Разработка методов и аппаратуры для спектрально-флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии тема автореферата и диссертации по физике, 01.04.21 ВАК РФ

Актуальность

Цель работы. Задачи исследования. Защищаемые положения

Научная новизна. Практическая значимость. Апробация работы

Постановка проблемы 10

Краткий обзор научной литературы 14

Глава 1. Разработка спектрально-флуоресцентных методов измерения и лазерно-спектроскопического оборудования 19

1.1. Измерение спектров лазерно-индуцированной флуоресценции биологических тканей 19

1.2. Измерение спектров рассеяния биологических тканей 24

1.3. Разработка методов регистрации флуоресцентных изображений 28

1.4. Оценка глубины фото динамического эффекта при воздействии лазерного излучения на биоткань 32

Глава 2. Создание методов регистрации фотосенсибилизаторов в биологических тканях 33

2.1. Методика приготовления стандартных образцов биологических сред, содержащих фотосенсибилизаторы 33

2.2. Исследование распространения света с различной длиной волны в биологических тканях 35

2.3. Распространение лазерного излучения в тонких слоях биологических тканей 39

2.4. Результаты математического моделирования распространения света в биоткани для используемого волоконно-оптического катетера 42

2.5. Некоторые технические решения по оптимизации методик измерения спектров флуоресценции 45

Глава 3. Разработка метода оценки эффективности фотосенсибилизаторов 48

3.1. Метод оценки эффективности фотосенсибилизаторов с применением -• элементов крови 48

3.2. Метод оценки эффективности фотосенсибилизаторов в клеточных суспензиях 50

3.3. Метод оценки эффективности фото сенсибилизаторов в биологических тканях in vivo 51

Глава 4. Особенности исследования лазерно-индуцированной флуоресценции патологических тканей различных органов 53

4.1. Разработка оптоволоконного интраскопа для флуоресцентной диагностики поверхностных и приповерхностных патологических образований кожи 53

4.2. Лазерная аутофлуоресцентная спектроскопия человека 57

4.3. Лазерная флуоресцентная спектроскопия человека с применением фотосенсибилизаторов 59

4.4. Лазерная флуоресцентная спектроскопия как метод контроля эффективности фотодинамической терапии человека 63

ВЫВОДЫ 63

ЛИТЕРАТУРА 65

ЛИТЕРАТУРА с участием автора 67

Патенты, заявки на изобретения и авторские свидетельства с участием автора 75

Список принятых в работе сокращений а ссылок. Благодарности 77

Свет, отраженный от организма, несет всю информацию о нем.

Нужно только суметь ее получить.»

Сергей Вавилов

Актуальность

Свет, отраженный от организма, в первую очередь дает информацию о содержащихся в ткани фотохромах и структуре ткани. Если ткань содержит собственные или введенные из вне флуорохромы, то индуцированная светом флуоресценция несет информацию о многих биологических процессах, протекающих в организме. Нужно только суметь ее получить без вреда для пациента и с максимальной информативностью для врача.

В последние годы в мире активно используются фотосенсибилизаторы для диагностики и лечения злокачественных опухолей. На практике некоторые виды новообразований можно диагностировать только при помощи спектроскопических методов, применяя фотосенсибилизаторы, которые избирательно накапливаются в злокачественных опухолях. То же относится и к лечению. Некоторые виды опухолей эффективно можно разрушить только при помощи света и доставленного в опухоль фотосенсибилизатора. Как для диагностики, так и для лечения отраженный свет и флуоресценция несут информацию о количественном содержании фотосенсибилизатора, степени оксигенации гемоглобина в микроциркуляторном русле исследуемой ткани и кровенаполненности органа. Таким образом, имеется возможность точно установить размеры опухоли, глубину инвазии и контролировать процесс лечения. Задача заключается в подборе оптимального фотосенсибилизатора для разных типов опухолей и их локализации, в создании технологичной методики диагностики и лечения и в разработке соответствующего надежного и удобного в работе оборудования.

К началу постановки этой работы в России не существовало ни одной из вышеперечисленных составляющих. В зарубежной практике дела обстояли несколько лучше, однако установки отличались большими габаритами, были сложны и неудобны в работе, дорогостоящи, а некоторых составляющих (таких, как измерение степени оксигенации и спектров флуоресценции органов человека in vivo) не существовало. В зачаточном состоянии находилось и понимание физических процессов, происходящих при взаимодействии света с фотосенсибилизаторами в ткани человека.

Цель работы

1. Создание методов исследования спектрально-флуоресцентных свойств биологических тканей человека.

2. Разработка и изготовление аппаратуры для флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии с применением лазерных, волоконно-оптических и спектрально-флуоресцентных технологий.

Задачи исследования

• Выявить основные закономерности распространения света в биологических тканях в зависимости от типа биологической ткани, ее физиологического состояния, длины волны излучения, концентрации и типа фотосенсибилизагора.

• Создать новые методы измерения и анализа спектрально-флуоресцентных свойств биологических объектов, содержащих эндогенные и экзогенные фотосенсибилизаторы, на модельных растворах, на экспериментальных животных и на пациентах в клинике.

• Разработать методы и аппаратуру для спектрально-флуоресцентной диагностики (ФД) рака и других новообразований, чувствительных и специфичных к разрабатываемым методам, с использованием эндогенных и экзогенных фотосенсибилизаторов (ФС).

• Разработать методы и аппаратуру для фотодинамической терапии (ФДТ), выявить критерии оценки результатов взаимодействия лазерного излучения с живой биологической тканью и на основании этого создать неинвазивные методы спектроскопического контроля за эффективностью лечения.

• Разработать лазерно-епектроскопические медицинские приборы и комплексы для ФД и ФДТ тех заболеваний, для которых данный метод является наиболее эффективным или единственно возможным, создать методы и программы обучения специалистов физиков и медиков для скорейшего внедрения разработок в клиническую практику.

Защищаемые положения

• Оптическая схема, результаты экспериментальных исследований и алгоритм расчета для определения концентрации фотосенсибилизаторов в биоткани по спектрам их флуоресценции и обратного рассеяния лазерного света, инициировавшего флуоресценцию, с точностью и чувствительностью, достаточными для надежной диагностики и для оценки эффективности фотодинамической терапии.

