Изучение взаимодействия структурных и пространственных аналогов эстрадиола с рецепторной системой матки тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

ВВЕДЕН Ж

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. ЭСТРАДИОЛЬНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ МЛЕКОПИТАЮЩИХ.

Глава I. РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ЭСТРАДИОЛА В ОРГАНИЗМЕ

Глава П. СВОЙСТВА ЦИТ0ПЛАЗМАТИЧЕСК0Г0 РЕЦЕПТОРА МАТКИ

П.1. Физико-химические свойства рецептора и его очистка. II

П.2. Сродство эстрадиола к рецептору и способы его определения

П.З. Кинетические и термодинамические параметры связывания эстрадиола с рецептором

ПЛ. Специфичность эстрадиол-рецепторного взаимодействия

Глава Ш. ЭСТРАДИОЛЬНЫЙ РЕЦЕПТОР ЯДЕР МАТКИ

Ш.1. Двухстадийная модель действия эстрогенов

Ш.2. Активация и трансформация цитосольного рецептора . 53 Ш.З. Транслокация эстрадиол-рецепторного комплекса в ядро

ШЛ. Локализация рецептора в ядре матки

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

I. СВЯЗЫВАНИЕ СТЕРОИДОВ С ЭСТРАДИОЛЪНЫМИ РЕЦЕПТОРАМИ

ЦИТОПЛАЗМЫ И ЯДЕР МАТКИ

1.1. Параметры связывания [%] эстрадиола

1.2. Зависимость рецепторного связывания эстрогенных стероидов от их структуры а) Способы определения конкурентной способности б) Сравнение специфичности связывания с цитосольным и ядерным рецепторами .84б) Свойства цитосольного рецептора матки разных животных г) Сравнение рецепторного связывания и эстрогенной активности аналогов эстрадиола д) Изучение температурной зависимости связывания стероидов с цитосолъным рецептором

П. ЯДЕРНАЯ ТРАНСЛОКАЦИЯ АНАЛОГОВ ЭСТРАДИОЛА

В ЕЕСКЛЕТОЧНОЙ СИСТЕМЕ

П.1. Изучение специфичности переноса стероидов в ядра матки

П.2. Специфичность цитоплазматического рецептора при переносе стероидов

Ш. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СРОДСТВА СТЕРОИД-РЕЦЕПТОРНЫХ КОМПЛЕКСОВ

К ЯДРАМ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ВЫВОДЫ

Гормоны это выделяемые железами внутренней секреции вещества, роль которых заключается в регуляции протекания множества различных процессов жизнедеятельности организмов.

Половые гормоны, синтезируемые гонадами, регулируют у высших животных и человека рост и физиологические функции органов размножения: стимулируют развитие вторичных половых признаков, управляют половыми циклами, обеспечивают оплодотворение, нормальное протекание беременности и лактацию. Помимо этого половые гормоны оказывают действие на многие другие функции организма, например, на синтез белков мышечной ткани (анаболический эффект), на обмен липи-дов и даже на эмоциональное состояние /1.2/.

Строение половых гормонов было изучено в 30-х годах нашего века и было установлено, что они относятся к классу циклопентанпер-гидрофенантрена и представляют собой стероидные соединения. Вскоре после этого были предложены различные способы как частичного, так и полного их синтеза. Эти успехи химиков-органиков имели кроме научного и большое практическое значение, -сделав эти соединения доступными в больших количествах. Женские половые гормоны, эстрогены, нашли применение в медицине при заместительной терапии, при лечении расстройств половой сферы, в акушерстве и гинекологии, при воздействии на опухоли, вызванные нарушением гормонального баланса в организме. Они стали использоваться также в ветеринарии и животноводстве для повышения плодовитости животных и увеличения их продуктивности. Развитие методов частичного и полного синтеза позволило получать соединения, не встречающиеся в природе, и вести поиск новых лекарственных средств направленного действия.

В лаборатории химии стероидов ИЕХ им.М.М.Шемякина АН СССР в конце 50-х - начале 60-х годов был разработан метод полного синтеза эстрогенов и 19-норстероидов /3/: п = I; 2

Этот метод позволил получать как природный женский половой гормон эстрадиол, так и его структурные и пространственные аналоги.

Было проведено широкое исследование как химических свойств, так и биологической активности в ряду синтезированных аналогов. Особый интерес представляло изучение реакционной способности функциональных групп при С—3 и С-17 атомах в молекуле эстра-1,3,5, (Ю)-триена, поскольку именно по этим группировкам и осуществляются метаболические превращения эстрогенов в организме. В ходе исследования кинетики химического ( ) и ферментативного (17/5- эстрадиолдегидрогеназа из плаценты человека) окисления

17/9- оксигруппы показано, что реакционная способность 17-гидро-ксильной группы определяется размером кольца т> , характером сочленения колец В/С и природой заместителя при С-3. Корреляция между электронной природой заместителя при С-3 и константой скорости окисления ОН-группы при С-17 была объяснена открытым Бартоном дистанционным эффектом электронной природы и подтверждена данными УФ-спектроскопии /4-11/. Были обнаружены и различия в рКа в ряду 3-оксипроизводных эстратриенов в зависимости от структурных изменений в молекуле эстратриена, что может быть следствием дистанционного эффекта от кольца Б к кольцу А конформационной природы. Наличие линейной корреляции между константами скорости окисления к2 и константой диссоциации Кддсс. подтвердило существование взаимного влияния заместителей в молекуле эстрогенов, определяющее реакционную способность молекулы в целом. При сопоставлении констант химического и ферментативного окисления для изученных::аналогов 17/3- оксиэстратриенов была обнаружена линейная корреляция значений максимальной скорости ( ) и скорости химического окисления ( к2). На основании этих данных сделан вывод, что основной вклад в скорость распада фермент-субстратного комплекса вносит реакционная способность самого субстрата, обусловленная дистанционным эффектом заместителей от кольца А к кольцу б и обратно.

Продолжением этих экспериментов стала данная работа, посвященная исследованию возможности проявления дистанционного эффекта при образовании эстроген-рецепторного комплекса.

На основании современных представлений о механизме действия эстрогенов эстрадиол проявляет свое специфическое гормональное действие в органах-мишенях, проникая внутрь клетки и оказывая влияние на процессы синтеза белка. Это характерно для всех стероидных гормонов и отличает их от белковых и пептидных гормонов, которые воздействуют на уровне клеточных мембран. Ключевым этапом является образование эстрадиолом комплексов со специфическими внутриклеточными белками-рецепторами. Изучение динамики связывания [б,7 -^Н J эстрадаола в клетке матки in vivo я vitro показало что эстрадиол вначале связывается с цитоплазматическим рецептором и затем появляется в ядре, где его взаимодействие с хроматином инициирует различные клеточные процессы.

