Вольтамперметрия мочевой кислоты и ее определение в биологических системах и некоторых объектах окружающей среды тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.02 ВАК РФ

тоцсша щщдашшсиий лшьиршгьт

На правах рукописи

АБЛШША СВЕТЛАНА АЛЕКСАНДРОВНА

ВОЛШШШРиШ'ШЯ МОЧЕВОЙ КИСЛОТУ И ЕЕ ОИГЕДШИШ В БИОШ'ЛЧШШ СИСТЕМАХ И ШСОТОРЦХ ОБЪЕКТАХ ОКШШЦЁЙ СЩЫ

02.00.02 - Аналитическая химия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Томск - 1994

Работа выполнена в Томском политехническом университете

НпучииЕ' руководитель: доктор химических наук, профессор Велихмаер Я.А.

Научный консультант: кандидат химических наук, доцент Анисимова Л. С.

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор

Ведущая организация - Сибирски? государственный медицинский университет, г,Томск

на заседании Специализированного Совета К.063.80.09 в Томском политехническом университете по адресу: 634004, г.Томск, прЛенина,30, ТПУ, химико-технологический факультет, Большая химическая аудитория.

С диссертацией можно ознакомиться в научно-технической библиотеке Томского политехнического университета.

Автореферат разослан " 1994г.

/

/ Ученый секретарь Спшиализированного Совета, кмшидат химических наук,

Водзинский Ю.В.

кандидат химических наук, с.н.с. Джабйрова н.к.

Защита состоится " / " ШО^сЛ- . 1994г. в

часов

доцент

ъ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работа. Мочевая кислота (МК) является конечным продуктом пуринового метаболизма у человека и животных и образуется во всех тканях. Нарушение обмена МК является причиной и сопрововдает такие заболевания как подагра, артриты, мочекаменная болезнь, облучения и другие. Количественное определение ИК представляет собой необходимый биохимический показатель в номенклатуре клиникодиагностических параметров. Является актуальным в оценке загрязнения объектов окружающей среды (стоков животноводческих ферм, загрязнений почвы и естественных водоемов), а также при оценке пригодности зерна и эернопродуктов для посева и употребления в пищу. В связи с этим аналитическая практика предъявляет повышенные требования к совершенствованию методов её определения.

Одним из перспективных методов контроля биосистем и объектов окружающей среды, обладающим высокой чувствительность;"! и селективностью является вольташерометрия.

Возможности вольтадаерометрии для анализа МК раскрыты далеко не полностью, а имеющиеся сведения весьма противоречивы и ограни-, чены. Практически отсутствуют методики.вольтамперометрического определения ПК. Выбор оптимизации электродного процесса определяет точность и чувствительность метода. Поэтому исследование вольтамперометрического поведения ПК продолжает представлять интерес и требует разработки экспрессных и высокочувствительных методик контроля МК в сложных по составу объектах.

Данная работа в некоторой степени восполняет' этот пробел.

Направление диссертационной работы .является составной частью работ по госбюджетным, темам № 0186.0078 283 по заказ-наряду Тоу.-МикрД, № 1.139 "Анализатор мочевой кислоты".

Цель работы. Исследовать вольташерометрическое поведение МК и разработать методики её' количественного определения в биологических системах и некоторых объектах окружающей среды.

Научная новизна. Показана способность ПК окисляться на различных типах твердых электродов С'Р£ , Аи, графит, стеклоугле-род, пирографит).

Установлены оптимальные условия определения ПК методом вольт-амперометрии. Впервые с его использованием определены протоли -

тпческие константы диссоциации МК.

- Впервые показано использование адсорбционной инверсионной г,ольтамперометрии для улучшения метрологических характеристик анализа при определении МК на уровне<5ЛО-7моль/л.

- Установлена природа тока окисления МК, рассмотрена эквивалентная схема системы олзктрод-раствор и определен ряд физико-химических констант.

- Предложена вероятная схема механизма электродного процесса с использованием стеклауглеродного электрода.

- Оценено влияние основы пробы на величину тока окисления '•К и разработаны методики иг иЦ-гО определения МК в сыворотке крови, моче и воде на уровне 10"^ -г- 10"** моль/л и 4 10"'' чоль/л соответственно.

