Микрокапсулирование озонидов триглицеридов ненасыщенных карбоновых кислот методом сложной коацервации тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.11 ВАК РФ

4Вй8875

На правах рукописи

Пенкина Юлия Александровна

МИКРО КАПСУЛИРОВАНИЕ ОЗОНИДОВ ТРИГЛИЦЕРИДОВ НЕНАСЫЩЕННЫХ КАРБОНОВЫХ КИСЛОТ МЕТОДОМ СЛОЖНОЙ КОАЦЕРВАЦИИ

02.00.11 — коллоидная химия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата технических наук

1 О НОЯ 2011

Москва 2011

4858875

Работа выполнена на кафедре коллоидной химии Российского химико-технологического университета им. Д. И. Менделеева

Научный руководитель: кандидат химических наук, доцент

Ким Виссарион Евгеньевич

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор

Плетнёв Михаил Юрьевич Московский государственный университет тонких химических технологий им. М. В. Ломоносова

доктор технических наук, профессор Шаповалов Николай Афанасьевич Белгородский государственный технологический университет им. В. Г. Шухова

Ведущая организация: Московский государственный текстильный

университет им, А. Н. Косыгина

Защита диссертации состоится 30 ноября 2011 г. в 14 час. 00 мин. на заседании диссертационного совета Д 212.204.11 при РХТУ им. Д. И. Менделеева (125047, г. Москва, Миусская пл., д. 9) в конференц-зале.

С диссертацией можно ознакомиться в Научно-информационном центре РХТУ им. Д. И. Менделеева.

Автореферат разослан <<!£» октября 2011 года.

Учёный секретарь /

диссертационного совета Д 212.204.11 л/Л/и^™^ Мурашова Н.М.

Актуальность проблемы. Микрокапсулирование биологически активных веществ (БАВ) - интенсивио развивающееся направление в технологии лекарственных и косметических средств. Одним из подобных БАВ является озонированное растительное масло, основной компонент которого представляет собой озониды триглицеридов ненасыщенных карбоновых кислот. Озонированное масло характеризуется высокой терапевтической активностью при делом ряде заболеваний кожи и слизистой. Однако, его использование как медикаментозного и космецевтического средства ограничено рядом факторов:

- низкой стабильностью при хранении в естественных условиях: комнатная температура, воздействие окружающей среды (влажность, воздействие света);

- возможностью деградации компонентов системы из-за окисляющего действия озонидов органических соединений;

- специфическим органолептическим действием (ярко выраженный запах).

Решение указанных проблем может быть достигнуто путем получения микрокап-

сулированных форм данного препарата и аналогичных продуктов. Одним из наиболее доступных и простых с экспериментальной точки зрения методов инкапсулирования маслорастворимых веществ является метод сложной коацервации. Этот метод заключается в получении микрокапсул путём формирования оболочки из полиэлектролитного комплекса (ПЭК) на поверхности капель эмульсии калсулируемого вещества. В качестве веществ, образующих оболочку, могут использоваться различные соединения как природного, так и синтетического происхождения, но, по крайней мере, одно из этих соединений должно являться полиэлектролитом. К настоящему времени опубликовано значительное количество работ, посвященных получению микрокапсул, содержащих биологически активные вещества, методом сложной коацервации. Большинство работ связано с технологией получения конкретных препаратов, однако, озонированные масла в этом плапе изучены крайне мало.

Вместе с тем, препараты для наружного применения, содержащие озонированные растительные масла, предста&чяют значительный интерес с точки зрения профилактики и лечения различных патологических процессов, связанных с изменением кожного покрова. Таким образом, разработка методов получения микрокапсулированных форм озонидов растительных масел и изучение физико-химических закономерностей этих процессов представляют актуальную задачу.

Цель работы. Получение микрокалсулированной формы продукта, сохраняющей стабильность во времени в составе лекарственного или косметического средства. Для этого необходимо установление закономерностей и разработка методов инкапсулирования озонидов растительных масел методом сложной коацервации.

Для достижения поставленной цели требовалось решение следующих задач:

- определить влияние строения полиэлекгролитов и экспериментальных условий (массовое соотношение двух полиэлектролитов, величина рН, порядок смешения и т. д.) на формирование полиэлектролитного комплекса (ПЭК);

- определить условия формирования оболочки из различных ПЭК на поверхности капель эмульсии озонидов растительного масла;

- разработать аналитический метод контроля степени инкапсулирования озонидов растительного масла;

- определить влияние природы материала оболочки и условий инкапсулирования на параметры дисперсности микрокапсул и эффективность инкапсулирования.

Научная новизна работы состоит в следующем:

- установлены условия образования оболочек микрокапсул из ПЭК желати-на/поликватерниумы, гуммиарабик/поликватерниумы;

- установлено влияние природы катионного полиэлектролита на процесс образования ПЭК желатина/поликватерниум и процесс инкапсулирования озонидов растительного масла;

- показано, что максимальная степень инкапсулирования озопидов растительного масла соответствует минимуму межфазного натяжения на границе раздела фаз «ма-СЛО./водная дисперсия ПЭК».

Практическая значимость работы состоит в следующем;

- разработан метод получения микрокапсул озонидов растительного масла методом сложной коацервации;

- разработана аналитическая методика определения озонидов растительного масла;

- оценена устойчивость микрокапсулированных форм озонидов растительного масла к величине рН среды и действию различных растворителей.

Апробация работы и публикации. Результаты работы были представлены на международном симпозиуме «Ars Separatoria» (Польша, Ченстохова, 2005 г.) и IV международном конгрессе «KOSMETIK International» (Москва, 2005 г.).

По теме диссертации опубликовано 3 работы: 1 статья в рецензируемом журнале, утвержденном перечнем ВАК; 2 тезиса докладов.

Структура и объём диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания методик эксперимента, обсуждения результатов и выводов. Работа изложена на 169 страницах машинописного текста, содержит 40 таблиц, 58 рисунков. Список цитируемой литературы включает 191 наименование.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Во «Введении» обоснована актуальность темы диссертации, сформулированы це-

ли и задачи исследования, указаны научная новизна и практическая значимость работы.

В первой главе («Литературный обзор») рассмотрены механизм биологического действия озона и озонированных растительных масел на живые организмы, общая характеристика методов микрокапсулирования (более подробно рассмотрен метод сложной коацервации), в частности, влияние различных факторов и условий проведения процесса на свойства получаемых микрокапсул и пути высвобождения активных веществ из микрокапсул. Перечислены области применения микрокапсулированных препаратов.

Во второй главе («Объекты и методы исследования») охарактеризованы использованные в работе реагенты и экспериментальные методики.

В работе использовались органические растворители (хлороформ и кислота уксусная ледяная), и калия йодид квалификации «х.ч.». Водные растворы кислоты хлористоводородной и натрия гидроксида для кислотно-основного титрования готовили из стандарт-титров согласно соответствующим методикам.

В качестве биологически активного вещества применяли препарат «Медозонид концентрат» (в дальнейшем- «препарата), представляющий собой озониды три-глицеридов ненасыщенных карбоновых кислот природного происхождения (фирма «Медозок», Россия).

В качестве составляющих оболочки использовали следующие водорастворимые полиэлектролиты или низкомолекулярные вещества: желатину, гуммиарабик (ГА), тст-радецилтриметиламмоний бромид (ТДТМАБ) и полимеры марки Ро1уяиа1егпшш®. Указанные электролиты использовались в виде растворов в дистиллированной воде. Торговые марки, химические названия и структурные формулы поликватерниумов и ТДТМАБ представлены в таблице 1.

Таблица 1 - Характеристики катионных соединений, использованных в работе

Наименование Химическое название Структурная формула

РоК^иаЮтпит-] 1 Кватернизированный сополимер винилпирро-лидона (УР) и димети-ламиноэтилметакрилата (ОМАЕМА) с2н5 1© НэС—N—СНэ -, в0503С2Н5 УН Н3с \'Р " ОМАЕМА '

Ро1уяиа1ешит-16, Ро1уяиа1егпшт-44 Сополимеры винилпир-ролидона (УР) и кватер-низированного винил-имидазола (С)У1) ¿1 УР X Ае^СН3 (}У1 У

Ро1уяиа1егпшт-46 Сополимер винилкапро-лактама (УСар), винил-пирролидона (УР) и кватернизированного винилимидазола (С)У1) Ь Ау УСар УР Г Ле ОБОзСНз 0У1

Ро1учиа1егптт-7 Сополимер диаллилди-метиламмонийхлорида фАОМАС) и акрила-мида (Ас1у1шш<1е) г

Усе Н3С сн3 -1х БАОМАС Асгу1агшс1е У

ТДТМАБ Тетрадецилтримети-ламмоиийбромид © © СН3(СН2)13К(СН3)3Вг

Примечание. У Ро1уяиа1егпшш-16 авионом является хлорид-ион СГ, у Ро1уциа1егшига-44 - метилсульфат-ион СН3050з~.

Для определения изоэлектрической точки (ИЭТ) полиэлектролита использовали турбидиметрический метод. Определение соотношения противоположно заряженных веществ, необходимого для образования ПЭК и последующей коацервации, проводили методом спекгрофотометрического титрования. Количественное определение озонидов в исходном препарате проводили методами йодометрии и УФ-спектрофотометрии. Полидисперсность и форму микрокапсул оценивали по данным оптической микроскопии.

