Синтез, спектроскопия ЯМР и конформации трисахаридов с вицинальным диэкваториальным замещением тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ имени Н.Д. ЗЕЛИНСКОГО

РГ6 ОД

О ' • , , - , . . .. . . » / ■ • ' ,

На правах рукописи

УДК 543.422.25:547.458.057.114.012

ХАТУНЦЕВА Елена Александровна

СИНТЕЗ, СПЕКТРОСКОПИЯ ЯМР И КОНФОРМАЦИИ ТРИСАХАРИДОВ С ВИЦИНАЛЬНЫМ ДИЭКВАТОРИАЛЬНЫМ ЗАМЕЩЕНИЕМ

(Специальность 02.00.03 органическая химия)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Москва 1997

Работа выполнена в Институте органической химии имени Н.Д. Зелинског Российской академии наук.

Научные руководители;

доктор химических наук Нифантьев Николай Эдуардович доктор химических наук Шашков Александр Степанович Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор А.И. Усов кандидат химических наук, ведущий научный сотрудник ВЛ. Львов Ведущая организация:

Московский Государственный Университет имени М.ВЛомоносова, биологический факультет.

Зашита состоится "»3 " ОС/ПЛО^Л. 1997 г. в "//-^ часов на заседании специализированного совета К.002.62.02 в Институте органической химии имени НД. Зелинского РАН (117913, Москва, Ленинский проспект, 47, конференц-зал).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Инстюуга органической химии имени НД. Зелинского РАН

Автореферат разослан ^ 'ССН'/ЦлблЯ 1997 г.

Ученый секретарь специализированного совета К.002.62.01 ИОХ РАН,

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Актуальной задачей современной химии углеводов зляется разработка новых методов структурного анализа и изучения особен-остей пространственного строения олиго- и полисахаридов. Одним из аиболее информативных физико-химических методов исследования структуры 1ких соединений представляется спектроскопия ЯМР, и в первую очередь, |3С-МР. Для анализа строения олиго- и полисахаридов по данным их спектров С-ЯМР разработаны специальные компьютерные программы, использующие 1зы данных, которые в настоящее время содержат информацию о дисахарид-ых блоках. Однако, этих данных оказалось недостаточно для анализа спектров щгосахаридов, содержащих вицинально дизамещенные моносахаридные ¡енья, т. е. включающих вицинально разветвленные фрагменты и линейные рагмеиты со внутренней (1-2)-связью. Анализ спектров таких соединений :обенно сложен, что связано со специальными спектральными эффектами, ,1 ¡ванными внутримолекулярным взаимодействием моносахаридных |местителей, сближенных благодаря их вицинальному расположению.

В этой связи представляется важным исследование природы таких |)фектов и их взаимосвязи со структурными параметрами на примере мало ¡ученных, но широко распространенных в природных объектах соединений с щипальным диэкваториальным замещением. Именно к такому типу »единений относятся объекты, исследуемые в данной работе.

Цель работы. Синтез и исследование спектральных (13С-ЯМР) и шформационных особенностей трисахаридов с вицинальным диэкваториаль-лм дизамещением, в том числе, с 3,4-диэкваториальным дизамещением на тмере 3,4-ди-О-гликозилированных производных метил-а-Ь-рамнопирано-|да, а также 1,2-диэкваториальным дизамещением на примерах линейных исахаридов со внутренней (1-2)-связью, родственных группоспецифическим [игосахаридам Н типа I (Ье11) и Н типа 2.

Научная новизна. Впервые синтезирована группа 3,4-ди-О-гликозилиро-нных производных метил-а-Ь-рамнопиранозида (общей формулы А), содер-ицих моносахаридные заместители с аО-, (50-, аЬ- и рЬ-конфигурациями и зличающихся между собой комбинацией абсолютных и аномерных конфи-раций заместителей.

Синтезированы группы трисахаридов общей формулы Б и В, родственных уппоспецифическим олигосахаридам Н типов 1 и 2, в которых варьируются

заместители при С-2 или С-5 остатка на восстанавливающем конце и аномерна; Конфигурация Ь-фукозного звена.

Получены и полностью интерпретированы спектры 'Н- и |3С-ЯМ1 синтезированных трисахаридов групп А, Б и В и соответствующих составля ющих дисахаридов. В спектрах |3С-ЯМР трисахаридов определены отклонени) от аддитивности. Проведен конформационнын анализ синтезированных олиго сахаридов с привлечением данных молекулярно-механических расчетов и экспе риментов по ядерным эффектам Оверхаузера (ЯЭО). Выявлена взаимосвяз] между отклонениями от аддитивности в спектрах |3С-ЯМР трисахаридов I строением терминальных моносахаридных остатков.

В ходе синтеза трисахаридов групп Б и В проведено исследованш структурных факторов, определяющих эффективность гликозилированш гликозилацетатами в присутствии триметилсилилтрифлата.

Практическая ценность работы. Получены спектральные данные (13С-ЯМР) для трисахаридов типов А-В, необходимые для создания базы данных дл> компьютерного бездеструктивного структурного анализа разветвленных олиго- I полисахаридов. Синтезированы ценные олигосахаридные модели для гликобио-логических исследований.

Публикации и апробация работы. Материалы диссертации опубликованы в 6 статьях. Основные результаты работы докладывались на XVII (Оттава Канада, 1994) и XVIII (Милан, Италия, 1996) Международных Углеводны> Симпозиумах и IV Международном Симпозиуме по Конформационным Исследованиям Углеводов (Аоста, Италия 1996).

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на страницах, содержит рисунков, таблиц и состоит из введения, обзора литературы, обсуждения результатов, экспериментальной части, выводов и списка литературы, включающего ссылок.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Настоящая работа является частью программы по синтезу, спектральному и конформационному исследованию олигосахаридов с вицинальным дизамеще-нием и посвящена изучению двух типов соединений с вицинальным диэквато-риальным замещением - в положениях 1,2 и 3,4.

В качестве объектов для исследования 3,4-диэкваториально замещенных структур были выбраны 3,4-ди-О-гликозилированные производные метил-а-Ь-рамнопиранозида (структура А), а для исследования 1,2-диэкваториального замещения - линейные метил-гликозиды трисахаридов (структуры Б и В), родственные группоспецифическим олигосахаридам крови Н типов 1 и 2.

Гоединения, содержащие такие фрагменты, широко распространены в природе I входят в состав разнообразных гликоконъюгатов и полисахаридов.

Проведенные ранее исследования величин отклонений от аддитивности в пектрах 13С-ЯМР вицинально разветвленных трисахаридов показали, что они ависят в первую очередь от абсолютной и аномерной конфигурации терми-1апъных моносахаридных остатков. Поэтому, для получения спектральных анных, необходимых для анализа 3,4-диэкваториально разветвленных оединений, нами были исследованы 3,4-ди-О-гликозилированные метил-а-Ь-пмнопиранозиды 1-16 со всеми возможными комбинациями аномерных и бсолютных конфигураций моносахаридных заместителей (аО, рО, аЬ и рЬ).

