Структурно-химическая характеристика полисахаридов из пижмы обыкновенной Tanacetum vulgare L. тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

1. ВВЕ ттЕНИЕ

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

2.1. Основные понятия спектроскопии ЯМР

2.2. Применение спектроскопии ЯМР для структурного исследования полисахаридов

2.3. Деградация пектиновых полисахаридов методами структурной химии углеводов

2.4. Общая структурная характеристика пектиновых полисахаридов

2.4.1. Галактуронан и рамногалактуронаны

2.4.2. Кислые арабино-3,6-галактаны как компоненты пектиновых веществ

2.4.3. Блоки ксилогалактуронана и апиогалактуронана в пектиновых полисахаридах

2.5. Физиологическая активность пектинов

Растительные полисахариды имеют широкое применение в медицине, парфюмерии, пищевой промышленности и т.д. Пектины представляют собой функционально важную группу углеводсодержащих биополимеров (биогликанов) клеточных стенок практически всех тканей растений. В настоящее время изучение строения пектиновых полисахаридов представляет значительный принципиальный и прикладной интерес, т.к. они являются одними из самых распространенных полисахаридов.Хотя пектины открыты более 200 лет назад, полное строение их макромолекул до настоящего времени нельзя считать установленным.Исследование строения пектинов представляет большие трудности вследствие того, что их макромолекула состоит из различающихся блоков и характеризуется нерегулярностью, отсутствием повторяющегося звена.Литературные.данные в области химии, технологии и физиологической активности пектинов указывают на то, что исследования пектиновых полисахаридов, по-прежнему, не утратили своей актуальности. Широкие возможности современных экспериментальных методов структурной химии углеводов позволяют изучить особенности химического строения пектиновых полисахаридов.Широко распространенные в природе пектиновые вещества играют важную биологическую роль в жизнедеятельности растений, выполняя функции структурообразования, ионного и водного обмена. Пектиновые вещества входят в состав протопектиновой системы растений, которая обусловливает форму и прочность клеточной оболочки растений.Пектиновые полисахариды принимают непосредственное участие в обеспечении тургора растений, морозостойкости и устойчивости к засухе, в прорастании и развитии семян, в противодействии фитопатогенам. Кроме того, пектины обладают высокой и многообразной физиологической активностью в отношении человека и животных, в частности, обусловливают выделение из организма радионуклидов, солей тяжелых металлов и других токсинов, обладают иммуномодулирующим действием.Имеющиеся к настоящему времени результаты свидетельствуют о непосредственной взаимосвязи активности и структурных особенностей пектинов. Накопление сведений о химической структуре физиологически активных пектиновых веществ позволит определить механизм их влияния на живой организм. Поэтому выделение пектиновых полисахаридов и изучение их структуры в связи с их биологической активностью является актуальной проблемой.Объектом наших исследований была выбрана широко распространенная на европейском Севере России пижма обыкновенная Tanacetum vulgare L.Выбор растения обусловлен широким использованием его в медицине и высоким содержанием полисахаридов, что открывает перспективу применения пижмы в качестве сырьевого источника для получения полисахаридов.Растения рода Tanacetum включают около 200 видов, многие из которых входят в состав флоры Европы и, в частности, России [1]. Пижма обыкновенная Т. vulgare широко распространена во многих районах России, включая Республику Коми. Достаточно обстоятельно изучены низкомолекулярные соединения, входящие в состав пижмы. Так, из различных видов пижмы выделено большое число физиологически активных флавоноидов и терпеноидов [1].Большой интерес к пижме Т. vulgare определяется ее применением для лечения кишечных заболеваний, язвенной болезни, ревматизма, а также наличием высокой антибактериальной и антигельминтной активности соединений, входящих в ее состав [1,2]. В то же время о химическом строении и физиологической активности полисахаридов пижмы Т. vulgare имеются лишь очень ограниченные сведения.Ранее [3] установлено, что сумма полисахаридов обладает выраженной противоязвенной активностью. При предварительном изучении полисахаридов, выделенных из пижмы Т. vulgare в фазе массового цветения, было показано, что 49.3% от веса сухого полисахаридного препарата составляет галактуроновая кислота, на основании чего сделан вывод о возможной принадлежности полисахаридов пижмы Т. vulgare к классу пектинов [3]. Кроме того, методом Лоури было установлено, что на долю белковых примесей приходится 6 - 7% от веса сухого полисахаридного препарата. Такое высокое содержание белка позволило предположить, что белок прочно связан с полисахаридами и выделяется совместно с ними [4 .Другие сведения о химической структуре и биологической активности полисахаридов, относящиеся к данному растению, в литературе отсутствуют.В нашем Отделе ранее [5] выявлена способность полисахаридов пижмы связывать в сыворотке крови атерогенные липопротеиды низкой плотности, которые являются инициаторами атеросклеротического процесса. Эти данные могут указывать на антиатеросклеротическую активность полисахаридов пижмы.В этой связи представляет интерес более подробно изучить химическое строение полисахаридов пижмы с тем, чтобы использовать впоследствии данные о химическом строении для установления корреляций между активностью и структурой.

ВЫВОДЫ

1. Впервые охарактеризован полисахаридный состав трех растений, широко распространенных на европейском Севере России: пижмы обыкновенной Tanacetum vulgare L., лопуха Arctium tomentosum Mill и мать-и-мачехи Tussilago farfara L.

