Синтез, реакционная способность и эффекты авторадиолиза производных тиомочевины, меченных серой-35 тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.14 ВАК РФ

№

московский государственный университет _ Асом<$9&1.в. Ломоносова » " фЬшмический факультет

На пранах рукописи

ткаченко сергей евгеньевич

СИНТЕЗ, РЕАКЦИОННАЯ СПОСОБНОСТЬ И ЭФФЕКТЫ АВТОРАДИОЛИЗА ПРОИЗВОДНЫХ ТИОМОЧЕВИНЫ, МЕЧЕННЫХ СЕРОЙ-35

Специальность: 02. 00. 14 - Радиохимия. 02. 00. 03 - Органическая химия

автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

москва - 1998

Работа выполнена на кафедре радиохимии химического факультетаМосковского государственного университета

им.М.В.Ломоносова и в Институте физиологически активных веществ Российской академии наук.

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

доктор химических наук, профессор В.М.Федосеев

член-корреспондент РАН, доктор химических наук, профессор Н.Ф.Мясоедов

доктор химических наук, профессор Н.В.Зык

ГНЦ РФ "Курчатовский институт". Научно-технический комплекс "Изотопы"

Защита состоится

ис-^ьу |99з г в [5 часов на заседании диссертационного совета К.053.05.61 в МГУ им.М.В.Ломоносова по адресу: 119899, ГСП Москва В-234, Ленинские горы, МГУ, химический факультет, кафедра радиохимии, ауд.308.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке химического факультета МГУ.

Автореферат разослан ^ ¡993 г

Ученый секретарь

диссертационного совета К.053.05.61,

канд.физ-мат.наук

Н.Н.Трошина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Медицинская химия, стремительно сформировавшаяся в последние два десятилетия как новая фундаментальная и прикладная химическая наука, органично включает в себя и модифицирует сообразно своим задачам и новым перспективам многие химические дисциплины. Это в первую очередь касается современной радиохимии, претерпевшей за это время удивительную трансформацию. Радиохимия, опираясь на свое достойное «неорганическое» прошлое и сохраняя свою исключительную роль в атомной энергетике и радиоэкологии, сегодня стала во многом химией меченых органических, биоорганических и бионеорганических соединений и достигла в этой области впечатляющих успехов (достаточно упомянуть только ПЭТ-томографшо, рлдиоиммунный и радиолигандный анализ, как выдающиеся достижения). В связи с этим актуальные задачи радиохимии как химии меченых веществ, помимо традиционной -синтеза радионуклидов в их простейших химических формах, заключаются в разработке новых регио-, стерео- и изотопомерно-селективных методов синтеза меченых веществ, в том числе меченных ультра короткоживущими изотопами и меченных многократно, в разработке новых рецепторных радиолигандов, новых методов радиоиммунного и радиолигандного анализа, а также радиохимических методов, используемых в тотальном скрининге и других современных способах рационального поиска физиологически активных веществ (ФАБ). Высокий уровень указанных задач определяет новые требования к изотопно меченным веществам. Помимо получения высокой молярной радиоактивности радиопрепарата чрезвычайно важными являются его высокая радиохимическая чистота, стабильность (сохранность), а также эквивалентность свойств меченого вещества и его холодного аналога в биологических тестах или химических превращениях. Последнее не всегда соблюдается, что отражено в некоторых публикациях, из анализа которых следует, что причиной такой «неэквивалентности» могут являться эффекты авторадиолиза меченого вещества.

В течение последних 20 лет явление авторадиолиза меченых веществ стало предметом широкого, но не систематического рассмотрения. Однако возрастающее с каждым годом разнообразие используемых радиопрепаратов, некоторые из которых чрезвычайно лабильны, широкий спектр практически доступных в настоящее время радионуклидов (в том числе, ультракороткоживущих) в различных химических и физических формах и особенно

применение соединений исключительно высокой удельной активности (100%-обогащение, многократно меченные вещества) -делают актуальным детальное изучения проблемы авторадиолиза. Помимо общего исследования этого явления представляется необходимым расширение самих границ понятия авторадиолиз и обсуждение в связи с этим определенных эффектов, тесно примыкающих к явлению саморазложения и способных искажать результаты экспериментальных работ или затруднять синтез меченых соединении.

Цель работы. 1) Разработка методов синтеза широкого ряда меченых физиологически активных Ы- и Б- производных ['^тиомочевины, включая гетероцнклы ряда 2-амино-2-тиазолина, 2-амино-5,6-дигидротиазина, а также [3з5]тиоокиси бициклофосфорильной структуры; 2) исследование эффектов авторадиолиза указанных соединений, воздействующих на радиохимическую чистоту, а также на их реакционную способность; 3) исследование механизма авторадиолиза некоторых [155]ФАВ, включая его химическое и радиационное моделирование; и 4) поиск различных способов защиты от авторадиолиза [355]ФАВ этого класса.

Научная новизна и практическая ценность работы.

1. Впервые разработаны удобные и дающие высокие радиохимические выходы методы синтеза таких [358]ФАВ, как: аллилтиомочевина; широкий спектр производных 2-амино-2-тназолина и 2-амнно-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазина; Б-аллил- и -ю-галогеналкилизотиомочевииы; фосфинилметилизотиурониевые соли и окиси мстил и арил бис-(изотиурониометил)фосфинов; тиоокиси 4-замещенных бициклофосфатов.

2. Обнаружено существенное влияние эффектов авторадиолиза на кинетику и состав продуктов гетероциклизации Ы-аллилтиомочевины, определена структура аномальных продуктов этих реакций, проведено их химическое и радиационное моделирование.

3. На основании моделирования авторадиолитических процессов предложены новые синтетические методы гетероциклизации И- и Б-производных тиомочевии.

4. Определены основные продукты авторадиолиза [355]-производных изотиомочевпн.

5. Найдена новая реакция [О5]тиомочевины с соединениями трехвалентного фосфора, инициируемая эффектами авторадиолиза.

6. Предложена удобная модель для изучения авторадиолиза и поиска способов защиты от него. Разработаны способы хранения

меченых производных тиомочевнны и перспективного радиолнпшда [ъЗ]тиоокиси 4-этилбициклофосфита.

Публикации и апробации работы. По материалам диссертации опубликовано 25 печатных работ. Ряд разделов работы был представлен в виде пленарных докладов на II Всесоюзном совещании «Биологически актипные соединения, меченные радиоактивными изотопами» (Звенигород, 1988) и XVII Всесоюзной конференции «Синтез и реакционная способность органических соединений серы» (Тбилиси, 1989). Материалы работы докладывались на Симпозиуме стран-членов СЭВ «Органические соединения, меченные радиоактивными изотопами» (Ленинград, 1981); XVI Всесоюзной конференции по химии и технологии органических соединений серы и сернистых нефтей (Рига, 1984); на I, II и III Всесоюзных совещаниях «Биологически активные соединения, меченные радиоактивными изотопами» (Звенигород, 1985, 1988, 1991); на Всесоюзной конференции но химии непредельных соединений (Казань, 1986); на VI Международной конференции по органическому синтезу (Москва, 1986).

