Выделение и синтетические трансформации некоторых тритерпеноидов солодки уральской. тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ
|
Михайлова, Лилия Рафаиловна
АВТОР
|
||||
|
кандидата химических наук
УЧЕНАЯ СТЕПЕНЬ
|
||||
|
Уфа
МЕСТО ЗАЩИТЫ
|
||||
|
2009
ГОД ЗАЩИТЫ
|
|
02.00.03
КОД ВАК РФ
|
||
|
|
||||
Из правах рукописи
0034В3486
Михайлова Лилия Рафанловиа
ВЫДЕЛЕНИЕ И СИНТЕТИЧЕСКИЕ ТРАНСФОРМАЦИИ НЕКОТОРЫХ ТРИТЕРПЕНОИДОВ СОЛОДКИ УРАЛЬСКОЙ
02.00.03 - Органическая химия
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук
гч
ць?
Уфа-2009
003463486
Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте органической химии Уфимского научного центра Российской академии наук
Научный руководитель:
доктор химических наук,
профессор
Балтина Л.А.
Официальные оппоненты:
доктор химических наук,
профессор
Зорин В.В.
кандидат химических наук,
доцент
Боцман Л.П.
Ведущая организация: ГОУ ВПО «Башкирский государственный университет»
Защита диссертации состоится 20 марта 2009 г. в 14— часов на заседании диссертационного совета Д 002.004.01 в УРАН Институте органической химии Уфимского научного центра РАН по адресу: 450054, Башкортостан, г. Уфа, проспект Октября,71, факс (347) 2356066;е-ша\1: chemorg@anrb.ru
С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке УРАН УНЦ РАН.
Автореферат разослан 17 февраля 2009 г.
Ученый секретарь диссертационного совета доктор химических наук, профессор Валеев Ф.А.
Актуальность темы. Неослабевающий интерес химиков-синтетиков и биологов к основным тритерпеновым веществам корней солодки голой (Glycyrrhiza glabra L.) и уральской (Gl. uralensis Fisher) - глицирризиновой кислоте (ГК) и ее основному метаболиту - глицирретовой кислоте (ГЛК) связан, прежде всего, с высокой и разнообразной биологической и фармакологической активностью этих природных соединений (противовоспалительной, противоязвенной, гепатопротекторной,
антиоксидантной, противовирусной, противоопухолевой и др.) и легкостью выделения из растительного сырья. ГК и ГЛК являются ярким примером перспективности направленных химических трансформаций тритерпеноидов в интересах медицинской химии. Таким образом, проведение исследований в области поиска новых растительных источников для получения тритерпеноидов солодки и проведение их направленных синтетических трансформаций с целью получения новых биологически активных веществ для медицины является актуальной задачей.
В настоящей работе в качестве базовых структур для синтетических трансформаций были использованы ряд тритерпеновых кислот солодки уральской и их производные, в качестве растительного сырья - корни Glycyrrhiza uralensis Fisher сибирских популяций.
Цель работы. Исследование тритерпеноидного состава экстракта корней солодки уральской сибирских популяций; синтез новых производных и аналогов тритерпеноидов с измененным пентациклическим скелетом молекул.
Работа выполнена в соответствии с планами научно-исследовательских работ Института органической химии Уфимского научного центра РАН по теме: «Химические трансформации и синтез аналогов биологически активных терпеноидов» (регистрационный номер 0120.0500681), при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (РФФИ) и БНТСа Австрии (международный грант 03-03-20004); РФФИ (грант 08-0300366); грантов Президента РФ № НШ-1488.2003.3 на поддержку молодых российских ученых и ведущих научных школ; № 02.120.11.1589 для государственной поддержки ведущих научных школ РФ (НШ-1589.2006.3); Федерального агентства по науке и инновациям (Роснаука) по темам 2005-РИ-12.0/004/088 «Синтез и изучение противовирусной активности новых производных и аналогов глицирризиновой кислоты и родственных соединений» (международный проект № 01.2006 12303); 2005-РИ-112/001/375 «Исследование реакционной способности низкомолекулярных растительных метаболитов - научная основа разработки лекарственных препаратов высокой социальной значимости» (научные школы) в рамках федеральной целевой научно-технической программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники» на 2002-2006 гг.
Научная новизна и практическая значимость. Исследован тритерпеновый состав экстракта корней солодки уральской сибирских популяций и проведены окислительные и скелетные превращения 11-дезоксо-ГЛК, ее производных и родственных тритерпеноидов.
Предложены удобные методы синтеза новых производных 11-дезоксо-ГЛК, i содержащих дополнительные кислородсодержащие (оксо, эпокси) функциональные группы С использованием в качестве окислителей озона, мета-хлорнадбензойной кислоты и диметилдиоксирана.
Осуществлен синтез новых А(С)-гомо-А(С)-аза-производных и 3-циано-3,4-секо-олеан-4-енов 11-дезоксо-ГЛК и олеан-9,12-Диен-30-овой кислоты.
Проведены скелетные и окислительные превращения 11-дезоксо-ГЛК по кольцу А с получением 4,23,24-нортритерпеновых производных с цис-сочленением циклов А и В.
Методами ЯМР спектроскопии высокого разрешения 'Н (400 МГц) и |3С (125 МГц) впервые сделано полное отнесение сигналов протонов и атомов углерода в спектрах ЯМР 'Н и |3С А-нор-производных.
Предложен простой метод получения тритерпеновых 1,2-транс-гликозидов путем гликозилирования тритерпеноидов пер-О-ацетатами моносахаридов при активации SnCl4.
Среди новых тритерпеновых производных выявлены вещества, обладающие гепатопротекторной, противоязвенной и анти-ВИЧ-1 активностью.
Апробация работы. Результаты исследований доложены на VI Международной конференции «Биоантиоксидант» (Москва, 2002 г.); 5-й Международном симпозиуме по химии природных соединений (Ташкент, 2003); 4-м Всероссийском симпозиуме по органической химии (Москва, 2003); IV Всероссийском научном семинаре и Молодежной научной школе «Химия и медицина» (Уфа, 2003); 13-м Европейском симпозиуме по органической химии (Дубровник, Хорватия, 2003 г.); III Всероссийской конференции «Химия и технология растительных веществ» (Саратов, 2004 г.); 2-ой Международной конференции по природным соединениям и физиологически активным веществам (Новосибирск, 2004 г.); VIII молодежной научной школе-конференции по органической химии (Казань, 2005 г.); Международном симпозиуме по химии, биологии и медицине (Пафос, Кипр, 2006 г.); IV Всероссийской научной конференции «Химия и технология растительных веществ» (Сыктывкар, 2006 г.); XIX Международном симпозиуме по медицинской химии (Стамбул, Турция, 2006 г.); XI Молодежной конференции по органической химии, посвященной 110. летию со дня рождения И.Я.Постовского (Екатеринбург, 2008 г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 работ, в том числе 2 статьи в журнале, рекомендованном ВАК, краткое сообщение в международном журнале, тезисы 12 докладов на международных, всероссийских и молодежных конференциях и симпозиумах.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 152 стр. и состоит из введения, обзора литературы, трех глав экспериментальных исследований, выводов, списка литературы, включающего 208 наименований, содержит 10 таблиц и 5 рисунков. В приложение включены спектры ЯМР 'Н и |3С, масс-спектры, акты испытаний биологической и фармакологической активности.
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
1. Выделение тритерпеноидов из экстракта корней солодки уральской сибирских популяций
Солодка (с.) уральская (Glycyrrhiza uralensis Fisher) - ценное лекарственное растение семейства бобовых (Leguminosae), относящееся к секции настоящих солодок Euglycyrrhiza Boiss, которое разрешено к применению в отечественной официальной медицине наряду с с. гол ой (Gl. glabra L.). Лекарственная ценность солодкового корня определяется наличием биологически активных веществ, основным из которых является тритерпеновый гликозид - глицирризиновая кислота (ГК) (1) и ее агликон -18ßH-FJlK (2), относящаяся к олеаненовым тритерпеноидам группы ß-амирина.
В качестве растительного сырья использованы корни с. уральской, собранной в Новосибирской области, с содержанием ГК 4,0±0,8%. Для выделения тритерпеновой фракции измельченные корни экстрагировали 2,0% водным раствором NH4OH, осаждали сумму кислот концентрированной H:S04 (pH 1-2) и гидролизовали 5% H2S04/Me0H.
29 30
сосж
(2)Я=Н (2а) Л=Ме
(3) КН; Я -Ас (За) И=Ме;К -Ас
сосж
(6) к=н
(6а) К Мс
СНгОН
ССХЖ
(4)Л=1Г=Н (4а) 1Г=Н; Я=Ме
(5)К =Лс, Я Н НО' (5а) Я -Ас, Р1=Ме
сосж
(7) К = П (7а) Л=Ме
СНгОН
Образующийся осадок реэкстрагировали ССЦ и хроматографировали многократно на колонке с АЬ03. В результате этих операций получены метиловые эфиры 18Р-ГЛК (2а) (4,1%), 11-дезоксо-ГЛК (4а) (0,4%), 24-окси-ГЛК (6а) (0,35%), 24-окси-11-дезоксо-ГЛК (7а) (0,6%) и 21,24-диокси-11-дезоксо-ГЛК (8а) (0,7%). Тритерпеноиды (7а и 8а) были выделены из корней с. уральской российского происхождения впервые.
2. Синтетические трансформации тритерпеноидов
Структурное сходство ГЛК и карбеноксолона со структурой кортикостероидов при длительном применении препаратов ГЛК вызывает ряд побочных эффектов, сходных с избытком в организме гормонов надпочечников (гипокалиемия, задержка натрия в организме, отеки, повышение артериального давления и др.), что связано со способностью ГЛК ингибировать 11 р-гидрокси-стероиддегидрогеназу. Поэтому более привлекательными в качестве темплатных структур для получения новых биологически активных веществ для медицины являются 11-дезоксо-ГЛК (4) и ее производные. Синтетические трансформации данной группы тритерпеноидов, связанные с глубокими структурными преобразованиями и окислительными превращениями, ранее практически не проводились.
В качестве исходных тритерпеноидов были использованы 18Р-ГЛК (2), 11 -дезоксо-ГЛК (4), 18,19-дегидро-ГЛК (9) и олеан-9,12-диен-30-овая кислота (10) и их производные (2а, 3, За, 4а, 5, 5а, 9а, 10а). 11-Дезоксо-ГЛК (4) и ее метиловый эфир (4а) получены восстановлением ГЛК или метилглицирретата (2а) Ъп в диоксане в присутствии соляной кислоты.
„соон
р).
сооя
(10)11=Н (/0а)й=Ме
Условия: а) №ВН/ГГФ-Н20 (1:1), N3011; б) Ка2НР04; в) НС1/ТГФ; г) СН^ШМеОН/ЕЬО
Восстановлением 18(3-ГЛК (2) избытком КаВН4 в смеси ТГФ-вода (1:1) в присутствии ¡Ч'аОН при кипячении получена эпимерная смесь (а/р) 11-окси-производного (106), которая при обработке концентрированной соляной кислотой дегидратируется до ЗР-гидрокси-9(11),12-диена (10) (выход 67%). При метилировании диазометаном образуется 30-метиловый эфир (10а) с количественным выходом (90%). Метиловый эфир гомоаннулярного диена (10а) был получен также при обработке кислоты (10) СНз! в ДМ СО в присутствии порошка КОН (выход 78%).
2.1. Окислительные превращения тритерпеноидов
Окислительные превращения биоактивных растительных тритерпеноидов представляют значительный интерес для получения новых кислородсодержащих производных и изучения зависимости структура-активность.