Метод измерений, результаты экспериментальных исследований и алгоритм обработки спектров флуоресценции и рассеяния тонких слоев биологических тканей для количественного измерения концентрации фотосенсибилизаторов на разработанной лазерно-волоконной спектроскопической установке с использованием фотосенсибилизаторов, которые накапливаются в поверхностных слоях полых органов.

Методы моделирования, алгоритм расчета и результаты исследований по определению степени оксигенации крови с применением спектроскопии рассеяния в видимом диапазоне спектра для определения степени оксигенации крови в микро-циркуляторном русле поверхностных слоев кожи и в слизистой оболочке органов, доступных для подведения оптических зондов.

Физический принцип и техническое решение регистрации флуоресцирующих, участков биологической ткани, экранированных слоем нефлуоресцирующей биологической ткани, для визуализации подкожного распространения опухоли или распространения метастазов.

Эффект нелинейного изменения интенсивности флуоресценции фотосенсибилизатора Фотосенс при облучении биологической ткани лазерным светом (длина волны возбуждения 675 нм, длина волны флуоресценции 690нм, плотность мощности лазерного облучения 300 мВт/см2, концентрация ФС 0.5 мг/кг).

Алгоритмы расчетов спектральной и спектрально-флуоресцентной информации для диагностики патологических участков, накопивших эндогенный или экзогенный фотосенсибилизатор, позволяющие идентифицировать вид патологии с целью оперативной координации тактики лечения.

Способ оценки эффективности фотосенсибилизаторов для ФДТ различных патологий по их способности утилизировать кислород из раствора, регистрируемый по спектру рассеяния и поглощения гемоглобином, добавленных в раствор в качестве «метки».

Физические н технологические принципы создания новых методов диагностики и лечения ряда заболеваний в соответствии с приведенными ниже ссылками на патенты и заявки на изобретения.

Научная новизна

Научная новизна проведенных исследований и разработок заключается в создании основ нового научного направления в лазерной физике — взаимодействия лазерного излучения с живыми биологическими тканями, содержащими фотосенсибилизаторы. Выявление новых информативных параметров, используемых для флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии. Основные защищаемые положения диссертации имеют приоритетный характер и защищены 39 патентами и заявками на изобретения.

Практическая значимость

Впервые получены следующие результаты:

1. Разработан комплекс медицинской аппаратуры для флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии рака (ДТК-ЗМ), включающий лазерно-флуоресцентный анализатор для проведения оптической биопсии и контроля за ФДТ, анализатор флуоресцентных изображений и полупроводниковый лазер для ФДТ на основе мощных лазерных диодов. Согласно постановлению Правительства г. Москвы, решением коллегии Государственного Комитета РФ по науке и технологиям, а также коллегии Минздрава РФ от 31.12.96г. № 1038-23-11 данным комплексом оснащены 20 больниц г. Москвы и других городов. Всего к настоящему моменту произведено более 150 приборов, которые работают в клиниках России, Германии, Японии, Южной Кореи, Израиля, Канады, Голландии и т.д.

2. На основании данных, полученных на комплексе ДГК-ЗМ совместно с медицинскими специалистами, предложены новые методы диагностики и лечения, которые внедрены в клиническую практику.

3. Совместно с ГНЦРФ НИОПИК исследованы и внедрены в клиническую практику два новых ФС - Фотосенс и Аласенс.

4. На созданном оборудовании и с применением внедренных в клиническую практику методов была оказана специализированная высокоэффективная медицинская помощь более чем 30 тыс. пациентов.

Личный вклад автора: Все представленные результаты получены лично автором или при его определяющей роли.

Апробация работы

Материалы диссертации докладывались на ряде научных конференций: -Международная конференция «Лазеры и медицина» Ташкент, 10-13 октября, 1989. -Photonics West, SPIE-The International Society for Optical Engineering, San Jose, California USA, 21-26 January 1991 - 2006 (ежегодно).

-Российские семинары в рамках пятой международной конференции "Лазерные техно логии-95", Шатура, 23 июня, 1995.

-21-st Meeting of the International Association for Breast Cancer Research, Paris, 1996. -7-th Congress of the European Society for Photobiology, Stresa, Italy, 1997. -World Congress on Medical Physics and Biomedical Engineering, p. 159, Nice, France, September 14-19, 1997.

-7-th Annual Inter. Laser Physics Workshop (LPHYS), Berlin, Germany, July 7-12, 1998.

-Congress of the European Society for Photobiol., Granada, Spain, Sept. 8-13, 1999. -Conference on Lasers Appl. and Technol. (LAT 2002), Moscow, Russia, June 22-28. -9-th Congress of the Europ. Society for Photobiol., Lillehammer, Norway, Sept. 3, 2001. -Международная конференция «Лазерные и информационные технологии в медицине XXI века». Санкт-Петербург, 2001. -III Съезд фотобиологов России, Воронеж, 2001.

-Научно-практическая конференция российских ученых "Актуальные аспекты лазерной медицины", Калуга, 2002.

-9-th World Congress of International Photodynamic Association, Tokyo, Japan, 2003. -The International Conference on Advanced Laser Technologies, Bedfordshire, UK, September 19-23, 2003.

-10-th Congress of the European Society for Photobiology, Австрия, 2003. -ILLA/LTL '2003 VIII International Conference "Laser and Laser-Information Technologies", Smolyan, Bulgaria, September 27- October 01, 2003. -13-th International Laser Physics Workshop, Trieste, Italy, July 12-16, 2004.

Публикации: no результатам диссертационной работы опубликовано более 300 печатных работ, из них 90 в российских реферируемых журналах, рекомендованных ВАК для публикации материалов докторских диссертаций. Имеется 39 патентов и заявок на изобретения.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, 4 глав и выводов.

ВЫВОДЫ

1. Разработаны новые методы измерения спектров рассеяния и флуоресценции, нашедшие применение в экспресс диагностике состояния некоторых органов и тканей человека:

4 Разработана оригинальная схема одновременного измерения спектров рассеяния и флуоресценции биоткани, техническая реализация которой позволяет измерять спектры практически в любой точке человеческого организма в реальном масштабе времени.