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 120 страницах, содержит 10 рисунков, 25 таблиц и состоит из введения, трех глав, выводов и списка литературы. В литературном обзоре изложены, систематизированы и критически проанализированы основные сведения об авторадиолпзе меченых органических соединении и способах защиты от него.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

В настоящей работе в качестве объектов исследования, представляющих практическую и теоретическую ценность в свете современных требований к меченым ФАВ, выбраны Б-, Ы-алифатические и гетероциклические производные [ъ5]тиомочевины. Соединения этого класса характеризуются высокой и разнообразной физиологической активностью, проявляя нейропротекторные. противовоспалительные, радиозащитные, антигистаминные, противораковые, росторегулируюшие и другие спойства. В диссертации разработаны удобные радиохимические методы синтеза ФАВ этого класса и исследованы эффекты авторадиолиза, влияющие не только на сохранность и радиохимическую чистоту этих веществ, ио и на кинетику, состав продуктов и направление их реакций.

I. СИНТЕЗ И РЕАКЦИИ ¡У-АЛЛИЛТИОМОЧЕВИИЫ, МЕЧЕННОЙ СЕРОЙ-35, (I*). ВЛИЯНИЕ АВТОРАДИОЛИЗА.

I. I. ЦИКЛИЗАЦИЯ ТИОМОЧЕВИНЫ В ПРОТОННЫХ КИСЛОТАХ.

Мы обнаружили, что гетероциклизация N-аллилтиомочевины (I*), меченной ссрой-35, под действием протонных кислот приводит к целому спектру соединений, что противоречит результатам синтетической практики, использующей эту реакцию для количественного получения производных 5-метил-2-амино-2-тиазолина (II), представляющих существенный интерес как ФАВ.

С целыо исследования указанного явления мы сопоставили составы продуктов циклизации тиомочевины I, меченной серой-35 и немеченой.

М-["Ъ5]аллилтиомочевнну (I*) получали изотопным обменом с элементной серой-35. Удельная радиоактивность полученной тиомочевины I* составляла 42.5 - 43.0 мКи/г (~5.0 Ки/моль). Контроль за чистотой препарата I*, а также определение состава продуктов его превращений осуществляли методом радиохроматографии. Во всех случаях наблюдали четкое разделение исходного вещества и продуктов реакции. В экспериментах, если не указано иначе, использовали тиомочевину I* с радиохимической чистотой не менее 99%.

Анализ реакционных смесей циклизации "холодной" тиомочевины I показал, что практически единственным ее продуктом при нагревании в водных растворах протонных кислот (НХ, X = CI, Br, HSOj) является 5-метил-2-амино-2-тиазолин (II). При этом наблюдалось образование следовых количеств изомерного («аити-Марковниковского») 2-амино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тназина (III) (не более 1.5% содержания соединения III в смеси при 100% глубине протекания реакции), а в случае растворов bbSO.i содержание гетероцикла III не превышало 0.5%. Состав продуктов реакции определяли методом спектроскопии ПМР, при этом анализировали концентрированную реакционную смесь.

Кроме того, методом ПМР спектроскопии была исследована циклизация тиомочевины I в 1.0 моль/л растворе 02504 в Э20 при 95°С в ампуле ЯМР спектрометра. В этом случае также не наблюдалось образования никаких иных продуктов циклизации.

nh.

NH-iii

I

ii

кроме гетероциклов И и III, причем содержание последнего не превышало 0,5 % даже при глубоких степенях превращения.

В этих же условиях циклизация тиомочепины I*, меченной eepoii-35, приводит под действием водных растворов галогенводородных кислот помимо тиазолина II и дигидротиазина III к аномальным продуктам реакции - 5-галогенметил-2-амнно-2-тиазолипам (IVa.o) и 5-галоген-2-амино-5,6-дигидро-4Н-1,3-тиазинам (Va,6), а под действием раствора серной кислоты - 5-оксиметил-2-амино-2-тиазолину (IVb). Кроме того, во всех случаях было обнаружено существенное возрастание (по сравнению с циклизацией холодном тиомочевины I) содержания дигидротиазина III в реакционной смеси, иногда достигающего 20%.

■V"=

нх

н,0

+ 111 + ы +

S^N

n11.

IV

IV, V а Х=С1, б X=Br, IV в Х=ОН

Т

нн. V

X

Мы также обнаружили (табл. I, доверительный интервал приведен для вероятности Р = 0.95), что количество аномальных продуктов циклизации в этих реакциях возрастает с увеличением: 1) удельной радиоактивности исходной тиомочевины I*; 2) концентрации кислоты; 3) содержания ионов галогена в растворе. При этом особенно заметным оказывается влияние кислотности среды. В разбавленных водных растворах кислот (С0 2 0.1 моль/л) соединения IV пли V практически не образуются, независимо от удельной активности тиомочевины I*, в то же время образуется неидентифицнрованный продукт (VI), по всей видимости полимерной природы, содержание которого увеличивается при понижении концентрации кислоты и достигает 15 - 20% (при концентрации кислоты менее 0.05 моль/л).

Необходимо также отметить, что во всех случаях содержание 5-членных гетероциклов IV существенно превосходило количество их 6-членных изомеров V (в соотношении 95 : 5). Для идентификации этих продуктов мы провели их встречные синтезы и показали идентичность хроматографичеекпх констант продуктов реакции и эталонных соединений во всех используемых системах растворителей.

Таблица /. Суммарное содержание (%) аномальных продуктов IV а (пли б) и V а (или б) при циклизации при 100° тиомочевииы 1*(С0 = 0.1 моль/л) в водных растворах кислот (100% глубина превращения)

УДЕЛЬНАЯ Выход (%) аномальных

УСЛОВИЯ АКТИВНОСТЬ продуктов IVa+ Va

тиомочевины I* (или IV6 + V6)

Ки/моль

0.1 моль/л HCl 5.0 1.5 ±0.7

0.5 моль/л HCl 5.0 3.9 ±07

1.0 моль/л HCl 5.0 9.1 ±3.0

1.0 моль/л HCl 0.5 7.3 ± 2.5

0.1 моль/л HB г 5.0 1.8 ±0.5

0.5 моль/л НВг 5.0 4.8 ±0.8

1.0 моль/л НВг 5.0 10.9 ± 1.3

0.5 моль/л НВг 0.5 4.2 ± 1.6

1.0 моль/л НВг 0.5 8.0 ± 2.2

1.0 моль/л НВг 0.05 4.7 ± 1.9

1.0 моль/л НВг + 0.05 5.0 11.0 ± 1.0

моль/л КВг

1.0 моль/л НВг + 0.1 5.0 11.3 ± 1.1

моль/л КВг

1.0 моль/л НВг + 0.5 5.0 14.0 ± 1.1

моль/л КВг

1.0 моль/л HCl+ 0.5 5.0 12.3 ± 1.4

моль/л NaCI

Нами впервые разработан "С-ЯМР-метод доказательства строения изомерных гетероциклов IV и V, основанный на существенном различии в спектральных характеристиках углеродного атома тиоамидиновой группы в 5- и 6-членных гетероциклах.