2.1.1. Озонолиз 11-дезоксо-глнцирретовон кислоты и ее производных
Озонолиз 11-дезоксо-ГЛК (4) в СН2С12 при -60°С до появления озона на выходе из колбы и последующее восстановление продуктов реакции Ъх\ в СН3СООН в течение 1 ч при 0 °С привели к получению смеси продуктов, которая была разделена КХ на сштикагеле (СГ). Из продуктов реакции выделено в индивидуальном по ТСХ состоянии соединение (11) (выход 36%), которое по спектрам ЯМР 'Н и |3С идентифицировано как олеан-3,12-дион-30-овая кислота (схема 1) и исходная 11-дезоксо-ГЛК (4). Спектр ЯМР 'Н 3,12-дикетона (11) характеризуется наличием сигнала 13рн при 2,8 м.д. с
константой спин-спинового взаимодействия (КССВ) 4 Гц, что характерно для производных тритерпеноидов р-амиринового ряда.
При озонировании 11-дезоксо-ГЛК (4) при -60 °С в смеси СН2С12-МеОН была получена 3[3-гидрокси-олеан-12-он-30-овая кислота (16) с выходом 42%.
Схема 1
Условия: а) 03) СНгСЬ, -60°С; б) гп/АсОН
Исчерпывающим озонолизом З-О-ацетата 11-дезоксо-ГЛК (5) при -60 °С в СН2С12 получен 12-он (17) (выход 48%). Карбонильный атом С12 в спектре ЯМР 13С соединения (17) имеет значение ХС 212,7 м.д., С13 - 50,8 м.д.
Озонолиз метилового эфира З-О-ацетата 11 -дезоксо-ГЛК (5а) в СН2С12 при -60 °С привел к смеси продуктов окисления, из которой выделены в чистом виде 12-он (18) (выход 32,5%) и З-О-Ас мегилглицирретата (За) (выход 15%) в соотношении 2:1 по данным спектров ЯМР 'Н и С.
COOR
(16) R = R*=H
(17)R = H;R1=Ac
(18)R = Me;R1=Ac
2.1.2. Окисление производных 11-дезоксо-ГЛК мета-хлорнадбензонной
кислотой
Проведено окисление производных И-дезоксо-ГЛК (5,5а) мета-хлорнадбензойной кислотой (т-СРВА) в СНСЬ или СН2С12 при 0-5 °С (схема 2). Окисление З-О-ацетата (5а) 2 экв. т-СРВА в СН2С12 в течение 7 суток привело к образованию 12а,13а-эпоксида (19) с выходом 67%.
Условия: а) 2 экв т-СРВА, СН2С12, 0-5 °С; б) ВР-Д:ЬО, С6Н6, 80 °С; в) 4 экв. т-СРВА,
СНС15, 0-5 °С
Для установления стереохимии эпоксидного цикла соединения (19) был проведен КОЕ - эксперимент и снят спектр ЯМР |3С без подавления протонов с определением константы С-Н взаимодействия. Величина вицинальной КССВ (.I3) между протоном при С18 и атомом углерода С12 равна 6,2 Гц, что говорит об их цис-расположении друг относительно друга.
При кипячении эпоксида (19) с эфиратом ВРз в бензоле образовывался 13(ЗН-олеан-12-он (18) с выходом 70%. При окислении З-О-ацетата (5) избытком т-СРВА (4 ммоль) в СНСЬ при 0-5 °С в течение 7 дней была получена Зр-ацетокси-олеан-13рН-12-он-30-овая кислота (17), идентичная образцу, полученному выше озонолизом.
2.2. Скелетные превращения тритерпеноидов 2.2.]. Бекмановская перегруппировка кетоксимов
Получены производные 21-дезоксо-ГЛК и олеан-9(11),12(13)-диен-30-овой кислоты с семичленными циклами А- и С- путем бекмановской перегруппировки соответствующих гидроксииминов (схемы 3-5).
Условия: а) Ш2ОН'НС1, Ру, 115 °С, 2 ч; б) БОСк, СН3СМ, 4 ч.
З-О-ацетаг 12-он-олеан-30-овой кислоты (17) был превращен в 12-гидроксиимино-производное (20) путем кипячения с 1ч1Н2ОН«НС1 в безводном пиридине в течение 2 ч (выход 78%). Бекмановская перегруппировка гидроксиимина (20) под действием БОСЬ в ацетонитриле протекала с образованием С-гомо-С-аза-производного (21).
Окислением метиловых эфиров 11-дезоксо-ГЛК (4а) и олеан-9(11),12(13)-диен-30-овой кислоты (10а) пиридинийдихроматом (РОС) в СН2С12 получены 3-оксо-производные (22) и (26) с выходами 70 и 65%, соответственно (схемы 4 и 5), которые путем кипячения с МНаОН'НО в безводном пиридине превращали в 3-гидроксиимины (23) и (27) с выходами 82-84%. В спектрах ЯМР ,3С оксимов (23) и (27) наблюдается сигнал СЗ при 166,5 - 166,6 м.д. (С=№). Взаимодействие оксимов (23) и (27) с 80С12 в диоксане при 10 °С проходило с образованием единственных продуктов реакции (24) и (28) с выходами 74-76% в результате бекмановской перегруппировки 1-го рода.
(25) 70%
Условия: а) PDC, СН2С12; б) NH2OH«HCl, Ру, И5 °С: в) SOC12,IO °С, 1% КОН; г) p-TsCl,
Ру, 1(5°С,5ч.
При нагревании оксимов (23) и (27) с p-TsCl в среде безводного пиридина проходила бекмановская перегруппировка 2-го рода с образованием 3-циано-3,4-секо-олеан-4-енов (25) и (29) с выходами 70 и 66 %, соответственно (схемы 4 и 5). В спектрах ЯМР ПС сигнал CN группы обнаруживается при 5 121,3 м.д. (соединение 25) и 120,3 м.д. (соединение 29) м.д., а сигналы С4 олефиновой связи при б 167,1 и 163,7 м.д., соответственно.
При кипячении А-гомо-4-аза-З-оксо-лроизводного (28) с реактивом Лавессона в толуоле в течение 5 ч получен 3-тиолактам (30) с выходом 65%, в спектре ЯМР 13С которого наблюдается смещение сигнала СЗ со 175,3 м.д. до 162,9 м.д. в результате образования связи C=S.
Условия: а) РОС, СНС13; б) Ы1ЬОН-НС1, 115° С, 1ч; в) БОСЬ, диоксан, 10 °С; 1% КОН; г) р-ТвО/Ру, 115 °С, 5 ч;) Реактив Лавессона, толуол, 5 ч.
2.2.2. Синтез и превращения А-циклопентановых производных 11-
дезоксо-ГЛК
Нами впервые осуществлен синтез производных 11-дезоксо-ГЛК (4) с пентациклическим кольцом А, которые представляют собой новую группу биологически активных веществ, лишенных эффекта «псевдоальдостеронизма», с использованием в качестве субстрата метилового эфира (4а) (схема 6).
Сужение цикла А в метиловом эфире 11 -дезоксо-ГЛК (4а) провели с помощью РС15 в смеси бензола - толуола 1:1с использованием классической перегруппировки Вагнера - Мейервейна, которая протекала по двум направлениям в зависимости от температуры реакции; при —10 — О °С образовывался метиловый эфир 3-изопропилиден-А-нео-5аН-олеан-12-ен-30-овой кислоты (31) с выходом 79,2 %. Проведение реакции дегидратации соединения (4а) РС15 при 5 - 10°С привело к эндо-изомеру А-норолеан-3(5)-ену (32) с выходом 82,5 %.
Условия: а) РС15> -10-0 °С; б) РС15, 5-10 °С; в) 03, -60 °С; г) Яи04, ССЦ; гп/АсОН; д) ЫН2ОН-НС1, Ру; е) БОСЬ, диоксан
При окислении изопропилиденового производного (31) в СС14 избытком Яи04 получена смесь изомерных 5РН- и 5аН -А-норкетонов (33а, б), которые были выделены КХ на А1203 в виде смеси в соотношении 2:1 по данным ЯМР-спектроскопии с общим выходом 62%.
Перекристаллизацией смеси изомеров (33 а, б) из ЕЮН получили чистые монокристаллы 5|ЗН-А-норкетона (33а), охарактеризованного рентгеноструктурным анализом* (рис.1).
Рис. 1. Рентгеноструктурный анализ метилового эфира 4,23,24-тринор-3-оксо-5(Ш-олеан-12-ен-30-овой кислоты (33а)
Парциальный озонолиз соединения (31) при - 60° С (~1 ммоль озона) в СН2С12 привел к образованию только 5рН-А-норкетона (33а), выделенного КХ с выходом 59%. В реакционной смеси содержался также исходный тритерпеноид (31) (30%). В спектре ЯМР 13С чистого 5рН-А-норкетона (33а) присутствует только один сигнал СЗ (С=0) при 221,4 м.д., сигнал 5РН протона имеет значение ХС 1,82 м.д. (синглет). При нагревании А-норкетона (33а) с NH2OH*HCl в безводном пиридине в течение 1 ч получен оксим (34) с выходом 84 %. В спектре ЯМР 13С данного соединения сигнал СЗ смещается до 167,3 м.д. (C=N) в результате образования имина.
Бекмановская перегруппировка оксима (34) под действием SOCI2 в абсолютном диоксане протекала с образованием лактама (35) (выход 67%). В соединениях (34) и (35) цис-сочленение колец А/В не изменяется, что подтверждается сохранением сигнала 5рН при 1,86 м.д. в виде синглета.
В результате парциального озонолиза соединения (32) при - 60° С получен За,5а-эпоксид (36) с выходом 56%. Из реакционной смеси КХ выделен также исходный эндо-изомер (32), идентифицированный по ТСХ с меткой. Стереохимия эпоксида (36) следует из наличия стерически затрудненной двойной связи С3(5) в исходном соединении (32), а также наличия в спектре ЯМР 13С ХС атомов СЗ и С5 при 5 75,1 и 75,9 м.д.
2.2.3. Спектры ЯМР ]Н и 13С А-циклопентановых производных 11-
дезокео-ГЛК
С использованием ЯМР спектрометра высокого разрешения Varian Unity Inova с рабочей частотой 400 МГц ('Н) и 125 МГц (13С)* были исследованы спектры ЯМР производных 11-дезоксо-ГЛК (31), (32) и (36) и проведено полное отнесение сигналов протонов методами двумерной (2D)-гомоядерной НН COSY и гетероядерной СН корреляционной спектроскопии
в режимах HSQC и НМВС. Значения ХС в спектрах ЯМР 'Н и ,3С высокого разрешения исследованных соединений приведены в табл. 1.
Как видно из данных табл. 1, в спектре ЯМР 13С соединения (31) имеются характеристические сигналы олефиновых атомов СЗ и С4 при 135,8 и 120,9 м.д. Два синглетных сигнала метальных протонов изопропилиденовой группы в спектре ЯМР 'Н имеют значения ХС 1,62 и 1,81 м.д. Значения ХС атомов углерода циклопентанового кольца А подтверждают 5аН-конфигурацию и транс-сочленение колец А/В в соединении (31).
В спектре ЯМР 13С эпоксида (36) появляются сигналы С-О-связей при 75,1 и 75,9 м.д., сигналы олефиновых атомов углерода СЗ и С5 отсутствуют. В спектре ЯМР 'Н протоны Н2 обнаруживаются при 5 1,73 и 1,61 м.д., протоны Н4 - при 5 1,77 м.д. Двойная связь в кольце С при парциальном озонолизе не озонируется, о чем свидетельствует сохранение сигналов атомов С12 и С13 в спектре ЯМР 13С соединения (36).
