Синтез и биологическая активность 6-замещенных производных пиридоксина

Штырлин, Никита Валерьевич

Синтез и биологическая активность 6-замещенных производных пиридоксина тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

Штырлин, Никита Валерьевич АВТОР

кандидата химических наук УЧЕНАЯ СТЕПЕНЬ

Казань МЕСТО ЗАЩИТЫ

2010 ГОД ЗАЩИТЫ

02.00.03 КОД ВАК РФ

Диссертация по химии на тему «Синтез и биологическая активность 6-замещенных производных пиридоксина»

Автореферат диссертации на тему "Синтез и биологическая активность 6-замещенных производных пиридоксина"

004611992

ШТЫРЛИН НИКИТА ВАЛЕРЬЕВИЧ

СИНТЕЗ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ 6-ЗАМЕЩЕННЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ПИРИДОКСИНА

02.00.03 - Органическая химия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

2 8 ОПТ 2010

КАЗАНЬ-2010

004611992

Работа выполнена на кафедре органической химии Химического института им. A.M. Бутлерова Казанского (Приволжского) федерального университета

Научный руководитель:

кандидат химических наук, доцент Штырлин Юрий Григорьевич

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор,

Резник Владимир Савич

доктор химических наук, профессор,

Бухаров Сергей Владимирович

Ведущая организация:

ГОУ ВПО "Самарский государственный университет'

Защита состоится «Д» ноября 2010 г. в 14 час. 30 мин, на заседании диссертационного совета Д 212.081.03 при Казанском (Приволжском) федеральном университете по адресу: ул. Кремлевская, 18, Химический институт им. А. М. Бутлерова КФУ, Бутлеровская аудитория.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке им. Н.И. Лобачевского Казанского (Приволжского) федерального университета.

Отзывы на автореферат просим направлять по адресу: 420008, г. Казань, ул. Кремлевская, 18, КФУ, Химический институт им. А.М. Бутлерова.

Автореферат разослан « » октября 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного Совета, кандидат химических наук

Казымова М. А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Функционализация природных биологически активных соединений является одним из важнейших подходов к созданию новых лекарственных средств. Ярким представителем таких соединений является витамин В6 - один из ключевых витаминов, вовлеченный в метаболизм с более чем 100 ферментами и участвующий в процессах биосинтеза аминокислот, метаболизме углеводов, жирных кислот и липидов. Среди более тысячи синтезированных производных пиридоксина обнаружены вещества, проявляющие кардиопротекторную, антихолинэстеразпую, ноотропную, радиопротекторную, антидепрессантную и другие виды активности.

В течение последних десяти лет в Химическом институте им. A.M. Бутлерова проводится систематическое изучение химических, физических и биологических свойств замещенных ацеталей пиридоксина. Установлены факторы, определяющие реакционную способность витамина В6 и пространственное строение семичленного гетероцикла в зависимости от природы заместителей у фенольного атома кислорода и ацетального атома углерода, изучены нелинейно-оптические свойства и проведены исследования in vitro и in vivo антибактериальной и антихолинэстеразной активности некоторых производных пиридоксина.

Несмотря на достаточно большой задел в этой области, 6-замещснные производные пиридоксина к началу настоящей работы были изучены явно недостаточно, что обусловлено экспериментальными сложностями при проведении реакций замещения атома водорода в этом положении пиридинового цикла Вместе с тем не вызывает сомнений, что раскрытие их богатого синтетического потенциала может стать совершенно новым направлением при создании высокоэффективных и безопасных инновационных лекарственных средств пиридинового ряда.

Цель работы заключалась в разработке подходов к синтезу широкого ряда 6-замешенных производных ииридоксина и выявлению среди них соединений -кандидатов в лекарственные средства.

Научная новизна работы состоит в том, что /¡первые:

- разработан подход к синтезу 6-метил-2,?,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола и проведено теоретическое и экспериментальное изучение реакций образования циклических кеталей на его основе;

- разработана методика синтеза циклических кеталей на основе 2,4,5,6-тетракис(гидроксиметил)пиридин-3-ола;

- с использованием кетальной защиты гидроксимегильных групп 6-замещенных производных пиридоксина проведено региоселективное окисление гидроксильных групп в различных положениях пиридинового цикла до карбальдегидов и получены соответствующие оксимы и тиосемикарбазоны;

- разработаны методики региоселективного замещения гидроксильных фупп 6-замещснных гидроксиметильных производных пиридоксина на атомы хлора и с использованием различных нуклеофильных реагентов синтезирован ряд тио-. амино- и фосфорсодержащих пентазамещенных пиридинов;

- синтезированы 52 новых производных пиридоксина

Практическая значимость. Некоторые из полученных в работе соединений могут быть рекомендованы в качестве кандидатов в лекарственные средства.

Экспериментами in vivo установлено, что модификация шести- и семичленных ацеталей и кеталей пиридоксина фармакофорной группой приводит к значительному уменьшению токсичности известного нестероидного противовоспалительного средства (напроксена) при сохранении противовоспалительной активности. Фосфорсодержащее производное пиридоксина in vitro показало высокую бактериостатическую активность по отношению к Staphylococcus aureus, сопоставимую с известными антибиотиками пеницилланового и цефалоспоринового ряда.

Публикации. По материалам работы опубликовано 2 статьи в центральных научных журналах, материалы и тезисы 10 докладов на международных, всероссийских и региональных конференциях, одна статья находится в печати.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 167 страницах, содержит 6 таблиц и 22 рисунка. Работа состоит из введения, трех глав, раздела постановки задачи, выводов, списка цитируемой литературы из 214 наименований и приложения на 6 страницах.

В обзоре литературы, приведенном в первой главе, представлены данные по реакционной способности широкого ряда производных витамина В6.

Вторая глава представляет собой обсуждение полученных результатов. В первом разделе приведены данные по теоретическому и экспериментальному изучению 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола и циклических ацетонидов на его основе. Во втором разделе рассмотрены данные по модификации метальной группы 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола. В третьем разделе описаны реакции ацилирования 6-замещенных производных пиридоксина по ароматической гидроксилыюй группе. В четвертом разделе представлены реакции региоселективного окисления 6-гидроксиметилзамещенных производных пиридоксина. Пятый раздел посвящен реакциям получения хлорзамещенных производных пиридоксина и реакциям нуклеофильного замещения на их основе. В шестом разделе представлены данные по биологической активности полученных соединений.

Третья глава содержит описание экспериментальной части работы.

В приложении приведены данные по биологической активности синтезированных соединений, предсказанные программой PASS.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

6-Метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ол и циклические ацетониды на его основе

Разработан новый подход к синтезу 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола, включающий три стадии: ацетонидную защиту гидроксиметильных групп в 4- и 5-положениях пиридоксина, гидроксиметилироваиие полученного семичленного циклического кеталя пиридоксина II в щелочной среде и последующее снятие кеталыюй защиты в кислой среде. В отличие от известного в литературе предложенный нами метод является более удобным в отношении количества стадий, их трудоемкости, доступности субстрата и реагентов и позволяет получать целевой продукт с обшим выходом 50 %.

Для соединения IV возможно образование четырех циклических ацетонидов: три из них представлены бициклическими моноацетонидами (III, V, VI), а один -трицикличееким бис-ацетонидом VII.

С использованием различных квантово-химических методов рассчитаны энергии реакции образования AG°f ацетонидов (III, V-VII) из соединения IV и ацетона (таблица 1). Установлено, что предпочтительным является процесс образования шестичленного кеталя V, в то время как другие кетали энергетически значительно менее выгодны.

Таблица 1. Энергии реакции образования &G°f (ккал/моль) циклических

кеталей (III, У-УЦ) по результатам квантово-химических расчетов.

