Электрохимическое поведение кардиопрепаратов и разработка методик их определения в биологических средах тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.02 ВАК РФ

ТОМСКИЙ ПОЛИТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

РЮ ОЙ

') -j рь ¡^ На правах рукописи

ИВАНОВСКАЯ ЕЛЕНА АЛЕКСЕЕВНА

ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКОЕ ПОВЕДЕНИЕ КАРДИОШШРАТОВ И РАЗРАБОТКА МЕТОДИК ИХ ОПРЕДЕЛЕНИЯ В БИОЛОГИЧЕСКИХ СВДАХ

02.00.02 - Аналитическая химия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Томе* - 1993

Работа выполнена в Томском политехническом университете.

Научный руководитель: доктор химических наук, профессор Белихмаер Я.А,

Научный консультант : кандидат химических наук, доцент Анисимова Л.С.

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор Водзинский С,Б.

кандидат химических наук Мамонтова И.П.

Ведущая организация - НИИ курортологии и физиотерапии г.Томска.

Защита состоится О^ 199 Ц т. на заседании Спе-

циалиэироваюгого Совета К. 063.80.09 в Томском политехническом университете по адресу: 634004, г Ломок, пр. Ленина, 30, ТПУ, химике-технологический факультет, большая химическая аудитория.

С диссертацией можно ознакомиться в научно-технической библиотеке Томского политехнического университета.

Автореферат разослан */<£- 199 $ г.

Ученый секретарь Специализированного Совета, кандидат химических наук, доце

РЯШЕНЦЕВА Т.®.

ВБЕДЕНЙЕ

Актуальность работы. В последние годы появилось значительное число новых биологически активных препаратов, количественное определение которых является актуальной задачей любой клинико-диагностической лаборатории научно-исследовательских медицинских учреждений.

Методы анализа должны сочетаться высокой чувствительностью к селективностью, а также правильностью и воспроизводимостью результатов определения, при этом предварительная обработка пробы не долота носить осложненного характера.

Электрохимические методы оказались весьма перспективными и чувствительными при определении лекарственных и токсичных веществ, а также их иетаболитов в биологических матрицах. Одним из перспективных методов определения лекарственных веществ является метод инверсионной вольтамперометрии, в развитие которого внесли значительный вклад отечественные и зарубежные ученые: С.И.Синякова, А.Г.Строыберг, Х.З.Брайнина, В.Я.Каллан, Ы.С.Захаров, В.Ф.Торопо-ва, М.Т.Козловский, Ниб, Шейн, Де Врид и многие другие.

Практически не изучено поведение лекарственных препаратов, используемых при лечении сердечно-сосудистых заболеваний. Количественное определение кардиопротекторов является актуальным а оценке эффективности лечения при аритмиях различной этиологии, ирц острой ишемическом повреждении миокарда и других заболеваниях сердечно-сосудистой системы.

Сведения по определенно микроколичеств лекарственных соединений методом инверсионной вольтамперометрии весьма ограничены. Исследования и методики, связанные с анализом биологических объектов на содержание милдроната, обзкдена, зтацизина, финоптина методом инверсионной вольтамперометрии, отсутствуют. Вопросы и особенности электродных процессов о участием лекарственных препаратов н материала электрода, определяющих чувствительность, точность и раэрешащур способность метода, такие мало изучены.

Данная работа в некоторой степени восполняет этот пробел.

Направление диссертационной работы является составной частьв работы по госбвднетной тематике # 0166.0078 283 по заказ-наряду Том.-НикрЛ.

Цель работы. Исследовать электрохимическое поведение кардао-препаратов и разработать методики их определения в биологических объектах.

Научная новизна. Впервые установлена способность кардиопро-текторов: милдроната, обзидана, этациэина и финоптина электрохимически концентрироваться на стационарном ртутном пленочном электроде в процессе анодной поляризации с образованием осадков, электрорастворение которых приводит к появление пиков на поляризационной гривой, параметры которых являются качественной и количественной характеристикой определяемых веществ.

- Определены оптимальные условия количественного определения кардиопрепаратов методом инверсионной вольтамперометрии.