• Созданы алгоритмы расчета концентрации фотосенсибилизаторов в биотканях в зависимости от типа фотосенсибилизатора, типа исследуемой ткани и ее толщины. Точность и повторяемость полученных результатов позволили создать новые эффективные методы медицинской диагностики и контроля за лечением.

Проведенные экспериментальные исследования по определению степени окси-генации крови с применением спектроскопии рассеяния в видимом диапазоне спектра создали необходимую базу для определения степени оксигенации крови в мик-роциркуляторном русле поверхностных слоев кожи и в слизистой оболочке органов, доступных для подведения оптических зондов. Клиническое использование этого метода существенно улучшило методы контроля за эффективностью фотодинамического лечения.

Разработаны методы и устройства измерений, предназначенные для оценки глубины проникновения света в биологическую среду, позволяющие рассчитать глубину зондирования при оптической диагностике и эффективную глубину лазерного воздействия при терапии органов с различными оптическими параметрами.

2. Разработаны новые методы регистрации и анализа изображений живых органов во флуоресцентном свете, на основании которых созданы новые методы и приборы для флуоресцентной диагностики различных патологий:

Разработана светодиодная конфокальная матрица с высокочувствительной ПЗС-камерой, в которой за счет конфокального расположения источников света, возбуждающих флуоресценцию, удалось избавиться от теней и бликов, которые искажали флуоресцентную картину и этим затрудняли диагностику.

Разработаны две модификации интраскопов, применяемые для регистрации флуоресцирующих участков биологической ткани, экранированных слоем нефлуо-ресцирующей биологической ткани, дающие возможность увидеть подкожное распространение опухоли или распространение метастазов.

Разработан метод и создана аппаратура одновременной регистрации флуоресцентных и цветных изображений исследуемого объекта в режиме реального времени, используя один и тот же оптический канал без потери качества цветного изображения.

3. Исследованы спектрально-флуоресцентные свойства новых соединений фта-лоцианинового и порфиринового ряда в модельных растворах на экспериментальных животных и на пациентах в клинических условиях:

Предложены новые спектроскопические методы оценки эффективности ФС, основанные на динамике изменения молекулярного кислорода в модельном растворе при исследовании in vitro или в биоткани при исследовании in vivo. Проведена оценка эффективности большого ряда фотосенсибилизаторов для целей ФД и ФДТ. По спектрам флуоресценции, измеренным во время эндоскопических исследований и хирургических операций, установлена динамика накопления и выведения Фотосенса и Аласенса в различных органах и тканях человека. Интенсивность флуоресценции Фотосенса в опухолевой ткани и в метастазах по сравнению с нормой возрастает с увеличением вводимой дозы, их отношение достигает максимума через 24-48 часов. При рекомендованных терапевтических дозах Фотосенса диагностическая контрастность не всегда достоверно значимо превышает единицу, поэтому введены дополнительные диагностические критерии, связанные с особенностями спектрального уширения линий флуоресценции, интенсивности рассеяния назад возбуждающего флуоресценцию лазерного излучения.

4. Разработаны методы и аппаратура для спектрально-флуоресцентной диагностики (ФД) рака внутриполостных органов и кожи с использованием фотосенсибилизаторов Фотосенс и Аласенс. Изготовленные приборы в количестве 150 штук приобретены ведущими медицинскими центрами Москвы, ряда регионов России, а также университетами и клиниками Белоруссии, Германии, Японии, Южной Кореи, Израиля, Канады, Голландии, Польши, Вьетнама. Они используются в клиниках для диагностики и лечения рака желудка, легких, ЛОР-органов, молочной железы, мочевого пузыря, кожи. В настоящее время проводятся исследования по применению этих методов и созданию новых приборов в диагностике и лечении рака щитовидной железы, печени, пищевода, шейки матки, а также доброкачественных новообразований при таких заболеваниях как папиломатоз, псориаз, сосудистые бляшки, пародонтоз, заболеваниях глаз, заболеваниях вирусной и бактериальной природы.

1. Лужков Ю.М. Ворожцов Г.Н. Город против рака: история, результаты, перспективы. // Российский химический журнал. 1998. T.XL1.. №5. С.3-4.

2. Конов В.И., Осико В.В., Щербаков И.А. Фундаментальные достижения оптики и лазерной физики для медицины. // Вестник Российской академии наук. 2004. Т.74. №2. СЛ.

3. Красновский А.А. (мл.). Фотодинамическое действие и синглетный кислород. // Биофизика. 2004. Т.49. №2. С.305-321.

4. Владимиров Ю.А. Фотохимия и люминесценция белков. //Москва: Наука, 1965.

5. T.I.Karu. Photobiological fundamentals of low-power laser therapy. // IEEE J.Quantum Electronics. 1987. QE-23 (10). P. 1703-1717.

6. Щербаков И.А., Конов В.И., Осико В.В. Возможности применения фундаментальных достижений физики в разработке новых лечебно-диагностических методов // Труды IV Международной конференции по реабилитологии. Москва, 2002. 4-6 октября.

7. Тучин В.В. Лазеры и волоконная оптика в биомедицинских исследованиях. Изд. Саратовского университета. 1998. С. 382.

8. Приезжее А.В., Тучин В.В. Лазерная диагностика в биологии и медицине. // М.: Наука. 1989. С.215.

9. Chugunov А.У., V.I. Novoderezhkin, T.V. Razumikhina and V.Ya. Panchenko. The analysis of expired lung air by laser spectroscopy methods for diagnostics of diseases. Laser Study of Macroscopic Biosystems. // Proc. SPIE. 1992. Vol. 1922. P. 184-185.

10. Gonchukov S.A., Lazarev Y.B. Intracavity laser refractometry of blood. // Proc. SPIE. 1999. Vol. 3599. P. 149-156.

11. Чиссов В.И., Соколов В.В., Филоненко Е.В. Фотодинамическая терапия злокачественных опухолей. Краткий очерк развития и клинического применения в России. // Российский химический журнал. 1998. № 5. Т. XLII. С. 5.

12. Чиссов В.И., Скобелкин O.K., Миронов А.Ф. и соавт. Фотодинамическая терапия и флуоресцентная диагностика злокачественных опухолей с препаратом Фото-гем. //Хирургия. 1994.№ 12. С.3-5.