Метод

Соединение l'riroda/РВЕ/ Gaussian 98/HF/ Gaussian 98/B3LYP/

3 z 6-31G(d, p) 6-31G(d, p)

VII 6.26 3.84 6.48

VI 1.28 0.39 1.21

III 4.16 1.97 4.62

V -0.64 -2.55 -0.21

Как оказалось, результаты теоретического изучения хорошо согласуются с экспериментальными данными. В реакции ацетонирования при высоких концентрациях кислотного катализатора (более 20% от массы раствора) наблюдается исключительное формирование термодинамически выгодного продукта V в виде растворимого в ацетоне хлоргидрата. Посредством варьирования концентрации катализатора и выведения из сферы реакции нерастворимых в ацетоне продуктов конденсации удалось получить кинетически контролируемые соединения III и VII. Пиридиниевая соль семичленного кеталя III и гидрохлорид дикеталя VII селективно образуются при концентрациях хлороводорода 5% и 14% от массы раствора соответственно. Отметим, что использование в качестве начального субстрата соединения III также приводит к целевым ацетонидам V и VII.

Аналогичные результаты были получены при использовании в качестве кислотного катализатора л-толуолсульфокислоты: при высоких концентрациях катализатора образуется кеталь V, а при более низких - нерастворимые в ацетоне пиридиниевые соли VIII и IX. Многократные попытки получения семичленного ацетонида VI, даже при широком варьировании экспериментальных условий (температура, время реакции, концентрация катализатора), оказались безуспешными.

Следует отметить, что соединение VIII кристаллизуется в двух полиморфных модификациях, различающихся конформацией гидроксиметильной группы относительно плоскости пиридинового цикла (рисунок 1).

Рисунок 1. Структура полиморфных кристаллов соединения VIII поданным РСА.

Модификация метальной группы 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридик-5-ола

Для синтеза новых производных пиридоксина, содержащих гидроксиметильные группы во втором и тестом положениях, на первой стадии соединение III ацилировали уксусным ангидридом. Полученное соединение X N-оксидировали jw-хлорпербензойной кислотой с последующей перегруппировкой N-окиси в среде уксусного ангидрида. Попытка синтеза пентола XIII путем одновременного снятия защитных групп у соединения XII оказалась безуспешной ввиду неустойчивости целевого продукта в кислых условиях. Путем снятия ацетатной защиты в основных условиях, при сохранении кетальной защиты двух гидроксиметильных групп, удалось выделить соединение XIV в индивидуальном виде. Последнее при большом избытке кислотного катализатора изомеризуется в термодинамически выгодный шестичленный кеталь XV.

сн3 о

АсО I

т-С1СйН4С(0)00Н

CHjC(0)CHj. HCl (25%)

СНз

.O-t-CHj о

КО.

\ XI

СИ,

.о-\~сн> о

C,HfONa

XIV

он

хп

н2о. н*

—X—■ .ОАс НО

хш

он .он

Аналогичная процедура с первоначальным Ы-оксидированием, ацилированием и снятием ацетатной защиты в основных условиях была использована, когда в качестве начального субстрата использовали моноксталь V и дшееталь VII. В условиях значительного избытка кислотного катализатора в среде ацетона полученный дикеталь XXI легко превращается в шестичленный кеталь XV. Состав и структура выделенных с помощью колоночной хроматографии соединений доказаны методами ЯМР 'Н спектроскопии, элементного анализа и масс-спектрометрии. н3с

н,с

он он

Н,с н,с

А,о. нД;

(C2HihN . Y'^I^OAC т-С'1С,;НлС(0)00Н

ОАс

HjCAN^0AC ^^OAc

l xvn

iijC

H.c

OH C2HsONa OH

Ac20

h,C-YN

Ac0\,AnA^oac

XVIII

N XXI

По данным квантово-химических расчетов наиболее энергетически выгодным является процесс образования шестичленного кеталя XV, тогда как образование других моно- и дикеталей является значительно менее выгодным (таблица 2).

Таблица 2. Свободная энергия Гиббса реакций образования AG14f (ккал/моль) циклических кеталей (XIV, XV, XXI-XXV) по данным квантово-химических

Соединение AG¿)ííf (ккал/моль)

XV 2.05

XIV 2.52

XXII 4.00

ХХШ 4.49

XXI 11.19

XXIV 12.66

XXV 13.19

Введение карбальдегидной и карбоксильной групп в 6-замещенные производные пнридоксина

Важнейшим направлением функционализации 6-гидроксиметилзамещенных производных пиридоксина стало получение на их основе соответствующих альдегидов и их производных. Получить целевой альдегид XXVI практически с количественным выходом удалось при использовании в качестве окислителя активированного диоксида марганца. При снятии ацетонидной защиты с альдегида XXVI образующийся продукт XXVII оказался нестабильным, и выделить его в индивидуальном виде не удалось. По этой причине все последующие модификации с его участием производились in situ.

С целью получения широкого ряда потенциально биологически активных соединений были синтезированы несколько производных пиридоксина, содержащих карбальдегидную группу в орто-положении к атому азота

пиридинового цикла. Последовательно были получены защищенные по фенолыюму гидроксилу альдегиды XXXII и ХХХШ путем первоначальной обработки соответствующих производных III и XXVIII метилхлорметиловым эфиром в присутствии гидрида натрия. Далее полученные соединения окисляли

активированным диоксидом марганца. R,

Rj „

,o-rR|

но X Го Г° 9

"VV MOMCl.NaH МОМОуЛ^ M^J момоЛ/

" чЛЛ"' H3c N С(0)Н

XXVIIT R R =сн XXX:Rj=CH); Rj^CHJ XXXII: RJ^CHJ; RJ^CHJ

XXIX; R|=H; Rj^CHiCH^ XXXI: R,-H; R2-CHj ХХХ1П: R,=H; R2=CH3

Алкилированием ароматической гидроксильной группы соединения III 2,4-динитробромбензолом с последующим окислением полученного продукта диоксидом марганца был получен альдегид XXXV, содержащий в пара-положении к альдегидной группе электроноакцепторный заместитель.

--------H/AjA^ Н,С^Л(0)Н

(П XXXIV XXXV

Отметим, что для соединений XXXII, XXXIII и XXXV программа PASS предсказывает кардиотоническую активность с вероятностью более 90%. Далее представляло интерес на основе региоизомерных карбальдегидов получить соответствующие оксимы, которые в отличие от альдегидов, с одной стороны, являются весьма стабильными соединениями, а с другой - представляют интерес в плане их биологической активности.

Окисление соединения III в кислой среде включало три стадии: на первой стадии в кислой среде снималась кеталыш защита, далее проводилось окисление диоксидом марганца и затем взаимодействием с солянокислым гидроксиламином получали целевой оксим XXXVI. Особо следует отметить региеспецифичность этой реакции: окисление проходит исключительно по гидроксиметильной группе в четвертом положении пиридинового цикла. Структура оксима XXXVI по данным РСА представлена на рисунке 2.

Рисунок 2. Структура соединения XXXVI по данным РСА.

Попытка получения оксима XXXVIII из соединения XXXVII путем снятия ацетонидной защиты оказалась неудачной вследствие нестабильности целевого продукта в кислой среде. Получить соединение XXXVIII удалось другим путем, включающим быстрое снятие кетальной защиты с альдегида XXVI с последующим взаимодействием промежуточного продукта с гидроксиламином и выводом целевого оксима из сферы реакции.

