Экспертная система для жидкостной хроматографии: принципы построения и применение в химическом анализе тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.02 ВАК РФ

На правах рукописи

РУДАКОВ Олег Борисович

ЭКСПЕРТНАЯ СИСТЕМА ДЛЯ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ: ПРИНЦИПЫ ПОСТРОЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ В ХИМИЧЕСКОМ АНАЛИЗЕ

Специальность 02.00.02 - аналитическая химия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора химических наук

Воронеж - 2004 г.

Работа выполнена на кафедре органической химии факультета экологии и химической технологии Воронежской государственной технологической академии

Научный консультант: доктор химических наук, профессор

Селеменев Владимир Федорович

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор

Шпигун Олег Алексеевич

Ведущая организация: Институт геохимии и аналитической

химии им. В.И. Вернадского РАН (г. Москва)

Защита состоится «22» октября 2004 г. в 15.00 на заседании диссертационного совета Д 212.038.19 при Воронежском государственном университете по адресу: 394693, Воронеж, Университетская пл. 1, ауд. 243.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Воронежского государственного университета.

Автореферат разослан « 0^» сентября 2004 г.

доктор химических наук, профессор Яшин Яков Иванович

доктор химических наук, профессор

Шапошник Владимир Алексеевич

Ученый секретарь диссертационного совета

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Жидкостная хроматография (ЖХ) получила широкое применение в аналитической, органической химии, биотехнологии, биохимии, медицине, микробиологии, фармацевтике, экологии. Благодаря неограниченной возможности варьировать состав подвижной фазы (ПФ) и тип сорбента, а также благодаря техническому прогрессу в аппаратурном оснащении и компьютеризации эффективность методов ЖХ в решении аналитических, технологических задач чрезвычайно высока. В связи с высоким уровнем развития методов ЖХ, в первую очередь, высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), происходит замена в системе ГОСТ устаревших методик выполнения измерений состава или качества важнейших аналитов на методики, основанные на применении ВЭЖХ. Эти методики сочетают в себе преимущества хрома-тографического разделения со спектрофотометрическим или иным способом детектирования разделенных компонентов. Однако, несмотря на множество преимуществ, метод ВЭЖХ отличается сложной дорогостоящей аппаратурой, высокой себестоимостью единичного анализа. Хроматогра-фические колонки предъявляют ряд жестких требований к вводимой пробе, к ПФ. Чтобы сократить «холостое» время эксплуатации хроматографа, уменьшить расходы и трудозатраты на разработку методик, в последние годы активно разрабатываются экспертные системы, позволяющие по установленным закономерностям, с минимальным предварительным экспериментом находить подходящие условия хроматографирования аналитов. Для адаптации стандартной методики к конкретной системе также всегда требуется какое-то количество подгоночных экспериментов, уточняющих в первую очередь состав и расход ПФ. Для минимизации этой процедуры необходимо разработать правила, исходя из установленных закономерностей.

БИБЛИОТЕКА С.П«ер5ург

оэ гсоУак^^

Актуальной проблемой является оценка качества хроматографиче-ской методики, предназначенной для массовых анализов. Совершенство методики определяется большим числом факторов (время анализа, материальные затраты, трудоемкость, техника безопасности лабораторных работ, совместимость пробы, элюента и колонки с техническими характеристиками аппаратуры, и т.д.). Необходимо разработать алгоритм экспертной оценки и процедуру оптимизации технико-эксплуатационных характеристик методики.

В связи со сложностью механизмов удерживания теория ЖХ еще недостаточно глубоко проработана, известные модели удерживания дают удовлетворительный прогноз в узких областях состава ПФ, отсутствуют феноменологические модели, описывающие хроматографические свойства многокомпонентных ПФ в широком интервале соотношений концентраций разбавителя и модификаторов. Мало изучены свойства хроматографи-ческих систем в условиях с низкой селективностью разделения, что не позволяет построить более точные модели удерживания в типовых условиях ЖХ. Не достаточно изучено хроматографическое поведение неионогенных полифункциональных органических соединений с высокой гидрофобно-стью. Изучение их удерживания представляет не только утилитарный интерес, но и позволяет найти закономерности удерживания от структуры сорбата в более широком диапазоне варьирования гидрофобно-гидрофильного баланса. Проблемными остаются качественные и количественные характеристики полярности сорбатов, ПФ из индивидуальных и смешанных растворителей, неподвижной фазы (НФ) на основе силикагеля с привитыми группами. Все известные шкалы полярности компонентов хроматографической системы не лишены недостатков. Это мешает сопоставлять хроматографическое поведение аналитов в ПФ и НФ различного химического состава и строения.

Злободневной проблемой, вызвавшей, в частности, развитие аналитической ВЭЖХ, является фальсификация, многокомпонентных натуральных и синтетических смесей аналитов в фармацевтической, парфюмерной и пищевой промышленности. Поэтому актуальной является разработка, принципов и методов идентификации многокомпонентных смесей вариативного состава.

В работе обобщены результаты исследований, выполненных автором на Кафедре органической химии и в Лаборатории инструментальных методов пищевой химии Воронежской государственной технологической академии в соответствии с планами НИР ВГТА, с Координационным планом Научного совета РАН по адсорбции и хроматографии на 2000-2004 г. (код 2.15.7.2., раздел «Синтез и исследование свойств полимерных сорбентов и носителей для хроматографии», тема «Разработка экспертной системы поиска оптимальной бинарной подвижной фазы при хроматографиче-ском разделении пищевых и физиологически активных веществ»). Часть работы выполнена в рамках гранта Министерства образования РФ по теме «Исследование закономерностей влияния содержания токсикантов в объектах производственной деятельности на окружающую природную среду», раздел «Разработка и реализация экспресс-тестов при анализе содержания токсикантов в объектах производственной деятельности» (код 87.15.03).

Цель исследования - разработка принципов построения экспертной системы для оценки аналитических и технико-эксплуатационных характеристик жидкостнохроматографических методик химического анализа и принципов проверки аутентичности многокомпонентных продуктов с вариативным составом по хроматографическим данным.

Достижение поставленной цели включало решение следующих

задач:

установление и систематизация общих закономерностей изменения хроматографических свойств типичных бинарных ПФ для нормально-

и обращенно-фазовой ВЭЖХ (плотности, вязкости, УФ-поглощения, показателя преломления, диэлектрической проницаемости, элюирующей способности, температуры кипения) при изменении объемной доли модификатора от 0 до 1 и разработка на их основе процедуры оптимизации условий хроматографирования, учитывающей свойства ПФ, аналита, сорбента, детектора и технико-эксплуатационных характеристик хроматографиче-ской системы;

установление общих закономерностей хроматографического поведения полифункциональных аналитов в типовых условиях ВЭЖХ, нахождение эмпирических зависимостей параметров удерживания от химического строения аналита (гидрофобно-гидрофильного баланса) и от полярности ПФ (качественного и количественного состава);

экспериментальное определение параметров удерживания серии полифункциональных аналитов (фенолов, цветообразующих компонентов, каротиноидов и антоциановых красителей, фосфолипидов, гликозидов) в различных вариантах ЖХ и оптимизация селективности разделения;

разработка феноменологических моделей удерживания «гидро-фобность сорбата - объем (фактор) удерживания», «объем (фактор) удерживания - полярность (объем модификатора) элюента» и оптимизация эмпирических коэффициентов в полученных уравнениях;

формирование базы данных по оптимальным условиям хромато-графирования важнейших аналитов в типичных вариантах ЖХ;

формирование базы данных по физико-химическим и технико-эксплуатационным свойствам индивидуальных и бинарных растворителей, применяемых в типовых ПФ;

определение для смешанных растворителей функциональных зависимостей, адекватно описывающих экспериментальные изотермы и изобары «свойство - состав», включающих свойства исходных чистых растворителей;

анализ корреляций между различными физико-химическими характеристиками растворителей, которые применяются в оценке полярности растворителей, разработка на их основе многопараметрических обобщенных критериев полярности, испытание их в качестве меры элюирую-щей способности в нормально- и обращенно-фазовой ЖХ;

разработка прототипа экспертной системы, решающей задачу определения оптимальных технико-эксплуатационных характеристик и статистически обоснованной количественной оценки качества методик ЖХ с применением обобщенных многофакторных критериев и обобщенных целевых функций, учитывающих весомость и вектор влияния нескольких факторов;

разработка и экспериментальная проверка критериев идентификации многокомпонентных смесей с вариативным составом по хроматогра-фическим данным.

Научная новизна работы:

Впервые изучены особенности хроматографического поведения в условиях нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ ряда полифункциональных высокогидрофобных соединений - цветообразующих компонентов фотоматериалов, светостабилизаторов и антиоксидантов, полупродуктов и компонентов фармацевтических препаратов.

Установлены количественные корреляции между критериями гид-рофобности полифункциональных органических соединений и параметрами их удерживания в широком диапазоне составов ПФ в условиях нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ.

Найдены феноменологические зависимости между параметрами удерживания сорбатов различного строения и полярностью ПФ в условиях нормально- и обращенно-фазовой хроматографии (НФХ и ОФХ). Обоснован физический смысл констант, входящих в эти зависимости.

Впервые установлено и доказано хроматографическое разделение енольных и кетонных форм пространственно затрудненных Р-дикарбонильных соединений, изучено влияние условий ЖХ (полярности ПФ и НФ, скорости потока, наличия катализаторов) на кето-енольное равновесие.

Выведены полуэмпирические уравнения, адекватно описывающие экспериментальные изотермы «плотность - объемная доля модификатора», «диэлектрическая проницаемость - объемная доля модификатора», «оптическая плотность - объемная доля модификатора», «показатель преломления - объемная доля модификатора», «вязкость - объемная доля модификатора», «элюирующая сила - объемная доля модификатора» для серии типичных бинарных подвижных фаз для нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ.

Выведено полуэмпирическое уравнение, адекватно описывающее изобары «температура кипения - объемная доля модификатора» для типичных бинарных подвижных фаз, применяемых в нормально- и обращен-но-фазовой ВЭЖХ.

Впервые найдены три полиазеотропные системы, в которых наблюдается корреляция между суммарной полярностью бинарного растворителя и объемной долей модификатора в азеотропной бинарной смеси.

Разработаны обобщенные критерии полярности растворителей, линейно коррелирующие с элюирующей способностью растворителей на разных сорбентах во всем диапазоне полярности в широкой выборке растворителей от алканов до воды. С учетом экспериментальных данных по элюирующей силе установлены оптимальные весовые коэффициенты парциальных полярностей обобщенного критерия для ЖХ на силикагеле, оксиде алюминия, силикагеле, модифицированном октадецильными группами и на активированном угле. Показано, что на сорбентах, отличающих-

ся химической природой, вклад различных парциальных полярностей в элюирующую способность может существенно различаться.

Впервые предложены количественные критерии полярности НФ, основанные на упрощенном критерии гидрофобности Шатца и на расчетных величинах логарифма распределения в системе октан-1-ол - вода для модельных соединений, имеющих функциональные группы, характерные для поверхности сорбента.

Разработаны алгоритмы выбора оптимальных растворителей и ПФ для конкретных аналитических задач с помощью обобщенных критериев и обобщенных целевых функций. Показано, что обобщенные критерии и обобщенные целевые функции могут применяться в экспертных системах для оценки качества хроматографической методики. Разработан прототип не имеющей мировых аналогов экспертной системы по количественной оценке технико-эксплуатационных характеристик методик с применением. ЖХ.

Разработаны принципы идентификации продуктов, представляющих собой многокомпонентные смеси с вариативным составом, содержащие примеси или фальсифицирующие добавки такого же качественного состава, что и основной продукт.

Установлено, что такие ионогенные гидрофобные соединения, как фосфолипиды, существуют в водных растворах в интервале рН=2-14 в нескольких ионных формах (от 2-х до 4-х), которые обладают разными. физико-химическими характеристиками.

Теоретически обоснованы и экспериментально оптимизированы методы разделения фосфолипидов с помощью ЖХ на сорбенте из сверх-сшитого полистирола и методом высоковольтного электрофореза.

Результаты исследований являются вкладом в развитие научного направления: метод жидкостной хроматографии в анализе полифункциональных органических соединений.

Практическая значимость:

Разработан комплекс методик определения качества пурпурных, голубых и желтых цветообразующих компонентов фотоматериалов с использованием метода ВЭЖХ.

Разработаны экспресс-методики идентификации жирорастворимых и водорастворимых натуральных красителей, углеводсодержащих соединений с использованием метода ВЭЖХ, которые включены в способы получения и применения этих соединений.

Разработаны методики определения фенолов, антиоксидантов и светостабилизаторов фенольного типа в присутствии низкомолекулярных фенолов с использованием метода микроколоночной нормально- и обра-щенно-фазовой ВЭЖХ.

Разработан способ хроматографического разделения фосфолипи-дов на неионогенном сорбенте из сверхсшитого полистирола.

Разработаны методики разделения фосфолипидов методом ТСХ и высоковольтного электрофореза на бумаге.

Предложен принцип подбора азеотропных ПФ с заданной элюи-рующей силой, дающий возможность применять в рутинных методиках ВЭЖХ легко регенерируемые элюенты, что существенно уменьшает материальные затраты на единичный анализ.

Разработанные критерии полярности ПФ позволяют сопоставлять хроматографические данные, полученные с использованием ПФ из растворителей разной природы, количественно сравнивать их элюирующую силу, находить изоэлюотропные составы, по которым можно подбирать альтернативные элюенты.

Разработаны принципы построения экспертной системы для ЖХ и в оболочке типового электронного процессора Microsoft Excel создан прототип экспертной системы, которая в рамках заданных граничных условий

по обобщенным критериям и обобщенным целевым функциям находит-оптимальные решения при выборе вариантов и условий ВЭЖХ.

Разработаны способы установления грубой фальсификации многокомпонентных аналитов по хроматографическим данным. Предложены контрольные карты, визуализирующие многокритериальные идентификационные зоны, ускоряющие и облегчающие процедуру идентификации многокомпонентных смесей.

Приоритет и новизна выполненных исследований подтверждены 7 патентами на изобретения РФ.

Разработанные методики химического анализа, алгоритмы экспертизы качества методик, идентификации многокомпонентных смесей апробированы на предприятиях, получены положительные отзывы и оформлены акты внедрения в ЗАО НПКФ «Аквилон», научно-техническом центре ОАО «Алтайхимпром», ОАО «Воронежский молочный комбинат», ЗАО «Инновационные системы ОКБМ», ООО «Целит», разработанная методика контроля качества эвгенола методом ВЭЖХ включена в ТУ 9391-027-10614163-2002 «Жидкость на основе эвгенола для приготовления стоматологической цинкоксид-эвгенольной пасты «Целит-эвгенол».

Методический аспект. Результаты исследования отражены в лекционных курсах и лабораторном практикуме по дисциплинам «Химический состав, свойства и контроль качества продуктов», «Методы и средства анализа пищевого сырья и продуктов растительного и животного происхождения» для специальности «Метрология и сертификация». В выполнении отдельных направлений диссертационной работы принимали участие магистры ВГУ Железная Т.А., Карпов СИ., аспиранты ВГТА Железной С.А., Комарова Е.В.

Положения, выносимые на защиту:

Обоснование нового подхода к поиску оптимальных решений при выборе условий ЖХ, состоящего в аналитическом решении системы урав-

нений, определяющих частные и обобщенные целевые функции, характеризующие хроматографическую систему «сорбат - элюент - сорбент», принципы построения и прототип экспертной системы для жидкостной хроматографии.

Общие закономерности удерживания 70 полифункциональных органических соединений с различной гидрофобностью в различных хро-матографических системах «сорбат - элюент - сорбент» (всего 350 систем), в том числе с использованием 24 марок сорбентов, 4 растворителей, используемых в качестве разбавителей подвижной фазы и И растворителей-модификаторов.

Способы решения задач качественного, количественного химического анализа, идентификации и обнаружения фальсификации, хромато-графического разделения и выделения индивидуальных компонентов многокомпонентной смеси.

Способы оценки элюирующей силы индивидуальных и смешанных растворителей с использованием обобщенных критериев.

Способ оценки полярности сорбента с использованием расчетных величин логарифма распределения в системе октан-1-ол — вода для модельных соединений, имеющих функциональные группы, характерные для поверхности сорбента.

Апробация работы. Основные положения и результаты диссертационной работы доложены на следующих конференциях:

ХХХТУ-ХШ ежегодные внутривузовские научные конференции ВГТА (г. Воронеж, 1994-2004);

Региональные: III, VI, VIII и IX конференции "Проблемы химии и химической технологии" (г. Воронеж 1995, 1998,2000; г.Тамбов, 2001);

Всесоюзные и Всероссийские: VII Всесоюз. конференция по химии дикарбонильных соединений, Рига, 1991; Всерос. конференция "Физико-химические основы пищевых и химических производств", г. Воронеж,

1996; Всерос. конференция «Агроэкология и устойчивое развитие общества», г. Красноярск, 1998; Всерос. симпозиум по теории и практике хроматографии и электрофореза, Москва, 1998; Всерос. симпозиум по химии поверхности, адсорбции и хроматографии, Москва, 1999; Всерос. конференция "Интеграция науки, производства и образования: состояние и перспективы", г. Юрга, 1999; Всерос. конференция "Химический анализ веществ и материалов", Москва, 2000; I Всерос. конференция «Теория конфликтов и ее приложения», г. Воронеж, 2000; Всерос. конференция «Современные технологические процессы получения материалов и изделий из древесины», г. Воронеж, 2001; Всерос. симпозиум «Современные проблемы хроматографии», Москва, 2002; I и II Всерос. конференция «Физико-химические процессы в конденсированном состоянии и на межфазных границах. Фагран 2002, Фагран 2004», г. Воронеж, 2002, 2004; Всерос. конференция «Проблемы теоретической и экспериментальной химии», г. Екатеринбург, 2002; Всерос. конференция «Масло. Сыр. Состояние, проблемы, перспективы развития», г. Углич, 2003; Национальный конгресс «Человек и лекарство», Москва, 2003; Всерос. конференция «Хроматография и хроматографические приборы», Москва, 2004.

Международные: I, II, Ш, IV и V Междунар. симпозиумы «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования» г. Пущино, 1995, 1997, 1999, 2001, 2003; Междунар. конференция «Научно-технический прогресс в бродильных производствах», г. Воронеж 1997; Междунар. экологические чтения памяти К.К. Сент-Илера, г. Воронеж, 1998; III, IV Междунар. конференция «Интродукция нетрадиционных и редких сельскохозяйственных растений», г. Пенза, 2000, г. Ульяновск, 2002; Междунар. конференция «Современное состояние и перспективы развития теории адсорбции», Москва, 2001; Междунар. конференция «От фундаментальной науки к новым технологиям. Химия и биотехнология

биологически активных добавок», Москва, 2001; IX и X Междунар. конференции «Физико-химические основы ионообменных процессов (Иони-ты-2001, Иониты-2004)», г. Воронеж, 2001, 2004; I Междунар. конгресс «Биотехнология - состояние и перспективы развития», Москва, 2002; Междунар. форум «Аналитика и аналитики», г. Воронеж, 2003; 3rd Int. Symposium on Separation in BioSciencies "100 Years of chromatography", Moscow, 2003; Междунар. конференция «Перспективы производства продуктов питания нового поколения», г. Омск, 2003; Международный научный семинар «100 лет хроматографии», г. Воронеж, 2003.

Личный вклад автора. Результаты, полученные в соавторстве и отраженные в диссертации, заключаются в теоретическом обосновании и постановке проблемы, разработке общих алгоритмов и подходов к исследованию закономерностей хроматографического поведения аналитов, в систематизации и анализе собственных и литературных данных. Все экспериментальные работы выполнены автором или под его руководством.

Публикации. По теме диссертации опубликованы 150 работ, в том числе 4 монографии, 65 статей в периодических изданиях, рекомендованных ВАК РФ для опубликования научных трудов, более 50 тезисов и материалов докладов на международных, всесоюзных, всероссийских конгрессах, симпозиумах и конференциях, получено 7 патентов на изобретения.

Структура диссертации. Диссертация состоит из введения, 6 глав, списка цитируемой литературы из 412 источников, приложения. Материал работы изложен на 400 страницах, содержит 103 рисунка, 89 таблиц, титульные листы патентов, акты внедрения и отзывы.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

В Главе 1 (Хроматографические системы сорбат - элюент - сорбент) дан обзор современного состояния ЖХ, систематизирована информация о выборе условий ЖХ, исходя из хроматографических свойств ком-

понентов хроматографической системы (рис.1). В этой главе рассмотрена связь строения сорбата с полярностью, гидрофобностью и растворимостью, оптическими и рефракционными свойствами. Для оценки гидро-фобно-гидрофильного баланса аналитов использовали упрощенный критерий Шатца и логарифмы коэффициента распределения веществ в системе октан-1-ол - вода (Н, 1о£Р,)- Охарактеризованы сорбенты для адсорбционной, нормально-фазовой, обращенно-фазовой и эксклюзионной хроматографии. Для количественной оценки гидрофобных свойств немо-дифицированных и привитых сорбентов предложены найденные для модельных соединений с помощью квантовохимических расчетов по алгоритму ВюВу:е величины С1с^Р. Ниже приведены структуры, использованные для расчетов С^Р.

Исходя из того, что индуктивные эффекты быстро затухают при их распространении по цепи, при расчете гидрофобности сорбента влиянием удаленных от поверхностной группы атомов матрицы силикагеля можно пренебречь. Если известны результаты эндкеппинга (степень покрытия поверхности привитыми группами и остаточная силанольная активность), их можно учесть, оценив гидрофобность сорбента по аддитивному уравнению

НнФ=а,С1<^Рон+а2С1оёРК|+аэС1о£Р,и, 0)

где доля немодифицированной, эндкиппированной и привитой поверхности, величины для соответствующих модельных соединений.