Микрокапсулы получали следующим образом. Предварительно готовили исходные растворы анионного и катионного полиэяектролитов в воде с определёнными концентрациями и необходимым значением рН, Затем расплавляли препарат при температуре 40-50°С до жидкого состояния и готовили эмульсию путём его эмульгирования в растворе анионного полиэлектролита на лабораторном гомогенизаторе «Асе» (Япония) в

течение .3 мин при скорости перемешивания 7000 об/мин. Далее к полученной эмульсии добавляли необходимое количество раствора катионного соединения и перемешивали ещё 5 мин при скорости 1000-1500 об/мин. По окончании процесса полученную систему охлаждали до +5°С для отверждения оболочки и хранили её при этой же температуре для замедления потери активности препарата.

Межфазное натяжение определяли методом веса-объёма капли с помощью сталагмометра.

Статистический анализ полученных результатов осуществляли методом вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента-Фишера в условиях доверительной вероятности Р = 1-а = 0.95.

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТА И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1 Определение условий образования коацерватов

Первоначально были определены значения рН изоэлектрической точки (ИЭТ) использованных в работе полиэлектролитов. Желатина является лолиамфолитом, её ИЭТ соответствует значению рН 5.2; ИЭТ остальных полиэлектролитов находится в сильнокислой или сильнощелочной области, и её не удалось определить экспериментально. Таким образом, сложная коацервация желатины и полимеров Polyquaternium® или ТДТМАБ протекает при значениях рН выше 5.2; коацервация гуммиарабика и тех же самых катионных соединений может иметь место во всём интервале значений рН.

Для определения массового соотношения [основание]/[поликислота], необходимого для образования ПЭК, проведено спектрофотометрическое титрование растворов желатины и гуммиарабика растворами катионных соединений при значениях рН 6,0 и 7,0 (на рисунках 1 а и 16 показаны кривые титрования при рН 6,0). В случае желатины это соотношение увеличивается при увеличении значения рН (таблица 2). Это связано с тем, что при повышении щёлочности среды возрастает число ионизированных карбоксильных групп желатины, в то время как плотность положительных зарядов на четвертичных аммониевых основаниях практически не изменяется. Таким образом, Требуется большее число положительно заряженных поликатионов для взаимодействия с определённым количеством желатины.

В отличие от других изученных нами полиэлектролитов, Polyquaternium-16 не образует ПЭК с желатиной. Однако, он образует такие комплексы с гуммиарабиком практически во всём интервале рН. При этом необходимое соотношение [Polyquaternium-16]/[1уммиарабик] увеличивается незначительно при увеличении значения рН или остаётся практически неизменным. Одним из возможных объяснений этого факта является то, что заряд макромолекул гуммиарабика очень мало изменяется при изменении вели-

чины рН среды. Аналогичные результаты были получены и для других катионных полиэлектролитов.

-Ä-2 —0—3

—Ж—6

—о—1 —А—2 —В- 3

—Ж—5 -»-6

Рисунок 1й - Кривые спектрофотометрического титрования раствора желатины растворами Polyquaternium и ТДТМАБ при pH = 6.0, X = 430 нм, 1 = 10 мм. 1 - Polyquaternium-1 1,2- Polyquatemium-46, 3 - PoIyquaternium-7, 4 - Polyquatemium-44, 5 - Polyqua-ternium-16 (Luviquat FC 550), 6-Polyquaternium-16 (Luviquat Excellence), 7 - ТДТМАБ

0,4 0,6

Cpotyq/Сжел

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4

СРо|у</СГА

Рисунок 16- Кривые спектрофотометрического титрования раствора гуммиарабика растворами Ро^иа1егшит и ТДТМАБ при тех же условиях

Таблица 2 - Массовое соотношение компонентов, необходимое для образования ПЭК, при титровании желатины катионными соединениями

Катионное соединение Массовое соотношение, [катионное соединение]/[желатина]

РН

6,0 7,0

Ро1уяиа1егпшт-11 0,2 0,3

Ро1уяиа1егпшт-46 0,4 0,7

Polyquateпli ит-7 0,4 0,5

Ро1уяиаГелнит-44 0,12* 0,2*

Ро1уяиа1егшит-16 ПЭК не образуется

ТДТМАБ 0,45 0,5

* Наблюдается выделение ПЭК в отдельную фазу

Таблица 3 - Массовое соотношение компонентов, необходимое для образования нЭК, при титровании туммиарабика катионными соединениями

Массовое соотношение,

Катионное соединение [катионное соединение]/[ГА]

рН

4.0 5,0 6,0 7,0

Ро1уяиа{:сгпшт-11 0,6 0,65 0,65 0,7

Ро 1уяиа[егп шт-46 1,3 1,1 1,1 1,1

Ро1уциа1егпшт-7 0,7* 0,7* 0,7* 0,7*

Ро1уяиа1егпшт-44 0,1* ОД* 0,1* 0,1*

Ро1учиа1егпшт-16 (Ьш^иа1 БС 550) 0,17 0,20 0,20 0,22

Ро1уяиагеттт-16 (Гдтфвй ЕхсеНепсе) 0,20 0,18 0,18 0,15

ТДТМАБ 1,15 1,15 1,1 1,1

* Наблюдается выделение ПЭК в отдельную фазу

2 Микроскопические исследования

В настоящей работе получение микрокапсул включало три стадии: • получение эмульсии инкапсулируемого вещества в растворе одного полиэлектролита;

« добавление в полученную эмульсию необходимого количества раствора противоположно заряженного полиэлектролита или низкомолекулярного вещества, что

вызывало сложную коацервацию и последующее покрытие эмульсионных капель каплями коацервата; • выделение микрокапсул.

На рисунках 2-5 представлены фотографии полученных микрокапсул.

10 мкм

Рисунок 4 - Микрокапсулы желатина/ Ро1уяиа1егпшт-46

10 мкм

Рисунок 2 - Микрокапсулы желатина/ Ро1уяиа1егпшт-11

10 мкм

Рисунок 3 - Микрокапсулы желатина/ Ро1уяиа1егпшт-7

10 мкм

Рисунок 5 - Микрокапсулы желатина/ Ро1уяиа1егпшт-44

Видно, что лучшие результаты достигаются при использовании Ро^иа1егшит марок Ро1удиа1егпшт-11 и Ро1уциа1етшт-7. При использовании Ро1уяиа1егшит-44 и Ро^иа1егпшт-46 эффективность микрокапсулирования более низкая (на фотографиях видны капли масла и частицы образовавшегося ПЭК).

Во всех случаях система полидисперсна. Размер частиц составляет от 2 до 15 мкм. Гистограммы распределения частиц по размерам представлены на рисунке 6.

Во всех случаях наибольшую долю занимает фракция микрокапсул с размерами 2,5-^5 мкм.

(¡>10

□ Желатина/Ро^-11

□ Желатина/Ро1уч-7 ■ Желатина/Ро^-46

Диаметр частиц с), мкм

Рисунок 6 -Гистограмма распределения микрокапсул по размерам

При использовании в качестве одного из полиэлектролитов гуммиарабика со всеми марками Ро1уяиа1егпшт или тетрадецилтриметиламмоний бромидом образования микрокапсул не происходит.

3 Количественное определение озонидов

Исходное содержание озонидов в препарате определяли йодометрическим методом. Озониды окисляют йодид калия в кислой среде. При этом выделяется эквивалентное количество йода, который оттитровывают тиосульфатом натрия.

Содержание активных озонидов в препарате составило 2,98 ммоль озонидных циклов на грамм.

Электронные спектры поглощения препарата при различных концентрациях (рисунок 7) характеризуются наличием максимума при 240 нм. Эта длина волны использовалась в качестве аналитической. Калибровочный график А=Г(с03 тыт) в интервале рабочих значений концентрации озонидных циклов представляет собой прямую. Таким образом, спектрофотометрический метод также может быть использован для количественного определения озонидов.

Результаты обоих аналитических методов количественного определения озонидных циклов в препарате сопоставимы между собой.

ЯСНОзСНЯ + 2Г + 2Н+-> 2КСНО + Н20 + ¡2

]2 + гШАОз —> 2^ + №28406

0,9 0,8

<

¡5 0,7

о

о

к 0,6

0

1 (0

I 0,4

т

I 0,3

о

0,2 0,1 0

Рисунок 7 - Спектры растворов препарата в хлороформе при различных концентрациях: 1-0,1 г/100 мл, 2 - 0,2 г/100 мл, 3 - 0,3 г/100 мл, 4 - 0,4 г/100 мл,

5-0,5 г/100 мл

Из-за нестабильности неинкапсулированного препарата концентрация озонидов в нём со временем уменьшается (рисунок 8), причём повышение температуры от +5°С до +20°С увеличивает скорость деградации активного вещества. Концентрация озонидов в препарате снижается линейно (рисунок 8), при +20°С сильнее, чем при +5°С. За 20 месяцев хранения препарата при +5°С, количество озонидов снизилось на 16.2%. При +20°С эта величина составляет 31.2%. Следовательно, препарат необходимо хранить при пониженных температурах.