- Методика определения МК в сыворотке крови аттестована на уровне ГОССТАНДАРТА М. Совместно с лабораторией аналитического приборостроения П1У создан лабораторный макет анализатора МК.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Условия вольташерометрического поведения МК на различных типах твердых электродов.

2. Влияние различных факторов (природы растворителя, рН, режима регистрации вольтямперэграмм, , Е0 , ) на потенциал и величину тока окисления МК.

3. Интерпритация данных о природе тока и вероятной схеме электродного процесса окисления МК.

4. Результаты по определении ряда физико-химических параметров электродной реакции с участием МК, имеющие аналитическое значение.

5. Методики количественного определения МК в биологических средах (сыворотке крови, моче) и воде.

Практическое значение. Выполненная работа расширяет возможности использования вольташерометрического метода для определения органических веществ в биологических системах и объектах окружающей средн. Установленные условия оптимизации электродного процесса позволили разработать высокочувствительные и селективные методики количественного анализа МК. Созданный совместно с лабораторией аналитического приборостроения ШУ лабораторный макет анализатора МК позволяет экспрессно проводить анализ сыворотки проза, мочи и ускорить постановку достоверного диагноза, повы-

сить эффективность лечения. Открывается перспектива применения метода для создания диагностической системы пуринового метаболизма, токсикологического анализа сточных и природных вод, оперативного контроля качества пищевых и зернопродуктов на содержанье МК.

Использование результатов работы. Разработанные методики вольтамперометрического определения МК в биологических средах (сыворотке крови, шче) и воде апробированы и переданы для использования в Сибирский медицинский университет, ШИ биологии и биофизики при Томском госуниверситете, НИИ курортологии и физиотерапии (г.Томск), медицинские учреждения г.Хабаровска, что подтверждается соответствующими актами о внедрении.

Методика определения МК в сыворотка крови аттестована на уровне ГОССТАНДАРТА Иг и допущена к применению в любых биохимических и клиникодиагностическнх лабораториях медицинских учреждений,что подтверждается соответствующим документом.

Апробация работы.' Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на Региональных конференциях "Электроаналитика Сибири -90" (г.Томск, 1990г.), "Аналитическая химия на службе здоровья человека" (г.Томск,1991г.), "Актуальные эколого-экономи-ческие проблемы современной химии. Х«мия-92". (г.Самара,1992г.), "Аналитика Сибири и Дальнего Востока " (г.Томск,1993г.), Всероссийском гидрогеохимическом совещании "Многоцелевые гидрогеохимические исследования в связи с поисками полезных ископаемых и охраной подземных вод" (г.Томск,1993г.), 1У Всероссийской конференции "ЭМА-94" (г.Москва,1994г.),-семинаре-выставке "Конверсия и приборостроение" (г.Томск,1994г.); на объединенных научных семинарах кафедр аналитической химии, физической и коллоидной химии и проблемной лаборатории физико-химического определения микропримесей полуповодников и особочистых материалов Томского политехнического университета, 1992-1994г .г.

Публикации: одно авторское свидетельство, четыре ¿татьи, шесть тезисов.

Структура диссертации . .Работа объемом 141 страшна машинописного текста, включая 23 рисунка и11 таблиц, состоит из введения, пяти глав, выводов и приложения. Список литературы содержит 146 библиографических названий работ отечественных и зарубежных авторов.

Б первой главе представлен литературный обзор по физико-химическим методам исследования и определения МК; рассматривается применение вольтамперометрических методов в анализе МК. На основании обзора формируются задачи исследования. Описание используемой аппаратуры, типов электродов, методики проведения эксперимента приведены во второй главе. Третья глава посвящена Выбору условий оптимизации олектроокисления МК. В четвертой главе приведены данные исследований природы тока и механизма окисления МК методами переменнотоковой и циклической вольтам-пероыетрии, хроноамперометрии, вольтамлерометрии с использовни-г ем вращающегося дискового электрода. Определены некоторые физико-химические константы, имеющие аналитическое значение и представляющие теоретический и практический интерес. Изложению ре-зельтатов опытов по оценке предела обнаружения и нижней границы определяемых содержаний МК, взаимного влияния веществ и разработке методик определения МК в биологических средах (сыворотке крови, моче) и воде посвящена пятая глава. Анализ полученных экспериментальных данных приведен в обсуждении результатов. В заключение сделаны выводы. В приложении представлены свидетельство и программа метрологической аттестации, акты о внедрении работы, список публикаций, отражающих содержание диссертации.

