Изучение особенностей биологической активности и физико-химических свойств бентонитовых глин в связи с применением их при госсипольном отравлении сельскохозяйственных животных тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ
Пирназаров, Дилшод Эргашович
АВТОР
|
||||
кандидата биологических наук
УЧЕНАЯ СТЕПЕНЬ
|
||||
Ташкент
МЕСТО ЗАЩИТЫ
|
||||
1996
ГОД ЗАЩИТЫ
|
|
02.00.10
КОД ВАК РФ
|
||
|
АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН
РГВ од
1 / H'Oí!
ИНСТИТУТ БИООРГАНИЧЕСКОЙ химии имени академика Садыкова А. С.
На правах рукописи УДК 619: 615. 9: 591.105: 553.611.6: 615. 93
пирназаров далаод зргаювкч
ИЗУЧЕНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ И ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ . СВОЙСТВ БЕНТОНИТОВЫХ ГЛИН В СВЯЗИ С ПРИМЕНЕНИЕМ ИХ ПРИ ГОССИПОЛЬНОМ ОТРАВЛЕНИИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
02.00.10 - Биоорганическая химия, химия природных и физиологически активных веществ
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата био л отческих наук
ТАШКЕНТ - 1996 г.
Работа выполнена в СамСХИ им, Ф. Ходжаева и в лабораториях химии хлопчатника и полифенолов Института биоорганической химии им.акад. Садыкова А. С.Академии наук Республики Узбекистан
Научный руководитель:
доктор химических наук, профессор . . Ш.К.Назаров
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук, профессор А. К. Нирахмедов
кандидат химических наук, с.н.с. С.й. Иуханедханова
- Ведущая организация: Ташкентский Государственный Университет
им. М.Улугбека
Защита состоится " 1996 г
к оо ~
в " Ч)" часов на заседании специализированного совета
Д.015.21.01 в Институте биоорганической химии им. акад.Садыкова А. С. АН РУ по адресу 7000143. г. Ташкент, ул. акад. Абдуллаева X., 83.
С диссертацией мою о ознакомится в библиотеке Института биоорганической химии им. акад.Садыкова А. С. АН РУ.
Автореферат разослан " " .■ 1996 г.
Ученый секретарь специализированного совета доктор химических наук, профессор
Н. И. Барам
- 3 -
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Одним из наиболее ценных и доступных кормов для сельскохозяйственных животных в Узбекистане являются побочные продукты масложировой промышленности, в частности, хлопковый шрот, жмых и шелуха. При комплексной переработке одной тонны семян средневолокнистого хлопчатника из. оставшегося шрота можно получить до 50 кг белка. Однако, широкому применению их в качестве высококалорийных кормов препятствует наличие в них ядовитых специфических госсипольных пигментов. Существует ряд методов по выделению или обеззараживанию госсипольных пигментов из-семян хлопчатника,, такие как обработка паром, аммиаком, солями железа, обработка дрожжевыми препаратами или выведение безгоссипольных сортов хлопчатника. Тем не менее,все эти методы имеют свои существенные недостатки, такие как энергоемкость, стоимость реактивов. а также эффекты , связанные с потерей кормовой ценности.
В связи с этим изучение и разработка новых методов обеззараки-вания госсиполсодержащих кормов, на основе дешевого местного сырья и.создание детоксикантов, оказывающих положительное влияние на основные биохимические процессы в организме животных, оптимизирующие содержание микроэлементов в крови и органах и улучшающие качество мясной продукции, являются актуальной задачей прикладных направлений современной,биоорганической химии.
Цели я задача исследования.Целью наших исследований являлась разработка профилактического детоксиканта на основе бентонитов Каттакурганского, Азкамарского, Дехканабадского месторождений против госсипольного-отравления сельскохозяйственных животных.
В связи с этим в работе поставлены следующие задачи:
-определение и подробная Физико-химическая характеристика Каттакурганского, Азкамарского и Дехканабадского бентонитов и их сравнительный анализ;
- определение сорбции бентонитами госсипола из различных растворов и растворителей., а также из желудочного сока; выяснение ме- ' ханизма сорбции и выбор оптимального бентонита; '
- определение влияния госсипола на биохимические параметры крови и тканей коз бычков и воздействие бентонитовой добавки на эти показатели;
- определение изменения микроэлементного состава органов и тканей коз , бычков, вызванных госсиполотоксикозом и воздействие
- 4 -
бентонитовых добавок на эти показатели; .
- определение содержания госсипола в тканях внутренних органов и фекалиях животных под влиянием добавок Дехканабадского бентонита; - :
- изучение профилактического детоксицирущего действия бентонитов Дехканабадского месторождения при длительном вскармливаниии . сельскохозяйственных хивотнах госсиполсодержащими кормами.
