Исследование взаимодействия лазерного излучения с биологическими тканями глаза, содержащими флуоресцирующие фотосенсибилизаторы тема автореферата и диссертации по физике, 01.04.21 ВАК РФ

Введение.

Глава 1. Анализ основных классов фотосенсибилизаторов, и методики флуоресцентной диагностики и терапии с их применением.

1.1. Основные классы фотосенсибилизаторов, используемых в клинической практике.

1.2. Механизм взаимодействия света с фотосенсибилизатором в биологической ткани.

1.3. Методики флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии патологий тканей заднего отдела глаза.

1.4. Оптические характеристики и особенности распространения лазерного излучения в глазных тканях.

1.5. Лазерно-спектроскопическая аппаратура контроля концентрации фотосенсибилизатора в биологической ткани.

Выводы.

Глава 2. Разработка методов и аппаратуры для исследования спектральных свойств глазных патологий.

2.1. Методы обработки спектральных данных и модели распространения светового излучения в тканях глаза.

2.2. Создание методики и аппаратуры для одновременной флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии с использованием лазерно-индуцированной флуоресценции.

2.3. Разработка алгоритмов одновременного захвата, обработки и вывода цветного и флуоресцентного изображений.

2.4. Создание программного модуля для анализа изображений.

2.5. Оптимизация системы фильтров флуоресцентного и цветного каналов системы регистрации изображений.

2.6. Разработка и методика создания тест-объекта для оценки характеристик лазерного спектроскопического комплекса

Выводы.

Глава 3. Исследование взаимодействия лазерного излучения с тканями глаза, содержащими Фотосенс.

3.1. Подготовка биологических моделей тканей глаза для исследования распространения светового излучения в глазных средах.

3.2. Исследования взаимодействия терапевтического лазерного излучения с тканями переднего отдела глаза.

3.3. Исследование распространения лазерного излучения в прозрачных средах глаза

3.4. Исследование светорассеивания в тканях сетчатки.

Выводы.

Глава 4. Применение аппаратуры для флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии тканей глаза на экспериментальных моделях и в клинике

4.1. Исследование световых мощностей терапевтического и диагностического режимов.

4.2. Исследование накопления фотосенсибилизатора в новообразованных сосудах роговицы с помощью флуоресцентных изображений.

4.3. Апробация аппаратуры для флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии тканей глаза на экспериментальных моделях.

4.4. Исследование флуоресцентных изображений опухолевых образований переднего и заднего отделов глаза.

4.5. Клиническое использование разработанных методов и аппаратуры для флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии тканей глаза.*.

Выводы.

В связи с бурным развитием научно-технического прогресса происходит внедрение достижений лазерной физики в медицину. Одним из наиболее впечатляющих достижений является метод флуоресцентной диагностики (ФД) и фотодинамической терапии (ФДТ)[ 15,16,32,129]. На сегодняшний день метод активно развивается и внедряется в медицинскую практику[3,14,128], поскольку обладает рядом существенных достоинств по сравнению с традиционными методами диагностики и лечения, а именно:

• отсутствие вредных излучений позволяет неоднократного"*повторять процедуры лечения

• избирательное накопление фотосенсибилизатора в области патологии и нетепловое воздействие на очаг патологии дает возможность сохранить окружающие здоровые ткани при проведении лечения

• возможность контроля концентрации препарата в ткани по характерной флуоресценции позволяет проводить неинвазивные исследования

• использование доступных на сегодняшний день высоко чувствительных аппаратных средств регистрации флуоресценции позволяет выявлять заболевания на ранних стадиях

ФД и ФДТ уже активно применяется в онкологии, и в ряде случаев рассматривается как альтернатива традиционным методам лечения и диагностики опухолевых заболеваний[43,86,91,180]. Успехи фотодинамики в этой области дали сильный толчок к проведению исследований по возможности ее внедрения и в других направлениях медицины. В настоящее время ФДТ уже хорошо зарекомендовала себя в области дерматологии[4,78,181]. Ведется внедрение методов ФД в области гастро-эндоскопии для диагностики онкологических заболеваний [20,22], а так же для диагностирования и лечения ряда офтальмологических псевдоопухолевых новообразований 161,176]. Основополагающим компонентом ФД и ФДТ является фотосенсибилизатор(ФС) - препарат, избирательно накапливающийся в области патологии и инициирующий фото динамические реакции под действием света [16,129]. Несмотря на то, что на сегодняшний день существует большое количество этих веществ, успешно применяемых в клинике, создаются новые классы препаратов, ведется интенсивный поиск наиболее эффективного. Однако исследования возможности использования нового препарата представляет собой комплексную многоэтапную задачу, решение которой требует детального изучения физических процессов, протекающих в фотосенсибилизированных биологических структурах под действием света с целью оценки световой дозиметрии, а так же создание соответствующих систем контроля [7]. Необходимость в проведении комплекса подобных исследований ставится обязательными условиями безопасности, как разрабатываемой методики, так и аппаратуры. Решение вышеперечисленных задач осуществляются индивидуально для конкретного ФС, в зависимости от его физико-химических свойств, а так же от индивидуальных оптических свойств исследуемой биологической ткани.

На сегодняшний день ФД и ФДТ активно развивается и в нашей стране. В России в клинической практике используется препараты Аласенс, Фотогем [17]. Одним из наиболее перспективных отечественных ФС второго поколения, разрешенного в России для лечения онкологических заболеваний, является препарат на основе фталоцианинов - Фотосенс (ГНЦ НИОПИК, Москва)[17,18]. Препарат обладает как высоким фотодинамическим эффектом, а так и способностью флуоресцировать. Фотосенс уже хорошо зарекомендовал себя в области онкологии[179].

