Тритерпеновые гликозиды листьев плюща крымского Hedera taurica Carr. тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

Л tf — i з

t'"

АКАДЕДОЯ НШ УКРДИШ.

шшй-шшчЕст тошш им. a.b. богатского

На правах рукописи Т01КА.ЧЕВ1 Наталья Васильевна

УДК 547.918.

ТРИТ2РПЕН0ВЫЕ ГЛИКОЗД* ЛИСТЬЕВ- ШЩА НШМСНОГО HBDEHA T1DRICA САНЕ.

02.00.10. -Биоорганическая химия, химия природных и физиологически активных веществ

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Одесса - 1992

Работа выполнена на кафедре органической химии Симферополь' ского госуниверситзта им. М.В. фрунэе в лаборатории химии при< родных соединений.

Научный руководитель - кандидат химических наук,

доцент ■ В.И. ГРИШКОВЩ

Научный консультант - доктор химических наук,

вед. .н. сотр. A.C. liMKQB

Официальные оппоненты - доктор химических наук,

- ^ ' . профессор Т.И. ДАВИДЕНКО

- кандидат химических наук, ст.н. сотр. И.В. ДОВГАНЬ

Ведущая организация - Киевский государственный униаер

ситет им. Т.Г. Шевченко.

Защита состоится " 'IQ " 199? года в ж:

/ / !

на заседании специализированного Совета Д. 016.58.02 по хиыиче вим наукам в Физико-химическом институте им. A.B. Богатского АН Украины по адресу 270060, г. Одесса, Черноморская дорога, 66. . --'"

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке $изико-химического института им. A.B. Богатскогр АН Украины. • Автореферат разослан " ¿13 " ^ 1992 года.

Ученый секретарь специализированного Совета, кандидат химических наук Jfa^ -H.A. ЛШВИН0£

РОССИЙСКАЯ icy^e,-.ЗЕМНАЯ БИВЛ'/ЛЛЕКА

(Щ&а ХАРАШШДт РЛБОШ

"Актуальность темы. Тритерпеновые гликозиды уже в течение трех десятилетий является объектом пристального внимания химиков, биологов и фармакологов. Эти вещества обладают широким спектром физиологического действия на организм. Однако возможности создания на их основе лекарственных препаратов реализуются не в полной мере из-за возникающих биохимических, интродукционных и ресурсных вопросов. Для их решения'необходимо знание химической структуры тритерпеновых гликозидов растений.

Растения рода плюц (сем. Аралиевые), содержащие тритерпеновые гликозиды, издавна применяли в народной медицине. Но недостаток структурной информации, касающейся, в частности, индивидуальных гликозидов ллща крымского 1 Hederá tauriea Свгг.. ), тормозит ис-юльзование этих соединений в качестве лекарственных препаратов.

Цель работы: Изучение комплекса тритерпеновых Гликозидов мстьев плюща крымского Hederá tauriea Сагг., сем. Araliaocaa, :азработка методов выделения и разделения индивидуальных веществ, .оказательстзо' их строения и выявление биологической активности ыделенных соединений как-перспективных физиологически активных екарственных препаратов.

Научная новизна и практическая значимость., Показано, что шц крымский является источником тритерпеновых гликозидоз ^-агатового ряда и сульфатцрованкых тритерпеноидов. Из листьев этого злтения выделено 20 соединений, б из которых являются иош&и; аз IX 2 гликозида эхиноцистовой кислоты, 2 сульфаифованша тритер-шоида (олеаноловая и эхиноцистовая кислоты), а такие их глиго-щы. •

Гликозиды эхиноцистовой кислоты впервые обнаружены в роде Hederá

Сульф^иро ванные гликозиды являются новыми соединениями Д£Я сьмепС7ва Аралиевых.

3-с>льфаты олеаноловой и эхиноцистовой кислот впервые обнаружены в природном источнике.

Работа представляет интерес в плане применения современных физико-химических методов для доказательства строения гликози-дов. Кроме того показано, что некоторые вещества проявляют имцуносупрессорное действие в экспериментах на мышах. Это определяет практическую значимость исследований.

Работа выполнена по плану НИР Симферопольского госуниверситета по теме 2.29.4.2. "Химическое изучение природного сырья для изыскания биологически активных веществ", номер государственной регистрации 01.66.0069186.

На защиту выносился доказательство строения двух новых сульфатированных тритерпеноидов, четырех новых тритерпеновых гликозидов, двух стериновых гликозидов и двенадцати гликозедо!