Научная новизна работы. Показано, что по элементному составу Дехканабадский и Азкамарский бентониты схожи, и их основным глинистым сорбирувдим минералом является монтмориллонит. . Максимальная набухаемость Дехканабадского бентонита достигается после температурной активации около 200°С. Впервые установлено, что исследуемый нами бентонит имеет высокую сорбционную способность к заряженным формам госсипола (катиондам и анионным), которая зависит от происхождения бентонита и свойств среды, в которой находится госсипол, при этом он не только сорбируется, но и окисляется. Установлено. что оптимальным условием для извлечения госсипола из желудочного сока, поступившего из хлопкового шрота, является рН 3,0-3,5. Изучением спектров люминисценции после добавки детокси-канта установлено присутствие в бентонитах окисленных Форм госсипола. Впервые показано, что бентониты необратимо сорбируют моно-и ди-карбокатионные формы госсипола из растворов серной кислоты, и предложена схема взаимодействия госсипола с кислородными вакансиями межплоскостного пространства монтмориллонита. Выявлено, что введение в госсиполсодержащйй корм Дехканабадского бентонита оказывает положительное влияние на динамику содержания общего белка и его фракций в крови животных, количество форменных элементов крови (лейкоцитов, эритроцитов, гемоглобина, СОЭ), а также оптимизирует к норме такие биохимические показатели, как АЛТ, аст, билирубин, сахар и основные микроэлементы (Ре. Мп. Си. Со, гп)
Практическая значимость работы. На основании проведенных ис-ледований показано, что введение Дехканабадского бентонита в состав радаона госсиполсодержащих кормов приводит к резкому снижению госсипола в организме животных,1- а также обогащает организм микро-'элементами. Разработаны оптимальные нормы прибавки бентонитового антидота' к кормам.' создан ГОСТ по применению бентонитовых добавок ■ и ТУ внедренное На Касанском. Каршинском, Каттакурганском МЖК и Яккабакском'мелькомбинате, которые утверждены ГУВ отделом по использованию кормовых добавок МСХ Республики Узбекистан 16.01.95Г
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на Всесоюзных научных конференциях: "Проблемы морфологии и паразитологии" (Москва. 1992); "Совершенствование мер борбы с болезнями сельскохозяйственных животных" (Бишкек, 1994); "Проблемы изыскания синтеза и производства новых препаратов для ветеринарии" (Самарканд, 1994); "Проблемы морфологии й паразитологии" (Москва. 1994) и научных конференциях профессорско-преподавательского состава СамСХИ (1992, 1994).
Публикация результатов исследования. По материалам диссертации опубликовано 14 работ.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 156 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, собственных данных и их обсуждения (экспериментальная часть содержит 5 разделов), списка литературы и приложения. В работу включены 33 таблицы и 12 рисунков. Список литературы содержит 140 источников.
На защиту выносятся следующие основные положения работы:
- основные характеристики физико-химических свойств и биологической активности бентонитов, их структура, микроэлементный состав, сорбционная способность; •
- влияние бентонитов при включении в госсиполсодержащие корма на динамику основных биохимических показателей сыворотки и форменных элементов крови, тканей органов животных, а также их микроэлементного состава и живой массы; !
- разработка рекомендаций по профилактике госсиполотоксикозов сельскохозяйственных «ивотных;
- экономическая эффективность от использования бентонита при откорме сельскозяйственных животных.
2. ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
ал.Катвришзм м метода «веемдадаыв«.
Для выполнения поставленных задач использовали чистый госси-пол, полученный в Институте Оиоорганической химии, хлопковый шрот и шелуху из перерабатывающих предприятий Касанского, Каршинского и каттакурганского МЖК, бентониты Дехканабадского.;Азкамарского и Каттакурганского месторождений,.' В экспериментальных и производственных условиях опыты ставили на 1617 животных, в том числе на
98 козах советской длинношерстной и 1519 бычках красной степной порода. .Содержание и кормление подопытных животных проводилось согласно ВИЖа.
В опытах in vitro изучались свойства Дехканабадского, Азка- . марского и Каттакурганского бентонитов в различных средах и желудочном соке, коз, ; как возможных антидотов госсипола в организме живорных. Свободный госсипол в кормах и Фекалиях определяли по известным методикам (А.Л.Маркман, В.П.Рзкехин. "Госсипол и его производные", Москва, 1965). ■
Рентгенофазные кследования различных образцов бентонитов и : фекалий животных проводились на дифрактометрах ДРОН-2, ДР0Н-УМ1. Электронномикроскопичоские иследования различных образцов бентонитов и фекалий проводили на электронном микроскопе TESLA В-242Е, с . ускоряющим напряжением 60 кВ. Содержание химических элементов определялось.в бентоните, внутренних органах и тканях животных путем использования метода нейтронно-активационного, эмиссионного и. атомно-адсорбцйонного спектрального, анализа по Про ¡¡су (1976). Атомно-адсорбццонный анализ проводили на спектрофотометре "Сатурн". Для изучения кинетики набухания бентонита использовали дилатометрический метод (Н.П.Песков, 1948). Содержание госсипола в органах и ткадях подопытных животных определяли по. методикам Smith, (1965), Croucn E.W., Bryant M.F. (1982).
Концентрацию гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов й СОЭ определяли общепринятыми'в гематологии методами. Биохимические анали- . зы крови, проведены по следующим показателям; общего белка - рефрактометрически, его фракций экспресс нефелометрическим методом Олла-Маккорда в модификации Е. А.Карпюка (1962); сахара - по Хаге-дарну- Ие1!сену; активность аспартат и аланинаминотрансфераз - по Т.С.Пасхзшой (1965); общего билирубина - по Иендрашику и др.; активность ацэтилходонэстеразы - по А.А.Покровскому (I960)'-. Экономическая эффективность методов профилактики отравления сельскохозяйственных животных госсипо^содержащими кормами определяли в соответствии с методическими рекомендациями, разработанными В.А.Се-редкиныя и др,-(1982,1987). <Все полученные данные были подвергнута: статистичеокой -обработке общепринятыми методами по Н.А. Плохимска- : му (1980) на персональном/ компьютере EC-182D.. - . : ' .
■ • ■ ^ >-; ■ 3: РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 3.1. Исследования физико-химических - свойств бентонитов!