Актуальность работы. Существует ряд широко распространенных глазных заболеваний, таких как субретинальная неоваскулярная мембрана (СНМ), эффективным методом лечения которой во всем мире признана ФДТ[172,182]. Актуальность задачи создания методики ФД и ФДТ СНМ с использованием отечественного препарата Фотосенс определяется как отсутствием других эффективных методов лечения, так и отсутствием разрешения на использование импортного ФС Визудин (Ciba Vision,

США)[176,164] на территории России. Помимо этого довольно высокая стоимость, как импортной аппаратуры, так и самого ФС Визудин, затрудняют его внедрение в отечественную клиническую практику. Фотосенс обладает способностью флуоресцировать, что в отличие от западных методик, дает возможность совмещения процедуры лечения и диагностики, что в значительной степени увеличивает эффективность лечения по сравнению с западными аналогами. Однако впервые использование данного ФС для лечения глазных патологий требует детального исследования взаимодействия лазерного излучения (длина волны 675 нм) с фотосенсибилизированными тканями глаза для оценки безопасности методик и избирательности воздействия на очаг патологии.

Цель исследования

Целью настоящей работы ставилось исследование взаимодействия лазерного излучения с фотосенсибилизированными тканями глаза для разработки методики визуализации флуоресцирующих фотосенсибилизированных патологических очагов ткани глаза, разработка аппаратных средств для проведения одновременной флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии глазных патологий.

Задачи.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Создание методики флуоресцентной диагностики глазных патологий на экспериментальных моделях с применением лазерной и спектроскопической аппаратуры.

2. Создание методики видеофлуоресцентной диагностики глазных патологий с применением цветных и высокочувствительных монохромных ПЗС-матриц.

3. Разработка алгоритмов обработки видеофлуоресцентных изображений патологий глаза для повышения диагностической контрастности.

4. Создание лазерного спектроскопического комплекса на базе современных офтальмологических приборов, предназначенных для визуализации патологий глаза, а также со специально созданными полупроводниковыми лазерами и видеофлуоресцентными системами регистрации и обработки.

5. Создание экспериментальных моделей, имитирующих флуоресцирующую структуру глазного дна с соответствующими характерными размерами для оценки чувствительности и пространственной разрешающей способности аппаратуры.

6. Исследование взаимодействия лазерного излучения с различными тканями глаза, содержащими ФС в диагностических и терапевтических дозах. Отработка режимов проведения ФД и ФДТ патологий глаза на экспериментальных моделях.

7. Оценка эффективности применения разработанных методов и аппаратуры на экспериментальных животных и на пациентах с различными глазными патологиями.

Научная новизна исследования.

• Проведены исследования взаимодействия лазерного излучения (с длиной волны в спектральном диапазоне 675+4 нм и мощностью до 2.5 Вт (плотность мощности от 100 до 1000 мВт/см)) с тканями глаз экспериментальных животных (кроликов), содержащими препарат Фотосенс при вводимой дозе ФС от 0.01 до 0.5 мг/кг веса животного.

• Создана аппаратура для одновременной регистрации флуоресцентного и цветного изображений патологий глазного дна

• Разработан оригинальный тест-объект для оценки пространственной разрешающей способности и чувствительности оптической части системы регистрации флуоресцентных изображений.

• Реализован метод одновременной диагностики и фотодинамической терапии с контролем за ее проведением патологий сетчатки с использованием одного ФС и в рамках одной процедуры. Получено положительное решение на патент РФ (№2003 126 738 от 03.09.2003).

• Разработана оригинальная лазерно-спектроскопическая методика оценки безопасности применения фотосенсибилизатора для ФД и ФДТ глазных патологий

Практическая значимость.

Разработан метод и аппаратура для лечения субретинальной неоваскулярной мембраны и некоторых видов опухолей. Разработанные методы и аппаратура проходят клинические испытания в ГУ НИИ Глазных болезней РАМН Московской Медицинской Академии им. И.М. Сеченова. Первые результаты показали хорошую эффективность для лечения некоторых патологий глаза.

Положения, выносимые на защиту.

• Разработанный алгоритм обработки спектрально-флуоресцентных изображений обеспечивает получение высококонтрастных изображений флуоресцирующих очагов в режиме реального времени при минимальной инерционности обработанного изображения.

• Разработанная методика обеспечивает проведение лазерно-флуоресцентных исследований и фотодинамического воздействия патологических очагов в рамках одной процедуры и с использованием одного ФС.

• Схемные решения специализированного оптического лазерного адаптера обеспечивают безопасность прилегающих к области патологий здоровых тканей при проведении ФД и ФДТ.

• Совмещение процедур спектральных исследований и фотодинамического разрушения патологии с препаратом Фотосенс обеспечивается оптической системой, имеющей следующие характеристики:

- оптический фильтр высокочувствительной матрицы: зона высокого пропускания 685-715 нм, длина волны на полу высоте - 688 нм, 713 нм

- оптический фильтр осветителя: зона высокого пропускания 400-665 нм, длина волны на полувысоте - 663 нм

- оптический фильтр лазерного источника: зона высокого пропускания 655-682 нм, длина волны на полувысоте - 657 нм, 679 нм

- оптический фильтр канала цветной камеры: зона высокого пропускания 400-665 нм, 717-900 нм, длина волны на полу высоте - 663 нм, 720 нм

Пропускание оптических фильтров: в зоне низкого пропускания не более 0.01%, в зоне высокого пропускания не менее 85%.

• Эффекты поглощения и светорассеяния в глазных тканях лазерного излучения с длиной волны 675+4 нм не влияют на безопасность и избирательность поражения патологического очага при проведении процедур ФД и ФДГ с Фотосенсом.

• Оптимальным режимом ФД и ФДТ с применением Фотосенса является режим, при котором терапевтическая плотность мощности излучения составляет 500-700 мВт/см, время экспозиции 120 с, концентрация препарата (0.1-0.5)мг/кг. Безопасная диагностическая плотность мощности составляет 50 мВт/см , при времени экспозиции до 5 минут. Оптимальное время проведения терапии 2-3 сутки после введения препарата.

Апробация работы.

Материалы диссертации докладывались на ряде научных конференций: на международной конференции «Лазерные технологии в медицине XXI века» (Санкт-Петербург, 2001), на научно-практической конференции российских ученых "Актуальные вопросы лазерной медицины" (Москва-Калуга. 2002), на конференции "The International Conference on Advanced Laser Technologies" (Bedfordshire, UK, 2003), на научно-практической конференции МИФИ (Москва, 2003), на международной научной конференции "VIII International Conference Laser and Laser-Information Technologies. Fundamental

Problems and Application" (Bulgaria, 2003), на международной конференции "IX World Congress of the International Photodynamic Association" (Miyazaki, Japan, 2003), на международной конференции по фотобиологии "ESP 2003 10th Congress of the European Society for Photobiology" (Австрия, 2003).

