Липиды двух представителей семейства лоховых (ELAEAGNACEAE) тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН ИНСТИТУТ БИООРГАНИЧЕСКОИ ХИМИИ - £ 0 ДИМЕ1Ш АКАДЕМИКА САДЫКОВА А. С.

5 ДВ ь^о

*■' ' На правах рукописи

ГОНЧАРОВА НАТАЛИЯ ПЕТРОВНА

УДК 547.915:543.51:665.31

ЛИПИДЫ ДВУХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ СЕМЕЙСТВА ЛОХОВЫХ (ЕЬАЕАОЫАСЕАЕ)

02.00.10 — Биоорганическая химия, химия природных и физиологически активных веществ

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Ташкент — 1996

Работа выполнена в Ордена Трудового Красного Знамени Институте химии растительных веществ АН РУ.

Научный руководитель: член-корр. АН РУ Глушенкова А. И.

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор Саидходжаев А. И. кандидат химических наук, старший научный сотрудник Толибаев И.

Ведущая организация: кафедра химии природных соединений Ташкентского Государственного Университета (г. Ташкент)

Защита состоится «У^» 1996 г. в ^ 'часов - -?- -

на заседании специализированного совета Д 015.21.01 при Институте биоорганической химии им. акад. Садыкова А. С. АН РУ (700143, Ташкент, ул. X. Абдуллаева, 83).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ИБОХ

АН РУ

Автореферат разослан «

1996 г.

Ученый секретарь специализированного сонета, доктор химических наук, профессор

БАРАМ Н. И.

Актуальность работы. В народней медицине растения семейства Лоховых издавна известны как лекарственные.

Жирное масло околоплодника облепихи обладает высокой физиологической активностью и используется как лечебное средство при разного рода тканевых поражениях. Но, в связи с ограниченными сырьевыми ресурсами, трудностью сбора плодов и небольшим содержанием в них масла, потребности медицины в згем препарате полностью нэ удовлетворены. Весьма актуальным, поэтому, является исследование липидов листьев облепихи, как потенциального источника биологически активных соединений подобного действия.

На территории Узбекистана имеются богатые естественные заросли облепихи, площадь которых, по оценкам специалистов, превышает 1000 га. Между тем, а облепиховой формации наиболее часто в качестве субъэдификатора встречается лох - другой представитель семейства Лоховых. Лйпиды этого вида ранее не изучались, хотя такое исследование также является актуальным. С теоретической точки зрения оно дает возможность, получить дополнительные данные по выявлению хемотачсономических признаков принадлежности растения к данному семейству. С практической старены - способствовать расширению сырьевых источников для извлечения активных компонентов.

Цель и задачи работы. Изучить состав нейтральных липидов листьев среднеазиатской облепихи в сравнении с липидами околоплодника, исследовать солярные соедкнеякя листьев.

Определить состав нейтральных и полярных липидов вегетативных и генеративных органов лоха, произрастаззтаго в Узбекистане.

Результаты определения содержания биологически ачтивных соединений в обоих растениях использовать для оценки перспективности их применения в качестве сырья для получения'фармакологических препаратов.

Научная новизна, работы. Впервые проведено исследование натив-ных липидов листьев облепихи, фракционированных на зпккутикуляр-ные и кутакулярные соединения. Определен вероятный набор молекулярных видов алифатических эфиров эпикутихулярнкх липидов. Также впервые показано, что биологически активные спирты кутикулярных липидов находятся в основном в связанном состоянии, установлена избирательность в этерификации их ацильнкии остатками.

Изучены ранее не исследованные полярные липиды листьев облепихи, а также нейтральные соединения коры ветвей этого растения.

Впервые приведены составы нейтральных и полярных липидов веге-

- 4 - .

тагиЕных и генеративных органов лоха узколистного, В масле семян обнаружены оксигенированные соединения, среди которых идентифицирована новая природная гидроксикислота.

Установлено высокое содержание биологически активных веществ в лкаидах нейтральной части листьев лоха.

Практическая значимость работы. Показано, что листья облепихи и лоха являются богатыми источниками биологически активных соединений. Высокая физиологическая активность суммарных экстрактов листьев, их отдельных фракций и композиций на их основе дает возможность рекомендовать листья обоих растений как источники получения препаратов - заменителей облепихового масла. На защиту выносятся следующие основные положения:

- анализ нейтральных эпикутикулярных и кутккулярных липидое листьев облепихи в сравнении с лкпвдами околоплодника, а также их полярных соединений;

- закономерности состава нейтральных и полярных липидов вегетативных к генеративных органов лоха;

- состав оксететфованных жирных кислот масла семян лоха;

- анализ . структуры оснозных компонентов нейтральных липидов листьев лоха. ...

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на Всесоюзном совещании (Барнаул, 1383 г.), 5-ой Всесоюзной конфгрещкк по. исследованию облепихи и облепихового масла (Горький, 1985 г.), а также на конференциях молодых ученых ИХРВ АН РУ в 1886 и 1989 гг.

Публикации, По материалам диссертации опубликовано 8 статей, 2 тезисов докладов, одно авторское свидетельство и один патент.

Структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 124 страницах машинописного текста и состоит из трех глав, списка литературы, включающего 167 ссылок. В тексте содержится 36 таблиц. В приложении приведены копии Авторского свидетельства СССР и патента РУ на способы получения ракозгживляэдкх средств из растительного сырья.

