Распределение по поверхности и динамическое поведение органических молекул, закрепленных на кремнеземе тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.04 ВАК РФ

'л О ; .

_[! ^ у А -

Московский ордена Ленина, ордена Октябрьской Революции и ордена Трудового Красного Знамени государственный университет имени М. В. Ломоносова

ХИМИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ Кафедра химии нефти и органического катализа

На правах рукописи ФАДЕЕВ Александр Юрьевич

УДК 541.183.02

РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ПО ПОВЕРХНОСТИ И ДИНАМИЧЕСКОЕ ПОВЕДЕНИЕ ОРГАНИЧЕСКИХ МОЛЕКУЛ, ЗАКРЕПЛЕННЫХ НА КРЕМНЕЗЕМЕ

Специальность: 02.00.04 — физическая химия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Москва — 1990

Работа выполнена на кафедре химии нефти и органического катализа Химического факультета Московского государственного университета имени М. В. Ломоносова.

Научный руководитель:

доктор химических наук, ведущий научный сотрудник Г. В. Лисичкин

Научный консультант:

доктор химических наук, старший научный сотрудник С. М. Староверов

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор К. И. Сакодынский

кандидат химических наук, старший научный сотрудник И. А. Леенсон

Ведущая организация:

Отделение института химической физики АН СССР

Защита состоится « . . 1990 г. в /Кч. на за-

седании Специализированного Ученого Совета Д-053.05.44 по химическим наукам при Московском государственном университете им. М. В. Ломоносова по адресу: 119899, ГСП-3, Москва, Ленинские горы, Химический факультет МГУ, СХА.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Химического факультета МГУ.

Автореферат разослан « . . 1990 г.

Ученый секретарь Специализированного Ученого Совета,

кандидат химических наук Е. В. Калашникова

.... ;! .. . ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ ...... -

^ . {Актуальность проблемы. В последние года широкое примене-йШ^й сорбции, катализе и биотехнологии находят пористые минеральные носители, в первую очередь,- кремнеземы с закрепленными на поверхности органическими соединениями. Наиболее важной областью практического использования химически модифицированных кремнеземов (ХМК) является высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), которая применяется не только в анализе, но и для препаративного и промышленного выделения продуктов биотехнологии и тонкого органического синтеза. Это предъявляет повышенные требования к воспроизводимости характеристик сорбентов на основе ХМК и определяет необходимость разработки методов синтеза материалов с заданной структурой и свойствами.

Целенаправленный синтез ХМК невозможен без углубленных данных о молекулярной организации привитого слоя. Хотя к началу наших исследований (1985 г.) в литературе появились работы по данной проблеме, практически неисследованными в теоретическом и экспериментальном плане оставались вопросы, связанные с распределением закрепленных молекул по поверхности носителя, влиянием структурно-геометрических характеристик кремнеземного носителя на структуру привитого слоя, а также динамическим поведением и конформационным состоянием молекул привитого слоя. Отсутствовали подходы к экспериментальному изучению распределения по поверхности закрепленных молекул и диффузии адсорбированных молекул в привитом слое.

Перечисленный круг задач и определяет актуальность настоящей диссертационной работы.

Цель работы. В работе были поставлены следущие основные задачи:

- разработка метода исследования распределения прививаемых молекул по поверхности кремнезема в реакциях химического модифицирования;

- проведение теоретического рассмотрения структуры привитого слоя пористых кремнеземов, модифицированных алкилсиланами;

- изучение влияния структурно-геометрических характеристик пористого кремнеземного носителя на структуру привитого слоя кремнеземов, модифицированных алкилсиланами, в особенности на динамическое поведение и конформационное состояние привитых алккльных групп;

- разработка методов количественного описания диффузии адсорбированных молекул в привитом слое ХМК;

- установление взаимосвязи мевду структурой привитого соединения и хроматографическими свойствами ХМК на примере сорбентов для аффинной хроматографии.

Научная новизна. Впервые теоретически и экспериментально исследованы вопросы распределения привитых органических молекул по поверхности кремнезема как .в реакциях иммобилизации, так и в реакциях поверхностной сборки. Разработан метод парамагнитных меток на основе ион-радикальных солей хемосорбированного тетра-' цианохинодиметана. Показана применимость данного метода для исследования распределения различных классов органических, молекул по поверхности кремнезема.

Впервые исследовано распределение аминов, аминокислот, пептидов, бромалкилхлорсиланов, алкилхлорсиланов и метоксисиланов по поверхности в реакциях химического модифицирования кремнезема. Установлено существование трех различных типов распределения закрепленных, молекул по поверхности кремнезема; островковое, статистическое и равномерное.

Проведено, теоретическое рассмотрение структуры привитого слоя кремнеземов, модифицированных алкилсиланами, во взаимосвязи с пористой структурой кремнеземного носителя. Теоретически предсказано и экспериментально доказано существование двух типов структур привитого слоя : "жесткой" и "лабильной". Разработан метод модельного расчета важнейших характеристик привитого слоя: плотности прививки, толщины привитого слоя, содержания углерода, доли жесткой структуры в привитом слое.

Определены коэффициенты диффузии сорбированного пирена и эффективная вязкость привитого слоя кремнеземов, модифицированных алкилсиланами. Показано, что коэффициенты вращательной и латеральной диффузии, значения энергии активации диффузии, вязкости привитого слоя зависят от пористой структуры кремнеземного носителя, плотности прививки и длины привитых алкильных молекул, наличия дополнительной силанизации и температуры.

На основе анализа спектров диффузного отражения продуктов взаимодействия аминосодержащих ХМК с ' тетрацианохинодиметаном предложен метод, позволяющий идентифицировать тип закрепленных, аминогрупп и характер связывания (одно- и двухточечное) диамино-соединевий.с поверхностью носителя. На примере сорбентов для аф-финой хроматографии показано, что селективность их действия определяется способом закрепления аффинного лигацда.

,.Практическое значение работы. В НИИ Гематологии и переливания крови (г.Львов) внедрены 8ффинные сорбенты для выделения и

очистки протеолитических ферментов и активировашшй носитель для иммобилизации низкомолекулярных лигандов, белков и ферментов.

Полученные в работе расчетные диаграммы состояния привитого слоя позволяют осуществлять целенаправленный синтез обращенно-фазовых сорбентов с заданным содержанием углерода, плотностью прививки и структурой привитого слоя. Результаты исследований по распределению привитых молекул по поверхности носителя позволяют получать модифицированные кремнеземы с изолированным или остров-ковым расположением закрепленных функциональных групп, что может быть использовано в синтезе селективных сорбентов и катализаторов.