Таблица 1
Значение химических сдвигов в спектрах ЯМР 'Н и 13С высокого разрешения (5, м.д.) производных 11-дезоксо-ГЛК с циклопентановым кольцом А (пиридин-с^, 310°К, TMS - внутренний стандарт)
Атом (31) (32) (36)
8с 8н Дс ÖH 6с 5н
1. 39.6 1.52 41.9 1.72 35.3 1.17
1.02 1.47 1.17
2. 29.0 2.10 28.4 2.28 23.9 1.73
2.23 2.21 1.61
3. 135.8 - 136.1 - 75.1 -
4. 120.9 - 26.8 2.72 28.9 1.77
5. 56.0 1.73 140.9 - 75.9 -
6. 23.4 1.60 20.0 2.37 20.2 2.02
2.19 1.97 1.33
7. 32.9 1,31 32.4 1.45 29.4 2.02
1.50 1.37 1.33
8. 40.0 - 40.7 - 40.4 -
9. 45.6 1.79 46.6 1.87 41.3 2.25
10. 44.2 - 49.8 - 41.3 -
11. 25.9 2.03 25.6 2.03 25.3 2.03
1.86 1.84 1.79
12. 123.1 5.42 123.5 5.45 123.0 5.44
13. 145.3 - 144.8 - 145.4 -
14. 42.0 - 42.2 - 42.5 -
15. 26.8 1.82 26.7 1.82 26.7 1.83
0.99 1.02 1.03
16. 27.4 2.02 27.4 1.99 27.4 2.00
0.88 0.97 0.88
17. 32.4 - 32.4 - 32.5 -
18. 49.1 2.14 49.3 2.14 49.2 2.14
19. 43.3 2.08 43.2 2.06 43.1 2.07
1.76 1.74 1.75
20. 44.5 - 44.5 - 44.6 -
21. 31.6 2.07 31.6 2.06 31.5 2.08
1.39 1.37 1.38
22. 38.9 1.49 38.6 1.49 38.8 1.49
1.40 1.37 1.38
23. 23.0 1.62 21.5 0.97 18.7 1.08
24. 19.7 1.81 22.1 1.01 19.1 0.95
25. 15.0 0.75 19.0 1.00 18.0 0.91
26. 17.2 1.02 16.0 1.09 16.6 1.11
27. 26.2 1.22 25.8 1.14 26.2 1.30
28. 28.5 0.87 28.5 0.87 28.5 0.88
29. 28.6 1.22 28.5 1.16 28.5 1.18
30. 177.4 - 177.3 - 177.3 -
Ме 51.5 3.71 51.5 3.68 51.1 3.70
Сигналы С1 и С2 циклопентанового фрагмента в спектре ЯМР 13С эпоксида (36) смещены в более сильное поле ~ на 4 - 5 м.д. и коррелируют с протонами при 1,17; 1,73 и 1,61 м.д., соответственно.
2.2.4. Окисление А-цнклопентановых производных тритерпеиоидов диметилдиоксираном
Хорошо известным стерео- и региоселективным окислителем является диметилдиоксиран (0\ГО), позволяющий окислять вторичные спиртовые группы и эпоксидировать двойные связи. Мы провели окисление 3-изопропил-А-нео-5аН-олеан-12-ен-30-овой кислоты (31) и А-норолеан-3,12-диен-3-(2-изопропильного)-производного (32) ОХШ в смеси ацетона-хлористого метилена (1:1) при 20-22 °С. Основным продуктом окисления соединения (31) является А-нор-ЗР,4р-эпоксид (40) (выход 71%) (схема 8), в спектре ЯМР ПС которого исчезают сигналы олефиновых атомов СЗ и С4, но появляются сигналы атомов углерода эпоксидного цикла при 77,2 (С3-0) и 57,9 (С4-0) м.д.
Окисление соединения (32) БМБ в аналогичных условиях также привело к Зр,5р-зпоксиду (41) с выходом 77%, отличающемуся от образца За,5а-эпоксида (36), полученного парциальным озонолизом, по ТСХ и спектрам ЯМР 'Н и 13С.
2.3. Гликозилирование тритерпенондов перацетнлированными сахарами при активации SnCl4
Синтез тритерпеновых О-гликозидов, моделирующих различные природные сапонины, в частности, гликозиды лекарственных растений (Glycyrrhiza, Panax, Bupleimm spp. etc.), представляет интерес как с точки зрения получения аналогов биоактивных природных соединений, так и с точки зрения изучения особенностей гликозилирования полифункциональных природных сапогенинов. Известно, что гликозилирование усиливает биодоступность природных соединений и синтетические тритерпеновые гликозиды можно рассматривать как пролекарства. Поэтому разработка новых эффективных методов гликозилирования сложных полифункциональных природных соединений, пригодных для получения аналогов природных глнкозидов, является одной из актуальных проблем современного гликозидного синтеза.
С целью изучения зависимости структура-активность нами осуществлен синтез З-О-гликозидов - модифицированных аналогов ГК, представляющих интерес для изучения зависимости структура-активность. Гликозилирование 18р- и 18,19-дегидро-ГЛК в виде их метиловых эфиров (2а, 9а) провели легко доступными гликозильными донорами (ГД) - пента-О-ацетатами p-D-галакто- и -глюкопираноз при активации кислотой Льюиса -SnC(4, широко используемой в синтезе N-гликозидов (нуклеозидов) (схема 9).
АсО
\ С11,0.4
0Ас
АсоД^-^-Л/
ОАс
ОООМе
Ю,
УЖ
ОЯ О'
ч СООМе
ю О^
ОООМе
(43) Я" Ас
АсО'
„ СХЮМе
ЯО
(За)
(44) а = 2,3,4,6-Ас-р-0-Са1р Условия: а) ЗпСЦ, СМзСК-ДХЭ, молекулярные сита 4 А, -20^20 °С
Для подбора оптимальных условий проведения реакции гликозилирования варьировались соотношения тритерпеноидов, ГД и активатора (АК), температурный режим и время реакции. Гликозилирование МеГЖ (2а) проводили в смеси ацетонитрила - дихлорэтана (ДХЭ) в интервале температур от -20 °С до 20 °С.
При проведении реакции гликозилирования при -20->-10 °С (2 ч) с использованием 6 ммоль активатора (БпСЦ) образовывалась смесь а- и р-галактопиранозидов (42) и (43) с общим выходом 24,5% с соотношением а/р-аномеров 6:1. Смесь гликозидов была разделена КХ на СГ. В качестве побочного продукта реакции получены незначительные количества З-О-ацетата МеГЛК (За).
Гликозилирование МеГЛК (2а) при соотношении реагентов ГД/МеГЛК/АК = 2,5:2:12 ммоль в присутствии молекулярных сит 4А при -20—>20 °С привело к увеличению выхода гликозидной фракции (74,2%), причем выход р-аномера (43) тоже увеличился (соотношение а/р=1:2).
Однако, реакция сопровождалась изомеризацией образующегося 3-0-(3-О-галакгопиранозида МеГЛК (43) в 18а-стереоизомер (44) под действием кислоты Льюиса.
Реакция гликозилирования метилового эфира 18,19-ГЛК (9а) при оптимальном соотношении реагентов при -5-0 °С течение 2-4 ч протекала с образованием только (З-гликозида (45), выход которого зависит как от времени проведения реакции, так и количества активатора. Выходы р-галактопиранозида 18,19-дегидро-ГЛК (45) составили 36,2 - 61,3 %. В качестве минорного побочного продукта реакции образуется З-О-ацетат (96).
Гликозилированием метилового эфира (9а) пента-О-ацетатом ¡3-D-глюкопиранозы в присутствии SnCU при -5-0 °С получен p-D-глкжопиранозид (46) с выходом 51,3%. Структура полученных гликозидов была подтверждена спектральными методами (ИК, УФ, ЯМР 'Н и 13С). В спектре ЯМР ПС а- D-галактопиранозида (42) ХС аномерного атома углерода равен 94,1 м.д., р- гликозида (43) - 103,5 м.д., как и в спектре ГК.
Для глюкозида (46) сделано полное отнесение сигналов протонов с использованием одно- и двумерных экспериментов (Н-Н COSY, Н-С HSQC, НМВС) на ЯМР спектрометре высокого разрешения Varían Inova (600 Мгц -'Н и 150 МГц - 13С). В области слабого поля спектра ЯМР 'Н гликозида (46) сигнал аномерного протона наблюдается при 4,93 м.д. в виде дублета с КССВ 7,8 Гц, что подтверждает p-конфигурацию гликозидной связи. Аксиальному протону при С 2' принадлежит триплет при 5,45 м.д. с КССВ 8,9 Гц, характеризующий взаимодействие данного протона с двумя соседними протонами с экваториальным и аксиальным расположением при СГ и СЗ'.
Дезацетилированием перацетилированных гликозидов (42,43,45,46) 0,1N NaOMe в смеси метанол a-хлористого метилена получили модельные гликозиды (47-50) с выходами 80-83%.
3. Биологическая и фармакологическая активность производных тритерпеноидов*
Установлено, что модельные тритерпеновые р-гликозиды (47-49) обладают гепатопротекторной активностью in vitro, увеличивают выживаемость клеток гепатоцитов человека HepG2 и снижают выделение лактатдегидрогеназы при алкогольной интоксикации. Исследованные соединения обладают слабовыраженной антиоксидантной активностью, но существенно снижают концентрацию белка-фактора некроза опухолей TNF-a (tumor necrosis factor) при этанольном гепатите, что говорит об их выраженных противовоспалительных свойствах.
Найдено, что гликозид (47) проявляет средневыраженную анти-ВИЧ-1 активность на модели первично инфицированных ВИЧ-1 лимфоидных клеток МТ-4 и имеет более высокий индекс селективности по сравнению с ГК.
З-Оксим 11-дезоксо-ГЛК (23) обладает гепатопротекторной активностью in vivo (на крысах) на модели острого гепатита, вызванного внутрибрюшинным введением СС14. Данное соединение при пероральном введении в дозе 50 мг/кг усиливает желчегонную активность печени и снижает уровень билирубина в сыворотке крови животных.
З-Оксо-производные 11-дезоксо-ГЛК (22) и олеан-9,11-диен-30-овой кислоты (26) предохраняют слизистую оболочку желудка крыс от изъязвления на модели индометациновых язв аналогично карбеноксолону при введении в равных дозах (50 мг/кг).
Таким образом, среди исследованных производных ГЛК и ее аналогов найдены вещества, обладающие гепатопротекторной, противоязвенной и анти-ВИЧ-1 активностью.
»Спектры ЯМР высокого разрешения 'н (400 и 600 МГц) и ПС (125 и 150 МГц) сняты в Институте фармацевтической химии и технологии Университета им. К.Франца (г. Грац, Австрия) » Школе химических и фармацевтических наук Университета Восточной Англии; б) рентгеноструктурньш анализ выполнен в Центре рентгеноструктурных исследований И H ЭОС РАН; в) изучение гепатопротекторной и антиоксидантной активности производных тритерпеноидов in vitro проведено в В Китайском медицинском университете г. Тайчунг (Тайвань); гепатопротекторные свойства оксима 11-дезоксо-ГЛК (23) in vivo - в лаборатории новых лекарственных средств Института органической химии УНЦ РАН; противоязвенной активности - в Башкирском государственном медицинском университете; анти-ВИЧ-1 активности - в Отделе ретровирусов ГНЦ ВБ «Вектор» (Новосибирская область).
ВЫВОДЫ
1. Из тритерпеновой фракции экстракта корней солодки уральской (Glycyrrhiza uralensis Fisher) сибирских популяций выделены и идентифицированы в виде метиловых эфиров пять тритерпеновых кислот, основной из которых является глицирретовая кислота (ГЛК). 24-Окси-11-дезоксо- и 21,24-диокси-11-дезоксо-ГЛК выделены из данного вида солодки впервые.