2. Из соцветий пижмы обыкновенной выделен танацетан TVF и показано, что он относится к классу пектиновых полисахаридов. На примере танацетана разработан и запатентован новый способ выделения пектиновых полисахаридов из растительного сырья, который позволяет получать полисахариды при уменьшении расхода времени и реагентов.

3. Найдено, что основными компонентами углеводной цепи танацетана являются остатки D-галактуроновой кислоты, L-арабинозы, D-галактозы и L-рамнозы. Установлено строение главной углеводной цепи танацетана и показано, что она представляет собой линейный oc-l,2-L-paMHo-a-l,4-D-галактуронан.

4. Методами частичного кислотного и ферментативного гидролиза, а также с помощью распада по Смиту и литиевой деградации получены фрагменты танацетана, подтверждающие наличие в его макромолекуле разветвленной области.

5. С помощью одно- и двумерной спектроскопии ядерного магнитного резонанса и хромато-масс-спектрометрии выяснено строение боковых цепей разветвленной области танацетана и показано наличие ковалентной связи между разветвленной и линейной областями макромолекулы.

94

Выражаю глубокую благодарность академику Ю.С. Оводову и ст.н.с., к.х.н. Р.Г. Оводовой за научное руководство, методическую и консультативную помощь в процессе выполнения и подготовки диссертационной работы.

Хочу искренне поблагодарить всех сотрудников Отдела молекулярной иммунологии и биотехнологии Института физиологии Коми НЦ УрО РАН, оказавших содействие в выполнении работы, а также сотрудников Института органической химии им. Н.Д. Зелинского РАН д.х.н. А.С. Шашкова и д.х.н. А.О. Чижова за снятие спектров ЯМР и масс-спектров, а так же помощь в их интерпретации, и к.х.н. М.И. Билан за помощь в подготовке образцов к снятию спектров ЯМР.

95

1. Abad M.J., Bermejo P., Villar A. An approach to the genus Tanacetum L. (Compositae): phytochemical and pharmacological review. // Phytother. Res.-1995.- V. 9.- P. 79-92.

2. Минаева В.Г. Лекарственные растения Сибири. Новосибирск: "Наука",- 1970.-С. 157-158.

3. Сысоева К.Н., Горин А.Г., Яковлев А.И. Динамика содержания водорастворимых полисахаридов в соцветиях пижмы обыкновенной. // Раст. ресурсы,- 1979.- Т. 15.- Вып. 1.- С. 89-91.

4. Шаламова Г.Г., Сысоева К.Н. Минеральный и белковый состав полисахаридного комплекса из соцветий Tanacetum vulgare. II Химия природн. соедин.- 1985.- № 2.- С.267-268.

5. Полле А.Я., Оводова Р.Г., Попов С.В. Выделение и общая характеристика полисахаридов из пижмы обыкновенной, мать-и-мачехи и лопуха войлочного. //Хим. раст. сырья.- 1999.- №. 1.- С. 33-38.

6. Smith F., Montgomery R. "The Chemistry of Plant Gums and Mucilages and Some Related Polysaccharides." Reinhold Publ. Co. N.- Y.- London, 1959.

7. Кочетков H.K., Бочков А.Ф., Дмитриев Б.А., Усов А.Н., Чижов О.С., Шибаев В.Н. "Химия углеводов."- М.: Химия, 1967.- С. 430-431.

8. Преображенская М.Е. О биологической активности полисахаридов. // Вопр. мед. химии.- 1964.- Т. 10.- С. 339-351.

9. Оводов Ю.С., Васьковский В.Е. Некоторые аспекты биологической роли и активности полисахаридов. // Усп. совр. биол.- 1968.- Т .66.- С. 51-65.

10. Сапожникова Е.В. "Пектиновые вещества плодов". М.:"Наука". 1968.

11. Торгов И.В. (Ред.) "Прогресс химии углеводов". // Чижов О.С., Шашков А.С. Масс-спектрометрия и ЯМР-спектроскопия в установлении структуры полисахаридов.- М.: Наука. 1985.- С. 39-49.

12. Оводов Ю.С. Избранные главы биоорганической химии.- 1996.-Сыктывкар: СГУ.96

13. Варшавский Я.В., Луценко И.Ф. (Ред.) "Установление структуры органических соединений физическими и химическими методами". (Пер. с англ.) Т. 1.- М.: Изд-во "Химия". 1967.- С. 204-299.

14. Claridge T.D.W. "High-Resolution NMR Techniques in Organic Chemistry." Elsevier Science "Pergamon". 1999.- 382 p.

15. Angyal S.J. Hudson's rules of isorotation as applied to furanosides, and the conformations of methyl aldofuranosides. // Carbohydr. Res. -1979.- V. 77.-№l.-p. 37-50.

16. Шашков A.C. Спектры ЯМР 13C родоначальных гексопираноз. // Изв. АН СССР. Сер. хим.- 1983.- №6.- С. 1328-1336.

17. Шашков А.С., Чижов О.С. Спектроскопия 13С-ЯМР в химии углеводов и родственных соединений. // Биоорган, химия.- 1976.- Т. 2.- №4.-С. 437-497.

18. Block К., Lundt I., Pedersen С. Assignment of anomeric structure toлcarbohydrates through geminal C-H coupling constants. // Tetrahedron Lett.-1973.- V. 14.- №13.-P. 1037-1040.

19. Grasdalen H., Larsen В., Smidsrad О. l3C-N.m.r. studies of alginate. // Carbohydr. Res.- 1977.- V. 56.- №2.- P. 11-15.