производных хедерагекина, эхиноцистовой и олеаноловой кислот из листьев плпца крымского.

Публикации и апробация работы. Основные результаты диссертации изложены в четырех статьях и доложены на ХУ1 Украинской конференции по органической химии (г. Терьопод, 1.10.92г. и итоговых конференциях профессорско-преподавательского состава Симферопольского госуниверситета (1991, 1992 г.г.).

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на страницах машинописного текста и состоит из обзора лите

ратуры (глава 1)5 обсуждения результатов (глаза II), экспериментальной части (глава ¿I), выводов и списка зштературн, вклю-. чающего 131 источник. Работа иллюстрирована 2¿> таблицами и ■?£> рисунками.

Автор выражает благодарность д.х.н., зед.н.с. Института биоорганической химии РАН Б.В. Розынову и доктору, профессору Сзуггеиптонского университета (ЗеллкоЗритения) Л. Джонсону, а ■ratee зед.н.с. Института органической хкшш РАН, д.х.н. A.C. ызаяозу за съемку масс- и ЯйР-спектров.

г ОСНОВНОЕ СОДЕРД/иЖ РДЕОЗЫ . •

I. Выделение глинозидов из листьев плгкца крымского.

Из экстракта.измельченных листьев шшэа смесю хлороформ-этанол (6:1) выделена сукма нвлоподдрвдх тликозидоз - компонентов А , В , С , D , В иг. Экстракт су.эсыо хлорг.фора-ога-иол (3:2) представлен суммой глккозидов сродней поллоносгл -

:со,у.по:-!он'гат,'.и ö . II , I к ~ .

Разделение гдикозкдоз зрэуедзкэ це?одгзл яропг.г.й5пян-«'г ::олоно-пюч н;.:. силикагол-э с : г

¡í сслу-е с-:\ - еллкнгчгклз а дг;-;!:1;;^- •• .'¡•уnn:¿K; гетэдо.". гдон;.': сг;;.г.;:,.^гс-^л"^-

о-'^асгэ. р:хi.oz\u-,oz оеда^силскз, пър-ьгаодог :ix í-;:л:-: пользе с коллегу: ДсЛ

.. . - ■

Гликозиды листьев плюща крымского С Hederá taurlca Carr.)

Таблица

1 Ai • Сз&зРб ■ ~ ' ~ °'014

2 А2 С35Н60°6 " ~ °.°05

3 Bj , Сз5И56Са +43,4 метанол 0,001

4 ы.э. CggH^Og +42,0 . пиридин 0,020

5 G ы.э. C^HggOjj 0,0 пиридин 0,00В

6 D . С41Н660^ -29,9 пиридин 0,00b

7 Е C4IH66°I2 + 7»Ь этанол 0,168

8 Т0 ы.э. C3IH4906SOT4 +42,0 метанол 0,003

9 г1 ■ С41Н66°12 +42'° пиридин 0,002

10 Р2 С42Н6Ь°13 +3,0 пиридин 0,001

11 Р3 с42НбЬ°14 +24,0 пиридин 0,005

12 ?4 ы.э. C3IH4907 sm4 +20,9 метанол 0,005

13 G1 %3%6°22 + 3,6 ' пиридин 0,014

14 G2 С59Н96°25 - .-28.8 метанол 0,022

15 ß. ^S^&^SZ ~ 0,2 пиридин 0,011

16 tij_ -34,9 пиридин 0,041

17 Е, С59Н96°2б -14,9 пиридин 0,1Ь4

18 I0 G49H79°20SМ4 " 6,3 метанол 0,006

19 I С54Н8В°24 +1В»2 пиридин 0,001

20 J 'W^^IS ^4 ~15'0 метанол 0,001

Процентное содержание гдикозидов в свежесобранных листья составляет 0,52 %. ~

В пересчете на воздушно-сухую массу сырья - 2,6 %.

Строение таурозидов Aj и Ао- По данным ^С-ЯМР и масс-спектров гликозид А цредставляет собой смесь стериновых глико-зидов - р -D-глвкопиранозидов стигыастерина (таурозид Aj) и

-ситостерина (таурозид Ag). Гликозиды аналогичного строения в семействе Аралиевых ранее были обнаружены в плице непальском Hederá napalenaia.

