Экстракция витаминов группы B и их определение в фармацевтических препаратах

Зыков, Алексей Владимирович

Экстракция витаминов группы B и их определение в фармацевтических препаратах тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.02 ВАК РФ

Зыков, Алексей Владимирович АВТОР

кандидата химических наук УЧЕНАЯ СТЕПЕНЬ

Воронеж МЕСТО ЗАЩИТЫ

2013 ГОД ЗАЩИТЫ

02.00.02 КОД ВАК РФ

Диссертация по химии на тему «Экстракция витаминов группы B и их определение в фармацевтических препаратах»

Автореферат диссертации на тему "Экстракция витаминов группы B и их определение в фармацевтических препаратах"

005048815 На правах рукописи

ЗЫКОВ Алексей Владимирович

ЭКСТРАКЦИЯ ВИТАМИНОВ ГРУППЫ В И ИХ ОПРЕДЕЛЕНИЕ В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТАХ

02.00.02 - Аналитическая химия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Воронеж 2013

г 4 ЯНВ 2013

005048815

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Воронежский государственный университет инженерных технологий»

Коренман Яков Израильевич - заслуженный деятель науки и техники РФ, доктор химических наук, профессор (ФГБОУ ВПО «Воронежский государственный университет инженерных технологий»)

Кизим Николай Федорович - доктор химических наук, профессор (Новомосковский институт (филиал) ФГБОУ ВПО «РХТУ им. Д. И. Менделеева»)

Хохлова Оксана Николаевна - кандидат химических наук, доцент (ФГБОУ ВПО «Воронежский государственный университет»)

ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет» Минздрава РФ

Защита диссертации состоится «21» февраля 2013 г. в 14 час 00 мин на заседании диссертационного совета Д.212.035.05 при ФГБОУ ВПО «Воронежский государственный университет инженерных технологий» по адресу: 394036, Воронеж, пр. Революции, 19, конференц-зал

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ФГБОУ ВПО «ВГУИТ».

Автореферат размещен в сети Интернет Минобрнауки РФ referat_vak@mon.gov.ru и ФГБОУ ВПО «ВГУИТ» http://wwvv.vsuet.ru

Автореферат разослан «10» января 2013 г.

Ученый секретарь диссертационного совета Д.212.035.05, к,т.н., доц.

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы

Витамины группы В - относятся к важнейшим биологически активным веществам. Контроль качества и подлинности новых лекарственных препаратов, поливитаминных комплексов, биологически активных добавок для детей и спортсменов, содержащих различные витамины, - актуальная задача аналитической химии.

Сложная матрица таблетированных поливитаминных комплексов обусловливает необходимость предварительного извлечения аналитов и их концентрирования. Решение задачи возможно методом жидкостной экстракции и последующего анализа концентрата физико-химическими методами. Экстракция водорастворимых витаминов группы В систематически не изучена, единственный известный коэффициент распределения относится к системе рибофлавин - изобутиловый спирт (0,47). Между тем, экстракция - одна из главных стадий извлечения биологически активных веществ на многих фармацевтических предприятиях.

Наиболее перспективна экстракция частично или неограниченно растворимыми в воде (гидрофильными) растворителями, а также экологически безопасными водорастворимыми полимерами. Выбор полимеров в качестве экстрагентов обусловлен, прежде всего, их высокой комплексообразующей способностью по отношению к биологически активным веществам и возможностью безреагентной реэкстракции.

Спектроскопия в ИК- и УФ-областях является фармакопейным методом анализа витаминов. Электрофоретическое определение витаминов малоизучено, поэтому разработка комплексной схемы анализа витаминов, включающей экстракцию и последующее

Автор выражает благодарность д.х.н. Н.Я. Мокшиной за научные консультации

электрофоретическое детектирование органической фазы, вносит определенный вклад в развитие аналитической химии витаминов.

