Синтез и биологическая активность новых липофильных производных изотиомочевины тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

На правах рукописи

7Т^ещ

Прошин Алексей Николаевич

СИНТЕЗ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НОВЫХ ЛИПОФИЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ИЗОТИОМОЧЕВИНЫ

02.00.03—органическая химия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Москва, 2004.

Работа выполнена в ИФАВ РАН

Научный руководитель: кандидат хим. наук С Е. Ткаченко

Научный консультант: член-корреспондент РАН, доктор хим. наук, профессор СО. Бачурин

Официальные оппоненты:

доктор хим. наук, профессор М.М. Краюшкин кандидат хим. наук А.Ю. Аксиненко

Ведущая организация:

Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН.

Защита диссертации состоится 22 октября 2004 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета К 002.102.01 в ИФАВ РАН по присуждению ученой степени кандидата химических наук по адресу: Черноголовка, Северный проезд 1, ИФАВ РАН.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ИФАВ РАН. Автореферат разослан 20 сентября 2004 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета ИФАВ РАН,

кандидат биологических наук

® ябЦооа^-

Общая характеристика работы. Актуальность проблемы.

Статистические данные последних лет дают основание считать возраст-зависимые нейродегенеративные расстройства, например болезнь Альцгеймера (БА), наряду с сердечнососудистыми и онкологическими заболеваниями, наиболее серьезной медико-социальной проблемой в развитых странах. В этой связи разработка и осуществление стратегии направленного синтеза новых оригинальных нейропротекторов и стимуляторов когнитивных функций является одной из приоритетных задач современной органической химии лекарственных средств (медицинской химии).

Среди широкого спектра различных подходов к созданию препаратов с нейропротекторными и когнитивно-стимулирующими свойствами особое внимание в последние годы уделяется различным лигандам глутаматэргической системы. Действие препаратов на их основе направлено на нормализацию кальциевого гомеостаза в клетках, регулируемого глутаматными рецепторами. Так, Мемантин — избирательный антагонист глутаматных рецепторов NMDA-подтипа, т. е. рецепторов, которые реагируют на специфическое связывание Ы-метил-О-аспарагиновой кислоты (NMDA), является единственным препаратом, рекомендованным для лечения болезни Альцгеймера на развитой стадии заболевания.

Помимо антагонистов NMDA-рецепторов крайне интересными и относительно мало исследованными в качестве потенциальных нейротропных препаратов являются лиганды другого подтипа глутаматных рецепторов, а именно АМРА-подтипа, которые активируются (8)"0'-амино-3-гвдрокси-5-метилизоксазол-4-ил-пропионовой кислотой (АМРА). В последние годы позитивные модуляторы АМРА-рецепторов, так называемые ампакины, были предложены в качестве новой группы когнитивных стимуляторов для лечения БА.

В этой связи весьма актуальной и перспективной представляется разработка направленной стратегии синтеза новых оригинальных соединений - потенциальных нейропротекторов и стимуляторов когнитивных функций, сочетающих свойства антагонистов NMDA-рецепторов и позитивных модуляторов АМРА-рецепторов.

Цель настоящей работы - направленный синтез эффекторов глутаматных рецепторов, в первую очередь антагонистов NMDA- рецепторов и позитивных модуляторов АМРА-рецепторов, в ряду производных изотиомочевины как новой группы потенциальных препаратов для лечения и предупреждения нейродегенеративных расстройств, связанных с нарушением функций глутаматэргической системы.

Научная новизна.

Разработан новый метод синтеза ^1-(гет)арилалкил-^(гет)арилметиламинов на основе восстановления альдиминов.

Разработаны препаративные методы синтеза ^1-(гет)арилалкил^-(гет)арилметилтиомочевин, изотиомочевин и изотиурониевых солей и их циклических аналогов.

Рециклизацией Ы-И30КСа30Л-3-ИЛ-К',Ы'-дизамешенных тиомочевин синтезированы 3-(2-оксоалкил)-5-амино-[1,2,4]-тиадиазолы - перспективные реагенты для введения З-алк-2-ил-5-амино-[ 1,2,41-тиадиазольного фрагмента.

Синтезировано более 150 новых соединений, содержащих ^1-(гет)арилалкил^-(гет)арилметиламиновый («дибензиламиновый») фрагмент, в том числе более 30 хиральных, более 80 производных изотиомочевины, а также более 40 циклических изотиурониевых солей и их биоизостерных аналогов.

Впервые синтезированы соединения, сочетающие в себе свойства блокаторов NMDA-рецепторов и позитивных модуляторов АМРА-рецепторов.

Проведен комплексный анализ результатов исследования связи структура-активность и моделирования взаимодействия соединений с различными участками связывания глутаматных рецепторов, позволивший обосновать отбор наиболее перспективных соединений для исследования их нейротропных свойств на моделях in vitro и in vivo.

Практическая значимость.

Разработаны удобные препаративные методы синтеза ^1-(гет)арилалкил-^ (гет)арилметиламинов и на их основе — тиомочевин, изотиомочевин и изотиурониевых солей, в том числе циклических.

Разработан новый, без применения тиофосгена, препаративный метод получения 3-метоксипропилизотиоцианата — ключевого реагента для синтеза 2-амино-5,6-дигидро-1,3-тиазинов.

Показана возможность введения в различные структуры 3-алк-2-ил-5-амино-[1,2,4]-тиадиазольного фрагмента.

Синтезирована и запатентована новая группа соединений на основе N,S-замешенных №-(гет)арилметилизотиомочевин, в ряду которых выявлены оригинальные высокоэффективные блокаторы глутамат-стимулированного входа Са2+.

Выявлены соединения IP-5051 и IP-9040 с уникальным спектром нейропротекторных и когнитивно-стимулирующих свойств. Данные соединения предложены для проведения дальнейших преклинических испытаний.

Апробация работы.

Результаты диссертационного исследования были представлены на международных и российских конференциях:

— Всероссийской конференции «Проблемы противолучевой защиты» (Москва. 1998);

— XII European Symposium on Fluorine Chemistry (Berlin, Germany, 1998);

— XX Всероссийской конференции по химии и технологии органических соединений серы (Казань, 1999);

— Joint Meeting of International Society for Neurochemistry (ISN) and European Society for Neurochemistry (ESN) (Berlin, Germany, 1999);

— 5th International Conference on Neuroprotective Agents (Lake Tahoe, CA, 2000);

— Международной школе-семинаре по компьютерной автоматизации и информатизации

«ACS-2000» (Москва, 2000);

— IV Съезде по радиационным исследованиям (Москва, 2001);

— X International Symposium "The New Frontiers of Neurochemistry and Biophysics on Diagnosis and Treatment ofNeurological Diseases" (Firenze, Italy, 2001);

— Second Joint French-Swiss Meeting on Medicinal Chemistry (Beaune, France, 2003);

— International Symposium "Advances in Synthetic, Combinatorial and Medicinal Chemistry" (Москва, 2004).

Структура диссертационной работы. Диссертация состоит из введения, литературного обзора, обсуждения результатов, экспериментальной части, выводов, списка литературы и приложения. Работа изложена на 135 страницах, содержит 9 таблиц. Библиография включает литературные ссылки на 186 публикаций. Содержание работы.

Первая глава представляет собой литературный обзор, в котором описаны способы получения и физиологическая активность производных изотиомочевины. Проанализированы данные для более 200 соединений, проявляющих разнообразную физиологическую активность, большая часть из которых являлась производными N,.N '-незамещенной изотиомочевины. Однако среди активных соединений не было найдено ни одной тетразамещенной изотиомочевины, что подтверждает оригинальность введения в структуру «дибензиламинового» фрагмента, обладающего в то же время и высокими липофильными свойствами. Также ни одно из описанных в литературе соединений данного класса не проявляет нейропротекторных или когнитивно-стимулирующих свойств за исключением препарата Клобенпропит (Clobenpropit) фирмы «Glaxo», прошедшего преклинические испытания на животных моделях деменции альцгеймеровского типа (рис.1).

Основными соединениями, проявляющими нейропротекторные и когнитивно-стимулирующие свойства и выпускаемые в качестве лекарственных средств, являются Мемантин (Akanitol Memantine), существенно менее активный Арисепт (Aricept) и некоторые другие.

Рис. 1. Некоторые из анти-альцгеймеровских препаратов.

В литературном обзоре также описаны методы экспериментального и теоретического изучения нейропротекторных и когнитивно-стимулирующих свойств соединений. Показано, что перспективным экспериментальным методом для оценки этих свойств являются тест водного лабиринта Морриса и тест активного избегания.

Основные работы по компьютерному молекулярному моделированию и конструированию лекарственных препаратов проводятся, как правило, методом классического QSAR и/или методом создания искусственных нейронных сетей. Однако наиболее трудоемким, но и наиболее перспективным, является моделирование взаимодействия изучаемых препаратов с центрами связывания белковых молекул (т. н. докинг-исследование).

На основании анализа литературных данных был сделан выбор основных теоретических и экспериментальных методов, которые были применены в настоящей работе.

Вторая глава посвящена рассмотрению потенциально возможные подходов для целевого дизайна новых физиологически активных соединений, что позволило сформулировать и в дальнейшем реализовать синтетическую задачу.

В качестве основного соединения для направленного дизайна новых соединений был использован известный высокоаффинный неконкурентный антагонист NMDA-рецепторов препарат Дизоцилпин (Dizocilpine, MK-801). Метод, который был использован для генерации новых структурных аналогов МК-801, основан на концепции «привилегированных»

NH

подструктур (фрагментов) в оригинальной трактовке, заключающейся в анализе получающихся фрагментов при виртуальном раскрытии напряженной структуры МК-801. Снятие напряженности МК-801 («дерегидификация») может предположительно привести к веществам, имеющим сродство к участку связывания МК-801 с NMDA-каналом, однако связывающимся в отличие от МК-801 обратимо. Это в свою очередь должно привести к потере нежелательных побочных психотомиметических эффектов, свойственных высокоаффинным блокаторам NMDA-каналов. Так, раскрытие бицикла в молекуле МК-801 приводит к двум типам веществ (рис. 2,3):

(1) моноциклические аналоги при раскрытии одного цикла;

(2) полностью разомкнутые аналоги при раскрытии двух циклов.

?,0 МК.ЯП1 .¿"

Рис- 2. Выделение из структуры МК-801 изохинолинового и изоиндолинового рядов.

Первый тип включает в себя 2 группы соединений: изохинолиновый и изоиндолиновый ряды (рис. 2). Структура этих молекул очень близка структуре МК-801, и некоторые из соединений, такие как FR-115427 (см. рис. 1), проявляют свойства высокоаффинного блокатора кальциевого канала и связанные с этим побочные эффекты.