На основании этих представлений была поставлена задача исследовать взаимодействие структурных и пространственных аналогов эст-радиола, синтезированных в нашей лаборатории, с рецепторнои системой матки на разных этапах функционирования рецепторов (цито-плазма-транслокацин-ядро), чтобы помимо корреляции между структурой и функцией этих аналогов изучить, зависит ли специфичность рецепторов от места их функционирования. Таким образом, целью работы было, с одной стороны, изучение рецепторного связывания производных эстрадаола в зависимости от строения молекулы стероида ("структура-функция"), с другой - сравнение специфичности разных стадий взаимодействия эстрогена с рецепторами, что могло бы позволять лучше понять механизм действия эстрадаола»

- 8

ВЫВОДЫ

1. Показано, что эстрадиольные рецепторы матки имеют близкие свойства независимо от того, находятся ли они в ядре или в цитоплазме клетки.

2. Установлено, что пространственные и структурные аналоги эстрадиола являются конкурентными ингибиторами связывания рн]эстрадиола как с цитосольными, так и с ядерными рецепторами.

3. Предложены формулы расчёта ^ конкурентных ингибиторов и показано, что три независимых способа определения К^- дают одинаковый результат.

Сделан вывод о существенном вкладе гидрофобных сил в связывание эстрогенов с рецепторами.

5. Показано, что при связывании аналогов эстрадиола с рецепторами, также как и в химических и ферментативных реакциях, большую роль играет реакционная способность функциональных групп, обусловленная взаимным влиянием заместителей в кольцах А и б (эффект дальнодействия).

6. Показано, что при функционировании полной рецепторной системы специфичность цитоплазматического рецептора и ядерного включения совпадают, но отличаются от специфичности эстроген-рецепторного взаимодействия в цитосоле.

7. Установлено отсутствие высокой лигандной специфичности при взаимодействии цитоплазматических рецепторных комплексов с ядрами.

8. Показано отличие свойств рецепторных систем матки крысы от свойств рецепторов матки кролика и морской свинки.

включения состава среды для гомогенизации тка

- 134 буфере CT), 2) б трис-буфере, содержавшем 0,15 М KCl (ТК), 3) в трис-буфере, содержавшем 1,5 мМ ЬДТА (ТЕ). Наибольшее включение наблюдалось в случае ТЕ-буфера (рис. 25). В экспериментах Ьрехера я др.- /20о, 207/, работавших с маткой крысы, добавление ЬДТА приводило, наоборот, к уменьшению ядерного связывания. Присутствие же 0,15 М KCl повышало это связывание. В наших опытах ЭДТА способствовал связыванию эстрадиола с ядрами, тогда как KCl в физиологической концентрации понижал ядерное включение. Трудно назвать причину такого расхождения, поскольку наши опыты с гомо-генатом матки крысы привели к тем же результатам, что и с маткой кролике. Из временной зависимости ядерного связывания видно, что включение в ядра - быстрый процесс и завершается практически пол ностью за 30 мин.

Рис.25 Ядерная транслокация [^эстрадиола в гоиогенате матки кролика при 25°.

Гомогенизация ткани проводилась в среде: трис-буфер (I), трис-ЭДТА (2), трис-0,15 М КС1(3)

Включение [^Н эстрадиола в ядра матки зависит от температуры (рис. 26). Наибольшее связывание наблюдалось при 25°, увеличение температуры до 37° приводило к снижению ядерного включения Значительное связывание [^Н ] эстрадиола с ядрами происходило при 4°, причем оно было не намного меньше, чем связывание при 37° кп/иде

6000

WOO

Рис.26. Ядерная транслокация [3н]эстрадиола в гомогенате матки кролика при гооо" 25° (I) и 4° (2).

Гомогенизация ткани в трис-ЭДТА буфере (1/36 г ткани/мл). е, чес

Изучение связывания эстрадиола с ядрами при различных концентрациях гомогената и дозах j эстрадиола (рис. 27) показало, что на практике удобно пользоваться препаратом ткани, полученным гомогенизацией в 30-кратном объеме (мл/г). Лри этом происходит небольшой расход ткани и в то же время при насыщающей дозе [3Н j эстрадиола (0,4 нг) связывание гормона с ядрами достаточно высокое для изучения конкурентного ингибирования связывания (6000 - 10000 имп-мин для KCI-экстракта ядер). Количество j эстрадиола, экстрагированного из ядер раствором KCl, составляло при этом 15-30$ от обшей радиоактивности, внесенной в пробу. -.

Рис.27 Зависимость ядерной транслокации при 25° от концентрации гомогената (а) и [3Н]эстрадиола (б) а) матку кролика гомогенизировали в различных объёмах ТЕ-буфера: I/I8 (I), 1/36 (2) и 1/90 (3) г ткани/мл; б) гомогенат (концентрация - 1/36) инкубировали с различными дозами [ Н]эстрадиола 2 часа; точка Т - транслокация в гомогенате, предварительно прогретом 30 мин при 60°.

- 136

Связывание эстрадиола с ядрами было специфичным для эстрогенов, так как очень высокие дозы тестостерона и прогестерона (5 мкМ) не ингибировали его. Об участии в ядерной транслокации клеточных белков говорит значительное снижение связывания после прогревания гомогената при 60°. б) Изучение специфичности ядерного включения.

В этом эксперименте инкубационные пробы содержали I мл гомогената матки и 0,2 мл раствора эстрадиола или смеси эстрадиола с немеченым стероидом. Инкубацию проводили при 25° в течение I часа. Осаждение ддерно-миофибриллярной фракции, промывку, экстракцию и измерение радиоактивности экстракта проводили так, как описано в разделе За. На основании полученных данных строили графики зависимости ингибирования связывания [%] эстрадиола от дозы конкурента. в) Определение специфичности цитоплазматического рецептора.

Супернатант, полученный после центрифугирования проб, в которых гомогенат инкубировали со стероидами, переносили в другие пробирки и добавляли 0,05 мл суспензии угля и декстрана для адсорбции свободных стероидо. После инкубации при 4° в течение 15 мин уголь удаляли центрифугированием (ЦЛР, откидной ротор, 3000 об/мин, 15 мин), отбирали аликвоты 0,8 мл, которые .смешивали с 8 мл сцинтиллятора для измерения количества связанного [% ] эстрадиола. На основании полученных данных строили графики зависимости ингибирования связывания J эстрадиола от дозы конкурента.

4. Измерение связывания стероид-рецепторных комплексов с ядрами в реконструированной системе. а) Получение цитосола, насыщенного стероидом.

Цитосол матки (концентрация белка 2-3 мг/мл) инкубировали с насыщающей концентрацией рН ] эстрадиола или немеченого стероида (I мл цитосола + 0,2 мл раствора стероида) при 4° в течение 2 часов. Были использованы следующие концентрации стероидов: [%Jэстрадиол и немеченый В -эстрадиол (I) - 20 яг/мл; Б-8«¿-эстрадиол (УШ) - 50 нг/мл; Б -эстрон (П) и © -эстриол (Ш) - 1000 нг/мл;

I)-3-дезоксиэстрадиол (1У), с -17-дезоксиэстрадиол (У) и ъ -эстрадиол (ЛП) - 10000 нг/мл. По окончании инкубации добавляли 0,05 мл 6%-суспензии угля. Пробы выдерживали с углем 15 мин при 0° и удаляли уголь центрифугированием. Полученный супернатант использовали как "комплексы стероидов". б) Связывание стероид-рецепторных комплексов с ядрами.

I мл "комплексов [3Н ] эстрадиола" смешивали с I мл цитосола или ТЁ-буфера, добавляли 0,5 мл суспензии ядер и инкубировали

1 ч при 4° или 25°. Эта проба служила контролем связывания.

