Полифенольные соединения растений рода Sedum тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

УДК 547.972 + 547.455 (088.8) + 547.56

На правах рукописи

Корулькин Дмитрий Юрьевич

ПОЛИФЕНОЛЪНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ РАСТЕНИЙ РОДА БЕБиМ

(02.00.10 - биоорганическая химия, химия природных и физиологически активных веществ)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата

химических наук

Республика Казахстан Алматы 1998

Работа выполнена на кафедре органической химии и химии природных соединений химического факультета Казахского государственного национального университета им. аль-Фараби.

Научный руководитель: Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

кандидат химических наук, доцент В.Б.Омуркамзинова

доктор химических наук, профессор П.П.Гладышев

кандидат химических наук, доцент Р.А.Жубаева

Московский государственный

университет

им. М.ВЛомоносова

Защита состоится "3" сентября 1998 г. в 1400 часов на заседании диссертационного совета Д 14 А 01.12 в Казахском государственном национальном университете им. аль-Фараби по адресу: 480012. г.Алматы, ул. Карасай батыра, 95л, химический факультет КазГУ, ауд. 321.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке КазГУ по адресу: 480012, г.Алматы, ул. Масанчи, 39/47.

Автореферат разослан " ^ " ® <> 1998 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Д 14 А 01.12

канд. хим. наук А.К.Бикмухаметова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Широкий спектр биологической активности и малая токсичность полифенол ьных соединений, отсутствие аллергизирующих и кумулятивных свойств этих соединений ставят их в ряд наиболее перспективных для практического использования в медицине, сельском хозяйстве, кожевенной и пищевой промышленности.

Актуальность темы диссертационной работы обусловлена потребностью здравоохранения и фармацевтической промышленности Республики Казахстан з новых, эффективных лекарственных средствах из растений местной флоры.

Изучение химического состава местных дикорастущих лекарственных растений тем более актуально, что Казахстан является богатейшим источником растительных ресурсов, а практической медициной и народным хозяйством используется лишь малая часть этих ресурсов.

Исследования химического состава растений рода Sedum (очиток) и опыт использования различных видов этого растения в народной медицине разных стран в качестве противоопухолевого, противовоспалительного, радиозащитного, сосудорасширяющего, ранозажив-ляюшего, гипотензивного и др. средств свидетельствуют о перспективности данного исследования и целесообразности введения растений рода Sedum в официнальную медицину.

К настоящему времени в той или иной степени изучен химический состав 92 видов Sedum, в том числе частично изучались 9 видов, описанных во флоре Казахстана.

Наиболее полно описан состав Sedum acre, который не описан во флоре Казахстана, хотя произрастает повсеместно и используется в декоративных целях.

Поэтому химическое исследование полифенольного комплекса казахстанских видов рода Sedum, изучение биологической активности соединений и создание фитопрепаратов на их основе представляется актуальны?,! как в теоретическом, так и в практическом отношении.

Объектами исследования были 7 видов растения Sedum, описанных во флоре Казахстана. Для углубленного исследования выбран Sedum hibridum, имеющий промышленные запасы на территории республики.

Данное исследование является частью плановых исследований кафедры органической химии и химии природных соединений КазГУ имени аль-Фараби по изучению полифенольных соединений

дикорастущих растений Казахстана по госбюджетному финансированию (номер гос.регистрации 0195РК00066).

Цель работы - изучение фенольных соединений некоторых казахстанских видов Бес1ит, установление их строения, выявление биологически активных веществ и фитопрепаратов, отбор видов, перспективных для комплексного использования.

Научная новизна работы. Впервые изучен качественный состав и количественное содержание полифенольного комплекса семи казахстанских видов Бескип.

Из 24 индивидуальных полифенолов, выделенных из Бес1ит ЫЬпёит (очитка гибридного) - 17 являются новыми для изучаемого вида, 9 - новыми для рода Бескип. Одно вещество является не описанным ранее соединением и отправлено на гос.регистрацию. Структуры всех соединений доказаны комплексом химических и физико-химических методов (кислотная, щелочная деструкция, получение производных, УФ-, ИК-, ПМР-, |3С-ЯМР-, масс- , ВЭЖХ, БХ, АХ и ТСХ).

По основным группам изученных соединений выявлены хемотаксо-номичсские признаки казахстанских видов Бес1ит.

Разработана методика качественного и количественного анализа суммарных фитопрепаратов на основе дубильных веществ методом ВЭЖХ.

По результата:.; биоиспытаний 4-х новых фитопрепаратов подтверждена высокая иммуностимулирующая активность, известная для видов Бес1ит и выявлено два новых вида активности -радиомодифицирующая и рострегулирующая.

Практическая значимость. Разработана методика качественного и количественного анализа фитопрепаратов на основе дубильных веществ методом ВЭЖХ, позволяющая контролировать состав препаратов в течение разных сроков хранения и пригодная для практического использования при разработке проектов НТД на препараты такого типа.

Показана возможность комплексного использования казахстанских видов растений рода очиток для получения - аминокислотного, флавоноидного и таннидного биологически активных комплексов.

Разработаны методики получения 4 фитопрепаратов на основе дубильных веществ и флавоноидов.

Личный вклад автора заключается в выполнении экспериментальной работы, обсуждении и обобщении полученных результатов, наработке фитопрепаратов для биоиспытаний, подготовке публикаций.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы докладывались и обсуждались на Симпозиуме "Современные проблемы экологически чистых технологий и материалов" (Алматы, 1996); Международной научно-практической конференции "Переработка лекарственного сырья и производство фитопрепаратов для медицины и сельского хозяйства" (Алматы, 1996); IV Международной конференции по медицинской ботанике (Ялта, 1997).

Публикации. По материалам диссерташш опубликовано 6 статей и тезисы 2 докладов.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 119 страницах машинописного текста и включает введение, 3 главы, 15 таблиц, 10 рисунков, список цитируемой литературы из 242 наименований, приложение (акты биоиспытаний препаратов, результаты ВЭЖХ-анализа выделенных соединений).

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ '

Объектом исследований служили надземные органы и корни 7-ми казахстанских видов Sedum: S. асге. S. aizoon, S. Ewersii, S. hibridum, S. kamtshaticum, S. purpureum, S. telefium (предгорья Заилийского Алатау).*

Для углубленного исследования выбран Sedum hibridum (очиток гибридный).