Х-(1->3)х

а-Ь-ЯИа-ОМе

1 а-Э-Мап а-Э-Мап 9 а-Ь-Юга а-Э-Мап

2 а-О-Мап р-О-СТс 10 а-ЬЮи Р-О-СТс

3 а-О-Мап а-Ь-ЯЬа 11 а-Ь-Юш сс-ЬЯНа

4 а-О-Мап Р-ЬРис 12 а-Ь-ЯЪа Р-Ь-Иис

5 р-0-С1с а-О-Мап 13 Р-Ь-рис а-Э-Мап

6 Р-Э-Ос Р-Э-Ос 14 р-ЬРис р-О-Ис

7 Р-0-С1с а-Ь-ЯЬа 15 Р-ЬРис а-Ь-Шт 1-16 8 Р-0-С1с Р-Ь-Рис 16 Р-Ь-Рис р-Ь-Рис

Изучение свойств трисахаридов с 1,2-дизамещением проводилось на римерах соединений 17-28, содержащих 1,2-дизамещенный остаток р-Б-длактопиранозы, в которых варьировался заместитель при С-2 (для соединений 7-22) и при С-5 (для соединений 23-28) остатка на восстанавливающем конце.

21 11=Н 22

27 Ю=ОН; Я2=Н 28

Выбор этих моделей определен результатами конфирмационного анализа метил гликозидов трисахаридов Н типов 1 (17) и 2 (23), показавшего, что на их кон формационное состояние влияет взаимодействие терминальной фукозы с заме стителем при С-2 в структурах типа 1 и при С-5 в структурах типа 2.

1. Синтез трисахаридов с вициналъным диэкваториальным дизамещепием.

1-1. 3,4-Ди-О-гликозшированные метил-а-Ь-рамнопиранозиды.

В качестве исходного соединения в синтезе трисахаридов 1, 6, 11 и 16 I одинаковыми моносахаридными остатками при О-З и 0-4 рамнопиранозиль ного фрагмента использовался метил-2-0-бензоил-а-Ь-рамнопиранозид 31 с( свободными ОН-группами при С-3 и С-4. Диол 31 получали с общим выходои 80% взаимодействием метил-а-Ь-рамнопиранозида (29) с триэтилортобензоаток и дальнейшим региосслективным раскрытием образующегося бициклическогс ортоуфира 30 в условиях кислотного гидролиза (схема I).

Бис-гликозилированием диола 31 (схема 2) с помощью 2,3,4,6-тетра-О-бензоил-а-О-манно- (32), 2,3,4-три-0-бензоил-а-Ь-рамно- (33) и 2,3,4-три-О-бензоил-а-Ь-фукопиранозилбромида (34) в условиях реакции Гельфериха (табл I, оп. 1,2,3), и 2,3,4,6-тетра-0-бензоил-а-0-глюкопиранозилбромида (35) в присутствии трифлата серебра в качестве промотора гликозилирования (оп. 4) получены защищенные трисахариды 36-39 с выходами 47, 90, 65 и 80%, которьк далее стандартными методами переводили в целевые трисахариды 1, 11, 16 и 6.

ОЕ1

Схема ]

Мап

Юш

Рис

ас

31

1,11,16,6

36 Я=Мап 38 11= Рис

37 К=ЯЬа 39 К=&с

Схема 2

При гликозилировании диола 31 бензобромфукозой (34) наблюдалось образование группы продуктов, что было связано с нарушением стереоизби-рательности р-фукозилирования и образованием а-фукозилированных соединений. Поэтому нами была изучена возможность синтеза трисахарида 16 по схеме, альтернативной описанной выше и включающей ступенчатое наращивание олигосахаридной цепи, начиная с получения (1-4)-связанного дисахарида 41 и его избирательно защищенных моногидроксильных производных 42 и 43.

Фукозил-рамнозид 41 и его Г,2'-цис-связанный изомер 48 были синтезированы с выходами 66 и 18% гликозилированием метил-2,3-0-изопропилиден-а Ь-рамнопиранозида (40) бензобромфукозой (34) в условиях реакции Гельфе-)иха и последующим гидролизом (схема 3, табл. 1, оп. 5). Конфигурация фукоз-1ых остатков в продуктах 41 и 48 установлена на основании величин КССВ гс,2' в спектрах 'Н-ЯМР (7,8 и 3,5 Гц). Далее диол 41 переводили в моногидрок-ильное производное 42 в условиях синтеза бензоата 31 из рамнозида 29.

Также, был синтезирован бензилированный аналог дисахарида 42, соеди-[ение 43, для которого ожидалась большая реакционная способность ОН-группы. 1оследний получали в результате последовательности реакций, включавших ритилирование спирта 42 перхлоратом трифенилметилия в присутствии 2,4,6-оллидина и последующие дебензоилирование, исчерпывающее бензилирование детритилирование. Общий выход моногвдроксильного производимо 43 составил 87%.

Гликозилированием тетрабензоата 42 фукозилбромидом 34 (табл. 1, оп. 6) ыл получен трисахарид 38 с выходом 62%. В случае бензилированного акцеп-эра 43 (оп. 7), как и ожидалось, реакция протекала заметно эффективнее и риводила к трисахариду 44 с выходом 83%.

Синтез других трисахаридов с (З-Ь-фукопиранозильным остатком при 0-4, )единений 4, 8 и 12, был проведен гликозилированием дисахаридных пред-ественников 42 и 43 с помощью гликозилбромидов 32,33 и 35 (табл. 1, оп. 8-10).

Таблица 1. Результаты синтезов защищенных олигосахаридов и свободных метил-

гликотдоа трисахаридов 1-16.