2. Проведены окислительные превращения 11-дезоксо-ГЛК и ее производных под действием озона, мета-хлорнадбензойной кислоты и диметилдиоксирана с получением новых тритерпеноидов, содержащих дополнительные кислородсодержащие (оксо-, эпокси) функциональные группы.
3. Осуществлены скелетные трансформации тритерпеноидов по кольцам А и С с получением новых структурных аналогов с измененным пентациклическим скелетом молекул. Впервые синтезированы А-гомо-А-аза-производные и 3-циано-3,4-секо-олеан-5-ены на основе 11-дезоксо-ГЛК и олеан-9,12-диен-30-овой кислоты. Предложена схема получения С-гомо-С-аза-производного 12-оксо-олеанан-30-овой кислоты.
4. Проведены скелетные и окислительные превращения 11-дезоксо-ГЛК по кольцу А с получением 4,23,24-нортритерпеновых производных с цис-сочленением циклов А и В. Методами ЯМР спектроскопии высокого разрешения 1Н (400 МГц) и 13С (125 МГц) впервые сделано полное отнесение сигналов протонов и атомов углерода в спектрах ЯМР 1Н и I3C А-циклопентановых производных.
5. Предложен простой метод получения тритерпеновых 1,2-транс-гликозидов путем гликозилирования тритерпеноидов пер-О-ацетатами моносахаридов при активации SnCl4 в смеси ацетонитрила-дихлорэтана в присутствии молекулярных сит.
6. Среди новых тритерпеновых производных выявлены вещества, обладающие гепатопротекторной, противоязвенной и анти-ВИЧ-1 активностью.
Основное содержание работы изложено в публикациях:
1. Михайлова Л.Р., Худобко М.В., Балтина Л.А., Куковинец О.С., Мавродиев В.К., Галин Ф.З. Озонолиз 11-дезоксо-глицирретовой кислоты и ее производных. // Химия прир. соед. -2007. - № 5. - С.469-472.
2. Михайлова Л.Р., Балтина Л.А., Кондратенко P.M., Kunert О., Спирихин Л.В., Галин Ф.З,, Толстиков Г.А.. Синтез и спектры ЯМР высокого разрешения А-нор-производных 11-дезоксо-глицирретовой кислоты. // Химия прир. соед. - 2006. - № 5. - С. 445-448.
3. Kondratenko R.M., Mikhailova L.R., Baltina L.A., Stolyarova O.V., Baschenko N.Z., Baltina L.A., jr., Friedman S.M., Plyasunova O.A., Pokrovskyi A.G., Tolstikov G.A. Transformations and Bioactivity of Major Triterpenoids of Licorice. // Drugs of the Future. - 2004. - V.29. - Suppl. A. - P. 86.
4. Кондратенко P.M., Абдюшева Л.P., Балтина Л.А., Насыров X.M., Толстиков Г.А. Новые производные глицирретовой кислоты как потенциальные антиоксиданты. // Тезисы докл. VI Международной конф. «Биоантиоксидант». - Москва, 2002 г. - С.288-289.
5. Kondratenko R.M., Baltina L.A., Mikhailova L.R., Nepogodiev S.A., Field R.A.. // Conference Proceedings of 5th International Symposium on the Chemistry of Natural Products. - Tashkent Uzbekistan, 2003. - P. 130.
6. Балтина Л.А., Михайлова Л.Р., Кондратенко P.M., Непогодьев С.А., Карта К.П., Филд Р.А. Синтез модельных тритерпеновых гликозидов - аналогов глицирризиновой кислоты. // Тезисы докл. Четвертого Всероссийского симпозиума по органической химии «Органическая химия - упадок или возрождение?». - Москва, 2003 г. - 2003. С. 11.
7. Балтина Л.А., Кондратенко P.M., Михайлова Л.Р., Насыров Х.М., Покровский А.Г., Плясунова О.А., Толстиков Г.А., Непогодьев С., Филд Р. Поиск новых биологически активных веществ для медицины среди производных и модифицированных аналогов глицирризиновой кислоты. // Тезисы докл. IV Всероссийского научного семинара и Молодежной научной школы «Химия и медицина». - Уфа, 2003 г. - С.51-52.
8. Baltina L., Kondratenko R., Flekhter О., Mikhailova L., Medvedeva N., Galin F., Tolstikov G. Selective Transformations of Bioactive Natural Trirepenoids. // Book of Abstracts of 13th European Symposium on Organic Chemistry. - Cavtat-Dubrovnic, Croatia, 2003. - ОС 45. - P.l 16.
9. Балтина Л.А., Флехтер О.Б., Кондратенко P.M., Медведева Н.И., Михайлова Л.Р., Галин Ф.З., Поройков В.В., Бореко Е.И., Покровский А.Г., Басченко Н.Ж., Толстиков Г.А., Кунерт О. Дизайн, синтез и оценка биологической активности новых производных и аналогов растительных
тритерпеновых веществ. // Тезисы докл. III Всероссийской конференции «Химия и технология растительных веществ». - Саратов., 2004. - С. 137-138.
10. Kondratenko R.M., Baltina L.A., Mikhailova L.R., Baltina L.A., jr., Stolyarova O.V., Tolstikov G.A., Nepogodiev S.A„ Field R.A., Kunert 0., Plyasunova O.A., Pokrovskyi A.G., Hover H., Cinatl J.. Synthesis of Novel Glycyrrhizic and Glycyrrhetic Acid Derivatives with Positive Antiviral Activity. // In the Book of Abstracts of the 2nd International Conference on Natural Products and Physiologically Active Substances (ICNPAS-2004) and 3,d EuroAsian Heterocyclic Meeting "Heterocycles in Organic and Combinatorial Chemistry" (EAHM-2004). - Novosibirsk, Russia, 2004. - P.24.
11. Михайлова Jl.P., Артелина A.B., Балтина Л.А. (мл.), Столярова О.А. Направленные трансформации минорных тритерпеноидов солодкового корня. // Тезисы докл. VIII молодежной научной школы-конференции по органической химии. - Казань, 2005 г. - С. 379.
12. Baltina L., Mikhailova L., Plyasunova О., Kunert О., Haslinger E. Cinatl J. Target transformations of licorice root triterpenoids for antiviral activities studies. // In Book of Abstr. International Symposium on Chemistry, Biology and Medicine. - Cyprus, 2006. - P 06.
13. Михайлова Л.P., Худобко M.B., Балтина Л.А., Галин Ф.З., Толстиков Г.А. Скелетные и окислительные превращения минорных тритерпеноидов солодкового корня. // Тезисы докл. IV Всероссийской научной конф. «Химия и технология растительных веществ». - Сыктывкар, 2006 г. - С.135.
14. Baltina L., Stolyarova О., Mikhailova L., Baltina L., Tolstikov G. Selective Transformations of Licorice Triterpenoids as a Basis for the Production of New Medicinal Agents with Target Biological Activity. // Abstr. from the XlXth Intern. Symp. on Mediical Chemistry. - Istanbul, Turkey, 2006. - P. 165.
15. Михайлова Л.P., Худобко M.B., Балтина Л.А. (мл.). Синтез А-аза-производных минорных тритерпеноидов солодкового корня. // Тезисы докл. XI Молодежной конференции по органической химии, посвященной 110-летию со дня рождения И.Я.Постовского. - Екатеринбург, 2008 г. - С. 92.
Соискатель:
Михайлова Л.Р.
Михайлова Лилия Рафаиловна
ВЫДЕЛЕНИЕ И СИНТЕТИЧЕСКИЕ ТРАНСФОРМАЦИИ НЕКОТОРЫХ ТРНТЕРПЕНОИДОВ СОЛОДКИ УРАЛЬСКОЙ
02 00.03 - Органическая химия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук
Лицензия №0177 от 10.06.96 г. Подписано в печать 16.02.2009 г. Бумага офсетная. Отпечатано на ризографе. Формат 60x84^. Усл.-печ. л. 1,5. Уч.-изд. л. 1,7.
Тираж 105 экз. Заказ № 439.
450000, г, Уфа, ул. Ленина, 3, ГОУ ВПО «Башгосмедуниверситет РОСЗРАВА»
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР « Тритерпеновые вещества настоящих видов солодок. Синтетические трансформации глицирретовой кислоты и родственных тритерпеноидов как путь к получению новых биологически активных веществ».
1.1. Тритерпеновые вещества настоящих видов солодок.
1.1.1. Строение и выделение глицирретовой кислоты.
1.1.2. Минорные тритерпеноиды настоящих видов солодок.
1.2. Синтетические трансформации глицирретовой кислоты и родственных тритерпеноидов как путь к получению новых биологически активных веществ.
1.2.1. Трансформации тритерпеноидов с сохранением пентациклического скелета.
1.2.2. Трансформации тритерпеноидов с изменением углеродного скелета.
1.2.2.1. Трансформации в кольце А.
1.2.2.2. Трансформации в кольце С. Восстановление и окисление.
1.4. Биологическая активность глицирретовой кислоты и ее производных. Лекарственные препараты.
ГЛАВА 2. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
2.1. Выделение тритерпеноидов из корней солодки уральской сибирских популяций.
2.2. Синтетические трансформации тритерпеноидов.
2.2.1. Исходные тритерпеноиды.
2.2.2. Окислительные превращения тритерпеноидов солодки.
2.2.2.1. Озонолиз 11-дезоксо-глицирретовой кислоты и ее производных.
2.2.2.2 Окисление производных 11-дезоксо-ГЛК мета-хлорпербензойной кислотой.
2.2.3 Скелетные превращения тритерпеноидов.
2.2.3.1. Бекмановская перегруппировка кетоксимов.
2.2.3.2. Синтез и превращения А-циклопентановых производных 11-дезоксо-ГЛК.
2.2.3.3. Спектры ЯМР 'Н и 13С А-циклопентановых производных 11-дезоксо-ГЛК.
2.2.3.4. Окисление А-циклопентановых производных тритерпеноидов диметилдиоксираном.
2.2.5. Гликозилирование тритерпеноидов перацетилированными сахарами при катализе SnCL,.
ГЛАВА 3. Биологическая и фармакологическая активность производных тритерпеноидов
3.1. Гепатопротекторная и антиоксидантная активность.
3.1.1. Гепатопротекторная и антиоксидантная активность модельных тритерпеновых гликозидов in vitro.
3.2. Гепатопротекторная активность 3-гидроксимина 11-дезоксо-глицирретовой кислоты in vivo.
3.3. Противоязвенная активность.
3.4. Анти-ВИЧ-1 активность.
ГЛАВА 4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
ВЫВОДЫ.
Одним из экономически и социально важных направлений в области современной органической, биоорганической и медицинской химии является синтез новых биологически активных веществ медицинского назначения на основе низкомолекулярных вторичных растительных метаболитов. В мировой практике постоянно растет удельный вес и объем продаж лекарственных препаратов, полученных на основе растительных метаболитов и их производных, идет постоянный поиск новых источников их получения. Лидирующие природные соединения и их модификанты особенно интенсивно внедряются в области онкологии, инфекционных и метаболических заболеваний, играют важную роль в разработке антибактериальных, антигрибковых и противовирусных препаратов.
Весьма перспективным подходом для получения новых лидирующих соединений для медицины с потенцированными фармакологическими свойствами являются их синтетические трансформации и синтез аналогов (миметиков) с заданной биоактивностью.
Растительные тритерпеноиды (ТТ) и их гликозиды относятся к числу природных соединений, представляющих большую ценность для медицины вследствие высокой и разнообразной биологической активности и широкой распространенности в растительном мире. Развитие химии тритерпеноидов в последнее двадцатилетие привело к получению целого ряда уникальных биологически активных веществ, представляющих интерес для медицины в качестве лекарственных препаратов. Так, проходят клинические исследования новые антимеланомные и анти-ВИЧ средства, полученные на основе пентациклического тритерпеноида бетулиновой кислоты.
