Выделение и строение силенана-пектина смолевки обыкновенной Silene vulgaris (Moench) Garcke тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

Введение

1. Литературный обзор

1.1. Строение клеточной стенки и роль пектинов в растениях

1.2. Определение пектиновых полисахаридов

1.3. Особенности экстракции пектиновых полисахаридов

1.4. Особенности структурного анализа пектиновых 13 полисахаридов

1.5. Главные элементы химической структуры пектиновых 24 полисахаридов

1.6. Единая структурная модель пектиновых полисахаридов

1.7. Физиологическая активность пектиновых полисахаридов

Пектинами называются полисахариды, имеющие главную углеводную цепь из ос-1,4-связанных остатков Э-галактуроновой кислоты. Они относятся к одному из широко распространенных классов растительных биогликанов (полисахаридов и гликоконъюгатов) - гликаногликуронанов [1, 2]. Пектины присутствуют практически во всех высших наземных растениях, ряде морских и пресноводных трав, причем они находятся в растениях как в растворимой, так и нерастворимой форме (протопектин) [3, 4].

Пектиновые полисахариды отличаются большим структурным разнообразием и содержат различные макромолекулярные фрагменты линейной и разветвленной областей [5, 6]. Сравнительно недавно выполнены структурные работы по частичной расшифровке строения некоторых фрагментов [7, 8]. Неоднократно делались попытки "обобщения накопленных данных в виде единой структурной модели пектинов [6, 9]. Тем не менее тонкая структура данных биополимеров остается изученной только в самых общих чертах. Отсутствует строгое доказательство ковалентной связи между нейтральными боковыми фрагментами и кором разветвленных областей. Поэтому для дальнейшего исследования особенностей химического строения пектиновых полисахаридов необходимо не только использование комплекса современных и классических методов, но и поиск новых подходов к структурному изучению этих сложных биополимеров.

Одной из причин недостаточной изученности пектиновых веществ является трудность выделения данных полисахаридов в нативном виде [10]. Долгое время исследования, посвященные методам экстракции пектинов, были связаны с проблемами промышленного получения [11]. Использование жестких условий экстракции растительного сырья приводит к значительной деградации неустойчивых гликозидных связей нейтральных углеводных цепей пектинов. Поэтому, несмотря на хорошие разработки в данном направлении, до сих пор остается актуальным совершенствование методов их получения.

Пектины известны богатым спектром полезных свойств, которые представляют значительный интерес для различных отраслей промышленности: пищевой, фармацевтической и парфюмерной [12, 13]. Благодаря способности образовывать устойчивые гели пектиновые вещества применяют в качестве студнеобразователей. Комплексообразующие свойства обусловливают их использование как природных детоксикантов.

Кроме того, пектины характеризуются высокой и многоплановой физиологической активностью [5]. В последние годы наибольший интерес исследователей привлекает иммуномодулирующее действие биополимеров данного класса [14, 15]. Для понимания механизма взаимосвязи физиологической активности и химических свойств пектиновых веществ на молекулярном уровне необходимо, выяснение не только главных элементов, но и особенностей тонкой структуры этих полисахаридов. На этом направлении привлекателен поиск новых физиологически активных пектинов и установление их строения для обнаружения структурных элементов, влияющих на проявление активности.

В качестве источника растительного сырья выбрана смолевка обыкновенная Silene vulgaris (Moench) Garcke (Oberna behen (L.) Ikonn) семейства Caryophyllaceae (гвоздичные) [16, 17], которая является широко распространенным в Европейской части России многолетним лекарственным растением и представляет собой нетрадиционный растительный источник пектиновых веществ. Известно, что отвар надземной части растения используется как диуретическое и отхаркивающее средство, наружно применяется при кожных заболеваниях и ревматизме [17, 18]. Из биологически активных соединений, содержащихся в растениях рода Silene, в том числе и в данном виде, внимание исследователей привлекали в основном тритерпеновые сапонины [19], в частности, силенозид [20, 21]; экдистероиды [22], органические кислоты, флавоноиды, дубильные ?

Тс* ft . слоты, флавоноиды, дубильные вещества, кумаринь: [16]. Известны работы, посвященные выделению и идентификации олигосахаридов из семян [23] и корней [24] смолевки обыкновенной.

При проведении скрининга полисахаридов растений европейского Севера России Отделе молекулярной иммунологии и биотехнологии полисахаридов Института физиологии Коми НЦ УрО РАН показано, что пектиновый полисахарид, выделенный из S. vulgaris и названный силенаном, стимулирует фагоцитоз [25]. При пероральном введении силенан усиливает кислородный метаболизм перитонеальных макрофагов, влияя на функциональную активность клеточных рецепторов. При этом его введение не приводит к изменению физико-химических свойств плазматической мембраны фагоцитов [26]. В экспериментах in vitro способность стимулирующего действия силе-нана на нейтрофилы крови и перитонеальные макрофаги состоит в усилении секреторной функции без изменения адгезивных свойств [27].

Таким образом, представляет значительный интерес и актуальность накопления информации о структурном разнообразии пектиновых полисахаридов, выяснение новых особенностей их тонкой химической структуры, дальнейшее развитие методов выделения и структурного анализа этих сложнейших биополимеров.

Настоящая работы посвящена получению и общей химической характеристике силенана, пектинового полисахарида из надземной части смолевки обыкновенной S. vulgaris, разработке эффективного выделения пектинов из цветковых растений, установлению общих закономерностей распределения углеводных цепей и особенностей тонкой структуры силенана.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР ПЕКТИНОВЫЕ ПОЛИСАХАРИДЫ

ВЫВОДЫ

1. Впервые из надземной части цветкового растения Silene vulgaris выделен пектиновый полисахарид, названный силенаном. Показано, что в его состав входят остатки галактуроновой кислоты, арабинозы, галактозы и рам-нозы в качестве основных компонентов. Силенан имеет низкую степень ме-токсилирования.

2. На примере силенана разработан общий эффективный метод выделения пектиновых полисахаридов из свежесобранного растительного материала, предварительно обработанного раствором формалина, с очисткой конечного продукта на колонках с полыми волокнами.

3. Установлено, что макромолекула силенана состоит из линейных и разветвленных областей. Линейная область представлена а-1,4-Б-галакто-пиранозилуронаном и а-1,2-рамно-а-1,4-Б-галактуронаном, который одновременно является главной углеводной цепью разветвленной области силенана - рамногалактуронана I.

4. С помощью метода метилирования и спектроскопии ЯМР показано наличие ковалентных связей между главной и боковыми углеводными цепями разветвленной области силенана, которые присоединены а-1,4-связью к остаткам рамнопиранозы кора и построены из остатков а-1,5-связанной ара-бинофуранозы и (3-1,3-, (3-1,4- и Р-1,6-связанной галактопиранозы. Точками разветвления боковых цепей являются остатки 3,5-ди-О-замещенной араби-нофуранозы и 2,3-, 3,6-, 4,6-ди-О-замещенной галактопиранозы.