Содержание работы. 1. Зпккутккулярные и кутикулярные липиды листьев облепихи. Анализировали липиды листьев облепихи, произрастающей в горном урочище Чкмган (Падтау, Чаткальсккй хребет). Составы эпикутикулярных и кутикулярных липидов, изученных методами колоночной., аналитической и препаративной ТСХ, приведет в табл.- 1. Преобла-

датие по массе классы соединений, согласно. ИК-спектрсскопии, отнесены к сложным эфирам. Применение метода жесткого гидролиза с последующей ГГ< продуктов реакции выявило, что больиая часть массы высших жирных гаслот(ЖК), участвовавших в этерификации эфиров эпикутикулярных' липидов, приходилась на бегеновую 22:0-кислоту, существенным был также вклад арахиновой 20:0 и пальмитиновой 16:0-кислот. Основными спиртами являлись докозанол 22:0, тетрако-занол 24:0 и эйкозанол 20:0. Кроме высших алифатических соединений, спиртовая часть этих эфиров содержала 4Х циклических спиртов, представленных В-ситостеролсм ((^414), эпифриделанолом ((^428) и 24-м9ТИденшклоарт&чолсм (М^О). Ж-анализ общих эфиров эпикутикулярных липидов покааал соответствие пиков молекулярных и фрагмента. ионов гомологическому ряду насыщенных С34Н68О2-С43Н96О2 (М'тМ*508-704) и ненасыщенных С32Н60О2-С46Н92О2 (КГ|И+'504-700) соединении с преобладанием четных гомологов. В случае ненасыщенных, эфиров молекулы с -такими молекулярными -массами мог.та слагаться как ив. пары насыще1шый/ненасыщенный остатки кислоты и спирта, так и из обоих Ненасыщенных остатков кзгсло-та/спирт.

В. составе эпикугикулярннх. л:тидов обнаружены таске циклические спирш (трнтерпексга и стё^^ причем тритерпенолы находились как в свободном, так и в зтарифицирозанном состояниях. Сте-ролы и в свободном, и в связанном виде были представлены тольга 8-ситостеролсм.

, Вдап'Жалкфаг^ескиэ, спирты и вксгие кислоты эпикутикулярнкх лилидоз ссстся1? иэ рздэв гсмелсгов насыЦ'Экных соеддаений 16:0-29:0 в случае сгп:р~св и 14:0-25:0 в случае кисло?. "У

••«раедй тритерпековж ккслот на'гас: даьайа 3. пкка*.; : 75й уро»-ловой -кислота,- 102 рлеаноловой к 15". нё^няфщарованной кислоты.' ■ " ■

Углеводороды эшас/тикулярного слоя состояли ив,трех гомологов • ряда С27-С31, в клеточных лшгадач набор углеводородов бил разнообразнее и вказчал 8 компонентов от С21 до Сзц в обоих случаях преобладал нонакозан С29.

Клеточные карстинойды были представлены в основном с-кароти-ном (УО-саектр).

Среди липадных 'классов клетки, кал и в эяикутикулярных липидач (табл.1), основным являлся класс слсжных эфиров, но его спиртовая часть была составлена в преобладающей массе иа циклических

Таблица 1.

Состав эпжсутакулярных и кутикудярных шшздоз листьев облепихи.

эпикутик. кутикул.

Показатели липиды липиды

Выход лшшдов.% от.массы сух. листьев 0,47 3,53

Классы липидов, X от массы:

Углеводороды 9,8 ■ 1,9

Каротиноиды - 0,7

Сложные эфиры . 58,7 44,4

Ацетаты тритерпенолов и стеролов 2,4 0,9

Триацилглицеролы (ТАГ) 5,9

Свободные жирные кислоты (СЗК) 3,0 в,2

Изопренолы' -

Свободные лирные спирты 2,1 } 8,7

Тритерпенолы 4,1

Стеролы 3,8 5,6

Тритерпеновые альдегиды - 1,2

Тритерпеновые кислоты 16,1 10,0

Тритерпеновые диады . - 3,9

Хлсрофгшювые питкенга+неадентифиц. : - 3,6

и изопроноидных спиртов. Методом КХ суммарные эфиры удаюсь частично фракционировать и затем отдельно исследовать составные .части более узких фракций. Из табл. 2 видео, что увеличение полярности фракций слоящих эфиров влечет аа собой уменьшение насыщенности кислот, хотя вклад отдельшк наоыгченнкх и кенасытенных кислот в каждой фракция неодинаков. ■

Среди £К фракцж; I отаечено наибольшее содержание 16-0-кисло-ты .н. необышю высюкое - миристшювой кислотк. Спирта этой фракции после препарагп-ного ТСХ-разделения, Г5Х и iiacc-спекгрометрии от-дельак ксмпокедтоБ, ¿казались ссс.'ояш}ГЛ1 из тритерпэновых диолов (152) -уваола и эржрсдкола' (М*442); р-ситостерола (25Z); мономе-, тилстеролоз (15Z) - эпифрдделгяола и цитростздиенола 0fiZ5); фи-тола. (lf*"296) и триметилстеродов (45Х), представленных циклоарте-нолои (1^426) и 24-»йтилекця:«оартаколск.

Во фракции эфиров 2 основными - спиртами 1 были иэопреновдные (501) - дека-, ундека- и додекаиэозренолы. Алифатические спирты составляли 20% от массы спиртов с преобладанием нонакозанола. Остальное в равной мере приходилось на долю метипстеродов (цитрос-тадиенола и обтузифолиода /lt4Z&/) и в-ситостерола. Кислотная часть этой фракции отличалась наличием ддзшноцепочечных кислот 20:0-24:0.

В следующей фракции сложных зфиров (фр.З) наблюдали еще большее увеличение обаэй ненасыщенности за счет возрастания доли

Таблица 2.

Ниркокислотнш состав ашшсодеркзщих классов кутикулярных липидов, 2 ГЯХ.