I. ВЫБОР УСЛОВИЙ СПШИЗАЩИ ЭШТРООКИСЛЕНИЯ

мочевой кислота.

Для количественного определения МК использован метод воль-тамперометрии. Информацию о концентрации определяемого вещества получали, регестрируя вольтамперные кривые и измеряя максимальный анодный ток.

В качестве индикаторных выбраны следующие твердые электроды: РЬ ,/7аи три типа углеродных электродов - графит, пропитанный полиэтиленом с парафином в вакууме (Г), пирографи* ШГ) и стеклоуглерод (СУ). По потенциалу пика окисления электроды можно расположить в ряд:

Г<СУ < ПГ< Аи<Р* с потенциалами пика 0,63; 0,68; 0,75; 0,77; 0,78 В соответственно. Структурное подобие материала электрода и адсорбция плоскостью молекул определяемого вещества (стереоспецифическая адсорбция) благоприятствуют переходу электрона при меньшем значении потенциала и способствуют более обратимому окислению МК

на графите, чем на СУ и ПГ. Затруднение процесса электроокисления МК на металлах обусловлено также и образованием оксидных слоев при потенциалах положительнее 0,8 В.

Максимальное значение тока наблюдали на графитовом электроде, минимальное - на платине. По-видимому, на единице площади графита окисляется большее количество молекул МК.

Хотя на электроде из графита МК,окисляется при меньшем потенциале и величина регистрируемого тока на 30% выше, чем в' тех же условиях на СУ-электроде, однако из-за большого значения остаточного тока он оказался менее удобкш в работе, чем СУ. В связи с этим в качестве индикаторного выбран СУ-электрод.

, Установленные оптимальные фоновые электролиты представлены в табл. I. Линейная зависимость градуировочных графиков сохраняется в диапазоне 6.10""^ * IcH? моль/л^

Определяющим фактором количественного определения МК является рН среды. При повышении рН потенциал полуволны смещается к менее положительным значениям. Это обусловлено смещением проклитического равновесия МК в растворе. В кислых средах МК находится в молекулярной про тонированной фо рме. При повышении рН на графике Ejyg-pH наблюдали два перегиба, соответствующие pKj= 5,59 и pKg = 9,20. При рН < рК^ регистрировали четко выраженный, хорошо воспроизводимый ( St<0,Об)'аналитический сигнал МК.

Установлено влияние природы растворителя на процесс электроокисления органического вещества. По легкости окисления UK растворители можно расположить в следующий ряд: ацетонитрил < этанол < вода < пропиленкарбонат (с потенциалами пика 0,28; 0,37; 0,55; 0,85 В соответственно). Максимальное значение тока регистрировали в ацетонитриле, минимальное - а про-'пиленкарбонате. Различные значения потенциалов пика и величины тока обусловлены специфической сольватацией деполяризатора молекулами растворителя: склонностью к донорно-акцепторному и другим видам взаимодействия, а также изменением вязкости среды. Применение неводных растворителей позволило снизить предел обнаружения МК более чем в три раза по сравнению с водными средами (табл.1).

Важным фактором при определении МК является выбор скорости изменения потенциала электрода и режима регистрации вольтаы-перных кривых. Оптимальными является скорость 40 4 60 иВ/с. при съемке линейных и 5 + 10 мВ/с - дифференциально-импульсных

e *

L с

- 4

ro

.5 r.

'J. со с

ь ь

СП I

. о

ЬН »-H t~< • • а

о см 1-1 •-о" оС Г-"

сл t- а, I I

о о О

k-í нч t-ч

ЧО VO

с-

H f\i H

000

1 i i s й s

o ra* о

m m ил

ь ь ь

►--< VH (-'

! ) I

ООО и .м н

а

œ С--

а ch m

о оз -

a - о

s i-t <—i

•о

0 щ я

Гц IX, (Ж*

1 01 ж о

'4.