5. В процессе изучения силенана получена принципиально новая дополнительная информация для базы данных по спектроскопии ЯМР пектиновых полисахаридов, которая может быть использована для структурного исследования пектинов из новых растительных источников.

2.5. Заключение

Таким образом, установлены основные элементы химической структуры силенана.

Выясненные особенности строения линейной и разветвленной областей данного пектина расширяют представление о тонкой структуре гликано-галактуронанов. Кроме того, на примере силенана доказано наличие кова-лентной связи между главной и .боковыми углеводными цепями пектиновых полисахаридов.

С этой целью, наряду с другими современными и классическими методами и походами структурной химии углеводов, широко использована двумерная спектроскопия ядерного магнитного резонанса. Полученные значения химических сдвигов сигналов моносахаридных остатков и олигосаха-ридных фрагментов силенана дополняют базу данных ЯМР пектиновых полисахаридов и расширяют возможности применения данного метода при исследовании родственных полисахаридов из новых источников.

Установленные структурные элементы макромолекулы силенана помогут в дальнейшем в выявлении структурных особенностей, ответственных за проявление физиологической активности растительных полисахаридов.

На примере смолевки обыкновенной разработан и запатентован эффективный способ выделения из свежесобранной надземной части цветковых растений пектиновых полисахаридов, обладающих иммуностимулирующим действием. Данный способ позволяет получать пектины с высоким выходом и с высокой степенью очистки.

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 3.1. Реагенты и материалы

В работе использовались следующие реагенты и материалы:

Полиакриламидный гель Bio-Gel Р-2, Р-4 (Bio-Rad Lab., USA), сефадекс G-25 (Pharmacia), сефакрил S-500 (Pharmacia), бумага для хроматографии Filtrak FN (Германия).

Все остальное реактивы категории «осч», «хч», «чда».

3.1.1. Растительный материал

Сбор надземной части смолевки обыкновенной S. vulgaris для выделения полисахаридных фракций из сухого сырья проводили в фазу цветения растения в июле в окрестностях г. Сыктывкара, на берегу р. Вычегды.

Сбор надземной части смолевки обыкновенной по различным фазам вегетации растения осуществляли в Ботаническом саду Сыктывкарского государственного университета в процессе появления надземной части, бутонизации, начала цветения, массового цветения, конца цветения и начала созревания семян, созревания семян.

Сбор надземной части смолевки обыкновенной для препаративного выделения полисахаридных фракций из свежесобранного сырья проводили в фазу цветения растения в Ботаническом саду СГУ.

3.2. Экспериментальные условия 3.2.1. Общие аналитические методы

Общее содержание гликуроновых кислот определяли по реакции с конц. H2SO4 и 3,5-диметилфенолом [162] и калибровочному графику для D-галактопиранозилуроновой кислоты; белка - по методу Лоури [163] и калибровочному графику для бычьего сывороточного альбумина; метоксилъных групп в пектинах - по методу [179] и калибровочному графику для метанола. Все спектрофотометрические измерения проводили на приборе Ultrospec 3000 (Англия).

Наличие крахмала определяли с помощью амилолиза и иод-крахмального теста [161].

Оптическое вращение определяли на приборе Polartronic MHZ (Германия) при 20°С в воде.

Гельпроникающую хроматографию выполняли на хроматографической системе (Pharmacia, Швеция) на колонках: а) с сефакрилом S-500: колонка А (анализ исходной фракции): 2.3 х 63 см, свободный объем V0= 200 мл, общий объем V = 606 мл; растворитель - 0.01 M NaCl, скорость растворителя 3 мл/мин; сбор фракций по 3 мл; колонка В (частичный кислотный гидролиз; ферментативный гидролиз; деградация по Смиту): 1.4 х 48 см, свободный объем V0= 32 мл, общий объем V = 73 мл; растворитель - диет, вода, скорость растворителя 0.3 мл/мин; сбор фракции по 3 мл; б) с сефадексом G-25: 2.5 х 75 см, свободный объем V0= 108 мл; растворитель - диет, вода, скорость растворителя 0.5 мл/мин; сбор фракций по 4.5 мл; в) с биогелем Р-4: 1.4 х 55 см, свободный объем V0= 27 мл, общий объем V = 80 мл; растворитель - диет, вода, скорость растворителя 0.3 мл/мин; сбор фракций по 2.5 мл;

Выход вещества контролировали по положительной реакции элюата на углеводы по методу Смита (реакция с фенолом в присутствии конц. серной кислоты) [180].

Для распределительной нисходящей бумажной хроматографии (БХ) использовали систему растворителей н. бутанол - пиридин - вода (6:4:3 v : v : v) на бумаге Filtrak FN - 12, FN - 13, идентификацию моносахаридов проводили с помощью раствора кислого анилинфталата при 105°С. Препаративное выделение галактуроновой кислоты осуществляли хроматографией на бумаге FN - 18.

Качественное и количественное определение нейтральных моносахаридов проводили в виде соответствующих ацетатов полиолов с помощью ГЖХ, которую выполняли на хроматографе Hewlett-Packard 4890А (США) с пламенно-ионизационным детектором и интегратором HP 3395А на капиллярной колонке RTX-1 (0.25 мм 0 х 30 м, Restek), газ-носитель -аргон. ГЖХ проводили в программе: от 175°С (1 мин) до 250°С (2 мин) со скоростью подъема температуры 3°/мин. Процентное содержание моносахаридов от суммарного препарата вычисляли из площадей пиков, используя коэффициенты отклика детектора [62].

ГЖХ-МС частично метилированных ацетатов полиолов проводили в Институте органической химии им. Н.Д. Зелинского (г. Москва) на хромато-масс-спектрометре Carlo Erba, Finnigan 4200 на капиллярной колонке Ultra-1 (0.2 мм 0 х 30 м, Hewllet-Packard), газ-носитель - гелий. Снимали в программе: от 150°С (1 мин) до 280°С со скоростью подъема температуры 5°/мин. МС: ионная ловушка Finnigan MAT ITD-700, развертка от m/z 44 до m/z 500. Энергия ионизирующих электронов « 70 eV. Температура интерфейса 220°С, частота сканирования 1 скан/с, задержка накопления 250 сек. Относительное содержание метилированных Сахаров представляли как соотношение площадей пиков по полному ионному току.

Полный кислотный гидролиз выполняли следующим образом: к навеске 3 - 5 мг полисахаридной фракции приливали 1 мл 2 M TFA, содержащей мио-шозт (0.3 - 0.5 мг/мл). Смесь нагревали 8 ч при 100°С, кислоту удаляли многократным упариванием досуха с метанолом. Моносахариды идентифицировали методами БХ и ГЖХ.