Уникальным свойством тритерпеновых веществ является их способность ингибировать вирусы на начальных стадиях репликативного цикла, в частности, стадии адсорбции вируса клетками и слияния. Подобные соединения не оказывают влияния непосредственно на процессы кодирования и реализации генетической информации вирусов, не вызывают развития лекарственной резистентности, что выгодно отличает их от известных противовирусных препаратов нуклеозидной природы.
В последние годы все большее внимание уделяется развитию методологии синтеза производных тритерпеноидов с более глубоким изменением нативного скелета молекул, которые представляют интерес в плане получения аналогов новых структурных типов. Так, 2-циано-3,12-диоксо-олеан-1,9-диен-28-овая кислота представляет интерес для медицины в качестве препарата для лечения различных воспалительных заболеваний и противоопухолевого агента.
Неослабевающий интерес химиков-синтетиков и биологов к основным тритерпеновым веществам корней солодки голой (Glycyrrhiza glabra L.) и (Gl. uralensis Fisher) — глицирризиновой кислоте (ГК) и ее основному метаболиту - глицирретовой кислоте (ГЛК) связан, прежде всего, с высокой и разнообразной биологической и фармакологической активностью этих природных соединений (противовоспалительной, противоязвенной, гепатопротекторной, антиоксидантной, противовирусной, противоопухолевой и др.) и легкостью выделения из растительного сырья. ГК и ГЛК являются, безусловно, ярким примером перспективности направленных химических трансформаций тритерпеноидов в интересах медицинской химии. Синтетические трансформации ГК и ГЛК послужили основой для получения ряда высокоактивных противовоспалительных, противоязвенных, иммуностимулирующих и противовирусных агентов. Динатриевая соль кислого сукцината ГЛК (карбеноксолон) длительно использовалась в Европе в качестве противоязвенного средства. На основе 18,19-дегидро-ГЛК разработана и внедрена в медицинскую практику мазевая композиция (глидеринин) для лечения аллергических заболеваний кожи, экзем и нейродермитов. Полу синтетическое производное ГК ниглизин оказалось высокоактивным ингибитором ВИЧ-1 и мутантных форм ВИЧ, резистентных к применяемым в настоящее время в медицине нуклеозидным ингибиторам ВИЧ. Таким образом, проведение исследований в области поиска новых растительных источников для получения тритерпеноидов солодки и проведение их направленных синтетических трансформаций с целью получения новых биологически активных веществ для медицины является актуальной задачей.
В настоящей работе в качестве базовых структур для синтетических трансформаций были использованы ряд тритерпеновых кислот солодки и их производные, в качестве растительного сырья - корни солодки уральской (Glycyrrhiza uralensis Fisher) сибирских популяций.
Цель работы: Исследование тритерпеноидного состава экстракта корней солодки уральской сибирских популяций; синтез новых производных и аналогов тритерпеноидов солодки с измененным пентациклическим скелетом молекул.
Для решения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:
- выделение и идентификация тритерпеноидов из экстракта корней дикорастущей солодки уральской (Новосибирская область);
- скелетные трансформации (по кольцам А и С) и окислительные превращения минорных тритерпеноидов солодки;
- разработка нового метода синтеза гликозилированных производных тритерпеноидов.
выводы
1. Из тритерпеновой фракции экстракта корней корней солодки уральской (Glycyrrhiza uralensis Fisher) сибирских популяций выделены и идентифицированы в виде метиловых эфиров 5 тритерпеновых кислот, основной из которых является глицирретовая кислота (ГЛК). 24-Окси-11-дезоксо- и 21,24-диокси-11-дезоксо-ГЛК выделены из данного вида солодки впервые.
2. Проведены окислительные превращения 11-дезоксо-ГЛК и ее производных под действием озона, мета-хлорнадбензойной кислоты и диметилдиоксирана с получением новых тритерпеноидов, содержащих дополнительные кислородсодержащие (оксо-, эпокси) функциональные группы.
3. Осуществлены скелетные трансформации тритерпеноидов по кольцам А и С с получением новых структурных аналогов с измененным пентациклическим скелетом молекул. Впервые синтезированы А-гомо-4-аза-производные и 3-циано-3,4-секо-олеан-4-ены на основе 11-дезоксо-ГЛК и олеан-9,12-диен-30-овой кислоты. Предложена схема получения С-гомо-11-аза-производного 12-оксо-олеанан-30-овой кислоты.
4. Проведены скелетные и окислительные превращения 11-дезоксо-ГЛК по кольцу А с получением 4,23,24-нортритерпеновых производных с цис-сочленением циклов А и В. Методами ЯМР спектроскопии высокого разрешения 1Н (400 МГц) и 13С (125 МГц) впервые сделано полное
1 13 отнесение сигналов протонов и атомов углерода в спектрах ЯМР Ни С А-циклопентановых производных.
5. Предложен простой метод получения тритерпеновых 1,2-транс-гликозидов путем гликозилирования тритерпеноидов пер-О-ацетатами моносахаридов при активации SnCl4 в смеси ацетонитрила-дихлорэтана в присутствии молекулярных сит.
6. Среди новых тритерпеновых производных выявлены вещества, обладающие гепатопротекторной, противоязвенной и анти-ВИЧ-1 активностью.
1. Круганова Е.А. Обзор видов родов Glycyrrhiza L. и Meristotropis Fisch. etMey.// Тр. БИНАН СССР Сер.1.- 1955.- Т. 11.- С. 164-167.
2. Круганова Е.А. К систематике и географии рода Glycyrrhiza L. // Вопросы изучения и использования солодки в народном хозяйстве СССР. Л.-Наука.- 1966.- С.19-26.
3. Амирова Г.С., Кирьялов Н.П. К хемотаксономии родов Glycyrrhiza L. и Meristotropis Fisch. et Меу флоры СССР. ИЖурн. общ. биологии- 1999.- Т.1.-№2.-С. 184-188.
4. Аммосов А.С., Литвиненко В.И. Фенольные соединения родов Glycyrrhiza L. и Meristotropis Fish, et Меу. // Растит, ресурсы.- 1995.- Т. 31.-№3.-С. 116-144.
5. Деканосидзе Г.Е., Чирва В .Я., Сергиенко Т.В. Биологическая роль, распространение и химическое строение тритерпеновых гликозидов. Тбилиси. 1984. 67 с.
6. Аммосов А.С., Литвиненко В.И. Тритерпеноиды растений родов Glycyrrhiza L. и Meristotropis Fisch. et Меу. // Хим.-фармацевт. ж- 2003.- Т. 37.-№2.-С. 31-42.
7. Толстиков Г.А., Шульц Э.Э., Балтина Л.А., Толстикова Т.Г. Солодка. Неиспользуемые возможности здравоохранения России. // Химия в интересах устойчивого развития.- 1997.- № 5.- С.57-73.
8. Shibata S. A Drug over the Millennia: Pharmacognosy, Chemistry, and Pharmacology of Licorice.// J. Pharm. Soc. Japan.- 2000.- Vol.120.- No. 10.-P.849-862.
9. Hostettmann K., Marston A. Saponins. Cambridge university Press. 1995. 548 p.
10. Bader G., Hiller K. Neue Ergebnisse zur Struktur und Wirkungsweise von Triterpensaponinen. HPharmazie.- 1987.- Vol. 42.-№. 9.-P. 577-597.
11. Shopke Th., Hiller K. Triterpenoid saponins. // Pharmazie.- 1990.-Vol.45.- No. 5.- P. 313-342.
12. Степанова Э.Ф., Сампиев A.M. Состояние исследований и перспективы использования травы солодки голой.// Хим.-фармацевт. ж.-1997.- Т. 31.-№ 10.-С. 39-43.
13. Толстиков Г.А., Балтина Л. А., Шульц Э.Э., Покровский А.Г. Глицирризиновая кислота.// Биоорган, химия 1997.- Т. 23.- № 9.- С. 691-709.
14. Чирва В.Я., Сергиенко Т.В. Тритерпеновые гликозиды видов порядка Fabales.// Растит, ресурсы 1988.- Т. 24,- № 2.- С. 281-298.
15. Pfaff С. System der Materia medica nach chemischen Prinzipien. Leipzig. 1808 p.
16. Tschirch A., Gederberg H.// Arch. Pharm,-1907.-Vol.97.-P.-245.
17. Ruzicka L., Jeger O., Ingold W. Neuer Beweis fur die verschiedene Lage der Carboxylgruppe bei der Oleanolsaure und der Glycyrrhetinsaure. // Helv. Chim:. Acta.- 1943.- Vol.26.- P. 2278-2282.
18. Djerassi C., Osieski J., Closson W. Optical rotatory dispersion studies. XXV. Effect of carbonyl groups in pentacyclic triterpenes. // J. Amer. Chem. Soc-1959.- Vol.81.- No. 17.- P.4587-4600.
19. Beaton J.M., Spring F.S. Triterpenoids. Part XLII. Configuration of carboxyl group in glycyrrhetinic acid. // J. Chem. Soc- 1955.- No. 9.- P.3126-3129.
20. Corey E.J., Cantrall E.W. Proof of the structure and stereochemistry of a-amirin bu suntheis from a P-amirin derivative glycyrrhatic acid. // J. Amer. Chem. Soc.- 1959.-Vol.81.-No. 17.- P. 4587-4600.
21. Takeda K. Glycyrrhetic acid. // J. Pharm. Soc. Jap.- 1938- Vol. 58.-P. 731-738.
22. Райкова Д.П., Аврамова С.М. Метод за получаване на чиста 180-глицирретинова кислицина. // Фармация.- 1986.- Т. 36.- № 3.- С. 6-10.
23. Муравьев И.А., Савченко JI.H. Получение глицирретиновой кислоты из экстрактов солодкового корня. //Хим.-фармацевт, ж 1979.- Т. 13.- № 5.-С. 97-102.
24. Савченко JI.H. Интенсификация процесса гидролиза моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты. // Химия прир. соед.-1978.-№4.- С. 531-532.
25. Koch V.H., Steinegger Е. Untersuchungen zur Hydrolyse der Glycyrrhizinsaure. // Pharm. Acta Helv.- 1980,- Bd. 55.- N. 4.- S. 93-96.
26. Лазурьевский Г.В., Терентьева И.В., Шамшурин A.A. Практические работы по химии природных соединений. // Наука.- Москва. 1961. 106 с.
27. Балтина Л.А., Флехтер О.Б., Путиева Ж.М., Кондратенко P.M., Краснова Л.В., Толстиков Г.А. Гидролиз Р-глицирризиновой кислоты. // Хим.-фарм. журн. 1996. - № 4. - С.47-49.
28. Beaton J.M., Spring F.S. The Isolation and Characterization of Glabric Acid, a New Triterpenoid Acid from Liquorice Root. // J. Chem. Soc- 1956,- No. 7.- P. 2417-2419.
29. Белоус B.H., Матюхина Л.Г., Рябинин A.A. Ураленовая кислота. // Журн. общ. химии- 1965.- Т. 35.- № 2.- С. 401.
30. Игнатов Д.В., Прокофьев Ю.И., Игнатова О.М., Тимофеев В.П., Медведева Н.В., Мишарин А.Ю. Простой метод получения 18а-глицирретиновой кислоты и ее производных. // Биоорган, химия. 2003. -Т.29. - № 4. - С.429-433.
31. Кирьялов Н.П., Богаткина В.Ф., Баркаева Е.Ю. Тритерпеноиды корней Glycyrrhiza uralensis. II Химия прир. соед 1974.- Т. 10.- № 1.- С. 102103.
