Фитоэкдистсроидыpaстений родов Chenopodium и Rhaponticum тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

Академия наук Республики Башкортостан Уфимский научный центр Российской академии наук Институт нефтехимии и катализа

На правах рукописи

РГБ ОД

1 з дек т

Боровикова Елена Борисовна

Фитоэкдистероиды растений родов СЬепоросИит п Шгаропйсит

02.00.03-0ргапическая химия 02.00.10-Биоорганическая химия, химия природных и физиологически активных веществ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Уфа-2000

Рабога выполнена в Институте нефтехимии и катализа Академии наук Республики Башкортостан и Уфимского научного центра Российской Академии наук.

Научный руководитель' доктор химических наук

Балтаев У.А.

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, ведущий научный сотрудник Степанов А.Е.

кандидат химических наук, доцент

Кондратенко P.M.

Ведущая организация: Институт органической химии

Уфимского научного центра Российской Академии наук

Защита диссертации состоится «¿5» деса.5/гя. 2000г. в 14п0 час. на заседании диссертационного совета Д. 200.33.01 при Институте нефтехимии и катализа АН РБ и УНЦ РАН ( 450075, Уфа, проспект Октября, 141).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Института нефтехимии и катализа АН РБ и УНЦ РАН.

Автореферат разослан «-/О» иоя,5/гя. 2000г. Ученый секретарь диссертационного совета '' л

доктор химических наук, профессор (и сГ^ Р.Г.Булгаков

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Экдистероиды представляют собой юлигидроксилированные стерипы с цис- сочленением колец А и В, содержащие юпряженную систему 6-кето-7-ен-группировку в кольце В; с 14а-ОН группой и юковой аепыо из восьми углеродных атомов. Они проявляют гормональную наивность, вызывающую линьку у беспозвоночных. Особый интерес федставляет действие экдистероидов на млекопитающих. Они показывают •начительный анаболический эффект. Экдистероиды можно использовать для гонтроля численности вредных насекомых и для стимулирования развития юлезных особей.

Разработка удобного метода выделения и изучения структуры новых >кдистероидов, исследование структура-активности этих соединений и создание га их основе препаратов для медицинской практики и сельского хозяйства ледует отнести к актуальным задачам современной органической и ¡иоорганической химии.

Целыо работы являлись исследования экдистероидов широко 1аспространенных растений родов Chenopodium и Rhaponticum, разработка 1етодов выделения экдистероидов, установление строения новых нп'оэкдистероидов, выявление зависимости между строением и спектральными арамеграми новых веществ, поиск путей создания на основе экдистероидов :репаратов для сельского хозяйства.

Научная новизна работы. Изучено 2 вида растений рода Chenopodium; из Chenopodium album L. выделено 3 соединения, одно из которых - впервые для того вида. Из семян растения Rhaponticum carthamoides выделено 7 соединений, з них два-впервые.

Разработана методика выделения экдистероидов из растения Chenopodium lbum L. с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) а завершающей стадии.

Разработаны схемы выделения фитоэкдистероидов из растений с малым одержанием (0,001%; Chenopodium album) и сравнительно большим эдержанием (до 2%; Rhaponticum carthamoides) экдистероидов.

На основании спектральных исследований установлено строение новых эединений, обнаружены закономерности в спектральных характеристиках, ыделенных структур.

Обнаружение 2-дезоксиэкдизона в Chenopodium album L. расширяет онимание роли экдистероидов для растений.

Практическая ценность работы. В результате проведенных нологических испытаний установлено, что некоторые из выделенных ■сдистсроидов повышают жизнеспособность и способствуют сохранению силы челосемей в зимний период, стимулируют вывод неплодных пчелиных маток и зеличивают их вес в однодневном возрасте, что положительно влияет на ^продуктивные показатели.

На защиту выносятся:

Представляются результаты структурного исследования 8 экдистероидов, выделенных из растений родов СЬспорос1тгп и Широпйсит.

Разработка методов выделения экдистероидов из растительных объектов с разным содержанием экдистероидов.

Закономерности ЯМР-спектров новых экдистероидов.

Данные биологических испытаний как основа для создания лекарственного препарата для улучшения жизнедеятельности медоносных пчел.

