Синтез и исследование производных 4-аминоглутаминовой кислоты тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

На правах рукописи

НИЗОВА Ирина Альбертовна

РГВ од

Синтез и исследование производных 4-аминоглутаминовой

кислоты

Специальность 02.00.03 - Органическая химия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Екатеринбург -2000

Работа выполнена в лаборатории химии аминокислот Института органического синтеза Уральского отделения Российской академии наук.

Научный руководитель • старший научный сотрудник,

доктор химических наук КРАСНОВ В.П.

Официальные оппоненты: старший научный сотрудник,

доктор химических наук РУСИНОВ В. Л.; доцент, кандидат химических наук ИКАНИНА Т.В.

Ведущая организация - Институт органической химии Уфимского научного центра РАН

Защита состоится "21" февраля 2000 г. в 15 ч на заседании специализированного ученого совета К 063.14.07 по присуждению ученой степени кандидата химических наук Уральского государственного технического университета, третий учебный корпус, аудитория Х-242.

Ваш отзыв в одном экземпляре, заверенный гербовой печатью, просим направлять по адресу: 620002, г. Екатеринбург, К-2, Уральский государственный технический университет, ученому секретарю совета Института, тел. 44-85-74.

Автореферат разослан "17" января 2000 г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат химических наук, с.н.с.

.Г. Кокшарова

Г-ой^ Л4Л П

Актуальность работы. В последнее время успешно развиваете направление синтеза органических соединений с использование! аминокислот в качестве хиральных синтонов, поэтому разработка новы методов синтеза стереоизомеров модифицированных аминокислот применение таких производных в качестве синтетических блоков, изучени их физиологической активности являются весьма актуальными.

Задача целенаправленного поиска соединений, обладающи физиологической активностью, также является весьма важной. Одним и перспективных путей получения новых физиологически активны соединений (ингибиторов ферментов, антиметаболитов и т.д.) являете модификация природных аминокислот путем введения в их молекул) дополнительных полярных заместителей. При этом, исключительно важно значение имеют как природа заместителя, так и стереохимия образующихс соединений.

В связи с особой ролью, которую играет в метаболизме растений : животных ¿-глутаминовая кислота (ГК) и 1,-пироглутаминовая кислот (ПГК) модификация этих соединений представляется наиболее интересно? От такого рода соединений можно ожидать избирательного транспорта опухолевые клетки и ингибирования биосинтеза нуклеиновых кислот избирательного транспорта ионов металлов. Среди них могут быт найдены антагонисты глутаматных рецепторов, существующих в централь ной нервной системе и причастных к нейрональной регуляции практическ] всех физиологических функций организма. Производные ПГК представ ляют интерес для синтеза на их основе аналогов природных гормон пептидов, обладающих повышенной резистентностью к ферментативно! деградации.

Цель работы - разработка методов синтеза стереоизомеро: производных 4-аминоглутаминовой кислоты, установление пространен венного строения синтезированных соединений, изучение их химическ» свойств и биологической активности.

Настоящая работа выполнена как часть плановых научно-исследовательских работ, проводимых в Институте органического синтеза УрО РАН по теме: "Синтез и исследование производных амино-дикарбоновых и диаминокарбоновых кислот, потенциальных ингибиторов нуклеинового и белкового обмена" (гос. per. № 01.86.0 003491).

Научная новизна. Разработан новый метод получения стереоизомеров 4-аминоглутаминовой кислоты. Впервые синтезирован ряд стереоизомеров производных 4-ариламиноглутаминовой кислоты. Стереоконфигурация полученных соединений установлена на основе данных Я MP спектроскопии и рентгеноструктурного анализа. Показано, что реакция между 4-галогенпроизводными ГК и и-замещенными анилинами протекает диастереоселективно, с образованием избытка трео-изомера продукта. На основании исследования кинетики реакции высказано предположение о ее механизме.

Проведено сравнительное изучение рК диссоциации и кислотно-основных равновесий в водных растворах синтезированных производных ГК, показано, что комплексообразующая способность указанных производных зависит как от характера заместителя, так и от стерео-конфигурации соединений. Установлено, что пирролидоновый цикл 4-фениламинопироглутаминовых кислот устойчив в кислой и нейтральной средах в отличие от ПГК.

Разработаны методы введения защитных групп в производные 4-фениламинопироглутаминовых кислот. Показано, что синтезированные производные могут быть использованы для синтеза на их основе амидов и пептидов.

Практическая значимость. Установлено, что взаимодействие (2S,4S) -Ы-тозил-4-фенилам1Шопироглутаминовой кислоты с (3S) -метил-3,4-дигидро-4Н-1,4-бензоксазином протекает более быстро, чем с Л-энантио-мером, что может быть использовано для разделения энантиомеров упомянутого бензоксазина методами кинетического расщепления.

Установлено, что в результате направленной рацемизации стереоизомеров Ы-фталоилпроизводных 4-ариламиноглутаминовых кислот могут быть получены соответствующие О-производные этих соединений. Среди синтезированных соединений выявлены ингибиторы глутаминсинтетазы; вещества, обладающие умеренной анальгетической и рострегулирующей активностью. Комплексы /и/>го-4-амино-£-глутаминовой кислоты и ГК с ионами Си2+ и Оа3+ обладают выраженной противоопухолевой активностью.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены с опубликованием тезисов на VI Всесоюзном симпозиуме по химии пептидов и белков (Рига, 1983), XIV Всесоюзном совещании по применению рентгеновских лучей и материалов (Кишинев, 1985), па XIV Всесоюзном Чугаевском совещании по химии комплексных соединений (Киев, 1985), на Всесоюзном совещании по органической кристаллохимии (Черноголовка,

1987), па V Всесоюзном симпозиуме по органическому синтезу (Москва,

1988), на Всесоюзном семинаре "Химия физиологически активных соединений" (Черноголовка, 1989), на Всесоюзном совещании "Механизмы реакций нуклеофильного замещения и присоединения" (Донецк, 1991), на IV Международном конгрессе по аминокислотам (Вена, 1995).

По материалам диссертации опубликовано 8 статей.

Объем работы. Диссертация состоит из введения, 5 глав, выводов, изложенных на 136 страницах машинописного текста, включает 6 рисунков и 15 таблиц, список литературы (161 наименование). В главе 1 приведен литературный обзор по методам синтеза и свойствам стереоизомеров производных 4-аминоглутаминовой кислоты.

Глава 2. СИНТЕЗ СТЕРЕОИЗОМЕРОВ ПРОИЗВОДНЫХ 4-АМИНО-ГЛУТАМИНОВОЙ КИСЛОТЫ.

2.1. Синтез стереоизомеров 4-аминоглутаминовой кислоты.

Взаимодействием диметилового эфира (28,411 Б) -Ы-фталоил-4-бромглутаминовой кислоты (1) с фталимидом калия при 20 °С в ДМФА с

последующим хроматографическим разделением и гидролизом были получены индивидуальные стереоизомеры (25,43)- и мезо-4-амино-глутаминовой кислоты (2 и 3).

СН3ООС

V—NPht

W-Br

СН3ООС

KNPht

СН300

NPht

'NPht

CHjOOC

CH3OOC

1. н+, н2о

2. Py

V—NPht

HOO<

HOOG

mpeo (2S.4S) HOOC

V—NH,

V—NPht

V— NH2

HOOC

мезо (2 Б, 4Я)

Проведение реакции при 140 °С сопровождается рацемизацией и приводит к получению изомеров (2ЯЗ,4Я5) -4-аминоглутаминовон кислоты.

2.2. Синтез производных 4-арнламнноглутаминовых кислот.

22.1. Диметиловые эфиры -Д-ариламино-Л'-фталоил-глутами-

новых кислот. Взаимодействием соединения 1 с избытком и-замещенного анилина при нагревании в ацетонитриле или спирте были получены диметиловые эфиры С-М-фталоил-4-ариламиноглутаминовой кислоты (4-13). Разделение диастереомеров осуществляли методами дробной кристаллизации и хроматографии. Установлено, что реакция протекает диастереоселективно, с преимущественным образованием трео-диастереомера. Скорость реакции возрастает с увеличением нуклеофильности амина (табл.1).

МеООС. /СООМе

=н (25,45), трео: Р!=СН30 (4), ОН (5),

СН3 (б), Н (7), МНСОСН3 (8), 1 (9), С1 (10), Вг (11)

СООМе

МРМ

(2Я,4Я), эритро'. Р=СН30 (12), СН3 (13)

Таблица 1

Взаимодействие соединения 1 с ариламинами (Я - заместитель в гг- положении)

Я Ацетонитрил Этанол

Время реакции, ч Выход, % Содержание (25,43)-изомера, % (ВЭЖХ) Время реакции, ч Выход, % Содержание (25,45)-изомера, % (ВЭЖХ)

СНзО 11 63 76 10 60 72

ОН 10 60 - 10 38 -

СНз 8 61 78 10 64 77

Н 11 68 78 10 73 79

ШСОСНз 8 47 75 10 56 78

I 8 41 74 10 44 78

С1 9 47 70 10 53 73

Вг 8 39 74 10 40 75

Вг 20 63 - - - -

Пространственную конфигурацию полученных соединений определяли методами ПМР спектроскопии и рентгеноструктурного анализа. Отнесение конфигураций соединений 4-13 сделано на основании данных ПМР спектроскопии, поскольку разность химсдвигов метиленовых протонов в случае соединений, имеющих мрео-конфигурацию, меньше, чем у соответствующих эритро-изомеров. Эти результаты совпадают с результатами рентгеноструктурного анализа, по данным которого соединения 4 (рис. 1), 7, 8 являются (25,45) -изомерами, а 13 - (28,411)-изомером (рис. 2).