В других пробах инкубировали смесь I мл "комплексов эстрадиола", I мл "комплексов С-эстрадиола" (или немеченого аналога) и 0,5 мл суспензии ядер.

После инкубации смеси осаждали ядра, промывали их (I мл ТЕ,

2 раза) и экстрагировали, как описано в разделе За.

5. Определение белка и ДНК.

Содержание белка в пробах определяли по методу Лоури /258/. В качестве белкового стандарта при построении калибровочной кривой использовали бычий сывороточный альбумин.

ДНК в пробах определяли по методу Бертона /259/. В качестве стандарта для калибровки применяли препарат ДНК тимуса телят.

6. Определение эстрогенной активности эстрадиола и его аналогов.

Эстрогенная активность изучавшихся соединений была определена в группе фармакологии Института биоорганяческой химии им. М.М.Ше мякина АН СССР.

Определение эстрогенной активности проводили: по методу Аллен-Дойзи - на овариэктомированных самках мышей-альбиносов весом 20-22 г; по методу Рубина - на неполовозрелых самках крыс весом 35-40 г.

Стероиды в различных дозах вводили экспериментальным животным подкожно, в виде раствора в персиковом масле, в течение 2-х •дней (метод Аллен-Дойзи) или 3-х дней (метод Рубина). Стероиды вводили в строго определенное время суток - в 10 часов утра.

Оценку эстрогенной активности проводили: через 24, 32, 48, 72, 96 часов после первой инъекции по вагинальным мазкам, и для каждого соединения определяли пороговую дозу, то есть дозу, вызывающую эструс у 50$ экспериментальных животных (метод Аллен-Дойзи); через 24 часа после последней инъекции по весу матки, и для каждого соединения определяли дозу, вызывающую увеличение веса матки в 2 раза по сравнению с контролем, то есть при инъекции персикового масла без стероида (метод Рубина).

1. "Физиология эндокринной системы" Л.: Наука, 1979, с.354-371.2. "Нормальная физиология" (ред. А.В.Коробков) М.: Высшая школа, 1980

2. Ananchenko S.N., T0rgov I.V. New synthesis of estrone, d,l-8-iso-oestrone and d,l-I9-nortestosterone. -Tetrahedron Lett., 1963, N23, p.l553-*558.

3. Егорова B.B«, Захарычев A.B., Ананченко C.H., Торгов И.В. Структура и реакционная способность в стероидах. Сообщение 3. Кинетика окисления производных эстрадиола-3,17/3 и D -гомо-эстрадиола-3,17а/3. И£в. АН СССР, серия хим., 1971, J*5,с.987-993.

4. Егорова В.В., Захарычев A.B., Ананченко С.Н. Кинетика окисления 17/0-оксиэстранов 17/3-эстрадиолдегидрогеназой из плаценты человека. Биохимия, I971, т.36, с.1183-1188.

5. Егорова В.В., Ананченко С.Н., Захарычев A.B., Торгов И.В. Исследование кинетики окисления I^-ОН-группы в ряду производных эстрадиола и р-гомоэстрадиола. Изв. Ali СССР, серия хим., 1969, *4, с.943-945.

6. Егорова В.В., Захарычев A.B., Ананченко С.Н. Структура и реакционная способность стероидов. Кинетика окисления эстрадиола--3,17/3 и его 3-метилового эфира ферментным препаратом из плаценты человека. Биохимия, 1970, т.35, с.895-900.

7. Егорова В.В., Захарычев A.B., Ананченко С.Н. Зависимость константы диссоциации фенольных стероидов от строения.

8. Изв. АН СССР, серия хим., 1972, »3, с.726-728.

9. Egorova V.V., Zakharychev A.V., Ananchenko S.N.

10. Structure and reactivity of steroids.- VI. Long range effects in a series of A^'^^-estratriene compounds. Tetrahedron, 1975, v.29, p.501-507.

11. Ю. Сорокина И.Б., Баркова Т.И., Захарычев А.В., Чигирь Р.Н., Ананченко С.Н., Торгов И.В. Эстрогенная и противоопухолевая активность в ряду трансформированных аналогов эст-рона и эстрадиола. Изв. АН СССР, серия биол., 1973, »5, с. 664-670.

12. Коган Г.А«, Захарычев А.В., Дешко Т.Н., Егорова В.В., Ананченко С.Н. Исследование дистанционного влияния удалённых заместителей в ряду производных эстрона с помощью УФ-спектров поглощения и кругового дихроизма. -Ж. орг. химии, 1973, т.43, с.2321-2327.

13. KingR.J.B., Mainwaring W.I.P. Steroid-cell interactions, Butterworth, London, 1974, p.190-254.15* Westphal U. Steroid-protein interaction, Springer Verlag, New Y0rk, 1971

14. Notebook W.D., G0rski J. Stereospecific binding of estrogens in the rat uterus.- Arch. Biochem. Biophys., 1965» v.III, p.559-568.

15. Jensen E.V., DeS0mbre E.H., Hurst D.J., Kawashima T., Jungblut P.W. Estrogen-receptor interactions in target tissues. -Archives d1Anatomie microscopique, 1967, tome 56, suppl. aun° 3-4, P.547-569.

16. Peck E.J., Burgner J., Clark J.H. Estrophilic binding sites of the uterus. Relation to uptake and retention of estradiolin vitro. Biochemistry, 1973, v.12, p.4596-4603.

17. Müller R.E., W0tiz H.H. Kinetics 0f estradiol entry into uterine cells. Endocrinology, 1979, v.105, p.II07-IH4.

18. Jensen E.V., DeS0mbre E.R. Estrogens and progestins. In Biochemical actions 0f hormones, 1972, v.2, p.212-255.

19. Jensen E.V. Mechanism of estrogen action in relation to carcinogenesis. Ppoc» Canadian Cancer Res. C0nf., I965, v.6,p.143-146

20. Jensen E.V., Suzuki T., Kawashima T., Stumpf W.E., Jungblut P.W. DeS0mbre E.R, A two-step mechanism for the interaction of estradiol with rat uterus, Proc.Nat.Acad.Sci. USA, I968, v.59,p.632-638.

21. Adv. in the Bi0sci., v.7, p.75-96.

22. Talwar G.P., Segal S.J., Evans A,, Davids0n O.W. The binding of estradiol in uterus: a mechanism for derepression of RNA synthesis. Pr0c.Nat.Acad.Sci. USA, 1964, v.52, p.1059-1066.

23. Toft D., G0rski J. A receptor molecule for estrogens: isolation from the rat uterus and preliminary characterization. -Proc.Nat.Acad.Sci. USA, I966, v.55, p.1574-1581.

24. Erdos T. Properties of a uterine oestradiol receptor. -Biochem.Biophys.Ees.C0mmun., I968, v.52, p.338-34-3.

25. R0chef0rt H., Baulieu E.-E. Effect of KC1, CaCl2, temperature and oestradiol on the uterine cytosol receptor of oestradiol. -Biochimie, I97I, v.53, p.893-907.

