Динамика образования и распределения микропримесей при биосинтезе этанола тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.04 ВАК РФ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Характеристика полупродуктов и микропримесей, образующихся при биосинтезе этанола

1.2. Динамические факторы накопления побочных продуктов брожения

1.3. Влияние примесей на органолептическую оценку спиртов

1.4. Роль аминокислот в процессе брожения.

1.5. Методы определения примесей этанола

ГЛАВА II. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реагенты

2.2. Объекты исследования, сырье и материалы

2.3. Хроматографическое определение компонентов реакционной среды

2.4. Хромато-масс-спектрометрическое определение микрокомпонентов в плодовом абрикосовом спирте

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТА И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Результаты анализа абрикосового спирта и влияние микропримесей на его качество

3.2. Динамика накопления этанола и примесей в зависимости от вида сырья

3.3. Динамика накопления биомассы спиртовых дрожжей при сбраживании различных субстратов

3.4. Изменение концентрации микропримесей и их соотношения в зависимости от вида сбраживаемых углеводов

3.5 Динамика накопления этанола при сбраживании сусла в зависимости от рН среды

3.6. Изучение динамики распределения микропримесей и их соотношения в зависимости от рН

3.7. Влияние температуры сбраживания на динамику распределения микропримесей

3.8. Динамика распределения диоксида углерода при различных температурах

3.9. Динамика накопления этилового спирта и распределения микропримесей при различных температурах

3.10. Математическое моделирование и оптимизация процесса брожения абрикосового сусла

3.10.1 Биокинетический подход

3.10.2 Метод планирования эксперимента

Актуальность работы. Спиртовое брожение, происходящее на основе анаэробного распада углеводов в результате жизнедеятельности дрожжей, является сложным биохимическим процессом. Основными продуктами спиртового брожения являются этанол и диоксид углерода. Наряду с этими соединениями образуются множество других соединений: высшие спирты; карбоновые кислоты; эфиры; альдегиды; кетоны и дикетоны, гетероциклические соединения и др., которые синтезируются как в результате утилизации углеводов дрожжами, так и вследствие обменных процессов аминокислот в условиях сбраживания. Качество ректификованного спирта существенно зависит от наличия микропримесей в основном продукте, и, поэтому, важной становится проблема определения и установления распределения примесных соединений как на различных этапах биосинтеза этанола, так и в фракциях при его ректификации.

Отсутствие достоверной экспериментально полученной информации о составе и количественном содержании примесных соединений в промышленном этаноле, производимом из различного сырья, делает разработку методики оперативного контроля микропримесей чрезвычайно важной. В этой связи, на первый план выдвигается подбор методов определения малых количеств органических веществ, образующихся при производстве основного компонента.

Одним из самых эффективных методов исследования и анализа органических соединений является хромато-масс-спектрометрия, включающая в себя библиотечный поиск, построения соединений на основе данных по фрагментации молекул различных классов органических веществ и получения информации о молекулярной структуре на основе использования определенных (специальных) методов ионизации.

Вместе с этим особо следует выделить необходимость установления динамики распределения микропримесей в различных фракциях отгона в процессе ректификации спирта.

В определенной степени такого типа задачи, наряду с проведением экспериментальных исследований, можно решать на основе подходов математического моделирования кинетических закономерностей микробиологических и биохимических процессов, а также оптимизации процесса методами планирования эксперимента.

Поэтому разработка физико-химических подходов к качественному и количественному определению микропримесей на уровне ПДК при производстве этанола, а также установление динамики их распределения в различных фракциях при ректификации в зависимости от условий производства является актуальной задачей.

Цель и задачи исследования. Цель работы заключалась в исследовании динамики распределения микропримесей - органических веществ различных классов, образующихся в процессе биосинтеза этанола из различного сырья в производственных условиях ректификации.

Достижение поставленной цели потребовало решение следующих задач:

- разработка методики исследования и определения примесных соединений на основе хромато-масс-спектрометрических методов применительно к условиям производства;

- исследование динамики распределения примесей при сбраживании сусла из различного сырья в зависимости от определяющих факторов управления (рН, температуры, концентрации, природы сырья) эффективностью сбраживания;

- оптимизация параметров сбраживания сусла и образования микропримесей на основе использования математического и биокинетического методов для достижения максимума целевого продукта в биосинтезе этанола.