Рис Л. Строение соединения 4.

Рис.2. Строение соединения 13.

2.2.2. Синтез 4-фе1!Нламнно-5-оксопролннов. При кислотном гидролизе соединений 4-11 образуются исключительно циклические (25,45)-4-ариламино-5-оксопролины (цис-4-ариламино-1,-пироглутамино-вые кислоты) 14-20, пирролидоновый цикл которых, в отличие от ПГК, устойчив в кислых и слабощелочных средах.

2.2.3. Исследование кинетики взаимодействия 4-галогенпроизводных глутамнновой кислоты с замещенными анилинами.* С целью выяснения факторов, определяющих диастереоселективность, была изучена кинетика реакции взаимодействия соединения I и диметилового эфира (25,4115) -4-иод-\'-фталоилглутаминовой кислоты (21) с ариламинами, отличающимися положением заместителя и его полярным влиянием. Реакцию проводили в присутствии 12-кратного избытка амина. Для определения состава реакционных смесей использовали метод ВЭЖХ.

При использовании индивидуальных изомеров соединения 1 установлено, что их взаимодействие с ариламинами сопровождается обращением конфигурации. А в результате реакции эпимеризации, катализируемой образующимся бромид-ионом, и протекающей параллельно реакции замещения, в реакционной массе накапливается второй диастереоизомер соединения 1 и продукт его превращения.

Помимо Вальденовского обращения получены дополнительные доказательства согласованного механизма замещения без преионизации:

ЫН ЫРМ 1. Н+, Н20 2. Ру

4-8, 10, 11 Я

цис- (23,45)

п = сн30 (14), ОН (15), сн3(1б), Н (17), ЫН2(18), С1 (19), Вг (20).

* Совместно с к.х.н. Королевой М.А.

положительный солевой эффект при проведении реакции в присутствии 0.5М ЫВг; линейная зависимость скорости от концентрации нуклеофила; ускорение замещения под высоким давлением; близкие значения констант скорости реакции замещения в протонных и апротонных растворителях. Таким образом, процесс замещения можно представить как совокупность взаимозависимых параллельных реакций второго порядка.

Мерой диастереоселективности в такой системе реакций может служить отношение к,}/кз=5.

Электронные эффекты пара-заместителя в нуклеофиле слабо влияют на величину Б, что видно на примере реакций с л-анизидином, я-толуидином и л-хлоранилином (табл. 2). Со снижением +М-эффекта пара-заместителя ариламина уменьшаются кз и к4, тогда как Б практически не изменяется. В ряду о-, м- и л-толуидинов значение Б выше для м-, чем для л-толуиднна, и минимально во всей серии реакций для о-толуидина.

В случае м-толувдина величина Б заметно выше по сравнению с параметром для л-толуидина, вероятно, из-за того, что л<-метил способен сильнее взаимодействовать стерически с Ы-фталоильным кольцом в переходном состоянии.

Таблица 2

Зависимость параметра Б от структуры ариламина

Ацетонитрил Этанол

Суб- Нуклеофил к3х105, к4х105, Б к3х105. к4х105, 8

страт с-1 с-1 с-1 с-1

1 л-анизидин 1,7 7,0 4,1 2,1 10,2 4,9

1 л-хлоранилин — — 0,17 0,88 5,2

21 л-анизидин 2,9 10,1 3,4 2,9 12,7 4,3

21 и-толуидин 0,97 4,11 4,2 1,2 5,3 4,4

21 .м-толуидин 0,69 3,49 5,0 — — —

21 о-толуидин 0,11 0,34 3,1 0,14 0,46 3,2

21 л-хлоранилин 0,11 0,43 4,0 0,24 1,17 4,9

Полученный результат можно объяснить тем, что в переходном состоянии реакции замещения галогена ариламином атомы С2 и С3 лежат примерно в одной плоскости с С*, С5 и у-протоном, минимально препятствуя как атаке нуклеофила, так и уходу галогенид-иона. При этом сложноэфирная группа при С1 максимально удалена от С5, углеродная цепь имеет от/>а//с-т/>а«с-конформацию, а М-фталоильная группа в трео-диастереомере экранирует С4-центр для подхода нуклеофила: из трео- из эритро-

2.2.4.Рацемнзация производных 4-аминоглутаминовой кислоты.

Известно, что соединение 1 под действием оснований рацемизуется по а-углеродному атому.

В результате исследования рацемизации соединения 4 в присутствии фталимида калия в ДМФА было установлено, что образуется смесь диастереоизомеров, после разделения которой методами кристаллизации и

колоночной хроматографии были выделены в чистом виде соединение 4 и диметиловый эфир (2Л,45)-4-(«-метоксифениламино)-Ы-фталоилглуга-миновой кислоты (22).

Следовательно, рацемизация затрагивает исключительно С2-атом.

Таким образом, благодаря регионаправленной рацемизации могут быть получены менее доступные производные £>-глутаминовой кислоты.

Глава 3. СВОЙСТВА 4-АМИНОГЛУТАМИНОВОЙ КИСЛОЫ И ЕЕ ПРОИЗВОДНЫХ. 3.1. Кислотно-основные свойства и гидролитическая устойчивость. Исследование кислотно-основных равновесий 4-аминоглутаминоьой кислоты и ее производных проводили в сравнении с ГК и трео- и эритро-диастереоизомерами (2S.4RS) -4-гидроксиглутаминовой кислоты (23,24).

Методом потенциометрического титрования были определены константы диссоциации соединений 2,3, ГК, 23,24 (табл. 3), 14-20 (табл.4).

рК диссоциации диастереомеров близки между собой. рК диссоциации у-карбокснлыюй группы наиболее сильно зависит от электроотрицательности у-заместителя.

Таблица 3

рК. Диссоциации соединений общей формулы НООС - СН-СН,-СН-СООН

I I

N-b , 25 *С, ц =0,1 (КИОз)

R Конфигурация № соединения рК2 рКз рК4

Н - ГК 4,18 9,64 -

ОН трео- 23 3,31 9,51 -

ОН эритро- 24 3,39 9,54 -

NH2 трео- 2 2,10 7,79 9,79

NH2 эритро- 3 2,09 7,97 9,91

Методом ИК-спектроскопии в D2O' изучена последовательность отщепления протонов и строение ионных форм этих соединений. Изучение проводили, основываясь на значениях частот и интенсивности полос поглощения, обусловленных симметричным и асимметричными колебаниями СОО и валентными колебаниями СООН-групп.

Таблица 4

Свойства соединений 14-20

Соединение Сп рК2 Период полупревращения, ч

(3 Н NaOD)

ПГК - - 0,88

18 -0,660 7,33а 8,50

15 -0,370 7,19ь 20,00е

14 -0,268 7,11 5,50

16 -0,170 7,02 0,75

17 0,00 7,10 1,25

19 0,227 6,93 0,45

20 0,232 6,99 0,18

а рКэ (рК2 4,21) ьрКз 10,12 Сстп(0-) =-0,52

Установлено, что ГК, 23, 24 существуют в растворе в виде цвитгер-ионов, образованных а-карбоксильной и а-аминогруппой. При увеличении рН депротонируется у-карбоксильная, затем а-ИНз4-группа. Соединения 2 и 3 существуют в виде двойного цвиттер-иона, последовательно отщепляющего протоны при увеличении рН раствора.

Для соединений 14-20 константы диссоциации протонированной ариламиногруппы закономерно уменьшаются с увеличением сп-константы Гаммета.

В отличие от ПГК, относительно легко превращающейся в ГК в кислой и щелочной среде, пирролидоновый цикл соединений 14-20 устойчив в кислой и слабощелочной средах. Размыкание лактамного кольца наблюдается лишь при нагревании этих соединений в

" Совместно с к.х.н. Синицыной Т. А.

силыющелочной среде. Попытка выделить свободные основания приводит к их обратной циклизации.

Методом ИК-спектроскопии в 020 изучен процесс размыкания под действием Зн. ЫаСЮ. В табл. 4 приведено время полупревращения в разомкнутую форму. Несмотря на ограниченную точность метода, полученные результаты однозначно свидетельствуют о том, что скорость размыкания растет с увеличением оп константы заместителя, что согласуется с известными сведениями об увеличении скорости щелочного гидролиза амидов при уменьшении электронной плотности на ацильном углеродном атоме.

3.2. Комплексообразующие свойства.

Константы устойчивости комплексов соединений ГК, 23, 24, 2, 3 с ионами Си(Н) определяли методом потенциометрического титрования (со стеклянным и хлор-серебряным электродами) и последующим расчетом по программе БСООБ.

