Вольтамперометрия мочевой кислоты и ее определение в биологических системах и некоторых объектах окружающей среды тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.02 ВАК РФ

Абакшина, Светлана Александровна АВТОР
кандидата химических наук УЧЕНАЯ СТЕПЕНЬ
Томск МЕСТО ЗАЩИТЫ
1994 ГОД ЗАЩИТЫ
   
02.00.02 КОД ВАК РФ
Автореферат по химии на тему «Вольтамперометрия мочевой кислоты и ее определение в биологических системах и некоторых объектах окружающей среды»
 
Автореферат диссертации на тему "Вольтамперометрия мочевой кислоты и ее определение в биологических системах и некоторых объектах окружающей среды"

рге од

у 3 МАЙ |ЯС& '1ШС1ай ПОЛИТЕ ШМЕСИШ1 .УШБЬРСИГЕГ

На правах рукописи

ШШДША. СВЕТЛАНА А1£КСА.ЩР0ВНА.

ВОЛЬТШЕРиШШта МОЧЕВОЙ кшшш И ЕЕ опщелшш В БИОЛОГИЧЕСКИХ СИСТЕМАХ И НЕКОТОРЫХ ОЁ1ЖШ ОКШАЩЫ1 СРЕДЦ

02.00.02 - Аналитическая химия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Томск - 1994

Работа выполнена в Томском политехническом университете.

Нпучпий руководитель: доктор химических наук, профессор Белихмаер Я.А.

НяучшП ионсультант: кандидат химических наук, доцент Анисимова Л. С.

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор

Водзинский Ю.В.

кандидат химических наук, с.и.с.

Джабарова H.H.

Ведущая организация - Сибирски!» государственный медицинский уппоэрситет, г.Томск

Защита состоится "/_." U4-&/CJL- 1994г. в часов

ид заседании Специализированного Совета К.063.60.09.в Томском политехническом университете по адресу: 634004, г.Томск, пр.Ленина,30, .ТПУ, химико-технологический факультет, Большая химическая аудитория.

С диссертацией можно ознакомиться в научно-технической биб-.тнотеке Томского политехнического университета.

Автореферат разослан 1994г.

/

/ Учеянй секретарь Специализированного Совета, гаидидат химических наук, Л

доцент гаШЩШ Т.Ф.

ь

ВВВДЕШЕ

Актуальность работа. Мочевая кислота (МК) является конечным продуктом пуринового метаболизма у человека и животных и образуется во всех тканях. Нарушение обмена МК является причиной и сопровождает такие заболевания как подагра, артриты, мочекаменная болезнь, облучения и другие, Количественное определение МК представляет собой необходимый биохимический показатель в номенклатуре клиникодиагностических параметров. Является актуальным в оценке загрязнения объектов окружающей среда (стоков животноводческих ферм, загрязнений почвы и естественных водоемов), а также при оценке пригодности зерна и зериопродуктов для посева и употребления в пшцу, В связи с этим аналитическая практика предъявляет повышенные требования к совершенствованию методов её определения.

Одним из перспективных методов контроля биосистем и объектов окружающей среды, обладавшим высокой чувствительно«!'" и селективность» я вдается вольташерометрия.

Возможности вольтамперометрии для анализа ИК раскрыты далеко не полнооты), а иыешциеся сведения весьма противоречивы и ограни-, чены. Практически отсутствуют методики вольтамперометрического определения Ш. Выбор оптимизации электродного процесса определяет точность и чувствительность метода. Поэтому исследование вольтамперометрического поведения МК продолжает представлять интерес и требует разработки экспрессных и высокочувствительных методик контроля МК в сложных по составу объектах.

Данная работа в некоторой степени восполняет'этот пробел.

Направление диссертационной работы -является составной частью работ по госбюджетным, темам * 0186.0078 203 по заказ-наряду То!(1.-Микр.1, № 1.13$ "Анализатор мочевой кислоты".