При дальнейшем размыкании изохинолинового и изоиндолинового циклов получаются 4 типа подструктур, которые являются полностью разомкнутыми аналогами МК-801: монобензиламиновый, бензгидриламиновый, фенетиламиновый и дибензиламиновый ряды (рис.3).

Функциональные вариации в каждом раду заключаются в изменениях «вокруг» выбранных подструктур (введение заместителей в арильные и/или алкильные заместители и биоизостерную замену фенильного заместителя), но не включают изменение подструктуры (например, введение новых циклов). В качестве объектов исследования были выбраны соединения дибензиламинового ряда: как сами дибензиламины, так и ациклические и циклические производные изотиомочевины, полученные на их основе.

| ННа1

«3

«1 I

N

Рис 4. Общие структуры синтезированных производных изотиомочевины,

2-аминотиазолина, 2-амино-5,6-дигидро-1,3-тиазина и 5-амино[1,2,4]тиадиазола.

В главе 3 описаны методы синтеза дибензиламинов и ациклических производных изотиомочевины.

Для создания библиотеки синтезированных веществ разработаны новые методы синтеза, с помощью которых было получено свыше 50 исходных вторичных аминов («дибензиламинов»), содержащих липофильные фрагменты (в том числе 30 оптически активных):

У=Н,СН3,

= замещенный фенил, пиридил, циклогекс-3-енил, тиенил, замещенный фурил, замещенный фенил, пиридил, тиенил, фурил, циклогекс-2-енилметил, замещенный бензил, ^морфолинометил, ^морфолиноэтил, ^[1,3]-имидазолоэтил.

Следует отметить, что используемый нами 1%-й Pd/C-катализатор позволил количественно восстанавливать альдимины до дибензиламинов в отличие от 10%-ного Pd/C-катализатора, традиционно применяемого для снятия бензильной группы.

Новые N,S-замещенные N'-1-(гет)арилалкил-N'-(гет)арилметилизотиомочевины, в том числе и их соли с фармакологически приемлемыми кислотами, а также отдельные оптические изомеры указанных соединений были получены в результате реакции аминов с изотиоцианатами с последующим алкилированием подходящим реагентом:

МК-801 Общая структура S /у\ О^7 1 H Hal R5 IP-5051

IP-9152 vÄ-n ( >Л \=/ 1H IP-9165 ^ГО F—^ IP-5015 До/ n /ул ^ \=/ IH

IP-9166 —N 1 ? (_}Л U IP-9181 ч О " IP-9169 v—' IH I

Рис. 5. Общая структура и наиболее активные производные дибензиламинового ряда.

В процессе работы были синтезированы некоторые оригинальные изотиоцианаты, в том числе оптически активные, что позволило получить изотиомочевины с двумя хиральными атомами (рис. 6).

1Р-9120 О .H ^J IP-9121 uo IH J IP-9122 О wd

IP-9172 cv. ,Н I | IP-9171 Or. NwNv^ IH y y IP-9180 ^ IH y y

Рис. б. Некоторые синтезированные хиральные и рацемические производные дибензиламинового ряда.

Первичный скрининг показал высокую активность некоторых из впервые

синтезированных дибензиламинов (рис. 7).

1 1

IP-9001 Ll) IP-9007 IP-9008

HN. HBr

HN HBr HNL HBr

и 0 0

K43/2i= 70 ±5,5%* К4зш=4,6±0,5% К«з/21= 21,4 ±4,8%

* Kjj 21- параметр, характеризующий влияние соединения на глутамат-индуцированный захват ионов СО1' (чем он низке, тем сильнее ингибироеание захвата ионов Cet'*).

Рис. 7. Кальций-блокирующая активность некоторых дибензиламинов.

В главе 4 описаны методы синтеза циклических аналогов изотиомочевин. Из ^аллилтиомочевин были получены новые производные изотиомочевины в ряду ^^дизамещенных 2-аминотиазолинов с различными заместителями в пятом положении (рис.8).

1Р-8001 ВгН . N ' 1Р-5059 ВгНгЛ^ 1Р-9106

1Р-6021 1Р-6059 *г\2 1Р-8019

Рис. 8. Некоторые синтезированные производные тиазолинового ряда.

Поиск активных соединений среди циклических аналогов изотиомочевины был продолжен в ряду 5-амино-[1,2,4]-тиадиазола, и предложен новый подход к синтезу 5-(дизамещенных)-амино-3-(2-оксопропил)-[1,2,4]-тиадиазолов на основе впервые полученного 5 -метилизоксазолил-3 -изотиоцианата:

5-Метилизоксазолил-З-изотиоцианат представляет собой светло-желтую жидкость, которая при комнатной температуре постепенно закристаллизовывается в соединение кирпично-красного цвета. Его исследование методами ЯМР, масс-спектроскопии и рентгеноструктурного анализа позволило установить структуру образующегося димера:

Рис. 9. Общий вид молекулы димера 5-метилизоксазолил-З-изотиоцианата.

Данные РСтА были получены в лаборатории рентгеноструктурных исследований ИНЭОС РАН канд

хим наук Стариковой 3 А

При реакции 5-метилизоксазолил-З-изотиоцианата с вторичными аминами происходит рециклизация промежуточных тиомочевин в тиадиазольное кольцо за счет атаки нуклеофильной тиокарбонильной группой связи N-0 изоксазольного цикла:

Н N

^у^исв * нм —

V // 4 И» & N-8 V

Этот метод позволил нам получить более 10 ранее неописанных 2-оксопропил-2-дибензиламино-1,4,2-тиадиазолов.

Структура 5-амино-3-(2-оксопропил)-[1,2,4]-тиадиазола, содержащая легко модифицируемую кетогруппу, позволяет включить небольшой [1,2,4]-тиадиазольный цикл в более сложные молекулы, что представляется весьма перспективным с учетом широкого спектра физиологической активности тиадиазолов:

Так, из ^монозамещенных 5-аминотиадиазолов был синтезирован ряд енаминовых производных, из которых после их восстановления получали тиомочевины (рис. 10).

На основе впервые полученного 5-трет-бутилизоксазолил-З-изотиоцианата были синтезированы неописанные в литературе соединения ряда 5-амино-3-(2-оксо-3,3-диметил-бутил)-[1,2,4]-тиадиазола:

1Р-9051 ^у-сс О 1Р-9191 ОугСгЧХ

1Р-9192 Я^/сс ж о 1Р-9190

1Р-9219 | |) 1Р-9240 ] ||

Рис. 10. Некоторые синтезированные производные тиадиазольного ряда.

Для получения 6-членных циклических производных изотиомочевины были синтезированы липофильные 2-замещенные амино-5,6-дигидро-1,3-тиазины из N-метоксипропилтиомочевин (рис. 11). Для исходного 3-метоксипропилизотиоцианата была разработана методика его синтеза без применения тиофосгена, отличающаяся от традиционной высоким выходом:

Рис. 11. Некоторые синтезированные производные тиазинового ряда.

Глава 5 посвящена описанию результатов исследований физико-химических и биологических свойств вновь синтезированных соединений, а именно:

— первичного скрининга синтезированных соединений;

— их физико-химических свойств;

— моделирования молекулярного взаимодействия наиболее активных соединений со связывающими центрами NMDA- и АМРА-рецепторов;

— когнитивно-стимулирующих свойств соединений IP-5O51 и №-9040 в поведенческих тестах.

На первой стадии исследований для оценки физиологической активности полученных соединений определялась способность каждого соединения ингибировать глутамат-зависимый захват Са (на синаптосомах мозга крысы) и проявляемая анти-NMDA активность. Это позволило значительно ограничить общее число испытываемых соединений, выбрав из них наиболее перспективные.

На второй стадии исследования веществ, отобранных по указанным выше критериям, т. е. "соединений-лидеров", изучались их нейропротекторные и когнитивно-стимулируюшие свойства в тесте на животных, моделирующим деменцию альцгеймеровского типа.

Все синтезированные соединения были протестированы в лаборатории нейрохимии ИФАВ РАН на способность ингибировать глутамат-индуцированный захват

Са2*. Для всех

соединений радиометрическим методом определялся показатель К4зд|, равный отношению разностей входа изотопа в присутствии и в отсутствие глутамата при концентрации

вещества 100 мкМ. Для активных веществ вычислялась концентрация (ICso), при которой наблюдалось 50%-е ингибирование захвата

Са2+. 36 соединений, наиболее активных в предыдущем тесте, были проверены на анти-ММОА-активность. Результаты, полученные для соединений-лидеров, приведены в таблице 1.

Таблица 1. Физиологическая активность соединений-лидеров.

Шифр соединения 1С», цм EDso, мг/кг * ЕСшьмкМ "

МК-801 22,9 0,2 —

IP-5051 30,0 10,0 20,0

IP-9040 2,8 1 0,5

IP-9007 20,0 25 —

IP-9143 8,0 5,0 12,0

IP-9152 12,0 — 5,0

* доза вещества в эксперименте in vivo, при которой ответ NMDA-рецептора ослабляется на 50%.

** концентрация, при которой ответ АМРА-рецептора в эксперименте in vitroy сшивается на 100%.

Анализ взаимосвязи «структура-активность» в рядах этих соединений (см. рис.5 на стр.10; общая структура тетразамещенных изотиомочевии) позволил обнаружить некоторые закономерности:

— для предпочтительны короткие алкильные заместители или заместители с двойной связью;

— соединения, где Я^Аг, неактивны; активность возрастает в ряду Аг-СНгАКСНгСНгАг йМкепу1; оптимальная длина алкильной цепочки - три-четыре атома углерода;

— наличие двойной связи, как и в случае Я), активность соединения не снижает;

— возможно введение в структуру изотиомочевины гетероциклов;

— для радикалов Яз И (и четких закономерностей не обнаружено; введение в структуру соединения атома фтора или метоксигруппы оставляет его активность примерно на том же уровне или незначительно снижает её; можно также указать на предпочтительность замещения в пара-положение.

Максимальную активность проявляет соединение 1Р-5051 (гидроиодид 8-ЭТИЛ-М-аллил-№,№-дибензилизотиомочевины), где й.1= Е1, Л^АН, ЯзД^Д^ Н, На1= I (см. рис.5 на стр.10).

«Соединения-лидеры» (таблица 1) демонстрируют высокие кальций-блокирующую и анти-ММЭА-активности. Согласно этим результатам была выбрана наиболее перспективная группа веществ для исследования их фармакологических свойств на расширенных поведенческих тестах. Параллельно проводилось сравнительное докинг-исследование по связыванию этих соединений с ММЭЛ- и АМРА-рецепторами для выяснения возможного механизма их действия.

Таблица 2. Физиологическая активность хиральных и рацемических изотиомочевин.