- Изучено влияние биологической основы пробы на величину тока растворения ртутных осадков лекарственных веществ и разработаны методики количественного определения препаратов в биологической среде на уровне 10+ 10"® моль/л. Впервые проведены фармакоки-нетические исследования милдроната в плазме и сыворотке крови больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями.

- Предложена вероятная схема электродного процесса с участием милдроната в условиях инверсионной вольтамперометрии.

- Получены сведения о кинетики электродного процесса растворения в щелочных растворах.

На. защиту выносятся следующие положения:

1. Условия электрохимического концентрирования лекарственных веществ на ртутно-пленочном электроде.

2. Результаты по определению ряда физико-химических и термодинамических параметров электродного процесса с участием кардио-протекторов.

3. Интерпретация данных о природе токов и наиболее вероятной схеме электродного процесса.

4. Методики количественного определения лекарственны* веществ в биологических средах /плазме, сыворотке, крови/.

б. Возможность применения инверсионной вольтамперометрии для фаркакакинетических исследований.

Практическое значение. Выполненная работа расширяет возможности использования метода инверсионной вольтамперометрии для определения микроколичеств некоторых кардиопрепаратов в биологических средах. Открывается перспектива применения метода для фармакокинетичееккх исследований кардиопрепаратов.

Использование результатов работы. Разработанные методики инверсионно-вольтамперометрического определения кардиопрепаратов

в растворах, и иилдроната, обзидана в биологических средах /плазме, сыворотке крови/ опробованы и переданы для использования в Томский НИЦ кардиологии и в медицинские учреждения г.Хабаровска, что подтверждено соответствующими актами о внедрении.

Методика инверсионно-вольтамперометрического определения иилдроната использована для фармакокинегических исследований в плазме больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями Томским НИЦ кардиологии, что отражено в прилагающихся документах.

Структура диссертации. Работа объемом страниц машинописного текста, включая 21 риснков и 10 таблиц; состоит из введения, пяти глав, выводов и приложения. Список литературы содержит 132 библиографических названий работ советских и зарубежных авторов.

В первой главе представлен литературный обзор по вольтаыперо-метрическому и полярографическому поведению лекарственных веществ на различного типах электродах, а такие методы их определения а объектах; рассматриваются различные варианты инверсионной вольтамперометрии лекарственных препаратов. На оснований обзора формулируются задачи исследования. Описание используемой в работа аппаратуры, типов электродов, методики проведения экспериментов, очистка посуды и приготовление растворов приведены во второй главе,

Третья глава посвящена подбору условий катодного ИВ определен ния кардиопрепаратов. В четвертой главе приведены данные экспериментальной проверки обратимости электродного процесса растворения концентратов ртутн с иклдрснатоы и определены некоторые фззи-ко-химические константы. Изложение результатов опытов по разработке методик определения кардкопрепаратов в биологических средах, а также оценке пределов обнаружения и ннхней границы определяемых лекарственных веществ посвящена пятая глава. В захлеченин сделаны выводы. А в приложении представлены анты о вяедрении результатов работы, список публикаций, отралсодих содержание диссертации.

Публикация: два авторских свидетельства, две статья, четверо уеэясов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

В первом раздела литературного обзора обсуждены аналитические возыоклости фяэяю-пмичесюи методов определения лекарственных

-б-

првпаратов. Сведения по анализу лекарственных препаратов в различных объектах представлены в виде таблицы на 6 страницах.

В следующей разделе приведены данные полярографического и вольтамперометрического определения различных типов лекарственных веществ. Показано, что мало изученной группой являются препараты, использующиеся при лечении сердечно-сосудистых заболеваний. Количественное ¡се определение карднопрератов является актуальным в оценке эффективности лечения.

В последнем разделе литературного обзора приведены данные по использованию различных вариантов электрохимических и ияверсионно-вольтвмперометричеоких методов исследования. Одним из перспективны* является инверсионный вольтамперометрлчесхий метод. Обладая высокой чувствительностью, он прост в аппаратурном оформлении и обладает достаточной для анализа эхспрессностью.