Цель работы. Исследовать вольгамперометрическое поведение МК и разработать методики её' количественного определения в биологических системах и некоторых объектах окружающей среды.

Научная новизна. Показана способность МК окисляться на различных типах твердых электродов ( Н , Аи, графит, стеклоугле-род, пирографит).

Установлены оптимальные условия определения МК методом вольт-аиперометрии. Впервые с его использованием определены проголи -

тические константы диссоциации МК,

- Впервые показано использование адсорбционной инверсионной вольтамперометрии для улучшения метрологических характеристик анализа при определении МК на уроЕне<5ЛО-7моль/л.

- Установлена природа тока окисления МК, рассмотрена эквивалентная схема системы электрод-раствор и определен ряд физико-хсмических констант.

- Предложена вероятная схема механизма электродного процесса с использованием сгеклоуглеродного электрода.

- Оценено влияние основы пробы на величину тока окисления Мл и разработали методики сп йЬго определения Ш.в сыворотке крови, моче я воде на уровне + 10~3 коль/л и Ю-9 *■10"'' моль/л соответственно.

- Методика определения Ш в сыворотке крови аттестована на уровне ГОССТАНДАРТА Р5. Совместно с лабораторией аналитического приборостроения ЖУ создан лабораторный макет анализатора МК.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Условия вольтамперометрического поведения (Ж на различных типах твердых электродов.

2. Влияние различных факторов (природы растворителя, рН, режима регистрации вольт&шерограмм, VI/ , Еэ ,'¿э ) на потенциал и величину тока окислений МК.

3. Интерпретация данных о природе тока и вероятной схеме электродного процесса окисления МК.

4. Результаты по определению ряда физико-химических параметров электродной реакции с участием МК, имеющие аналитическое значение.

5. Методики количественного определения МК в биологических средах (сыворотке крови, моче) и воде.

Практическое значение. Выполненная работа расширяет возможности использования вольтамперометрического метода для определения органических веществ в биологических системах и объектах окружающей средн. Установленные условия оптимизации электродного процесса позволила разработать высокочувствительные и селективные методики количественного анализа МК. Созданный совместно с лабораторией аналитического приборостроения ШУ лабораторный макет йчеипэатора ЫК позволяет экспрессно проводить анализ сыворотки крови, мочи и ускорить постановку достоверного диагноза, повы-

сить эффективность лечения. Открывается перспектива применения метода для создания диагностической системы пуринового метаболизма, токсикологического анализа сточных и природных вод, оперативного контроля качества пищевых и зеркопродуктоа на содержание МК.

Использование результатов работы. Разработанные методики вольтамперометрического определения ПК в биологических средах {сыворотке крови, моче) и воде апробировали и переданы для использования в Сибирский медицинский университет, ШИ биологии и биофизики при Томском госуниверситете, НИИ курортологии и физиотерапии (г.Томск), медицинские учреяедения г.Хабаровска, что подтверждается соответствующими актами о внедрении.

Методика определения Ш а сыворотка крови аттестована на уровне ГОССТАНДАРТА И и допущена к применению в любых биохимических и клиникодиагностических лабораториях медицинских учреждений,что подтверждается соответствующим документом.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на Региональных конференциях "Электрааналитика Сибири -90" (г.Томск, 1990г.), "Аналитическая химия на службе здоровья человека" (г. Томск,1991г.), "Актуальные эколого-экономи-ческие проблемы современной химии. Хишш-92". (г,Самара, 1992г.), "Аналитика Сибири и Дальнего Востока " (г.Томск,1993г.), Всероссийском гидрогеохимическом совещании "Многоцелевое гидрогеохимические исследования в связи с поисками полезных ископаемых и охраной подземных вод" (г.Томск,1993г.), 1У Всероссийской конференции "ЭМА-94" (г.Москва, 1994г.) ,• семнларе-выставке "Конверсия и приборостроение" (г.Томск,1994г.); на объединенных научных семинарах кафедр аналитической химии, физической и коллоидной химий и проблемной лаборатории физико-химического определения микропримесей полуповодников и особочистых материалов Томского политехнического университета, 1992-1994г.г.

