Электроаналитические свойства производных антипирина и бенздиазепина тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.02 ВАК РФ

На правах рукописи

Башкатова Наталия Владимировна

Электроаналитические свойства производных антипирина и бенздиазепина

02 00 02 — аналитическая химия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Томск —2007

003061178

Работа выполнена на кафедре физической и аналитической химии Томского политехнического университета

НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ

доктор химических наук, профессор Карбаинов Юрий Александрович

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ доктор химических наук,

доцент Ковалева Светлана Владимировна

кандидат химических наук, с н с Джабарова Наиля Кашафовна

ВЕДУЩАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ

НИИ безопасности жизнедеятельности республики Башкортостан

Защита диссертации состоится 25 июня 2007 г в 16 30 на заседании диссертационного совета Д 212 269 04 при Томском политехническом университете по адресу 634050, г Томск, пр Ленина, 30

С диссертацией можно ознакомиться в научно-технической библиотеке Томского политехнического университета по адресу г Томск, ул Белинского, 53

Автореферат разослан «25» мая 2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета, канд хим наук, доцент

- I/ Гиндуллина 'Ц "Ь^Ч Татьяна Михайловна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одним из главных направлений развития современной электроаналитической химии является разработка эффективных методов исследования и анализа органических соединений Исследования в этом направлении имеют теоретическое и практическое значение для дальнейшего поиска наиболее эффективных путей осуществления аналитических определений данных веществ Электрохимические методы характеризуются высокой чувствительностью, точностью, экспрессностью, поэтому они находят все более широкое применение как для определения, так и для исследования свойств органических соединений, имеющих фармацевтическое значение, и создают разумную альтернативу традиционным хроматографическим методам анализа

Азотсодержащие гетероциклические соединения ряда антипиринов, бенздиазепинов и антигшриламидов зарекомендовали себя как эффективные болеутоляющие и психотропные средства, широко используемые в медицинской практике во всем мире Появляются новые препараты этого класса, к контролю их качества предъявляются все более серьезные требования Поэтому разработка новых чувствительных, доступных и удобных в работе методик их определения представляется актуальной задачей, от решения которой зависит эффективность и безопасность предлагаемых на рынке лекарственных препаратов Необходимо подчеркнуть при этом, что использование препаратов с антиоксидантными свойствами находит все более широкое применение в медицине в профилактических и лечебных целях при патологических состояниях свободнорадикалыюй природы

Цель работы: исследовать электроаналитические свойства производных антипиринов, бенздиазепинов и антипириламидов

В соответствии с этим в работе были поставлены следующие задачи 1. Исследовать электроаналитические свойства, рассмотреть влияние ряда факторов (природы фонового электролита, материала электрода) на потенциалы окисления и восстановления исследуемых веществ методом вольтамперометрии

2 Рассмотреть закономерности процессов окисления и восстановления указанных препаратов на твердых электродах. Рассчитать кинетические параметры этих процессов

3 Исследовать взаимосвязь между электрохимическими свойствами и квантово - химическими параметрами изучаемых веществ

4 Используя метод катодной вольтамперометрии и модельную реакцию электровосстановления кислорода, исследовать антиоксидантные свойства антипиринов, бенздиазепинов и анипириламидов для выяснения их роли в механизмах взаимодействия с кислородом и его активными радикалами

5 Разработать методику количественного химического определения антипириламида стеариновой кислоты как перспективного лекарственного препарата, используя метод вольтамперометрии

/

/

Научная новизна. Впервые рассмотрены теоретические закономерности обратимого процесса окисления и восстановления антипириламидов на твердых электродах для двух последовательных электрохимических реакций Предложен способ оценки коэффициентов диффузии и константы диффузионного тока указанных веществ.

Рассчитаны квантово - химические параметры исследуемых веществ Впервые выведены корреляционные уравнения между расчетными квантово-химическими параметрами и экспериментально полученными потенциалами окисления производных антипирина и антипириламида

Проведено определение антиоксидантной активности исследуемых веществ методом катодной вольтамперометрии в неводных средах

Практическая значимость.

Разработана методика количественного химического определения антипириламида стеариновой кислоты, как перспективного лекарственного препарата, используя метод вольтамперометрии

Проведено определение антиоксидантной активности исследуемых соединений в сравнении со стандартными антиоксидантами методом катодной вольтамперометрии в неводных средах

Предложен способ оценки потенциалов окисления органических соединений на основании расчетных квантово - химических параметров и выведенного корреляционного уравнения между ними

На защиту выносятся:

1 Способ количественного химического определения антипириламида стеариновой кислоты методом вольтамперометрии

2 Способ оценки потенциалов окисления органических соединений на основе их расчетных квантово - химических параметров

3 Результаты определения антиоксидантных свойств исследуемых соединений в сравнении со стандартными антиоксидантами методом катодной вольтамперометрии в неводных средах

4 Способ определения коэффициентов диффузии и константы диффузионного тока органических соединений для двух обратимых последовательных электрохимических реакций на твердых электродах

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы в период их выполнения докладывались на российских и международных конференциях и симпозиумах на Всероссийской научной конференции "Актуальные проблемы аналитической химии" (Москва, 2002), Региональной научно-практической конференции "Химия и технология лекарственных препаратов и полупродуктов" (Новокузнецк, 2002), 7th International Conference / Workshop on Pharmacy and Applied Physical Chemistry, (Innsbruck (Austria), 2003), V Всероссийской научной конференции "Экоаналитика-2003" (Санкт-Петербург, 2003), 15th International Symposium "Pharmaceutical and Biomedical Analysis" (Florence (Italy), 2004), 10th International Conference on

Electroanalysis (Galway (Ireland), 2004), VII Всероссийской научной конференции "Аналитика Сибири и Дальнего Востока" (Новосибирск, 2004)

По материалам диссертации опубликовано 5 статей и 7 тезисов докладов

Диссертация выполнена при поддержке гранта Минобразования РФ №А03-2 11-795 "Исследование связи между окислительной способностью и антиоксидантной активностью лекарственных препаратов" Объем и структура диссертации.

Диссертационная работа изложена на 168 страницах, содержит 36 таблиц, 35 рисунков и библиографию из 155 наименований Работа состоит из введения, шести глав, обсуждения результатов, выводов, списка литературы и приложений

Во введении раскрыта актуальность темы, определены цели и задачи исследования, сформулированы научная новизна и практическая значимость работы

В первой главе приведен литературный обзор, характеризующий возможности вольтамперометрии и квантово-химических расчетных методов в исследовании электрохимических и антиоксидантных свойств органических соединений

Во второй главе рассмотрены теоретические закономерности двух последовательных электрохимических реакций в вольтамперометрии для обратимого электродного процесса на твердых электродах, предложен способ оценки коэффициентов диффузии и константы диффузионного тока исследуемых веществ Исследованы зависимости между расчетными квантово - химическими и экспериментальными электрохимическими параметрами ряда производных карбазола и антипирина

В третьей главе описаны условия эксперимента, способы приготовления растворов и электродов, представлены данные об используемом оборудовании и объектах исследования

Четвертая глава посвящена исследованию электроаналитических свойств производных антипирина, бенздиазепина и антипириламида

В пятой главе представлены результаты определения антиоксидантной активности изучаемых соединений

В шестой главе разработана методика количественного химического определения антипириламида стеариновой кислоты, определены ее метрологические характеристики

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Исследования проводили на полярографе ПУ-1 с двухкоординатным самописцем ЛКД - 4 и вольтамперометрическом анализаторе ТА-2 в комплекте с ПК В работе использовали метод катодной и циклической вольтамперометрии

Вольтамперограммы исследуемых растворов регистрировали на стационарных электродах с линейной разверткой потенциала со скоростью 20 мВ/с. Для измерений использовали индикаторные ртутнопленочный (РПЭ) и

стеклоуглеродный (СУЭ) электроды В качестве электрода сравнения применяли хлоридсеребряный электрод Вспомогательным электродом служил стеклоуглеродный электрод

Квантово-химические расчеты конформаций молекул и зарядов на атомах в исследуемых соединениях проводили с помощью программного пакета HyperChem 6 02 фирмы HyperCube полуэмпирическим методом AMI

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Электрохимические свойства исследуемых веществ изучены методом циклической вольтамперометрии, полученные вольтамперограммы представлены на рис 1

Рис 1 Циклические вольтамперограммы на СУЭ в фоновом электролите 0 1 М N80104 в С2Н5ОН 1 - антипирина, 2 - хлорантипирина, 3 - бромантипирина, 4 - йодантипирина, 5 -аминоантипирина, 6 - антинириламида олеиновой кислоты (АПОК), 7 - антипириламида стеариновой кислоты (АПСК), 8 - антипириламида коричной кислоты (АПКК), 9 - 8,9-дихлорида антипириламида олеиновой кислоты (ДХАО), 10 - 8,9-гидроксихлорида антипириламида олеиновой кислоты (ГХАО), 11 - 8,9-метоксихлорида антипириламида олеиновой кислоты (МХАО), 12 - 8,9-метоксибромида антипириламида олеиновой кислоты (МБАО)

Как видно из рис 1, процесс окисления и восстановления антипирина и его галогенпроизводных имеет обратимый характер, легче всего окислению и восстановлению подвергается антипирин, затем йод-, бром- и хлор-производные, что хорошо согласуется с литературными данными

Форма циклических вольтамперных кривых и близость потенциалов анодных и катодных пиков, указывают на обратимость процесса окисления и восстановления аминоантипирина и антипириламидов Полученные вольтамперограммы позволяют сделать ряд предположений по механизму окисления и восстановления исследуемых соединений

1) наличие анодного пика при Е = +0 6 В у аминоантипирина связано с окислением амино-группы,

2) введение длинного кислотного остатка (олеиновой, стеариновой и коричной кислот) приводит к сдвигу потенциала окисления амидной группы до Е = +105-+1 13Вв АПОК, АПСК и АПКК согласно следующей схемы-

нм—к

- сн,

сн,-

I

РГ1

+

ж-

сн,-

I.