Объектами исследования являются процессы образования, накопления и распределения органических микропримесей при биосинтезе этилового спирта из различного сырья. Выбор данных процессов обусловлен тем, что это позволит решить ряд конкретных проблем, связанных с повышением качества получаемого продукта при промышленном производстве этанола.

Методы исследования. Экспериментальное исследование динамики образования и распределения, а также анализ составляющих биоинтеза на содержание примесных органических соединений проводили хроматографическим и хромато-масс-спектрометрическим методами. Для оптимизации процесса производства промышленного продукта использованы методы планирования эксперимента; для выяснения особенностей биокинетических закономерностей образования этанола применены методы математического моделирования.

Научная новизна работы заключается в следующем:

- разработана методика идентификации и количественного определения примесных соединений в процессе биосинтеза этанола на основе хромато-масс-спектрометрии; показано, что предложенная методика значительно превосходит по достоверности, воспроизводимости и экспрессности действующие ГОСТовские методы;

- систематически изучены состав и количественное содержание микропримесей более чем в 450 образцах биосинтеза этанола из различного сырья; установлено, что состав и соотношение примесных соединений однозначно характеризуют сырьевой источник, из которого получен этанол;

- изучена динамика распределения этанола и микропримесных соединений из сбраживаемого сырья различного происхождения;

- построена математическая модель процесса сбраживания абрикосового сусла, подобраны оптимальные условия процесса брожения, биосинтеза этанола и образования примесных соединений.

Теоретическая и практическая ценность заключается в том, что развитые в работы подходы с совместным применением хроматографии и хромато-масс-спектрометрии позволяют получить наиболее полную и достоверную информацию о динамике распределения микропримесей при биосинтезе этанола из различного сырья. Разработанные методы исследования могут быть применены при анализе объектов окружающей среды, продовольственного сырья, пищевой продукции, медицинских препаратов и лекарственных средств.

Разработанные при выполнении методы внедрены на ОАО «Дагестан-Этанол», что позволило значительно повысить качество получаемого этанола, а также определить содержание примесных соединений на уровне десятых долей ПДК.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на: Региональной научной конференции «Химики Северного Кавказа народному хозяйству» (Махачкала, 1998), Всероссийской конференции «Химический анализ веществ и минералов» (Москва, 2000), IV Международной конференции «Экология и жизнь» (Пенза, 2001),Всероссийской заочной конференции «Катализ в биотехнологии, химии и химических технологиях» (Тверь, 2002), конференциях профессорско-преподавательского состава Дагестанского государственного технического университета (Махачкала, 2000, 2001, 2002).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 4 статьи, Патент РФ и 6 тезисов докладов.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 128 страницах машинописного текста, состоит из введения, четырех глав, выводов и приложений, иллюстрирована 15 рисунками, содержит 15 таблиц и список использованной литературы из 136 наименований работ отечественных и зарубежных авторов.

Основные выводы

1. На основе изучения динамики биосинтеза этанола и микропримесей, а также распределения микропримесных соединений в головной фракции этилового спирта в зависимости от различных факторов установлено, что образование и характер распределения биомассы, этанола, диоксида углерода и микропримесей зависят не только от природы сбраживаемого сусла и азотнофосфорного питания, но и от концентрации Сахаров, температуры и рН - среды.

2. Показано, что оптимальные условия для максимального выхода продукта и минимального отношения концентраций компонентов сивушной и головной фракций соответствует условиям: 1 = 30 °С, рН 5,2.

3. Используя метод планирования эксперимента, были найдены регрессионные модели, отражающие влияние на процесс брожения абрикосового сусла трех факторов: температуры, начальной концентрации Сахаров и концентрации азота. Методом линейного программирования для целевой функции, максимизирующей выход этанола, определены области оптимальных значений управляющих параметров.

4. В соответствии с литературными данными и собственными исследованиями предложена математическая модель кинетических закономерностей процесса брожения абрикосового сусла в виде системы из трех дифференциальных уравнений. Численное интегрирование системы уравнений показало, что модель удовлетворительно описывает протекающие процессы; показано, что предложенная модель позволяет осуществлять мониторинг технологического процесса производства пищевого спирта.