публикации: одно авторское свидетельство, четыре статьи, шесть тезисов.

Структура диссертации . . Работа объемом 141 страниц машинописного текста, вклочая 23 рисунка и11 таблиц, состоит из введения, пяти глав, выводов и приложения. Оюсок литературы содержит Ш библиографических названий работ отечественных и зарубежных авторов.

В первой главе представлен литературный обзор по физико-химическим методам исследования и определения ЫК; рассматривается применение .вольтемперометрическик методов в анализе МК. На основании обзора формируется задачи исследования. Описание используемой аппаратуры, типов электродов, методики проведения эксперимента приведены во второй главе. Третья глава посвящена выбору условий оптимизации элэнтроокисления МК. В четвертой главе приведены данные исследований природы тока и механизма окисления МК методами переменнотоковой и циклической вольтам-перометрии, хроноамперометрш, вольтамперометрии с использовнит см вращающегося дискового электрода. Определены некоторые физико-химические константы, имеющие аналитическое значение и-представляющие теоретический и практический интерес. Изложению ре-зельтатов опытов по оценке предела обнаружения и нижней границы ' определяемых содержаний Ш, взаимного влияния веществ и разработке методик определения МК в биологических средах (сыворотке крови, моче) и воде посвящена пятая глава. Анализ полученных экспериментальных данных приведен в обсуждении результатов. В заклочение сделаны выводы. В приложении представлены свидетельство и программа метрологической аттестации, акты о внедрении работы, список публикаций, отражающих содержание диссертации.

I. ВЫБОР УСЛОВИЙ ОПТИМИЗАЦИИ ЭЛЕКТРООКИСЛЕНИЯ

мочевой кислота.

Дня количественного определения МК использован метод воль-тамперометрии. Информации о концентрации определяемого вещества получали, регестрируя вольтампернве кривые и измеряя максимальный анодный ток.

В качестве индикаторных выбраны следующие твердые электроды: РЬ ,4а и три типа углеродных электродов - графит, пропитанный полиэтиленом с парафином в вакууме (Г), пирографи? ОТГ) и стеклоуглерод (СУ). По потенциалу пика окисления электроды можно расположить в ряд:

ГсСУ < ПГ < Аи<Р* с потенциалами пика 0,63; 0,68; 0,75; 0,77; 0,78 В соответственно. Структурное подобие материала электрода и адсорбция плоскость с молекул определяемого вещества (сгереоспецифическая адсорбция) благоприятствуют переходу электрона при меньшем значении потенциала и способствуют более обратимому окислении МК

на графите, чем на СУ и ПГ. Затруднение процесса злектроокис-ления МК на металлах обусловлено также и образованием оксидных слоев при потенциалах положительнеэ 0,8 В.

Максимальное значение тока наблюдали на графитовом электроде, минимальное - на платине. По-видиыому, на единице площади графита окисляется большее количество молекул ПК.

Хотя на электроде из графита МК .окисляется при меньшем потенциале и величина регистрируемого тока на 30$ выше, чем в тех же условиях на СУ-электроде, однако из-за большого' значения остаточного тока он оказался менеэ удобным в работе, чем СУ. В связи с этим в качестве индикаторного выбран СУ-электрод.

., Установленные оптимальные фоновые электролиты представлены в табл. I. Линейная зависимость градуировочных графиков сохраняется в диапазоне б.Ю-^ Ю-Е? моль/л.

Определяющим фактором количественного определения МК является рН среды. При повышении рН потенциал полуволны смещается к менее положительным значениям. Это обусловлено смещением прото-литичеекого равновесия МК в растворе. В кислых средах МК находится в молекулярной протонированной форме; При повышении рН на графике Е^-рН наблюдали два перегиба, соответствующие

5,59 и рН£ = 9,20. При рН < рК^ регистрировали четко выраженный, хорошо воспроизводимый ( 5Ь<0,Об)'аналитический сигнал МК.