_ 7 -
юго-западного Узбекистана Изучение химического состава и физико-химических свойств бентонитовых глин необходимо для понимания их физиологического действия в связи с возможностью применения бентонитов в качестве минеральной подкормки и детоксиканта для сельскохозяйственных животных. Рентгенофазный анализ бентонитовых минералов считается одним из точных методов диагностики их состояния. Рёнтгенофазным анализом показано, что во всех исследованных образцах содержатся, линии, характерные для определенного вида минералов. Установлено, что в анализированных бентонитах из 3-х месторождений наибольшее: содержание монтмориллонита (55-65%) характерно для Дехканабадско-го месторождения. Содержание цеолитов незначительно, гидрослюды -10-15%. Присутствие некоторых примесей (цеолитов, кварца, хлоритов, гндрослюды) указывает на необходимость уменьшения их количества, так как эти минералы могут повреждать слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта животных. Набухаемость характеризует способность бентонитов поглощать воду и обменные ионы, что приводит к значительному увеличению объема (до 25 раз). Установлено, что наибольшей набухаемостьа обладают бентониты Дехканабадского месторождения, активированные при 200-300°С. В лаборатории нейт-ронно-активационного анализа ИЯФ АН РУи центральной химической лаборатории "Самаркандгеология" проведен анализ образцов бентони-' товых глин методами нейтронноактивационного анализа,. атомной адсорбции и эмиссионной спектроскопии Показано, что Дехканабадский и Азкамарский бентониты относительно' близки по своему составу, хотя и отличаются по содержанию Со, Я1, Мп. Содержание РЬ и СсЗ в Каттакурганском бентоните выше, чем в Дехкан£бадскоМ И Азкамарс-. ком в 3-4 и 9 раз, соответственно. Доказано, что в Дехканабадских и Азкамарских бентонитах содержание тяжелых металлов типа РЬ и Hg намного ниже ПДК. Каттакурганские бентониты бедны по содержанию жизненно важных элементов и характеризуются более высоким содержанием РЬ и Hg. С целью выяснения особенностей криптостроения бентонитов проведено электронно-микроскопическое исследование бентонитовых глин данных месторождений- Показано, что в составе изученных глин очень часто обнаруживаются частицы изометрич-нотпластинчатой: формы, .свидетельствующие, о. наличии в пробах гид-рослйдн. Смещенйослойные образования гидрослюдисто-монткориллони-тово^о состава определяются йо^переходам! от'гидрослиды к •• монтмориллониту или. нарСсрот:' •' •'. ■• • '
Сравшгг&кьшв характеристики предельной сорбция госсипшш кз рагеттаыг растворители очвданяыьн н неочзззэншаи обргзцага бейтоютов Ка?твк$рггЕг (К), Азкакгра (А) и Дехканабада (Д) ( ояргделоио спектрофотоиетрнчесга^ количество растворителя - 10 ил, кояпество добавяеавого сорбента 1г)
I.
Ра ств орят ел
Сорбеаг Щелочь йетанол Этанол Ацетоа Концентрир. НгБОл
*Ч20 % извде ченяя Д-350 % извлечения Д-400 % Извлечения Д-420 % Извлечения Д-420 % Извде чения
КОНТРОЛЬ»« 0*440 100 0,420 100 0,650 100 0,380 ; 1оо 0,900 100
Неочиярвий (К) 0,285 64,1 0,205 48,8 0,450 69,2 0,290 76,1 0,810 90,0
ОчпевяиЯ (КГ 0,230 52,3 0,207 49,2 0,390 . 60,0 0,285 75,4 0,855 95,2
Неочмцкш* (А) 0,250 56 с 4 0,190 45,0 0,400 61,5 0,205 53,0 0,440 48,8
ОЧХЦВНШЯ (А) 0,210 47,6 0,180 42,8 0,350 53,8 0,194 51,0 0,580 64,4
неочщвяма (Я) очившмв 0,217 49,5 0,120 28,3 0,300 46,1 0,150 39,4 0,300 33,3
0,170 38,7 0,080 19,4 0,210 32,3 0,130 34,7 0,520 57,7
со
I
(Д)
Д - оптктеская плотность
• ' V -.•г®-?.(S a Uû
Рко.1. Воашккая
cxera еорбтеи госсипола a прэвтеанег». »»«яоскостгон
I-Кивлород: " ■
ST* »ÄJÄ^ ■
í ВДроксклькая связь: 9-Ваго•Mw'WojefafcK. » г - < ■ *"■' '
3.2.Исследование сорбции бентонитами госсипола из различных растворов.
' Полученные данные по предельной сорбции госсипола из различных растворителей приведены в таблице 1. Из приведенных данных видно, что существует четкая закономерность сорбции госсипола бентонитами Каттакургана. ■ Азкамара и Дехканабада. Очищенные бентониты более активно сорбируют госсипол из различных растворителей (за исключением HZS04). чем неочищенные.. Вторая закономерность заключается в том, что Дехканабадский бентонит, который по содержанию монтмориллонита превосходит Азкамарский и намного - Каттакурганс-кий, является очень сильным адсорбентом госсипола, а в очищенном виде адсорбирует госсипол более, чем на 80% из метанольного раствора. Третья закономерность заключается в том, что.госсипол сорбируется даже из концентрированного раствора H2S04. В этом случае происходит необратимая сорбция значительного количества госсипола Азкакарским и Дехканабадским бентонитами. Данные рентгенофазного анализа показали, что общая геометрическая структура госсипола по размерам полностью отвечает возможной геометрии межплоскостного пространства при набухании монтмориллонита (до 19А). В связи с этим мы предлагаем возможную схему взаимодействий, определяющую специфическую • сорбцию заряженных форм госсипола в межплоскостном пространстве монтмориллонита, которая представлена.на рисунке 1.
3.3. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ДЕХКАНАБадСКОГО БЕНТОНИТА
3.3.1. Изучение сорбции госсипола бентонитом в желудочном • соке коз.
Показано, что Дехканабадский бентонит по многим параметрам схож с Азкамарским, а по сорбционным свойствам превосходит последний. Поэтому для наших дальнейших исследований мы брали только бентонит Дехканабадского месторождения.. Желудочный сок животных с рН 6,7 брали при помощи.'фистулы и хранили При температуре +4°С. В качестве, хлопкового корма использовали неконцентрированный шрот Касанского масло-экстракционного завода с содержанием свободного госсипола -0,047Ж и связанного -1,56%,(по весу).
