Синтез и изучение механизма антибактериального действия гидрофобных производных антибиотика эремомицина тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

Список принятых в работе сокращений ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ОСНОВЫ ДЕЙСТВИЯ ГЛИКОПЕПТИДНЫХ АНТИБИОТИКОВ И ИХ ПОЛУСИНТЕТИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДНЫХ"

1.1. Основные представители гликопептидных антибиотиков

1.2. Взаимодействие гликопептидных антибиотиков с предшественниками пептидогликана как механизм ингибирования ими роста бактериальных клеток

1.3. Димеризация гликопептидных антибиотиков

1.3.1. Структура нековалентных димеров

1.3.2. Значение димеризации для проявления антибактериальной активности

1.3.3. Влияние структурной организации гликопептидных антибиотиков и их димеров на проявление антибактериальной активности

1.4. Распространение гликопептид-резистентных микроорганизмов и механизм их резистентности

1.5. Синтез и изучение полусинтетических производных гликопептидных антибиотиков, активных в отношении гликопептид-резистентных микроорганизмов

1.5.1. Гипотеза о совместном действии димеризации и "заякоривания" на бактериальной мембране как основе преодоления резистентности

1.5.2. Подавление стадии трансгликозилирования синтеза пептидогликана как механизм действия гидрофобных производных гликопептидов, активных в отношении GRE

1.5.3. Синтез и изучение ковалентных димеров ванкомицина, активных в отношении GRE

ИЗЛОЖЕНИЕ И ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Введение

2.1. Синтез карбоксамидов эремомицина и изучение закономерности структура-активность

2.2. Получение гидрофобных производных эремомицина и дез-(Лг-метил-/)-лейцил)-эремомицина. Сравнительное изучение роли гидрофобного заместителя в проявлении антибактериальной активности

2.3. Изучение роли структуры некоторых гликопептидных антибиотиков в проявлении антибактериальной активности их гидрофобных производных

2.4. Получение и изучение антибактериальной активности производных дез-(7У-метил)-А,г',Л''"-дибензилэремомицина с восстановленной пептидной связью между 1-ой и 2-ой аминокислотами

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Актуальность проблемы. В связи с широким распространением полирезистентных микроорганизмов в мировой медицинской практике резко возросла потребность в антибиотиках, относящихся к группе гликопептидов, высокоактивных в отношении возбудителей со множественной лекарственной устойчивостью. Гликопептиды ванкомицин и тейкопланин - антибиотики резерва, являются общепризнанными препаратами выбора для лечения инфекций, вызванных полирезистентными грамположительными кокками. Однако все более частое применение ванкомицина и тейкопланина в клинике, а также использование антибиотиков группы гликопептидов - актапланина и авопарцина - в сельском хозяйстве привело к появлению полирезистентных штаммов энтерококков, устойчивых также и к антибиотикам этого класса. Распространение резистентных штаммов в клиниках США и Европы представляет собой все возрастающую опасность, так как на эти патогенные микроорганизмы не действуют никакие из применяемых в настоящее время химиотерапевтических средств. Лишь несколько препаратов, активных в отношении гликопептид-резистентных энтерококков (GRE), находятся на стадии клинических испытаний.

Одним из наиболее эффективных путей решения проблемы резистентности к гликопептидам является целенаправленное создание препаратов, активных в отношении полирезистентных патогенных микроорганизмов, путем химической модификации природных гликопептидных антибиотиков. Изучение полусинтетических производных гликопептидных антибиотиков привело к открытию активности некоторых из них в отношении гликопептид-резистентных энтерококков. Понимание механизма действия этих производных может послужить основой для рационального дизайна полусинтетических гликопептидов, активных в отношении GRE.

Цель работы. Целью нашей работы было получение новых полусинтетических производных отечественного гликопептидного антибиотика эремомицина, а также некоторых производных ванкомицина и тейкопланина. Исследования были направлены на изучение связи структура-активность и изучение механизма действия полученных гидрофобных производных, активных в отношении GRE.

Научная новизна. Синтезированы серии новых полусинтетических производных гликопептидных антибиотиков и изучена их антибактериальная активность. Разработан метод получения Л^'-алкильных производных эремомицина с применением защиты /У-концевой вторичной аминогруппы антибиотика. Впервые получены производные эремомицина с нарушенным связываюшим карманом, а также синтезированы производные эремомицина нового типа с восстановленной 1,2-пептидной связью. Биохимические исследования показали, что гидрофобные производные гликопептидных антибиотиков ингибируют синтез пептидогликана на стадии трансгликозилирования, и механизм их действия в отношении GRE не зависит от депсипептидного связывания.