Апробацпя работы и публикации. Материалы но теме диссертации доложены на XIII Международной конференции по экдизонам (Германия, Иена, 1998); на конференции, посвященной памяти академика Юнусова С.Ю (Ташкент,1999); на V Международной конференции „Наукоемкие химические технологии11 (Ярославль,1998) и представлены на Международной конференции по природным соединениям (Голландия, Амстердам, 1999); на XXXVI Международном конгрессе пчеловодства (Канада, Ванкувер, 1999); на Международной конференции природных и физиологически активных соединений (Новосибирск,1998); на III Всероссийском совещании по лесохимии и органическому синтезу (Сыктывкар, 1998).

По содержанию диссертации опубликовано 2 статьи, тезисы 7 докладов на конференциях и получено положительное решение на патент.

Объем работы. Диссертационная работа изложена на 86 страницах машинописного текста и состоит из введения, 3 глав, выводов, включает 87 наименований цитируемой литературы.

Представленная работа выполнялась в рамках темы лаборатории выделения и идентификации органических соединений Института нефтехимии и катализа Академии наук Республики Башкортостан и Уфимского научного центра Российской Академии наук „Выделение, идентификация, исследование биологической активности и влияния на поведение насекомых растительных веществ стероидной и терпеноидной структуры» (2.29.8.2.Природные феромоны, аттрактанты, репелленты и экдистероиды).

Содержание диссертации 1. Фитоэкдпстероиды Chenopodiura album

Содержание фитоэкдистероидов у различных видов растений различается очень резко. Отсюда становится понятным стремление исследователей изучать те виды, в которых фитоэкдистероиды содержатся в значительных количествах. К настоящему времени идентифицировано более 160 экдистероидов. Значение большого числа минорных фитоэкдистероидов в сочетании с одним, с двумя или тремя основными экдистероидами в растениях не ясно, но существует предположение, что эти вещества усиливают адаптивность растений.

С точки зрения распределения фитоэкдистероидов в растениях, род Chenopodium нас интересовал не только из-за многочисленности федставляющих его видов, но и их различию по ареалу распространения и шологии. Интересно отметить, что у Chenopodium album перед цветением [жтоэкдистероиды распределяются в. надземных частях растений, и наивысшая сонцентрация экдистероидов обнаруживается в самых верхних листьях. При этом юлыпинство авторов обнаруживали в растениях рода Chenopodium экдистерон, юлииодин В » 24(28)-дегидромакистерон А.

На основании предварительного ; хроматографического исследования жстраклов Chenopodium album L. и Chenopodium glaucum L. на содержание ждистероидов для детального изучения выбрано растение Chenopodium album L., фопзрастающее в окрестностях г. Уфы. Сбор растений был проведен после юзревания семян .

Поскольку содержание экдистероидов в данном растении мало, мы 'делили серьезное внимание разработке схемы выделения экдистероидов. Следуя :хеме 1, нам удалось выделить в индивидуальном виде экдистерон (I), полиподин 3 (II) и 2-дезоксиэкдизон (III). Обнаружение 2-дезоксиэкдизона в растении рода "lienopodium после созревания семян, то есть по завершению вегетационного щкла, является очень интересным фактом с точки зрения биогенеза 1кдистероидов.

Выделенные фитоокдистероиды идентифицированы по физико-химическим ;онстантам, на основании ЙК, ПМР (таблица 1, I и II) и масс-спектральных щнных (таблица 2) и непосредственным сравнением с заведомыми образцами метод ТСХ).

R

он

I-

IH

I. R,=R3-OH; R2=H; И. R,=R2=R3=OH; III. R^R.-R^H

Схема 1

Схема выделения экдисерондов из семян Chenopodium (¿bum L.

Измельченные семена Chenopodium album L.