Опыт Гликозил-акиептор Гликозил -донор, экв. Промотор Продукт Выход, % Свободный трисахарид

1 31 32, 3,5 Hg(CN>2 36 47 1

2 31 33, 2 Hg(CN)2 37 90 11

3 31 34, 2 Hg(CN)2 38 65 16

4 31 35,2 AgOTf 39 80 6

5 40 34, 1,5 Hg(CN)2 41 66

48 18

6 42 34, 2 Hg(CN)2 39 62

7 43 34, 1,5 Hg(CN)2 44 83

8 42 32, 2 Hg(CN)2 46 42 4

9 42 35, 3,5 AgOTf 47 63 8

10 43 33, 1,5 Hg(CN)2 45 96 12

11 49 35, 3 AgOTf 50 69 2

12 49 33, 3 Hg(CN)2 51 52 3

13 52 32, 2 Hg(CN)2 53 73 5

14 52 30, 3,5 Hg(CN)2 54 60 7

IS 55 32, 2 Hg(CN)2 56 74 9

16 55 35, 2 AgOTf 57 92 10

17 58 32, 2,5 Hg(CN)2 59 94 13

18 58 35, 2 AgOTf 60 94 14

19 58 33, 2 HR(CN), 61 88 15

49 Rl=Ac R2=H

50 Ri=Ac R2=Glc

51 Rl=Ac R2=Rha

55 Ri=Ac R2=H

56 Rl=Ac R2=Man

57 Rl=Ac R2=Glc

52 Ri=Ac R2=H

53 Ri=Ac R2=Man

54 Rl=Ac R2=Rha

58 Rl=Ac R2=H 59Ri=Ac R2=Man

60 Ri=Ac R2=Glc

61 Ri=Ac R2=Rha

Трисахариды 2, 3, 5, 7, 9, 10 и 13-15 были получены исходя из шсахаридных блоков 49, 52, 55 и 58, синтезированных в данной лаборатории )анее. Результаты гликозилирования соединений 49, 52, 55 и 58 суммированы в габл 1.

После удаления защитных групп в защищенных трисахаридах были полу-1ены соединения 1-16. Аналогично из соответствующих предшественников 5ыли получены и составляющие дисахариды 62-69.

1.2. Линейные трисахариды с (1-2) связью, родственные группоспецифическим олигосахаридам Н типов 1 и 2.

Целевые трисахариды 17-28, были получены по схеме, включающей тервоначальное построение галактозил-гликозидных блоков и их дальнейшее 2'-Э-фукозилирование. В качестве' метода р-галактозилирования метил-гликозид-1ых предшественников 71-76 было выбрано гликозилирование 1,2,3,4,6-пента-Э-ацетил-р-О-галактопиранозой (70) в присутствии триметилсилилтрифлата ;ТМ50Т{). Результаты проведенных реакций приведены в табл. 2.

3-О-Галактозилирование глюкозаминида 71 протекало неэффективно и зыход лактозаминида 77 составлял 30%. Напротив, в случае глюкозвда 72 с «лорбензильной защитной группой при 0-2 реакция протекала с высоким зыходом (85%). При галакгозилировании 2-дезокси-глюкозида 73 наблюдали :го полную деструкцию. Поэтому требуемый дисахарид 79 был получен глико-¡илированием акцептора 73 ацетобромгалактозой в присутствии Цианида и эромида ртути (II).

4-О-Галактозилирование глюкозаминида 74 и хиновозида 75 протекало >ффективно (выходы дисахаридов 80 и 81 - 84 и 86%). Взаимодействие 70 с ссилозидом 76 сопровождалось частичной деструкцией акцептора, чем и объясняется низкий выход продукта реакции 82 (42%).

Дисахариды 77-82 О-дсзацетилированием переводили в соответствующие гетраолы, которые далее обработкой диметаловым ацеталем бензальдегцда в трисутствии ТзОН превращали в 4',6'-0-бензилиденовые производные 83-85 и >5-97. Их последующее региоизбирательное бензоилирование приводило к :оответствующим З'-О-бензоилированным продуктам 86-88 и 98-100. Только в случае диола 95 реакция сопровождалась образованием 2'-бензоата (выход 20%).

Х-(1->3)-а-Ь-Ю1а-ОМе X

У-( I -й)-а-Ь-Ю1а-ОМе У

62 а-О-Мап

63 р-0-01с

64 а-1-Ю1я

65 р-ЬРис

66 а-О-Мап

67 р-О-Ис

68 а-НУш

69 р-Ь-Рис

Таблица 2. Гликозилирование галактозил-акцепторов 71-76 1,2,3,4,6-пента-О-ацетил-Р-Б-галактопиранозой (70) в присутствии триметилсилилтрифлата в дихлорметане.

Опыт | Гликозил-донор Гликозил-акцептор Продукт Выход, %

3-0-1ликозшт>ование 0*с

\—\

д п А \

1 70' 71 ¡^РМЬ 77 30%

2 70" 72 Я=ОВпС1 78 Я=ОВпС1 85%

3 70а • 73 И=Н 79 Я=Н 0%

4- О-гликозиливование

4 70б НО-"^-"Д 84%

Црми МРМЪ

80

?

но—^-"-"Я __ОМ»

\»п Овл

5 70* 75 Я=Мс 81 Я=Ме 86%

6 70а 76 Я=Н 82 Я=Н 42%

* Использовали 1,2 экв. гликозил-донора 70. 6 Использовали 2 экв. гликозил-донора 70.

83 11=ЫРМ11

84 К=ОВпС1-4

85 Я=Н

86 R=NPhth

87 Я=ОВпС1-4 +34/ 88 Я=Н

Схема 4

89 К=№МЬ

90 Я=ОВпС1-4

91 Я=Н

17 19 21

18 20 22

-92 11=КРЫЬ -93 К=ОВпС1-4 -94 Я=Н

95 Я1=КРЬЛ, Я2=СН20Вп

96 Я1=ОВп, Я2=Ме

97 Ю=ОВп, Я2=Н

98 Я^РМЬ, Я2=СН20Вп

99 Я1=ОВп, Я2=Ме

100 Я1=ОВп, Я2=Н

^ 1

ВхО 101 Ю^РЫИ, Я2=Вп, ЯЗ=СН2ОВп, Я4+Я5=РЬСН 107

23 --- 102 Я1=ЫРШ11, Я2=Н, ЯЗ=СН2ОН, Я4=Я5=ОАс 103 Я1=ОВп, Я2=Вп, ЯЗ=Ме, Я4+Я5=РЬСН 108-- 109 24

25 -- 104 Я1=ОВп, Я2=Вп, ЯЗ=Ме, Я4=Я5=Н 105 Я1=ОВп, Я2=Вп, ЯЗ=Н, Я4+Я5=РЬСН 110-- 111 26

27 -- юб Я1=овп, Я2=вп, яз=н, я4=я5=н 112-- 28

Схема 5

На завершающем этапе синтеза трисахаридов 17-28 проводилось фукози-лирование дисахаридных акцепторов 86-88 и 98-100 бензобромфукозой (34) в условиях реакции Гельфериха (схемы 4 и 5). Из дисахаридов 86-88 были получены пары а- и p-фукозилированных трисахаридов 89 и 92, 90 и 93, и 91 и 94 в соотношениях 9:1, 2:3 и 1:2, соответственно (схема 4). Фукозилирование акцепторов 98-100 также давало а- и p-фукозилированные трисахариды в соотношениях 1:2 для пар трисахаридов 101, 107, и 103, 109, и в соотношении 1:4 для трисахаридов 105 и 111. Изомерные продукты фукозилирования дисахаридов 98-100 были разделены методом ВЭЖХ в виде 4',6'-ди-0-ацетатов (102 и 108), и диолов (104, 110) и (106, 112). Конфигурацию остатков фукозы в полученных трисахаридах определяли на основании величин констант J\¿ в спектрах 'Н-ЯМР.