Установлено влияние природы растворителя на процесс электроокисления органического вещества. По легкости окисления МК растворители можно расположить в следующий ряд: ацетонитрил < этанол < вода <пропиленкарбонат (с потенциалами пика 0,28; 0,37; 0,55; 0,85 В соответственно^. Максимальное значение тока регистрировали в ацетонитриле, минимальное - й про-пиленкарбонате. Различные значения потенциалов пика и величины тока обусловлены специфической сольватацией деполяризатора молекулами растворителя: склонностью к донорно-акцепторноцу и другим видам взаимодействия, а также изменением вязкости среды. Применение неводных растворителей позволило снизить предел обнаружения МК более чем в три раза по сравнение с водными средами (табл.1).

Важйым фактором при определении МК является выбор скорости изменения потенциала алектрода и рекима регистрации вольтам-перных кривых. Оптимальными является скорость 40 •» 60 иВ/с. при съемке линейных и 5 4 10 иВ/с - дифференциально-импульсных

1, с 1 1 3' стч ! о СП '.Л ь ь »-1 »—i о и 1 о и -<? о нч с* ь сл ¿3 t

' ? о СЧ - Ô t- -т ô ó чп

IU '.0 ,т\ г— ■s< »—« t-H od' Cß

« ч го

о г.

.Гл O-, I I I

ООО

■M vo Vû

4£J

О

г н-ч о> Ь г i-* t~í vo 1-1

ÇNJ m со чэ

m i—i ел

ч c\J и IM ГО

о о о О о

о о о о о

' tri ' 43 5 + 43 s f и

о M о 1—1

о о о о о

ел со t- а\

■а ГЛ 1Л <т ¿t

О о о о о

ч Ч" * * -t •h

\о ю m о

» \о Г\ ил -t -J-

Î С* 1

.'ti о о О о о

о

3

t—I

о о

СО

(M

о

о •h

3

СО сл

LTv 1Г\

L

ООО H-Í M ►H и-4 •

о V—4 V-H V—4 .Г? I о

'.3 m H 1Л tn tn «H

•ГУ СП

' ь

1-H +

s ?

ь

M

\D

о ?

oo

СО

о f

\0 Ü0

СЛ

ь

г г г

ю ! я t«- а, СИ ГС СП

э cri m 1-Н см Ъ сс О

И 1 О ft) « о чО о а 43

Ю г • О л СП ж tn к

о i s t M И œ СМ ¿r

« л о О О СМ о

С.1 1 a ri: г:: X НО

) Oí et* о-. сх OJ -=*- И R

1 I О о (Ч

ta о, -«■ ¿г -Г •е-

1 œ О к о о о о

e 1 И о iTl <—ч -^Й m te m ÎB ?л m m

(• за Z С4 lO СО ЕС из

1 ж а? • • и О ОТ о

и. 1 ё —/ —* tn sí t< a «

см a; Ж

1 Ж Л О В ил X

W CL> tn О - си О (Л и") ■л

о 1 О о и о о о о О о

14 ' Í1» 2

1 ¡4 о О о О о о о о

вольгамперогреш, а наиболее чувствительным - режим дифферсл--цнальной вольтамперометрии.

Использование предварительного адсорСииоиного концентрирования (Еэ = 0,10 г 0,20В; t3 = 60 с) позволило регистрировать аналитический сигнал с четко выраженным максимумом и определять низкие концентрации МК на уровне < 5'Ю"7 моль/л.

П. ИССЛЕДОВАНИЕ ЭЛЕКТРОДНОГО ПРОЦЕССА ОКИСШИЙ МОЧЕВОЙ КИСЛОШ И ШРВДЕЛЕШЕ НЕКОТОРЫХ ФЮИКО-ХИЫИЧЕСКИХ КОНСТАНТ.