Апробация работы. Основные результаты работы были доложены на Всесоюзном семинаре "Химические реакции на поверхности дисперсных твердых тел" (Киев,1986 г.), Ш Всесоюзной конференции по химии кластеров (Одесса,1987 г.), IV Всесоюзном симпозиуме по молекулярной хроматографии (Алма-Ата,1987 г.), конференциях молодых ученых МГУ (Москва, 1985-87 гг.), VII Всесоюзном совещании по проблеме "Комплексы с переносом заряда и ион-радикальные соли" (Черноголовка, 1988 г.), Международном симпозиуме ИШАК по химии поверхности, адсорбции и хроматографии (Москва, 1988 г.), XVI Межвузовской конференции молодых ученых "Химия и физика твердого тела" (Ленинград,1989 г.).

Структура и обьем диссертации. Диссертация состоит из введения, секи глав, выводов, списка литературы и приложения. Она содержит 226 стр., Еключая 27 табл. и 33 рис. Библиография - 125 ссылок. В приложении представлены акты о внедрении полученных в работе результатов.

Публикации. По результатам исследований опубликовано 8 статей и 4 тезиса на научных конференциях.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ ЧАСТЬ 1

Метод йарамагнитных меток на основе ион-радикальных солей тетрацианохинодиметана. в исследовании распределения молекул, закрепленных на кремнеземе

Вопрос о распределении закрепленных молекул по поверхности является ключевым в химии привитых поверхностных соединений. Знание механизма заполнения поверхности дает возможность целенаправленного синтеза новых классов сорбентов и катализаторов с заданным распределением сорбционнкх и активных центров по поверхности носителя. Настоящая часть работы посвящена разработке экспериментального метода-исследования распределения закрепленых

молекул и классификации реакций химического модифицирования по типам распределения молекул по поверхности. 1.1. Распределение молекул модификатора по поверхности кремнезема в реакциях иммобилизации

В качестве физико-химического метода исследования, чувствительного к взаимному расположению закрепленных молекул, мы использовали спектроскопию ЭПР. Парамагнитными метками служили анион-радикалы тетрацианохинодиметана. В работе показано, что ' тетрацианохинодиметан - ^{^СГу^н *ТС№3) в мягких условиях и с высоким выходом реагирует с закрепленными вторичными и третичными аминами по схеме: ^

!ю£щсн2)пл(с2н5)2 + тещ -> |1сексн2)пга+(с2н5)2.тско~- (1) В' тех случаях, когда исходный модификатор представлял с;обой бромалкилхлорсилан общей формулы С1(112)81(СН2)пВг , п=1,3; с1,сн3, то после реакции модификатора с поверхностью бромалкиль-ные группы количественно замещали на аминогруппы избытком диэтиламина и лишь после этого обрабатывали TCNQ.no (1). При таком подходе отпадает необходимость сложного синтеза модификатора, содержащего в своем составе парамагнитные метки. Кроме того,появляется возможность исследовать реальные системы, поскольку обработка тещ происходит после взаимодействия модификатора с повехностью.

В работе показано, что в случае, когда закрепленные молекулы расположены на расстоянии менее 11 2, после их обработки тещ ЭПР спектр проявляется в виде обменно-сужаиного синглета с шириной линии АН = 0,5-1,2 Гс. Такие спектры характерны для кристаллических ион-радикальных солей тещ (ИРС тещ). В случае, когда закрепленные молекулы расположены на расстоянии 16 § и более, ЭЦР спектр проявляется в виде диполь-уширенного синглета, в ряде случаев обладающего смазанной сверхтонкой структурой. Если же на поверхности присутствуют и изолированные закрепленные молекулы и их агрегаты, то спектр ЭПР проявляется в виде суперпозиции обменного и диполь-уширенного синглетов. Мы принимали, что доля закрепленных молекул, находящихся в агрегатах, пропорциональна площади обменного синглета в спектре ЭПР.

В результате проведенных исследований удалось выявить три различных типа изменения ЭПР спектров с ростом поверхностной концентрации закрепленных молекул, соответствующих трем различным типам распределения закрепленных молекул по поверхности. Статистическое распределение. Молекулы модификатора реагируют с поверхностью независимо друг от друга случайным образом. При ма-

лых поверхностных концентрациях наблюдается полидисперсность состава привитого слоя, наряду с изолированными закрепленными молекулами присутствуют и их агрегаты. В спектрах ЭПР с ростом поверхностной концентрации закрепленных молекул постепенно увеличивается вклад обменного синглета:

J

1-10%

20-40%

80-100% ? Ст.зап.,%

Островковое распределение. Закрепленная молекула создает благоприятные условия для закрепления последующих молекул в непосредственной близости от себя ("положительный эффект соседа"). При малых степенях заполнения привитый слой состоит из агрегатов закрепленных молекул. Изолированные молекулы практически отсутствуют. Вид ЭПР спектра не зависит от поверхностной концентрации (изменяется только его интенсивность) и представляет собой обменный синглет:

Лг

J

1-10%

20-40%

80-100% > Ст.зап.,%

Равномерное распределение. Молекулы модификатора реагируют с поверхностью преимущественно в удалении от уже закрепленных молекул ("отрицательный эффект соседа"). Привитый слой преимущественно состоит из изолированных закрепленных молекул. ЭПР спектр с ростом поверхностной концентрации переходит от диполь-уширенного синглета со смазанной сверхтонкой структурой к ди-поль-уширенному синглету или суперпозиции диполь-уширенного и обменного синглетов, однако, вклад обменного синглета значительно ниже, чем в случае статистического распределения:

1-5%

10-15%

£0-40% ч, Ст.зап.,%

Критерием, позволяющим относить наблюдаемые эксперименталь-

ныв данные к тому или иному типу распределения, мохет быть вид зависимости доли закрепленных молекул, находящихся в агрегатах -а, от степени заполнения поверхности молекулами модификатора -в. Действительно, вид зависимости а(8) должен сильно различаться для различных типов распределения.