Полученные защищенные производные далее стандартными методами переводили в целевые трисахариды 17-28, кроме которых были также получены и составляющие их дисахариды 113-120.

-----

он в*

113 R1=NHAc

114 Ю=ОН

115 Ri=H

116 Ri=NHAc; R2=CH2OH

117 R!=OH; R2=CH3

118 Ri=OH; R2=H

119

120

2. Спектроскопия 'Н- и 13С-ЯМР и конформационный анализ олигосахаридов.

Для всех олигосахаридов были получены спектры 'Н- и 13С-ЯМР, отнесение сигналов в которых проводили с использованием 'Н-'Н, ,3С-'Н и 'Н-13С двумерной корреляционной спектроскопии ЯМР.

Одной из основных задач данной работы было определение и анализ отклонений величии химических сдвигов сигналов в спектрах 13С-ЯМР от аддитивности (для краткости далее обозначаемых ДА). Величины АД представляют собой разницу между экспериментальными и вычисленными значениями химических сдвигов сигналов для соответствующих углеродных атомов в трисахаридах и составляющих дисахаридах. Поиск их зависимости от конформацион-ных особенностей трисахаридов также являлся одной из целей данной работы.

11

11

2.1. 3,4-Ди-О-гликозилированные производные метил-а-Ь-рамнопиранозида. Расчет величин ДД в спектрах |3С-ЯМР трисахаридов 1-16 проводили по уравнениям (1)-(3), первое из которых использовалось для расчета. ДД5С атомов бисгликозилированной рамнозы, а уравнения (2) и (3) - для определения величин ДД6С-Г и ДД5С-1", соответственно".

ДД5С/=5С?гСэксп-5С^рас= 5С^ГСэксп"т(бС4ьКЬаОМс_Д5С1(|-.з)эксп+Л5С/(1-.4)эксп)= =8С*гСжсп—(8С4иШОМе—(5С/(1_»3)ЭКСП .5С4[_ЮшОМе)+(5С^1-.4)эксп—5С4ьЯ1иОМе))=

эксп бС/(|_»3)эксц 6С/(1-,4)эксп+5С41.ЩшОМе (О

ДД5С1' =5СГтсэксп_5СГ(|_,з)эксп (2)

ДД5С1"=6С1"тсэксп1-5С1"(1_,4)ЭКС11 (3)

Таблица 3. Отклонения от аддитивности в спектрах ,3С-ЯМР разветвленных трисахаридов 1-16, м.д._

№ Стереохи-мический код ДД

С-1 С-2 с-з С-4 С-5 С-6 С-1 С"-1

1 ООЦаос -0,45 -0,65 -о,о; -3,5 0,55 0,15 0,3 -1Д

2 ООЦсф -0,15 -0,4 -0,3 -3,6 -0,35 -0,15. -0,1 -1,1

3 ОЬЦаа -0,35 -1,3 -0,55 -1,1 -0,25 -0,15 -1,0 -0,1

4 01Х,аР -0,15 0,8 -1,65 -3,5 1,05 -0,15 -0,4 -0,2

5 ОБЬ,рос -0,3 -1,1 0,2 -3,3 0,15 0,05 -0,9 -1,1

6 ооцрр -0,2 -0,1 0,15 -2,35 0,1 -0,2 -0,3 -0,8

7 01Х,Ра -0,25 -0,2 0,4 -1,2 0,1 -0,1 -0,2 -0,1

8 эщрр -0,3 0,35 0,5 -2,5 0,7 -0,4 0,75 0,1

9 ЬОЬ.аа 0,1 0,1 1,8 -2,9 0,45 -0,3 0,4 -0,6

10 ЬОЦсф 0,15. 0,2 1,35 -3,0 0,3 0,35 0,4 -0,7

11 ЬЬЦаа 0,3 0,2 2,2 -0,1 0,5 0,3 0,5 0,4

12 ИХ.оф 0,1 0,9 -1,5 -1,4 0,9 0,3 -0,5 0,3

13 ЬОЦра -0,35 -0,4 -1,8 -4,7 0,1 -0,15 -0,75 -1,4

14 иоцрр -0,35 -0,5 -0,85 -0,3 0,45 -0,25 -0,05 0,5

15 И-Цра -0,25 -0,7 -0,75 -1,4 0,05 -0,25 -0,45 0

16 ых,рр -0,25 0,65 -2,6 -3,0 1,1 0,15 -0,45 -1,0

'здесь и далее номера атомов углерода без штрихов относятся к дизамещенному моносахаридному остатку, а с одним и двумя штрихами - к моносахаридным заместителям при О-З и 0-4, соответственно.

В уравнениях (1)-(3) SCirc, SCi^-,6C/(i-,4), и 6C4.LRhaOMc - химические сдвиги С/ -тых атомов в спектре 13С-ЯМР исследуемого трисахарида, соответствующих ему (1-3)- и (1-4)-связанных дисахаридов и незамещенного метил-а-L-рамнопиранознда, а величины Д6С/(1_»з)эксп и Д5С/(1_,4)Э|ЖП - эффекты гликози-лирования [Lipkind, G. М.; Shashkov, A. S.; Knirel, Y. A.; Vinogradov, Е. V.; Kochetkov, N. К. Caibohydr. Res. -V.175 (1988).-Р.59-75.), которые представякл собой разницу химических сдвигов в дисахариде и моносахариде.

Найденные величины АД представлены в табл. 3. Почти для всех трисаха-ридов 1-16 наблюдались значительные величины ДД. Для гликозидированных атомов С-3 и С-4 дизамещеннош рамнсиного осгажа ДД изменялись от -4,7 до 2,2 м.д.

Взаимосвязь между спектральными и конформационными характеристиками в трисахаридах 1-16 рассматривалась нами в рамках концепции Гранта и Чини, согласно которой на величину химического сдвига атома углерода оказывает влияние взаимодействие протона, связанного с ним, с другими протонами. Возникающее в результате этого взаимодействия изменение химического сдвига Д5С описывается полуэмпирическим уравнением A6C=168Oxexp(-2,671r)xcos0, где г - расстояние между взаимодействующими протонами, а © - угол между векторами С-Н и Н-Н (рис. 1). В это уравнение входят геометрические параметры, которые зависят от конформационного состояния олигосахаридов. Традиционно, дисахаридный фрагмент олигосахарида представляется как образование из жестких моносахаридных остатков, соединенных кислородным мостиком и его

/7......\

Рисунок 1. а) Взаимодействие протонов, влияющее на величину химического сдвига сигнала атома углерода, б) Взаимодействие аномерного и трансгликозидного протонов, влияющее на величины химических сдвигов сигналов атомов углерода, соединенны кислородным мостиком.