Проанализированы оптические свойства типовых растворителей, полярность и элюирующая сила, смешиваемость. Предложены обобщенные критерии полярности и элюирующей способности (рациональный и

редуктивный критерии, табл.1) для серии растворителей, охватывающие широкий диапазон полярных свойств от алканов до воды. В качестве парциальных параметров полярности использовали показатели, проверенные широкой хроматографической практикой: диэлектрическая проницаемость Ег, параметр полярности Снайдера Р', параметр растворимости Гильденбранда 5т и сольватохромный параметр Димрота-Райхерта ЕТ(ЗО). Так, для 39 растворителей рациональный критерий определяли по (2):

P°i=E[(PrPn,in)/(Pmax-PmiI1)]/4, (2)

где: Р° - среднеарифметическое от 4-х нормализованных параметров для i-го растворителя, - парциальный параметр, - максимальное и

минимальное значения P¡ в данной выборке. Критерий Р° варьирует в диапазоне 0.012-1.0. При включении в шкалу большего числа растворителей, с максимально возможным разбросом величин полярности (42 растворителя от формамида до декана) оказалось, что в выборке нет ни одного растворителя, для которого все 4 параметра минимальны или максимальны, поэтому для Р(, полученных по (2), процедуру нормализации повторили. Для практического удобства максимальное значение критерия в расширенной шкале для воды приняли за 100, а минимальное значение для декана приравняли 0. Полученный критерий назвали редуктивным (табл. 1), так как он сокращает число переменных, характеризующих полярность (в хемометрике эта процедура называется редукцией данных), являясь линейной комбинацией 4-х исходных переменных, применяемых в ЖХ. Ре-дуктивный и рациональный критерии полярности растворителей имеют тесную линейную корреляцию между собой

и хорошие корреляции со всеми известными шкалами элюирующей силы, на силикагеле, оксиде алюминия, силикагеле, модифицированным группами С|8 и активированном угле во всем диапазоне полярностей, более тесные, чем входящие в них парциальные критерии.

Преимущество обобщенных критериев Рм и Р° заключается в том, что они безразмерны, статистически усреднены, не имеют ярко выраженных специфически заниженных или завышенных для некоторых растворителей значений.

Таблица 1. Обобщенные кватернарные критерии полярности Р" и Рц

Растворитель ро Рн Растворитель ро Рм

Декан 0.003* 0.00 Октан-1-ол 0.288* 28.85

Изооктан 0.012 0.32 Бутан-2-он 0.322 29.03

Пентан 0.013 0.45 Пиридин 0.290* 29.04

Циклогексан 0.016 0.71 трет-Бутанол 0.292 29.12

Гексан 0.017 0.85 Пентан-1-ол 0.311* 31.25

Гептан 0.022 1.44 Бензонитрил 0.316* 31.72

Триэтиламин 0.067 6.24 Ацетон 0.356 32.18

Тетрахлорметан 0.076 7.29 Нитробензол 0.329* 33.00

Сероуглерод 0.084* 8.25 Бутан-1-ол 0.362 36.29

Диизопропиловый эфир 0.094 9.02 Пропан-2-ол 0.366 36.72

Диэтиловый эфир 0.120 11.73 СНзСООН 0.385 38.45

Толуол 0.133 12.07 Пропан-1-ол 0.434 39.09

Бензол 0.165 13.44 ДМФА 0.452 42.88

Хлорбензол 0.207 16.65 Этанол 0.436 43.97

Бромэтан 0.168* 16.72 Ацетонитрил 0.452 44.66

ТГФ 0.209 21.00 Нитрометан 0.472 46.72

1,4-Диоксан 0.214 21.71 ДМСО 0.481* 48.41

Этилацетат 0.214 21.84 Метанол 0.537 54.34

Хлороформ 0.227 22.00 Этиленгликоль 0.619 62.77

Метиленхлорид 0.245 23.04 Формамид 0.831* 83.83

Дихлорэтан 0.286 24.88 Вода 1.00- 100.00

* Примечание. Рассчитано по корреляции Р^=101.22Р°-0.28

Разработанные шкалы хорошо согласуются с классификацией Снайдера, выделяющей 8 групп селективности (рис.2). Так, в выборках растворителей по трендам АВ, СБ и ЕБ наблюдаются наиболее тесные корреляции Е°(8Ю2)=аРк, е0(А1203)=ЬРк, Е°(С,8)=а-ЬР,,4.

Для уточнения измерений элюирующей силы в конкретных вариантах ЖХ предложено использовать обобщенные критерии полярности с оптимизированными весовыми коэффициентами:

где Р8 -значение обобщенного критерия полярности для 8-го варианта, а, коэффициент веса 1-го параметра, Х;5 — значение 1-го параметра для 8-го варианта, х* - нормирующее значение для 1-го параметра (значение для воды), т - количество параметров.

Найдено, что диэлектрической проницаемостью в условиях НФХ на силикагеле можно пренебречь. Для наиболее тесных кватернарных корреляций Р5=а+Ье0(8Ю2) коэффициент веса е,- составляет а,=0.002. Поэтому для 60 растворителей получены тернарные критерии Р§ (см. ур. (4), (5)). Для ОФХ лучшие корреляции с е0(С]8), дает кватернарный критерий (см. ур. (6)). Для ЖХ на углероде достаточно применить бинарный критерий, из которого исключены по итогам компьютерной экспертизы параметры 5Т и Р' (см. ур. (7)).

Р(8Ю2)=0.40(5т/5т*')+0.35(Ет(30)/Ет(30)*')+0.25(Р'/Р"'), (4) Р(А1203)=0.45(5т/8т,,)+0.15(Ет(ЗО)/Ет(30Л+0.40(Р7Р'"), (5) Р(С18)=0.77(5т/бтж)+0.03(Ет{30)/Ет(30Г)+0.14(Р7Р'"')+0.06(е/О,(6) Р(С)=0.30(Ет(30)/Ет(30Г)+0.70(е/£Л (7)

Между критериями полярности и экспериментальными значениями элюируюшей силы установлены следующие кошелянии

Р(8Ю2)=0.374е°(8Ю2)+0.291 (11=0.9581, п=60), (8)

Таким образом, оптимизированные коэффициенты веса а, для разных вариантов ЖХ отличаются, что указывает на существенные различия в характере влияния полярности на механизмы удерживания в конкретных хроматографических системах.

Рис.1. Принципиальная схема выбора оптимального варианта, положенная в основу построения прототипа экспертной системы для нормально- и об-ращенно-фазовой ВЭЖХ, ключевыми признаками в которой являются полярность (гидрофобно-гидрофильный баланс) компонентов хроматографической системы

в с

Рис. 2. Диаграмма распределения !-VIII групп селективности растворителей по Снайдеру. Хе - способность к протонодонорным, Х<! - к протоноак-цепторным, а Х„ - способность к ди-поль-дипольным взаимодействиям

D

X

А

о

В Главе 2 (Объекты исследования и методика эксперимента) приведены характеристики аналитов: строение и некоторые свойства (критерии гидрофобности, аналитические длины волн, растворимость и др.), дано описание сорбентов, колонок, хроматографической аппаратуры, методик исследования, статистической обработки и аппроксимации экспериментальных данных- Выборка компонентов хроматографических систем охватывает основные варианты, применяемые в типовых исследовательских лабораториях. Измерения проводили на жидкостных хроматографах «Милихром-4», ЖХ-1307М, Цвет-3006 (РФ), LP-697 (Чехия), Waters Delta-prep 3000 (США). ГЖХ проводили на приборах «Цвет-500М», «Цвет-800» (РФ). Спектры регистрировали на приборах СФ-46 (РФ), Spe-cord-M40 и Specord M80 (ФРГ). Спектры ПМР получали на спектрометре Брукер СХР-300 (ФРГ). Диэлектрическую проницаемость измеряли на ди-элькометре GK 68 (ФРГ). Вязкость определяли на вискозиметре Оствальда, показатель преломления измеряли рефрактометром ИРФ-454 (РФ). Электрофорез выполняли на приборе LFG (Венгрия). Статистическую обработку и аппроксимацию данных проводили с использованием программ SigmaPlot 2001, Microsoft Excel XP, Statistica V6.0, а химические расчеты -при помощи прикладных программ ChemOffice 2002, Hyperchem V7.01.

В Главе 3 (Изотермы хроматографических свойств бинарных подвижных фаз) рассмотрено влияние объемной доли модификаторов <р2 для нормально- и обращенно-фазовых бинарных ПФ на плотность, оптиче-

скую плотность, предел прозрачности, показатель преломления, вязкость, диэлектрическую проницаемость и элюирующую силу, дана физико-химическая трактовка сходств и различий в характере изотерм для бинарных систем, основанная на природе межмолекулярных взаимодействий. Как правило, изотермы не линейны и неаддитивно зависят от <р2- Так, объемные, оптические, рефракционные, диэлектрические СВОЙСТВА В большинстве случаев адекватно описываются модифицированными биномиальными кривыми (см. ур. (12)-(15), Я>0.99), в отдельных случаях более точными являются полиномы типа (16). Для предела прозрачности в УФ-свете, вязкости и элюирующей силы в НФХ выявлены рациональные зависимости (19)-(21). Во всех выведенных зависимостях использованы исходные параметры чистого модификатора и разбавителя, что позволило уменьшить число эмпирических коэффициентов с неявным физическим смыслом (табл. 2). При зависимый параметр ПФ становится равен параметру для чистого разбавителя, а при соответственно, параметру чистого модификатора. Оптимальные значения коэффициентов т ур. (12)-(22) найдены для наиболее типичных бинарных систем, пригодных для ЖХ (всего исследовано 189 изотерм). На рис. 3-13 приведены характерные изотермы. Для практического удобства в ур. (12)-(22) в качестве независимой переменной взяли объемные доли в которых принято измерять концентрацию модификатора в аналитической ЖХ. Показано, что учет неаддитивности хроматографических свойств смешанных ПФ позволяет избежать критических режимов хроматографирования, повысить чувствительность детектирования и надежность хроматографической методики в целом, уменьшить риск возникновения неполадок оборудования и снизить стоимость анализа. Дальнейшее развитие и обоснование получил принцип изоэлюотропности многокомпонентных ПФ.

Таблица 2. Характерные изотермы хроматографических свойств и изобара Ткип для бинарных и псевдобинарных систем растворителей

Параметр ПФ Уравнение

Плотность, г/см3 Р12=Р!+РР|Ф2+(Р2-РРГР|)Ф22 (12)

Оптическая плотность А,2=А1+рА,ф2+(А2-рА1-А,)ф22 (для НФХ) (13) А,2=(А2- Р)ф2-Рф22 (для ОФХ) (14)

Показатель преломления п12=п,+Рп,ф2+(пгРпгП|)ф22 (15) п |2=п [+ап ,ф2+(Ьп2-ап ,-П|)ф22+ (п2-Ьп2)ф23 (16)

Диэлектрическая проницаемость е12=Б,+Ре,ф2+(е2-реге|)ф22 (17) С|2з = ¿1 + гп£| 9)3+ (е3-те2-е,)ф32 (18) при условии £1<£2<£3

Предел прозрачности в УФ свете, нм 12={ X* 1+[\Ч 1 + А+ВН* ,]ф2}/( 1 +Аф2+Вф22) (19)

Вязкость, СП П.2={П,+[Л2(1+А+В)-Т1,1ф2}/(1+Аф2+Вф22) (20)

Элюирующая сила в НФХ еО12={е°.+[еО2(1+А+В)-е01]<р2}/(1+Аф2+Вф22) (21) 1о8Е°12=1о.Е;8012+А1о8ф2 (22)

Температура кипения Т12={Т,+[Т2(1+А+В)-Т1]ф2}/(1+Аф2+Вф22) (23)

В Главе 4 (Изобары температуры кипения бинарных элюентов. Азеотропные свойства) проанализированы азеотропные свойства 34 бинарных систем растворителей. Из используемых в ЖХ жидких смесей примерно три четверти образуют азеотропы. Применение азеотропных составов в качестве ПФ существенно уменьшает расходы в массовых анализах и в препаративной ВЭЖХ за счет простой перегонки элюата и многократного использования отгона в качестве ПФ. Для прогноза Ткип бинарной ПФ произвольного состава предложена рациональная функция (23), проходящая через три важнейшие экспериментальные точки: -

Ткнп разбавителя, модификатора и азеотропа. Сопоставление расчетных и экспериментальных Т|2 показывает, что ур. (23) в целом адекватно аппроксимируют изобары (Я=0.999-0.910) во всем диапазоне ф2=0-1. С наибольшей точностью ур. (23) описывает изобары для систем вода - этанол, вода

- метанол, вода - уксусная кислота, этилацетат - метанол. Для систем гек-сан - хлороформ, бензол - метанол, вода - ацетонитрил ур. (23) точно аппроксимирует восходящую ветвь изобары, а в системах циклогексан -этилацетат, гексан - пропан-1-ол, хлороформ - метанол оно лучше описывает нисходящую ветвь изобары. Не смотря на наличие в этих случаях систематических отклонений на одной из ветвей изобары (рис. 14), ур. (23) может точно охарактеризовать экспериментальные Т|2 вблизи экстремума, что позволяет применять его для прикладных расчетов. Установлено, что концентрация модификатора <рд в азеотропной ПФ для НФХ тем выше, чем выше ее полярность. Это правило соблюдается как для малополярных ПФ, разбавителем в которых служат углеводороды (рис. 15, линия 1, Р°сум=0-036+0.181 фд), так и для полярных ПФ с метанолом в качестве добавки (линия III, P%,=0.I84+0.377(Pa). Выше определенного уровня по. лярности азеотропия отсутствует.

5

о'

-0 4

Ов

02

06

Ов

1 О

Ч>2

Рис. 3. Изотермы отклонения показателя преломления от аддитивной величины &=/(<Рг) при 25 °С для систем: циклогексан — этанол (I); гексан - 1,2-дихлорэтан (2); вода - ТГФ при 20 сС (3); вода

- ацетонитрил при 20 °С (4); вода

- этанол (5); вода - метанол (6)

ц*103

Рис. 4. Изотермы вязхости при 25°С для систем: 1 - вода - этанол; 2 - вода - тетрагидрофуран (20°С); 3 - вода - метанол; 4 — вода - ацетонитрил (20°С); 5 - циклогексан - диоксан; 6 - гексан -пропан-2-ол (20°С); 7 - гексан -этанол; 8 - гексан - хлороформ

о5 о« 08 Го

О 02 04 06 0в „ 1

<?ро|

Рис. 6. Изотермы £\г=Л<ряода) при 25 "С для ПФ: 1 — ацетонитрил — вода; 2 - метанол - вода; 3 - ТГФ - вода

Рис. 5. Изотермы отклонения экспериментального объема от аддитивного 6 - (¡>1 при 25°С для систем: 1 - циклогексан - диоксан; 2 - гексан - пропан-2-ол; 3 - гек-сан - пропан-1-ол; 4 - вода - ацетонитрил (25°С); 5 - вода - этанол; 6 - вода - метанол; 7 - вода - ацетон

Рис. 7. Изотермы е12 при 25

°С для ПФ: 1 - гексан - этанол, 2 - гексан - пропан-2-ол; 3 - гексан- хлороформ

Для таких разбавителей как алканы и циклоалканы не удается получить азеотропы с полярностью Р0сум >0.23. А в системе разбавитель -метанол азеотропия отсутствует при величине близкой к полярности

метанола. Доля модификатора в азеотропной ПФ для ОФХ, наоборот, тем выше, чем меньше суммарная полярность (линия азеотропов II, Р0СТМ=-0.141+0.586фд). Метанол и более полярные модификаторы не способны образовывать с водой азеотропных смесей. Не создают с водой азеотропы сильно ассоциированные растворители с Н-связью или апротонные высо-кодиполярные растворители (уксусная кислота, ДМФА, ДМСО). Найдено, что в системах с общим разбавителем, например, гексан - модификатор (НФХ) или вода - модификатор (ОФХ), с увеличением полярности модификатора, его доля в азеотропной нормально-фазовой ПФ уменьшается, стремясь к и увеличивается в ОФХ, стремясь к

В Главе 5 (Общие закономерности удерживания гидрофобных сор-батов) рассмотрено влияние строения сорбата и полярности ПФ на параметры удерживания в нормально- и обращенно-фазовой системах сорбат -

элюент - сорбент, дана трактовка экспериментальных данных с учетом

современных представлении теории удерживания.

Рис. 19.'Зависимости (29), система сорбат - (гексан - диоксан) - Си-ласорб 600: 1 - фенол; 2 - 3-(4-бифенил)-1 -(2-гидроксифенил)-1 -пропанон; система сорбат — (гексан - этилацетат) - Силасорб 600: 3 - фенол; 4 - эвгенол; 5 — р-нафтол; 6 — 2-метил-6-(3-фенилпропил)фенол; 7 - 3-(4-ю/?е/я-бутилфенил)-1 -(2-гидроксифенил)- 1 -пропанон

Рис. 20. Зависимость (36), система сорбат - (вода — ацетонитрил) -Силасорб N112: 1 - р-нафтол; 2 -фенол; 3-м -крезол; 4 - бензол; 5 - 3-(/И-толил)-1 -(2-гидроксифенил)-! -пропанон

В табл. 3 и на рис. 16-20 приведены характерные зависимости для хроматографического поведения полифункциональных высокогидрофобных неионогенных сорбатов на примере цветообразующих компонентов фотоматериалов, светостабилизаторов, антиоксидантов фенольного типа, фенолов, ионогенных гидрофобных соединений на примере фосфолипи-дов, неполярных гидрофобных соединений на примере каротиноидов и, наконец, полифункциональных гидрофильных соединений на примере ряда гликозидов (антоцианов, стевиозида, углеводов). Для варианта ОФХ показана возможность вычленить в наблюдаемых зависимостях составляющую объема удерживания Умр, обусловленную нормально-фазовым распределительным механизмом сорбции, и составляющую У|у>, обусловленную сольвофобным механизмом сорбции. Ур. (22) адекватно описывает эксперимент (Я>0.99) в условиях ОФХ на Силасорбе N42 и на Силасорбе

^^ Найдено, что в системе сорбат - (вода - ацетонитрил) - Силасорб NH2 в чистом ацетонитриле (фг=1) доля Укр для фенолов составляет только 0.03-8.8% от наблюдаемого У]*. При увеличении доли воды в ПФ до 60%, доля Удр возрастает до 30.8-40.2%, а в системе сорбат - (вода - ацетонитрил) - Силасорб С)8 в чистом ацетонитриле Умр равна 10-20%, но при уменьшении ф2 быстро сводится на нет.

Таблица 3. Характерные зависимости удерживания сорбатов от их строения, состава и полярности ПФ в НФХ, ОФХ и ЭХ

Хроматографиче-ская система Уравнение

Полифункциональный сорбат -(гексан — модификатор) - Силасорб 600 Ук=а+Ь/ф2+с/ф22 (24) Ук=Ум+а/Рм+Ь/Рн2 (25) Ук=Ум+а/ Рм +Ь/ Рм 2+с/ Р»3 (26) Ук=(а+Ь Р„)/(1+с Ры +с1 Ры 2) (27) VR=(a+bH)/(l+cH+dH2) (28) ]ойк=а-ЬЕ°,2 (29)

Полифункциональный сорбат -(вода - модификатор) - Силасорб с» 1о§УК=а+ЬРц или 1о§УК=а+ЬР° (30) ^УК=а+ЬН (31) 1о§УК=а+Ыо§Р (32) logVR=logVNp+a PN (33) 1о8Ут=а+Ь(Ро-у0 (34)

Фенолы - (вода -модификатор) -Силасорб N112 УК=(1-х)Уыр+ХУкр (35) Ч = (1 - х)(Ум +а/ Р+Ь/ Р2)+х1 0'08 Ум+"р>(36)

Углеводы (водорастворимые полимеры) - вода — МолселектвЮ 1ёМ = а-ЬУК (37) Кс=а-ЬУК (38) 11о=-а+Ь(1о£М) (39)

Примечание:Ум - мертвый объем, а, Ь, с, <3, х - эмпирические коэффициенты; Н - гидрофобность, Рм - суммарная полярность (Рм =Еф,Рм,), аналогичные зависимости найдены для Р°; У^ - нормально-фазовая, УЙР - об-ращенно-фазовая составляющая к - фактор удерживания; у - заданный коэффициент программы градиента, Р0 - полярность ПФ в начале градиента 0=0); 1о£Р - логарифм коэффициента распределения в системе октан-1-ол - вода; - радиус гирации (вращения) молекулы сорбата; М - молекулярная масса.