1. Выделение фенольных соединений

Измельченное сырье (отдельно корни и надземная часть) последовательно обрабатывали бензолом и хлороформом для удаления липофильных веществ. Полнфенольный комплекс извлекали исчерпывающим экстрагированием 70% ацетоном, сочетая способ мацерации (24 часа) с последующей термической экстракцией при температуре около 60°С. Разделение веществ фенольной природы, в зависимости от их растворимости, проводили последовательной экстракцией органическими растворителями различной полярности (эфир, этилацетат). Выделение индивидуальных соединений осуществляли по разработанной нами схеме, с использованием сефадекса LH-20, полиамида, силикагеля L100/160 и препаративной хроматографии на бумаге и пластинах "Silufol UV-254", в аналитических целях использовали ВЭЖХ.

(*) - Автор выражает благодарность к.б.н., вне ГБС МН-АН PK Грудзинской JI.M. за помощь в заготовке и идентификации видов.

Полифенольный комплекс изученных видов очитков представлен 20-40 веществами, в очитке гибридном - 35 веществами семи групп соединений. Выделено и идентифицировано 24 индивидуальных фенольных соединения, представленных фенолами, фенолокислотами, флавоноидами, кумаринами и дубильными веществами (2.01-2.24).

2.1. Идентификация выделенных соединений Определение температуры плавления веществ проводили на блоке Кофлера. Удельные вращения определяли на круговом поляриметре СМ, УФ-спектры соединений снимали в метаноле и с диагностическими добавками, на приборах СФ-46 и "Specord UV", ИК-спектры - на приборе UR-75 (таблетки КВг), ЯМР ОН и "С) - на приборах "Bruker АМХ-400", "Bruker АМ-300" (400.13, 300.13 и 75.47 MHz) в (СОз)гСО и DMSO-dó (шкала о м.д.) , масс-спектры на масс -спектрометре "МАТ-311" с компьютерной системой . обработки данных SS-100 MS фирмы "Vanan"; (энергия ионизирующих электронов 70 еУ). ВЭЖХ-анализ проводили на хроматографе "DuPont 8800" в условиях обращенно-фазового процесса (Кл. 4.6x250 мм с Zorbax ODS; в качестве подвижной фазы использовали смеси: А -ацетонитрил-вода состава от 3:7 до 1:1 и Б - KH;PÛ4 - К2НРО-1 -этанол - этилацетат (42,5:42,5:10:5); скорость потока варьировалась от 0,5 до 1,0 мл/мин; использовался УФ-детектор (254 и 278 нм)).

2.1. Идентификация флавоноидов Флавоноидный комплекс растения представлен 10 веществами (тремя агликонами: госсипетин (2.02), кверцетин (2.06), кемпферол (2.10); пятью моногликозидами: 7-0-р-0-ксилопиранозид госсипетина (2.01), 3-0-(3-0-(2"-0-гашюил)глюкопиранозид кверцетина (2.04), З-О-P-D-глюкопиранозид кверцетина (2.05), З-О-сс-Ь-рамнопиранозид кверцетина (2.07), З-О-а-Ь-рамнопиранозид кемпферола (2.09) и двумя биозидами: З-О-Р-О-галактопиранозидо-О-р-В-ксилопиранозид

кверцетина (2.03) и З-О-рутинозид кверцетина (2.08)). Структуры соединений доказаны на основании комплексного использования специфических качественных реакций, химических и физико-химических методов. Агликоны и агликоновая часть гликозидов доказаны на основании данных кислотного гидролиза, щелочной деструкции, физико-химических характеристик, сравнением с аутентичными образцами и литературными данными. Углеводные фрагменты представлены D-глюкозой, D-галактозой, L-рамнозой и D-ксилозой, идентифицированы сравнением с достоверными образцами.

Кроме того, впервые для видов 8ес1ит, начато исследование антоцианов цветков Б. ЫЬпёит и Б. кагШзЬаисит. Следует отметить, что окраска цветков казахстанских видов Seduш аналогичная, размеры и количество их на стеблях различно.

При хроматографическом анализе обнаружено 5 антоциановых пигментов, в индивидуальном состоянии выделено и охарактеризовано 2 доминирующих вещества (2.11 и 2.12).

Результаты УФ-спектралъного исследования веществ с использованием диагностических добавок представлены в таблице1, ПМР-спектры - в таблице 2, 1Г,С-ЯМР и масс-спектры описаны по тексту.

Вещество - 2.04 - Для определения структурных фрагментов молекулы проводили стадийный кислотный гидролиз, при котором к 30 минуте отмечено образование двух полупродуктов, а затем кверцетина, Э-глюкозы и галловой кислоты.

Тпл полупродуктов = (212-214 "С и 240-241 °С) соответствуют З-О-р-О-ггаокозвду кверцетина и галловой кислоте и не дают депрессии при определении температур плавления проб смешения с достоверными образцами.

При проведении щелочной деструкции вещества 2.04, продукты реакции идентифицированы как флорогшоцин, протокатеховая и гачловая кислоты, что соответствует кверцитрину, этерифицирован-ному галловой кислотой.

Сложноэфирный характер связи галловой кислоты с гликозидом подтвержден наличием в ИК-спектре вещества полосы С=0 - группы в области 1734 см-1, наряду с наличием второй полосы поглощения С=0 группы в области 1640-1660 см1, характерной для 3,5-типа диокси-замещения флавоноида, при наличии 7,3',4'-триоксигруппировки.

Шесть сигналов в ПМР-спектре вещества 2.04 в области 3.60-6.04 мд соответствуют протонам углеводного фрагмента молекулы Э-глюкозы, а химический сдвиг Н-1" и Н-2" сигналов глюкозы на 0.4-0.5 мд указывает на 1",2"-тип замещения последней. Двухпротонный синглетный сигнал при 7.10 мд отнесен к эквивалентным Н-2,6 галловой кислоты. Два дублетных сигнала с константой мета-расщепления при 6.22 и 6.54 мд, подтверждают 5,7-тип замещения кольца А, а наличие трех дублет-дублетных сигналов при 6.94, 7.59 и 7.78 мд указывает на 3',4'-тип замещения кольца В. 13С-ЯМР-спектр вещества 2.04 в (СОз)гСО: 157.7 (С-2); 134.2 (С-3); 178.4 (С-4): 162.6 (С-5); 99.4 (С-6); 166.7 (С-7); 94.4 (С-8); 157.8 (С-9); 105.4 (С-10), 122.8 (С-Г); 115.8 (С-2'); 145.4 (С-3'); 149.1 (С-4'); 117.1 (С-5'); 122.7 (С-6'); 121.2 (С-Г"); 110.2 (2С, С-2'",6"') 145.8 (2С, С-3'",5'"); 138.9 (С-4'"); 165.1 (С-7"'); 99.8 (С-Г'); 73,3 (С-2"); 76.4 (С-3"); 69.2 (С-