Мы провели моделирование на ЭВМ процесса заполнения поверхности молекулами модификатора и рассчитали кривую а=а(В) для статистического распределения. В расчетах молекулы модификатора аппроксимировали дисками с диаметром D=1 (в случае моно- и три-хлорсиланов эта величина принималась равной диаметру якорной кремнийорганической группы - 7,1 2)¡участок поверхности представлял собой квадрат 30 х 30, содержащий .реакционоспособные места (силанольные группы) в узлах регулярной треугольной сетки с параметром 4,5 8 , что соответствует среднему расстоянию между си-ланольными грушами в предельно гидроксилированных кремнеземах; координаты и выпавших дисков выбирали случайно из отрезка [0,30]. Агрегатом размера М считали набор из М.дисков, центры которых лежат друг от друга на расстоянии, не превышающем L. Величина L связана с конкретным физико-химическим методом регистрации агрегатов закрепленных молекул, что в нашем случае составляет 11 8 . Мы считали, что для проявления спинового обмена в спектрах ЭПР достаточно трех близкорасположенных закрепленных молекул. Расчетная кривая накопления агрегатов с размером М £ 3 представлена на рис.1. В тех случаях, когда экспериментальная зависимость а(в) лежит выше расчетной - мы имеем дело с остров-ковым распределением. В тех случаях, когда экспериментальная зависимость лежит ниже расчетной - мы имеем равномерное распределение закрепленных молекул по поверхности.

• Полученные экспериментальные зависимости а(6) суммированы на рис.1. Видно, что распределение молекул бромалкилхлорсиланов по поверхности в результате химического модифицирования имеет ярко выраженный островковый характер,тогда как распределение молекул 7~N,N-диэтиламинопропшифиметоксисилана - статистическое.

Алкилхлорсиланы не содержат функциональных груш, которые можно превратить в аминогруппы. Поэтому, для исследования их распределения использовалось то обстоятельство, что при заполнении поверхности но островковому механизму на 80-90% оставшиеся 10-20% немодифицированной поверхности будут представлять собой "островки" вакантных мест. В случае же статистического распределения модификатора - вакантные места будут также, распределены статистически. Оставшиеся немодифицированные участки поверхности

обрабатывали у-бромпропилтрихлорсиланом и исследовали его распределение как описано выше. Результаты исследований приведены в табл.1. Табл.1.

Распределение молекул модификатора по поверхности кремнезема в _реакциях иммобилизации_

Модификатор поверхности Условия реакции Тип распределения

1. (СН30)331(СН2)3М(02Н5) 2 Толуол,80 и Статистический

2. СЗ^З^СН^Вг Толуол,80°С Острозковый

3. С1(СН3)231(СН2)3В1' Толуол,80°С Островковый

4. СИСН^ЗШ^ВГ Толуол,80°С Островковнй

5. С181(СН3)3 Толуол,пиридин,80° С Островковый

Толуол,80°С Статистический

6. С1з31СдН17 Толуол,пиридин,80°С Островковый

Толуол,80 С Статистический

7. С1<СН3)2С12Н25 Толуол,пиридин,80° С Островковый

Толуол,80°С Статистический

На примере алкилхлорсиланов мы исследовали влияние органического основания - пиридина, служащего катализатором реакции модифицирования, на конечное распределение. Как видно из табл.1., проведение модифицирования с пиридином приводит к островковому, а в отсутствие пиридина - к статистическому распределению. 1.2 Распределений молекул по поверхности в реакциях поверхностной сборки Для закрепления на кремнеземе молекул сложного строения используют реакции, связанные с превращениями в привитом слое -метод поверхностной сборки. Наиболее часто для этих целей применяются ХМК, содержащие на поверхности бромпропильные, эпокси- и тозилатные группы ( N 1-3, табл.2).

Характеристики исходных модифицированных кремнеземов

* Табл.2.

* Привитое соединение ~ УШ^да, кокианизаша. ш ФУШСцИональн йерШ}тных

ммоль/г I групп/нм~

1 -(СН2;30СН2СН-СН2 1,79 0,26 1,3

2 -(СН2)3Вг 1,44 0,40 2,0

3 - (СН2) дОСН^НС^ОТв 5,40 0,26 1,3

4 - (СН2) дОСН^НС^ОТз 4,66 0,15 0,7

* - кремнеземный носитель - Силохром С-120.

Целью данной части работы явилось изучение распределения закрепляемых аминосоединений по поверхности при их взаимодействиии с функциональными группами ХМК. В качестве исследуемых аминосоединений были выбраны алифатические амины, аминокислоты и пептиды. При определении типа распределения использовали описанный в предыдущем разделе метод парамагнитных меток на основе ион-радикальных солей ФСВД.

Образцы с различной поверхностной концентрацией аминосоеди-ненкя получали по схеме:

¡к-сексн^з® + шге,!^ -> ¡^-фцсн^Ф-ш^ (2)

где Ф = Вг; -ОСН2СНЧЗН2; -0СН2СН(0Н)СН20Тв

Далее образцы обрабатывали Т(Ж) по схеме (1) и исследовали ЭПР спектры. Наиболее важные результаты приведены на рис.1 и в

табл.3.

Исходные фушсцисР нальные группы поверхности_

Распределение молекул по поверхности в реакциях поверхностной сборки

Табл.3.

Аминосоединёние

"Условия реакции

Тш

распределения

- (С!^ )3осн2сн^сн2

п-СзН^На,

(су^нн

П_С12Н251Ш2 п-С18НЭ7КН2

вода,20°С

вода,20°С

вода,20°С; ЫаС1, 1М „ С2Н50Н,20°С

С2Н50Н,20°С

Островковый Равномерный

Островковый Равномерный Равномерный

-(СН^зВг

п-СзД^Ш^

(С2н5)2ш

вода,20иС С2Н50Н,20°С

вода,20°С„ С2Н50Н,20°С

Островковый Островковый

Островковый Островковый

- (СН2) зОСН^СЕ^ОТа

п-Сз^Ш^

(С2Н5)2НН Н2К(СН2)2Ш2

вода.20°с С2НЦ0Н,20°С

вода,20°С

вода,20°С; рН = 3-9 рН = 1

вода,20°С

Островковый Островковый

Островковый

Островковый Статистический

Статистический

п-с18нЭ7ш2 с2н50н,20°с Равномерный

В результате исследований удалось установить, что определяющим фактором, приводящим к островковому распределению, является активность аминосоединения в реакциях нуклеофильного замещения функциональных групп поверхности ХМК. По нашему мнению, в случае высокой нуклеофальности аминосоединения закрепленная молекула

вызывает перераспределение электронной плотности соседних функциональных групп, что облегчает закрепление последующих молекул по соседству с уже закрепленными. Снижение активности аминосое-динения за счет протонирования или введения объемных заместителей (додецил- и октадециламин) приводит к статистическому или равномерному распределению. Проведение реакции в присутствии постороннего электролита стабилизирует промежуточные структуры с разделением зарядов и способствует активации соседних функциональных групп, приводя к островковому распределению.