При исследовании циклизации "холодной" тиомочевины I в 1.0 моль/л растворе HCl в присутствии [3r,CI]NaCl (2.0 моль/л, удельная активность 0.05 мКи/ммоль) мы также обнаружили образование тиазолина IVa , достигающее 3-7 %.

Мы изучили кинетику циклизации тиомочевины I* в водных растворах кислот и показали, что накопление цикла И хорошо подчиняется уравнению для необратимой псевдомономолекулярной реакции. Так, для реакционной системы

ki к5 II -- I -- VI

IV

где к[, кз, кз, kj, ks - константы скоростей соответствующих стадий, для накопления гетероцикла II справедлива следующая зависимость:

d[II] / dt = k, х [I], тогда t

[II] = k,xi[l]dt (l)

0

Константы скорости образования тиазолина II k| находили методом графического интегрирования в соответствии с уравнением (I), линеаризуя экспериментальные данные в координатах { [II]; i(I] dt ). Результаты обработки методом МНК данных аналитической зависимости (1) представлены в табл. 2 (доверительный интервал приведен для вероятности Р = 0.95).

Таблш(а 2. Константы скорости (к| х Ю4, с'1) образования тиазолина II при циклизации тиомочевины I* (С0 = 0.1 моль/л; удельная активность 5.0 Ки/моль) в водных растворах кислот

УСЛОВИЯ КИСЛОТА

энцентрация кислоты Температура, ° НС1 НВг

(моль/л) С

0.10 100 0.079 ±0.012 0.170 ± 0.058

0.50 100 0.53 ±0.05 0.65 + 0.06

1.00 100 1.65 ±0.18 1.97 ±0.50

1.00 ПО 4.03 ±0.48 6.18 ± 0.32

1.00 90 0.61 ±0.12 1.51 ±0.42

1.00 80 0.27 ±0.02 0.31 ±0.11

С другой стороны, если все параллельные процессы убыли тиомочевины I* подчиняются уравнению для необратимой псевдомономолекулярной реакции, то и суммарная убыль вещества I* должна подчиняться этому уравнению. Тогда:

-с1[1*]/сй = к5х[1*], гдек5=к, + к2+ к,+ к4 + к5, или 1п[1*] = 1п[1*]0-к5х1, (2)

Однако обработка экспериментальных данных по уравнению (2) во всех случаях не приводила к линейной зависимости (и не давала удовлетворительной корреляции между параметрами уравнения). Это показывает, что не все конкурентные реакции, приводящие к убыли тиомочевины I*, являются реакциями первого порядка. На рисунке 1 представлены кинетические кривые циклизации тиомочевины I* в растворе серной кислоты (0.5 моль/л), из которых следует, что в отличие от тиазолина II основное накопление циклических соединений III и IVb происходит в первые 5-10 минут реакции. Такие же кинетические зависимости были обнаружены и при циклизации тиомочевины I* в других протонных кислотах.

минуты

Рис. 1. Содержание (%) продуктов циклизации тиомочевины I* (С„ = 0.1 моль/л) в водной H2S04 (С0 = 0.5 моль/л) при 100°С .

Основной причиной такого явления представляются эффекты вторичного авторадиолиза исходной тиомочевины I*. Р-Частицы, образующиеся за счет распада серы-35 (средняя энергия р-излучения серы-35 Еч, = 0.049 МэВ, средний пробег частиц в воде равен 40 мкм), эффективно взаимодействуют с молекулами растворителя, приводя к образованию большого числа первичных продуктов радиолиза водно-кислотных растворов. Реакции этих продуктов радиолиза с тиомочевиной I* способны приводить к генерированию реакционноспособных эпитио-радикалов VII, подобных частицам, образующимся при восстановлении гетероциклов IVa,6 и Va,б металлами в кислой среде. Только образованием бициклической структуры VII можно объяснить

существенное увеличение выхода 6-членного гетероиикла III при циклизации тпомочевины I* по сравнению с циклизацией холодного тиокарбамида I. Реакция интермедиата VII с ионами галогена или Н20 приводит к аномальным продуктам IV и V.

Н20-ДЛ/~~ еач, н, он ,0, н2, н202, ...

'ЗЦ

н2с

N4

N1-1.,

Н3С

НС-<

NH NH-,

Б- уН

N4,

IV + V

VII

Без дополнительных физико-химических исследований природы интермедиатов VII трудно однозначно интерпретировать их реакционную способность. Однако имеющиеся данные по радиолизу производных тиомочевины свидетельствуют об относительно высокой стабильности тиокарбамидных радикальных частиц, причиной которой является делокализация электрона тиоамидиниевой группировкой. Возможны и другие механизмы инициирования аномальных превращений меченой тиомочевины I* (в частности, влияние растворенного кислорода или накопление радиолитических примесей в «твердой» тиомочевине I*).

В данной работе в качестве модели авторадиолиза тиомочевины I* был использован внешний у-радиолиз холодной тиомочевины I в водных растворах серной кислоты. Радиационно-хнмические процессы исследовали, облучая растворы тиомочевины I в открытых стеклянных пробирках на установке "Гамма-200" (источник у-излучения Сб, мощность поглощенной дозы 4.63x10 " Гр/с). Методом ПМР исследовали состав продуктов ее радиолиза в 1.0 моль/л растворе 0250.) в ЭгО. Мы обнаружили, что

L,

í"

радиолитические превращения соединения I в среде протонных кислот происходят очень легко (в интервалах доз 0.1 - 1.0 Гр) и во многом напоминают его термическую циклизацию (рис. 2). ; Основным продуктом

|i _ « радиолиза оказался гетероцикл II,

,-' i в то же время было обнаружено

достоверное увеличение

содержания изомерного

дигидротиазина III (до б - 7 %) по сравнению с циклизацией холодной тиомочевины I. В реакционной смеси был обнаружен также и тназолин IVb, однако его содержание было очень незначительным (не более 2 %). Хотя, как известно, механизмы радиолиза и авторадиолиза отличаются, полученные

результаты подтверждают

возможность радиолитического образования радикальных частиц нашему мнению, являются ответственными за

Рис.2. Спектры ПМР реакционных смсссй. полученных при(а)кипячении и(б) радиолизе тиомочевины 1 о D:S0j/D;0 (100% глубина превращения тиомочевины I)

vii, которые, ПО аномальные кинетику и состав продуктов этой реакции.

I. 2. МОДЕЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ. ГАЛОГЕН- И ГПДРОКСИ-ЦИКЛИЗАЦИЯ ТИОМОЧЕВИНЫ I.

При исследовании бромирования тиомочевины I* мы также обнаружили существенную зависимость состава продуктов этой реакции оттого, какой изотоп серы содержитЫ-аплилтпокарбамид.