Установлено,'что при'инкубации шрота с НС1 количество госси--пола, извлекаемого. 70% водным ацетоном, резро увеличивается за-счет освобождения его из ■связанных форм. Содержание-госсипола в жидкости тем выше, чем' больше концентрация НС1. При инкубации
бентонита с желудочным соком и шротом содержание госсипола неизменно, но если шрот предварительно инкубировать с НС1, то после совместной инкубации шрота, желудочного сока и бентонита концентрация госсипола в жидкости, определяемая известным методом, резко уменьшается. Из данных эксперимента видно, что для извлечения госсипола из хлопкового шрота оптимальным является рН 3-3,5, при котором отмечена :: наибольшая сорбция госсипола бентонитом. Показано, что наиболее эффективным количеством бентонита в данном случае является 1,5г/л. при котором содержание определяемого госсипола в жидкой среде равно 0,008% (до сорбции - 0047%).
Существует ряд методов обезвреживания госсиполсодержащих кормов, однако все они имеют свои определенные недостатки; так как наша проблема была связана с созданием нового направления по обезвреживанию госсиполсодержащих кормов, то важно было охарактеризовать влияние госсипола на ряд основных биохимических показателей крови обследованных нами животных (коз и бычков) и выяснить антидотные свойства Дехканабадского бентонита.
3.3.2. Влияние включения бентонита в госсиполсодержащие корма на динамику основных биохимических показателей в сыворотке и форменных элементах крови бычков и коз
Нами изучено влияние госсипола на основные биохимические показатели крови и содержание микроэлементного состава в органах и тканях бычков при включении в корм Дехканабадского бентонита, при длительности откорма 150 дней. Установлено, что содержание общего белка за 120 и 150 дней снижается на 19.3% (Р<0.01): (Р < 0.001), альбумина, а-р и y-глобулинов соответственно, на 27%, 30,6Я и 34,9% (Р<0,0П: (Р<0,001), а содержание р-глобулина остается без изменений. На 150 день кормления госсиполсодержащим кормом активность АХЭ снижается на 31% (Р<0,001). а ферментов АЛТ И ACT возрастает, соответственно на 2В,5% (Р<0,001) и 38, 155 (Р<0,001), при этом уровень билирубина в сыворотке крови" повышаьтся на 75,1% (Р<0, 01) . Эти данные указывают на то, что при госсипольной интоксикации происходит довольно значительное поражение печени и достоверное снижение уровня сахара в крови. Далее нами было изучено влияние добавки бентонита в госсипо'лсодержащие корма на изменение количества эритроцитов, лейкоцитов," гемоглобина на показатели скорости оседания эритроцитов крови бычков.
При этом было показано, что количество эритроцитов достоверно
снижается, начиная.с 60 дня скармливания, причем на 150 день - до 25% (Р<0,001) по' сравнению с контролем, ". лейкоцитов - на' 13,1% (0,001), гемоглобина - на 48.7% ; (Р<0,001). Аналогичны закономерности госсиполотоксикоза, а именно изменения содержания общего белка в сыворотке крощ. альбумина, а-р к "/-глобулинов,. увеличение активности. АлАТ и АсАТ; билирубина, снижение активности АХЭ, уменьшение количества эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, увеличение СОЭ обнаружен^ и для коз.. Введение в состав корма коз бентонитовых добавок приводит' также, как и в случае'бычков к удержанию этих показателей на-уровне- коктроля." -, В отличие от экспериментов с .бычками, опыты, с козами были поставлены в течение 75 дней, и первые признаки госсиполотоксикоза начали проявляться уже на 50 день опыта.: . Нужно отметать, что козы более, чувствительны к госсиполу. чем бычки,.Тоссипольнм интоксикация оказывает существенное влияние на основные биохимические.", показатели сыворотки и форменные, элементы- крови .бычков; и ксз, вызывает'нарушение функции печени, почек,:ведет. к" развитию хелезодефвциткой анемии. Введение же в госсиполсодерярщй .корм ¡бентонитовых^добавок нормализует основные биохимические показатели крови, количество форменных элементов. сохраняя их на уровне контроля. Следовательно, Дехкана-бадский бентонит не уступает Азкамарскому по способности предупреждать госсипольную интоксикацию.
3.3.3. Влияние.госсиполсодержащего корма на динамику изменения показателей микроэлементного состава крови и тканей органов, бычков и коз
В дальнейшем важно было выяснить, как.влияет интоксикация госсиполсодернащим кормом на содержание з крови.и тканях важнейших микроэлементов, таких как Си, Мп, 7,п, Ге. Со.
Данные по микроэлементному составу показывают, что содержание микроэлементов в крови коз, потреблявших корм с хлопковым шротом и шелухой (вторач группа животных) изменяется на 75 день для Си ст 13.2% до 28.4% (Р<0.001). 2П на 25 день - 4%. на 50 день - 11% (Р<0!) и на 75 .день - 15,1% (Р<-0.001). Изменение содержания Ге такие начинается на 75 день - 40% (Р<0,001). Содержание Со в течение всего периода/кормления фактически не изменяется.
Рведение бентонитовой добавки в состав госсиполосодержащего керна сохраняет показатели , содержания всех микроэлементов на ур-пне контрольных. В следующей серии'опытов было определено из-
менение количества микроэлементов в различных органах. Из полученных данных следует, что госсипольная интоксикация приводит к довольно серьезным изменениям микроэлементного состава крови и тканей таких важных органов как печень, селезенка, почки, сердце. При этом потери таких жизненно важных микроэлементов как Fe, Си, Zn довольно значительны. Отсюда можно полагать, что и наряду с поражением печени при госсипольной интоксикации быстро развивается железодефицитная анемия, а выведение Zn. способствующего активации действия витаминов, приводит к авитаминозу, Добавление в госсиполсодержащие корма бентонита нормализует показатели микроэлементного состава крови, органов и тканей, сохраняя•их на уровне контроля. Таким образом, полученные нами данные убедительно указывают на способность применяемого нами Дехканабадского бентонита предупреждать отравление госсиполом.