РЬ

3) наличие анодного пика при Е = +0 6 В у ДХАО, ГХАО, МХАО и МБАО также связано с окислением амино-группы, которому предшествует гидролиз амидной связи,

4) пики окисления в диапазоне потенциалов +1.2 - +1.4 В у всех изучаемых соединений, по-видимому, связаны с окислением антипиринового кольца согласно следующей схемы

СНз" ^ Р11

Поскольку процесс окисления и восстановления данных веществ имеет обратимый характер, рассмотрена схема обратимого электродного процесса для двух последовательных электрохимических реакций типа Е] - Е2 в циклической вольтамперометрии в условиях нестационарной диффузии на твердых электродах Рассмотрим схему электродного процесса, когда в результате электрохимической реакции одно соединение переходит в другое, которое, в свою очередь, являясь электрохимически активным, превращается в новое соединение

Л-П~ет^в-Пге\->М (1)

Сформулируем соответствующую краевую задачу для этого случая

дСА(х,0 51

= А

82Сл(х,0 Эх2

(2)

дСв(х,1) _ 0 Сн(х,1) ' ия

а/

дСиЩ)

= д

дх2

а/ " ал2

Для системы уравнений (2) и (3)

при / = 0, СА(х,0) = С°{, Св(х,0) = О при / > О И д: 00, Сл(00,/) -» С°

(4)

(5)

(6)

Кроме того

С1(х,0 С8л{х,!)

= ехр

ят

ехр

(-УК*)'

ЯГ

(7)

д

дСА(х,1)

дх

=-д

9Са(дг,/)

ах

(8)

Кроме того допускаем, что с погрешностью не более 5 % диффузионный поток вещества А у поверхности электрода пропорционален

дСА(х,1)

х=0

Д

а*

= *[С2-0 95С„(0,0]

(9)

где С, (О,/) и есть концентрация вещества А у поверхности электрода, моль/см или моль/мл

При решении краевой задачи получено следующее уравнение для предельного тока

0 95*^

Д

(10)

Это уравнение позволяет из экспериментальных данных зависимости 1преЛ = /(•Л') оценить значения константы диффузионного тока к и коэффициента диффузии вещества А Линейный характер данной зависимости можно рассматривать как доказательство механизма и диффузионного ограничения процесса

На рис 2 приведены графики зависимости /пргд = /(л/и>) на СУЭ для антипириламидов олеиновой, стеариновой и коричной кислот Из тангенса угла наклона полученных прямых по уравнению (10) определены значения коэффициентов диффузии В исследуемых веществ, представленные в табл 1 Для сравнения в табл 1 приведены значения коэффициентов диффузии Б, рассчитанные по уравнению Рендлса - Шевчика

= 0 44б2]'Ъ'С

г/Луй ЯГ

(П)

Константы диффузионного тока к определены по уравнению (10) из отрезка, отсекаемого зависимостью 1пргд = /(-УмО на оси ординат

I мкА

Рис 2 Зависимость тока окисления АГЮК (1), ЛПСК (2) и АПКК (3) от скорости развертки потенциала

Таблица 1

Коэффициенты диффузии и константы диффузионного тока антипириламидов (п = 5, Р = 0 95)

Название z-222 RT = 0058 /(£„-£,) £„-Г, D* 106, см2/с D 106, см2/с k 104, см/с

АПОК 1 0 55±0 03 0 90 0 81±0 07

АПСК 1 0 79±0 05 1 61 1 25±0 08

АПКК 1 1 49±0 09 2 07 1 37±0 06

Примечание D - коэффициенты диффузии, рассчитанные по уравнению (10), D -

коэффициенты диффузии, рассчитанные по уравнению Реидлса - Шевчика (11)

Для изучения зависимости между электрохимическими свойствами органических веществ и расчетными значениями квантово - химических параметров полуэмпирическим методом AMI для 73 производных карбазола определены разница теплот образования молекул и их катион - радикалов (АДН), энергии ВЗМО (ЕВЗмо)

На графике, представленном на рис 3, отображены значения потенциала полуволны окисления в зависимости от энергии ВЗМО для 73 производных карбазола

Рассмотрена зависимость потенциала полуволны окисления карбазолов от разности теплот образования субстрата и его катион - радикала, представленная на рис 4

Е,„,В 25

■ < ^^ я и

■ ЧЬ-^и * т^Ь * Т 1 . ■ ■

■ а ■

■ ■ .\ ■

Рис 3 Зависимость потенциала полуволны окисления от энергии ВЗМО для производных карбазола

25,

а ^ а и

■ ■ ■■ Лг ¿да1" г ■■

/ и

/ ■

ДА II, хкал/мопь

Рис 4 Зависимость потенциала полуволны окисления от разности теплот образования субстрата и его катион-радикала для производных карбазола

Анализ полученных результатов показывает, что существуют достаточно тесные взаимосвязи между исследуемыми параметрами в координатах Ет — Евзмо и Е1/2 — ДАН В табл 2 сведены несколько общих зависимостей Отдельно выделены фрагменты соединений с Ещ < 1 1 В, где наблюдается наиболее тесная связь

Таблица 2

Зависимость между величинами Е)я, энергиями ВЗМО и ААН производных карбазола по уравнениям Ею = а + Ьх + сх2

№ х = ДАН (ккал/моль) № х = Евзмо (эВ)

а Ь с 104 г а Ь с г

1 -4 161 0 0296 0 0 93 5 -5 18 -0 76 0 0 85

2 -18 378 0 1867 -4 333 0 96 6 -31 94 -7 05 -0 371 0 90

3 -6 59 0 0435 0 0 97 7 -9 77 -1 312 0 0 85

4 -18 63 0 187 -4 281 0 97 8 -55 50 -12 767 -0 717 0 86

Примечание уравнения 1,2,5 и 6 для полной выборки соединений «1» - «73», уравнения 3,4, 7 и 8 для соединений с значениями С1/2 < 1 1 В (17 точек)

Данные табл 2 показывают, 'что существенно лучшие корреляции наблюдаются между Ею и разницей теплот образования карбазолов и соответствующих им катион-радикалов ААН, нежели между Ею и энергиями ВЗМО карбазолов Таким образом, изменение энтальпий при переходе от субстрата к его катион-радикалу Б"1" более адекватно отражает влияние структуры субстрата на процесс электрохимического окисления, нежели оценка энергии ВЗМО одного субстрата Кроме того, само наличие достоверных корреляций с ААН указывает, по-видимому, на обратимость рассматриваемой стадии электрохимического окисления (без учета дальнейших превращений катион-радикалов в последующих стадиях)

Кроме карбазолов предложенная модель использована для описания ряда производных антипирина С этой целью проведены квантово-химические расчеты антипирина, его галогенпроизводных, антипириламидов и соответствующих им катион-радикалов Для всех веществ вычислены значения разницы теплот образования самой молекулы и ее катион-радикала ААН На основе выведенного корреляционного уравнения 1 (табл 2) рассчитаны значения потенциалов окисления производных антипириламида, которые представлены в табл 3

Данные табл 3 показывают, что расчетные величины потенциалов окисления удовлетворительно совпадают с их экспериментальными значениями Это подтверждает возможность практического использования уравнения 1 (табл 2) для приближенной оценки величин окислительных потенциалов гетероциклических соединений иных классов, чем карбазолы

Таблица 3

Окислительные потенциалы и вычисленные ААН для антипирина и его производных

Название АДН, кДж/моль Ерасч» В Еэксп» В А, %

антипирин 766 0 1 26 +1 29±0 03 23

хлорантипирин 787 8 1 41 +1 39+0 05 1 4

бромантипирин 787 0 1 40 +1.39±0 04 07

йодантипирин 784 0 1.38 +1 31±0 03 5 3

АПОК 749 9 1 14 +1 13±0 03 09

АПСК 751 2 1 15 +1 05+0 03 95

АПКК 741 3 1 08 +1 05+0 03 29

ДХАО 745 1 1 11 +1 18±0 03 59

ГХАО 750 9 1 15 +1 18±0 03 25

МХАО 756 4 1 19 +1 18±0 03 08

МБАО 756 7 1 19 +1 18+0 03 0 8

Примечание Ерасч - потенциалы окисления, рассчитанные по уравнению 1 (табл 3)

В последнее время проводится широкий поиск и тестирование свойств и активности новых лекарственных средств природного и синтетического происхождения для коррекции антиоксидантного статуса организма

В этой связи сравнительное исследование оригинальных биологически активных соединений, синтезированных на основе антипирина или с использованием его производных, представляется перспективным направлением поиска новых высокоэффективных препаратов антиоксидантного действия.