конформационное состояние описывается величинами углов вращения вокруг межзвеньевой гликозидной связи (Ф) и связи 0-Сп (V), где Сп - атом углерода агликона, участвующий в образовании межзвеньевого мостика. Тогда, зависимость Д5С от геометрических параметров дисахаридного фрагмента можно выразить в виде Д5С=_Д<р) при фиксированной величине V и Л5С=_Дц/) при фиксированной величине <р.

На рис. 2А и 2Б приведены графики зависимостей Д5С=Дср) при ц/ф 60° (рис. 2А) и Д5С=.Ду) при фиксированной величине фф 0° (рис. 2Б). В качестве Уф и фф использовались среднестатистические абсолютные величины ч/ф и фф для наиболее устойчивых конформеров дисахаридов. Из рис. 2Б видно, что

«менение угла у вносит наибольший вклад в отклонение от аддитивности -ликозидированного атома углерода, для которых обычно и наблюдаются 5ольшие АД.

исунок 2. Зависимость величины изменения химического сдвига 13С ЯМР для номерного атома углерода терминального остатка С-1' (или С-1") (кривая а) и шкозидированного атома углерода (кривая б) от диэдральных углов ф (А) и у (Б).

Необходимо отметить, что уравнение Гранта и Чини не было цаптировано для расчета углеводных фрагментов, связанных гликозидной вязью, и поэтому может использоваться только для качественной оценки гличин ДД, сопровождающих конформационные изменения в олигосахаридах.

Для исследования характера конформационных изменений (1-3)- К Обвязанных дисахаридных фрагментов при переходе от трисахаридов 1-16 к вставляющим дисахарндам 62-69 нами был проведен их конформационный чализ с привлечением экспериментов по ЯЭО, а для трисахаридов 1, 9 и 11 и 1сахаридов 62, 64, 66 и 68 - молекулярно-механических расчетов по методу ЕСОР с обработкой результатов расчета по методу Монте-Карло*. Величины ЭО измерялись при предоблучении аномерных протонов терминальных оносахаридных остатков.

"асчеты проводились Г.В. Затонским (ИОХ РАН)

Рассмотрим основные результаты конформационного анализа трисаха-ридов 1-16, сравнивая конформационные особенности сначала для (1-4).-, а затем и для (1-3)-связанных дисахаридных фрагментов в составе различных трисахаридов. Для качественной оценки величин ДД нами использованы средние значения диэдральных углов ф и у, найденные из конформационных карт для дисахаридных фрагментов грисахаридов и соответствующих дисахаридов.

Для трисахаридов 1, 5, 9 и 13, содержащих дисахаридный фрагмент а-О-Маи-(1-4)-а-Ь-Ш1а, были найдены большие отрицательные величины ДДС-4 и ДДС-Г (табл. 3). Такой эффект, наиболее вероятно, связан с большей удаленностью протонов Н-4 рамнозы и Н-1" остатка маннозы в этих трисахаридах по сравнению с дисахаридом 66. При предоблучении Н-1" в соединениях 1, 5, 9, 13 и 66 наблюдались ЯЭО на Н-4 и Н-6. 'Ото свидетельствует о положении Н-1"

л

"1 -1

б)

Рисунок 3. Кросс-сечение поверхности засе-ленносги* конформеров в координатах ср-ц/ для дисахаридного фрагмента а-0-Мап-(1-4)-а-Ь-Я11а в дисахариде 66 (а) и трисахаридах 1 (б) и 9 (в).

*Изолшши соединяют точки с равной заселенностью конформеров.

ежду" Н-4 и Н-5, чему соответствует отрицательная величина угла <р. Для сахарила 66 соотношение ЯЭО на Н-6 и Н-4 равно 1:5, а для трисахаридов 1, 9 и 11 оно заметно больше и составляет 1:3, 1:4, 1:3,5 и 1:3, соответственно. >этому, в трисахаридах Н-1" находится, в среднем, дальше от Н-4, чем в диса-эиде 66, что коррелирует с найденными для них отрицательными отклонении от аддитивности.

Сравнение конформационных карт для дисахарида 66 (рис. За) и трисаха-да 1 (рис. 36) показало, что, в среднем, наиболее заселенная область для агмента a-D-Man-(l-4)-a-L-Rha характеризуется уменьшением диэдрального ia ч< по сравнению с дисахаридом, в среднем, от -10° (для дисахарида) до -40° 1Я трисахарида), тогда как угол ф остается равным -40°. На рис. 2Б видно, что :личение средней абсолютной величины угла vy от 10° до 40° должно вызывать шчину ДДС-4 около -3,5 м.д., что соответствует экспериментальному значе-ю -3,5 м.д.

При сравнении конформационных карт трисахарида 9 (рис. Зв) и дисаха-ца 66 (рис. За) видно, что при переходе от дисахарида к трисахариду наиболее „ пленные конформеры перемешаются в область меньших углов <р от -40° для :ахарида до -20° для трисахарида и у от 10° до -40°. Увеличение абсолютной шчины v должно вызывать отрицательное отклонение от аддитивности для 4 около -3,5 мл. (см. рис. 2Б), а уменьшение абсолютной величины ф -южительное отклонение 1,0 м.д., что в сумме составляет около -2,5 м.д. Это 1чение качественно соответствует наблюдаемому для трисахарида 9 значитель-чу отрицательному отклонению, равному -2,9 м.д.

Рассмотрим информационное состояние фрагмента p-D-Glc-(l-4)-a-L-а в трисахаридах 2, 6, 10 и 14. При предоблучении Н-1" в трисахаридах 2, 6, и дисахариде'Ш наблюдался ЯЭО на Н-4, а в трисахариде 10 - ЯЭО на Н-4 1-6. Сравнение относительных величин ЯЭО на Н-4 для трисахаридов 2, 6, и и дисахарида 111 показало, что среднее расстояние между Н-1" и Н-4 мало 1енилось при переходе от дисахарида к трисахаридам. Однако, для трисаха-юв 2, 6, и 10 наблюдались значительные отрицательные ДДС-4. Из .этого шера видно, что тенденции в изменении величин ЯЭО и АД не всегда совпа->т, так как ДА зависят не только от расстояния между протонами (как ЯЭО), и от величин углов ф и у.

Для трисахаридов 3, 7, 11 и 15, в состав которых входит фрагмент a-L-i-(l-4)-a-L-Rlia, были найдены небольшие отрицательные значения ДДС-4. 11 предоблучении Н-1" в этих трисахаридах и дисахариде 68 были найдены О на Н-4, величины которых различаются незначительно. Это свидетельст-г о том, что расстояние между Н-Г и Н-4 мало изменилось при переходе от к трисахаридам, что соответствует наблюдаемым малым значениям величин АД.