Как видно из ! вышеизложенного, влияние госсиполсодержащего корма на биохимические показатели крови и его форменные элементы в принципе соответствует данным, полученным Давлатовым Н.Ш. Однако. влияние госсипольной интоксикации на микроэлементный состав крови и тканей таких важнейших органов как печень, почки, селезенка, сердце, мышцы не было изучено, хотя известно, что микроэлементы играют важнейшую роль в регуляции биохимических и физиологических процессов в жизнедеятельности живого организма. В связи с этим, нами изучено влияние госиполыюй интоксикации на изменение микроэлементного состава крови бычков, потреблявших госсиполсодержащий корм. Например, содержание, Си в крови начинает снижаться уже на 60 день приема корма и на 150 день доходит ло. 48,8% (Р<0,001) по сравнению с контрольным. Резко снижается и содержание Fe - до 38,8% (Р>0.001), что подтверждают биохимические данные по снижению количества гемоглобина.
Вторая серия опытов по определению микроэлементов состава тканей органов показывает, что в печени содержание Си значительно снижается на . 10,1 % (Р>0.001): очень незначительно снижается содержание Mn. "Zn на.4,3% и на 33,3% (Р>0,001) - содержание Fe. Содержание Со остается в течение всего временя.кормления на уровне . контроля'. Также довольно сильно снижается содержание Си и Fe в селезенке на 33,1% и 16.7% (Р>0.001), соответственно. Аналогичное резкое снижение содержания Си И Fe на 25% и 26.8% (Р>0, 001) характерно и для тканей почек. Слабо выражены подобные изменения содержания Си, Fe, Zn для тканеП сердца и миощы.
Введение в состав госсиполсодерясащего корма бентонита предохраняет организм животного от интоксикации госсиполом, и все показатели микроэлементного состава тканей органов остаются на уровне контрольных. Из этих данных можно сделать вывод, что Дехканабадс-к.ий бентонит в применяемых дозах является эффективным детоксикан-тон профилактического действия от госипольного отравления животных госсиполсодержащим кормом.
3.3.4. Содержание госсипола в фекалиях и некоторых органах коз и бычков, потреблявших госсиполсодержащий корм с добавкой бентонита
Представляет интерес выяснить, в каких количествах госсипол выводится бентонитом из организма животных. Для решения этого вопроса было проведено исследование фекалий коз и бычков. В фекалиях коз, ' потреблявших госсиполсодержащий корм, содержится в среднем 1/3 (Р>)О,001), и в организме задерживается 2/3 от исходного количества госсипола (Р<0,001). При добавлении в корм бентонита из организма выводится фекалиями 74%(Р<0,001), а сохраняется в организме только 26% госсипола (Р>0,001), которые , по видимому. в основном депонируются в жировых тканях, так как госсипол хорошо растворим в жирах. Аналогичная картина наблюдалась и у бычков, потреблявших госсиполсодержащий корм: выводимость госсипола из организма равна 31,8% (Р<0,001).'В то же время добавление, в корм бентонита резко увеличивает выводимость госсипола из организма. Это в процентном выражении составляет 70,5% (Р<0<001). Приведенные выше данные свидетельствуют о том, что госсипол, проходя через желудочно-кишечный тракт, выводится бентонитом более, чем на 70% (Р<0,001) в неизменном виде. Не меняется при этом и структура основного минерала бентонита.
Результаты приведенных выше опытов показали, что более 25% (Р>0,001) госсипола остается в организме животного и может аккумулироваться в различных органах, тканях животных. Из данных, приведенных в . таблице : 2 видно, .что . в -группе животных,, потреблявших госсиполсодержащий - корм, , наибольшее содержание госсипола найдено в " печени. Исследование . органов коз на. содержание госсипола показало также, . что На 25,день после забоя содержание госсипола в органах и;тканях уменьшается в 24-27 раз. подержание госсипола в органах и тканях бычков. получавших бентонит резко понизилось: в печени в 3.6 (Р>0,001) раз.'в почках
л
ВШШ БЕНТОНИТА ка СОДЕРЯ&ЗЕ ГОССШОЛА (МГ/КГ) В ОРГАНАХ И ЖАКЯХ КОЗ И БЫЧКОВ, ПОТРЕБЛЯВШИХ госгаполсодЕшда КОШ
Таблица 2
Сргага а
статистические
П О К А 3 А Т Е Л И, М - и
Т1Ш Овз добавка бйэтокита гсзл (к^З) 0 добавлением бентонита козы <п=3) Без добавки Оентонита Оычки (п--7) С добавкой сонтоззи'а бачзм (п=7)
В день [Сщтстз 25 да. зхйое ' посла эабсл В день забоя Спустя 25 да. после забоя В день забоя Спустя 25 да после забоя В день |Спустя 25 да. забоя | после забоя
ЙЭТЗЕЬ Шгч^а. Сагаашка ЛгПВШ
ПК&Л 4 ± ^,28 .И 5 IЛ 3 ±$,33
1^-2,1 8 ± 0,49 2Э^2Г7 1 ± 0,03 Ю 2 о? 1± 0,04 3 - 0,31 . ..-сядян
24- 1,5 2 ± 0,3 34± 3,2 1 ± 0,05 1 ± 0,05 1 ± 0,04
I
1 2 0,06
2 ± 0,4
0,04 14Й*7,1
Л Пй ПО т т о
29*^1.8 42,9
Щ*
следа
39, 17
1.0 0,33
***
14 ±0,38 4 ,± 0,36 19 ±1,3 2 ±0,4 2 ± 0,5 следа
ЗЭ ± 3,35 5 ± 0,4 51 ± 4,7 2 ±0,5 2 ± 0,3 1 ± 0,03
± 0,28 ±0,06 ± 0г37 следы
сл
I
Веаггчага статаетацесжз достоверны (** Р<0,01; *** 3?<0,001) по сраваезщ» с ^тозайшатчшзви!щташ
-5,8 (Р>0,001), селезенке - 4,5 (Р>0,001). легких- 18,5 (Р>0,001), сердце - 8,5 (Р>0,001). мышцах - 5 (РЖ001) раз. аналогичное снижение содержания госипола отмечено в органах коз.