Работа выполнена в соответствии с научным направлением кафедры физической и аналитической химии ВГУИТ «Теоретическое обоснование, разработка инновационных решений для совершенствования технологических процессов, средств их контроля и оценки экологической безопасности» (г/к 01.1.302.21413) и в рамках ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» (г/к № П2264 от 13.11.2009).

Цель исследования - разработка эффективных разнохарактерных экстракционных систем для извлечения витаминов группы В из водных сред и фармацевтических препаратов с применением УФ-спекгроскопического и электрофоретического методов детектирования определяемых компонентов.

Задачи:

• установление оптимальных условий извлечения витаминов гидрофильными растворителями и их смесями;

• изучение межфазного распределения витаминов в системах водорастворимый полимер - водно-солевой раствор;

• разработка методик эффективного экстракционного разделения бинарных и тройных смесей витаминов с последующим спектроскопическим или электрофоретическим детектированием;

• применение разработанных методик в анализе объектов со сложной матрицей (поливитаминные комплексы и биологически активные добавки).

Научная новизна

Систематически изучена экстракция витаминов группы В из водных сред гидрофильными растворителями разных классов (спирты, эфиры, кетон) и их смесями в присутствии высаливателя. Методом ИК-спектроскопии обоснованы механизмы взаимодействия водорастворимых витаминов с органическими растворителями, представлены схемы образования гидратно-солъватных комплексов.

Для экстракции витаминов применены карбоцепные полимеры поли-Ы-виниламидного ряда - поли-Ы-випилпирролидон (ПВП-18000) и поли-М-винилкапролактам (ПВК-18000), а также полиэтиленгли-коли (ПЭГ-2000 и ПЭГ-5000) и полиакриламид (ПАА-10000).

Разработаны оптимальные условия экстракции (выбор выса-ливателя, исходное соотношение объемов водной и органической фаз, температура, рН, продолжительность экстракции, концентрация полимера). Экстракционные системы применены для разделения бинарных и тройных смесей витаминов.

Для количественного определения витаминов в водных и органических концентратах применены УФ-спектроскопия и электрофорез в режиме мицеллярной электрокинетической хроматографии. Спектроскопическое определение витаминов в бинарных и тройных смесях после их предварительного разделения осуществляли с применением расчетного метода Фирордта.

Практическая значимость

Разработаны эффективные экстракционные системы, обеспечивающие практически полное извлечение витаминов из водно-солевых растворов. Предложены методики экстракционного разделения витаминов, характеризующиеся высокими факторами разделения.

Разработан комплекс экстракционно-спектрометрических и экстракционно-электрофоретических методик определения витаминов в фармацевтических препаратах (таблетированные поливитаминные комплексы и препараты, ампулы для инъекций).

Новизна практических разработок подтверждена 5 патентами РФ. Методики опубликованы в 15 информационных бюллетенях Воронежского ЦНТИ. Разработки используются в лабораторном практикуме на кафедре физической и аналитической химии Воронежского государственного университета инженерных технологий, апробированы в испытательной лаборатории по сертификации продукции при ВГУИТ и в производственных лабораториях отдела контроля качества ОАО «Верофарм» (г. Воронеж).

Основные положения, представляемые к защите:

• извлечение витаминов группы В из водных сред гидрофильными растворителями и их бинарными смесями, а также водорастворимыми полимерами в присутствии высаливателя;

• экстракционные системы для эффективного разделения смесей витаминов;

• методики селективного УФ-спектроскопического определения витаминов в бинарных и тройных смесях методом Фирордта;

• новые экстракционно-спектроскопические и экстракци-онно-электрофоретические методики определения витаминов в фармацевтических препаратах.