32. Kitagawa I., Hori К., Sakagami М., Zhou J.-L., Yoshikawa M. Saponin and Sapogenol. XLVIII. On the Constituents of the Roots of Glycyrrhiza uralensis
33. Fischer from Northeastern China. (2). Licorice-saponins D3, E2, F3, Y2, H2, J2, and K2. // Chem. Pharm. Bull- 1993.- Vol. 41.- No. 8.- P. 1337-1345.
34. Кирьялов Н.П., Богаткина В.Ф., Надежина Т.П. 24-оксиглицирретовая кислота из корней Glycyrrhiza Korshinskyi. // Химия прир. соед.- 1972.- № 3.- С. 395-396.
35. Elgamal М.Н.А., Fayez М.В.Е. The structure of glabric acid, a further triterpenoid constituent of Glycyrrhiza glabra L. I I Acta Chim. (Budapest).- 1968.-Vol. 58.-No. 1.- P. 75-84.
36. Canonica L., Danieli В., Russo G., Bonati A. Triterpenes from Glycyrrhiza glabra. IV. 18a-Hydroxyglycyrrhetic acid. // Gazz. Chim. Ital.- 1967.-Vol. 97.- No. 5.- P. 769-786. // Chem. Abstr.- 1968.- V. 68.- 13206a.
37. Van C. Hulle, Braeckman P., Vanderwalle M. Impurities in glycyrrhetic acid. II Pharm. Weekbald.- 1971.- Vol.106.- No. 25.- P. 501-505. //Chem. Abstr.-197L- Vol. 75.- 67423g.
38. Elgamal M.H.A., Fayez M.B.E., Shatzke G. Constituents of local plants.
39. VI. Liquoric acid, a new triterpenoid from roots of Glycyrrhiza glabra L. // Tetrahedron.- 1965.- Vol. 21.- P. 2109-2115.
40. Kanaoka M., Iano S., Kato H. Preparation of 3a-3H.-3p-Hydroxy-18p-and 3a- Hydroxy-18ф and a)- glycyrrhetic Acid and Radioimmunjassae of Glycyrrhetic Acid. // Chem. Pharm. Bull.- 1988.- Vol. 36.- No. 9.- P. 3264-3270.
41. Shen F.-J., Ни Т.- F., Yu Ya-Ch., Xu Zh.-D. Studies on chemical constituents of G. uralensis Fish. // Chem. J. Chin. Univ.- 1995.- Vol. 16.- No. 4.-P. 572-574.
42. Толстиков Г.А., Горяев М.И. Глицирретовая кислота. Алма-Ата.-Наука (Каз. ССР). 1966. 93 с.
43. Price K.R., Johnson J.T., Fenwick P. The chemistry and biologycal significance of saponins in foods and feedingstruffs. // C.R.C. Crit Rev. Food. Sci. Nutr.- 1987.- Vol. 26.- No. 1.- P. 27-135.
44. Shu J., Zhao J., Zhang R. Isolation and structural identification of triterpene sapogenins from Glycyrrhiza uralensis Fisch. // Jaoxue Xuebao- 1985.-Vol. 20.-№3.- C. 193-197.
45. Kitagawa I., Zhou J.-L., Sakagami M., Tamiyama Т., Yoshikawa M. Licorice-saponins A3, B2, C2, D3 and E2, five new oleanene- type triterpene oligoglycosides from Chinese Glycyrrhizae Radix. // Chem. Pharm. Bull 1988.-Vol. 36.- No. 9.- P. 3710-3713.
46. Кирьялов Н.П., Богаткина В.Ф. Структура глабровой кислоты. -// Химия прир. соед- 1975.- № 1.- С. 105-107.
47. Canonica L., Russo G., Bombardelli E. Triterpenes of Glycyrrhiza glabra. II. Liquiritic acid. IIGazz. Chim. Ital.- 1966.- Vol. 96.- No. 6.- P. 833-842. // Chem. Abstr.- 1966.- Vol. 65.- 15435f.
48. Kun Z., Li-Ning C., Ru-Yi Z. Структурная идентификация инфласапонина III и инфласапонина V. // Yaodeng Xuexiao huaxun xuebao = Chem. J. Chin. Univ.- 1994.- Vol. 15.- No. 6.- P. 845-848.-РЖХим.- 1995.- 23 E 81.
49. Zeng L., Zhang R.Y., Wei P., Wang D., Gao C.Y., Lou Z.C. New triterpenoidal sapogenins from the Glycyrrhiza yunnanensis. // Yao Hsuch Hsuch Pao (Acta Pharm. Sinica).- 1990.- Vol. 25.- No. 7.- P. 515-521. Chem.Abstr.-1991.- Vol. 114.- 20975x.
50. Zeng L., Zang R.-Y., Wang D., Lou Z.-G. Two triterpenoids from roots of Gl. yannanensis. // Phytochemistry.- 1990.- Vol. 29.- No. 11.- P. 3605-3609.
51. Canonica L., Russo G., Bombardelli E. Triterpenes of Glycyrrhiza glabra. I. Two new Lactones with an oleanane structure. // Gazz. Chem. Ital- 1966.- Vol. 96.- P. 772 785. // Chem. Abstr.- 1966.- Vol. 65.- 15435b.
52. Кирьялов Н.П., Богаткина В.Ф., Надежина Т.П. Глабролид из корней Glycyrrhiza aspera. IIХимия прир. соед- 1973.- № 2.- С. 277.
53. Canonica L., Danieli В., Manitto P., Russo G., Russo G., Bombardelli E. Triterpeni della Glycyrrhiza glabra Nota V. Glicirretolo e 21a— idrossiisoglabrolide. // Gazz. Chim. Ital.- 1967.- Vol. 97.- P. 1347-1358.
54. Canonica L., Danieli В., Manitto P., Russo G. Triterpenes of Glycyrrhiza glabra. III. Structure of isogabrolide. // Gazz. Chim. Ital.- 1966.- Vol.96.- No. 6.-P. 843-851. // Chem. Abstr.- 1966. V. 65.- 15436b.
55. Shu Y., Zhang R., Zhao Y., Zhang I., Tong W. Isolation and structure determination of new triterpene sapogenins from Glycyrrhiza uralensis Fisch. // Yaoxue Xuebao- 1987.- V. 2217.- P. 512-514. // Chem. Abstr.- 1987.- V. 107.-214819a.
56. Jia Q., Wang В., Shu Y.H., Zhang R.Y., Gao C.Y., Qiao L., Pang J.H. The structure of glyuranolide, a new treterpens of Glycyrrhiza uralensis Fisch. //
57. Yaoxue Xuebao.- 1989.- V. 24.- No. 5,- P. 348-352. I/ Chem. Abstr.- 1989.- V. 111.- 228990u.
58. Толстиков Г. А., Ирисметов М.П. Исследование реакций глицирретовой кислоты и перспективы применения ее производных в качестве лекарственных средств. // Изв. АН Каз.ССР, Сер. Хим. 1984.- № 4.-С. 53-61.
59. Горяев М.И., Ирисметов И.П., Толстиков Г.А. Исследования синтетических превращений стероидного алкалоида соласодина и тритерпеноида глицирретовой кислоты. // Изв. АН Каз.ССР, Сер. Хим1977.- №46.- С. 42-55.
60. Ванштоне А., Маиле Г. Новые производные глицерретиновой кислоты. // Заявка 21-40809, Великобритания. // РЖХим.- 1985.-№ 12.- О 208П.
61. Накано С., Мисима М., Сибата С., Нагата Н. Промотор чрескожного всасывания и капли для назального применения на его основе. // Заявка 1233230. Япония. II РЖХим.- 1990.-210106П.
62. Накамура Й., Мураками А., Исида С., Мураками К.Способ получения стерилглицирренатов. // Заявка 61-151155. Япония. // РЖХим- 1987.-140142П.
63. Liu К. Ch., Lee L. Ch., Kong W.H.,Hsieh T.T. Synthesis and evaluation the antiulcer agent disodium glycyrrhetic acid succinate. // Yao Tsuch Tsa Chin1978.-Vol. 30.-№ 2.- P. 69-72.
64. Wang С., Han Y., Liu W., Shu Y., Zhang R. The Synthesis of Clycyrrhetinic Acid Dervatives. // Youji Huaxue.-I990.-Vol 10.-P. 520-524.
65. Wang C., Han Y., Liu W., Zhang R. The Synthesis of 11-Deoxoglycyrrhetinic Acid Dervatives. // Youji Huaxue.-1996.-Vol. 16.-P. 189-192.
66. Inoue H., Kurosu S., Takenchi Т., Mori Т., Shibata S. Glycyrrhetic acid derivatives: antinocicepnive activity of deoxyglycyrrhetol dihemiphthalate fnd the related compounds. // J. Pharm. Pharmacol.- I990.-Vol. 42.- No. 3.- P. 199-200.
67. Артамонов А.Ф., Нигматуллина Ф.С., Ирисметов М.П., Джиембаев Б.Ж. Синтез а-моноглицеридов тритерпеновых кислот и их цитратов. // Химия прир. соед-1999.-Ш 6.-С. 746-750.
68. Куронр М., Унно Й., Кимура X., Ока М., Хасэгава К., Икэда С. Производные глицирретиновой кислоты, получение и противоязвенные-лекарственные препараты на их основе. Заявка 63-135351, Япония. // РЖХим,- 1990.- № 17.- О 109П.
69. Далимов Д.Н., Джураев А.Ж., Камаев Ф.Г. Синтез некоторых амидов З-О-ацетил-18-рН-глицирретовой кислоты. II Химия прир. coed.-200l.-N2 2.-С. 129-131.
70. Кондо Я., Икэда Т. Способ получения производных глицирретиновой кислоты, обладающих противовоспалительной и противоаллергической активностью. // Пат. 4910504, Япония. // РЖХим.- 1974.- № 22.- Н 466П.
71. Hess H.J., Nelson R.P. 18P-glycyrrhetinic acid amides useful as antiulker agents. //Pat. 3.859.328, US. // Chem.Abstr.- 1975.- Vol. 83.- 43547q.
72. Толстиков Г.А., Балтина JI.A., Сердюк Н.Г. Глицирретовая кислота. // Хим.-фармацевт. Die.- 1998.- Т. 32.- № 8.- С. 5-14.
73. Толстиков Г.А., Халилов Л.М., Балтина Л.А., Кондратенко P.M., Панасенко А.А., Васильева Е.В. Спектры ЯМР13 С ряда пента- и гексациклических тритерпеноидов производных глицирретовой кислоты. // Химия прир. соед,- 1985.- № 5.- С. 645-653.
74. Soo-Jong Um., Myoung-Soon Park., Si-Ho Park., Hye-Sook-han., Young-Ya Kwon., Hong-Sig Sin. Syntehsis of Glycyrrhetinic Acid Derivatives and Their Effects on Tyrosinase Activity.// Biorg. Med. Chem.-2003.--Vol. 11.-P.-5345-5352.
75. Puri S.C., Dhar K.L., Atal C.K. Synthesis of 3,11- dioxo- 3a- aza- A-homo- 12- oleanen- 30- oic acid. // Indian J. Chem. Sect.- 1977.- Vol. 15B.- No. 10.- P. 917-918.
76. Толстиков Г.А., Алибаева X.A., Горяев М.И. Тритерпеноиды. XVII. Жур. орг. хим. 1969. - Т.5. - Вып. 9. - С. 1625-1630.
77. Алибаева Х.А., Ким Х.О., Горяев М.И., Ирисметов М.П. Бекмановская перегрупировка амидов глицирретовой кислоты. // Изв. АН Коз.ССР.Сер. Хим.- 1975.- Т. 25.- № 6. С. 39-42.