Практическая ценность работы. Получено и охарактеризовано 31 новое производное, из которых 12 высокоактивны в отношении гликопептид-резистентных энтерококков. В сотрудничестве с биохимиками выявлен механизм действия гидрофобных производных гликопептидных антибиотиков, активных в отношении гликопептид-резистентных микроорганизмов.

Положения, выносимые на защиту. 1. Получение новых производных эремомицина: амидов, ./У-алкилпроизводных, производных эремомицина с нарушенным связывающим карманом, а также гидрофобных карбоксамидов ванкомицина, тейкопланина, его агликона и низкоактивных продуктов деградации эремомицина.

2. Изучение влияния места введения гидрофобного заместителя на антибактериальную активность, в том числе и в отношении GRE, и механизма действия производных эремомицина.

3. Исследование влияния структуры гликопептидных антибиотиков эремомицина, ванкомицина, тейкопланина на проявление антибактериальной активности их гидрофобных производных.

4. Исследование (совместно с биохимиками) этапов подавления синтеза пептидогликана гидрофобными производными эремомицина в сравнении с эремомицином.

5. Разработка метода синтеза производных эремомицина с восстановленной пептидной связью между 1-ой и 2-ой аминокислотами и изучение влияния на антибактериальную активность замены 1,2-пептидной связи на аминоалкильную на примере дез-(А'-метил)-Лг',Лг"-дибензилэремомицина.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ОСНОВЫ ДЕЙСТВИЯ

ГЛИКОПЕПТИДНЫХ АНТИБИОТИКОВ И ИХ ПОЛУСИНТЕТИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДНЫХ"

1.1.

Основные представители гликопептидных антибиотиков

К настоящему времени известно более сотни гликопептидных антибиотиков. Антибиотики-гликопептиды имеют сложную структуру, основу которой составляет гептапептидный скелет, причем все боковые радикалы ароматических аминокислот связаны между собой, образуя дополнительно три или четыре макроцикла [1]. Структуры основных представителей гликопептидных антибиотиков приведены на Рис. 1.

Р н

ОН . о 1

ОН но

Банком нщт

Эремомицин Y=H Хлорэрсмомицип Y=C1

Тейкоплашш А-А2 но [/сн2он

ОН

Ристоцетнн А

Рис. 1. Основные представители гликопептидных антибиотиков

Классификация гликопептидов базируется на типе аминокислотных остатков в позициях 1 и 3 [2]. Первую группу составляют антибиотики, боковые остатки 1-ой и 3-ей аминокислот которых имеют алифатическую природу и не связаны между собой. К этой группе относятся такие антибиотики, как ванкомицин и эремомицин. (Рис. 1). Вторую группу составляют антибиотики, имеющие ароматические боковые радикалы остатков 1-ой и 3-ей аминокислот (авопарцин). К третьей группе относятся антибиотики, ароматические остатки боковых радикалов которых связаны между собой, образуя четвертый макроцикл (тейкопланин и ристоцетин А) (Рис. 1).

выводы

1. Получена серия новых карбоксамидов эремомицина и установлено, что введение гидрофобных заместителей (5-алкокси-триптаминов) приводит к появлению активности в отношениии гликопептид-резистентных энтерококков при сохранении активности в отношении гликопептид-чувствительных бактерий.

2. Осуществлено удаление остатка 1-ой аминокислоты эремомицина методом деградации по Эдману, что создало основу для получения производных с нарушенным связывающим карманом.

3. Разработаны метод синтеза А^'-алкильных производных эремомицина и дез-(А'-метил-/)-лейцил)-эремомицина. Получены гидрофобные амиды гликопептидных антибиотиков (эремомицина, ванкомицина, тейкопланина и его агликона), а также низкоактивных продуктов деградации эремомицина, в том числе с нарушенным связывающим карманом.

4. Изучена антибактериальная активность полученных производных в отношении гликопептид-чувствительных и гликопептид-резистентных (GRE и GISA) штаммов. Установлено, что антибактериальная активность в отношении гликопептид-резистентных энтерококков определяется структурой гидрофобного заместителя и мало зависит от места его введения на периферии молекулы.

5. Проведено исследование механизма действия полученных нами гидрофобных производных эремомицина, активных в отношении GRE. Совместно с биохимиками установлено, что:

1) Введение гидрофобного заместителя сообщает производным новый механизм действия, не обусловленный дипептидным или депсипептидным связыванием и позволяющий преодолевать резистентность бактерий к гликопептидам.