Для установления природы донорных атомов лиганда, включающихся в образование координационной связи, полученные константы устойчивости комплексов сравнивали с таковыми для структурных аналогов этих соединений. Результаты приведены в табл. 5. Из полученных данных следует, что введение 2-й аминогруппы приводит к образованию более прочных комплексов с Си(П). Для всех соединений в условиях титрования наблюдалось образование протонированных комплексов СиНЬ+, в которых ион меди связан с а-амино- и а-карбоксильной группой.

Таблица 5

Логарифмы константы устойчивости комплексов Си(Н) (в скобках приведены стандартные отклонения)

Соединение Тип комплекса

СиНЬ+ СиЬ СиЪг2' Си(НЬ)г Си(Н.]Ь)

2 16,51 (0,08) 11,48(0,03) 16,76 (0,03) 32,41 (0,07) -

3 17,02 (0,02) 11,80(0,04) 17,18(0,08) 32,46 (0,20) -

ГК 12,69 (0,03) 8,47 (0,01) 15,11 (0,05) - -

23 12,10 (0,03) 8,40 (0,01) 14,97 (0,03) - 1,73(0,02)

24 12,12 (0,02) 8,30 (0,01) 14,40 (0,05) - 2,30 (0,02)

Повышенная устойчивость комплексов СиЬ в случае соединений 2 и 3 обусловлена участием в координации 2-х амнно- и 2-х карбоксильных групп. Более устойчивы комплексы с э/жтро-изомером (3), так как в этом случае легче реализуется характерная для комплексов Си2+ квадратно-плоскостная структура.

В комплексах СиЬг2- оба лиганда не могут быть тетрадентатными, тем не менее, значение констант устойчивости для соединений 2 и 3 также выше. По-видимому, в комплексообразовании участвуют две амино- и одна СООН-группы.

При комплексообразовании Си2+ с соединениями 23, 24 образуется также депротонированный комплекс. Значительные различия констант устойчивости таких комплексов для диастереоизомеров могут служить косвенным подтверждением тому, что протон отщепляется от гидрокси-группы и она также участвует в координации.

Методами потенциометического титрования было исследовано комплексообразование соединений ГК, 2, 3,23, 24 с ионами РЗЭ (Ьа3+, У3+) и Оа3+. Наиболее высокие константы устойчивости исследованных соединений имеют комплексы соединений 23, 24. В растворе существует, в основном, депротонированный комплекс:

Ме3+ + Ь2' МеЬН., + Н+

Данные ИК-спектроскопии в ЭгО позволяют предполагать, что отщепление протона происходит от у-гидроксилыюй группы.

Изучение комплексообразования данных соединений показало, что они не обладают высокой комплексообразующей способностью в отношении Са3+. В растворе существуют, в основном, протонированные комплексы, при дальнейшем увеличении рН происходит образование гидролизованных комплексов сложного состава.

Глава 4. СИНТЕЗ АМИДОВ И ПЕПТИДОВ (2S.4S) -4-ФЕНИЛ АМИНО-

5-ОКСОПРОЛИНА

Соединения 14-20 - аналоги ПГК, являющейся фрагментом важных природных и неприродных соединений с биологической активностью, могут представлять интерес для синтеза подобных соединений с целью расширения спектра действия и увеличения их ферментативной и гидролитической устойчивости. Соединение 17 было выбрано в качестве модельного.

4.1. Введение N-защитных групп.

В мягких условиях взаимодействием 17 с тозилхлоридом или ди-(ш/>еш-бутил)-пирокарбонатом получены соединения 25, 26, защищенные по ариламиногруппе. При этом возрастает растворимость в органических растворителях.

R1 25 R1 = Л-СН3С6Н4 (Tos), R2 = ОН;

I

Ph—Nv 26 R1 = (СН3)3СО(СО)- (Вое), R2= ОН;

27 R1 = Вое, R2 = 0С6Н4Ы02-л;

COR2

28 R1 = Вое, R2 = OC6CI5;

о

29 R1 = Вое, R2= o-V

) о

4.2. Получение активированных эфиров.

Карбодиимидным методом были получены нитрофешшовый, пентахлорфениловый и оксисукцинимидный эфиры (27-29), активность которых невелика, по-видимому, из-за стерических препятствий.

4.3. Получение амидов.

Циклогексил- (30), шо-пропил- (31) и шрет-бутиламиды (32), производные соединения 26, получены методом активированных эфиров. Реакция протекала медленно, в течение нескольких суток.

Фениламид (33) получали хлорангкдридиым методом, используя в качестве исходного соединение 25.

Tos Ph-N

SOCL

V

25

O NH

34

Tos

/=\ Ph-N.

COCI

O NH

33

CO-NHPh

При исследовании взаимодействия хлорангидрида 34 со стерически затрудненным амидом, (R.S) -2,3-дигидро-3-метил-4Н-1,4-бензоксазином, являющимся фрагментом алкалоидов и антибиотиков, было установлено, что реакция протекает стереоселективно. Быстрее реагирует (¿7-изомер амина с образованием диастереоизомера 35.

Tos Ph-N.

Н

34

Соотношение 34:амш = 1:1 64 % 35 0.5:1 71% 35

/ÍTA

СО—N О

36

Диастереоизомеры амида (35 и 36) разделяли методом колоночной хроматографии. При последующем кислотном гидролизе 35 получен оптически активный изомер амина.

4.4. Синтез пептидов.

Карбодиимидным методом были получены дипептиды 26 и метилового эфира £,-(Р)-фенилаланина (37), 26 и метилового эфира ¿-триптофана (38), 25 и метилового эфира¿-аланина (39).

Получить карбодиимидным методом дипептид соединения 26 и диметилового эфира ¿-гистидина не удалось, так как в силу сгерической затрудненности, преобладала конкурирующая реакция обазования Ы-ацилмочевины (40). Этот дипептид (41) был получен методом смешанных ангидридов с использованием метилхлорформиата в качестве конденсирующего агента, а также методом активированных эфиров.

Вое

Р11—N

37

С6Н1Т~ М N ~ С6Н

26

40

СО

I

РИ—N 1) СН3ОСОС1, ТЭА

Вое

2) НюОМе

N

СООМе

Глава 5. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СИНТЕЗИРОВАННЫХ

СОЕДИНЕНИЙ.

5.1. Взаимодействие с глутаминсннтетазон хлореллы.

Было изучено взаимодействие производных ПГК с одним из основных ферментов азотистого обмена - глутаминсинтетазой (ГС). Соединения 14, 15 проявили невысокую субстратную активность в отношении ГС хлореллы, не зависящую от природы заместителя в ароматическом кольце. Было установлено, что соединения 14, 15, 16, 20 могут присоединяться к активному центру ГС с образованием фермент-ингибиторных комплексов. Ингибиторная активность зависит от природы заместителя в ароматическом кольце (наиболее высокая у соединения 20).

5.2. Противоопухолевая активность комплексных соединений.

Была изучена противоопухолевая активность растворов комплексных соединений Cu2+, La3+ и Ga3+ с соединениями 2, 3, ГК, 23, 24 m vivo. Было показано, что комплексообразование с этими биолигандами существенно снижает токсичность ионов металлов. Комплексы Cu2+умеренно активны в отношении саркомы-37, комплексы Ga3+ с ГК и 2 высоко активны в отношении рака легкого Льюиса и лейкоза La.

5.3. Другие виды биологической активности.

Соединения 16 и 37 обладает небольшой противоопухолевой активностью в отношении саркомы-37 и АК-755. Соединение 17 в дозах, близких к токсической, активно в отношении вируса осповакцины.

Соединение 14 обладает умеренным дозазависящим анальгетическим эффектом. Соединение 11 проявило рострегулирующую активность (на культуре клеток высших растении и хлореллы).

Широкий спектр действия полученных соединений может служить основанием для поиска в ряду модифицированных аналогов ПГК новых соединений с высокой биологической активностью.

20 Выводы

1. В результате изучения реакции замещения брома в производном 4-бромглутаминовои кислоты азотсодержащими нуклеофнлами разработаны новые методы получения стереоизомеров 4-амино-глутаминовой кислоты и ее производных. Впервые синтезированы стереоизомеры производных 4-ариламиноглутаминовой кислоты. Стереоконфигурация полученных соединений установлена на основе данных .ЯМР-спектроскопии и рентгеносгруктурного анализа.

2. Синтезирован ряд (25,4Б) -4-ариламино-5-оксопролинов. Показано, что пирролидоновый цикл этих соединений устойчив в кислой и нейтральной средах в отличие от пироглутаминовой кислоты.

3. Показано, что реакция между 4-галогенпроизводными глутаминовой кислоты и замещенными анилинами протекает диастерео-селективно, с образованием избытка трео-т омера продукта. На основании исследования кинетики реакции высказано предположение о ее механизме. Полученные данные использованы для регионаправленной рацемизации 4-ариламино-производных глутаминовой кислоты.

4. Проведено сравнительное изучение свойств полученных соединений: определены рК диссоциации и последовательность депротонирования функциональных групп в водных средах, исследована способность некоторых соединений образовывать комплексы с ионами меди и РЗЭ. Показано, чго комплексообразующая способность

4-производных глутаминовой кислоты зависит как от характера заместителя, так и от стереоконфигурации.