Выводы:

• Фотодинамический эффект тканей сетчатки инициируется при плотностях мощности, значения которых составляют (500-700) мВт/см при концентрациях вводимого препарата (0.1 -0.5)мг/кг и времени облучения 90 с.

• Экспериментально установленные плотности мощности диагностического режима, достаточные для регистрации флуоресцентного сигнала и безопасные для здоровых тканей сетчатки составляют 10 мВт/см2, при времени экспозиции 5мин.

• Чувствительности ПЗС матриц достаточно для регистрации слабого флуоресцентного сигнала при возбуждении флуоресценции плотностью мощности ЮмВт/см .

• Максимально время накопление препарата в области СНМ достигается на 3 сутки

Заключение.

1. Создан новый лазерно-спектроскопический метод и аппаратура для проведения флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии заболеваний глаз:

• разработана принципиальная схема лазерно-спектроскопического комплекса на базе специально созданных полупроводниковых лазеров и видеофлуоресцентных систем регистрации и обработки, адаптированных к стандартным медицинским приборам, предназначенных для визуализации патологий глаз;

• создан комплекс аппаратуры с применением лазерных систем, высокочувствительных цветных и монохромных ПЗС-матриц, позволяющий совмещать процесс видеофлуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии глазных патологий в рамках одной процедуры;

• разработаны алгоритмы обработки и вывода видеоинформации, позволяющие получать в режиме реального времени высококонтрастные флуоресцентные изображения, повышающие точность диагностирования заболеваний глаз;

• создан тест-объект для оценки чувствительности и пространственной разрешающей способности разработанной аппаратуры, имитирующий флуоресценцию и структуру мелких патологических очагов с характерными размерами до 10 мкм;

2. Исследовано взаимодействие светового излучения с фотосенсибилизированными тканями глаза с целью оптимизации режимов флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии, а также оценки безопасности разработанных методик:

• исследования рассеивающих свойств роговицы и хрусталика для излучения с длиной волны 675 нм показали, что рассеяние в этих тканях не влияет на избирательность воздействия при проведении ФДТ задних отделов глаза;

• результаты исследований эффектов поглощения в стекловидном теле и хрусталике позволили определить коэффициент экстинкции ткани хрусталика, а так же оптимизировать расчет световых доз при проведении ФДиФДТ;

• исследования рассеяния в тканях сетчатки при ее облучении терапевтической плотностью мощности позволили оцененить возможность фотодинамического поражения прилегающих к области патологии здоровых тканей. Показана избирательность поражения патологических очагов во время терапии;

• осуществлено численное моделирование перераспределения световой энергии при прохождении света через сетчатку с учетом обеспечиваемых лазерным адаптером углов сходимости светового пучка. Данные моделирования могут быть использованы для расчета световой дозы при лечении заболеваний заднего отдела глаза;

3. Отработанны параметры ФД и ФДТ различных глазных заболеваний на моделях с использованием глаз экспериментальных животных):

• показано, что фотодинамическое воздействие реализуется при дозах ФС 0.1-0.5 мг/кг при плотности мощности 500 мВт/см и времени экспозиции 90 с. При плотности мощности 10 мВт/см обеспечивается регистрация высококонтрастных флуоресцентных изображений при отсутствии фотодинамического поражения;

• определены оптимальные времена проведения процедуры ФД и ФДТ, которые составляют третьи сутки после введения препарата;

• показана эффективность методики и аппаратуры на модели субретинальной неоваскуляризации глаз экспериментальных животных;

Созданный метод и комплекс аппаратуры используются при клинических испытаниях в ГУ НИИ Глазных болезней РАМН Московской Медицинской Академии им. И.М. Сеченова. Показана эффективность разработанной аппаратуры и метода на 15 пациентах, с различными глазными патологиями. Отрабатываются условия применимости метода ФДТ и аппаратуры для опухолевых заболеваний заднего отдела глаза. ч'

1. Адамян Л.В., Беляева Л.А., Странадко Е.Ф., Лощенов В.Б. Диагностические возможности Аласенс-индуцорованной флюоресценции в гинекологии // Научно-практическая конференция Российских ученых "Актуальные аспекты лазерной медицины" с.308

2. Балашевич Л.И., Измайлов A.C. Современные лазерные технологии в диагностике и лечении повреждений органа зрения и их последствий.// М.,1999.- 83 с.

3. Березин А.Н., Синяева М.Л., Киселев Г.Л., Лощенов В.Б. Аппаратура для флюоресцентной диагностики заболеваний полости рта. // Российский биотерапевтический журнал; (2), стр.46-47(2004)

4. Ершова Е. Ю., Каримова Л. Н., Харнас С. С., Лощенов В. Б. Разработка методики ФДТ псориаза с использованием 5-аминолевулиновой кислоты // Всероссийская научно-практическая конференция, Москва, с. 120(2002)

5. Жуков Б.Н., Лысов H.A. Лазерное излучение в экспериментальной и клинической ангиологии. // Самара, 1996

6. Измайлов A.C., Балашевич Л.И. Хориоидальная неоваскуляризация // С.-Пб., с. 35 (2001)

7. Киселев Г.Л., Лощенов В.Б. Распределение лазерного излучения в биологической ткани при фотодинамической терапии и диагностике // Российский химический журнал, №5,т. XLII. стр. 53. (1998)

8. Красновский A.A. Синглетный молекулярный кислород и первичные механизмы фотодинамического действия оптического излучения // Итоги науки и техники .т.З. с.63-132(1992)

9. Ю.Ланзетта П., Мичиелетто П., Пирракчио А. И др. Новые лазерные технологии в офтальмологии // Мат. Российской научно-практической конференции.- Калуга, 2002.- С.71.