2) Подавление синтеза пептидогликана гидрофобными производными происходит на стадиии трансгликозилирования, в то время как эремомицин подавляет стадию транспептидации.

6. Впервые осуществлена замена пептидной связи между 1-ой и 2-ой аминокислотами на аминоалкильную на примере дез-(Л/-метил)-Л/'',ЛГ'-дибензилэремомицина. Показано, что такая замена пептидной связи в полученных производных приводит к значительному снижению антибактериальной активности.

Заключение

В настоящей работе проведены исследования, направленные на изучение гидрофобных производных гликопептидного антибиотика эремомицина и некоторых производных ванкомицина и тейкопланина. Среди серии амидов эремомицина выявлен метокситриптамид эремомицина (9), высокоактивный в отношении как гликопептид-чувствительных, так и гликопептид-резистентных бактерий (GRE и GISA).

Показано, что введение гидрофобного заместителя (п-децильного или п-(п-хлорфенил)-бензильного) на периферии молекулы гликопептидного антибиотика сообщает полученным производным новый механизм действия, необусловленный дипептидным или депсипептидным связыванием с предшественниками пептидогликана. Подавление синтеза пептидогликана гидрофобными производными происходит на стадии трансгликозилирования, тогда как исходные антибиотики подавляют синтез пептидогликана на стадии транспептидации. Этот механизм действия придает полученным производным изученных гликопептидов достаточно высокую активность (МПК 4-8 мкг/мл) в отношениии гликопептид-резистентных (GRE и GISA) и гликопептид-чувствительных микроорганизмов независимо от строения исходного гликопептида. За счет связывания гидрофобных производных с -D-Ala-D-Ala (по механизму действия антибиотиков-гликопептидов) их активность в отношении гликопептид-чувствительных штаммов сопоставима с активностью исходных антибиотиков.

Установлена важная роль остатка 1-ой аминокислоты в проявлении антибактериальной активности эремомицина. На примере А^'-дибензильных производных продемонстрировано, что как отщепление 1-ой аминокислоты, так и восстановление 1,2 пептидной связи приводит к значительному снижению антибактериальной активности в отношении чувствительных штаммов.

1. Преображенская М.Н., Мирошникова О.В., Павлов А.Ю., Олсуфьева Е.Н. Антибактериальные гликопептидные антибиотики (обзор). // ХГС. 1998. -N.12. - С. 1605-1631.

2. Loll P.J., Axelsen Р.Н. The structural biology of molecular recogninition by vancomycin. Annu. Rev. // Biophys. Biomol. Struct. 2000. - V. 29. - P. 2652289.

3. Reynolds P.E. Studies on the mode of action of vancomycin. // Biochim. Biophys. Acta. 1961. -V. 52. - P. 403-405.

4. Anderson J.S., Matsutsuhashi M., Haskin M., Strominger J.L. Biosynthesis of the peptidoglycan of bacterial cell walls. Phosphplipid carriers in the reaction sequence. // J. Biol. Chem. 1967. - V. 242. - P. 3180-3190.

5. Chatterjee A.N., Perkins H.R Compounds formed between nucleotides related to the biosynthesis of the bacterial cell wall and vancomycin. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1966. - V. 24. - P. 489-494.

6. Strominger J.L., Trenn R.H., Scott S.S. Oxamycin, a competitive antagonist of the incorporation of Z)-alanine into a uridine nucletide in Staphylococcus aureus. // J. Amer. Chem. Soc. 1959. -V. 81. - P. 3803-3804.

7. Perkins H.R. Specificity of combination between mucopeptide precursors and vancomycin or ristocetin. // Biochem. J. 1969. - V. 111. - P. 195-205.

8. Williamson M.P., Williams D.H., Hammond S.J. Interactions of vancomycin and ristocetin with peptides as a model for protein binding. // Tetrahedron. 1984. - V. 40.-P. 569-577.

9. Barna J.С.J., Williams D.H. The structure and mode of action of glycopeptide antibiotics of the vancomycin group. // Annu. Rev. Microbiol. 1984. - V. 38 - P. 339-357.

10. Nagarjan R. Glycopeptide antibiotics. New York: Marcel Dekker. 1994.

11. Williams D.H., Bardsley B. The vancomycin group of antibiotics and the figth against resistant bacteria. // Angew. Chem. Int. Ed. 1999. -V. 38. - P. 1172-1193.