I. ИНВЕРСИОННАЯ ВОЛЬТАШЕРОЫЕГГИЯ НАРДЮПРЕПАРАТОВ

В качестве объектов выбраны следующие лекарственные препараты: ммлдронат, этациэин, фииоптин, обэидам /табл.1/.

Для определения указанных веществ использовали метод катодной инверсионной вольтамперометрии /КИВ/.

Источником информации служили поляризационные кривые электрохимического восстановления калорастворимых соединений, осажденных на поверхности ртутно-пленочного электрода /РПЭ/ при его анодной поляризации из растворов, содержался определяемые вещества.

1.1. Использование катодной инверсионной вольтамперометрии в анализе милдроната

Молекула милдроната имеет структуру биполярного иона, что обуславливает хорошую растворимость его в воде и органических растворителях. Поэтому для его определения использовали буферные растворы Бриттона-Робинсона в широком диапазоне рН, а также водные и водно-сметанные раствора электролитов: ис£ , Л/М^.ЛМРО, . Хорошо воспроизводимые ВА-кривые восстановления концентрата милдроната зарегистрированы в цепочных и нейтральных растворах на фонах, указанных в таблице I /рис.1/. По-видимому, в таких растворах молекула милдроната преимущественно существует в виде отрицательно заряженного иона, что способствует его концентрированию при анодной поляризации ртутно-пленочного электрода.

В сильно-кислых растворах поляризационные кривые растворения, пригодные для аналитического определения, не были получены.

Оптимальный диапазон рН для количественного определения мил-дроната 7,7 т 10. В этом интервале рН величина тока практически не меняется.

м -Е

А<сЛ. Вольтамперограммы восстановления осадков мил-дроната.

Фон - 0,1 и а и ; Ы = 30 мВ/с, 7,= 120 е., Еэ = 0,60 В; Ю"^моль/л; Ср=3'10~®иоль/л.

Линейная зависимость градуирсвочного графгеа сохраняется в широком диапазоне определяемых концентраций от 10"^ до 10~^моль/л.

Для определения милдроната в биологических средах /плазие, • сыворотке крови/ оптимальным является 0,2 Н раствор _

в 50? ПК и 0,1 И раствор ¿1С£. . Использование ПК в качестве растворителя повивает растворимость биологической пробы и обеспечивает высокую электропроводность растворов. Это приводит к улучшение воспроизводимости вольтемперограмм.

Потенциал накопления и длительность концентрирования является одним из факторов, опрэделящям аналитические возионности метода.

Зависимость величины тона потенциала электролиза имеет коло-колообразную форму с максимумом /рис.2/. Интервал потенциалов при которых регистрируются пики растворения концентратов ограничен в анодной области процессом растворения материала электрода. В катодной области - восстановлением осадков солей. При потенциа-ае более 0,55 В регистрируется дополнительный прэдпик восстановления ионов ртути, которые образуются при высокой анодной поляризации электрода, что затрудняет количественное определение лекар-

Основные условна определения кардкопротекторов методом ИВА.

Таблица I

Формула Название Фоны Диапазон Е__ ,В , Е__а1 С„ , Мьн

определяв- эл' мин. "К é *

usa. кон- ° центраций.и

Т. дигиорат 3- 0,1 M 2■I0"Y*I0~J 0^60 2 -(0,66+1,00) (0,10- 1,64» -(2,2.2-триме- L ¡Cl -0,051 Т(1-7 (сû tf-MCMHJiDO г талгидраэиний) 10

*21ф пропионвг

1 &

Pt__________

pu 9,2 U>JA" ,I0-5

Ииздрона* 0;2J« _ 3

в 50% ПК 10"° * 10"° 0,40 2 -(0,60+0,70) (0,10- 1,00-

s ч °.°5) rn-6

Бриттона- I0~° * 10"^ 0,20 I -(0,20+0,30^ fn тч 10 l.

Рпбингпня (O.Î5r T.TR. ®

ПЯАЯ й 0.55 2 -(0,50+0,70) 0.10- 2,301?

