Терпеноиды и флавоноиды PULICARIA SALVIIFOLIA и PULICARIA ULIGINOSA тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН ИНСТИТУТ БИООРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ ИМЕНИ АКАДЕМИКА САДЫКОВА А. С.

п г г* 1

• I о о,]

* Г ДЕК Ил правах рукописи

ЭШБАКОВА КОМИЛА АЛИБЕКОВНА

УДК 547.91:547.595.9:547.972.

ТЕРПЕНОИДЫ И ФЛ4ВОНОИДЫ PULICARIA SALVIIFOLIA И PULICARIA ULIGINOSA

02.00.10 — Биоорганическая химия, химия природных и физиологически активных веществ

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

)

ТАШКЕНТ — 19%

Работа выполнена в Ордена Трудового Красного Знамени Институте химии растительных веществ АН РУ.

Научный руководитель: доктор химических наук,

профессор МАЛИКОВ В. М.

Официальные оппоненты: доктор химических наук,

профессор У. Н. Зайнутдинов

кандидат химических наук старший научный сотрудник Ш. Ю. Исламбеков

Ведущая организация: Ташкентский Фармацевтический

институт

Защита диссертации состоится « Щ » Ш91996 г.

в су часов на заседании Специализированного Совета

Д 015.21.01 при Институте биоорганической химии им.акад. Садыкова А. С. АН РУ по адресу: 700143, Ташкент, ул. X. Аб-дуллаева, 83.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ИБОХ АН РУ.

Автореферат разослан «

Ученый секретарь Специализированного Совета доктор химических наук, проф.

Н. И. БАРАМ

- о -

Актуальность тшобпемы. Растительной гар в настоящее вреда тагае. как и во времена зелжого Ибн Синьг, остается неисчерпаемым источником новых природных биологически активных веществ. Наряду с широким спектром физиологического действия растительные вещества обладают большим разнообразием углеродных скелетов, циклов. Функциональных групп и химических сесйстз. поэтому их химическое исследование всегда актуально.

Цель работы. Целью диссертации было исследование двух представителей рода Pulicaria сен.Asteraceae: P.salviifolia и Р.uliginosa. выделение и разделение терпеноидов и флавоноидов. идентификация известных, установление строения новых соединений, изучение их химических и спектральных свойств, разработка способов получения наиболее физиологически активных компонентов.

Научная новизна работы заключается в том. что: -выделены и установлено строение 3 новых клеродановых дитерпеноидов и 1 нового флавсиа. из P.salviifolia.

-впервые подвергнут химическому исследованию вид Р.uliginosa. из которого выделены и идентифицирована 1 сесквитерпено-выЯ лактсн и i флавон.

Практическая ценность диссертации заключается в. разработке нового способа получения гкпоглккемкческсго препарата сальзифо-лина. позволявшего увеличить его выход в 5 раз. На способ получено положительное реаение на заявку от 29.06.92 г. И 4943487. йа основе изучения динамики накопления сальвифолина в различные периоды вегетации было показано. что максимальное его содержание приходится ni период цветения и начала плодоношения.

На защиту выносятся следуедие основные положения:

1. Результаты исследования по выделению и идентификации терлйнондов и фласонсидов дзух видов растений рода Pulicaria.

2. Доказательство строения трех новых дитерпеноидов юзероданосого ряда и одного нового флавока.

3. Разработка нового способа получения препарата "Сальви$ояин"а (увеличивающего его выход в 5 раз).

4. Исследование динамики накопления сальвифолина в растении Pulicaria salviifolia в различные периоды его вегетации.

Публикация и апробация работы. Результаты исследований были опубликованы в 6 статьях в журналах "Химия природных соединений*. "Киме ва фармация", доложены на конференциях молодых уче-

них НХРВ АН РУз (1991.1992 г.). 1-ом Международном Узбекско-Ту-рецком симпозиуме по химии растительных веществ (Тапкент, 1994Г).

Работа выполнена в лаборатории химии кумаринов и терпеноидов ордена Трудового Красного Знамени Института химии растительных веществ АН Республики Узбекистан.

При выполнении диссертационной работы соискатель пользовался консультациям кандидата химических наук, старшего научного сотрудника Сагитдиновой Г.В.

Объем и структура диссертационной работы. Диссертация изложена на 104 страницах и состоит из введения, литературного обзора (глава i). обсуздеш:я собственных исследований (глава 2), экспериментальной части (глава 3), выводов и списка литературы, вклячаюцего 100 источников и приложений, куда входят акты испытаний. Работа иллюстрирована 7 таблицами, 10 рисунками.

Литературный обзор состоит из четырех разделов, где впервые собран, систематизирован и обобщен материал но всем изученным видан Pulicaria.