Для получения ацетатов полиолов использовали метод, описанный в [34], согласно которому полученную в результате кислотного гидролиза смесь моносахаридов растворяли в 1 М растворе аммиака (1 мл) и добавляли около 5 мг боргидрида натрия. Смесь оставляли на 5 - 16 час. Далее избыток боргидрида натрия разрушали добавлением 2-3 капель конц. уксусной кислоты и упаривали раствор на вакуумном роторном испарителе досуха, прибавляя по 1 мл метанола. К сухому остатку добавляли по 0.2 мл сухого пиридина и уксусного ангидрида. Смесь полиолов ацетилировали в течение 16 ч. при комнатной температуре в темноте или в течение 1 час. при 80°С. Далее смесь упаривали на вакуумном роторном испарителе досуха до удаления избытка пиридина и уксусного ангидрида, прибавляя сначала по 1 мл толуола, затем по 1 мл метанола. Полученную смесь ацетатов полиолов растворяли в 0.2 мл сухого хлороформа, и количественно переносили в пробирки Эппендорфа, упаривали до 0.1 - 0.2 мл и анализировали методом ГЖХ.

Метилирование проводили по методу Хакомори согласно методике [34]. В колбу с сухим образцом поли- или олигосахаридной фракции (2 -5 мг) добавляли в атмосфере азота 0.5 - 1 мл сухого ДМСО. Смесь перемешивали при комнатной температуре 3 час. до растворения образца. Затем к раствору добавляли 0.5 - 1 мл 2 М СН380СН2ТМа+. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение не менее 5 ч. или оставляли на ночь. Далее раствор замораживали и добавляли 0.5 - 1 мл иодистого метила. Когда смесь расплавлялась, ее перемешивали в течение 6 час. Содержимое колбы разбавляли равным объемом воды, диализовали и лиофилизовали.

Далее сухой образец растворяли в 1 мл тетрагидрофурана и добавляли 5 мг 1лВН4 [178]. Смесь нагревали при 70°С в течение 1 час., нейтрализовали 200 мкл 10 %-ной уксусной кислоты в метаноле, диализовали и лиофилизовали. Полученный образец обрабатывали СН380СН2~~На+ и иодистым метилом, как описано выше. Далее образец гидролизовали в 2 М ТБА (0.5

1 мл) при 100°С в течение 5 час. Кислоту отгоняли с метанолом, полученные метилированные моносахариды переводили в ацетаты полиолов (см. выше) и анализировали с помощью ГЖХ и ГЖХ-МС.

Результаты метилирования фрагментов силенана SVPS, SVPL-1, SVPL-2 приведен в табл. 15 (см. главу " Обсуждение результатов ", раздел 2.3.4.).

ИК-спектры регистрировали на спектрофотометре UR-20.

Спектры ЯМР снимали в Институте органической химии им. Н.Д. Зелинского (г. Москва) на приборе DRX-500 фирмы Bruker (Германия) для 3 - 5 % растворов поли- и олигосахаридов в D20 при 55°С и 70°С (внутренний стандарт - ацетон, 8Н 2.225 м.д., 5С 31.45 м.д.). Для снятия двумерных спектров COSY, TOCSY, ROESY и HSQC использовали стандартные методики фирмы Bruker. Снятие спектров ROESY выполняли с временем смешивания 200 мсек. Для -экспериментов TOCSY использовали длительность MLEV17 спин-лока 60 мсек.

Определение зольности исходного силенана проводили по методике, описанной в [И]. Три навески силенана SV (около 1 г каждая), взятые с точностью до ± 0.0002 г осторожно сожгли в предварительно прокаленных и взвешенных тиглях на электроплитке до прекращения выделения продуктов сгорания. Затем тигли с веществом прокаливали в муфельной печи при температуре 800°С до полного озоления навесок продукта. После взвешивания тигли повторно прокаливали в течение 30 мин, охлаждали в эксикаторе и взвешивали. Процедуру повторяли до разницы между двумя последующими взвешиваниями не более 0.0002 г. Массовую долю общей золы Ash (в %) вычисляли по формуле:

Ash = m"m° х 100%, Ш] - mo где m - масса тигля с золой, г; mi - масса тигля с навеской продукта до прокаливания, г; то - масса тигля, г.

Результаты определения зольности приведены в таблице 17.

1. Кочетков Н.К., Бочков А.Ф., Дмитриев Б.А. и др. Химия углеводов. -М.: Химия, 1967. -672 с.

2. Ovodov Yu.S. Structural chemistry of plant glycuronoglycans // Pure Appl. Chem. 1975. - Vol. 42, № 3. - P. 351-369.

3. Carpita N.C., Gibeaut D.M. Structural models of primary cell walls in flowering plants: consistency of molecular structure with the physical properties of the walls during growth // Plant J. 1993. - Vol. 3, № 1. - P. 1-30.

4. Ovodova R.G., Vaskovsky V.E., Ovodov Yu.S. The pectic substances of Zosteraceae // Carbohydr. Res. 1968. - Vol. 6. - P. 328-332.

5. Оводов Ю.С. Полисахариды цветковых растений: структура и физиологическая активность // Биоорган, химия. 1998. - Т. 24, № 7. - С. 483-501.

6. O'Neill М.А., Albersheim P., Darvill A.G. The pectic polysaccharides of primary cell walls. In Meth. Plant Biochem. / Ed. P.M. Dey. London.: Acad Press., 1990.-P. 415-441.

7. An J., Zhang L., O'Neill M.A. et al. Isolation and structural characterization of ewoto-rhamnogalacturonase-generated fragments of the backbone of rhamno-galacturonan I // Carbohydr. Res. 1994. - Vol. 264. - P. 83-96.

8. Whitcombe A.J., O'Neill M.A., Steffan W., Albersheim P., Darvill A.G. Structural characterization of the pectic polysaccharide, rhamnogalacturonan II // Carbohydr. Res. 1995. - Vol. 271. - P. 15-29.

9. Schols H.A., Voragen A.G.J. Complex pectins: structure elucidation using enzymes. In Pectins and pectinases / Eds. J. Visser, A.G.J. Voragen: Elsevier Sci. B.V. 1996.-P. 3-19.

10. Турахожаев M.T., Ходжаева M.A. Растительные пектиновые вещества. Способы выделения пектиновых веществ //Химия природн. соедин. 1993. -С. 635-643.

11. Голубев В .H., Шелухина Н.П. Пектин: химия, технология, применение. М.: Изд. АТН РФ, 1995.-387 с.

12. Донченко J1.B. Технология пектина и пектинопродуктов. М.: ДеЛи,2000.

13. Офицеров E.H., Костин В.И. Углеводы амаранта и их практическое использование / Под ред. Ю.С. Оводова. Ульяновск.: Ин-т химии Коми НЦ УрО РАН, 2001.- 179 с.

14. Wagner H. Immunostimulants of plant origin // Croatica Chem. Acta. -1995.-Vol. 68.-P. 615-626.

15. Yamada H. Pectic polysaccharides from Chinese herbs: structure and biological activity // Carbohydr. Polym. 1994. - Vol. 25. - P. 269-276.

16. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование / Под ред. Ал. А. Федорова. Л.:, 1985. - 571 с.

17. Растительные ресурсы России и сопредельных государств: часть I -Семейства Lycopodiaceae Ephedraceae, часть II - дополнения к 1-7 томам / Под ред. Л.М. Беленовской, Л.И. Медведевой - Санкт-Петербург.: Мир и се-мья-95, 1996.-571 с.

18. Ильина И.В. Народная медицина коми. Сыктывкар.: Коми книжное издательство, 1997. - 130 с.

19. Тагисбаев Е.Т., Писаев A.A. К исследованию химического состава и фармакодинамики выделенных веществ из корней смолевки широколистной // Тр. 24-й итог, научн. конфер. Алма-Ата, 1963. - С. 102 - 104.

20. Тагисбаев Е.Т. Исследование Silene latifolia (Mill). Rendle. et Britt. и ее тритерпенового гликозида силенозида: Автореф. дис. канд. фарм. наук. -Баку. 1966.- 14 с.

21. Садыков З.Т., Саадов 3. Фитоэкдистероиды растений рода Silene. XIX. Строение силенозида G // Химия природн. соедин. 1999. - С. 663-665.

22. Зибарева Л.Н. Распространение экдистероидов в роде Silene L. и динамика их содержания // Раст. ресурсы. 1999. - Вып. 1. - С. 79-87.

23. Courtois J.-D., Courtois J.-E. Oligosaccharides of Silene inflata // Fac. Pharm. Paris. 1966. - Vol. 28. - P. 197- 210.

24. Dave J., Courtois J.-E. Isolation of various trisaccharides and tetrasaccha-rides from the roots of Silene inflata /I Fac. Pharm. Paris. 1965. - Vol. 261. - P. 3483-3485.

25. Попов C.B. Взаимодействие фагоцитов млекопитающих с полисахаридами растений / Под ред. Ю.С. Оводова. Сыктывкар.: РАН УрО Коми НЦ, 2002.- 110 с.

26. Щербухин В.Д., Анулов О.В. Галактоманнаны семян бобовых (обзор) // Прикладная биохимия и микробиология. 1999. - Т. 35, № 3. - С. 257274.

27. Горшкова Т.А., Джибео Д., Ибрагимов М.Р. и др. Хроматографиче-ский анализ полисахаридов матрикса клеточных стенок различных органов проростков льна // Биохимия. 1995. - Т. 60, № 2. - С. 257-262.

28. Carpita N.C. Structure and biogenesis of the cell walls of grasses // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1996. - Vol. 47. - P. 445-476.

29. Оводов Ю.С. Избранные главы биоорганической химии. Сыктывкар: СГУ, 1998.-222 с.

30. The polysaccharides / Ed. G.O. Aspinall London.: Acad. Press, 1982. -Vol. 2. - 503 p.

31. Tibbits C.W., MacDougall A.J., Ring S.G. Calcium binding and swelling behaviour of a high methoxyl pectin gel // Carbohydr. Res. 1998. - Vol. 310. - P. 101-107.

32. York W.S., Darvill A.G., McNeil M., Stevenson T.T. Isolation and characterization of plant cell walls and cell-wall components // Meth. Enzymol. 1986. -Vol. 118. - P. 3-40.

33. Мкртчян T.A., Снапян Г.Г., Никогосян Г.А. Получение пектина из лопуха (род Arctium) // Укр. биохим. журн. 1998. - Т. 70, № 1. - С. 98-105.

34. Kertesz Z.I. The pectic substances // New York; London: Acad. Press. -1951.-629 p.

35. Eriksson I., Andersson R., Aman P. Extraction of pectic substances from dehulled rapeseed // Carbohydr. Res. 1997. - Vol. 301. - P. 177-185.

36. Ralet M.-Ch., Thibault J.-F. Extraction and characterisation of very highly methylated pectins from lemon cell walls // Carbohydr. Res. 1994. - Vol. 260. - P. 283-296.

37. Furuta H., Takahashi Т., Tobe J. et al. Extraction of water-soluble soybean polysaccharides under acidic conditions // Biosci. Biotechnol. Biochem. -1998. Vol. 62. - P. 2300-2305.

38. Renard C.M.G.C., Weightman R. M., Thibault J.-F. The xylose-rich pectins from pea hulls // Intern. J. Macromolecules. 1997. - Vol. 21. - P. 155-162.

39. Соснина H.A., Миронов В.Ф., Карасева A.H. и др. Выделение полисахаридов растений рода Lupinus и исследование их химического состава и структурных особенностей // Химия природн. соедин. 2000. - № 1. - С. 32-34.

40. Ципаева О.В. Выделение, структурная индентификация и химическая модификация пектиновых веществ растения амарант и некоторых модельных соединений: Автореферат дис. канд. хим. наук. Казань, 2000. - 20 с.

41. Marcelin О., Saulnier L., Brillouet J.-M. Extraction and characterization of water-soluble pectic substances from guava (Psidium guajava L.) // Carbohydr. Res. 1991. -Vol. 212. -P. 159-167.

42. Westerlund E., Aman P., Andersson R.E. et al. Chemical characterization of water-soluble pectin in papaya fruit // Carbohydr. Polym. 1991. - Vol. 15. - P. 67-78.

43. Yamaguchi F., Ota Y., Hatanaka C. Extraction and purification of pectic polysaccharides from soybean okara and enzymatic analysis of their structures // Carbohydr. Polym. 1996. - Vol. 30. - P. 265-273.

44. Zablackis E., Huang J., Mtiller B. et al. Characterization of the cell-wall polysaccharides of Arabidopsis thaliana leaves // Plant Physiol. 1995. - Vol. 107. -P. 1129-1138.

45. Redwell R.J., Fischer M., Kendal E., MacRae E.A. Galactose loss and fruit ripening: high-molecular-weight arabinogalactans in the pectic polysaccharides of fruit cell walls // Planta. 1997. - Vol. 203. - P. 174-181.

46. Edashige Y., Ishii T. Rhamnogalacturonan I from xylem differentiating zones of Cryptomeria japonica II Carbohydr. Res. 1997. - Vol. 304. - P. 357-365.

47. Renard C.M.G.C., Thibault J.-F. Structure and properties of apple and sugar-beet pectins extracted by chelating agents // Carbohydr. Res. 1993. - Vol. 244.-P. 99-114.

48. Naran R., Ebringerova A., Hromadkova Z., Patoprsty V. Carbohydrate polymers from underground parts of Cistanche deserticola // Phytochemistry. -1995.-Vol. 40.-P. 709-715.

49. Rihouey C., Morvan C., Borissova I., et al. Structural features of CDTA-soluble pectins from flax hypocotyls // Carbohydr. Polym. 1995. - Vol. 28. - P. 159-166.