13. Миронов А.Ф. Разработка сенсибилизаторов второго поколения на основе природных хлорофиллов. // Российский химический журнал. 1998. № 5. Т. XLII. С. 23.

14. Странадко Е.Ф. Механизмы действия фотодинамической терапии // Российский онкологический журнал. 2000. №4. С. 52-56.

15. Полсачев В.И. Флуоресцентный метод в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных заболеваний желудка. // Вестник хирургии. 1992. № 1.С. 95-97.

16. Armichev V., Andrei V., Ivanov, Mishik A. Kazaryan. Physico-technical background of metal vapor laser systems and their application in oncology. // Proc. SPIE. CIS Selected Papers: Laser Use in Oncology. 1996. V. 2728. P. 223-239.

17. Lipson R.L., Baldes E.J. The photodynamic properties of a particular haematoporphy-rin derivative. //Arch. Dermatol. 1960. V. 82. P. 508-516.

18. Lipson R.L., Baldes E.J., Olsen A.M. The use of a derivative of haematoporphyrin in tumor detection. // J. Natl. Cancer Inst. 1961. V. 26. P.l-11.

19. Dougherty T.J. Photosensitizers: therapy and detection of malignant tumours. // Photochem Photobiol. 1987. V. 45. P. 879-889.

20. Wilson B.D., Mang T.S., Stoll H. et al. Photodynamic therapy for the treatment of basal cell carcinoma. //Arch. Dermatol. 1992. V. 128. P. 1597-1601.

21. Svaasand L.O.,Wyss P.,Wyss M.T., Tadir Y., Tromberg B.J. and Berns M.W. Dosimetry model for photodynamic therapy with topically administered photosensitizers // Lasers Surg. Med. 1996. Y. 18. P. 139-49.

22. Kienle A., Lilge L.D., Patterson M.S., Wilson B.C., Hibst R., Steiner R.W. Investigation of multilayered tissue with in vivo reflectance measurements. // Proc. SPIE. 1992. V. 2326. P. 212-221.

23. Brancaleon L and Moseley H. Laser and Non-laser Light Sources for Photodynamic Therapy. //Lasers Med. Sei. 2002. V. 17. P. 173-186.

24. Jianan Qu., Macaulay C., Lam S., Palcic B. Laser-induced fluorescence spectroscopy at endoscopy. // Proc. SPIE. 1994. V. 2133, P. 162-169.

25. Koenig F., McGovern F.J., Althausen. A.F. et al. Laser induced autofluorescence diagnosis of bladder cancer. // J. Urol. 1996. V. 156 (5). P. 1597-1601.

26. Nilsson A., Stael von Holstein С. et al. Clinical detection studies of Barrett's metaplasia and esophageal adenocarcinoma by means of laser-induced fluorescence. // Proc. SPIE. 1995. V. 2627. P. 49-56.

27. Zargi M., Smid L., Fajdiga I. et al. Laser induced fluorescence in diagnostics of laryngeal cancer. //Acta Oto-Laryngol. Suppl. 1997. V. 527. P. 125-127.

28. Zeng H., MacAulay C., McLean D.I. et al. The dynamics of laser-induced changes in human skin autofluorescence experimental measurements and theoretical modeling. // Photochem Photobiol. 1998. V. 68:2. P. 227-236.

29. Chwirot B.W., Chwirot S., Redzinski J. et al. Detection of melanomas by digital imaging of spectrally resolved ultraviolet light induced autofluorescence of human. I I Eur. J. Cancer. 1998. V. 34 (11). P. 1730-1734.

30. Betz C.S., Mehlmann M., Rick K. et al. Autofluorescence imaging and spectroscopy of normal and malignant mucosa in patients with head and neck cancer. // Lasers Surg. Med. 1999. V. 25. P. 323-334.

31. Bissonnette R., Zeng H., McLean D.I. et al. Psoriatic plaques exhibit red autofluorescence that is due to protoporphyrin IX. // J. Invest. Dermatol. 1998. V. 111:4. P. 586-591.

32. Kennedy J.C., Pottier R.H. Endogenous protoporphyrin IX: a clinically useful photo-sensitizer for photodynamic therapy. // J. Photochem. Photobiol. 1992. В 14. P. 275-292.

33. Bakhmutov D., Gonchukov S., Kharchenko O., Nikiforova O. and Ydovin Yu. Early dental caries detection by fluorescence spectroscopy H Laser Phys. Lett. 2004. Vol. 1. No.U.P. 565-569.

34. ЛИТЕРАТУРА с участием автора

35. Baryshev M.V., Loschenov V.B. Optimization of optical fiber catheter for spectral investigations in clinics. // Proc. SPIE. 1994. V. 2084. P. 106-118.

36. Berezin A.N., Kiselev G.L., Volkova A.I., Loschenov V. В., Sinyaeva M.L., Ma-medov Ad.A., Lervkin V.V., Kharnas S.S. Investigation of normal and pathological parodontium tissue autofluorescence images. // Proc. SPIE. 2004. V. 5486, p. 287-294.

37. Douplick A.Y., Loschenov V.B., Malinin V., Proscurnev S., Klimov D. Changes of optical parameters of moving whole blood depending on shear rate. // Proc. SPIE. 1996. V. 2923. P. 35-43.

38. Douplick A.Y., Loschenov V.B. Identification of spectroscopic and optical parameters of whole blood depending on its concentration and layer thickness. // Proc. SPIE. 1996. V. 2624. P. 165-176.

39. Douplick A.Y., Loschenov V.B., Klimov D.Y., Linkov K.G. New method of fluorescence diagnostics, photodynamic preventive maintenance, and treatment of diseases of the periodontium and mucous membrane of mouth. //Pros. SPIE. 1998. V. 3196. P. 206209.

40. Douplick A.Y., Loschenov V.B., Stratonnikov A.A. Spectra changes of whole blood with Sulphanated Aluminum Phtalocyanine photosensitizer during photodynamic therapy in vitro. // Proc. SPIE. 1996. V. 2923. P. 44-48.