5. Разработана методика хромато-масс-спектрометрического определения индивидуальных микропримесных соединений из различного сырья на уровне меньших ПДК в этаноле и этанолсодержащих жидкостях. На основе анализа более 450 образцов этилового спирта на содержание микропримесей показано преимущество предложенной методики (по достоверности, воспроизводимости и экспрессности) по сравнению с существующими ГОСТовскими методами.

1. Коновалов С.А. Биохимия бродильных производств. М.: Пищевая промышленность, 1967. 311 с.

2. Коновалов С.А. Биохимия дрожжей. М.: Пищевая промышленность, 1980. 271 с.

3. Ковалевич J1.C. Образование диацетила и других побочных продуктов дрожжами при интенсифицированных режимах брожения. Автор. канд. техн.наук. М.: МТИПП, 1974. 33 с.

4. Артюхов В.Г., Нагорная H.A. Влияние летучих примесей на качество пищевого спирта. М.: ЦНИИТЭИПищепром, 1983. Вып.7. 28 с.

5. Маринич А.Н., Нагурная H.A., Тухарь A.A., Артюхов В.Г. Влияние металла на образование ацеталей и кротонового альдегида в условиях эпюрации. М.: ЦНИИТЭПищепром, 1977. С.4-6

6. Фетман Г.И., Шойхет М.И., Чепелева A.C. Технология бродильных производств. М.: Высш. шк., 1966. 342 с.

7. Anderson R.G.,Howard D. The Synthesis of Acetate Esters by Brewing Yeasts. // J. App. Chem. and Biotechnology, 1976, V.26. №3. P.107-108

8. Илларионова В.И., Финогенова T.B., Глазунова JI.M. Изучение влияния условий культивирования на образование лимонной и изолимонной кислот Candida lipolitica на среде с гексадеканом //Прикл. биохим. и микробиолог., 1975, T.IX . №2. С. 172 178

9. Маринченко Т.Е., Кислая Л.В., Мудрак Т.Е., Серова Ю.З., Добролинская Г.М. Сбраживанбие сусла из крахмалсодержащего сырья термо-толерантными дрожжами //Ферментная и спиртовая промышленность, 1985. №5. С.284-291

10. Schugerl К. Integrated processing of biotechnology products // Biotechnology Advances, 2000. V. 18. P.581-599

11. Гваладзе В.З. Корреляция между продуктами алкогольного брожения. Тбилиси, 1936.

12. Родопуло A.K. Труды ВНИИВиВ «Магарач»., 1958.Т.6. Вып. 11

13. Casey G.P., Ingledew W.M.//Critical Review Microbiology, 1986. V.13. P.219

14. Мальцев П.М. Технология бродильных производств. М.: Пищевая промышленность, 1980. 560 с.

15. Беренцвейг И.А., Исаева B.C., Крицкова Г.М. Динамика накопления диацетила при производстве пива в непрерывном потоке. М.: ЦНИИТЭИПищепром, 1971. №1. С.6-10

16. Беренцвейг И.А., Крицкова Г.М. Изучение образования и превращение диацетила для разработки технологии непрерывного получения пива. М.: ЦНИИТЭИПищепром, 1974. 24 с.

17. Bishop С.М. // Review of Science Instruments, 1994.V.65. P.1803-1832.

18. Родопуло A.K., Кавадзе A.B., Писарницкий А.Ф. Биосинтез и метаболизм ацетоина и диацетила (обзор) //Прикл. биохим. микробиол., 1976. Т.ХШ. №3. С.309-316

19. Казанская Т.Б., Анюхин Ю.Г. Внеклеточное накопление валина бактериями семейства Enterobacteriacere образующими ацетоин //Микробиология, 1974. Т.43. №3. С.546-547

20. Казанская Т.Б, Анюхин Ю.Г, Федорова Т.А. Соотношение ацетоина и валина в культурах бактерий семейства Enterobacteriacere на средах с глюкозой и глицерином. //Микробиология, 1975. Т.44. №2. С.245-247

21. Соришвили Н.Г., Панасюк AJI., Линецкая А.Е. Новое в правилах производства плодовых вин //Виноград и вино России, 1994. №2. С.21

22. Орешкин А.Е., Кудряшова H.A. Образование диацетила и ацетоина при сбраживании виноградного сусла //Прикл. биохим. и микробиол., 1971, Т.7. №6/ С.703-708

23. Бурьян Н.И.,Тюрина JI.B. Микробиология виноделия. М.: Пищевая промышленность, 1979. 272 с.