26. Notides A.C., Hamilton D.E., Auer H.E. A kinetic analysis of the estrogen receptor transformation. J.Biol.Chem., 1975, v.250, p.3945-3950L

27. Notides A.C. Binding affinity and specificity of the estrogen receptor of the rat uterus and anterior pituitary. -Endocrinology, 1970, v.87, p.987-992.

28. K0renman S.G., Rao B.R. Reversible disaggregation of the cyto-sol-estrogen binding protein of uterine cytosol« B?oc.Nat. Acad.Sci.USA, 1968, v.61, p.1028-1027.

29. Rochefort H., Baulieu E.-E. New in vitro studies of estradiol binding in castrated rat uterus. Endocrinology, 1969, v.84, p.I08-116.

30. Giannopoulos G., G0rski J. Estrogen-binding protein of the rat uterus. Different molecular forms associated with nuclear uptake of estradiol. J.Biol.Chem., 1971, v.246, p.2530-2536.

31. Stancel G.M., Leung K.M.iP., G0rski J. Estrogen receptors in the rat uterus. Multiple forms produced by concentration-dependent aggregation. Biochemistry, 1973, v.12, p.2130-2137.

32. Chamness G.C., Mc Guire W.L. Estrogen receptors in the rat uterus. Physiological forms and artifacts. Biochemistry, 1972, v.II, p.2466-2472.

33. Puca G.A., N0la E., Sica V., Bresciani F. Estrogen-binding proteins of calf uterus. Partial purification and preliminary characterization of two cytoplasmic proteins, Biochemistry, 1971, v.10, p.3769-3780»

34. DeS0mbre E.R,, Puca G.A., Jensen E.V. Purification of an estro-philic protein from calf uterus. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1969» v.64, p.148-154.

35. Sherman M.E., Atienza S.B.P., Shansky J.R., H0ffman L.M. Progesterone receptors of chick oviduct. Steroid-binding "subunit" formed with divalent cations. J.Biol.Chem., 1974, v.249, p.5351-5363.

36. Puca G.A., Medici N., M0ncharm0nt B., N0la E., Sica V# Estrogen receptor of calf uterus: an easy and fast purification procedure. J.Steroid Biochem., 1980, v.12, p.T05-H3.

37. Sica V., N0la E.f Puca G.A., Bresciani F. Estrogen binding proteins of calf uterus. Inhibition of aggregation and dissociation of receptor by chemical perturbation with NaSCH". -Biochemistry, 1976, v.I5, p.I9I5-I923.

38. Auricchio F., Rotondi A., Schiavone E.f Bresciani F. Oestrogen receptor of mammary gland. Inhibition of aggregation and characterization of receptor from lactating gland in the presenceof sodium bromide. Bi0chem.J,, I978, v.169, p.481-488.

39. Rat R.L., Vallet-Str0uve' C., Erdos T. The properties 0f a uterine oestradiol-receptor after limited proteolysis. Biochimie, 1974, v. 56, p.1387-1394.

40. Carlson KaE., Sun L.-H.K., Katzenellenbogen J.A. Characterization of trypsin-treated f0rms 0f the estrogen receptor from rat and lamb uterus. Biochemistry, 1977, v.16, p.4288-4296.

41. Notides A.C., Hamilton D.E., Rudolph J.H. Estrogen-binding proteins of the human uterus. Bi0chim. et biophys. acta, 1972, v.271, p.214-224.

42. Lovgren T., Petterson K., ZoUVonen I., Punnonen R. Binding characteristics of estrone, estradiol and estriol to the myo-metrial estrogen receptor. J.Steroid Bi0chem., 1978, v.9, p.803-809•

43. Schneider S.L,, Dao T.L. Effect of Ca2+ and salt 0n forms 0f estradiol cytoplasmic receptor in human neoplastic breast tissue. Cancer Res,, 1977, v.37, p.382-387.

44. Carlstedt-Duke J., Wränge ö., Dahlberg E., Gustafsson J.-A^r, Högberg B. Transformation of the glucocorticoid receptor in rat liver cytosol by lysosomal enzymes. J.Biol.Chem,, 1979» v.254, P.I537-I559.

45. V0nderhaar B.K., Kim U.H., Mueller G.C. The subunit character of soluble estrogen receptors from rat uteri and their modification in vitro. Biochim. et biophys. acta, 1970, v,2l5,p.125-153.

46. Agarwal M.K., E0ssier B.C. Multiplicity of steroid hormonereceptors. IFEBS Lett., 1977, v.82, p.165-168.

47. Смирнов A.H. Проблема гетерогенности рецепторов стероидных гормонов. Пробл. эндокринол., 1978, т.24, №6, с.98-107.

48. Schräder W.T., Seleznev Yu.,M., Vedeckis W.V., O'Malley B.W. Subunit structure of steroid receptors. In Gene Regulation by Steroid Hormones, A.K.E0y, J.H.Clark, eds, Springer-Verlag, 1980, p.78-88.

49. Greene G.L., Cl0ss L.E., Fleming H., DeS0mbre E.R., Jensen E.V. Antibodies to estrogen receptor: immunochemical similarity of estrophylin from various mammalian species. Ptoc.Nat.Acad. Sei.USA, 1977, V.74, p.3681-3685.

50. Sica V., Parikh I., N0la E., Puca G.A., Cuatrecesas P. Affinity chromatography and the purification of estrogen receptor. -J.Biol.Chem., 1973, v.248, p.654-3-6558.

51. Schräder W.T., Kuhn E.W., o'Malley B.W. Pr0gester0ne-binding components of chick oviduct. Eeceptor subunit protein purified to apparent homogeneity fr0m laying hen oviducts. J.Bi0l. Chem., 1977, v.252, p.299-307.

52. Puca G.A., N0la E., Sica V., Bresciani F. Estrogen-binding proteins of calf uterus. Interrelationship "between various forms and identification of a receptor-transforming factor. -Biochemistry, 1972, v.II, p.4157-4165.

53. Puca G.A., Nola E., Sica V., Bresciani F. Purification 0f estrogen receptors. In Methods in enzymology, 1975, V.36A,p.331-549.

54. DeS0mbre E.R., Chabaud J.P., Puca G.A., Jensen E.Y. Purification and properties of an estrogen-binding protein from calf uterus. J.Ster0i Biochem., 1971, v.2, p.95-103.

55. Cuatrecasas P., Anfinsen C.B. Affinity chromatography. Annu. Rev.Biochem., 1971, v.40, p.259-278.

56. Jungblut P.W., M0rr0w R.I., Reeder G.L., Jensen E.V. Uptake 0f estradiol by uterine receptors in vitro. Abstracts, 47 Meeting of the Endocrine S0ciety, 1965, p.56.

57. V0nderhaar B., Mueller G.C., Binding 0f estrogen receptor t0 estradiol immobilized on insoluble resin. Bi0chim. et biopfcfrs. acta, 1969, v.176, p.626-631.

58. Truong H., Geynet C., Millet C., S0ulignac 0., B0uc0urt R., Vignau M., (Torelli V., Baalieu E.-E. Purification 0f estradi0l--receptor "by affinity chromatography. Representative experiments. FEBS Lett., 1975, v.55, p.289-294-.

59. Sica V., Nola E., Parikh I., Puca G.A., Cuatrecasas P. Purification of oestradiol receptors by affinity chromatography. -Nature New Biology, 1975, v.244, p.56-59.