Таблица 4. Примеры оптимизированных систем сорбат - сорбент - элюент

Основной аналит, Сорбент; зернение Состав элюента Вари-

условия (мкм); размер ко- (%.об.), расход ант ЖХ

детектирования лонки (ммхмм) (мл/мин)

1 2 3 4

r2ooc \ Сепарон SGX; 7.5; Гексан-ЭА-ИС,

( }-coorj | 3.3x150 70:29:1,0.7

Сепарон CN; 7.5; 3.3x150 Гексан-Д-Э-ТЭА; 77.7:15.9:6:0.4; 0.7

nh Гексан-Д-Э-УК; НФ

Сепарон CN, 7.5; ВЭЖХ

so! 3.3x150 86.95:11:2:0.05;

0.8

о Силасорб 600;7.0; Гексан-ИС-ДЭА;

Н. 2.0x80 99.7:0.2:0.1,0.2

nh | ц-Бондапак С)8; 5.0; М-ЭА-вода-УК;

с=о 8x100 85.9:8:6:0.1; 2.0

1 chr, | Силасорб С|8; 7.5; Э-М-В; 62:29:9

4.0x250 (60 °С); 2.0

с=о 1 ос|,нз7 Силасорб Q»; 5.0; М-ЭА-вода, ОФ

м 2.0x64 86:8:6; 0.2 ВЭЖХ

о Силасорб С|8; 7.0; Э-Д-вода; 78:16:6;

3.3x150 0.5

Х=254-313 нм Силасорб С|8; 7.0; 2.0x80 М-ЭА-В-УК; 85.5:8:6:0.5; 0.2

NHR2 Сепарон NH2; 5.0; Гексан-диоксан;

1 с=о 3.3x150 80:20; 0.5

HO-/QV-R Силасорб 600; Гексан-Х; 80:20;

6.0x200; 5.0 0.9

Силасорб Гептан-Х-ИС;

О CN;3.3xl50; 7.0 91.6:8:0.4; 0.6

Сепарон CN; Гексан-Д-Э;

3.3x150; 7.0 78:16:6; 0.7 НФ

Х=254-313 нм Сепарон CN; 3.3x150; 5.0 Сепарон CN; 3.3x150; 5.0 Силасорб 300; 6.0x200; 10.0 Гексан-Д-ЭА; 90:5:5; 0.6 Гексан-Д-ЭА; 92:3:5; 0.5 Гексан-ЭА; 75:25; 2.0 ВЭЖХ

1 2 3 4

N111*2 р-Бондапак С18; ТГФ-вода;

1 С=0 3.5x150; 5.0 Градиент 50:50 —»• 30:70; 0.5

110 \0/к Силасорб С)8; 2.0x62; 5.0 Этанол-вода; 96:4; 0.1 ОФ вэжх

о ц-Бондапак С:8; Э-ТГФ-вода;

8.0x100; 10.0 65:15:20; 1.5

Я.=254-313 нм Силасорб С|8; 2.0x62; 5.0 Э-АН-вода; 48:50:2; 0.1

Силасорб С|8; Метанол-вода; Преп. ОФ вэжх

3.3x150; 7.0 95:5; 0.8

ц-Бондапак С,8; ТГФ-вода; 60:40;

19.0x150; 10.0 7.0

К\ Сепарон БОХ; 7.0; Гексан-Х-Э;

О 3.3x150 85:10:5; 0.5

Сепарон С1М; 7.0; Гексан-Х-Э;

1 ^ «3 3.3x150 85:10:5; 0.6

Нуклеосил; 5.0; Гексан-Д-Э;

л-" V/4» 2.0x64 75:15:10; 0.1

Сепарон С1М; 7.0; Гексан-Д-Э;

3.3x150 78:16:6; 0.7 НФ ВЭЖХ

р-с Сепарон БСХ; 5.0; Гексан-Х-Э;

3.3x150 85:10:5; 0.5

С] Силасорб СМ; 5.0; Гексан-Д-Э;

>.=254-289 нм 2.0x64 Нуклеосил; 5.0; 2.0x64 Силасорб 600; 5.0; 2.0x80 Сепарон СЫ; 7.0; 3.3x150 75:15:10; 0.1 Гексан-Х-Э; 70:20:10; 0.1 Гексан-Д-Э; 75:15:10; 0.1 Гексан-Х-Э; 85:10:5; 0.6

ОСН3 Силасорб СИ; 7.0; Г-ИС-ТЭА;

1 с=о 1 2.0x80; 99.4:0.5:0.1;0.2 НФ

Силасорб С>4; 7.5; Г-ИС-ТЭА; ВЭЖХ

„ V"2 4.0x250 99.45:0.5:0.05; 2.0

гуи р-Бондапак СЫ; 5.0; Г-ИС-ДЭА; 99.4:0.5:0.1

3.9x150 ОФ

ОС18Н37 Новапак С18; 5.0; ТГФ-АН-зода; ВЭЖХ

>.=254-290 нм 3.9x150 42:32:18; 1.0

1 2 3 4

он Силасорб 600; 5.0; Гексан-ИС; НФ

п R 2x80; 99.07:0.03;0.1; вэжх

у Силасорб 600; 5.0; 2x80; Силасорб 600; 5.0; Гексан-ЭА; 90:10; 0.1; Гексан-Х; 95:5;

1 R 2x62 0.1

Силасорб С18; 5.0; Ацетонитрил - ОФ

Х=254-290 нм 2x80; Силасорб С|8; 5.0; 2x80; вода; 85:15; 0.1; Метанол - вода; 90:10; вэжх

Силасорб 600; 5.0; Гексан-ЭА; 95:5; НФ

ОН О 1 II 2x80; 0.1; вэжх

Силасорб 600; 5.0; Гексан-диоксан;

2x62 97:3; 0.1;

и Силасорб 600; 5.0; 2x80; Гексан-ИС; 99.9:0.01,0.1;

Х=254 нм Силасорб С|8; 5.0; Ацетонитрил - ОФ

2x80; вода; 85:15; 0.1; вэжх

Силасорб С,8; 5.0; Метанол - вода;

2x80; 90:10;

Примечание: АН - СН3СМ; В - Н20; Г - гексан; Д - диоксан; ДЭА - ди-этиламин; ИС - /-С3Н7ОН; М - СН3ОН. МК - НСООН; ТЭА - триэтила-мин; УК - СН3СООН. X - СНС13. ТГФ - тетрагидрофуран, Э - этанол; ЭА - этилацетат; КХ - колоночная хроматография низкого давления; ЭФ -электрофорез; ЭХ - эксклюзионная хроматография; Я, - Н, алкильные, арипьные, алкиларильные заместители, полярные и неполярные функциональные группы разного строения.

На рис. 22-24 приведены примеры хроматограмм некоторых сложных природных смесей, исследованных в настоящей работе.

20

Рис. 22. Хроматограмма каротинои-дов экстракта каротина моркови после глубокой термоокислительной деструкции. Сепарон CN 4 (3.3x150 мм), гептан - пропан-2-ол

^ (98:2), 436 нм, 0.5 мл/мин, 1 - р-

0 Т^мин каротин

14 28

Найдено, что в условиях НФХ в слабополярных ПФ ((|>2=0-0.1) и в условиях ОФХ в сильнополярных ПФ (ф2=0-6-0.7) Р-дикарбонильные соединения с объемными заместителями в орто-положении от дикарбониль-ного фрагмента могут хроматографироваться в виде разделенных кетонной и енольной форм (рис. 25). Это явление, обусловленное медленным установлением таутомерного равновесия

детально исследовано на примере орто-октадецилокси-бензоилметилацетата (ОДБМ) с применением методов ИК-, УФ-, ПМР-спектрометрии, аналитической и препаративной ВЭЖХ. Для устранения эффекта в НФХ предложено добавлять в качестве минорного модификатора диэтил- или триэтиламин, которые катализируют процесс установления таутомерного равновесия, а разрешение пиков таутомеров можно регулировать полярностью ПФ. Уменьшение скорости элюирования и повышение температуры до 30 °С также приводит к ухудшению их разделения. Известно, что кето-енольное равновесие является хорошим индикатором полярности среды. Нами установлена тесная корреляция между концентрацией енольной формы ОДБМ в чистом или смешанном растворителе и его полярностью, выраженной критерием Рц (рис. 26).

В результате проведенных исследований создана база данных по ЖХ полифункциональных соединений с широким размахом выборки гидро-

фобно-гидрофильного баланса, включающая физико-химические параметры аналитов (Н, logP, растворимость, аналитическая длина волны), свойства сорбента (марка, размер колонки и частиц), состав и полярность ПФ. В табл. 4 и рис. 22-25 приведены примеры полифункциональных аналитов, взятых в качестве объектов исследования, и условия ВЭЖХ, адаптированные к используемой хроматографической аппаратуре. При проверке качества методики оценивали аналитические и технико-эксплуатационные характеристики всего хроматографического комплекса.

В Главе 6 (Хемометрические приемы оптимизации методик хроматографи-ческого анализа) описаны приемы экспертизы баз данных в жидкостной хроматографии, которые учитывают хроматографические свойства аналита (молекулярная масса, полярность, гидрофобно-гидрофильный бапанс, растворимость, свойства, позволяющие детектировать аналит), свойства элюентов (объемные, оптические свойства, вязкость, показатель преломления, температура кипения, токсичность, пожаро- и взрывоопасность, химическая инертность, стоимость и т.д.), и особенности сорбентов (тип, зернение, параметры колонки). Представлено описание прототипа экспертной системы, созданной в оболочке программы Microsoft Excel. Для экспертизы и подбора оптимальных условий ЖХ предложено применять обобщенные критерии (40) и обобщенные целевые функции (41).

m

К.=£а,(х:/хГ) , (40)

где обобщенный критерий для s-ro варианта, коэффициент веса i-го параметра, х* — значение i-го параметра для s-го варианта, х' - нормирующее значение для i-го параметра, m - количество параметров. Коэффициент веса находят методами экспертной оценки: прямым назначением, по балльной системе и методом парных сравнений. Согласованность оцен-

ки экспертов проверяется коэффициентом вариабельности, равным отношению среднего а, к величине стандартного отклонения V = Э; / Б;.

где Роб — значения обобщенной целевой функции для s-той ПФ, а^ — коэффициент веса к-той целевой ф у н к^цТи"^ - нормирующее значение для - число составляющих (частных) целевых функций. Перед составляющими целевыми функциями, которые максимизируются, ставится знак плюс, перед минимизируемыми - знак минус. Значения р|<норм принимается при максимализации ^той целевой функции рьН0Рм= р^"1®", при ее минимизации — р|£"0р''м=р1ст,п. Например, если оптимизируется оптическая плотность ПФ, величина равна минимальному значению функции А^фг)-

Созданная база данных дает возможность количественно сравнивать априори или апостериори техническую оптимальность того или иного состава ПФ и делать правильный выбор из нескольких вариантов, подходящих по эффективности и селективности разделения. По величине можно сравнивать качество существующих методик, применяемых для решения той или иной аналитической задачи. На рис. 27 приведен один из ключевых рабочих листов программы поиска оптимального решения по обобщенной целевой функции. Рис. 28-30 дают общее представление о том, как выглядят типичные частные и целевые функции для НФХ и ОФХ. Визуализация этих функций позволяет оператору легко сделать экспертную оценку качества методики и оценить возможности ее улучшения. Создание алгоритмов поиска Р^ не представляет большой сложности, несмотря на наличие нескольких оптимизируемых параметров. В итоге получается двухмерный график, простой в интерпретации. Аналогично проводят поиск оптимального решения при выборе колонки, если извест-

ны функциональные зависимости между ее параметрами и граничные условия, удовлетворяющие требованиям аналитической задачи.

Рис. 27. Рабочий лист экспертной системы ввода граничных условий и расчета 9 частных и обобщенной целевой функции

Рис. 28. Обобщенная (ОЦФ) и составляющие целевые функции Рк для микроколоночной ВЭЖХ эвгенола для ПФ гексан - пропан-2-ол: 1 - предел прозрачности; 2 - растворимость, 3 - полярность, 4 - Тквп; 5 - оптическая плотность, при 250 нм, 6 - плотность, 7 - стоимость, 8 - ПДК; 9 - вязкость

Рис. 29. Типичные Р„б для хромато-графической системы «цветообра-зующие компоненты — Силасорб 600 («Милихром», УФД) - бинарные ПФ гексан - модификатор»: 1 - диэтиловый эфир; 2 - этилацетат; 3 - ТГФ; 4 - хлороформ; 5 - этанол; 6 - диоксан; 7 — пропан-2-ол

Рис. 30. Типичные для хрома-тографической системы «гидрофобные соединения — Силасорб С!8 («Милихром», УФД) - бинарные ПФ вода - модификатор»: 1 - аце-тонитрил; 2 - метанол; 3 - ТГФ

Целесообразно говорить не о точечном оптимуме, а об оптимальном диапазоне который на отдельных участках может изменяться медленно. Оптимальное решение зачастую регулируется наложенными граничными условиями. При отсутствии функциональных зависимостей предложено использовать обобщенные критерии.

Разработаны принципы обнаружения многокомпонентной фальсифицирующей добавки переменного состава в многокомпонентном продукте с переменным составом этих же компонентов. На рис. 31 даны 6 из 20 разных позиций взаимного расположения характеристичных диапазонов колебаний концентрации ьго компонента в системе из двух продуктов - стандартного и эрзаца. На оси абсцисс отложена массовая доля эрзаца (0-100%), на оси ординат - массовая доля ьго компонента. Зона ЛББС выделяет допустимый диапазон изменений содержания компонента в

0 0.2 0.4 0.4 ое 1

стандартном продукте, а зона A'B'D'C' - диапазон характерный для i-ro компонента в фальсифицирующей добавке. Линии АВ и CD - верхняя и нижняя граница интервала, в котором варьирует содержание компонента в стандарте, а линии А 'В' и C'D' - границы для i-ro компонента в эрзаце. Линии - тренды изменения концентрации компонента

по мере роста массовой доли эрзаца в смеси. Линии трендов исходят из экстремальных концентраций компонента в стандартном продукте (точки А и С) и заканчиваются в точке, соответствующей экстремальным концентрациям компонента в эрзаце (В 'и D"). Перпендикуляры на ось абсцисс из точки пересечения линий трендов с линиями АВ и CD указывают m2, при которой можно обнаружить эрзац. Наличие эрзаца гарантированно фиксируется в случае реализации вариантов a, b, leu 2е. Если в нем нет i-ro компонента стандартного продукта (вариант а), примесь обнаруживается, как только линия тренда пересечет линию CD, т.е. .достоверно зафиксируется более низкая концентрация компонента в пробе. Если в добавке есть i-й компонент, отсутствующий в стандартном продукте (вариант 6), тогда эрзац раскрывается на уровне порога обнаружения i-ro пика на хромато-грамме. С учетом разбавления можно заметить до 0.5 % добавки. В тех случаях, когда диапазоны содержания компонента в смешиваемых композициях частично перекрываются (вариант с), или имеют общую границу (вариант d), добавка открывается, как только концентрация компонента станет ниже или выше предельно допустимого значения, т.е. линии трендов пересекут линию АВ или CD. Однако есть вероятность получить тренды, не пересекающиеся с линиями АВ и CD. В этих случаях обнаружить фальсификацию нельзя. Для идентификации перспективны варианты е, когда диапазоны содержания компонентов в продукте и эрзаце полностью изолированы.

■) ь)

О |||р% 100 0 т2% 100

Рис. 31. Варианты взаимного расположения диапазонов содержания ьго компонента в двух смешиваемых многокомпонентных аналитах: а - компонент отсутствует в эрзаце; Ь - компонент отсутствует в стандартном продукте; с - диапазоны в стандартном продукте и эрзаце частично перекрываются; d - диапазоны в стандарте и эрзаце имеют общую границу раздела; 1е и 2е - массовая доля компонента в стандарте выше или ниже, чем в эрзаце, а диапазоны его содержания изолированы.

Добавка гарантированно находится, как только концентрация компонента становится выше или ниже границы допустимого диапазона. Гарантированные пределы обнаружения эрзаца обозначены точкой Р. Для разных контролируемых компонентов значения Р, как правило, не совпа-

дают. Экстремальные значения контролируемых критериев ограничивают идентификационную зону. Если хотя бы один критерий, с учетом погрешности определения выходит из ее пределов, следует заключение о несоответствии стандартному образцу. Многокритериальные идентификационные зоны сложных природных смесей имеют индивидуальные границы, для проверки аутентичности продуктов по этим зонам перспективны алгоритмы искусственных нейронных сетей, в практической экспертизе удобны контрольные карты (диаграммы), визуализирующие идентификационные зоны.

Разработанные принципы применимы при идентификации натуральности или аутентичности жиров по триглицеридному, жирно-кислотному составу, составу стеринов, летучих компонентов, по продуктам пиролиза; белков - по аминокислотному составу. Они применимы при проверке аутентичности многих фармпрепаратов, на основе экстрактов биологически активных добавок, которые фальсифицируются разбавлением, нарушением пропорций активных компонентов.

Выполненные в настоящей работе систематические исследования и обобщения в области теории и практики ЖХ позволяют совершенствовать аналитические и технико-эксплуатационные характеристики методик определения полифункциональных органических соединений.

Выводы

1. Изучены, теоретически обоснованы особенности и оптимизированы условия высокоэффективной жидкостной хроматографии высокогидрофобных и полярных полифункциональных соединений на примере цве-тообразующих компонентов фотоматериалов, антиоксидантов, светоста-билизаторов и полупродуктов фармацевтических препаратов фенольного типа, каротиноидов и гликозидов. Установлены количественные корреляции между критериями гидрофобности полифункциональных органических соединений и параметрами их удерживания. Если в условиях обра-

щенно-фазовой хроматографии наблюдается линейное увеличение логарифма обьема удерживания при увеличении гидрофобности сорбатов, то в условиях нормально-фазовой хроматографии объемы удерживания проявляют эффект насыщения - для низкогидрофобных соединений они резко падают при увеличении гидрофобности сорбатов, а для высокогидрофобных соединений объемы удерживания уменьшаются плавно, стремясь к объему удерживания несорбируемого вещества.

2. Установлены феноменологические зависимости между параметрами удерживания сорбатов, их строением и полярностью подвижной фазы на немодифицированном и модифицированных силикагелях. Обоснован физический смысл некоторых констант, входящих в эти зависимости. Так, удерживание сорбатов в зависимости от полярности подвижной фазы в условиях нормально-фазовой хроматографии адекватно описывается уравнением обратной инверсии, свободный член которого равен мертвому объему. В условиях обращенно-фазовой хроматографии в зависимости от строения групп, модифицирующих поверхность силикагеля, и количества остаточных силанольных групп, выявлено наличие нормально-фазовой составляющей объема удерживания, доля которой увеличивается при увеличении концентрации органического модификатора в водно-органических подвижных фазах. Свободный член в линейных логарифмических анаморфозах, описывающих влияние полярности подвижной фазы в обращенно-фазовой хроматографии равен логарифму величины нормально-фазовой составляющей наблюдаемого объема удерживания.

3. Изучены и проанализированы изотермы плотности, диэлектрической проницаемости, оптической плотности, показателя преломления, вязкости и элюирующей силы от объемной доли модификатора для серии типовых бинарных нормально- и обращенно-фазовых подвижных фаз. Показано, что учет неаддитивности этих изотерм при оптимизации хромато-графических методик позволяет повысить чувствительность определения,

улучшить технико-эксплуатационные характеристики методики, избежать критических режимов хроматографирования.

4. Проанализированы изобары температуры кипения от объемной доли модификатора для типичных бинарных подвижных фаз, применяемых в жидкостной хроматографии. Найдены полиазеотропные системы, позволяющие по корреляции между полярностью бинарного растворителя и объемной долей модификатора в азеотропной бинарной смеси подбирать азеотропы с заданной элюирующей силой. Концентрация модификатора в азеотропной подвижной фазе для нормально-фазовой хроматографии тем выше, чем выше ее полярность, а в азеотропной обращенной подвижной фазе концентрация модификатора тем выше, чем меньше суммарная полярность.

5. Разработаны шкалы полярности растворителей, основанные на обобщенных кватернарных критериях, которые позволяют измерять полярность и элюирующую силу растворителей различной природы в широком диапазоне варьирования полярных свойств. С помощью этих критериев изучено влияние полярности подвижной фазы на параметры удерживания сорбатов в нормально- и обращенно-фазовой хроматографии, на кето-енольное равновесие экспериментально проверена и уточнена концепция применения изоэлюотропных составов в условиях нормально- и обращенно-фазовой жидкостной хроматографии. Для элюи-рующей силы растворителей на силикагеле, оксиде алюминия, октадеци-лированном силикагеле и на активированном угле установлены оптимальные коэффициенты веса парциальных полярностей обобщенного критерия, в результате чего получены бинарный, тернарный и кватернарный критерии полярности, максимально адаптированные для соответствующих хро-матографических систем.

6. Проанализированы возможности измерения гидрофобности и полярных свойств сорбентов с помощью упрощенного критерия гидро-

фобности Шатца и расчетных величин логарифма коэффициента распределения между октан-1олом и водой для модельных соединений, имеющих такой же состав функциональных групп, что и поверхность сорбента.

7. Разработаны принципы создания экспертной системы оценки качества хроматографической методики анализа. Создан прототип экспертной системы, в котором были использованы результаты оригинальных физико-химических и хемометрических исследований полярности и элюирующей силы подвижной фазы; закономерности изменения температуры кипения, плотности, вязкости, показателя преломления, оптической плотности в серии типовых бинарных подвижных фаз в широком диапазоне составов (при изменении объемной доли от 0 до 1), а также данные по растворимости серии аналитов в.типовом наборе из 10 растворителей, имеющих максимальный рейтинг хроматографических свойств. В экспертной системе использовали готовый, протестированный, всесторонне апробированный пакет программ статистической обработки и поиска оптимальных решений, включенный в типовой табличный процессор Microsoft Excel. Разработаны алгоритмы выбора оптимальных условий жидкостной хроматографии для конкретных аналитических задач с помощью обобщенных критериев и обобщенных целевых функций. Многопараметрическая количественная оценка хроматографических методик, учитывающая совокупность хроматографических свойств сорбата, подвижной фазы, колонки, эксплуатационных характеристик хроматографа и граничные условия технического задания, позволяет разрабатывать надежные методики выполнения измерений для рутинных массовых анализов и сопоставлять уровни качества нескольких методик, решающих одну и ту же аналитическую задачу по величине обобщенной целевой функции.

8. Разработан принцип обнаружения многокомпонентной фальсифицирующей добавки переменного состава в многокомпонентном про-

дукте с переменным составом этих же компонентов, в основу которого положен анализ контролируемых хроматографических данных и сопоставление их со статистически достоверно установленными диапазонами возможных колебаний содержания серии характеристичных компонентов в стандартном образце. Изучение и обобщение хроматографических баз данных показало, что вероятность обнаружения фальсификации многокомпонентных аналитов заметно повышается, если используется многокритериальная идентификационная зона, включающая 5-10 контролируемых компонентов или параметров. Если содержание хотя бы одного компонента с учетом погрешности измерений выходит за пределы идентификационной зоны, аналит следует признать неаутентичным декларируемому продукту. Визуализация многокритериальных идентификационных зон с помощью контрольных карт, сокращает информацию, повышает наглядность и облегчает ее восприятие, ускоряет процедуру идентификации. Предложено использовать контрольные карты многокомпонентных продуктов в качестве основы для создания экспертных систем оценки аутентичности продуктов со сложным составом.