Изучено влияние природы материала электрода на некоторые характеристики двойного электрического слоя (ДЭС). методом пер, меннотоковой вольтамперометрии. Фарадёевские гоки в области потенциала пина имеот характерный максимум. Вед емкостных гоног представлен на рис. I. При рассмотрении эквивалентной схемы системы электрод-раствор(рисЛ) получена система дифференциальных уравнений. Установлено изменение всех грех параметров ДЗС (Cj, Rn,Cn ) в процессе электроокисления МК в зависимости or материала электрода. Показано, что в переменнотоковоы режиме можно с помощью подбора материала электрода уменьшить искажение аналитического сигнала, связанного с пререзарядкой двух емкостей и С„). Использование перемзннотоковой вольтамперометрии по сравнении с постояннотоковой обеспечивает повышение чувствительности определения МК в три раза.

Хроноампврометрическив исследования природы тока злекгрооки-сления МК показали подчинение его характера законам полубесконечной диффузии. Из графика зависимости 1п?ел ~ 1/^<*Установ лено, что электроокисление МК протекает с участием двух электронов. Впервые рассчитано значение коэффициента диффузии UK э водной среде;

Д х (0,63 ± 0,03) '10" сыГ/с .

При установлении природы и механизма электродного процесса электроокисления ЫК использовали метод ДВА и вольтамперометрии с вращающимся дисковым электродом.

Характер циклических вольтамерограмм представлен на рис.2. При катодном реверсе потенциала пик восстановления UK не зарегистрирован, а полученная обратная волна соответствует дальней шецу протеканию процесса электроокисления UK.

и ч—

да &$ /,г

—I-Г -т—

й!

~I—

а* ке о,г аа —г т-¥-г

С„ Яя

Гг

г'

а 6

Рис. I. Эквивалентная схема системы электрод-раствор /а/ и емкостные кривые электроокисления МК /б/; буфер Бриттона-Робинсона, рН 1,89; емкостной ток: Р£ /I/, СУ /2/, Г /3/; Р*/1/, СУ /2/, Г /3/ с С^ = 9,5-кН* моль/л; нулевая линия тока /4/.

е. в

0,й 0.6 ОЛ С.£_

Рис. 2. Циклическая вольтамперограмма МК. Зон: буфер Бриттона-Робинсона, рН 1,89; С^ = 2,9«Ю-5 моль/л;

' \л/ = 50 кВ/с.

Зависимость величины предельного тока от 1/ПГ в диапазоне 400 4- 2000 об/мин носит прямолинейный характер. Адсорбционная составляющая, рассчитанная из графика 1ррел- эктра-поляцией прямых на ось ординат и из отношения фарадеевской и емкостной составляющих тока в режиме переменнотоковой вольт-амперометрии, не превышает 1/9 суммарного тока.Следовательно, ток электроокисления ИК является в основном диффузионным в области предельного тока.

По уравнению Левича рассчитано число электронов, участвующих в электродном процессе, во всем диапазоне рН: 2 = 1,9 ¿ 0,2

На полулогарифмических графиках Е - щ»л. -I в за-

висимости от скорости вращения электрода имеется 2 или 3 излома, что указывает на сложный характер электродного процесса, протекающего, по видимому, через стадию образования короткожи-вущлх ион-радикалов. Рассчитанные эффективные коэффициента переноса/¡4 имеют различные значения и изменяются от I до 0,25 по мере протекания процесса.

В целом электродный процесс является диффузионно-контроли-руемым, протекает с участием двух электронов и двух протонов и может быть осложнен как замедленными электрохимическими стадиями, так и адсорбцией,и изменением механизма процесса. На основании проведенных исследований предложена вероятная схема элекгро-окисления МК в оптимальных условиях'.

РН < 1%

О

О

/\ м II'

н 'К

II

и

н н

\ У

-е ^

»/■Д „ -Л.