60. B0uc0urt B., Vignau M., T0relli V., Richard-F0y H., Geynet C., Seco-Millet C., Redeuilh G., Baulieu E.-E. New bi0specific adsorbents for the purification of estradiol receptor. -J.Biol.Chem., 1978, v.255, p.8221-8228.

61. Molinari A.M., Medici N., M0ncharmont B., Puca G.A. Estradiol receptor of calf uterus: interaction with heparin-agarose and purification. Pr0c.Nat.Acad.Sci.USA, 1977, v.77, p.4886-4890.

62. Puca G.A., Sica V., N0la E., Bresciani P. Purification and properties of native estradiol receptor. J.Steroid Bi0chem., 1979, v.II, p.501-506.

63. Sica V., Bresciani P. Estrogen-binding protein of calf uterus. Homogeneity of receptor from cytoSol by affinity chromatography. Biochemist^, 1979, v.18, p.2569-2578.

64. Coffer A.I., Milt0n P.J.D., Piyse-Davies J., King R.J.B. Purification of the estradiol receptor from human uterus ty affinity chromatography. M0ll.Cell.Endocrin., 1977, v.6, p.251-246.

65. Ratajczak T., Hfihnel R. Investigation of methods of estradiol receptor purification prior to affinity chromatography.

66. J .Steroid Bi0chem., 1980, v.13, p.439-444.

67. Auricchio Botondi A., Sampaolo P., Schiavone E. CytoSol oestrogen-receptor of lactating mammary gland. Effect of heparin on the aggregation of "the receptor and interaction of the receptor with heparin-sepharose. -Bi0chem.J., 1978, v.I7I> p.137-141.

68. Rotondi A., Auricchio F. Oestrogen receptor of calf mammary gland. Purification "by use sodium bromide and heparin-sepharose. -Biochem.J., I978, v.178, p.581-587.

69. Baulieu E.-E., Raynaud J.-P. A "proportional graph" method for measuring "binding systems. Eur.J.Bi0chem., 1970, v.I3,p.293-304.

70. Zimmering P.E., Kahn I., Lieberman S. Estradiol and progesterone binding to a fraction of ovine endometrial cytoplasm. -Biochemistry, 1970, v.9, p.2498-2506.

71. T0ft D., Shyamala G., G0rski J. A receptor molecule for estrogens: studies using a cell-free system. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1967, v.57, p.1740-1743.

72. Michel G., Jung I., Baulieu E.-E., Aussel C., Uriel J. Tw0 high estrogen binding proteins of different specificity in the immature rat uterus cyt0s0l. Steroids, 1974, v.24, p.437-449.

73. K0renman S.G. Comparative binding affinity of estrogens and its relation to estrogenic potency. Steroids, I969, v.13, p.163--177.

74. Mester J., Robertson D.M., Feherty P., Kellie A.E. Determination of high-affinity receptor sites in uterine supernatant preparations. -Biochem.J., 1970, v.120, p.831-836.

75. Mc Guire W.L. Quantitation of estrogen receptor in mammary carcinoma. In Methods in enzym0logy, 1975, V.36A, p.248-254.

76. Erdos T., Best-Belpomme M., Bessada R. A rapid assay for binding estradiol to uterine receptor(s). Anal.Bi0chem., 1970, v.37, p.244-252.

77. Michelson K.E., Petra P.H. A filter assay f0r the sex binding protein (SBP) 0f human serum. EEBS Lett., 1974, v.44, p.34-38.

78. Barbanel G., B0rgna J.-L., B0nnafoUS J.-C., Mani J.-G. Development of a microassay for estradiol receptors. Eur.J.Bi0chem., 1977, v.80, p.4II-42J.

79. Hazato T., Murayama A., Matsuzawa A., Yamamoto T. A new assay of estrogen receptor by thin-layer gel filtration. Anal. Biochem., 1979, v.94, p.29-35.

80. Steggles A.W., King R.J.B. The use of protamine t0 study 6,7-^. oestradiol-I7/3 binding in rat uterus. Bi0chem.J.,1970, v.118, p.695-701.

81. Chariness G.C., Huff K., Mc Quire W.L. Protamine-precipitated estrogen receptor: a solid-phase ligand exchange assay. -Steroids, 1975, v.25, p.627-655.

82. Santi D.V., Sibley C.H., Perriard E.R., T0mkins G.M., Baxter J.D. A filter assay for steroid hormone receptors. -Biochemistry, 1973, v.12, p.2412-2416.

83. Wagner R.K. Characterization and assay of steroid-hormone receptors and steroid-binding serum proteins by agar gel electrophoresis at low temperature. H0ppe-Seyler's Z. Physiol.Chem., 1972, v.355, p.1235-1245.0

84. Wrange 0., H0rdensk;jold B., Gustafss0n J.-A. CytoSol estradiol receptor in human mammary carcinomas an assay based on isoelectric focusing in polyacrylamide gel. Anal.Bi0chem., 1978, v.85, p.4-61-475.

85. Scatchard G. The attraction of proteins for small proteins and ions. Ann.N.Y.Acad.Sci., 1949, v.51» p.660-672.

86. Linewear H., Burk D. The dtermination of enzyme dissociation constants. J.Am.chem.S0c., 1934, v.56, p.658-666.

87. B0loff M.S., Creange J.E., P0tts G.O. Unique estrogenbinding properties of rat pregnancy plasma. Endocrinology» 1971, v.88, p.427-452.

88. Radanyi C., Mercier-B0dard C., Secc0-Millet C., Baulieu E.-E. Eichard-Poy H. ¿¿-Fetoprotein is not a component of the estradiol receptor of the rat uterus. Peoc.Nat.Acad.Sci. USA, I977, v.74, p.2269-2272.

89. Eriksson H, Heterogeneity of estrogen receptors in the cyto-sol and nuclear fractions of the rat uterus. Bi0chem. Biophys.Ees.C0mmun., 1978, v.81, p.I-7.

90. Clark J.H., Hardin J.W., Upchurch S., Eriksson H. Heterogeneity of estrogen binding sites in the cytoSol of the rat uterus. J.Biol.Chem., 1978, v.253, p.7630-7634.

91. Chamness G.C., Mc Guire W.L. Scatchard plots: common errors in correction and interpretation. Steroids, 1975, v.26, p.538-542.

92. Baulieu E.-E. Current approaches to steroid hormone-cell interactions. In Cent.Regulation Endocrine Sys. Proc. N0bel P0und.Symp. 42 Princ., Stockholm 1978, New Y0rk-L0nd0n,1979, p.239-260.

93. Mester J., Robertson D.M. The determination of the dissociation velocity constants of rabbit uterine cytoSol receptor-estrogen complexes. Bi0chim. et biophys. acta, 1971, v.230, p.543-549.

94. Korach K.S., Muldoon T.G. Characterization of the interaction between I7/3-estradiol and its cytoplasmic receptor in the rat anterior pituitary gland. Biochemistry, 1974-» v. 13,p.1932-1938.

95. Anand Kumar S., Beach Т., Dickerman H.W. Effect 0f chaotro-pic anions on the rate of dissociation of estradiol-receptor protein complexes of mouse uterine cytoSol. Bi0chem. Biophys.Res.Commun., 1978, v.84, p.631-638.