12. Cristofaro M.F., Beauregard D.A., Yan H., Osborn N.J., Williams D.H. Cooperativity between non-polar and ionic forces in the binding of bacterial cell wall analogues by vancomycin in aqeous solution. // J. Antibiot. 1995. - V. 48. -P. 805-810.

13. Olsufyeva E.N., Berdnikova T.F., Miroshnikova O.V., Reznikova M.I., Preobrazhenskaya M.N. Chemical modification of antibiotic eremomycin at the asparagine side chain. // J. Antibiot. 1999. - V. 52. - P. 319-324.

14. Allen N.E., LeTourneau D.L., Hobbs J.N., Jr. The role of hydrophobic side chains as determinants of antibacterial activity of semisynthetic glycopeptide antibiotics. // J. Antibiot. 1997. -V. 50. - P. 677-684.

15. Mackay J.P., Gerhard U., Beauregard D.A., Westwell M.S., Searle M.S., Williams D.H. Glycopeptide antibiotic activity and the possible role of dimerization: a model for biological signaling. // J. Am. Chem. Soc. 1994. - V. 116. - P. 4581-4590.

16. Good V.M., Gwynn M.N., Knowles D.J.C. MM 45289, a potent glycopeptide antibiotic which interacts weakly with diacetyl-L-lysyl-D-alanyl-ZJ-alanine. // J. Antibiot. 1990. - V. 43. - P. 550-555.

17. Gortlitzer J., Gale T.F., Williams D.H. Attempted introduction of a fourth amide NHinto the carboxylate-binding pocket of glycopeptide antibiotics. // J. Chem. Soc. Perkin Trans 1. 1999. - P. 3253-3257.

18. Trani A., Ferrari P., Pallanza R., Tarzia G. Deaminoteicoplanin and its derivatives. Synthesis, antibacterial activity, and binding strength to Ac-/)-Ala-Z)-Ala. // J. Med. Chem. 1989. -V. 32.-P. 310-314.

19. Harris C.M., Kopecka H., Harris T.M. Vancomycin: structure and transformation to CDP-I. // J. Am. Chem. Soc. 1983. -V. 105. - P. 6915-6922.

20. Nieto М., Perkins H.R. Physicochemical properties of vancomycin and iodovancomycin and their complexes with diacetyl-L-lysyl-D-alanyl-D-alanine. // Biochem. J. 1971. - V. 123. - P. 773-787.

21. Walto J.P., Williams D.H. Aspects of molecular recognition: solvent exclusion and dimerization of the antibiotic ristocetin when bound to a model bacterial cell-wall precursor. // J. Am. Chem. Soc. 1989. - 111. - P. 2474-2480.

22. Gerhard U., Mackay J.P., Maplestone R.A., Williams D.H. The role of the sugar and chlorine substituents in the dimerization of vancomycin antibiotics. // J. Am. Chem. Soc. 1993.-V. 115.-P. 232-237.

23. Staroske Т., O'Brien D.P., Jorgensen T.J.D., Roepstorff P., Williams D.H., Heck A.J.R. The formation of heterodimers by vancomycin Group Antibiotics. // Chem Eur. J.-2000.-P. 504-509.

24. Williams D.H., Maguire A.J., Tsuzuki W., Westwell M. An analysis of the origins of a cooperative binding energy of dimerization. // Science. 1998. - V. 280. - P. 711-714.

25. Schafer M., Schneider T.R., Sheldrick G.M. Crystal structure of vancomycin. // Structure. 1996. -V. 4. - P. 1509-1515.

26. Williams D.H., Searle M.S., Mackay J.P., Gerhard U., Maplestone R.A. Toward an estimation of binding constants in aguenos solution: studies of assotiations of vancomycin group antibiotics. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. - V. 90. - P. 1172-1178.

27. Pearce C.M., Gerhard U., Williams D.H. Ligands which bind weakly to vancomycin: studies by 13C NMR spectroscopy. // J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2. -1995. -V. 2. P. 159-163.

28. Loll P.J., Miller R., Weeks C.M., Axelsen P.H. A ligand-mediated dimerization mode for vancomycin. // Chem. Biol. 1998. - V. 5. - P. 293-298.

29. Batta G., Sztaricskai F., Makarova M.O., Gladkikh E.G., Pogozheva V.V., Berdnikova T.F. Backbone dynamics and amide proton exchange at the two sides of the eremomycin dimer by 15N NMR. // Chem. Commun. 2001. - P. 501-502.