Таблица 1

УФ-спектроскопия флавоноидов казахстанского вида Sedum hibridum

Вещество А.мах ,НМ

МеОН +NaOMe +NaOAc +ЫаОАс/НзВОз +А!СЬ +А1С1з/НС1

2.01 385 369 394 403 427 421

276. 270 279 278 298 298

2.02 385 362 394 407 451 446

278 289 285 290 292 292

2.03 356 388 374 384 381 375

268 280 286 276 298 297

2.04 357 267 220

2.05 355 391 370 380 384 376

268 284 286 273 300 298

2.06 376 334 409 398 432 426

256 386 262 264 278 277

2.07 352 387 369 369 390 368

268 280 284 270 289 287

2.08 351 384 370 377 409 389

264 270 275 264 ' 280 270

2.09 355 388 371 361 371 365

270 283 287 278 288 287

2.10 360 411 377 364 396 394

269 375 282 272 296 297

Таблица 2

Данные ПМР-спектроскопии флавоноидов Sedum hibridum

№ а м.д. (DMSO-dft)

Н-6 H-8 H-2' H-3* H-5' H-6' Протоны углеводных фрагментов другие

2.01 керацегат 6.82s 7.47dd 6.93dd 7.52dd 4.92-5.34m(4H, Н-Г,2',3\4');3.37Ч(Н-5'а); 4.27dd(l l-5'e) 2.07s(9H) 2,32s(3H) 2.38s(l 211)

2.03 6.18d 6.39d 7.52dd -- 6.86dd 7.68dd 3.02-4.43m(10H);4.62d(H-l '");5.78d(H-l")

2.03 нсраистат 7.33d 7.48d 8.06dd 7.6 ldd 8.12dd 7. i Od (Н-Г), 5.821(Н-Г"), 5.11-5.36m(4H,H-2",3",4",5"), 4.76-4.89in(3H, H-2"',3"',4"'), 4.10q(H-5"'e), 3.56q(H-5"'a), 3.34(2H-6") 2.33s(12H) 1.98s(18H)

2.04 6.22d 6.54d 7.78dd -- 6.94dd 7.59dd 3.6dd(I I-5"j;3.7dd(II-6");3.78dd(H-6");3.9t (H-4");4.(j«)t(H-3");5.39cld(H-2");6.04d(H-l") 7.10s(2H)

2.05 6.10d 6.40d 7.28dd -- 6.82dd 7.42dd 3.06-3.62m(6H);5.26d(H-l")

2.07 6.05d 6.40d 7.20dd 6.80dd 7.32dd 1.02d(3H;CHj);3.32in(H-5");3.47brs(H-3"); • 3.62brs(H-4");4.27t(H-2");5.08d(H-l ")

2.08 6.20d 6.52d 7.33dd -- 6.88dd 7.47dd 0.83d(3H;CIb);3.23-3.7m(10H);4.17d(H-r"); 5.82d(H-l")

2.09 6.26d 6.67d 7.82d 6.86d 6.86d 7.82d 0.8d(3II;CH3);3.2m(H-5");3.26-3.76m (2H;H-3",4");4.26t(H-2");4.96d(H-l")

4"); 78.0 (С-5"); 61.7 (С-6"). Как видно, химический сдвиг сигналов С-Г' и С-2" глюкозы по отношению к спектру незамещенной D-глюкозы, подтверждает вывод о 1",2"-типе замещения глюкозы, а большая величина смещения сигнала С-2" указывает на присутствие более полярной группировки в его окружении (молекула галловой кислоты). Число сигналов в спектре (28) соответствует числу углеродных атомов моно-галлоильного эфира моноглюкозида кверцетина. Присоединение глюкозы в положение 3- подтверждается областью резонанса С-3 кверцетина при 134.2 ад. 3',4'-тип замещения кольца B-наличием одноуглеродных сигналов в области 145-150 мд.

Сигнал М+ при 616 ш/е в масс-спектре вещества 2.04 также соответствует моногаллоил-моноглюкозиду кверцетина. Осколочные ионы (ММ 54 и ММ82) соответствуют отрыву галлоильного фрагмента и С=0 группы. Ионы с массами 414, 400, 364 и 337 соответствуют фрагментации углеводной части, связанной с флавоноидом. Наличие в масс-спектре иона 332 т/е, равного массе моногаллоилглюкозы, свидетельствует об этерификации флавоноид-ного гликозида галловой кислотой через углеводный фрагмент. Сигналы ионов 170, 153, 125 т/е соответствуют стандартному пути фрагментации галловой кислоты.

На основании изложенных данных соединение 2.04 идентифицировано как 3-О-р-0-(2"-О-галлоил)глюкопира1103ид 5,7,3',4'-тетра-оксифлавона. Вещество является новым для растений рода Sedum.

Специфическая окраска вещества 2.03 с аммиаком и раствором ЖАК, темная флуоресценция в УФ-свете и значительная подвижность в 2% СНзСООН указывают на гликозидированную природу этого вещества.

цин и протокатеховая кислота, что указывает на кверцетиновую природу агликона.

В динамике кислотного гидролиза вещества на первой стадии отщепляется О-ксилоза с образованием промежуточного продукта. По окончании гидролиза в продуктах идентифицированы кверцетин, Б-ксилоза и Э-галактоза. Полупродукт гидролиза на основании сопос-

он

В продуктах щелочной деструкции идентифицированы флороглЮ'

тавления литературных и экспериментальных данных идентифицирован как З-О-Р-О-галактопиранозид кверцетина.

Батохромное смещение положения первого максимума на 32 нм от действия СНзОЫа (табл.1) указывает на наличие свободной 4'-оксигруппы, смещение обеих полос - от действия СНзСООИа Рипах1=А.1мхП=+1о им) свидетельствует о свободной 7,4'-диоксигруп-пировки. Ортодиоксигруппировка кольца В (3',4') доказана по сдвигу Я-гаэх1=+28 нм от добавления НзВОз/СНзСОСЖа. Образование комплекса при добавлении А1С1з (Хтахп=+45 нм), указывает на наличие 5-ОН группы. Таким образом, наличие в исследуемой молекуле 5,7,3',4'- не замещенных гидроксигрупп указывает на биозидную природу вещества 2.03.

Два однопротонных дублетных сигнала с константой мета-расщепления в ПМР-спектре вещества 2.03 в области 6.15-6.55 мд подтверждают 5,7-тип замещения кольца А, а наличие трех дублет-дублетных сигналов в области 6.85-7.70 мд свидетельствует о 3',4'-замещении кольца В. Мультиплетный сигнал, интенсивностью в 10 протонов, в области 3.02-4.43 мд, синглетные однопротонные сигналы аномерных протонов при 4.62 и 5.78 мд и разница в их химических сдвигах равная 1.16 мд подтверждает биозидную природу углеводного заместителя.