Иммобилизация:

о - С1351(СН2)3ВГ • -

(НеО)381(СН2)3КЕг2

Поверхностная сборка: (ИСХ.ХМК ЖЗ, табл.2) А - п-СдН^Ш^

Д - (ОА^ИН

О - п-С18Н37Ш12

О - Н^СН^СШ!^

(в,*)

Рис.1. Расчетная зависимость а(9) (сплошная линия) для статистического распределения и экспериментальные данные.

ЧАСТЬ 2

Применение тетрацианохинодиметана в исследовании структуры аминосоединений, закрепленных на кремнеземе Способность тещ в мягких условиях давать окрашенные продукты с аминосоединениями может быть эффективно использована для идентификации состава привитого слоя ХМК. В связи с изложенным, представляло интерес исследование взаимодействия тещ с различными аминосоединениями, закрепленными на поверхности.Характеристики исследованных аминосодержащих ХМК приведены в табл.4.

По данным методов электронной спектроскопии диффузного отражения (ДО), спектроскопии ЭПР и потенциометрического титрования установлено, что при взаимодействии тещ с первичными аминогруппами поверхности основным продуктом реакции является амино-замещенное производное, тещ (поглощение при 430 нм):

- (сНд

N0'' >1*==' ^СИ

3 количествах, не превышающих 1Я, образуется и дизамещенное производное тещ . В качестве промежуточных продуктов реакции замечания установлено образование ИРС тещ. При взаимодействии с

вторичными и третичными аминогруппами на поверхности происходит образование КРС тепа.

ТаОл.4.

Привитое соединение Носитель 3 рУД.' М/Г Конц.аминосоедашения

ммоль/г групп/нм2

1. -(0Н2)3ЫН2 с-во 80 0,21 1,6

-(сн2)3ын2 Б1-300 300 0,80 1,6

2. -(СН2)11ЫН2 С-80 30 0,03 0,2

3. -(СН^ГШС^ С-80 80 0,12 1,0

4. -(СН2)3ШС12Н25 31-300 300 . 0,10 0,2

5. -(СН2)3Ы(С2Н5)2 С-80 80 0,24 1,8

-(СН2)3Н(С2Н5)2 Б1-300 300 0,51 1,0

Существенно, что элеткронные спектры ДО ХМК, содержащих первичные, вторичные и третичные аминогруппы, после обработки тема существенно различаются (см. рис.2).

о ~ "" ~~ ' — ~ """ ~~ ~~ ~ ~~ " " " —

. 840 625 470 430 360 ?.,пт

Рис.2. Электронные спектры ДО ХМК, содержащих первичные (1), вторичные (2) и третичные (3) аминогруппы, обработанных ТСМО (обр. 1,3,5 табл.4).

Значительный практический интерес представляет исследован» направления реакции в привитом слое при использовании полифункциональных лигандов, например, диаминов. Действительно, структура привитого слоя и сорбционные свойства сорбента -будут различными в зависимости от того произошло одно- или двухточечное свя зывание лиганда с поверхностными функциональными группами :

Цющсн^ф- + Ш2

£31.031 (СН„)Ф ?

^ п Щ

<

^ЗКШ (СН2 )ДФ

¿вюзкса,) ни

^ п ^ и

ЙЮЗКСН^Ш"

- 1С -

Характеристики исходных ХЖ приведены в табл.2. В качестве исследуемых диаминосоединений были выбраны: этилендиамин, аминокислоты лизин и орнитин, циклические декапептиды грамицидин С и бацитрацин А.

После проведения реакции исследуемых диаминосоединений с ХМК образцы обрабатывали тсэд и анализировали спектры ДО. Наличие поглощения при 430 нм в нашем случае однозначно говорило о том, что произошло преимущественно одноточечное связывание ли-ганда с поверхностью и часть первичных аминогрупп осталась свободной (обознач.в табл.5 "1:1"). В случае двухточечного, связывания указанная полоса в спектрах отсутствовала (обознач.в табл.5 "1:2"; см.рис.3).

Экспериментальные данные, суммированные в табл.5, свидетельствуют, что определяющее влияние на тип связывания оказывают природа функциональных групп поверхности, активность диаминосое-динения и его концентрация.

Табл.5.

Структура закрепленных диаминосоединений

Исходные ХМК* Степень заполнения поверхности диаминосоединенмем,%

Этилендиамин Лизин Орнитин 1"рамици-дин С Бацитрацин А

<10 1100 <10 |100 <10 |100 <101100 <10 |100

1. 1:2 1 2. 1:2 1 3. 1:2 1 4. 1:2 1 2 1:1 1:1 1:1 1:1 1:1 1:1 1:1 1:1 2 1:2 1:2 1:2 1:2 1:1 1:1 1:1 1:1 2 1:2 1:2 1:2 1:2 1:2 1:2 1:2 1:2 2 1:2 1:1 1:2 1:1 1:2 1:1 1:2 1:2

(*) - нумерация исходных ХМК соответствует табл.2.

840 625 470 430 360 \,пга

Рис.3. Электронные спектры ДО ХМК с закрепленным грамицидином С, обработанных TCNQ; (1)-закрепление грамицидина С проводили по реакции с эпокси-группами поверхности, (2)-по реакции с тозилатными группами поверхности. Полученные данные были использованы при синтезе аффинных

сорбентов на основе ХМК с закрепленными грамицидином и бацитра-цином. Было установлено, что указанные лиганды проявляют аффинность к исследованным протеолитическим ферментам (пепсин свиньи, тромбин человека, сериновая протеиназа из Thermoaotinomyoes vulgaris, трипсин человека, субтилизин), лишь будучи закрепленными на поверхности за обе аминогруппы (см.рис.4).

D

лу

(WVAAl®

VWVASH'

'NHg -NHg

^ео jrlMNaCl,

0 i6 V 20

Номер фракции

^280 Исх.буферный

р-р" Г "Ч

/о 1о 20

Рис.4. Одно- и двухточечное закрепление грамицидина С на поверхности (показано схематично) и типичные хроматограммы элюирова-ния протеиназ.

ЧАСТЬ 3

Влияние пористой структуры носителя на структуру привитого слоя химически модифицированных кремнеземов В современной ВЭЖХ основным классом сорбентов являются кремнеземы, химически модифицированные длинноцепочечными алкил-силанами. Анализ литературы показал, что зачастую хроматографи-ческие характеристики однотипных сорбентов заметно различаются и эти различия трудно поддаются объяснению. Даже простейшее рассмотрение показывает исключительную сложность подобных объектов. Действительно, поверхностная концентрация закрепленных ал-кильных групп (плотность прививки - р ) зависит от пористой структуры носителя; в свою очередь, уменьшение плотности прививки приводит к росту числа доступных силанольных групп и изменению толщины привитого слоя. Неконтролируемое изменение указанных параметров и является, по нашему мнению, основной причиной хро-матографической невоспроизводимости, казалось бы, идентичных ХМК. Представляется, что лишь рассмотрение ХМК как целого во взаимосвязи строения модификатора и пористой структуры кремне-

земного носителя позволит получать сорбенты с заданной структурой привитого слоя и воспроизводимыми свойствами.