(

О

вг,

еюн

IV6 + Ve +

50% >20%

nh2 >10%

+ VI +

продукты окисления

> 15%

Основным продуктом взаимодействия холодного тиокарбамида I с бромом в абсолютном спирте ( при 0 - 20" С) является тиазолин 1Уб (более 95%), тогда как его меченый аналог I* дает помимо указанного вещества также его изомер Уб, сольвоаддукт и продукты

полимеризации и окисления. Видимо, в основе такого явления лежит автораднолитическое генерирование тномочевиной I* радикальных частиц типа VII.

Учитывая ото, одной из задач работы было исследование поведения аллилтиокарбамида I в процессах гапогенирования или гидроксилированпя, часто имеющих радикальную (или радикально-цепную) природу.

Гетероциклизация N-аллилтиомочевин I под действием йода и брома, приводящая к соответствующим солям 5-галогенметил-2-амино-2-тиазолина, известна давно и широко используется в синтетической практике для получения производных ряда 2-амино-2-тиазолина и их аналогов. В то же время при хлорировании тиомочевин I первоначально образующиеся 5-хлорметил-2-амино-2-тиазолины (IVa) под действием хлора быстро подвергаются деструкции. Поэтому до настоящего исследования для получения соединений IVa использовали многостадийный путь на основе дигидротиазин-тиазолиновой перегруппировки.

Мы исследовали взаимодействие различных производных тиомочевины I с рядом хлорирующих агентов, в том числе с N-хлорсукцинимидом, хлористым сульфурилом и трет-бутилгипохлоритом. Под действием этих реагентов наблюдалась окислительная (радикальная) деструкция тиомочевин I, приводящая, также как и воздействие хлора, к целому спектру соединений (дисульфиды, сульфиды, сульфокислоты, аплилмочевина, элементная сера и т.д.). Мы провели поиск новых селективных хлорирующих радикальных агентов. Особый интерес в этом плане представляли а-хлорнитрозоалканы VIII, разнообразно взаимодействующие с различными мягкими нуклеофилами. В настоящей работе впервые показано, что взаимодействие хлорнитрозоалканов VIII с тиомочевииами I селективно приводит к образованию тиазолинов IVa.

Реакция гладко протекает в кислой среде, тиазолнпы IVa выделяются практически количественно. В нейтральной или основной среде происходит исключительно деструкция тиомочевин. На основании анализа состава продуктов этих реакций можно предположить, что ключевая стадия механизма процесса состоит либо в галогенфильной реакции тиомочевин I и нптрозо производных VIII с образованием промежуточных формамидинсульфенилхлоридов, либо в мягком радикальном (или цепном ион-радикальном) генерировании атомарного хлора соединениями VIII.

С1"

v"

\

к2

N О

НС1

С1

с1

я'

V

нс1

н2о/еюн

VIII

1

Б^М + n нс1

\Ма

Я', (З2 = Н, А1ку1, Агу1, ЫНК

Наиболее интересным продуктом аномальной гетероциклизации меченой тиомочевины I* является спирт 1Ув, являющийся представителем трудно доступного ряда производных 2-амино-2-тиазолина. Мы впервые нашли возможность прямого гидроксилирования тиомочевины I (по аналогии с авторадиолитической циклизацией тиомочевины I*) при воздействии на нее перекиси водорода в органических кислотах. Выход целевого продукта такой гидроксициклизации составляет около 40%.

й1

n н2°2

^ Т к2 —-

э нс02н

I

и2 = н, а1ку1, агу! |\/в

он

Разработанные на основе анализа авторадиолитических реакций тиомочевины I* методы циклизации тиомочевин I имеют большое практическое значение. Впервые удалось получить ряд тиазолинов 1\/а и 1Ув, а также новые ФАВ этого класса, меченные серой-35.

I. 3. АВТОРАДЦОЛИЗ ТИОМОЧЕВИНЫ I*.

Тиомочевина I является высоко чувствительным объектом к воздействию электрофильных и радикальных агентов, поэтому

представляется удобной моделью для изучения эффектов авторадиолиза и поиска средств защиты ог него.

Методом тонкослойной радиохроматографии мы изучили зависимость радиохимической чистоты (как одной из самых важных характеристик радиопрепаратов) тиомочевины I* от условий ее хранения и различных стабилизирующих добавок.

Для определения радиохимической чистоты тиомочевины I* сопоставляли радиоактивность соответствующей ей

хроматографической зоны с активностью всей хроматограммы, причем проводили аналнз хроматограмм, проявленных не менее, чем в трех различных хроматографических системах.

Наиболее важным условием сохранения радиохимической чистоты тиокарбамида I* оказалась его исходная чистота (табл. 3).

Таблица 3. Зависимость радиохимической чистоты (РХЧ) тиомочевины I* (0.005 Ки/ммоль) от условий хранения в растворах с _радиоактивной концентрацией 0.5 мКи/мл _

Температура, исходная РХЧ (%) РХЧ (%)

РАСТВОРИТЕЛЬ °С РХЧ (%) через через

неделю месяц

этанол +20 99 95 85

этанол +5 99 98 90

этанол -20 99 99 95

без растворителя +5 99 99 90

этанол +20 95 85 65

этанол +5 95 90 80

этанол -20 95 95 85

ацетон -20 95 90 75

1.0 моль/л +5 95 80 50

водный НС1

этанол - п-ксилол -20 95 85 70

(1:1)

без растворителя +5 95 90 75

этанол +20 80 40 -

этанол +5 80 45 -

этанол -20 80 60 менее 20

Существенное влияние на сохранность тиомочевины 1* проявили также температура и способ хранения. Соединение I* хорошо хранится в кристаллическом виде и в разбавленных растворах в абсолютном этаноле. Значительный ингибирующий эффект на

процесс авторадиолиза тиомочевины I* оказали различные добавки (табл. 4).

Таблица 4. Влияние различных добавок на радиохимическую

чистоту (РХЧ) тиокарбамида 1* при его хранении в абсолютном этаноле при 5°С (радиоактивная концентрация 0.5мКи/мл)

Добавка исходная РХЧ РХЧ РХЧ РХЧ

(ее содержание в РХЧ (%) (%) (%) (%) (%)

растворе) через через через через

48 час 96 час 168 час 240 час

без добавок 80 61 51 45 20

(5%) 80 51 43 38 20

п-ксилол

(5%) толуол 80 67 58 51 43

(5%) бензол 80 71 65 63 50

(5%) фенол 80 72 66 60 53

(5%) ионол 80 74 68 64 57

(5%) фенол + 80 76 73 71 65

(5%) РРИ,

(5%) ионол + 80 77 76 74 70

(5%) РР1п

(5%) 80 55 40 менее -

НБСНгСНгОН 20

без добавок 95 94 94 90 со

(5%) ионол 95 95 94 94 90

(5%) ионол + 95 95 95 94 94

(5%) РРИ,

Особенно эффективными стабилизирующими добавками оказались нонол и его смесь с трифенилфосфином, последняя представляет собой оригинальную добавку, эффективно ингибирующую вторичный автораднолпз различных меченых соединений, исследованных в данной работе.