30. Westwell M.S., Bardsley В., Dancer R.J., Try A.C., Williams D.H. Cooperativity in ligand binding expressed at a model cell membrane by the vancomycin group antibiotics. // Chem. Commun. 1996. - P. 589-590.

31. Bearegard D.A., Williams D.H., Gwynn M.N., Knowles D.J.C. Dimerization and membrane anchors in extracelluar targetting of vancomycin group antibiotics. // Antimicrob. Agents. Chemother. 1995. -V. 39. - P. 781-785.

32. Cooper M.A., Fiorini M.T., Abell C., Williams D.H. Binding of vancomycin group antibiotics to D-alanine and D-lactate presenting self-assembled monolayers. // Bioorg. Med. Chem. -2000. V. 8. - P. 2609-2616.

33. Batta G., Cristofaro M.F., Sharman G.J., Williams D.H. Demonstration of the difference in binding affinity between the two binding sites of the ristocetin A asymmetric dimer. // Chem. Commun. 1996. - P. 101-103.

34. Kaplan J., Korty B.D., Axelsen P.H., Loll P.J. The role of sugar residues in molecular recognition by vancomycin. // J. Med. Chem. 2001. - V. 44. - P. 1837— 1840.

35. Тренин А.Ю., Олсуфьева E.H. Механизм резистентности к гликопептидным антибиотикам как основа создания новых производных, способных к преодолению резистентности. //Биоорг. хим. -1997. Т. 23. - С. 851-867.

36. Woodford N., Johnson А.Р., Morrison D., Speller D.C.E. Current perspectives on glycopeptide resistance. // Clin. Microbiol. Rev. 1995. - V. 8. - P. 585-615.

37. Белобородова H.B. Антибиотики-гликопептиды: клиническое значение. // Русский медицинский журнал. 1998. -N. 6. - С. 832-836.

38. Courvalin P. Resistance of enterococci to glycopeptides. // Antimicrob. Agents Chemother. 1990. - V. 31. - P. 2291-2296.

39. Perichon В., Reynolds P., Courvalin P. FawD-type glycopeptide-resistant Enterococcus faecium BM4339. // Antimicrob. Agents Chemother. 1997. - V. 41. -P. 2016-2018.

40. Marshall C.G., Lessard I.A.D., Park I.-S., Wright G.D. Glycopeptide antiobiotic resistance genes in glycopeptide-producing organisms. // Antimicrob. Agents Chemother. 1998 - V. 42. - P. 2215-2220.

41. Павлов А.Ю., Преображенская М.Н. Химическая модификация гликопептидных антибиотиков (обзор). // Биоорг. хим. 1998. - Т. 24. - С. 644-662.

42. Allen N.E., Hobbs J.N., Nicas T.I. Inhibition of peptidoglycan biosynthesis in vancomycin-susceptible and -resistant bacteria by a semisynthetic glycopeptide antibiotic. // Antimicrob. Agents Chemother. 1996. - V. 40. - P. 2356-2362.

43. Allen N.E., LeTourneau D.L., Hobbs J.N., Jr. Molecular interactions of a semisynthetic glycopeptide antibiotic wiht Z)-alanyl-Z)-alanine and Z)-alanyl-Z)-lactate residues. // Antimicrob. Agents Chemother. 1997. - V. 41. - P. 66-71.

44. Izaki K., Strominger J.L. Biosynthesis of the peptidoglycan of bacterial cell walls. Purification and properties of two Z)-alanine carboxypeptidases from Escherichia coli. // J. Biol. Chem. 1968. - V. 43. - P. 687-698.

45. Nieto M., Perkins R., Reynolds P.E. Reversal by a specific peptide (diacetyl-ay-Z-diaminobutyryl-Z)-alanyl-D-alanine) of vancomycin inhibition in intact bacteria and cell-free preparations. // Biochem. J. 1972. - V. 126. - P. 139-149.

46. Sharman G.J., Williams D.H. Common factors in the mode of action of vancomycin group antibiotics active against resistant bacteria. // Chem. Commun. 1997. - P. 723-724.

47. Ge M., Chen Z., Onishi H.R., Kohler J., Silver L.L., Kerns R., Fukuzawa S„ Thompson C., Kahn D. Vancomycin derivatives that inhibit peptidoglycan biosynthesis without binding D-A\a-I)-Ah. II Science. 1999. - V. 284. - P. 507511.

48. Kerns R., Dong S.D., Fukuzawa S., Carbeck J., Kohler J., Silver L., Kahne D. The role of hydrophobic substituients in the biological activity of glycopeptide antibiotics. // J. Am. Chem. Soc. 2000. - V. 122. - P. 12608-12609.