5. Путем избирательной защиты аминогруппы в 4-фениламино-

5-оксопролине синтезированы производные, которые могут быть использованы для синтеза амидов и пептидов.

6. Установлено, что взаимодействие (25,48) -М-тоз1щ-4-фениламино-5-оксопролина с (35) -метил-2,3-дигидро-4Н-1,4-бешоксазином протекает более быстро, чем с Я-энантиомером, что может быть использовано для

разделения эиантиомеров этого бензоксазина методами кинетического расщепления.

7. Среди синтезированных соединений выявлены ингибиторы глутаминсинтетазы; вещества, обладающие умеренной анальгетической и рострегулирующей активностью. Комплексы трео-4-амтю-L-глутаминовой кислоты и глутаминовой кислоты с ионами Си2+ и Ga3+ обладают выраженной противоопухолевой активностью.

Основное содержание работы изложено в публикациях:

1. Исследование ионных форм глутаминовой кислоты и ее производных / И.А. Низова, Т.А. Синицына, В.П. Краснов и др.- Журн. общей химии,-1981.- Т.51 ,№11.- С.2592-2596.

2. Комплексообразующие свойства некоторых С4-производных глутаминовой кислоты. И.А. Низова, В.П. Краснов, Л.В. Алексеева и др. //Тез. докл. VI Всесоюзного симпозиума по химии пептидов и белков, Рига, 1983.-С. 302.

3. Исследование кислотно-основных равновесий диастереомеров 2.,5-диаминопентандиовой кислоты в водных растворах / И.А. Низова, Т.А. Синицына, В.П. Краснов и др. П Журн. общей химии.- 1983,- Т.53, в.9,-С.2123-2126.

4. Изучение комплексообразования Cu(II) с диастереомерами 4-аминоглутаминовой кислоты в растворах / И.А. Низова, В.П. Краснов, Л.В. Алексеева и др. //Коорд. химия,-1984,- Т. 10, в.2,- С. 157-160.

5. Стереоконфигурация некоторых С4-производных диметилового эфира М-фталил-Ь-глутаминовой кислоты / В.Х. Кравцов, И.М. Букрина, И.А. Низова, В.П. Краснов // Тез. докл. VII Молодежной конференции по синтетическим и природным физиологически активным соединениям, Ереван, 1984,- С. 117.

6. Рентгеноструктурное исследование 4-ариламино- и тио-производных L-глутаминовой кислоты / В.Х. Кравцов, И.А. Низова, В.П.

Краснов и др. // Тез. докл. XIV Всесоюзного совещания по применению рентгеновских лучей и материалов, Кишинев, 1985. - С. 173-174.

7. Противоопухолевая активность комплексов глутаминовой кислоты и некоторых ее С4-производных с Cu(II) / Г.М. Аношина, И.А. Низова, В.П. Краснов и др. // Тез. докл. XV Всесоюзного Чугаевского совещания по химии комплексных соединений, Киев, 1985. - С.459.

8. Изучение комплексообразования Cu(II) с диастереомерами 4-гидрокси-Ь-глутаминовой кислоты / И.А. Низова, В.П. Краснов, JI.B. Алексеева // Тез. докл. XV Всесоюзного Чугаевского совещания по химии комплексных соединений, Киев, 1985. - С.116.

9. Изучение комплексообразования Cu(II) с диастереомерами 4-гидрокси-Ь-глутаминовой кислоты / И.А. Низова, A.A. Ивакин, В.П. Краснов и др. //Коорд. химия,- 1986,- Т.12, в. 10.- С.1321-1324.

10. Строение некоторых С4-производных диметилового эфира N-фталоилглутаминовой кислоты / В.Х. Кравцов, В.Н. Бшошкин, Т.И. Малиновский, И.М. Букрина, И.А. Низова и др. // Тез. докл. Всесоюзного совещания по органической кристаллохимии, Черноголовка, 1987.- С. 159.

11. Синтез цис-4-ариламино-Ь-пироглутаминовых кислот / И.А. Низова, В.П. Краснов, О.В. Михайлова, JI.B. Алексеева II Тез. докл. V Всесоюзного симпозиума по органическому синтезу, Москва, 1988,- С.105-106.

12. И.А. Низова, В.П. Краснов. Синтез и биологическая активность цис-4-ариламино-пироглутаминовых кислот // Тез. докл. Всесоюзного семинара "Химия физиологически активных соединений", Черноголовка, 1989,- С.178.

13.Т.А. Синицына, И.А. Низова, В.П. Краснов / Исследование стабильности пирролидонового цикла производных пироглутаминовой кислоты И Тез. докл. Всесоюзного семинара "Химия физиологически активных соединений", Черноголовка, 1989.-С.214.

14. Синтез диастереомеров диметиловых эфиров 4-ариламино-

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. 4-Аминопроизводные глутаминовой кислоты: синтез, свойства, использование (краткие литературные сведения).

ГЛАВА 2. Синтез стереоизомеров производных 4-амино-глутаминовой кислоты.

2.1. Синтез стереоизомеров 4-аминоглутаминовой кислоты.

2.2. Синтез производных 4-ариламиноглутаминовых кислот.

2.2.1. Диметиловые эфиры (25,4Я5)-4-ариламино-1Ч-фталоил-глутаминовых кислот.

2.2.2. Синтез 4-ариламино-5-оксопролинов.

2.2.3. Исследование кинетики взаимодействия 4-галогенпроизводных глутаминовой кислоты с замещенными анилинами.

2.2.4. Рацемизация производных 4-аминоглутаминовой кислоты.

Экспериментальная часть к главе 2.

ГЛАВА 3. Свойства 4-аминоглутаминовой кислоты и ее производных

3.1. Кислотно-основные свойства и гидролитическая устойчивость.

3.2. Комплексообразующие свойства.

3.2.1. Комплексообразование с ионами двухвалентной меди.

3.2.2. Комплексообразование с ионами редкоземельных элементов и галлия.

Экспериментальная часть к главе 3.

ГЛАВА 4. Синтез амидов и пептидов (25,45')-4-фениламино-5-оксо-пролина.

4.1. Введение N-защитных групп.

4.2. Получение активированных эфиров.

4.3. Получение амидов.

4.4. Синтез пептидов.

Экспериментальная часть к главе 4.

ГЛАВА 5. Биологическая активность синтезированных соединений

5.1. Взаимодействие с глутаминсинтетазой хлореллы.

5.2. Противоопухолевая активность комплексных соединений.

5.3. Другие виды биологической активности.

ВЫВОДЫ.

В последнее время интенсивно развивается химия непротеиногенных аминокислот, которые служат моделями исследования строения и функций природных белков и механизма действия ферментов.

Неприродные аминокислоты могут проявлять свойства ингибиторов ферментативных процессов, а также, являясь антиметаболитами, внедряться в биологически важные структуры, модифицировать их активность и придавать им устойчивость к действию протеаз [1, 2].

Для проявления биологической активности стереохимия полученных соединений имеет исключительно важное значение. Поэтому разработка новых методов синтеза стереоизомеров модифицированных аминокислот с использованием природных аминокислот в качестве хиральных синтонов является весьма актуальной [3]. В связи с особой ролью, которую играет в метаболизме растений и животных Ь-глутаминовая кислота (ГК) и Ь-пиро-глутаминовая кислота (5-оксопролин, ПГК) [4], модификация этих соединений путем введения в молекулы дополнительных полярных заместителей является наиболее интересной

От такого рода соединений можно ожидать избирательного транспорта в опухолевые клетки и ингибирования синтеза нуклеиновых кислот. Среди них могут быть найдены антагонисты глутаматных рецепторов, существующих в центральной нервной системе (ЦНС) и причастных к процессам памяти, возникновения эпилепсии и болезни Альцгеймера [5,6]. Стереоизомеры модифицированной ГК и ПГК также могут быть использованы как синтетические блоки для получения препаратов, близких по своей структуре к естественным метаболитам организма, в частности, гормон-пептидам, нейро-пептидам и их фрагментам, участвующим в регулировании важнейших физиологических процессов и проявляющих ноотропную активность [7].

Следует отметить также, что синтез стереоспецифически замещенных производных ГК и ПГК обеспечивает доступ к производным других 6 аминокислот, например, пролина [1,8]

Целью данной работы являлась разработка методов синтеза стереоизомеров производных 4-аминоглутаминовой кислоты, установление пространственного строения синтезированных соединений, изучение их химических свойств и биологической активности.

Настоящая работа выполнена как часть плановых научно-исследовательских работ, проводимых в Институте органического синтеза УрО РАН по теме: "Синтез и исследование производных амино-дикарбоновых и диаминокарбоновых кислот, потенциальных ингибиторов нуклеинового и белкового обмена" (гос. per. № 01.86.0 003491).

Научная новизна. Разработан новый метод получения стереоизомеров 4-аминоглутаминовой кислоты. Впервые синтезирован ряд стереоизомеров производных 4-ариламиноглутаминовой кислоты. Стерео-конфигурация полученных соединений установлена на основе данных ЯМР спектроскопии и рентгеноструктурного анализа. Показано, что реакция между 4-галогенпроизводными ГК и «-замещенными анилинами протекает диастереоселективно, с образованием избытка трео-изомера продукта. На основании исследования кинетики реакции высказано предположение о ее механизме.