4 Изучение процесса микрокапсулирования озонидов растительного масла методом сложной коацервации

Эффективность процесса микрокапсулирования (доля препарата (в процентах), вошедшего в микрокапсулы) определяли по разнице исходной и остаточной концентрации озонидов в дисперсионной среде. Не захваченное в микрокапсулы озонированное растительное масло экстрагировали хлороформом и спектрофотометрическим методом определяли концентрацию озонидных циклов. Выбор хлороформа в качестве экстраген-та связан с тем, что озонированное растительное масло хорошо в нём растворимо, а образующиеся полимерные оболочки устойчивы к его действию. Полученные результаты представлены в таблице 4.

-о-2 4

260 300 350 400 450

Длина волны Л, на

и

О 6 10 15 20 25

Время, мае

Рисунок 8 - Снижение концентрации озонидных циклов в препарате при хранении при различных температурах: 1 - +20°С, 2 - +5°С

Таблица 4- Эффективность микрокапсулировапия для микрокапсул желатина-Ро1удиа1егпшт (ТДТМАБ) (спектрофотометрический метод)

Тип катионного соединения Эффективность микрокапсулирования, %

рН=6,0 рН=7,0

Ро1уаиа1сгпшт-11 29 ±3 23 ±3

Ро^иа1егшшп-44 5± 1 1 ± 0,3

Ро^иа1еппит-46 25 ±2 11 ±2

Ро!)^иа1егпшт-7 29 ±2 22 ± 3

ТДТМАБ 23 ±5 21 ±3

Эффективность микрокапсулирования зависит от типа катионного соединения, что можно объяснить неодинаковым сродством коацерватов различной природы к инкапсулируемому веществу. Чем больше это сродство (в качестве его меры можно принять поверхностную активность коацервата по отношению к инкапсулируемому веществу или межфазное натяжение между ними), тем лучше идёт адсорбция коацервата на межфазной поверхности, а также смачивание им масляных капель и его распределение вокруг них. Это увеличивает эффективность инкапсулирования.

При изготовлении микрокапсул гуммиарабик-Ро1уяиа1егпшт (ТДТМАБ) при использовании всех типов катионных соединений эффективность микрокапсулирования близка к нулю. Это может быть обусловлено низким сродством соответствующих коа-церватов к инкапсулируемому веществу. С другой стороны, это может быть связано с тем, что гуммиарабик при низких концентрациях плохо стабилизирует эмульсию, её капли флокулируют, прежде чем на них образуется оболочка, и поэтому необходимо присутствие стабилизаторов.

Для объяснения различной эффективности инкапсулирования препарата при использовании различных типов катионных соединений были проведены тензометриче-ские исследования. Как известно, межфазное натяжение на границе раздела фаз (водная среда, содержащая ПЭК)/(инкапсулируемое вещество), является характеристикой адсорбционной способности ПЭК. Чем сильнее снижается межфазное натяжение с увеличением концентрации ПЭК, тем лучше он адсорбируется на межфазной границе, и тем выше вероятность образования полимерной оболочки вокруг инкапсулированного вещества, а не выделение полимерного комплекса отдельной фазой.

В этой части работы мы использовали оливковое масло вместо озонированного растительного масла. Во-первых, это обусловлено удобством проведения эксперимента (озонированное оливковое масло при комнатной температуре представляет собой твёрдое вещество, а оливковое масло является жидкостью при тех же условиях); во-вторых, оливковое масло наиболее близко по химическому строению к озонированному оливковому маслу.

Межфазное натяжение определяли стандартным методом веса-объёма капли с помощью сталагмометра. Было изучено влияние на межфазное натяжение полиэлектролитных комплексов, образованных желатиной и катионными полиэлектролитами Ро1у-quaternшm-ll, Ро1уциа1егпшт-44 или гуммиарабиком. При использовании указанных катионных полиэлектролитов наблюдается, соответственно, наибольшая и наименьшая эффективность микрокапсулирования.

Зависимость межфазного натяжения от массового соотношения РоК^^еггишп/ желатина (Ср^/Сжи,) при рН = 6.0 представлена на рисунке 9. При росте соотношения срыуч-ц/сжед межфазное натяжение постепенно снижается, достигая минимума при Сро^ч-п/Сжел = 0.2. При этом же соотношении кривая зависимости А = ^Ср^п/Сжел) выходит на максимум (рисунок 1а). При дальнейшем его увеличении наблюдается возрастание межфазного натяжения. Следовательно, ПЭК адсорбируется лучше, чем отдельные составляющие его полимеры. Полученные данные подтверждают вывод о максимальной эффективности инкапсулирования при соотношении Сро^ц/Сжа, = 0,2.

Рисунок 9 - Зависимость межфазного натяжения системы оливковое масло/водная дисперсия коацервата от массового соотношения Ро1уяиа1егшит/желатина при рН = 6.0: 1 - Ро1уд1^егшит-11,2- Ро1у^иа1егшит-44

При росте соотношения Сро^у'Сжи межфазное натяжение постепенно увеличивается, достигая максимума при сРо|у(1.4Усжвл = 0.4 (рисунок 9). Увеличение межфазного натяжения и результаты, полученные при спектрофотометрическом титровании, свидетельствуют о предпочтительном выделении данного полиэлектролитного комплекса в отдельную фазу. В этом случае индивидуальные полимеры лучше адсорбируются на межфазной границе, чем образующийся между ними комплекс.

15

5 13 : X 2 о" 12 11 10 (

О 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4

сРо])Ч-'| ^ГА

Рисунок 10 - Зависимость межфазного натяжения оливковое масло/водная дисперсия коацервата от массового соотношения Ро1>Х1иа1егпщт-11/гуммиарабик (сРо1>ч.п/сгд)

при рН=6.0

При использовании гуммиарабика при увеличении соотношения сРо|уч.и/сГА наблюдается незначительное снижение межфазного натяжения во всём диапазоне сРо|УЧ.з 2/сга (рисунок 10), в то время как коацерват образуется при сРо,у(1.и/сгА =0.63, а затем происходит его растворение в избытке Ро1уяиа1егпшт-11 (рисунок 16). Этот факт можно объяснить тем, что адсорбционная способность коацервата лишь незначительно выше адсорбционной способности гуммиарабика. Дальнейшее снижение межфазного натяжения после достижения максимума на кривой зависимости А=Г(сРс,1УЧ/Сга) (рисунок 16) и растворения ПЭК в избытке Ро1уяиа1егпшт предположительно происходит из-за увеличения общей концентрации макромолекул полимеров в растворе.

Низкая эффективность инкапсулирования в оболочку из полиэлектролитного комплекса гуммиарабик-Ро^иа[егпшт может быть обусловлена двумя причинами: низкой адсорбционной способностью коацервата и низкой эмульгирующей способностью гуммиарабика. Гуммиарабик является эффективным эмульгатором при относительно высоких концентрациях.

Для дополнительного подтверждения полученных результатов были проведены кинетические исследования формирования полиэлектролитных комплексов в воде. Изменение оптической плотности растворов желатины и двух полимеров Ро1удиа1егпшт (Ро1уяиа1егпшт-11 и Ро1уяиа1етшт-44) в зависимости от времени представлены на рисунке 11.

0,5

0,4 0,3

«

0,2 0,1 0

0 100 200 300 400 500 600 700 Время нс

Рисунок 11 - Кинетика формирования полиэлектролитных комплексов Ро1усраа1егпшш/ желатина при рН = 6.0: 1 -Ро^иа1егпшт-11, 2 - Ро^иа1егпшт-44, Концентрация полимеров 0.05 масс. %. Соотношения полимеров: сро1у[1_п/сжы1=0'20, ср01уч.44/сжел=0.35

)

Г

к -©-1

V

. -

Максимальное значение оптической плотности соответствует образованию не растворимого в воде полиэлекгролитного комплекса. Для формирования комплекса жела-тина-Ро1)Ч}1Шегпшт-11 требуется около 15 секунд, и затем оптическая плотность не изменяется в течение как минимум 10 минут (рисунок 11, кривая 1). Комплекс желатина-Ро^иа1егшшп-11 остается в высокодисперсном состоянии достаточно долго, т. е. для него предпочтительнее адсорбция на межфазной границе, что способствует формированию полимерной оболочки вокруг капель озонированного растительного масла. Поведение пары полиэлектролитов: желатины а Ро^иа1егшшп-44, отличается тем, что на формирование Г1ЭК затрачивается около 10 секунд, и затем в течение 3 минут оптическая плотность системы уменьшается практически до первоначального значения (рисунок 11, кривая 2). Визуально наблюдается образование осадка и прозрачной надосадоч-ной жидкости, т. е. образующийся ПЭК быстро агрегирует и выделяется в виде отдельной фазы. Таким образом, для полиэлекгролитного комплекса желатина-Ро1уциа(сгпшт-44 когезионное взаимодействие более выгодно, чем адсорбция на межфазной границе, что не способствует формированию полимерной оболочки вокруг капель озонированного растительного масла.

ВЫВОДЫ

1. Разработана методика микрокапсулирования озонированного растительного масла методом сложной коацервации. Определены оптимальные соотношения различных анионных (желатины и гуммиарабика) и катионных полимеров (Ро^иа1егшшп) для образования полиэлектролитных комплексов (ПЭК) и последующей коацервации. Однако, способны к формированию полимерной оболочки только ПЭК желатина/Ро^иа1егпшт. В случае использования гуммиарабика необходимо дополнительное присутствие стабилизаторов.