20. Grasdalen H., Larsen В., Smidsrad O. A p.m.r. study of the composition and sequence of uronate residues in alginates. // Carbohydr. Res.- 1979.- V. 68.-№1.-P. 23-31.11

21. Grasdalen H., Larsen В., Smidsrad O. C-n.m.r. studies of monomeric composition and sequence in alginate. // Carbohydr. Res.- 1981.- V. 89 №2.- P. 179-191.

22. Ходжаева M.A., Исмаилов З.Ф., Кондратенко E.C., Шашков А.С. Углеводы Allium. II. Новый тип глюкофруктана из Allium sativum. II Химия природн. соедин. 1982.- №1.- С. 23-28.

23. Usui Т., Yamaoka N., Matsuda К., Sugiyama Н., Seto S. 13С Nuclear magnetic resonance spectra of glucobioses, glucotrioses, and glucans. // J. Chem. Soc. Perkin Trans. Part I.- 1973.- №20.- P. 2425-2432.

24. Trnka Т., Cerny M., Shmyrina A.Ja., Shashkov A.S., Sviridov A.F., Chizov O.S. A 13c-n.m.r. study of 1,6:2,3- and l,6:3,4-dianhydro-p-D-hexo-pyranoses and their 0-acetyl and deoxy derivatives. // Carbohydr. Res.- 1979.- V. 76.- №1- P. 39-44.

25. Шашков A.C., Гришковец В.И., Земляков A.E., Чирва В.Я. Спектроскопия 13С-ЯМР метиловых эфиров метил(метил-а-0-маннопиранозид)уроната // Биоорган, химия.- 1984.-Т. 10.- №1.- С. 88-92.

26. Шашков А.С., Гришковец В.И., Чирва В.Я. Изучение метиловых эфиров метил(метил-а-0-галактопиранозид)уроната с помощью спектроскопии 13С-ЯМР. // Биоорган, химия.- 1982.- Т. 8.- №10.- С. 13931399.

27. Gorin P.A.J., Mazurek М. Carbon-13 and proton nuclear magnetic resonance studies on methyl aldofuranosides and their <3-alkyl derivatives. // Carbohydr. Res.- 1976.- V. 48.- №2.- P. 171-186.

28. Dmitriev B.A., Kocharova N.A., Knirel Yu.A., Shashkov A.S., Kochetkov N.K., Stanislavsky E.S., Mashilova G.M. Somatic Antigens of98

29. Pseudomonas aeruginosa. The structure of the polysaccharide chain of Ps.aeruginosa 0:6 (Lanyi) lipopolysaccharide. //Eur. J. Biochem.- 1982.- V. 125.-№1.-P. 229-237.

30. Шашков A.C., Львов B.JI., Тохтамышаева H.B., Дмитриев Б.А., Кочетков Н.К. Структура и спектр 13С-ЯМР специфического полисахарида Shigella boydii тип 4. // Биоорган, химия.- 1981.- Т. 7.- №5.- С. 729-735.

31. Kardosova A., Capek P. Chemical and С13 NMR of а arabinoramnogalactan from the leaves of Plantago lanceolata L. var. Libor. // Coll. Czech. Chem. Commun.- 1994.- V. 59.- P. 2714-2719.

32. Schols H.A., Posthumus M.A., Voragen A.G.J. Structural features of hairy regions of pectins isolated from apple juice produced by the liquefaction process. // Carbohydr. Res.- 1990.- V.206.- P. 117-129.

33. Cui W., Eskin M.N.A., Biliaderis C.G., Marat K. NMR characterization of a 4-0-mathyl-J3-D-glucuronic acid-containing rhamnogalctouronan from yellow mustard (Sinapis alba L.) mucilage. // Carbohydr. Res.- 1996.- V. 292.- P. 173183.

34. Odonmazig P., Badrga D., Ebringerova A., Alfoldi J. Structures of pectic polysaccharides isolated from the Siberian apricot (Armaniaca siberica Lam.). // Carbohydr. Res.- 1992.- V. 226.- P. 353-358.

35. Юлдашева Н.П., Рахимов Д.А., Турхожаев М.Т. Полисахариды Eremurus. XXVI. Изучение строения пектина из листьев Eremurus regelii. И Химия природн. соедин.- 1993,- №2.- С. 191-194.

36. Redgwell R.J., Melton L.D., Brasch D.J., Coddington J.M. Structures of the pectic polysaccharides from the cell walls of kiwifruit. // Carbohydr. Res.-1992.-V. 226.- P. 287-302.

37. Keenan M.H.J., Belton P.S., Matthew J.A., Howson S.J. A 13C-NMR study of sugar-beet pectin. // Carbohydr. Res.- 1985.- V. 138.- P. 168-170.

38. Naran R.} Ebringerova A., Hromadkova Z., Patoprsty V. Carbohydrate polymers from underground parts of Cistanche deserticola. // Phytochemistry.-1995.- V. 40.- № 3.- P. 709-715.

39. Pressey R., Himmelsbach D.S. 13C-NMR spectrum of a galactose-rich polysaccharide from tomato fruit. // Carbohydr. Res.- 1984.- V. 127.- P. 356-359.

40. Westerlund E., Aman P., Andersson R.E., Andersson R. Investigation of the distribution of methyl ester groups in pectin by high-field C13 NMR. // Carbohydr. Polym.- 1991.- V. 14.- P. 179-187.

41. Neiss T.G., Cheng H.N., Daas P.J., Schols H.A. NMR and statistical analysis of the galacturonic acid and methyl ester distributions in pectic polysaccharides. //Polymer Preprint 1.- 1998.- P. 688-689.