Порядок связи между углеводными фрагментами доказывался сопоставлением ПМР-спектров исходного соединения и его пераце-тата, записанных в одних и тех же условиях. В частности обнаружено, что у первого протона ксилозы и шестого протона галактозы наблюдается наибольший сдвиг равный, 1,05 и 1,20 мд соответственно, присутствуют два двухпротонных сигнала мепшеновых групп галактозы и ксилозы и семь - метановых протонов с незначительным химическим сдвигом, что свидетельствует о 1-6 типе связи между углеводными фрагментами (табл. 2).

На основании вышеизложенного вещество 2.03 является новым гликозидом кверцетина - 3-0-р-0-галактопиранозидо-(1-6)-0-р-0-ксилопиранозидом.

он

Вещества 2.11 и 2.12: В продуктах щелочного плава у обеих пигментов получен флороглюцин, указывающий на 5,7-диоксизаме-щение кольца А, а п-оксибензойная кислота в качестве продукта той же реакции вещества 2.12 указывает на 4'-оксизамещение кольца В. Ванилиновая кислота у вещества 2.11 может указывать на 4'-окси-3'-метоксизамещение кольца В.

Свободное 4'-положение ОН-группы в указанных веществах подтверждается переходом окрасок пигментов при подщелачивании от красной до синей. На отсутствие углеводного заместителя в пятом положении веществ указывает красная, а не желтая флуоресценция их в УФ-свете.

УФ-спектр веществ 2.11 и 2.12 в метаноле и результаты перекисного окисления пигментов по Чандлеру (отсутствие в продуктах фенолокислот), свидетельствуют о том, что вещества не являются ацилированными формами антоцианов. Максимумы поглощения исследуемых красителей в УФ-спектрах, снятых в 0,01% НС1 в метаноле, отсутствие сдвига максимумов при добавлении борной кислоты к исследуемым пигментам, подтверждающее отсутствие орто-диоксигруппировки в обеих молекулах, смещение максимума II полосы при добавлении СНзСООКа на +16 нм и I - на +12 нм для вещества 2.11 и +13 нм - II; +10 нм -I для вещества 2.12 полностью совпадают со значениями максимумов для З-О-глюкозидов пеопидина (вещество 2.11) и пеларгонидина (вещество 2.12).

На основании полученных данных вещество 2.11 идентифицировано как З-О-Р-О-глюкоплранозид пеошщина, а вещество 2.12 - как З-О-р-О-глюкопиранозид пеларгонидина; соединения ранее не описаны для рода Беёиш.

2.2. Идентификация кумаринов

Вещества 2.13, 2.14 и 2.15 отнесены к кумаринам на основании специфических реакций и хроматографического исследования.

При окислении насыщенным раствором КМпО-1 при рН среды 10 в продуктах реакции вещества 2.13 обнаружена бензойная кислота, что подтверждает его кумариновую природу с незамещенным кольцом В. В продуктах окисления веществ 2.14 и 2.15 в этих условиях обнаружена м-оксибензойная кислота, что свидетельствует о наличии в структурах указанных соединений 5 или 7- ОН-групп и отсутствии других заместителей в кольце В.

Положение максимума поглощения вещества 2.13 в метаноле, а также отсутствие смещения полос при добавлении СНзСОСЖа в УФ-спектре, синглетный четырехпротонный сигнал при 6.55 мд в ПМР-

спектре исследуемого соединения подтверждают отсутствие замещения в кольце В, а дублетные сигналы при 6.18 и 7.08 мд свидетельствуют о незамещенности кольца А, что соответствует спектру незамещенного кумарина.

Положение максимумов поглощения в УФ-спектрах веществ 2.14 и 2.15 в метаноле (около 320 нм), батохромньш сдвиг этой полосы от действия СНзСОСЖа для вещества 2.14 объясняется как наличием замещения в молекуле, так и о- или п-расположением гидроксигрупп в структуре этого вещества. Эти выводы подтверждены данными ПМР-спектров, представленных в таблице 3.

Таблица 3

Данные ПМР-спектроскопии кумаринов Бейиш ЫЬпс1ит

Лг° о м.д. (ОМБО-ёе)

Н-3 Н-4 Н-5 Н-6 Н-7 Н-8

2.13 6,18(1 7,08с1 6,555 (4Н)

2.14 5,46з - - 6,75сИ 7,45(1 6,83(1с1

2.15 6.27с1 7,17(1 6,72(1(1 6,62(1с1 6,62(1(1

Наличие четырех сигналов протонов в области 5.46-7.45 мд, в ПМР-спектре вещества 2.14, указывает на дизамещенность структуры кумарина. Синглетный сигнал при 5.46 ад может соответствовать только Н-3 кольца А с кислородсодержащим заместителем в положении 4 кумариновой молекулы.

В |3С-ЯМР-спектре вещества 2.14(161.7 (С-2);89.7 (С-3); 167.8 (С-4); 155.6 (С-5); 110.8 (С-6); 132.8 (С-7); 107.4 (С-8); 154.6 (С-9); 103.7 (С-10)) на расположение гидроксигруппы в 4-, а не в 3-положении указывает характерный сигнал 89.7 мд. Дизамещенность молекулы подтверждается наличием двух сигналов в области выше 160 мд и характерным положением узлового углеродного атома при 103.7 мд. В случае 8-оксизамещелия - в продуктах перманганатометрического расщепления должна была быть найдена салициловая кислота, в случае 5-оксизамещения - м-оксибензойная. Перечисленные экспериментальные данные соответствуют описанным для 4,5-диоксикумарина.

В ПМР-спектре вещества 2.15 сигналы 6.27 и 7.17 мд, соответствуют протонам кольца А и свидетельствуют об отсутствии заместителей в 3- и 4-положениях. Сдвиг сигналов на 0.09 мд от аналогичных сигналов в спектре незамещенного кумарина указывает

на отсутствие 5-замещения, т.е. вещество 2.15 является 7-оксикумарином (умбеллифероном).

Вещество 2.15 - умбеллиферон - является нйвым для Sedum Ы1^ит, а 2.14 - 4,5-диокснкумарин - ранее не выделялось из растений рода Sedum.

. 2.3. Идентификация дубильных веществ

В этилацетатном извлечении надземной части Sedum специфическими качественными реакциями при хроматографическом исследовании обнаружено 6 гидроли ииишпуемых дубильных веществ и одно дубильное вещество ковдеисированного типа.