1-4

я

о

г и о •Y О 1 t—4 en ь г

ó t- ô ó чо

Ы со' VO

о

i—I

с\) СМ

о о

о а*

í +

о н

% ►H ь ЬЧ 00 о ы % 1 Ы >-t

CM ил со чо

>n СП —*

нч <\J

О о

о* о

•(■ +

о »-•

о о о о

LO tn

Ь 'о

нн •

'о. Ь

Ы >-4

г г

•f +

э о о

1-4

о

да о/ *

vo

OJ

о

о m

ж

со

л

я-

о

-a-

ж о 2 ^

я О

m

INJ

о*

Z

о о ж о

(Ч -я-

о m te

ПО

ы я

о о

i s

со >- СЛ ON о t-t <9 аз

с-\ m if" •а- ^ сл со

о о О О O О о

* t ■Г •f + + +

VO ил о VO со со яз чо

гл СП -i* -=»• см с-\ m со

о о о о о о О О

m

ь

+

г

in

3 к

l/ï О

к in

(м тлаз

о о см но

н

.-т я

о Л-

|Г\ О

аз ТА

со ж

ц со

^ а

s

ес

in tri

о о

о* о*

m

ь

1

("I

о

ЧО »

о

ГЦ Л-

•я.

m к

U0

ы

X

m о

вольташорогремм, а наиболее чувствительным - режим дифференциальной вольташерометрии.

Использование предварительного адсорбционного концентрирования (Еэ = 0,10 -г 0,20В; £э = 60 с) позволило регистрировать аналитический сигнал с четко выраженным максимумом и определять низкие концентрации ЫК на уровне <5'Ю~7 моль/л.

п. иссщоваше электродюго процесса окисления мочевой кислота И определение ншоторых физшо-хдоических констант.

Изучено влияние природы материала электрода на некоторые характеристики двойного электрического слоя (ДОС), методом переменного ковой вольташерометрии. Фарадёевские токи в области потенциала пика имеют характерный максимум. Вид емкостных такое представлен на рис. I. При рассмотрении эквивалентной схемы системы электрод-раствор(рис.Г) получена система дифференциальных уравнений. Установлено изменение всех трех параметров ДОС (С^, Йп,Сп ) в процессе электроокисления МК в зависимости от материала электрода. Показано, что в переменнотоковом режиме можно с помощью подбора материала электрода уменьшить искажение аналитического сигнала, связанного с пререзарядкой двух емкостей (С| и С„). Использование переменнотоковой вольтампероыетриа по сравнению с постояннотоковой обеспечивает повышение чувствительности определения МК в три раза.

Хроноамперометрические исследования природы тока электроонн-сления МК показали подчинение его характера закапай полубесконечной диффузии. Из графика зависимости 1п?ел ~ ^//Т Установлено, что электроокисление МК протекает с участием двух электронов. Впервые рассчитано значение коэффициента диффузии Ш( в водной среде; • Д * (0,63 ± 0,03) -Ю-5 си/с .

При установлении природы и механизма электродного процесса электроокисления МК использовали метод ЦВА и вольташерометрис с вращающимся дисковым электродом.

Характер циклических вольтамерограмм представлен на рис.2. При катодном реверсе потенциала пик восстановления ЫК не зарегистрирован, а полученная обратная волна соответствует дальнейшему протеканию процесса элентроокисдения МК.

и

10 0.8

В.В

а$ м ол р.! ю о,г

ФЙ7

1 -1— / -Г -т- г' .._ , ,- —| Г 1-г-г

р. \

* 4 4

а о

Рис. I. Эквивалентная схема системы электрод-раствор /а/ и емкостные кривые электроонисления МК /б/; буфер Бриттона-Робинсона, рН 1,89; емкостной ток: Р4/1/, СУ /2/, Г /3/; Р£/1/, СУ /2/, Г /3/ с С^ = 9,5'Ю моль/л; нулевая линия тока /4/.

0,6

Рис. 2. Циклическая вольтамперограмма МК. Фон: буфер Бриттона-Робинсона, рН 1,69; = 2,9-Ю"5 моль/л;

' чл/" = 50 кВ/с.