10. П.Ларичев A.B., Ирошников Н.Г., Вартапетов С.К., Панченко В.Я. Адаптивная оптика в офтальмологии // Тезисы докладов 1-й Троицкой конференции по медицинской физике 19-21 мая стр. 14(2004)

11. Ларичев A.B., Иванов П.В., Ирошников Н.Г., Шмальгаузен В.И., Оттен Л. Дж. Адаптивная система для регистрации изображения глазного дна // Квантовая электроника, 32, №10 стр.902-909(2002)

12. Линьков К.Г., Березин А.Н., Лощенов В.Б. Аппаратура для ФД и ФДТ // Российский биотерапевтический журнал ; (2) , стр.54 (2004)

13. Лощенов В.Б., Стратонников A.A., Волкова А.И., Прохоров А.М. Портативная спектроскопическая система для флуоресцентной диагностики опухолей и контроля за фотодинамической терапией // Росс. Хим. Журнал;т.ХП1(5) с.50-53(1998)

14. Лощенов В.Б., Стратонников A.A. Физические основы флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии // Сборник трудов МИФИ, том 4, стр. 53-54 (2000)

15. Лукьянец Е.А. Новые сенсибилизаторы для фотодинамической терапии. // Рос. Химический журнал. . т. XLII. -N.5. - С.9-16. (1995)

16. Лукьянец Е.А. Новые сенсибилизаторы для фотодинамической терапии. // Фотодинамическая терапия Материалы 111 всероссийского симпозиума, с. 117-128.(1999)

17. Пасечникова Н.Ф., Тесленко A.C. // Новые лазерные технологии в офтальмологии: Мат. Российской научно-практической конференции.// Калуга с.75. (2002)

18. Ремизов А.Н., Максина А.Г., Потапенко А .Я. Медицинская и биологическая физика // изд. Дрофа стр.383-385(2003)

19. Решетников A.B., Кемов Ю.В., Залевский И.Д., Гончаров С.Е., Барышников А.Ю. Основные результаты доклинического изучения нового фотосенсибилизатора 'Радахлорина' // Российский биотерапевтический журнал, №2.т.1, с. 141(2002)

20. Руководство для врачей. Лазеры в клинической медицине под ред. Проф. С.Д. Плетнева //Москва, изд."Медицина",с.53-54 (1996)

21. Сивухин Д.В. Общий курс физики.Оптика. // М: изд. Наука, с.752(1985)

22. Тучин В.В. Исследование биотканей методами светорассеяния // Успехи физ. Наук. г. Т. 167, №5. С.517-539 (1997)

23. Фут X., Свободные радикалы в биологии // Под ред. Прайор. М: Мир-. ,т.2, с.96(1979)

24. Харнас С.С., Кузин Н.М, Лощенов В.Б, Заводнов В.Я, Склянская O.A., Левкин В.В., Торшина Н.Л.,. Волкова А.И., Посыпанова A.M. Фотодинамическая терапия рака желудка. // Материалы 11 всероссийского симпозиума с международным участием, с.26-29. (1997)

25. Щербаков И .А., Конов В.И., Осико В.В. Возможности применения фундаментальных достижений физики в разработке новых лечебно-диагностических методов // Труды IV Международной конференции по реабилитологии. Москва, 4-6 октября(2002)

26. Akira O., Yuko G., Kenji K., Susumu N., Tokubiko M. PDT to Monkey CNV with ATX-S10(Na): Inapproppriateness of Early Laser Irradiation for Selective Occlusion // Ophthalmology & Visual Science, , Vol. 42 (11), p.2639-2645(2001)

27. Alpes J. Optical Coherence Tomography: image of coherence. // Science (261) p.555(1993)

28. Asrani S., Zou S., D'Anna S., Lutty G., Vinores S.A., Goldberg M.F., Zeimer R. Feasibility of laser-targeted photoocclusion of the choriocapillary layer in rats. Invest Ophthalmol Vis Sci. Dec;38(13) p.2702-10 (1997)

29. Asrani S., Zeimer R. Feasibility of laser targeted photo-occlusion of ocular vessels // Br. J. Ophthalmol., vol.79(8), p.766-70 (1995)

30. Baba J., Cameron B., Gerard S. Effect of temperature,PH, and corneal birefringence on polarimetric glucose monitoring in the eye // Journal of Biomedical Optics. Vol7(3). P.321-328 (2002)

31. Benedek G.B., Pande J., Thurston G.M., Clark J.I. Theoretical and experimental basis for the inhibition of cataract. // Prog. Retin. Eye Res. 18, p.391-402(1999)

32. Beausencourt E., Remky A., Eisner A. E., Hartnett M. E., Trempe C. L. Infrared scanning laser tomography of macular cysts // Ophthalmology; 107 p.376-385(2000)

33. Bermig J.,Tylla H.,Jochmann C.,Nestler A.,WolfS. Angiographic findings in patients with exudative age-related macular degeneration.// Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. Mar 240 p. 169-75(2002)

34. Bevilacqua F. and Depeursinge C. Monte Carlo study of diffuse reflectance at source-detector separations close to one transport mean free path // J. Opt. Soc.Am.;A. 16 (12) p. 2935-2945(1999)

35. Birngruber R., Schmidt-Erfurth U., Teschner S., Noack J. Confocal laser scanning fluorescence topography: a new method for three-dimensional functional imaging of vascular structures. // Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. Jul;238(7)p.559-65(2000)

36. Blinder K.J., Peyman G.A., Paris C.L., et al: Submacular scar excision in age related macular degeneration. // Int Ophtalmol Clin., (15) p.215(1991)

37. Blum H.F. Photodynamic action and diseases caused by light // Hafner Publishing Co., New York (1964)

38. Boettner E. A. and Wolter J. R., // Invest. Ophthalmol. Vision Sci.;l(6), p.776-783 (1962)

39. Bulow N. Light scattering by pigment epithelium granules in the human retina // Acta Ophthalmol.;46, p. 1048-53(1968)

40. Bressler N.M., Bressler SB. Preventative ophthalmology, age-related macular degeneration. // Ophthalmology.; 102, 1206-1211(1995)

41. Cardillo Piccolino F, Eandi C.M., Ventre L., Rigault De La Longrais R.C., Grignolo F.M. Transpupillary thermotherapy of juxtafoveal recurrent choroidal neovascularization. // Eur J Ophthalmol. Jun;13(5) p.453-60(2003)

42. Chakravarthy U., Houston R., Archer D. Treatment of age-related subfoveal neovascular membranes by teletherapy: a pilot study. // Br. J. Ophthalmol.; 77, p.265-273(1993)