В сумме гидролизуемых дубильных веществ преобладают галлотаннины (5 веществ), одно вещество (2.17) является эллаготан-нином. Из пяти галлотаннинов, вещество 2.16 является доминирующим. При хроматографическом исследовании аналогичных фракций других видов Sedum также отмечено преобладание различных галлотаннинов, по количественному содержанию наиболее богаты дубильными веществами Б. гекГшш и Б. а1гооп. В сумме дубильных веществ доля конденсированного дубильного вещества во всех видах, по данным анализа методом ВЭЖХ, составляет 58-65%. В таблице 4 представлены данные спектрального исследования дубильных веществ Sedum ЫЬг^ит.

Таблица 4

Данные ПМР-спектроскопии дубильных веществ Sedum hibridum

№ ст м.д. (ОМБСМб)

Н-Г Н-2' Н-3' Н-4' Н-5' Н-6' другие

2.16 4.99йр 4.93dd(I 5.09dd|з 5.73dd<x 5.381(} 3.94ё(1а 3.88с!с3р 4.02ddg 3.64<1р 7.025, 7.03э, 7.055, 7.08Б

2.17 5.04аа 5.32йр 4Л6йр 5.07ddct 5.20(Р 4.08dа 4.10<Зр 3.82(1« 3.83ЬК(} 4.12«^ 4.14(3р 6.45з, 6.52в, 6.59з, 6.625

Вещество 2.16 отнесено к гидролизуемым дубильным веществам на основе галловой кислоты, поскольку помимо характерных качественных реакций и фиолетовой флуоресценции в УФ-свете в продуктах его стадийного кислотного гидролиза обнаружены промежуточный продукт и галловая кислота, а затем О-ппокоза и

галловая кислота. Образование промежуточного продукта гидролиза свидетельствует о сложном строении таннина, о наличии нескольких галлоильных фрагментов, а также об их неравноценности в углеводной составляющей. Промежуточный продукт гидролиза флуоресцирует фиолетовым цветом в УФ-свете, образует ярко-синее окрашивание с раствором ЖАК и зеленое - с о-толуидином. Температура плавления 149-150 (,С (лит. 148-151°С) и [сф = +47.3° (с 1.05; ЕЮН), (лит. +47.6°) полупродукта гидролиза соответствуют 3-галлоилглюкозе .

В ПМР-спектре вещества прописываются 12 сигналов углеводных протонов в области 3.60-5.78 мд а- и ß-форм глюкозы, и четыре сигнала ароматических протонов двух молекул галловой кислоты в области 7.05-7.10 мд, что согласуется с литературными данными для 2,3-дигаллоилглюкозы.

Сигналы 1:'С-ЯМР-спектра соединения отнесены к двум группам: 14 сигналов от 108.9 до 165.3 мд являются сигналами углеродных атомов двух молекул галловой кислоты и 12 сигналов от 60.6 до 94.5 мд - сигналы а-н ß- форм глюкозы с рядовым замещением.

Пик молекулярного нона в масс-спектре вещества при 484 ш/е также соответствует дигаллоилппокозе. Наличие сигналов осколочных ионов (М+-153 и М+-306) указывает на последовательный отрыв галлоильных фрагментов, а сигналы с массами 179 и 169 ш/е соответствуют ионам глюкозидного фрагмента и галловой кислоты, массы 153 и 126 ш/е соответствуют отрыву С=0 фрагментов от осколочных ионов. Сигналы в области от 93 до 39 т/е соответствуют фрагментации ароматической и углеводной систем.

В ПМР-спектре перацетата вещества 2.16 девятипротонный синглет при 1.90 мд, соответствует трем алифатическим ацетильным группам, а синглет при .2.42 мд интенсивностью в 18 протонных единиц - шести ароматическим ацетильным группам. Мультиплетный сигнал в области 3.75-6.30 мд соответствует шести протонам углеводного компонента, два двухпротонных синглета при 7.03 и 7.12 мд по положению и интенсивности соответствуют близким по характеру экранирования молекулам галловой кислоты, следовательно, соединение 2.16 является 2,3-дигаллоилглюкозой, которая ранее из растений рода Sedum не выделялась.

нонр НОНЙ ои

он

' Вещество 2.17 на основании данных кислотного гидролиза (эллаговая кислота и Б-глюкоза), характерных цветных реакций, фиолетовой флуоресценции в УФ-свете, отсутствия промежуточных продуктов гидролиза идентифицировано как моногексаоксидифеноил-гдюкоза. Зеленовато-желтое окрашивание с о-толуидином, четыре однопротонных синглета при 6.45, 6.52, 6.59 и 6.62 ад, относящихся к протонам гексаоксидифеноильного фрагмента, двенадцать сигналов в области от 3.83 до 5.32 мд, соответствующих а- и р-формам углеводной части молекулы, сдвиг сигналов 3'- (триплет при 5.20 мд и дублет-дублетов при 5.07 мд) и 6'- (два дублета, интенсивностью в два протона каждый при 4.14 и 4.16 мд) протонов свидетельствует о замещенности углеводных гидроксигрупп в указанных положениях.

Двадцать восемь сигналов в 13С-ЯМР-спектре в области от 106.4 до 168.7 мд соответствуют гексаоксидифеновому фрагменту молекулы. Пять пар углеродных атомов, связанных С-С связью в области 106.4107.5 мд, 115.2-115.9 мд, 123.0-123.8 мд, 135.0-135.9 ад, 143.9-144.8 ад, сигналы 166.4, 166.6, 167.9 и 168.1 мд соответствующие углеродным атомам в С=0 группах и двенадцать сигналов углеродных атомов глюкозы в области 65.5-102.0 мд соответствуют литературным данным для 3,6-гексаоксидифеноилглюкозы. Этот вывод согласуется с масс-спектром, где молекулярный ион ММ82 соответствует гексаоксиди-феноилглюкозе. Осколочные ионы (ММ8), (М*-338), ионы с массами 339, 179 т/е, сигналы от 153 до 39 ш/е соответствуют стандартному пути фрагментации гидролизуемых таннинов на основе гексаоксидифеновой кислоты.

Таким образом, вещество 2.17 идентифицироваио как 3,6-гексаоксидифеноилглюкоза и ранее из растений рода БесЗит не выделялось.

2.4. Идентификация фенола и фенолокислот Вещество 2.18: По положению на хроматограммах, на основании специфических качественных реакций, кислотного гидролиза и сравнения с достоверными метчиками обнаружены О-глюкоза и гидрохинон, последний не давал депрессии температуры плавления с метчиком гидрохинона, следовательно вещество 2.18 является глкжозидом гидрохинона, арбутином.