96. Sica V., Puca G.A., M0linari A.M., Buonaguro F.M., Bresciani F. Effect of chemical perturbation with NaSCN 0n receptor--estradiol interaction. A new exchange assay at low temperature. Biochemistry, 1980, v.19, p.83-88.

97. Geynet C., Millet C., Tru0ng H., Baulieu E.-E. Estrogens andantiestrogens. Gynec.Invest., 1972, v.3, p.2-29.

98. Розен В.Б., Смирнов А.Н. "Рецепторы и стероидные гормоны",

99. Изд-во МГУ, Москва, 1981, с.99.

100. Sala-Trepat J.M., Reti Е. Dissociation studies 0f different forms of the estradiol-receptor complex from calf uterus; higher stability of the complex bound to chromatin. -Biochim. et bi0phys. acta, 1974, v.338, p.92-103.

101. Vallet-Strouve' C., Rat L., Sala-Trepat J.M. Limited proteolysis 0f cytoplasmic and nuclear uterine estradiol receptors yields identical estradiol-binding fragments. Eur.J.Bi0chen 1976, v.66, p.327-337.

102. Sica V., Weicz A., Petrillo A., Armetta I., Puca G.A. Assay of total estradiol receptor in tissue homogenate and tissue fractions "by exchange with sodium thiocyanate at low temperature. Biochemistry, I98I, v.20, p.686-693.

103. Eosner A.L., Schwartz A.M., Bray C.L., Burstein N.A. Accelerated dissociation of estrogen receptor-ligand complexes by estradiol. Evidence for negative cooperativity of binding. -Arch.Biochem.Biophys., 1979, v.198, p.153-163.

104. StroUpe S.D., Westphal U. Steroid-protein interactions. Stopped flow fluorescence studies of the interaction between steroid hormones and progesterone-binding globulin. J.Bi0l. Chem., I975, v.250, p.8735-8739.

105. Zeelen P.J. Interactions of steroids with receptors. In Biological Activity and Chemical Structure, Elsevier Scientific Publishinf Company, Amsterdam, 1977, p.147-160.139« Dtiax W.L., Weeks C.M. Molecular basis of estrogenicity:

106. X-ray erystallographic studies. In Estrogens in the en-viroment, J.A. Mc Lachlan, ed., Elsevier N0rth Holland, 1980, p.II-31.

107. Duax W.L., Griffin J.P., R0hrer D.C., Weeks C.M. Ster0id agonists and antagonists: molecular conformation, receptor binding and activity. In HQrmone antagonists, M.K.Agar-wal ed., Walter de Gruyter, Berlin, New Y0rk, 1982, p.3-24.

108. K0renman S.G. Relation between estrogen inhibitory activity and binding to cytosol of rabbit and human uterus. -Endocrinology, 1970, v. 87, p.IIl9-II23.

109. Akera T., Cheng V.-J.K. A simple method for the determination of affinity and binding site concentration in receptor binding studies. Bi0chim. et bi0phys. acta, 1977, v.470, p.412-423.

110. Verse'e V., Barel A.O. Binding specificity of estrogens and n0randr0gens t0 rat «^-fetoprotein (APP) . FEBS Lett., 1978, v.96, p.I55-I58.

111. Tseng L., Gurpide E. Heterogeneity 0f saturable estradiol binding sites in nuclei of human endometrium. Estetrol studies. J.Steroid Biochem., 1978, v.9, p.II45-II48.

112. Shutt D.A., C0x R.J. Ster0id and phyto-oestrogen binding to sheep uterine receptors in vitro* J.Endocr., 1972, v.52, p.299-510.

113. Eatzenellenbogen J.A., Johnson H.J., Myers H.N. Photoaffini-ty labels for estrogen binding proteins of rat uterus. -Biochemistry, 1975, v.12, p.4085-4092.

114. Hahnel R., Twaddle E., Ratajczak P. The specificity 0f the estrogen receptor of human uterus. J.Steroid Bi0chem., 1975, v.4, p.21-51.

115. Panchenko N.D., Sturchak S.V., Shchedrina R.N., Pivnitsky Z.Z., Ishkov V.L. The specificity 0f the human uterine receptor. -Acta endocr., 1979, v.90, p.167-175»

116. ZeelenF.J., Bergink E.W. Structure-activity relationships of steroid estrogens. In Cytotoxic estrogens in hormone receptive tumors, J.Raus, H.Martens, G.Leclercq, eds, 1980,p.39-48.

117. Korach K.S. Estrogen action in the mouse uterus: characterization of the cytoSol and nuclear receptor system. -Endocrinology, 1979, v.104, p.1524-1552.

118. Payne D.W., Katzenellenbogen J.A. Differential effects of estrogens in tissues: a comparison of estrogen receptor in rabbit uterus and vagina. Endocrinology, 1980, v.106,p.1545-1552.

119. Daxenbichler G., Grill H.J., D0manig E., M0ser E., Dapunt 0. Receptor binding of fluorescein labeled steroids. J.Steroid Bi0chem., 1980» v.13, p.489-493.

120. Wani M.C., Hector D.H., White D.H., Pitt C.G., Kimmel G.L. Synthesis, antifertility activity and pr0tein binding affinity 0f 7(8— IIeOabe0ster0ids. J.Med.Chem., 1977, v.20, p.547-551.

121. Mc Donald E.G., Cidlowski J .A. Alterations in specificity of the glucocorticoid receptor with temperature in rat splenic lymphocytes. J.Ster0id Bi0chem., 1979» v.IO,p.21-29.

122. Durani S., Anand IT. A possible basis f0r structure-function relationship 0f estrogens. Int.J.Quantum Chem., 1981, v.20, p.71-83.

123. Duax W.L., Griffin J.F., E0hrer D.C., Swens0n D.C., Weeks C.M. Molecular details 0f receptor binding and hormonal acti0n of steroids derived from X-ray crystallographic investigations. J.Ster0id Bi0chem., I98I, v.15, p.41- 47.

124. Anders0n J.F., Peck E.J., Clark J.H. Nuclear receptor estrogen complex: relationship between concentration and early uter0tr0phic responses. Endocrinology» 1973» v.92,p.1488-1495•

125. Anderson J.N., Peck E.J., Clark J.H. Estrogen-induced uterine responses and growth: relationship to receptor estrogen "binding by uterine nuclei. Endocrinology» *975> v.96, p.160-167.

126. Jensen E.V., M0hla S., G0rell T., Tanaka S., DeS0mbre E.E. Estrophile to nucle0phile in two easy steps. J.Steroid Biochem., I972, v.3, p.445-458.

127. G0rski J*» Cann0n F. Current m0dels 0f ster0id hormone action, a critique. Annu.Rev.Physiol., 1976, v.38, p.425-450.

128. J. Jungblut P.W., Gaues J., Hughes A., Kallweit E., Sieralta W., Szendro P., Wagner P.K. Activation of transcription regulating proteuns by steroids. J.Steroid Bi0chem., 1976, v.7, p.II09-HI6.