Целью настоящей части работы явилось исследование влияния структурно-геометрических характеристик кремнезема на структуру привитого слоя, плотность прививки и толщину привитого слоя ХМК.

3.1. Теоретическое рассмотрение В основу теоретического рассмотрения была выбрана следующая модель: носитель имеет цилиндрические поры; в порах одинакового диаметра среднее расстояние мелщу точками фиксации закрепленных молекул постоянно; закрепленные молекулы принимают такую конфор-мацшо, которая обеспечивает наибольшую плотность прививки.

В рамках предложенной модели можно показать, что существует такое значение диаметра поры Б*, что для закрепленные ал-кильные молекулы начинают испытывать взаимные стерические затруднения. Например, для закрепленных алкильных цепей в 16 мети-леновых звеньев это значение составляет 9,8 нм. Для 1КП*

рассмотрим закрепленную алкильную цепь как цилиндр, расположенный перпендику-поверхности, с высотой ь и диаметром q. В данном приближении конформационные изменения закрепленных молекул будем рассматривать как изменение ьич. Из соотношения подобия (рис.5) получим: Рис.5. Модель приви- Ь = Щ/(Б - 2Ь)

того слоя при ткь*. Учитывая постоянство объема молекулы, получим соотношение между ьи? : ч = •) ^то1/Ьтс . Отсюда, выражение для плотности прививки при В<В* :

р(Ь) = 1,15/ Ь2 = 1,15131(0 - гы2/^^^2 Анализ функции р(Ю показал, что она имеет единственный максимум в интервале (О,Б/2) при и = 0/6. Полученный результат означает, что наибольшая плотность прививки реализуется при такой конформации закрепленных молекул, когда толщина привитого слоя вшестеро меньше диаметра поры. При этом плотность прививки линейно связана с диаметром поры : р(Ь=э/6) = сопело.

Для пор с Б>0* плотность прививки равна максимально возможной, что для алкилхлорсиланов составляет 2,3 групп/нм2. Предположив, что диаметр пор распределен по нормальному закону с параметрами В0 ио, окончательно получим:

Р = ^ ок 5^4 + <3>

Б^и б2 - доли поверхности, приходящиеся на узкие (Б<Б*) и широкие поры (ОБ4) соответственно. Результаты расчета по формуле (3) данных, полученных в .нашей лаборатории (А 1-6) и литературных данных (И 7-10) представлены в табл.6.

Плотность прививки: расчет и эксперимент Табл.6.

Привитое соединение

пористая структура исхода, носителя

Плотность ПрИВИВКИо групп/им^

В ,нм

о

о.нм

расчет Т эксперимент

1. 2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

10.

-°16Н33

"С16Н33

~°16Н33

"°16Е33

-°16Н33 -(сн2)10си

"С1бН33 "С18н37 "°18Н37 "°18Н37

40,0 25,0 13,5 11 ,5

5.4 6,8

14,0 16,0 12,0

8.5

5,0 3,0 3,0 1,5 1,0 1,5

1.0

3.0 1,0

1.1

2,3 2,3 1,9 1,9 1,3 1,5

2,3 2,2 2,2 1,9

2.3 ± 0,15 2,1 ± 0,15

2.0 ± 0,15 1,9 ± 0,15

1.4 ± 0,15 1 ,6 ± 0,15

2.1 ± 0,15 1 ,8 ± 0,15 2,1 ± 0,15 1 ,9 ± 0,15

Большой практический интерес представляло получение расчетных зависимостей содержания углерода %С и плотности прививики р от среденего диаметра пор носителя Во и числа атомов углерода п в ал-кильной цепи модификатора. Расчеты проводили по ур.(3). Результаты, представленные на рис.6., позволяют проследить основные тенденции изменения параметров привитого слоя в зависимости от структурно-геометрических характеристик носителя.

Рис.6. Зависимости и р от Б0 для С-18 сорбентов, объем пор -0,75 мл/г; (1) - о=1 нм,(2) - о=3 нм Зависимость %С от п.- числа атомов углерода в алкильной цепи модификатора Как было показано, в порах с Б<Б* привитый слой обладает фиксированной толщиной. Конформационные переходы закрепленных молекул ограничены или невозможны. Такое состояние привитого слоя мы наз-

важ "жесткой структурой". В противоположность жесткой структура в порах с В>Б* реализуется "лабильная структура": закрепленные молекулы могут изменять свои конформации в зависимости от внешних условий и температуры. Применительно к процессам хроматографического разделения на сорбентах с жесткой структурой предпочтителен адсорбционный механизм удерживания, а на сорбентах с лабильной структурой, привитый слой которых проницаем для молекул сорбата, - распределительный механизм удерживания.

Представляется, что для более полного описания привитого слоя ХМК, наряду с 55С и плотностью прививики, необходимо введение нового параметра л - содержания жесткой структуры в привитом слое. По определению, И = [Б1/(31+52)]-100%. Расчетная зависимость и от среднего диаметра пор представлена на рис.7. По нашему мнению, именно непостоянство и при неконтролируемом изменении Бо от партии к партии является основной причиной хроматографической невоспроизводимости. Воспроизводимыми свойствами могут обладать лишь структурно-однотипные сорбенты, привитый слой которых характеризуется одинаковыми значениями %С, р и й. С этой точки зрения, лучше всего использовать сорбенты с чисто жесткой (й=юо;б) или чисто лабильной

Рис.7. Зависимость доли жесткой Рис.8."Диаграмма состояния при-структуры (И) от Бо для С-18 витого слоя" кремнеземов, мо-сорбентов. (1 )-о=1; (2)-о=3 нм. дифицированных алкилсиланами. Полученные в настоящем разделе расчетные данные Оылк объединены в диаграмму состояния привитого слоя (рис.8). Пользуясь данной диаграммой, можно целенаправленно выбирать оптимальную пару носитель - модификатор для получения сорбента с заданными значениями %С и и.

3.2. Толщина привитого слоя

Анализ литературных данных показал, что многие исследователи

определяют толщину привитого слоя как полуразность средних диаметров пор, полученных из кривых распределения объема пор по диаметру, до и после химического модифицирования образца:

Ъ. = 0.5 (Vй?) <4>

Однако, более правильно толщину привитого слоя следует определять как полуразность средних диаметров пор, полученных из кривых распределения числа гор го диаметру, до и после модифицирования:.