Главными радиоактивными продуктами авторадиолиза тиомочевины I* оказались полимерные вещества (типа VI), продукты окисления и элементная сера-35. Состав продуктов авторадиолиза тиокарбамида I* существенно зависит от растворителя и условий хранения.

II. СИНТЕЗ И РЕАКЦИОННАЯ СПОСОБНОСТЬ Б-ПРОНЗВОДНЫХ [^(ТИОМОЧЕВИНЫ И ИССЛЕДОВАНИЕ ЭФФЕКТОВ ИХ АВТОРАДИОЛИЗА.

II. 1. СИНТЕЗ 5-Г,55|ЛЛЛИЛИ ЮТ110М0ЧЕВШ1Ы

Б-Аллилизотиомочевина (IX), формально являясь изомером тиомочевины I, принципиально отличается от последней как по методам получения, так и по химическим свойствам. В настоящей работе получена изотиомочевина IX*, меченная серой-35, при этом впервые обнаружено, что ее синтез можно осуществить не только прямым аллилпрованием ['^тиомочевины, но и с помощью «фрагментарного» обмена изотиомочевины IX с меченым тиокарбамидом, легко проходящем при нагревании веществ в спирте.

Таким образом мы получили также изотиомочевину IX*, меченную С-14. В подобный фрагментарный обмен вступают также Б-бензилизотиомочевины.

Изотиомочевина IX* оказалась существенно более устойчивой к воздействию апторадиолиза по сравнению с тиомочевиной I*. В то же время мы обнаружили, что в отличие от холодного вещества IX меченая изотиомочевина IX* при хранении в виде растворов в различных растворителях (спирты, водно-спиртовые смеси, ДМФЛ) или в виде кристаллов (гидробромид, перхлорат и пикрат изотиомочевины IX*) претерпевает авторадиолитическое разложение с выделением заметного количества меченой тиомочевины. Методом тонкослойной радиохроматографин показано, что при хранении гидробромида изотиомочевины IX* (0.05 Ки/ммоль) при 5°С в кристаллическом виде и в виде этанольного раствора (0.5 моль/л) в течение 30 дней образовалось соответственно 10% и 17% меченой тиомочевины. Мы обнаружили такой же эффект и в случае 5-[|4С]аллилизотиомочевины.

II. 2. СИНТЕЗ З-ГАЛОГЕНАЛКИЛИЗОТИОМОЧЕВИН II ИХ

В настоящей работе впервые разработаны удобные методы синтеза соединений, содержащих в алифатической цепи атом галогена и изотиурониевую группу. В качестве модельных соединений были получены взаимодействием избытка а>,(о'-дибромалкана с тиомочевиной простейшие представители этого ряда веществ: гидробромиды 5-2-бромэтилизотиомочевины (X), Б-З-бромпропилизотиомочевины (XI), 5-4-бромбутилизотиомочевины (XII) и 5-5-бромпентилизотиомочевины (XIII).

IX

IX*

АНАЛОГОВ, МЕЧЕННЫХ СЕРОН-35.

минуты

Рис. 3. Содержание (%) промежуточных S-бромалкнлнзотиомочевнн ([1| - X, (2| - XI, [3| - XII, [4| - XIII) в реакции тиомочеоипы (С™ - 0.1 моль/л) с днбромалканлмн (С„ = 0.05 моль/л) в этаноле при 100ЛС

С целью оптимизации метода синтеза этих соединений мы детально изучили кинетику взаимодействия ['!55]тиомочевины с терминальными дибромалканами в спирте. Показано, что во всех случаях концентрация промежуточного монотиурониевого производного на всех глубинах превращения незначительна (рис. 3). Обнаружено также, что эта реакция осложнена образованием побочных продуктов. В случае 1,2-дибромэтана и 1,3-дибромпропана циклизуется интермедиат, приводя к 2-амино-2-тиазолину (XIV) и дигидротиазину III соответственно. В случае бромистого метилена циклизуется диизотиурониевое производное, лишь реакции 1,4-дибромбутана и 1,5-дибромпентана протекают гладко, приводя в конечном итоге только к диизотиурониевым продуктам. Мы определили константы скоростей всех стадий этих реакций (табл. 5).

Вг - (СН2)П - Вг

к,

Б

NN

Вг-(СН2)П-Б-< ^

ЫН3 Вг

X, XI, XII, XIII

п = 2 -НВг п = 3 - НВг

XIV

H2N

т

Б

N4.

Вг"

НЫ

NN3 Вг

п = 1

^Н4Вг

Б Б

н2ы ы^ын2 вг

Таблица 5. Константы скорости реакции [355]тиомочевины (С0= 0.1 моль/л) с терминальными дибромалканами Вг-(СН2)П-Вг (С0= 0.05 моль/л) (к|, л-моль"' с"1) и промежуточными 5-бромалкилизотиомочевинами Вг^СЬУп^СХМНг^Вг'

п ] 2 3 4 5

к|х104 3.14±0.17 \1.2+0.1 48.4±5.0 66.7+3.4 73.5±5.1

кгхЮ" 89.7±6.8 64.5±3.0 116+9 138±10 92.8±3.9

2

Скорость замещения атома брома в молекуле исходного дибромапкана оказалась во всех случаях меньше скорости замещения атома брома в промежуточной

бромалкилизотиомочевине (кг > к|). Кроме того, если для первой стадии реакции (к|) выполняется закон затухания индукционного влияния, то для второй стадии реакции (кг) не наблюдается никакой монотонной зависимости скорости реакции от длины полиметиленовой цепи. Эти данные мы учитывали при разработке методов синтеза соединений X - XIII, меченных серой-35.

Подобный подход мы использозали при исследовании взаимодействия окисей бис(хлорметил)фосфинов (XV) с ["5]тиомочевиной. Разработаны удобные методы синтеза (реакция гладко идет только в трифторэтанолс) и разделения методом ионобменной хроматографии монозамещенных (XVI) и дизамещенных (XVII) изотиурониевых производных этого класса, впервые получены холодные и меченые соединения XVI и XVII.

с1

ЫН,

о 8=< О ын2

; с,

о

II

-р-л

о

ын3 с1

1мн„

ын,

о

II

-Р.-Л

3

ч

ын

о

ны^

ын, с1

мнз С1

xv

XVI

XVII

р = сн3, он, с6н5, 4-сн3с6н4, 4-сн3ос6нф 4-(сн3)2ыс6н4

Соединения Х*-ХШ*, XVI* и XVII*, меченные серой-35, были исследованы с точки зрения их авторадиолитической устойчивости. Наиболее чувствительными к воздействию авторадиолиза оказались гндробромиды X* и XII*, а также дигидрохлорид XVII* (Я = ОН).

В случае соединения X* основным продуктом его авторадиолиза являлся тиазолин XIV*, причем в отличие от холодной изотиомочевины X циклизация меченого вещества X* происходила даже в кислой среде, а также при хранении его в кристаллическом виде при -20°С (при удельной радиоактивности 0.05 Ки/ммоль в течение 30 дней накапливается до 10%тиазолина XIV*).