50. Thomas J.R., Darvill A.G., Albersheim P. Isolation and structural characterization of the pectic polysaccharide rhamnogalacturonan II from walls of suspension-cultured rice cells // Carbohydr. Res. 1989. - Vol. 185. - P. 261-277.

51. Vignon M.R., Garcia-Jaldon C. Structural features of the pectic polysaccharides isolated from retted hemp bast fibers // Carbohydr. Res. 1996. - Vol. 296. - P. 249-260.

52. Stevens B J.H., Selvendran R.R. Structural features of cell-wall polysaccharides of the carrot Daucus carota II Carbohydr. Res. 1984. - Vol. 128. - P. 321333.

53. Kindel P., Cheng L., Ade B.R. Solubilization of pectic polysaccharide from the call walls of Lemna minor and Apium graveolens // Phytochemistry. -1996.-Vol. 41.-P. 719-723.

54. Оводова Р.Г., Головченко B.B., Попов C.B., Шашков А.С., Оводов Ю.С. Структурное исследование и физиологическая активность лемнана, пектина из Lemna minor L // Биоорган, химия. 2000. - Т. 26, № 10. - С. 743-751.

55. Полле А .Я., Оводова Р.Г., Шашков А.С., Оводов Ю.С. Выделение и общая характеристика полисахаридов пижмы обыкновенной // Биоорган, химия. 2000. - Т. 27, № 1. - С. 52-56.

56. Ros J.M., Schols Н.А., Voragen A.G.J. Extraction, characterisation, and enzymatic degradation of lemon peel pectins // Carbohydr. Res. 1996. - Vol. 282. -P. 271-284.

57. Alkorta I., Garbisu C., Llama M.J., Serra J.L. Industrial applications of pectic enzymes: a review // Process Biochemistry. 1998. - Vol. 33. -P. 21-28.

58. Renard C.M.G.C., Thibault J.-F. Studies on apple cell walls with rhamno-galacturonase // Carbohydr. Polym. 1993. - Vol. 22. - P. 203-210.

59. Doco Т., Williams P., Vidal S., Pellerin P. Rhamnogalacturonan И, a dominant polysaccharide in juices produced by enzymic liquefaction of fruits and vegetables // Carbohydr. Res. 1997. - Vol. 297. - P. 181-186.

60. Методы химии углеводов / Под ред. P.JI. Уистлера, M.JI. Вольфрома. М.: Мир, 1967.- 512 с.

61. Ohtani К., Okai К., Yamashita U. et al Characterisation of an acidic polysaccharide isolated from the leaves of Corchorus olitorius (Moroheiya) // Bio-sci. Biotechnol. Biochem. 1995. - Vol. 59, № 3. - P. 378-381.

62. Odonmazig P., Badga D., Ebringerova' A., Alfoldi J. Structures of pectic polysaccharides isolated from the Siberian apricot {Armaniaca siberica Lam.) // Carbohydr. Res. 1992. - Vol. 226. - P. 353-358.

63. Shin K.-S., Kiyohara H., Matsumoto Т., Yamada H. Rhamnogalacturonan II from the leaves of Panax ginseng C.A. Meyer as a macrophage Fc receptor expression-enhancing polysaccharide // Carbohydr. Res. 1997. - Vol. 300. - P. 239249.

64. Залялиева C.B., Кабулов Б.Д., Ахунджанов K.A., Рашидова С.Ш. Жидкостная хроматография полисахаридов // Химия природн. соедин. 1999.- № 1. С. 3-18.

65. Aspinall G.O., Fanous Н.К. Structural investigations on the non-starchy polysaccharides of apples // Carbohydr. Polym. 1984. - Vol. 4. - P. 193-214.

66. Redgwell R.J., Melton L.D., Brasch D.J., Coddington J.M. Structures of the pectic polysaccharides from the cell walls of kiwifruit // Carbohydr. Res. 1992.- Vol. 226. P. 287-302.

67. Оводов Ю.С. Хроматография углеводов с использованием ионообменных смол // Усп. химии. 1971. - Т. XL. - С. 764-774.

68. Dinand Е., Excoffier G., Lienart Y., Vignon M.R. Two rhamnogalactu-ronide tetrasaccharides isolated from semi-retted flax fibers are signaling molecules in Rubus fruticosus L. cells // Plant Physiol. 1997. - Vol. 115. - P. 793-801.

69. Will F., Dietrich H. Characterization of residual pectins from raspberry juices // Carbohydr. Polym. 1994. - Vol. 25. - P. 155-160.

70. Рафиков C.P., Будтов В.П., Монаков Ю.Б. Введение в физико-химию растворов полимеров / Под ред. В.В. Коршак М.: Наука, 1978.-328с.

71. El-Tinuy А.Н., El-Shafic A.S., Nour А.А. A chemical study of pumpkin pectin substances // Trop. Sci. 1983. - Vol. 24, № 3. - P. 173-183.

72. Berth G., Anger H., Linow F. Streulichtphotometrische und viskosimet-rischen Untersuchungen an Pektinen in wussrigen Losungen zur Molmassenbestimmung // Die Nahrung. 1977. - Bd. 21, № 10. - S. 939-950.

73. Кадырханов M.P., Семенова JI.H., Воропаева H.JI. и др. О молекулярных массах пектиновых полисахаридов // Химия природн. соедин. Растит, природ, соед. С. 32-35.

74. Rinaudo M. Physicochemical properties of pectins in solution and gel states // Pectins and Pectinases: Proceedings of an International Symposium. -Wageningen, Netherlands, 1996. P. 21-34.

75. Цветков B.H., Эскин B.E., Френкель С .Я. Структура макромолекул в растворах. М.: Наука, 1964. - 457 с.

76. The polysaccharides / Ed. G.O. Aspinall London.: Acad. Press, 1982. -Vol. 1.- 340 p.

77. Чижов O.C., Шашков A.C. Масс-спектрометрия и ЯМР-спектроскопия в установлении структуры полисахаридов. В кн. Прогресс химии углеводов / Под ред. И.В. Торгова М.: Наука, 1985. - С. 30-54.

78. Оводов Ю.С. Газожидкостная хроматография углеводов. Обзор. -Владивосток: Изд-во АН СССР, 1970. 70 с.

79. Усов А.И. Альгиновые кислоты и альгинаты: методы анализа, определения состава и установления строения // Усп. химии. 1999. - Т. 68, № 11.-С. 1051-1061.

80. Jay A. The methylation reaction in carbohydrate analysis // J. Carbohydr. Chem. 1996. - Vol. 15, № 8. - P. 897-923.

81. Kochetkov N.K., Chizov O.S. Mass spectrometry of carbohydrate derivatives // Advan. Carbohydr. Chem. 1966. Vol. 21. - P. 39-93.

82. Соловьева Т.Ф., Арсенюк JI.B., Оводов Ю.С. Пектин женьшеня. Строение полигалактуронида // Химия природн. соедин. 1969. - № 4. - С. 201-203.