(5)

Ь = 0.5<Во-]£)

и связаны следующим соотношением

Можно показать, что Б0

Б0=ву-2о2/1>ч и уравнение (4) справедливо лишь когда о мала, т.е. в случае узких и симметричных распределений пор по размерам. Указанное обстоятельство не принимается авторами во внимание, порождая известный разброс данных по толщине привитого слоя.

В настоящей работе толщину привитого слоя определяли по экспериментальным данным об изменении объема пор после модифицирования: ь = 0,5Во(1 - VI - ду/у ) (6) Кроме того, для ХМК, распределение пор для которых заканчивается левее ь*, использовали уравнение Ь = 0/6.

_Толщина привитого слоя Табл. ■.

Привитое соединение

т>0, нм

Толщина привитого слоя, нм

ПО(6) I ГО(4) | Ь=Р/6

-°16Н33

-°16н33 ~°16н33 -С16^33

-°16Н33

25,0 13,5 11,5 5,4

13,4 20,0 10,0 6,6

1,20 0,95 1,10 0,85

0,94 1,50 1,10 1,03

0,0 2,0 1.4

0,5

2,2 2,8 1.6

0,90

1,10

Цредставленцые в табл.7 результаты расчета экспериментальных данных, полученных в нашей лаборатории (*1-4), и литературных данных (*б-8) свидетельствуют, что структура привитого слоя кремнеземов, модифицированных длинноцепочечннми алкилсиланами,скорее "жид-костноподобная", чем "щеточная", как полагали некоторые авторы.

ЧАСТЬ 4

Флуоресцентные и парамагнитные зонды в исследовании структуры ' привитого слоя кремнеземов, модифицированных алкилсиланами Анализ литературы показал, что в исследовании динамических характеристик сорбированных и закрепленных молекул наиболее эффективными являются методы парамагнитных и флуоресцентных зондов. На-

стоящая часть работы посвящена исследованию процессов длффузаа сорбированных молекул-зондов в привитом слое кремнеземов, модифя-цированных алкилсиланами. Характеристики ¡а«-э»пгжянх ХШ£ приведены в табл.8.

Кремнеземы, модифкцирозакнке алкилснлгн

Л Модификатор Носитель V км 3, м2/г Гкл; л^яцентр. пгк.. туттПо иоч,

групн/нм"

1. с18ксн3)3 с-30 40,0 67 2,4 с7"

2. «.бксн-р^нд с-80 40,0 67 2,3 С4

3. с1бксн3)2с6н1г1 с-80 40,0 67 2,2 с6

4. с1331с8н17 с-80 40,0 67 1,6 С8

5. с1331с8н17 с-80 40,0 67 1,6 С8/о

6. 01351с12н25 с-80 40,0 67 2,2 с12/с

7. С1381С16Н33 с-80 40,0 67 2,3 С16

8. 01зБ1с1бнзз с-80 40,0 67 2,3

9. С13зю18н37 с-80 40.0 67 2,2 С18/о

10 0131(снз)2с16нзя Ар-300 25,0 166 2,0 С16

11 с1бксн3)2016н33 кск-2 13,5 186 2,0 С16

12 С131(СН3)2С16Н33 б1-100 11,5 283 1.9 С16

13 с1б1(сп3)2с16н33 31-60 10,5 320 1,9 С16

14 01Б1(сн3)2с16н33 31-600 5,4 476 1.3 С16

(*) - /с обозначает, что проводили дополнительную обработку образца смесью триметилхлорсилана и гексегатилдисилазанэ, 4.1. Диифузия и агрегация пирена в привитом слое ХШ

Исследования показали, что при низких степенях заполнения поверхности сорбированным пиреном в спектрах флуоресценции наблюдаются характерные электронно-колебательные полосы, соответствующие мономерам пирена (рис.9.1). С увеличением поверхностной концентрации пирена появляется, как и в растворах, флуоресценция эксимеров пирена, максимум которой находится при 460 ем, а спектр возбуждения флуоресценции совпадает со спектром возбувдэния флуоресценции мономеров пирена (рис.9.2). Образование эксимеров зависит от длины цепи закрепленной алкильной молекулы и от наличия доступных сила-нольных групп поверхности. Для ХМК с закрепленными короткими ал-кильными цепями (#1,2 таб.8) образование эксимеров происходит уже при 0,1%-ном заполнении поверхности пиреном от монослоя, тогда как, для ХМК, содержащих гекса- и октадецильные закрепленные молекулы - при 10-15%-ном заполнен®'..

Рис.9. Типичные спектры флуоресценции (—) и возбувдения флуоресценции (---) шрена, сорбированного на кремнеземах, модифицированных алкилсиланами. 1 - мономер; 2 - эксимер; 3 - фаза шрена

Образование эксимеров пирена - процесс, лимитируемый диффузией. Оценить значения коэффициентов диффузии можно по уравнению Зй-нштейна-Смолуховского:

И = <Ах>2/^ (7)

где Ах и 1; - длина и время скачка молекулы. Более точно коэффициенты диффузии определяли по уравнению для константы скорости бимолекулярной реакции, протекапцей на поверхности и лимитируемой диффузией (уравнение Смолуховского):

ь8 =

4*Ш.

(8)

Значения - констант скорости образования эксимеров были определены из экспериментальных концентрационных зависимостей отношения интенсивностей флуоресценции эксимера и мономера. По уравнению Стокса-Эйнштейна определяли вязкость привитого слоя ХМК:

Б = КГ/41СЪТ) (9)

Полученные данные представлены в табл.9. Как и следовало ожидать, значения коэффициентов диффузии закономерно'уменьшаются с ростом длины алкильной цепи.

Табл.9.

Б-10й см^/с Т). кг/моль-С Еакт' кДж/моль

ХМК а по (7) по (8) сПз

с1 6,9 5,28 2,60 1.7 1941 2,59

°6 17,6 2,64 0-72 6,2 540 6,60

Са/о 13,5 1,88 0,44 10,2 327 5,60

С12/о 26,4 0,26 0,06 76,6 43 9,91

С1б/о 33,6 0,20 0,03 162,5 21 12,62

С18/о 38,1 0,19 0,02 231,7 14 14.34

Эта зависимость адекватно описывается следующим уравнением:

I) = оопв1;-ехр(-0,13п) - оогш1;- ехр(-0,37п/НГ) (9)

где п - число атомов углерода, приходящихся на 1 нм2 поверхности.