Шифр соединения К43Д1,% ГС», мкМ ЕСюо, мкМ [оЬ*

1Р-9180 101.3+.4.0 — — +3

1Р-9122 3.0+1.2 26.3 8-9 -120

[Р-9121 2.3 +.0.2 20.4 8-9 +117

1Р-9120 5.9+1.55 19.1 10 —

1Р-9171 91.4 + 2.7 — — -178

1Р-9172 73.6 + 7.3 — — -2

*оптическая активность соединений измерялась вЕЮНпри концентрации 1% при 2УС.

Физиологическая активность синтезированных хиральных и рацемических изотиомочевин подчиняется закономерностям, перечисленным выше. Результаты, полученные для некоторых изученных изотиомочевин, включая самые активные, приведены в таблице 2.

Циклические изотиомочевины в целом показали не очень высокую активность в первичном тесте (таблица 3.)-

Таблица 3. Кальций-блокирующая активность некоторых впервые синтезированных циклических изотиомочевин.

Шифр соединения К43/21» % 1Сзд, мкМ

1Р-8001 92.5 + 5.9 —

1Р-5059 25.4 + 3.6 67.6

1Р-9106 10.7 ±7.3 56.2

1Р-6021 17.5 ±4.6 49.0

1Р-6059 63.5 ±0.1 126.0

1Р-8019 54.3 ±2.5 100.0

1Р-9051 14.0 ±2.5 41.7

[Р-9191 28.1 ±11.1 64.6

1Р-9192 101.7 + 6.7 —

1Р-9190 146.5 ±10.4 —

1Р-9041 75.8 ±4.2 —

1Р-9055 85.8 + 9.1 —

Состав и структуры полученных соединений определялись на основе анализа данных элементного анализа и ЯМР-спектроскопии. Для объяснения различия в поведенческих тестах разных анионных форм наиболее активных соединений было проведено рентгеноструктурное исследование полученных кристаллов и определена липофильность этих веществ.

Липофильность - один из основных факторов, управляющих фармакокинетикой и фармакодинамикой вещества, его проникновением через гематоэнцефалический барьер и способностью опознавать биомишень и связываться с ней. Таким образом, величина данного параметра является весьма существенной для препаратов, которые действуют на ЦНС. В связи с этим было проведено сравнение результатов теоретического и экспериментального определения коэффициентов распределения исследуемых веществ в системах «октанол-вода» и «октанол-буфер (рН=7.4)» (logD) (табл.4).

Рассчитанные коэффициенты распределения наиболее активных соединений (ClogP, табл. 4) значительно превосходят экспериментально определенные значения (logP, logD), что указывает на недостаточную применимость существующих расчетных методов для предсказания липофильных свойств сложных сопряженных систем типа изотиомочевин. Надо отметить, что экспериментально определенные значения, в отличие от расчетных, подчиняются «правилу пяти» Липински. Это позволяет охарактеризовать данный класс соединений как «drag-like compounds», поскольку выполняются и другие критерии вышеупомянутого правила.

Таблица 4. Коэффициенты распределения для наиболее активных веществ.

Шифр соединения ClogP (p«^,* logP „«„," logD(pH=7.4)(J«n)"

IP-9152 6.27 1.95 2.48

IP-9040 6.71 2.54 3.18

IP-9007 5.15 — 2.65

IP-9143 7.07 2.39 2.54

1Р-5051_йодид 6.21 2.74 2.94

1Р-5051_хлорид 6.21 2.74 2.00

IP-5051_бромид 6.21 2.74 2.16

(H2N)2CSCH3 HI 0.23 — -0.73

n-BuNCS — 3.07 (2.91)"* —

*Расчет проводился с помощью программы EPI Suite v3.il

(http://www.ера. %ov/ovvt/exvosure/docs/eyisuitedî.htm).

** Экспериментальное определение коэффициентов logP и logD выполнено доктором хим. наук А.Н. Турановым в ИФТТРАНметодом атомно-эмиссионной спектрометрии (ICAP-61).

***Литературные данные (Я.И.Коренман, Коэффициенты распределения органических соединений. Воронеж, изд-воВГУ, 1992, с.63).

Отметим более предпочтительное по абсолютной величине значение коэффициента logD=2.94 для соединения IP-5051 в форме иодида по сравнению с logD=2.00 для его «хлоридной» формы. Этот факт, по-видимому, и служит причиной заметных различий фармакологических свойств этих двух форм в поведенческих тестах на животных.

В группе канд. хим. наук В.В. Палюлина (МГУ) было проведено компьютерное моделирование молекулярного взаимодействия наиболее активных соединений со связывающими центрами NMDA-рецептора для выяснения механизма возникновения физиологической активности.

Согласно расчетам соединение МК-801 образует 2 водородные связи с карбонильными кислородами аминокислот Asn616 и Leu615, a 2 дополнительные водородные связи образуются с амидной группой Asn616. В то же время одно из бензольных

колец соединения МК-801 расположено в узком «кармане», который образован гидрофобной спиралью. Столь сильное взаимодействие данного лиганда с участком связывания NMDA-рецептора и приводит к полному блокированию канала.

Рис 12. Результаты моделирования связывания IP-5051 и IP-9040 на внутриканальном участке NMDA -рецептора.

Рис. 13. Результаты моделирования связывания №-5951 и №-9040 с АМРА-рецептором.

Результаты моделирования связывания соединения 1Р-5051 с тем же рецептором позволили предположить, что, по-видимому, 1Р-5051 способен связываться с тем же гидрофобным карманом, что и МК-801 (рис. 12). Однако в отличие от МК-801 соединение

1Р-5051 обладает существенно большей информационной подвижностью и, кроме того, связывается с рецептором только одной водородной связью, в результате чего молекула связанного лиганда приобретает дополнительные степени свободы. А взаимодействие гидрофобной части молекулы 1Р-5051 и с другими неспецифическими субъединицами рецептора приводит к уменьшению прочности специфического лиганд-рецепторного комплекса, т. е. ускоряет скорость открытия-закрытия кальциевого канала.

Результаты проведенного компьютерного анализа (рис. 12, 13) дают основания предполагать, что место связывания активных производных изотиомочевины может располагаться в кармане связывания модуляторов АМРА-рецептора и в участке связывания блокаторов ММЭЛ-рецептора.

Сравнительное изучение когнитивно-стимулирующих свойств соединений-лидеров 1Р-5051, 1Р-9040 к модельных препаратов Мемантин и Арисепт, применяемых для лечения БА, были проведены в лаборатории нейрохимии ИФАВ РАН. Болезнь Альцгеймера моделировалась на крысах путем инъекций нейротоксина ЛБ64Л, вызывающего селективное разрушение ацетилхолиновых синаптических окончаний с последующей дегенерацией нейронов.

Пероральное введение 1Р-5051 восстанавливало когнитивные функции, которые ухудшались после инъекции ЛБ64Л как в обучающем тесте, так и в тесте запоминания (рис. 14). Соединение 1Р-5081 вызывает статистически значимый эффект повышения памяти в дозах вещества в интервале от 0.5 до 5.0 мг/кг (перорально).

А Б

1 контроль 2 ЛБ-64Л 3 ЛБ-64Л + 1Р-5051, 1мг/кг 4 ЛБ-64Л + 1Р-5051,5мг/кг

Рис. 14. Когнитивно-стимулирующий эффект 1Р-5051. А. Обучающий тест. Б. Тест на запоминание.

В случае введения экспериментальным животным соединений Мемантин и 1Р-5051 найдено статистически значимое улучшение способности к обучению, которое сравнимо с результатами для контрольной группы животных или даже превосходит его. Кроме того, соединения 1Р-9040, 1Р-5051 и Мемантин продемонстрировали устойчивый пролонгированный эффект, наблюдаемый после прекращения инъекций. Этот факт позволил предположить, что данные соединения влияют на регенеративные и/или компенсаторные процессы в мозгу.

Полученные результаты позволяют сделать вывод, что соединения 1Р-9040 и 1Р-5051 • повышают способность к обучению крыс с частичной хронической потерей холинэргических функций в задаче нахождения невидимой платформы и демонстрируют длительный эффект по сохранению выработанного навыка по окончанию обучения и инъекций соединения (рис. 15).

1N

5-й день 11-й день 14-й день 2в-йдень

1 контроль, 100% 2 AF-64A 3 AF-64A + Арисепт 4 AF-64A + Мемантин

5 AF-64A + IP-5051 б AF-64A + IP-9040

Рис. 15. Относительное время (%) поиска платформы крысами.

Результаты, полученные на животных при введении соединений IP-5051 или IP-9040 к окончанию эксперимента (26-й день), близки к аналогичным данным для контрольной группы и группы животных, получавших Мемантин.

Также было проведено сравнительное изучение действия соединений IP-5051 и МК-801 в различных дозах на локомоторную активность крыс. Обнаружено, что МК-801 в дозах от 0.1 мг/кг вызывает у животных значительный побочный психогенический эффект, проявляющийся в стереотипичном поведении (I), атаксии (II) и гиперактивности (III) (таблица 5).

Таблица 5. Психогеническое действие МК-801 и 1Р-5051.

МК-801, ЕОм = 0.2 мг/кг 1Р-5051, ЕРм = 10 мг/кг

Доза, мг/кг I II III Доза, мг/кг I II III

0.1 нет нет + 0.5 нет нет нет

0.2 + + ++ 1 нет нет нет

0.4 + ++ +++ 5 нет нет нет

0.8 +++ +++ +++ 10 нет нет нет

1.0 ММ ++++ -н-н- 50 нет нет +

В случае соединения 1Р-5051 никаких побочных эффектов, типичных для МК-801, обнаружено не было. При этом важно отметить, что отсутствие побочных эффектов установлено для широкого интервала доз от 0.5 до 50 мг/кг, полностью совпадающего с интервалом его неврологической активности. Полученные результаты позволяют сделать вывод, что 1Р-5051 характеризуется спектром поведенческой активности, радикально отличающимся от действия МК-801. В частности, это соединение не дает психотомиметических побочных эффектов в интервалах доз, даже превышающих терапевтически значимые.

Таким образом, соединение-лидер 1Р-5051 обладает многообещающим фармакологическим профилем:

— способностью ингибировать глутамат-индуцированный захват Са2+ (1С5о=30 цМ);

— высокой aнти-NMDA-aKmBHOCГbю (ЕВ5о=10 мг/кг);

— позитивной модуляцией АМРА-рецепторов (ЕСзоо=20 цМ);

— когнитивно-стимулирующими свойствами в тестах деменции альцгеймеровского типа (Е05о=1 мг/кг), что нашло подтверждение в экспериментах и на интактных животных;

— низкой токсичностью кроме того, у данного соединения наблюдается отсутствие МК-801—подобных психотомиметических побочных эффектов, а также отсутствие седатативного воздействия.