Многократные попытки алкилирования оксимов XXXVI и XXXVII при варьировании реакционных условий и природы алкилирующего агента (бромистый метил, йодистый метил, диметилсульфат), с целью получения аналогов известных реактиваторов холинэстеразы, не привели к ожидаемым пиридиниевым солям. Мы полагаем, что главная причина столь разительного понижения реакционной способности полученных соединений на фоне производных пиридина и пиридоксина, в частности, обусловлена стерической загруженностью атома азота со стороны орио-заместителей и эффектами "стерической поддержки" со стороны заместителей в трех других положениях.

На основе региоизомерных карбальдегидов также были получены соответствующие тиосемикарбазоны, относящиеся к весьма перспективному классу биологически активных соединений. Соединения XXXIX, ХЬ и Х1Л представляют собой кристаллические вещества с температурой плавления выше 140°С. Состав и структура полученных соединений доказаны методами ЯМР 'Н спектроскопии и элементного анализа.

ÄCH) T J »,0.4^

XXVI

,0H

Г 011

"°XT

HjC^N C(0)H

ЛН

s Г 011

K.N-fl-iW'YY

xxxix

H3c CH

"W HO. III

4jC N

HO. HjC

C(0)H

HjN-N-C-NH,

HjCSi «0)11 H,C

XXVI

HjC

H II N-N-C-NH,

OH .OH

С целью введения карбоксильной группы в 6-замещенные производные пиридоксина были проведены попытки окисления соединений III и ГУ с использованием диоксида марганца или перманганата калия в щелочной среде. Однако в обоих случаях получить желаемый продукт не удалось из-за сильного осмоления реакционной смеси. Поэтому карбоксильная группа была введена алкшшрованием фенольного гидроксила этиловым эфиром бромуксусной кислоты с последующим снятием сложноэфирной защиты. При этом с хорошим выходом была выделена натриевая соль соответствующей кислоты XLHI.

"ic — 'Щ г-,, !']С

Kall, BiC[(,C(0)OEt

EtO(0)CCH20.

C,H5ON3 ^одаотыуАу^

HjC

N XLtH

Реакции иуклеофкльного замещения в ряду б-гидроксиметилзамещенных производных пиридоксина

Для первоначальной активации гидроксиметильных фупп соответствующих семи- и шестичленных кеталей 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола, но аналогии с производными пиридоксина, были предприняты попытки получения мезитильных производных. Однако, вместо ожидаемых мезилатов были получены соответствующие хлорпроизводные XL.IV и ХЬУ. Мы полагаем, что столь неожиданный ход реакции, как и в рассмотренных выше случаях, связан с эффектом стернческой загруженности пентазамещенных пиридинов, проявляющимся в значительном увеличении скорости замещения мезилатной группы присутствующим в реакционной смеси хлорид-ионом.

MsCI. Ei3N MsO

H,C

л™*

-CI

XLIV

CH3 Л

H,C

-QH MsCI, El)N .Oil

-CI

H,C N' V

XLV

Хлорпроизводное XLV удалось получить также и более "традиционным" способом, используя в качестве хлорирующего агента хлористый тионил. Замечено, что в реакции семичленного кеталя Ш с хлористым тионилом происходит изомеризация с образованием термодинамически выгодного шестичлеиного кеталя XLV, который также можно получить встречным синтезом из соединения V.

Первоначально были проведены реакции нуклеофильного замещения полученных хлорпроизводньгх с рядом серосодержащих нуклеофилов. Взаимодействие соединения ХЬУ с двукратнььм избытком тиофенола практически с количественным выходом приводит к образованию соответствующего дитиопроизводного ХЬУ1. Последующее снятие кетальнон защиты с соединения ХЬУ1 в кислой среде приводит к целевому продукту с выходом 92%. Реакция монохлорпроизводного ХНУ с тиофенолом также протекает достаточно гладко и после снятия мезилатной защиты образуется продукт ХЫХ Дальнейшее снятие кетальной защиты в кислой среде позволило получить соединение Ь, содержащее тиофенольную группу в орто-положении к атому азота. Состав и структура выделенных с помощью колоночной хроматографии соединений доказаны методами ЯМР 'Н и |3С спектроскопии и масс-спектрометрии.

XLV

HjC N V

XLV

II,с

он ( он

H ¿AA^"1 Н,САА^

Таким образом, на примере реакции с тисфенолом был отработан подход, позволяющий с использованием реакций нуклеофилыюго замещения селективно модифицировать гидроксиметильные группы во втором и третьем положениях 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола. Это открывает широкие перспективы селективного введения различных функциональных групп в 6-замещенные пиридоксины.

Помимо тиофенола в реакции нуклеофильного замещения были вовлечены и другие серосодержащие луклеофнлы, в частности, бензилмеркаптан, о-бис(меркаптометил)бензол и метиловый эфир мсркаптоуксусной кислоты. В результате реакции соединения XLV с двухкратным мольным избытком бензилмеркаптана или метилового эфира меркаптоуксусной кислоты были выделены соответствующие производные LI и LIII. В реакции с о-бис(мсркаптометил)бензолом при эквимольном соотношении субстрата и реагента был получен циклический продукт LIL Следует отметить, что со всеми изученными серосодержащими нуклеофилами реакции протекают не селективно, и при эквимольном соотношении субстрат/реагент наблюдается образование всех трех возможных продуктов.

ÇHj сн,

HiC-p

HjC

C;.HsONa, PhCH2SH

XLV

H)C

N u

N' XLV

LUI

Также не селективно протекает окисление соединения ХЬУ1 м-хлорпербензойной кислотой с образованием неразделимой смеси продуктов окисления. При исчерпывающем окислении образуется соответствующая М-окись бис-сульфона 1ЛУ

Н)С

5РЬ т-ааддо^он о^Ч/-*0^11 1 /ч

И 3С N -—$02РЬ I Ь1У

С целью дальнейшего раскрытия синтетического потенциала 6-замещенных производных пиридоксина представляло интерес получить ряд производных путем взаимодействия с различными азот- и фосфорсодержащими нуклеофилами. В реакциях соединения ХЬУ с аммиаком, изопропиламином или этилендиамином как при эквимольном, так и при избыточном количестве аминной компоненты всегда наблюдается неразделимая колоночной хроматографией смесь продуктов аминирования. Реакция с большим избытком вторичного амина (диметил- или диэтиламина) протекает селективно, и с высоким выходом образуется единственный продукт. Структура полученных трициклических соединений ЬУ и ЬУ1 доказана методами ЯМР 'н и |3С-спектроскопии, элементного анализа и масс-спектрометрии. Мы полагаем, что столь необычный факт селективного получения четвертичных аммониевых солей, указывающий на близкие скорости последовательных реакций алкилирования вторичного амина двумя хлорметильными группами соединения ХЬУ, связан со стерическими особенностями пентазамешенных пиридинов (см. выше).

ХЬУ

Реакция соединения ХЬУ с избытком трифенилфосфина протекает мягко, и с высоким выходом образуется бисфосфониевая соль ЬУН. Структура доказана методами ЯМР 'Н, ВС, "Р-спсктроскопии и масс-спектрометрии.

Биологическая активность некоторых производных пиридоксина

В рамках поставленной в работе задачи по выявлению среди синтезированных соединений кандидатов в лекарственные средства нами были протестированы некоторые из 6-замсщснпьгх производньк пиридоксина на различные виды активности. Исследование антибактериальной активности соединений IV, XXXVI, XXXVII и ЬУП на штаммах патогенных микроорганизмов показало, что наибольший интерес представляет бисфосфониевая соль 1Л'П. Результаты исследования активности этого соединения приведены в таблицах 3 и 4. В качестве реперных соединений использовались известные антибиотики цефалоспоринового и пенициллинового ряда, а также бензилтрифенилфосфоний хлорид - структурный аналог соединения 1Л'П.