83. Оводова Р.Г. Химическое исследование зостерина пектина морских трав: Автореф. дис. канд. хим. наук. - Владивосток, 1971.-21 с.

84. Шашков А.С., Чижов. О.С. Спектроскопия 13С-ЯМР в химии углеводов и родственных соединений // Биоорган, химия. 1976. - Т. 2, № 4. - С. 438497.

85. Westerlund E., Aman P., Andersson R.E., Andersson R. Investigation of1the distribution of methyl ester groups in pectin by high-field С NMR // Carbo-hydr. Polym. 1991. - Vol. 14. - P. 179-187.

86. Neiss T.G., Cheng H.N., Daas P.J., Schols H.A. NMR and statistical analysis of the galacturonic acid and methyl ester distributions in pectic polysaccharides // Polymer Preprint 1. 1998. - P. 688-689.

87. Grasdalen H., Вакоу O.E., Larsen B. Determination of the degree of es-terification and the distribution of methylated and free carboxyl groups in pectins by .H-NMR spectroscopy // Carbohydr. Res. 1988. - Vol. 184. - P. 183-191.

88. Komalavilas P., Mort A.J. The acetylation at 0-3 of galacturonic acid in the rhamnose-rich portion of pectins // Carbohydr. Res. 1989. - Vol. 189. - P. 261 -272.

89. Ishii T. O-Acetylated oligosaccharides from pectins of potato tuber cell walls//Plant Physiol. 1997. - Vol. 113."- P. 1265-1272.

90. Юлдашева Н.П., Рахимов Д.А., Турхожаев M.T. Полисахариды Еге-murus. XXVI. Изучение строения пектина из листьев Eremurus regelii II Химияприродн. соедин. 1993. - № 2. - С. 191-194.1

91. Pressey R., Himmelsbach D.S. C-NMR spectrum of a galactose-rich polysaccharide from tomato fruit // Carbohydr. Res. 1984. - Vol. 127. - P. 356359.

92. Keenan M.H.J., Belton P.S., Matthew J.A., Howson S.J. A 13C-NMR study of sugar-beet pectin // Carbohydr. Res. 1985. - Vol. 138. - P. 168-170.

93. Capek P., Matulova M., Kardosova A. An acidic heteropolysaccharide from the flowers of Malva mauritiana L // J. Carbohydr. Chem. 1997. - Vol. 16, №9.-P. 1373-1391.

94. Cui W., Eskin M.N.A., Biliaderis C.G., Marat K. NMR characterization of a 4-0-methyl-(3-D-glucuronic acid-containing rhamnogalacturonan from yellow mustard (Sinapis alba L.) mucilage // Carbohydr. Res. 1996. - Vol. 292. - P. 173183.

95. Lo V.M., Hahn M.G., Halbeek H. Preparation, purification, and structural charaterization of linear oligogalacturonides. An FAB-mass spectrometric and NMR spectroscopic study // Carbohydr. Res. 1994. - Vol. 255. - P. 271-284.

96. Colquhoun I.J., Ruiter G.A., Schols H.A., Voragen A.G.J. Identification by n.m.r. spectroscopy of oligosaccharides obtained by treatment of the hairy regions of apple pectin with rhamnogalacturonase // Carbohydr. Res. 1990. - Vol. 206.-P. 131-144.

97. Kardosova A., Capek P. Chemical and C13-NMR of a rhamnoarabinoga-lactan from the leaves of Plantago lanceolata L. var. libor 11 Collect. Czech. Chem. Commun. 1994. - Vol. 59. - P.2714-2720.

98. Ralet M.C., Thibalult J.-F., Faulds C.B., Williamson G. Isolation and purification of feruloylated oligosaccharides from cell walls of sugar-beet pulp // Carbohydr. Res. 1994. - Vol. 263. - P. 227-241.

99. York W.S., Darvill A.G., McNeil M., Albersheim P. 3-Deoxy-D-manno-2-octulosonic acid (KDO) is a component of rhamnogalacturonan II, a pectic polysaccharide in the primary cell walls ofplants // Carbohydr. Res. 1985. - Vol. 138. -P. 109-126.

100. Renard C.M.G.C., Lahaye M., Mutter M. et al. Isolation and structural characterisation of rhamnogalacturonan oligomers generated by controlled acid hydrolysis of sugar-beet pulp // Carbohydr. Res. 1998. - Vol. 305. - P. 271-280.

101. Yamada H., Ra K.S., Kiyohara H. et al Structural characterisation of an anti-complementary pectic polysaccharide from the roots of Bupleurum falcatum L // Carbohydr. Res. 1989. - Vol. 189. - P. 209-226.

102. Thibalult J.-F., Renard C.M.G.C., Axelos M.A.V. et al. Studies of the length of homogalacturonic regions in pectins by acid hydrolysis // Carbohydr. Res.- 1993. Vol. 238. - P. 271-286.

103. Ros J.M., Schols H.A., Voragen A.G.J. Lemon albedo cell walls contain distrinct populations of pectic hairy regions // Carbohydr. Res. 1998. - Vol. 37. - P. 159-166.

104. Родионова H.A., Безбородов A.M. О локализации систем ферментов, катализирующих расщепление полисахаридов растительных клеточных стенок у высших растений. Пектиназы. (обзор) // Прикл. биохим. Микробиол.- 1997.-Т. 33.-С. 467-487.

105. Lau J.M., McNeil М., Darvill A.G., Albersheim P. Structure of the backbone of rhamnogalacturonan I, a pectic polysaccharide in the primary cell walls of plants // Carbohydr. Res. 1985. - Vol. 137. - P. 111-125.

106. Lerouge P., O'Neill M.A., Darvill A.G., Albersheim P. Structural characterization of endo-glycanase-generated oligoglycosyl side chains of rhamnogalacturonan I // Carbohydr. Res. 1993. - Vol. 243. - P. 359-371.

107. Zhan D., Janssen P., Mort A.J. Scarcity or complete lack of single rham-nose residues interspersed within the homogalacturonan regions of citrus pectin // Carbohydr. Res. 1998. - Vol. 308. - P. 373-380.

108. Vries J.A., Rombouts F.M., Voragen A.G.J., Pilnik W. Distribution of methoxyl groups in apple pectic substances // Carbohydr. Polym. 1983. - Vol. 3. -P. 245-258.

109. Schols H.A., Voragen A.G.J. Occurrence of pectic hairy regions in various plant cell wall materials and their degradability by rhamnogalacturonase // Carbohydr. Res. 1994. - Vol. 256. - P. 83-95.

110. Schols H.A., Geraeds C.C.J.M., Leeuwen M.F.S. et al. Rhamnogalactu-ronase: a novel enzyme that degrades the hairy regions of pectins // Carbohydr. Res. 1990. - Vol. 206. - P. 105-115.