Выводы

1. Разработан новый метод синтеза N-(гет)арилалкил-N-(гет)арипме-тиламинов на основе восстановления оснований Шиффа, с помощью которого было впервые синтезировано более 50 дибензиламинов, в том числе более 30 оптически активных.

2. Разработаны методы синтеза М-(гет)арилметил-М-(гет)арилалкил-тиомочевин, изотиомочевин и изотиурониевых солей и их циклических производных. На их основе впервые синтезировано более 80 ациклических производных, содержащих дибензиламиновый фрагмент, и 40 циклических аналогов изотиомочевины, в том числе производные ряда тиазолинов, тиазинов и тиадиазолов.

3. Предложен новый подход к синтезу труднодоступных 5-(дизамещенных)-амино-[1,2,4]-тиадиазолов на основе впервые полученных 5-метилизоксазолил-З-изотиоцианата и 5-трет-бутилизоксазолил-З-изотиоцианата.

4. Разработан метод введения 3-(алк-2-ил)-5-амино-[1,2,4]-тиадиазольного фрагмента в молекулы с аминогруппой.

5. Для всех соединений рассчитаны значения коэффициентов распределения «октанол-вода» (ClogP), а для семи наиболее активных веществ коэффициенты распределения logP и logD(pH 7.4) определены экспериментально. Сравнение этих данных указывает на недостаточную точность современных расчетных методов предсказания коэффициентов липофильности для сложных сопряженных систем типа изотиомочевин.

6. Первичным скринингом обнаружена высокая фармакологическая перспективность липофильных производных изотиомочевины. Показано, что циклические соединения имеют более низкую активность в первичных тестах, чем их разомкнутые аналоги.

7. Выявлены соединения-лидеры (IP-5051 и IP-9040) с уникальным спектром нейропротекторных и когнитивно-стимулирующих свойств. Данные соединения предложены для проведения дальнейших преклинических испытаний.

Основное содержание диссертации изложено в следующих публикациях

1. S Bachunn, V Gngonev, О Drany, A Proshin, S Tkachenko, Isothiouronium denvative potentiates AMPA/kaimte-Induced currents in rat cerebellar Purkinje neurons, J Neurochem, 1999, 73,Suppl4S,S 143D

2. S Tkachenko, S Bachunn, A Proshm, A Ustinov, L Petrova, N Zefirov, Synthesis and neurochemical properties of substituted tnbenzylamines (open analogs of MK-801) as potent NMDA-receptor linked ion channel blockers, Restorative Neurology and Neurosaence, 2000, Vol 16, No 1, P 72-73

3. S Bachunn, S Tkachenko, I Baskin, N Lermontova, L Petrova, A Ustinov, A Proshin, V Gngonev, N Lukoyanov, V Palyulin, N Zefirov, Neuroprotective and cognition enhancing properties of MK-801 flexible analogs Structure-activity relationships, Annals NY Acad Sci, 2001, Vol 939, P 219-236

4. S Tkachenko, S Bachunn, T Muhma, L Petrova, M Dminev, A Ustinov, A Proshm, К Balakin, Focused synthesis of open-chain analogs of MK-801 as potent neuroprotectors and the use of neural network modeling procedures for lead finding and optimization, Drug Fut, 2002, 27, Supp A, P 525

5. S Tkachenko, E Kiselyova, A Afanas'ev, A Ustinov, S Klochkov, S Bachunn, T Serova, A Proshin, К Balakin, Synthesis and structure-activity relationships of novel antitumor pyndinium and quinohnium hpophilic cations, Drug Fut, 2002, Vol 27, Suppl A, P 527

6. Ю Я Иванов, С Е Ткаченко, А Н Прошин, А К Устинов, С О Бачурин, М-Холинэргические свойства производных 2-амино-2-тиазолина, Хим -Форм Журн 2002, Т 36 №11, С 8-9

7. Ю Я Иванов, С Е Ткаченко, А Н Прошин, С О Бачурин, Производные 2-амино-2-тиазолина - новый хемотип, обладающий мускариноподобным действием, Биомедицинская химия, 2003, Т 49, №1, С 92-95

8. С Е Ткаченко, А Н Прошин, С О Бачурин, Л Н Петрова, Н С Зефиров, Производные Ы,5-замешенных Ы'-1-[(гет)арилалкил]-К'-(гет)арилметилизотиомочевин или их солей с фармакотогически приемлемыми кислотами НХ, способы получения их солей и оснований, фармацевтическая композиция, способ лечения и способ изучения глутаматэргической системы, Патент РФ, №2223952, приоритет от 04 06 2001

9. С Е Ткаченко, А Н Прошин, М Э Дмитриев, Н Н Лермонтова, В В Григорьев, С О Бачурин, НС Зефиров, S-Замещенные Н-1-[(гетеро)арил]алкил-Ы'-[(гетеро)арил] алкилизотиомочевины, способ их получения, физиологически активные S-замещенные N-1-

[(гетеро)арил]алкил-Ы*-[(гетеро)арил]алкилизотиомочевины, фармацевтическая композиция и способ лечения, заявка на Патент РФ, №2002132699, приоритет от 5.12.2002.

10. S.E. Tkachenko, T.M. Serova, V.A. Palyulin, A.N. Proshin, N.V. Averina, L.N. Petrova, L.S. Solyakov, S.O. Bachurin, N.S. Zefirov, Structure-Activity Relationships of a Series of Polycyclic and Bridged Compounds Affecting on Ca+2 Homeostasis, XIII Intern. Symp. Medicinal Chemistry, Paris, 1994.

11. СЕ. Ткаченко, А.Н. Прошин, А.К. Устинов, Е.В. Кулиш, Т.П. Трофимова, СО. Бачурин, В.М. Федосеев, Н.С. Зефиров, «Пролекарства» и «липофильные» производные циклических изотиомочевин — перспективные радио- и нейропротекторы, Всероссийская конференция «Проблемы противолучевой защиты», Москва, 1998.

12. А. V. Popov, E. L. Luzina, А. N. Pushin, V. Е. Baulin, А. N. Proshin, and A. V. Shastin, Syntheses Starting from Octafluoroisobutene, XII European Symposium on Fluorine Chemistry, Berlin, Germany, 1998, PII-72.

13. СЕ. Ткаченко, А.Н. Прошин, А.Н. Путин, Л.Н. Петрова, СО. Бачурин, Н.С. Зефиров, Региоконтроль в дегидрогалогенировании изомерных циклических р -галогенизотиомочевин и физиологическая активность продуктов реакций, XXВсероссийская конференция по химии и технологии органических соединений серы, Казань, 1999.

14. S. Bachurin, S. Tkachenko, I. Baskin, N. Lermontova, L. Petrova, A. Ustinov, A. Proshin, V. Grigoriev, N. Lukoyanov, V. Palyulin, N. Zefirov, Neuroprotective and cognition enhancing properties of MK-801 flexible analogs. Structure-activity relationships, 5h International Conference on Neuroprotective Agents, Lake Tahoe, CA, 2000, Abstr, TuO6.

15. T.B. Мухина, СО. Бачурин, СЕ. Ткаченко, Л.Н. Петрова, А.Н. Прошин, А.К. Устинов, И.И. Баскин, Н.В. Артеменко, Н.М. Гальберштам, ВА. Палюлин, Н.С. Зефиров, Применение методологии искусственных нейронных сетей для анализа количественной связи структура-активность в ряду аналогов МК-801, Международная школа-семинар по компьютерной автоматизации и информатизации «ACS-2000», Москва, 2000, С.49-50.

16. СЕ. Ткаченко, Т.П. Трофимова, А.Н. Прошин, М.Э. Дмитриев, Л.Н. Петрова, СО. Бачурин, А.А. Мандругин, В.М. Федосеев, Г.В. Донцова, М.М. Константинова, Радиозащитная и нейропротекторная активность новых производных циклических изотиомочевин, IVСъезд по радиационным исследованиям, Москва, 2001, Т.2, С.436.

17. S. Bachurin, S. Tkachenko, I. Baskin, A. Proshin, V. Grigoriev, N. Lermontova, V. Palyulin, N. Zefirov, Focused Design and Study of Novel Neuroprotectors and Cognition-Enchancers in Series of Glutamate Receptors Ligands, X International Symposium "The New Frontiers of Neurochemistry and Biophysics on Diagnosis and Treatment of Neurological Diseases", Firenze, Italy, 2001, P.24-25.

18. S Bachunn, I Baskm, A Proshm, V Palyulm, I Tikhonova, N Zefirov, Rational design of novel neuroprotectors and cognition-enhancer in a series of glutamate receptors hgands, Second Joint French-Swiss Meeting on Medicinal Chemistry, Beaune, France, 2003

19. T P Trofimova, A N Pushin, A N Proshm, A A Mandrugin, V M Fedoseev, S E Tkachenko, Convenient "Cautious" Method of 5-Hydroxymethyl-2-amino-2-thiazolmes Synthesis, International Symposium "Advances in Synthetic, Combinatorial and Medicinal Chemistry", Moscow, 2004, Vol 2, P 186

ЛР№ 020055 от 31.12.96 г.

Сдано в печать 10.09.04 г. Офсетная печать

Формат60x84/16

Тираж 100 экз. Заказ № 179

МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ СЕРВИСА 141220, М.О., Пушкинский район, пос. Черкизово, ул. Главная, 99

»17333

РНБ Русский фонд

2005-4 12508

Введение.

Глава 1. Биологическая активность и синтез производных изотиомочевины (Литературный обзор).

1.1. Биологическая активность ациклических и циклических производных изотиомочевины.

1.2. Методы синтеза S-замещенных ациклических тиомочевин.

1.3. Методы синтеза циклических производных изотиомочевины: 2-амино-2-тиазолина, 2-амино-5,6-дигидро-1,3-тиазина и

5-амино [ 1,2,4]тиадиазолов.

1.4. Нейропротекторы, когнитивные стимуляторы и болезнь Альцгеймера (БА).

1.5. Типы поведенческих тестов, используемых для исследования влияния препаратов на обучение и память лабораторных животных.

1.6. Компьютерное моделирование (докинг) как метод моделирования активности.

Глава 2. Моделирование соединений с нейротропной активностью в ряду разомкнутых аналогов препарата МК-801.

Глава 3. Синтез дибензиламинов и ациклических производных изотиомочевины.

3.1. Синтез исходных вторичных аминов («дибензиламинов»).

3.2. Синтез ациклических производных изотиомочевины.

Глава 4. Синтез циклических производных изотиомочевины.

4.1. Синтез Щ^-дизамещенных 2-аминотиазолинов.

4.2. Синтез 5-(дизамещенных)-амино-3-(2-оксопропил)-[1,2,4]-тиадиазолов.