Перацетат ВСЩССТВЗ ИМСЛ 1 пд— 145-146 «С (лит. Тпл—145-145.5 °С) и при ВЭЖХ-анализе с аутентичным образцом арбутина в системе: 0.01М К2НРО4-О.О1М КРЬРОч-этанол-этилацетат (42.5:42.5:10:5) дисперсии пиков не отмечено.

Положения максимумов в УФ-спектре соединения 2.18 в метаноле соответствуют литературным данным для арбутина.

Вещества 2.19-2.24 отнесены к фенолокислотам на основании их голубой флуоресценции в УФ-свете и специфических реакций с раствором ЖАК и ДзПНА.

Вещество 2.19 величина Тпл, , отсутствие депрессии при определении Тпл пробы смешения его с метчиком галловой кислоты и время удерживания при ВЭЖХ-анализе в системе: 0.01М К:НРС>4-0.01 М КШРО-сЭтанол-этилацегат (42.5:42.5:10:5) позволяют идентифицировать его как галловую (3,4,5-триоксибензойную) кислоту.

Вещество 2.20 по температуре плавления, УФ-спектру 'в метаноле, хроматографическому сравнению с метчиком и отсутствию дисперсии пика при ВЭЖХ-анализе с метчиком идентифицировано как гентизиновая (2,5-диоксибензойная) кислота.

Следует отметить, что гентизиновая кислота является новой для 5е(1ит ЫЬпёит.

На основании специфических качественных реакций, температур плавления проб смешения с достоверными образцами кофейной, ванилиновой, сиреневой и феруловой кислот, УФ-сиектров в метаноле и времени удерживания веществ 2.21-2.24 при ВЭЖХ-анализе с аутентичными образцами (табл. 5) идентифицированы как - кофейная (2-(3,4-диоксифенилен)пропеновая); ванилиновая (З-метокси-4-оксибензой-ная); сиреневая (3,5-диметокси-4-оксибензойная); феруловая (2-(3-метокси-4-окспфснилсн)пропсновая) кислоты. Идентифицированные фенолокислоты также являются новыми для Бескип ЫЬпёшп, а сиреневая кислота ранее не выделялась из растений рода Бескнп.

Таблица 5

Физико-химические характеристики фенолокислот БесШт ЫЬпс1ит

Название Температура плавления,°С Время удерживания, мин

метчик образец образец метчик

гентизиновая 199.5 200-201 2,69 2.71

сиреневая 203 203-204 3,40 3,41

ванилиновая 207 208-209 3,06 3,02

галловая 238-239 239-240 1,88 1,89

кофейная 195 195-196 2,60 2,57

феруловая 168 167-168 3,19 3,23

Ниже представлены структуры веществ, новых для рода Беёипк

он

НОН2С

но

<

Кроме того, из казахстанского вида 8. ЫЬп(1ит впервые выделены н идентифицированы соединения 5 групп природных веществ: 2.01- 7-0-Р-0-ксилопиранозид (3,5.8,3',4'-пентаоксифлавона) госсипегина

2.03- 3-0-р-0-галактопиранозидо-(1-6)-0-р-В-ксилопираноз11Д квердетина (5,7,3',4'-тетраоксифлавона)

2.04- кверцетин-3-0-р-В-(2"-0-галлоил)-глюкопиранозид

2.08- З-О-рутшюзид (5,7,3',4'-тетраокснфлавона) квердетина

2.09- З-О-а-Ь-рамнопиранозид (5,7,4'-триоксифлавона) кемпферола 2.11 - кумарин

2.12- 4,5-диоксикумарин

2.13- 7-оксикумарин (умбеллиферон) 2.14 - 2,3-дигаллоил-0-глюкоза

2.15- 3,6-гексаоксидифеноил-0-глюкоза

2.16- 3-0-{3-0-глюкопиранозид пеонидина

2.17- З-О-р-О-глкжопиранозид (5,7,3',4'-тетраоксифлавил1ш) иеларгонидина

2.20- 2,5-диоксибензойная (гентизиновая) кислота

2.21 - 2-(3,4-диоксифенилен)пропеновая (кофейная) кислота

2.22- З-метокси-4-оксибензойная (ванилиновая) кислота

2.23- 3,5-диметокси-4-оксибензойная (сиреневая) кислота

2.24- 2-(3-метокси-4-оксифеннлен)пропеновая (феруловая) кислота

Надземные части и корни S. aizoon, Ewersii, purpureum, telefium, acre и kamtshaticum (казахстанские виды) исследовали аналогично с S. hibridum и обнаружили во всех видах фенолы, фенолокислоты, алкалоиды, аминокислоты, углеводы, флавоноиды, дубильные вещества, карбоновые кислоты (таблицы 6-10).

Сопоставительный анализ экспериментальных и литературных данных по химическому составу растений рода Sedum позволил выявить химические таксоны казахстанских видов Sedum по изученным группам природных соединений. Ниже представлены эти данные (выделены таксоны).

Таблица 6

Фенолы казахстанских растений рода Sedum

о Ü LÖ О о от 1 ш vi ■5 -S С/) 3 "я те со я о и | о. <л а 3 "у и vi

1 2 3 4 6 7

гидрохинон + + + + + + +

флороглгацнн + + + + + . + +

пирокатехин + 4- +

пирогаллол + +

арбутин + + + + +

Таблица 7

Фенолокислоты казахстанских растений рода Sedum

I 2 3 4 5 6 7

галловая + + + + + + +

кофейная + + + + + + +

феруловая + + + + + +

сиреневая + + + + + + +

гентизиновая + + + + + +

ванилиновая + + + + + + +

о-кумаровая +

Таблица 8 Углеводы казахстанских растений рода Бескип

1 2 3 4 5 6 7

глюкоза + + + + + + +

рамноза + + + + + + +

фруктоза + + + + +

мальтоза + +

арабиноза +

ксилоза + + :

Таблица 9 Флавоноиды казахстанских растений рода Зеёиш

1 2 3 | 4 5 6 ¡7

кемпферол + + + + + + ! +

кверцетин + + + + + + ! +

госсипетин + + ! + !

З-О-а-Ь-рамнопиранозид кемпферола + + + + +

З-О-сс-Ь-рамноииранозид кверцетина + + + + + +

кверцетин-3-0-а-0-(2"-0-галлоил)глюкопиранозид. + +

3-0-р-В-галар;топиранозидо-(1-6)-О-р-Б-ксилопиранозид кверцетина + + -

З-О-рутинозид кверцетина + + + +

З-О-р-Б-глюкопиранозид кверцетина + + + + + +

7-О-р-В-ксшюпиранозид госсипетина + +

Таблица 10

Аминокислоты казахстанских растений рода Sedum

1 2 3 4 5 6 7

цистеин + + + ■ + ' + + +

триптофан + + + + + + +

треонин + + + + + + +

глутаминовая кислота + + + + + +

аспарагиновая кислота + + + + + +

метионин + + +

аспарапш + ! + +

глутамин 1 ! +

аргинин + + + + +

Таксоны казахстанских видов Sedum

соон

сн о

кемпферол

ОН

NH,

мн.