Соединение XII* оказалось исключительно неустойчивым. При удельной радиоактивности менее 1 мКи/ммоль в течение 30 дней происходила его полная деструкция, независимо от того, как (в растворах, в твердом виде, в присутствии ингибиторов и т.д.) хранилось вещество. Радиоактивные продукты его авторадиолиза не удалось идентифицировать, по всей видимости, они образуются в результате олигомеризации бутенилтиольного фрагмента молекулы.

Мы обнаружили, что при хранении меченого дигидрохлорида диизотиомочевины XVII* (Я = ОН) образуется только один продукт, который удалось идентифицировать с помощью модельного встречного синтеза и 'Н- и "Р- ЯМР спектров. Мы показали, что это вещество представляет собой ранее не известный циклический

дисульфид XVIII (фосфорный аналог природной аспарагусоаоп кислоты). Мы также впервые получили подобные циклические дисульфиды исходя из всех производных XVII. Для этого диизотиомочевины XVII окисляли кислородом воздуха в слабо щелочном (рН « 8) водно-спиртовом растворе, поддерживая постоянный рН добавлением раствора бикарбоната натрия. Выходы составляли 30-65%.

О

s nh3 cl

HN^

NH3 Cl ' XVII

R\ ,0

02

pH = 8 S-S

ЕЮН/Н20

XVIII

я = сн3, он, с6н5. 4-сн3сбн„, 4-сн3осбн4, ф(сн3)21чс6н4

Необходимо отметить, что авторадиолиз диизотиомочевины XVII* (Я = ОН) удалось существенно ингибировать с помощью добавки ионола или (наиболее эффективно) ионола в смеси с РРИт.

II. 3. СИНТЕЗ II СВОЙСТВА ЦИКЛИЧЕСКИХ Р-Г^ГАЛОГЕНАЛКИЛШОТИОМОЧЕВИН.

Циклические изотиомочевины - производные тиазолинов IV и днгидротиазинов V - представляют значительный интерес как потенциальные ФАВ. В настоящей работе мы впервые получили гетероциклы ^*а и 1У*б галогенциклизацией меченой тиомочевины 1*. кроме того аналогично синтезировали [155]5-иодметил-2-амино-2-тиазолин (1У«г, X = I). Авторадиолитическне примеси удаляли хроматографически, что позволило получить соединения IV* (выходы составляли 30-50%) с радиохимической чистотой > 97%.

N4,

ын2 ♦ 40°С

- NHjBr

О

X = Cl, Вг

Изомерные 6-членные гетероциклы V*a и V*6 синтезировали циклизацией соответствующей 2-замещенной 1,3-

ампнопропилизотиомочевины. Удельная радиоактивность гетероциклов IV* и V* составляла 0.005 - 0.01 Ки/ммоль.

Синтез меченых гетероциклов IV* и V* позволил детально изучить механизм и кинетику дигидротиазин-тиазолиновой перегруппировки, протекающей с образованием промежуточных ион-парных эписульфониевых частиц (XIX). Мы впервые с помощью экспериментов с двойной радиоактивной меткой (3'S и ,ЙС1) показали, что в сольволитической реакции наблюдается эффект «внутреннего возврата» анионов хлора (т.е. содержание перегруппированного и меченного только серой-35 гетероцикла IV*a в реакционной смеси существенно превосходит содержание дважды меченного продукта [,r'Cl]-IV*a).

СГ

Na36CI

v*a -— V'^N * - " IV*a + [36CI]-lV*a

ЕЮН/Н20

nh2

XIX

Мы впервые показали что под действием сильных оснований гетероциклы IV и V количественно превращаются в тииранилметилкарбодиимиды (XX), структура которых доказана методами ЯМР- и КР- спектроскопии. Соединения XX стабильны только в сильно основной среде, а под действием кислот полностью

переходят в 5-метил замещенные гетероциклы IV.

+

- НХ ^ Д н , N11 N—С—N—Р _

В-

XX

н+ R = Н, alkyl, aryl

IV

Эти данные были использованы для разработки методов селективного и «сверхбыстрого» Бм-замещения атомов галогена в структурах IV.

Соединения IV* сравнительно устойчивы к воздействию авторадиолиза, что было подтверждено также исследованием внешнего у-радиолиза тиазолина IV*6 в водной среде. В то же время гетероциклы V* менее стабильны. При удельной радиоактивности 0.005 Ки/ммоль гидрогалогениды этих соединений сохраняют удовлетворительную радиохимическую чистоту (> 95%) в течение 30

днем тольк-о при хранении в кристаллическом виде при -20"С. Интересно, что основным продуктом авторадиолиза дигидротиазинов V* оказался перегруппированный продукт IV*.

III. СИНТЕЗ И ЭФФЕКТЫ АВТОРАДИОЛИЗА 4-ЭТ11Л-БПЦИКЛОТИО!1ФОСФАТА, МЕЧЕННОГО СЕРОЙ-35.

4-Ллкил-2,6,7-триокса-1 -(|)осфабиникло[2,2,2]октан-1 -тиоксиды (бициклотнонфосфаты), являясь селективными блокаторамн СГ канатов, обладают исключительно высокими физиологической активностью и токсичностью, а меченные радиоизотопами соединения этого класса используются в настоящее время как радиолиганды для нейрохимии и нейрофармакологии. Одной из задач настоящей работы явился поиск оптимальных методов синтеза меченного серой-35 4-этилбициклотионфосфата (XXI*).

В данной работе мы исследовали изотопный обмен в системе 4-этилбициклотионфосфат XXI - элементная сера-35, до настоящего времени не изученный. Можно предположить, что в отличие от нециклических производных тионфоефорной кислоты, которые не обмениваются с элементной серой-35, соединения XXI вследствие большей стерической доступности атома фосфора в их структуре и способности образовывать спиро-соедипепия, будут способны также образовывать интермедиаты XXII, а следовательно участвовать в изотопном обмене.

+ „з, ^ XX,-

n-2

XXI XXII

Однако, мы обнаружили, что этот процесс не идет и в случае соединения XXI. Анализ реакционных смесей проводили методом тонкослойной радиохроматографии. Реакцию проводили в толуоле, в смеси толуола и амилового спирта (1 : 1) и без растворителя при различной температуре (от 60° до 120"С). При проведении реакции без растворителя даже при температуре не более 100"С наблюдалось заметное разрушение соединения XXI с незначительной тенденцией к вхождению радиоактивной метки.

В настоящей работе показано, что для синтеза соединения XXI*, меченного серой-35, хорошо применим метод сульфурирования соответствующего 4-этилбициклофосфита (XXIII) элементной серой-35, однако его выход и радиохимическая чистота продукта существенно зависят от условий реакции.