Таким образом, введение в состав корма, применявшихся нами количеств бентонита, привело к резкому снижению содержания госсипола в организме животных.
3.3.5. Влияние бентонита на прирост живой массы коз и бычков при потреблении госсиполсодержащего корма
Представляет интерес изучение влияния бентонита на прирост живой массы подопытных коз и бычков при потреблении ими госсипол-содержащего корма. Для этого мы определяли живую массу подопытных коз на 25. 50 и 75 дни кормления. Первая группа животных была , ■контрольной, вторая потребляла госсиполсодержащий корм, третья потребляла госсиполсодержащий корм и бентонит. Контрольная группа коз. получавшая только комбикорм, прибавила в весе на 4,2 кг за .75 дней (Р<0,001), тогда как во второй группе они потеряли в весе на 1,3 кг (Р<0,001); привесы живой массы в третьей группе живот- .. ных составили 3,6 кг (Р<0,001).
Более четкие результаты изменения привеса животных гпри потреблении госсиполсодержащего корма были получены на бычках. Так, для контрольных,животных привес за 150 дней составил 139 кг (Р<0.001), для группы бычков, потреблявших госсиполсодержащий корм +114 кг (Р>0.001) и для третьей группы животных, потреблявших госсиполсодержащий корм с бентонитовой добавкой, +142 кг (Р<0,001). следовательно, при госсипольном отравлении животные теряют в весе в средней 25 кг (Р>0,001), живой массы по сравнению с контролем, а добавки бентонита к корму нормализуют прирост живой массы, предупреждая госипольнре отравление. Экономический эффект от введения бентонита в рацион бычков на откорм составляет 124,4 сума в расчете-на одно кивотное, а у коз - 16.6 сума на одно «швотно.е. '.-;
В экспериментальных и производственных,условиях опыты произ-•• водились на 1617 животных ,". в том:,числе — на:98 козах советской длинношерстной и 1519 бычках красной'степной породы. 'Экономичес^ кий эффект от использования бентонита Дехканабадского месторожде- . кия 'при откорме '«квотных' составил 189.9 тысяч-сум."Таким образом,, '• иолученше результаты ¡.•с.гут служить экономическим -обоснованием;, . При внедрении его п П['активу'сете;.-знарии как средства'профидакти-
ки госсиполтоксикозов.и считается источником макро и микроэлементов для сельскохозяйственных животных.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИЙ
1.Рекомендации "По применению монтмориллонита в сочетании с некоторыми элементами для повышения продуктивности свиней и предупреждения госсиполового отравления". Ташкент, 1992, Госкоопком УзССР, 23.04.90.
2.ТУ на кормовой бентонит для Азкамарского месторождения. Утвержден ГУВ и отделом по использованию кормовых добавок. МСХ Республики Узбекистан, 21.05. 92 г. •
3. Инструкция "По применению бентонита Азкамарского месторождения с целью профилактики . госсиполового отравления у кур".Ташкент, 1992. ГУВ МСХ Республики Узбекистан от 23.09.92.
4.Рекомендации "По профилактике госсиполотоксикозов сельскохозяйственных животных и птиц". Ташкент, 1993, ГУВ МСХ Республики Узбекистан. 23.09.92
5. ТУ "Бентонитовая глина Дехканабадского месторождения -минеральная кормовая добавка и антидот профилактического действия при госсипольном отравлении сельскохозяйственных животных и птиц". Утвержден ГУВ и отделом по использованию кормовых добавок МСХ Республики Узбекистан. 16.01.95
ВЫВОДЫ
1.Методами рентгенофазного анализа.' нейтронно-актйвационной, атомно-адсорбционной и эмиссионной спектроскопию! проведено изучение минерального и химического состава бентонитов некоторых месторождений Узбекистана. Показано, что по содержанию монтмориллонита и микроэлементов наиболее перспективными для применения в животноводстве являются бентониты Дехканабадского и Азкамарского месторождений, в то же время Катгакурганские бентониты характеризуются относительно низким содржанием жизненно важных элементов и присутствием повышенных концентраций РЬ и Ш- ■■',
2. В результате определения относительного содержания примесных минералов, раздражающих слизистые ткани' (кварц, слюда, гайландит и др.), установлена необходимость применения монтмориллонитов в качестве добавки в корма в очищенной, форме., разработан лабораторный регламент очистки Дехканабадского и Азкамарского бентонитов
. 3. Установлено, что изученные бентониты обладают наибольшей набухаемостыо при активации в температурном интервале 200 -300°с, причем наиболее активным является Дехканабадский бентонит. Изучение спектров люминесценции установлено присутствие в бентонитах окисленных форм госсипола. Впервые показано, что бентониты необратимо сорбируют моно- и дикарбокатионные формы госсипола из растворов концентрированной (Н2S04) кислоты. Предложена возможная схема взаимодействия госсипола с кислородными вакансиями межплоскостного пространства монтмориллонита.