Основные материалы диссертации опубликованы в следующих работах:

1. Рудаков, О.Б. Физико-химические системы сорбат - сорбент - элю-ент в жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков,- В.Ф: Селеменев. - Воронеж : Изд-во Воронеж, ун-та, 2003.-300 с.

2. Рудаков, О.Б. Растворитель как средство управления процессом в жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков. - Воронеж : Изд-во Воронеж, ун-та, 2003.-300 с.

3. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, И.А. Востров, С.В. Федоров и др. - Воронеж : Водолей, 2004.-528 с.

4. Рудаков, О.Б. Дифференциальный термический анализ пищевых жиров / К.К. Полянский, С.А Снегирев, О.Б. Рудаков. - М. : ДеЛи принт, 2004.-86 с.

5. Разделение и идентификация таутомерных форм орто-октадецилоксибензоилметилацетата методом ВЭЖХ с УФ детектированием / О.Б. Рудаков, Н.И. Мотина, О.А Чистовская и др. // Журн. аналит. химии. - 1991. -Т. 46, № 12. - С. 2355-2364.

6. ВЭЖХ цветообразующих компонентов. Желтые компоненты из ряда производных анилидов ароилуксусных кислот и их полупродукты / О.Б. Рудаков, Н.И. Мотина, Л.В. Минкина и др. // Журн. аналит. химии. - 1993. -Т. 48, №2.-С. 297-304.

7. ВЭЖХ цветообразующих пурпурных компонентов - производных пиразолона-5 / О.Б. Рудаков, Л.В. Дулуба, Г.С. Степанова, А.А. Галяутди-нов//Журн. аналит. химии.-1993.-Т. 48, № 12.-С. 1934-1940.

8. Рудаков, О.Б. Высокоэффективная жидкостная хроматография цве-тообразующих голубых компонентов из ряда производных амидов 1-гидрокси-2-нафтойной кислоты / О.Б. Рудаков, О.А Чистовская, М.Л. Уш-калова // Журн. аналит. химии. - 1995. - Т. 50, № 3. - С. 277-282.

9. Парофазное определение микропримесей тетрахлорметана, хлороформа, толуола и хлорбензола в сточных водах химического производства / О.Б. Рудаков, ЕА Дубко, Г.С. Степанова, В.И. Баутин // Журн. аналит. химии. - 1995. -Т. 50, № П. - С. 1196-1198.

10. Рудаков, О.Б. Диэлектрическая проницаемость как мера полярности бинарных подвижных фаз, используемых в высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков // Журн. аналит. химии. - 1998. - Т. 53, №9.-С. 952-957.

11. Рудаков. О.Б. Оптимизация условий разделения методом высокоэффективной жидкостной хроматографии недиффундирующих компонентов фотоматериалов / О.Б. Рудаков, В.В. Хрипушин, В.Ф. Селеменев // Журн. аналит. химии. - 1999. -Т. 54, № 7. - С. 699-705.

12. Оптические свойства бинарных подвижных фаз как составляющие целевые функции при оптимизации условий высокоэффективной жидкостной хроматографии гидрофобных соединений фенольного типа / О.Б.

Рудаков, В.В. Хрипушин, О.Н. Бочарова, Л.В. Рудакова // Журн. аналит. химии.-2001.-Т.56,№ 1.-С.44-51.

13. Рудаков, О.Б. Микроколоночная высокоэффективная жидкостная хроматография орто-замещенных производных фенола / О.Б. Рудаков, М.П. Алексюк, В.В. Коновалов // Журн. аналит. химии. -2001. -Т. 56, № 4.-С. 351-358.

14. Рудаков, О.Б. Качественная идентификация молочного жира по хроматографическим данным / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский, М.П. Алек-сюк//Журн. аналит. химии.-2002.-Т. 57, № 12.-С. 1081-1088.

15. Некоторые аспекты влияния природы растворителя и давления на реакционную способность кремнийорганических пероксидов в реакциях термического разложения / О.Б. Рудаков, В.М. Жулин, Т.А. Сосновская, И.П. Яковлев // Изв. АН СССР. Сер. химич. - 1987. -№ 7. - С. 1489-1496.

16. Рудаков, О.Б. Обобщенный критерий полярности растворителей как средство управления хроматографическим процессом / О.Б. Рудаков, И.П. Седишев // Изв. РАН. Сер. химич. -2003. -№ 1.-С. 52-59.

17. Рудаков, О.Б. Диэлектрическая проницаемость двух- и трехкомпо-нентных подвижных фаз, используемых в высокоэффективной жидкостной хроматографии/ О.Б. Рудаков // Журн. физич. химии. - 1997. -Т. 71, № 12.-С. 2245-2248.

18. Рудаков, О.Б. Плотность бинарных подвижных фаз / О.Б. Рудаков, М.И. Соколов, Л.В. Рудакова // Журн. физич. химии. - 1999. - Т. 73, № 7. -С. 1303-1306.

19. Рудаков, О.Б. Вязкость бинарных подвижных фаз для высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, М.И. Соколов, В.Ф. Селеменев // Журн. физич. химии. -1999. -Т. 73, № 9. -С. 1641-1644.

20. Рудаков, О.Б. Показатель преломления бинарных подвижных фаз для высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев // Журн. физич. химии. - 1999. -Т. 73, № 12.-С. 2242-2245.

21. Рудаков, О.Б. Температура кипения бинарных подвижных фаз, применяемых для высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, О.Н. Бочарова // Журн. физич. химии. - 2000. - Т. 74, № 6. - С. 1093-1098.

22. Энергетические и спектральные характеристики Н-связей в фосфо-липидах/ В.Ф. Селеменев, Г.Ю. Орос, С.А Железной, А.С. Шестаков, Т.Д. Железная, Е.Ф. Сафонова, В.М. Болотов, О.Б. Рудаков // Журн. физич. хи-мии.-2001.-Т. 75, №4.-С. 653-659.

23. Обращенно-фазовая микроколоночная высокоэффективная хроматография фенолов / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев, В.В. Коновалов, О.Н. Спитченко//Журн. физич. химии.-2002. - Т. 76,№ 5. - С. 931-935.

24. Рудаков, О.Б. Влияние состава на элюирующую способность бинарных подвижных фаз в нормально-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков // Журн. физич. химии. - 2003. - Т. 77, № 12.-С. 2230-2235.

25. Рудаков, О.Б. Расчет объемов активации термических превращений триметилсилил(кумил)пероксида методом сплайн-аппроксимации /В.М. Жулин, О.Б. Рудаков, В.Л. Антоновский // Журн. физич: химии. - 2004. -Т. 78, №7.-С. 1270-1274.

26. Рудаков, О.Б. Описание элюирующей способности бинарных подвижных фаз в нормально-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков // Журн. физич. химии. - 2004. - Т. 78, №9. - С. 1674-1677.

27. ИК-спектроскопическое исследование кето-енольной таутомерии орто-октадецилоксибензоилметилацетата / О.Б. Рудаков, А.Н. Гольцев, Ю.В. Каплин и др. // Журн. прикладной спектроскопии. - 1991. - Т. 54, № 1.-С. 22-25.

28. Оптимизация условий определения массовой доли эвгенола методом микроколоночной высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, ЕА Подолина, Я.И. Коренман и др. // Сорбционные и хромато-графические процессы. - 2001. - Т. 1, № 1. - С. 46-52.

29. Хемометрический подход в оценке элюирующей способности подвижных фаз в ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев, И.М. Сезин и др. // Сорбционные и хроматографические процессы. - 2001. - Т. 1, № 6. - С. 1053-1064.

30. Рудаков, О.Б. Оценка полярности хроматографических растворителей по обобщенным критериям / О.Б. Рудаков // Сорбционные и хромато-графические процессы. - 2002. - Т. 2, № 5-6. - С. 596-608.

31. Микроколоночная ВЭЖХ водноспиртовых экстрактов древесины дуба / И.В. Новикова, А.В. Данковцев, СВ. Востриков, О.Б. Рудаков, Н.В. Дроздова // Сорбционные и хроматографические процессы. - 2003. - Т. 3, №5.-С. 612-615.

32. Тетрагидрофуран - универсальный растворитель для жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев, М.И. Соколов, Л.В. Рудакова // Вестник ВГУ. Сер. Химия. Биология. Фармация. - 2003. - №2. - С. 56-65.

33. Хроматографическое определение натуральных и искусственных каротиноидов в пищевых продуктах / О.Б. Рудаков, Л.И. Перикова, В.М. Болотов, Г.А. Сташина // Вестник ВГУ. Сер. Химия. Биология. Фармация. - 2004. -№ 1.- С. 78-84.

34. Фракционный состав антоциановых красителей из растительных экстрактов и контроль над ними методом ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, А.Д. Хай-рутдинова, А.П. Один, В.М. Болотов // Вестник ВГУ. Сер. Химия. Биология. Фармация. - 2004. - №1. - С.85-93.

Патенты:

1. Способ получения модифицированного каротиноидного красителя из растительного сырья : пат. 2139306 Рос. Федерация, МПК С 09 В 61/00 / Болотов В.М., Магомедов Г.О., Рудаков О.Б., Комарова Е.В. ; заявитель и патентообладатель Воронеж, гос. технологич. академия. -№ 98144475/13 ; заявл. 20.07.98 ; опубл. 10.10.99, Бюл. №28. - 5 с.

2. Способ разделения фосфолипидов : пат. 2169734 Рос. Федерация, МПК С 07 Б 9/09 / Селеменев В.Ф., Орос Г.Ю., Железной С.А., Рудаков О.Б. и др. ; заявитель и патентообладатель Воронеж, гос. ун-т. - № 99125174/04 ; заявл. 30.11.99 ; опубл. 27.06.01, Бюл. №18. -3 с.

3. Способ получения соли полиакриловой кислоты : пат. 2186792 Рос. Федерация, МПК С 08 Б 120/06, 6/06, 6/10 / Щербань А.И., Рудаков О.Б., Алымова А.Т. и др. ; заявитель и патентообладатель ООО «Научно-

производственная фирма «Техника и информация». - № 99122178/04 ; заявл. 26.10.99 ; опубл. 10.08.02, Бюл. №22. - 6 с.

4. Устройство для идентификации компонентов в сложных смесях : пат. 2192636 Рос. Федерация, МПК G 01 N 30/46 / Рудаков О.Б., Боев А.И., Никитина С.Ю. и др. ; заявитель и патентообладатель Воронеж, гос. ун-т. - № 2001111977/28 ; заявл. 03.05.01 ; опубл. 10.11.02, Бюл. №31.-4 с.

5. Способ определения гидрохинона и пирокатехина в водных растворах : пат. №2205398 Рос. Федерация, МПК G 01 N 30/02 / Харитонова Л. А., Коренман Я.И., Рудаков О.Б.; заявитель и патентообладатель Воронеж, гос. технологич. академия. - №2001135696/28 ; заявл. 24.12.01 ; опубл. 27.05.03, Бюл. №15.-3 с.

6. Композиция для получения творожной массы «Амелия» : пат. 2219783 Рос. Федерация, МПК А 23 С 23/00, А 23 L 1/30 / Полянский К.К., Лосева В.А., Глаголева Л.Э., Смольский Г.М., Рудаков О.Б., Кузнецова Е.В.; заявитель и патентообладатель Воронеж, гос. технологич. академия. - № 2002115833/13 ; заявл. 13.06.02 ; опубл. 27.12.03, Бюл. №36. - 10 с.

7. Способ получения спирто-водорастворимого каротиноидного красителя из растительного сырья : пат. 2221829 Рос. Федерация, МПК С 09 В 61/00 / Перикова Л.И., Болотов В.М., Рудаков О.Б.; заявитель и патентообладатель Воронеж, гос. технологич. академия. - № 2002119910/13; за-явл. 22.07.02; опубл. 20.01.04, Бюл. №2. - 5 с.

Подписано в печать 1.09.2004. Формат 60x84 1/16.

Бумага офсетная. Гарнитура «Таймс». Ризография.

Усл. печ. л. 2. Тираж 100 экз. Заказ

Воронежская государственная технологическая академия (ВГТА) Участок оперативной полиграфии ВГТА Адрес академии и участка оперативной полиграфии 394017, г. Воронеж, пр. Революции, 19

« 168 97

Основные обозначения и используемые сокращения.

Введение.

Глава 1. Хроматографические системы сорбат - элюент — сорбент.

1.1. Дефиниции и термины.

1.2. Предмет исследования и анализ развития проблемы.

1.3. Физико-химические критерии совместимости компонентов системы сорбат — элюент — сорбент.

1.4. Хроматографические свойства типовых сорбатов.

1.4.1. Полярность и гидрофобность.

1.4.2. Строение сорбата и растворимость.

1.4.3. Оптические свойства.

1.4.4. Рефракционные свойства.

1.5. Современные сорбенты для жидкостной хроматографии.

1.5.1.Сорбенты для адсорбционной и нормально-фазовой хроматографии.

1.5.2. Привитые сорбенты для нормально-фазовой хроматографии.

1.5.3. Сорбенты для обращенно-фазовой хроматографии.

1.5.4. Сорбенты для эксклюзионной хроматографии.

1.5.6. Количественная оценка полярных свойств сорбентов.

1.6. Хроматографические свойства типовых растворителей.

1.6.1. Оптические свойства.

1.6.2. Полярность и элюирующая сила.

1.6.3. Смешиваемость. Миксотропный ряд.

1.7. Обобщенные критерии полярности растворителей.

1.8. Обобщенные критерии элюирующей силы растворителей.

Divide ut regnes

Жидкостная хроматография изучает межмолекулярные взаимодействия и перенос молекул или частиц в системе из двух несмешивающихся фаз -стационарной и подвижной. В зависимости от варианта ЖХ в качестве неподвижной фазы используют немодифицированные и модифицированные силикагели, синтетические или искусственные полимерные материалы. В качестве подвижной фазы используют смешанные растворители, включающие разбавитель и один или несколько модификаторов, которые для выбранного варианта ЖХ обладают большей элюирующей способностью, чем базовый растворитель (разбавитель).

Предметом исследования являются физико-химические системы сор-бат - элюент (подвижная фаза) - сорбент (неподвижная фаза) в жидкостной хроматографии в широкой области изменений структуры сорбата и состава подвижной фазы в зависимости от типа сорбента и механизма удерживания.

Актуальность проблемы. ЖХ получила широкое применение в аналитической, органической химии, биотехнологии, биохимии, медицине, микробиологии, фармацевтике, экологии как метод разделения, выделения и анализа органических соединений самого разнообразного строения. Благодаря неограниченной возможности варьировать состав ПФ и тип сорбента, а также благодаря техническому прогрессу в аппаратурном оснащении и компьютеризации эффективность методов ЖХ в решении аналитических задач чрезвычайно высока. Практически не существует объектов, для хроматогра-фического разделения которых не удалось бы найти подходящего сорбента, систем растворителей и способов детектирования.

В связи с высоким уровнем развития методов ЖХ, и в первую очередь ВЭЖХ, происходит замена в системе ГОСТ устаревших спектрофотометри-ческих методик химического анализа на методики, основанные на методах

ЖХ. Эти методики сочетают в себе преимущества хроматографического разделения со спектрофотометрическим или иным способом детектирования разделенных компонентов. Не смотря на множество преимуществ, современные методы ЖХ отличается более высокой себестоимостью единичного анализа, сложной хроматографической аппаратурой, дорогостоящими колонками, которые предъявляют ряд жестких требований к вводимой пробе, к подвижной фазе. Чтобы сократить «холостое» время эксплуатации хроматографов, уменьшить расходы и трудозатраты на разработку методик, в последнее десятилетие активно разрабатываются экспертные системы, позволяющие по установленным закономерностям, с минимальным предварительным экспериментом находить подходящие условия разделения и детектирования анализируемых компонентов. Стандартизированные методики в свою очередь не могут идентично воспроизводиться на разных хроматографиче-ских системах, имеющих номинально близкие характеристики. Для адаптации методики к конкретному хроматографу и колонке требуется так же какое-то количество подгоночных экспериментов, уточняющих в первую очередь состав и расход ПФ. Для минимизации этой процедуры опять же необходимо применение известных правил и закономерностей. Разработка экспертных систем для различных методов химического анализа является одним из приоритетных и актуальных проблем современной аналитической химии, над которыми активно работают целые научные школы.

В связи со сложностью механизмов удерживания теория ЖХ еще недостаточно глубоко проработана. Известные модели удерживания дают удовлетворительный прогноз только в узких областях состава ПФ, отсутствует универсальный математический аппарат, позволяющий описывать хро-матографические свойства многокомпонентных ПФ в широком интервале концентраций модификатора. Практически не изучались свойства хромато-графических систем в условиях с низкой селективностью разделения, вместе с тем, измерения параметров удерживания аналитов в этих не имеющих пракпрактический интерес областях позволяет построить более точные модели удерживания в типовых условиях хроматографирования. Не достаточно хорошо изучено хроматографическое поведение полифункциональных органических соединений с высокой гидрофобностью, которая определяется в первую очередь наличием в молекуле объемных алкильных и арильных заместителей. К этим соединениям относятся цветообразующие компоненты фотоматериалов, антиоксиданты и светостабилизаторы, синтетические и натуральные красители, липофильные фармацевтические препараты. Изучение их удерживания представляет не только частный интерес, но и позволяет найти закономерности удерживания от структуры сорбата в более широком диапазоне варьирования гидрофобно-гидрофильного баланса. Проблемным с практической и теоретической точки зрения остаются качественные и количественные характеристики полярности индивидуальных и смешанных растворителей. Полярность растворителя определяет его способность растворять аналит, смешиваться с разбавителем, элюировать сорбат через слой сорбента. В то же время известные критерии полярности, применяемые в ЖХ, не лишены ряда недостатков, отсутствует универсальный подход в количественном определении элюирующей способности растворителей. Это мешает сопоставлять хроматографическое поведение аналитов в ПФ, состоящих из растворителей разной природы. Актуальной проблемой является оценка качества хроматографической методики, предназначенной для массовых определений. Оно зависит от большого числа факторов (времени анализа, стоимости материалов, техники безопасности лабораторных работ, совместимости ПФ с техническими характеристиками хроматографической аппаратуры и т.д.). Следовательно, необходимо разработать процедуру оптимизации технико-эксплуатационных характеристик методики и для надежной экспертной оценки разработать количественные критерии ее качества, создать соответствующий набор правил, алгоритмов и баз данных, объединенных в экспертную систему. Злободневной проблемой, вызвавшей, в частности, развитие аналитической ВЭЖХ, является фальсификация многокомпонентных натуральных и синтетических смесей аналитов в фармацевтической, парфюмерной и пищевой промышленности. Поэтому актуальной является разработка принципов и методов идентификации многокомпонентных смесей вариативного состава.

В настоящей работе обобщены результаты исследований, выполненных автором на кафедре органической химии и в лаборатории инструментальных методов пищевой химии Воронежской государственной технологической академии в соответствии с планами НИР ВГТА, с Координационным планом Научного совета РАН по адсорбции и хроматографии на 2000-2004 г. (код 2.15.7.2., раздел «Синтез и исследование свойств полимерных сорбентов и носителей для хроматографии», тема «Разработка экспертной системы поиска оптимальной бинарной подвижной фазы при хроматографическом разделении пищевых и физиологически активных веществ»). Часть работы выполнена в рамках гранта Министерства образования РФ по теме «Исследование закономерностей влияния содержания токсикантов в объектах производственной деятельности на окружающую природную среду», раздел «Разработка и реализация экспресс-тестов при анализе содержания токсикантов в объектах производственной деятельности»(код 87.15.03).

Цели диссертационной работы:

Разработка принципов построения экспертной системы для оценки технико-эксплуатационных характеристик жидкостнохроматографических методик химического анализа и принципов проверки аутентичности многокомпонентных продуктов с вариативным составом по хроматографическим данным.

Для достижения поставленных целей решались следующие задачи: установление и систематизация общих закономерностей изменения хроматографических свойств типичных бинарных ПФ для нормально- и об-ращенно-фазовой ВЭЖХ (плотности, вязкости, УФ-поглощения, показателя преломления, диэлектрической проницаемости, элюирующей способности, температуры кипения) при изменении объемной доли модификатора от 0 до 1 и разработка на их основе процедуры оптимизации условий хроматографи-рования, учитывающей свойства ПФ, аналита, сорбента, детектора и технико-эксплуатационных характеристик хроматографической системы; установление общих закономерностей хроматографического поведения полифункциональных аналитов в типовых условиях ВЭЖХ, нахождение эмпирических зависимостей параметров удерживания от химического строения аналита (гидрофобно-гидрофильного баланса) и от полярности ПФ (качественного и количественного состава); экспериментальное определение параметров удерживания серии полифункциональных аналитов (фенолов, цветообразующих компонентов, каро-тиноидов и антоциановых красителей, фосфолипидов, углеводов) в различных вариантах ЖХ и оптимизация селективности разделения; разработка феноменологических моделей удерживания «гидрофоб-ность сорбата - объем (фактор) удерживания», «объем (фактор) удерживания - полярность (объем модификатора) элюента» и оптимизация эмпирических коэффициентов в полученных уравнениях; формирование базы данных по оптимальным условиям хроматографирования важнейших аналитов в типичных вариантах ЖХ; формирование базы данных по физико-химическим и технико-эксплуатационным свойствам индивидуальных и бинарных растворителей, применяемых в типовых ПФ; определение для смешанных растворителей функциональных зависимостей, адекватно описывающих экспериментальные изотермы и изобары «свойство — состав», включающих свойства исходных чистых растворителей; анализ корреляций между различными физико-химическими характеристиками растворителей, которые применяются в оценке полярности растворителей, разработка на их основе многопараметрических обобщенных критериев полярности, испытание их в качестве меры элюирующей способности в нормально- и обращенно-фазовой ЖХ; разработка прототипа экспертной системы, решающей задачу определения оптимальных технико-эксплуатационных характеристик и статистически обоснованной количественной оценки качества методик ЖХ с применением обобщенных многофакторных критериев и обобщенных целевых функций, учитывающих весомость и вектор влияния нескольких факторов; разработка и экспериментальная проверка критериев идентификации многокомпонентных смесей с вариативным составом по хроматографиче-ским данным.