Кислоты Фракции сложных эфиров ТАГ СЯК

1 2 3 4 5

12:0 4,4 0,7 0,4 0.4 0,4 о з -

14:0 20,8 3,9 1,0 0.8 2,1 5*4 1,6

15:0 1,8 0,7 - - - -

16:0 43,6 33,6 34,4 ■•■30,8 29,9 19,7 15,9

16:1. i О R 21,3 33,5 40,7 ОП 4 , l 23,7 4.7

16:2 - - . - 1.2 - -

18:0 4,2 15,1 15,1 14,8 10,8 - 1,2

18:1 10,7 7,1 6,5 7,6 8,2 9,4 10,4

18:2- 1,2 4,4 3,1 4,9 10,7 lo,5 14,5

18:3 - 7,6 31,0 51,7

20:0 0,7 з"з - - ■ - • -

22:0 - 1,0 - - - - -

24:0 - 8,3 - - - -

75,5 . 67,2 50,9 46,8 '43,2 20,4 18,7

Ui 24,5 32,8 49,1 53,2 56,8 79,6 81,3

16:1-кислоты. В спиртовой части, наряду с. ыетилстеролами, ивопре-КОДсиИ И жирными СГОфТвМИ, ПОЯВЛЯЛИСЬ а- И в"&МИрЮШ (55%) В CO-отношеник i:?..

В слсжноэфирной фракции 4 'содержание 1б:1-кнслоты было макси. мальпкм (40,72). Кислоты фракции 4 по-прэзкеыу сгнаивали основеуп массу (702) а- и р-змиринов и остатки иаогтренолов и метилстеролов

ПрОДЦДС фр'этЛЦ2"г.

Спиртовая часть фракции 5 сложных эфиров на тонком слое проявлялась одной полосой, соответствующей тритерпенолам (амкринам). Качественный состав кислот, зтерифииирующих эти тритерпенолы, отличался появлением в эфирах лнколеновсй кислоты 18:3, которой не было - ни в одной из предыдущее фракций. Кислота 18:3 находилась' в других классах клеточных липидов, составляя е триацилглицеродах -одну треть, а в СКК - половши .от массы ЕК.

В ацетатах трктерпенслов и стеролоЕ уксусная кислота, по данным Г5Х и Ш, избирательно -этерифицировава--амирины к р-ситссте-рол. Псете омыления;фракции ТАГ из. нейтральной части были выделены ос-(1^430) и 5-, т-изомеры (М^б)-токоферолов. Кэ свободных спиртов в- составе клеточныхлипидов Сыли обнаружены изопренолы, а- н р-бмкршш в смеси о жиркм.ги спиртами" (основной Сов). мономе-тилстеролы (цитростадиенол и сОтузифолиол). и в-ситостерол.

. ' - 8 "

МС-данные более, полярной фракции, дающей ка ТСХ положительную реакцию .Либермана-Бурхарда, позволяют отнести данную фракцию.к тритерпеновым альдегидам (М*440). Тритерпеновые кислоты состоят на QQZ. из урсоловой и на 10Z -олеаноловой кислот.

В наиболее полярной фракции обнаружены тритерпеновые соединения,. идентифицированные как уваол и эритродиол. Пигменты полярных фракций бьши обычными для фотосинте8ирующих тканей и представляли, собой хлсрофиллн к продукты их окисления. : '

2. Полярные дкпиды листьев облепихи. .

Сумку полярных'' липидов разделяли КХ ка глдао- (ГЛ>. к фосфсли-пиды (ФЛ) (36,5 и 12,IX, соответственно). Основными ГЛ-кяассамк листьев являются мокогалактозид-(МГДГ), дигалактозкл-(дГДГ) и сульфохиновозилдкглицеридь! (СХЗДГ), доля которых составляет в общем 85.2Z от массы ГЛ (табл.3)Самим ненасыщенными являются .МГДГ» где содержание 18:3-кислоты достигает,72%, _ затем следуют ДГДР с содержанием этой кислоты -64Z. СХВДГ, как обнаружено и в листьях других растений, обогащены 16:0-кислотой, составляющей более 50Х от массы кислот.

Для выявления возможных изомеров С1б-кислот, общие Ж, выделенные из, отдельных классов ®Я и ГЛ, -разделяли на силикагеле, , импрегкированнсм А£Шз< Оракции моноенов, диенов и триенов под. вергали , перкодат^пермангакатному окислен::» к продукты деструкции идентифицировали Г2Х. Установлено, что все ГЛ-классы имеют по два. изомера 16:1-ккслоты: 16:1(9) и 16:1(3). Среди триеновых кислот 16:3(7,10,13) сосредоточена в основном в СХВДГ, наименьшее ее содержание в ИГДГ, что отличает этот объект ст других исследованных видов.

Среди СЛ идентифицировали 4 основных класса: фосфатидилхолин . (СХ), фосфатидызтанодамин (СЭ), фосфатидилглицерин (ФГ) и фосфа-тидшшнозит (С»0, а также следа. диФР (табл.3). Жирные кислоты ФХ, . ФЭ к. 531 имеют примерно. одинаковые , качественный .•'• и количественный составы, основными кислотами их являются 16:0, 18:3 и 18:2. Во всех классах ЗУ1 обнаружена пальмитолеиновая кислота, 1б:1(3)-йзо-мер найден только у ФИ.

Таким образом, листья облепихи, произрастающей в РУз, представляют собой богатый источник,биологически активных веществ, набор их идентичен с таковым масла околоплодника, облепихи, и .поэтому листья могут быть пригодны для получения препаратов-вамените-

Таблица 3.

Полярные липиды листьев облепихи и распределение в них жирных кислот.