4.3. Синтез 5-амино-3-(2-оксо-3,3-Диметил-бутил)-[1,2,4]-тиадиазолов.

4.4. Синтез 2-амино-5,6-дигидро-1,3-тиазинов.

Глава 5. Результаты исследований физико-химических и биологических свойств вновь синтезированных соединений.

5.1. Первичный скрининг синтезированных соединений.

5.2. Анализ взаимосвязи «структура-активность» для вновь синтезированных соединений в рядах циклических и ациклических производных изотиомочевины.

5.3. Изучение липофильности синтезированных соединений и рентгеноструктурные исследования соединений-лидеров.

5.4. Моделирование молекулярного взаимодействия наиболее активных соединений со связывающими центрами NMDA- и АМРА-рецепторов.

5.5. Исследование когнитивно-стимулирующих свойств соединений IP-5051 и IP-9040 в поведенческих тестах.

Глава 6. Экспериментальная часть.

6.1 Физико-химические методы анализа.

6.2. Методики синтезов.

Выводы.

Статистические данные последних лет дают основание считать возраст-зависимые нейродегенеративные расстройства, например болезнь Альцгеймера (БА), наряду с сердечно-сосудистыми и онкологическими заболеваниями, наиболее серьезной медико-социальной проблемой в развитых странах. В этой связи разработка и осуществление стратегии направленного синтеза новых оригинальных нейропротекторов и стимуляторов когнитивных функций является одной из приоритетных задач современной органической химии лекарственных средств (медицинской химии).

Среди широкого спектра различных подходов к созданию препаратов с нейропротекторными и когнитивно-стимулирующими свойствами особое внимание в последние годы уделяется различным лигандам глутаматэргической системы. Действие препаратов на их основе направлено на нормализацию кальциевого гомеостаза в клетках, регулируемого глутаматными рецепторами. Так, Мемантин — избирательный антагонист глутаматных рецепторов NMDA-подтипа, т. е. рецепторов, которые реагируют на специфическое связывание N-метил-О-аспарагиновой кислоты (NMDA), является единственным препаратом, рекомендованным для лечения болезни Альцгеймера на развитой стадии заболевания.

Помимо антагонистов NMDA-рецепторов крайне интересными и относительно мало исследованными в качестве потенциальных нейротропных препаратов являются лиганды другого подтипа глутаматных рецепторов, а именно АМРА-подтипа, которые активируются (8)-а-амино-3-гидрокси-5-метилизоксазол-4-ил-пропионовой кислотой (AMPА). В последние годы позитивные модуляторы АМРА-рецепторов, так называемые ампакины, были предложены в качестве новой группы когнитивных стимуляторов для лечения БА.

В этой связи весьма актуальной и перспективной представляется разработка направленной стратегии синтеза новых оригинальных соединений - потенциальных нейропротекторов и стимуляторов когнитивных функций, сочетающих свойства антагонистов NMDA-рецепторов и позитивных модуляторов АМРА-рецепторов.

Цель настоящей работы - направленный синтез эффекторов глутаматных рецепторов, в первую очередь антагонистов NMDA-рецепторов и позитивных модуляторов АМРА-рецепторов, в ряду производных изотиомочевины как новой группы потенциальных препаратов для лечения и предупреждения нейродегенеративных расстройств, связанных с нарушением функций глутаматэргической системы.

Научная новизна работы определяется следующими аспектами: разработан новый метод синтеза N-1 -(гет)арилалкил-Т\[-(гет)арилметиламинов на основе восстановления альдиминов; разработаны методы синтеза N-1 -(гет)арилалкил-1Ч-(гет)арилметилтиомочевин, изотиомочевин и изотиурониевых солей и их циклических аналогов; рециклизацией ^изоксазол-З-ил-Н'^'-дизамещенных тиомочевин синтезированы 3-(2-оксоалкил)-5-амино-[1,2,4]-тиадиазолы - перспективные реагенты для введения 3-алк-2-ил-5-амино-[1,2,4]-тиадиазольного фрагмента; синтезировано более 150 новых соединений, содержащих N-1 -(гет)арилалкил-Т\[-(гет)арилметиламиновый («дибензиламиновый») фрагмент, в том числе более 30 хиральных, более 80 производных изотиомочевины, а также более 40 циклических изотиурониевых солей и их биоизостерных аналогов; впервые синтезированы соединения, сочетающие в себе свойства блокаторов NMDA-рецепторов и позитивных модуляторов АМРА-рецепторов; проведен комплексный анализ результатов исследования связи «структура-активность» и моделирования взаимодействия соединений с различными участками связывания глутаматных рецепторов, позволивший обосновать отбор наиболее перспективных соединений для изучения их нейротропных свойств на моделях in vitro и in vivo.

Практическая значимость работы состоит в следующем: разработаны удобные препаративные методы синтеза N-1 -(гет)арилалкил-Т\[-(гет)арилметиламинов и на их основе - тиомочевин, изотиомочевин, изотиурониевых солей, в том числе циклических; разработан новый, без применения тиофосгена, препаративный метод получения с высоким выходом метоксипропилизотиоцианата - ключевого реагента для синтеза 2-амино-5,6-дигидро-1,3-тиазинов; показана возможность введения в различные структуры 3-алк-2-ил-5-амино-[1,2,4]-тиадиазольного фрагмента; синтезирована и запатентована новая группа соединений на основе Незамещенных N' -(гет)арилметилизотиомочевин, в ряду которых выявлены оригинальные высокоэффективные блокаторы глутамат-стимулированного входа Са2+; выявлены соединения IP-5051 и IP-9040 с уникальным спектром нейропротекторных и когнитивно-стимулирующих свойств. Данные соединения предложены для проведения дальнейших преклинических испытаний.

1. Биологическая активность и синтез производных изотиомочевины

Литературный обзор).

Выводы.

1. Разработан новый метод синтеза Ы-(гет)арилалкил-Ы-(гет)арилметиламинов на основе восстановления оснований Шиффа, с помощью которого было впервые синтезировано более 50 дибензиламинов, в том числе более 30 оптически активных.

2. Разработаны методы синтеза Ы-(гет)арилметил -N-(гет)арилалкилтиомочевин, изотиомочевин и изотиурониевых солей и их циклических производных. На их основе впервые синтезировано более 80 ациклических производных, содержащих дибензиламиновый фрагмент, и 40 циклических аналогов изотиомочевины, в том числе производные ряда тиазолинов, тиазинов и тиадиазолов.

3. Предложен новый подход к синтезу труднодоступных 5-дизамещенных амино-[1,2,4]-тиадиазолов на основе впервые полученных 5-метилизоксазолил-3-изотиоцианата и 5-трет-бутилизоксазолил-З-изотиоцианата.

4. Разработан метод введения 3-(алк-2-ил)-5-амино-[1,2,4]-тиадиазольного фрагмента в молекулы с аминогруппой.

5. Для всех соединений рассчитаны значения коэффициентов распределения «октанол-вода» (ClogP), а для семи наиболее активных веществ logP и logD(pH7.4) определены экспериментально. Сравнение этих данных указывает на недостаточную точность современных расчетных методов предсказания коэффициентов липофильности для сложных сопряженных систем типа изотиомочевин.

6. Первичным скринингом обнаружена высокая фармакологическая перспективность липофильных производных изотиомочевины. Показано, что циклические соединения имеют более низкую активность в первичных тестах, чем их разомкнутые аналоги.

7. Выявлены соединения-лидеры (IP-5051 и IP-9040) с уникальным спектром нейропротекторных и когнитивно-стимулирующих свойств. Данные соединения предложены для проведения дальнейших преклинических испытаний.

1. C.R. Rasmussen, Nitrogen heterocyclic carboximidamide compounds, US Patent 4211867, McNeil Laboratories.

2. C.R. Rasmussen, F.J. Villani, B.E. Reynolds, A versatile synthesis of N,N,N"-trisubstituted guanidines, Synthesis, 1988, p. 460-466.

3. Д.Ф. Томсон, Защита млекопитающих от ионизирующих излучений, М., 1964, с. 76.

4. Ж.А. Голощапова, Т.Н. Тужилкова, Л.И. Мизрах, Экспериментальное подтверждение применения некоторых изотиурониевых производных в качестве радиопротекторов, Радиобиология, 1981, 21(4), с. 521-525.

5. D. Doherty, W. Burnett, Protective effect of S-(5-aminoethylisothiouronium bromide and related compounds against X-radiation death in mice, Proc. Soc., Exp. Biol. And Med., 1955, 89, p. 312-314.

6. L.H. Wei, N. Arabolos, L.J. Ignarro, Certain S-substituted isothioureas not only inhibit NO synthase catalytic activity but also decrease translation and stability of inducible NO synthase protein, Nitric Oxide, 1998, 2, p. 155-164.

7. E.P. Garvey et al., Enzyme inhibitors, WO 94/12165.

8. W. Griffith, K. Narayanan, S-Alkyl-isothioureido-amino acids and use thereof, US Patent 5364881.

9. J.A. Oplinger et al., Substituted urea and isothiourea derivatives as NO synthase inhibitors, WO 95/09619.

10. B.G. Shearer, Aminoacid derivatives as NO synthase inhibitors, WO 95/00505.

11. J.E. MacDonald, Isothiourea derivatives as NO synthase inhibitors, WO 96/09286.

12. T. Honda, T. Makino, T. Nagafuji, Aniline derivatives having nitrogen monoxide synthase inhibitor activity, WO 96/18608.

13. J.E. MacDonald, Bicyclic isothiourea derivatives useful in therapy, WO 96/24588.

14. N. Sekiguchi, Hetero-tricyclic compounds exhibiting inhibitory activity against NO synthase, WO 98/42667.

15. T. Makino, Heterocyclic compounds having NO synthase inhibitory activity, WO 99/23069.

16. T. Makino, T. Nagafuji, Amino acid derivative having nitrogen monoxide synthetase inhibitor activity, WO 96/06076.

17. K. Ichimori, D.J. Stuehr, R.N. Atkinson, Synthesis and evalutaion of new sulfur-containing L-arginine-derived inhibitors of nitric oxide synthase, J. Med. Chem., 1999, 42(10), p. 1842-1848.

18. A. Mertens, Preparation of thiocarbamidinic acid derivatives from isothioureas for antiviral pharmaceuticals, WO 95/04034, CA 1995,122, 265045.

19. P.D. Davis, Substituted pyrroles, JP 90/264776.

20. M.R. Barbachyn, F.L. Нота, A. Monge, Polyaromatic antiviral compositions, WO 98/45259.

21. A. Pascual, A. Rindlibacher, H. Schmidt, N-(pyrid-3-yl)thioureas and derivatives as acaricides, II. Qantitative structure-activity relashionships and chemodynamic behavior, Pestic. Sci., 1995, 44(4), p. 369-379.