Строение таурозцда'Вр В составе таурозида Bj по данным кислотного гидролиза идентифицированы.арабиноза и зхиноцисто-вая кислота, причем остаток арабинозы связан с гидроксильной группой у С-3 атома агликона, поскольку гликозид метилируется эфирным раствором диазометана по свободной карбоксильной группе эхмноцистовой кислоты. Предварительная структура этого глико-зида как 3-0-<х-ь -арабинопиранозида эхиноциетовой кислоты дополнительно подтверждена данными спектра НИР, в котором идентифицированы сигналы, положение и характер расщепления которых (величины констант спин-спинового взаимодействия КССВ ) соответствуют одному остатку ос-арабинозы, а также сигналы агли-конной части (7 синглетов четвертичных -СНд групп, псевдотри-плетные сигналы H-I2 и H-I6 и характерный дублет-дублетный сигнал Н-3). Структура таурозида Вт дополнительно подтверждена

то

данными хоС-ШР спектра.

Гликозид, идентичный тауроэиду Вр выделен из фатсии японской Pataia Japónica.

Строение таурозидов В.,, С и Е. Таурозиды B¿, С и S иден-гифицироваш с ранее выделенными «шкозидами из листьев пшда <рьп.:ского и представляют собой ■ 3-0-оС- ь -арабинопиранозид седерагенина, 3-0- ос _ ь-рашопиранозил-СГ-гйЭ-О-с*-! -арабино-шранозид олеаколовой кислоты и З-О-ос _ i -радаапиранозил-CI—'¿)--О-сС-Ь -арабинопиранозид хедерагешна.

- а -

то

Строение таурозида зр . Данные кислотного гидролиза и С-ЙМР спектра соответствуют составу гликозида рашозагарабиксза: охинощ!сч»ааз кислота 1:1:1.

В ШаР-сдектре полного ацетата таурозида В методой двойного гомоядерного резонанса удалось отнести сигналы всех скелетных цротоков сахарных остатков. При этоы сигнал Н-2' остатка араби-нозы находится в существенно более сильном поле (3,56 м.д.), чем Н-2' остатка рачнозы,. что свидетельствует о наличии гликозадной связи ыеаду--ними, а из величины КССВ % остатка грабинозы (6,8 Гц) следует с£-конфигурация ее гликозидного центра.

' И

Сигналы углеводных С-атомов в С-&1? спектре таурозида 13 полностью совпадают с литературными данными для дисахаридного фрагмента сс-и -рамнопиранозил-<1-»2)Ч)-<х-ь-арабинопнрано-зил- , а'остальные сигналы,соответствующие агликонной часта гликозида, идентичны таковым для 3-гликозилированной эхиноцис-товой кислоты.

Таким образом, таурозид Э представляет собой 3-0-сс-Ь -раьмопирачоаил-(1—'2)-О-«.-Ь -арабинопиргнозид зхиноцястовой кислоты и является ноззд гллкооидры:

Строение таурозида ?0 . - В кислотном гидролизате Ро идентифицирована олеаноловая кислота и нэ обнаружены сахара.

Сопоставление хин. сдвигов сигналов С-атоыов в ^С-ЯЫР спектре с литературными данными для олеаноловой киСлоты показывает их'близость, но хим. сдвиг с 6 84,7 ы.д. не совпадает ни с хим. сдвигом С-3 атома в гликозилированной олеаноловой кислоте (88,9 м.д.), ни в свободной олеаноловой кислоте (7В,£ м.д.). Сигналы других углеродных атомов в спектре таурозида отсутствуют. Очевидно, Сд-ОН группа этерифицирована неорганической кислотой. Качественный.анализ гидролизата Ро позволил обнаружить сульфат-анион. Дачные Ш-спектроскопий дополнительно подтверждают наличие 0=^=0 группы . 1400 см""*, 1230

см"*). Следовательно,, таурозид Р0 представляет собой 3-судьфат

13 "

олеаноловой кислом. С-ШР спектры ро и синтетического.

3-сульфата олеаноловой кислоты идентичны, что. окончательно

подтверждает структуру таурозида 70 ;

3-Сульфат олеаноловой кислоты впервые обнаружен в природном источнике.

Строение таурозкдов , Р2 и . По хроиатогрсфзчес-

кой подвижности, результатам кислотного гидролиза и на основа тч

АОС-ЯЫР спектров таурозида , р2 и идентичны ранез изученным хедерозид&ы 1>2 , ^ и Т из ягод шаща^фиасзого а

представляют собой 3-0- £ - Б-глюкопиранозил-С!—*2)-0-ос-ъ -арабинопиранозид хедерагешша* 3-0-£ - В-глюкопиранозя-(1-»2)-

- Х)-глюкопиранозид олеаноловой кислоты и 3-0- р -ъ -глюко-пиранозил-(1—»2)-0--глюкошранозид хедерагенина соответст' венно.