4. Изучена, предельная сорбция госсипола Каттакурганским, Азкамарским и Дехканабадским . бентонитами и активированными формами из различных, растворителей при разных рН Ш80,. Нг304, СН30Н, С2Н5ОН, НС1, (СН3)2СО и др.). Установлено, что бентониты, в особенности, очищенные формы Дехканабадского и Азкамарского бентонитов, имеют высокую сорбционную способность к заряженным формам госсипола (анионным и катионным).
5. Изучено взаимодействие желудочного сока жвачных животных с хлопковым шротом. Установлен максимальный выход госсипола в желудочный сок при рН 3.О - 3,5. Показано, что в этих условиях бентониты и их активированные формы сорбируют 80-90% госсипола из желудочного сока коз.
6.Установлено, что введение в состав госсиполсодержащего корма определенных доз бентонита приводит к резкому снижению содержания этого полифенола в тканях организма животных за счет выведения сорбированного госипола с экскрементами.
7.Установлено,, что добавление в госсиполсодержащие корма Дехканабадского бентонита предотвращает значительные изменения микроэлементного состава крови, тканей и органов животных, сохраняя их на уровне контроля, служит убедительным доказательством профилактического антидотного свойства данного бентонита и оказывает положительное влияние на показатели динамики содержания общего белка и его фракций в крови животных, форменных элементов крови, (лейкоцитов, эритроцитов, гемоглобина, СОЭ). .',. .'".•'.,
,8.Показано, что при госипольном отравлении происходят потери в живой массе жвачных животных. Добавки бентонитов Дехканабадского. месторождения к корму нормализуют- приростживой •массы.,' эффективно-предупреждая госсицольн^е'.отравление; животных,;, При ,йтрм э.к.онрм}1ческ^.,з^ектиэнос.ть о.^, применения .бентонита, при откорме КРС составляет 124,4 сума', а у коз - 16,6 сум^ на одно.
животное,
9.Впервые разработаны технические условия "Бентонитовая глина Дехканабадского месторождения, минеральная кормовая добавка и антидот профилактического действия при госсипольном отравлении сельскохозяйственных.животных и птиц" (утверждено Министерством сельского хозяйства й Главным управлением ветеринарии Республики Узбекистан).
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1.Пирназаров Д.Э.. Назаров М.Ш., Леонтьев В.Б., Арустамян М. А.\ Назаров III. М. Сорбционная способность различных форм госси-пола на бентонитах // Узб. хим. ж. 1994. N1. С. 9-Ю.
2.Пирназаров Д.Э,, Закиров М.3., Назаров М. Ш., Назаров Ш.Н: .Марданов Р.Г. Роль бентонита в снижении содержания госсипола в желудочном соке животных // ДАН РУз. 1995. N3. С.36-38.
3. Назаров.М.Ш... Пирназаров Д. Э.. Назаров Ш.Н. Изучение набу-хаемости местных бентонитов. // Науч. тр. Московского мед.акад. им.И.М.Сеченова. "Проблемы морфологии; и паразитологии". Москва.
.1994. С.254. .
4. Назаров М.Ш., Пирназаров Д.Э.. Назаров Ш.Н. Изучение обезвреживания бентонитами. //Науч. тр. Московского .мед. акад. им.И.М. Сеченова. "Проблемы морфологии и паразитологии". Москва. 1994. С. 255.
5. Пирназаров Д. Э.; Назаров М. Ш.. Назаров Ш. Н. Влияние бентонитов и желудочного сока коз на степень извлечения госсипола . из хлопкового шрота // Сб. науч. тр, "Совершенствование мер борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных" Бишкек. 1994. С.79-81.
6.Пирназаров Д.Э. Извлечение госсипола из хлопкового шрота монтмориллонитом // Науч. конф. "Проблемы изыскания, синтеза и производства новых препаратов для ветеринарии" Самарканд. 1994. С.77-78.
7. Пирназаров Д.Э..' Назаров М. Ш.. Хайдаров К.Х. , Назаров Ш. Н. , Ким P.M. Влияние Дехканабадского бентонита на процесс пищеварения; .коз. •>/'• Науч.конф.мблодых 'ученых и л аспирактов СамСХИ.* Самарканд. 1994. С. 26. : \ .
8.Назаров М.Ш.,Пирназаров Д; 9., Нахалбоев А. Н., Абдивоитов Ш. А., Назаров Ш.Н.' Химический состав кровй и шерсти у откормочных бычков // Науч. конф. молодых ученых и аспирантов СамСХИ. Самарканд. 1994. С. 25;
9. Пирназаров Д.Э., Назаров Н.Ш., Назаров Ш.Н., Абдивоитов Ш. А. Адсорбция госипола при помор местных бентонитов // Науч. конф. молодых ученых и аспирантов СамСХИ. Самарканд.1994.С.28.
Ю.Назаров М.|И. . Пирназаров Д. 3.. Назаров Ш.Н. Адсорбционные свойства бентонитов при нейтрализации госсипола // Науч.отчет конф. профессоров, преподавателей и аспирантов САмСХИ. Самарканд 1994. С.223.
11.Пирназаров Д.Э,, Назаров Ш.Н.. Жураев Ж.Я. Экономическая эффективность при кормлении Дехканабадским бентонитом откормочных бычков и молодых телок // Науч. конф. молодых ученых и аспирантов СамСХИ. Самарканд. 1995. С.95-97.