1 ■ • I 1 1 к

>1(1« 1 • • • >

— - г Н|-Г—!-1-1— - щ

Рисунок 4. Кросс-сечение поверхности заселенности конформеров в координатах ф-у для дисахаридного фрагмента а-Ь-ЯЬа-( 1 -4)-а-Ь-И1а в дисахариде 68 (а) и трисахариде 11 (б).

Молекулярно-механический расчет для трисахарида 11 (рис. 46) показа некоторое изменение конформации его дисахаридного фрагмента а-Ь-Ю1а-(1 4)-а-Ь-Ю\а по сравнению с дисахаридом 68 (рис. 4а). Увеличение среднего зна чения угла у от 10° до 40° должно вызывать (рис. 2Б) отрицательную величин ДАС-4 около -2,0 м.д., а уменьшение угла ф (рис. 2А) - положительную вели чину около 1,5 м.д., что в сумме дает -0,5 м.д. Эта величина качественно соот ветствует экспериментальному значению -0,1 м.д.

Для трисахаридов 4, 8, 12, и 16, содержащих фрагмент р-Ь-Рис-(1-4)-а-1_ Юи, были найдены большие отрицательные значения ДДС-4. При предоблуче нии Н-1" в этих трисахаридах и дисахариде 69 были измерены ЯЭО на Н-4 ] Н-6. Сравнение их соотношений - 1:3 для дисахарида 69, но 1:5 для трисаха ридов 4, 8 и 12, показало, что, в среднем, в трисахаридах протон Н-1" боле удален от Н-4, чем в дисахариде 69, что соответствует найденным отклонения! от аддитивности.

Важно отметить, что для соединений 4, 8 и 12, так же, как и для трисаха ридов 1, 5, 9 и 13, включающих фрагмент а-0-Мап-(1-4)-а-Ь-Ш1а, был] найдены одинаковые величины отклонений от аддитивности для С-1" и С-4 ] соотношения ЯЭО на Н-4 и Н-6, что свидетельствует о родственном характер конформационных изменений, не зависящем от природы моносахаридног заместителя в положении 3 остатка разветвленной рамнозы.

Для соединения 16, в спектре 13С-ЯМР которого также наблюдали значи тельное отрицательное отклонение химического сдвига С-4 (-3,0 м.д.) и С-1

1.7

1,0 м.д), данные по ЯЭО не были получены из-за перекрывания сигналов укопиранозильных остатков при О-З и 0-4.

Перейдем теперь к рассмотрению конформационных особенностей (1-3)-зязанных дисахаридных фрагментов. Для трисахаридов 1-4, которые содержат исахаридный фрагмент ct-D-Man-(l-3)-a-L-RhaOMe были найдены небольшие грицательные отклонения от аддитивности. Соотношения ЯЭО на Н-3 и Н-2 чя трисахаридов 1 (1:2,5), 2 (1:3), 3 (1:2,5) и 4 (1:2,7) и дисахарида 62 (1:1,7), змеренных при предоблучении Н-Г различаются мало, чем можно объяснить ебольшие наблюдаемые величины ДАС-3. Однако, из конформационных карт тя трисахарида 1 (рис. 56) и дисахарида a-D-Man-(l-3)-a-L-RhaOMe (рис. 5а) идно, что углы ф к f для наиболее заселенных конформеров изменяются в эстаточной степени сильно, чтобы наблюдалась заметная отрицательная вели-ина ААС-3. Это, наиболее вероятно, связано с тем, что применяемая нами рограмма (как и другие, используемые в настоящее время для теоретического онформационного анализа углеводов) недостаточно точно отображает конфор-ационное распределение в области "перевернутых" конформеров с углами у коло 180°. Экспериментально (ЯЭО) в (1-4)-связанном дисахариде 66 была бнаружена значительная заселенность "перевернутых" конформеров, обеспе-ивающих взаимодействие Н-1" и Н-3 (относительная величина ЯЭО на Н-3 эставляет 10% по отношению к ЯЭО на Н-4). Эти конформеры обеспечивают ополнительный сильнопольный сдвиг С-3 в дисахариде 66. В (1-4)-связанном исахарицном фрагменте трисахарида 1 "перевернутых" конформеров не обна-уокено, что, очевидно, должно привести к слабопольному смещению химичес-

а)....... " "'" ...... "б)" "

исунок 5. Кросс-сечение поверхности заселенности кбнформеров в координатах ф-vy тя виаиарипного фрагмента a-D-Man-(l-3)-a-l^raia в дисахариде 62 (а) и трисахариде 1 (б).

кого ель и га С-3, который частично компенсирует ожидаемый по расчету силь цокольный сдвиг за счет вышеуказанного изменения конформации около (1-3) > ликозидном связи.

В спектрах |3С-ЯМР трисахаридов 5-8, включающих дисахаридный фраг мент р-0-01с-(1-3)-а-Ь-КЬа, были найденные лишь небольшие значения ДДС-и ДДС-Г. Величины ЯЭО на Н-3, измеренные при облучении Н-Г в этих три сахаридах и дисахариде 63, свидетельствует о том, чго расстояния между Н-Г С-3 в этих соединениях примерно одинаковы.

Рисунок 6. Кросс-сечение поверхности заселенности в координатах ф V для дисахарвдного фрагмента а-Ь-Иш (1-3)н -Ь-Юга в дисахариде 64 (а) и трисахарида 9 (б) и И (в).

Исследование конформации фрагмента а-Ь-11Ьа-(1-3 (-а-Ь-ЯКа в трисах; ридах 9-11 представляло особый интерес, так как для них были найдены пал< жительные величины ДДС-3. Поэтому, можно было ожидать, что в этих трисах ридах протоны Н'-1 и Н-3 более .ближены, чем в дисахариде 64 При предобл чении Н-Г в этих трисахаридах были зарегистрирован ЯЭО на Н-2 и Н-3, а щ 64 был нчйден ЯЭО только на Н-3. Из конформациоиных карт для трисахара

1 (рис. 5в) и дисахарида 64 (рис 5а) видно, что при переходе от дисахарида к рисахариду происходит измегсние средних величин углов ф от 50°до 40° и у от 5° до 0° для наиболее заселенных конформеров. Это должно вызывать положи-гльную величину ДДС-3 около +2 м.д., что соответствует найденной величине ДС-3 для 11 (+2,2 м.д). Однако, для трисахарида 9 изменение средних величин глов ф от 50° до 30° и у от 15° до -20° по расчету не должно приводить к оявлению Д4С-3. что противоречит экспериментальному значению ДДС-3 +1,8 .д. Вероятно, что несоответствие рассчитанной и экспериментальной величин ызвано тем, что для оценки средних величин ДД применялся качественный одход, а не строгий расчет с учетом заселения всех конформеров. Для трисаха-ида 12 было найдено небольшое отрицательное отклонение на С-3. Для него, ис же как и для дисахарида 64, не наблюдался ЯЭО на Н-2, что свидетельство-ш> о подобии конформаций фрагмента а-Ь-КЬа-(1-3)-а-Ь-Ш1аОМе в этих эединениях. Сравнение величин ЯЭО на Н-3 для 12 и 64 показало, что в зисахариде 12 Н-Р более удален от Н-3, чем в дисахариде а-Ь-Юга-(1-3)-а-1--ЬаОМе, чем и вызвано небольшое отрицательное отклонение.