42. Grasdalen H., Bakoy O.E., Larsen B. Determination of the degree of esterification and the distribution of methylated and free carboxyl groups in pectins by 'H-NMR spectroscopy. // Carbohydr. Res.- 1988.- V. 184.- P. 183-191.

43. Komalavilas P., Mort A.J. The acetylation at 0-3 of galacturonic acid in the rhamnose-rich portion of pectins.//Carbohydr. Res. 1989. V. 189. P. 261-272.

44. Ishii T. O-Acetylated oligosaccharides from pectins of potato tuber cell walls. // Plant Physiol.- 1997.- V. 113.- P. 1265-1272.

45. Свиридов А.Ф., Арифходжаев Х.А., Шашков А.С., Ботвиенко И.В., Чижов О.С., Кочетков Н.К. Полисахариды микобактерий. 4*. Структура внеклеточного полисахарида, продуцируемого Mycobacterium album В-88. // Биоорган, химия.- 1979.- Т. 5.-№4.- С. 568-577.

46. Свиридов А.Ф., Шашков А.С., Кочетков Н.К., Ботвиенко И.В., Егоров Н.С. Полисахариды микобактерий. 5*. Структура свободного внеклеточного полисахарида, синтезируемого Mycobacterium salivarum 76. // Биоорган, химия.- 1982.- Т. 8.-№9.- С. 1242-1251.

47. Branefors-Helander P., Classon В., Kenne L., Lindberg В. Structural studies of the capsular antigen of Haemophilus influenzae type c. // Carbohydr. Res.- 1979.- V. 76.- №1.- p. 197-202.

48. Egan W., Tsui F.-P., Climenson P.A., Schneerson R. Structural and immunological studies of the Haemophilus influenzae type с capsular polysaccharide. // Carbohydr. Res.- 1980.- V. 80.- №2.- P. 305-316.

49. Egan W., Tsui F.-P., Schneerson R. Structural studies of the Haemophilus influenzae type f capsular polysaccharide. // Carbohydr. Res.- 1980.- V. 79.- №2.-P. 271-277.

50. Branefors-Helander P., Kenne L., Lindberg B. Structural studies of the capsular antigen from Haemophilus influenzae type f. // Carbohydr. Res.- 1980.-V. 79.-№2.- P. 308-312.

51. Ohno H., Yadomae Т., Miyazaki T. The structure of the type-specific polysaccharide of Pneumococcus type XIX. // Carbohydr. Res.- 1980.- V. 80.-№2.- P. 297-304.

52. L'vov V.L., Tochtamysheva N.V., Shashkov A.S., Dmitriev B.A., Capek K. 3-(N-acetyl-L-seryl)amino.-3,6-dideoxy-D-glucose: a novel constituent of a bacterial antigenic polysaccharide. // Carbohydr. Res.- 1983.- V. 112.- №2.- P. 233-239.

53. Azadi P., O'Neill M.A., Bergmann C., Darvill A.G., Albersheim P. The backbone of the pectic polysaccharide rhamnogalacturonan I is cleaved by an endohydrolase and an endolyase. // Glycobiology.- 1995.- V. 5.- P. 783-789.101

54. Dinand E., Excoffier G., Lienart Y., Vignon M.R. Two rhamnogalacturonide tetrasaccharides isolated from semi-retted flax // Plant Physiol.- 1997.- V. 115.- P. 793-801.

55. An J., Zhang L., O'Neill M.A., Albersheim P., Darvill A.G. Isolation and characterization of endo-rhamnogalacturonase-generated fragments of the backbone of rhamnogalacturonan. // Carbohydr. Res.- 1994.- V. 264.- P. 83-96.

56. Schols H.A., Bakx E.J., Schipper D., Voragen A.G.J. A xylogalacturonan subunit present in the modified hairy regions of apple pectin. // Carbohydr. Res.-1995.- V.279.- P. 265-279.

57. Schols H.A., Voragen A.G.J., Colquhoun I.J. Isolation and characterization of rhamnogalacturonan oligomers, liberated during degradation of pectic hairy regions by rhamnogalacturonase. // Carbohydr. Res.- 1994.- V. 256.-P. 97-111.

58. Carpita N.C., Gibeant D.M. Structural models of primary cell walls in flowering plants: consistency of molecular structure with the physical properties of the walls during growth. //Plant J.- 1993.- V. 3.- P. 1-30.

59. Aspinall G.O. The polysaccharides.- V. 1.- London.: Academic Press, Inc.- 1982.- 340 p.

60. York W.S., Darvill A.G., McNeil M., Stevenson T.T. Isolation and characterization of plant cell walls and cell-wall components. // Meth.Enzymol.-1985.- V. 118.-P. 3-40.102

61. Гляд В.М. Определение моно- и олигосахаридов в растениях методом нормально-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. // Новые научные методики. Вып. 55. Изд-во Коми НЦ УрО РАН.- Сыктывкар.- 1999.- 16 с.

62. Оводов Ю.С. Хроматография углеводов с использованием ионообменных смол. // Усп. химии.- 1971.- Т.40,- С.764-774.

63. Whitcombe A.J., O'Neil М.А., Steffan W., Albersheim P., Darvill A.G. Structural characterization of the pectic polysaccharide, rhamnogalacturonan II. // Carbohydr. Res.- 1995.- V. 271.- P. 15-29.