, ЛИГОЗД." гликолшаы Фооюлипиди

СХВДР ДГДГ XI Х2 ГС мгдг Ас-ГС ФХ ФЭ ФГ СИ

Содержание, X от массы: 7,5 32,5 1,2 1,7 5,7 45,2 6,2 32,8 29,7 21,5 16,0

. Кислота, X ГЯХ: 14:0 15:0 16:0 16:1(3) 16:1(9) 16:3 13:0 18:1 18:2 1др,кислот а 3,3 1,8 55,4 } 3,2 4,8 ' 6,1 6,0 3,6 15,8 66,6 33,4 0,3 0,2 24,4 К 5 1,1 1,2 1,4 2,7 64,2 3,0 26^1 73,9 0,4 18,5 ' 1.5 1,1 6,1: 10,4 58.0 4,0 20.1 : 79,9 0~4 20,0 .Аа. 1,1 8,3 9.0 57,7 1,7 20,4 79,6 ; - 0,3 0,2 9,1 )/3 0,9 2,9 11,7 72,2 1,4 9,6 90,4 .1,4 0,8 28,5 2,9 0,9 1.4 14,4 10,8 31,4 7.5 33,7 66,3 0,6 30.4 0,8 2,5 5,3 19.5 38,2 2,7 36,2 63,8 1/2 35,2 2.5 2,2 4,8 15.2 32.3 6.6 45,2 54,8 0,8 21.5 12;б 1.2 2.4 8.5 48.6 4,4 25,Б 74,5 1,0 37.4 ]1.9 3,6 4,2 16,8 27.5 7,6 49.6 50,4

"минорные количества кислот: 9:0,10:0,10:1,11:1,12:1,13:0,13:1,14:1,14:2,

15:0,16:2,20:1.

лей облепихсвого изсла.. Фармакологические исследования гексановых зкстрактов листьев показали выраженное поаитивкое влияние их на лечение кожных ран, ожогов, а также язвеннък поражении желудка.

3. Липвды коры стеблей облепихи.

Выход гексанового извлечения из сухой коры стеблей составил --12. Состав и содержание идентифицированных нейтральных липидов коры облепихи следующий.(X от массы липидов)¡углеводороды (3,4), алифатические эфиры- (1,4), сложные зфиры ЯК с циклическими спиртами (5,6), ацетаты отёролов (4,7), ТАГ (16,4), СЕК (48,6), жирные спирты+тритерпенолы (5,7), стэролы (4,8), тритерпеновые кислоты (4,0), неиденти&щировангше (5,4). В составе ЯК, определенных для двух кгассов -ТАГ. и СЯК (табл.4)- в значительном количестве обнаружена характерная для облепихи 16:1-кислота. Также, как и в других органах растения облепихи, ; в коре высок уровень циклических и жирных спиртов, а также тритерпеноьых кислот.

Резюмируя ■ полученные данные, следует отметить, ■ что липидц вегетативных органов облепихи.характеризуются'налотием.аначителько-го количества .пальыитолеиноврй кислоты в нейтральных соединениях,. а также биологически .активных весеств, представлекнкх' цикопески-ки и игспренсадшлот спирга\вг; и тр1ггерпенозыге1 кислотами.

Таблица 4.

Ьфнокислотнык состав ТАГ и СЖ коры облепихи, X ГЕЧ.

Кислоты; 12:0 14:0 15:0 16:0 16:1 16:2 18:0 18:1 18:2 20:0

сак таг :■' 1,4 м»о 1.6 1.0 1.3 34,4 29,3 20,5 36.* 1.7 1.3 7,1 27,9 23,4 4,6 5,1 1,9

4. Нейтральны*» дипидн. семкн лоха.

Изучала липвды трех' морфологических форм лоха вида . Е1аеагпиз апгизШоИа Ь.» щюизрадтазд« на территории Узбекистана. В «золах семян преобладает; ТАГ (86.2-93.7Х). Крема того, в липидах всех форм имеются углеводороды (0,1-0,5%), сложные эфиры ЖК с алифатическими и : циклкчеогашк спиртами (1,6-3,0%), С2К (0.1-1.4Х), ?рктераекода (0.3-0.8Х), стеролы (1,9-6,2х), а также оксигенированные соединения (эпоксиацилдиацаятлицерош-до 2%, гидроксиациддиаг^аглицеролы-до 0,6Х).

Во фракциях ТАГ «асел семян оснавной' этерифихвфувдей кислотой • является 18:2 (табл.5), в СХК, в отличие от ТАГ, повышено содер-

жанке насыщенных (16:0 и 18:0), с сохранением 18:2 в качестве основной. Если состав ЯК двух предыдущих фракций почти не отличается для трех изученных форм растения, то в сложных эфирах выделяется ЕК-состав формы II. Здесь почти в 10 раз по сравнению с формами I и III повышено содержание лауриновой 12:0 и на. ту же величину уменьшается масса 16:0-кислоты.-

. Преобладающим углеводородом -лктяог семян трех форм лоха является Сга (68,2-75,4t). Во фракции стеролов и га зфкров найден только 8-ситостерол. Кз лкгшдов семян , растешет лоха формы I, содержащих наибольшее количество окисленных соединений, выделили монозпокск- и моногидрюкскацилдиацилглицеролы.

Состав-кирных . -.'вцило*-- окскгенированных -классов приведен в тайд.5. Более половины их массы приходится ка долю 18:2-кислоты. .

ЭГ.0КСИ- и пздрокстетслоты игучате в виде ТМС-прсизводных их МЭ методом ГХ-МС. На хроматсграмме диТМС-производных МЭ зпокси- • кислот выделялся ляс 3. Его MC содсрягл таг*, молекулярного кс-на и характеристичных фрагментов., ука?кр*ющих на то, что основным компонентом суммы эпоксккислот является 15,1С-эпокси-9,12-октадека-дкёкозая кислота, что характерно и дзет.семян облепихи (табл.б).

. .. Таблица 5.