Проведено сравнительное изучение рК диссоциации и кислотно-основных равновесий в водных растворах синтезированных производных ГК, показано, что комплексообразующая способность указанных производных зависит как от характера заместителя, так и от стерео-конфигурации соединений. Установлено, что пирролидоновый цикл 4-фениламинопироглутаминовых кислот устойчив в кислой и нейтральной средах в отличие от ПГК. Разработаны методы введения защитных групп в производные 4-фениламинопироглутаминовых кислот. Показано, что синтезированные производные могут быть использованы для синтеза на их основе амидов и пептидов. 8

выводы

1. В результате изучения реакции замещения брома в производном

4-бромглутаминовой кислоты азотсодержащими нуклеофилами разработаны новые методы получения стереоизомеров 4-аминоглута-миновой кислоты и ее производных. Впервые синтезированы стерео-изомеры производных 4-ариламиноглутаминовой кислоты. Стерео-конфигурация полученных соединений установлена на основании данных ЯМР - спектроскопии и рентгеноструктурного анализа.

2. Синтезирован ряд (28,4Б) -4-фениламино-5-оксопролинов. Показано, что пирролидоновый цикл этих соединений устойчив в кислой и нейтральной средах в отличие от пироглутаминовой кислоты.

3. Показано, что реакция между 4-галогенпроизводными глута-миновой кислоты и замещенными анилинами протекает диастерео-селективно, с образованием избытка трео-изомера продукта. На основании исследования кинетики реакции высказано предположение о ее механизме. Полученные данные использованы для регионаправленой рацемизации ариламинопроизводных глутаминовой кислоты.

4. Проведено сравнительное изучение свойств полученных соединений: определены рК диссоциации и последовательность депротони-рования функциональных групп в водных средах, исследована способность некоторых соединений образовывать комплексы с ионами меди и РЗЭ. Показано, что комплексообразующая способность 4-производных глутаминовой кислоты зависит как от характера заместителя, так и от стерео-конфигурации.

5. Путем избирательной защиты аминогруппы в 4-фениламинопиро-глутаминовых кислотах синтезированы производные, которые могут быть использованы для синтеза амидов и пептидов.

6. Установлено, что взаимодействие (<25'^5,у)-М-тозил-4-фениламино

5-оксопролина с (35У-метил-2,3-дигидро-4Н-1,4-бензоксазином протекает более быстро, чем с Л-энантиомером, что может быть использовано для

104

разделения энантиомеров этого бензоксазина методами кинетического расщепления.

7. Среди синтезированных соединений выявлены ингибиторы глутаминсинтетазы; вещества, обладающие умеренной анальгетической и рострегулирующей активностью. Комплексы т/?ео-4-амино-Ь-глутами-новой кислоты и глутаминовой кислоты с ионами Си2+ и Оа3+ обладают выраженной противоопухолевой активностью.

105

1. Moody С.М., Young D.W. Stereospesific synthesis of 4-alkylglutamates and 4-alkylprolines 1.I Tetrahedron Lett.- 1994. - Y.35, N 39. - P.7277-7280.

2. Synthesis of non-proteinogenic amino acids with three chiral centres / Bowler A.N., Doyle P.M., Hitchcock P.B. // Tetrahedron Lett. 1991. - Y.32, N 23. -P.2679-2682.

3. Coppola G.M., Schuster H.F. Asymmetric synthesis. Construction of chiral molecules using amino acids. New York, Chichester, Brisbane, Toronto, Singapore: A Wiley-Intersciense publication, 1987. - 393 p.

4. Аминокислоты, их производные и регуляция метаболизма / Кричевская А.А., Лукаш А.И., Шугалей B.C. и др. // Изд-во Ростовского ун-та, 1983. -112 с.

5. Дамбинова С.А. Нейрорецепторы глутамата. Л: Наука, 1989. - 144 с.

6. Synthesis of potential agonists and antagonists for central glutamate receptors by a novel "ring switching" process / Bowler A.N., Dinsmore A., Doyle P.M. et al // J.Chem. Soc. Chem.Comm. 1991. - № 5. - P.314-316.

7. Клуша B.E. Пептиды регуляторы функций мозга. - Рига: Зинатне, 1984 - 181 с.

8. Koskinen A.M.P., Rapoport Н. Synthesis of 4-substituted prolines as conformationally constrained amino acid analogues // J. Org. Chem. 1989. -V.54, № 8. - P.1859-1866.

9. Antagonism of exitatory amino acid induced responses and of synaptic exitation in the isolated spinal cord of the frog / Evans R.H., Fransis A.A., Hunt K. et al // Br. J. Pharm. - 1979. - Y.64, № 4. - P.591-603.

10. Алексеева Л.В., Бурде Н.Л., Фирсова Н.А. С-производные глутами-новой кислоты. Синтез, биологические и биохимические свойства. ч.2.1061. Свердловск, 1981. 230 с.

11. Webb T.R., Eigenbrot С. Conformationally restricted arginine analogues // J. Org. Chem. 1991. -V.56, № 9. - P.3009-3016.

12. Schankar R., Scott A.I. Chiral lactams as templates for enzyme inhibitors: a simplified route to the expanded pool // Heterocycles. 1996. - V. 46, № 1. -P.145-148.

13. Design of a natural cis peptide bond motif to form type VI /З-turn mimetic / Paul P.K.C., Burney P.A., Campbell M.M. et al // Bioorg. and Med. Chem. Lett. 1992. - V. 2, № 2. - P.141-144.

14. Goda S.K., Akhtar M. Neomycin biosynthesis the incorporation of D-6-deoxyglucose derivatives and variously labelled glucose into the 2-deoxy-streptamine ring // J. Antibiotics. 1992. - Y.45, № 6. - P.984-994.

15. Degradation of streptomycin and streptamin / Carter H.E., Clark R.K., Dickman J.S.R. et al // Science. 1946. - Y.103, № 2675. - P.540.

16. Carter H.E., Van Abeele F.R., Rothrock J.W. A general method for the synthesis of a,y-diamino acids // J. Biol. Chem. 1949. - V. 178, № 1. - P.325-334.

17. Oxidative transformation of coded aromatic amino acids with 4-t-butyl-iodylbenzene / Ranganathan S., Ranganathan D., Singh S. et al // J. Chem. Soc. Chem. Comm. 1987. - № 24. - P.1887-1888.

18. Noma M., Noguchi M., Tamaki E. A new amino acid, Nicotianamine, from tabacco leaves // Tetrahedron Lett. 1971. - № 22. - P.2017-2020.

19. A structure reactivity study of the binding of acetylglutamate to carbamoyl phosphate syntetase I / Britton H.E., Garcia-Espana, Goya P. et al // Eur. J. Biochem. - 1990. - V. 188, № 1. - P.47-53.

20. Ингибирование активности глутаминсинтетазы хлореллы и мозга свиньи биологически активными производными глутаминовой кислоты / Фирсова Н.А., Селиванова К.М., Алексеева JI.B. и др. // Биохимия. -1986. Т.51, № 5. - С.850-855.

21. Plante L.T., Crawford E.J., Friedkin M. Enzyme studies with new analogues107of folic acid and homofolic acid // J. Biol. Chem. 1967. - V.242, № 7. -P. 1466-1476.

22. Fluorine-containing amino acids and their derivatives. 7. Synthesis and antitumor activity of a- and y-substitutied methotrexate analogs / Tsushima Т., Kawada K., Ishihara S. et al // Tetrahedron. 1988. - V. 44, № 17. -P.5375-5387.

23. Пат. 6,281,385 Япония. МКИ С 07 D 475/08. Tsushima Т., Kawada К. Preparation of methotrexate derivatives as antitumor agents. Заявл. 02.10.85.-Опубл. 14.04.87.

24. Синтез и радиопротекторные свойства сарколизин-содержащих пептидов / Ватулина Г.Г., Толстых Е.И., Широкова А.Г. и др. // Хим.-фарм. журн. 1997. - Т.31, № 6. - С.30-32.

25. Пат. 94 26,294 РСТ. МКИ А 61 К 37/ 02. Dunn Т.J., Srinivasan A. Ligand precursors for incorporation into peptides. Заявл. 14.05.93. - Опубл. 24.10.94.

26. Пат. 3,024,369 ФРГ. МКИ С 07 С 103/52. Bouchaudon J., Farge D., James С. Tripeptides, their nontoxic salts and pharmaceuticals containing them. -Заявл. 10.06.79.-Опубл. 15.01.81.

27. Попова B.A., Алексеева Л.В., Ивакин А.А. Синтез и комплексообразующие свойства 4-иминодиацетат-ВЬ-глутаминовой кислоты // Труды Института химии УНЦ АН СССР. Свердловск, 1976. -В.30. - С.100-104.

28. Mulzer J. New aspects in stereoselective synthesis of amino-alkohols and aminoacids / in Stereoselective synthesis, ed. Schölkopf О., Schulz E. Berlin Springer, 1993. - P.37-61.

29. Synthese einer neuen nicht natürlichen Aminosäure mit einem Benzodiazepinrest in der Seitenkette und Einbau in ein Tripeptid / Mulzer J., Schröder F., Lobbia A. et al // Angew. Chem. 1994. - B.107, № 17. - S.1813-1815.