л этилаюшопро- бинсона ~°«05 'Iû

tMyisl/c-A^-c-cKjWi пиогаиО рН 1,61

& v си фенотиазиана

¿ х Ни. гидрохлорид.

О* Этациэин. О, H IO^IO"3 -0,35 I 0,20 0.20- 2,7- . _. J(*.HP04__-0,35 'кг4

ЙЖЯЕ" "MB I 0,25+0,30 (0,10: 2,20- 7

Ml I 04 "з нафгокси) -2- в < ût . °'05' ,10

х НС4 пропанола

гидрохлорид.

Обзидан.

^cu^s «к. ^»4-ДИМвТОКСИ- л pu п .

*10 0,35 3 -(I'I0+I'25' № 2,02-c*j fv ^-2-изопропилвалеронит- _7

fv '-2-изопропилвалеронит- —. тл

лнсг СиГ1,орид' 'Х

ственного вещества.

Время электролиза - 2 минуты. Оптимальной является скорой» развертки потенциала 30 мВ/с.

(1,2) ■ Р)

30-.Ю

30-40

ю--го

Рис.2. Зависимость величины тока восстановления осадков органических веществ от потенциала электролиза, v = 30 мВ/с (1,2,3); С (1,2,3) = М-юЛюль/л.

1. Финоптин. Фон-0,2 НМ,НР0ч-, 7}( с) = 160;

2. Этацизин. Фон - буфер Брат-тона-Робинсона, рН 2,

Г,(с) = 120;

3. Ыилдронат. «он - 0,2 НА/И,Щ в БОЯМ, ?,(с) = 120.

1.2. Применение инверсионной вольтамперометрии в анализе обзйдана, этацизина, финоптмна.

В отличие от мил дрот? а гетероциклические органические гидрохлорида - обзкдан, финоптин, атацизин являются полярографически активными и способны окисляться и восстанавливаться на графитовом я ртутно-пленочноы электродах. Получены волны окисления этацизина при потенциале 0,20 В и водны его восстановления при -0,55 В. Потенциал Е^^ окисления обзйдана равен 0,25-0,30 В и потенциал восстановления фииоптнна - (1,1*1,2) В на соответствующих фонах /табл.1/.

Применение ИВ позволило снизить ¡гелгеп границу' определяемых содеряаний на 1-2 порядка. Диапазон определяемых концентраций 10" *10 мояь/д. Относительное стандартное отклонение &г не превынает 0,1,

Время накопления выбрано экспериментально и не превышает 3 мянут.

Оптимальной скоростьп развертки поляризующего напряжения является скорость 30-50 иВ/с,

Характер зависимости величины тока от потенциала электроли^ за аналогичен рассмотренному ранее /рис.2/.

П. ИЗУЧЕНИЕ ЭЛЕКТРОДНЫХ ПРОЦЕССОВ РАСТВОРЕНИЯ ОСАДКОВ

РТУТНЫХ СОЛЕЙ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ,

Чувствительность метода катодной инверсионной вольтамперометрии лимитируется физико-химическими факторами образования малорастворимых соединений, одним из определяющих является доста-. точно малая растворимость образующегося на электроде осадка. Сведения по растворимости солей ртути лекарственных веществ отсутствуют.

Нами определено произведение растворимости / Ьр / соли ртути милдроната /осажденной на поверхности электрода/ потен-циометрическим методом, с использованием электррхимической цепи, состоящая из электродов I и П рода.

(-) Нд,И3((СОО)г ¡ЧСОО', II Ир {"03)2 Но О)

Концентрацию милдроната изменяли в диапазоне от 0,5 до 10"^ моль/л. Полученное значение Ьр равно (3,2 - 0,8)-10"^.

Произведение растворимости рассчитано также из ИВ-данных по формуле, предложенной Пневым и соответствует величине (3,4 ± 0,6)- Ю-19.

Полученные значения Ьр свидетелвствуют об образовании малорастворимого соединения.