24. Грачева И.М. Биосинтез высших спиртов дрожжами. Микробиология, Т.1. М.: ВИНИТИ, 1972. С. 97-120

25. Шлегель Г. Общая микробиология. М.: Мир, 1972. 478 с.

26. Родопуло А.К., Чичашвили Н.Д., Ковадзе A.B. Исследование накопления вторичных продуктов алкогольного брожения дрожжами Saccharomyces vini Saccharomyces oviformis //Прикл. биохим. микробиол., 1978, T.X1V. №1. С.85-92.

27. Чулкова А.П. Условия культивирования Aerobacter cloacae, благоприятные для образования валина //Микробиология, 1970.Т.39. №3. С. 440-446

28. Грачева И.М. Исследование процесса образования высших спиртов дрожжами. Автор. докт. техн. наук. М.: МТИПП, 1972. 72 с.

29. Askaa G., Christansen С., Ern M. Bovine Mycoplasmos: Genome Size and Base Composition of DNA //Y. Gen Micropiol., 1973.V.75. №2. P.283-286

30. Jones A.M., Ingledew W.M// Processes Biochemistry, 1994. Y.29.P.483

31. Сисакян H.M. Научное чтение, 1951.С.57

32. Веселов И.Я. Научное чтение, 1951. С.5

33. Технология спирта. Под ред. Яровенко В.Л.- М.: Колос, 1999. С. 140

34. Thoukis R. //Amer. Your. Enolog. 1959. №9. P. 161

35. Patnaik P.R. Are microbes intelligent beings? :- An assessment of cybernetic modeling//Biotechnology Advances, 2000.V.18. №4. P.267-288

36. Taylor F., Michal J. Kurantz, Goldberg N., Craig J.C. //Biotechnology Lettes, 1998.V.20. P.67-72

37. Thomas K.C., Hynes S.H., Ingledew W.M. //Applied Environmental Microbiology, 1994. V.60. P.1519

38. Ибрагимова Н.У., Вагабов M.B., Вагабова З.М-З., Рамазанов А.Ш. Хроматографическое определение микропримесей в этаноле //Известия ВУЗов. Пищевая технология, 2000. №2-3. С.28-31

39. Веселов И.Я., Грачева И.М. Труды 5-го Международ. Биохим. конгресса симп., 1962. Т.8. С.290

40. Castor Y.,Guymon Y. //Science, 1952. №115. P. 2980

41. Castor Y. Food. Res., 1953. №18. P.139

42. Бирюков B.B. Кантере M.B. Оптимизация периодических процессов культивирования микроорганизмов. М.: Наука, 1985. 215с.

43. Лукерченко В.Н., Рыбаков Ю.П. //Хранение и переработка сельхозсырья, 2001. №3. С. 19-22.

44. Сисакян Н.М., Родопуло А.К., Егоров И.А. Химизм образования сивушных масел при алкогольном брожении В кн.: 13. С. 29-43.

45. Грачева И.М., Бабаева С.А., Грязнов В.П. Прикладная биохимия и микробиология. 1965. Т.1, Вып.5. 529 с.

46. Genevois L. //Inds. Agid. Et aliment., 1959. №11. P.837

47. Щербаков C.C., Попов М.П., Кретович B.JT. Идентификация тиолового соединения, выделяемого дрожжами Saccharomyces cerevisiae в процессе брожения.//Прикл. биохим. и микробиол., 1976, Т.ХП. №5. С.674-680.

48. Петросян Ц.Л. Азотистые вещества и их роль в процессе выдержки коньячного спирта. В кн. : 13 ., С.95-106

49. Беренцвейг И.А. Исследование образования побочных продуктов брожения с целью разработки технологии непрерывного брожения и дображивания пива. Автореф. канд. техн. наук М.: МТИППЮ, 1975. 33 с.

50. Жвирблянская А.Ю., Исаева B.C. Дрожжи в пивоварении. М.: Пищевая промышленность, 1979. 248 с.