Экстракция этанолом

Этанольный раствор суммы экстрактивных веществ

Упаривание растворителя, разбавление водой

Очищенный экстракт,

содержащий

фитоэкдистероиды

Обработка гексаном

Водно-этанольный раствор

Экстракция бутанолом, упаривание растворителя

Сумма

фитоэкди стероидов

Колоночная хроматография и рехроматография на Si02_

Индивидуальные экдастероиды 1,11

вэжх

1

Индивидуальный экдистероид III

Таблица 1

ПМР-спектры экдистероидов, выделешгых нз __Chenopodium album L.(5, м.л.) _

Протоны Экдистероиды

экдистерон полиподин В

H-2 4,17 4,26

Н-3 4,21 4,15

Н-7 6,25 6,25

Н-9 3,58 3,62

Н-17 3,00 2,96

Н-22 3,87 3,84

Me-18 1,21 1,19

Me-19 1,06 1,13

Ме-21 1,58 1,57

Ме-26 1,24 1,35

Ме-27 1,24 1,35

Таблица 2

Пути масс-спектромстрического распада экдистероидов, выделенных из Chenopodium album L. (miz)

№ пп Соединение [МГ Высокомассовая область [М-пН20]\ [М-СНз-пН20]4 Разрыв по Сп - С2о связи Разрыв по С2о - С22 связи

стероидный скелет боковая цепь стероидный скелет боковая цепь

1 экдистерон 462 [М- н2ог, 444, 429,426, 411,408, 393 300 143 363,345, 327 99,81

2 полиподин В 478 [М-2Н20]+, 460,442,424 316 143 361, 343 99,81

3 2-дезокси-экдизон 448 430,412,361 284 127 332, 324 99,81

Высокоэффективная жидкостная хроматография фитоэкдистероидов

При разделении минорных компонентов экдистероидов вне зависимости от источника исследования - растения или биологического объекта используется высокоэффективная жидкостная хроматография. Этот метод классически подходит к исследованию экдистероидов, только потому, что в молекуле фитоэкдистероидов присутствует а, р- ненасыщенная карбонильная группа, без которой экдистероиды теряют активность гормонов линьки насекомых, и которая в УФ-спектре имеет максимум в области 244 нм. Применяя различные детекторы, фиксирующие данную область, можно контролировать состав элюента, вытекающего из хроматографической колонки. Чаще всего применяются ультрафиолетовые детекторы электронного захвата, а промышленность выпускает УФ-детекторы при длине волны 254 нм. Это означает, что растворители применяемые для разделения экдистероидов должны быть прозрачными для УФ-излучения в данной области. Так, как для объекта исследований мы заранее выбрали растение с очень малым содержанием экдистероидов, соответственно выбрали и тактику разделения этих веществ на ВЭЖХ. Для этого, проведя разделение с помощью колоночной хроматографии и рехроматографии, мы сузили количество сопутствующих веществ. После приступили к разработке условий разделения на ВЭЖХ. На основе данных ТСХ, предварительно определив полярности разделяемой фракции экдистероидов, для разделения подбирали состав растворителей и тип хроматографических колонок. В начале экспериментировали на обращеннофазных колонках, а далее на нормалыюфазных колонках аналитического образца. Наиболее подходящим в нашем случае оказалась нормальнофазная колонка 2огЬах-зП в системе растворителей хлороформ- изопропиловый спирт - вода. Таким образом, нам удалось выделить 2-дезоксиэкдизон, идентифицированный на основании времени удерживания (ВЭЖХ) и масс-спектра. Это первый случай выделения 2-дезоксиэкдизона из растений рода СЪепоро&ит.

2. Фитоэкдистероиды семян ШтропИсит сагШато1(1е8

В качестве представителя растений, содержащих макроколичества экдистероидов (2% и более), мы выбрали для исследований семена Шгарописшп сагЛах^скБ \Villd [11рп]. Ранее проведенные исследования ИЬаропйсит carthamoides показали высокое содержание экдистерона в семенах по сравнению с остальными частями этого растения.

С помощью разработанного метода были выделены и физико-химическими методами установлены структуры ряда экдистероидов, отличающихся расположением заместителей при С-2, С-3, С-22, С-23, С-24 и С-25. При этом мы разработали методику разделения экдистероидов средней полярности, содержащихся в семенах Миропйсит carthamoides. Совмещая адсорбционную хроматографию с высокоэффективной жидкостной хроматографией, нам удалось наряду с известными экдистероидам и [экдистерон

(I), полииодин В (II), 24 (28)- дегидромакистерон А (IV)] выделить два новых экдистероида, названных нами лестерон (V) и рапистерон D-20-ацетат (VI) Особенно стоит отметить извлечение двух изомерных экдистероидов -макистерона А (VII) и 24-эпимакистерона А (VIII).