64. York W.S., Darvill A.G., McNeil M., Albersheim P. 3-Deoxy-D-manno-2-octulosonic acid (KDO) is a component of rhamnogalacturonan II, a pectic polysaccharide in the primary cell walls of plants. // Carbohydr. Res.- 1985.- V. 138.-P. 109-126.

65. Spellman M.W., McNeil M., Darvill A.G., Albersheim P. Characterization of a structurally complex heptasaccharide isolated from the pectic polysaccharide rhamnogalacturonan II. //Carbohydr. Res.- 1983.- V. 122.- P. 131153.

66. Ralet M.C., Thibalult J.F., Faulds C.B., Williamson G. Isolation and purification of feruloylated oligosaccharides from cell walls of sugar-beet pulp. // Carbohydr. Res.- 1994.- V. 263.- P. 227-241.

67. Yamada H., Ra K.S., Kiyohara H., Cyong J.-C., Otsuka Y. Structural characterisation of an anti-complementary pectic polysaccharide from the roots of Bupleurum falcatum L. // Carbohydr. Res.- 1989.- V. 189.- P. 209-226.

68. Thomas J.T., Darvill A.G., Albersheim P. Isolation and structural characterization of the pectic polysaccharide rhamnogalacturonan II from walls of suspension-cultured rice cells. //Carbohydr. Res.- 1989.- V. 185.- P. 261-277.

69. Yamada H., Hirano M., Kiyohara H. Partial structure of an anti-ulcer pectic polysaccharide from the roots of Bupleurum falcatum L. // Carbohydr. Res.-1991.- V. 219.- P. 173-192.103

70. Kiyohara H., Hirano M., Wen X.-G., Matsumoto Т., Sun X.-B., Yamada H. Characterisation of an anti-ulcer pectic polysaccharide from leaves of Panax ginseng C.A. Meyer. // Carbohydr. Res.- 1994.- V. 263.- P. 89-101.

71. Capek P., Matulova M., Kardosova A. An acidic heteropolysaccharide from the flowers of Malva mauritilana L. // J. Carbohydr. Chem.- 1997.- V. 16.-№9.- P. 1373-1391

72. Stevens B.J., Selvendran R.R. Pectic polysaccharides of cabbage {Brassica oleracea). // Phytochemistry.- 1984.- V. 23.- №1.- P. 107-115.

73. Shin K.-S., Kiyohara H., Matsumoto Т., Yamada H. Rhamnogalacturonan II from the leaves of Panax ginseng C.A. Meyer as a macrophage Fc receptor expression-enhancing polysaccharide. // Carbohydr. Res.- 1997.- V. 300.- P. 239249.

74. Thibault J.F., Renard C.M.G.C., Axelos M.A.V., Roger P., Crepeau M.J. Studies of the length of homogalacturonic regions in pectins by acid hydrolysis. // Carbohydr. Res.- 1993.- V. 238.- P. 271-286.

75. Lo V.M., Hahn M.G., Halbeek H. Preparation, purification, and strustural charaterization of linear oligogalacturonides. An FAB-mass spectrometric and NMR spectroscopic study. // Carbohydr. Res.- 1994.- V. 255.- P. 271-284.

76. Schols H.A., Voragen A.G.J. Occurrence of pectic hairy regions in various plant cell wall materials and their degradability by rhamnogalacturonase. // Carbohydr. Res.- 1994.- V. 256.- P. 83-95.

77. Голубев B.H., Шелухина Н.П. Пектин: химия, технология, применение.- Москва: Издательство Академии технологических наук РФ,-1995.- 387 с.

78. Ros J.M., Schols Н.А., Voragen A.G.J. Extraction, characterisation, and enzymatic degradation of lemon peel pectins. // Carbohydr. Res.- 1996.- V. 282.-P. 271-284.

79. Marcelin O., Saulnier L., Brillouet J.-M. Extraction and characterization of water-soluble pectic substances from guava (Psidium guajava L.). // Carbohydr. Res.- 1991.-V. 212.-P. 159-167.

80. Tibbits C.W., MacDougall A.J., Ring S.G. Calcium binding and behaviour of a high methoxyl pectin gel. // Carbohydr. Res.- 1998 V. 310 - P. 101-107.

81. Renard C.M.G.C., Weightman R. M., Thibault J.-F. The xylose-rich pectins from pea hulls. // Intern. J. Macromolecules.- 1997.- V. 21.- P. 155-162.

82. Huisman M.M.H., Schols H.A., Voragen A.G.J. Enzymatic degradation of cell wall polysaccharides from soybean meal. // Carbohydr. Polym.- 1999.- V. 38.-P. 299-307.

83. Aspinall G.O., Fanous H.K. Structural investigations on the non-starchy polysaccharides of apples. // Carbohydr. Polym.- 1984.- V. 4.- P. 193-214.

84. Ohtani K., Okai K., Yamashita U., Yuasa I., Misaki A. Characterisation of an acidic polysaccharide isolated from the leaves of Corchorus olitorius (Moroheiya). //Biosci. Biotechnol. Biochem.- 1995.- V. 59.- №3.- P. 378-381.

85. Stevenson T.T., Darvill A.G., Albersheim P. Structural features of the plant cell-wall polysaccharide rhamnogalacturonan II. // Carbohydr. Res.- 1988.-V. 182.- P. 207-226.105

86. Lerouge P., O'Neill M.A., Darvill A.G., Albersheim P. Structural characterization of endo-glycanase-generated oligoglycosyl side chains of rhamnogalacturonan I. // Carbohydr. Res.- 1993.- V. 243.- P. 359-371.