О

35«;

ххг

XXIII

При проведении реакции без растворителя (в расплаве реагентов в инертной атмосфере) выход соединения XXI* оказался низким (не более 15%), а при использовании в качестве реакционной среды толуола, п-ксилола или смеси толуол - амиловый спирт (1 : 1) -удовлетворительным (табл. 6). Тиоифосфат XXI* является (как и весь класс бициклофосфатов) весьма лабильной структурой, что проявляется в значительном уменьшении выхода при проведении реакции более б часов. Выход понижается при увеличении удельной радиоактивности элементной серы, что может быть следствием высокой радиационной чувствительности соединения XXI*, которая подтверждается также значительными эффектами авторадиолиза этого вещества при хранении.

Таблица 6. Радиохимический выход (%) тионфосфата XXI* при взаимодействии фосфита XXIII ( С0 = 15 моль/л) с элементной

Время, Удельная Радиохими-

Условия час активность серы-35, мКи/ммоль ческий я) выход ' (%)

п-ксилол, 138° I 0.5 30

п-ксилол, 138° 4 0.5 43

толуол, 110" 1 0.5 22

толуол, 110° 4 0.5 65

толуол, 110° 6 0.5 78

толуол, 110° 10 0.5 50

толуол, 90° 10 0.5 30

толуол, 90° 25 0.5 39

толуол, 110° б 5.0 54

толуол, 110° 6 60 менее 30Ь|

толуол + пентанол-1 (1:1), 6 0.5 71

110°

толуол + пентанол-1 (1:1), 6 0.5 70

добавка ИагБ (0.1 моль/л),

110°

a) Отношение радиоактивности соединения XXI* к радиоактивности всех меченых веществ в реакционной смеси.

b) наблюдается образование большого числа побочных продуктов.

Несмотря на удовлетворительный выход соединения XXI*, его радиохимическая чистота оказалась низкой (только после очистки на колонке ВЭЖХ она составила > 95%).

В работе была исследована применимость в качестве источника серы-35 при сульфурнровании фосфита XXIII доступного и удобного реагента - [^5]тиомочевины. В качестве модельной реакции мы изучили взаимодействие трифенилфосфина с тиомочевиной в различных условиях, анализируя реакционные смеси методом 31Р-ЯМР. Образование тиоокиси трифенилфосфина было зафиксировано в двух случаях:

1) При кипячении эквимолярных количеств РРЬ-„ ССЦ и тиомочевины в хлористом метилене в течение 4 часов (до 40%

5=РР1ъ).

2) При сульфурнровании РРЬ, в модифицированных условиях реакции Мицунобу с использованием диэтилазадикарбоксилата (более 50%).

В отсутствии инициаторов реакция РРИзс тиомочевиной не идет.

В настоящей работе мы впервые обнаружили, что тиомочевипа, меченная серой-35, в отличие от холодной, способна реагировать с РР11, с образованием [355]5=РРЬ3. Реакция протекает в ДМФА, п

толуоле, а также при кипячении в смеси толуола и спирта (I : I).

*

НССЩСН^ -Л/\Г~" НСОМ(СН3)2 НСОМ(СН3)СН2 •, НС(0 )М(СН3)2

• нс(0")м(сн3)г )=э " НССЩСНз) 2 +

ны

э.

мн, ---ы'н,

НСОМ(СН3)СН2-

ны

NN / НД -э. + ррь3 -- э-рри, -- з=ррь|3 + с

МН, МН2 ны

Н2Гд,

Ъ + НСОМ(СН3)2 -- |\|Н2СЫ + НСОЫ(СН3)СН2 • + н2

ни

Вероятно, реакция носит радикально-цепной характер, включающий образование тиильных и фосфоранильных радикалов. Мы провели радиционно-химическое моделирование этой необычной реакции и нашли, что тиомочевипа и трифенилфосфнн

взаимодействуют и под действием у-излучения. Анализ реакционных смесей проводили с помощью 31Р-ЯМР. Наиболее быстро процесс протекает в ДМФА (концентрация каждого реагента около 1 моль/л). При этом образуется около 2 % тиоокиси на 100 рад внешнего у-излучения.

Обнаружено, что реакция меченой тиомочевины с бициклофосфитом XXIII также протекает с удовлетворительным выходом (около 40%). Выход тиоокиси XXI* в реакции фосфита XXIII с [355]тиомочевиной под действием авторадиолиза уступает выходу сульфурирования фосфита XXIII элементной [3:>5]серой, в то же время радиохимическая чистота продукта оказалась более высокой ( 98% после одной кристаллизации).

В работе обнаружено, что наиболее эффективным средством ингибирования эффектов авторадиолиза тиоокиси XXI* является стабилизирующая добавка (ионол - РРИз).

ВЫВОДЫ

1. Разработаны оригинальные методы синтеза и впервые получен ряд физиологически активных циклических и линейных Ы- и Б-производных тиомочевины, меченных серой-35.

2. Обнаружено существенное влияние эффектов авторадиолиза на кинетику и состав продуктов гетероциклизации Ы-[355]аллилтиомочевины.

3. На основании химического и радиационного моделирования авторадиолитических процессов предложены новые синтетические методы галоген- и гидроксициклизации Ы-аплилтиокарбамидов.

4. Изучена кинетика взаимодействия [355]тиомочевины с дигалогеналканами и окисями бис(хлорметил)фосфинов и предложены удобные методы синтеза Б-[ъ5]галогеналкилизотиомочевин и их аналогов.

5. На основании изучения (с применением изотопов 35Э и 36С1) механизма изомеризации циклических (3-галогеналкилизотиомочевин разработаны новые селективные методы Бн-замещения в этом ряду.

6. Определены основные продукты авторадиолиза циклических и линейных Б- и И- производных [355]тиомочевины.

7. Разработан удобный метод синтеза [355]тиоокнси 4-этилбициклофосфита. Найдена новая реакция [355]тиомочевины с соединениями трехвалентного фосфора, инициируемая эффектами авторадиолиза.

8. Предложена удобная модель для изучения авторадиолиза и поиска способов стабилизации соединений, меченных серой-35.

Основное содержание работы изложено в следующих публикациях:

]. С.Е. Ткачепко, Т.П. Трофимова, H.A. Карпа:, В.М. Фсдоссск. Влияние лвторадиолнза на циклизацию ¡Ч'-лллнлтно^очсвнны, меченной серой-35. // Радиохимии. 1998. Т. 40. Вып.: С. 146-149.

2. С.Е. Ткачепко. Д.П. Са.и,пиков, Я.И. Лыс, В.М. Федосеев, B.C. Чурилип. S-Пронзводные тномочевины. XX. Взаимодействие тномочевины с терминальными днбромалканами. // Ж. Орг. Хим. 1983. Т. 19. JVL1 5. С. 988-995.

3.A.A. Голубея, A.A. Мандругип, М.Я. Сенененко, С.Е. Ткачепко. Д.Д. Толстой, B.C. Чурилип, В.М. Федосеев. Сольволнз алифатических и гетероциклических нзотномочевнп как способ получения меченых соединений. // Материалы II Симпозиума стран-членов СЭВ «Органические соединения, меченные радиоактивными иютопамп». (Ленинград. 1981). М. «ЦНИИ Атоминформ». 1982. Часть 2. С. 66-75.