24 (28)- Дегидромакистерон А

Фитоэкдистероид (IV), v™^ 3300-3500 (ОН), 1665 см"1 (a,ß-ненасыщенный кетон). В спектре ЯМР 'Н IV при 5,16 и 4,98 м.д. проявляются два уширенных однопропротонных синглета, указывающие на присутствие винилиденового звена в структуре этого соединения. При этом наблюдается смещение в слабое поле сигналов протонов при С-26 и С-27метильных групп на 0,16-0,22 м.д. по сравнению с соответствующими сигналами в ПМР-спектре экдистерона, что также подтверждает присутствие винилиденового звена в боковой цепи при С-24 углеродном атоме.

Этот вывод подтверждают и данные масс-спектра соединения IV. Масс-спектрометрический разрыв боковой цепи соединения IV по С-20-С-22 связи отмечается ионами с m/z 111 и 83. Образование иона с m/z 111 показывает смещение характерного иона с m/z 99 в экдистероне на 12 массовых единиц, а последующий распад этого иона протекает с выделением СО-группы и приводит к иону с m/z 83.

Таким образом, экдистероид IV имеет структуру 5Р-эргоста-7,24(28)-диен-2ß,3ß,14a,20R,22R,25-reKcaoKCH-6-oHa, т.е. является 24(28)-ненасыщенным производным макистерона А.

Лестерон

Фитоэкдистероид (V), аморфный, v™1^ : 3360-3470 (ОН), 1650 см"1 a,ß- ненасыщенный кетон).

В масс-спектре рассматриваемого экдистероида отсутствует пик молекулярного иона, однако в области высоких массовых чисел отмечены кгидратационные ионы с m/z 460, 442, 424, 406, 388 (схема 2). Фрагменты с m/z 579, 361, 343, 325, присущие экдистероидам с 20, 22-диольной группировкой, ;видетельствуют о наличии в стероидном скелете фитоэкдистероида V четырех

гидроксильных групп. Пики ионов с m/z 99 п 81, относящиеся к разрыву боковой цепи, и фрагменты с m/z 316, 379, 361, 343 и 325, характеризующие разрывы в стероидном ядре, свидетельствуют о том, что лестерон имеет диольную группу при С-20-С-22 и претерпевает разрыв по связям С-17-С-20 и С-20-С-22. Указанные фрагменты боковой цепи экдистероида V присущи распаду С-20-С-22 экдистеропа (I). Приведенные фрагменты стероидной части соединения V соответствуют распадам стероидной части туркестерона и рапистерона D. Следовательно, распад масс-спектра соединения V свидетельствует о присутствии четырех гидроксильных групп в стероидной и трех гидроксильных групп в боковой цепи экдистероида V.

В спектре ЯМР 'Н (рис.1) лестерона при 4,25м.д. проявляется сигнал е виде дублет-триплета с константой J=12 и 4 Гц, относящийся к сигнал} аксиального протона, геминального к вторичной гидроксильной группе при С-3 Квартет в области 4,14 м.д. с константой J=3,5 Гц относится к экваториальном} протону, геминальному к вторичной гидроксильной группе при С-2.

Эти данные идентичны известным характеристикам спектра ITMP дл5 рапистерона D и свидетельствуют об а-ориентации гидроксильных групп при CA и С-3. При 4,04 м.д. проявляется в виде дублет-квартета сигнал неизвестной протона, геминального к вторичной гидроксильной группе, под действиек которого сигналы метальных ipynn при С-18 и С-19 экранированы и проявляются при 1,01м.д. и 1,05м.д., соответственно. Этот факт свидетельствует о том, чтс неизвестная гидроксильная группа может быть расположена в цикле С экдистероида V. В цикле С неизвестная гидроксильная группа может находитьс: только при С-11 или С-12 углеродных атомах. Так как сигнал протона при С-Г проявляется также как в рапистероне D и вид сигнала не меняется, следователь» неизвестный протон, проявляющийся в виде дублет-квартета, скорее всеп должен находиться при С-11 позиции.Сравнение сигналов ангулярны: метальных групп при С-18 и С-19, а также протона при С-9 экдистероида V i туркестерона (таблица 3) свидетельствует об ß-ориентации гидроксильно; группы при С-11. Совпадение значений химических сдвигов протонов метильны групп при С-21, С-26 и С-27 туркестерона и экдистероида V, в сочетании данными масс-спектрометрического распада доказывает идентичность боково цепи этих экдистероидов.