соон

соон

он

треонин

ОН

СООН ОН

гилрохинон флороглюшш галловая кислота

I^^COOH Я00" ?00Н

НО но

ОСНз

глюкоза

рамноза

он

кофейная кислота

Н3СО'

сирсисвая кислота

ОСНз

ОН ванилиновая

Количественное определение обнаруженных групп природных соединений проводили по методикам ГФ СССР XI изд. Данные количественных измерений представлены в таблице 11, из которой видно, что максимальное содержание фенолокислот, кумаринов и свободных углеводов характерно для S. aizoon, флавоноидов для S. Ewersii, аминокислот для S. асге, алкалоидов для S. purpureum, ташшнов для S. telefium и S. aizoon. Наиболее богат и разнообразен по составу полифенольный комплекс - S. telefium, S. Ewersii, S. aizoon.

Таблица 11

Результаты сравнительного количественного определения некоторых групп природных соединений казахстанских видов 8е(1ит

Вид 5е<3ит Общая зола % Зола н.р. в НО % Сульфатная зола % Феноло- кнслоты % Флаво ноиды % Углеводы % Аминокислоты % Алкалоиды % Кума-рины % Таннины % Полифе-нольный комплекс %

1А 34.72 29.15 39.36 0.07 0.79 5.25 4.30 0.02 0.38 13.89 15.13

1Б 31.56 19.98 32.44 0.09 1.52 1.82 0.71 0.05 0.39 12.99 14.99

2А. 10.34 37.17 12.68 0.12 1.15 14.07 1.44 0.35 1.24 22.81 25.32

2Б 10.02 31.11 10.85 0.07 1.55 2.53 1.34 0.20 0.28 11.50 13.40

ЗА 13.44 46.88 20.04 0.09 2.28 6.03 1.09 0.26 1.11 21.28 24.76

ЗБ 12.51 40.09 17.73 0.03 3.07 2.09 3.43 0.10 0.30 14.80 18.20

4А 15.48 56.59 19.02 0.08 0.89 3.04 1.74 0.23 0.81 14.83 16.62

4Б 15.19 48.72 17.34 0.11 1.20 2.41 1.37 0.11 0.62 14.11 16.04

5А 11.68 42.18 14.88 0.08 1.12 14.00 1.06 0.25 0.39 7.46 9.05

5Б 11.44 45:64 18.98 0.07 1.50 2.62 1.09 0.11 0.31 9.99 11.87

6А 11.10 39.46 12.94 0.04 1.34 2.59 1.20 0.07 0.24 10.30 11.92

6Б 10.91 41.12 14.36 0.03 1.80 13.56 1.16 0.46 0.34 6.94 9.12

7А 13.60 39.70 16.12 0.11 1.13 1.49 2.90 0.33 0.75 16.71 18.70

7Б 13.18 40.24 17.54 0.08 1.14 2.31 1.24 0.18 0.97 24.79 26.98

(А) - корни; (Б) - надземная часть

4. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии в анализе природных полифенолов

Поскольку полифенольный комплекс Зес1ит ЫЬпс1шп представлен сложной смесью фенолов, фенолокислот, кумаринов, флавоноидов, дубильных веществ гидролизуемого и конденсированного типов, нами проведена работа по подбору условий их разделения методом ВЭЖХ.

Описанные варианты условий разделения не удовлетворяли качеству разделения при совместном присутствии, указанных групп соединений.

Оптимальные условия разделения подбирали изменением концентрации комплекса, подбором подвижных фаз, скорости потока элюента, длины волны детектора. В результате нами отработана методика разделения флавоноидов, дубильных веществ гидролизуемого и конденсированного типов, кумаринов и фенолокислот.

Разделение алкалоидов и аминокислот было менее результативным, но оптимальные условия оказались пригодными для качественного и количественного анализа состава фитопрепаратов на основе дубильных веществ, причем, меняя длину волны и состав подвижных фаз можно анализировать как гидролизуемые, так и конденсированные дубильные вещества фитопрепаратов или растений при их совместном присутствии, независимо от сроков хранения фитопрепаратов. Методика пригодна для практического использования при разработке проектов НТД на препараты такого типа. Она апробирована на препаратах из различных растений (ольха, репешок, очиток, эфедра) и показала хорошую сходимость результатов определения дубильных веществ, флавоноидов, фенолов и фенолокислот.

Биологически активные препараты БесЫт ЫЬпс1иш

Препарат ОВ-1: Полифенольный комплекс из надземной части (водорастворимая фракция водно-ацетонового извлечения); обладает умеренным (86.6%) иммуностимулирующим действием.

Препарат ОВ-7 - водно-ацетоновое извлечение из надземной части; обладает высоким иммуностимулирующим действием (до 100%). Оба препарата могут быть эффективны при заболеваниях, связанных со снижением сопротивляемости и иммунитета организма.

Препарат ОВО-1 - водный отвар надземной части (термическая экстракция) обладает высокой ростстимулирующей активностью,

индуцируя рост, активность ферментов, оказывая пролонгирующее действие, усиливающееся в стрессовой ситуации.

Препарат ДПС-5к - этилацетатный экстракт из надземной части, показал умеренное радиозащитное действие.

Акты изучения биологической активности в медицинском центре "Вита-Вент", институте физиологии, генетики и биоинженерии растений МН-АН РК, институте радиационной безопасности и экологии КЯЦ РК прилагаются в тексте диссертации.

ВЫВОДЫ

1. Изучен химический состав и определено количественное содержание основных групп природных соединений 7 видов растений рода 5ес1ит, произрастающих в Казахстане.

Показано, что все виды изученных растений содержат 9 групп природных соединений в различных количествах. Показана возможность комплексного использования растений рода очиток для получения аминокислотного, флавоноидного и таннидного биологически активных комплексов.

2. Выявлены фенольный. фенолокислотный, углеводный, аминокислотный и флавоноидный таксоны Бсскнп, отличия в качественном составе и количественном содержании веществ казахстанских видов 5е(1ит.

3. Изучен полнфенольный комплекс 5сс1ит ЫЬпс1ит, при этом в его составе установлено наличие 35 веществ 7 групп соединений.

Выделены и охарактеризованы комплексом химических и физико-химических (хроматография, УФ-, ИК-, ПМР-, 13С-ЯМР-, масс-спектроскопия) методов 24 индивидуальных соединения, из которых 17 веществ ранее не были описаны для Зес1ит Ьюпс1ит, а 9 соединений впервые обнаружены в растениях рода Sedu.ni, одно соединение является не описанным ранее.