Строение таурозида . В спектре ПМР таурозида наблюдается значительный низкопольный сдвиг (1,3 м.д.) сигнала Н-3 по.сравнению с положением сигнала Н-3 в гликозилированной эхиноцистовой кислоте С3,24 м.д.). Остальные сигналы соответствуют протонам остатка эхиноцистовой.кислоты. С учетом данных кислотного гидролиза (обнаружены эхиноцистовая кислота и сульфат-анион) можно предположить, что Сд-ОН группа этерифицированЕ серной кислотой аналогично таурозиду Т0 . Это подтверждается и данными ИК-спектроскопии.

13

Сравнение хим. сдвигов сигналов в С-йМР спектре Р^ с литературными данными для синтетического.3-сульфата эхиноцистовой кислоты показывает их совпадение, что окончательно подтверждает структуру таурозида как 3-сульфата эхиноцистовой кислоты:

3-Сульфат эхиноцистовой кисл оть впервые выделен из природного источника.

Строение таурозида СЦ , По хроматографической подвижности тауразид .g1 совпадает с хедерозидом g из ягод плюща • крымского. Их идентичность дополнительно подтверждена данными

кислотного гидролиза, сравнением прогенинов, полученных после

13

щелочного гидролиза .И полным совпадением С-ЯМР спектров. Следовательно, таурозид является 3-0- ос-Ъ -арабинопирано-знл-28'-С- et- ь -рамнопиранозил-(1—>4)-0-js - D-глюкопиранозил--D -глюкошранозиловнм эфиром хедерагенина.

Строение гаурозида Sq • данным кислотного гидролиза

таурозид (*2 содержит ра(лнозу, арабинозу, глюкозу и олеаноло-

вую кислоту. Прогенин из (¡2 идентичен таурозиду С из листьев

плюща и представляет собой 3-0- ы.-ъ -рамнопиранозил-ii—»2)-

0- ос- 1 -арабинопиранозид олеаноловой кислоты. 13

G-iîiAP спектр таурозида S2 содержит пять сигналов аномер-ных С-атомов. Следовательно, по карбоксильной группе у. <*2 присоединен трясахаридный фрагмент предположительного строения & -Ь -рамнопиранозил-(1—>4) -0-р - D -глюкопиранозил-(1 —»6) -0-s -D -глюкопиранозшг- , типичный для гликоэидов растений сем.

то

Аралиевых. В C-nàP спектре G2 сигналы С-атомов агликонной части аналогичны таковым для олеаноловой кислоты.

Полные отнесения сигналов в ЛМР-спектре таурозида G2 выполнены с помощью методики селективного гоыоядерного двойного

■ра

резонанса, а отнесения сигналов в спектре С-ЯМР - с помощью

двумерной гетероядерной корреляционной спектроскопии (HETCOSY).

Анализ положения углеводных С-атомов (.м.д.) показал, что оста/ № ток арабинои замещен по С-2, остаток одной глюкозы - по С-6 , м

а другой - по С-4 (.положительные ос -эффекты 4-Ю 'м,д. и отрицательные -эффекты 0-2 м.д.); остатки рамноз являются незаме-

ценны»!(концевыми). Типы связей в обеих углеводных цепях до-полнительн подтверждены и анализом спектров ШУР полного ацетата g2 f£ котором сигналы Н-2'арабинозы, Н~4*и Н-б^глакоз смещены о; обычного положения в сильное, поле на 0.6 - 1,0 м.д. Из величин KCGB сигналов.аномершх протонов следует ^-конфигурация обоих остатков глюкоз и ос -конфигурация остатка араби-нозы. Остальные КССВ полностью согласуются с paiiHO-, арабино-и глюко-конфигурацияют ыокосатридаых состатков.

' Таким образом," таурозид вредставляет собой 3-0-ос-ь-рамношранозил-( I —Z) -0-«■ - Ъ ~арабинолиранозил-2Ь-0-сс-ь -рам-нопиранозил-(1—>4)т0-^ -D -тажогшранозил-(1~»6)-0-^ - d -глюко-шранозиловый эфир олеаноловсй кислоты: ' .

Гликозиды, аналогичные таурозиду G2 , ранее были обнаружены в следующих растениях семейства Аралиевых: Acanthopanax eonticoBíia, Eleutherococcus scaHcocun и Hederá helix.