43. Chakravarthy, U., Radiation therapy for age-related macular degeneration letter. // Jama,.vol.278(4), p. 288-9(1997)

44. Chang B., Yannuzzi L.A., Ladas I.D., Guyer D.R., Slakter J.S., Sorenson J. A. Choroidal Neovascularization in Second Eyes of Patients with Unilateral Exudative Age-Related Macular Degeneration. // Ophthalmology; 102: 1380 -1386(1995)

45. Cherrick G.R., Stein S.W., Leevy C.M. Indocyanine green: observations on its physical properties, plasma decay, and hepatic extraction. // J Clin Invest;39 p.592(1960)

46. Costa R., Farah M., Freymuller E., Morales P., Smith R., Cardillo J. Choriocapillaris photodynamic therapy using indocyanine green. // Am J. Ophthalmol.; 132 p.557-565(2001)

47. Chaudhry N.A., Mieler W.F., Han D.P., Alfaro III V.D., Liggett P.E. Preoperative Use of Tissue Plasminogen Activator for Large Submacular

48. Hemorrhage.// Ophthalmic Surg Lasers 1999; 30 p.l76-180.and pneumatic displacement. Ophthalmology ; 106 p. 1900-6(1999)

49. Dailey H.A., Smith A. Differential interaction of porphyrins used in photoradiation therapy with ferrochelatase. // Biochem. J.;223,p.441-445(1984)

50. David B., Marilyn A., Bishop F., McMullen T. A Lattice Model for Computing the Transmissivity of the Cornea and Sclera // Biophys J., November; vol.75(5), p. 2520-2531 (1998)

51. DeRosa M.C., Crutchley R.J. Photosensitized singlet oxygen and its applications// Coord. Chem. Rev. Vol.233-234, p.351-371(2002)

52. Delori F. C., Spectrophotometer for noninvasive measurement of intrinsic fluorescence and reflectance of the ocular fundus // Appl. Opt.;33, 7439-7452 (1994)

53. Desmettre T.J., Soulie-Begu S., Devoisselle J.M., Mordon S.R. Diode laser-induced thermal damage evaluation on the retina with a liposome dye system. // Lasers Surg Med.;vol24(l) p.61-8(1999)

54. Desmettre T., Devoisselle J.M., Soulie-Begu S., Mordon S. Value of fluorescein angiography in control of retinal thermal damage due to diode laser // J. Fr. Ophtalmol. Aug-Sep;vol.22(7) p.730-7(1999)

55. Dougehrty T.J., Boyle D.G., Weishaupt K.R. Photoradiation therapy of human tumors //The science of photomedicine", J.D. Regan and J.A. Parrish eds., Plenum press, New York, p.265(1982)

56. Dougehrty T.J. PDT of malignant tumors // in press in: "CRC Critical Reviews in oncology/Hemathology" CRC Press, Boca Raton, Florida, p. 184(1984)

57. Dreher A. W. and Weinreb R. N., "Accuracy of topographic measurements in a model eye with the laser tomographic scanner," Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.;32 p.2992-2996 (1991)

58. Drexler W., Morgner U., Kartner F.X., et.al. In vivo ultra high resolution optical coherence tomography // Opt. lett.;24, p. 1221-1223(1999)

59. Edell E.S., Cortese D.A. Photodynamic therapy in the management of early superficial sqamous cell carcinoma as an alternative to surgical resection .// Chest. vol.102.-p. 1319-1322(1992)

60. Eisner A.E., Burns S. A., Weiter J. J., and Hartnett M. E., "Diagnostic applications of near infrared solid-state lasers in the eye // " LEOS '94, IEEE Catalog number 94CH3371-2, Library of Congress number 93-61268,Vol.1 p.14-15(1994)

61. Eisner A. E., Burns S. A., Hughes G. W., and Webb R. H., "Reflectometry with a Scanning Laser Ophthalmoscope," // Appl. Opt., 1992;31, p.3697-3710

62. Eisner A. E., Burns S. A., Weiter J. J., and Delori F. C., "Infrared imaging of subretinal structures in the human ocular fundus," Vision Res.;36, p.191-205 (1996)

63. Ershova E. Yu.} Karimova L. N., Kharnas S. S.} Kuzmin S. G., Loschenov V. B. Photodynamic therapy of acne vulgaris. // Proc. SP1E 2003; 4949. p. 62-67

64. Evans J, Wormald R. Is the incidence of registrable age-related macular degeneration increasing? // Br J Ophthalmol; 80 p.9-14. (1996)

65. Evans J.R. Causes of blindness and partial sight in England and Wales 1990-1991. Studies on medical and population subjects 57.// London. HSMO, 1995., 254 (5035), p.l 178-1181(1991)

66. Farrar Stuart, Roberts Cynthia, Johnston William, Weber Paul Optical properties of human trabecular meshwork in the visible and near -infrared region // Lasers in surgery and medicine vol.25, issue 4, p.348-362 (1999).

67. Finger, P., A. Berson, D. Sherr, et al., Radiation therapy for subretinal neovascularization. 0phthalmolgy;103, p. 878-889(1996)

68. Flock S.T., Jacques S.L., Wilson B.C., Star W.M., van Gemert M.J.C., Optical Properties of Intralipid: A phantom medium for light propagation studies, Lasers in Surgery and Medicine; 12, p.510-519(1992)

69. Flower R.W. Experimental studies of indocyanine green dye-enhanced photocoagulation of choroidal neovascularization feeder vessels. Am J Ophthalmol. Apr; 129(4),p.501-12(2000)

70. Flower RW, Hochheimer BF. Clinical infrared absorption angiography of the choroid. Am J Ophthalmol;73 p.458±9(1972)

71. Foley P. Clinical efficacy of methyl aminolevulinate (Metvix) photodynamic therapy. // J. Dermatolog. Treat.; 14 Suppl 3:15-22 (2003)

72. Gilliland K.O., Freel C.D., Lane C.W., Fowler W.C., Costello M.J. Multilamellar bodies as potential scattering particles in human age-related nuclear cataracts. // Mol. Vis. 7,120-130(2001)