87. Родионова H.A., Безбородов A.M. О локализации систем ферментов, катализирующих расщепление полисахаридов растительных клеточных стенок у высших растений. Пектиназы. //Прикл. биохим. микробиол.- 1997.Т. 33.- С. 467-487.

88. Kiyohara Н., Yamada Н. Characterisation of methyl-ester distributions in galacturonan regions of complement activating pectins from the roots of Angelica acutiloba Kitagawa. // Carbohydr. Polym.- 1994.- V. 25.- P. 117-122.

89. Schols H.A., Geraeds C.C.J.M., Leeuwen M.F.S., Kormelink F.J.M., Voragen A.G.J. Rhamnogalacturonase: a novel enzyme that degrades the hairy regions of pectins. // Carbohydr. Res.- 1990.- V. 206.- P. 105-115.

90. Mutter M., Beldman G., Pitson S.M., Schols H.A., Voragen A.G.J. Rhamnogalacturonan a-D-galactopyranosyluronohydrolase. // Plant Physiol.-1998.- V. 117.- P. 153-163.

91. Hirano M., Kiyohara H., Matsumoto Т., Yamada H. Structural studies of endo-polygalactuonase-resistant fragments of an antiulcer pectin from the roots of Bupleurum falcatum L. // Carbohydr. Res.- 1994.- V. 251.- P. 145-162.

92. Hirano M., Kiyohara H., Yamada H. Existence of a rhamnogalacturonan II-like region in bioactive pectins from medicinal herbs. // Planta Med.- 1994.- V. 60.- P. 450-454.

93. Thomas J.R., Darvill A.G., Albersheim P. Rhamnogalacturonan I, a pectic polysaccharide that is a component of monocot cell-walls. // Carbohydr. Res.- 1989.- V. 185.- P. 279-305.106

94. Ishii Т., Thomas J., Darvill A.G., Albersheim P. Structure of plant cell walls XXVI. The walls of suspension-cultured sycamore cells contain a family of rhamnogalacturonan I-Iike pectic polysaccharides. // Plant Physiol.- 1989.- V. 89,-P. 421-428.

95. Lau J.M., McNeil M., Darvill A.G., Albersheim P. Treatment of rhamnogalacturonan I with litium in ethylendiamine. // Carbohydr. Res.- 1987.- V. 168.- P. 245-274.

96. Edashige Y., Ishii T. Rhamnogalacturonan I from xylem differentiating zones of Cryptomeria japonica. // Carbohydr. Res.- 1997.- V. 304.- P. 357-365.

97. Hakomori S. A rapid permethylation of glycolipid, and polysaccharide catalyzed by methylsufinyl carbanion in dimethyl sulfoxide. // J. Biochem. {Tokyo)- 1964.- V. 55.- P. 205-208.

98. Jay A. The methylation reaction in carbohydrate analysis. I I J. Carbohydr. Chem.- 1996.- V. 15.- P. 897-923.

99. Ishii Т., Matsunaga Т., Pellerin P., CTNeil M.A., Darvill A.G., Albersheim P. The plant cell wall polysaccharide rhamnogalacturonan II self-assembles into a covalently cross-linked dimer. // J. Biol. Chem.- 1999,- V. 274.-P. 13098-13104.

100. Kiyohara H., Cyong J.-C., Yamada H. Structure and anti-complementary activity of pectic polysaccharides isolated from the root of Angelica acutiloba Kitagawa. // Carbohydr. Res.- 1988.- V. 182,- P. 259-275.

101. Melton L.D., McNeil M., Darvill A.G., Albersheim P. Structural characterizatoon of oligosaccharides isolated from the pectic polysaccharide rhamnogalacturonan II. // Carbohydr. Res.- 1986.- V. 146.- P. 279-305.107

102. BeMiller J.N. I I Chemistry and Function of Pectins. / Eds M.L.Fishman, J.J.Jen Washington, D.C.: Am. Chem. Soc.- 1986.- P. 2-12.

103. O'Neill M.A., Albersheim P., Darvill A.G. The pectic polysaccharides of primary cell walls. // The Biochemistry of Plants. V.2. / Ed. P.M. Dey. L.: Acad. Press, London,- 1990.- P. 415-441.

104. Zhan D., Janssen P., Mort A.J. Scarcity or complete lack of single rhamnose residues interspersed within the homogalacturonan regions of citrus pectin. // Carbohydr. Res.- 1998.- V. 308.- P. 373-380.

105. Yamaguchi F., Ota Y., Hatanaka C. Extraction and purification of pectic polysaccharides from soybean okara and enzymatic analysis of their structures. // Carbohydr. Polym.- 1996.- V. 30.- P. 265-273.

106. Yamada H. Pectic polysaccharides from Chines herbs: structure and biological activity. // Carbohydr. Polym.- 1994.- V. 25.- P. 269-276.

107. Zablackis E., Huang J., Muller В., Darvill A.G., Albrsheim P. Characterization of the cell-wall polysaccharides of Arabidopsis thaliana leaves. // Plant Physiol.- 1995.- V. 107.-P. 1129-1138.

108. Lau J.M., McNeill M., Darvill A.G., Albersheim P. Structure of the backbone of rhamnogalacturonan I, a pectic polysaccharide in the primary cell walls of plants. // Carbohydr. Res.- 1985.- V. 137.- P. 111-125.

109. Schols H.A., Vierhuis E., Bakx E.J., Voragen A.GJ. Different populations of pectic hairy regions occur in apple cell walls. // Carbohydr. Res.-1995.- V. 275.- P. 343-360.