2. Выявлено, что оптимальное соотношение полиэлектролитов для образования ПЭК (катионное соединение/желатина (гуммиарабик)) не зависит от порядка добавления компонентов, кроме случая, когда ПЭК выделяется в виде осадка. В случае использования желатины в качестве поликислоты оно увеличивается с увеличением рН среды, а в случае использования гуммиарабика не зависит от рН.

3. Разработана аналитическая методика определения озонидов растительного масла методом спектрофотометрии. Результаты слектрофотометрического и йодометрического методов сопоставимы между собой.

4. Определены эффективности инкапсулирования озонированного растительного масла в различные полимерные оболочки. Наибольшая эффективность инкапсулирования наблюдается при использовании пары полиэлектролитов желатина/Ро1учиагегпшт-11.

5. Проведено сравнение эффективности инкапсулирования и адсорбционных свойств различных ПЭК. Показано, что при более высокой адсорбционной способности наблюдается более высокая эффективность инкапсулирования, в то время как более сильное когезионное взаимодействие ПЭК, образованного парой желатина/Ро1уяиа1егшит-44, приводит к выделению полимерного комплекса в виде отдельной фазы с практически нулевой эффективностью инкапсулирования.

6. Для достижения максимальной эффективности инкапсулирования следует инкапсулировать озонированное масло в оболочку из полиэлектролитов желатины и Ро1}^иа1егпшт-11 при массовом соотношении Ро^Шегшшп-11 /желатина, равном 0,2. Полученные микрокапсулы стабильны в составе ранозаживляющего геля в течение срока годности продукции (акт испытаний прилагается).

Публикации по теме диссертации

1. ПенкинаЮ. А., Зайцев В. Я., Иванова Л. И., Ким В. Микрокапсулы озонидов в решении проблем чувствительной кожи // Сб. тез. и докл. IV междун. конгр. KOSMETIK international. -М., 2005. С. 52-53

2. Penkina Yu. A., Kim V., Zaitsev V. Ya., Ivanova L. I» Encapsulation of ozonized oil and cosmetic application of polymer shielded ozonides // In: Proceed. XX Intern. Symp. «Ars Separatoria 2005». -Cz^stochowa, Poland, 2005. P. 173-174

3. Букарь H. В., Пенкина Ю. А., Авраменко Г. В., Киенская К. И., Кухаргнко А. В. Микрокапсулирование озонированного растительного масла методом сложной коацервации // Химическая технология, 2008. Т. 9. №5. С. 217-220

Пенкина Юлия Александровна МИКРОКАПСУЛИРОВАНИЕ ОЗОНИДОВ ТРИГЛИЦЕРИДОВ НЕНАСЫЩЕННЫХ КАРБОНОВЫХ КИСЛОТ МЕТОДОМ СЛОЖНОЙ КОАЦЕРВАЦИИ

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата технических наук

ЛИЦЕНЗИЯ ЦЦМ 00608 Формат 60x84/16 1,2 усл. п.л.

Бумага офсетная 80 гр. тираж 100 экз. Заказ № 123

Отпечатано с готовых о/м в типографии ООО «МЕДИНА-Принт» ул. Селезнёвская, д.11 А, стр. 1 тел.: (495) 943-26-80

1 ВВЕДЕНИЕ.

2 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

2.1 БИОЛОГИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ОЗОНА И ОЗОНИРОВАННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО МАСЛА НА ЖИВЫЕ ОРГАНИЗМЫ.

2.2 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МИКРОКАПСУЛИРОВАННЫХ СИСТЕМ И МЕТОДОВ МИКРОКАПСУЛИРОВАНИЯ.

2.2.1 Микрокапсулированные композиции в фармацевтических и косметических продуктах.

2.2.2 Коацервация.

2.2.2.1 Простая коацервация.

2.2.2.2 Сложная коацервация.

2.3 ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ФАКТОРОВ НА СВОЙСТВА ПОЛУЧАЕМЫХ МИКРОКАПСУЛ.

2.3.1 Свойства и структура мембраны капсул.

2.3.1.1 Свойства оболочки капсул, полученных методом коацерва-ции.

2.3.1.2 Свойства оболочки капсул, полученных химическими, физическими и остальными физико-химическими методами.

2.3.2 Перекрёстная сшивка.

2.3.3 Влияние скорости перемешивания на свойства получаемых микрокапсул.

2.3.4 Эффективность процесса микрокапсулирования.

2.4 ВЫСВОБОЖДЕНИЕ ВЕЩЕСТВ ИЗ МИКРОКАПСУЛ.

2.4.1 Возможные пути высвобождения. Применение микрокапсул.

2.4.2 Высвобождение веществ из микрокапсул, полученных методом сложной коацервации.

2.5 ВЫВОДЫ ПО ЛИТЕРАТУРНОМУ ОБЗОРУ.

3 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

3.1 ХАРАКТЕРИСТИКА ИСХОДНЫХ ВЕЩЕСТВ.

3.2 Методы исследования.

3.2.1 Оценка кислотно-основных свойств полиэлектролитов.

3:2.2 Измерение вязкости растворов полимеров.

3:23 Определение изоэлектрической точки полиэлектролита.

3.2.4 Методика инкапсулирования:.

3.2.5 Анализ дисперсности микрокапсул с помощью оптической микроскопии.

3.2.6 Оценка устойчивости оболочки микрокапсул.

3.2.7 Количественное определение озонидов:.!.

3.2.8 Определение степени экстракции препарата;из стандартных эмульсий с концентрацией препарата 5, 10 и 15%.

3.2.9 Тензометрические исследования.

3.3 МАТЕМАТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ЭКСПЕРИМЕНТА.:.

4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.'„.

4.1 ОСНОВНЫЕ КОЛЛОИДНО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ПОЛИЭЛЕКТРОЛИТОВ;.;.;. .Ж

4:1.1 Кислотно-основные свойства полиэлектролитов:.:.81!

4.1.2 Исследование вязкости растворовполимеров.

4.1.3 Определение изоэлектрической точки полиэлектролитов;.

4:2 ПОДБОР УСЛОВИЙ ОБРАЗОВАНИЯ КОАЦЕРВАТОВ.

4.3 МИКРОКАПСУЛИРОВАНИЕ.

4.3. Г Получение микрокапсул озонированного масла:.

4.3.2 Оценка свойств оболочки микрокапсул.

4.4 КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОЗОНИДОВ.

4.4.1; Содержание озонидов в исходном препарате.

4.4.2 Определение эффективности микрокапсулирования.

4.4.3 Микрокапсулирование в оболочку гyммиapaбйк-Polyquateпlium®.

4.4.4 Метрологическая характеристика методов анализа. Сравнение спектрофо-тометрического и йодометрического методов по воспроизводимости.

4.5 АДСОРБЦИОННАЯ СПОСОБНОСТЬ РАЗЛИЧНЫХ КОАЦЕРВАТОВ.

5 ВЫВОДЫ.

Актуальность проблемы. Одним из интенсивно развивающихся направлений в технологии лекарственных и косметических средств является микрокапсулирование биологически активных веществ (БАВ). Озонированное растительное масло, основным компонентом которого являются озониды триглицеридов ненасыщенных карбо-новых кислот, характеризуется высокой терапевтической активностью при целом ряде заболеваний кожи и слизистой. Однако, использование озонированного масла как медикаментозного и космецевтического средства ограничено рядом факторов:

- его низкой стабильностью при хранении в естественных условиях: комнатная температура, воздействие окружающей среды (влажность, воздействие света);

- возможностью деградации компонентов системы из-за окисляющего^ действия* озонидов органических соединений;

- специфическим органолептическим действием (ярко выраженный запах).

Решение указанных проблем может быть достигнуто путём получения-микрокапсулированных форм данного препарата и аналогичных продуктов. Одним из наиболее доступных и простых с экспериментальной точки зрения методов инкапсулирования-маслорастворимых веществ (является метод сложной коацервации. Этот метод заключается в получении, микрокапсул путём формирования оболочки из полиэлектролитного комплекса (ПЭК) на поверхности капель,эмульсии капсулируемого вещества. В качестве веществ, образующих оболочку, могут использоваться различные соединения как природного, так и синтетического происхождения, но, по крайней мере, одно из этих соединений должно являться полиэлектролитом. К настоящему времени опубликовано значительное количество работ, посвященных получению микрокапсул, содержащих биологически активные вещества, методом сложной коацервации. Большинство работ связано с технологией получения конкретных препаратов, однако, озонированные масла в этом плане изучены крайне мало.

Вместе с тем, препараты для наружного применения, содержащие озонированные растительные масла, представляют значительный интерес с точки зрения профилактики и лечения различных патологических процессов, связанных с изменением кожного покрова. Таким образом, разработка методов получения микрокапсулиро-ванных форм озонидов растительных масел и изучение физико-химических закономерностей этих процессов представляют актуальную задачу.

Цель работы. Получение микрокапсулированной формы продукта, сохраняющей стабильность во времени в составе лекарственного или косметического средства. Для этого необходимо установление закономерностей и разработка методов инкапсулирования озонидов растительных масел методом сложной коацервации.