73. Giovanni A., Amato G.P., Mariotti C., Scasselati Sforzollini B. Optical Coherence Tomography imaging of Choroidal Neovascularization and its role in the determination of patient's eligibility for surgery. // Br J Ophthalmol; Vol.83 p.438-442.( 1999)

74. Gullstrand A., Helmhholz's Physyological Optics // Optical society of America,New York,, Appendix, p.350-358(1924)

75. Guyer DR, Yannuzzi La, Slakter JS. et al. Classification of choroidal neovascularisation by digital indocyanine green angiography. // Ophthalmology; 103 p.2054-60(1996)

76. HahnS.M, Smith R.P, FriedbergJ. Photodynamic therapy for mesothelioma.// Curr Treat Options Oncol. Oct 2 p.375-83(2001)

77. Helmholtz H., Southall J.P.C.,eds., Helmholtz's Treatise on Physyological optics // Optical Society of America, Rochester(1924)

78. HammerM., Roggan A., Schweitzer D. and Muller G. Optical properties of ocular fundus tissue—an in vitro study using the double-integrating-sphere technique inverse Monte-Carlo simulation//Phys. Med. Biol.;40 p.963-78 (1995)

79. Hansen F. K. A clinical study of the normal human central corneal thickness. // Acta Ophtalmol.;49, p.82-89 (1971)

80. Hartnett M. E., Weiter J. J., Staurenghi G., and Eisner A E. Deep retinal vascular anomalous complexes in advanced age- related macular degeneration // 0phtalmol.;103, p.2042-2053 (1996)

81. Hartnett M.E. and Eisner A. E., "Characteristics of exudative age-related macular degeneration determined in vivo with confocal direct and indirect infrared imaging," Ophthalmol.; 103, p.58-71 (1996)

82. Hiiji N.K., Larke J.R. Thickness of human cornea measured by topographic tachometry//Am. J. Optom.;55, p.97-100 (1978)

83. Hee M.R., Izatt J.A., Swanson E.A., Huang D., Schuman J.S., Lin C.P., Puliafito C.A., Fujimoto J.G. Optical Coherence Tomography of the human retina // Arch. Ophthalmol.; 113, p.325-332(1995)

84. Hee M.R., Izatt J.A., Swanson E.A., et al. Optical coherence tomography of the human retina. // Arch. Ophthalmol.; (113), p.325-332(1995)

85. Henderson B. W. Th. J. Dougherty. Photodynamic therapy // Eds. New York: Dekker(1992)

86. Hillesberg R. van, Kost WJ., Wilson J.H. Current Status of Photodynamic Therapy in Oncology. // Drugs.; vol.48(4), p. 510-524(1994)

87. Hirokazu N., Zeimer R., Morton F. G., Salvatore A. D., Stanley A. V., Rhonda Grebe Laser Targeted Photo-occlusion of Rat Choroidal Neovascularization Without Collateral Damage // Photochemistry and Photobiology, vol. 75(2): 149-158(2002)

88. Hogan M.J. Bruch's membrane and disease of the macula: role of elastic tissue and collagen. // Trans. Ophthalmol. Soc. UK.; 87 p.l 13 - 161(1967)

89. Inderfurth J.H., Ferguson R.D., Frish M.B., Birngruber R. Dynamic reflectometer for control of laser photocoagulation on the retina. //Lasers Surg Med.;vol.l5(l) p.54-61(1994)

90. Ishimara A. Wave propagation and scattering in random media // Academic press , New York, 1978.

91. Jansson F. Measurements of intraocular distances by ultrasound. // Acta Ophtalmol. Suppl.;74,p. 1 -49( 1963)

92. Jacques S. L., Alter C. A. and Prahl S. A., Angular dependence of HeNe laser light scattering by human dermis // Lasers Life Sci.;l, p.309-333 (1987)

93. Jaronski J.W., Kasprzak H.T. Linear birefringence measurements of the in vitro human cornea // Optalmic Physiol Opt. Vol.23(4) p.361-369(2003)

94. Jerath M.R., Chundru R., Barrett S.F., Rylander H.G. 3rd, Welch A.J. Reflectance feedback control of photocoagulation in vivo. //Arch. Ophthalmol. Apr;l 11(4) p.531-534(1993)

95. Johnson P., Bellnier D., Hendersonet al. Combination PDT targeting vessels and tumor cells using anionic and cationic photosensitizers // Photocem. Photobiol., p.57:50 (1993)

96. Jose M Ruiz-Moreno, Conception de la Vega. Surgical removal of subfoveal choroidal neovascularization in highly myopic patient. // Br.J.Ophtalmol. Vol.85, p. 1041-1043(2001)

97. Kaplan H. Submacular surgery for choroidal neovascularization. // Br. J. Ophthalmol.; 80 p.101. (1996)

98. Khoobehi B., Char C.A., Peyman G.A., Schuele K.M. Study of the mechanisms of laser-induced release of liposome-encapsulated dye. Lasers Surg. Med.;10(3) p.303-9(1990)

99. Klein R., Klein BEK, Linton KLP. Prevalence of age-related maculopathy: the Beaver Dam Eye Study // Ophthalmology.; 99, p.933-943(1992)

100. Kobayashi H, Kobayashi K Age-related macular degeneration: long-term results of radiotherapy for subfoveal neovascular membranes. Am. J. Ophthalmol. Nov; 130(5) p.617-35(2000)

101. Koretz J.F., Kaufman P.L., Neider M.W., Goeckner P.A., Accomodation and presbyopia in the human eye aging of the interior segment.// Vision res.;29, 1685-1692(1989)

102. Kronfeld, P. C. The gross anatomy and embryology of the eye. In The Eye // 2nd Ed. H. Davison, editor. Academic Press, New York. 1-66. (1969)

103. Kudryashov Alexis V., Kulakov V. B., Kotsuba Ye. V., Novikova L. V., Panchenko Vladislav Y., Samarkin Vadim V. Low-cost adaptive optical devices for multipurpose applications // Proc. SPIE Vol. 3688, p. 469-475(1999)

104. Kunze C., Eisner A. E., Beausencourt E., Moraes L., Hartnett M. E., and Trempe C. L. Spatial extent of pigment epithelial detachments in age-related macular degeneration // Ophthalmology;9, p. 1830-1840 (1999)