Научная новизна работы:

Впервые изучены особенности хроматографического поведения в условиях нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ ряда полифункциональных высокогидрофобных соединений — цветообразующих компонентов фотоматериалов, светостабилизаторов и антиоксидантов, полупродуктов и компонентов фармацевтических препаратов.

Установлены количественные корреляции между критериями гидро-фобности полифункциональных органических соединений и параметрами их удерживания в широком диапазоне составов ПФ в условиях нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ.

Найдены феноменологические зависимости между параметрами удерживания сорбатов различного строения и полярностью ПФ в условиях нормально- и обращенно-фазовой хроматографии. Обоснован физический смысл констант, входящих в эти зависимости.

Впервые установлено и доказано хроматографическое разделение енольных и кетонных форм пространственно затрудненных р-дикарбонильных соединений, изучено влияние условий ЖХ (полярности ПФ и НФ, скорости потока, наличия катализаторов) на кето-енольное равновесие.

Выведены полуэмпирические уравнения, адекватно описывающие экспериментальные изотермы «плотность — объемная доля модификатора», «диэлектрическая проницаемость — объемная доля модификатора», «оптическая плотность — объемная доля модификатора», «показатель преломления -объемная доля модификатора», «вязкость - объемная доля модификатора», «элюирующая сила - объемная доля модификатора» для серии типичных бинарных подвижных фаз для нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ.

Выведено полуэмпирическое уравнение, адекватно описывающее изобары «температура кипения - объемная доля модификатора» для типичных бинарных подвижных фаз, применяемых в нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ.

Впервые найдены три полиазеотропные системы, в которых наблюдается корреляция между полярностью бинарного растворителя и объемной долей модификатора в азеотропной бинарной смеси.

Разработаны кватернарные обобщенные критерии полярности растворителей, линейно коррелирующие с элюирующей способностью растворителей на разных сорбентах во всем диапазоне полярности в широкой выборке растворителей от алканов до воды. С учетом экспериментальных данных по элюирующей силе установлены оптимальные весовые коэффициенты парциальных полярностей обобщенного критерия для ЖХ на силикагеле, оксиде алюминия, силикагеле, модифицированном октадецильными группами и на активированном угле. Показано, что на сорбентах, отличающихся химической природой, вклад различных парциальных полярностей в элюирующую способность может существенно различаться.

Впервые предложены количественные критерии полярности неподвижной фазы, основанные на упрощенном критерии гидрофобности Шатца и на расчетных величинах логарифма распределения в системе октан-1-ол -вода для модельных соединений, имеющих функциональные группы, характерные для поверхности сорбента.

Разработаны алгоритмы выбора оптимальных растворителей и ПФ для конкретных аналитических задач с помощью обобщенных критериев и обобщенных целевых функций. Показано, что обобщенные критерии и обобщенные целевые функции могут применяться в экспертных системах для оценки качества хроматографической методики. Разработан прототип не имеющей мировых аналогов экспертной системы по количественной оценке технико-эксплуатационных характеристик методик с применением ЖХ.

Разработаны принципы идентификации продуктов, представляющих собой многокомпонентные смеси с вариативным составом, содержащие примеси или фальсифицирующие добавки такого же качественного состава, что и основной продукт.

Установлено, что такие ионогенные гидрофобные соединения, как фосфолипиды, существуют в водных растворах в интервале рН=2-14 в нескольких ионных формах (от 2-х до 4-х), которые обладают разными термодинамическими и физико-химическими характеристиками.

Теоретически обоснованы и экспериментально оптимизированы методы разделения фосфолипидов с помощью ЖХ на сорбенте из сверхсшитого полистирола и методом высоковольтного электрофореза.

Результаты исследований являются вкладом в развитие научного направления: метод жидкостной хроматографии в анализе полифункциональных органических соединений.

Практическая значимость:

Разработан комплекс методик определения качества пурпурных, голубых и желтых цветообразующих компонентов фотоматериалов с использованием метода ВЭЖХ.

Разработаны экспресс-методики идентификации жирорастворимых и водорастворимых натуральных красителей, углеводсодержащих соединений с использованием метода ВЭЖХ, которые включены в способы получения и применения этих соединений.

Разработаны методики определения фенолов, антиоксидантов и свето-стабилизаторов фенольного типа в присутствии низкомолекулярных фенолов с использованием метода микроколоночной нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ.

Разработан способ хроматографического разделения фосфолипидов на неионогенном сорбенте из сверхсшитого полистирола.

Разработаны методики разделения фосфолипидов методом ТСХ и высоковольтного электрофореза на бумаге.

Разработаны способы установления грубой фальсификации многокомпонентных аналитов по хроматографическим данным. Предложены контрольные карты, визуализирующие многокритериальные идентификационные зоны, ускоряющие и облегчающие процедуру идентификации многокомпонентных смесей.

Предложен универсальный математический аппарат, адекватно описывающий изотермы хроматографических свойств бинарных ПФ, позволяющий учитывать технико-эксплуатационные характеристики хроматографической аппаратуры при оптимизации методик анализа.

Предложен принцип подбора азеотропных ПФ с заданной элюирующей силой, дающий возможность применять в рутинных методиках ВЭЖХ легко регенерируемые элюенты, что существенно уменьшает материальные затраты на единичный анализ.

Разработанные критерии полярности ПФ позволяют сопоставлять хро-матографические данные, полученные с использованием ПФ из растворителей разной природы, количественно сравнивать их элюирующую силу, находить изоэлюотропные составы, по которым можно подбирать альтернативные элюенты.

Разработаны принципы построения экспертной системы для ЖХ и в оболочке типового электронного процессора Microsoft Excel создан прототип экспертной системы, которая в рамках заданных граничных условий по обобщенным критериям и обобщенным целевым функциям находит оптимальные решения при выборе вариантов и условий ВЭЖХ.

Приоритет и новизна выполненных исследований подтверждены 7 патентами на изобретения РФ.

Разработанные методики химического анализа, алгоритмы экспертизы качества методик, идентификации многокомпонентных смесей апробированы на предприятиях, получены положительные отзывы и оформлены акты внедрения в ЗАО НПКФ «Аквилон», научно-техническом центре ОАО «Ал-тайхимпром», ОАО «Воронежский молочный комбинат», ЗАО «Инновационные системы ОКБМ», ОАО «Целит», разработанная методика контроля качества эвгенола методом ВЭЖХ включена в ТУ 9391-027-10614163-2002 «Жидкость на основе эвгенола для приготовления стоматологической цин-коксид-эвгенольной пасты «Целит-эвгенол».

Методический аспект. Результаты исследования отражены в лекционных курсах и лабораторном практикуме по дисциплинам «Химический состав, свойства и контроль качества продуктов», «Методы и средства анализа пищевого сырья и продуктов растительного и животного происхождения» для студентов очной формы обучения и слушателей по программе профессиональной переподготовки по специальности «Метрология и сертификация». В выполнении отдельных направлений диссертационной работы принимали участие магистры ВГУ Железная Т.А., Карпов С.И., аспиранты ВГТА Железной С.А., Комарова Е.В., Хайрутдинова А.Д., Снегирев С.А.

Положения, выносимые на защиту:

Обоснование нового подхода к поиску оптимальных решений при выборе условий ЖХ, состоящего в аналитическом решении системы уравнений, определяющих частные и обобщенные целевые функции, характеризующие хроматографическую систему «сорбат - элюеит - сорбент», принципы построения и прототип экспертной системы для жидкостной хроматографии.

Общие закономерности удерживания 70 полифункциональных органических соединений с различной гидрофобностью в различных хроматографи-ческих системах «сорбат - элюент - сорбент» (всего 350 систем), в том числе с использованием 24 марок сорбентов, 4 растворителей, используемых в качестве разбавителей подвижной фазы и 11 растворителей-модификаторов.

Способы решения задач качественного, количественного химического анализа, идентификации и обнаружения фальсификации, хроматографиче-ского разделения и выделения индивидуальных компонентов многокомпонентной смеси.

Способы оценки полярности и элюирующей силы индивидуальных и смешанных растворителей с использованием обобщенных критериев.

Способ оценки полярности сорбента с использованием расчетных ве- : личин логарифма распределения в системе октан-1-ол - вода для модельных соединений, имеющих функциональные группы, характерные для поверхности сорбента.

Апробация работы. Основные положения и результаты диссертационной работы доложены на следующих конференциях, симпозиумах и конгрессах:

XXXIV-XLII ежегодные внутривузовские научные конференции ВГТА (г. Воронеж, 1994-2004);

Региональные: III, VI, VIII и IX конференции "Проблемы химии и химической технологии" (г. Воронеж 1995, 1998, 2000; г.Тамбов, 2001);

Всесоюзные и Всероссийские: VII Всесоюз. конференция по химии ди-карбонильных соединений, Рига, 1991; Всерос. конференция "Физико-химические основы пищевых и химических производств", г. Воронеж, 1996; Всерос. «Агроэкология и устойчивое развитие общества», г. Красноярск,

1998; Всерос. симпозиум по теории и практике хроматографии и электрофореза, Москва, 1998; Всерос. симпозиум по химии поверхности, адсорбции и хроматографии, Москва, 1999; Всерос. конференция "Интеграция науки, производства и образования: состояние и перспективы", г. Юрга, 1999; Всерос. конференция "Химический анализ веществ и материалов", Москва, 2000; I Всерос. конференция. «Теория конфликтов и ее приложения», г. Воронеж, 2000; Всерос. конференция «Современные технологические процессы получения материалов и изделий из древесины», г. Воронеж, 2001; Всерос. симпозиум «Современные проблемы хроматографии», Москва, 2002; I Всерос. конференция «Физико-химические процессы в конденсированном состоянии и на межфазных границах. Фагран 2002», г. Воронеж, 2002; Всерос. конференция «Проблемы теоретической и экспериментальной химии», г. Екатеринбург, 2002; Всерос. конференция «Масло. Сыр. Состояние, проблемы, перспективы развития», г. Углич, 2003; Национальный конгресс «Человек и лекарство» г. Москва, 2003; Всерос. конференция «Хроматография и хрома-тографические приборы» г. Москва, 2004.

Международные: I, II, III, IV и V Междунар. симпозиумы «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их практического использования» г. Пущино, 1995, 1997, 1999, 2001, 2003; Междунар. конференция «Научно-технический прогресс в бродильных производствах», г. Воронеж 1997 г.; Междунар. экологические чтения памяти К.К. Сент-Илера, г. Воронеж, 1998; III, IV Междунар. конференция «Интродукция нетрадиционных и редких сельскохозяйственных растений», г. Пенза, 2000; г. Ульяновск, 2002; Междунар. конференция «Современное состояние и перспективы развития теории адсорбции», Москва, 2001; Междунар. конференция «От фундаментальной науки к новым технологиям. Химия и биотехнология биологически активных добавок», Москва, 2001; IX и X Междунар. конференции «Физико-химические основы ионообменных процессов (Иониты-2001, Иониты-2004)», г. Воронеж, 2001, 2004; I Междунар. конгресс «Биотехнология - состояние и перспективы развития», Москва, 2002; Междунар. форум «Аналитика и аналитики», г. Воронеж, 2003; 3rd Int. Symposium on Separation in BioSciencies "100 Years of chromatography", Moscow, 2003; Междунар. конференция «Перспективы производства продуктов питания нового поколения», г. Омск, 2003; Международный научный семинар «100 лет хроматографии», г. Воронеж, 2003.

Личиый вклад автора. Результаты, полученные в соавторстве и отраженные в диссертации, заключаются в теоретическом обосновании и постановке проблемы, разработке общих алгоритмов и подходов к исследованию закономерностей хроматографического поведения аналитов, в систематизации и анализе собственных и литературных данных. Все экспериментальные работы выполнены автором или под его руководством.

Публикации. По теме диссертации опубликованы 150 работ, в том числе 4 монографии, 65 статей в периодических изданиях, рекомендованных ВАК РФ для опубликования научных трудов, более 50 тезисов докладов на международных, всесоюзных, всероссийских конгрессах, симпозиумах и конференциях, получено 7 патентов на изобретение.

Структура диссертации. Диссертация состоит из введения, 6 глав, списка цитируемой литературы из 412 источников, приложения. Материал работы изложен на 400 страницах, содержит 103 рисунка, 89 таблиц, титульные листы патентов, акты внедрения и отзывы.

Выводы

1. Изучены, теоретически обоснованы особенности и оптимизированы условия высокоэффективной жидкостной хроматографии высокогидрофобных и полярных полифункциональных соединений на примере цветообра-зующих компонентов фотоматериалов, антиоксидантов, светостабилизаторов и полупродуктов фармацевтических препаратов фенольного типа, кароти-ноидов и гликозидов. Установлены количественные корреляции между критериями гидрофобности полифункциональных органических соединений и параметрами их удерживания. Если в условиях обращенно-фазовой хроматографии наблюдается линейное увеличение логарифма объема удерживания при увеличении гидрофобности сорбатов, то в условиях нормально-фазовой хроматографии объемы удерживания проявляют эффект насыщения - для низкогидрофобных соединений они резко падают при увеличении гидрофобности сорбатов, а для высокогидрофобных соединений объемы удерживания уменьшаются плавно, стремясь к объему удерживания несорбируемого вещества.

2. Установлены феноменологические зависимости между параметрами удерживания сорбатов, их строением и полярностью подвижной фазы на не-модифицированном и модифицированных силикагелях. Обоснован физический смысл некоторых констант, входящих в эти зависимости. Так, удерживание сорбатов в зависимости от полярности подвижной фазы в условиях нормально-фазовой хроматографии адекватно описывается уравнением обратной инверсии, свободный член которого равен мертвому объему. В условиях обращенно-фазовой хроматографии в зависимости от строения групп, модифицирующих поверхность силикагеля, и количества остаточных сила-нольных групп, выявлено наличие нормально-фазовой составляющей объема удерживания, доля которой увеличивается при увеличении концентрации органического модификатора в водно-органических подвижных фазах. Свободный член в линейных логарифмических анаморфозах, описывающих влияние полярности подвижной фазы в обращенно-фазовой хроматографии равен логарифму величины нормально-фазовой составляющей наблюдаемого объема удерживания.

3. Изучены и проанализированы изотермы плотности, диэлектрической проницаемости, оптической плотности, показателя преломления, вязкости и элюирующей силы от объемной доли модификатора для серии типовых бинарных нормально- и обращенно-фазовых подвижных фаз. Показано, что учет неаддитивности этих изотерм при оптимизации хроматографических методик позволяет повысить чувствительность определения, улучшить технико-эксплуатационные характеристики методики, избежать критических режимов хроматографирования.

4. Проанализированы изобары температуры кипения от объемной доли модификатора для типичных бинарных подвижных фаз, применяемых в жидкостной хроматографии. Найдены полиазеотропные системы, позволяющие по корреляции между полярностью бинарного растворителя и объемной долей модификатора в азеотропной бинарной смеси подбирать азеотропы с заданной элюирующей силой. Концентрация модификатора в азеотропной подвижной фазе для нормально-фазовой хроматографии тем выше, чем выше ее полярность, а в азеотропной обращенной подвижной фазе концентрация модификатора тем выше, чем меньше суммарная полярность.

5. Разработаны шкалы полярности растворителей, основанные на обобщенных кватернарных критериях, которые позволяют измерять полярность и элюирующую силу растворителей различной природы в широком диапазоне варьирования полярных свойств. С помощью этих критериев изучено влияние полярности подвижной фазы на параметры удерждоания сорбатов в нормально- и обращенно-фазовой хроматографии, на кето-енольнре равновесие p-кетоэфиров, экспериментально проверена и уточнена концепция применения изоэлюотропных составов в условиях нормально- и обращенно-фазовой жидкостной хроматографии. Для элюирующей силы растворителей на силикагеле, оксиде алюминия, октадецилированном силикагеле и на активированном угле установлены оптимальные коэффициенты веса парциальных полярностей обобщенного критерия, в результате чего получены бинарный, тернарный и кватернарный критерии полярности, максимально адаптированные для соответствующих хроматографических систем.

6. Проанализированы возможности измерения гидрофобности и полярных свойств сорбентов с помощью упрощенного критерия гидрофобности Шатца и расчетных величин логарифма коэффициента распределения между октан- 1олом и водой для модельных соединений, имеющих такой же состав функциональных групп, что и поверхность сорбента.

7. Разработаны принципы создания экспертной системы оценки качества хроматографической методики анализа. Создан прототип экспертной системы, в котором были использованы результаты оригинальных физико-химических и хемометрических исследований полярности и элюирующей силы подвижной фазы; закономерности изменения температуры кипения, плотности, вязкости, показателя преломления, оптической плотности в серии типовых бинарных подвижных фаз в широком диапазоне составов (при изменении объемной доли от 0 до 1), а также данные по растворимости серии аналитов в типовом наборе из 10 растворителей, имеющих максимальный рейтинг хроматографических свойств. В экспертной системе использовали готовый, протестированный, всесторонне апробированный пакет программ статистической обработки и поиска оптимальных решений, включенный в типовой табличный процессор Microsoft Excel. Разработаны алгоритмы выбора оптимальных условий жидкостной хроматографии для конкретных аналитических задач с помощью обобщенных критериев и обобщенных целевых функций. Многопараметрическая количественная оценка хроматографических методик, учитывающая совокупность хроматографических свойств сорбата, подвижной фазы, колонки, эксплуатационных характеристик хроматографа и граничные условия технического задания, позволяет разрабатывать надежные методики выполнения измерений для рутинных массовых анализов и сопоставлять уровни качества нескольких методик, решающих одну и ту же аналитическую задачу по величине обобщенной целевой функции.

8. Разработан принцип обнаружения многокомпонентной фальсифицирующей добавки переменного состава в многокомпонентном продукте с переменным составом этих же компонентов, в основу которого положен анализ контролируемых хроматографических данных и сопоставление их со статистически достоверно установленными диапазонами возможных колебаний содержания серии характеристичных компонентов в стандартном образце. Изучение и обобщение хроматографических баз данных показало, что вероятность обнаружения фальсификации многокомпонентных аналитов заметно повышается, если используется многокритериальная идентификационная зона, включающая 5-10 контролируемых компонентов или параметров. Если содержание хотя бы одного компонента с учетом погрешности измерений выходит за пределы идентификационной зоны, аналит следует признать неаутентичным декларируемому продукту. Визуализация многокритериальных идентификационных зон с помощью контрольных карт, сокращает информацию, повышает наглядность и облегчает ее восприятие, ускоряет процедуру идентификации. Предложено использовать контрольные карты многокомпонентных продуктов в качестве основы для создания экспертных систем оценки аутентичности продуктов со сложным составом.

1. Хроматография. Основные понятия. Терминология. - М. : Сборники научно-нормативной терминологии, 1997. - Вып. 114. — 48 с.

2. Ettre, L.S. Nomenclature for chromatography / L.S. Ettre // Pure Appl. Chem. 1993. - V. 65. - P. 819-872.

3. Ettre, L.S. New unified non nomenclature for chromatography / L.S. Ettre // Chromatographia. 1994. - V. 38. - P. 521-526.

4. Majors, R.E. Glossary of liquid phase separations terms / R.E. Majors // Liquid Chromatogr. and Gas Chromatogr. 2001. - V. 19, N. 2. - P. 124-162.

5. Рекомендации и номенклатурные правила ИЮПАК по химии / Под ред. В.М. Иванова. -М.: Наука, 2004. 158 с.

6. Березкин, В.Г. Что такое хроматография? (О новом подходе к определению хроматографии) / В.Г. Березкин. М. : Наука, 2003. — 76 с.

7. Цвет, М.С. О новой категории адсорбционных явлений и о применении их к биохимическому анализу / М.С. Цвет // Труды Варшавского общества естествоиспытателей, отд. биологии. — 1903. Т. 14. — С. 1-20.

8. Tswett, M.S. Physikalisch-chemische Studien uber das Chlorophyll. Die Adsorbtionen / M.S. Tswett // Berichte Dtsch. bot. Ges. Bd. 1906. - V. 24. - S. 316-323.

9. Tswett, M.S. Adsorbtionanalyse und chromatographische Methode. Anwendung auf die Chemie des Chlorophylls / M.S. Tswett // Berichte Dtsch. bot. Ges. Bd. 1906. -V. 24. - S. 384-393.

10. Цвет, М.С. Адсорбционный анализ так называемого «кристаллического хлорофилла» / М.С. Цвет // Журн. русского физико-химического общества. — 1910. Т. 42, В. 8. - С. 1385-1387.

11. Цвет, М.С. Хроматографический адсорбционный анализ. Избранные работы /М.С. Цвет. Л.: Изд-во АН СССР, 1946. - 274 с.

12. Сенченкова Е.М. Михаил Семенович Цвет / Е.М. Сенченкова. — М. : Наука, 1973.-306 с.

13. Шноль, С.Э. Герои и злодеи российской науки / С.Э. Шноль. — М. : КРОН-ПРЕСС, 1997.-464 с.14. 75 Years of Chromatography A Historical Dialogue / Eds. L.S. Ettre, A. Zlatkis. - Amsterdam, The Netherlands : Elsevier, 1979. - 502 p.