30. Пат. 4 428 960 США. МКИ 424-274, С 07 D 205/12. Heck J.Y. 3-Amino-6-substituted thio-l-azabicyclo3,2,0.=hept-6-en-2-one-7-carboxylic acids. -Заявл. 19. 04. 82. Опубл. 31. 01. 84.

31. Hellman H., Lingens F., Folz E. Synthesen der a,a'-Diaminoglutarsaüre // Chem.Ber. 1956. - B. 89, № 10. - S.2433-2439.

32. Eberson L. On the reaction between substituted malonic esters and methylene bromide I // Acta Chem. Scand. 1958. - Y. 12. - P.314-323.

33. Смирнова A.A., Перекалин B.B., Щербаков B.A. Синтез у-аминокислот и а-пирролидонов //Журн. орг. хим. 1968. - Т.4, № 12. - С.2245-2255.

34. Алексеева JI.B., Бурде H.J1., Билим Г.В. Синтез и исследование соединений с потенциальной биологической активностью. Y. Диалкиламинопроизводные глутаминовой кислоты // Журн. орг. хим. -1971. Т.7, № 4. - С.645-647.

35. Бурде H.JL, Алексеева JI.B. Синтез и исследование соединений с потенциальной биологической активностью. VIII. Особенности гс-нитробензоилирования у-замещенных глутаминовых кислот // Журн. орг. хим. 1972. - Т. 8, № 8. - С.1587-1591.

36. Аношина Г.М. Предварительные данные о противоопухолевой активности некоторых производных глутаминовой и фолиевой кислот //109

37. Химиотерапия опухолей в СССР. 1973. - В. 18. - С.46-47.

38. Алексеева JI.B., Бурде Н.Л., Пушкарева З.В. Синтез и исследование соединений с потенциальной биологической активностью. VI. 4-Ди-(2-хлорэтил)-амино-ОЬ-глутаминовой кислоты // Журн. орг. хим. 1971. - Т.7, № 4. - С.647-651.

39. Изыскание радиопротекторов в ряду производных глутаминовой кислоты / Ватулина Г.Г., Тужилкова Т.Н., Матвеева Т.В. и др. // Хим.-фарм. журн. 1986. - Т.20. - С. 1078-1083.

40. Синтез и некоторые свойства производных 4-ферроцениламино-глутаминовой кислоты / Краснов В.П., Шашмурина А.А,, Алексеева Л.В. и др. //Хим.-фарм. журн. -1980. Т. 14, № 10. - С.45-48.

41. Kumar S., Ramakrishnan V.T., Bayer J.H. N-Nitroso and N-nitro derivatives of diazacycioalkanes and tetraazadicycloalkanes from N,N'-diaminodicarboxylate esters // Heterocycles. 1989. - V.29, № 10. - P. 19972006.

42. Stereospesific amino acid synthesis; preparation of the y-anion derived from glutamic acid / Baldwin J.E., North M., Flinn A. et al // J. Chem. Soc. Chem.Comm. 1988. - № 12. - P.828-829.

43. Asymmetric synthesis of y-substituted glutamic acid derivatives via a glutamic acid y-enolate synthon / Del Bosco M., Johnstone A.N.C., Bazza G. et al // Tetrahedron. 1995. - V. 51, № 31. - P.8545-8554 и ссылки там.

44. Baldwin J.E., Miranda Т., Moloney M. Amino acid synthesis using (L)-pyroglutamic acid as a chiral starting material // Tetrahedron. 1989. -Y.45, №23. - P.7459-7468.

45. Tomihisa O., Akio H., Shigeo N. Steroselective hydroxylation of N110carbamoyl-L-pyroglutamate. Synthesis of (-)-bulgecinine // Tetrahedron Lett. 1988. - V.29, № 3. - P.329-332.

46. Moody C.M., Young D.W. Stereospecific synthesis of naturally occuring 4-alkylideneglutamic acids, 4-alkylglutamates and 4-alkylprolines // J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1. 1997. - № 23. - P.3519-3530.

47. Synthesis of w^o-2,4-diaminoglutaric acid / Avenoza A., Cativiela C., Peregrina J.M. et al // Tetrahedron Asym. 1996. -V.7, № 8. - P. 1555-1558.

48. Asymmetric synthesis of meso- and (2R, 4i?)-2,4-diaminoglutaric acids / Avenoza A., Cativiela C., Peregrina J.M. et al // Tetrahedron: Asym. 1997. -У.8, № 6. - P.863-871.

49. Funaki I., Thijs L., Zwanenburg B. Synthesis of 3-amino-pyrrolidin-2-ones by an intramolecular reaction of azeridine-carboxamides // Tetrahedron. -1996. V. 52, № 29. - P.9909-9924.

50. Javidan A., Schafer K., Pyne S.G. Diastereoselective Michael reactions of azomethine ylides to chiral 4-methyleneoxazolidin-5-ones: synthesis of the four stereoisomeres of 4-benzamidopyroglutamate// Syn. Lett. 1997. - № 1. -P.100-102.

51. Stereospecific synthesis of m^vo-diaminodicarboxylic acids / Arakawa Y., Goto Т., Kawase K. et al // Chem. Pharm. Bull. 1995. - V. 43, № 3. - P.535-536.

52. Асимметрический синтез (25',^5)-2,4-диаминоглутаровой и {2S,3S)-2,3-диметилянтарной кислот с использованием хиральных комплексов Ni (II) / Белоконь Ю.Н., Черноглазова Н.И., Бацанов А.С. и др. // Изв. АН СССР. Сер.хим. 1987. - № 4. - С.852-857.

53. Synthesis and bioactivity of a new class of rigid glutamate analogues. Modulators of the N-methyl-D-aspartate receptor / Kozikowsky A.P.,1.l

54. Tückmantel W., Reynolds I J. et al // J. Med. Chem. 1990. -Y.33, № 6. -P.1561-1571.

55. Синтез 3-гидроксо-2,4-диаминопентандиовой кислоты и исследование ее комплексообразующих свойств / Алексеева Л.В., Бурде Н.Л., Подгорная И.В. и др. // Журн. общ. хим. 1977. - Т.47, № 3. - С.695-699.

56. A synthesis of methoxatin / Büchi G., Botkin J.H., Lee G.C.M. et al // J.Am.Chem.Soc. 1985. - V.107. - P.5555-5556.

57. A reexamination of reaction between pyruvic acid and anyline / Tapia I., Alcazar V., Grande M. et al // Tetrahedron. 1988. - V. 44, № 16. - P.5113-5116.

58. Synthesis and properties of 4-haloglutamates / Krasnov V.P., Bukrina I.M., Korolyova M.A. et al // Synthesis. 1994. - № 12. - P.961-964.

59. Синтез г^с-4-ариламино-Е-пироглутаминовых кислот / Низова И.А., Краснов В.П., Михайлова О.В. и др. // Тез. докл. V Всесоюзного симпозиума по орг. синтезу. Москва. - 1988. - С. 105-106.

60. Синтез диастереомеров диметиловых эфиров 4-ариламино-Ы-фталил-L-глутаминовых кислот / Низова И.А., Коротовских О.В., Алексеева Л.В. и др. // Изв. АН СССР. Сер.хим. 1989. - № 12. - С.2781-2785

61. Синтез и строение некоторых производных с-1-фталимидоциклопропан-дикарбоновой-г-1,1-2-кислоты / Кравцов В.Х., Биюшкин В.Н., Краснов В.П. и др. //Докл. АН СССР. 1990. - Т.311, №3. - С.622-625.112

62. Рентгеноструктурное исследование 4-ариламино- и тио-производных Ь-глутаминовой кислоты / Кравцов В.Х., Низова И.А., Краснов В.П. и др. // Тез. докл. XIV Всесоюзного совещания по применению рентгеновских лучей и материалов. Кишинев. - 1985. - С.173-174.

63. Строение некоторых С4-производных диметилового эфира Ы-фталоил-глутаминовой кислоты / Кравцов В.Х., Биюшкин В.Н„ Малиновский Т.И. и др. // Тез. докл. Всесоюзного совещания по органической кристаллохимии. -Черноголовка. 1987. - С. 159.

64. Кристаллическая и молекулярная структура диметилового эфира 4-(«-метоксифениламино)-Ы-фталил-Ь-глутаминовой кислоты / Кравцов В.Х., Биюшкин В.Н., Малиновский Т.И. и др. / Докл. АН СССР. 1989. -Т.309, № 5. - С.1121-1125.

65. Низова И.А., Краснов И.П. Синтез и биологическая активность цис-4-арш1-аминопироглутаминовых кислот // Тез. докл. Всесоюзного семинара "Химия физиологически активных соединений". Черноголовка. -1989. - С. 178.

66. Синицына Т.А., Низова И.А., Краснов В.П. Исследование стабильности пирролидонового цикла производных пироглутаминовой кислоты // Тез. докл. Всесоюзного семинара "Химия физиологически активных113соединений". Черноголовка. - 1989. - С.214.