105. Kruger A., Matulla B.,Woltzt M., Pieh S., Strenn K. et al. Short-term Oral Pentoxifylline Use Increases Choroidal Blood Flow in Patients With Age-related Macular Degeneration. // Arch Ophthalmol.; 116 p.27 -30(1998)

106. Leighton D.A., Tomlison A. Changes in axial length and other dimensions of the eye ball with increasing age. // Acta 0phtal.;50, p.815-821(1972)

107. Levenberg K. A method for the solution of certain problems in least squares // Quart. Appl. Math, vol.11, pp.431-441(1963)

108. Lipson R.L., Blades E.J., Olsen A.V. The use of a derivative of hematoporphyrin in tumor detection // J.Natl.Canser Inst, vol.26, p. 1-8(1961)

109. Lobo C.L., Bernardes R.C., Santos F.J., Cunha-Vaz J.G. Mapping retinal fluorescein leakage with confocal scanning laser fluorometiy of the human vitreous. Arch Ophthalmol. May; 117(5)p.631-7(1999)

110. Loschenov V.B., Konov V.I., Prokhorov A.M. Photodynamic therapy and fluorescence diagnostics // Laser Physics. V. 10. N 6(2000)

111. Loschenov V.B., Kuzin, M. I., Artjushenko V.G., Konov, Vitaly I. Study of tissue fluorescence spectra in situ // SPIE Proc., vol.1066, 271-274, (1989).

112. Macular Photocoagulation Study Group. Argon laser photocoagulation for neovascular maculopathy: five year results from randomized clinical trials. Archives of Ophthalmology.; 109, p. 1109-1114( 1991)

113. Macular Photocoagulation Study Group. Subfoveolar neovascular lesion in ARMD: guidelines for evaluation and treatment in the macular photocoagulation study. // Arch Ophtalmol, Vol.l09(9), p.l242-1957(1991)

114. Macular Photocoaglation study group. Argon laser photocoagulation of neovascular lesion of ARMD: result of randomized clinical trial. //Arch Ophtalmol,Vol. 100, p.912-918( 1982)

115. Martola E.L., Baum J.L. Central and peripheral cornea thickness // Arch. Ophtalmol.,Vol.79, p.28-30 (1968)

116. Marcos S., Burns S., Chang He J. Model for cone directionality reflectometric measurements based on scattering. // J.Opt.Soc.Am.; vol. 15(8), p.2012-2021 (1998)

117. Masahiro Miura, M.D. Ann E. Eisner, Ph.D. Three dimensional imaging in age-related macular degeneration // Optics express;Vol.9(9), p.436-442(2001)

118. Matsuhashi H, Noda Y, Takahashi D, Mariya Y Radiation therapy for small choroidal neovascularization in age-related macular degeneration. // Jpn. J. Ophthalmol., Nov-Dec;Vol.44(6) p.653-60(2000)

119. Mauget-Faysse M., Chiquet C., Milea D., Romestaing P., Gerard J.P., Martin P., Koenig F. Long term results of radiotherapy for subfoveal choroidal neovascularisation in age-related macular degeneration. // Br. J. Ophthalmol.; Vol.83: p.923-928(1999)

120. Miller J.W., Stinson W.G., Gregory W.A., El-Koumi H.E., Poliafito C.A. Phthalocyanine Photodynamic Therapy of Experimental Iris Neovascularization // Ophthalmology , Vol.98, № 11, p.1711-1719(1991)

121. Mohan K.C., Shukla D., Namperumalsamy P, Kim R. Management of age-related macular degeneration. J Indian Med Assoc. Aug;101(8) p.471-476(2003)

122. Mordon S., Desmettre T., Devoisselle J.M. Quantitative fluorescein angiography following diode laser retinal photocoagulation // Lasers Surg Med.;Vol.24(5) p.338-45(1999)

123. Mordon S, Desmettre T, Devoisselle JM. Laser-induced release of liposome-encapsulated dye to monitor tissue temperature: a preliminary in vivo study // Lasers Surg Med.;vol.l6(3) p.246-52(1995)

124. Muller G. et al. (Eds) Medical Optical Tomography: Functional Imaging and Monitoring // Bellingham: SPIE , IS.l 1 (1993)

125. Nakao S.,Ono T.,Nagata R.,Iwata K. The distribution of refractive index in the human crystalline lens.//Jpn.J.Clin.Optalmol.;Vol.23 p.903-906(1969)

126. Nemati B., Dunn A., Welch J., Rylander G. Optical model for light distribution during transscleral cyclophotocoagulation // Applied Optics Vol. 37(4), p.764-771 (1998)

127. Newsom R.B., McAlister J.C., Saeed M., McHugh J.D.A. : Transpupillary thermotherapy for the treatment of choroidal neovascularization. // Br. J. Ophthalmol.; Vol. 85 p. 173-178(2001)

128. Obana A, Gohto Y, Kanai M, Nakajima S, Kaneda K, Miki T. Selective photodynamic effects of the new photosensitizer ATX-S10(Na) on choroidal neovascularization in monkeys.// Arch Ophthalmol. May; vol.118(5)p.650-8(2000)

129. Obana A, Gohto Y. Scanning laser system for photodynamic therapy of choroidal neovascularization. // Lasers Surg Med.;Vol.30(5) p.370-375(2002)

130. Ogura Y., Guran T., Shahidi M., Mori M.T., Zeimer R.C. Feasibility of targeted drug delivery to selective areas of the retina. Invest Ophthalmol Vis. Sci. Jul;Vol.32(8) p.2351-6(1991)

131. Ordwin E., Borene M., Hubel A. Biomechanical and optical characteristics of a corneal stromal equivalent // Journal of Biomechanical engeneering Vol.125 p.439-444 (2003)

132. Overholt B.F., Panjehpour M. Photodynamic therapy for Barrett's esophagus. // Gastrointest Endose Clin. N. Am. vol.7. p.207-220(1997)

133. Parks S., Aitken D., Keating D., Dutton G.N. Argon laser photocoagulation of fluorescein stained retina an unrecognized hazard // Br. J. Ophthalmol. Jun;Vol.78(6),p.476-7(1994)