49. Eggert U.S., Ruiz N., Falcone B.V., Branstrom A.A., Goldman R.C., Silhavy T.J., Kahne D. Genetic basis for activity differences between vancomycin and glycolipid derivatives of vancomycin. // Science, в печати.

50. Sundram U.N., Griffin J.H. Novel vancomycin dimers with activity against vancomycin-resistant enterococci. // J. Am. Chem. Soc. 1996. - V. 118. - P. 13107-13108.

51. Rao J., Whitesides G.M. Tight binding of a dimeric derivative of vancomycin with dimeric Z-Lys-D-Ala-D-Ala. // J. Am. Chem. Soc. 1997. - V. 119. - P. 1028610290.

52. Rao J., Yan L., Lahiri J., Whitesides G., Weis R.M., Warren H.S. Binding of a dimeric derivative of vancomycin to Z-Lys-D-Ala-D-lactate in solution and at a surface. // Chem. Biol. 1999. -V. 6. - P. 353-359.

53. Stack D R., LeTourneau D.L., Mullen D.L., Butler T.F., Allen N.E. Covalent glycopeptide dimers: synthesis, physical characterization, and antibacterial activity. // 37th Intersci. Conf. Antimicrob. Agents Chemother. 1998. -V. 37. - P. 146.

54. Pavlov A.Y., Lazhko E.I., Preobrazhenskaya M.N. A new type of chemical modification of glycopeptide antibiotics: aminomethylated derivatives of eremomycin and their antibacterial activity. // J. Antibiot. 1997. - V. 50. - P. 509-513.

55. Pavlov A.Y., Preobrazhenskaya M.N., Malabarba A., Ciabatti, R., Colombo L. Mono and Double Modified Teicoplanin Aglycon Derivatives on the Amino Acid No. 7; Structure-Activity Relationship. // J. Antibiot. 1998. - V. 51. - P. 73-81.

56. Shi Z., Griffin J.N. Catallysis of carbamate hydrolysis by vancomycin and semisyntetic derivatives. // J. Am. Chem. Soc. 1993. - V. 115. - P. 6482-6486.

57. Sundram U.N., Griffin J.N. General and efficient method for the solution and solid-phase synthesis of vancomycin carboxamide derivatives. // J. Org. Chem. 1995. -V. 60.-P. 1102-1103.

58. Snyder N.J., Zweifel M.J., Cooper R.D.G., Rodriguez M.N., Mullen D.L., Butler T.F. // 37th ICAAC, Toronto, Canada. 1997. - p. F-2.

59. Booth P.M., Stone D.J.M., Williams D.H. The Edman degradation of vancomycin: preparation of vancomycin hexapeptide. // J. Chem. Soc. Commun. -1987. P. 1694-1695.

60. Branstrom A.A., Midha S.S., Goldman R.C. In situ assay for identifying inhibitors of bacterial transglycosylase. // FEMS Microbiol Lett. 2000. - V. 191. - P. 187190.

61. McPhail D., Cooper A. Thermodynamics and kinetics of dissociation of ligand linduced dimers of vancomycin antibiotics. // J. Chem. Soc. Faradey Trans. 1997. -V. 93. - P. 2283-2289.

62. Fehrentz J.-A., Castro B. An a efficentsynhtesis of optically active a-(t-butoxycarbonylamino)-aldehydes froma-amino acids. // Synth. Commun. 1983. -P. 676-678.

63. Yan H., Qi D., Cheng X., Song Z., Li W., He B. Antibiotic activities and affinities for bacterial cell wall analogue of 7V-demethylvancomycin and its derivatives. // J. Antibiot. 1998. -V. 51. - P. 750-756.

64. Rittle K.E., Homnick C.F., Pontichello G.S., Evans B.E. A synhtesis of statine utilizing an oxidative route to chiral a-amino aldehydes. // J. Org. Chem. 1982. -V. 47. - P. 3016-3018.

65. Soucek M., Urban J. // Collect. Czeech. Chem. Commmun. 1995. - V. 60. - P. 693-696.1. БЛАГОДАРНОСТИ

66. К ГХрил. 2. 1 Н-ЯМР-спектр пропаргиламида эремомицина (4)8Н176.3562j- 174.3948 174.157: 173.2611171.2391- 159.3201- 157.8501136.9457105.93271. Г 95.2746 95.23671. Л О"ш1. СЛ"шги