-Строение тауоозида . ilo данным кислотного гидролиза б составе таурозида с-^ обнаружены раыноза, арабиноза и глюкоза., & в качестве агликона - хедерагениь. щелочным гидролизом G-, получили прогенин, идентичный таурозиду Е из листьев штда

крымского и представляющий собой З-О-а-1-рамнопиранозил-Ь -арабинопиранозид хедерагенина.

Анализ ^С-ЯМР спектра таурозида о^ позволил обнаружить в области 90-110 м.д. сигналы четырех аномерных С-атомов. Следо-затэльио, по карбоксильной группе присоединен дисахаридный фрагмент. Отнесения сигналов фрагмента рамнопиранозил-(1—>2)-арабинопираиозил- проведены путем сопоставления с литературная дакншлл. Оставшиеся 12 сигналов углеводных С-атомов должны принадлежать дисахаридному фрагменту по карбоксильной группе.. С учетом данных кислотного гидролиза это должны быть два остатка глюкозы. Сравнение хим. сдвигов этих сигналов с литературными данными для остатка £-генциобиозы показывает их полное совпадение, а сигналы агликонной части совпадают с литературными данными для 3,28-гликозилированного хедерагенина.

Таким образом, таурозид является 3-0-об- ь-раынопира-нозил-( I—"2) -0- ос— Ь -арабинопиранозил-28-0-^-п -глюкопйрано-зил-(1—- й - г лю ко пир ан о з ил о вым эфиром хедерагенина. _1'ли-козид, идентичный , ранее был выделен из В±рагсиэ азигецд.

А

Строение таурозида Н^. В составе таурозида Н^ с помощью кислотного гидролиза идентифицированы рамноза, арабиноза, глюкоза и эхиноцистовая кислота. Прогенин из Н^ идентичен таурози-ду и из листьев плюща и представляет собой 3-0-«х-ь -рамнопи-ранозил-Ц—2)-О- сС- 1л -арабинопиранозид эхиноцистовой кислоты. По карбоксильной группе таурозида Н| присоединен трисахаридный фрагмент раынопиранозил-( I —4)-О-глюкопиранозил-С!—6) -0-глюко-пиранозял- , поскольку подспектры углеводных частей Н^ и полностью идентичны; сигналы агликонной части соответствуют та-коеь'м для эхиноцистовой кислоты.

' Следовательно, таурозид Н^ представляет собой З-О-ос-ь-раинопиранс *л-(1—-¡¿)-0-Ь-арабинопиранозил-28-0-- Ь-рам-нош^лноаи Л—4)-0-р- В -глюкопиранозил-(1—- Ь -гдю-копираноз^-.овый эфир эхиноцистовой кислоты и является новый соединением:

Строение таурозида Но . Анализ хроматографической под-

13

вижности, кислотного и щелочного гидролизатов, а также С-Нм^ спектров таурозида Н2 показал, что он идентичен хедерозиду Н|-из ягод щщца крымского и является 3-0-<х-Ь-рамнопиранозил-(1-*2)-0-«-Ь -арабиноппранозил-кВ-О-с*- Ь -рамнопиранозил-Ц—»4! -О-В -глакопиралозил-(1-*£|)-0-^-Ъ -глюкопиранозиловыы эфиром хедерагенина.

Строение таурозида 13. При кислотном гидролизе 10 обнаружены олеаноловая кислота, а также рамноза, глюкоза и сульфат-анион. В цродукте целочного гидролиза идентифицировали 3-суль-фат олеаноловой'кислоты. Очевидно, таурозид 10 представляет собой гликозклировалкий по карбоксильной группе тритерпеноидный сульфат из ллстьев плща.

Вследствие низкой растворимости 10 в стандартном раствори-

13

теле - дейтерсгшридине, его ШР- и С-лЫР спектры получены в

дейтерокетаноде. Отнесения сигналов углеводных остатков в спектре ПйР выполнены с помощью двумерной гомоядерной корреляционной спектроскопии ( СОЗУ ), а полные отнесения сигналов,

углеводных С-атомов выполнены с помощью методики НЕТСССТ .