ТЕРПЕНОКДЫ К СЛАВОгЮИД!и P'JLICAIIIA CALVIIFOLIA И PULICARIA ULIGINOSA Дктерпенсвды "Pulicaria salviiíolia

Pulicaria salviiíolia Bgl ín Нет (блошшца шал®еслисгкая, сем. Asteraceae) многолетнее растение, достигающее высоты 1 к. имеет сильный специфический запах полыни, покрыто беловатым налетом, произрастает кг сухих качекисто-Е^бкистах стслонах. на галечниках и на выходах пестроцветных пород, в основном в Средней Азии.

i ¿líiLL oímjmí кссл&ДйилШи ¡¿идз&чНа^ чйсть ило»ик*;цы у~

мой, собранной в стадии цзстемиг. вблизи селения Хоаабад Пгдского района Наманганской области, при этом выделены 5 зе^еств: саль-вин. сгльвннин. хардвихкиевая кислота, сальвифолин, сальвицин. Эти вещества имеют выраженный гипогликемический эффект. Из них сальвифолин показал самый высокий гипогликемический эффект.

Мы исследовали надземную часть Pulicaria salviiíolia. собранную в разных местах произрастания. Предварительные исследования показали, что химический состав растения Р.salviiíolia, соб-

санного из 5 мест произрастания (Ташкентской обл. окпестностн Ангрена, окрестности Чарвака, Республика Таджикистан, окрестнос-та г. Айни. Самаркандской обл. по берегам р. Зарафаан, наманганс-кой обл. село Пунган.) одинаковый, а корни из всех мест отличаются ст надземной части по химическому составу.

Из хлороформного экстракта надземной части наряду с ранее вьщглешшмн веадесизанк, многократным хроматографированием выделила ече четыре новых вещества: сальвицинин, сальвицинолнд А и 3, пуликарин. По спектральным характеристикам и химическим свойствам они были отаесгкы к клероданозым дитерпеноидам и флаЕОнам.

Строение сальвицинина (I). С22Н305, хорошо растворяется в водных растворах бикарбоната натрия и щелочей, что свидетельствует о его кислотной природе.

ИК-спзхтр:(см"1) 3600-3200 (гидроксильная группа). 1740 (слоаатэфиркая карбонильная группа). 1570 {карбонильной группы).

Масс-спектр: га/г 378 (!Г>. 360 (М-Н20Г., 333 (К-СССНГ.

Спектр ПМ? характеризуется следующими сигналами: снкглетп по ЗН третичных метальных групп при 0.65 и 1.12 м.д.; дублет (ЗН) вторичного метила при 0,7 м.д., Л=6,5 Гц; трьхпротон.чый снкглат мэтнльной группы при дзсйноЗ сзязи при 1. 62 м.д.: узкий трехпро-тояякй снкглет протоков ацетильной группы при 1.96 м.д. Одаопро-тснкьй ушнренньЯ триплет пел 7.04 к. д. сг^7,0 Гц относится к протону при двойкой связи.' сопряжгнноЗ с карбонилом: при 5,2 м.д. резонирует екггал олйфинозогс- протона боковой алифатической цепи в виде триплета з 3>6,5 Гц. При 3.6 м.д. резонирует сигнал протона, гешнал&когэ к 'гздрэкейлк'юй группе, в виде одяопротсн-иого уширенного триплета. ,31«6.25 Гц. Двухг.ротоншй дублет при 4,42 м.д;. 1=6.5 Гц. откосятся к чсгавеиовсЯ группе, связанной с ацетоксильной группой.

Состав салшщякива, кофчзстбо и характер метилышк групп в сочеташш с сигналом оле$ияового прогона при 7.04 м.д., (т.31-7,0 Гц) позволяют отаеети его к датерпскоэдам хлеродакового тина с боковой алифатической цепочкой. Действительно, при щелочном г:-щ~ ролизе из I получена клеродановая кислота сальвмцин (II). идентифицированная по Физико-химическим и спектральным параметрам. По составу садьвйций и сальвицинин различаются на одну ацетиль-нуи группу. Сравнений спектров ПМР I и II (таблица 1> указывает на то, . что сальгкцккмн яздаатся моноацетатом сальвицика по

ТАБЛИЦА i

ХС, мультнплетность и КССВ протонов в спектрах ПМР салъвицини-иаШ н его производных (О-ГМДС. 100 МГц. d, м.д. J. Гц)

Вещество и растворитель Положение протонов

{1-3 !!-б 11-14 2Н-15 CH3-I6 СНз-17 СНэ-1в СН3-20 ССН3 ОАс

СальвицининШ" 7.04. 3.6 5.2 4.42 1.62 0.7 1.12 0.65 - 1.S6

CDCl3 т 7.0 т 5.25 • Т 6.5 СП ii B.CV Д 6.5 с с с

СальвицинШ)" 7.1 3.62 5.32 •4.1 i! 6 0.72 1.14 0.65 - - ■ - .