Таблица 3. Данные по иигибированию роста патогенных бактерий растворами тестируемых соединений (10 мкг/мл) после 24 часов культивирования.

Штамм Соединение Подавление роста, в %

Proteus vulgaris LVII 10.1

Цефазолин 94.3

бензилтрифенилфосфоний хлорид 5.3

Staphylococcus aureus LV1I 82.9

Цефазолин 87.8

бензилтрифенилфосфоний хлорид 4.2

Таблица 4. Минимаьная ингибируюшая концентрация (мкг/мл) тестируемых соединений на штаммах патогенных микроорганизмов после 24 часов культивирования

Соединение Бактериальные штаммы

Proteus vulgaris Staphylococcus aureus

LVII 312 39

Цефазолин 156 39

Бензилпеннииилин 39 39

Ампицилин 39 39

Из представленных данных можно сделать вывод, что соединение LVH удачно сочетает в себе высокую активность и избирательность действия против Staphylococcus aureus, относящегося к числу наиболее резистентных штаммов микроорганизмов.

Для лечения воспалительных заболеваний опорно-двигательного аппарата наиболее часто используются нестероидные противовоспалительные средства

(НПВС), которые обладают рядом побочных эффектов. В литературе описано немало работ, посвященных получению амидов и сложных эфиров на основе НПВС. Как правило, полученные соединения т \чуо становятся значительно более безопасными, но при этом на фоне исходных субстанций существенно проигрывают по противовоспалительной активности. С этих позиций представлялось интересным ответить на вопрос: возможно ли в эфирах напроксена, содержащих пиридоксиновый фрагмент, сохранить высокую противовоспалительную активность и при этом уменьшить токсичность, в первую очередь, гастротоксичность?

Исследование противовоспалительной активности проводили в группе доцента Фатгаховой А.Н. на кафедре биохимии КФУ с использованием модели «формалинового отека» на мышах. В качестве тестируемых соединений использовались эфиры напроксена, полученные взаимодействием хлорангидрида Б-напроксена с ацеталями и кеталями пиридоксина. В отличие от пиридоксина реакция его 6-гидроксиметилзамещенных производных с хлорангидридом Я-напроксена как при эквимольном, так и при двукратном избытке ацилирующей компоненты приводила к образованию неразделимой смеси продуктов.

/г-

НСуА^ NaH,H/X)'

H,cV

С(0)С1

IljCO'

а3с

LVni: R=CH3; LIX". R=H

H3C

H3C o

N CH3

Результаты исследования показали, что все три соединения (LV1II, LIX и LX) в пределах экспериментальной ошибки определения обладают одинаковой с напроксеном противовоспалительной активностью. Вместе с тем, значение ЛД50 для одного из соединений оказалось в три раза выше по сравнению с S-напроксеном.

Таким образом, использование эфиров S-напроксена на основе производных пиридоксина представляет интерес при разработке новых безопасных НПВС.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

1. Разработан удобный способ синтеза 6-замещенных пиридоксинов. На основе 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола синтезированы 52 новых пиридоксиновых производных.

2. Проведено теоретическое и экспериментальное изучение реакций образования циклических кеталей на основе б-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола и 2,4,5,6-тетракис(гидроксиметил)пиридин-3-ола. Установлено, что в обоих случаях продуктами термодинамического контроля являются шестичленные кетали по ароматической гидроксигруппе и гидроксиметильной группе в четвертом положении пиридинового кольца.

3. С использованием кеталыюй защиты гидроксиметильных групп 6-замещенных производных пиридоксина проведено региоселективное окисление гидроксильных фупп в различных положениях пиридинового цикла до карбальдегидов, и получены соответствующие оксимы и тиосемикарбазоны.

4. Предложены методики синтеза ряда тио-, амино- и фосфорсодержащих пентазамещенньк пиридинов на основе реакций нуклеофилыюго замещения хлорпроизводных шести- и семичленных кеталей 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола.

5. Установлено, что фосфорсодержащее производное 6-замещенного пиридоксина обладает высокой бактериостатической активностью по отношению к Staphylococcus aureus, сопоставимую с известными антибиотиками пеницилланового и цефалоспоринового ряда.

6. Экспериментами in vivo показано, что модификация некоторых шести- и семичленных ацеталей и кеталей пиридоксина с использованием известного нестероидного противовоспалительного средства S-наирокссна приводит к значительному понижению токсичности этих производных на фоне высокой противовоспалительной активности.

Основное содержание диссертации изложено в следующих публикациях:

1. Штырлин, Н.В. Новый метод синтеза 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола [Текст] / Н.В. Штырлин, А.Д. Стрсльник, Л.П. Сысоева, О.А. Лодочникова, Е.Н. Климовицкий, Ю.Г. Штырлин // Журн. орг. химии. -2009. -Вып.84, №.8. - С. 1266-1268.

2. Штырлин, Н.В. Теоретическое и экспериментальное исследование циклических ацетоцидов 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола [Текст] / Н.В. Штырлин, О.А. Лодочникова, М.В. Пугачев, Т.Н. Маджидов, Л.П. Сысоева, И.А. Литвинов, Е.Н. Климовицкий, Ю.Г. Штырлин // Журн. орг. химии. - 2010. -Вып.85, №.4. - С. 569-575.

3. Штырлин, Н.В. Экспериментальное и теоретическое исследование 6-замещенных производных пиридоксина. Синтез циклических ацетонидов 2,4,5,6-тетракис(гидроксиметил)пиридин-3-ола [Текст] / Н.В. Штырлин, А.Б. Добрынин, М.В. Пугачев, Т.И. Маджидов, Л.П. Сысоева, Р.З. Мусин, И.А. Литвинов, Е.Н. Климовицкий, Ю.Г. Штырлин / Журн. орг. химии. Per. № 114/10. В печати.

4. Штырлин, Н.В. Синтез и селективная функционализация новых 6-замешенных производных пиридоксина [Текст] / Н.В. Штырлин, М.В. Пугачев, З.М. Рахимова, Ю.Г. Штырлин // 1 Международная конференция "Новые

направления в химии гетероциклических соединений". - Сб. науч. тр. - Кисловодск, 2009.-С. 225-226.

5. Штырлин, Н.В. Синтез новых производных пиридоксина [Текст] / Н.В. Штырлин // XIV Международная конференция студентов, аспирантов и молодых учёных "Ломоносов-2007" химия. - Тез. докл. - Москва, 2007. - С. 359.

6. Штырлин, Н.В. Синтез и превращения 6-метил-2,3,4-тригидроксиметилпиридин-5-ола [Текст] / Н.В. Штырлин, Ю.Г. Штырлин // VIII Научная конференция молодых ученых, аспирантов и студентов научно-образовательного центра Казанского государственного университета «Материалы и технологии XXI века». - Тез. докл. - Казань, 2008. - С. 87.

7. Рахимова, З.М. Теоретическое и экспериментальное исследование циклических ацетонидов на основе 6-метил-2,3,4-тригидроксиметилпиридин-5-ола [Текст] / Н.В. Штырлин, М.В. Пугачев, З.М. Рахимова // XVI Международная конференция студентов, аспирантов и молодых учёных "Ломоносов-2009" химия. -Тез. докл. - Москва, 2009. - С. 359.

8. Штырлин, Н.В. Селективное окисление новых 6-замещенных производных пиридоксина [Текст] / Н.В. Штырлин, М.В. Пугачев, З.М. Рахимова, Е.Н. Климовицкий, Ю.Г. Штырлин // II Региональная научно-практическая конференция "Синтез и перспективы использования новых биологически активных соединений". - Тез. докл. - Казань, 2009. - С. 85-86.