12.Назаров Ш.Н., Давпатов Н.Щ. .Нахалбоев А.Н., Назаров М.Ш., Иргашев И. X., Риш М.А.. Ниязов Х.Б.. Пирназаров Д.Э. Применение монтмориллонита в сочетании с некоторыми элементами для повышения продуктивности свиней и предупреждения госсипольного отравления //Рекомендации Госкоопком УзССР. Ташкент 1992. 16 с
13. Давлатов Н.Ш., Назаров Ш.Н., Иргашев И. X.. Назаров М.Ш.. Каримов М.Г., Пирназаров Д.Э. Профилактика госсиполотоксикозов сельскохозяйственный животных и птиц // Рекомендации ГУВ МСХ Республика Узбекистан. Ташкент. 1992. 9 с.
14. Давлатов Н.Ш., Назаров 111. Н.. Иргашев И. X., Абдурахмонов Т.А.. Каримов М.Г.. Пирназаров Д.Э. Применение бентонита Азка-мэрского месторождения о целью профилактики госсипольного отравления у кур // Инструкция ГУВ Республики Узбекистан. Ташкент. 1992. 2с.
- 21 -Пирназаров Д. Э. . 1$ишло^ хужалик хайвонларини госсипол билан за^арланишини олдини олишда гилмояни щглланилиши биологик фаоллиги ва унинг физико-кимёвий хоссаларшш урганиш.
Мазкур иш )$айвонларда озш$а ^ушимчаси сифатида ишлатиладиган Дезуузнобод гилмоясининг Физиковий. кимёвий ва биологик хусусият- • ларини урганиш ва ^айвонлар хурагида кенг ишлатиладиган. пахта чи^индиларидан олинадиган ози^алар таркибида сагуювчи за^арли госсипол моддасини мшуюрини камайтириб зарарсизлантиришга багиш-ланган.
Бу муанмони ечиш учун Деэдонобод гилмояси энтеросорбент сифатида урганилди. Электронмикроскопик, рентгенофазали, эмиссион. нейтронно-активацион ва атомно-адсорбцион анализлар натижасида гилмоянинг таркибидаги актив рсми монтмориллонит мивдори Азкамар гилмоясига нисбатан куп са^лаши туфайли унинг сорбцион хусусияти хам кучлиро^ эканлиги ани^ланди, шу билан з^йвон организми мухи-тига мослаштириб гилмоянинг биотрансформация ва госсиполни суриб олиш механизми урганилиб чи^лди. Тажрибада госсипол са!угсвчи озицрларини истемол рлиб зах^рланган з^йвонларнинг крннинг био-кимёвий ва морфологик таркиби текшириб курилганда, ACT, АЛТ, АХЭ, мирорини купайиши. Умумий о^сил, ва унинг фракцияла-ри. эритроцит, гемоглобин, мшуюрини камайиши кузатилди, Госсипол са1уювчи ози^лар билан Дехконобод гилмоясйни истемол Щ1якб бор-ган з^айвонлар гуруз^ида ^оннинг биокимёвий ва морфологик курсаткич-лари миерида са^ланиб туриши анищганди. Госсиполдан зазфрланган гурух х^йвонларининг ^рнини ва ички орган тукималарида микроэле-менглар ми&дори камайиб ¡ужит кузатлди. Гилмоя истемол ^илган гурухда эса микроэлемент мивдори назорат гурухи сингари .миёрида садани б туриши ашцушди.Шундай к^либ ^айвон^ар хурагига Дез$£он-обод гилмояси iy/шиб берилганда, у госсиполни узига сорбция: ^либ уни зарарсизлантиради, ва микроэлемент манбаи здюобланади.
Бу эса пахта чи!ушдиларидан ^олинадиган озю^ларни кенг куллаш имконини яратади ва бурдо^ланае'тган зфйвонларнинг мазфулдорлиги- • ни"ошириши урганилди. Утказилган тажрибаларнинг и(уисодий самара-дорлиги борвдаги бу^чаларда з$рр бир бощга 124.4 эчкиларда эса 16.6 сум цутимча фойда бериши курсатилди ва гилмоя з^йвонлар маху-сулдорлигини ошириш, госсипол билан заз^рланишини олдини олиш учун озуцр фшммчаси сифатида уллаш иилаб чи^риига тавсия линди.
- 22 - ' I'lrnasarov D. E.
THE STUDY OF PERCULTARITIES BIOLOGICAL ACTIVITY .AND
PHYSICAL - CHEMICAL PROPERTIES OF BENTONITE CLAYS DURING THE POISONING OF AGRICULTURAL ANIMALS WITH GOSSYPOL
In this, work It is studied the Influence of bentonlte clays from different regions of Uzbekistan in order decrease the toxicity of food .industry wastes being used in ration of agricultural animals.
The initial basical stuff for Its remaking are the cotton seeds containing toxical substances - gossypol that is limited its using as the fodder for animals. Instead of probit there is loss because of unknown physical-chemicals properties of bentonlte clays.
Nowdaus there are numerous methods of gossypol toxicity degasing but they do reach its aim.
In this paper it is given the comparative investigation of structure, construction and microelement composition of bentoni-tes. It is shown the bentonlte of Dehkanabad lauer to be possened of high quality.
The Introduction of bentonlte definited doses Into gossypol containing ration gives the considerable decreasing of gossypol in tissues of different organs of animals.
At the same time It Is stated Dehkanabad bentonlte supplement to gossypol- containing fodder prevents the significant changes of microelement composition of blood, tissue and organs of animals being in the control levels. Our results, testify the effective prophylactic measure of bentonlte using. It is studied and shown the positive, influence of .this bentonlte upon dynamics of albumlnen and its groups in animal blood as well as blood picture (hemoglobin, leucocytes, erythrocytes, SEE). \
Thus it is detailed the gossypol poisoning of animals, and suggested the measures of Its prophylaxis. .._..'.
Economic efficiency ..calculated one head ot,animais;,is. for: ■ • the bull calves - 124 s.. for the goats - 16.6 s. •.
As a result of complex work it is developed the technical conditions of bentonlte using to the ration of productive animals for the aim of gossypol toxicosis prophylaxis.