С другой стороны, уравнение для коэффициента диффузии можно представить как Б = ехр(-Еа/иг) Отсюда получаем:

Еа = 0,37п (10)

Т.е., энергия активации диффузии линейно зависит от числа атомов углерода или от длины закрепленной алкильной цепи (табл.9).

При исследовании влияния среднего диаметра пор кремнеземного носителя на диффузию молекул сорбата в привитом слое ХМК было установлено, что при уменьшении й0 коэффициенты диффузии пирена заметно увеличиваются (тао'л.10). Та0л ^ Влияние среднего диаметра пор носителя на диффузию пирена

в привитом слое ХМК

ХМК* нм б-106,см^/с по (8) V. сПз м/'моль-с

с16/с °16 °1б °1б с16 40,0 0,03 162,5 21,0 25,0 0,05 90,3 37,9 13,5 0,14 35,5 96,1 11,5 0,09 51,1 66,7 5,4 0,21 23,0 148,3

* - обозначение ХМК соответствует табл.8. Полученные данные можно объяснить с помощью представлений о жесткой структуре привитого слоя. Действительно, для узкопористых ХМК привитый слой доступен для молекул пирена не полностью, что и приводит к уменьшению его эффективной вязкости.

Для ХМК на основе Силохрома С-ВО увеличение поверхностной концентрации пирена приводит к образованию его фазы, что проявля ется в виде новых полос в спектре возбувдения флуоресценции, характерных для пирена- в твердом состоянии (рис.9.3). Образование фазы, как и образование зксимеров, зависит от длины алкильной цепи. Для образцов С1 и С4 образование фазы наблюдается при 0.5-1Ж-ном заполнении поверхности пиреном, а для образцов С16и С18 - образование фазы не было зарегистрировано вплоть до 20%-ного заполнения. Образование фазы сорбата на модифицированных поверхностях зависит от соотношения энергий взаимодействия сорбат-сорбат и сор-бат-поверхность сорбента. В случае короткоцепочечных модификаторов дисперсионное взаимодействие пирен-привитый слой невелико. С увеличением длины алкильной цепи модификатора это взаимодействие увеличивается и, как следствие, увеличивается минимальная концентрация. пирена, при которой начинается образование фазы.

. оадакалн в асслеговгниа структур

г^гагтого слоя Ж-£

В КЯЧЯСТТП 77"РЛМЗГРИТНЭГС воида бал выбран стабильный нитрок-

>;:вь;пй .2.2,6,е-г$тр2мэгалпипэрадоз-4-оксал (танон-4). При

./,.,орС1га тау. ь: г:огерхнэста кремнеземов, модифицированных

ью^охлорсихавамя ~лт трихлорсиланами с дополнительной силанизаци-

оЗ, в спектрах 3.1? наблздаются два сигнала, соответствующих быст-

—1п —я

ром? !0 "- 10 с) и медленному(0 с) движению сорбиро-

езнпого рздахала (ргг.Ю). Наблвдаемое явление, по нашему мнению, озответстаует наличию радикалов, расположенных вблизи поверхности юс стеля, и радикалов, распределенных по привитому слою и непос-¡пдствэто не контактирующих с носителем. Подобные эффекты наибо-.яче ярко ьыразшны для образцов, модифицированных длинноцепочечными алкилсиланами (Сд+С?а). Для образцов С6 они незначительны, а для образцов С1, С4 подобные эффекты не наблюдаются. Действительно, с ¿¡мэкьшенивм толщины привитого слоя нивелируются различия между возможными состояниями сорбированного радикала и наблюдается только один тот движения.

Наличие доступных силанольных групп оказывает значительное влияние на попадание сорбированного танона-4. Для образцов, мода-фицнроваЕшх трихлорсиланами без дополнительной силанизации, набит доэ тс я только медленный тип движения сорбированного радикала, что, видимо, селзляо с образованием водородной связи между молекулами танона-4 и снланольными группами поверхности (рис.10).

По уравнению: - 1птс = 1пА + Еа/НГ были определены

анергии активации вращения танона-4 .сорбированного в привитом о/оо ХМК. Результаты приведены в табл.10.

(1) А (2)

I

Р.'^.Ю. ЭГГ' ^ет.-гры танона-4,сорбированного на образцах: (1) - С8 («';} - СаЛ (Л 4,5 табл.8). Концентрация радикала - 0,06 нм"2.

Пр;: ¿дсчурбцкк танона-4 на образце С16 со средним диаметром пор 5,4 нм ь спектре ЭПР присутствуют две компоненты, соответствующие резко различающимся Бременам корреляции - т^ 5-Ю-7 и .'. Ю-1'с (рис.11).Увеличение поверхностной концентрации танона-4 приводит к росту вклада быстрою движения ( отметим, что подобного я&лония не происходит в случае широкопористых ХМК ). Аналогичная

картина наблюдается и для ХМК С16 со средним диаметром пор 10,5 и

Табл.11.

Энергия активации вращения танона-4, сорбированного на ХМК

ХМК* Поверхностная концентрация ? танона-4, нм Носитель в0,нм йакт* кДж/моль

С1 0,06 С-80 40,0 5,1

°4 0,06 С-80 40,0 14,4

С12 0,06 С-80 40,0 12,9

С12/о 0,01 С-80 40,0 11,8

С1б/о 0,10 С-80 40,0 15,4

С16 0,06 Ар-300 25,0 15,5

°16 0,05 31-100 11.5 17.9

°16 0,06 51-60 10,5 18,0

°16 0,01 Б1-600 5,4 24,0

(*) - обозначение ХМК соответствует табл.8.

11,5 нм, тогда как поведение сорбированного танона-4 на ХМК С1(- с

Б0=5,4 нм (* 14 табл.8). Концентрация радикала: (1) - 0,06; (2) -0,1 нм-2.

Полученные данные, по нашему мнению, подтвервдают существование жесткой структуры привитого слоя для узкопористых ХМК. Так, в случае широкопористых ХМК С16 (С-80,Ар-300) с лабильной структурой привитого слоя имеется широкий набор состояний (по временам корреляции) дня молекул сорбата. В случае узкопористых ХМК С16 (31-100,-60,-600) с жесткой структурой - имеется два резко различающихся набора времен корреляции, причем медленное движение, видимо, обусловлено радикалами, сорбированными в "нижней" части привитого слоя, а быстрое движение - соответствует радикалам, сорбированным на привитом слое. В "верхней" части привитого слоя, образованной переплетенными алкильными цепями, сорбция, видимо, вообще не происходит.