"Кк-Г -К:}-

0 »

/

-И н

" и

Л'«-»«.

0 и и И

о

II И

-нг

емгро

И он )

т I

о

о

I / 41 "о ■

N

__ч^о

выоро п _/ /_ д

УГ И

шс-тю

п ОН И

н он н

Ч-0-+

/ ыпго

С. Я о

Ш. НЙ1МЕНЕНЙЕ ЫЕ'ГОДя АНОДНОЙ ЮДЪТШЕШлЕТгш ДЛЯ ШРЕДЕШМЯ МОЧЕВОЙ КИСЛОТЫ В БИОЛОГИЧЕСКИХ СИ-

стадх и вода.

Возможность аналитического определения ЫК методом анодной аольташерометркк охарактеризовала нижней границей определяемых содержаний (Сн , 0,33) и пределом обнаружения ССт,л ), расснитанным по трехсигмовоцу критерию (табл.1). Подученные значения метрологических характеристик свидетельствует о преимуществе использования метода дифференциальной вольтамперомет-рии для количественного определения ЫК.

Установленные оптимальные условия электродного процесса использованы при разработке методик количественного определения Ш в сцворотке крови, моче и воде.

При разработке методик оценено мешающее влияние на аналитический сигнал различных соединений и ионов, содержащихся в анализируемых объектах и являющихся электрохимически активными в условиях проведения анализа. Показано, что 3-оксиантраниловая и аскорбиновая кислота, фенол и его производные на уровне (Ю 4 10"^) моль/л,тысячекратные избытки щавелевой, молочной я лямонно» кисла?, ц;;ст;;;;£, циагеина и ионов ?Са.(й),&>(») не мешает количественному определению МК.

Присутствие белков в пробе затрудняет подвод деполяризатора к электроду и снижает чувствительность и точность определения. Основа биопробы, освобожденная от содержащихся в ней белков вольфрамавокислым кдтрием и серной кислотой по общепринятой ме-тодике.^не влияет на величину тока и форад- вольтамперных кривых (рис.ЗК

Установлены соотношения объеиов пробы и фона, 'при которых сохранялась линейность градуировочных графикой. Для анализа достаточно 0,2 мл сыворотки крови, 0,02 +0,1 мл мочи, 1-2 мл во- -

ды.

На основании подобранных оптимальных условий впервые разработаны экспрессные методики сп■ \sitio определения МК на уровне Ю"5 ♦ Ю"3 моль/л в биологических среде« и 10 + 10"^модь/л в воде. Количественное определение проводили методой добавок стандартного раствора. Время анализа единичной пробы - 2 4 5 мин.

Правильность разработанных методик подтверждена проведением сравнительных анализов проб колориметрическим методом, лрименя-шадшнся в настоящее время в клинической практике (табл.2) и

Рис.3. Зависимость тока окисления МК от концентрации; .

Фон: 0,05 М КСдН504 /I/; 0,05 Ы КС^Н^О^ с добатчгой 0,02 мл мочи /2/; 0,1 мл сыворотки крорн /3/; и/-- 50 мВ/с; Юс.

' ^ ^ г ^

е> ю.мопь/л и методом "введено - найдено" (табл.3).

Методика количественкого определения МК в сиеоротке крови аттестована на уровно ГОССТАНДАРТА К5 и допушона к применению в любых биохимических я кляникодиагностиче.ских лабораториях медицинских учрездений, что подтверждается соответствующим документом.

Таким образом, разработеннне методики количественного определения МК в сложных по составу объектах (сыворотке крови,моче, воде) экспрессии, не требуют применения дефицитных и дорогостоящих реактивов, отличаются высокой селективностью и чувствительное тьп. Минимально определяемая концентрация на 2-3 порядка ниже методов, используемых в настоящее вреш в клинической практике (колориметрических, энэиматических). Разработанные методики апробированы в ряде ан&читичееких и биохимических лабораториях , что подтверждается пятью актами о внедрении.