129. Lippman M., B0lan G., M0nac0 M., Pincus L., Engel L. M0del systems f0r the study of estrogen action in tissue culture. J.Steroid Biochem., 1976, v.7, p.1045-1051.

130. Mc Guire W.L., Zava D.T., Chamness G.C., H0rwitz K.B. Human breast cancer: biologically active estrogen receptor in the absence 0f estrogen? Science, 1977, v.196, p.663-664.

131. Jungblut P.W., Hughes A., Gaues J., Kallweit E., Maschler I., Pari F., Sieralta W., Szendro P.I., Wagner P.K. Mechanisms involved in the regulation of steroid receptor levels.

132. J.Steroid Biochem., 1979, v.II, p.273-278.167» Jensen E.V., DeS0mbre E.R. Mechanism of action of the female sex h0rm0nes. Annu.Rev.Bi0chem., 1972, v.41, p.203-2o9*

133. M0hla S., DeS0mbre E.R., Jensen E.V. Tissue-specific stimulation of RNA synthesis by transformed estradiol-receptor complex. Bi0chem.Biophys.Res.C0mmun., 1972, v.46, p.661-667169» Jensen E.V., DeS0mbre E.R. Estrogen-receptor interaction.

134. Estrogenic hormones effect transformation of specific receptor proteins to a biochemically functional form. Science, 1972, v.182, p.126-134.

135. Yamamoto K.R., Alberts B.M. In vitro c0nversi0n 0f estradiol--receptor protein to its nucleyr form: dependence on hormone and DNA. Pr0c.Nat.Acad.Sci.USA, 1972, v.69, p.2l05-2l09.

136. Kalimi M., C0lman P., Feigels0n P. The "activated" hepatic glucocorticoid-receptor complex. Its generation and properties. J.Bi0l.Chem., 1975» v.250, p.1080-1086.

137. Munck A., P0ley R. Activation of steroid hormone-receptor complexes in intact target cells in physiological conditions. -Nature (L0nd0n), 1979, v.278, p.752-754.

138. Beat0 Kalimi M., K0nstam M., Feigels0n P. Interaction of glucocorticoids with rat liver nuclei. II.Studies on the nature of the cytoSol transfer factor and the nuclear acceptor site. Biochemistry, 1973, v. 12, p.3372-3379.

139. Cake M.H., DiS0rb0 D.M., Litwack G. Effect 0f pyrid0xal phosphate on the DNA binding site of activated hepatic glucocorticoid receptor. J.Bi0l.Chem., 1978, v.253, p.4886--4891.

140. Yamamoto K.R., Alberts B. On the specificity of the binding of the estradiol receptor protein in deoxyribonucleic acid. J.Biol.Chem., 1974, v.249, p.7076-7086.

141. Mainwaring W.I.P., Irving R. The use of deoxyribonucleic acid-cellulose chromatography and isoelectric f0cusing for the characterization and partial purification of steroid--recept0r complexes. -Bi0chem.J., 1973, P v.134, p.113-127.

142. Kuhn R.W., Schrader W.T., C0ty W.A., C0nn P.M., O'Malley B.W. Pr ogesterone—binding components of chick oviduct. Biochemical characterization of purified oviduct progesterone receptor B subunit. -J.Biol.Chem., 1977, v.252, p.308-317.

143. Atger M., Milgrom E. Mechanism and kinetics of the thermal activation of glucocorticoid hormone-receptor complex. -J.Biol.Chem., 1976, v.251, p.4758-4762.

144. Jensen E.V., Numata M., Brecher P.I., DeS0mbre E.R. H0rm0ne--recept0r interaction as a guide to biochemical mechanism. -In Biochemistry 0f Ster0id H0rm0ne Action, 197*, v.52,p.155-159.

145. Parchman L.G., Litwack G. Resolution of activated and unacti-vated f0rms 0f the glucocorticoid recept0r from rat liver. -Arch.Biochem.Biopbys., 1977, v.183, p.374-382.

146. Milgr0m E., Atger M., Baulieu E.-E. Acidophilic activation 0i steroid hormone receptors. Biochemistry, 1973, v.12,p.5198-5205.

147. Jensen E.V., Brecher P.I., Numata M., Smith S., DeS0mbre E.R. Estrogen interaction with target tissues; two-step transfer of recept0r t0 the nucleus. In Methods in enzym0logy, 1975, v.36A, p.267-275.

148. Weichman B.M., N0tides A.C. Estradi0l-binding kinetics 0f the activated and nonactivated estrogen receptor. J.Bi0l. Chem., 1977, v.252, p.8856-8862.

149. N0tides A.C., Nielsen S. A molecular and kinetic analysis of estrogen receptor transformation. J.Ster0id Bi0chem., 1975, v.6, p.483-486.

150. M0udgil V.K., Eessalu T.E.:Activation 0f estradi0l-recept0r complex by ATP in vitr0. PEBS Lett., 1980, v.122, p.189-192

151. DeS0mbre E.R., M0hla S., Jensen E.V. Estr0gen-independent activation of the receptor protein of calf uterus cytoSol. -Bi0chem.Bi0phys.Res.Commun., 1972, v.48, p.I60l-l608.

152. Sato B., Nishizava Y., N0ma K., Matsum0to K., Yamamura Y. Estrogen-independent nuclear binding of receptor protein of rat uterine cytosGl by removal of low molecular weight inhibitor. End0crin0logy, 1979, v.104, p.1474-1479

153. Traish A.M., Müller R.E., W0tiz H.H. C0mparis0n 0f formation, activation and nuclear translocation of receptor-estradiol (R'E2) complex at 0° and 37°C in intact uterine cells. -J.Biol.Chem., I979, v.254, p.6560-6563.

154. M0udgil V.K., J0hn J.K. ATP-dependent activation of glucocorticoid receptor from rat liver cytoSol* Bi0chem.J., 1980, V.I90, p.799-808.

155. M0udgil V.K., J0hn J.K. Interaction 0f rat liver glucocorticoid receptor with adenosine 51-triphosphate. Characterization of interaction by use of ATP-sepharose affinity chromatography. -Bi0chem.J., 1980, v.190, p.809-818.

156. G0idl J.A., Cake M.H., D0lan K.P., Parchman L.G., Litwack G. Activation 0f the rat liver glucocorticoid-receptor complex. Biochemistry, 1977, v.16, p.2I25-2I30.

157. Sato B., N0ma K., Nishizava Y., Naka o E., Matsumoto , Yamamura Y. Mechanism of activation of steroid receptors: involvement 0f low m0lecular weight inhibitor in acti0n 0f androgen, glucocorticoid, and estr0gen receptor systems.

158. Endocrinology, 1980, v.I06, p.II42-Il48.

159. Müller R.E., Traish A., W0tiz H.H. Effects 0f pyrid0xal 51--ph0sphate on uterine estr0gen receptor. I.Inhibition of nuclear binding in cell-free system and intact uterus. -J.Biol.Chem., 1980, v.255, p.4062-4067.

160. PackB.A., Christensen C., D0uraghy M., Brooks S.C. Nuclear and cytosolic estrogen receptor in gilt endometrium throughout the estr0us cycle. End0crin0logy, 1978, v.103, p.2129-2136.