Зависимость величины предельного тока от \ГйГ в диапазоне 400 + 2000 об/мин носит прямолинейный характер. Адсорбционная составляющая, рассчитанная из графика 1лма. -\/иГ эктра-поляцией прямых на ось ординат и из отношения фарадеевской и емкостной составляющих тока в режиме переменною ковой вольт-амперометрии, не превышает 1/9 суммарного тока.Следовательно, ток электроокисления МК является в основном диффузионным в области предельного тока.

По уравнению Левича рассчитано число электронов, участвующих в электродном процессе, во всем диапазоне рН: Е = 1,9 ± 0,2

Т

На полулогарифмически* графиках Е - А прщ. -I в зависимости от скорости вращения электрода имеется 2 или 3 излома, что указывает на сложный характер электродного процесса, протекающего, по видимому, через стадию образования короткожи-вущих ион-радикалов. Рассчитанные эффективные коэффициенты переноса^« имеют различные значения и изменяются от I до 0,25 по мере протекания процесса.

В целом электродный процесс является диффузионно-контроли-руемым, протекает с участием двух электронов и двух протонов и может быть осложнен как замедленными электрохимическими стадиями, так и адсорбцией,и изменением механизма процесса. На основании проведенных исследований предложена вероятная схема электроокисления МК в оптимальных условиях5 . Рн <

О

НУ .I

АЛ -е. ЛЛ шЛЛ

ни- и и. н

I а . ° . I н

-А оХ 1 )а0 алтю оЛ I ^

о н 0 и он И

»¿ни щ ^

Ш. ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДА АШДНОЙ ВОЛЬТАШЕРОЫЕГРШ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЧЕВОЙ КИСЛОТЫ В БИОЛОГИЧЕСКИХ СИ-СТШАХ И ЮДЕ.

Возможность аналитического определения ЫК методом анодной вольтамперометрии охарактеризована нижней границей определяемых содержаний (Сн , 0,33) и пределом обнаружения {Ст1п ), рассииганным по трахсигмовому критерию (табл.1). Полученные значения метрологических характеристик свидетельствуют о преимуществе использования метода дифференциальной вольтамперометрии для количественного определения МК.

Установленные оптимальные условия электродного процесса использованы при разработке методик количественного определения ЦК в сыворотке крови, моче и воде.

При разработке методик оценено мешающее влияние на аналитический сигнал различных соединений и ионов, содержащихся в анализируемых объектах' и являющихся электрохимически активными в условиях проведения анализа. Показано, что 3-оксиантраниловая и аскорбиновая кислоты, фенол и его производные на уровне (10 + 10"^) моль/л,тысячекратные избытки щавелевой, молочной и лимонной кислот, цистина, цистеина и ионов Г, С£', ¿г: Со.(¡), Ъ>{ё) не мешают количественному определению Ш,

Присутствие белков в пробе затрудняет подвод деполяризатора к электроду и снижает чувствительность и точность определения. Основа биопробы, освобожденная от содержащихся в ней белков вольфрамовокислым натрием и серной кислотой по общепринятой методике, _не влияет на величину тока и форцу вольтамперных кривых (рис.3)"

Установлены соотношения объемов пробы и фона, при которых сохранялась линейность градуировочных графикой. Для анализа достаточно 0,2 мл сыворотки крови, 0,02 4 0,1 мл мочи, 1-2 мл во- • да.

На основании подобранных оптимальных условий впервые разработаны экспрессные методики ¿п уИго определения МК на уровне 10"^ ♦ Ю-3 моль/л в биологических средах и 10"® + 10~'моль/л в воде. Количественное определение проводили методом добавок стандартного раствора. Время анализа единичной пробы - 2 5 мин.

Правильность разработанных методик подтверждена проведением сравнительных анализов проб колориметрическим методом, применяющимися в настоящее время в клинической практике (табл.2) и

Рис.3. Зависимость тока окисления МК от концентрации;

фон: 0,05 Ы КСу%04 /I/; 0,05 И КСцН^О^ с добавкой 0,02 мл мочи /2/; 0,1 мл сыворотки крови /•'■/; >л>-= 50 мВ/с; ¿, = 10с.

/ а * ?

<?. (О, ноль ¡Л

п методом "введено - найдено" (табл.3).

Методика количественного определения МК в сыворотке крови аттестована на уровне ГОССТАНДАРТА РФ и допущена' к применения в любых биохимических и клиникодиогностических лабораториях медицинских учреждений, что подтверждается соответствующим документом.