9. Штырлин, Н.В. Теоретическое и экспериментальное исследование циклических ацетонидов новьгх 6-замещенных производных пиридоксина [Текст] / Н.В. Штырлин, М.В. Пугачев, Л.П. Сысоева, Ю.Г. Штырлин // "XII молодежная конференция по органической химии". - Тез. докл. - Иваново, 2009. - С. 187-189.

10. Штырлин, Н.В. Полиморфные кристаллы тозилата 1,5-дигидро-3,3,8-триметил-6-гидроксиметил-[1,3]-диоксепино-[5,6-с]-пиридиний-9-ола [Текст] / Н.В. Штырлин, О.А. Лодочникова, Ю.Г. Штырлин, И.А. Литвинов // V Национальная кристаллохимическая конференция. - Тез. докл. - Казань, 2009. - С. 98.

И. Пугачев, М.В. Синтез 2,6-дигидроксиметилзамещенных производных пиридоксина [Текст] / М.В. Пугачев, Н.В. Штырлин, З.М. Рахимова // IX Научная конференция молодых ученых, аспирантов и студентов научно-образовательного центра Казанского государственного университета «Материалы и технологии XXI века». - Тез. докл. - Казань, 2009. - С. 68.

12. Гарипов, М.Р. Синтез и биологическая активность 6-замещенных производных пиридоксина [Текст] / М.Р. Гарипов, З.М. Рахимова, М.В. Пугачев, Н.В. Штырлин, А.Д. Стрелышк // IX Научная конференция молодых ученых, аспирантов и студентов научно-образовательного центра Казанского государственного университета «Материалы и технологии XXI века». - Тез. докл. -Казань, 2009. - С. 25.

13. Пугачев, М.В. Оксимы и тиосемикарбазоны на основе 6-замещенных производных пиридоксина [Текст] / М.В. Пугачев, Н.В. Штырлин // XVII Международная конференция студентов, аспирантов и молодых учёных "Ломоносов-2010" химия. - Тез. докл. - Москва, 2010. - С. I.

Отпечатано в полном соответствии с представленным оригинал-макетом

Подписано в печать 28.09.2010. Форм. 60 * 84 1/16. Гарнитура «Тайме». Печать ризографическая. Печ. л. 1,25. Тираж 120. Заказ 350.

Лаборатория оперативной полиграфии Издательства Казанского Университета 420045, Казань, Кр. Позиция, 2а Тел. 233-72-12

Содержание диссертации автор исследовательской работы: кандидата химических наук, Штырлин, Никита Валерьевич

Оглавление

Введение

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Общие сведения и синтез соединений группы витамина В

1.2 Реакционная способность пиридоксина

1.2.1 Циклические ацетали и кетали пиридоксина

1.2.2 Модификация метальной группы пиридоксина

1.2.3 Модификация ароматической гидроксигруппы 26 пиридоксина

1.2.4 Модификация четвертого положения пиридоксина

1.2.5 Модификация пятого положения пиридоксина

1.2.6 Модификация шестого положения пиридоксина 43 ПОСТАНОВКА ЗАДАЧИ

ГЛАВА 2. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

2.1 6-Метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ол и циклические 49 ацетониды на его основе

2.1.1 Рентгеноструктурное исследование циклических 54 ацетонидов 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола

2.2 Модификация метальной группы б-метил-2,3,4- 59 трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола

2.2.1 Квантовохимическое исследование циклических 63 ацетонидов 2,4,5,6-тетракис(гидроксиметил)пиридин-3-ола

2.2.2 Рентгеноструктурное исследование циклических 66 ацетонидов 2,4,5,6-тетракис(гидроксиметил)пиридин-3-ола

2.3 Ацилирование 6-замещенных производных пиридоксина по 70 фенольному гидроксилу

2.4 Реакции окисления 6-гидроксиметилзамещенных производных 75 пиридоксина

2.4.1 Получение альдегидов на основе 6-метил-2,3,4- 76 трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола

2.4.2 Синтез шиффовых оснований на основе региоизомерных 84 производных 4- и 6-пиридоксинкарбальдегидов

2.4.3 Получение карбоновых кислот на основе 6-метил-2,3,4- 85 трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола

2.5 Реакции нуклеофильного замещения в ряду 6- 87 гидроксиметилзамещенных производных пиридоксина

2.5.1 Реакции нуклеофильного замещения с серосодержащими нуклеофилами

2.5.2 Реакции нуклеофильного замещения с азотсодержащими 96 нуклеофилами

2.5.3 Реакции нуклеофильного замещения с 98 фосфорсодержащими нуклеофилами

2.6 Биологическая активность некоторых производных пиридоксина

2.6.1 Исследование антибактериальной активности 6- 100 замещенных производных пиридоксина

2.6.2 Противовоспалительное действие производных 103 пиридоксина, содержащих фармакофорную группу

2.6.3 Результаты компьютерного предсказания биологической 106 активности полученных веществ

ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1 Исходные вещества

3.2 Физико-химические измерения

3.3 Квантовохимические расчеты

3.4 Методика изучения антибактериальной активности

3.5 Методика изучения противовоспалительной активности

3.6 Методики синтеза соединениий 112 ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ 138 Список литературы 139 Приложение

Введение диссертация по химии, на тему "Синтез и биологическая активность 6-замещенных производных пиридоксина"

Актуальность темы. Функционализация природных биологически активных соединений является одним из важнейших подходов к созданию новых лекарственных средств. Ярким представителем таких соединений является витамин В6 - один из ключевых витаминов, вовлеченный в метаболизм с более чем 100 ферментами и участвующий в процессах биосинтеза аминокислот, метаболизме углеводов, жирных кислот и липидов. Среди более тысячи синтезированных производных пиридоксина обнаружены вещества, проявляющие кардиопротекторную, антихолинэстеразную, ноотропную, радиопротекторную, антидепрессантную и другие виды активности.

Несмотря на достаточно большой задел в этой области, 6-замещенные производные пиридоксина к началу настоящей работы были изучены явно недостаточно, что обусловлено экспериментальными сложностями при проведении реакций замещения атома водорода в этом положении пиридинового цикла. Вместе с тем не вызывает сомнений, что раскрытие их богатого синтетического потенциала может стать совершенно новым направлением при создании высокоэффективных и безопасных инновационных лекарственных средств пиридинового ряда.

Цель работы заключалась в разработке подходов к синтезу широкого ряда 6-замещенных производных пиридоксина и выявлению среди них соединений - кандидатов в лекарственные средства.

Научная новизна работы состоит в том, что впервые: разработан подход к синтезу 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола и проведено теоретическое и экспериментальное изучение реакций образования циклических кеталей на его основе;

- разработана методика синтеза циклических кеталей на основе 2,4,5,6—тетракис(гидроксиметил)пиридин-3-ола;

- с использованием кетальной защиты гидроксиметильных групп 6-замещенных производных пиридоксина проведено . региоселективное окисление гидроксильных групп в различных положениях пиридинового цикла до карбальдегидов и получены соответствующие оксимы и тиосемикарбазоны;

- разработаны методики региоселективного замещения гидроксильных групп 6-замещенных гидроксиметильных производных пиридоксина на атомы хлора и с использованием различных нуклеофильных реагентов на их основе синтезирован ряд тио-, амино- и фосфорсодержащих пентазамещенных пиридинов;

- синтезированы 52 новых производных пиридоксина;

Практическая значимость. Некоторые из полученных в работе соединений могут быть рекомендованы в качестве кандидатов в лекарственные средства. Экспериментами in vivo показано, что модификация некоторых шести- и семичленных ацеталей и кеталей пиридоксина, с использованием известного нестероидного противовоспалительного средства S-напроксена, приводит к значительному понижению токсичности этих производных на фоне высокой противовоспалительной активности. Фосфорсодержащее производное 6-замещенного пиридоксина in vitro показало высокую бактериостатическую активность по отношению к

Staphylococcus aureus, сопоставимую с известными антибиотиками пеницилланового и цефалоспоринового ряда.