Таким образом, согласно имеющимся данным, лестерону можн приписать структуру 5р-холест-7-ен-2а,За, 11р,14а,2011,2211,25-гексагидрокси-б она.

Таблица 3

Химические сдвиги протонов в ПМР- спектре

туркестерона и лестероиа (8,м.д.)__

Положение протонов Туркестероп Лестерон

Н-2 4,45 4,14

Н-3 4,06 4,25

Н-7 6.12 6,11

Н-9 3,75 3,53

Н-11 4.45 4,04

Н-17 - 2.81

Н-22 - 3,72

Ме-18 1,12 1,01

Ме-19 1,18 1,05

Ме-21 1,45 1,44

Ме-26 1,24 1,24

Ме-27 1,24 1,24

Схема 2

Основные пути масс-спектрометрического распада лестерона

ОН

т/г37Э |-Н20 т/г361 |-Н20

т/г343 |-Н20

т/г325

1-4 Н20] т/г424

[М-4Н20-Ме]

\ +

[М-5Н20] т/г406

/1-5Н20-Ме]+ т/2391

1-6НгО]

т/г388

[М-6Н20-Ме] гЫгЪП

Рапистерон Р — 20 - ацетат

Фитоэкдистероид^1),т. пл. 225-227° (этидацетат-метанол),[а.]20в+36,5±20 (с 0,7; метанол), утг„ см"1: 3300-3400 (ОН), 1662(а,р-ненасыгценный кетон), 1715 и 1285(сложный эфир).

ЯМР 'Н-епектр (ряс. 2) этого соединения содержит сигналы протонов при 4,14, 4,25 и 3,84м.д., геминалышх к гидроксильным группам при С-2, С-3 и С-22, соответственно. В области сигналов метальных групп проявляются синглеты при

1,12 (СНз-18), 1,18(СН3-19), 1,35(СН3-26, СН3-27), 1,56(СНГ21), а также

дополнительный сигнал при 1,92м.д., где обычно проявляются сигналы, соответствующие ацетатной группе. Поскольку сигналы всех вторичных гидроксильных групп находятся на своих местах, ацетатная группа может быть расположена только при третичной гидроксильпой группе.

В масс-спектре экдистероида VI молекулярный ион отсутствует, а в области высоких массовых чисел обнаруживаются пики ионов с т/г 520, 505, 502, 487, 478, 469, 460, 451 (схема 3), соответствующие отщеплепию от молекулярного иона от одного до нескольких молекул воды и метальных групп.

Распад связи С-20-С-22 экдистероида VI характеризуется ионом с т/г 421, что на 42 м.е. больше, чем соответствующий разрыв связи в масс-спектре рапистерона Б, в котором отмечается подобный разрыв в виде иона с т/г 379.

Распад по связи С-17-С-20 экдистероида VI характеризуется ионом с т/г 316, что подтверждает местоположение ацетатной группы приС-20.

Таким образом, соединение VI имеет структуру 5р-холест-7-ен-2а,3а,5,14а,2211,25-гексагидрокси-6-он-20-ацетата.

Ас

ОН

НО-^

НО'

НО

'Н

О

Схема 3

Основные пути масс-спектрометрического распада рапнстерон D-20- ацетата

0

т/2421

1 -Me m/z406

|-Н20

m/z403

[М-1Н20] m/z 520

I

[M-H20-Me]T

m/z505 * +

-2Н20] m/z502

i +

1-2Н20-Ме] т/2487

I

[М-АсОН]+ m/z478

[М-ЗН20-Ме] m/z469

[М-Ас0Н-Н20] m/z460

[М-4Н20-Ме] m/z451

Макпстерон Л

Фитоэкдистероид VII, т. пл. 261-263° (метанол-этплацетат). В масс-:пектре этого соединения проявляется пик молекулярного иона с m/z 494. Дегидратанионные ионы отмечены в области высоких массовых чисел с m/z 476, 158,440, 422.Распад связи С-20-С-22 экдистероида VII показывают ионы с m/z 563, 345 и 327, которые соответствуют таковому разрыву в экдистероне (I). Травильность этого вывода подтверждает распад связи С-17-С-20, когда фоявляется ион с m/z 300. Л ионы с m/z 113 и 95 свидетельствуют о присутствии юполнительной метальной группы [по сравнению с экдистероном (I)] в юединенпи VII.