Для трисахаридов 13-15, содержащих остаток р-Ь-фукозы при О-З, были айдены небольшие отрицательные ДДС-3. При предоблучении Н-Г в этих жсахаридах и дисахариде 65 были измерены ЯЭО на Н-2 и Н-3, соотношение эторых для 65 было несколько меньше (1:2), чем для трисахаридов 13 (1:1). 1(1:1,3) и 15 (1:1,4). Это свндетельсвует об увеличении расстояния от Н-1' до -3 при переходе от дисахарида к трисахаридам и коррелирует с наблюдаемыми ¡личинами ДДС-3.

Таким образом, была обнаружена и изучена зависимость спектральных и информационных характеристик от структурных параметров соединений 1-16. равнение величин ДД, найденных для трисахаридов 1-16 с аналогичными данами для других, ранее изученных серий вицинально диэкваториалъно разветв-:нных трисахаридов показало, что перенесение этих величин между стереохи-пчески подобными трисахаридами некорректно.

2.2. Линейные трисахариды с (1-2)-связъю, родственные группоспецифическим ол игосахаридам Н типа 1 (Ье?).

Расчет величин отклонений от аддитивности (табл. 4) в спектрах ,3С-ЯМР исахаридов 17-22 проводился по уравнениям (4)-(6):

^С^«1=8С»гСиссп-8С'гСрас= 5С/ГСз*пГ"(5С%10Оа1+ Л5С<(1-2)э1ссп+ Д5С'(1-.3)эксп)=

=5С/гСэкс11-5С/(1_2)эксп_5С|( b.3)3Kcn+5CipDGal (4

AA5C/Fuc=6Civs3K;n_5Cl(i-.2) эксп (5

AA5CioicOMe=SCfTS3Kcn—5С'(1-3) ЭКсп (6

В формулах (4)-(6) bC-txc, 6С-/(|_2), бС-/(1-.3), и бС-^poai - химически сдвиги С/'-тых атомов в спектре иС-ЯМР исследуемого трисахарида, соответст вующих ему (1-2)- и (1-3)-связанных дисахаридов и свободной галактозы, величины Д5С/(1_,2)эксп и АбС/(1<з)эксп - эффекты гликозилирования [Lipkind, С М.; Shashkov, A. S.; Knirel, Y. A.; Vinogradov, Е. V.; Kochetkov, N. К. Carbohydi Res. -V.175 (1988).-Р.59-75.\, которые представяют собой разницу химически сдвигов в дисахариде и моносахариде.

Для исследования характера конформационных изменений дисахаридны фрагментов трисахаридов был проведен конформационный анализ трисахаридо 17-22 и соответствующих дисахаридов 113-115, 119 и 120 с привлечение! экспериментов по ядерным эффектам Оверхаузера и молекулярно-механически расчетов по методу GEGOP с обработкой результатов расчета по методу Монте Карло.*

Для трисахаридов 17-22, так же как и для рамнозидов 1-16, была выяв лена зависимость между найденными величинами ДА и структурными парамет рами, что связано с тесным пространственным взаимодействием между остат ком фукозы и заместителем при атоме углерода С-2 моносахаридного остатка н восстанавливающем конце. Так, в ряду а-фукозилированных трисахаридов 17 19 и 21, в которых варьировался заместитель при С-2 (NHAc, ОН, Н), наблю далось закономерное уменьшение величин ДДС-1 галактозы и ДДС-3 остатка н; восстанавливающем конце. Конформационный анализ показал, что в трисаха ридах 17 и 19, для которых эти величины были особенно велики, область коп фермеров с меньшим расстоянием между аномерным протоном галактозы i соответствующим трансгликозидным протоном Н-3 более заселена, чем в соот ветствующих дисахаридах 113 и 114 и трисахариде 21. Аналогичным образок можно объяснить большие величины ДДС-1 галактозы и ДДС-3 остатка н: восстанавливающем конце в трисахариде 18. В то же время, при предоблученш Н-1 остатка фукозы в трисахаридах 17, 19 и 21 были найдены почти равньи величины ЯЭО на Н-2 галактозы, и, соответственно, для них были рассчитань одинаковые значения ДДС-2.

* Расчеты проводились Й. Дуусом (Карлсбергская лаборатория, Дания)

Таблица 4. Отклонения от аддитивности (м.д.) в спектрах ,3С-ЯМР трисахаридов 17-22.______

№ Остаток ДДС-1 ДДС-2 ДДС-3 ДДС-4 ДДС-5 ДДС-6

а-Серия

17 a-Fue -0,3 -0,1 0 0,2 -0,2 0,2

19 а-Fue -0,5 0,1 0,1 0,1 0,1 0,4

21 а-Fue -0,4 0 0,1 0,1 0,1 0,3

17 P-Gal -1,8 -1,1 1,0 1,0 0,5 0,6

19 (3-Gal -0,9 -1,6 0,7 0,5 0,2 0,1

21 P-Gal -0,5 -1,2 0,9 0,5 0,5 0,2

17 P-GlcNAc 1,2 0,6 -5,1 0,3 0,4 0,3

19 p-Glc 0,4 0,7 -2,0 0,1 0 0

21 р-2-дсз<жси-С1с -0,1 0 -0,7 0,1. 0 -0,2

P-Серия

18 P-Fuc 0,9 -0,1 -0,2 -0,2 0,2 -0,1

20 P-Fuc 0 0,1 0,2 0,4 0,1 -0,1

22 P-Fuc -0,2 0 0 0,1 0 0

18 [i-Gal -2,2 2,4 0,8 0,3 0,3 0,4

го P-Gal -0,5 0,3 0,1 -0,1 0,1 0

12 P-Gal -0,2 -0,3 0,4 0 0,1 0,1

18 p-GlcNAc 0 1,2 -3,4 -0,1 0,3 0,2

!0 P-Glc -0,2 -0,1 0,5 -0,1 0 0

!2 [í-2-дсчокси-Gtc 0 0 0,4 0,2 0 0

2.3. Линейные трисахариды с (1-2)-связью, родственные группоспецифическим олигосахаридам Н типа 2.

Расчет величин отклонений от аддитивности . для трисахаридов 23г28 табл. 5) проводился по уравнениям, аналогичным уравнениям (4)-(6).