Апробация работы

Отдельные разделы диссертационной работы доложены на Съезде аналитиков России (Москва, 2010), XI и XII Международных конференциях «Пищевые технологии и биотехнологии» (Казань, 2010, 2012), Республиканской конференции с международным участием «Аналитика РБ - 2010» (Минск, 2010), XI и XII Всероссийских конференциях «Химия и химическая технология в XXI веке» (Томск, 2010, 2011), IV Международной конференции «Экстракция органических соединений» (Воронеж, 2010), III и IV Международных симпозиумах по сорбции и экстракции (Владивосток, 2010, 2011), I Международной конференции «Современные методы аналитического контроля качества и безопасности продовольственного сырья и продуктов питания» (Москва, 2010), XIX Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Волгоград, 2011), 77 и 78 конференциях «Наукові здобутки молоді -вирішенню проблем харчування людства в XXI столітті» (Киев, Украина, 2011, 2012), II Международной конференции «Актуальные проблемы химической науки, практики и образования» (Курск, 2011), V Всероссийской конференции «Химия в современном мире» (Санкт-Петербург, 2011), III Всероссийском симпозиуме с международным участием «Разделение и концентрирование в аналитической химии и радиохимии (Краснодар, 2011), IV Всероссийской конференции «Теория и практика массообменных процессов химической технологии» (Уфа, 2011), Республиканской конференции «Зеленая химия - в интересах устойчивого развития» (Самарканд, Узбекистан, 2012), II Международной конференции «Химия и химическая технология» (Караганда, Казахстан, 2012), VI Всероссийской конференции молодых ученых, аспирантов и студентов с международным участием «Менделеев-2012» (Санкт-Петербург, 2012), отчетных научных конференциях и семинарах ВГУИТ (2009 - 2012).

Публикации

Основные положения диссертации изложены в 19 статьях, из них 10 статей в журналах, входящих в перечень ВАК, 5 изобретениях, материалах докладов на Международных и Всероссийских конференциях.

Объем и структура работы

Диссертационная работа состоит из введения, четырех глав, выводов, списка цитируемой литературы (151 источник) и приложения (материалы Роспатента, акты апробации и внедрения практических разработок, бюллетени Воронежского ЦНТИ и другие материалы). Работа изложена на 172 страницах компьютерного текста, содержит 22 рисунка и 23 таблицы.

Содержание работы

Во введении обоснована актуальность темы диссертационной работы и перспективность применения экстракции для извлечения, разделения и определения витаминов группы В в водных средах и фармацевтических препаратах.

ГЛАВА 1. Обзор литературы. Приведен обзор способов определения витаминов в водных средах и фармацевтических препаратах. Обобщены известные способы извлечения и разделения водорастворимых витаминов из водных сред и готовых лекарственных форм. Сделан вывод об отсутствии систематических исследований в области экстракции витаминов группы В гидрофильными растворителями и их смесями, а также водорастворимыми полимерами.

ГЛАВА 2. Объекты и методы исследования. Обоснован выбор объектов исследования - тиамин гидрохлорид (Bi), рибофлавин (В2), рибофлавин-мононуклеотид (В*2), пиридоксин гидрохлорид (В6), цианокобаламин (В|2). Изложена методика выполнения эксперимента. Экстрагенты - спирты (этиловый, изопропиловый, бутиловый), кетон (ацетон), эфиры (этилацетат, 1,4-диоксан) и их смеси, а также полимеры (поли-М-винилпирролидон, поли-М-винил-капролактам, полиэтиленгликоли, полиакриламид). Высаливатели -сульфат аммония, карбонат калия, сульфит и хлорид натрия.

Экстракты анализировали методами ИК- (Bruker Vertex 70, диапазон частот 550 - 4000 см"1, интерферометр Майкельсона) и УФ-спектроскопии (Shimadzu UV mini-1240, кварцевая кювета,

толщина светопоглощающего слоя 1 см), а также электрофоретиче-ски на приборе «Капель-105» с применением источника высокого напряжения положительной полярности и встроенного фотометрического детектора (и = +25 кВ, I = 40 °СД = 240 нм) в режиме ми-целлярной электрокинетической хроматографии (МЭКХ).

Обработку и оценку достоверности результатов анализа проводили методами математической статистики.

ГЛАВА 3. Экстракция витаминов группы В индивидуальными растворителями и их смесями.