В данной работе изучены антиоксидантные свойства как уже известных лекарственных препаратов группы антипиринов (например, йодантипирин), так и впервые синтезированных соединений этого класса, потенциально обладающих биологической активностью (производные антипириламида)

Для определения антиоксидантной активности использовался метод катодной вольтамперометрии

В данном способе рассматривается одноэлектронное восстановление кислорода с образованием активных кислородных радикалов, согласно следующей схемы

02+ё^±0'г' (12) 0~+Н+<±Н0-г (13) Н02 + Я+ + ё Н202 (14)

Соединение, имеющее восстановительную природу, реагирует с активными радикалами кислорода на поверхности рабочего электрода, что визуально отражается в уменьшении катодного тока одноэлектронного восстановления

кислорода на ртутно-пленочном электроде в области потенциалов от 0 до -0 8В относительно хлоридсеребряного электрода сравнения Степень уменьшения тока электровосстановления кислорода относительно концентрации антиоксидантов в растворе служит критерием оценки антиоксидантной активности образца (15)

/„ С

(15)

где 7,-ток ЭВ 02 в присутствии АО в растворе, мкА, /„-ток ЭВ 02 в отсутствии АО в растворе, мкА, С - концентрация АО в растворе, г/мл

Данный критерий отражает степень изменения концентрации кислорода и его активных радикалов в зависимости ог концентрации АО в растворе.

На рис 5 (на примере антипирина) представлены вольтамперограммы предельного тока ЭВ Ог в зависимости от концентрации АО в объеме раствора Аналогичные зависимости были получены для всего ряда исследуемых веществ

Было отмечено, что добавление антипирина и его галогенпроизводных приводит к уменьшению предельного тока ЭВ Ог (рис 5), что свидетельствует о проявлении данными веществами антиоксидантных свойств Для оценки АОА препаратов были построены зависимости относительного изменения

предельного тока ЭВ 02 (—) от их концентрации в объеме раствора По

тангенсу угла наклона полученных зависимостей определены коэффициенты антиоксидантной активности препаратов (К, мл/г) (15), которые приведены в табл 4

Таблица 4.

Коэффициенты антиоксидантной активности антипирина и его галогенпроизводных (п = 5, Р = 0 95)

0 8 -Е, В

Рис 5 Вольтамперограммы тока ЭВ Ог на РПЭ в фоновом электролите 0 1 М ЫаОО.) в С2Н5ОН в отсутствие (1) и присутствии антипирина 2 91 мг/мл (2) и 4 11 мг/мл (3)

Название К, мл/г

антипирин 18.9+1 2

С1-антипирин 20.2±1.3

Вг-антипирин 34 9±2 6

1-антипирин 36 4+2 7

Проведенные исследования антиоксидантных свойств антипирина и его галогенпроизводных показывают, что антиоксидантная активность в ряду галогензамещенных антипиринов увеличивается от С1- к 1-производному Аналогично изучены антиоксидантные свойства антипириламидов, а также исходных для их синтеза соединений, результаты представлены в табл 5

Данные табл 5 показывают, что коэффициент АОА аминоантипирина выше, чем у антипирина и его галогенпроизводных, это связано с наличием в его структуре ЫН2-группы, склонной к легкой отдаче протона - к окислению Однако по сравнению с синтезируемыми на его основе соединениями (антипириламидами) аминоантипирин проявляет не высокую АОА

Таблица 5

Коэффициенты антиоксидантной активности антипириламидов (п = 5, Р = 0 95)

Название К, мл/г

АПОК 755±28

АПСК 163+16

АПКК 162+10

ДХАО 791+5 9

ГХАО 418+4 7

МХАО 63 7+4 0

МБАО 63 3±3 9

аминоантипирин 41 2±2 6

олеиновая кислота 146+16

Ионол 495+37

Полученные результаты позволяют выделить из исследуемых соединений наиболее перспективные в плане фармацевтического применения Это, прежде всего, антипириламид олеиновой кислоты (АПОК), который показал высокую антиоксидантную активность по сравнению со стандартным антиоксидантом ионолом и может быть рекомендован в качестве лекарственного препарата антиоксидантной природы для лечения и профилактики ряда заболеваний, а также антипириламид стеариновой кислоты (АПСК) - известный как стампирин, имеющий применение в качестве противовоспалительного препарата

Данные по исследованию АОА АПОК методом катодной вольтамперометрии хорошо согласуются с результатами исследования биологической активности препарата in vivo Установлено, что АПОК повышает выживаемость мышей и оказывает защитное (хемопревентивное действие) при воздействии гепатотоксина - четыреххлористого углерода в токсических дозах LD50 четыреххлористого углерода повышается с 2,5 мл/кг (для интактных животных) до 4,0 мл/кг (для животных получавших

предобработку АПОК) - на 60 % А также АПОК оказывает выраженное и достоверное антимутагенное действие у мышей на фоне обработки циклофосфаном Судя по снижению количества эритроцитов с микроядрами АПОК при профилактическом введении (острый опыт и опыт с предобработкой) в дозе 100 мг/кг вызывает практически полное подавление мутагенеза вызываемого введением циклофосфана Полученные результаты подтверждают наличие у АПОК выраженных антирадикальных, радиопротекгорных и гепатозащитных свойств

Одним из главных направлений развития современной электроаналитической химии является разработка эффективных методов исследования и анализа Электрохимические методы определения и вольтамперометрия, в частности, характеризуются высокой чувствительностью, экспрессностью и простотой в аппаратурном оформлении Они успешно применяются для количественного химического определения веществ органической и неорганической природы

Лекарственные препараты в этом ряду имеют особое значение, т к от точности измерения их концентрации зависит и дозировка данных препаратов и их лечебное воздействие на организм

Полученные пики окисления исследуемых веществ можно использовать в качестве аналитических сигналов для разработки методик их количественного определения методом вольтамперометрии Антипириламид стеариновой кислоты (АПСК) известен как противовоспалительный препарат стампирин, прошел клинические испытания и допущен к применению До настоящего времени количественное определение АПСК проводили методом кислотно-основного титрования после предварительного гидролиза препарата Использование метода вольтамперометрии позволяет исключить длительную стадию пробоподготовки и повысить чувствительность количественного определения АПСК В связи с этим на основании полученных результатов была разработана методика количественного химического определения АПСК методом вольтамперометрии, определены ее метрологические характеристики, представленные в табл 6

Таблица 6

Диапазон измерений, значения показателей повторяемости и внутрилабораторной прецизионности методики при доверительной вероятности Р = 0 95

Диапазон измеряемых концентраций, С 105, моль/л Показатель повторяемости оу 10 , моль/л Показатель внутрилабораторной прецизионности, сгя 105, моль/л

От 1 42 до 33 30 включ. 0 15 0 26

Проверена правильность методики КХА антипириламида стеариновой кислоты методом «введено-найдено» (табл 7)

Таблица 7

Результаты количественного определения антипириламида стеариновой кислоты в модельных растворах (п = 5, Р = 0 95)

Введено, С 105, моль/л Найдено, С-105, моль/л £,%

1 42 1 25+0 20 16

2 84 2 69±0 30 11

4 25 4 11+0 57 14

5 65 5 60+0 54 96

7 04 710+0 93 13

8 43 8 50±0 89 И

9 80 9 7±1 1 11

И 20 11 20+0 77 69

13 90 14 20±0 89 63

16 60 16 9+1 0 59

19 20 19 60±0 79 40

23 20 23 10+0 64 28

27 00 27 20±0 87 32

33 30 32 80±0 67 20

В настоящее время терапия с включением препаратов, обладающих антиоксидантными свойствами, находит все большее применение в лечении и профилактике ряда заболеваний В связи с этим в работе проведено исследование антиоксидантных свойств транквилизаторов 1,4-бенздиазепинового ряда - нозепама и ФБД-диона (рис 6). По нашим предположениям, нозепам и продукт его окисления ФБД-дион, имея в своей структуре N11- группу в 1,4-бенздиазепиновом остове, могли бы проявить антиоксидантные свойства

Рис 6 Структурные формулы представителей 1,4-бенздиазепинового ряда I-нозепам (7-хлор-1,3-дигидро-3-гидрокси-5-фенил-2Я-1,4-бенздиазепин-2-он), II - ФБД-дион (7-хлор-5-фенил-1 Я-1,4-бенздиазепин-2,3-дион)

Полученные результаты подтвердили наше предположение о наличии антиоксидантной активности данных веществ (рис 7, табл 8) Нозепам проявляет антиоксидантные свойства, сравнимые с таковыми ионола Как и

ожидалось, антиоксидантная активность ФБД-диона ниже, чем у нозепама, поскольку в его структуре нет гидроксильной группы, способной к легкой отдаче протона при взаимодейтвии с радикалами.