Для.достижения поставленной цели требовалось решение следующих задач:

- определить влияние строения полиэлектролитов и экспериментальных условий (массовое соотношение двух полиэлектролитов, величина рН, порядок смешениями т. д.) на формирование полиэлектролитного комплекса (ПЭК);

- определить условия формирования оболочки из различных ИЭК на поверхности капель эмульсии озонидов растительного масла;

- разработать аналитический метод контроля степени' инкапсулирования озонидов растительного масла;

- определить влияние природы материала оболочки и условий» инкапсулирования1 на параметры дисперсности микрокапсул и эффективность инкапсулирования.

Научная новизна работы состоит в следующем:

- установлены условия образования оболочек микрокапсул из ПЭК желати-на/поликватерниумы; гуммиарабик/поликватерниумы;

- установлено влияние природы катионного полиэлектролита на процесс образования ПЭК желатина/поликватерниум и процесс инкапсулирования.озонидов растительного масла;

- показано, что максимальная степень инкапсулирования' озонидов растительного масла соответствует минимуму межфазного натяжения на границе раздела фаз «масло/водная дисперсия ПЭК».

Практическая значимость работы состоит в следующем:

- разработан метод получения микрокапсул озонидов растительного масла методом сложной коацервации;

- разработана аналитическая методика определения озонидов растительного масла;

- оценена устойчивость микрокапсулированных форм озонидов растительного масла к величине рН среды и действию различных растворителей.

2 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

5 ВЫВОДЫ

Разработана методика микрокапсулирования. озонированного растительного масла методом сложной коацервации. Определены оптимальные соотношения различных анионных (желатины и гуммиарабика) и катионных полимеров. (Polyquaternium) для. образования ПЭК и последующей- коацервации. Однако, способны к. формированию полимерной оболочки только ПЭК желатина/Polyquaterniumi В случае использования, гуммиарабика необходимо дополнительное присутствие стабилизаторов.

Выявлено, что оптимальное соотношение полиэлектролитов для образования ПЭК (катионное соединение/желатин (гуммиарабик)) не зависит от порядка добавления компонентов, кроме случая, когда ПЭК выделяется в виде осадка. В случае использования желатины в> качестве поликислоты оно увеличивается с увеличением-рН среды, а в случае использования гуммиарабика не зависит от рН.

Разработана аналитическая методика определения озонидов растительного масла: Результаты спектрофотометрического и йодометрического методов сопоставимы между собой.

Определены эффективности инкапсулирования озонированного растительного масла в различные полимерные оболочки. Наибольшая эффективность инкапсулирования наблюдается при использовании пары полиэлектролитов желатина/Ро1уяиа1егпшт-11.

Проведено сравнение степени эффективности инкапсулирования и адсорбционных свойств различных ПЭК. Показано, что при более высокой адсорбционной способности наблюдается более высокая эффективность инкапсулирования, в то время как более сильное когезионное взаимодействие ПЭК, образованного парой желатина/Ро1уяиа1егпшт-44, приводит к высаждению полимерного комплекса отдельной фазой с практически нулевой эффективностью инкапсулирования.

Для достижения максимальной эффективности инкапсулирования следует инкапсулировать озонированное масло в оболочку из полиэлектролитов желатины и Ро1уяиа1егпшт-11 при массовом соотношении Ро1уяиа1егпшт-11/желатина, равном 0,2. Полученные микрокапсулы стабильны в составе ранозаживляющего геля в течение срока годности (акт испытаний продукции представлен в приложении Г).

1. Медицинский озон в лечении акушерско-гинекологической патологии: Пособие для врачей. Нижний Новгород: Издательство Нижегородской государственной медицинской академии, 2001. 16 с.

2. Bocci V, PaulesuL. Studies on the biological effects of ozone. 1. Induction of interferon gamma on human leucocytes // Haemotologica, 1990. Vol. 75. P. 510-515

3. KiefH. The treatment of neurodermatitis with the auto-homologous immune therapy. Proceed. of 11th World Congress of the International Ozone Association. San-Francisco, 1993. P. 436-438

4. Wolf H. H. Das Medizinische Ozon. 2 Aufl. Verlag. fur Medizin Dr. Ewald Fischer, Heidelberg, 1982. 583 p.

5. Гульман M. И., Винник Ю. С., Перьянова О. В., Якимов С. В., Черданцев Д. В., Анишина О. В. Механизмы действия и перспективы применения медицинского озона в клинической практике // Материалы I Всероссийского конгресса по патофизиологии, 1996

6. Delgado J., Wong R., Regalado С. P., Noriega A. Subcutaneous ozone therapy in the treatment of simplex herpes // Proceed. 2nd International symposium on Ozone Applications. Havana, Cuba, 1997. P. 62

7. Перетягин С. П. Патофизиологическое обоснование озонотерапии постгеморрагического периода: автореф. дис. докт. мед. наук. — Казань, 1991. 29 с.

8. Sunnen G. V. Ozone in medicine / Proceed. 12 Ozone World Congress «Ozone in medicine». New-York, 1989. Vol. 3. P. 1-16

9. Петрий В. В. Первый опыт применения озонотерапии в лечении ишемической болезни сердца // Рос. мед. журн., 1998. №3. С. 42-44

10. Cruz О., MenendezS., Martinez М. Е., ClaveraT. Application of Ozonized Oil in the Treatment of Alveolitis // 2nd International Symposium on Ozone Applications. Havana, Cuba March 24-26, 1997

11. LemusL., OrdazE., Rodríguez E. Application of Oleozon in the Treatment of Subpros-thesis Stomatitis // 2nd International Symposium on Ozone Applications. Havana, Cuba -March 24-26, 1997

12. Castañeira E. Т., Cruz O., Menéndez S. Dyschromia Treated with Oleozon // 2nd International Symposium on Ozone Applications. Havana, Cuba March 24-26, 1997

13. Morris G., Menéndez S. Oleozon in Gynecology // 2nd International Symposium on Ozone Applications. Havana, Cuba March 24-26, 1997

14. Morris G.; Menéndez S. Application of Oleozon in the Hemorrhoids // 2nd International Symposium on Ozone Applications. Havana; Cuba March 24-26, 1997

15. PiñolF., CedeñoN., Diaz W. Therapy Effects of Ozonized Oil (Oleozon) in the Treatment of Giardiasis // 2nd International Symposium on Ozone Applications. Havana, Cuba -March 24-26, 1997

16. González M. E., Menéndes S., Cedeño N., Orvera G., Díaz W. Ozonized Oil (Oleozon) in the Treatment- of Children Suffering of Giardiasis // 2nd International Symposium on Ozone Applications. Havana, Cuba March 24-26, 1997

17. Alvarez R., Menéndez S., Peguera M.,,Turrent J. Treatment of Primary Pioderma with Ozonized Sunflower Oil // 2nd International Symposium on1 Ozone Applications. Havana, Cuba March 24-26, 1997

18. Falcón L.,-Simón D., Menéndez S., MoyaS., Garbayo E., DiazW. Experiences of Nine Years Using Ozonized Oil in Dermatology // 2nd International Symposium on Ozone Applications. Havana, Cuba March 24-26,1997

19. Сопромадзе M. А., Липатов К. В., Канорский И. Д., Емельянов А. Ю. Использование комбинированной озоно-ультразвуковой обработки в лечении гнойных ран // -М.: Третий конгресс ассоциации хирургов им. Н. И. Пирогова, 2001

20. Гречканев Г. О. Озонированное оливковое масло в лечении крауроза вульвы // Сборник научных работ первой-научно-практической конференции «Местное и парентеральное применение озонотерапии в медицине». Украина, Харьков, 2001 г. 124 с. С. 85-87

21. Конопельцев И. Г., Филатов А. В., Костаев А. А. Антимикробная активность и стабильность озонированного рыбьего жира // Тез. докл. IV Всероссийской научно-практической конференции «Озон и методы эфферентной терапии в медицине», 2000 г. 248 с.

22. Липатов С. Г. Применение озонированного масла в лечении химических поражений пищеварительного тракта при отравлениях уксусной кислотой: дис. . канд. мед. наук. Екатеринбург, 2000.

23. Байтяков В. В. Влияние эмоксипина и озонированного растительного масла на клиническое течение и некоторые показатели гомеостаза у больных псориазом: дис. . канд. мед. наук. -Саранск, 2004. 142 е.: ил.

24. Асанова Г. К., Смирнова Ю. Г. Профилактика и лечение заболевании желудочно-кишечного тракта озонированным маслом // Тез. I всерос. конф. «Озон и другие экологически чистые окислители. Наука и технологии». -М.; МГУ, 2005

25. Сопромадзе М. А., Липатов К. В., Канорский И. Д., Емельянов А. Ю. Использование комбинированной озоно-ультразвуковой обработки в лечении гнойных ран // Третий конгресс Ассоциации хирургов имени-Н. И. Пирогова, Материалы конгресса

26. Емельянов А. Ю. Возможности комбинированного применения озона и низкочастотного ультразвука в лечении гнойных ран (экспериментально-клиническое исследование): дис. канд. мед. наук. Москва, 2006. 152 с.