14. Poole, C.F. Chromatography Today / C.F. Poole, S.K. Poole. Amsterdam, The Netherlands : Elsevier, 1991. - 1026 p.

15. Ahuja, S. Trace and Ultratrace Analysis of HPLC / S. Ahuja. NY, USA : Wiley-Interscience, 1992. - 419 p.

16. Аналитическая хроматография / К.И. Сакодынский., В.В. Бражников, С.А. Волков, В.Ю. Зельвенский, Э.С. Ганкина, В.Д. Шатц. М. : Химия, 1993.-464 с.

17. Advances in Liquid Chromatography: 35 Years of Column Liquid Chromatography in Japan / Eds. T. Hanai, H. Hantano. — NJ, USA : World Scientific, 1996.-338 p.

18. Практическая газовая и жидкостная хроматография / Б.В Столяров, И.М Савинов, А.Г. Витенберг и др. СПб.: СпбГУ, 1998. - 612 с.

19. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии / Под. ред. А. Хеншен и др. М.: Мир, 1988. - 688 с.

20. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, И.А. Востров, С.В. Федоров, А.А. Филиппов, В.Ф. Селеменев, А.А. Приданцев. — Воронеж : Водолей, 2004. 528 с.

21. Рудаков, О.Б. Физико-химические системы сорбат — сорбент элюент в жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев. - Воронеж : Изд-во ВорГУ, 2003. - 300 с.

22. Рудаков, О.Б. Растворитель как средство управления процессом в жидкостной хроматографии. — Воронеж : Изд-во ВорГУ, 2003. — 300 с.

23. Шатц, В.Д. Высокоэффективная жидкостная хроматография / В.Д. Шатц, О.В. Сахартова. Рига : Зинатне, 1988. - 390 с.

24. Snyder, L.R. Principles of Adsorption Chromatography / L.R. Snyder. NY, USA : M. Dekker, Inc., 1968. - 413 p.

25. Современное состояние жидкостной хроматографии / Под ред. Дж. Киркленда. М.: Мир, 1974. - 325 с.

26. Стыскин, E.JI. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография / E.JI. Стыскин, Л.Б. Ициксон, Е.В. Брауде. М. : Химия, 1986. — 172 с.

27. Беленький, Б.Г. Хроматография полимеров / Б.Г. Беленький, Л.З. Вилен-чик. М. : Химия, 1978. - 344 с.

28. Лурье, А.А. Хроматографические материалы (справочник) / А.А. Лурье. М.: Химия, 1978. - 440 с.

29. Snyder, L.R. Practical HPLC Method Development / L.R. Snyder, J.J. Kirk-land, J.L. Glajch. — 2nd ed. NY, USA : Wiley-Interscience, 1997. - 765 p.

30. Схунмакерс, П. Оптимизация селективности в хроматографии / П. Схунмакерс. М.: Мир, 1989. - 399 с.

31. Food Analysis by HPLC / Ed. L.M. Nollet. NY, USA: M. Dekker, Inc., 1992. - 759 p.

32. Deyl, Z. Quality Control in Pharmaceutical Analysis — Separation Methods / Z. Deyl. Amsterdam, The Netherlands: Elsevier, 1997. -241 p.

33. Wagman, G.H. Chromatography of Antibiotics / G.H. Wagman, M.J. Weinstein. Ed. 2. - Amsterdam, The Netherlands : Elsevier, 1984. - 504 p.

34. Hammond, E.W. Chromatography for the Analysis of Lipids / E.W. Hammond. Boca Raton, FL, USA : CRC Press, 1993.-188 p.

35. Pharmaceutical and Biomedical Applications of Liquid Chromatography / Eds. C.M. Riley, W.J. Lough, I.M. Wainer. — Oxford, UK : Pergamon Division of Elsevier, 1994.-379 p.

36. Hostettmarm, K. Preparative Chromatography Techniques, Applications in Natural Products Isolation / K. Hostettmann, A. Marston, M. Hostettmann. Ed. 2. - Berlin, Germany : Springer, 1998. - 244 p.

37. Киселев, A.B. Адсорбционная газовая и жидкостная хроматография / А.В. Киселев, Я.И. Яшин. М : Химия, 1979. - 288 с.

38. Киселев, А.В. Молекулярные основы адсорбционной хроматографии / А.В. Киселев, Д.П. Пошкус, Я.И. Яшин. М : Химия, 1986. - 272 с.

39. Количественный анализ хроматографическими методами / Под ред. Э. Кац. М.: Мир, 1990. - 320 с.

40. Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам / Под ред. О. Микеша : в 2-х томах. М.: Мир, 1982. - 783 с.

41. Practice of High-Performance Liquid Chromatography: Applications, Equipment and Quantitative Analysis / Ed. H. Engelhardt. Ed. 2. — Berlin, Germany : Springer, 1993.-461 p.

42. Meyer, V.R. Praxis der Hochleistungs — Flussigchromatographie / V.R. Meyer. 3rd ed. - NY, USA : J. Wiley& Sons, 1998. - 352 p.

43. Lunn, G. HPLC Methods for Pharmaceutical Analysis / G. Lunn, N.R. Schmuff: 4 Vols. NY, USA : Wiley-Interscience, 1997 - 2000. - 5400 p.

44. Bidlingmeyer, B.A. Practical HPLC Methodology and Applications / B.A. Bidlingmeyer. — NY, USA : Wiley-Interscience, 1993. 464 p.

45. Даванков, B.A. Лигандообменная хроматография / B.A. Даванков, Дж. Навратил, X. Уолтон. М. : Мир, 1989. - 294 с.

46. Scouten, W.H. Affinity Chromatography : Bioselective Adsorption on Inert Matrices / W.H. Scouten. NY, USA : John Wiley & Sons, 1981; Reprinted by Sigma-Aldrich Corp., 1992. - 348 p.

47. Энгельгардт, X. Жидкостная хроматография при высоких давлениях / X. Энгельгард. М.: Мир, 1980. - 245 с.

48. Препаративная жидкостная хроматография / Под ред. Б. Бидлингмейера. М. : Мир, 1990.-360 с.

49. Жидкостная колоночная хроматография / Под ред. 3. Дейла и др. : в 3-х томах. -М. : Мир, 1978. 1175 с.

50. Karger, B.L. An Introduction to Separation Science / B.L. Karger, L.R. Snyder, C. Horvath. NY, USA : Wiley-Interscience, 1973.-586 p.

51. High-Performance Liquid Chromatography / Ed. J.H. Knox. — Edinburgh, UK : Edinburgh University Press, 1980. 285 p.

52. Robards, K. Principles and Practice of Modern Chromatographic Methods / K. Robards, P.R. Haddad, P.E. Jackson. London, UK, NY, USA : Academic Press, 1995.-495 p.

53. Walker, J.Q. Chromatography Fundamentals, Applications and Troubleshooting / J.Q. Walker, J. Minneci. Niles, IL, USA : Preston Publications, 1996. - 208 P

54. Forgacs, E. Molecular Basis of Chromatographic Separation / E. Forgacs, T. Cserhati. Boca Raton, FL, USA : CRC Press, 1997. - 243 p.

55. Lu, P.C. Chromatographic Theory Basis / P.C. Lu, Z.Z. Dai. Ed. 2. - Beijing, P.R., China : Science Press, 1997. - 484 p.

56. Patel, D. Liquid Chromatography : Essential Data. Chichester, UK : J. Wiley & Sons, 1997.- 146 p.

57. Enclyclopedia of Chromatography / Ed. J. Cazes. NY, USA : M. Dekker, Inc., 2001.-952 p.

58. Сычев, С.Н. Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии «Милихром» / С.Н. Сычев, К.С. Сычев,

59. B.А. Гаврилина. Орел : Изд-во ОГТУ, 2002. - 134 с.

60. Szepesy, G. How to Use Reversed-Phase HPLC / G. Szepesy. NY, USA : VCH Publishers, 1992. - 369 p.

61. Хроматография. Практическое приложение метода / Под ред. Э. Хефт-ман. В 2-х томах. - М. : Мир, 1986. - 758 с.

62. High performance liquid Chromatography : Principles and Methods in Biotechnology / Ed. E. Katz. Chichester, UK : John Wiley & Sons, Ltd, 1996. - 5221. P

63. Введение в микромасштабную высокоэффективную жидкостную хроматографию / Под ред. Д. Исии. М.: Мир, 1991. — 240 с.

64. Microcolumn High-Performance Liquid Chromatography / Ed. P. Kucera. -New York : Elsevier, 1984. 302 p.

65. Snyder, L.R. Classification of the solvent properties of common liquids / L.R. Snyder // J. Chromatogr. Sci. 1978. - V. 16, N. 6. - P. 223-234.

66. Sadek, P. The HPLC solvent guide / P. Sadek. NY, USA : J. Wiley & Sons, 1996.-346 p.

67. Ланин, С.Н. Прогнозирование удерживания в высокоэффективной жидкостной хроматографии. Межмолекулярные взаимодействия в подвижной фазе / С.Н. Ланин, Ю.С. Никитин // Журн. аналитич. химии. — 1991. — Т. 46, № 10.-С. 1971-1980.

68. Влияние ассоциации молекул модификатора в подвижной фазе на удерживание в высокоэффективной жидкостной хроматографии / С.Н. Ланин Э.М. Ля-люнина, Ю.С.Никитин, Н.К. Шония // Журн. физ. химии. 1993. — Т. 67, № 1. —1. C. 146-150.

69. Ланин, С.Н. Влияние ассоциации молекул сорбата и модификатора в подвижной фазе на удерживание в высокоэффективной жидкостной хроматографии / С.Н. Ланин, Н.А Ланина, Ю.С. Никитин // Журн. физ. химии. -1995. -Т. 69, № П.- С. 2045-2051.

70. Осипов, О.А. Справочник по дипольным моментам / О.А. Осипов, В.И. Минкин, А.Д. Гарновский. — М. : Высшая школа, 1971. — 416 с.

71. Cambridge Soft Chemical Drawing, Chemical Databases, Enterprises Solutions, Desktop Software, Consulting Services. - (http://www. cambridgesoft. com).

72. Сычев, С.Н. Полуэмпирическая теория удерживания в нормально-фазовой ВЭЖХ на адсорбционно-модифицированном силикагеле / С.Н. Сычев // Сорбционные и хроматографические процессы. — 2003. Т. 3 - Вып. 4. -С. 446-454.

73. Сычев, С.Н. Оценка напряженности электростатического поля адсорб-ционно-модифицированного силикагеля / С.Н. Сычев, К.С. Сычев, С.Н. Ланин // Журн. физич. химии. 2000. - Т. 74, № 3. - С. 511-513.

74. Hansch, С. Substituent constants for correlation analysis in chemistry and biology / C. Hansch, A. Leo. New York : Wiley, 1979. - 352 p.

75. Глинка, Н.Л. Общая химия : Учебное пособие для вузов / Н.Л. Глинка. — Л. : Химия, 1980. 720 с.

76. Hildebrand, J.H. Regular and Related Solutions / J.H Hildebrand, J.M. Praus-nitz, R.L. Scott. New York : Van Nostrand Reinhold, 1970. - 228 p.

77. Hildebrand J.H. The Solubility of Nonelectrolytes / J.H. Hildebrand, R.L. Scott. 3rd ed. - New York : Dover, 1964. - 488 p.

78. Химия. Большой энциклопедический словарь. — М. : Большая Российская энциклопедия, 1998. — 792 с.

79. Пери, Дж. Справочник инженера-химика / Дж. Пери. JI. : Химия, 1969. -Т. 1.-640 с.

80. Рабинович, В.А. Краткий химический справочник / В.А. Рабинович, З.Я. Хавин. Л. : Химия, 1991.-432 с.

81. Справочник химика / Под ред. Б.П. Никольского. М.-Л. : Химия, 1964. -Т.3.-1005 с.

82. LC Resources Inc. : Innovative resources for chromatography (HPLC and LC-MS). — (http://www.lcresources.com).

83. ВЭЖХ цветообразующих пурпурных компонентов — производных пира-золона-5 / О.Б. Рудаков, Л.В. Дулуба, Г.С. Степанова, А.А. Галяутдинов // Журн. аналитич. химии. 1993. - Т. 48, № 12. - С. 1934-1940.

84. Рудаков, О.Б. Оптимизация условий разделения методом высокоэффективной жидкостной хроматографии недиффундирующих компонентов фотоматериалов / О.Б. Рудаков, В.В. Хрипушин, В.Ф. Селеменев // Журн. аналитич. химии. 1999. - Т. 54, № 7. - С. 699-705.

85. Гордон, А. Спутник химика. Физико-химические свойства, методики, библиография / А. Гордон, Р. Форд. М. : Мир, 1976. - 542 с.

86. Левшин, Л.В. Оптические методы исследования молекулярных систем. Ч. 1. Молекулярная спектроскопия / Л.В. Левшин, A.M. Салецкий. М.: Изд-воМГУ, 1994.-320 с.

87. Коренман, И.М. Фотометрический анализ. Методы определения органических соединений / И.М. Коренман. М.: Химия, 1975. - 360 с.

88. Lunn, G. Handbook of Derivatization Reactions for HPLC / G. Lunn, L.C. Hellwig. NY, USA : J. Wiley & Sons, 1998. - 1795 p.

89. Handbook of Derivatives for Chromatography / Eds. K. Blau, J.M. Halket. — 2nd ed. NY, USA : J. Wiley & Sons, 1993. - 3 69 p.

90. Modern Derivatization Methods for Separation Science / Ed. T. Toyo'oka. -NY, USA : J. Wiley &Sons, 1999. 298 p.

91. The Waters Chromatography Handbook 1993-1994. Milford : Millipore Corp., 1993. - 320 p.

92. Chromatography. Alltech Catalog 400. Deerfield : Alltech, 1997. - 800 p.

93. Life Science Research Products 96. — Bio-Rad, Hercules, California : Bio-Rad Laboratories, 1996. 442 p.

94. Supelco. Chromatography Products for Analysis and Purification. — Deisen-hofen : Sigma-Aldrich Chemie GmbH, 2001. 607 p.

95. Справочник биохимика / P. Досон, Д. Эллиот, У. Эллиот, К. Джонс. М. : Мир, 1991.-544 с.

96. Шаршунова, М. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии / М. Шаршунова, В.Шварц, Ч. Михалец. — М. : Мир, 1980. -Т.1.-295 с.

97. Sadek, P.C. Troubleshooting HPLC Systems : A Bench Manual / P.C. Sadek. NY, USA : J. Wiley & Sons, 2000. - 306 p.

98. Ахадов, Я.Ю. Диэлектрические свойства чистых жидкостей / Я.Ю. Аха-дов. М. : Химия, 1972. - 412 с.

99. Ахадов, Я.Ю. Диэлектрические свойства бинарных растворов / Я.Ю. Ахадов. М. : Химия, 1977.-400 с.

100. Райхардт, К. Растворители и эффекты среды в органической химии / К. Райхардт. М. : Мир, 1991. - 763 с.

101. Рудаков, О.Б. Диэлектрическая проницаемость двух- и трехкомпонентных подвижных фаз, используемых в высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков // Журн. физич. химии. 1997. — Т. 71, № 12. - С. 2245-2248.

102. Рудаков, О.Б. Диэлектрическая проницаемость как мера полярности бинарных подвижных фаз, используемых в высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков // Журн. аналитич. химии. — 1998. — Т. 53, № 9. -С. 952-957.

103. Рудаков, О.Б. Рациональная шкала полярности растворителей для жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев, JI.B. Рудакова // Теория и практика сорбционных процессов. — Воронеж : Из-во ВорГУ, 1998. -Вып. 23.-С. 242-251.

104. Хемометрический подход в оценке элюирующей способности подвижных фаз в ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев, И.М. Сезин, И.В. Аристов, Е.В. Данилова // Сорбционные и хроматографические процессы. 2001. - Т. 1, № 6. — С. 1053-1064.

105. Рудаков, О.Б. Применение редуктивного критерия полярности растворителей в жидкостной хроматографии фенолов / О.Б. Рудаков // Конденсированные среды и межфазные границы. — 2002. Т. 4, № 2. - С. 140-149.

106. Рудаков, О.Б. Обобщенный критерий полярности растворителей как средство управления хроматографическим процессом / О.Б. Рудаков, И.П. Седишев // Известия РАН. Сер. химич. 2003. - № 1. - С. 52-59.

107. Математика. Большой энциклопедический словарь / Гл. ред. Ю.В. Прохоров. М. : Большая Российская энциклопедия, 1998. - 848 с.

108. Рудаков, О.Б. Микроколоночная высокоэффективная жидкостная хроматография орто-замещенных производных фенола / О.Б. Рудаков, М.П. Алек-сюк, В.В. Коновалов // Журн. аналитич. химии. — 2001. Т. 56, № 4. — С. 351358.

109. Обращенно-фазовая микроколоночная высокоэффективная хроматография фенолов / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев, В.В. Коновалов, О.Н. Спитчен-ко // Журн. физич. химии. 2002. - Т. 76, № 5. - С. 931-935.

110. Рудаков, О.Б. Температура кипения бинарных подвижных фаз, применяемых для высокоэффективной жидкостной хроматографии/О.Б. Рудаков, О.Н. Бочарова // Журн. физич. химии. 2000. - Т. 74, № 6. - С. 1093-1098.

111. Рудаков, О.Б. Элюирующая способность бинарных подвижных фаз в нормально-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б.

112. Рудаков, И.П. Седишев, JI.B. Рудакова // Конденсирован, среды и межфазные границы. 2003. - Т. 4, № 2. - С. 176-181.

113. Рудаков, О.Б. Оценка полярности хроматографических растворителей по обобщенным критериям / О.Б. Рудаков // Сорбционные и хроматографиче-ские процессы. 2002. - Т. 2, № 5-6. - С. 596-608.

114. Оптимизация условий определения массовой доли эвгенола методом микроколоночной высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, Е.А. Подолина, Я.И. Коренман и др. // Сорбционные и хроматографи-ческие процессы. 2001. - Т. 1, № 1. - С. 46-52.

115. Рудаков, О.Б. Адсорбционная ВЭЖХ орто-замещенных фенолов / О.Б. Рудаков, В.В. Коновалов, В.Ф. Селеменев // Всерос. конф. "Химический анализ веществ и материалов", Москва, 16-12 апр. 2000 г. : Тез. докл. М., 2000. - С. 287-288.

116. Ахназарова, C.JI. Методы оптимизации эксперимента в химической технологии / C.JI. Ахназарова, В.В. Кафаров. М.: Высшая школа, 1985. - 327 с.

117. Дьяконов, А.Н. Химия фотографических материалов / А.Н. Дьяконов. — М. : Искусство, 1989. 272 с.

118. Болотов, В.М. Модифицированные пищевые красители растительного сырья: получение, состав, свойства и области применения: дисс. . д-ра техн. наук : 030023 : защищена 08.06.00 : утверждена 05.01.01 / В.М. Болотов. -Воронеж, 2000. 380 с.

119. Нечаев А.П. Пищевые добавки / А.П. Нечаев, А.А. Кочеткова, А.Н. Зайцев. М. : Колос, Колос-Пресс, 2002. — 256 с.

120. Танчев, С.С. Антоцианы в плодах и овощах / С.С. Танчев. — М. : Пищевая промышленность, 1980. — 304 с.

121. Харламова, О.А. Натуральные пищевые красители / О.А. Харламова, Б.В. Кафка. М.: Наука, 1989. - 191 с.

122. Нечаев, А.П.Пищевые добавки / А.П. Нечаев, А.А. Кочеткова, А.Н. Зайцев. М.: МГУПП, 1997. - 63 с.

123. Арутюнян, Н.С. Фосфолипиды растительных масел / Н.С. Арутюнян, Е.П. Корнена. М.: Агропромиздат, 1986. - 256 с.

124. Рудаков, О.Б. ВЭЖХ цветообразующих компонентов фотоматериалов / О.Б. Рудаков // Проблемы химии и химической технологии, 3-я регион, конф. Воронеж, 28-30 сен. 1995 г.: Тез. докл. Воронеж, 1995. - С. 232-233.

125. Органические растворители. Физические свойства и методы очистки / А. Вайсбергер, Э. Проскауэр, Дж. Риддик, Э. Тупс. М. : Из-во иностранной литературы, 1958. - 518 с.

126. Скурихин, В.Н. Методы анализа витаминов А, Е, D и каротина в кормах, биологических объектах и продуктах животноводства / В.Н. Скурихин, С.Б. Шабеев. М.: Химия, 1996. - 96 с.

127. Идентификация органических соединений / Р. Шрайнер, Р.Фьюзон, Д. Кертин, Т. Моррилл. М. : Мир, 1983, - 704 с.

128. Углянская, В.А. Инфракрасная спектроскопия ионообменных материалов / В.А. Углянская, Г.А. Чикин, В.Ф. Селеменев, Т.А. Завьялова. Инфракрасная спектроскопия ионообменных материалов. Воронеж : Из-во ВорГУ, 1989.-208 с.

129. Эмме, Ф. Диэлектрические измерения / Ф. Эме. М. : Химия, 1967. — 223 с.

130. Бретшнайдер, С. Свойства газов и жидкостей. Инженерные методы расчета / С. Бретшнайдер. — М.: Химия, 1966. 536 с.

131. Электрофорез фосфолипидной добавки / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский, Л.Э. Глаголева, Т.А. Железная // Молочная промышленность. 2003. - № 2. -С. 48.

132. Парофазное определение микропримесей тетрахлорметана, хлороформа, толуола и хлорбензола в сточных водах химического производства / О.Б. Рудаков, Е.А. Дубко, Г.С. Степанова, В.И. Баутин // Журн. аналитич. химии. -1995.-Т. 50, №11.-С. 1196-1198.

133. ГОСТ Р 51483-99. Масла растительные и жиры животные. Определение методом газовой хроматографии массовой доли метиловых эфиров индивидуальных жирных кислот к их сумме. М.: ИПК Изд-во стандартов, 2000. 7 с.

134. Сорбполимер Материалы и оборудование для тонкослойной хроматографии. - (http://www.sorbfil.com).