Таблица 8

Коэффициенты антиоксидантной активности препаратов (п = 5, Р = 0 95)

-Е, В

Рис 7 Вольтамперограммы тока ЭВ О2 на РПЭ в фоновом электролиге 0 1 М №СЮ.( в ДМСО в отсутствие (1) и присутствии нозепама 0 12 мг/мл (2) и 0 24 мг/мл (3)

Название К, мл/г

Нозепам 567±49

ФБД-дион 263±16

Ионол 495±37

Исследованы электрохимические свойства нозепама и продукта его окисления ФБД-диона Установлено, что нозепам не проявляет электрохимической активности в данных условиях эксперимента Для ФБД-диона наблюдается два необратимых пика восстановления при потенциалах Е = -0 6 В и Е = -1 05 В (рис 8)

02 04 06 08 10 12 _Е, В

Рис 8 Вольтамперограмма тока восстановления 7-хлор-5-фенил-Ш-1,4-бешдиазепин-2,3-диона (ФБД-диона) И на РПЭ в среде 0 1 М N30104 ДМСО

Наличие двух пиков восстановления у ФБД-диона возможно связано с лактам-лактимной таутомерией данного вещества в растворе (рис 9)

Рис 9 Лактам-лшсгимная таутомерия 7-хл0р-5-фенил-1Я-1,4-беиздиазепин-2,3-ДИ0на (ФБД-диона) в среде 0 1 М N80104 ДМСО

ВЫВОДЫ

1 Исследованы электроаналитические свойства производных антипирина, бенздиазепина, антипириламида Найдены потенциалы окисления и восстановления указанных веществ, показано наличие двух последовательных обратимых электрохимических реакций для производных антипириламида на твердых электродах

2 Рассмотрены закономерности окисления и восстановления антипириламидов на твердых электродах для двух последовательных электрохимических реакций Получено уравнение для тока на электрод Предложен способ расчета коэффициентов диффузии и констант диффузионного тока данных соединений

3 Проведен расчет квантово — химических параметров производных антипирина и карбазола энергии ВЗМО, разность теплот образования молекул и их катион — радикалов Получена корреляционная зависимость между расчетными квантово — химическими параметрами и экспериментальными значениями потенциалов окисления исследуемых веществ

4 Проведена оценка потенциалов окисления производных антипириламида на основании расчетных квантово - химических параметров и выведенного корреляционного уравнения между ними Показано удовлетворительное совпадение расчетных данных со значениями, полученными экспериментально

5 Исследованы антиоксидантные свойства производных антипирина, антипириламида, бенздиазепина, используя метод катодной вольтамперометрии и модельную реакцию электровосстановления кислорода в неводных средах

6 Разработана методика количественного химического определения антипириламида стеариновой кислоты в модельных растворах методом вольтамперометрии в диапазоне концентраций от 1 42 10" до 3 33 10"4 моль/л Рассчитаны значения показателей повторяемости и внутрилабораторной прецизионности методики

Основное содержание диссертации изложено в следующих публикациях:

1 Филимонов В Д, Карбаинов Ю А , Короткова Е.И, Башкатова Н В., Воловоденко А В Исследование связи между электрохимическими параметрами ряда производных карбазола и антипирина и их квантово-химическими характеристиками // Изв. вузов Химия и хим технология - 2002 - Т 45, № 3 -С 75-79

2 Карбаинов Ю А , Фофонова Т.М , Башкатова Н В , Куташова Е А Закономерности электродных процессов, контролируемых последующими химическими реакциями, в тонкопленочных системах в инверсионной вольтамперометрии // Изв вузов Химия и хим технология - 2002 - Т 45, № 3 -С 69-71

3. Башкатова Н В , Короткова Е И , Карбаинов Ю А Определение орто- и пара-положения йодтолуола методом вольтамперометрии // Тез докл Всероссийской научной конференции "Актуальные проблемы аналитической химии" Москва 2002 С 41-42

4 Башкатова Н В , Карбаинов Ю А , Короткова Е И , Тимощенко Л В Электрохимические характеристики ароматических йодпроизводных // Тез докл Региональной научно-практической конференции "Химия и технология лекарственных препаратов и полупродуктов". Новокузнецк. 2002 С 93-96

5 Карбаинов Ю А , Короткова Е И , Башкатова Н.В Физико-химические закономерности электродных процессов в инверсионной вольтамперометрии органических соединений с предшествующей реакцией протонизации // Изв вузов Химия и хим технология —2003 -Т46, №3 -С. 115-118

6 Bashkatova N V , Korotkova Е I, Karbainov Yu.A , Mamaeva E A , Bakibaev A A Investigation of antioxidant properties of pharmaceuticals by voltammetry // Book of abstr 7th International Conference / Workshop on Pharmacy and Applied Physical Chemistry Innsbruck 2003 PO 14

7 Короткова E И , Карбаинов IO A , Юсубов M С , Башкатова H В Исследование антиоксидантных свойств биологически-активных веществ методом вольтамперометрии // Тез докл V Всероссийской научной конференции "Экоаналитика-2003" Санкт-Петербург. 2003. С 230

8 Короткова Е И , Мамаева Е А , Башкатова Н В , Бакибаев А А. Электрохимическое определение антиоксидантных свойств 1,4-бенздиазепинов//Хим-фарм журн -2004 — Т 38,№3 -С 52-53

9 Bashkatova N V , Korotkova Е I, Karbainov Yu А , Yagovkin A Yu , Bakibaev A A Investigation of electrochemical and antioxidant properties of pharmaceuticals by voltammetry // Book of abstr 15th International Symposium "Pharmaceutical and Biomedical Analysis" Florence 2004 P. 101.

10 Bashkatova N V , Korotkova E I, Karbainov Yu A , Yagovkin A Yu, Bakibaev A A Investigation of electrochemical properties of antipynne derivatives

by voltammetry // Book of abstr 10th International Conference on Electroanalysis Galway 2004 P 167

11 Башкатова H В , Короткова E И, Яговкин А Ю, Бакибаев А А., Карбаинов Ю А Исследование электрохимических свойств антипириламида олеиновой кислоты и его производных // Тез докл. VII Всероссийской научной конференции "Аналитика Сибири и Дальнего Востока" Новосибирск 2004 С 88

12 Bashkatova N V , Korotkova ЕI, Karbainov Yu А, Yagovkin A Yu , Bakibaev A A. Electrochemical, quantum-chemical and antioxidant properties of antipynne and its derivatives// J Pharm Biomed Anal -2005 - V 37 - P 1143 — 1147

Автор считает своим долгом выразить искреннюю признательность научному консультанту - к х н , доценту кафедры ФАХ ХТФ ТПУ Коротковой Елене Ивановне за помощь при подготовке и написании диссертационной работы, а также д х н, зав кафедрой ОХОС ХТФ ТПУ профессору Филимонову В Д , магистранту кафедры ОХОС ХТФ ТПУ Воловоденко А В за помощь в проведении квантово-химических расчетов, д х н, зав кафедрой ФАХ ХТФ ТПУ профессору Бакибаеву А А , к х.н, докторанту кафедры ФАХ ХТФ ТПУ Яговкину А Ю за предоставление объектов исследования и плодотворное сотрудничество

Подписано к печати 24 05 07 Бумага офсетная Печать RISO Формат 60x84/16 Тираж 100 экз Заказ № 72-0507 Центр ризографии и копирования Ч/П Тисленко О В Св-во №14 263 от21 01 2002г,пр Ленина,41,оф №7а

УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Электрохимические свойства органических соединений.

1.1.1. Вольтамперометрия в исследовании свойств и анализе органических соединений.

1.1.2. Механизмы окисления и восстановления некоторых органических соединений.

1.2. Антиоксидантные свойства органических соединений.

1.2.1. Механизмы антиоксидантного воздействия на организм.

1.2.2. Антиоксидантные свойства некоторых лекарственных препаратов.

1.2.3. Методы определения антиоксидантной активности.

1.2.4. Механизмы взаимодействия антиоксидантов с кислородом и его активными радикалами в методе катодной вольтамперометрии.

1.3. Квантово-химические параметры органических соединений.

1.3.1. Квантово-химические расчетные методы.

1.3.2. Применение квантово-химических методов в исследовании свойств органических соединений.

ГЛАВА 2. ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Закономерности двух последовательных электрохимических реакций в вольтамперометрии для обратимого электродного процесса на твердых электродах.

2.2. Исследование взаимосвязи между квантово-химическими параметрами и электрохимическими свойствами ряда азотсодержащих гетероциклических соединений.

2.2.1. Исследование взаимосвязи между квантово-химическими параметрами и потенциалами окислении ряда карбазолов.

2.2.2. Исследование взаимосвязи между квантово-химическими параметрами и потенциалами окислении ряда антипиринов.

ГЛАВА 3. АППАРАТУРА И МЕТОДИКА ЭКСПЕРИМЕНТА.

3.1. Приборы, ячейки, электроды, растворы и реактивы.

3.2. Объекты исследования.

3.3. Методика эксперимента.

ГЛАВА 4. ЭЛЕКТРОАНАЛИТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ИССЛЕДУЕМЫХ ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ.

4.1. Электроаналитические свойства антипирина и его галогенпроизводных.

4.2. Электроаналитические свойства бенздиазепинов.

4.3. Электроаналитические свойства антипириламидов.

ГЛАВА 5. АНТИОКСИДАНТНЫЕ СВОЙСТВА ИССЛЕДУЕМЫХ ОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ.

5.1. Антиоксидантные свойства антипирина и его галогенпроизводных.

5.2. Антиоксидантные свойства бенздиазепинов.

5.3. Антиоксидантные свойства антипириламидов.