111. Azadi P., O'Neill M.A., Bergmann C. et al. The backbone of the pectic polysaccharide rhamnogalacturonan I is cleaved by an endohydrolase and an endo-lyase // Glycobiology. 1995. - Vol. 5. - P. 783-789.

112. Huisman M.M.H., Schols H.A., Voragen A.G.J. Enzymatic degradation of cell wall polysaccharides from soybean meal // Carbohydr. Polym. 1999. - Vol. 38. - P. 299-307.

113. Mutter M., Beldman G., Pitson S.M. et al. Rhamnogalacturonan a-D-galactopyranosyluronohydrolase // Plant Physiol. 1998. - Vol. 117. - P. 153-163.

114. Kiyohara H., Hirano M., Wen X.-G. et al. Characterisation of an antiulcer pectic polysaccharide from leaves of Panax ginseng C.A. Meyer // Carbohydr. Res. 1994. - Vol. 263. - P. 89-101.

115. Schols H.A., Voragen A.G.J., Colquhoun I.J. Isolation and characterization of rhamnogalacturonan oligomers, liberated during degradation of pectic hairy regions by rhamnogalacturonase // Carbohydr. Res. 1994. - Vol. 256. - P. 97-111.

116. Godstein I.O., Hay G.W., Lewis B.A. and Smith F. In Methods in carbohydrate chemistry / Ed. R.L. Whistler. New York and London: Acad. Press, 1965.-Vol. 5.-P. 361 -370.

117. Guha S., Basu S. Structural features of the whole polysaccharide from Pongamia glabra gum // Indian J. Chem. 1990. - Vol. 29B. - P. 545-547.

118. Lau J.M., McNeil M., Darvill A.G., Albersheim P. Treatment of rhamnogalacturonan I with lithium in ethylendiamine // Carbohydr. Res. 1987. - Vol. 168.-P. 245-274.

119. Lau J.M., McNeil M., Darvill A.G., Albersheim P. Selective degradation of the glycosyluronic acid residues of complex carbohydrates by lithium dissolved in ethylendiamine // Carbohydr. Res. 1987. - Vol. 168. - P. 219-243.

120. Stevenson T.T., Darvill A.G., Albersheim P. Structural features of the plant cell-wall polysaccharide rhamnogalacturonan II // Carbohydr. Res. 1998. -Vol. 182. - P. 207-226.

121. Kiyohara H., Yamada H. Characterisation of methyl-ester distributions in galacturonan regions of complement activating pectins from the roots of Angelica acutiloba Kitagawa // Carbohydr. Polym. 1994. - Vol. 25. - P. 117-122.

122. Kravtchenko T.P., Arnould I., Voragen A.G.J., Pilnik W. Improvement of the selective depolymerization of pectic substances by chemical P-elimination in aqueous solution // Carbohydr. Polym. 1992. - Vol. 19. - P. 237-242.

123. McNeil M., Darvill A.G., Albersheim P. Structure of plant cell walls. Rhamnogalacturonan I, a structurally complex pectic polysaccharide in the walls of suspension-cultured sycamore cells // Plant Physiol. 1980. - Vol. 66. - P. 11281134.

124. Kikuchi A., Edashige Y., Ishii T., Satoh S. A xylogalacturonan whose level is dependent on the size of cell clusters is present in the pectin from cultured carrot cells // Planta. 1996. - Vol. 200. - P. 369-372.

125. Yamada H., Hirano M., Kiyohara H. Partial structure of an anti-ulcer pectic polysaccharide from the roots of Bupleurum falcatum L // Carbohydr. Res. -1991.-Vol. 219.-P. 173-192.

126. Kiyohara H., Cyong J.-C., Yamada H. Structure and anti-complementary activity of pectic polysaccharides isolated from the root of Angelica acutiloba Kitagawa// Carbohydr. Res. 1988. - Vol. 182. - P. 259-275.

127. Schols H.A., Vierhuis E., Bakx E.J., Vorgen A.G.J. Different populations of pectic hairy regions occur in apple cell walls // Carbohydr. Res. 1995. -Vol. 275.-P. 343-360.

128. Ishii T., Thomas J., Darvill A., Albersheim P. Structure of plant cell walls. XXVI. The walls of suspension-cultured sycamore cells contain a family of rhamnogalacturonan-I-like pectic polysaccharides // Plant Physiol. 1989. - Vol. 89. -P. 421-428.

129. McNeil M., Darvill A.G., Albersheim P. XII. Identification of seven differently linked glycosyl residues attached to 0-4 of the 2,4-linked L-rhamnosyl residues of rhamnogalacturonan I // Plant Physiol. 1982. - Vol. 70. - P. 1586-1591.

130. Hirano M., Kiyohara H., Matsumoto T., Yamada H. Structural studies of endopolygalacturonase-resistent fragments of an antiulcer pectin from the roots of Bupleurum falcatum L // Carbohydr. Res. 1994. - Vol. 251. - P. 145-162.

131. Ishii T., Matsunaga T. Isolation and characterization of a boron-rhamnogalacturonan-II complex from cell walls of sugar beet pulp // Carbohydr. Res.- 1996.-Vol. 284.-P. 1-9.

132. Kobayashi M., Matoh T., Azuma J.-L. Two chains of rhamnogalacturonan II are cross-linked by borate-diol ester bonds in higher plant cell walls // Plant Physiol. 1996. - Vol. 110. - P. 1017-1020.

133. Ishii Т., Matsunaga Т., Pellerin P., (УNeil M.A., Darvill A.G., Alber-sheim P. The plant cell wall polysaccharide rhamnogalacturonan II self-assembles into a covalently cross-linked dimer // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274. - P. 1309813104.

134. Арифходжаев A.O. Галактаны и галактансодержащие полисахариды высших растений // Химия природн. соедин. 2000. № 3. - С. 185-197.

135. Stevens В.J., Selvendran R.R. Pectic polysaccharides of cabbage {Bras-sica oleracea) // Phytochemistry. 1984. - Vol. 23, № 1. - P. 107-115.

136. Schols H.A., Bakx E.J., Schipper D., Voragen A.G.J. A xylogalactu-ronan subunit present in the modified hairy regions of apple pectin // Carbohydr. Res. 1995. - Vol. 279. - P. 265-279.

137. Hart D.A., Kindel P.K. Isolation and partical characterization of apioga-lacturonan from the cell walls of Lemna minor И Biochem. J. 1970. - Vol. 116. - P. 569-579.

138. Лигай Л.В., Бандюкова В.А. Полисахариды видов сем. Malvaceae II Растит, ресурсы. 1997. - Т. 33, Вып. 2. - С. 98-107.

139. Оводов Ю.С. Полисахариды грибов, мхов и лишайников, структура и физиологическая активность. Сыктывкар, 1997. - С. 21-30 (Тр. Коми НЦ УрО РАН, № 156).