110. Vignon M.R., Garcia-Jaldon C. Structural features of the pectic polysaccharides isolated from retted hemp bast fibers. // Carbohydr. Res.- 1996.-V. 296.- P. 249-260.

111. McNeill M., Darvill A.G., Albersheim P. Structure of plant cell walls. X. Rhamnogalacturonan I, a structurally complex pectic polysaccharide in the walls of suspension cultured sycamore cells. // Plant Physiol 1980.- V. 66.- P. 1128-1134.108

112. Sakamoto Т., Sakai Т. Protopectinase T: a rhamnogalacturonase able to soluble protopectin from sugar beet pectin. // Carbohydr. Res.- 1994.- V. 259.-P. 77-91.

113. Rihouey C., Morvan C., Borissova I., Jauneau A., Demarty M., Jarvis M. Structural features of CDTA-soluble pectins from flax hypocotyls. // Carbohydr. Polym.- 1995.- V. 28.- P. 159-166.

114. Ralet M.-Ch., Thibault J.-F. Extraction and characterisation of very highly methylated pectins from lemon cell walls. // Carbohydr. Res.- 1994.- V. 260.-P. 283-296.

115. Thomas J.T., McNeil M., Darvill A.G., Albersheim P. Structure of the plant cell walls XIX: Isolation and characterization of wall polysaccharides from suspension-cultured Douglas fir cells. // Plant Physiol.- 1987.- V. 83.- P. 659-671.

116. Darvill A.G., Angur C., Bergmann C. et al. Oligosaccharins: oligosaccharides that regulare growth, development and defence responses in plants. // Glycobiology.- 1992.- V. 2.- P. 181-198.

117. Stevenson Т., McNeill M., Darvill A.G., Albersheim P. Structure of the plant cell walls. XVIII. An analysis of the extracellular polysaccharides of suspension-cultured sycamore cells. // Plant Physiol.- 1986.- V. 80.- P. 1012-1019.

118. Darvill A.G., McNeill M., Albersheim P. Structure of plant cell walls. VIII. A new pectic polysaccharide. // Plant Physiol.- 1978.- V. 62.- P. 418-422.

119. Stevenson Т., Darvill A.G., Albersheim P. 3-Deoxy-Z)-lyxo-2-heptulosaric acid, a component of the plant cell-wall polysaccharide rhamnogalacturonan-II. // Carbohydr. Res.- 1988.- V. 179.- P. 269-288.

120. Aldington S., Fry S.C. Rhamnogalactoronan II a biologically active fragment. // J. Exp. Bot.- 1994.- V. 45.- P. 287-293.

121. Kobayashi M., Matoh Т., Azuma J.-L. Two chains of rhamnogalacturonan II are cross-linked by borate-diol ester bonds in higher plant cell walls.//PlantPhysiol.- 1996.- V. 110.-P. 1017-1020.

122. Doco Т., Williams P., Vidal S., Pellerin P. Rhamnogalacturonan II, a dominant polysaccharide in juices produced by enzymic liquefaction of fruits and vegetables. // Carbohydr. Res.- 1997.- V. 297.- P. 181-186.

123. Matoh Т., Kawaguchi S., Kobayashi M. Ubiquity of a borate-rhamnogalacturonan II complex in the cell walls of higher plants. // Plant Cell Physiol.- 1996.- V. 37.- P. 636-640.

124. Will F., Dietrich H. Characterization of residual pectins from raspberry juices. // Carbohydr. Polym.- 1994.- V. 25.- P. 155-160.

125. Stevens B.J.H., Selvendran R.R. Structural features of cell-wall polysaccharides of the carrot Daucus carota. II Carbohydr. Res.- 1984.- V. 128.- P. 321-333.

126. Tomoda M., Shimizu N., Kanari M., Gonda R, Arai S., Okuda Y. Characterization of two polysaccharides having activity on the reticuloendothelial system from the root of Glycyrrhiza uralensis. И Chem. Pharm. Bull.- 1990.- V. 38.- P. 1667-1671.110

127. Shimizu N., Tomoda M., Takada K., Gonda R. The core structure and immunological activities of glycyrrhizan UA, the main polysaccharide from the root of Glycyrrhiza uralensis. I I Chem. Pharm. Bull.- 1992.- V. 40.- P. 2125-2128.

128. Shimizu N., Tomoda M., Satoh M., Gonda R., Ohara N. Characterization of a polysaccharide having activity on the reticuloendothelial system from the stolon of Glycyrrhiza glabra var. glandulifera. Я Chem. Pharm. Bull.- 1991.- V. 39.- P. 2082-2086.

129. Kikuchi A., Edashige Y., Ishii Т., Satoh S. A xylogalacturonan whose level is dependent on the size of cell clusters is present in the pectin from cultured carrot cells. // Planta.- 1996.- V. 200.- P. 369-372.

130. Kindel P., Cheng L., Ade B.R. Solubilization of pectic polysaccharide from the call walls of Lemna minor and Apium graveolens. II Phytochemistry.-1996.- V. 41.- P. 719-723.

131. Оводова Р.Г., Головченко B.B., Попов C.B., Шашков А.С., Оводов Ю.С. Структурное исследование и физиологическая активность лемнана, пектина из Lemna minor L. II Биоорган. Химия.- 2000.- Т. 26.- С. 743-751.