134. Pass H. PDT in oncology. Mechanism and clinical use // J.Nat Canser institute, Vol.85(6), p.443-456(1993)

135. Pease P., Adams A. J., Nuccio E., Vision Res.;5, 705-710 (1973)

136. Peyman G.A., Khoobehi B., Shamsnia S., Navarro G.C. Fundus laser coagulation using a video system of scanning laser ophthalmoscope. // Lasers Surg. Med.;Vol.l3(6) p.680-684(1993)

137. Pierscionec B.K., Chan D.Y.C. Refractive index gradient of human lenses. // Optom.Vis.Sci.; Vol.66, p.822-829(1989)

138. Pharmacological therapy for macular degeneration study group. Interferon Alfa-2a Is Ineffective for Patients With Choroidal Neovascularization Secondary to Age-Related Macular Degeneration. // Arch. Ophthalmol.; Vol.15 p.865 -872(1997)

139. Policard A. Etudes sur les aspects offerts par des tumeurs expérimentales examinee lumiere de woods // C.R. Soc. Biol., Vol.91, p. 1423-1234 (1924)

140. Puliafito CA, Hee MR, Lin CP, Reichel E, Schuman JS, et al. Imaging of macular diseases with optical coherence tomography. Ophthalmology;Vol.l02 p.217-229(1995)

141. Raab O. Uber die Wirkung fluorecierender Stoffe auf infusorien // Z. Biol.,, Vol.39, p. 524-529(1990)

142. Reading V.M., Weale R.A. Macular pigment and chromatic aberration // Journal of the optical society of America;Vol.64, p.231(1974)

143. Reichel E, Berrocal AM, Ip M, Kroll AJ, Desai V, Duker JS, Puliafito CA: Transpupillary thermotherapy of occult subfoveal choroidal neovascularization in patients with age-related macular degeneration. C)phthalmology;Vol.l06 p. 1908-1914(1999)

144. Rogers AH, Martidis A, Greenberg PB, Puliafito CA. Optical coherence tomography findings following photodynamic therapy of choroidal neovascularization. // Am. J. Ophthalmol. Oct;Vol. 134(4) p.566-76 (2002)

145. Roodhooft J. No efficacious treatment for age-related macular degeneration // Bull. Soc. beige Ophtalmol.; (276) p.83-92(2000)

146. Rosenbach-Belkin V., Chun L., Feodor L. et al. Serine Conjugates of Chlorophyll and Bacteriochlorophyll -.Photocytotoxicity in vitro and Tissue Distributuon in Mice Bearing Melanoma Tumors // Photochem. Photobiol.— Vol. 64(1), p. 174-181(1996)

147. Sandra Harris Sub-retinal neovascular membrane in exudative macular degeneration Clinical and Experimental Optometry;Vol.86(l) p. 51-56 (2003)

148. Scachat A.P. .Radiotherapy and the Treatment of Age-related Macular Degeneration. //Arch Ophthalmol.; Vol.116 p. 1507- 1511(1998)

149. Schmidt-Erfurth U., Miller J., Sickenberg M. et al. Photodynamic therapy of subfoveal choroidal neovascularization: clinical and angiographic examples. // Graefe's Arch Clin Exp Ophthalmol.; Vol.236 p.365-374(1998)

150. Schmidt-Erfurth U., Noack J., Teschner S., Birngruber R. Confocal indocyanine green angiography with 3-dimensional topography. Results in choroid neovascularization (CNV) // Ophthalmologe. Dec; vol.96(12) p.797-804(1999)

151. Snodderly D. M., Auran J. D., and Delori F. C., Invest. // Ophthalmol. Vision Sci.;vol.25(6), p.674-685 (1984)

152. Sokolov V.V., Chissov V.I., Aristarchova // V.I. SPIE Vol.2625, p. 476-482 (1995)

153. Stenstrom S. Investigation of the variation and the correlation of the optical elements of human eyes. // Am. J. Op-tom.;Vol.25,p.340-350(1948)

154. Stranadko E.F., Skobelkin O.K., Litvin G.T. et al. Photodynamic therapy of human malignant tumors: a comparative study between Photogem and tetrasulfonated aluminium phthalocyanine.// Proc. SPIE 2625.p.440-448(1996)

155. Svanberg K, Anderson T, Killander D et al. Photodynamic therapy of non-melanoma malignant tumours of the skin using topical 5-aminolaevulinic acid sensitisation and laser irradiation. // Br. J. Dermatol.; Vol. 130 p. 743-51(1994)

156. Thylefors B., Negrel A.D., Pararajasegaram R., Dadzie K.Y. Global data on blindness. // Bulletin of the World Health Organization;Vol.73 p.l 15 -121(1995)

157. Verkruysse W., Nilsson A. M. K., Milner T. E., Beek J. F., Lucassen G. W. and van Gemert M. J. C. Optical absorption of blood depends on temperatureduring a 0.5 ms laser pulse at 586 nm // Photochem. Photobiol.;Vol.67 (3) p.282-288(1998)

158. Verma L., Tewari H.K., Nainiwal S., Ravindranathan J. Transpupillary thermotherapy in subfoveal choroidal neovascular membrane secondary to age-related macular degeneration. // Indian J. Ophthalmol. Mar;Vol.52(1) p.35-40(2004)

159. Voight D.R., Dayhaw-Barker P. The effect of sodium fluorescein on argon green photocoagulation. J Am Optom Assoc. Feb;Vol.66(2),p. 100-5(1995)

160. Webb R.H., Hughes G.W., Pomerantzeff O. Flying spot TV ophtalmoscope // Appl. Optics;Vol.19 p.2991-2997 (1980)

161. Welch A., Gardner C., Richards-Kortum R., Chan E., Criswell G., Pfefer J., Warren S. Propagation of fluorescent light // Lasers in surgery and medicine, Vol. 21, p. 166-178( 1997)

162. Yifei Huang, Keith M. Meek Swelling Studies on the Cornea and Sclera: The Effects of pH and Ionic Strength // Biophys J, September,, Vol. 77(3) p. 1655-1665(1999)

163. Zeimer R.C., Guran T., Shahidi M., Mori M.T. Visualization of the retinal microvasculature by targeted dye delivery. //Invest Ophthalmol Vis Sei. Aug;Vol.31(8) p. 1459-65 (1990)