41. Douplick A.Y., Stratonnikov A.A., Loschenov V.B., Lebedeva V.S., Derkacheva V.M., Vitkin A., Rumyanceva V.D., Kuzmin S.G., Mironov A.F., Luk'yanets E.A. The study of photodynamic reactions in human blood. // J. Biomed. Optics. 2000. V. 5. P. 338-349.

42. Douplick A.Y., Yaroslavsky I.V., Loschenov V.B., Alexandrov M.T., Sirkin A.L. Identification of spectroscopic parameters of whole blood depending on its physiological properties. // Proc. SPIE. 1995. V. 2326. P. 319-325.

43. Edinak N.J., Rueck A.C., Steiner R.W., Genze F., Loschenov V.B. Laser-induced fluorescence spectroscopy of AlPc4 and liposomal ZnPc in a rat bladder tumor model and correlation with PDT efficiency. // Proc. SPIE. 1996. V. 2924. P. 266-267.

44. Ershova E.Yu., Karimova L.N., Kharnas S.S., Kuzmin S.G., Loschenov V.B. Photodynamic therapy of acne vulgaris. // Proc. SPIE. 2003. V. 4949. P. 62-67.

45. Kharnas S.S., Kuzin N.M., Zavodnov V.Y., Sclyanskaya O.A., Linkov K.G., Loschenov V.B. Photodynamic therapy of gastric cancer. // Proc. SPIE. 1996. V. 2625. P.449-450.

46. Khused Y.G., Tomilova L.G., Podgaetsky V.M., Zharkova N.N., Loschenov V.B. Synthesis of some water soluble diphthalocyanines of rare earth elements as perspective synthetic PDT dyes. //Proc. SPIE. 1994. V. 2078. P. 521-523.

47. Kuzin N.M., Loschenov V.B., Stratonnikov A.A., Artemjeva O.V., Levkiri V.V., Kharnas S.S. Method of oxygenation saturation evaluation of stomach mucous after subtotal cancer resection. //Proc. SPIE. 1995. V. 2328. P. 98-101.

48. Linkov K.G., Kisselev G.L., Loschenov V.B. Investigation of physical model of biological tissue. // Proc. SPIE, Laser-Tissue Interaction and Tissue Optics. IV. 1996. V. 2923. P. 58-67.

49. Linkov K.G., Kisselev G.L., Loschenov V.B. Determination of optical properties of biological tissue in its depth. //Proc. SPIE. 1998. V. 3196. P. 210-217.

50. Linkov K.G., Kisselev G.L., Loschenov V.B. Investigations of physical model of biological tissue. //Proc. SPIE. 1996. V. 2923. P. 58-67.

51. Linkov K.G., Kisselev G.L., Loschenov V.B. 3D visualization of hidden objects with irregular scattering or absorbing properties. // Proc. SPIE. 1998. V. 3195. P. 298305.

52. Linkov K.G., Loschenov V.B., Kiselev G.L., Edinak N.E., Steiner R.W. Determination of photosensitizer concentration in normal skin tissue and in skin tumor with the use of two-wavelength laser light. // Proc. SPIE. 1996. V. 2625. P. 519-526.

53. Loschenov V.B., Kuzin M.I., Artjushenko V.G., Konov V.l. Study of tissue fluorescence spectra in situ. // Proc. SPIE. 1989. V. 1066. P. 271- 274.

54. Loschenov V.B., Baryshev M.V., Kuzin M.I., Zavodnov V.Y., Uspensky L.V., Ablitsov, U.A., Loginov L.E., Rybin V.K. Spectral-autofluorescent diagnostics of stomach and lung cancer. // Proc. SPIE. 1991. V. 1420. P. 271-281.

55. Loschenov V.B., Baryshev M.V., Zharkova N.N., Artjushenko V.G., Krjukov A., Startsev A., Moran K.B., Brown J.D. Multichannel fiber system for luminescence diagnostics of tumors. //Proc. SPIE. 1992. V. 1649. P. 135-138.

56. Loschenov V.B., Steiner R. Spectra investigation methods of biological tissues. Technique. Experiments. Clinics. //Proc. SPIE. 1993. V. 2081. P. 96-108.

57. Loschenov V.B., Stratonnikov A.A. Spectra line separation method for sophisticated data analysis of biological tissue optical spectra. // Proc. SPIE. 1994. V. 2081. P. 237-242.

58. Loschenov V.B., Steiner R. Working out the early diagnostic and control for the cancer treatment method with the use of photosensitizes of modeling action. // Proc. SPIE. 1994. V. 2325. P. 144-148.

59. Loschenov V.B., Baryshev M.V., Poleshkin P.V., Kuzin M.I., Ablitsov U.A., Rybin V.K. Intrasurgical diagnostics of lymphatic nodes metastasis using laser-induced autofluorescence. // Proc. SPIE. 1994. V. 2081. P. 205-208.

60. Loschenov V.B., Poleshkin P.V., Stratonnikov A.A. The spectroscopy analysis of tissues in vivo. // SPIE. 1995. V. 2370. Proc. of 5-th Int. Conf. Laser Applications in Life Sciences (LALS). P. 500-508.

61. Loschenov V.B., Konov V.l., Prokhorov A.M. Photodynamic Therapy and Fluorescence Diagnostics. // Laser Phys. 2000. V. 10. No. 6. P.l 188. http://www.lasphys.com/

62. Loschenov V.B., Meerovich G.A., Budzinskaya M.V., Ermakova N.A., Shevchik S.A, Kharnas S.S. Device for fluorescent control and photodynamic therapy of age related macula degeneration. // Proc. SPIE. 2003. V. 5486. P. 380-382.

63. Loschenov V.B., Stratonnikov A.A., Vasilchenko S.Y., Volkova A.I., Kharnas S.S., Sheptak E.A. Development of the myocardial photodynamic revascularization method. // Proc. SPIE. 2004.V. 5486. P. 347-351.

64. Loschenov V. B., Taraz Majid. Developing system for delivery of optical radiation in medicobiological researches. // Proc. SPIE. 2004. V. 5449, P. 261-266.

65. Luk'yanets E.A., Loschenov V.B., Meerovich G.A., Ulasjuk V.N. Perspectives of obtaining photosensitizers for near-IR range. // Proc. SPIE. 1994. V. 2078. P. 494-498.