ГЛАВА 6. МЕТОДИКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ХИМИЧЕСКОГО

ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИПИРИЛАМИДА СТЕАРИНОВОЙ КИСЛОТЫ.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Актуальность темы. Одним из главных направлений развития современной электроаналитической химии является разработка эффективных методов исследования и анализа органических соединений. Исследования в этом направлении имеют теоретическое и практическое значение для дальнейшего поиска наиболее эффективных путей осуществления аналитических определений данных веществ. Электрохимические методы характеризуются высокой чувствительностью, точностью, экспрессностью, поэтому они находят все более широкое применение как для определения, так и для исследования свойств органических соединений, имеющих фармацевтическое значение, и создают разумную альтернативу традиционным хроматографическим методам анализа.

Азотсодержащие гетероциклические соединения ряда антипиринов, бенздиазепинов и антипириламидов зарекомендовали себя как эффективные болеутоляющие и психотропные средства, широко используемые в медицинской практике во всем мире. Появляются новые препараты этого класса, к контролю их качества предъявляются все более серьезные требования. Поэтому разработка новых чувствительных, доступных и удобных в работе методик их определения представляется актуальной задачей, от решения которой зависит эффективность и безопасность предлагаемых на рынке лекарственных препаратов. Необходимо подчеркнуть при этом, что использование препаратов с антиоксидантными свойствами находит все более широкое применение в медицине в профилактических и лечебных целях при патологических состояниях свободнорадикальной природы.

Цель работы: исследовать электроаналитические свойства производных антипиринов, бенздиазепинов и антипириламидов.

В соответствии с этим в работе были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать электроаналитические свойства, рассмотреть влияние ряда факторов (природы фонового электролита, материала электрода) на потенциалы окисления и восстановления исследуемых веществ методом вольтамперометрии.

2. Рассмотреть закономерности процессов окисления и восстановления указанных препаратов на твердых электродах. Рассчитать кинетические параметры этих процессов.

3. Исследовать взаимосвязь между электрохимическими свойствами и квантово - химическими параметрами изучаемых веществ.

4. Используя метод катодной вольтамперометрии и модельную реакцию электровосстановления кислорода, исследовать антиоксидантные свойства антипиринов, бенздиазепинов и анипириламидов для выяснения их роли в механизмах взаимодействия с кислородом и его активными радикалами.

5. Разработать методику количественного химического определения антипириламида стеариновой кислоты как перспективного лекарственного препарата, используя метод вольтамперометрии.

Научная новизна. Впервые рассмотрены теоретические закономерности обратимого процесса окисления и восстановления антипириламидов на твердых электродах для двух последовательных электрохимических реакций. Предложен способ оценки коэффициентов диффузии и константы диффузионного тока указанных веществ.

Рассчитаны квантово - химические параметры исследуемых веществ. Впервые выведены корреляционные уравнения между расчетными квантово-химическими параметрами и экспериментально полученными потенциалами окисления производных антипирина и антипириламида.

Проведено определение антиоксидантной активности исследуемых веществ методом катодной вольтамперометрии в неводных средах.

Практическая значимость. Разработана методика количественного химического определения антипириламида стеариновой кислоты, как перспективного лекарственного препарата, используя метод вольтамперометрии.

Проведено определение антиоксидантной активности исследуемых соединений в сравнении со стандартными антиоксидантами методом катодной вольтамперометрии в неводных средах.

Предложен способ оценки потенциалов окисления органических соединений на основании расчетных квантово - химических параметров и выведенного корреляционного уравнения между ними.

На защиту выносятся:

1. Способ количественного химического определения антипириламида стеариновой кислоты методом вольтамперометрии.

2. Способ оценки потенциалов окисления органических соединений на основе их расчетных квантово - химических параметров.

3. Результаты определения антиоксидантных свойств исследуемых соединений в сравнении со стандартными антиоксидантами методом катодной вольтамперометрии в неводных средах.

4. Способ определения коэффициентов диффузии и константы диффузионного тока органических соединений для двух обратимых последовательных электрохимических реакций на твердых электродах.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы в период их выполнения докладывались на российских и международных конференциях и симпозиумах: на Всероссийской научной конференции "Актуальные проблемы аналитической химии" (Москва, 2002); Региональной научно-практической конференции "Химия и технология лекарственных препаратов и полупродуктов" (Новокузнецк, 2002); 7th International Conference / Workshop on Pharmacy and Applied Physical Chemistry, (Innsbruck (Austria), 2003); V Всероссийской научной конференции "Экоаналитика-2003" (Санкт-Петербург, 2003); 15th International Symposium "Pharmaceutical and Biomedical Analysis" (Florence (Italy), 2004); 10th International Conference on Electroanalysis (Galway (Ireland), 2004); VII Всероссийской научной конференции "Аналитика Сибири и Дальнего Востока" (Новосибирск, 2004).

По материалам диссертации опубликовано 5 статей и 7 тезисов докладов.

Диссертация выполнена при поддержке гранта Минобразования РФ № АОЗ-2.11-795 "Исследование связи между окислительной способностью и антиоксидантной активностью лекарственных препаратов".

Объем и структура диссертации.

Диссертационная работа изложена на 168 страницах, содержит 36 таблиц, 35 рисунков и библиографию из 155 наименований. Работа состоит из введения, шести глав, обсуждения результатов, выводов, списка литературы и приложений.

ВЫВОДЫ

1. Исследованы электроаналитические свойства производных антипирина, бенздиазепина, антипириламида. Найдены потенциалы окисления и восстановления указанных веществ, показано наличие двух последовательных обратимых электрохимических реакций для производных антипириламида на твердых электродах.

2. Рассмотрены закономерности окисления и восстановления антипириламидов на твердых электродах для двух последовательных электрохимических реакций. Получено уравнение для тока на электрод. Предложен способ расчета коэффициентов диффузии и констант диффузионного тока данных соединений.

3. Проведен расчет квантово - химических параметров производных антипирина и карбазола: энергии ВЗМО, разность теплот образования молекул и их катион - радикалов. Получена корреляционная зависимость между расчетными квантово - химическими параметрами и экспериментальными значениями потенциалов окисления исследуемых веществ.

4. Проведена оценка потенциалов окисления производных антипириламида на основании расчетных квантово - химических параметров и выведенного корреляционного уравнения между ними. Показано удовлетворительное совпадение расчетных данных со значениями, полученными экспериментально.

5. Исследованы антиоксидантные свойства производных антипирина, антипириламида, бенздиазепина, используя метод катодной вольтамперометрии и модельную реакцию электровосстановления кислорода в неводных средах.

6. Разработана методика количественного химического определения антипириламида стеариновой кислоты в модельных растворах методом вольтамперометрии в диапазоне концентраций от 1.42-10"5 до 3.33-10"4 моль/л. Рассчитаны значения показателей повторяемости и внутрилабораторной прецизионности методики.

1. Манн Ч., Барнес К. Электрохимические реакции в неводных системах. -М.: Химия, 1974.-480 с.

2. Ион-радикалы в электродных процессах: Сб. статей / Под ред. Е.И. Хрущевой. М.: Наука, 1983. - 336 с.

3. Электродные процессы в растворах органических соединений: Учеб. пособие / Под ред. Б.Б. Дамаскина. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1985. -312 с.

4. Китаев Ю.П., Троепольская Т.В., Будников Г.К. Промежуточные продукты в электрохимических реакциях. М.:Наука, 1982. - 216 с.

5. Томилов А.П., Майрановский С.Г., Фиошин М.Я., Смирнов В.А. Электрохимия органических соединений. Д.: Химия, 1968. - 592 с.

6. Abou-Elenien G.M., Ismail N.A., El-Maghraby А.А., Al-abdallah G.M. Electrochemical studies on some pyrazole, oxadiazole and thiadiazole derivatives // Electroanalysis. 2001. - V. 13, № 12. - P. 1022 - 1029.

7. Andrieux C.P., Saveant J.M. Electrochemical cyclization: I. Formal kinetics for voltammetric studies (linear sweep, rotating disc, polarography) // J. Electroanal. Chem. 1974. -V. 53, № 2. - P. 165 - 186.

8. Tabakovic I., Trkovnik M., Galijas D. Electrochemical synthesis of heterocyclic compounds: Part V. Anodic synthesis of some N-heterocycles // J. Electroanal. Chem. 1978. - V. 86, № 1. - P. 241 - 244.

9. Abou-Elenien G.M. Redox characteristics of some substituted formazans in aqueous media // J. Electroanal. Chem. 1994. - V. 375, № 1 - 2. - P. 301 -305.

10. Ю.Чаузов B.A., Парчинский B.3., Синелыцикова E.B., Петросян В.А. Взаимодействие некоторых аренов и пиразолов в условиях бездиафрагменного электролиза в среде MeCN // Известия Академии наук. Серия химическая. -2001. №7. - С. 1215-1219.

11. Lennartz M., Steckhan E., Sadakane M. Electrochemical Oxidation of (R)-4-Hydroxy-2-pyrrolidone: A Key Building Block for Stereoselective N-Acyliminium Ion Coupling Reactions // Tetrahedron. 1999. - V. 55, №50.-P. 14407- 14420.

12. Moeller K.D. Synthetic applications of anodic electrochemistry // Tetrahedron. 2000. - V. 56, № 49. - P. 9527 - 9554.