Зкрксгг^стккй состав: лкпкдсв сзмяи zcxa.-

Класс липи- ДОВ Форма лоха ■ . Кислота, 2 :ГЯХ

8:0 10:0 12:0 14:0 15:0 16:0 16:1 17:0 18:0 18:1 18:2jl8:3

ТАГ I II 0,7 0,3 0.5 0,3 - 1 3,7 0,5 1,8 ' - |. 4-3 0,5 0,5 1,0 2,7 1,3 1,9 22,3 23.1 25',7 54,2|16,5 59.1Il2,4 56,6|-10,4

■ СЕК 'I II III 0,9 0,5 0,2 2,2 1,7 0.1 1.7 1,5 0,7 .0,5 20.7 18.8 21,3 3,2 2,7 .5,6 1,2 0,3 7,7 7,5 6,9 25,9 24,6 26,9 32,6 35,3 34,1 6,0 4.8 3.9

Сложные афиры I II III 1,0 1,1 .1,2 0,9 3,4 22,6 3,3 3,0 0,9 1,5 0,9 0,5. 27,3 2 5 2912 3,1 1,8 3,2 Р к 1,'2 6,9 13,8 3,8 24,2 21,9 27,2 13.6 27,0 20.7 л о с; 5,0 10.4

зпок-си-ТАГ . I . - - 0,8 4,3 - 22,1 1 60,7jl2,l 1

гид-рок- СИ- ТАГ I - - - 8,2 3,4 24,1 54,0 10,3

кЕ предыдущего хроштографкческого пика покагывает наличие неразделенной смеси.двух изомерных соединений - производных 9,10-зпок-си-12- и 12,13-эпскси-9-октадеценовой кислот.

МС остальных трех хроматографических пиков содержат слабые пики молекулярных ионов с т/г 488,486 и 484, что соответствует наличию в смеси диэпоксикислот, у которых одна из зпоксигрупп не вступила в реакцию. Эти соединения частично подвергаются термическому разложению на колонке, в результате которого образуются продукты состава М-ТМСОН, и определить их структуру этим методом пока не удалось.•

Хромагсграмма суммы :ТМС-производных М5 гидроксикислот в этих же усжзвкяхобнаружшга 9 хроиатографических пиков.. МС основного по содержанию из них ■■ оказался наиболее сложным по составу. Он состоял из смеси трех С1в-гидроксикислот с двойной связью - у ес-атома и изомерных по положении гкдроксила: 8-, 11- и 12-гвд-рокси-9-октадеценовые кислоты. Разделения изомерных соединений не произошло,. что наблюдалось к ранее. Неразделе-кккж оказались к пары соединений, соответствующих структурам 7-8 к 9-10. МС соединения 11 отвечает структуре насыщенной 12-ОН-октадекановой кислоты. ... . /:

Далънейаая интерпретация спектров показывает разделение трех гадроксщшслот Сав: 2» кгоизриж кзк по всдсяениэ гэдрсктала, так . и по поражению двойной связи.- Учитывая, что в случае яг-г.яьного расположения ТМС-группы и конгюгироьайкьс; диеновых связей наиболее значительными являются ионы, образующиеся в результате а-расщепления ближе'к ТМС-группе, - ш аденткфицировадз! 9-СН-10.12- и 13-0Н-9,11-октадекадиеноные кислоты. В случае последнего пика значения М*332 и двух наиболее интенсивных пиков иокоз (т/г 297 и 229) в его' УС однозначно определяют полатекие конъюгировакной ди-енольной системы как 8,10-, в то время как больший пик с т/г297 показывает локализац»® Ткй-грулпы., Таким образом, МС зтого пика соответствует структуре 12-0Н-8,10-октадекадиеновой кислоты.

ИК-спектр суммарных гидроксикислст обнаруживает полосы поглощения как цис-транс-,.так и транс-транс-сопряженных диеновых систем, поэтому подобное разделение изомеров оксигенированных 18:2-кисяот может быть, связано с пространственной конфигурацией диеновой системы..

Таблица Б. Оксигенировантше кислоты семян лоха.

Название, структура

Фрагментные и характеристичные ионы,т/2

Эпоксикислоты

1. 9,1и-зп-12-октадеценовая СНз(СНг)4СН=СНСН2СН-СН(СН2)7С00Н

чО'

2. 12,13-эп-9-октадец<?новая

снз(сно) 4СН-снсн-сн-сн (снг) 7«юн >|У . .

3. 15,16-эп-9,12-октадекадиенсвая снзсн2сн-рнснгсн-снонгсн^сн(сн2)7С00Н

4. дйзпокси-18:0

5. Диэпокси-18:1 о. Диэпокси-18:2. СН3С7Н8ОШ-СН (СНг) 7СООН

4 О'

.. Гидроксикислоты

7. ЮЧЗН^Ь.й-тридекадиеновая СНз(СН2)2СН-СН-СНСН-СН(СНг) 4СООН

ОН

8. 11~0Н-9-тридеценЬзая '

сн3ен2£н-сн-сн(СНг)7СОСН .

9. 9-ОН-Ю-гексадецековая СНз(СИ2)4СН-СН^Н-(СН2)?С00Н

10. З-ОК-гептадег^нсвая ■ . СКз(СН2)?СН-(СН2)7С00Н

11. 12-0К-октадекановая СНз(СИ2)5СН-(СН2)юС0СН

. ОН

12. 8-0Н-9-октадецековая СН3(СН2)7СН=СН^Н- (сн2)6соон

13. И-ОН-Э-октадецёноЕая

СНз(СНг)бСн-сн=сн(сн2)7 соон он

14. 12-0Н-9-октадеценовая

СНч(СН2)^СН-СН2СН=СН(СНо)7С00Н ОН

15. 9-0Н-10,12-октадекадиеновач ОЫСН2)4СН=СНСН=СКСН-(СН2)7С00К

" он .