27. Torrezl. F., Piñol V. С., UrrutiaE. S., Regueiferos M. G. In vitro Antimicrobial-Activity of Ozonized Theobroma Oil Against Candida albicans // Ozone Sci. Eng., 2006. Vol. 28. P. 187-190

28. Díaz M. F., Gavin J. A., Gómez M., Curtielles V., Hernández F. Study of Ozonated Sunflower Oil Using 1H NMR and Microbiological'Analysis // Ozone Sci. Eng., 2006.- Vol. 28. P. 59-63

29. Солодовник В. Д. Микрокапсулирование. М.: Химия, 1980. 216 с.

30. Афанасьев А. Г. Микрокапсулирование и некоторые области его применения. М.: Знание, 1982. 64 с.

31. LeonL., Herbert А. Е., Joseph L. К. The Theory And Practice Of Industrial Pharmacy. Mumbai: Varghese Publishing House, 3rd edition, 1990.

32. Benita S. Microencapsulation: Methods and industrial applications. Nova York: CRC Press Taylor & Francis Group; USA, 2nd edition; 2006. 756 p.

33. Jyothi N. V., Prasanna M., Sakarkar S. N., Prabha S., Seetha Ramaiah P., Srawan G, Microencapsulation Techniques, Factors Influencing Encapsulation Efficiency: A Review // J. Microencapsul., 2010. Vol. 27, Iss. 3. P. 187-197

34. Bansode S. S., Banarjee S. K., GaikwadD. D., Jadhav S. L., ThoratR. M. Microencapsulation: A review // Int. J. Pharm. Sci. Review and Research, 2010. Vol. 1, Iss. 2. P. 38-43

35. Shekhar К., Naga Madhu M., Pradeep V., Banji D. A Review on Microencapsulation // Int. J. Pharm. Sci. Review and Research, 2010. Vol. 5, Iss. 2. P. 58-62

36. Афанасьев А. Г. Прикладные и коллоидные аспекты применения микрокапсул.// Современные технологии в отрасли бытового обслуживания населения. -М.: изд. Моск. технол. ин-та, 1991. С. 248-264

37. Betageri G. V., Jenkins S. A., Parsons D. L. Liposome drug delivery systems // Technom-ic Pub. Co. Inc., USA, Lancaster, Pennsylvania, 1993. P. 13-14

38. Schreier H., Bouwstra J. Liposomes and niosomes as topical drug carriers // J. Control. Release, 1994. Vol.30. P. 1-15

39. ImbertD.1, WickettR. Topical delivery with liposomes // Cosmetics and Toiletries, 1995. Vol. 110, No. 9. P. 32-45

40. Sentjurc M., Vrhovnik K., Kristl J. Liposomes as a topical delivery system: the role of size on transport studied by the EPR imaging method // J. Contr. Release, 1999. Vol. 59, No. 1. P. 87-97

41. Langner, M., Krai Т. E. Liposome-based drug delivery systems // Pol. J. Pharmacol., 1999. Vol. 51,No.3. P. 211-222

42. Lian Т., Ho, R. J. Y. Trends and Developments in Liposome Drug Delivery Systems // J. Pharm. Sci., 2001. Vol. 90, No. 6. P. 667-680

43. Erjavec V., Pavlica Z., Sentjurc M., Petelin, M. In vivo study of liposomes as drug carriers to oral mucosa using EPR oximetry // Int. J. Pharm., 2006. Vol. 307, No. 1. P. 1-8

44. EmbiilK., Nacht S. The microsponges delivery system //J. Microencapsul., 1996. Vol. 5. P. 575-588

45. Jelvehgari M., Siahi-Shadbad M. R., Azarmi S., Martin G. P., Nokhodchi A. The micro-sponge delivery system of benzoyl peroxide: Preparation, characterization and release studies // Int. J. Pharm., 2006. Vol. 308, No. 1. P. 124-132

46. OrluM., CevherE., AramanA. Design and evaluation of colon specific drug delivery system containing flurbiprofen microsponges // Int. J. Pharm., 2006; Vol.318, No. 1, pp. 103-117

47. ChadawarV., Jessy ShajiJ. Microsponge delivery system // Curr. Drug Del., 2007. Vol. 4, No. 2. P. 123-129

48. Szente L., Szejtli J., Szeman J., Kato L. Fatty Acid-Cyclodextrin Complexes: Properties and Applications //J. Incl. Phenom. Macrocycl: Chem., 1993. Vol. 16, No. 4. P. 339-354

49. Stella V. J., RajewskiR. A. Cyclodextrins: Their Future in Drug Formulation and Delivery // Pharm. Res., 1997. Vol. 14; No. 5. P. 556-567

50. Monza da SilveiraA., Ponchel G., PuisieuxF., DucheneD. Combined Poly(isobutylcyanoacrylate) and Cyclodextrins Nanoparticles for Enhancing the Encapsulation of Lipophilic Drugs // Pharm. Res., 1998. Vol. 15, No. 7. P. 1051-1055

51. Lofitsson T., Olafsson J. H. Cyclodextrins: new drug delivery systems in dermatology // Int. J. Derm., 1998. Vol: 37. P. 241-246,

52. Uekama K., Hirayama F., Irie T. Cyclodextrin drug carrier systems // Chem: Rev., 1998. Vol. 98. P. 2045-2076

53. Hattori K., Kenmoku A., Mizuguchi M., Ikeda D., Mizuno MI, Inazu T. Saccharide-branched Cyclodextrins as-Targeting Drug Carriers // J. IncK Phenom. Macrocycl. Chem., 2006. Vol. 56, No. 1-2. P. 9-16

54. Cavalli R., Trotta F., Tumiatti W. Cyclodextrin-based Nanosponges for Drug Delivery // J. Incl. Phenom. Macrocycl. Chem., 2006. Vol. 56, No. 1-2. P. 209-213

55. WehrleK., Gallagher E., Neville D. P., KeoghM.K., ArendtE. K. Microencapsulated high-fat powders in biscuit production // Z. Lebensm. Unters Forsch. A., 1999. Vol. 208, No. 5-6. P. 388-393

56. O'Brien C. M., Grau H., Neville D. P., Keogh M. K., Arendt E. K. Functionality of microencapsulated high-fat powders in wheat bread // Eur. Food Res. Technology, 2000. Vol. 212, No. LP. 64-69

57. Gibbs B. F., Kermasha S., Alii I., Mulligan C. N. Encapsulation in the food industry: a review // Int. J. Food Sci. Nutr., 1999. Vol. 50, No. 3. P. 213-224

58. Partanen R., Ahro M., Hakala M., Kallio H., Forssell P. Microencapsulation of caraway extract in (3-cyclodextrin and modified starches // Eur. Food Res. Technology, 2002. Vol. 214, No. 3.P. 242-247

59. ShahinR., LeefM., Eldridge J., Hudson M., GilleyR. Adjuvanticity and Protective Immunity Elicited by Bordetella pertussis Antigens Encapsulated in Poly(DL-Lactide-Co-Glycolide) Microspheres // Infect. Immun., 1995. Vol. 63, No. 4. P. 1195-1200

60. Mandal T. K. Development of Biodegradable Drug Delivery System to Treat Addiction // Drug Develop. Ind. Pharm., 1999; Vol. 25, No. 6., pp.773-779

61. Ogawa Y. Injectable microcapsules prepared with biodegradable poly(alpha-hydroxy) acids for prolonged release of drugs // J. Biomater. Sci. Polymer Edn., 1997. Vol. 8, No. 5. P. 391-409

62. Ichikawa H., Fujioka K., Adeyeye M. C., Fukumori Y. Use of ion-exchange resins to prepare 100 |xm-sized microcapsules with prolonged drug-release by the Wurster process // Int. J. Pharm. 2001. Vol. 216, No. 1-2. P. 67-76

63. Sirotti C., Colombo I., Grassy M. Modelling of drug-release from poly-disperse microencapsulated spherical particles // J. Microencapsul., 2002. Vol. 19, No. 5. P. 603-614

64. Haider A., Sa B. Preparation and In Vitro Evaluation of Polystyrene-Coated Diltiazem-Resin Complex by Oil-in-Water Emulsion Solvent Evaporation Method // AAPS PharmSciTech., 2006. Vol. 7, No. 2, Article 46

65. Palmieri G. F., Bonacucina G., Di Martino P., Martelli S. Gastro-resistant microspheres containing ketoprofen // J. Microencapsul., 2002. Vol. 19, No. 1. P. 111-119

66. SarmentoB., Martins S., Ribeiro A., VeigaF., NeufeldRi, FerreiraD. Development and Comparison of Different Nanoparticulate Polyelectrolyte Complexes as Insulin Carriers // Int. J. of Peptide Research and Therapeutics, 2006. Vol. 12, No. 2. P. 131-138

67. Tiyabooncchai W., Ritthidej G. C. Development of« indomethacin sustained release microcapsules using- chitosan-carboxymethylcellulose complex coacervation // Songclanaka-rin J. Sci. Technol., 2003. Vol'. 25, No. 2. P: 245-254

68. Thimma T. R., Tammishetti S. Barium chloride crosslinked carboxymethyl guar gum beads for gastrointestinal drug delivery // J. Appl. Polym. Sci., 2001'. Vol. 82, Iss. 12. P. 3084-3090*

69. Silva C. M., Ribeiro A. J., Figueiredo M., FerreiraD., VeigaF. Microencapsulation of Hemoglobin in Chitosan-coated Alginate Microspheres Prepared by Emulsifica-tion/Internal Gelation // The AAPS Journal; 2006. Vol. 7, No. 4. P. 903-913