51. Nabetani H., Nakajima M., Watanabe F.// Journal of Chemical Engineering. 1992. Japan 25. P.269

52. Thomas K.C., et al.//Appried Biochemistry and Biotechnology, 1993.V.43. P.211

53. Mohan S.B., Chonan S.R. //Biotech. Bioeng., 1993. №42. P.974-986

54. Гаврилова H.H. Роль биомассы дрожжей Saccharomyces carlsbergensis в процессе образования высших спиртов при брожении. Автореф. канд. ттехн.наук. М., 1970. 26 с.

55. Ахназарова C.JL, Кафаров В.В. Методы оптимизации эксперимента в химической технологии. М.: Высш. шк., 1985. С.327

56. Бородин В.М., Мейсель М.Н. Опыт применения антибиотика олевомитицина для выявления хромосом у дрожжей. //Микробиология, 1976.Т. 45. №2. С.370-372

57. Иванова В.Ю., Белуков C.B. Повышение криорезистентности пекарских дрожжей как результат изменения условий их культивирования.// Биотехнология, 1996. №8. С.50-52

58. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. М.: И.Л., 1961.

59. Кислая Л.В., Маринченко В.А., Мудрак Т.Е., Климчук Г.К. Влияние кислотности на накопление термотолерантных дрожжей и сбраживание сусла//Ферментная и спиртовая промышленность, 1986. №2. С.42-46

60. Куприянова Ашина Ф.Г., Колпаков А.И., Луцкая А.Ю., Кепечева P.M., Лещинская П.Б. Влияние РНКазы Bacillus intermedius на рост культуры дрожжей Saccharomyces cerevisiae //Прикладная биохимия и микробиология, 1996, Т.32. №2. С.254-259

61. Куприянова Ашина Ф.Г., Колпаков А.И., Луцкая А.Ю., Эль-Регистан Г.И., Козлова А.Н., Дужа М.В. Действие мембранотропных физиологически активных веществ на рост культуры Saccharomyces cerevisiae //Микробиология., 1995. Т.64. №5. С.596-600

62. Чистякова Т.И., Дидюхина Э.Г., Ерошин В.К.,Исследование влияния ионов цинка и железа на рост и состав биомассы дрожжей Candida utils.//Микробиология. 1993. Т.62. С. 700-707.

63. Столяров Б.В., Савинов И.М., Витенберг А.Г. Руководство к практическим работам по газовой хроматографии. М.: Химия. 1978. С.203-205.

64. Маринченко и др. Технология спирта. М.: Легкая и пищевая технология, 1981. 416 с.

65. Малашенко Ю.Р., Мучник Ф.В., Романовская В.А., Садовников Ю.С. Математические модели и ЭВМ в микробиологической практике. Киев: Наукова Думка, 1980. 195 с.

66. Риберо-Гайон Ж., Пеино Э., Риберо-Гайон Н., Сюдро П. Теория и практика виноделия, т.2. М.: Пищевая промышленность, 1979. С. 16-42

67. Родопуло А. К. Определение качества шампанского и игристых вин с помощью газовой хроматографии. Биохимические методы. М.: Пищевая промышленность. 1980. С.165-169

68. Holcberg I.B., Margalith P.//Europe Journal of Applied Microbiology. 1981. V.13.P.133.

69. Брухман Э.Э. Прикладная биохимия. М.: Легк. и пищ. пр-ть, 1981.295 с.

70. Алексеева М.Г. Получение штаммов дрожжей Saccharomyces cerevisiae, обладающих амилолитической активностью для хлебопекарной промышленности /Тез. докл. межд. конф. М.: МПИ, 1991. С. 83.

71. Коновалов С.А. Биосинтез ферментов микроорганизмами. М.: Пищевая промышленность, 1972. 267 с.

72. Ленинжер А. Биохимия. М.:Мир, 1974. 957с.