16. 13-0Н-9,11-октадекадиеновая СНз(СНг)«СН-СН-СНСН-СН(СНг)7СО0Н

он

17. 12-0Н-8,10'Октадекадиеновая СНз(СН2)5СН-СН-СНСН-СН(СН2)бС00Н

472

472

470

488 486 484

312 314

■356 372 386 384 384 384 382 382 382'

457,439,361,332,315, 259,213

457,439,401,299.275, 270,173

455,439,412,339,233,

131,

393 '

395 '

394,361,327,259,225

297,231,269.265,197 299,285,283,267,157 341,325*309,285,189 357¿341,325,259,215 371.355,339,301,187 369,353,337,271,241 369,353.337,285,227 369,353,335,299,187

367,351,341,335,311, 292,225

387,351,335,311.225. 130

367,351.335,297,239

- 14 -

5. Нейтральные дкпкды околоплодника доха. Выход кейтрадьньк гкгддов, экстрагированных гексаком яз измельченных околоплодников трех форм доха, составил: 1,2; 0,95 и 0,82 от, массы сырья;. Нейтральные'липиды околоплодников представлены 8 классах® соединений. Содержание ТАГ здесь, в отличие от облепихи, невелико (19-312), но. также, как и облепиха, иссдедуе» мый объект Еключает аначительное количество биологически сливных вецеств, представленных тритерпекодами, стеродами и их эфирами, а таюке-тригерпеновьми кислотами. ^

Следует отметить, что в .- составе свободных стеролов . (24,8-28,92) и стеролов, полученных в результате жесткого гидролиза фракции сложных зфкров (7,2-8,02), методами .ТЕХ- к ИЗ обнаружен лишь »-ситостерол, т.е. почти треть нейтральных липидов плодовой мякоти доха состоит из чистого р-ситостерола. ' . ' •

Состав ЕК. фракций ТАГ .плодовой мякоти б основном однороден к имеет три главные по содержании кислоты (16:0,18:1 и 18:2). Однако состав СЕК вгрех форыах ааАгегко раг.^жаетсл . Еслк у первых двух форм большая часть суммарных кислот приходится на 16:0, то в СЕК формы III, как и в- сложных эфирах семян формы 11, отмечено . высокое содержание . 12:0-кислоты.. Во фракциях сждагых эфкров форм 1 и II доминируют 16:0, 18:3 и 22:1-кислотьг, в форме III этой же-, фрггэдш 16:0, 18:2 И 18:1. '..

. Таким сйр^ом, : если-при сравнения"масед.-'семян лоха и'облепихк обнаружена вдеитичнссть их ЖК-составов и наличие ь них. окисаейвых' липидов, то состав липидов. околоплодника лоха не. аналогичен таковому облепихи, Содержание • уникального-масла окодопдодника облепихи составляет 8-102 на сухую массу и 902 масла представлено ТАГ. Мякоть доха бедна лйпидами и соответственно содержанием, класса ТАГ.,. На долю основной, -'характерной для околоплодника облепихи 16:1-кислоты приходится 40-502 от. массы кислот,;,у лоха же ее содержание составляет всего 3-102.

6. Полярные липиды плодов лоха. Определяли содержание и состав ГЛ и плодов лоха (табл.7), а также распределение ЖК'в отдельных классах.

Основным классом ГЛ и в семенах, и в околошгодиике являются МГДГ. Все ГЛ-классы семян являются высоко насыщенными, основные кислоты здесь 16:0 и 18:0.

• В ГЛ околоплодника 18:0 также.является основной, содержание 18:0 значительно ниже по- сравнению, с: семенами и несколько увели- •

- га - ■

чена доля 18:1-кислоты. Кроме того, ГЛ плодов доха имеют в составе этеррйицирувщих их кислот ниакомолекулярные кислоты ряда Сд-Сгз, насыщенные и моноеиовые.

Среди ФЯ плодов -лоха преобладают ФХ. В качественном отношении семена отличаются присутствием ФК, М-ацил- и лкзо-М-зцял-ФЗ, -а также неидентифицированного ФЛ, дающего положительную реакцию на сахар, не обнаруженных в околоплоднике.

При сравнении ЯК-составов ФЛ околоплодника й семян оказалось, что качественно они вдентичны. Преобладающими среди насыщенных кислот является 16:0, среди ненасыщенных -18:2 и 18:1. В основных ЬЯ-классах доля ненасыщенных кислот превалирует. ИДеятифицирован-

Таблица 7.

Состав глико- и фосфолшщдов плодов лоха. .

гл, г ФЛ, %

от массы семена околоплодник от массы семена околоплодник

Неидентиф. 10,0 . ФХ 52,1 45,8

СХ8ДГ 12,3 8,4 та • 16,4 25,0

ДГДГ 25,3 11,6 ФИ' 19.2 29,2

Керамид- ФК . 3.5 ■ -

олигозиды 1.3 2.2 И-ацид-ФЭ 1.7 -

Цэребрози- 2,5 Лизо-Н- 3.2 \ ■

ды 4,1 -ацил-ФЭ -

ГС. 6,7 18,1 3.9 -

МГДГ 34,9 36,1

Ас-ГС . 4,2 11,6

АС-МГДГ 2,8 7,9

нкэ в семенах лоха минсрныэ ФЛ, креме ФК, отдкчазтеа высоки содержанием насыщенных кислот.

■ 7. Люпин коры ветвей и цзетов лоха.-.

Были исследованы нейтральные липиды,■ ■ извлеченные из воздуп-но-сухих керы и одетов лоха (табл.8).

■ Основным классом нейтральных липидов в цветах были сдожшй эфйры НК: с алифатическими' и 'ци^и^сюадт' сщф'гсмй, в таре - триа-цилглицерелы и сложные зфиры.

Углеводородные фракции из . этих органов растения были представлены не только насыщенными соединениями, как в остальных частях лоха. . 8 состав углеводородов коры, по данным Ад^/ТСХ и Ж, входили гомологичные мою-, ди- и гриексвые углеводороды с пиками молекулярных- ионоз с т/г 250-292 .(СгвНз4-С21Н4о) - Углеводороды цветов были еще Солее разнообразны по составу. Физидо-химическими методами здесь были обнаружена разветвленные, каротинсидные и

ароматические УВ.