Экстракция органическими растворителями. Эффективность распределения витаминов в системах органический растворитель - насыщенный водно-солевой раствор определяется способностью экстрагентов образовывать с извлекаемым витамином устойчивые комплексы - сольваты, гидрато-сольваты, ионные ассоциаты.

Ацетон относится к полярным апротонным растворителям, они не могут быть донорами водородных связей, поскольку содержащиеся в их структуре С-Н-связи не поляризованы в достаточной мере. Водородная связь образуется в результате взаимодействия ОН-группы витамина с С=0-группой ацетона.

Наиболее полно ацетоном извлекаются цианокобаламин (В)2) и рибофлавин В2 (К = 99 % и Я = 79 % соответственно). Степень извлечение витаминов В2* и В6 не превышает 25 %. Тиамин гидрохлорид практически не извлекается (табл. 1).

Таблица 1. Коэффициенты распределения (£>) и степень извлечения (/?, %) витаминов при экстракции ацетоном из растворов сульфата аммония; 1, п = 3, Р = 0,95.

Витамин £ /?,% Витамин й

в, 0,20±0,02 3 В,2 550±40 99

в2 20±2 79 В*2 1,4±0,1 22

в6 1,5±0,1 23

Механизм образования гидрато-сольватов в системах со спиртами отличается от сольватации ацетоном. Водородные связи образуются преимущественно за счет свободных электронных пар атомов кислорода ОН-групп витаминов и протонами ОН-групп спиртов.

Наиболее полно извлекается витамин В|2 в системе изопропи-ловый спирт - сульфат аммония - вода (коэффициент распределения достигает 1500) (табл. 2).

Таблица 2. Коэффициенты распределения витаминов при экстракции алифатическими спиртами из растворов высаливателя; 5 : 1, п = 3, Р = 0,95.

Витамин Высали- Этиловый Изопропи- Бутиловый

ватель спирт ловый спирт спирт

в, К2С03 37±3 2,5±0,2 1,4±0,1

В2 Г№14)2804 - 16±1 11±1

В*2 (Ш^БО,, - 0,80±0,06 0,60±0,05

В6 К2С03 220*20 33±3 8,4±0,6

В|2 (Ш4)2804 - 1500±100 330±25

Извлечение витаминов В) и В6 спиртами эффективно только в системах с карбонатом калия в качестве высаливателя. Экстракция этиловым спиртом характеризуется значительно более высокими коэффициентами распределения витаминов В, и Вбпо сравнению с системами на основе изопропилового или бутилового спиртов.

Экстракционные характеристики в системах с этилацетатом и 1,4-диоксаном значительно уступают системам с ацетоном или спиртами. Это объясняется меньшей гидрофильностью эфиров по сравнению с изученными растворителями других классов.

Экстракция смесями растворителей. Установлено, что зависимость коэффициентов распределения рибофлавина от содержания отдельных компонентов бинарной смеси ацетон - изопропило-вый спирт имеет синергетический характер (рис.1).

0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 Ацетон, мол. доли

Рис. 1. Синергизм при экстракции рибофлавина смесями ацетон - изо-пропиловый спирт в присутствии сульфата аммония; пунктир - линия аддитивности.

Одна из причин синергизма - образование смешанных соль-ватов рибофлавина с обоими компонентами смеси растворителей. Влияние равнонаправленных факторов (синергизм и высаливание) на межфазное распределение витамина В2 проявляется в повышении коэффициентов О при экстракции смесью ацетон - изопропи-ловый спирт (мол. доли 0,4 : 0,6).

Экстракция полимерами. Концентрация (С) полимеров изменялась в интервале 0,01 - 0,05 г/см3. Предварительные исследования показали, что при С > 0,05 г/см3 коэффициенты распределения витаминов возрастают незначительно.

Наибольшая эффективность экстракции витамина Во достигается при применении растворов ПЭГ-5000 с С = 0,05 г/см3 (Э = 3300) или ПЭГ-2000 с С = 0,04 г/см3 (Б = 3400) (табл. 3).