66. Meerovich G.A., Loschenov V.B., Stratonnikov A.A., Linkov K.G., Zhuravleva V.P., Stepushkin V.A., Luk'yanets E.A., Worozhtsov G.N. Laser fluorescent system for

67. SPIE. 1996. V. 2728. P. 35-38.

68. Okhotnikova N.L., Dadvany S.A., Kuszin M.I., Kharnas S.S., Zavodnov V.Y., Sklyanskaya O.A., Loschenov V.B., Volkova A.I., Agafonov V.V. Application of 5-ALA for differential diagnostics of stomach diseases. // Proc. SPIE. 2001. V. 4156. P. 266-271.

69. Shevchik S.A., Meerovich G.A., Budzinskaya M.V., Ermakova N.A., Kharnas S.S., LoschenovV.B. A laser-spectroscopy complex for fluorescent diagnostics and photodynamic therapy of age-related macula degeneration. // Proc. SPIE. 2004. V. 5449. P. 222-226.

70. Sinyaeva M.L., Mamedov Ad.A., Volkova A.I., Loschenov V.B., Vasilchenko S.Yu. Fluorescent diagnostics in stomatology. // Laser Phys. 2004. V.14. №8. P. 11321140.

71. Stratonnikov A.A., Ablitsov Y.A., Edinak N.E., Kharnas S.S., Loginov L.E., Loschenov V.B., Misin S.V., Solomacho E.G., Chental V.V., Torshina N.L. The photo-dynamic therapy protocol parameters. //Proc. SPIE. 1996. V. 2625. P. 507-511.

72. Stratonnikov A.A., Douplik A. Y., Klimov D.V., Loschenov V.B., Mizin S.V. The influence of light irradiation on blood oxygen saturation level in vitro and in vivo during photodynamic therapy.//Proc. SPIE. 1998. V. 3247. P. 128-136.

73. Stratonnikov A.A., Douplik A.Y., Loschenov V.B. Oxygen consumption and its transport in tissues during photodynamic therapy of tumors and whole blood. // Adv. Exp. Med. Biol. 1999. V. 471. P. 515-523.

74. Stratonnikov A.A., Loschenov V.B., Klimov D.V, Edinak N.E., Wolnukhin V.A., Strashkevich I.A. The spectral fluorescent properties of tissues in vivo with excitation in the red wavelength range. //Proc. SPIE. 1997. V. 3197. P. 119-130.

75. Stratonnikov A.A., Meerovich G.A., Loschenov V.B. Photobleaching of photosen-sitizers in vivo during laser irradiation. // Proc. of 9-th Annual International Laser Physics Workshop (LPHYS 2000). Bordeaux. France. July. P. 17-21.

76. Stratonnikov A.A., Polikarpov V.S., Loschenov V.B. Photobleaching of endogenous fluorochroms in tissues in vivo during laser irradiation. // Proc. SPIE. 2001. V. 4241. P. 13-24.

77. Stratonnikov A. A., Meerovich G.A., Loschenov V.B. Photobleaching of photosensitize« applied for photodynamic therapy. // Proc. SPIE. 2000. V. 3909. P. 81-91.

78. Stratonnikov A.A., Douplik A.Yu., Loschenov V.B. Oxygen Consumption and photobleaching in whole blood incubated with photosensitizer induced by laser irradiation.//Laser Phys. 2003. V. 13. No. l.P. 1.

79. Stratonnikov A.A., Ermishova N.V., Loschenov V.B. Influence of red laser irradiation on hemoglobin oxygen saturation and blood volume in human skin in vivo. // Proc. SPIE. 2001. V. 4257. P. 57-64.

80. Stratonnikov A.A., Loschenov V.B. Evaluation of blood oxygen saturation in vivo from diffuse reflectance spectra. // J. Biomed. Optics. 2001. V. 6. P. 457-467.

81. Taraz M., Loschenov V.B. Measuring optical properties of microvolume biopsies. // Proc. SPIE. ALT'03 Int. Conf. on Advanced Laser Technologies: Biomedical Optics. 2004. V. 5486. P. 167-172.

82. Stratonnikov A.A., Loschenov V.B., Klimov D.V., Edinac N.E. Wolnukhin V.A., Strashkevich I.A. Spectral fluorescent properties of tissues in vivo with excitation in the red wavelength range. // Proc. SPIE. 1997. V. 3197. P. 119-130.

83. Vetshev P.S., Ippolitov L.I., Loschenov V.B., Kazaryan A.M., Minnibaev M.T., Vetshev S.P. Laser autofluorescent spectroscopy in adrenal tumor surgery. // Proc. SPIE. 1999. V. 4059, p. 67-72, Laser Use in Oncology II (1999).

84. Zavodnov V.Y., Kuzin M.I., Kharnas S.S., Linkov K.G., Loschenov V.B., Stratonnikov A.A., Posypanova A.M. Palliative treatment of patients with malignant structures of esophagus. //Proc. SPIE. 1996. V. 2625. P. 482-483.

85. Zuev V.M., Beliaeva L.A., Tevlina E.V., Zaiceva G.U., Loschenov V.B., Stratonnikov A.A., Volkova A.I. Autofluorescence diagnostic of gynecological diseases ex vivo.//Proc. SPIE. 2001. V.4156. P. 26-30.

86. Бабин A.B., Лощенов В.Б., Кораблин C.H., Ронзин А.Д. К методам ранней онкологической диагностики. Методы профилактики и лечения ЛОР органов. // Москва. ЦОЛИУВ. 1989. С. 29-31.

87. Беляева Л.А., Адам ян JI.B., Жорданиа К.И., Лощенов В.Б. Диагностическая ценность лазерной флуоресцентной спектроскопии с препаратом Аласенс в оперативной гинекологии. // Проблемы репродукции. 2004. №2. С. 17-23.

88. Belyaeva L.A., Adamyan L.V., Kozachenko V.P., Stratonnikov A.A., Stranadko E.F., Loschenov V.B. Fluorescence diagnostics in oncological gynecology. // Proc. SPIE. V. 5068. P. 55-60.