161. Barrack E.R., Hawkins E.E., Allen S.L., Hicks L.L., C0ffey

162. Maurer H.R., Chalkley G.R. S0me properties 0f a nuclear binding sites 0f estradiol. J.M0l.Bi0l., 1967, v.27, p.4-31-44-1,

163. Pavlik E.J., Rutledge S., Eckert R.L., Katzenellenb0gen B.S. Localization of estr0gen recept0rs in uterine cells. An appraisal of translocation. Exp.Cell Res., 1979, v.123,p.177-189.

164. Puca G.A., N0la E., Hibner U., Cicala G., Sica V. Interaction of the estradiol receptor fr0m calf uterus with its nuclear acceptor sites. J.Bi0l.Chem., 1975, v.250, p.6452-6459.

165. Baudendistel L. J., Ruh U.S. Antiestrogen acti0n: differential nuclear retention and extractability of the estrogen receptor. Steroids, 1976, v. 28, p.223-237.

166. Clark J.H., Peck E.J. Nuclear retention of receptor-oestrogen complex and nuclear acceptor sites. Nature (London),1976, v.260, p.635-637.

167. Ruh T.S., Baudendistel L.J. Different nuclear binding site for antiestrogen and estr0gen receptor complexes. Endocrinology, 1976, v.IOO, p.420-426.

168. Juliano J.V., Stancel G.M. Estrogen recept0rs in the rat uterus. Relation of hormone-receptor complexes. Biochemistry, 1976, v.15, p.916-920.

169. Muller R.E., Traish A.M., W0tiz H.H. Interaction 0f recept0r--estr0gen c0mplex (R'E) with uterine nuclei. J.Bi0l.Chem.,1977, v.252, p.8206-82II.

170. Muller R.E., Meader J.E., W0tiz H.H. Effects 0f ethidium br0mide on the extractability 0f nuclear receptor-estrogen Complex. -Cancer Res., 1978, v.38, p.4233-4237.

171. Shyamala Harris G. Nature 0f estrogen specific binding sites in the nuclei 0f m0use uteri. Nature New Bi0logy, 1971»p.246-248.

172. King R.J.B., G0rd0n J. Involvement 0f !®A in the mechanism f0r uterine 0estradi0l recept0r. Nature New Bi0loEy, 1972, v.240, p.185-187.223* Toft D.o. The interaction of uterine estr0gen recept0r with DNA. J.Steroid. Bi0chera., 1972, v.3, p.515-522.

173. Liao s», Liang T,, Tym0czko J.L. Rib0nucleoprotein binding of ster0id-"receplJorn complexes. Nature New Bi0logy, 1973, v.241, p.211-213.

174. Jacks0n V., Chalkley R. The binding 0f estradi0l-I7/S t0 the b0vine endometrial nuclear membrane. J.Bi0l.Chem., 1974, v.249, p.I6I5-I626.

175. Stratling W.H., ofMalley B.W. Studies 0n the structure and function of chick-oviduct chromatin. 2.Biochemical characterization 0f tw0 chromatin fractions isolated by ECTHAM-cel-lulose chromatography. Eur.J.Bi0chem., v.66, p.435-441.

176. Sala-Trepat J.M., Hibner U., Vallet-Str0uve'C. Is0lati0n 0f a chromatin fraction from calf endometrium hifhly enriched in estradiol binding sites. Nucleic Acid Res., 1977, v.4, p.649-662.

177. Chamness G.C., Jennings A.W., Mc Guire W.L. Estr0gen receptor binding t0 isolated nuclei. A nonsaturable pr0cess. -Biochemistry, 1974, v.I3, p.327-331.

178. Musliner T.A., Chader G.J. A r0le f0r DNA in the f0rmati0n of nuclear estradiol-receptor Complex in a cell-free system. Biochem.Bi0phys.Res.C0mmun., 1971» v.45, p.998-1003»

179. Andre' J., R0chef0rt H. In vitr0 binding 0f the estrogen receptor t0 DNA: absence of saturation at equilibrium. -FEBS Lett., 1975, v.50, p.319-323.

180. Nishig0ri H., M0udgil V.K., T0ft D. Inactivati0n 0f avian pr0gester0ne receptor binding to ATP-sephar0se by pyridoxal ^-phosphate. Bi0chem. ;Bi0phys.Res.C0mmun., 1978, v.80, p.112-118.

181. Nishig0ri H., T0ft D. Chemical modification 0f the avian progesterone recept0r by pyridoxal ^^pbosphate. J.Bi0l. Chem., 1979, v.254, P.9I55-9I6I.

182. M0udgil V.K., Weeks G.A. Inhibition 0f hen oviduct estradiol recept0r by aurintricarb0xylic acid. FEBS Lett., 1978, v.94, p.324-326.

183. Kumar S.A., Beach T.A., Dickerman H.W. Effect 0f cibarc0n blue F3GA 0n oligonucleotide binding site of estradiol-re-ceptor c0mplexes 0f m0use uterine cytoSol. Proc.Nat.Acad. S ci.USA, 1979, v. 76, p .-2199-2205 •

184. Yamamoto E.E., Alberts B.M. Ster0id recept0rs: elements f0r m0dulati0n of eukari0tic transcription. Annu.Rev.Bi0chem., 1976, v. 45, p.721-746.

185. Bl00m E., Matulich D.T., Lan U.C., Higgins S.J., Sim0ns S.S., Baxter J.D. Nuclear binding 0fgluc0c0rtic0id recept0rs: relations betwwen cytoSQl binding, activati0n and the biological response. J.Ster0id Bi0chem., 1980, v.12, p.175-184.

186. Sarff M., G0rski J. C0ntr0l of estr0gen binding pr0tein concentration under basal c0nditi0ns and after estrogen administration. -Biochemistry, I97I, v.Io, p.2557-2563.

187. GiannoPoUloS G., G0rski J. Estr0gen recept0rs. Quantitative studies 0n transfer of estradiol from cytoplasmic to nuclear binding sites. J.Bi0l.Chem., 1971, v.246, p.2524-2529.

188. H0rwitz K.B., Mc Guire W.L. Nuclear estr0gen recept0rs. Effectof inhibition o11 prosessing and steady state levels. — J.Bi0l.Chem., 1980, v.255, p.9699-9705.

189. Musliner T.A., Chader G.J., Villee C.A. Studies 0n estradiol recept0rs 0f rat uterus. Nuclear uptake in vitr0. -Bi0chemistry, I970, v.9, p.4448-4453.

190. P0well-J0nes W., Nayfeh S.N., Lucier G.W. Translocation 0f 4 S and 5 8 forms 0f estrogen-receptors into rat liver nuclei in vitr0. Bi0chem.Bi0phys.Ees.C0mmun., 1978, v.85,p.167-173.

191. Linkie D.M. Estr0gen recept0rs in different target tissues: similarities 0f form dissimilarities 0f transformation.

192. End0crin0l0gy, 1977, v.lQl, p.1862-1870«

193. Fleming H., Gurpide E. Available estradiol receptors in nuclei fxom human endometrium. J.Ster0id Bi0chem., 1980, v.15, p.3-11,

194. Best-Belpomme M., Dessen P. Inhibition competitive. Eelatione lineaires n0uvelles et generales. Bi0chimie, 1973» v. 55, p.II-16.