CDClj : т т . Т Д с д • с с

7.0 5.0 6.5 6.5. ЗН 6.5

Лактон (III) 6.4 3.64 5.26 4.45 1.62 0.92 0.96 0.8 2.0

CDCI3 т 5.6 дд . 12 4.0 Т 7.0 Д 7.0 С Д ■ 6.5 с с с

Метиловый эфир 5.78 3.63* 5.65 4.42 1.65 0.59 1.4 0.51 3.63 2.0

сальвицининаОУ) т 1! т д с Д с с с с,

С5В5» 7.0 6.5 6.5 6.5

Диацетат мети- 5.78 4.7 5.25 4.5 1.64 0.77 1.32 0.7 3.6 1.92

лового эфира Т ДД Т Д G Д С с с с

сапьвицкшша(У) 6.0 10 6.5 6.5 6.5 2.0

C5D5II 5.0 с

« Наложение сигналоз Н-6 и 0СИ3.

'** Наблюдается также сигнал протона }цфбохснлмюП грушш при 8.9 м.д.в виде уш.с

первичной гидроксильиой группе при с-15. так как в спектре ПМР сальвицинина сигнал протонов Н-15 претерпевает низкопольный сдвиг на Д5 0.32 м.д. и соответственно наблюдается высокопольный сдвиг сигнала олефинового протона Н-14 на 0.12 м.д. Сигнал вторичной гидроксильной группы Н—6 не изменяется.

Таким образом, сальвицинин шгеет строение 6а-окси-15-ацеток-си-19-1сарбокси-Я1ракс-клерода-3.13(14)-даена (I).

При ацетклирсвании салыжцина и сальвицинина била выявлена способность этих веществ к лактонизации. Из обоих веществ в присутствии уксусного ангидрида в пиридине при комнатной температуре был получен лактон III С22Нзг04 360 <М*). в ИК-спектре которого наблэдается четкая полоса поглощения ■у-лактонного нарбонила при 1780 см"1 и сложкоэфирного при 1745 см"5. В спектре ГШР лак-тона III (таблица 1) наблкдается Еысоколольное смещение сигналов Н-3 и H-1S. лактс::кый протон резонирует при 3.64 и. д. в виде • дублета дублетов, с КССВ 12 и 4 Гц. сигналы боковой алифатииескоЧ цепи практически не изменяют свой харахтер и положение (Н-14. 2Н-15. СН3-1б).

Химические превращения сальвицинина (I)

IV V

Ацетнлировать вторичную гидроксильную группу в сальБкцннине удается только после предварительного метилирования карбоксильной группы диазометаном.

Строение сальвииинолида А (VI). С20Н2805, т.пл. 148-150°. В НК-спектре имеются полосы поглощения гидроксильной группы (340D см"!). карбонила а,р-ненасыщенного ^-лактона (1752,1669 см"5), совокупность полос при 755 и 1669 с.ч"1 характерна для а. ß-ненасыщенной карбоновсй кислоты. Молекулярная масса 348 установлена масс-спектрометрически.

Спектр ПНР близок к спектрам ПМР производных клеродана, ранее выделенных из этого растения.

В облаете сильных полей каблздактся сигналы трех меткльньж групп (СН,-17» СН3-18, СН3 -20, см. табл.2.3). При 7,06 м.д. (уи.т. • J-4.0 Гц, 1Н) наблюдается характерный для вдеродановых производных сигнал винильного протона в группировке -СН«С<с 0 0 н Количество и характер сигналов метальных', групп, тркапеткый сигнал винильного протона позволяют отнести саяьвицияолид А к производным клеродана. В области гакгкдроксилькых протонов наблада-ется одноирстонныЛ .уширенный- триплет (J»5,5 Гц) при 3.75 к. д. Отнесение сигналов Н-14 и Н-16 удалось сделать по результатам экспериментов с двойным облучением. При снятии спектра ИМ? б дейтсромзтаиолг' ка&икдаетга-дюьнах КССВ атих протонов. Оре^ицо-вьш протон Н-14 образует-шюхоразрсаинную квиатстку» структуру, которую по результатам экспериментов с двойкам резонансом -можно объяснить триплрт/трипле.тным расщеплением с метиленовыми протонами 2Н-12 и 2Н-16 с константами 1,5 и 2.0 Гц. Соответственно метиленовые проток« 2Н-12 обнаружены по развязке спин-спинового взаимодействия с Н-14 и 2Н-16 при 2.05 м.д. Сигнал Н-14 при подавлении протонов 2H-12 проявляет остаточное трнплетное, а 2Н-16 дуйаетяое• расщезлекае с кссз.яJ"2,0 Гц. Зто.взаккодейстанс протонов Н-14 к 2Н-16 также- подтверждается двойным резонансом.

Совокупность данных ИК- и спектров ПМР обнаруживает одновременное присутствие в молекуле YI трех основных кислородсодержащих функциональных групп: карбоксила, сопряженного с двойной связью, вторичного гидроксила и карбоннла а.^-сопряженного ■¡(-лактона. "

При метилировании диазометаном в обычных условиях сальвицинолкд А образует метиловый эфир YII.