89. Лощенов В.Б. Спектроскопическое исследование фармакокинетики эндогенного фотосенсибилизатора протопорфирина IX в тканях самок мышей. // Российский биотерапевтический журнал. 2003. № 4. С. 35-39.

90. Березин А.Н., Синяева М.Л., Шевчик С.А., Киселев Г.Л., Лощенов В.Б. Аппаратура для флуоресцентной диагностики полости рта. // Российский биотерапевтический журнал. 2004. Т. 3 (4). С. 56-60.

91. Ветшев П.С., Харнас С.С., Лощенов В.Б., Чилингариди К.Е., Ипполитов Л.И., Ветшев С.П., Габаидзе Д.И. Возможности совершенствования интраопе-рационной диагностики заболеваний щитовидной железы. // Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2001. Jfel2.

92. Ветшев П.С., Чилингариди К.Е., Ипполитов Л.И., Харнас С.С., Лощенов В.Б., Габаидзе Д.И., Дуплик А.Ю. Первый опыт применения лазерной спектроскопии в хирургическом лечении заболеваний щитовидной железы. // Проблемы эндокринологии. 1999. № 1. С. 17-20.

93. Ветшев П.С., Чилингариди К.Е., Лощенов В.Б., Габаидзе Д.И., Ветшев С.П., Баранова О.В., Озеров С.К. Сравнительная оценка методов исследования при аденомах щитовидной железы. //Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2001. №10.

94. Грачев С.В., Лощенов В.Б., Наседкин А.Н. Приоритетные направления лазерной медицины в ММА им. И.М. Сеченова. // Лазерная медицина. 2000. Г. 4 (4). С. 5-8.

95. Ветшев П.С., Чилингариди К.Е., Ипполитов Л.И., Харнас С.С., Лощенов В.Б., Габаидзе Д.И., Дуплин А.Ю. Первый опыт применения лазерной спектроскопии в хирургическом лечении заболеваний щитовидной железы // Проб-емы эндокринологии. Т. 1. С. 17-20.

96. Дадвани С.А., Зуев В.М., Харнас С.С., Беляева Л.А., Лощенов В.Б. Фотодинамическая терапия в гинекологии. //Лазерная медицина. 2000. №12. С. 72-80.

97. Дадвани С.А., Харнас С.С., Чилингариди К.Е., Лощенов В.Б., Ветшев С.П. Лазерная аутофлуоресцентная спектроскопия новый метод экспресс-диагностики в хирургии. (Обзор). // Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 1999. № 10. С. 75-79.

98. Захаров H.A., Кустов Е.Ф., Лощенов В.Б. Нелинейные и спектрально-люминисцентные характеристики кристаллов А2В207 с псевдо-перовскитной структурой. // Изв. АН СССР. 1978. Сер. физ. Т. 42. №12. С. 2534.

99. Захаров H.A., Кустов Е.Ф., Лощенов В.Б. Спектроскопические свойства монокристаллов La2Ti207 легированных неодимом. // Письма в ЖТФ. 1978. Т. 4. №17. С. 1043.

100. Каримова Л.Н., Ершова Е.Ю., Харнас С.С., Кузьмин С.Г., Тараз М., Березин А.Н., Лощенов В.Б. Флуоресцентная диагностика и фотодинамическая терапия acne vulgaris с применением Аласенса. // Российский биотерапевтический журнал. 2004. Т. 3 (4). С. 66-69.

101. Киселев Г.Л., Лощенов В.Б. Распределение лазерного излучения в биологической ткани при фотодинамической терапии и диагностике. // Российский химический журнал. 1998. Т. XLII. №5. С. 53-62.

102. Коган Е.А., Невольских A.A., Жаркова H.H., Лощенов В.Б. Морфо- и патогенез повреждений злокачественных опухолей при фотодинамической терапии. // Архив патологии. 1994. № 6.

103. Кузин М.И., Харнас С.С., Заводнов В.Я., Охотникова Н.Л., Лощенов В.Б., Спектрально-флуоресцентный анализ АЛА-индуцированного протопорфирина IX в дифференциальной диагностике заболеваний желудка. // Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2000. №11.

104. Кустов Е.Ф., Лощенов В.Б., Сурогина В.А. Интенсивности электродиполь-ных переходов между состояниями 4 fn-конфигураций. Тетрагональное приближение. // Оптика и спектр. 1980. Т. 19 №4. С. 719.

105. Кустов Е.Ф., Лощенов В.Б., Сурогина В.А. Интенсивности электродиполь-ных переходов между состояниями 4 fn-конфигураций. // Оптика и спектр. 1978. Т. 45. С. 842.

106. Линьков К.Г., Харнас С.С., Лотов А.Н., Кулезнева Ю.В., Лощенов В.Б. Применение лазерной и спектральной аппаратуры для фотодинамической терапии и флуоресцентной диагностики с препаратами Фотосенс и Аласенс. // Лазерная медицина. 2002. Т.6 (1). С.48.

107. Линьков К.Г., Киселев Г.Л., Лощенов В.Б., Стратоников A.A. Контроль за степенью оксигенации гемоглобина с помощью спектрозональных изображений. // Биомедицинская радиоэлектроника. 2001. №1. С. 36-40.

108. Лощенов В.Б., Ежова Ж.А., Красилов Ю.И., Орловский В.П., Кузнецов Н.Т., Воробьев В.Д. Изучение двойных ортофосфатов редкоземельных элементов физико-химическими и спектроскопическими методами. // Изв. АН СССР, сер. неорг. мат. 1979. Т. 15(6). С. 1120.

109. Лощенов В.Б., Стратонников A.A., Волкова А.И, Прохоров А.М. Портативная спектроскопическая система для флуоресцентной диагностики опухолей и контроля за фотодинамической терапией. // Российский химический журнал. 1998. Т. XLII. №5. С. 50-53.

110. Максимова С.И., Панкина К.К., Лощенов В.Б. Структурные и люминисцент-ные свойства al-CsNd(P03)4. // Изв. АН СССР, сер. неорг. мат. 1981. Т. 17 (1). С. 116.

111. Максимова С.И., Палкина К.К., Лощенов В.Б., Кузнецов В.Г. Структура и люминисценгные свойства кристаллов a-CsNd(P03)4. // Изв. АН СССР, сер. неорг. мат. 1979. Т. 15(6). С. 969.