4. С.Е. Ткачепко, U.C. Чури.иш, В.М. Федосеев. Циклизация 2-галогенэтилнзотномочевнн. // Тезисы докл. XVI Всесоюз. Конференции но химии н технологии органических соединении серы н сернистых нефтен. Рига. 1984. С. 119.

5. С.Е. Ткачепко, Д.Д. Толстой, B.C. Чурилип, В.М. Федосеев. Подвижность тноклрбамндного фрагмента в S-аллилнзотномочепинах. //Ж. Орг. Хим. 19S2. T. 18.JV.7. С. 1551.

6. В.М. Федосеев, Я.И. Лыс, СЕ. Ткачепко. Синтез меченых биологически актипных гстерониклов исходя из N^uuiiuiTi!OM04eBi!Hi»i-J5S. // Тезисы докл. 1 Всесоюз. Совещания «Биологически активные соединения, меченные радиоактивными изотопами». (Звенигород. 1985). М. 1985. С. 79-S0.

7. А.И. Путин, СЕ. Ткачепко, В.М. Федосеев. Новая скелетная перегруппировка циклических ß-галогеналкилнзотномочспнн. // Известия All СССР. Серия химия. 1986. „Y»3. С. 733-734.

8. С.Е. Ткачепко, А.Н. Путин, B.IF. Фетисов. Механизм взаимодействия N-аллилтнокарбамнда с элсктрофнльнымн агентами. // Тезисы докл. Всесоюз. Конференции «Химия непредельных соединений». Казань. 1986. С. 140.

9. S.E. Tkachenko, A.N. Pushin, V.M. Eetlosecv. Regiocontrol in synthesis and S\-reactions of cyclic ß-halogenalkylisothionreas (CHATU). // Abstracts of papers VI Int. Conference oil Organic Synthesis. Moscow. 1986. P. B-082.

10. СЕ. Ткачепко, А.Н. Путин, В.М. Федосеев. Направление присоединения лмннов к 2,3-дибромпропнлнзотиоинанату. // Ж. Общ. Хим. 1987. Т. 57. jYîIO. С. 2400-2401.

11. С.Е. Ткачепко, В.М. Федосеев. Саморадиолнз меченых соединений н проблема защиты от него. // Тезисы докл. II Всесоюз. Совещания «Биологически актнпиые соединении, меченные радиоактивными изотопами». (Звенигород. 19SS). M. 1988. С. II.

12. С.Е. Ткачепко, Я.П. Лис, В.М. Федосеев. Синтез меченых S-[3,w-галогеналкилнзотиомочепни. // Тезисы докл. II Всесоюз. Совещания «Биологически активные соединения, меченные радиоактпппымп изотопами». (Звенигород. 1988). М. 1988. С. 70-71.

13. A.A. Маслов, С.Е. Ткачепко, Г.Я. Первухин. Жидкостный ецпнтплляцнонпын состап для измерения радиоактивности биологических образцов. И Авторское свидетельство СССР. Л; 1604016. 1988.

14. Е.С. Дубровская, ¡O.A. Насип, AJI. Яркевич, С.Е. Ткаченко, E.H. Цветков. Фосфиннлмстилнзогиуроннсвые соли, проявляющие росторсгулнруюшую активность. // Авторское свидетельство СССР. jYs 1587871. 1988.

15. С.Е. Ткаченко, В.М. Федосеев. Изомеризация циклических ß-галогеналкнлнзотиомочевин. // Тезисы докл. XVII Всссоюз. Конференции «Синтез и реакционная способность органических соединений серы». Тбилиси. 1989. С. 25.

16. A.II. Пушиц, С.Е. Ткаченко. Идентификации циклических ß-галогеиалкнлизотномочевин но спектрам ЯМР С-13. II Тезисы докл. XVII Всссоюз. Конференции «Синтез и реакционная способность органических соединений серы». Тбилиси. 1989. С. 158.

17. Ю.Г. Кулишов, С.Е. Ткачспко, А.Н. Яркевич, A.N. Бовин. II Тезисы докл. XVII Всссоюз. Конференции «Синтез и реакционная способность органических соединении серы». Тбилиси. 1989. С. 405.

18. Е.С. Дубровская, Ю.Г. Кулшиов, С.Е. Ткачспко, ¡O.A. Васин, А.Н. Бовин, E.H. Цветков. Днхлорнды окисей метил- н прил-бис-(изотнуронномет11л)фосфииов, проявляющих росторегулнрующую активность. // Авторское свидетельство СССР. jYî 4467803. 1989.

19. Л.Т. Золотарева, А.Н. Яркевич, Ю.Г. Кулишов, С.Е. Ткаченко, U.M. Федосеев, E.H. Цветков. Синтез S-фосфинилмстилнзотномочсвнн н оценка нх раднозащнтнон активности. // Хнм.-Фарм. Журнал. 1990. Т. 24. jVs 3. С. 22-24.

20. С.Е. Ткачспко, Т.П. Трофимова, U.M. Федосеев. Г^-Аллилтиокарбамнд-3^ - удобная модель для изучения эффектов авторадиолиза и поиска путей защиты от него. // Тезисы докл. III Всссоюз. Совещания «Биологически активные соединения, меченные радиоактивными изотопами». (Звенигород. 1991). M. 1991. С. 86-87.

21. Т.П. Трофимова, Х.А. Сиппшс, U.M. Федосеев, U.E. Соколов, С.Е. Ткаченко. Синтез и устойчивость бипнклотионфосфатов, меченных серой-35. // Тезисы локл. III Всссоюз. Совещания «Биологически активные соединении, .меченные радиоактивными изотопами». (Звенигород. 1991). ¡VI. 1991. С. 70-71.

22. М.А. Орлова, Т.П. Трофимова, H.H. Трошииа, Л. Т. Золотарева, U.M. Федосеев, С.Е. Ткачспко. Воздействие радномоднфикаторов на серииовыс протелзы при нх у-облученин. // Вестник Московского университета. Серия 2. Химия. 1993. Т. 34. №5. С. 465-470.

23. A. Ruzdokky, О. Lomova, I). Sukhachev, S. Tkachenko, O. Raersky, /V. Zeßrov. Structure Generation of New Antiradiation Compounds. // In: QSAR and Molecular Modelling: Concepts, Computational Tools and Biological Applications. Eds.: F. Sanz, J. Cimillo, and F. Mnnnut. Pi ous Science Publishers. 1995. P. 661-662.

24. С.Е. Ткачспко, Т.П. Трофимова, U.M. Федосеев. Аномальная гетероннклнзацня N-аллилтиомочепниы, меченной ссрои-35, в среде протонных кислот. // ХГС. 1998. (в печати, принято Редакцией 11. II. 97).

25. С.Е. Ткаченко, А.Н. Путин, В.Б. Соколов, U.M. Федосеев, II.И. Мартынов. Цнклизания производных N-аллнлтиомочсвииы под действием а-хлорннтрозоалканов. // ХГС. 1998. (в печати, принято Редакцией 19. II. 97).