78. Ирисметов М.П. Синтез и биологическая активность производных глицирретовой кислоты, соласодина и диосгенина. Дисс. . д-ра хим. наук. -Алматы. 1993.
79. Raventos Т., Villa J., Hunter R., Bonet J. I. Synthesis del 2,11- dioxo-23A- bisnor- 18p- olean- 3(5)- 12- dien- 30- oato de metilo. // Afinidad.- 1982.-Vol. 39.- No. 382.- P. 519-520.
80. Raventos Т., Campov J., Riera L., Bonet J. I. Sinthesis de derivados dtl acido 18P" glicirretico pjtencialmente hidrosolubles. // Afinidad- 1984.- Vol. 41.-No. 391,-P. 293-294.
81. Nishino H., Shibata Sh., Hirabayashi K., Iwata S. Antitumor- promoting activity of glycyrrhetinic acid- related compounds. // Kyoto-furitsu Ika Daigaki Zosshi.- 1986.- Vol. 95.-No. 2.-P. 1563-1566.
82. Pellegata R., Pinza M., Pifferi G., Farina C. A new reduction of the enone system of 18P-glycyrretic acid. // Organic preparations and procedures int.-1999.-Vol. 31.-№ 2.- P. 181-187.
83. Толстиков Г.А., Алибаева X.A., Потапов B.M. О некоторых А-тринорпроизводных глицирретовой кислоты. И ЖОрХ.- 1969.- №5.- С. 16311635.
84. Baran I.S., Langford D.D., Liang C.D., Pitzele B.S. Synthesis and biological activities of substituted glycyrrhetic acid. // J. Med. Chem 1974.- Vol. 17,-P. 181-190.
85. Гаянов P.X., Ким X.O., Ирисметов М.П., Горяев М.И. О взаимодействии глицирретовой кислоты с озоном. // ЖОрХ.- 1977.- Т. 13.- № 4.- С. 895.95. www.aldera.ru96. www.mosmedclinic.ru97. www.medexfol.ru98. www.lekarstva.ru
86. Gottfried S., Baxendale L. Glycyrrhetinic acid derivatives. // Pat. 843133, Br .// Chem.Abstr I960.- V. 55.- 2027L
87. Parke D.V. The Biochemical Pharmacology of carbenoxolone, its possible mechanism of action. II Acta gastroenterol. Belg- 1983.- Vol. 46.- P. 437447.
88. Farina C., Pinza M. Pifferi G. Synthesis and anti-ulcer activity of new derivatives of glycyrrhetic, oleanolic and ursolic acids. IIII Farmaco.- 1998.-Vol. 53.- P. 22-32.
89. C.Capra. Antiinflammatory activity of sodium succinylglycyrrhetate and sodium succinylliquiritate. // Fitoterapia- 1966.-Vol.37.-N 3.-P.80-84.
90. Capasso F., Mascolo N., Autor G., Duraccio M.R. Glycyrrhetinic acid, leukocytes and prostaglandines. II J. Pharm. Pharmacol.- 1983.- Vol. 35.- No. 5.-P. 332-335.
91. Inoue H., Inoue K., Takeuchi Т., Nagata N., Shibata Sh. Inhibition of rat inflammatory paw oedema by dihemiphtalate of glycyrrhetinic acid derivatives: comparison with glycyrrhetinic acid. // J. Pharm. Pharmacol.-1993.- Vol.45.-P.1067-1071.
92. H.Inoue, T.Mori, Sh. Shibata, Y.Koshima. Modulation by glycyrrhetinic acid derivatives of TPA-induced mouse ear oedema. // Br. J. Pharmacol.- 1989.-Vol.96.- P. 204-210.
93. Ирисметов М.П. 18-Дегидроглицирретовая кислота новое противовоспалительное средство.// Изучение и использование солодки в народном хозяйстве СССР. -Алма-Ата.- Гылым.- 1991.- С. 169-170.
94. Гаммерман А.Ф. Применение солодки в медицине народов Востока. // В сб. "Вопросы изучения и использования солодки в СССР". Москва-Ленинград. Наука. 1966. С.15-18.
95. Gheorghiu Th., Frotz H., Klein H. Experimental and clinical studies of the mechanism of the effect of carbenoxolone. I. Effect of carbenoxolone on gastric-juice mucusecretion in rats. // Verh. Deut. Ges. Inn. Med-1911.-Vol.77.-P.511-515.
96. Dajani E., Bianchi R., Casler j., Weet J. Gastric antiulcer and antisecretory effects of carbenoxolon, aldosterone and desoxycorticosterone in rats. II Arch. Int. Pharmacodyn.- 1979.-Vol. 242.-P.128-138.
97. Baron J. Effect of carbenoxolone sodium on human gastric acid secretion. // Gut. 1977. - Vol. 18.-P. 721 - 722.
98. Оболенцева Г.В., Литвиненко В.И., Амосов A.C., Попова Т.В., Сампиев A.M. Фармакологические и терапевтические свойства препаратов солодки. //Хим.-фармацевт. ж 1999.- Т. 33.- № 8.- С. 24-31.
99. Савченко Л.Н., Маринина Т.Ф, Муравьев И.А. Исследования в области технологии мягких лекарственных форм глицирретовой кислоты. // В сб. «Изучение и использование солодки в народном хозяйстве СССР».-Алма-Ата: Гылым. 1991. С. 136-139.
100. Мельникова В.С, Карагезян К.М. Динамика гистоморфологических изменений кожи морских свинок с контактным аллергическим дерматитом при лечении глицирретовой кислотой и преднизолоном. // Вестн. дерматол. и венерол.- 1980.- № З.-С. 24-29.
101. Veyron H., Giustiniani V. Use of glycyrrhetinic acid as a cicatrizant. // Eur. Pat. 275222, 1988. // Chem. Abstr.-1988.- Vol. 109.-21604If.
102. Муравьев И.А., Савченко JI.H. Разработка технологии производства глициррената и его лекарственных форм. // Материалы III Симпозиума по изучению и использованию солодки в народном хозяйстве СССР. Ашхабад. 198 8.С. 115-116.
103. Вичканова С.А, Рубинчик М.А. Противотрихомонадные свойства препарата глициррената натрия из Glycyrrhiza glabra L. // В сб. «Вопросы изучения и использования солодки в СССР». Москва-Ленинград. Наука. 1966. С. 176-179.
104. El-Gamal М., Abd Е., Falez К., Hegazi A., Ata N. Synthesis of some glycyrrhetinic acid sulfonamide derivatives with prospected antimicrobial activity. //Qatar Univ. Scl J.-1994.- N 14 (Spec. Issue)- P.147-153.
105. Суягина И.В. Изменения в индексе метаболизма липидов под действием глицирретината при экспериментальной гиперлипемии. // Биол. Науки. Москва.- 1982.- № 8.- С. 47-50.
106. Скульте И.В., Василенко Ю.К., Пономарев В.Д. К характеристике активности глицирама и глицирената при экспериментальном атеросклерозе. //Биол. Науки. -Москва,- 1982.- № 10.- С. 56-60.
107. Василенко Ю.К., Пономарев В.Д., Оганесян Э.Т. Сравнительное исследование гиполипидемических свойств тритерпеноидов. // Хим.-фармацевт. ж 1981.- № 5.- С. 50-53.
108. Василенко Ю.К., Мезенова Г.Д., Шульц И.В., Козарский В.В. Сравнительное исследование гиполипидемической активности ряда препаратов солодки. // Изв. Северо-Кавказского научного центра Высшей школы. -Естеств. Науки.- 1984.- № 4.- С. 83-87.
109. E.De Clerq. New selective antiviral agents active against the AIDS virus. //Trends Pharmacol. Sci. 1987.- Vol.8.- N 9.- P.339-345.
110. Закиров Н.У., Айзиков M.H., Курмуков А.Г. Кардио протекторное действие 18-дегидроглицирретовой кислоты при экспериментальном повреждении миокарда.// Экспер. клин. фарм. -1999.-Т.62.-№ 2.-С.19-21.
111. Ирисметов М.П., Абдикалиев Н.А., Поминова Н.М., Северова Е.А. Средство для лечения воспалительных процессов в миокарде. Заявка на предпатент РК № 2002/0569.1, приоритет от 21.10.2002. Решение о выдаче патента РК от 21.10.2002.
112. Shim S.B., Kim NJ., Kim D.H. Beta-glucuronidase inhibitory activity and hepatoprotective effect of 18p-Glycyrrhetinic acid from the rhizomes of Glycyrrhiza uralensis.// Planta Med.- 2000.- Vol. 66.- No. 1.- P. 40-43.
113. Miura N., Matsumoto Y., Miyairi S., Naganuma A. Protective effect of triterpene compounds against the cytotoxicity of cadmium in Hep G2 cells.// Molecular Pharm.Л999.-Vol 56.-№ 6.-1324-1328.
114. Yamaguchi Т., Watanabe T. Effect of triterpenes on the mutagenicities of various mutagenes toward Salminella. //Agric. Biol. Chem.- 1984.- Vol.48.- N 12, P.3137-3139.
115. Mori Т., Kobayashi K., Sugiya Y. Effects of oral administration of glycyrrhizin 'and its combinations on urine volume and electrolyte metabolism in rats. //Oyo Yakuri.- 1987.- Vol.34.- № 3.- P. 293-301. // Chem. Abstr.- 1988.- Vol. 108.- 493 07t.
116. MacKenzie M.A., Hoefnagels W.H., Jansen R.W., Benraad ThJ., Kloppenborg P.W. The influence of glycyrrhetinic acid on plasma Cortisol and cortisone in healthy young volunteers. // J. Clin. Endocrinol. Metab- 1990.-Vol.70.- № 6.- P.1637-1643.
117. Vam Uum N., Walker В., Hermus M., Sweep C., Smits P., Leeuw P., Lenders J. Effect of glycyrrhetinic acid on 11-beta-hydroxysteroid dehydrogenase activity in normosensitive and hypertensive subjects.// Clin Science.-2QQ2.-Vo\. 102.-№ 2.- P. 203-211.
118. Koyama K., Krozowski Z. Modulation of 11- beta- hydroxysteroid type 2 activity in ishikawa cells is associated with changes in cellular proliferation.//144
119. Mol. Cell Endocrinol,-2001.-Vol. 183.-№ 1-2.-P. 165-170.
120. Soro A., Panarelli M., Holloway C., Fraser R., Keyon C. In vivo and in vitro effects of carbenoxolon on glucocorticoid receptor binding and glucocorticoid activity.// Steroids.-1997.62.-P. 388-394.
121. Bielenberg J. Licorice can also induce intoxications. // Pharm. Ztg-1989.- Vol. 134.- № 49. p. 9-12.
122. Hiroshi H., Toshihiko H., Kitaro O. Therapeutic effect of glycyrrhetinic acid in MRL lpr/lpr mice. Implications of alteration of corticosteroid metabolism.// Life Sciences.-2Ш.-Vol. 69.-P. 2429-2438.
123. Sakamoto K., Wakabayashi K. Inhibitory effect of glycyrrhetinic acid on testosterone production in rat gonads.// Endocrinol. Jpn- 1988.- Vol.35.- № 2.- P. 333-342.
124. Lin I., Hau D., Chen W., Chen K., Lin G. Effects of Glycyrrhizae and. Glycyrrhizic acid on cellular immunocompetence of gamma-ray-irradiated mice.// Chinese Med. J.-1996.-Vol. 109.-№2.-P. 138-142.
125. Lin I., Hau D., You J., Huang H., Chen K., Chiou Y. Effects of Glycyrrhizae and Glycyrrhizic acid on cellular immunocompetence in low -dose gamma-ray irradiated mice.// ChangGung Memorial Hospital- 1999.-Vol. 22.-Ж-3.-P. 370-377.