112. Максимова С.И., Палкина К.К., Лощенов В.Б., Кузнецов В.Г. Структура кристаллов типа RbLn(P03)4 и спектрально-люминисцентные свойства MNd(P03)4 // Журнал неорганической химии. 1978. Т. XXIII, II, С. 2959.

113. Меерович Г.А., Стратоников A.A., Лощенов В.Б., Коган Е.А., Гладских О.П., Лукьянец Е.А., Ворожцов Г.Н., Пальцев М.А. О влиянии параметров лазерного облучения на механизмы повреждения опухолей при ФДТ. // Лазерная медицина. 2000. Т. 4 (4). С. 19-22.

114. Охотникова Н.Л., Дадвани С.А., Кузин М.И., Харнас С.С., Заводнов В.Я.,

115. VwKJl>lllV14U./Í W.2 1., 0.13,., J3UJIKUÍÍU. / V.U. LljJHMUrilJiilil' J-aMJrlHUJlHiiyJlHrlUöUH КИслоты при флуоресцентной диагностике заболеваний желудка. // Лазерная медицина. 2000. Т. 4 (4). С. 64-66.

116. Стратонников A.A., Лощенов В.Б., Дуплик А.Ю. Контроль за степенью окси-генации гемоглобина во время фотодинамической терапии в облучаемых тканях и крови. // Российский химический журнал. 1998. Т. XLII. №5. С. 63-67.

117. Стратонников A.A., Ермишова Н.В., Лощенов В.Б. Диагностика реакции капиллярного русла тканей на лазерное излучение. II Квантовая электроника. 2002. Т. 32. №>10. С. 917-922.

118. Успенский Л.В., М.И.Кузин, Ю.А.Аблицов, В.К.Рыбин, В.Б.Лощенов. Лазерная флуоресцентная спектроскопия в интраоперационной диагностике и оценке распространенности рака легкого. // Хирургия. Журнал им. Н.И.Пирогова. 1998. №3. С. 31-33.

119. Шевченко ЮЛ, Харнас С.С., Лощенов В.Б., Коган Е.А., Аблицов Ю.А., Заводнов В.Я., Завражина И.Н., Патока Е.Ю. Флуоресцентная диагностика хирургических заболеваний легких с использованием препарата Аласенс. // Анналы хирургии. 2003. №>2. С. 57-63.

120. Шевченко ЮЛ., Э.А.Шептак, Харнас С.С., Волкова А.И., Лощенов В.Б. Фотодинамическая реваскуляризация миокарда в эксперименте. // Научно-практическая конференция российских ученых «Актуальные аспекты лазерной медицины». Москва-Калуга. 2002. С.375.

121. Адамян Л.В., Беляева Л.А., Лощенов В.Б. Возможности лазерно-флуоресцентной диагностики при эндоскопических операциях в гинекологии. // Лапароскопия и гистероскопия в гинекологии и акушерстве. Москва, 2002. С. 513-518.

122. ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ И АВТОРСКИЕ СВИДЕТЕЛЬСТВАс участием автора •

123. АС № 1506357 (10.09.1987) Способ определения уровня оксигенации слизистой оболочки органа.

124. Na 2160615 (2000.12.20) Способ предоперационной фотодинамической терапии.

125. Na 2161910 (2001.01.20) Способ дифференциальной диагностики шаровидных образований легких.

126. Na 2169590 (2001.06.27) Спектральное устройство для контроля и мониторинга процесса фотодинамической терапии.

127. Na 2172514 (2001.08.20) Драйвер полупроводникового лазера.25. № 2176475 (2001.12.10) Матричное светодиодное устройство для флуоресцентной диагностики и фототерапии патологических участков.

128. Na 2185103 (2002.07.20) Способ определения фотодинамической активности in vitro.

129. Na 2187347 (2002.08.20) Способ фотодинамической терапии и аппликатор для его осуществления.

130. Na 2189781 (2002.09.27) Оптический интроскоп.

131. Na 2202339 (2003.04.20) Средство для флуоресцентной диагностики.

132. Na 2002100757 (2003.08.20) Способ флуоресцентной диагностики злокачественных новообразований легких.

133. Na 2213593 (2003.10.10) Способ флуоресцентной диагностики периферического рака легкого.

134. Na 2214601 (2003.10.20) Способ диагностики цистобилиарных свищей и истонченных стенок кист при эхинококкэктомии из печени.33. № 2218570 (2003.12.10) Способ флуоресцентной диагностики новообразований.

135. Na 2219921 (2003.12.27) Средство для флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии онкологических и неонкологических заболеваний.35. № 2002135181 (2004.07.10) Способ ранней неинвазивной диагностики рака шейки матки и вульвы.

136. Na 2003111190 (2004.11.10) Способ лечения ишемической болезни сердца в эксперименте.

137. Na 2003126738 (2005.03.10) Устройство и способ диагностики и фотодинамической терапии заболеваний глаз.

138. Ссылка на публикацию других авторов

139. Ссылка на публикацию с участием автора

140. Р-123. Ссылка на пагенг с участием автора

141. ALA, АПК, АЛА 5 аминопевулиновая кислотаin vitro На неживомin vivo На живом

142. Аласенс Коммерческое название химического соединения — 5 аминоле-вулиновой кислоты

143. ВОНЦ Всесоюзный онкологический научный центр им. H.H. Блохина Российской академии медицинских наук.1. ПК инфракрасный

144. ЛАС лазерная аутофлюоресцентная спектроскопия

145. ЛФС Лазерная флюоресцентная спектроскопия

146. WIM А Московская медицинская академия им. U.M. Сеченова.

147. ПП IX Протопорфирин 9 (промежуточный продукт метаболизма АЛА)

148. ТУР Трансуретральная резекция1. УФ ультрафиолетовый

149. ФД Флюоресцентная диагностика

150. ФДТ Фотодинамическая терапия

151. Фотосенс Коммерческое название химического соединения — сульфированного (фталоцианина алюминия1. ФС Фотосенсибилизатор

152. ЦЕНИ ИОФРАН Центр естественно-научных исследований Института общей физики им. A.M. Прохорова Российской академии наук1. БЛАГОДАРНОСТИ