22. M. Kogan, Preparation of herbicidal N,N'-(N"-isopropylcarbamoyl-N"'-isopropylcarbamoyl)-S-ethylisothiourea. US Patent 4714493,1987, CA 1987,107,111110.

23. M. Booke, F. Hinder, L.D. Traber, S-ethylisothiourea, a nonamino acid inhibitor of nitric oxide synthase, reverses septic vasodilation in sheep, Shock, 1995, 4(4), p. 274-281.

24. B. Gopalan, Orthosubstituted biphenyl amidine and biphenyl guanidine derivatives and antidiabetic or hypoglycaemic agents containing them, WO 92/00273.

25. J.C. Powers, C.-M. Kam, Isocoumarins with basic substituents as serine proteases inhibitors, anticoagulants and anti-inflammatory agents, US Patent 4845242.

26. G. De Nanteuil, Boronic acid peptide derivatives having protease inhibiting activity, process for preparation thereof and pharmaceutical compositions comprising them, FR 94/7589.

27. J.-F. Patoiseau, Substituted l-(piperidin-4-yl)-3-(aryl)-isothioureas, their preparation and therapeutic use, FR 99/0705.

28. M. Hori, T. Yamamoto, H. Ohtaka, Novel isothiourea derivatives, WO 97/09306.

29. J.W. Black, G.J. Durant, J.C. Emmett, Isothioureas and their derivatives, US Patent 3759944.

30. H. Van der Goot, MJ.P.Schepers, G.J. Sterk, Isothiourea anlogues of histamine as potent agonists or antagonists of the histamine Нз-receptor, Eur. J. Med. Chem., 1992, 27(5), p. 511517.

31. C.O. Бачурин, Медико-химические подходы к направленному поиску препаратов для лечения и предупреждения болезни Альцгеймера, Вопросы медицинской химии, 2001, 2, с. 155-197.

32. J.P. De Esch, J.E.J. Mills, T.D.J. Perkins, Development of a pharmacophore model for histamine H3 receptor antagonists, using the newly developed molecular modeling program SLATE, J. Med. Chem., 2001, 44(11), p. 1666-1674.

33. G.J. Durant, C.R. Ganellin, D.W. Hills, The histamine H2-receptor agonist impromidine: Synthesis and structure activity considerations, J. Med. Chem., 1985, 28(10), p. 1414-1422.

34. B.D. Wallingford, R.A. Lancia, E.C. Soutiere, Antagonism of xylazine in white-tailed deer with intramuscular injection of yohimbine, J. Wildl. Dis., 1996, 32 (2), p. 399-402.

35. V.N. Jackson, D.S. Bahia, G. Milligan, Modulation of relative intrinsic activity of agonists at the alpha-2A adrenoreceptor by mutation of residue 351 of G protein, Mol. Pharmacol, 1999, 55 (2), p. 195-201.

36. J.A.E. Hubbell, K.W. Hinchcliff, L.M. Schmall, Anesthetic, cardiorespiratory, and metabolic effects of four intravenous anesthetic regiments induced in horses immediately after maximal exercise, Am. J. Vet. Res., 2000, 61(12), p. 1545-1552.

37. T.W. Sawyer, Modulation of sulfur mustard toxicity by arginine analogs and related nitric oxide synthase inhibitors in vitro, Toxicol Sci., 1998, 46(1), p. 112-123.

38. M. Rudolph, J.G. Pelletier, D. Pare, Estimation of synaptic conductances and their variances from intracellular recording of neocortical neurons in vivo, Neurocomputing, 2004, 58-60, p. 387-392.

39. P.H. Dorff, S. Jung, S.W. Goldstein, A.A. Nagel, Preparation of N-(pyridinylmethyl)-heterocyclideneamine compounds as nicotinic acetylholine receptor binding agents, Eur. Pat. Appl. EP 857725, CA 1998,129,175646.

40. J. E. van Muijlwijk-Koezen, H. Timmerman, R. C. Volliga, Thiazole and thiadiazole analogues as a novel class of adenosine receptor antagonists, J. Med. Chem., 44(5), 2001, p. 749-762.

41. K. Pan, M.K. Scott, D.H.S. Lee, 2,3-Diaryl-5-anilinol,2,4.thiadiazoles as melanocortin MC4 receptor agonists and their effects on feeding behavior on rats, Bioorg. Med. Chem., 2003,11(2), p. 185-192.

42. C. Marrano, P. de Macedo, P.Gagnon, Synthesis and evaluation of novel dipeptide-bound 1,2,4-Thiadiazoles as irreversible inhibitors of guinea pig liver transglutaminase, Bioorg. Med. Chem., 2001, 9(12), p. 3231-3242.

43. D. Gupta, J. Vidien, A note of tautomerism of thiocarbamide and monophenylthiocarbamide: reaction with aqueous alkali, J. Indian. Chem. Soc., 1954, 31, p. 179-180.

44. H. Behringer, Die Synthese der 2-aminothiazincarbonsaure-4 und uber eine neue Cystin-Synthese, Lieb. Ann., 1951, 574, s. 140-156.

45. H. Goldshmidt, H. Grini, Addition von Halogenalkylen an Thioharnstoff, Z. Elektrochem., 1913,19, s. 226-234.

46. H. Goldshmidt, A. Hagen, Phisico-chemical studies on the addition product of thiourea with alkyl iodines, Z. Elektrochem., 1916, 22, s. 339-349.

47. M. Vecera, J. Gasparcic, Identifikaceorganich latek. VIII. Mikroidentifikace alkylhalogenidu, O-alkyl-a N-alkylskupin chromatographic na papire, Chem. Listy., 1954, 48, p. 1360-1363.

48. B.A. Василевский, Е.Д. Свердлов, B.M Федосеев, Взаимодействие тиомочевины с а-броммасляной кислотой. I. Влияние растворителя на скорость реакции, ЖОХ, 1963, 5, с. 2397-2401.

49. J. Gante, N-(Methylthio-N'-tosylformimidoyl)aminosauren, Angew. Chem., 1967, 79, s. 858-859.

50. К. Hartke, G. Salamon, Heterosubstituierte Fulvene. IV. Im 5-Ring unsubstituierte 6.6-Diamino-fulvene, Chem. Ber., 1970,103, s. 133-146.

51. V.I. Cohen, A Convenient Synthesis of mono-, N,N'-di, and trisubstituted selenoureas from methyl carbamimidothioates (S-methylpseudothioureas), Synthesis, 1980,1, p. 60-63.

52. D. Durr, p-Trifluoromethylphenyliminoverbindungen, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Wirkstoffe in Schadlingsbekampfungsmitteln, DE 2020918, 1969, Ciba AG, Erf., C.A., 1971, 74, 53259.

53. J.F. Olin, F.B. Dains, The action of the halogen hydrins and of ethylene oxide on the thioureas,/. Am. Chem. Soc., 1930, 52, p. 3322-3327.

54. W. Hanefeld, Untersuchungen an 1.3-Thiazinen. VI. Ringschlubreaktionen N-monosubstituierter Thioharnstoffe mit 1,3-reaktiven Propienylderivaten, Arch. Pharm. (Weinheim, Ger.), 1977, 310, s. 273-285.

55. E. Akerblom, Addition of thioureas to ethyl (2-furyl) and (5-nitro-2-furyl) propiolate, Chem. Scr, 1974, 6, p 35-44; C.A., 1975, 82, 43301.

56. H. Kessler, Н.О. Kalinowski, С. Chamler, Mesomere Kationen .1. Die Syntese von S-Aryl-thiuroniumsalzen, Justus Liebigs Ann. Chem., 1969, 727, s. 228-230.

57. Е.П. Несынов, M.M. Беспрозванная, П.С. Пелькис, S-Арильные производные 1,3-дизамещенных тиомочевины, ЖорХ, 1966, 2, с. 1891-1894.

58. S. Furumoto, Novel method for the synthesis of carbodiimides, Nippon Kagaku Zasshi, 1971, 92(4), p. 357-360.

59. P. Gronski, K. Hartke, Thiocarbonyl-Ylide des 1,3-Diazacyclopentadiens und des Cyclopentadiens, Chem. Ber., 1978, 111, s. 272-281.

60. A. Pollak, A. Stanovnik, M. Tisler, The reaction of some compounds containing thioamide groups with 2,4,6-trichloro-l,3,5-triazine, Can. J. Chem., 1966, 44, p. 829-832.

61. A.R. Katritzky, B.V.Rogovoy, V.Vvedensky, Versatile solid-phase synthesis of S-arylisothioureas, J. Comb. Chem., 2002, 4, 290-294.

62. A.R. Katritzky, V. Vvedensky, B.V. Rogovoy, Solid-phase synthesis of N,N-disubstituted S,N'-diarylisothioureas: facile exchange reactions of isocyanates, J. Comb. Chem., 2002, 4, 285-289.

63. Б.В. Копылова, И.И. Кандрор, P.X. Фрейндлина, Радикальное арилирование тиомочевины и ^ГЧ'-дифенилтиомочевины N-нитрозоацетанилидами, Изв. Акад. наук, сер. хим., 1979, с. 1138-1139.

64. R. Singh, V.K. Verma, Chemistry of isodithiobiurets. Part II. Oxidative de-p-chlorobenzylation as an alternative route to the Synthesis of 3,5-diaryl/arylalkylimino-l,2,4-dithiazolidines, J. Indian Chem. Soc, 1977, 54, p. 908-911.

65. J.S. Davidson, A preparation of 3-benzoylamino-5-phenyl-l,2,4-triazole, Chem. andlnd. (London), 1972, p. 464-465.

66. K. Nowak, L. Kania, Guanidine derivatives.V. Synthesis of mono- and diamino acid derivatives of S-methylisothiourea, Rocz. Chem., 1969, 43(11), 1953-1960.

67. E.H. Cox; J.M. Sprague, Sulfonamido-s-substituted isothioureas, 1948, US Patent 2441566, Sharpu. Dohme Inc., Erf.: C.A., 1948, 42, 6852.

68. F. Arndt, Uber aromatische Isothioharnstoffe und ihre Umwandlung in aromatische orthothiokohlensaureester, Justus Liebigs Ann. Chem., 1911, 384, s. 322-351.

69. E.Vowinkel, G.Claussen, Reaktionen von Thiophenolen mit Dicyclohexylcarbodiimid, Chem. Ber., 1974,107, s. 898-906.

70. P. Schlack, G. Keil, Neue Carbodiimid-Synthesen, Justus Liebigs Ann. Chem., 1963, 61, s. 164-172.

71. T. Mukaiyama, S. Yamamoto, K. Inomata, The reactions of complexes of thioboronite with compounds containing carbon-nitrogen multiple bond, Bull. Chem. Soc. Jpn., 1971, 44, p. 2807-2810.