Заключение диссертации по теме "Органическая химия"

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

1. Разработан удобный способ синтеза 6-замещенных пиридоксинов. На основе 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола синтезировано 52 новых производных пиридоксина.

2. Проведено теоретическое и экспериментальное изучение реакций образования циклических кеталей на основе 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола и 2,4,5,6-тетракис(гидроксиметил)-пиридин-3-ола. Установлено, что в обоих случаях продуктами термодинамического контроля являются шестичленные кетали по ароматической гидроксигруппе и гидроксиметильной группе в четвертом положении пиридинового кольца.

3. С использованием кетальной защиты гидроксиметильных групп 6-замещенных производных пиридоксина проведено региоселективное окисление гидроксильных групп в различных положениях пиридинового цикла до карбальдегидов и получены соответствующие оксимы и тиосемикарбазоны.

4. Предложены методики синтеза ряда тио-, амино- и фосфорсодержащих пентазамещенных пиридинов на основе реакций нуклеофильного замещения хлорпроизводных шести- и семичленных кеталей 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола.

6. Экспериментами in vivo показано, что модификация некоторых шести- и семичленных ацеталей и кеталей пиридоксина, с использованием известного нестероидного противовоспалительного средства S-напроксена, приводит к значительному понижению токсичности этих производных на фоне высокой противовоспалительной активности.

Список источников диссертации и автореферата по химии, кандидата химических наук, Штырлин, Никита Валерьевич, Казань

1. Keresztesy, J. Vitamin B-6. // J. Keresztesy, J. Stevens Текст. // J. Am. Chem. Soc. 1938. - V. 60, N. 5. - P. 1267-1268.

2. Gyorgy, P. Crystalline vitamine B6 / P. Gyorgy Текст. // J. Am. Chem. Soc. -1938. V. 60, N. 4. - P. 983-984.

3. Stiller, E.T. The structure of vitamin B6.1 Текст. / E.T. Stiller, J.C. Kerestesy, J.P. Stevens // J. Am. Chem. Soc. 1939. - V. 61, N. 5. - P. 1237-1242.

4. Harris, S.A. Structure of vitamin B6. II Текст. / S.A. Harris, E.T. Stiller, K. Folkers // J. Am. Chem. Soc. 1939. - V. 61, N.5. - P. 1242-1245

5. Snell, E.E. Vitamin activities of "pyridoxal" and "pyridoxamine" Текст. /Е.Е. Snell // J. Biol. Chem. 1944. - V. 154. - P. 313-314.

6. Harris, S.A. The vitamin B6 group. II. The structure and synthesis of pyridoxine and pyridoxal Текст. / S.A. Harris, D. Heyl, K. Folkers // J. Am. Chem. Soc. -1944. V. 66, N. 12. - P. 2088-2092.

7. Wood, W.A. The discovery, synthesis, and role of pyridoxal phosphate: phase I of many phases in the Gunsalus odyssey Текст. / W.A. Wood // Biochem. & Biophys. Res. Comm. 2003. -V.312. - P. 185-189.

8. Umbreit, W.W. Function of the vitamin B6 group: mechanism of transamination Текст. / W.W. Umbreit, D.J. O'Kane, I.C. Gunsalus // J. Biol. Chem. 1948. - V. 176.-P. 629-637.

9. Snell, E. The vitamin B6 group. V. The Reversible heteroconversional of pyridoxal and pyridoxamine by transamination reactions Текст. / E. Snell // J. Am. Chem. Soc. 1949. -V. 67, N. 2. - P. 194-197.

10. Umbreit, W. The function of pyridoxine derivatives: arginine and glutamic acid decarboxylases Текст. / W. Umbreit, I. Gunsalus // J. Biol. Chem. 1945. - V. 159.-P. 333-341.

11. Rothberg, S. Studies of the mechanism of decarboxilation Текст. / S. Rothberg, D. Steinberg // J. Am. Chem. Soc. *1957. - V. 79, N. 12. - P. 32743278.

12. Wood, W. D-Alanine formation: a racemase in streptococous faccalis Текст. / W. Wood, I. Gunsalus // J. Biol. Chem. -1951. V. 190, N. 1. - P. 403-405.

13. Park, H. Bioinspired chemical inversion of L-amino acids to D-amino acids Текст. / H. Park, K-M. Kim, A. Lee, S. Ham, W. Nam, J. Chin // J. Am. Chem. Soc. 2007.-V. 129, N. 6. - P. 1518-1519.

14. Sanadi, D. Synthesis of serine from glycine in mitochondrial fragments Текст. / D. Sanadi, M. Bennet // Biochim. Biophys. Acta 1960. - V. 39, N. 2. - P. 367369.

15. Yanofsky, C. Enzymatic studies with a series of triptophan auxotrophs of escherichia coli Текст. / С. Yanofsky // J. Biol. Chem. 1957. - V. 224, N. 2. - P. 783-792.

16. Metzler, D. The reversible catalytic cleavage of hydroxyamino acids by pyridoxal and metal salts Текст. / D. Metzler, L. Longenecker, E. Snell // J. Am. Chem. Soc. 1954. - V. 76, N. 3. - P. 639-644.

17. Claiton, P.T. B6-responsive disorders: A model of vitamin dependency Текст. / P.T. Claiton // J Inherit. Metab. Dis. 2006. - V. 29. - P. 317-326.

18. Okada, M. Effect of vitamin B6 deficiency on glycogen metabolism in the skeletal muscle, heart, and liver of rats Текст. / M. Okada, K. Ishikawa, K. Watanabe // J. Nutr. Sci. Vitaminol. 1991. - V. 37. - P. 349-357.

19. Bardhan, J. Chemistry of 1,3-dicarbonyl compounds. I. The mechanism of cyanacetamid and cyaneacetic esters condensation Текст. / J. Bardhan // J. Chem. Soc. 1929. - P. 2223-2232.

20. Wenner, W. New approach to condensed pyridine-2-ons Текст. / W. Wenner, J. Plati // J. Org. Chem. 1946. - V. 11, N. 6. - P. 751-753.

21. Bruce, W. Derivatives 3-cyano-4-etholrymethyl-6-methyl-2-pyridone and some related transformation products Текст. / W. Bruce, H. Coover // J. Am. Chem. Soc. 1944. - V. 66, N. 12. - P. 2092-2094.

22. Wenner, W. Derivatives of 2-pyridone Текст. / W.Wenner, J. Piatti // J.Org.Chem. 1946. - V.l 1, N. 6. - P. 753-759.

23. Pat. CH 217228, IPC C07D 213/87. 2-Methyl-4-(ethoxymethyl)-5-cyano-6-hydroxypyridine Текст. / F. Copier; La Roche & Co. Опубл. — 15.10.1941.

24. Mowat J. A synthesis of vitamin B6 Текст. / J. Mowat, F. Piligrim, G. Karlson // J. Chem. Soc. 1943 - V. 65. - P. 954-955.

25. Pat. US 2410938, IPC C07D 213/67. Pyridine derivatives and process for the manufacture of same Текст. / M. Hoffer; La Roche & Co. Опубл. - 12.11.1946.

26. Cohen, A. Synthetical experiments in the В group of vitamins. Part IV. A synthesis of pyridoxine Текст. / A. Cohen, J. Haworth, E. Hughes // J. Chem. Soc. 1952. - P. 4374-4383.