67. Синтез и исследование (28,48)-4-ариламино-2-карбокси-5-пирролидонов / Низова И.А., Краснов В.П., Синицына Т.А. и др. // Изв. АН СССР. Сер. хим. 1993. - № 12. - С.2087-2090.

68. Ингольд К. Теоретические основы органической химии. / пер. с англ. под ред. Бужина К.П., Белецкой И.П. М: Мир, 1973. - С. 453.

69. Краснов В.П., Королева М.А. Нуклеофильное замещение галогена в 4-галогенпроизводных глутаминовой кислоты. Сообщение 1. Влияние растворителя // Изв. АН. Сер. хим. 1995. - № 4. - С.652-655.

70. Краснов В.П„ Королева М.А., Русинов Г.Л. Нуклеофильное замещение галогена в 4-галогенпроизводных глутаминовой кислоты. Сообщение 3. Влияние высокого давления на стереохимический результат реакции // Изв. АН. Сер. хим. 1996. - № 3. - С.583-585.

71. Isaacs N.S. Physical organic chemistry. Belfast: Longman Scient. and Tech. -1987.-P.315.

72. Gutmann V. Solvent effects on the reactivities of organometallic compounds // Coord. Chem. Rev. 1976. - V. 18, № 2. - P.225-255.

73. Нуклеофильное замещение галогена в 4-галогенпроизводных глутаминовой кислоты. Сообщение 2. Влияние структуры нуклеофила-ариламина / Краснов

74. B.П., Королева М.А., Низова И.А. и др. // Изв. АН. Сер. хим. 1995. - № 4.1. C.656-659.

75. Substitution reaction of 4-haloglutamates with arylamines // Krasnov V.P., Korolyova M.A., Nizova I.A. et al // Amino acids. 1995. - V.7. - P.71

76. Кодесс М.И., Королева M.A., Краснов В.П. Конформационная подвижность 4-галогенпроизводных диметилового эфира N-фталоилглутаминовой кислоты // Тез. докл. V Всероссийского семинара по спектроскопии ЯМР. -Москва. 1997. -С.85.

77. Capon В. Neighboring group participation // Quart.Reviews. 1964. - V. 18, № 1.1141. Р.45-111.

78. Королева M. А. Исследование реакций нуклеофильного замещения галогена в стереоизомерах 4-галогенпроизводных глутаминовой кислоты // Канд. диссерт. Екатеринбург, 1996. - 163 с.

79. Потапов В.М. Стереохимия. М: Химия, 1988. - С.70.

80. Королева М.А., Краснов В.П., Жданова Е.А. Исследование реакции 4-бромпроизводного глутаминовой кислоты с сильными основаниями // Тез. докл. Симпозиума по орг. химии. С.-Петербург. - 1995. - С.51.

81. Racemization of 4-arylamino-2-phthalimidoglutarates / Krasnov V.P., Korolyova M.A., Nizova I.A. et al // Amino acids. 1995. - Y.7. - P.71-72.

82. Лабораторные работы по органической химии / под ред.Гинзбурга О.Ф., Петрова A.A. М: Высшая школа, 1974. - С.249.

83. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты / пер. с англ. под ред. Опарина А.И. М: Мир, 1966. - 816С.

84. Альберт А. Избирательная токсичность / под ред. Филонова В.А. М: Медицина, 1989. - Т.2. - С.74-99.

85. Альберт А. Сержент Е. Константы ионизации кислот и оснований / пер. с англ. под ред. Порай-Кошица Б.А. М: Химия, 1964. - 179С.

86. Sayce I.G. Computer calculation of equilibrium constants of species present in mixtures of metal ions and complexing agents // Talanta. 1968. - V. 15. -P.1397-1411.

87. Исследование ионных форм глутаминовой кислоты и ее производных/ Низова И.А., Синицына Т.А., Краснов В.П. и др. // Журн. общ. хим. -1981. Т. 51, № 11. - С.2592-2596.

88. Исследование кислотно-основных равновесий диастереомеров 2,5-диаминопентандиовой кислоты в водных растворах / Низова И.А., Синицына Т.А., Краснов В.П. и др. // Журн. общ. хим. 1983. - Т.59, №9. - С.2123-2126.115

89. Беллами JI. Инфракрасные спектры сложных молекул / пер. с англ. под ред. Шигорина Д.Н. М: ИЛ, 1963. - 444 с.

90. Nakanishi К. Infrared absorption spectroscopy. San Francisco: Holden-Day etc. -1972. -P.196-197.

91. Гордон А., Форд P. Спутник химика. / пер. с англ. Розенберга Е.Л., Коппель С.И. М: Мир, 1976. - С.171-174.

92. Evans С.A., Guevremont R. Metal complexes of aspartic acid and glutamic acid. In Metal ions in biological systems / ed. Sigel H. New York: M.Dekker, 1979. -V. 9. - P.41-76.

93. Верхова O.A., Сорока В.P. Биологическая роль лантанидов // Успехи совр. биол. 1980. - Т. 90, № 3(6). - С.363-391.

94. Cleare M.J., Hydes Р.С. Antitumor properties of metal complexes. In Metal ions in biological system / ed. Sigel H. New York: M.Dekker, 1980. - V.ll. - P.l-62.

95. О комплексных соединениях меди (II) с некоторыми органическими лигандами / Останкевич Н.А., Дьяченко Е.К., Любомирова К.Н. и др. // Хим,-фарм. журн. 1978. - Т. 12, № 1. -С.82-85.

96. Противоопухолевые свойства смешанных координационных соединений меди (II) с аминокислотами / Трещалина Е.М., Коновалова А.Л., Преснов М.А. и др. // Докл. АН СССР. 1979. - Т.248. - С.1273-1276.

97. Биологические аспекты координационной химии / под ред. Яцимирского К.Б. Киев: Наукова думка, 1979. - С. 199-233

98. Ritsma J.H. Stereoselectivity and proton binding in copper (II) complexes of aspartic acid, glutamic acid and some N-methyl and N-benzylhistidine derivatives // Rec. trav. chim. 1975. - V. 94, № 9-10. - P.210-215.

99. Nagypal J., Gergely A., Farkas E. Thermodynamic study of the parent and mixed complexes of aspartic acid, glutamic acid and glycine with Си (II) // J. Inorg. Nucl. Chem. 1974. - V.36. - P.699-706.116

100. Комплексообразующие свойства некоторых С4-производных глутами-новой кислоты / Низова И.А., Краснов В.П., Алексеева J1.B. и др. // Тез. докл. VI Всесоюзного симпозиума по химии пептидов и белков. Рига. - 1983. -С.302.

101. Изучение комплексообразования Cu(II) с диастереомерами 4-амино-глутаминовой кислоты в растворах / Низова И.А., Краснов В.П., Алексеева Л.В. и др. // Коорд. хим. 1984. - Т. 10, № 2. - С.157-160.

102. Низова И.А., Краснов В.П., Алексеева Л.В. Изучение комплексообразования Cu(II) с диастереомерами 4-гидрокси-Ь-глутаминовой кислоты // Тез. докл. XV Всесоюзного Чугаевского совещания по химии комплексных соединений. Киев. - 1985. -С. 116.

103. Изучение комплексообразования Cu(II) с диастереомерами 4-гидрокси-L-глутаминовой кислоты / Низова И.А., Краснов В.П., Ивакин А.А. и др. // Коорд. хим. 1989. - Т. 12, № 10. - С.1321-1324.

104. Hay R.W., Morris P.J., Perrin D.D. Copper (II) complexes of 2,3-diamino-propionic acid // Aust. J. Chem. 1984. - V. 21, № 4. - P. 1073-1076.

105. Equilibrium constants of D,L-2-amino-4-hydroxybutyric acid and its chelates with divalent metals / Braibanti A., Dallavalle F., Leporati E. et al // Inorg. Chem. Acta. -1971. V.5, № 3. - P.449-452.

106. Яцимирский К. Б., Крисс Е.Е., Гвяздовская В.Л. Константы устойчивости комплексов металчов с биолигандами. Киев: Наукова думка,1979. - 236 с.

107. Gergely A., Mojzes J., Kassai-Barza Z.S. Stability constants and formation enthalpy and entropy changes of complexes of serine, threonine and alpha-amino butyric acid // J. Inorg. Nucl. Chem. 1972. - V. 34, № 4. - P.277-290.

108. Kruck T.P.A., Sarkar B. Ternary coordination complexes between copper (II) and amino acids, and an appraisal of the enhancement of ternary complex stability //Canad. J. Chem. 1973. -V. 51, № 21. - P.3555-3562.

109. Ramanujam V.V., Rengaraj K., Sivasankar B. Polarographic behaviour of117tridentate hydroxyamino acid complexes of copper (II): complexes of DL-serine, DL-threonine and DL-?-amino-?-hydroxybutyric acid // Ind. J. Chem. -1980. V. 19A, № 3. - P.240-243.

110. Nagypal I., Farkas E., Gergely A. NMR study of the kinetics of the proton-exchange reactions in aqueous solutions of copper(II)-amino acid parent complexes // J. Inorg. Nucl. Chem. 1975. - Y 37, № 10. - P.2145-2149.