13. Ланкин B.3., Вихерт A.M., Тихазе A.K. Роль перекисного окисления липидов в этиологии и патогенезе атеросклероза // Вопр. мед. химии. -1989. Т. 35, №3.-С. 18-24.

14. Панасенко О.М., Сергиенко В.И. Свободнорадикальная модификация липопротеинов крови и атеросклероз // Биол. мембраны. 1993. -Т. 10, №4.-С. 341 -382.

15. Esterbauer Н., Gebicki J., Puhl Н., Jurgens G. The role of lipid peroxidation and antioxidants in oxidative modification of LDL // Free Rad. Biol. Med. -1992. V. 13, № 4. - P. 341 - 390.

16. Hennig В., Chow C.K. Lipid peroxidation and endothelial cell injury: Implications in atherosclerosis. Review // Free Rad. Biol. Med. 1988. -V. 4,№2.-P. 99-105.

17. Меньшикова Е.Б., Зенков H.K., Сафина А.Ф. Окислительный стресс при ишемическом и реперфузионном повреждении миокарда // Успехи соврем, биологии. 1997. - № 3. - С. 362 - 373.

18. Flaherty J.T. Miocardial injury mediated by oxygen free radicals // Amer. J. Med. 1991. - V. 91. - P. 79 - 85.

19. Александровский Ю.А., Поюровский M.B., Незнамов Г.Г. Неврозы и перекисное окисление липидов. М.: Наука, 1991. - 144 с.

20. Adams J.D., Odunze I.N. Oxygen free radicals and Parkinson's disease // Free Rad. Biol. Med. 1991. - V. 10, № 2. - P. 161 - 169.

21. Lohr J.B., Browning J.A. Free radical involvement in neuropsychiatric illnesses // Psychophamacol. Bull. 1995. - V. 31. - P. 159 - 165.

22. Kumar К.W., Das U.M. Are free radicals involved in the pathobiology of human essential hypertension? // Free Rad. Res. Commun. 1993. - V. 19. -P. 59-66.

23. Taddei S., Magagna A., Virdis A., Salvetti A., Ghiadoni L. Cyclooxygenase is the main source of oxydative stress in essential hypertension // American Journal of Hypertension. 1998. - V. 11, № 41001. - 174 A.

24. Baynes J.W. Role of oxidative stress in development of complications in diabetes mellitus // Diabetes. 1991. - V. 40. - P. 405 - 412.

25. Ceriello A., Quatraro A., Caretta F. et al. Evidence for a possible role of oxygen free radicals in the abnormal functional arterial vasomotion in insulin dependent diabetes // Diabete. Metab. 1990. - V. 16. - P. 318 -322.

26. Эмануэль H.M. Физико-химия рака // Природа. 1982. - № 1. - С. 76 -83.

27. Witz G. Active oxygen species as factors in multistage carcinogenesis // Proc. Soc. Exp. Biol. 1991. - V. 198, № 7. - P. 675 - 682.

28. Sahu S.C. Role of oxygen free radicals in the molecular mechanisms of carcinogenesis: a review // Environ. Carcin. and Ecotoxicol. Rev. 1991. -V. 9, № l.-P. 83-112.

29. Wie H. Activation of oncogenes and or inactivation of anti-oncogenes by reactive oxygen species // Med. Hypotheses. 1992. - V. 39. - P. 267 -270.

30. Перекисное окисление и стресс / В.А. Барабой, И.И. Брехман, В.А. Голотин, Ю.Б. Кудряшов. С-Пб.: Наука, 1992. - 148 с.

31. Forest S.E., Stimson M.J., Simon J.D. Mechanism for the photochemical production of superoxide by quinacrine // J. Phys. Chem. 1999. - В 103. -P. 3963-3965.

32. Козлов Ю.П. Свободные радикалы и их роль в нормальных и патологических процессах. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1973. - 173 с.

33. Владимиров Ю.А., Азизова О.А., Деев А.И. и др. Свободные радикалы в живых системах // Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. 1991. -Т. 29, № 1.-С. 1 -252.

34. Свободнорадикальное окисление и старение / В.Х. Хавинсон, В.А. Баринов и др.; под ред. А.Д. Ноздрачева. СПб.: Наука, 2003. - 326 с.

35. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. - 252 с.

36. Зенков Н.К., Панкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс. Биохимический и патофизиологический аспекты. М.: МАИК «Наука/Интерпериодика», 2001. - 343 с.

37. Imlay J.A., Linn S. DNA damage and oxygen radical toxicity // Science. -1988.-V. 240.-P. 1302-1309.

38. Абрамова Ж.И., Оксенгендлер Г.И. Человек и противоокислительные вещества. Л.: Наука, 1985. - 230 с.

39. Ланкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н. Свободнорадикальные процессы в норме и при паталогических состояниях: Пособие для врачей. М.: Медицина, 2001. - 78 с.

40. Абдуллин И.Ф., Турова Е.Н., Будников Г.К. Органические антиоксиданты как объекты анализа // Заводская лаборатория. 2001. -Т. 67, №6.-С. 3-13.

41. Рогинский В.А. Фенольные антиоксиданты. Реакционная способность и эффективность. М.: Наука, 1988. - 247 с.

42. Нонхибел Д., Уолтон Дж. Химия свободных радикалов. Структура и механизм реакций. М.: Мир, 1977. - 606 с.

43. Ингольд К. Теоретические основы органической химии. М.: Мир, 1973.- 1055 с.

44. Розанцев Э.Г., Шолле В.Д. Органическая химия свободных радикалов. -М.: Химия, 1979.-334 с.

45. Денисов Е.Т. Циклические механизмы обрыва цепей в реакциях окисления органических соединений // Успехи химии. 1996. - Т. 65, № 6. - С. 547 - 563.

46. Кузьмин В.И., Лосев А.С., Морозов И.С., Павлова И.П. и др. Синтез и биологическая активность 2-фенилэтил-З-оксипиридинов // Хим.-фарм. журнал. 1993. - Т. 27, № 8. - С.19 - 24.

47. Смирнов Л.Д., Дюмаев К.Н. р-Оксипроизводные шестичленных азотистых гетероциклов, синтез, ингибирующая активность и биологические свойства (обзор) // Хим.-фарм. журнал. 1982. - Т. 16, №4.-С. 28-44.

48. Клебанов Г.И., Любицкий О.Б., Васильева О.В., Климов Ю.В., Пензулаева О.Б. и др. Антиоксидантные свойства производных 3-оксипиридина: мексидола, эмоксипина и проксипина // Вопросы медицинской химии. 2001. - Т. 47, № 3. - С. 288 - 300.

49. Пашин Е.Н., Шведова А.А. Влияние синтетического антиоксиданта эмоксипина на тонус коронарных сосудов // Фармакол. и токсикол. -1989.-№ 1.-С. 17-19.

50. Рудык Б.И., Сабадышин Р.А. Влияние эмоксипина на состояние перекисного окисления липидов у больных с хронической сердечной недостаточностью // Кардиология. 1991. - № 11. - С. 52 - 54.

51. Лазебник Л.Б., Фришберг A.M., Дроздов В.Н. Место антиоксиданта эмоксипина в комплексной терапии острого осложненного инфаркта миокарда // Кардиология. 1994. - Т.34, № 1 - 2. - С. 122 - 126.

52. Новиков В.Е., Маслова Н.Н. Влияние мексидола на течение посттравматической эпилепсии // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2003. - Т. 66, № 4. - С. 9 - 11.

53. Швед Н.И., Белозецкая-Смиян С.И. Коррекция эмоксипином нарушений перекисного окисления липидов у больных деформирующим остеоартрозом // Врач. дело. 1991. - №10. - С. 101 - 103.

54. Murase Н., Yamaochi R., Kato К., Kunieda Т., Terao J. Synthesis of a novel vitamin derivative, 2-(a-D-Glucopyranosyl)Methyl-2,5,7,8-TetramethylChroman-6-Ol by a-glucosidase-catalysed transglucosyglation // Lipids. 1997. -V. 32, № 1. -P. 73. - 78.

55. Kapoor S., Mucherjee Т., Kagiya T.V. and Nair C.K.K. Redox reactions of tocopherol monoglucoside aqua of solutions: a plus radiolysis studies // J. Radiat. Res. 2002. - V. 43, № 1. - P. 99-106.

56. Rajagopalan R., Wani K., Nuilgol N.G., Kagiya T.V. and Nair C.K.K. Inhibition of y-radiation indused DNA damage in plasmid pBR322 by TMG, water-soluble derivative of vitamin E // J. Radiat. Res. 2002. -V. 43, №2.-P. 153- 159.

57. Nair C.K.K., Rajagopalan R., Wani K., Huilgol N.G., Kagiya V.T., Kapoor S. Mechanism of radioprotection by TMG, water soluble vitamin E // J. Radiat. Res. 1999. - V.40, № 4 - P. 451.

58. Cheong N., Perrault A.R., Iliakis G. In vitro rejoining of DNA double strand breaks: a comparison of genomic-DNA with plasmid-DNA-based assay // Int. J. Radiat. Biol. 1998. - V.73, № 5 - P. 481 - 491.

59. Спасов A.A., Косолапов B.A., Островский O.B., Дрозд В.В., Верещагин В.К. и др. Противоишемические свойства нового антиоксидантногосредства эноксифола // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2003. - Т. 66, № 4. - С. 17 - 20.