27. Clauson-Kaas, N. Preparation of 3-pyridols from furans Текст. / N. Clauson-Kaas, N. Elming, Z. Tyle // Acta. Chim. Scand. 1955. - V. 9. -P. 1-5.

28. Clauson-Kaas, N. Preparation of 3-pyridols from furans Текст. /N. Clauson-Kaas, P. Nebenskov // Acta. Chim. Scand: 1955.- V. 9. - P: 14-19.

29. Elming, N. Preparation of 3-pyridols from furans Текст. / N. Elming, N. Clausson-Kaas // Acta. Chim. Scand. 1955. - V. 9. - P: 23-25.

30. Pat. US 2410531, IPC C07D 213/66. Synthesis of vitamin B6 Текст. / L. Szabo; Wyeth Corp. Опубл. - 11.15.1946.

31. Изотов, 3. И. Синтез пиридоксина (обзор) Текст. / З.И. Изотов, В.И. Гунар // Хим. Фарм. Журн. - 1988. - Т. 22, N. 2. - С. 207-214.

32. Карпейская, М. Я. Конденсация оксазолов с диенофилами — новый метод синтеза пиридиновых оснований Текст. / М.Я. Карпейская, B.JI. Флорентьев // Усп. хим. 1969. - Т. 38, N. 7. - С. 1244-1256.

33. Изотов, 3. И. Синтез пиридоксина в условиях высокого давления Текст. / 3. И. Изотов, С. В. Степанова, Б. С. Эльянов, В. И. Гунар // Хим. Фарм. Журн. - 1987. - Т. 21, N. 7. - С. 858-862.

34. Boger, D.L. Diels Alder reactions of heterocyclic azadienes: scope and applications Текст. / D. L. Boger. // Chem. Rev. - 1986. - V. 86, N. 5. -P. 781793.

35. Firestone, R.A. Synthesis of pyridozine by diels-alder reactions with 4-methyl-5-alkoxy oxazoles Текст. / R.A.Firestone, E.E.Harris, W. Reuter // Tetrahedron — 1967. V. 23, N. 2. - P. 943-946.

36. Jones, R.G. Lithium aluminum hydride reduction of pyridine carboxylic esters: synthesis of vitamin B6 Текст. / R.G. Jones, E.C Kornfeld // J. Am. Chem. Soc. -1951.-V. 73, N. l.-P. 107-109.

37. Pat GB 1116118, IPC C07D 213/67. Process for the preparation of pyridoxine Текст. / Merck & Co. Inc. Опубл. - 06.06.1968.

38. Pat US 2744114, IPC C07D 213/67. Pyridoxine synthesis Текст. / R.G. Jones; Lilly & Co. Опубл. - 05.01.1956.

39. Dumond, Y.R. Silane reduction of 5-hydroxy-6-methyl-pyridine-3,4-dicarboxylic acid diethyl ester: synthesis of vitamin B6 Текст. / Y.R. Dumond, A.G. Gum //Molecules 2003. - V. 8, N. 12. - P. 873-881.

40. Pat. JP 57134467, IPG C07D213/82. Pyridine derivative and its preparation Текст. / S. Sadakatsu, O. Masanobu; Daiichi Seiyaku Co. Опубл. - 19.08.1982.

41. Geiger, E. Cobalt-catalyzed cycloaddition of alkynes and nitriles to pyridines: A new route to pyridoxine (vitamin B6) Текст. / E. Geiger, M. Lalonde, H. Stoller, H. Schleich // Helv. Chim. Acta. 1984. - V.67, N. 5. - P. 1274-1282.

42. Gutnov, A. An improved synthesis of pyridoxine via 2+2+2. cyclization of acetylenes and nitriles [Текст] / A. Gutnov, V. Abaev, D. Redkin, C. Fisher, W. Bonrath, B. Heller// Synlett-2005. -N. 7. P. 1188-1190.

43. Harris, S.A. The vitamin B6 group. II. The structure and synthesis of pyridoxine and pyridoxal Текст. / S.A. Harris, D. Heyl, K. Folkers // J. Am. Chem. Soc. 1944. - V. 66, N. 12. - P. 2088-2092.

44. Pat UK 603289, IPC A61K31/44. Physiologically active pyridoxine derivatives, and method of preparing the same Текст. / E. Snell; Research Corp. -Опубл. 14.06.1948.

45. Pat. US 0161678, IPC A61K 31/444. Methods for the synthesis of pyridoxamine Текст. / R. Khalifan, R. Keilitz, C. Koellner, T. Degenhardt, S.R. Brand; McDonnel Boehnen Hulbert & Berghoff LLP. Опубл. - 12.06.2007.

46. Ahrens, H. A direct method for preparing pyridoxal and 4-pyridoxic acid Текст. / H. Ahrens, W. Korytnyk // J. Het. Chem. 1967. - V.4. - P. 625-626.

47. Green, T.W. Protective Groups in Organic Synthesis Текст. / T.W. Green, P.G.M. Wuts. N.-Y.: J. Wiley & Sons Inc., 1999 - 779 p.

48. De Belder, A.N. Cyclic acetals of the aldoses and aldosides Текст. / A.N. De Belder // Adv. Carbohyd. Chem. and Biochem. 1965. - V.20. - P. 219-302.

49. Showier, A.J. Condensation products of glycerol with aldehydes and ketons. 2-substituted m-dioxan-5-oles and l,3-dioxolane-4-methanoles Текст. / A.J. Showier, P.A. Darley // Chem. Rev. 1967. - V. 67, N. 4. - P. 427-440.

50. Baddiley, J. An unambiguous synthesis of codecarboxilase Текст. / J. Baddiley, A.P. Mathias // J. Chem. Soc. 1952. - P. 2583-2591.

51. Cohen, A. Synthetical experiments in the В group of vitamins. Part V. Novel derivatives of pyridoxine Текст. / A. Cohen, E. Hughes // J. Chem. Soc. 1952. -P. 4384-4386.

52. Korytnyk, W. A seven-membered cyclic ketal of pyridoxol Текст. / W. Korytnyk // J. Org. Chem. 1962. - V. 27, N. 10. - P. 3724-3726.

53. Nelson, J.T. Proton and carbon-13 NMR structural assignment of two isomeric isopropylidenepyridoxines Текст. / J.T. Nelson, P.H. Nelson // Magn. Res. Chem. 1987. - V. 25, N. 4. - P. 309-310.

54. Korytnyk, W. Proton NMR spectra of compounds in the Vitamin Вб group Текст. / W. Korytnyk, R.P. Singh // J. Am. Chem. Soc. 1963. - V. 85, N. 18. - P. 2813-2817.

55. Петухов, A.C. Синтез, пространственная структура и свойства семичленных ацеталей пиридоксина: Дис. канд. хим. наук. Текст. / А.С. Петухов; Казанский гос. ун-т. Казань., 2004. - 178 с.

56. Стрельник, А. Д. Синтез, Синтез и биологическая активность некоторых производных пириджоксина: Дис. канд. хим. наук Текст. / А. Д. Стрельник Казань, 2009.- 128 с.

57. Harris, S.A. Chemistry of vitamin B6. III. 2-Ethyl-3-hydroxy-4,5-bis-(hydroxymethyl)-pyridine a homolog of vitamin B6 Текст. / S.A. Harris, A.N. Wilson // J. Am. Chem. Soc. - 1941. - V. 63, N. 18. - P. 2526-2527.

58. Ikawa, M. Synthesis and biological activity of homologs of pyridoxal and pyridoxamine Текст. / M. Ikawa, E. Snell // J. Am. Chem. Soc. 1954. - V. 76, N. 3. - P. 637-638.