132. Hart D.A., Kindel Р.К. Isolation and partical characterization of apiogalacturonan from the cell walls of Lemna minor. U Biochem. J.- 1970.- V. 116.-P. 569-579.

133. Wagner H. Immunostimulants of plant origin // Croatica Chem. Acta.-1995.- Vol. 68.-P. 615-626.

134. Лоенко Ю.Н., Артюков A.A., Козловская Э.П., Мирошниченко В .А., Еляков Г.Б. Зостерин.- Владивосток: Дальнаука,- 1997.- 212 с.1.l

135. Попов C.B. Функциональные реакции нейтрофилов и макрофагов на растительные полисахариды. // Автореферат канд. дисс.- 1999.-Сыктывкар.- 18 с.

136. Оводов Ю.С., Полисахариды грибов, мхов и лишайников, структура и физиологическая активность // Труды Коми НЦ УрО РАН.- 1997.-Сыктывкар.- № 156.- С. 21-30.

137. Jackson R., Bush S., Cardin A. Glycosaminoglycans: molecular properties, protein interactions, and role in physiological processes // Physiol. Rev.- 1991. -Vol. 71.- P. 481-539.

138. Полле А.Я. Выделение и характеристика полисахаридов побегов пижмы обыкновенной Tanacetum vulgare L. // VIII Республиканская студенческая конференция "Человек и окружающая среда": Тез. докл. Сыктывкар, 1998. С. 40-41.

139. Hais J.M., Macek К. Handbuch der Papierchromatographie. Jena, 1958.

140. Lowry О. H., Rosebrough N. J., Farr A. L., Randall R. J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. // J. Biol. Chem.- 1951.- V. 193.- P. 265-275.

141. Полле А .Я., Оводова Р.Г., Шашков А.С., Оводов Ю.С. Выделение и общая характеристика полисахаридов пижмы обыкновенной. // Биоорган, химия.- 2001.- Т. 27.- №1.- С. 52-56.

142. Полле А.Я., Гюнтер Е.А., Попов С.В., Оводова Р.Г. Полисахариды пижмы обыкновенной Tanacetum vulgare L. // Всероссийская конференция "Химия и технология растительных веществ". Тез. докл. Сыктывкар. 2000. С. 121.

143. Ovodova R.G., Vaskovsky V.E., Ovodov Yu.S. The pectic substances of Zosteraceae. II Carbohydr. Res.- 1968.-V. 6.- P. 328-332.

144. Darvill A., McNeil M., Albersheim P. and Delmer D.P., in Tolbert N.E. (Ed). The primary Cell Walls of Flowering Plants: The Biochemistry of Plants, 1. The Plant Cells, New York: Academic Press,- 1980. (pp. 91-162).

145. Полле А.Я., Оводова Р.Г., Оводов Ю.С. Способ получения из растительного сырья суммы полисахаридов. Патент РФ №2176515 от 10.12.2001 г. (приоритет от 8.08. 2000 г.).- БИ. № 34.- 2001.

146. Perepelov A.V., Babicka D., Shashkov A.S., Arbatsky N.P., Senchenkova S.N., Rozalski A., Knirel Y.A. Structure and cross-reactivity of the O-antigen of Proteus vulgaris 08. // Carbohydr. Res. 1999. V. 318. P. 186-192.

147. Polle A.Ya., Ovodova R.G., Shashkov A.S., Ovodov Yu.S. Some structural features of pectic polysaccharide from tansy, Tanacetum vulgare L. // Carbohydr. Polym.- 2002.- V. 49.- №3.- P. 337-344.113

148. Guillon F., Thibault J.-F. Oxidative Cross-Linking of Chemically and Enzymatically Modified Sugar-Beet Pectin. I I Carbohydr. Polym.- 1990.- V. 12.-P. 353-374.

149. Renard C.M.G.C., Lahaye M., Mutter M., Voragen F.G.J., Thibault J.-F. Isolation and structural characterization of rhamnogalacturonan oligomers generated by controlled acid hydrolysis of sugar-beet pulp. // Carbohydr. Res.-1998.- V. 305.- P. 271-280.

150. Godstein I.O., Hay G.W., Lewis B.A. and Smith F., in Whistler R.L. (Ed). Methods in Carbohydrate Chemistry, V. 5. New York and London: Academic Press- 1965. (pp. 361-370).

151. Усов А.И., Билан М.И. Полисахариды водорослей. 52. Строение сульфатированного ксилогалактана из известковой красной водоросли Bossiella cretacea (P. et R.) Johansen (Rhodophyta, Corallinaceae). // Биоорган, химия.- 1998.-Т. 24.-C. 139-146.

152. Новосельская И.Л., Воропаева Н.Л., Семенова Л.Н., Рашидова С.Ш. Пектин. Тенденции научных и прикладных исследований. // Химия природн. соедин.- 2000.- №1.- С. 3-11.

153. Wood, P. J., Siddiqui, I.R. Determination of methanol and its application to measurement of pectin ester content and pectin methyl esterase activity. // Analyt. Biochem.-1971. -V. 39.- P. 418-423.

154. Hodge J.E., Hofreiter B.T. Determination of reducing sugars and carbohydrates. // Methods in carbohydrate chemistry. / Ed. Whistler R.L., Wolfrom M.L., BeMiller J.N., Shafizadeh F.: New York: Academic Press. 1962. P. 380-394.

155. Dubois M., Gilles K. A., Hamilton J. K., Rebers P. A., Smith F. Colorimetric method for determination of sugars and related substances. // Analyt. Chem.- 1956.- V. 28.- P. 350-356.