126. Tsuda H., Okamoto H. Elimination of metabolic cooperation by glycyrrhetinic acid, an antitumor promoter, in cultured Chinese hamster cells. // Carcinogenesis.- 1986.- Vol.7.- № 11.- P.1805-1807.
127. Kitagawa К., Nishino H., Iwashima A. Inhibition of the specific binding of 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate to mouse epidermal membrane fractions by glycyrrhetic acid. //Oncology.- 1986.- Vol.43.- № 2- P.127-130.
128. Logemann W., Laurria F. Antileukaemic activity of glycyrrhetinic acid.// Nature-1960.-Vol. 187.-P. 607-608.
129. Rui H. Research and development of cancer chemiprotective agents in China. II J. Cellular Biochem. Supplement.-1997.-Vol. 27.-P. 7-11.
130. Konoshima Т., Takasaki M., Tokuda H., Masuda K., Arai Y., Shiojima K., Agenta H. Antitumor promoting activities of triterpenoids from ferns. II J. Biol. Pharm. Bull.- 1996.-Vol. 19.-p. 962-965.
131. Nishino H., Hirabayashi K., Iwata S., Shibata Sh. Antitumor-promoting activity of 18a-olean-12-ene-3p,23,28-triol. //J. Kyoto Pref. Univ. Med.- 1988.-Vol. 97.-№7.- P. 911-915.
132. Шваров И.Ф., Коновалова H.K., Путилова Т.И. Влияние тритерпеноидных соединений из солодки голой на экспериментальные опухоли. // В сб. «Вопросы изучения и использования солодки в СССР».-Москва-Ленинград.-Наука.- 1966.- С. 167-170.
133. Государственная фармакопея СССР X. Мин-во здравоохранения СССР. М.: Медицина.- 1990. -390с.
134. Dioxoglycyrrhetic acid. // Пат. 5970638, Japan.-1984. HChem. Abstr.-101.-1715662t.
135. Мустафина С.Р. Синтез новых биологически активных производных глицирризиновой кислоты. Дисс. кан.хим.наук. Уфа.-2001.-195 с.
136. Yoshida K., Furihara K., Yamane H., Omori T. Metabolism of 18p-glycyrrhetinic acid in Sphingomoas paucimobilis strain G5. // Biotechnology Leti2001.-Vol. 23.-P. 253-258.
137. АН M.S., Jahangir М., Hussan S.S.,Choudhary M.I. Inhibition of a-glucosidase by oleanolic acid and its synthetic derivatives. // Phy to chemistry.2002.-№ 60.-P. 295-299.
138. Толстиков Г.А., Горяев М.И., Толстикова Л.Ф. Тритерпеноиды IV. О некоторых реакциях 18рН- и 18аН-метилглицирретатов в кольце А. // Синтез природных соединений их аналогов и фрагментов.965.-С.91-95.
139. Boar R.B. Jokhadar L., De Luque M., Mc Ghie J.F. On the reported transformation of (3-amyrin into oleanolic acid. // J. Chem. Soc.Perkin 7.-1977.-P.2104-2109.
140. Farina C., Pinza M., Synthesis of new 12-oxo derivatives of oleanolic acid with 13a configuration. // Gazz. Chim. 7ta/.-1987.-Vol.l 17.-P. 561.
141. Zhu Y.-M., Shen J.-K., Wang H.-K., Cosentino L.M., Lee K.-H. Synhesis and anti-HIV activity of oleanolic acid derivatives. IIBioorg. Med. Chem. Lett.-2001 .-Vol. 11 .-P. 3115-3118.
142. Klinot G., Vystrcil A. Beckmansche umlagerung von triterpen-3-ketoximen. // Coll. Chem. Comm.- 1962.-Vol. 27,- №2.-P. 336-377.
143. Carman R.M., Cowley D. The structure of nyctanthic acid. // Austr.J. Chem-1965.-Vol. 18.-№5.-P. 213-217.
144. Whitman G.N. The structure of nyctanthic acid. // // J. Chem. Soc. -1960.-Vol. 5.-P. 2016-2020.
145. Stevenson R. Friedelin and related compounds. VI. Azahomofriedelanes. 11 J. Org. Chem.-1963.-Vol. 28.-№ l.-P. 188-190.
146. Zaprutko L., Partyka D.JBednarczyk-Cwynar B. Triterpenoids. Part 21: Oleanolic acid azaderivatives as percutaneous transport promoters. IIBiorg. Med. Chem. Lett.-2004.-V. 14.-№ 18.-P. 4723-4726.
147. Honda Т., Gribble G.W. Design and synthesis of 23,24-dinoroleanolic acid derivatives, novel triterpenoid-sterod hybrid molecules. // J.Org. Chem-1998.-V. 63.-№14.-P. 4846-4849.
148. Honda Т., Finlay H.J, Gribble G.W., Sun N., Sporn M.B. New enone derivatives of oleanolic acid and ursolic acid in inhibitors of nitric oxide production in mouse macrophages. // Biorg. Med. Chem. Letf.-1997.-Vol. 7.-№. 13.-P. 1623-1628.
149. Tapondjon L.A., Ngonou F.N., Lontsi D., Sondengman B.L., Connoly J.D. // Tetrahedron-1998.-Vol. 54.-2099-2010.
150. Sejbal J., Homolova I., Tislerova V., Kreck V. Preparation and conformational analysis of 1,2-seco derivatives of 19p,28-epoxi-18-oleanane. //Collect. Czech. Chem.Commun.-2000.-Vol.65.-P. 1339-1356.
151. Толстиков Г. А., Алибаева X. M., Потапов В. М. XIX. О некоторых А-триснорпроизводных глицирретовой кислоты. // ЖОрХ. 1969. - Т. 5. -Вып. 9.-С. 1631-1635.
152. Медведева Н.И., Флехтер О.Б., Gzella A., Zaprutko L. Строение минорного продукта озонолиза 19р,28-эпокси-А-нео-18а-олеан-3(5)-ена. // Химия прир. соед.-2006.- Т.-42.-№ 5.-С. 499-500.
153. Seebacher W., Simic N., Weis R., Kunert O. Spectral Assignments and reference Data. UMagn. Res. Chem.-2003.-Vol.41.-P. 626-638.
154. Sammers M.F., Marzilli L.G., Bax A. Complete 1H and, 13H С assignments of coenzyme through the use of new two dimensional NMR experiments. // J.Am.Chem. Soc.-1986.-Vol. 108.-P. 4285-4294
155. Buxton P.C., Marples B.A., Toon R.C., Waddinngton V.L. Selective dimethyldioxirane oxidation of bile acid methyl esters. //Tetrahedron Lett-1999.-Vol. 40.-P. 4729-4732.
156. Ashavina O.Yu., Kabalnova N.N., Flekhter O.B., Spirikhin L.V., Galin F.Z., Baltina L.A., Starikova Z.A., Antipin M. Yu., Tolstikov G.A. Oxidation of betulin and its acetates with dimethyldioxirane. //Mendeleev Commun.-2004.-Vol. 14.-№ 5.-P.221-223.
157. Sparg S.G., Light M.E., Van Stenden J. // Biological activities and distribution of plant saponins. //J. Ethnopharm .-2004.-Vol. 94.-P.219-243.
158. Pie K., Chwalek M., Voutquenne-Nazabadioko L. Synthesis of a-Hederin, 5-Hederin, and related triterpenoid saponins. //Eur. J. Org. Chem.--2004.-P.1588-1603.
159. Cheng M.S. Yan M.C., Liu Y., Zheng L.G., Liu J. Synthesis of p-hederin and hederacolchiside Al: triterpenoid saponins bearing a unique cytotoxicity-inducing disaccharide moiety. HCarboh. Res.-2006.-Vol. 341.-P. 60-67.
160. Peng W., Su J., Lin F., Han. X., Yu B. Facile synthesis of Ginsenoside Ro. II Synlett.-2004.-P. 0259-0262.
161. Ullah N. Seebacher W., Weis R., Jurenitsch J., Rauchensteiner K., Haslinger E. Synthesis and hemolytic properties of Glycyrrhetic acid glycosides. IIMonatch. C7zew2.-2000.-Vol. 131.-P. 787-794.
162. Ullah N., Seebacher W., Haslinger E., Jurenitsch J., Rauchensteiner K., Weis R. Synthesis and hemolytic properties of lactosides of Glycyrrhetic acid derivatives.H Monatch. Chem.-2002.-Vol 133.-P. 139-150.
163. Saito S., Nagase S., Kawase M., Nagamura Y. Synthesis of Glycyrrhetic acid diglycosides and their cytoprotective activities against CC14-induced hepatic injury in vitro. IIEur. J. Med.Сhem.-1996.--Vol. 31.-P.557-574.
164. Methods in carbohydrate chemistry. V. I, II.IV,V. I/Ed by Roy L.W., Wolfrom M.L. Academic Press, New York, London, 1980, 1962-1965.
165. Chatterjee S.K. Nuhn P. Stereoselectve a-glycosidation using FeC13 as a Lewis acid catalyst. I I Chem. Comm.- 1998.-P. 1729-1730.
166. Mukaiyama Т., Talashima Т., Katsurada M., Aizawa H.A. A highly stereoselective synthesis of a-glucosides from 1-O-acetyl glucose by use of tin (IV) chloride-silver perchlorate catalyst system. // Chem. Lett.- 1991.-P. 533-536.
167. Флехтер О.Б. Стереоселективный синтез тритерпеновых и стероидных З-О-2-дезокси-гликозидов на основе гликалей. //Дисс. канд. хим. наук.-Уфа.-1996.-184 с.
168. Nose M., Ito M., Kamimira К., Shimizu M., Ogihara Y. A comparision of the antihepatotoxic activity between glycyrrhizin and glycyrrhetinic acids. // Planta Med- 1994.-Vol. 60.- P. 136-139.
169. Бышевский А.Ш., Терсенов O.A. Биохимия для врача. Екатеринбург: Уральский рабочий.-1994. 384 с.
170. Беленький M.JI. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. 2-е изд., перераб. и доп. Ленинград,- 1963.- 152 с.
171. О.А.Плясунова, И.Н.Егоричева, Н.В.Федюк, Л.А.Балтина, Ю.И.Муринов, А.Г.Покровский, Г.А.Толстиков. Изучение анти-ВИЧ активности (3-глицирризиновой кислоты // Вопросы вирусол-1992.- № 5-6.-С.235-238.
172. Гордон А.Дж., Форд Р.А. Спутник химика. М.: Мир.- 1976.- 543 с.
173. Методы химии углеводов. М.: Мир.- 1967. -512 с.
174. Ruzichka L., Marxer A. Triterpenes. XLIV. Conversion of glycyrrhetinic acid into P-amirin. //Helv. Chim. Acta.- 1939. Vol.-22.-P. 195-201.
175. Рябинин А.А., Коновалова H.E. Некоторые синтезы на основе глицирретовой кислоты. // Журн. общ. Химии 1962.-Vol.- 32.-№ 2.- Р. 644646.12 13
176. Von О. Jeger, W.Hofer. Zur Kenntnis der Triterpene. Uber das A ' -01eanen-ol-(30). //Helv. Chim. Acta.- 1948.- Vol. 31.-P. 157-160.
177. G.M.Sheldrick. SHELXTL. 5.10. Structure determination Sofware Suite, Bruker AXS. Madison, Wiskonsin.- USA.-1998.
178. Motoko M., Naohiko M., Fukase K., Yoko M., Shonosake Z. Synthesis of P-glycosides of glycyrrhetic acid. // J. Pharm. Soc. Jpn.- 1989.- Vol. 109.-P. 544-559.