Химические преарэщения сальвицинолида А (У1)

При - ацеталирсаашт уксусны« . ангидридом.. в пиридине при комнатной температуре, вместо '.ожидаемого ацетата."по зторнчнсй гадрокснльной группе, образуется дилахтон VIII.

В ШС-спекгре VIII наряду с полосой поглощения карбонила исходного вещества при 1752 см"1 появляется интенсивная полоса поглощения карбоиила у-лактоаа при 1760 см"1, а полоса поглощения гидроксила исчезает полностью.

Молекулярная масса вещества. VIII уменьшается ка 18 единиц «Г»330).-т.е. можно предположить, что прензсзла дегидратация с последующая циклизацией С~5 и С-1Э и образованием лактокного кольца.

Это подтверждается,и спектром ПГ-СР вещества УШ: наибольшее изменение происходит в сигнале протона !ЬЗ. который смещается в сильное поле на 0.62 м.д. (табл.2)

Ранее такая склонность к лактониьацня была отмечена для сальвицинина.

Таким образом, для сальвицинолица А предлагается строение 6-а-окси-19-карбокси~тракс-клерода-3.13(14)диен. 16.15-олида.

Таблица 2

ХС. мультиплетность. КССВ протонов сальБйцинолидов А Ш) и Й (IX) и их производных (0-ГМДС, 100 МГц, й.м.д.Л.Гц).

Вещество и растворитель

Протоны

УШ IX

у г У1 Ш

С0С13 сба 00 С1>С13 С0С13 С0С13

н-з 7.06 уш.т 6.83 т 6.70 т 6.44 Т 7.0 т

>4.0 >4.0 >4. о - >3.5 Л»4.0

Н-б 3.75 уш.т 3. 58 дц 3. 62 яд 3.66 дд 3.60 уш.т >7.0

>5.5 >8.5; 6.5 >11: 5.0 >11.4:4.1

Н-14 7.10 уш.С 7.30 тт 7.05 ТТ 7.05 тт 5.82 дд

> 2.0; 1.5 >1. 5;2.0 >2.5: 2.0 >16.0:10.0

Н-15 5.14 д >16.0; 5.01 . д >10.0

Н-16 4.73 уш. с 4.77 дт 4.73 дт 4.72 ДТ 1. 22 с

>2.0; 1.5 >2.0:1.5 >2.0: 1.8

Н-17 0.81 уш.Д 0.83 д 0.80 Д 0. 94 д 0.73 д

.1=5.5 >6.0 >5.0 >5.0

Н-18 1.18 с 1-18 с 1*17 с 0.97 с 1.12 с

Н-20 0.71 с 0.72 с 0.70 с 0.82 с 0. 64 с

Строение сальвицичолида В (IX). СупЕЬлО,. т. пл. 160-161°. НК-спектр (ркс.в): 3600-3200 см"1 (гидрйксильная группа). 1750 и 1680 см*1 (карбонильная группа а, 0-кенасщгкного у-язятощ), Молекулярная масса 31В установлена масс-спектрометрически.

: Спектр ПНР .(табл. 2) позволяет отнести сальвицинолкд В также к ¥-лзктона.ч клероданэвого ряда,: но в. отличие ог сальвицинолида А с алуфсдичесхой боковой цепочкой. Строение боковой алифатической цепочки стацоЕитсй яскшна основании спектров ПМР,

Два дублета при 5.01 к. д. (1-10 Гц) и при 5,14 м. д. (>16 Гц) относятся кпротонам С-15 экзометиленовой группировки, у которых большие константа вицинального взаимодействия. а геминалыше. близки к нуле. Однопротониый дублет дублетов при 5.82 м. д. (>16.0: 10,0 Гц) относится к вицинальному к ним протону при С-14. отсутствие дополнительных расщеплений в сигнале этого протона указывает на то, что соседний атом углерода С-13 четвертачный и сигналы очень характерны для такого Фрагкекта дитерпгноидов. Послгднее хорошо согласуется с тем, что при 1,22 и.д. наблюдается сигнал метила С-16 при атоме углерода.

связанном с кислородной функцией. АБС-экзометиленовая система протонов при С-14 и С-15 также подтверждена методом двойного резонанса.

Тагам образет-т. совокупность спектральных характеристик позволяет предложить для сальвицинолида В строение 13-ок-ск-транс-клерода-3.14-диен-6-а.19-олида (IX).

Строение пуликяпина (X) . Колоночной хроматографией спиртового экстракта на силихагеле наряду с выделеяньт ^нтерпеноидами кле-роданового типа, мы выделили нозое производное флавонола состава С1чН130, (X). т. пл. 180-181° и назвали его/пуликарином.