Для трисахаридов 23-28, так же как и для соединений 17-22, была най-;ена корреляция между структурными параметрами трисахаридов и величинами [Д. Так, в ,3С-ЯМР спектрах глюкозаминидов 23, 24 и хиновозидов 25, 26 с бьемными заместителями СНгОН и СН3 при С-5, были найдены большие еличины ДДС-1 для остатка галактозы и ДДС-4 для остатка на восстанашшва->щем конце, а для ксилозидов 27 и 28, которые не содержат заместитель при --5, эти величины были незначительны.

Таблица 5. Отклонения от аддитивности (м.д.) в спектрах ,3С-ЯМР трисахаридов 23-28._

№ Остаток ДДС-1 ДАС-2 ДДС-3 ДДС-4 ДДС-5 ДДС-6

а-Серия

23 a-Fue -0,5 0 0,1 0 0,2 0,3

25 а-Fue -0,7 -0,2 0 -0,2 0 0

27 а-Fue -0,6 -0,1 -0,1 -0,1 0 0

23 P-Gal -1,3 -1,9 0,9 0,6 0,4 0,2

25 P-Gal -1,4 -1,9 0,8 0,7 0,3 0,3

27 p-Gal -0,7 -1,2 0,7 0,4 0,2 0,1

23 P-GIcNAc 0,1 0,2 -0,1 -2,4 0,5 0

25 P-Qu¡ 0,1 0,1 -0,1 -2,8 0,3 0,1

27 p-Xyl 0,2 0 0,2 -0,5 -0,1

p- Серия

24 P-Fuc -0,2 0 0,2 0 0,1 -0,1

26 P-Fuc -0,4 -0,2 -0,1 -0,2 -0,2 -0,3

28 P-Fuc -0,4 -0,3 -0,2 -0,2 -0,3 -0,2

24 P-Gal -1,6 0 0,5 0 0 0,1

26 P-Gal -1,8 -0,4 -0,4 0,1 0 0,1

28 P-Gal -0,7 -0,3 0,4 0 0 0

24 P-GlcNAc 0 -0,2 -0,2 -1,8 0,1 0,1

26 p-Qui 0 0,2 -0,2 -2,0 0,3 0,5

28 P-Xyl 0 0 0,1 0,2 0

Выводы

1. Синтезированы шестнадцать 3,4-ди-О-гликозилированных производны метил-а-Ь-рамнопиранозида, содержащих моносахаридные заместители с а О рО-, аЬ- и реконфигурациями и различающихся между собой комбинацие абсолютных и аномерных конфигураций заместителей. Синтезированы все ди сахариды, соответствующие фрагментам исследованных трисахаридов.

2. Синтезированы метил-гликозиды группоспецифических трисахаридов I типов 1 и 2, а также их модифицированные производные и р-фукозилироваи мыс аналоги.

3. Для всех синтезированных олигосахаридов получены и полносты интерпретированы спектры 'Н- и |3С-ЯМР. Определены отклонения от адди тивности в спектрах 13С-ЯМР трисахаридов, необходимые для компьютерног структурного анализа олиго- и полисахаридов с 1,2- и 3,4- диэваториальны; дизамещением.

4. Для синтезированных олигосахаридов проведены конформационные сследования с привлечением экспериментов по ядерным эффектам Овер-1узера и теоретических конформационных расчетов с использованием програм-ы GEGOP. Изучена зависимость спектральных и конформационных характе-!1стик от структурных параметров олигосахаридов.

Основное содержание работы изложено в следующих публикациях.

1. Нифантьев Н.Э., Шашков А.С., Хатунцева Е.А., Цветков Ю.Е., Шерман .А., Кочетков Н.К. Синтез и исследование спектров ЯМР и конформаций гзветапенных олигосахаридов. 15. 2,3-ди-О-гликозилированные метил-a-L-1мнопиранозиды с одним или двумя 2-ацетамидо-2-дезокси-р-0-глкжопира-эзильными остатками // Биоорган, химия.-Т.20 (1994). С. 1001-1012.

2. Khatuntseva Е.А., Shashkov A.S., Nifant'ev N.E. Synthesis and l3C-NMR jdies of 3,4-di-O-glycosyl methyl a-L-rhamnopyranosides // Abstracts of the XVII ternational Carbohydrate Symposium, Ottawa, Canada, 1994, B2.88.

3. Хатунцева E.A., Шашков A.C., Нифантьев Н.Э. Синтез и исследование |ектров ЯМР и конформаций разветвленных олигосахаридов. 16. Синтез 3,4-i-O-гликозилированных производных метил-а-Ь-рамнопиранозида // юорган. химия. -Т.22 (1996). С. 376-382.

4. Nifant'ev N.E., Khatuntseva Е.А., Shashkov A.S., Bock К. Use of p-glycosyl etates as glycosyl donors in oligosaccharide synthesis: scope and limitations // irbohydr. Lett. -V.l (1996). P. 399-406.

5. Duus J., Bock K., Shashkov A.S., Khatuntseva E.A., and Nifant'ev N.E. nthesis and structural studies of branched 2-linked trisaccharides related to blood >up determinants // Carbohydr. Res. -V.288 (1996). P. 25-44.

6. Duus J., Nifant'ev N.E., Shashkov A.S., Khatuntseva E.A., and Bock K. VlR and conformational studies of (l->2)-linked trisaccharides related to blood >up determinants // Abstracts of the XVIII International Carbohydrate Symposium, lano, Italy, 1996, AP 025.

7. Duus J., Nifant'ev N.E., Shashkov A.S., Khatuntseva E.A., and Bock K. ilR and conformational studies of (1 ->2)-linked trisaccharides related to blood mp determinants (Led) // Abstracts of the IV International Satellite Meeting on nformational Studies of Carbohydrates, La Thuile (Aosta), Italy, 1996, P 10.

8. Хатунцева Е.А., Шерман A.A., Шашков A.C., Дабровский Я Нифантьев Н. Э. Синтез метил-3-0-(р-0-фукопиранозил)-р-0-хиновопиран( зида и его З'-O-, 2,3'-ди-0- и 2',3'-ди-0-метилированных производных , Биоорган, химия. -Т. 23 (1997). С. 228-233.

9. Khatuntseva Е.А., Shashkov A.S., Nifant'ev N.E. 'H- and °C-NMR data f( 3-0-, 4-0- and 3,4-di-O-glycosylated methyl ot-L-rhainnopyranosides // Magn. Re Chem. -V. 35 (1997). C. 414-419.

ЛР N 020657 от .11 ноября 1992 г. Подписано в печать 25.08.1996 г. Тираж 70 экз. Бесплатно

Отпечатано в отделе технической документации ИГиРГИ 117312 Москва; ул. Ферсмана, 50.