4. Впервые в растениях 8ес1ит установлено наличие антоцианов и дубильных веществ гидролизуемого Сконденсированного типов.

5. Разработаны методики получения фитопрепаратов на основе дубильных веществ, подтверждена высокая иммуностимулирующая активность, извесная для видов БесШт и выявлены новые виды активности - радиомодифицирующая и рострегулирующая.

6. Разработана методика качественного и количественого анализа фитопрепаратов на основе дубильных веществ методом ВЭЖХ, позволяющая контролировать состав препаратов в течение разных сроков хранения. Методика пригодна для практического

использования при разработке проектов НТД на препараты такого

типа.

Основные результаты излоз/сены в следующих публикациях

1. Омуркамзинова В.Б., Бикбулатова Т.Н., Корулькин Д.Ю. Проблемы стандартизации фитопрепаратов на основе дубильных веществ Н Перспективы развития производства биопрепаратов для медицины и сельского хозяйства: Материалы межд. науч.-практ. конф.- Степногорск, 1995. С.70

2. Корулькин Д.Ю., Омуркамзинова В.Б., Бектенова Г.А. Исследование дубильных веществ некоторых растеши! Казахстана методом ВЭЖХ II Перспективы развития производства биопрепаратов для медицины и сельского хозяйства: Материалы 2 межд. науч.-практ. конф.- Алматы, 1996. С.36-37

3. Корулькин Д.Ю., Омуркамзинова В.Б. Воднорастворимые вещества очитка гибридного // Современные ' проблемы экологически чистых технолопш и материалов: Материалы Симпозиума.- Алматы, 1996, С.188-189

4. Корулькин Д.Ю., Омуркамзинова В.Б., Статникова Н.И. Изучение иммунорегулирующей активности фитопрепаратов некоторых видов растений очиток // Технология возделывания, переработка лекарственного сырья и производство фитопрепаратов для медицины и сельского хозяйства: Тез. докл. межд. науч.-практ. конф.- Шымкент, 1997, С. 195

5. Корулькин Д.Ю., Омуркамзинова В.Б. Химическое исследование некоторых растений рода очиток // Тез. 4 межд. конф. по медицинской ботанике.- Киев, 1997, С. 402-403

6. Корулькин Д.Ю., Омуркамзинова В.Б., Бектенова Г.А. ВЭЖХ в анализе растительных дубильных веществ // Химия природных соединений.- 1997, N.4, с.644-645

7. Корулькин Д.Ю., Омуркамзинова В.Б. Флавононды очитка гибридного // Вестник КазГУ, сер. химическая, 1998, N.9, С.73-75

8. Корулькин Д.Ю., Омуркамзинова В.Б. Полифенолы очитка гибридного II Вестник КазГУ, сер. химическая, 1998, N.9, С.71-72

Корулькин Дмитрий Юрьевич

Беёит трзлмдас оамддктердщ полифенолды к,осылыстары

Химия кылымдарыньщ кандидаты кылыми дэрежесш алу ушш дайындалран диссертация.

02.00.10 - биоорганикалык, химия, табиинжане физиологиялык, белсещц крсылыстар химиясы.

Тушн

К<азак,станда есетш Бейиш тукымдас вслмдоктердщ 7-турп«з табига косылыстаргы непзп тобыньщ сандьщ курамы аньщгалып жэне химиялык кэдэамы зерттелда. Очиток тукымдас ес1мд1ктерда комплексп турде кдзданып, аминокд>1ШКЬ1ДДЫ, флавоноидты комплексп жэне тер! шепш затгар алу MYMкlндiгi керсетщвд.

Фенолды, фенолкышкылды, кешрсулы, аминокышкылды, жэне флавоноидты Бейиш таксондарьшьщ кдзак,стандык, Беёигп турлершен сапалык; к^рамы жэне сандык мазмуны жарынан езгешшктер1 керсет1дщ.

Бсёиш ЫЬпс1ит полифенолды комплекс! зерттелщщ 24 таза косылыстар белшдо. Химиялык, жэне физико- химиялык; (хроматография, УФ-, ИК-, ПМР-, ЯМР-, масс-спектроскопия) эдастер аркдлчы олардьщ курлысы алыкталды. 17-зат бурын 8ес1ит ЫЬпёиш у111"1 аныкталмаиан, ал 9 косылыс Беёиш грулмдас еымдоктер упнн алгаш рет табылып отыр.

Алгаш рет Беёитнщ тер! шепш заттарыньщ гидролизденуш! комплекс! зерттел1ндо.

Тер1 шепш заттарыньщ _ непзшде фитопрепаратгар алу эдастерш аныкталып, иммунореттеуншк белсендшш таранындалды жэне белсендшцсгщ жаца тур1 — радиомодифика-циялау жэне есуд1ретгеушшк белсендшп керсетщщ.

ЖЭСХ — эдас! аркылы тер1 шегйи заттардьщ непзшде фитопрепаратгардьщ сапалык; жэне сандык, анализшщ эддстер1 ендедщ.

Korulkin Dmitry Yurievich

POLYPHENOL COMPOUNDS OF THE SEDUM PLANTS

The candidate of Chemistry Applicant Thesis Speciality 02.00.10 - Bioorganic chemistry, chemistry of natural and physiology active compounds

SUMMARY

Seven kinds of Sedum plants growing in Kazakstan are studied for the matter of chemical composition and quantitative containing of basic groups in nature compounds.

The possibility of complex utilization of Sedum plants for obtaining aininoacid, flavonoid and tannin complexes is shown.

The phenol, phenoloacids, hydrocarbonic, aminoacidic arid flavonoid taxes Sedum are obtained, the difference in qualitative and quantitative composition of Kazakstan plants are understood.

The polyphenol complex Sedum hibridum is studied. By using a complex of physical and physical-chemical methods (chromatography, UV, IR-, 'H- and 13C-NMR-, mass-spectroscopy) 24 individual compounds were extracted and analyzed. It of them have been described for Sedum hibridum yet. 9 of them have been discovered at the first time.

The complex of hydrolyzed tannin substances is studied at the first time.

The methods of obtaining phytopreparations on the base of tannin substances are invented, immunoregulating activity is confirmed and new kinds of activities have been observed. They are the radiomodifying and growth-regulating.

The qualitative and quantitative analyses of phytopreparations on the base of tannin substances is implemented by method of HPLC, that allows to control the composition of reactions for various periods of time. The method is applicable for practical utilization at accomplishing projects for substances of such the type.