УФ-спектр 272, 351 ни (1с с 3.61; 3,53; 3,77)]

характерен для производных флавонола, замещенных по гидроксиль-КОЙ группе при С-3. 1Ж-сП£Ктр: 3410,1655,1610,1520.1470.1360 см"1. Масс-спектр: (л/2) ■■ (М* )'«374. (!Г-1)=373. (Г-15)=359.

'' Спеахрашше данные пулнкарина и его молекулярная масса, свидетельствуют о том, что пуликарин относится к дигидрокси-тет-раметоксифлавонам. Ион (М+-1)=373 в масс-спектре соответствует иону, образованному при отрше протона от бЧ)Н-грутта.

Анализ У$-спектров пулнкарина с ионизируюсдеми и комплексооб-разущими добавки А1С13. А1С13+НС1, НаОСН3, СН, СООМа, СН,С00-Иа+Н3ВОэ показывает, что в пуликарине в положениях 3,5, 7,41 отсутствуют свободные гидроксильные группы, т.е. эти группы метилированы.

В спектре ПМР (С0С13. 100 МГц) наблюдаются сигналы, характерные для окси-метоксизамещенных флаконов. Мультиплет (2Н) при 7,55 м.д. соответствует протонам Н-21 и Н-61; дублет (1Н) при 6.95 м.д. относится к протону Н-5!, . синглет (1Н) при 6,42 м.д. характерен для-протона Н-8, сигналы четырех метоксильных трупп в виде четырех узких синглетов (по ЗН) наблюдаются в области 3.75. 3.78. 3.82. 3.85 м.д., при 6.05 м.д. в виде синглета (1Н) проявляется сигнал гидроксилыгой группы, который исчезает в спектре

■о

к

ацетата.

При ацетилировании пуликарина образуется диацетат С23Н2г010 (XI), охарактеризованный спектрально.

Сплавление пуликарина со щелочью приводит к образованию изо-ванилиновой кислоты (XII). что однозначно определяет расположен ние метокси- и гидроксигругд п кольце в.

На основании вышеизложенных данных пуликарин имеет строение 6,31 -дигидрокси-3,5,7,4' -тетраметоксифлавона (X).

Химические превращения пуликарина (X)

C^OCSVioch,

осн, О С ООН

XI хп

сшажтЕРЯЕКонда л щвошг-ПЛЛСАПХА UUGIKÜSA

Блошница болотная - Pulicaria uliginosa STEW (Р.dysentirica) произрастает 2 Центральной Азии. Кране, Афганистане, юге Европы и ранее химическому исследованию не подвергалась.

Строение гайллардина (XIП) кы исследовали надземную часть блошницы болотной. собранную в Ферганской долине (Узбекистан) в период цветения. Для экстракции сырья использовали хлороформ, метанол. Сумму разделили колоночной хроматографией на силикагеле, из хлороформного экстракта выделили оптически неактивное кристаллическое вещество Са7Нг205, т.пл, 188-190°, [а]р 0° (с 0.5; хлороформ).

Согласно ИК-спектру вещество отнесли к ацилированным у-яак-тонам (3520. 1770. 1735. 1680 см"1). Оно имеет ацетильную и гид-

роксильную группы, что потверждает масс-спектрометрия и данные спектроскопии ПМР.

В масс-спектре отмечается пики ионов с и/2 306(М*), 288 ((Г -Н2 0). 247(М*-0С0СН3).

Вещество не ацетилируется уксусным ангидридом в пиридине при нагревании, что свидетельствует о третичном характере его гидрокспльной группы.

S ПМР-спсг.тре кзблкдзиотся сигналы протоков метала при двойной связи (с 1.75 м.д.ЗН), протонов метила при гетероатоме (с 1.18 м.д.ЗН), протонов метила ацетильной группы (с 2.00 м.д.ЗН), лактонного протона (уш.д. J=10 гц.4.4 м.дЛН). протонов экзомети-л€на (два дублета при 5.47 и 6.12 м.д. с J=3.5 гц. по 1Н каждый), два сигнала в виде сильно ускренных сикглетов по 1Н при 5.24 и 5. 8 м.д. могут быть отнесены к гемацильному и олефиновому протонам.

Совокупность спектральных данных позволила предложить для Jf-лактона несколько альтернативных структур. Для достоверного установления строения мы провели рентгеноструктурный анализ (РСА) кристалла списываемого к-лактона. так как располагали всего несколькими кристаллами вещества.

Но результатам РСА исследуемый Y'-дайтоа оказался кдсктичкш' гайлйарпику (XIII). ]:знее-пвделенноку из Gaillardia pulctiella. Inula oculus-chriisti, Ir.ula brltanica L.s.I. . Inula britanlca L.var.cftlnensis (Rupr.) Regel. Растение Pulicaria uliginosa -блошнмца болотная на содержание лактонов исследовалась впервые.

Строение сорб''?юлияа, (XIV). Продолжая исследование суммы надземной части растения Pulicaria uliginosa, из метанольного экстракта мы выделили флавон состава С15Н1206. т.пл. 276-278°.