Таким образом, разработанные методики количественного определения МК в сложных по составу объектах (сыворотке крови,моче, поде) экспрессии, не требуют применения дефицитных и дорогостоящих реактивов, отличаются высокой селективностью и чувствительностью. Минимально определяемая концентрация на 2-3 порядка ниже методов, используемых в настоящее время в клинической практике (колориметрических, энзиматических). Разработанные методики апробированы в ряде аналитических и биохимических лабораториях, что подтверждается пятью актами о внедрении.

В настоящее время совместно с лабораторией аналитического приборостроения ШУ создан лабораторный макет анализатора МК, предназначенный для её экспрессного определения в биологических системах. .

Таблица 2

Определение МК в биологических объектах (Р - 0,95. п « 5)

Объект Л пробы ВА колориметрия (с - б)хмол»Д__(с * о)¿моль/л

сиворот-~ ~1 (1.6± 0,1) ЛСГ* а?85 0,2)~ КГ4"

К» крови I, х ,,

2 (2,0 ±0,1)* 10 (2,1* 0,2) «кН

3 (3,1 *0,2)-10~4 (3,2± 0,3) «Ю-1* '4 (4,0* 0,2)-10"* (4,2 *0,2) «КН*

моча I (1,4 (1,6 ±0,3) «Ю-З

2 (2,01*0,1)-КГ; (2,3 ±0,2) «10-3

3 (2,7 £0,1). 10 (3,0 ±0,2) ЛО"3 ______4____(3,4 ±041).10-3_ _ Ра7_10,1)_.10гЗ_

Таблица 3

Определение МК методом ЙА (Р*0,95, п*5)

Объект § пробы Введено , С, Найдено, ;__________моль/д______иоль/л_ _

•»орот- х г.О'Ю-4 (2,0 £0,1).КГ4

"крови 2 4,0Л(Н (4,1 ад.2).иИ

3 5,2.10-5 (4,9£ 0,3)-10~5

моче I 3,5.10-3 (3,5 £0,2) ЛО-3

2 '/ 1.4.10-3 (1,3 +0,2) ЛО""3

3 8,0« КГ4 (8,0 ±0,8) ЛО-1»

вид» I 5,3.10-7 (5,0 ±0,3)Л(Г7

2 1;2Л0-8- (1,5 ф0,2).10-8

ВЫВОДЫ

1. На основе изучения вольтамперометрического поведения МК показана возможность её электроокисления на тверды* электрода* ( Pfc , Au., Г СУ, ПГ).

2. Установлено влияние различных факторов (природа электрода и растворителя, Еэ, t3 , w , режима регистрации вольтамперо-грамм) на потенциал и величину тока окисления МК.

3. Показана определяющая роль рН среды на количественное определение МК. Впервые вольтамперомегрическим методом определены константы диссоциации МК (pKj » 5,59; pKg » 9,20).

4. Впервые показана возможность определения МК на уровне Ю~9 < 10" моль/л с использованием адсорбционной инверсионной вольтамперометрии (Ед = 0,1 4 0,2В; t д = 40 4 60с).

5. Рассмотрена эквивалентная схема системы электрод-раствор. Различными вариантами вольтамперометрии определены некоторые физико-химические параметры электродной реакции с участием МК, имеющие аналитическое значение ( 2 , ,Д).

6. Установлено, что электроокисление МК представляет сложный диффузионно-коктролируемый процесс, протекающий с участием двух электронов и двух протонов. Предложена вероятная схема электродного процесса окисления МК на стеклоуглеродном электроде.

7. Сделана оценка пределов обнаружения и нижней границы определяемых содержаний МК. Значения Cmio и Сн составляют '

6,4 -Ю"9; 5,0-Ю"9 моль/л и 1,5 ' 10~9; 1,4 -'Ю-9 моль/л соответственно в водккх и неводных средах.

8. Оценено влияние основы пробы на величину тока. Обоснован и экспериментально подобран объем биоматериала и воды для количественного определения МК. Показано, что для анализа достаточно 0,1 мл сыворотки крови, 0,02 ♦ 0,1 мл мочи, 1-2 мл воды.