Из потенциометрических измерений найдено значение формального стандартного потенциала электрода

Анализ ИК-спектров подтверждает, что в состав накопленных при электролизе концентратов входят группы, входящие в структур- . ную формулу лекарственного препарата. Данные ИК-спектров свидетельствуют о наличии полос поглощения в спектре осадка при

1600 см"* и 1150 см"* и А. =- 3300 си-1, которым отвечают карбоксильная группа, МИ и эфирная группировки, входящие в состав органического вещества. ;

Образование, серебристо-белого осадка на электроде можно было визуально наблюдать при электролизе. Осадок легко удалялся при слабом протирании электрода о фильтровальную бумагу.

Для аналитической практик* большое значение имеет электродная / проводимость растворов. Каких-либо данных о проводимости растворов определяемых веществ не найдено. Поэтому представляло практический и теоретический интерес определение электропроводности растворов и величины константы диссоциации / Кр / электролита. Зависимости удельной и молярной электрической проводимости и степени диссоциации от концентрации раствора милдроната характер-

ны аналогичным зависимостям для растворов слабы* электролитов. Значения И и А соответственно равны (1,4-10""7 - 2,6-10"®; 7,9 - 1,4) для диапазона концентраций 3,2-10 4 10"^ моль/л.

Рассчитанные из кондуктометрических измерений значения аналитическим и графическим способом близки меаду собой и соответственно равны (1,48 ± 0,37)-Ю"7 и I,Бб>10 .

Полученные данные свидетельствуют о том, что милдронат в водных растворах является слабым электролитом.

Достоверность полученных значений Ьр , Ид н £ проверяли путем определения аналогичным способом значений произведения растворимости Идг и Ир уксусной кислоты и сравнением полученных результатов с литературными данными.

Сведения о природе тока имеют немаловажное значение ддя аналитических целей.

Для оценки обратимости процессов растворения осадков воспользовались известными в литературе критериями. Сняты зависимости У-9. я с использованием стационарного н вращающегося

электродов. Отношение тангенсов угла наклона прямых £ ог ^И7 к максимального тока растворения от количества электричества для вращающегося и покоящегося электродов близко к единице, что говорит о необратимом характере электродного процесса.

Из полученных значений тангенсов углов наклона оценен эффективный коэффициент переноса электродного процесса / 4Л /, значения которого близко к 0,5 и равно (0,62 - 0,07) А/си.

Рассчитанная величина константы скорости восстановления равна 1,94-Ю"*3 см/с.

Съемка циклических вольтаыперограмм подтверждает необратимый характер электродного процесса. Различие между значениями потенциалов катодного и анодного пиков составляло 300 - 320 мВ.

Изложенные вьюе опытные данные показывают, что процесс растворения осадков милдроната протекает необратимо и замедленной стадией является акт передачи электрона.

В результате проведенных исследований можно предложить вероятную схему механизма злектриодного процесса. В растворе: И СООН ПСОО' * «, О'

При анодной поляризации электрода

Ну'* ШО- '/г Ир{* * (ЯСОО]г иири. ■

Из литературных данных известно, что соли ртути (I) неустойчивы и быстро диспропорционирувт с образованием более устойчивой соли ртути (П)! Цу''(Ш0)2 ^ Нр(АСОО)г + У у бытро

Цри катодной развертка потенциала, происходит восстановление накопленного осадка:

Ш. ОПЩЕЛЕНИЕ КАРДИОПРШРАТОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДАХ

Возможность аналитического определения веществ методом ИВ охарактеризована нижней границей определяемых содержаний ( Сц ) я пределом обнаружения ( Сгп1п,р ), рассчитанным по трехсигмовому критерию /табл.1/. Полученные значения метрологических характеристик свидетельствуют о преимуществе использования метода ИВ с линейным наложением потенциала для количественного определения лекарственных веществ.

С целью разработки методик количественного определения лекарственных препаратов оценено мешающее влияние ряда веществ, нахождение которых возможно в биологических средах. Показано, что определению не мешает аскорбиновая, щавелевая, мочевая кислоты, некоторые окси-соединения, фенолы, а также И', бг~, ионн.