В КК-спектре флавона присутствуют полосы поглощения при 3350.1658.1525.1570.1520.1440,1350 см"1.

В УФ-спектре имеются максимумы поглощения при \a¿¿27Z (lg е=3.64). 340 нм (lg е=3.80).

,-14-. • <

Масс-спектроиБтрическая фрагментация соединения. характерна для распада молекул оксиметоксифлавонов под действием электронного удара: m/z 300 (М\), 299(М4-1), 285 (М*-СНЗ), 257 (М*-СН3-С0). В спектре ПЫР (ДМСО. 100 МГц) тоже наблюдаются сигналы, характерные для оксиметоксиэамещенных флавонов. Дублет при 7.87 м.д. (J=S, 5 Гц. 2Н); соответствует 'протонам Н-21 к Н-6!. дублет при 6,87 м.д. (J=8.5 Гц, 2Н) относится к протона Н-31 и Н-51, синглет при 6,7 м.д. (1Н) характерен для протона Н-3, сннглет при 6,5 м.д. (III) относится к Н-8, при 3,7 м.д. наблада-ется трехпротонный узкий синглет протонов метоксильной группы.

Анализ УФ-спектрос с добавками метилата натрия и ацетата натрия, а также совокупность всех вышеизложенных спектральных характеристик позволили идентифицировать выделенный флавон с сорбифолкном - 5.6.41-тригидрокси-7-метоксифлавоном (XIY). ранее выделенным из Sorbaria stellipita. Scoparia dulcis.. Anvillea garcini. Pitocarphus revolutua.

Из растений рода. Pulicaria сорЗифолин выделен впервые:

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ.СОДЕРЖАНИЯ САЛЬВИФОЛИНА В СЫРЬЕ.

Из Pulicaria salviifolia была выделена кислота, имеющая кле-родановый скелет - сальвифолин, который обладает гилогликешчес-кой активностью. Для выявления оптимальных мест и периода вегетации сырья мы изучили количественное содержание сальвифолина из пяти мест произрастания растения.

Воздушко-сухую измельченную надземную часть Pulicaria salvi-ifolia, собранную в период конца цветения-начала плодоношения, экстрагировали этиловым спиртом.

После отгонки этанола, остаток обработали этилацетатом, затек раствором соды. После нейтрализации раствором серной кисло-

та целевой продукт извлекали этилацетатом. Сальсифолин выделили препаративно на пластинках силуфол.

Аналогично количественное содержание сальвифолина определяли в разных местах произрастания, в различных органах растения и по периодам его вегетации.

В результате проведенных исследований было показано, что максимальное содержание сальвифолина обнаружено в период цветения и начале плодоношения (таблица 3).

Таблица 3.

Содержание сальвифолина в растений Pulicaria salviifolia в зависимости от места, произрастания и от периода вегетации.

Место произрастания

% Содержание от веса сухого сырья

фаза бурного роста

фаза бута фаза цве- фаза

низации тения начала

плод.

фаза

конца

плод.

1 Окр.г.Намангана

/пос.Пунган/

2 Окр.г.Самарканда дол. р. Зарафпан

3 Окр. г. Ангрена''" /Ангвенскнй разрез/

4 Бостанлик.р-н. Ташкент, обл.

5 Окр.г.Айни Таджикистан

0,58 0.60

0.62 0.65

0,63

0.97 0.Э8

0.97 0.96 0.99

0.99 1.00

0.99 0,98 1.01

0.55 0.57

0.56

-•-Обозначение отсутствия .фазы,

Установили, что его количество практически не зависит от места произрастания, а -тзажо и наибольшее количество сальвифолина содержат цветы и семена Pulicaria salviifolia (таблица 4).

' Таблица 4. ; Содержание сальвифолина в отдельных органах растения Pulicaria salviifolia

N п/п Органы растения СальвифОлин ' -(в % от веса сухого сырья)

1 Стебель 0,30

2 Листья 0.75

3 Цветы : 0.99 :

4 Семена 1.00

НОВЬЙ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ САЯЬЗ№ВДИЯА

Как указано вше. сальвифолиа обладает гипогликемической активностью н для него ранее разработан способ получения. По предложенному способу удается выделить 13Х сальвифолина от общего количества вещества, содержащегося в растении, а основная часть сальвифолина. как показали наши исследования, остается в осадке вместе с хлорофиллами. К недостаткам способа следует отнести использование длительного процесса колоночной хроматографии, при которой необходим постоянный контроль за фракциями методом ТСХ, объединение однородных фракций и т.д. При наработках большого количества вещества этот процесс может быть многодневным и непременно сопровождается потерями больших количеств веществ, необратимо адсорбирущихся на адсорбенте.

Мы разработали новый метод получения сальвифолина из растения с большим его выходом.