Присутствие в спектре ЯМР 'Н дублетного сигнала метнлыюй группы при ,05 м.д. и двух сигналов метальных групп (СН3-26 и СН3-27) при 1,28 и 1,30 м.д., т>гда как в спектре экдистерона (I) сигналы этих метальных групп совпадают, юказывает наличие метальной группы в VII при С-24. Изучение данных спектра 5МР ПС (таблица 4) с использованием J-модуляции экдистероида VII годтверждает структуру макистерона А.

Таблица 4

Спектр ЯМР ,3С макистерона Л (C5D5N, 100 МГц , 8,м.д.)

С-1 37,9 С-11 21,1 С-21 21,5

С-2 68,0 С-12 31,7 С-22 74,7

с-з 68.0 С-13 48,1 С-23 34.5

С-4 32,4 С-14 84,2 С-24 41,7

С-5 51,4 С-15 32.0 С-25 72,1

С-б 203,5 С-16 21,3 С-26 28,2

С-1 121,7 С-17 49,9 С-27 26,4

С-8 166,0 С-18 17,9 С-28 15,4

С-9 34,5 С-19 24,4

С-10 38,6 С-20 76,9

Применение ВЭЖХ для разделения изомерных экдистероидов

При разделении экдистероидов семян Leuzea carthamoides мы обнаружили фракции, состоящие из двух или трех экдистероидов, трудно разделяемых на колошах с сшшкагелем. Данный вывод подтверждался применением двумерной ТСХ. С помощью ВЭЖХ [колонка Zorbax - sil (250 мм х 9,4мм) в системе растворителей дихлорметан-изопропиловый спирт-вода] нам удалось разделить фракцию из двух экдистероидов, один из которых оказался макистероном А, £ второй - его изомером 24-эпимакистероном А. Идентичность масс-спектрое обоих соединениий и время выхода (ВЭЖХ) свидетельствуют о структуре соединения VIII как 24-эпимакистероне А.

Исследование биологической активности выделенных экдистероидов

Экдистерон и нолиподин В, выделенные из Chenopodium album и Leuzc; carthamoides были апробированы в качестве противоварроатозного препарата.

Открытый одновозрастный расплод рабочих пчел ( 8 дней после откладю яйца) был обработан водными растворами экдистерона и полиподина В i концентрации ЗхЮ"2 мг/л. В качестве контроля использовался необработанны! расшюд того же возраста. Количество клещей подсчитывали при вскрытии 20-ti дневного расплода (таблица 5).

Таблица 5

Заклещеванность пчелиного расплода, обработанного экдистероном и полшюдииом В

Расплод Количество Количество Заклещеванность,

куколок, шт. клещей, шт. %

контрольный 181 106 59,1

Продолжение таблицы 5

эбработанный 221 47 21,7

экдистероном

збработанный 190 93 48,9

толиподином В

Отмечено более чем двухкратное снижение (на 37,4%) заклещеванности асплода, обработанного водным раствором экдистерона, по сравнению с онтрольным опытом. В случае обработки водным раствором полиподина В акже наблюдалось снижение заклещеванности, однако эта разница была еныней (10,2%).

При визуальном сравнении с контрольным расплодом не обнаружено родств и отклонений обработанных куколок. При взвешивании также не ыявлено достоверных различий между средней массой контрольных уколок(106,0+1,72мг) и обработанных экдистероном (108,57±0,94мг) и олиподином В (107,3+1,01мг).

Таким образом, обработка пчелиного расплода фитоэкдистероидами не ызывала уродств и отклонений в постэмбриональном развитии рабочих пчел. Три этом наблюдалось снижение пораженное™ расплода эктопаразитом (едоносных пчел клешем Varroajacobsoni.