73. Rose А.Н. Response to the Chemical environment. The Yeats. London. Acad. Press., 1987. V.2. P.5-40

74. Trelea I.C., Titica M., Landaud S., Latrille E., Corrieu G.,Cheruy A. Predictive modeling of brewing fermentation: from knowledge based to black box models/Mathematics and Computers in Simulation, 2001.№56. P. 405-424

75. Никольский H.H. В кн.: Руководство по цитологии. Т.1., М.: Наука, 1965. С.491-522

76. Риберо-Гайон Ж., Пейно Э. Виноделие возбудители брожения. Приготовление вин: пер. с фр. / под ред. Н.К.Могилянского. М.: Пищевая промышленность. 1971. 378 с.

77. Неклюдов А.Д., Федорова Н.В., Илюхина В.П., Купов Х.А., Кравченко JI.B. Влияние аминокислот и полипептидов на процесс автолиза биомассы Saccharomyces cerevisiae //Прикладная биохимия и микробиология. 1994. Т.30. вып.1. С.127-131

78. Гуськова В.П., Беляева Р.Ф., Георгиев Е.С., Сизова JI.E. //Гигиена и санитария. 1995. №2. С.50-51

79. Martin R.A., Wood R., Peake A.A. Committee on foods //J.AOAC Ind. 1992. V.75. №1. P.157-159

80. Gonzalez L.M., Gonzalez L. R. A selective separation of alcohol beverages and distilled wines by GC //J.Chromatogr. Sci., 1994. Y.32. №5. P.195-198

81. Walsh J.W., Illingsworth B. The analysis of trace components present in gain neutral spirits and commersial vodkas /PITTCON 94, Chicago, 1994. P. 805.

82. Sandford V., Overton Ph.D., Manura J.J. Volatiles in commercial beverages.// PITTCON'92, New Orleans. 1992. P.24-26

83. Delahunty C.N. Conner J.M., Piggott J.R., Paterson A. Perception of heterocyclic nitrogen compounds in nature whiskey //J. Instr. Brew., 1993. V.93. №6. P.479-482

84. Laber H., Schulz J., Spanhalz W.R., Bremser W. Use of a combined GC/FTIR/MS System for the analysis of spirits //J. Anal. Chem. 1995. Y.353 №6. P.530-535.

85. Messer P., Hoffman A., Macnamara K. Application of multidimensional to restricted compound analysis in distilled spirits //PITTSON'95. New Orleans, 1995.P.918.

86. Messer P., Hoffman A., Macnamara К A routine multidimensional GC-MSD for congener analysis in distilled spirits // PITTSON'95. New Orleans. 1995. P.265

87. Favier J.-C., Ireland R.J., Mourel R.-M., Feninberg M. Describtion de la typicite des vius et boissons alkoolisees par le systeme international//Sci. alim. 1994. V.14. №5. P.617-625

88. Maranda D. Oznaczanie zanieczyszczen organicznuchw spirytusach //Przem.ferm.i. owoc. warzyw, 1989. V.33. №5. P.6-8

89. Neale M.E. Rapid HPLC method for determination of ethanol and fusel oil in the alcoholic beverage industry //J. Chromatogr., 1988. V.447. №2. P.443-450

90. Li Juangian, Liu Guojun. Газохроматографическое определение спиртов, альдегидов, эфиров в питьевых спиртах //J. West China Univ. Med. Sci. 1991. V.22. №1. P. 103-106.

91. Hagman G., Roeraade J. Rapid determination of volatiles in alcoholic beverages by precolumn backflush gas chromatography // J.High Resolut. Chromatogr. 1990.V.13. №2. P.99-103.

92. Leisieure M. Identification de polluants a haute sensibilite aves le couplage CPG/ SM SATURN II.// Analusis. 1993. V.20. №7. P.645-649.

93. Dagna L., Gasparini G., Icardi M.L., Sesia E. Metodo multiresiduo di estrazione su colonna per la determinazione di residui di fitofarmaci in matrici vegetali e leaquiede //Boll. chim. ig. Parte sci. 1993. V. 44. №56, P.383-397.

94. Corneliussen P.E., Boyer К W., Chin H.B. Committee on residues //J. AO AC. Ind., 1992. V.4 №1. P.160-163.

95. Sawyer L.D. Multiresidue methods //J. AOAC Int. 1992. V.75. №1. P.119

96. Каталог сокращенных масс-спектров. Новосибирск: Наука, 1981, 188 с.