Поставленная цель достигается тем, что сальвифолин как вещество, имеющее кислый характер, извлекается непосредственно из сухого измельченноф'растения 1-33 раствором соду, содовый экстракт после -прожязйая гаксаяеи, '.'пожелается, выпавший осадок отделяете?!, проиьтается длегалл-поагцпюй водой, сушится при комнатной температуре. затем растворяется в сухом хлороформе, при сгущении которого -в .'вакууме, •'.сальви^одам -выпадает -в осадок.. Выход, конечного продукта достигает 65% от общего содержания т.е. в 5 раз больве, ^чем по нзьестасму способу.

Содержание сальвифолика в растении определено исчерпывающей экстракцией кз,'сырья -содовш. раствором н затем препаративной хроматографигй, оно составляет 1% от веса сухого растения, собранного в фазу начала плодоиоиения..

Общая схеад получешщ сальвифо;мна по предлагаемому способу представлена на схеме 1.

Саяьвя$олии,\ получения! предлагаемым способом. идентифицирован по Ш., ПИР, масс-спектрам, его гкпоглике:з1ческая активность подтверждена фардакологаческими исследованиями в отделе фармакологии и токенколотг ИХРВ с.н.с.Хуааактсвой З.А. и м.н.с. Таииу-хаиедовой И.А.

Схема 1.

Обиая схема получения савьвифслина.

У

| РАСТВОРЕНИЕ 3 УЛОРОФОРМЕ, СГУЕЕНИЕ

, Г

САЛЬВИФОЛЯН !

Якологнчес^яя ¿г.ткзуость изученных встгеств'. В спкзи с тем, что в последние года-появился-ряд сообщений о влиянии флавокои-дов на организм при нарушении лигмдного обмена, представляет интерес провести фармакологические исследования по действию пула-карикг на уровень хол'естеряяа и триглицеридов в сыворотке крови Исследования был!! проведены в лаборатории фармакологии КХРВ ак РУ с.н.с., к. б.н. Хушбактсвой З.А. Полученные ею экспериментальные данные показывают, что введение пуликарина нормальным животным в течение 10 /шей способствует снижению уровня холестеоина в сыворотке крови на 20%.

Применение пуликарина в условиях нарушенного липидного обмена способствует его нормализации. Таз-., если воспроизведение три-тоновой гиперлипидемии сопровождалось увгличением уровня холестерина в 4 раза, предварительное введение пуликарина препятствовало увеличению его уровня на 19%. Введение же его животным с эндогенной гиперли1шдемией также способствовало снижению содержания холестерина в крови.

ВЫВОДЫ

1. Проведено систематическое исследование терпеноидов и флавонов двух видов Pulicaria. Р.uliginosa химическому исследованию подвергалась впервые.

2. Из Р.salviifolia выделено 8 дитерпеноидов клеродановогр ряда. 5 из них идентифицированы с ранее выделенными веществами (сальвин. сальвинин. хардвиккиевая кислота, сальвифолин. сальвй-цин), а для 3 новых-сальБИЦИННна ба-окси-15-ацегокси~19-карбокси -траьс-клерода-3.13(14)-диена, сальвицинолида А б-а-окси-19-кар-бокси-транс-клерода-3,13(14)диен,16.15-олида и сальвицинолида Б 13-окси-тргшс-клеро«а-3,14-диен-6-а, 19-слида, установлено строение на основе химических превращений, интерпретации спектральных характеристик как самых Беществ, так и их производных.

3. Впервые из Р.salviifolia выделен новый флавон! для которого на основании изучения физико-химических свойств и спектральных характеристик как самого вещества, так и его ацетильного производного, установлено строение 6.3'-дигидрсжси-3,5.7,4*-тет-раметоксифлавона. названного.. пулигсарином.

4. Из Р. uliginosa впервые взделени и идентифицированы гвая-нолид гайллардин и флавон сорбифолин.

5. На основе изучения дннаинкн накопления салььифолииа с онтогенезе было показано, 'Что. максимальное содержание сальвифолина приходится на период цветения и начало плодоношения.

6. Разработан новый способ получения гипоглнкемнческого препарата сальвифолина. на который получено положительное решение на заявку от 29.06.32 г. N 4943487.

Содержание;диссертации изложено в следуадих работах:

1. Сагнтдинова Г.В. , Эагбакова К.А. Хушбактова З.А.. Маликов В.М.. Олимзв 5. Флавоноид пуликарин из Pulicaria salviifolia и его гиполипидемическля активность. //Химия природ.соед.-1992.- К 3-4.- С. 328-330.

2. Сагитдиьова Г.В.. Эшбакова К.А.. Калифов В.К. Дктерпено-иды Pulicaria salviifolia III. Строение сальвицикина. // Химия природ.соед. -1994. -Н 2. -Р. 246-249.

3. Эибакова К.А.. Сагитдинова Г.В. Маликов В.М., Мукунов И. У.. Абдуназаров С. Кандли диабетга карши препарат "Сальвифолин"нинг усинлнкдаги микдорий анадизи. //tome ва

фармаиия. -1995. -Н 1. -С. 16-13.