140. Максимов В.И. Бондаренко В.М., Родоман В.Е. Влияние пектина на микрофлору желудочно-кишечного тракта // Ж. микробиол. 1998. - № 6. - С. 107-108.

141. Harris P.J., Ferguson L.R. Dietary fibers may protect or enhance carcinogenesis // Mutat. Res. 1999. - Vol. 443. - P. 95-110.

142. Lee Y.S., Chung I.S., Lee I.R., et al. Activation of multiple effector pathways of immune system by the antineoplastic immunostimulator acidic polysaccharide ginsan isolated from Panax ginseng II Anticancer Res. 1997. - Vol. 17. - P. 323-332.

143. Лоенко Ю.Н., Артюков А.А., Козловская Э.П. др. Зостерин. Владивосток: Дальнаука, 1997. - 212 с.

144. Jackson R., Bush S., Cardin A. Glycosaminoglycans: molecular properties, protein interactions, and role in physiological processes // Physiol. Rev. 1991. -Vol. 71. - P. 481-539.

145. Шалаев C.B., Алманова Л.И., Медведева ИВ. и др. Гиполипидеми-ческие свойства растворимых пищевых волокон (пектина) у больных ишеми-ческой болезнью сердца // Кардиология. 1998. - № 3. - С. 47-52.

146. Ходжаева М.А., Хушбактова З.А., Ирисметова Н.С. Углеводы Allium. Глюкофруктаны Allium suvorovii и их биологическая активность // Химия природн. соедин. 1998. - С. 731-735.

147. Рахимов Д.А., Маликова М.Х., Вахабов А.А. и др. Растительные полисахариды. IX. Выделение и антикоагулянтная активность полисахаридов Lagochilus usunachmaticus 17 Химия природн. соедин. 1998. - С. 690-692.

148. Sakurai М.Н., Matsumoto Т., Kiyohara Н., Yamada Н. B-cell proliferation activity of pectic polysaccharide from a medicinal herb, the root of Bupleurum falcatum L. and its structural requirement // Immunology. 1999. - Vol. 97. - P. 540-547.

149. Бушнева О.А., Оводова Р.Г., Мишарина E.A. Силенаны полисахариды смолевки обыкновенной (Silene vulgaris) II Химия раст. сырья. - 1999. -№ 1. - С. 27-32.

150. Новосельская И.Л., Воропаева Н.Л., Семенова Л.Н., Рашидова С.Ш. Пектин. Тенденции научных и прикладных исследований // Химия природн. соедин. 2000. - № 1. - С. 3-11.

151. Peat S., Turvey J. R., Evans J. M. The structure of floridean starch. Part II. Enzymic hydrolysis and other studies //J. Chem. Soc. 1959. - P. 3341-3344.

152. Lowry О. H., Rosebrough N. J., Farr A. L., Randall R. J. Protein measurement with the Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. - Vol. 193. - P. 265275.

153. Оводова Р.Г., Бушнева O.A., Головченко B.B., Попов С.В., Оводов Ю.С. Способ получения из растительного сырья полисахаридов, обладающих иммуностимулирующим действием // Патент РФ № 2149642 от 27.05.00. БИ2000, № 15.

154. Оводова Р.Г., Бушнева О.А., Шашков А.С., Оводов Ю.С. Выделение и предварительное иследование строения полисахаридов из смолевки обыкновенной Silene vulgaris II Биоорган, химия. 2000. - Т. 26. - С. 686-692.

155. Мирсагатова Д., Семенова JI.H., Пулатова С., Воропаева Н.Л., Рубан И.Н., Рашидова С.Ш. Динамика накопления и изменения пектиновых веществ при хранении лимона сорта ялонгоч // Химия природн. соедин. 1998. -С. 67-69.

156. Сысоева К.Н., Горин А.Г., Яковлев А.И. Динамика содержания водорастворимых полисахаридов в соцветиях пижмы обыкновенной // Растит, ресурсы. 1979. - Т. 15. - С. 89-91.

157. Соловьева Т.Ф. Химическое изучение пектина женьшеня: Автореф. дис. канд. хим. наук. Владивосток, 1969. - 20 с.'

158. Оводов Ю.С. Химическое исследование гликуроногликанов кислых растительных полисахаридов: Автореф. дис. док. хим. наук. - Москва, 1971.-41 с.

159. Bushneva О.А., Ovodova R.G., Shashkov A.S., Ovodov Yu.S. Structural studies on hairy regions of pectic polysaccharide from campion Silene vulgaris (iOberna behen) II Carbohydr. Polym. 2002. - Vol. 49. - P. 471-478.

160. Catoire L., Goldberg R., Pierron M., Morvan С., Herve du Penhoat C. An efficient procedure for studying pectin structure which combines limited de-polymerization and 13C NMR// Eur. Biophys. J. 1998. - Vol. 27. - P. 127-136.

161. Breitmaier E., Hass G., Voelter W. Atlas of carbon-13 NMR data. / Ed. Heyden / Philadelphia. 1979. Vol. 1.

162. Шашков A.C. 13С-ЯМР спектроскопия углеводов: Автореф. дис. док. хим. наук. Москва, 1983. - 42 с.

163. Polle A.Y., Ovodova R.G., Shashkov A.S., Ovodov Yu.S. Some structural features of pectic polysaccharide from tansy, Tanacetum vulgare L // Carbohydr. Polym. 2002. - Vol. 49. - P. 337-344.

164. Бушнева О.А., Оводова Р.Г. Химическая структура силенана пектина смолевки обыкновенной Silene vulgaris IIII Всероссийская конференция "Химия и технология растительных веществ": Тез. докл. - Казань, 2002. - С. 94-95.128

165. Perepelov A.V., Babicka D., Shashkov A.S. et al. Structure and cross-reactivity of the O-antigen of Proteus vulgaris 08 // Carbohydr. Res. 1999. - Vol. 318. - P. 186-192.

166. Wood P.Y., Siddiqui I.R. Determination of methanol and its application to measurement of pectic ester content and pectin methyl esterase activity // Anal. Biochem. 1971. - Vol. 39. - P. 418-423.

167. Dubois M., Gilles K.A., Hamilton J.K., Rebers P.A., Smith F. Colori-metric method for determination of sugars and related substances // Analyt. Chem. -1956.-Vol. 28.-P. 350-356.

168. Геккелер K.E., Экштайн X. Аналитические и препаративные лабораторные методы. М.: Химия, 1994. - 416 с.

169. Hodge J.E., Hofreiter В.Т. Determination of reducing sugars and carbohydrates // Methods in carbohydrate chemistry / Eds. R.L. Whistler, M.L. Wolfrom, J.N. BeMiller, F. Shafizadeh New York: Acad. Press., 1962. - P. 380-394.1. БЛАГОДАРНОСТИ

170. Автор выражает искреннюю благодарность своим научным руководителям академику Оводову Юрию Семеновичу и ст.н.с., к.х.н. Оводовой Раисе Григорьевне.