выводы

1. Впервые теретически и экспериментально исследованы вопросы распределения закрепленных органических молекул по поверхности в реакциях химического модифицирования кремнезема. На основе ион-радикальных солей хемосорбированного тетрацианохинодиметана разработан метод парамагнитных меток и показана его применимость для исследования распределения закрепленных органических молекул в реакциях иммобилизации и поверхностной сборки.

2. Впервые исследовано распределение алифатических аминов, аминокислот, пептидов, хлор- и метоксисиланов по поверхности в реакциях их закрепления на кремнеземе. Установлено существование трех различных типов распределения закрепленных молекул по поверхности: островковое, статистическое и равномерное. Показано, что изменяя природу функциональных групп поверхности и модификатора и/или условия модифицирования, можно синтезировать химически модифицированные кремнеземы с заданным типом распределения закрепленных молекул.

3. Теоретически предсказано и экспериментально доказано существование двух типов структур привитого слоя химически модифицированных кремнеземов: "жесткой" и "лабильной". Разработан метод модельного расчета важнейших характеристик привитого слоя: плотности прививки, толщины привитого слоя, содержания углерода, доли жесткой структуры по данным о строении молекул модификатора и распределении пор носителя по размерам.

4. Методами парамагнитных и флуоресцентных зондов исследованы динамические характеристики сорбированных и закрепленных молекул. Показано, что эффективная вязкость привитого слоя увеличивается с ростом длины привитой алкильной цепи и среднего диаметра пор кремнеземного носителя. Определены коэффициенты латеральной диффузии пирена в привитом слое кремнеземов, модифицированных алкилсилана-ми. Показано, что энергия активации диффузии линейно возрастает с ростом числа метиленовых звеньев в расчете на единицу поверхности.

5. Методом спектроскопии флуоресценции на примере пирена определены условия процесса агрегации-дезагрегации молекул сорбата в привитом слое кремнеземов, модифицированных алкилсиланами. Показано, что степень агрегации уменьшается с ростом плотности прививки, длины закрепленной алкильной .цепи и концентрации доступных сила-нольных группе. С применением нитроксильных зондов изучены взаимодействия

молекул сорбата с силанольными и закрепленными алкильными группами модифицированных кремнеземов. Показано наличие двух состояний мо-

лекул сорбата - находящихся в быстром и медленном движении - для длинноцепочечных ( более восьми метиленовых звеньев) закрепленных алкильных групп.

7. Предложен метод идентификации закрепленных ашшосоединений, основанный на анализе электронных спектров отражения продуктов их взаимодействия с тетрацианохинодиметаном. Показана возможность определения типа закрепленной аминогруппы ( первичная, вторичная, третичная) и характера связывания диаминосоединений ( одно- или двухточечное) с поверхностью модифицированных кремнеземов. На примере сорбентов с закрепленными циклическими пептидами грамицидином и бацитрацином показано, что их аффинность в процессах выделения протеиназ проявляется лишь при двухточечном закреплении пептидов на поверхности сорбента.

Основное содержание работы изложено в следующих публикациях: '

1. Лисичкин- Г.В., Староверов С.М., Голубев В.Б., Фадеев А.Ю. Ион-радикальные соли тетрацианохинодиметана как парамагнитные зонды для исследования распределения привитых молекул. - Докл. АН СССР, 1987, т.294, J6 5, с.1165-1167.

2. Фадеев А.Ю., Староверов С.М., Лисичкин Г.В. Свойства и применение ион-радикальных солей тетрацианохинодиметана, закрепленных на поверхности модифицированных кремнеземов. - Ж.Всес.Хим.О-ва им.Д.И.Менделеева, 1987, т.32, * 3, с.349-350.

3. Староверов С.М., Фадеев А.Ю., Голубев В.Б., Лисичкин Г.В. Исследование процесса формирования структуры привитых соединений тетрацианохинодиметана на поверхности кремнеземов методами спектроскопии ЭПР и диффузного отражения. - Химическая физика,

1988, т.7, * 1, с.93-99.

4. Лисичкин Г.В., Рунов В.К., Староверов С.М., Фадеев А.Ю. Латеральная диффузия и агрегация пирена в привитом слое модифицированных кремнеземов. - Докл.АН СССР, 1988, т.299, с.917-920.

5. Лисичкин Г.В., Рунов В.К., Староверов С.М., Фадеев А.Ю. Процессы диффузии и агрегации пирена в привитом слое кремнеземов, модифицированных алкилсиланами. - Химическая физика, 1989, т.8, J* 5, с.702-710.

6. Fadeev A.Yu., Staroverov S.M. Geometrio structural properties of bonded layers of ohemically modified silioas. -J.Chromatogr., 1988, v.447, p.103-116.

7. Padeev A.Yu., Staroverov S.M. Calculation of oharaoteristios of bonded layer of reversed stationary phases. - J.Chromatogr.,

1989, v.465, p.233-240.

8. Мингапев П.Г., Фадеев A.D., Староверов С.М., Лунина Е.В., Лисичкин Г.В. Исследование структуры привитого слоя химически модифицированных кремнеземов методом парамагнитного зонда. - Химическая физика. 1990, т.9, * 2, с.183-188.

9. Староверов С.М., Шония Н.К., Фадеева И.В., Фадеев A.D., Лисичкин Г.В., Никитин D.O. Изменение структурных параметров сорбентов для хроматографии при химическом модифицировании: рёсчет и эксперимент. В кн.: 17 Всесоюзный симпозиум по молекулярной хроматографии. Тезисы докладов. Алма-Ата, 1987, с.147-148.

10. Староверов С.М., Фадеев A.D., Лисичкин Г.В. Применение парамагнитных зондов на основе тетрацианохинодиметана для исследования состава и структуры фаз для жидкостной хроматографии. -Там же. с.148-149.

11. Фадеев A.D., Староверов С.М., Лисичкин Г.В. Гетерогенизация тетрацианохинодиметана и его ион-радк&льных солей на кремнеземных носителях. В кн.: Материалы VII Всесоюзного совещания по проблеме "Комплексы с переносом заряда и ион-радикальные соли". Тезисы докладов. Черноголовка, 1988, с.206.

12. Фадеев A.D. Диффузия пирена в привитом слое химически модифицированных кремнеземов. В кн. XVI Межвузовская конференция молодых ученых "Химия и физика твердого тела". Тезисы докладов. Ленинград, 1989, с.35.

Подписано к печати 23.01.90 Л-10574 Формат 60x901/16 Усл.п.л. 1,5 Уч.-изд.л. 1,0 Печать офсетная

РТМ.ТКП. * 3_Тираж 100 экз. Бесплатно Изл *44 Зак. ¿У

Типография АгроНИИТЙШП

j