Выводы

1.Из растений Chenopodium album L. и Rhaponticum carthamoides Willd. Iljin], содержащих от 0,001 до 2% смеси экдистероидов выделены и щентифицированы стрзктуры известных экдистероидов - экдистерона, юлиподина В, 2-дезоксиэкдизона, 24(28)-дегидромакистерона А, макистерона А, !4-эпимакистерона А, а также установлены структуры двух новых экдистероидов - лестерона и рапистерона D-20-ацетата.

2. С использованием ВЭЖХ разработана и реализована схема выделения «шорных экдистероидов из растения Chenopodium album L.

3. Впервые из растений семейства Chenopodiaceae выделен и идентифицирован 2- дезоксиэкдизон.

4. Впервые из растения рода Rhaponticum выделены и идентифицированы «омерные С-28 экдистероиды - макистерон А и 24-эпимакистерон А.

5. С помощью спектральных методов, а также сравнением с известными ждистероидами установлены структуры новых экдистероидов - лестерона и запистерона D-20-ацетата.

Список работ по теме диссертации

1.Borovikova Е.В., Baltayev U.A. Lesterone, a phytoecdysteroid from seeds of Leuzea carthamoides // Химия природных соединений, 1999, №2, c.205-206. (опубликовано на англ.языке)

2.Боровикова Е.Б., Шангараева Г.С., Балтаев У.А. Рапистерон D-20-ацетат из семян Leuzea carthamoides. // Химия природных соединений, 1999, №2, с.207-

3.Боровикова Е.Б., Шангараева Г.С., Балтаев У.А. Новые фитоэкдистероиды семян Leuzea carthamoides и их роль в жизнедеятельности полезных насекомых. // Химия природных соединений, Спец. выпуск. Материалы конференции, посвященной памяти академика Юнусова С.Ю. / Ташкент, 17-19 марта 1999, с.ЗЗ.

4.Borovikova Е.В., Shangaraeva G.S., Lafont R., Baltayev U.A.Phytoecdysteroids from Rhaponticum and Chenopodium// International Conference „2000 years of Natural Products Research- Past, Present and Future» (book of abstracts) /Amsterdam, 26-30 July 1999,P.460.

5. Балтаев У.А, Галяутдинов И.В., Боровикова Е.Б., Шангараева Г.С., Одиноков В.Н Технология выделения из растительного сырья экдистероидов и их применение в пчеловодстве. // Тезисы докладов 5-ой Международной научно-технической конференции „ Наукоемкие химические технологии -98", /Ярославль, 19-21 мая 1998, 206-207.

6. Baltayev U.A., Galiautdinov I.V., Borovikova Е.В., Shangaraeva G.S. New data in investigation of phytoecdysteroids isolated from Compositae, Chenopodiaceae and Caryophyllaceae and study of their influence on the development of Apis mellifera and Varroa jacobsoni // Abstracts of XIIIth Ecdysone Workshop /Jena, 27-31 July 1998, №14.

7. Балтаев У.А., Галяутдинов И.В.. Боровикова Е.Б., Одиноков В.Н. Фитоэкдистероиды растений рода Serratula и Chenopodium. Выделение и трансформации. //Тезисы докладов III Всероссийского совещания. Лесохимия и органический синтез. / Сыктывкар, 28 сентября-2 октября 1998, с.28.

8.Baltayev U.A., Galiautdinov I.V., Borovikova Е.В., Shangaraeva G.S., Odinokov V.N., Dzhemilev U.M. Ecdysteroids of South Ural Plants. Isolation, Transformation and Biological Activity // International Conference on Natural Products and Physiological Active Substances (book of abstracts) / Novosibirsk, November 30-December 6 1998, p.29.

9.Kakpakov Vitali Т., Baltayev Umirzak A., Shangaraeva Guzel S., Borovikova Elena B. Ontoregulators in honeybee life. II XXXVI International Congress of APIMONDIA (book of abstracts)/, Vancouver, 12-18 September 1999.

10.Положительное решение от 2.06.1999 по заявке № 99104684 на „Способ снижения заклещеванности пчелиного расплода» ( Шангараева Г.С., Боровикова Е.Б., Балтаев У.А.)

208.