72. J. Goerdler, H.Lohmann, Darstellung, Stabilitat und Additionsreaktionen von Imidoylcarbodiimiden, Chem. Ber., 1977,110, s. 2996-3009.

73. E. Kuhle, Umsetzungen von Isocyaniddihalogeniden und ihren Derivaten, Angew. Chem., 1969, 81, s. 18-32.

74. H. Eilingsfeld, L. Mobius, Verfahren zur Herstellung von Isothioharnstoffen, DE 1545629, 1965, BASF, Erf.

75. R. Neidlein, U. Askani, Zum Reaktionsverhalten von Isonitrildichloriden, Iminothiokohlensaureesterchloriden und Bis-methylmercaptomethylencyanamid gegenuber Enaminen so wie Oximen, 2. Mitt, Arch. Pharm., (Weinheim, Ger), 1977, 31, s. 820-827.

76. K.Zeile, H. Stahle, K.-H. Hauptmann, 2-(2-Chlor-4-methyl- oder -athylanilino)-l,3-diazacyclopenten-(2) deren Salze so wie ein Verfahren zu deren Herstellung, DE 1303930, 1963, Boehringer Sohn GmbH, Erf., C.A., 1976, 85, 211.

77. D.L. Klayman, R.J. Shine, Categorization of N-substituted thioureas via their S-methyl derivatives, Anal. Chim. Acta., 1968, 41, p. 408-411.

78. R. Maly, Synthesis and chemistry of 2-aminothiazoles and 2-amino-4:5-dihydrothiazoles, J. Chem. Soc., 1867, 42, p. 45-61.

79. R. Aschoff, Die Synthese der substituierte Derivate des 2-Amino-2-thiazolins, J. Pr. Chem., 1870, 4, s. 314-322.

80. S. Gabriel, Ueber Amidomercaptan, Ber., 1889, 22, s. 1137-1139.

81. S. Gabriel, R. Stelzner, Ueber Vinylamin, Ber., 1895, 28, s. 2929-2938.

82. A. Uedinck, Ueber einige des P-Brompropylamins, Ber., 1899, 32, s. 967-979.

83. S. Gabriel, J. Colman, Uber a-Phenyl-|3-chlor-athylamin, C6H5.CH(NH2).CH2.C1, Ber., 1914, 47, s. 1886-1873.

84. F. Wolfheim, Uber (3-Phenyl-p-chlor-athylamin, C6H5.CHC1.CH2.NH2, Ber., 1914, 47, s. 1440-1452.

85. S. Gabriel, H. Ohle, Zur Kenntnis des Normal-und Isopropylamines, Ber., 1917, 50, s. 804-818.

86. A.E. Dixon, Action of bromine on allylthiocarbimide, J. Chem. Soc., 1892, 61, p. 545550.

87. P. Hirsch, Zur Kenntniss des (3- Brompropylamins, Ber., 1890, 23, s. 964a-974a.

88. T. Hino, K. Voji, S. Akaboshi, Radiation-protective agents. IV. Synthesis of tetrahydro-(3-carbolines and 2-aminothiazoline derivative from tryptophanols, Chem. Pharm. Bull., 1970, 18, p. 384-388.

89. W. Markward, O. Frobenius, Ueber verbindungen aus der Aethyleniminreihe, Ber., 1901, 34, s. 3544-3558.

90. J. Gadamer, Ueber das Thiosinamin(II), Arch. Pharm., 1896, 234, s. 1-47.

91. J. Gadamer, Ueber das Thiosinamin und seine Halogenadditionsprodukte, Arch. Pharm., 1895, 233, s. 646-684.

92. S. Gabriel, J. Colman, Ueber einige angebliche Penthiazolderivate, Ber., 1906,39, s. 2889-2092.

93. A.E. Dixon, The chemistry of dibromopropylthiocarbamide; and the action of bromine and iodine upon allylthiourea, J. Chem. Soc., 1896, 69, p. 17-35.

94. C.M. Хрипак, И.В. Смоланка, Синтез 2^-амино-5-бромметилтиазолина-2 и его производных, Укр. хим. ж., 1971, 37(1), с. 94-95.

95. С. Fromm, R. Kapellez-Adler, Untersuchungen uber einige Heterocyclen und deren Tautomeriefahigkeit, Ann., 1928, 467, s. 240-274.

96. S. Gabriel, E. Leupold, Zur Kenntniss einiger Abbkomlinge des Bromathyl- und Brompropyl-Amins, Ber., 1898,31, s. 2832-2839.

97. C. Avenarius, Umlagerung von Alkylthiozinaminen und Alkylallylsulfosemicarbaziden in isomere Basen, Ber., 1891, 24, s. 260-271.

98. B. Prader, Ueber aromatisch substituirte Pseudothioharnstoffe, Ber., 1889, 22, s. 2991-3001.

99. H.A. Bruson, J.W. Eastes, Action of sulfuric acid upon unsaturated isothiocyanates: mercaptothiazolines, J. Am. Chem. Soc., 1937, 59, p. 2011-2013.

100. Т. Hino, К. Tana-Ami, К. Yamada, Radiation-protective agents. II. The transformation of 2-(2-aminoethyl) thiopseudoureas to 2-amino-2-thiazolines Chem. Pharm. Bull., 1966,14, p. 1201-1209.

101. S. Gabriel, Zur Kenntnis der Isopropylamines Ber., 1916, 49, s. 2120-2123.

102. F. Dains, F. Eberly, Alkyl derivatives of monosubstituted thiazolidinones J. Am. Chem. Soc., 1933, 55, p. 3859-3863.

103. G. Young, S.I. Crookes, Contributions to the chemistry of the amidines. 2-Aminothiazoles and 2-imino-2:3-dihydrothiazoles. 2-Iminotetrahydrothiazoles and 2-amino-4,5-dihydrothiazoles, J. Chem. Soc., 1906, 89, p. 59-76.

104. M. Busch, H. Lotz, Zur Kenntnis der Hydrazindicarbamide, J. Pr. Chem., 1914, 90, s. 257-273.

105. E. Kolshorn, Zur Kenntniss der Aminoketone, Ber., 1904, 37, s. 2474-2486.

106. В.И. Станинец, A.E. Шилов, Реакции присоединения с внутримолекулярным образованием цикла, Усп. хим., 1971, 40, с. 491-512.

107. А.Н. Пушин, С.Е. Ткаченко, В.М. Федосеев, Новая скелетная перегруппировка циклических |3-галогеналкилизотиомочевин, Изв. АН СССР, 1986, сер. хим., 3, с. 733-734.

108. С.Е. Ткаченко, А.Н. Пушин, В.М. Федосеев, Направление присоединения аминов к 2,3-дибромпропилизотиоцианату, ЖОХ, 1987, 57 (10), с. 2400-2401.

109. В.М. Федосеев, Ю.М. Евдокимов, S-Производные тиомочевины. IX. Синтез бромгидратов 2-алкил(арил)- и 2-диалкиламино-5-(изотиуронийбромид)-метил-Д2-тиазолинов, ЖОХ, 1964,34, с. 1551-1556.

110. A. Schoberl, М. Kawohl, Thiazolinylharnstoffe aus Cystamin, Angew. Chem., 1951, 63, s. 268.

111. M. Rimpler, A. Schoberl, Notiz zur Kenntnis der 2-Amino-thiazolin-carbonsaure und ihrer Ester, Ber., 1968,101, s. 375-377.

112. A.S. Deutsch, P.E. Fanta, Chemistry of ethyleneimine.il. Ring-opening of 2,2-dimethyl-1 -(N-phenylthiocarbamyl)aziridine, J. Org. Chem., 1956, 21(8), p. 892-895.

113. M. Tisher, Beitrag zur Synthese und Umlagerung 1-substituierte Thiocarbamylathylenimine in N-substituierte Derivate des 2-Amino-2-thiazolins, Arch. Pharm., 1958, 291, s. 457-463.

114. Y. Iwakura, A. Nabeya, The ring-opening of ethylenimine compounds, Nippon Kagaku Zasshi, 1956, 77, p. 773-778.

115. Y. Iwakura, A. Nabeya, T. Nishiguchi, Isomerization of 1-thioacylazetidines and related compounds, J. Org. Chem, 1966,31(10), p. 3352-3361.

116. R.A. Wohl, D.F. Headley, The stereochemistry of aziridine ring expansion with sulfure nucleophiles to give thiazolidines and 2-amino-2-thiazolines, J. Org. Chem., 1972, 37(26), p. 4401-4406.

117. J.X. Khym, R. Shapira, D.G. Doherty, Ion exchande studies of transguanilation reactions. I. Rearrangement of S,2-aminoethylisothiourea to 2-mercaptoethylguanidine and 2-aminothiazoline, J. Am. Chem. Soc., 1957, 79, p. 5663-5666.

118. B.M. Федосеев, B.H. Бочкарев, А.Б. Силаев, S-Производные тиомочевины. IV. Получение 2-бром-З-изотиуронийпропиламина и исследование некоторых его превращений, ЖОХ, 1961, 31, с. 3929-3933.

119. В.М. Федосеев, И.В. Филиппович, S-Производные тиомочевины. X. Получение 2-амино-5-бром-Д2-дигидро-1,3-тиазина, ЖОХ, 1964, 34, с. 1556-1561.

120. В.М. Федосеев, B.C. Чурилин, В.П. Тащи, Тиазин-тиазолиновая перегруппировка, ДАН СССР, 1971,197, с. 1351-1352.

121. В.М. Федосеев, И.В. Филиппович, S-Производные тиомочевины. XI. О продукте реакции бромгидрата 2,3-дибромпропиламина с роданидом калия, ЖОХ, 1964, 34, с. 1561-1565.

122. S. Gabriel, R. Stelzner, Zur Kenntniss der Hydroxyl- und Halogen-Derivate secundarer und tertiarer Basen, Ber., 1896, 29, s. 2381-2391.

123. R.G. Clapp, L. Long, T. Hasselstrom, The interconversion of 2-substituted 2-oxazolines and 2-thiazolines, J. Org. Chem, 1964, 29(8), p. 2172-2174.

124. A.F. McKay, D.J. Whittingham, M.-E. Kreling, Amino acid. VIII. 2-ThiazoIine and A2-dihydro-l,3-thiazine derivatives of to-amino acids, J. Am. Chem. Soc., 1958, 80, p .3339-3342.

125. W. Albert, Verfahren zur Herstellung von substituierten 2-Iminothiazolidinen, DE 942027.

126. B.M. Федосеев, Г.Н. Шалаева, В.И. Першин, S-Производные тиомочевины. XIV. О возможности получения 2,3 -диизотиуронийпропиламина, ЖОрХ, 1968, 4, с. 17911793.