60. Трещенкова Ю.А., Голощапов А.Н., Бурлакова Е.Б. Действие малых доз фенозана на биохимические свойства лактатдегидрогеназы и микровязкость мембран микросом мозга мышей // Радиационная биология. Радиоэкология. 2003. - Т. 43, № 3. - С. 320 - 323.

61. Ревазова Ю.А, Гуськова Т.А., Худолей В.В., Филов В.А. Изучение отдаленных эффектов олипифата // Экспериментальная онкология. -2003. Т. 25, № 4. - С. 256 - 259.

62. Средство для лечения и профилактики вирусного клещевого энцефалита, индуцированного в эксперименте: Патент РФ 2025126 / В.Е. Яворовская, А.С. Саратиков, Ю.В. Федоров и др. № 4116965/14; Заявл. 09.09.86; Опубл. 30.12.94. - Бюл. № 24. - С. 31.

63. Средство для профилактики и лечения клещевого энцефалита «Йодантипирин»: Патент РФ 2141826 / А.С. Саратиков, В.Е. Яворовская, Т.Г. Хоружая и др. № 97118775/14; Заявл. 12.11.97; Опубл. 27.11.99. - Бюл. № 33. - С. 116.

64. Противовирусное средство: Патент РФ 2190402 / В.И. Трубачев, С.К. Яблоков, О.Е. Рогачева. № 2001124875/14; Заявл. 12.09.2001; Опубл. 10.10.2002. - Бюл. № 28. - С. 202.

65. Средство для профилактики гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций: Патент РФ 2175548 / А.С. Саратиков, В.Е. Яворовская, А.В. Лепехин др. № 98107411/14; Заявл. 20.04.98; Опубл. 10.11.2001. - Бюл. № 31. - С. 298.

66. Гриценко Л.Н. Противовирусные и иммуномодулирующие свойства производных пиразолона и салицилатов при Коксаки ВЗ- вирусной инфекции: Автореф. дис. канд. мед. наук. Томск, 1990. - 24 с.

67. Быстрицкий Е.Л. Синтез N-галогенпроизводных гликолурила, их галогенирующая и окислительная способность в реакциях с производными антипирина и исследование свойств синтезированных соединений: Дис. .канд. хим. наук. Томск, 2003. - 129 с.

68. Halliwell В. Antioxidant characterization. Methodology and mechanism // Biochemical Pharmacology. 1995. - V. 49, № 10. - P. 1341 - 1348.

69. Antolovich M., Prenzler P.D., Patsalides E., McDonald S., Robards K. Methods for testing antioxidant activity // Analyst. 2002. - V. 127. -P. 183- 198.

70. Хасанов B.B., Рыжова ГЛ., Мальцева Е.В. Методы исследования антиоксидантов // Химия растительного сырья. 2004. - № 3. - С. 63 -75.

71. Храпова Н.Г. Определение антирадикальной активности веществ природного происхождения методом хемилюминесценции // Исследование синтетических и природных антиоксидантов in vitro и in vivo. М.: Наука, 1992. - 110 с.

72. Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В., Любицкий О.Б., Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А. Ингибирование сывороточными антиоксидантами окисления люминола в присутствии гемоглобина и пероксида водорода // Вопр. мед. химии. 1997. - Т. 43, № 2. - С. 87 - 92.

73. Навас М.Х., Хименец A.M., Асуэро А.Г. Определение восстановительной способности настоек семени канарского канареечника методом хемилюминесценции // Журн. аналит. химии. -2004.-Т. 59,№ 1.-С. 84-86.

74. Lissi E., Salim-Hanna M., Pascual C., Castillo M.D. Evaluation of total antioxidant potential (TRAP) and total antioxidant reactivity from luminol-enhanced chemiluminescence measurements // Free Rad. Biol. Med. 1995. -V. 18, № 2. - P. 153- 158.

75. Клебанов Г.И., Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В., Любицкий О.Б., Владимиров Ю.А. Антиоксидантная активность сыворотки крови // Вестник РАМН. 1999. - № 2. - С. 15 - 22.

76. Krasovska A., Rosiak D., Czkapiak К., Lukaszewicz М. Chemiluminescence detection of peroxyl radicals and comparison of antioxidant activity of phenolic compounds // Current topics in Biophysics. -2000.- V. 24.-P. 89-95.

77. Наумов B.B., Храпова Н.Г. Определение активности слабых антиоксидантов хемилюминесцентным методом // Кинетика и катализ. 1984. - Т. 25, № 3. - С. 563 - 570.

78. Xie W., Xu P., Liu Q. Antioxidant activity of water-soluble chitosan derivatives // Bioorganic & medicinal chemistry letters. 2001. - V. 11, № 13.-P. 1699-1701.

79. Papadopoulos K., Triantis Т., Dimotikali D., Nikokavouras J. Evaluation of food antioxidant activity by photostorage chemiluminescence // J. Anal. Chim. Acta. 2001. - V. 433, № 2. - P. 263 - 268.

80. Большакова И.В., Лозовская Е.Л., Сапежинский И.И. Антиоксидантные свойства ряда экстрактов лекарственных растений // Биофизика. 1997. - Т. 42, № 2. - С. 480 - 483.

81. Магин Д.В., Измайлов Д.Ю., Попов И.Н., Левин Г., Владимиров Ю.А. Фотохемилюминесценция как метод изучения антиоксидантной активности в биологических системах. Математическое моделирование // Вопросы медицинской химии. 2000. - Т. 46. - С. 65 -68.

82. Лозовская Е.Л., Сапежинский И.И. Сравнительная эффективность некоторых лекарственных препаратов как акцепторов супероксидных радикалов // Биофизика. 1993. - Т. 38, № 1. - С. 31 - 36.

83. Арзамасцев А.П., Шкарина Е.И., Максимова Т.В., Пахомов В.П. и др. Оценка показателей антиоксидантной активности препаратов на основе лекарственного растительного сырья. // Хим.-фарм. журн. -1999.-Т. 33,№ 11.-С. 17-20.

84. Шарипов Г.Л., Казаков В.П., Толстиков Г.А. Химия и хемилюминесценция 1,2-диоксикетанов. М.: Наука, 1990. - 288 с.

85. Беляков В.А., Васильев Р.Ф., Федорова Г.Ф. Хемилюминесценция при окислении непредельных органических соединений в растворах // Изв. АН СССР. Сер. Хим. 1983. - № 12. - С. 2709 - 2717.

86. Васильев Р.Ф., Наумов В.В., Федорова Г.Ф. Молекулярная хемилюминесценция липидов и ее влияние на определение активности антиоксидантов // Биоантиоксидант: Тез. докл. IV Межд. конф. 16-19 апреля 2002 г. Москва, 2002. - С. 73 - 74.

87. Цепалов В.Ф. Метод количественного анализа антиоксидантов с помощью модельной реакции инициированного окисления // Исследование синтетических и природных антиоксидантов in vitro и in vivo. М.: Наука, 1992. - 110 с.

88. Калинкина Г.И., Писарева С.И. Метод определения антиоксидантной активности растительных вводно-спиртовых экстрактов // Хим.-фарм. журн. 1992. - Т. 26, № 1. - С. 65 - 66.

89. Никитина B.C., Шендель Г.В., Герчиков А.Я., Ефименко Н.Б. Флавоноиды листьев малины и ежевики и их антиоксидантная активность // Хим.-фарм. журн. 2000. - Т. 34, № 11. - С. 25 - 27.

90. Ермилова Е.В., Кадырова Т.В., Краснов Е.А., Писарева С.И., Пынченков В.И. Антиокислительная активность экстрактов водяники черной // Хим.-фарм. журн. 2000. - Т. 34, № 11. - С. 28 - 30.

91. Дадали Ю.В., Дадали В.А., Макаров В.Г. Спектрофотометрический метод оценки антиоксидантной активности фитопрепаратов и натуральных продуктов // Биоантиоксидант: Тез. докл. IV Межд. конф. 16-19 апреля 2002 г. Москва, 2002. - С. 149 - 150.

92. Fogliano V., Verde V., Randazzo G., Ritieni A. Method for measuring antioxidant activity and its application to monitoring the antioxidant capacity of wines // J. Agric. Food Chem. 1999. - V. 47, № 3. - P. 1035 -1040.

93. Tubaro F., Micossi E., Ursini F. The antioxidant capacity of complex mixtures by kinetic analysis of crocin bleaching inhibition // J. Am. Oil Chem. Soc. -1996. -V. 73, № 3. P. 173 - 176.

94. Tubaro F., Ghiselli A., Rapuzzi P., Maiorino M., Ursini F. Analysis of plasma antioxidant capacity by competition kinetics // Free Rad. Biol. Med. 1998. - V. 24, № 7 - 8. - P. 1228 - 1234.

95. Lussignoli S., Fraccaroli M., Andrioli G., Brocco G., Bellavite P. A microplate-based colorimetric assay of the total peroxyl radical trappingcapability of human plasma // Analytical Biochemistry. 1999. - V. 269. -P. 38-44.

96. Singleton V.L., Rossi J.A. Colorimetry of total phenolics with phosphomolybdic-phosphotungstic acid reagents // Am. J. Enol. Vitic. -1965.-V. 16, №3.-P. 144- 158.