Установленные условия ИВ-определения позволили разработать методики анализа кардиопрепаратов в растворах и методики ¿п vii.ro определения милдроната, обэидана в биологических средах /плазме, сыворотке крови/, на уровне моль/л без предварительного

отделения основы. Подобраны оптимальные соотношения пробы и фона, при которых сохранялся линейный характер градукровочных графиков н достигалась удовлетворительная воспроизводимость полезного сигнала. •

В присутствии плазмы объемом (0,02*0,1) ил диапазон определяемых концентраций сохранялся, но величина тока несколько увеличивалась /рнс.З./.

По-видимому, это связано с наличием в плазма небольшого количества аналогов милдроната (¡Г - бутиробетаина, карнитина), ведущих себя аналогично милдронату. Однако гто не мешает количественному определению вводимого лекарственного вещества.

Методики основаны на разбавлении пробы (предварительно осво-боаденной от белков гепарннои, известным способом) фоновым электролитом с последующим полярогра^ированием полученного раствора. Пра-

Рис.З. Зависимость тока восстановления осадков от концентрация милдроната на фоне буфера Бритто-на-Робинсона, рН 9; (1,1')и 0,1 Ы UCÍ (2, 2') при определении милдроната в чистых растворах (1,2) и плазме крови

ЕЭ(В): I, I1- 0,20; 2, 2' - 0,60;

7э (с): 1,1' - 120; 2, 2' - 60;

. , (мВ/с^: I.l'.- 20; 2, 2' - 30.

c-i

вильность разработанных методик подтверждена методом "введено-найдено" /табл.2/. Время единичного анализа не превьюает 15 ммн.

Методики использованы для фармакокинетических исследований лекарственных препаратов у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями. Регистрацию цитостатика проводили до введения, через 10 минут, ]С, 2, 5, .... 9 часов после однократного внутривенного введения препарата.

Фармакокинетические параметры рассчитывали по известной одночастевой модели,'основанной на анализе зависимости концентрации препарата от времени его растворения в крови ( С -Ь кривых). Максимальное всасывание милдроната в кровь отмечали через час после введения препарата. Период полувыведения из организма 9 часов. Установлено, что препарат выводится Из организма через 18 часов.

Полученные данные позволяют следить за временем воздействия и циркуляция лекарства в организме, за созданием терапевтически значимого уровня, т.е. судить об эффективности препарата.

Таким образом, установленные оптимальные условия проведения электродного процесса позволили проводить концентрирование лекарственных препаратов, приводящее к улучшению метрологических характеристик количественного анализа органических веществ. Методики ИВ-определеняя опробированы в биохимической лаборатории НИЦ кардиология г.Томска, что подтверждается соответствующими актами о внедрении.

Таблица 2

Определение шлдронота ,в плпэив, сыворотке крови методом ИВ / Р - 0,95/.

Биологический объект Фон Введено,моль/л ¿г Найдено, моль/л

1. Плазма крови 2. Сыворотка крови о.2н тщ в 50^ про- пиленкар- бонагге 1,50 -КГ5 4,60-Ю-6 0,10 б 0,12 ' 7 (1,9 1 0,7)- Ю-5 (4,9 * 0,5) . Ю-6

I. Плазма крови 0,1М ИС£ 2,90- Ю-0 0,08 3 (2,8 ± 0,4) - 10-6

Определение обэидана в биологических объектах методом Таблица 3 ИВ / р = 0,95/.

Биологический объект Р пробы Введено, моль/л Найдено, моль/л

1. Плазма крови Ч 5,0-10-6 0,07 3 (6,3 ± 0,8)-10-б

2. Сыворотка крови Сыворотка кровя 2 3 7,0-10"4 3,4-КГ4 0,10 3 (7,6 ¿0,7Ч04 0,13 3 (3,5 ± 0,8)- КГ4

вывода

1. На основе изучения электрохимического поведения лекарственна веществ - кардиопрепаратов, показана возможность юс электроосаадения с образованием малорастворимых солей. Впервые получены поляризационные кривые восстановления концентратов лекарственных веществ, пригодных для аналитических целей.

2. Установлено влияние различных факторов (рН, Е, Л, , и и/ ) на потенциал и величину тока восстановления накопленных

осадков, осажденных при электролизе растворов, содержащих лекарственные препараты.