135. SigmaPlot graphing software, graphs, 3-D graphs, 2-D graphs. -(http://www.spss.com/software/science/sigmaplot).

136. Персон, P. Microsoft Excel 97 в подлиннике / P. Персон. С.-П. : BHV -Санкт-Петербург, 1997.-Т. 1,2. 1312 с.

137. Кузьмин, В. Microsoft Office Excel 2003. Учебный курс / В.Кузьмин. -С.-Пб.: Питер, 2004. 492 с.

138. Куправа, Т. A. Excel. Практическое руководство / Т. А. Куправа. М. : Диалог-МИФИ, 2003.-240 с.

139. StatSoft Russia Статистическое ПО. - (http://www.statsoft.ru/home /default, htm)

140. Боровиков, В.П. Популярное введение в программу Statistica / В.П. Боровиков. М. : КомпьютерПресс, 1998. — 267с.

141. Боровиков, В.П. Statistica. Статистический анализ и обработка данных в среде Windows / В.П., В.П. Боровиков, И.П. Боровиков. — М.: Информационно -издательский дом "Филинъ", 1997. — 608 с.

142. Боровиков, В.П. Statistica. Искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов / В.П. Боровиков. С.-Пб.: Питер, 2001. — 656 с.

143. Жулин, В.М. Расчет объемов активации термических превращений три-метилсилил(кумил)пероксида методом сплайн-аппроксимации / В.М. Жулин, О.Б. Рудаков, B.J1. Антоновский // Журн. физич. химии. — 2004. — Т. 78, № 7. -С. 1270-1274.

144. Курицкий, Б.Я. Поиск оптимальных решений средствами Excel 7.0 / Б .Я. Курицкий. СПб. : BHV-Санкт-Петербург, 1997. - 384 с.

145. Померанцев, АЛ. Компьютерная система FITTER для регрессионного анализа данных. Учебное пособие / A.JI. Померанцев, О.Е. Родионова. — М. : Изд-во ИХФ РАН, 2001. 31 с.

146. Lab Exercises Using HyperChem. (http://www.hyper.com/news/press/ lab-book.html).

147. Optimization using Excel Solver Frontline Systems. - (http://www. front-sys.com).

148. Фиалков, Ю.Я. Растворитель как средство управления химическим процессом / Ю.Я. Фиалков. JI. : Химия, 1990. - 240 с.

149. Крестов, Г.А. Физико-химические свойства бинарных растворителей : Справ, изд. / Г.А. Крестов, В.Н. Афанасьев, JI.C. Ефремова. — JI. : Химия, 1988.-688 с.

150. Фиалков, Ю.Я. Двойные жидкие системы / Ю.Я. Фиалков. — Киев : Тех-шка, 1969.-220 с.

151. Рудаков, О.Б. Плотность бинарных подвижных фаз / О.Б. Рудаков, М.И. Соколов, JI.B. Рудакова // Журн. физич. химии. 1999. - Т. 73, № 7. — С. 1303-1306.

152. Техническая энциклопедия. Справочник физико-химических и технологических величин. -М.: ОТС, 1933. Т. 10. -414 с.

153. Физическая химия. Теоретическое и практическое руководство / Под ред. Б.П. Никольского. JI. : Химия, 1987. - 880 с.

154. Рудаков, О.Б. Вязкость бинарных подвижных фаз для высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, М.И. Соколов, В.Ф. Селеменев // Журн. физич. химии. 1999. - Т. 73, № 9. - С. 1641-1644.

155. Иоффе, Б.В. Рефрактометрические методы химии / Б.В. Иоффе. JL : Химия, 1983.-352 с.

156. Рейтинг растворителей для ВЭЖХ с рефрактометрическим детектированием / О.Б. Рудаков, В.В. Хрипушин, В.Ф. Селеменев, О.Н. Бочарова, JI.B.

157. Рудакова, Н.В. Дроздова // Теория и практика сорбционных процессов. — Воронеж : Изд-во ВорГУ, 1998. Вып. 24. - С. 82-85.

158. Рудаков, О.Б. Показатель преломления бинарных подвижных фаз для высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селе-менев // Журн. физич. химии. 1999. - Т. 73, № 12. - С. 2242-2245.

159. Openhaim, G. Temperature-dependent refractive index issues using a UV— visible detector in high-performance liquid chromatography / G. Openhaim, E. Grushka // J. of Chromatogr. A. 2002. - N. 942. - P. 63-71.

160. HPLC Detection: Newer Methods / Ed. G. Patonay. NY, USA: VCH, 1992. -236 p.

161. A Practical Guide to HPLC Detection / Ed. D. Parriott. San Diego, CA, USA: Academic Press, 1993. - 293 p.

162. Scott, R.P.W. Chromatography Detectors / R.P.W. Scott. New York. : M. Dekker Inc., 1997. - 536 p.

163. Рудаков, О.Б. Ультрафиолетовое поглощение бинарных подвижных фаз для ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, В.В. Коновалов, Л.В. Рудакова // Всерос. конф. "Химический анализ веществ и материалов", Москва, 16-12 апр. 2000 г.: Тез. докл. М., 2000. - С. 289-290.

164. Коновалов, В.В. Оптическая плотность бинарных подвижных фаз для нормально-фазовой жидкостной хроматографии / В.В. Коновалов, А.В. Калач, О.Б. Рудаков // Теория и практика сорбционных процессов. Воронеж : ВГУ, 2000. - Вып. 26. - С. 244-250.

165. Сольватохромия: Проблемы и методы / Под ред. Н.Г. Бахшиева. Л. : ЛГУ, 1989. - 320 с.

166. Казицина, JI.А. Применение УФ-, ИК- и ЯМР-спектроскопии в органической химии / Л.А. Казицина, Н.Б. Куплетская. М. : Высшая школа, 1971.- 264 с.

167. Trappe, W. Separation of biological fats from natural mixtures by means of absorbtion columns. I. The eluotropic series of solvents / W. Trappe // Biochem. Z.- 1940. V. 305.-P. 150-159.

168. Энтелис, С.Г. Реакционноспособные олигомеры i С.Г. Энтелис, В.В. Ев-реинов, А.И Кузаев. М.: Химия, 1985. — 304 с.

169. Рудаков, О.Б. Элюирующая способность бинарных подвижных фаз в нормально-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков, И.П. Седишев, Л.В. Рудакова // Конденсированные среды и межфазные границы. 2003. - Т. 5, № 3. - С. 311-317.

170. Рудаков, О.Б. Описание элюирующей способности бинарных подвижных фаз в нормально-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б.Рудаков // Журн. физич. химии. 2004. - Т. 78, № 9. - С. 16741677.

171. Влияние состава на элюирующую способность бинарных подвижных фаз в нормально-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков И Журн. физич. хим. 2003. - Т. 77, № 12. - С. 2230-2235.

172. Сахартова, О.В. Сравнительные расчеты удерживания в хроматографии производных циклопентанона на силикагеле / О.В. Сахартова, В.Д. Шатц // Журн. аналитич. химии. 1985. - Т. 40, № 5. - С. 872-880.

173. Рудаков, О.Б. Жидкостно-адсорбционная хроматография высокогидрофобных орто-замещенных фенолов / О.Б. Рудаков // Конденсированные среды и межфазные границы. 1999. — Т. 1, № 4. — С. 308-314.

174. Bosch, Е. Relationships between Ет Polarity and Composition in Binary Solvent Mixtures / E. Bosch, M. Roses // J. Chem. Soc. Faraday Trans. 1992. - V. 88, N. 24.-P. 3541-3546.

175. Prediction of the retention in reversed-phase liquid chromatography using solute-mobile phase-stationary phase polarity parameters / J.R. Torres-Lapasio, M.C. Garca-Alvarez-Coque, M. Roses, E. Bosch // J. Chrom. A. 2002. - N. 955. -P. 19-34.

176. Bosch, E. Linear description of solute retention in reversed-phase liquid chromatography by a new mobile phase polarity parameter / E. Bosch, P. Bou, M. Roses // Analytica Chimica Acta. 1994. - N. 299. - P. 219-229.

177. Коган, В.Б. Равновесие между жидкостью и паром. Справ, пособие / В.Б. Коган, В.М. Фридман, В.В. Кафаров. M.-JI. : Наука, 1966. - Кн. 1, 2. - 1426 с.

178. Огородников, С.К. Азеотропные смеси. Справочник / С.К. Огородников, Т.М. Лестева. JI.: Химия, 1971. - 848 с.

179. Коган, Б.Г. Азеотропная и экстрактивная ректификация / Б.Г. Коган. JI. -.Химия, 1971.-315 с.

180. Рудаков, О.Б. Определение производных анилидов ароилуксусных кислот методом ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, О.А. Чистовская, Е.В. Кантарева // Методы анализа и контроля качества продукции, НИИТЭХИМ. 1991. - № 4. -С. 19-21.

181. Рудаков, О.Б. Определение производных пиразолона методом ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, JI.B. Дулуба, О.А. Чистовская // Методы анализа и контроля качества продукции, НИИТЭХИМ. 1991. -№ 8. - С. 4-5.

182. Рудаков, О.Б. Определение примесей в пурпурной цветообразующей компоненте на основе пиразолона методом ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, JI.B. Дулуба, О.А. Чистовская // Методы анализа и контроля качества продукции, НИИТЭХИМ. 1991.-№8.-С. 6-7.

183. Подосенова, Н.Г. Особенности адсорбционной хроматографии фуллере-нов / Н.Г. Подосенова // Журн. физич. химии. — 1996. — Т. 70, № 1. — С. 138142.

184. Бах, Р. Экспертная система для разработки методик высокоэффективной жидкостной хроматографии. В кн. Искусственный интеллект: применение в химии. Под ред. Т. Пирса и Б. Хони / Р. Бах, Дж. Карницки, С. Аббот . М. : Мир, 1988.-С. 309-325.

185. Сычев, С.Н. Влияние ассоциации полярной добавки в элюенте на удерживание замещенных фенолов в НФ ВЭЖХ / С.Н.Сычев // Сорбционные и хроматографические процессы. — 2004.— Т. 4, № 2. С. 144-151.

186. Онучак, JI.A. Физико-химические закономерности удерживания феноль-ных соединений в обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии / JI.A. Онучак, Р.А. Минахметов, В.А. Куркин // Журн. физич. химии. -2002.-Т. 76, №9.-С. 1691-1696.

187. Барам, Г. И. Групповое определение хлорфенолов в желчи рыб как тест на загрязнение водоема стоками предприятий целлюлозной промышленности / Г.И. Барам, И.И. Маринайте, С.В. Надобнов // Журн. физич. химии. -1991.-Т. 65, № 12.-С. 2867-2873.

188. Рудаков, О.Б. Общая модель описания параметров удерживания фенолов в нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ / О.Б. Рудаков // Хроматография и хроматографические приборы. Всерос. симп., М. , 14-18 мар. 2004 г. : Тез. докл. М. - 2004. - С. 81.

189. Рудаков, О.Б. Высокоэффективная жидкостная хроматография фенолов в полярной подвижной фазе на аминопропильном силикагеле // Журн. физич. химии. 2004. - Т. 78, № 11. - С. 2061-2067.

190. Бергельсон, Л.Д. Препаративная биохимия липидов / Л.Д. Бергельсон, Э.В. Дятловицкая, Ю.Г. Молотковский. М. : Наука, 1981. - 256 с.

191. Полянский, К.К. Изучение функциональности природных фосфолипидов в производстве молочных продуктов / К.К. Полянский, Л.Э. Глаголева, О.Б. Рудаков // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2002. — № 5. — С. 52.

192. Добавка «Витол» в молочных продуктах / К.К. Полянский, Л.Э. Глаголева, С.А. Железной, О.Б. Рудаков // Молочная промышленность. — 2001. — № 5.-С. 39-41.

193. Энергетические и спектральные характеристики Н-связей в фосфолипи-дах / В.Ф. Селеменев, Г.Ю. Орос, С.А. Железной, А.С. Шестаков, Т.А. Железная, Е.Ф. Сафонова, В.М. Болотов, О.Б. Рудаков // Журн. физич. химии. -2001. Т. 75, № 4. - С. 653-659.

194. Поглощение окрашенных веществ из ферментационных растворов лизина «сверхсшитым» полистирольным сорбентом / М.П. Цюрюпа, В.А. Да-ванков, Л.Г. Кривоносова, В.Ф. Селеменев, Г.А. Чикин // Прикладная биохимия и микробиология. 1985. - Т. 21. -№ 1. -С.72-77.

195. Препаративная жидкостная хроматография фосфолипидов / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев, Т.А. Железная и др. // Сорбционные и хроматографиче-ские процессы. 2002. - № 2. - С. 203-208.

196. Физико-химические основы фракционирования фосфолипидов семян подсолнечника / В.Ф. Селеменев, О.Б. Рудаков, В.М. Болотов, С.А. Железной, В.В. Коновалов, Е.Ф. Сафонова // Хранение и переработка сельхозсырья. -2000. — № 12.-С. 66-70.

197. Рудаков, О.Б. Фракционирование фосфолипидов на неионогенном сорбенте / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев // Масла и жиры. Инф. бюл. — 2003. № 6.-С. 1-3.

198. Разделение фосфолипидов на неионогенном сорбенте / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев, Т.А. Железная, Е.Ф. Сафонова // Хранение и переработка сельхозсырья. 2002. - № 7. - С. 18-19.

199. Davankov, V.A. Structure and properties of hypercrosslinked polystyrene — the first representative of a new class of polymer networks / V.A. Davankov and M.P. Tsyurupa // Reactive Polymers. 1990. - № 13. - P. 27-42.

200. Hypercrosslinked polystyrene as a novel type of high-performance liquid chromatography column packing material. Mechanisms of retention / V.A. Davankov, C.S. Sychov, M.M. Ilyin, K.O. Sochilina // J. Chromatography A, 2003. - V. 987. - P. 67-75.

201. Даванков, B.A. Применение сверхсшитых полистирольных сорбентов в высокоэффективной жидкостной хроматографии / В.А. Даванков, К.С. Сычев, М.М. Ильин // Заводская лаборатория. 2003. - Т.69. - №4 С. 3-7.

202. Соколов, М.И. Пламенно-ионизационный детектор для эксклюзионной хроматографии / М.И. Соколов, О.Б. Рудаков // Хроматография и хромато-графические приборы. Всерос. симп., М., 14-18 мар. 2004 г. : Тез. докл. М., -2004.-С. 178.

203. Соколов, М.И. Жидкостный хроматограф с пламенно-ионизационным детектором для эксклюзионной хроматографии / М.И. Соколов, О.Б. Рудаков

204. Сорбционные и хроматографические процессы. 2004, - Т. 4, № 3. — С. 348-352.

205. Количественная тонкослойная хроматография фосфолипидов / О.Б. Рудаков, В.В. Хрипушин, Е.Ф. Сафонова, Железная Т.А. // Сорбционные и хроматографические процессы. 2002. — № 2. — С. 209-212.

206. Количественный ТСХ-анализ фосфолипидов в отходах маслоэкстракци-онных заводов / О.Б. Рудаков, С.А. Железной, В.М. Болотов, А.С. и др. // Вестник Тамбовского Университета. Тамбов, 1999. - Т. 4, Вып. 2. - С. 264.

207. Физико-химические основы сорбционного выделения и разделения фосфолипидов / В.Ф. Селеменев, О.Б. Рудаков, Е.Ф. Сафонова, В.В. Коновалов //

208. Современное состояние и перспективы развития теории адсорбции, IX меж-дународн. конф., Москва, 24-28 апр. 2001 г.: Тез. докл. М., 2001. - С. 37.

209. Выделение и анализ фосфолипидов из отходов амарантового масла / Е.Ф. Сафонова, В.Ф. Селеменев, О.Б. Рудаков и др. // Проблемы химии и химической технологии : IX регион, конф., Воронеж, 23-25 мая 2001 г. : Мат. докл. -Тамбов, 2001.-С. 163-164.

210. Количественная тонкослойная хроматография фосфолипидов / О.Б. Рудаков, В.В. Хрипушин, Е.Ф. Сафонова, В.Ф. Селеменев // Сорбционные и хроматографические процессы. 2002. — № 2. — С. 209-212.

211. Количественная оценка фосфолипидов методом ТСХ / Е.Ф. Сафонова, А.И. Сливкин, В.Ф. Селеменев и др. // Человек и лекарство. X Национальный конгресс, Москва, 10-14 окт. 2003 г. : Тез. докл. М., 2003. — С. 751.

212. Количественная оценка фосфолипидов методом ВЭТСХ с использованием компьютерного сканирования / А.А. Назарова, Т.А. Корнева, Е.В. Ковалева и др. // Сорбционные и хроматографические процессы. — 2003. Т. 3, № 2.-С. 213-216.

213. Рудаков, О.Б. Фракционирование растительных фосфолипидов и строение их ионных форм / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев // Масла и жиры. Инф. бюл. 2003. - № 5. - С. 4-6.

214. Рудаков, О.Б. Растительные фосфолипиды в комбинированных продуктах питания / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский, Л.Э. Глаголева // Масла и жиры. Инф. бюл. 2003. - № 6. - С. 7.

215. Кирхнер, Ю. Тонкослойная хроматография / Ю. Кирхнер. — М. : Мир, 1981.-1139 с.

216. Хроматография в тонких слоях / Под ред. Э. Шталя. М. : Мир, 1965. -508 с.

217. Гидрофильные желтые каротиноидные красители / В.М. Болотов, О.Б. Рудаков, Н.А. Жеребцов, С.Н. Лесных // Экологический вестник Черноземья. Воронеж, 1996. - Вып. 2. - С. 49-50.

218. Рудаков, О.Б. Микроколоночная ВЭЖХ экстрактов растительных пигментов / О.Б. Рудаков, Н.А. Полухин, В.М. Болотов // Проблемы химии и химической технологии, 3-я регион, конф., Воронеж, 28-30 сен. 1995 г. : Тез. докл. Воронеж, 1995. - С. 230-231.

219. Рудаков, О.Б. ВЭЖХ натуральных и модифицированных растительных пигментов / О.Б. Рудаков, Н.А. Полухин, В.М. Болотов // Экологический вестник Черноземья. — Воронеж, 1996. — Вып. 2. — С. 46-49.

220. Болотов, В.М. Модифицированный каротиноидный краситель из моркови / В.М. Болотов, О.Б. Рудаков, С.Н. Лесных // Экология и безопасность жизнедеятельности : межвуз. сб. тр. Воронеж : Изд-во ВорГТА, 1996. -Вып. 1.-С. 65-66.

221. Болотов, В.М. Термоокисление Р-каротина в растворе / В.М. Болотов, О.Б. Рудаков, Е.В. Шершнева // Известия вузов. Пищевая технология. — 1997. -№4-5.-С. 21-23.

222. Болотов, В.М. Спектрофотометрия термоокисления каротина / В.М. Болотов, О.Б. Рудаков, Е.В. Шершнева // Экология и безопасность жизнедеятельности: межвуз. сб. тр. Воронеж : Изд-во ВорГТА, 1997. — Вып. 2. - С. 90-94.

223. Экспресс-анализ экстрактов каротиноидов из растительного сырья методом ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, В.М. Болотов, Е.В. Шершнева, М.И. Соколов, А.С. Шестаков // Вестник ВГТА. 1997. - № 2. - С. 56-59.

224. Рудаков, О.Б. Хроматографический способ идентификации натуральных и искусственных каротиноидов в пищевых продуктах / О.Б. Рудаков, В.М. Болотов // Хранение и переработка сельхозсырья. 1998. - № 5. — С. 26-27.

225. Рудаков, О.Б. Влияние различных факторов на кинетику термоокисления экстрактов каротиноидов из корнеплодов моркови / О.Б. Рудаков, Е.В.

226. Шершнева, В.М. Болотов // Известия вузов. Пищевая технология. 1998. — Вып. 4.-С. 41-43.

227. Спектрофотометрическое определение бета-каротина в комбинированных продуктах / О.Б. Рудаков, О.И. Долматова, А.Н. Пономарев, JI.B. Го-лубева, К.К. Полянский // Молочная промышленность. — 2001. — № 8. С. 4546.

228. Сохранность p-каротина в молоке цельном сгущенном с сахаром / К.К. Полянский, Л.В. Голубева, О.И. Долматова, О.Б. Рудаков // Молочная промышленность. 2000. — № 12. — С. 46.

229. Хроматографическое определение натуральных и искусственных каротиноидов в пищевых продуктах / О.Б. Рудаков, Л.И. Перикова, В.М. Болотов,

230. Г.А. Сташина // Вестник ВГУ. Сер. : Химия. Биология. Фармация. -2004. № 1.-С. 78-84.

231. Перикова, Л.И. Экспресс-определение каротиноидов в пищевых продуктах / Л.И. Перикова, О.Б. Рудаков, Г.А. Сташина // Масла и жиры Информ. бюл. 2004. - № 5. - С. 5-7.

232. Жидкостная хроматография растительных пигментов / О.Б. Рудаков, В.М. Болотов, А.Д. Хайрутдинова, Л.И. Перикова // Аналитика и аналитики. Международн. форум. Каталог рефератов и статей, 2-6 июня 2003 г., Воронеж.-Воронеж, 2003.-Т. 1.-С. 173.

233. Тетрагидрофуран — универсальный растворитель для жидкостной хроматографии /О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев, М.И. Соколов, Л.В. Рудакова // Вестник ВГУ. Сер.: Химия. Биология. Фармация. 2003. Вып. 2. - С. 56-65.

234. ИК-спектроскопическое исследование кето-енольной таутомерии орто-октадецилоксибензоилметилацетата / О.Б. Рудаков, А.Н. Гольцев, Ю.В. Кап-лин, И.А. Терновская, А.С. Лунев // Журн. прикладной спектроскопии. — 1991.-Т. 54, № 1.-С. 22-25.