97. Cao G.H., Alessio H.M., Cutler R.G. Oxygen radical absorbency capacity assay for antioxidants // Free Rad. Biol. Med. 1993. - V. 3, № 14.- P. 303-311.

98. Cao G., Verdon G., Wu C.P., Wang A.H.B., Prior R.L. Automated assay of oxygen radical absorbance capacity with the COBAS FARA II // Clin. Chem. 1995. - V. 41. - P. 1738 - 1744.

99. Ehlenfeldt M.K., Prior R.L. Oxygen radical absorbance capacity (ORAC) and phenolic and anthocyanin concentrations in fruit and leaf tissues of highbush blueberry // J. Agric. Food Chem. 2001. - V. 49. -P. 2222-2227.

100. Cao G., Sanchez-Moreno C., Prior R.L. Procyanidins, anthocyanins and antioxidant capacity in wines // Faseb Journal. 2000. - V. 14. -P. A564-A569.

101. Cao G.H., Shukitt-Hale В., Bickford P.C., Joseph J.A., McEwen J., Prior R.L. Hyperoxia-induced changes in antioxidant capacity and the effect on dietary antioxidants // Journal of Applied Physiology. 1999. - V. 86. -P. 1817- 1822.

102. Абдуллин И.Ф., Турова E.H., Будников Г.К. Кулонометрическая оценка антиоксидантной способности экстрактов чая электрогенерированным бромом // Журнал аналит. химии. 2001. -Т. 56,№6.-С. 627-629.

103. Абдуллин И.Ф., Турова Е.Н., Будников Г.К., Зиятдинова Г.К., Гайсина Г.Х. Электрогенерированный бром реагент для определения антиоксидантной способности соков и экстрактов // Заводская лаборатория. - 2002. - Т. 68, № 9. - С. 12 - 15.

104. Бумбер А.А., Корниенко И.В., Профатилова И.А., Внуков В.В., Корниенко И.Е., Гарновский А.Д. Полярографический метод в изучении антиоксидантной активности аминокислот и белков // Журнал общей химии. 2001. - Т. 71, № 8. - С. 1387 - 1390.

105. Psotova J., Zahalkova J., Hrbac J., Simanek V., Bartek J. Determination of total antioxidant capacity in plasma by cyclic voltammetry. Two case reports // Biomedical Papers. 2001. - V. 145, №2.-P. 81 -83.

106. Chevion S., Roberts M.A., Chevion M. The use of cyclic voltammetry for the evaluation of antioxidant capacity // Free Rad. Biol. Med. 2000. -V. 28, №6.-P. 860-870.

107. Ge В., Lisdat F. Superoxide sensor based on cytochrome С immobilized on mixed-thiol SAM with a new calibration method // Analytica Chimica Acta. 2002. - V. 454, № 1. - P. 53 - 64.

108. Chen J., Wollenberger U., Lisdat F., Ge В., Scheller F.W. Superoxide sensor based on hemin modified electrode // Sensors and Actuators B. -2000.-V. 70,№ 1-3.-P. 115-120.

109. Lisdat F., Ge В., Reszka R., Kozniewska E. An electrochemical method for quantification of the radical scavenging activity of SOD // Fresenius J. Anal. Chem. 1999. - V. 365, № 6. - P. 494 - 498.

110. Ignatov S., Shishniashvili D., Ge В., Scheller F.W., Lisdat F. Amperometric biosensor based on a functionalized gold electrode for detection of antioxidants // Biosensors & Bioelectronics. 2002. - V. 17, № 3. - P. 191-199.

111. Campanella L., Favero G., Persi L., Tomassetti M. Evaluation of radical scavenging properties of several plants, fresh or from a herbalist's, using a superoxide dismutase biosensor // J. Pharm. Biomed. Anal. 2001. - V. 24, № 5 - 6. - P. 1055 - 1064.

112. Осина M.A., Богдановская В. А., Тарасевич M.P. Биоамперометрическое определение производных фенола с использованием композита лакказа-нафион // Электрохимия. 2003. -Т. 39, №4.-С. 450-456.

113. Абаляева В.В., Ефимов О.Н. Полианилиновый электрод для определения содержания антиоксидантов // Электрохимия. 2002. -Т. 38,№ 10.-С. 1212-1215.

114. Абанькин В.П., Мельниченко А.В. Изучение влияния си-токоферола на ультрафиолетовый фотолиз фосфатидил-холина методом хроматографии // Биоантиоксидант: Тез. докл. IV Межд. конф. 16-19 апреля 2002 г. Москва, 2002. - С. 4 - 5.

115. Короткова Е.И. Вольтамперометрический способ определения активности антиоксидантов // Журн. физич. химии. 2000. - Т. 74, №9.-С. 1704-1706.

116. Korotkova E.I., Karbainov Yu.A., Shevchuk A.V. Study of antioxidant properties by voltammetry // J. Electroanal. Chem. 2002. -V. 508, № 1.-56-60.

117. Коваленко E.A., Березовский В. А., Эпштейн И.М. Полярографическое определение кислорода в организме. М.: Медицина, 1975. - 232 с.

118. Korotkova E.I., Karbainov Yu.A., Avramchik О.A. Investigation of antioxidant and catalytic properties of some biologically active substances by voltammetry // J. Anal. Bioanal. Chem. 2003. - V. 375, № 3. - P. 465 -468.

119. Квантово-химические расчеты в органической химии и молекулярной спектроскопии / К.Я. Бурштейн, П.П. Шорыгин. М.: Наука, 1989. - 104 с.

120. Заградник Р., Полак Р. Основы квантовой химии. М.: Мир, 1979.-462 с.

121. Блюменфельд JI.A., Кукушкин А.К. Курс квантовой химии и строения молекул. -М.: Изд-во Моск. ун-та, 1980. 136 с.

122. Дьюар М. Теория молекулярных орбиталей в органической химии. М.: Мир, 1972. - 590 с.

123. Жидомиров Г.М., Багатурьянц А.А., Абронин И.А. Прикладная квантовая химия. Расчеты реакционной способности и механизмов химических реакций. М.: Химия, 1979. - 296 с.

124. Кларк Т. Компьютерная химия. М.: Мир, 1990. - 383 с.

125. Минкин В.И., Симкин Б .я., Миняев P.M. Квантовая химия органических соединений. Механизмы реакций. М.: Химия, 1986. -248 с.

126. Фларри Р. Квантовая химия. Введение. М.: Мир, 1985. - 472 с.

127. Marco Nonella A quantum chemical investigation of structures, vibrational spectra and electron affinities of the radicals of quinone model compounds // Photosynthesis Research. 1998. - V. 55, № 2 - 3. - P. 253 -259.

128. Ambrose James F., Carpenter Lawrence L., Nelson Robert F. Electrochemical and spectroscopic properties of cation radicals // J. Electrochem. Soc. 1975. - V. 122, №7. - P. 876 - 894.

129. Тихомиров В. А., Герман Э.Д. Расчеты методом MNDO поверхностей потенциальной энергии распада анион-радикалов 1,2-дифтор- и 1,2-дииодэтанов. // Электрохимия. 1993. - Т. 29, № 5. -С.622 - 625.

130. Лыков А.В. Теория теплопроводности. М.: Высшая школа, 1967.-600 с.

131. Карбаинов Ю.А. Теоретические основы инверсионной вольтамперометрии растворов комплексов металлов (в т.ч. экстрактов) со стационарными ртутными электродами ограниченного объема: Дис. .д-ра хим. наук. М., 1981.- 409 с.

132. Карбаинов Ю.А., Носкова Г.Н. Вольтамперометрическое исследование реакций перехода йодат-ионов в йодид-ионы на ртутно-пленочном электроде. // Изв. вузов. Химия и хим. технология. 2004. -Т. 47, №7.-С. 58-61.

133. Электроаналитические методы. Теория и практика / Под ред. Ф. Шольца. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2006. - 326 с.

134. Электрохимия органических соединений / Под ред. А.П. Томилова, Л.Г. Феоктистова. М.: Мир, 1976. - 731 с.

135. Филимонов В.Д., Сироткина Е.Е. Химия мономеров на основе карбазола. Новосибирск.: Наука, 1995. - 400 с.

136. Андронати С.А., Воронина Т.А. Целенаправленный поиск новых нейротропных препаратов. Рига: Зинатне, 1983. - С. 94 - 109.

137. Вальдман А.В., Александровский Ю.А. Психофармакология невротических расстройств. М.: Медицина, 1987. - 287 с.

138. Кептя Э.Б., Мухин Е.А. Повышение устойчивости организма к гипероксическому стрессу диазепамом. // Стресс и адаптация. -Кишинев: Наука, 1978. С. 176 - 177.

139. Mamaeva Е.А., Bakibaev A.A., Akhmedzhanov R.R. Nitrogen-containing heterocycles and alkaloids // Chemistry of biologically active of synthetic and natural compound (CBC). Moscow: Iridium Press, 2001. -V. 1.-P. 376-380.

140. Проект ВФС на субстанцию противовоспалительного препарата стампирин. Томск, 1969. - С. 63 - 64.

141. ГОСТ Р ИСО 5725-1 2002. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. - Введ. 23.04.2002. - М.: Изд-во стандартов, 2002. - 24.

142. Индексы реакционной способности антипирина и его производных