В настоящее время совместно с лабораторией аналитического приборостроения ШУ создан лабораторный макет анализатора МК, предназначенный для её экспрессного определения в биологических системах.

Таблица 2

Определение МК в биологических объектах (Р - 0,95. п « 5)

Объект * пробы ВА колориметрия

__(с - §)*модь/л (с ± §)Амоль/л _

сыяорот-" ~1 С1,6^_0,Х) (Св1 0,2)" 10=Г

к« крови ,, ,

2 (2,0 0,1)*10 (2,1* 0.2) 'КН

3 (3,1 ±0,2)'КГ^ (3,2* 0,3) •ю-''

'<» С*,0* 0,2) •Ю"'1 (4,2 *0,2) -10-4

моч« I (I,* (1,6 ±0,3) -10-3

2 (2,01*0,1)•10"; (2,3 ±0,2) -10-Э

3 (2,7 10,1) .10 (3,0 ±0,2) ЛО-3 _________(3,4 ¿^12.1СГ3_ _ Ох7_±0,1)__Л0^

Таблица 3

Определение МК методом ВА (Р=0,95, п-5)

Объект М пробы Введено , С, Найдено, __________модь/л______молк/л_ _

миорот- х 2,0-Ю"4 (2,0 Ю.О.Ю-4

"ЕР°ВЙ 2 4.0Л0-* (4.1ЗД.2).1<И

Э 5.2Л0-5 0,Э)'10-5

моче I , 3.5ЛГ3 (3,5 £0,2)Л0~3

2 ¡' (1,3 +0,2).Ю-3

3 8,0.1СН> (8,0 ±0,8)ЛсИ

воде I 5,3.10-7 (5,0 ±0,3)Л(Г7

г 1-,гло-в- (1.5 ♦о.г)ло-в

ВЫВОДЫ

1. На основе изучения вольтамперометрического поведения МК показана возможность её электроокисления на твердых электродах ( Pt , Аи, Г СУ, ПГ).

2. Установлено влияние различных факторов (природа электрода и растворителя, Е3, , и/ , режима регистрации вольтаыперо-грамм) на потенциал и величину тока окисления МК.

3. Показана определяющая, роль рН среды на количественное определение МК. Впервые вольтамперометрическим методом определены константы диссоциации МК (рК^ * 5,59; рК^ » 9,20).

4. Впервые показана возможность определения МК на уровне 10"^ * 10 моль/л с использованием адсорбционной инверсионной вольтамперометрии (Ед = 0,1 + 0,2В; э = 40 * 60с).

5. Рассмотрена эквивалентная схема системы электрод-раствор. Различными вариантами вольтамперсметрии определены некоторые физико-химические параметры электродной реакции с участием МК, имеющие аналитическое значение ( 2 , ¿2

6. Установлено, что электроокисление МК представляет сложный диффузионно-конгролируедай процесс, протекающий с участием двух электронов и двух протонов. Предложена вероятная схема электродного процесса окисления МК на стеклоуглеродном электроде.

7. Сделана оценка пределов обнаружения и нижней границы определяемых содержаний МК. Значения Слил и 0ц составляет '

6,4 'Ю-9; 5,0'10~9 моль/л и 1,5 • 10 1,4 -"Ю-9 моль/л соответственно в водных и неводных средах.

8. Оценено влияние основы пробы на величину тока. Обоснован и экспериментально подобран объем биоматериала и воды для количественного определения МК. Показано, что для анализа достаточно 0,1 мл сыворотки крови, 0,02 4 0,1 мл мочи, 1-2 мл воды.

9. На, основании, установленных оптимальных условий разработаны методики ¿п уНъо определения МК в сыворотке крови,моче и воде без отделения основы на уровне Ю~5 + 10"4; Ю~4 4 10"^; 10"*® 4 Ю~7 моль/л соответственно. Методики апробированы в ряде медицинских учреядеяий и НИИ г.г. Томска и Хабаровска, что подтверждается соответствующими актами о внедрении.