13

В С-ЯЫР спектре 10 в области аномерных С-атомов находятся три сигнала. Следовательно, углеводная цепь по карбоксильной группе представлена трисахаридоы. Характер расщепления сигналов скелетных углеЕодных протонов и КССВ соответствуют двум остаткам ^ -глюкогшранозы и одному остатку рамнопиранозы. Анализ положения сигналов аномерных протонов показывает, что один из.них находится, в существенно более слабом поле (5,30 м.д.), а соответствующий ему С-атом г в более сильном поле 496,2. м.д.), чем другие. Следовательно, этот остаток глюкозы образует ацилглико-зидную связь с агликоном. Остаток этой же глюкозы замещен по ОН-грулпе у С-б'атома (а-эффект +7,7 м.д.), в то время как остаток другой глюкозы - по С^-ОН группе I<х-эффект- +8,5 м.д.); на соседних атомах проявляются отрицательные ^-эффекты около 'I м.д. Остаток рамнопиранозы по положению сигналов С-атомов является незамеченным. Следовательно,трисахарид представляет собой раынопиранозил-С!—*4)-глюиодираноэил-(1-»б)-глвкодираш-зил- . С-ЯМР спектр насыщенного раствора тауроэида 10 в дей-теропиридине показывает полное совпадение сигналов углеводной части с сигналами для ранее описанного наш аналогичного три-сахарида, а агликонной части - с таковыми для сульфатировакного прогенина из Вир1еигиш го*щы11*о11ии и для синтетического 3-сульфата олеаноловой кислоты.

Таким образом, таурозид 10 представляет сабой 3-судьфат-2В-0- ос- ь -раынопиранозил-^!—4)-С- в - В -гллкопиранозил-С!—6)-'

-0-у5- О-глюкопиранозилового эфира олеаноловой кислоты я является новым гликозидом:

"о-£ -о и о

о и

си

Строение таутозида.I . С помощью тонкослойной хроматографии, кислотного и щелочного гидролизов показано, что таурозид I идентичен хедерозиду I из ягод плюща крымского и представляет собой 3-0-£ - Б -глюкопиранозил-(;1-»-2) -О--глюкопиранозил-28-0-^ -к -глюкопиранозил-(1—«■б)-0-р -1)-глюкопиранозиловый эфир хедерагенина. .

Строение таурозида J . ■ В-кислотном гидролизате таурозида .Г обнаружены эхиноцистовая кислота, рамноза, глюкоза и сульфат-анион. В продукте щелочного гидролиза в качестве прогеница идентифицирован 3-сульфат ахиноцистовой кислоты, идентичный тауро-аиду г. из листьев плаца.

С-ШР подспектры углеводных частей таурозидов ^ и 10 идентичны, а хим. сдвиги сигналов агликонной части таурозида 3 совпадают с таковыми для соединения Г^ . Следовательно, углеводная часть J представлена трисахаридом раынопиранозйл-(1-*4)-глюко-гщранозид-С!—»6)-глокопкранозил- ; ее строение дополнительно подтверждено иетодом СОЭ! .

Таким образом, гаурозид J представляет собой 3-сульфат-2Ь~0-сс~ Ь.-рамно1шраноэил-(1~-4)-0- Я - 3-гжяопиранозил-(1-^б)--0-^3-В -глзокопиранозилового эфира эхиноцмстовой 'кислоты-и является новым соединением: .

тельно подтверждены ?АВ~ масс-спектрами, з которых идентифицированы пики кластерных, дротонирозанкых молекулярных и осколочных ионов, соответствующих последовательной потере моносахарид-ных остатков.

Анализ структур выделенных глккозидов показывает, что они представляют собой производные хедерагенина, олеаноловой и эхиноцистовой кислот. Выделенные глинозиды является как моно- , так и бисдесмозмдачи. Структуры-углеводных цепей по гидронсиль-кой группе у третьего углеродного атома агликока представляют

собой типичные для гликозидов растений семейства Аралиевых /

моно- и дисахаридкые фрагменты: c¿-ъ-араэинопиранозил- ,

-ь -рамноппранозил-(1—*2)-0-сс-Ь -арабинопиранозил- , р-V-глюкопяранооил-(1-*-2)-0-<х-ь -арабиношгракозил- и J5-Э -глюка-пиранозил-ÍI—2)-0- jj~D -г.танопиракозил- . дисахаридов с другими типа'/л связей не обнаружено, хотя из близкого вида Hederá holte выделен гликозид со структурой -б-глюкопирано-

зил-(1—*4)-0~ct~Ii -арабинопиранозил^хедерагенин, а. для гликозидов Hederá colcliica характерно наличие разветвленной углеводной трисахаридной цепи у С-3 атома агликока.