9. основании, установленных оптимальных условий разработаны методики in viiio определения МК в сыворотке крови,моче и воде без отделения основы на уровне 4 Ю-"*; Ю-'* 4 10"^; I0"9 4 Ю~7 моль/л соответственно. Методики апробированы в ряде медицинских учреждений и НИИ г.г. Томска и Хабаровска, что подтверждается соответствующими актами о внедрении.

10.Методика определения МК в сыворотке крови аттестована на уровне ГОССТАНДАРТА PS и допущена к применению в биохимических лабораториях медицинских учреждений, что' подтверждается соответствующим документом. Совместно с лабораторией аналитического приборостроения ТПУ создан лабораторный иакет анализатора МК.

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ ШУБЛЩОВАЮ В ОЩУЩ® РАБОТАХ:

1. Ивановская Б.А., Абаканиа С.А., Анисимова Л.С., Слипченко В.Ф. Определение органических лекарственных препаратов в биологических средах методами вольтамперомегрии // Электроаналитика Сибири-90.Проблемы и перспективы. Регион, конф. Тезисы докладов. - Томск, 1990. - С.25.

2. Анисимова Л.С., Слипченко В.Ф., Абакшина С.А., Ивановская Е.А. Фарыакокинегические исследования лекарственных препаратов

и метаболитов при различных путях их введения в организм// Аналитическая химия на службе здоровья человека. Региональн. научно -практ. конф. Тезисы докладов. - Томск,1991 . - C.IQ.

3. Анисииова Л.С., Слипченко В.Ф., Каплин A.A., Новикова (Абакшина) С.А.. Способ инверсионного вольтадаерометрическо-го определения мочевой кислоты // A.C. 1665292 СССР, ШШ5 ,

01 » 27/48.- » 4680321/25; Заявл. 16.04.89; опубл. 23.07.91. Бел. » 27

4. Анисииова Л.С., Слипченко В.Ф., Абакшина С.А., Ивановская Е.А.. Фармакокинегическяе исследования лекарственных препаратов и метаболитов при различных путях их введения в организм // Деп. в ОШЩЭДИМ. - Томск, 1991 . - М49-Ж-92.-С.66-68.

5. Абакшина С.А., Анисииова Л.С. Электрохимическое поведение и разработка экспресс - методики определения мочевой кислоты в природных и биологических средах // Актуальные эколого-акономические проблемы современной химии. Химия -92. Научн.-практ. конф. Тезисы докладов. - Самара,1992. - С.

6. Абакшина С.А., Анисимова Л.С., Слипченко В.Ф..Белихма-ер Я.А. Определение мочевой кислоты в биологических средах методом дифференциальной вольтамперомегрии //Е. аналит.химии.-1993. - Т.48., » 2. - С.370-375.

7.Дбакшша С.А,Анисимова Л.С., Белихмаер Я.А. Оптимизация количественного определения мочевой кислоты методом вольтам-перометрии 11 Аналитика Сибири и Дальнего Востока. Регион, конф. Тезисы докладов. - ТЪмск, 1993.- СД7.

8. Абакшина С.А., Анисимова Л.С., Белихмаер Я.А.. Вольтам-перометрическое определение мочевой кислоты в природных и сточных водах // Многоцелевые гидрогеохимические исследования в связи с поисками полезных ископаемых и охраной подземных вод.

Всероссийское совещание, Тезисы докладов,- Томск,1993.-С.199-200.

9. Иванов И.Ю., Абакшина С.А., Белихмаер Я.А. Вольтамтеро-ь<етрический анализатор мочевой кислоты // Электрохимические методы анализа. ЭЙА-94. 1У Всероссийск. конф. Тезисы докладов. - Москва, 1994. -С.60

10. Абакшина С.А., Анисимова Л.С., Назаров В.Ф., Белихмз-ер Я.А.Вольтамперокетрия мочевой кислоты на твердых электродах //Ж. аналиг. химия,- 1994. - Г.49., & 9 . -С.

11. Абакшина С.А., Анисимова Л.С., Беяихмаер Я.А., Манвей-лер Н.Ф. Определение мочевой- кислоты в сыворотке-крови и моче вольтахгтерометрическто методом // Кдинич. лабор. диагностика. - 1994. - »6. - С.