3. Сделана оценка пределов обнаружения и някнеП границы определяемых содержаний милдроната, обзйдана,»тацязкна, фяноп-тина методом инверсионной вольтамперометрии в оптимальных условиях проведения анализа. Значения Спъп и Си лежат в диапазону концентраций 2,0-Ю-7 4- 2,1 -Ю"6 моль/л.

4. Впервые определены физико-химические величины, имеющие аналитическое значение ( , Ьр , , X и А ).

5. Показано, что процессы растворения осадков милдроната протекают необратимо. Определены некоторые параметры электродной реакции растворения концентратов милдроната , ^з , й- ).

6. Предложена вероятная схема электродного процесса накопления и растворения'ртутных солей милдроната.

7. Изучено влияние основы пробы на велииину тока. Экспериментально подобран объем плазмы и сыворотки крови для количественного определения лекарственных препаратов. Показано, что для анализа достаточно 0,02 мл пробы.

8. На основании выбранных оптимальных условий установления взаимного влияния веществ разработаны методики определения кардио-преНаратов в чистых растворах и методики определения гп1го милдроната,'обзйдана в биологических средах, которые апробированы в НИЦ кардиологии г.Томска, что подтверждается соответствующими актами о внедрении.

9. Проведены фармакокинетическяе исследования милдроната

у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями. Рассчитано максимальное время всасывания, время выведения препарата из организма. Результаты исследований внедрены I клиническую медицинскую практику,что также подтверждается соответствующим документом.

СГМСОК ПУБЛИКАЦИЙ

1. Ивановская БД., Абашина С.А., Анисимова Л.С., Слипчекио В.Ф. Определение органических лекарственных препаратов в биологических средах методами вольтамперометрии. //В кн.: Элэктроаналитика Сибири-90. Состояние и перспективы: Тез.докл. Per. кокф., Томск, 1990, с.25.

2. Анисимова Л.С., Слишенко Б.5., Абакшина С.А., Ивановская Е.А. Фармакокинетические исследования лекарственных препаратов и метаболитов при различных путях их введения в организм. В кн.: Аналитическая химия на службе здоровья человека.: Тез. докл. Per. Научн.-практ. кокф. Томск, 1991г., с.18.

3. Анисимова Я.С., Сдипченко B.S., Аб&ншина С.А., Ивановская Е.А. Фариакокинегическме исследования лекарственных препаратов в метаболитов при различных путях их введения в организм. // Рукопись представлена Томским политехи, ин-том. Деп. ь ОШИТЭШ, г.Тоыск, 1991г. № 149-ХП-92, с.66-68.

4. Каплин A.A., Ивановская Е.А., Анисииова Л.С. Имверсион-но-вольтамшромвтрический способ определения двгидрат-3-{2,2,2-трше?илгидразиний)-пропионат. // A.c. & 01 27/48

* 1728775 (СССР). - Ог.убл. 1991г.

5. Анисимова Л.С., Ивановская Е.А. Инверсионно-Еольтшшэро-иетрическоа определение обзидаиа (1-изопропвл-амино-3-(1-нафтокси-(2-пропаиола гядрохлорида). // A.c. G- 0127/48

» 17Б0413 (СССР). - Опубл. IS9£r.

6. Ивановская Е.А., Анисимова Л.С. Инверсионное вольтам-перометрическое определение дигндрат-3-(2,2,2-тргметилгидрази-И«й)-пропионата. // Н. аналит. химии, 1992г., т.47, Е 9, C.I676-I680. ' *

7. Анисииова Д.С., Ивановская Е.А., Слнпчепко В.й. ЭлектрохимичесвиЯ анализ лекарственных препаратов. // В на,; Аналитика Сабирн в Дальнего Востока. : Тез. докл. конф., р.Тсиск, 1993г., 0.17.

8. Ивановская Е.А., Агаошова Л.С. Инверсионный вольгакда-роцетрвческжй способ определения 3-карбов*оксяаыиио-10-(З-дяэтиланянопрогтоиил)-фенотиазиана гвдрохлорид. // Иол,