Таблица 8.

Нейтральные липиды коры ветвей и цветов лоха..

Содержание, X от массы

Липид

кора цветы .

1. Углеводороды 11,5 • 4,0

2. Сложные эфиры ЖК с алифатич..и цик- 16,4 33,1

лич. спиртами

3. Метиловые и этиловые эфиры ЖК . - 1.8

4. Ацетаты стеролов 1,4 -

5. Триацклглицеролы 26,2 15,4

6. Токоферолы - 0.4

7. Свободные жирные кислоты .- 0,5 5,8

8. Изопренслы 1.6 -

9. Высшие жирные спирты 5,3 X 15.2

10 Тритерпенолы . 5,0

11 Диацилглицеролы 0,9 2,0

12 Стеролы 4,6 9,9

13 . Гидроксиацилдиацилглицеролы 0.9 ■ -

14 Тритерпеновые-кислоты , 9,6 7,5

15 Моноацидглицеролы - - 0,9

16 Хлорофилла : i6,i . - .

17 Неидеяткфицировашшв 4,0 ...

Основным парадом' этих двух объектов, также как и во всех остальных изученных органах растений семокства Лоховых, Otis нока-козаз. ■

Сракщгл: свободных и ацижфСЕакккх трятерпл»огов состояли из снеси аюфнкоэ, стерслы и в свободной, и в связанной форие-из В-ситостерала. Крсмэ того, с Цветах обнаружещ натквкыо кетясовие и зкиовыо зфг^ц 2К и тскофоролы. отсутствующе в коре.

По составу ХК ащисодержаздос липидзв ТАГ в обоих .источниках-являются ненаоыцс-ЕНаас:, но в ТАГ коры основная кислота - 18:1, в ТАГ цветов - 18:3. В сложнкс зфирах коры доминирует 18:2, в цветах - 16:0 н 18:1-каслаты примерно в■: равных количествах. • 8. Липидылистьевдоха. : Липады листьев доха изучали, разделяя экстракт на кислус и нейтральную части. В кислой части обнаружены жирные (основные 18:3 и 16:0) и трятерпеновые кислоты. Состав лшшдов нейтральной части, Ъ от кассы: углеводороды-*,в; каротиноиды+неидентифициро-ванные-2,9; сложные эфиры 2К с адифатическимии циклическим! спиртами-4Д; изосренолы-32,9; жирные спирты+тритерпенолы-11,2; тритерпевовые альдегиды-1,0; метилстероаы-1,7; стераш-5,5; ос-¥аоное-неидеята5кцарованное.

По этим данным, одну треть липидов нейтральной части листьев составляют иэопренолы, обладающие высотой физиологической а-гж-ностыо. Экспериментальное изучение 6ио2ктиености Липидов нейтральной части гидролизата листьев лоха в виде композиции на основе растительного масла, проведенное в лаборатории фармакологии ИХРВ АН РУз, показало.выраженное ранозаживляющее и противоязвенное действие.

ВЫВОДЫ."

1. Впервые проведено сравнительное.изучение нейтральных,липидов листьев облепихи,, фракционированных на эпикутикуляркые и ку-тикулярные липиды. Показано, что основными липидами эпикутикуляр-ного слоя р.ЕЛяатся сложные .эфиры высокомолекулярных спиртов к кислот. Впервые определен состав нативных. клеточных липкдов листьев облепихи. представленный 15 классами соединений установленной структуры. Найдено, что основная масса липидов клетки приходится на долю сложных зфиров жирных, циклических й кзспреко-кдных спиртов с жирными. кислотами.

2. Впервые изучен состав полярных липкдов . - листьев, облепихи, представленный 7 глико- и 4 фосфолипидными классами.1 3 отличие от фосфолилидов, бо всех гликолипидных классах обнаружено по два. изсмера 1б:1-кк^оты:,'.а также'1,б:3--кислота.

3. Впервые изучены нейтральные ¿являй* горы ветвей - -облепихи, определен ¡кирнокислоткый состав основных ацилсодер^ащих классов; выявлено, что по содержгшот лальмитолеивовой кислоты-, характерной душ облепихового масла, • этот орган растения занимает промежуточное поюкэяие мёяду листьями и оковогагодником.'

4. Исследованы ранее не изученные нейтральные и полярные липиды генеративных органов другого представителя семейства Лохо-вых-лоха узколистного. В семенах обнаружено 8 классов нейтральных липидов с преобладанием тркадагглицеролов, 9 классов гликокеждое и 6-фосфолипидов. - Масло семян, лоха является лияолево-ссдержащим, что характерно и для фосфолипидов, гликолипиды обогащены насыщенными кислотами 16:0 И 18:0.

. 5. В составе масла семян- выявлено . 2 ..типа - оксигенированных триацилглицеролов. Методом РХ-Ж, установлено,, что они этерифици-рованы 6 эпокси-: и'11 . гидроксикислотами. Установлена структура новой:природной кислоты как 12-гидрокси-8,10-октадекадиеновок.

6. В околоплоднике лоха обнаружены: 8 классов нейтральных липидов, 8 глико- и 3 фосфрлипидных класса, определена их кирвокис-

лотные составы. В нейтральных лилкдах основными кислотами являются 16:0, 18:1 18:2, в ГЛ -16:0, 18:1 а В Ш - 18:2. .

7. Среди нейтральных ляпидов цветов-лоха обнаружено 12 классов соединений с преобладанием по массе сложных эфиров различных спиртов с жирными кислотами. ■

8. Впервые изучены нейтральные липиды вегетативных органов . лоха: коры-ветвей и листьев. Оскобныккклассами. нейтральнее лшк-дов коры являются углеводороды, сложные эфиры циклических спиртов с жирными ккслотаии и трнгцклглицеролы. Лжиды нейтральной части листьев лоха на одну треть состоят ив изопреколов.