Структура углеводной цепи по карбоксильной группе агликона в выделенных гликозидах представлена главный образом типичным д..я всех рас ений семейства Аралиевых трисахаридным фрагментом аС~ L -рашок фэнозил-(1-«4)-0-р - в -глюкопнранозил-(1—»6)-0-J -D-глюкопиранозил- ; однако в отличие от гликозидов Hederá nepalenaisM Hederá гЬошЬеа этот трисахарид ни в одном из выделенных гликозидов не ацетийирован. В ^ес минорных гликозидах по карбоксильной группе обнаружен дисахариднЫй фрагмент ^-в -глюкопиранозил-(1-г*6)-0-.уз-1) -глюкопиранозил- . Для других изученных видов рода Hederá такой остаток не найден.

В изученных к настоящему времени видах рода Нейега обнаружены исключительно гликозиды хедер&генина и олеаноловой кислоты. В Hederá taurioa наряду с этим найдены й гликозиды эхиноцисто-вой кислоты. В семействе Аралиевых два гликозида эхиноцистовой ... кислоты наДцены лишь в роде Fataia . ¿(роме того, в Hederá taurica обнаружены сульфатированные тритерпеноиды (олеаноловая и эхиноцистошя кислоты) и их гликозиды. Сульфатированные тритерпеноиды лупанового ряда ранее были найдены в роде Schefflera сем. Araliaoeae , а сульфатированные гликозиды в этом семействе нами обнаружены впервые.

Д. Биологическая активность тритерпеновых гликозидов листьев плща крымского.

Надлунная активность. Влияние тритерпеновых гликозидов на гуморальный иммунный ответ изучали на кафедре фармакогнозии Курского медицинского института канд.фары.наук доцентом I .А. дроздом. Опыты выполнены на ьылах-самцах линии СБА, и:<ыу-низмрованшх взвесью эритроцитов дамана. Суммарный экстракт из

листьев цлща крымского испытывали в концентрациях 5 и 500 '' мг/кг веса животного. Отмечено, что-сумма экстрактивных-веществ статистически достоверно супрессирует гуморальный шлмунный ответ. у мышей более чем в 30 раз по сравнению с .контролем.

Поскольку сумма экстрактивных веществ представлена в основном тритерпеновыми и фенольными гликозидами (последние имеют низкую ишунную активность), проведено иммунологическое исследование чистого таурозида . Показано, что он угнетает гуморальный иммунный ответ более, чем в 2 раза, проявляя при этом активность в очень низких дозах (0,06 - 0,25 мг/кг)..

Антгельминтная активность. Антгельминтная активность тритерпеновых гликозидов листьев плица крымского изучалась в Вильнюсском отделе Института гельминтологии им. К.И. Скрябина доктором вет. наук А. Вшняускасом. Опыты выполнены на белых крысах, инвазированных Ш.рроа-Ьгоп5у1ив Ъгав111епа1а• Установлено, что сумма тритерпеновых гликозидов проявляет антгельшнт-ную, активность около ЬО% от стандарта.

Острая потребность практического здравоохранения в препаратах, подавляющих аутоиммунные реакции организма человека, позволяет считать тригерпеновые гликозиды листьев плюща крымского веществами, перспективными для создания имыуносупрессоров.

ВЫВОДЫ

1. Показано, что плющ крымский Вейега táurica Сагг. (сем. Atí liaceae ) является источником стергшовых и трнтерденошх гликозидов, а также трктерпеноидшх сульфатов. Из листьев

' ' этого растения выделено 2 гликозида стариков, 2 трктердено-идных сульфата, 2 гликозияирайанкых тритерпеноиднюг сульфата и 14 трктераенавых гликозидов.

2. Установлено строение диух стериновых гликозидов - таурози-дов Aj и - j - И -глакопиранозидов стигмастерика и j-су,-тостерина.

3. Доказано строение двух тритерпеноидных сульфатов - таурози-дов Р0 и как 3-суяьфатов олеаноловой и эхиноцистовой кислот, Бпервие обнаруженных в природном источнике.

4. Показано, что таурозиды IQ и J представляют собой ИБ-0-

■ tí. - L -раАшошфанозил-(1 —»4)-0-£ - В -глэкояиргназкл-( 1-^-6)--0-J3 - D-глакопиранозилоЕые эфары З-сульфатов олеаноловоЯ к гхиноцисговой кислот к являются новыьж гликозидама.