4. К.А.Эшбахова. Г. S. Сагитдинова, В. М.Маликов. С.Мелибаев. Злавон сорбифолин из Pulicaria uliginosa. //Химия природ.соед. - 1995. -Н 1.- С.100-101.

5. К.А.Эпбакова. М.К.Махмудов. Г.В.Сагатд:;нопа. Б.Такходза-ез. Кристаллическая и молекулярная структура гзайанолида гайл-лардина. //Химия природ.соед. -1996. -N 2. -С. 202-205.

6.К.А.Зшбакова. Г.В.Сагатдинова. М.Г.Левковнч. Б.Ф.Расулов, Н.Д.Абдуллаев, В.М.Маликов. Дитерпеноиды Pulicaria salviifolia IY. Строение сальвицинолидов А и В. //Химия, природ, сое-дин..-1996. -Н 6. -С. 855-858.

7. Сагнтдкнова Г.В.. Забакова К.А.. Ташмухамедова М.А.., На-матханов А.У.. Мелибоез С.. Нурмухамеяоза М.Р.. Абдуллаез Н.Д.. Маликов В.М., Хушбактова З.А.. Сыров В.Н., Арипджанов А.К. Положительное решение на заявку от 29.05.92 г. N 4943487. "Способ получение б-с-гидрокси-lS. 16-эпокся-19-карбоксн-транс-клеро-да -3(4)13(16). 14 -трие.ч - дитерпекоидязя кислота обладающая ги-погликемическая активность.

X У Л 0 С А

К.А.Эзбакова

PULICARIA SALVIIFOLIA ВА PULICARIA ULIGINOSA УСКМЛИК-ЛАГЙНННГ ТЕРПЕНОЯД ВА ФЛАВОШЩЛАРИ

Диссертация Pulicaria туркукига кирузчи усимликларшшг 2 ту-ряни, (ягня Pulicaria salviifolia ва Pulicaria uliginosa) терпе-новд ва флазононд моддаларин.ч ургапизга багишланган. булиб, иш натиглспда 8 хдеродан ^аторига оид дитерпеноид,- 2 флаион ва 1 сескзитерпгн лактон моддалари ажратиб олинди.

4 янги (3 клеродая каторлн днтерпснонд ва 1 флавон) моддг-ниат тузшшя уларнииг кнмёши! узгаришларини урганищ натижалаои з{акда физик текиарай- усуллари брдздада. исботландн. Биринчи марта Pulicaria uliginosa усимлнги ш<ёзий жи^атдан урганилдя ва бу усимлпк таркибидан илк бора адабиётда маълум сесквнтерпен лакто-нн гайллардин ва Флазок сорбифолинларни -ажратяб олиндн.

Амалий медицина нуктаи назаридан а^амиятяи гипогликемия. препарат "Сальвифолин"нкнг энг куп ии^дори усимликнинг усио хойи, вегетация даври . ^амда усичликнинг органлари б?йича ургаиилиб. унинг ^скмлншанг гуллаа ва уругланшяинг бошланиш даврига тугри

келиши анккланди. Шункнгдех гкпоглякегик препарат -'"Сальзнфо-лхн'нинг янтн. 'унуии- 5 маротоба ю^ери болтан оливка услуба ишлаб чииддди ва авторлих гуво^комасига рухсатнома олинди.

Флавои пуликаринкинг цондаги холестерин мицдорини 20% га ка-иайтириши шшКгЛанда.

' Диссертация рус таляда ёзилган булиб. машянха ёзувидзти 104 бетли техстда баён этилган ва у кирип, 3 боб, хулосалар хш-иа 100 номдаги библиографиянн уз ичига олада.

Sussaary

K.A.Eshbakova

TE5FEN0IDS AXD FLAV0K0IBS OF PULICAEIA SAL.VIIF0LIA AND PULICARIA ULIGIN0SA Hie thesis is-devoted to the study of Pulicaris. salviifolia and Pulicaria uliginosa tarpanoids anal flavonoids. As a result of tlie investigation there have been isolated С clercdane diter-penoids. 2 flavons ,and 1 sesquiterpenlactone. The. structures of 4 new compounds (3 . clerodane ¿¿terpenoids and l flavcne) were elucidated on the tsisiS of cfceaical transformation and spectral sethods of investigation.

Chemical stuiy of Pulicaria uliginosa has been carried out for the first time. •••SesqtiiterpsalactoRe gayllardin ana flavoac Eorbifolin vrcre isolated from ths plant.

It has been established the quantitative content of salvifo-lin depending cn growing place агЛ vegetative period and plant organs.' The practical./ sigtiificince of this thesis consists cf the ftork out of. nes? nsthod for : an isolation of hypoglytoc-Kic preparation "Salvifolih" free the plant with higher yield and the copyright, receipt.

t