70. Ahonkhai E. I., Ikhuoria M. A., Okhamafe A. O. Effect of Solvent Type and Drying Method on Protein Retention in Chitosan-Alginate Microcapsules // Tropical J. of Pharmaceutical Research, 2006. Vol. 5, No. 2. P. 583-588

71. Jones D. H., McBride B. W., Farrar G. H. Poly(lactide-co-glycolide) microencapsulation of vaccine antigens // J. of Biotechnology, 1996. Vol: 44, No. 1-3. P. 29-36

72. UchidaT., ShiosakiK., Nakada Y., FukadaK., Eda Y., Tokiyoshi S., NagareyaN., Mat-suyama K. Microencapsulation of hepatitis B core antigen for vaccine preparation // Pharm. Research., 1998. Vol. 15, No. 11. P. 1708-1713

73. Men Y., Audran R., Thomasin C., Eberl G., Demotz S., Merkle H. P., Gander В., Corra-din G. МНС class I- and class II-restricted processing and presentation of microencapsulated antigens // Vaccine, 1999. Vol. 17, Iss. 9-10. P. 1047-1056

74. GillR. F., Montgomery P. C. Enhancement of rat tear IgA antibody responses following intranasal immunization with antigen and CpG ODN // Curr. Eye Res., 2002. Vol. 24, No. 3. P. 228-233

75. Dixit V., Gitnick G. Transplantation of microencapsulated hepatocytes for liver function, replacement // J. Biomater. Sci. Polym. Ed., 1995. Vol. 7, No. 4. P. 343-357

76. LiR. H.; AltreuterD. H.; Gentile F. T. Transport characterization of hydrogel matrices for cell encapsulation // Biotechnol. bioeng. 1996. Vol. 50, No. 4. P. 365-373

77. Аметов А. С. Новое качество жизни больного сахарным диабетом // Наука и жизнь,2001. №3

78. Strand В. L., Gâserod О., KulsengB., EspevikT, Skjâk-Brœk G. Alginate-polylysine-alginate microcapsules: effect of size reduction on capsule properties // J. Microencapsul.,2002. Vol. 19, No. 5. P. 615-630

79. QuekC.-H., Li J, SunT. Photo-crosslinkable microcapsules formed by polyelectrolyte copolymer and modified collagen for rat hepatocyte encapsulation // Biomaterials, 2004. Vol. 25. P. 3531-3540

80. Chang T. M. S. Artificial Cells for Cell and Organ Replacements // Artificial Organs, 2004. Vol. 28, No.3. P. 265-270

81. Prakash S., Soe-Lin H. Strategy for Cell Therapy: Polymers for Live Cell'Encapsulation and Delivery // Trends Biomater. Artif. Organs, 2004. Vol. 18, No. 1. P. 24-35

82. Kühtreiber W. M., Lanza R. P., Chick W. L. Cell Encapsulation Technology and Therapeutics // Birkhauser, Boston, Basel, Berlin, 1999. 450 p.

83. Diekmann S., Glöckner P., Bader A. The influence of different cultivation conditions on the metabolic functionality of encapsulated primary hepatocytes // Int. J. Artif. Organs, 2007. Vol. 30, No. 3. P. 192-198

84. Karp J. Mi, Shoichet M. S., Davies J. E. Bone formation on two-dimensional poly(DL-lactide-co-glycolide) (PLGA) films and three-dimensional PLGA tissue engineering scaffolds in vitro // J. Biomed: Mater. Res., 2003. Vol: 64A. P. 388-396

85. Karp J. M., RzeszutekK., Shoichet, M. S., Davies, J. E. Fabrication of Precise Cylindrical Three-Dimensional Tissue Engineering Scaffolds for In Vitro and' In Vivo Bone Engineering Applications // J: Craniofac. Surg., 2003. Vol. 14, No. 3. P. 317-323

86. Junyapracert V. B., Mitrevej A., Sinchaipanid N., Boonme P., Wurster D. E. Effect of Process Variables on the Microencapsulation» of Vitamin A Palmitate by Gelatin-Acacia Coacervation // Drug Dev. Ind. Pharm. 2001'. Vol. 27, Iss. 6/ P. 561-566

87. Simonnet J-T., Richard P., AncilottiD., Benech-Kieffer F., HadjurC., DelvigneV. Encapsulation of vitamins enhances their delivery into skin // World congress of dermatology.- Paris, 2002

88. Simonnet J-T., Richard P. L'Oreal, USP 591487

89. DodaneV., Vilivalam V. D. Pharmaceutical applications of chitosan // PSTT, 1998. Vol. I, No. 6. P: 246-253

90. Müller R., MäderK, GohlaS. Solid-lipid nanoparticles (SLN) for controlled drug delivery a review of the state of the art // Eur. J. Pharm. Biopharm. 2000. Vol. 50. P. 161-177

91. PeiraE., MarzolaP., Podio V., Aime S., Sbarbati A., Gasco M. R. In vitro and in<vivo study of solid lipid nanoparticles loaded with superparamagnetic iron oxide // J. Microen-capsul.; 2003. Vol. 11, No. 1. P. 19-24

92. BondiM. L., FontanaG., CarlisiB., GiammonaG. Preparation and characterization of solid lipid nanoparticles containing cloricromene // J. Microencapsul., 2003. Vol. 10, No. 4. P. 245-250

93. Hou D., Xie C., Huang K., Zhu C. The production and characteristics of solid lipid nanoparticles (SLNs) // Biomaterials, 2003. No. 24. P. 1781-1785

94. Ko J. A., ParkH. J., Park Y. S., Hwang S. J., Park J. B: Chitosan microparticle preparation for controlled drug release by response-surface methodology // J. Microencapsul., 2003. Vol. 20, No. 6. P. 791-797

95. McGuireM. R., ShashaB. S. Starch"encapsulation of microbial pesticides // American Chemical Society Symposium Series, 1995. Vol. 595. P. 229-237

96. Satturwar P. M., Mandaogade P. M:, Dorle A. K. A novel method for preparation of Eu-dragit RL microcapsules 11 J. Microencapsul:, 2002. Vol. 19, No. 4. P. 407-413

97. Alavi A. K., Squillante III E., Mehta K. A. Formulation of enterosoluble microparticles for an acid labile protein // J. Pharm. Pharmaceut. Sci., 2002. Vol. 5, No. 3. P. 234-244

98. Leelarasamee N., Howard S. A., Malanga C. J., Ma J. K. H. A method, for the preparation of polylactic acid microcapsules of controlled particle size and drug loading // J. Microencapsul., 1988. Vol. 5. P. 147-157

99. Шапиро IO., Квитницкая Э., Бабцов В. Преимущества новых микрокапсул для доставки неустойчивых соединений//80Р\У-.1оигпа1 (Russian version); 2001. №5-6. G. 4-10;

100. Arshady R. Microspheres, and microcapsules, a survey of manufacturing techniques. Part II: Coacervation■// Polym:'Eng. Sci.,. 1990: Vol: 30| No. 5. P: 905-914' :

101. Шумилина E. В., Щипунов E. А. Гели хигозана с каррагинанами.// Коллоидн. ж.,2002: Т. 64, № 31G: 413-420^. ;

102. Weinbreck F., de Vries R., SchrooyenP., de Kruif C. G. Complex coacervation of whey proteins andigum arabic//Biomacromolecules,.2003; Vol! 4. P.293-303

103. Weinbreck F.; Tromp R. H., de Kruif C. G. Composition and structure of whey protein/gum arabiccoacervates//Biomacromolecules, 2004: Vol: 5. P; 1437-1445'

104. Ducel V., Richard J., Popineau Y., Boury F. Rheological Interfacial Properties of Plant Protein-Arabic Gum Coacervates at the Oil-Water Interface // Biomacromolecules, 2005. Vol. 6, Iss. 2. P. 790-796

105. Bartkowiak A., HunkelerD. New Microcapsules Based on Oligoelectrolyte Complexation // Ann. N. Y. Acad. Sci., 1999. Vol. 875. P. 36-45

106. Bartkowiak A., HunkelerD. Alginate-oligochitosan microcapsules: a mechanistic study relating membrane and capsule properties to reaction conditions // Chem. Mater. 1999. Vol. 11. P. 2486-2492

107. Bartkowiak A., HunkelerD. Alginate-oligochitosani microcapsules. II. Control of me-chanistical resistance and permeability of the membrane // Chem. Mater. 2000. Vol. 12. P. 206-212

108. RehorA., Canaple L., Zhang Zl, HunkelerD. The compressive deformation of multi-component microcapsules: Influence of size, membrane thickness, and compression speed // J. Biomater. Sci. Polymer Edn, Vol. 12,2001. No. 2, P: 157-170

109. MiF.-L., Shyu S.-S., Chen C.-T. Porous chitosan microsphere for controlling the antigen release of Newcastle disease vaccine: preparation of antigen-absorbed microsphere and in vitro release // Biomaterials, 1999. Vol. 20. P: 1603-1612'

110. Blandino A., Macias M., Cantero D. Glucose oxidase release from calcium alginate gel capsules // Enzyme Microb. Technol., 2000. Vol. 27. P. 319-324'