5. Доказано строение тгурозидов Sj , D и Н, как'З-О-сС- ь-ара-бикзшгрскогкда» 3-0-ce- L-ракноаираногкл-(1-«-2)-0- ос- Ь -ар^ккогзфанозмда ¡; 3-0- ос - Ь -рглиолкрансгил-С í-*2) -0- о; -

- г-¿^сЗ.гкожфанозпл-Зо-О-a-L -ргк-оппранозил-(1—-í)-0- f¡-

- Г- —5)- Е -глт;эаз:ранозйлового

ICKC.-.-OTU. 52урозвдь! 3 u кьдкютск НОБШ.:Л СО-íívjuí/k::;:;:.:;. iя;:;;сс:;ди дхшэцнсго&з?. кпедссы EncpBL'D oCHupv-

•3, ¿-'uvüsouicsio -ге^рогкдов С s s ;; í^ как -

rci»:on::puiíOEiii¿-(,i---;'E)-0~cí.-. х-йра&шошфанозэда, 3-0-js - & -•

fí - £-гдпкоЕ'раноз^ла г. 3-0-Ь -

рашопкранозил-(й-*2) -0- оС- Ъ -арабинопнранозил-йВ-О- л-1. - 4. :рашопиранозил-(1—п-глвкооиратозил-С!—-

- Э-глюколиранозилового эфира олеаноловой кислоты. *

7. Доказано, что таурозиды 82» В, 0,|, в^, Н^ и I цред-

•ставляют собой 3-0-ос-х -арабинопиранозид, 3-0-«-Х -рам-нолиранозил-(1-*2)-0- а- ъ -арабинопиранозид, 3-0-£ - 3) -гдп>-копиранозил-С1-*г)-0-о£-1,-арабиношранозид, 3-0--глю-копиранозил-С1—»2)4)-^-1>-глюкодиранозид,. 3-Ю-«-1г -арабино-лиранозил-28-0- Ь -рашопиранозил-С 1—4) -0-п^ - Ь -глпкопи-ранозил-(1—6)-0-^ -1) -глюкопиранозиловый эфир, 3-0-л-1» -рамнопиранозил-Ц—2)-0- «- Г.-араСинопиранозил-28-О-£ - О -глюковдранозил-(1—»6)-0-у - 0-глюкопиранозиловый .эфир, 3-0- ос- х-рамнопиранозил-тИ—»2)-0-а -1 -арабинопиранозил-38-0-

- ос- Ь -рамношранозил-(1—4)-0-р-Ъ -глюкопиранозил-(1-»6)--0-р - в -глюкапиранозиловый э$ир и 3-0-^ -глвкопиранозид--(1-*2)-0- -глокопиранозил-Зв-О-- з> -глокопиранозо-

—(I—-6)—0— ^ — И-глЕкопиранозилоаый эфир хедерагенина. . Тауроззд впервые обнаружен в семействе Аралиевых. В. Выявлена антгельминтная активность суммы тритерпеновых глм-

козидов пдща крымского. 9. Изучено влияние тритерпеновых гликозидов на гуморальный иммунный ответ. Доказано, что сумма гликозидов листьев пдпца и индивидуальный гликозид - таурозид обладает имцуносуп-рессорным действием.

Основное содержание диссертации изложено в следующих публикациях:

1. Тритерг-^новые гликозиды Hederá taurica. УН. Строение ■"ау^.' . ов А и D из листьев шпица крымского. / В.И. 1ришко--вец, Н.В. Толкачева, А.С. .¡Пашков, В.Я. Чирва// Химия при. род. соединений, -1991. -№ £. - С.£Ь6-6Ь9.

2. Тритерпеновые гликозиды Hederá taurica. i'di. Таурозиды F.J-, í2 , 11 тритерпеноидный сульфат. / В.И. Хришковец, Н.В. Толкачева, А.С. Шашков. В.Я. Чирва // Химия лрирод. соединений. - 1991. - № 6. - С. 860-661.

3. Тритерпеновые гликозиды Hederá, taurica. IX. Строение таурозидов G^, (¡^ , G^ > Hí и Н2 из листьев плюща крымского. / В.И. 1ришковец, ,Н.В. Толкачева, А.С..-Шашков,

B.Я. Чирва // Химия природ, соединений. ~ 1992. - № 5. -

C. 522-52В.

' 4. Тритерпеновые гликозиды Hederá taurica. X. Строение соединений 1 и J из листьев плица крымского. / •

B.И. 1ришковец, Н.В. Толкачева, А.С. .Дашков, В.Я. Чирва// Химия природ, соединений. - 1992. - № б. - С. 751-755.

5. Тритерпеновые гликозиды листьев плюща крымского. Толкачева Н.В., 1ришковец В.И., Чирва В.Я. Тезисы докладов ХУ1 . Украинской конференции по органической химии. Часть II.

C. 470. Тернополь, 1992 г.