10.Методика определения Ж в сыворотке крови аттестована на уровне ГОССТАНДАРТА Р® и допущена к применению в биохимических лабораториях медицинских учреждений, что подтверждается соответствующим документом. Совместно с лабораторией аналитического приборостроения И1У создан лабораторный макет анализатора МК.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ ОПУБЛИКОВАНО В ОВДШЩХ РАБОТАХ:

1. Ивановская Е.А., Абакшина С.А., Анисимова Л.С., Слипченко В.Ф. Определение органических лекарственных препаратов в биологических средах методами вольтампероыегрии // Электроаналитика Сибири-90 .Проблемы и перспективы. Регион, конф. Тезисы докладов. - Томск, 1990. - С.25.

2. Анисимова Л.С., Слипченко В.Ф., Абакшина С.А., Ивановская Е.А. Фармакокинетические исследования лекарственных препаратов

и метаболитов при различных путях их введения в организм//. Аналитическая химия на службе здоровья человека. Региональн. научно -практ. конф. Тезисы докладов. - Томск,1991 . - С.IG.

3. Анисиыова Л.С., Слипченко В.Ф., Каллин A.A., Новикова (Абакшина) С.А.. Способ инверсионного вольтамперометрическо-го определения мочевой кислоты // A.C. 1665292 СССР, МКИ5 ,

01 » 27/48.- » 4680321/25; Заявл. 16.04.89; опубл. 23.07.91. Бол. * 27

4. Анисимова Л.С,, Слипченко В.Ф., Абакшина С.А., Ивановская Е.А.. Фармакокинетические исследования лекарственных препаратов и метаболитов при различных путях их введения в организм // Деп. в ОШИШИМ. - Томск, 1991 . - Ш9-ХП-92.-С.66-68.

5. Абакшина С.А., Анисимова Л.С, Электрохимическое поведение и разработка экспресс - методики определения мочевой кислоты в природных' и биологических средах // Актуальные эколого-вкономические проблемы современной химии. Химия -92. Научн.-практ. конф. Тезисы докладов. - Самара,1992. - С.

6. Абакшина С.А., Анисимова I.C., Слипченко В.Ф..Белихма-ер Я.А. Определение мочевой кислоты в биологических средах методом дифференциальной вольтамперометрии //I. аналит.химии.-1993. - Т.48., » 2. - С.370-375.

7.Абакшша С. А,Анисимова Л.С., Белихмаер Я.А. Оптимизация количественного определения мочевой кислоты методом вольтамперометрии // Аналитика Сибири и Дальнего Востока. Регион, конф. Тезисы докладов. - ТЪмск, 1993.- С.17.

8. Абакшина С.А., Анисимова Л.С., Белихмаер Я.А.. Вольтам-пероыетрическое определение мочевой кислоты в природных и сточных водах // Многоцелевые гидрогеохимические исследования в связи с поисками полезных ископаемых и охраной подземных вод.

Всероссийское совещание, Тезисы докладов,- Томск,1993.-С.199-200.

9. Иванов И.Ю., Абакшина С.А., Белюсмаер Я.А. Вольтамперо-метрический анализатор мочевой кислоты )I Электрохимические методы анализа. ЗМА-94. 1У Всероссийск. конф. Тезисы докладов. - Москва, 1994. -С.60

10. Абакшина С.А., Анисигова Л.С., Назаров Б.Ф., Белихма-ер Я.А.Вольтамперометрия мочевой кислоты на твердых электродах Ш. шалит. химия.- 1994. - Г.49., 9 . -С.

11. Абакшина С.А., Анисимова Л.С., Еелихмаер Я.А., МанвеЯ-лер Н.Ф. Определение мочевой• кислоты в сыворотке-крови и моче вольтамперометрическкм методой U Клинич. лабор. диагностика. - 1994. - » 6. - С.

C2W-