235. Штерн, Э. Электронная адсорбционная спектроскопия в органической химии / Э. Штерн, К. Тиммонс. М. : Мир, 1976. - 263 с.

236. Темникова, Т.И. Курс теоретических основ органической химии. — Л.: Госхимиздат, 1962. — 540 с.

237. Mori, S. Size-Exclusion Chromatography / S. Mori, H.G. Barth. Heidelberg, Germany: Springer, 1999. - 234 p.

238. Column Handbook for Size-Exclusion Chromatography / Ed. C.-S. Wu. San Diego, CA, USA: Academic Press, 1999. - 637 p.

239. Беленький, Б.Г. Водная высокоэффективная эксклюзионная жидкостная хроматография биополимеров, ее проблемы и перспективы / Б.Г. Беленький, В.Г. Мальцев // В кн. : Прикладная хроматография. М. : Наука, 1984. — С. 54-64.

240. Merken, Н. М. Liquid chromatographic method for the separation and quantification of prominent flavonoid aglycones / H.M. Merken, G.R Beecher // J. Chromatogr. A. 2000, - V. 897. - P. 177.

241. Возможности хроматографии молока / О.Б. Рудаков, М.И. Соколов, В.А. Белоглазов, А.Ф. Клинских // Молочная промышленность. — 1999. — № 9. — С. 39-40.

242. Гель-проникающая хроматография смесей олиго-, ди- и моносахаридов / О.Б. Рудаков, М.И. Соколов, С.Ю. Болдырев, А.С. Шестаков // Известия вузов. Пищевая технология. — 1999. Вып. 5-6. - С. 92-94.

243. Эксклюзионная хроматография как метод контроля за свежестью молока / О.Б. Рудаков, М.И. Соколов, О.И. Долматова, К.К. Полянский // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2001. — № 3. С. 50-51.

244. Рудаков, О.Б. Практические аспекты жидкостной хроматографии углеводов / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский, А.И. Сливкин // Теория и практика сорбционных процессов. Воронеж : ВГУ, 1999. - № 25. — С. 201-208.

245. Физико-химические основы сорбционных и мембранных методов выделения и разделения аминокислот / В.Ф. Селеменев, В.Ю. Хохлов, О.В. Боб-решова и др. — Воронеж : Изд-во Воронеж, ун-та, 2001. — 300 с.

246. Матвеева, М.В. Равновесие и кинетика сорбции нейтральных и основных аминокислот амфолитом АНКВ-35 / М.В. Матвеева, С.И. Карпов, О.Б. Рудаков // Теория и практика сорбционных процессов. — Воронеж : Изд-во Воронеж, ун-та, 1998. Вып. 23. - С. 172-176.

247. Углеводная фракция продуктов на основе топинамбура / Н.С. Родионова, М.И. Соколов, О.Б. Рудаков и др. // Молочная промышленность. — 1999. — № 10.-С. 29-30.

248. Рудаков, О.Б. Современная жидкостная хроматография углеводов / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский // Молочная промышленность. 1999. — № 4. — С. 25-27.

249. Rudakov, О.В. Chemical Modification of the Food Natural Dyes from Vegetative Row / O.B. Rudakov, V.M. Bolotov // Material Ernahrungs forschung. -2000. V. 45, № 8. - S. 187-188.

250. Гель-проникающая хроматография смесей олиго-, ди- и моносахаридов / М.И. Соколов, С.Ю. Болдырев, А.С. Шестаков, О.Б. Рудаков // Известия вузов. Пищевая технология. — 1999. Вып. 5-6. - С. 92-94.

251. Хроматографический контроль изменения нутриентов молочных консервов в процессе хранения / О.Б. Рудаков, JI.B. Голубева, А.Н. Пономарев и др. // Хранение и переработка сельхозсырья. 2001. — №9. — С. 37-38.

252. Данковцев, А.В. Контроль за содержанием углеводов в квасном сусле методом ТСХ/А.В. Данковцев, О.Б. Рудаков, С.В. Востриков // Сорбционные и хроматографические процессы. — 2002. — № 4. — С. 442-444.

253. Микроколоночная ВЭЖХ водно-спиртовых экстрактов древесины дуба / И.В. Новикова, А.В. Данковцев, С.В. Востриков, О.Б. Рудаков // Сорбционные и хроматографические процессы. — 2003. — Т. 3, № 5. — С. 612-617.

254. Антоциановый краситель для мороженого / Л.Э. Глаголева, О.Б. Рудаков, В.В. Смирнова, К.К. Полянский // Молочная промышленность. 2003. -№5.-С. 58-59.

255. Определение методом тонкослойной хроматографии содержания углеводов в картофеле и овощах при влаготепловой обработке / А.Н. Остриков, Г.В. Калашников, О.Б. Рудаков и др. // Известия вузов. Пищевая технология. -2003. -№5-6.-С. 106-108.

256. Фракционный состав антоциановых красителей из растительных экстрактов и контроль над ними методом ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, А.Д. Хайрутдинова, А.П. Один, В.М. Болотов// Вестник ВГУ. Серия : Химия. Биология. Фармация. 2004. - № 1. - С. 85-93.

257. Контроль стевиозида высокоэффективной жидкостной хроматографией / О.Б. Рудаков, Н.Д. Верзилина, С. В. Фёдоров, К.К. Полянский // Молочная промышленность. 2004. № 7. - С. 54-55.

258. Лазарева, Е.Е. Косвенное спектрофотометрическое детектирование неэлектролитов в высокоэффективной жидкостной хроматографии / Е.Е. Лазарева, Г.Д. Брыкина, О.А. Шпигун // Журн. аналитич. химии. 1998. - Т. 53, № 3. - С. 230-238.

259. Leonardo peak sharer. - (http://ilch.vsmu.edu.ua/soft/leonardo/ leo-nardo.htm).

260. Романченко, С.В. Классификация математических моделей аналитических сигналов в форме пиков / С.В. Романченко, А.Г. Стромберг // Журн. аналитич. химии. 2000. - Т. 55, № 11. - С. 1144-1148.

261. Крусь, Г.Н. Методы исследования молока и молочных продуктов / Г.Н. Крусь, A.M. Шалыгина, З.В. Волокитина. М.: Колос, 2000. - 368 с.

262. Танчев, С.С. Антоцианы в плодах и овощах. — М. : Пищевая промышленность, 1980.-304 с.

263. Харламова, О.А., Кафка Б.В. Натуральные пищевые красители. М. : Наука, 1989.- 191 с.

264. Дейнека, В.И. Относительный анализ удерживания гликозидов циани-дина / В.И. Дейнека, A.M. Григорьев // Журн. физич. химии. 2004. — Т. 78. — № 5. - С.796-799.

265. Рудаков, О.Б. Экспертиза качества пищевых продуктов с использованием хроматографических методов // О.Б.Рудаков, К.К. Полянский // Питание для человека. Научно-практ. конф., Москва, 12-14 апр. 2004 г. : Тез. докл. — М., 2004.-С. 8-10.

266. Основы аналитической химии. Кн. 2. Методы химического анализа: Учеб. для вузов / Ю.А.Золотов, Е.Н. Дорохова, В.И. Фадеева и др. М. : Высшая школа, 2002. - 494 с.

267. Грановский, Ю.В. Успехи и проблемы хемометрии / Ю.В. Грановский // Вестник Моск. ун-та. Сер. 2, Химия. 1997. - Т. 38, № 4. - С. 211-217.

268. Калач, А.В. Искусственные нейронные сети — вчера, сегодня, завтра / А.В. Калач, Я.И. Коренман, С.И. Нифталиев. Воронеж. : Изд-во Воронеж, ун-та, 2002.-291 с.

269. Шараф, М.А. Хемометрика / М.А. Шараф, Д.Л. Иллмэн, Б.Р. Коваль-ски. Л. : Химия, 1989. - 270 с.

270. Expert system in chromatography. Results of the ESCA project / L. Buydens, P. Schoenmakers, F. Maris, H. Hindriks // Analytica chim. acta. 1993. - T. 272, N. l.-P. 41-51.

271. Искусственный интеллект: применение в химии / Под ред. Т. Пирса, Б. Хони. М.: Мир, 1988. - 430 с.

272. Эсбенсен, К. Анализ многомерных данных / К. Эсбенсен. Барнаул: Изд-во Алтайского ун-та, 2003. — 157 с.

273. Design and Analysis in Chemical Research / Ed. Roy Tranter. Sheffield : Analytical Chemistry, 2000. - 576 p.

274. Долгоносов, A.M. Сорбенты КАНК и программа IONCHROM как результаты фундаментальных исследований в хроматографии / A.M. Долгоносов, А.Г. Прудковский // Сорбционные и хроматографические процессы. — 2001. Т. 1. - № 6. - С. 927-935.

275. Jinno, К.А. Computer-Assisted Chromatography System / K.A. Jinno. — Heidelberg, Germany : Huethig, 1990. — 275 p.

276. Handbook of Process Chromatography : A Guide to Optimization, Scale Up and Validation / Eds. G.K. Sofer, L. Hagel. San Diego, CA, USA : Academic Press, 1997.-387 p.

277. Lu, P.C. HPLC and its Expert System / P.C. Lu, Y.K. Zhang, X.M. Liang. -Shenyang, P.R., China : Liaoning Press of Science and Technology, 1993. 654 p.

278. Computer-Assisted Method Development for HPLC / Eds. J.L. Glaich, L.R. Snyder. Amsterdam, The Netherlands : Elsevier, 1990, - 682 p.

279. Stout, R.W. High Performance Liquid Chromatographic Column Efficiency as a Function of Particle Composition and Geometry, and Capacity Factor / R.W. Stout, J.J. DeStefano, L.R. Snyder // J. Chromatogr. 1983. - V. 282. - P. 263270.

280. Stadalius, M.A. Optimization Model for the Gradient Elution Separation of * Peptide Mixtures by Reversed-Phase HPLC. Verification of Retention Relationships / M.A. Stadalius, H.S. Gold, L.R. Snyder // J. Chromatogr. 1984. - V. 296. -P. 31-38.

281. Snyder, L.R. Fast Method Development for Reversed-Phase HPLC. The Use of Computer Simulations / L.R. Snyder, J.W. Dolan, M.P. Rigney // LC and GC: Magazine of Liquid and Gas Chromatography. — 1986. N. 4. - P. 921-935.

282. Snyder, L.R. Selecting Column Conditions for Reversed-Phase HPLC Separation. II. Column Configuration and Column Evaluation / L.R. Snyder, P.E. Antle // LC Magazine. 1985. -N. 3. - P. 98-106.

283. Snyder, L.R. HPLC Computer Simulation. Optimizing Column Conditions / L.R. Snyder, J.W. Dolan // Am. Lab. 1986. - V. 18, N. 8. - P. 37-45.

284. Snyder, L.R. Computer Simulation in HPLC Method Development. Reducing the Error of Predicted Retention Times / L.R. Snyder, M.A. Quarry // J. Liq. Chromatogr. 1987. - V. 10. - P. 1789-1799.

285. Stadalius, M.A. Predicting Bandwidth in the HPLC Separation of Large Bio-molecules. A General Model for the Four Common HPLC Methods / M.A. Stadalius, B.F.D. Ghrist, L.R. Snyder // J. Chromatogr. 1987. - V. 387. - P. 21-29.

286. Dolan, J.W. DryLab Computer Simulation for HPLC Method Development. II. Gradient Elution / J.W. Dolan, D.C. Lommen, L.R. Snyder // J. Chromatogr. — 1989.-V. 485.-P. 91-112.

287. Computer-Aided Optimization of High-Performance Liquid Chromatography in the Pharmaceutical Industry / E.P. Lankmayr, W. Wegscheider, J.C. Gfeller, N.M. Djordjevic, B. Schreiber // J. Chromatogr. 1989. - V. 485. - P. 183-191.

288. Dolan, J.W. Integration of Computer-Aided Method Development Techniques in LC / J.W. Dolan, L.R. Snyder // J. Chromatogr. Sci. 1990. - V. 28. - P. 379385.

289. Gant, J.R. A Method Development System for Liquid Chromatography / J.R. Gant, F.L. Vandemark, A.F. Poile // Am. Lab. 1990. - V. 22, N. 8. - P. 15-21.

290. Dolan, J.W. Liquid Chromatography Expert Systems: A Modular Approach / J.W. Dolan, L.R. Snyder // Am. Lab. 1990. - V. 22, N. 8. - P. 50-55.

291. Markowski, W. Computer Simulation for Optimization of HPLC of Some Phenolic Pollutants / W. Markowski, Т.Н. Dzido, E. Soczewinski // J. Chromatogr. 1990. — V. 523.-P. 81-89.

292. Dolan, J.W. High-Performance Liquid Chromatographic Computer Simulation Based on a Restricted Multiparameter Approach. I. Theory and Verification /

293. J.W. Dolan, D.C. Lommen, L.R. Snyder // J. Chromatogr. 1990. - V. 535. - P. 55-69.

294. Mellish, N.G. Computer-Assisted HPLC Method Development in a Pharmaceutical Laboratory / N.G. Mellish // LC and GC: Magazine of Liquid and Gas Chromatography. 1991. -N. 9. - P. 845-851.

295. Molnar, I. Fast Development of a Robust High-Performance Liquid Chromatographic Method for Ginkgo biloba based on Computer Simulation / I. Molnar, K.H. Gober, B. Christ // J. Chromatogr. 1991. - V. 550. - P. 39-45.

296. Dzido, Т.Н. Computer-Aided Optimization of High-Performance Liquid Chromatographic Analysis of Flavonoids from Some Species of the Genus Althaea / Т.Н. Dzido, E. Soczewinski, J. Gudej // J. Chromatogr. 1991. - V. 550. - P. 7177.

297. Software for Chromatographic Method Development / A. Drouen, J.W. Dolan, L.R. Snyder, A. Poile, P. Schoenmakers // LC and GC: Magazine of Liquid and Gas Chromatography. 1991. - N. 9. - P. 714-721.

298. Multiparameter Computer Simulation for HPLC Method Development / J.W. Dolan, J.A. Lewis, W.D. Raddatz, L.R. Snyder // Am. Lab. 1992. - V. 24, N. 3. -P. 40-45.

299. Molnar, I. Validation of Robust Chromatography Methods Using Computer-Assisted Method Development for Quality Control / I. Molnar // LC and GC Internal 1996.-V. 9,N. 12.-P. 800-811.

300. Dzido, Т.Н. Computer Optimization for RP-HPLC Separation of Some Nucleosides / Т.Н. Dzido, A. Sory // Chem. Anal. (Warsaw). 1996. - V. 41. - P. 113-117.

301. Selectivity Control in HPLC Method Development / L.R. Snyder, J.W. Dolan, I. Molnar, N.M. Djordjevic // LC and GC: Magazine of Liquid and Gas Chromatography. 1997. -V. 15, N. 2. -P. 136-145.

302. Molnar, I. Validation of Robust Chromatography Methods Using Computer-Assisted Method Development for Quality Control. II /1. Molnar // LC and GC Internal 1997. - V. 10. - P. 32-40.

303. Molnar, I. Reversed-Phase Gradient Elution : How to Get Better Results with Less Work /1. Molnar, L.R. Snyder, J.R. Dolan // LC&GC Intern. 1998. - N. 11. -P. 374-385.

304. Computer Simulation for the Simultaneous Optimization of Any Two Variables and Any Chromatographic Procedure / P. Haber, T. Baczek, R. Kaliszan, L.R. Snyder, J.W. Dolan, C.T. Wehr // J. Chromatogr. Sci. 2000. - V. 38. - P. 386-394.

305. Wennberg, T. Computer-Assisted Scale-Up from Analytical HPLC to Preparative MPLC for the Separation of Phenolic Compounds / T. Wennberg, J.P. Rauha, H. Vuorela // Chromatographia. 2001. - V. 53 (Suppl.). - P. S240-S245.

306. Molnar, I. Computerized design of separation strategies by reversed-phase liquid chromatography: development of DryLab software / I. Molnar // J. Chromatogr. A. — 2002. — V. 965.-P. 175-194.

307. Рудаков, О.Б. Количественные критерии выбора оптимальных растворителей для ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, JI.B. Рудакова, В.Ф. Селеменев // Теория ипрактика сорбционных процессов. Воронеж: Изд-во Воронеж, ун-та, 1998. -Вып. 23.-С. 251-258.

308. Рейтинг растворителей для микроколоночной ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, В.В. Хрипушин, В.Ф. Селеменев и др. // Теория и практика сорбционных процессов. Воронеж: Изд-во Воронеж, ун-та, 1999. — Вып. 24. - С. 45-47.

309. Рейтинг бинарных подвижных фаз для ВЭЖХ / О.Б. Рудаков, В.В. Хрипушин, О.Н. Бочарова, В.Ф. Селеменев // Всерос. Симп. по химии поверхности, адсорбции и хроматографии, Москва, 1999 г. : Тез. докл. — М., 1999. — С. 115.

310. ElueX 5. (http://www.compudrug.com/hplc.html).

311. Merk KGaA-Home.- (http://www.chromsword.com)

312. A program for automated HPLC method development / W.-D. Beinert, R. Jack, V. Eckert, S. Galushko, V. Tanchuk, I. Shishkina // American Laboratory News.-2001.-V. 33, N. 15.-P. 14-15.

313. Vollautomatische HPLC-Methodenentwicklung / W.-D. Beinert, V. Eckert, S. Galushko, V. Tanchuk, I. Shiskina // Labor Praxis. 2002. - V. 26, N. 2. - P. 1618.

314. ADS Limathon Ltd, Sheffild, UK - Developers of database solution. -(http://www.limathon.com).

315. Рудаков, О.Б. Качественная идентификация молочного жира по хрома-тографическим данным / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский, М.П. Алексюк // Журн. аналитич. химии. 2002. - Т. 57, № 12. - С. 1081-1088.

316. Рудаков, О.Б. Комплексный анализ жиров хроматографическими методами / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский // Масло. Сыр. Состояние, проблемы, перспективы развития. Материалы докладов научно-практ. конф., 14-16 окт. 2003 г., Углич. Углич, 2003. - С. 127-128.

317. Рудаков, О.Б. Анализ жирных кислот методом высокоэффективной жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков // Масла и жиры. Информ. бюл. -2003. — № 7. — С.4.

318. Хроматографические критерии натуральности молочного жира / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский, М.П. Алексюк, С.Ю. Никитина // Сорбционные и хроматографические процессы. — 2001. — Т. 1, № 6. С. 1065-1072.

319. Экспрессная хроматографическая идентификация молочного и растительных жиров / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский, С.Ю. Никитина, А.И. Боев // Сорбционные и хроматографические процессы. 2001. — Т. 1, № 5. - С. 893898.

320. Рудаков, О.Б. Хроматографическая идентификация растительных масел / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2001. -№ 10.-С. 37-40.

321. Рудаков, О.Б. Развитие метода интерпретации хроматограмм животных жиров / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский // Хранение и переработка сельхозсырья. 2001. - № 10. - С 40-42.

322. Рудаков, О.Б. Развитие метода интерпретации хроматограмм при идентификации растительных масел / О.Б. Рудаков // Химия растительного сырья. 2001. -№ 4. — С. 77-82.

323. Рудаков, О.Б. Проверка натуральности молочного жира по многокритериальной идентификационной зоне / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский // Сыроделие и маслоделие. 2002. - № 1. — С. 10-11.

324. Хроматографическая идентификация молочного жира по запаху / О.Б. Рудаков, А.И. Боев, С.Ю. Никитина, К.К. Полянский, О.В. Плотникова // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2002. — № 2. — С. 53-56.

325. Возможности пиролитической хроматографии в идентификации молочного жира / О.Б. Рудаков, А.И. Боев, С.Ю. Никитина, К.К. Полянский, О.В. Плотникова // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2002. № 3. — С. 4952.

326. Оценка качества натуральных и комбинированных жиров / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский, Т.В. Дубинина и др. // Сыроделие и маслоделие. 2002. - № 4.-С. 20-21.

327. Статистический подход в определении натуральности жиров по хрома-тографическим данным / О.Б. Рудаков, В.Ф. Селеменев, О.В. Плотникова и др. //Сорбционные и хроматографические процессы. — 2002. — Т. 2, № 3. С. 295-303.

328. Устройство для идентификации примесей в системах спиртового производства / С.Ю. Никитина, Н.А. Порохова, А.И. Боев, О.Б. Рудаков // Производство спирта и ликероводочных изделий. — 2002. — № 4. С. 32-33.

329. Рудаков, О.Б. Хроматография и хроматографические приборы сегодня / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский // Молочная промышленность. 2004. — № 4. — С. 38.

330. Полянский, К.К. Дифференциальный термический анализ пищевых жиров / К.К. Полянский, С.А. Снегирев, О.Б. Рудаков. М. : ДеЛи принт, 2004. -86 с.

331. Рудаков, О.Б. Сезонные и климатические колебания состава молочного жира / О.Б. Рудаков // Масла и жиры. Инф. бюл. 2003. — № 11. — С. 6-7.

332. Рудаков, О.Б. Алгоритм идентификации жиров по жирно-кислотному составу / О.Б. Рудаков // Масла и жиры. Инф. бюл. 2003. —№ 3. - С. 1-5.

333. Рудаков, О.Б. Рапсовое масло состав, свойства и применение / О.Б. Рудаков // Масла и жиры. Инф. бюл. - 2004. - № 2. - С. 1-2.

334. Рудаков, О.Б. Современные подходы в идентификации жиров / О.Б. Рудаков, К.К. Полянский // Растительные масла и продукты, получаемые на основе масел. I Конф., М., 4-5 нояб. 2003 г. : Материалы конф. М., 2003. — С. 7-10.

335. Любарь, А.В. Хроматографическое определение аутентичности жировых продуктов / А.В. Любарь, О.Б. Рудаков, К.К. Полянский // Хроматография и хроматографические приборы. Всерос. симп., М., 15-19 марта 2004 г. : Тез. докл. М., 2004. - С. 205.