59. Cohen, A. Synthetical experiments in the В group of vitamins. Part VI. Synthesis of the pyridoxine analogue, 2-benxyl-3-hydroxy-4,5-bis-hydroxymethylpyridine Текст. / A. Cohen, J.A. Silk / J. Chem. Soc. 1952. - P. 4386-^4390.

60. Heyl, D. Chemistry of vitamine B6. X. Some homologs of vitamine Be group Текст. / D. Heyl, E. Luz, S.A. Harris, K. Folkers // J. Am. Chem. Soc. 1953. -V. 75,N. 16.-P. 4079-4080.

61. Melius, P. Synthesis and enzymological activity of some pyridoxine analogs Текст. / P. Melius, D.L. Marshall / J. Chem. Soc. 1967. - V. 10. - P. 1157-1158.

62. Zeidler, J. 2-Hydroxypyridoxol, a biosynthetic precursor of vitamins B6 and Bi in yeast Текст. / J. Zeidler, N. Ullach, R.N. Gupta, R.M. Pauloski, B.G. Sayer, I.D. Spenser / J. Am. Chem. Soc. 2002. - V. 124, N. 17. - P. 4542-4543.

63. Bedford, G.R. N-oxides and related compounds. Part XXIII. Some piridoxine analogues Текст. / G.R. Bedford, A.R. Katritzky, H.M Wuest // J. Chem. Soc. -1963.-N. 9.-P. 4600-4602.

64. Korytnyk, W. Vitamin B6 antagonists obtained by replacing or modifying the 2-methyl group Текст. / W. Korytnyk, N. Angelino //J. Med. Chem. 1977. - V. 20, N. 6. - P. 745-749.

65. Korytnyk, W. Synthesis and biological activity of vitamin B6 analogs Текст. / W. Korytnyk / Methods in enzym. 1978. - V. 16. - P. 454-^83.

66. Korytnyk, W. 4-Halovinyl- and 4-ethynyl-4-deformylpyridoxal derivatives and related analogues as potentially irreversible antagonists of vitamin B6 Текст. / W. Korytnyk, N. Angelino / J. Med. Chem. 1977. - V. 20, N. 4. - P. 567-572.

67. Ullah, N. Deuterium-labeled 2-hydroxypyridoxol Текст. / N. Ullah, J. Zeidler, I.D. Spenser// Synlett. 2003 -N. 9. - P. 1344-1348.

68. Kuzuhara, H. Synthesis of a chiral pyridoxal analogue as a potential catalyst for stereospecific nonenzymatic reactions Текст. / H. Kuzuhara, M. Iwata, S. Emoto / J. Am. Chem. Soc. 1977. - V. 99, N. 12. - P. 4173^1175.

69. Kuzuhara, H. Asymmetric synthesis of allo-threonine and threonine; the use of a chiral pyridoxal-like pyridinophane zinc complex as an enzyme mimic Текст. / H. Kuzuhara, N. Watanabe, M. Ando // J. Chem. Soc. 1987.- N.2.- P. 95-96.

70. Miyashita, M. Stereoselective and N-terminal selective a-alkylation of peptides using apyridoxal model compound as a chiral N-terminal activator Текст. / К. Miyashita, H. Miyabe, K. Tai, H. Iwaki, T. Imanishi // Chem. Comm. 1998. - V. 19.-P. 1987-1988.

71. Koh, J.T. Geometric control of a pyridoxal-catalyzed aldol condensation Текст. / J.T. Koh, L. Delaude, R. Breslow // J. Am. Chem. Soc. 1994. - V. 116, N. 25.-P. 11234-11240.

72. Kesel, A.J. Synthesis of retinoid vitamin A-vitamin B6 conjugate analogues for antiviral chemotherapy Текст. / AJ. Kesel // Biochem. & Biophys. Res. Comm. 2003. - V. 300, N. 3. - P. 793-799.

73. Pat WO 46555 Al, IPC C07D 213/81. HIV integrase inhibitors from pyridoxine Текст. / В. Stranix, F. Beaulieu, J-E. Bouchard, G. Milot, W. Zhigang, R. Ruel; Ambrilla biopharma Inc. Опубл. - 10.12.2009.

74. Pat. US 0195236 Al. IPC A61K 31/4415. Pyridoxal analogues and methods of treatment Текст. / W. Haque; Medicure Inc. Опубл. - 16.10.2003.

75. Sennello, L.T. Synthesis of fat-soluble analogs of pyridoxal 5'-phosphate Текст. / L.T. Sennello, C.J. Argoudelis / J. Org. Chem. 1968. - V.33, N. 10. -P. 3983-3985.

76. Pat. WO 53606. IPC C07/D 491/04. Pyridoxal analogues for vitamine B6 disorders Текст. / W. Haque; Medicure Inc. Опубл. - 7.03.2000.

77. Pat GB 2075983 A. IPC C07/D 213/67. Pyridoxine derivatives, process for preparing them and use in therapeutics Текст. / M. Deschamps, M. Urbain, S.A. Labaz N.V. Опубл. - 25.11.1981.

78. Pieper, P.A. 3-Deoxy-3-fluoropyridoxamine 5-phosphate: synthesis and chemical and biological properties of a coenzyme B6 analog Текст. / P.A. Pieper, D. Yang, H. Zhou, H. Lui / J. Am. Chem. Soc. 1997. - V. 119, N. 8. - P. 18091817.

79. Sakuragi, T. Pyridoxine N-oxide Текст. / Т. Sakuragi, F.A. Kummerow / J.Org.Chem. 1959. - V. 24, N. 7. - P. 1032-1033.

80. Korytnyk, W. Acetyl rearangement and the structures of some esters related to pyridoxine Текст. // W. Korytnyk, B. Paul // Tetrahedron Lett. 1966. - V. 7, N. 8. - P. 777-782.

81. Korytnyk, W. Acyl migration and selective esterification in pyridoxol Текст. / W. Korytnyk, B. Paul // J. Org. Chem. 1967. -V. 32, N. 12. -P. 3791-3796.

82. Paul, B. Selective esterification and acyl rearrengments in vitamine B6 Текст. / В. Paul, W. Korytnyk // Tetrahedron 1969. - V. 25, N. 5. - P. 1071-1087.

83. McCasland, G.E. 4,5-Dihalo and 3-amino analogs of pyridoxine. New route to 4-deoxypyridoxine Текст. / G.E. McCasland, L.K. Gottwald, A. Fürst / J. Org. Chem. 1961.-V. 26,N. 9.-P. 3541-3543.

84. Singh, P.P. Pyridoxine chemistry. VII. Some modification of the 4-position of pyridoxol Текст. / P.P. Singh, W. Korytnyk / J. Med. Chem. 1965. - V.8, N. 1. -P. 116-117.

85. Korytnyk, W. Selective modification of the a4-position of pyridoxol. I. Extension and branching of the 4-side chain Текст. / W. Korytnik, B. Paul // J. Med. Chem.- 1970.-V. 13, N. 2.-P. 187-191.

86. Schmidt, U. 4-Pyridoxthiol und andere S-haltige vitamin -B6-derivate Текст. / U. Schmidt, G. Giesselmann // Lieb. Ann. 1962. - V. 65 - P. 162-170.

87. Frydas, S. MCP-1 and MIP-2 response in Trichinella spiralis infected micetreated with 4-deoxypyridoxine (4-DPD) Текст. / S. Frydas, N. Papaioannou, M. Reale, R.C. Barbacane, P. Conti / Immun. Lett. 2002. - V. 83, N. 1. - P. 3137.

88. Coburn, S.P. The chemistry and metabolism of 4'-deoxypyridoxine Текст. /

89. S.P. Coburn. Boca Raton Fla., CRC Press, 1981.-202 p.