111. Исследование реакций обмена лигандов в растворах комплексов меди (II) с серином / Попель A.JL, Захаров А.В., Евгеньева И.И. и др. // Журн. неорг. хим. 1978. - V. 23, № 9. - С.2447-2451.

112. Пятницкий И.В. Комплексные соединения металлов с оксикислотами // Успехи хим. 1963. - Т. 32, № 1. - С. 93-119.

113. Рогозина Э.М., Попов Д.К., Поникарова Т.М. Изучение взаимодействия радиоизотопов РЗЭ с белками и аминокислотами // Журн. общ. хим. 1970. - Т. 40, № 11. - С.2466-2469.

114. Батяев JI.M., Ларионов С.В. Об устойчивости комплексных соединений лантана, церия, празеодима и неодима с глутаминовой кислотой // Изв. СО АН СССР. 1962. - Т.2. - С.113-117.

115. Костромина Н.А. Комплексонаты РЗЭ. М: Наука, 1980. - 254 с.

116. Накамото Н. Инфракрасные спектры неорганических и координационных соединений. М: Мир, 1966. - 250 с.

117. Химия комплексных соединений РЗЭ / Яцимирский К.Б., Костромина Н.А., Шека З.А. и др. Киев: Наукова думка, 1966. - С.248-269.

118. Буданова J1.M., Володарская Р.С., Канаев Н.А. Анализ алюминиевых и магниевых сплавов. М: Металлургия, 1966. - С.304.

119. Руководство по препаративной неорганической химии/ ред.Брауэр Г. пер. с нем. Беркенгейма Б.М. М: ИЛ, 1956. - 892 с.

120. Крешков А.П. Основы аналитической химии. М: Химия, 1970.- Т. 2. - С.216.118

121. Воронина Т.А., Середенина С.Б. Ноотропные препараты, достижения и новые проблемы // Эксп. и клинич. фарм. 1998. - Т.61, №4,- С.3-9.

122. Влияние облигатной замены и конформационных ограничений на психотропную активность аналогов тиролиберина / Мазуров А.А., Коротенко Т.И., Горбапок В.Я. и др. // Изв. АН СССР. Сер. хим. 1998. - № 10. -С.2015-2019.

123. Бойко С.С., Вицкова Г.Ю., Жердев В.П. Фармакокинетика ноотропных лекарственных средств // Эксп. и клинич. фарм. 1997. - Т.60, № 6. - С.62-70.

124. Corbin A. From contraception to cancer: a review of the therapeutic applications of LHRH analogues as antitumor agents // Yale J. Biol, and Med. 1982. - V. 55, № 1. -P.27-47.

125. Chemistry and molecular biology in the search for new LHRH antagonist / Kutscher В., Bernd M., Beckers T. et al // Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1997. -V. 36., № 20. - C.2149-2161.

126. Rigo В., Kolokouris A., Kolokouris N. Studies on pyrrolidinones. Synthesis of some N-fatty acylpyroglutamic acids // J. Heterocycl. Chem. 1995. - V. 32, № 5. -C.1489-1492.

127. Structure-activity relationship of memory enhancing peptide ZNC(C)PR analogs / Wang P.-L., Du Y.-C., Lai L.-H. et al // Acta Pharm. Sin. 1994. - V.15, № 14. -C.311-316.

128. Пат. 5312811 США. МКИ5 A 61 К 37/02, С 07 К 5/10. Peptide derivatives and antidementia agents / Masaki M., Kondo S., Miyake N., Uehara M. et al. -Заявл. 14.08.89. Опубл. 17.05.94.

129. Пептидные аналоги пирацетама как лиганды предполагаемых ноотропных119рецепторов / Гудашева Т.А., Островская Р.У., Трофимов С.С. и др. // Хим.-фарм. жури. 1985. - № 11. - С. 1322-1329.

130. Пат. 2423390 ФРГ. МКИ С 07 D 207/28. Pyroglutamyl Verbindungen mit antidepressiver Wirkung und Verfahren zu ih rsr Herstellung / König W., Geiger R., Wissmann H. et al. Заявл. 14.05.74. - Опубл. 04.12.75.

131. Пат. 4066635 США. МКИ С 07 С 103/52 , Н 61 К 37/00. Gillessen D., Studer R., Trzeciak A. L-Pyroglutamyl-L-histidyl-L-prolyl-beta-alanine-amide and salts. Заявл.20.09.76. - Опубл. 03.01.78.

132. Пат. 4933354 США. МКИ5 С 07 D 207/28, А 61 К 31/40. 2-Pyrrolidone -5-carboxylic acid compounds useful for the treatment of mental disorders / Ikeguchi S., Kinoshita Y., Kaneto H. et al. Заявл. 17.08.88. - Опубл. 12.06.90.

133. Заявка 59-67254 Япония. МКИ С 07 С 103/52, С 07 С 102/00. Кицукава И. Способ получения полупродукта синтеза церулеина. Заявл. 08.10.82. - Опубл. 16.04.84.

134. Björkman S., Castensson S., Sievertsson H. Tripeptide analogues of melanocyte-stimulating hormon release-inhibiting hormon (Pro-Leu-GlyNH2) as inhibitor of oxotremorine-induced tremor // J. Med. Chem. 1979. - V. 22, №8. - P.931-935.

135. Пат. 447,247 Испания. МКИ С 07 D . Ethyl 2-carbethoxy-5-oxo-l-pyrrolidine butyrate / Bosch C.J., Bonjoch S.J., Martinez R.C. et al. Заявл. 29.01.79.-Опубл. 12.10.79.

136. PIDOTIMOD, a new immunostimulating dipeptid studied by molecular mechanistics, normal mode analysis and dynamics calculations / Villiani V., Pucciariello R., Crimella T. et al // J. Mol. Struct. 1993. - V. 298, № 1-3. -P. 177-190.

137. Пат. 4956344 США. МКИ5 A 61 К 37/02. Method for treatment of lesions in the large intestinal epithelium with a tripeptide / Fossli Т., Reichelt K.L., Skraastad ? et al. Заявл. 01.02.89. - Опубл. 11.09.90.120

138. Пат. 104564 ПНР. МКИ С 07 С 103/52. Sposob wytwarzania nowego amidu szesciopeptydu / Traczyk W., Lipkowski A., Drabarek S. et al. Заявл. 05.08.76. - Опубл. 29.11.80.

139. Пат. 4264489 США. МКИ С 07 D 207/36. Ondetti М.А., Gordon Е.М., Ryono D.E. Pyroglutamic acid derivatives and analogs. Заявл. 25.06.79. -Опубл. 18.11.80

140. Швачкин Ю.П., Смирнова А.Н. Синтез нового структурного аналога анарексогенного пептида / Журн. общ. хим. 1981. - Т. 55, № 4. - С.967.

141. Пат. 32364834 Германия. МКИ С 07 С 103/52. Szirtes Т., Kisfaludy L., Knoll В. Tripeptides and drugs containing them. Заявл. 02.10.81. -Опубл.21.04.83.

142. Авт. св-во 469687 СССР . МКИ С 07 С 103/52. Способ получения пироглутамил-серил-глицинамида / Юдаев Н.А., Утешева З.Ф., Швачкин Ю.П. и др. Заявл. 27.07.73. - Опубл. 31.07.75.

143. Европ. пат. 135444. МКИ С 07 D 07/28. Pauly М. Pyroglutamic derivatives, their intermediates and their use as bactiricides or fungicides. -Заявл. 12.09.83. Опубл. 27.03.85.

144. Dolichos biflorous pyroglutamylglutamine. A new diuretic principle from Dolichos biflorous seeds / Handa G., Singh J., Nandi L.N. et al I I Indian J. Chem. B. 1990. - V. 29, № 12. - P.l 156-1158.

145. Пушкин А.В., Евстигнеева З.Г., Кретович В.Л. Определение активности глютаминсинтетазы по ортофосфату в экстрактах из семян гороха // В сб. Биохимические методы. М: Наука, 1980. - С.94-99.

146. Субстратная специфичность глутаминсинтетазы хлореллы по отношению к биологически активным производным глутаминовой кислоты / Фирсова Н.А., Алексеева Л.В., Селиванова К.М. и др. // Биохимия.1211986. Т. 51, № 6. - С.980-984. .

147. Активность глутаминсинтетазы хлореллы в отношении трео-4-гидрокси-Ь-глутаминовой кислоты / Фирсова Н.А., Низова И.А., Алексеева JI.B. и др. // Прикл.биохимия и микробиолог. 1984. - Т.20, №5. - С.593-597.

148. Северин Е.С., Ковалева Г.К., Сащенко Л.П. Исследование кинетики и механизма ингибирования аспартат-глутамат-трансаминазы цикло-глутаминовыми кислотами // Биохимия. 1972. - Т.37, № 3. - С.469-477.

149. Weisbroad R.S., Meister A. Studies on glutamine synthetase from Escherichia coll Formation of pyrrolidone carboxylate and inhibition by methionine sulfoximine // J. Biol. Chem. 1973. - V. 248, № 11. - P.3997-4001.

150. Противоопухолевая активность комплексов глутаминовой кислоты и некоторых ее С4-производных с Cu(II) / Тез. докл. XV Всесоюзного Чугаевского совещ. по химии компл. соединений. Киев. - 1985. - С.459.