9. На способы получения рановаживляющих средств из листьев облепихи и лоха получены авторское свидетельство н патент РУг.

Материалы диодеотаиии опубликованы в работах:

.1. Жмарко Т.Г., Гончарова H.H., Гигиенова Э.И., Глушенкова А.К. Групповой состав' нейтральных люгадов в пасхе паэдоз. tiippap- ... haö rhaanpldes. 7/ Хкакя.'природ. средин.-1984.-С.300.-

2. -Гончарова Н.П., Глуденкоьа А.И. Липиды плодов лоха. // Химия природ. соедин.-1990.-С.17.

3. Гончарова Н.П.', Ксамухамедов А.Ш., Глушенкова А.И. Глико-и фосфолипиды плодов Elaeagnüs artgustifolis. // Химия природ, соедин.-1533. -С.645. ..*

4. Гончарова И.П., Глуиешсова А.И. Лхасы листьев среднеазиатских форм"облепихи. // ХкМкя природ. соедин.-1923. -C.8S4.

Б. Сыров В.Н. . Гончарова Н.П;-, Хушбактова 3.Ä., Дкухарова >:. ,' Глуыокгльа А.К.• Перспективы-испольвовэ.ч!'л лкстидрого экстракта из листьев облепихи в качестве ранозалшвлящего ■ и противоязвенного средства. // Киме ва фармация.-1994.-С.54.

-.6. Гончарова Н.П., Плугарь В.К., Рашкес Я.В., Ксамухамедов А.Ш., ГлуиенкоЕз А.К. 'Окгигешфсваиные кислоты якпидоз семян Е1а-esgnus angustifoHa-// Химия природ, соедин.-1994.-С.715.

7. Гончарова Н.П., Глушенкова А.К. Эпикутикулярные и,клеточные липиды листьев облепихи. //Химия природ. соедин. -1995. -С. 790.

8. Гончарова Н.П., Глуагенкова А.И. Полярные липиды листьев облепихи.// 'Химия природ, соедин.-1995.-С.657.

9. A.C. 1480175 СССР МКИ3 А 61 К 35/78 / Гончарова Н.П., Глушенкова А.К., Сыров В.Н.. Деухарзва М.Х., Хушбактова З.А., Туляганов Н.Т.-Йс.

10. Патент РУ N 1754 МКИ3 А 61 К 35/73 /Исамухамедов А. 31.. Гончарова Н.П.. Глушенкога Х.Н., Сырса В.Н., Набиев А.Н., Хусбак-тсга З.А. - Зс.

11. Глушенкова А.И..Гигиенова Э.И., Емкрко Т.Г..Гончарова Н.П. Сравнительный анализ состава липидсв масел плодовой мякоти и семян облепихи./ Отчет по координационной программе "Исследование облепихи и облеоихавого масла за 1931-1982гг."-Новосибирск-Барнаул. -1333. -С. 20-21.

12. Ямырга Т.Г., Гокчароза Н.П., Зегельман А.Б.. Глушенкова А.И. Липида листьев и фреоновых экстрактов плодов облепихи./ Тезисы доклада ка 5-сй Всесоюзной конференции по исследованию облепихи и облепихового масла.-Горма!Й.-1985.-С.7.

ХУЛОСА

Н.П. Гончарова :

гийдздоплзр (Е1аеащ-;асеае) оиласкяинг якяи вакиля лидидлари.

Этпсутй<удяр за кутшуляр дютиддар фгсмига ажратшгган чаканда успмлкги баргяяиЕГ ¡$утбоиз лхпидлари, мева урами лгеодларяга ¡^и-еслаб ургаяклди. . Чаканда ускмлиги бгргишпгг ^утбли лишдлари ур-таюищги ва уларда-16:1-кисловали язшерининг та^симдаштш; ани$-лаяди. -'■•■"■

• Илгари урганиглаглл ингкчка. жйксий аъ-

золаритиг ^утбли .ва ф^йсиз липиддари -ургакиадк. ^утбскз дигад-дар таркибвда тур , окскдлокган: бкриге/л Уларнкнг ацидданадетая камоталари орасвда бтгсн-зпокси ва 11та-си-гидрокси. Янги табгаш 12-гкдрокси-8.10-октгдекздкен кисдатгск-нинт тузилиЕп ани^панди. ^ . ■

Яийда усиклиги усия аъволарикинг !$утбсиз липидларк уртпэди. Дийда усимлиги баргзда биологик фаол. моддалгрникг мшрорк кярря зкаялиги курсатиб берилди.

Зийда ва чаканда ?симлкги барляая ярани г/аатувчи восита одиа усулига муаллифлнк гуво^комаси ва патент олинди.

- 20 -SAMARV

N.P.Goncharova

Lipids of two representatives from Elaeagnaceae family.

Study of the neutral lipids from the leaves of Hippcphae rhamnoides fractionated on the epicuticular and cutlcular lipids has been carried out in comparison with the pericarp lipids.

Polar lipids of the leaves of Hippophae rhamnoides were studied and the positional distribution of the 18:1 acid isomers in them established. ■

Neutral and polar lipids from the generative organs of Ela-eagnus ang-ustifolia were studied for the first tine.- Two types of oxygenated compounds were found in the composition of the neutral lipids. Among the acids' acylating them there are 6-epoxy and 11-hydroxy ones. The structure of new natural acid was established as 12-hydroxy-8,10-octadecadienic.

In vegetative organs of Elaeagnus angustifolia there have been studied the neutral lipids. High concentration of biologically active substances in the leaves of this plant was shown.

Author's certificate and the patent on receipt modes of wound heal ling remedies from leaves of H. rhsnicides and E. angustifo-lia were received., •