127. В.М. Федосеев, С.П. Коваленко, А.Б. Силаев, S-Производные тиомочевины.

128. Синтез N-ацетил- и К,.Ч-диэтил-2,3-диизотиуронийпропиламина, ЖОХ, 1959, 29, с. 1703-1707.

129. В.М. Федосеев, В.Н. Бочкарев, А.Б. Силаев, S-Производные тиомочевины. III. Реакция тиомочевины с К-(2,3-дипропил)-фталимидом, ЖОХ, 1960, 30, с. 3795-3798.

130. В.М. Федосеев, В.В. Иваненков, А.Б. Силаев, S-Производные тиомочевины.1.. Синтез 2-имино-3-алкил-5-изотиуронийметилтиазолидинов, ЖОХ, 1960, 30, с .34683472.

131. W. Will, Ueber die aus Sulfocarbanilid durch Addition von Jodalkylen entstehenden verbindungen, Ber., 1882,15, s. 338-348.

132. F.B. Dains, R.Q. Brewster, J.S. Blair, The substituted thioureas. III. The synthesis of thiazolidine and thiazane derivatives, J. Am. Chem. Soc., 1922, 44, p. 2637-2643.

133. F.B. Dains, R.Q. Brewster, I.L. Malm, The substituted thioureas. V. The synthesis of thioureas from aminoethanols and of thiazolidine derivatives, J. Am. Chem. Soc., 1925, 47, p. 1981-1989.

134. И.Н. Азербаев, Jl.T. Калкабаева, М.Ж. Айтходжаева, Синтез тиазолинов и тиазолидинов, ХГС, 1972, 4, с. 471-474.

135. S. Gabriel, W.E. Lauer, Zur Kenntniss des Propylamin, Ber., 1890,23, s. 87a-95a.

136. A. Schoberl, H. Kawohl, Uber das 2-Amino-penthiazolins, Angew. Chem., 1952, 64, s. 643.

137. A. Schoberl, H. Kawohl, G. Hansen, Uber die Cyanidspaltung von Homocystamin und uber das 2-Amino-pentiazolin, J. Lieb. Ann., 1958, 614, s. 83-96.

138. D.L. Klayman, G.W.A. Milne, 2-Amino-A2-thiazolines from aminoethyl thiosulfates. The mass spectra of 2-Amino-A2-thiazolines and related compounds, J. Org. Chem., 1966, 31(7), p. 2349-2355.

139. Y.Iwakura, A.Nabeya, T.Nishiguchi, Isomerization of thioacylazetidines and related compounds, J.Org.Chem., 1966, 31 (10), p. 3352-3356.

140. D.G. Doherty, R. Shapira, W.T. Burnett, Synthesis of aminoalkylisothiuronium salts and their conversion to mercaptoalkylguanidines and thiazolines, J. Am. Chem. Soc., 1957, 79, p. 5667-5671.

141. B.M. Федосеев., B.C Чурилин., Я.И. Лыс, S-Производные тиомочевины, Вести. МГУ, 1971, 5, с. 611-613.

142. В.И. Иванский, Химия гетероциклических соединений, Н., Высш. Школа, 1978, с. 384.

143. В.Н. Chase, J.J. Walker, A Novel reaction of thiourea, the structure of Jaffe's base, and related studies,/. Chem. Soc., 1955, p 4443-4450.

144. A.J. Boulton, A.R. Katrizky, A.M. Hamid, Heterocyclic rearrangements. Part X. A generalised monocyclic reaarrangement, J. Chem. Soc., 1967, p. 2005-2007.

145. M. Ruccia, N. Vivona, G. Cusmano, Mononuclear heterocyclic reaarangements. Rearragements in the 1,2,5-oxadiazole series,/. Chem. Soc., Perkin Trans. 1,1977, p. 589-591.

146. N. Vivona, G. Cusmano, G. Macaluso, Mononuclear heterocyclic reaarangements. Rearragements in the 1,2,4-oxadiazoles, isoxazoles, and 1,2,5-oxadiazoles involving a sulphur atom,/. Chem. Soc., Perkin Trans. 1,1977, p. 1616-1619.

147. B.A Загоревский, H.B. Власова, Д.А. Зыков, Поиск антиалкогольных средств в ряду амидов замещенных пиразол-4-карбоновой и пиразол-4-уксусной кислот, Хим,-фарм. ж., 1989, с. 966-971.

148. М.В. Вовк, Н.В. Мельниченко, В.А. Черноус, М.К. Братенко, 4-Функциональнозамещенные 3-гетеропиразолы X. Взаимодействие 3-арил-1-фенил-4-пиразолкабонилизотиоцианатов с З-амино-5-метилизоксазолом, ЖОХ, 2002, 38, с. 627629.

149. G. Macaluso, G. Cusmano, S. Buscemi, Heterocyclic reaarangements. Rearragements in the 1,2,4-oxadiazoles, isoxazoles, and 1,2,5-oxadiazoles involving a carbethoxythiourea nitrogen-carbon-sulfur sequence, Heterocycles, 1986, 24, p. 3433-3439.

150. F. Forette, F. Boiler, In: Alzheimer's disease and related disorders. Eds. K. Iqbal, D.F. Swaab, B. Winblad and H.M. Wisniweski, 1999, J.Wiley & Sons Ltd., New York, p. 623631.

151. K.A. Yamada, Modulating excitatory synaptic neurotransmission: potential treatment for neurological disease, Neurobiological Dis., 1998, 5, 2, p. 67-80.

152. G. Lynch, Memory and the brain: unexpected chemistries and a new pharmacology, J. Neurobiol. Learn and Memory, 1998, 70, n.1-2, p. 82-100.

153. A. Doble, The Role of Excitotoxicity in Neurodegenerative Disease: Implication for Therapy. Pharmacology and Therapeutics. 1999, 81, 3, p. 163-221.

154. D. Bleakman, D. Lodge, Neuropharmacology of AMPA and kainate receptors Neuropharmacology, 1998,37, p. 1187-1204.

155. C.G. Parsons, W. Danysz, G. Quack, Glutamate in CNS Disorders as a Target for Drug Development: An Update, Drugs News Perspect., 1998,11, 9, p. 523-580.

156. B. Winblad, N. Poritis, Memantine in severe dementia: results of the 9M-Best Study (Benefit and efficacy in severely demented patients during treatment with memantine), Int. J. Geriatr. Psychiatry, 1999,14(2), p. 135-146.

157. G. Lynch, R. Granger, J. Ambros-Ingerson, Evidence that a positive modulator of AMPA-type glutamate receptors improves delayed recall in aged humans, Experimental Neurology, 1997,145, p.89-92.

158. S. Bachurin, V. Grigoriev, O. Drany, A. Proshin, S. Tkachenko, Isothiouronium derivative potentiates AMPA/kainite-Induced currents in rat cerebellar Purkinje neurons, J. Neurochem., 1999, 73, Suppl.4S, S143D.

159. G. W. Evans, P. L. Brennan, М. A. Skorpanich, and D. Held, Cognitive mapping and elderly adults: verbal and location memory for urban landmarks, Journal of Gerontology, 1984,39, p. 452-456.

160. Т. E. Moore, B. Richards, and J. Hood, Aging and the coding of spatialinformation, J. ofGeront., 1984,39, p. 210-212.

161. С.А. Barnes, Aging and the physiology of spatial memory, Neurobiology ofAging, 1988, 9, p. 563-568.

162. M.J. Sharps, E.S. Gollin, Memory for object location in young and elderly adults, J. ofGeront., 1987, 42, p. 336-341.

163. JJ. Buccarasco, A.V. Terry Jr., Multiple Central Nervous System Targets for Eliciting Beneficial Effects on Memory and Cognition, J. Pharmacol. Exp. Theor., 2000, 295, p. 438-446.

164. E.E. Букатина, И.В. Григорьева, O.B. Смирнов, Клинические различия между деменцией альдгеймеровского типа и мультиинфарктной демендией, Ж. нейропатол. психиатр, им. С. С. Корсакова, 1994, 94, с. 38-42.

165. S. Bachurin, Е. Bukatina, N. Lermontova, Antihistamine agent Dimebon as novel neuroprotector and cognition enhancer, The Annals of the New York Acad. Sci., 2001, 939, p. 425-435.

166. T. Walsh, I. Hanin, A review of effects of AF64A, a cholinergic neurotoxin, In: Advances in Behavioral Biology, V.29. Alzheimer's and Parkinson's disease, Ed. by A. Fisher, I. Hanin, and P Lachman, London: Plenum Press, 1986, p. 461-467.

167. T. Walsh, K. Opello, The use of AF64A to model Alzheimer disease, In: toxin-induced models of neurological disorders, Ed. by M.L. Woodruff and A.J. Nonneman, Plenum Press, New York and London, 1994, p. 259-279.

168. W.K. Honig, Studies of working memory in the pigeon, In: Cognitive Processes in Animal Behavior, Ed. by S.H. Hulse, H. Fowler, and W.K. Honig, N.J. Hillsdale, Laurence Erlbaum, 1978, p. 211-248.

169. R.G.M. Morris, Spatial localization does not require the presence of local cues, Learning and Motivation, 1981,12, p. 239-261.

170. W.R. Mundy, S. Barone, H.A. Tilson, Neurotoxic lesions of the nucleus basalis induced by colchicine: effects on spatial navigation in the water maze, Brain Research, 1990, 512, p. 221-228.

171. R. Brandeis, Y. Brandys, S. Yehuda, The use of the Morris watermaze in the study of memory and learning, Int. J. Neurosci., 1989, 48, p. 22-40.

172. R. McNamara, R.W. Skelton, The neuropharmacological and meurochemical basis of place learning in the Morris watermaze, Brain Res. Rev., 1993,18, p. 33-49.

173. О.Н. Зефирова, Н.С. Зефиров, Медицинская химия (Medicinal chemistry). II. Методологические основы создания лекарственных препаратов, Вести. Моск. Ун-та, сер. 2, 2000, 41, с. 103-108.

174. М.С. Беленикин, А. Маккиаруло, Г. Константано, В.А. Палюлин, Р. Пелличари, Н.С. Зефиров, Молекулярный докинг лигандов глутаматных рецепторов, Вести. Моск. Ун-та, сер. 2, 2002, 43, с. 221-230.

175. N.M. Gray, В.К. Cheng, S.J. Mick, С.М. Lair, Р.С. Contreras, Phencyclidine-like Effects of Tetrahydroisoquinolines and Related Compounds, J. Med. Chem., 1989, 32, p. 12421248.

176. Y. Ueda, K. Katsuta, H. Nakanishi, K. Yoshida, Non-competitive NMDA antagonists, FR115427 and MK801, enhance neuronal survival in primary culture, Neurosci. Lett., 1995,185, p. 107-110.