97. Громова Т.И., Муратшин A.M., Рудакова С.В., Рязанова Н.М. Качество алкогольных напитков на сегодняшний день //Стандарты и качество, 1997. №3 С.71-74

98. Шлегель Г. Общая микробиология. М.: Мир, 1972. 478 с.

99. Banat I.M., Nigam P., Singh D., Marchant R., McHale A.P.//World J. of Microbiol, and Biotechnol., 1998. №14. P.809- 821

100. Востриков C.B. , Мальцева О.Ю., Федорова E.B. Изучение динамики накопления примесей этилового спирта при сбраживании различных видов сусла //Известия ВУЗов. Пищевая технология №4. 1998. С.43-44

101. Грачева И.М., Бабаева С.А., Грязнов В.П. //Прикладная биохимия и микробиология, 1965. Т.1. Вып. 5. 529 с.

102. Залесская М.И., Микробиология, 1997. Т.Х. С. 1941

103. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. В 3-х т. М.:Мир, 1982

104. Мариченко Т.Е., Кислая Л.В., Мудрак Т.Е., Серова Ю.З., Добролинская Г.М. Сбраживание сусла из крахмалсодержащего сырья термотолерантными дрожжами //Ферментная и спиртовая промышленность, 1985. №5. С. 52-56

105. Елинов Н.П. Химическая микробиология. М.: Высш. шк., 1989. 448 с.

106. Бирюков В.В., Кантере М.В. Оптимизация периодических процессов культивирования микроорганизмов. М.: Наука, 1985. 215с

107. Лукерченко В.Н., Рыбаков Ю.П. /Хранение и переработка сельхозсырья. 2001. №3. С. 19-22

108. Banat I.M., Nigam P., Singh D., Marchant R., McHale A.P. //World Journal of Microbiology and Biotechnology, 1998. №14. P.809-821

109. Frank Taylor, Michael J. Kurantz, Neil Goldberg, James C. Craig //Biotechnology Letters,1998. №20. P. 67-72

110. Rodriguez-Acosta F., Torres N.V., Regalado C.M. //Journal of Biotechnology, 1999. №68, P. 15-28

111. Trelea I.C., Titica M., Landaud S., Latrille E., Corrieu G., Cheruy A. //Mathematics and Computers in Simulation, 2001. №56. P. 405-424

112. Bishop C.M. //Review of Science Instruments. 1994. №65. P.1803-1832

113. Acuna G. Latrille E., Beal C., Corrieu G. //Journal of Fermentation Bioengineering. 1998. N85. P.615-622

114. Елинов Н.П. Основы биоехнологии. СПб.: Наука, 1995. 600 с.

115. Шуваева Г.П., Шеламова С.А. Теория и практика решения задач по статистике. Воронеж: ВГТА, 2001. 552 с.

116. Бирюков В.В., Кантере М.В. Оптимизация периодических процессов культивирования микроорганизмов. М.: Наука, 1985. 215с

117. Келети Т. Основы ферментативной кинетики. М.: Мир, 1990. 350 с.

118. Nabetani Н., Nakajima М., Watanabe A. //Journal of Chemical Engineering, Japan, 1992. №25. P. 269

119. Casey, G.P., Ingledew, W. M. //Critical Review Microbiology, 1986. №13. P.219

120. D'amore Т., et al. //Critical Review of Biotechnology, 1990. N9. P. 287

121. Thomas К. C., et al.// Applied Biochemistry & Biotechnology, V.43, 1993. P.211

122. Holcberg I.B., Margalith P. //Europe Journal of Applied Microbiology, 1981. №13. P.133

123. Jones A. M., Ingledew W. M. //Processes Biochemistry, 1994. №29. P. 483

124. Thomas К. C., Ingledew W. M. //Applied Environmental Microbiology, 1990. №56. P. 2046

125. Thomas К. C., Hynes S.H., Ingledew W. M. //Applied Environmental Microbiology, 1994. №60. P. 1519

126. Бурьян Н.И., Тюрина JI.B. Микробиология виноделия. М.: Пищевая промышленность, 1979. 272 с.

127. Frank Taylor, Michael J. Kurantz, Neil Goldberg, James C. Craig //Biotechnology Letters, 1997. №17. P. 37-42

128. Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика. Практический курс. М.:ФАИР-ПРЕСС, 1999. 720 с.