111. Breguet V., GugerliR., PernettiM. von Stockar U., Marisonl. W. Formation of Microcapsules from Polyelectrolyte and Covalent Interactions // Langmuir, 2005. Vol.21. P. 9764-9772

112. Liu Z. M. Becker T., NeufeldR. J. Spherical Alginate Granules Formulated for QuickRelease Active Subtilisin // Biotechnol. Prog., 2005. Vol. 21. P. 568-574

113. WeinbreckF., Minor M., de KruifC. G. Microencapsulation of oils using whey protein/gum arabic coacervates // J. Microencapsul., 2004. Vol. 21, No. 6. P. 667-679

114. WeinbreckF., Wientjes R. H: W., NieuwenhuijseH. Rheological properties of whey protein/gum arabic coacervates // J. Rheol. 2004. Vol. 48, Iss. 6. P. 1215-1228

115. Lamprecht A., Schäfer U., LehrC.-M. Influences of process parameters on preparation of microparticle used as.a carrier system for Q-3 unsaturated fatty acid ethyl esters // J. Microencapsul., 2001. Vol. 18, No. 3. P. 347-357

116. Ghang C.-P., Leung T.-K., Hsu C.-C. Release properties on gelatin-gum- arabic microcapsules containing camphor oibwith added-polystyrene // Colloids Surf., B: Biointerface, 2006. Vol. 50; Iss. 2. P. 136-140

117. БабакВ. Г. Коллоидная химия в технологии микрокансулирования. ЧТ. Свердловск: Изд-во Урал, ун-та, 1991. 172 с.

118. Cleland J. L. Solvent evaporation processes for the production of controlled'release biodegradable microspheres formulations for therapeutical?and vaccines.// Biotechnol. Prog., 1998. Vol. 14, No. 1. P. 102-107

119. Tracy M. A., Ward K. L., Firouzabadian L., Wang Y., Dong N., Qian R., Zhang Y. Factors Affecting the Degradation Rate of Poly(Lactide-Co-Glycolide).Microspheres, in-Vivo and in-Vitro // Biomaterials, 1999. Vol. 20, Iss. 11. P. 1057-1062

120. JeongB., Kibbey M. R., Birnbaum J. C., Won Y.-Y., GutowskaA. Thermogelling biodegradable polymers with hydrophilic backbones: PEG-g-PLGA // Macromolecules, 2000. Vol. 33, No. 22. P. 8317-8322

121. KoyamaN., Doi, Y. Miscibility, thermal properties and enzymatic degradability of binary blends of poly(R)-3 hydroxybutyric acid. with poly(e-caprolactone-co-lactide) // Macromolecules, 1996. Vol. 29, No. 18. P. 5843-5851

122. Rajeev A. J. The manufacturing techniques of various drug loaded biodegradable poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) devices // Biomaterials, 2000. Vol. 21, Iss. 23. P. 24752490

123. KuritaK., ShimadaK., NishiyamaY., ShimojohM., Nishimura S.-I. Nonnatural branched polysaccarides: synthesys and properties of chitin and chitosan having a-mannoside branches // Macromolecules, 1998. Vol. 31, No. 15. P. 4764-4769

124. Diaz R. V., Llabres M., Evora C. One-month release microspheres of 1-125 bovine calcitonin in-vitro and in-vivo studies // J: Contr. Release, 1999. Vol.- 59, Iss. 1. P. 55-62

125. LemoineD., WautersF., Bouchend'homme S., PreatV. Preparation and Characterization of Alginate Microspheres Containing a Model Antigen // Int. J. Pharm, 1998. Vol. 176; Iss. l.P. 9-19

126. TabataY-., IkadaY., MorimotoK., KatsumataH., YabutaT., IwanagaK., KakemiM. Surfactant-free preparation of biodegradable hydrogel microspheres for protein release // L Bioact. Compat. Polym., 1999. Vol. 14, Iss. 5. P. 371-384

127. Kader A., Jalil R. Formulation Factors Affecting Drug-Release from Poly(Lactic Acid) (PLA) Microcapsule Tablets // Drug Develop. Ind. Pharm., 1999. Vol. 25, Iss. 2. P. 141151

128. YinX., Stover H. D. H. Hydrogel Microspheres Formed by Complex Coacervation of Partially MPEG-Grafted Poly(styrene-a/f-maleic anhydride) with PDADMAC and Cross-Linking with Polyamines // Macromolecules, 2003. Vol. 36. P. 8773-8779

129. Jegat C., Taverdet J. L. Stirring speed influence study on the microencapsulation process and on the drug release from microcapsules // Polymer Bull., 2000. Vol. 44. P. 345-351

130. Duquemin S. J., Nikon J. R. The effect of sodium lauryl sulphate, cetrimide and poly-sorbate-20 surfactants on complex coacervate volume and droplet size // J: Pharm. Pharmacol:, 1985. Vol: 37, Iss: 10: P; 698-702 , .

131. Vinetsky Y., MagdassiM. Formation and surface properties of microcapsules based on gelatin-sodium dodecyl sulphate interactions // Colloids Surf., A: Physicochem. Eng. Asp., 1997. Vol. 122, Iss. 1-3. P. 227-235

132. RongY., ChenH.-Z., WeiD.-C., SunJ.-Z., WangM. Microcapsules with compact membrane structure from gelatin and styrene maleic anhydride copolymer by complex coa-cervation // Colloids Surf., A: Physicochem. Eng. Asp., 2004. Vol. 242, Iss. 1-3. P. 17-20

133. Franjione J., Vasishtha N. The art and science of microencapsulation // Summer 1995 issue of Technology Today®

134. DowlerC. C., Dailey O. D., MullinixB. G. Polymeric microcapsules of alachlor and metolachlor: preparation and evaluation of controlled-release properties // J. Agric. Food. Chem. 1999. No. 47. P. 2908-2913

135. Saunders B. R., Crowther H. M., Vincent B. Poly(methyl methaciylate)-co-(methacrylic acid). Microgel Particles: Swelling Control Using pH, Cononsolvency, and" Osmotic Deswelling // Macromolecules, 1997. Vol. 30, No. 3. P. 482-487

136. Eichenbaum G. M., KiserP. F., Simon S. A., NeedhamD. pH and Ion-Triggered Volume Response of Anionic Нуdrogel* Microspheres. // Macromolecules, 1998. Vol. 31, No. 15. P. 5084-5093

137. KimJ.-C., Song M.-E., LeeE.-J., ParkS.-K., RangM.-J., AhnH.-J. Preparation and Characterization of Triclosan-Containing Microcapsules by Complex Coacervation // J. Dispersion Sci. Technol., 2001. Vol. 22, Iss. 6. P. 591-596

138. ГОСТ 25794.1-83. Реактивы. Методы приготовления титрованных растворов для кислотно-основного титрования. —М., ИПК «Издательство стандартов», 2003. 12 с.

139. Медозонид концентрат. Технические условия. ТУ 9154-004-11441871-04. -М., ООО фирма «МЕДОЗОН», 2004. 9 с.

140. Желатин фотографический активный-низковязкий медленный. Технические условия. ТУ 6-44-1548-91. 1992. 72 с.

141. Техническая документация фирмы «Agrisales»

142. Международная номенклатура , косметических ингредиентов (International Nomenclature of Cosmetic Ingredients INCI) URL: www.cosmetic-world.com/inci (дата обращения: 22.11.2007)

143. Техническая документация фирмы «Basf»

144. Техническая документация фирмы «3V Sigma»

145. Техническая документация фирмы «Еврохим»i

146. Коллоидная химия поверхностно-активных веществ и полимеров: практикум по технологии косметических средств / Под ред. В.Е.Кима, и А. С.Гродского. М.: Топ-Книга, 2003. 144 с. - (Ex professo)

147. Лабораторные работы и задачи по коллоидной химии / Под ред. Ю. Г. Фролова и А. С. Гродского. -М.: Химия, 1986. 216 е.: ил.

148. Martinez TellezG., Ledea Lozano О., Días Gomez M. F. Measurement of Peroxidic Species in Ozonized Sunflower Oil // Ozone Sei. Eng., 2006. Vol. 28. P. 181-185

149. Адамсон А. Физическая химия поверхностей. Пер. с англ. -М., Мир, 1979. 569 е.: ил.

150. Пугачевич П. П., Бегляров Э. М., ЛавыгинИ. А. Поверхностные явления в полимерах -М.: Химия, 1982. 200 с.

151. Государственная фармакопея СССР. Одиннадцатое издание. Выпуск 1. Общие методы анализа. -М.; Медицина, 1987. 334 с.

152. Дёрффель К. Статистика в аналитической химии. Пер. с нем. М., Мир, 1994. 268 е.: ил.

153. Основы аналитической химии. В 2 кн. Кн. 2. Методы химического анализа: Учеб. для вузов. Под ред. Ю. А. Золотова. -М.: Высш. шк., 1996. 461 е.: ил.

154. Отго M. Современные методы аналитической химии (в 2-х томах). Т. 1. -М.: Техносфера, 2004. 288 с.

155. Фролов Ю. Г., Гродский А-. С. Свойства разбавленных растворов полимеров: Учеб. пособие. -М.: МХТИ, 1983. 57 е.: ил.

156. Тагер А. А. Физико-химия полимеров. -М.: Научный мир, 2007. 576 с.