Таблица 3. Коэффициенты распределения витаминов при экстракции полимерами; Г = 5 : 1, п = 3, Р = 0,95.

^полимера» Г/СМ В,2 в2 В*2 в6 в,

ПЭГ-2000

0,04 3400±250 38±3 25±2 62±5 56±5

0,05 3800±250 42±3 28±2 70±6 63±5

ПЭГ-5000

0,04 2500±200 19±2 14±1 35±3 32±3

0,05 3300±250 21 ±2 16±1 41±3 37±3

ПВП

0,04 460±35 30±2 23±2 8,2±0,6 3,2 ±0,2

0,05 520±40 34±3 26±2 8,9±0,7 3,4±0,3

ПВК

0,04 55±4 24±2 19±1 2,6±0,2 1,0±0,1

0,05 60±5 26±2 21±2 2,9±0,2 1,1±0,1

ПАА

0,04 290±20 23±2 1£Ы 13±1 9,7±0,8

0,05 310±25 24±2 20±2 14±1 11±1

Системы с ПЭГ-2000 более эффективны, чем с ПЭГ-5000. Это связано с большим количеством активных элементарных звеньев в молекуле ПЭГ-2000 при одной и той же концентрации. Повышение молекулярной массы полимера приводит к уменьшению числа элементарных звеньев, участвующих в процессе межфазного распределения. В результате внутримолекулярных взаимодействий ОН-групп

полимера образуются замкнутые циклы из элементарных звеньев, которые не взаимодействуют с распределяемым веществом.

Извлечение витаминов пол и-Ы-ви н и лам идам и происходит за счет водородных связей между атомом кислорода полимера (не-спаренная пара электронов) и атомом водорода в структуре витамина через «мостик» воды.

Установлено, что максимальные экстракционные характеристики достигаются при извлечении витамина В12 раствором ПВП. Витамины В[ и Вб извлекаются менее полно по сравнению с другими изученными витаминами (табл. 3).

Отметим более высокие коэффициенты распределения витаминов В! и В6 в системах на основе ПАА по сравнению с экстракцией полимерами поли-Ы-виниламидного ряда (табл. 3).

Разработаны эффективные экстракционные системы на основе гидрофильных растворителей и водорастворимых полимеров для извлечения витаминов группы В из водно-солевых растворов. С целью достижения практически полного извлечения витамина В2 из водных растворов применена экстракция синерге-тическими смесями растворителей. Изучено влияние концентрации полимера на коэффициенты распределения и степень извлечения витаминов.

ГЛАВА 4. Экстракционное разделение и селективное определение витаминов группы В в водных растворах н фармацевтических препаратах.

Определение витаминов в водных растворах и фармацевтических препаратах на уровне микроколичеств известными инструментальными методами, как правило, включает стадию предварительного извлечения и разделения.

Экстракционное концентрирование исключает разрушение целевых компонентов, позволяет совмещать пробоотбор с пробо-подготовкой, улучшает метрологические характеристики методик определения. При этом необходимым условием последующего анализа концентрата является практически полное (95 - 99 %-ное) извлечение аналита в экстракт.

На основании установленных нами экстракционных характеристик разработана комплексная схема определения витаминов в фармацевтических препаратах (рис. 2).

Рис. 2. Комплексная схема определения витаминов в фармацевтических препаратах.

Таблица 4. Уравнения для расчета содержания витаминов в бинарных смесях.

сШ2 = 3,70-10'5 -А31*3 - 2,75-10"5-А445, сВ2 = 1,00-10^ - А445 - 1,22 • 10"5 -А360 св,2 = 3,70 •10-5'-А3б° - 2,75-10"5-А445, св.2 = 7,33 -Ю-5 -А445 - 8,91 -Ю-6 -А360

В]2-В,: св12 = 3,36-10"5-А360, св, = 6,17 • 10"5 • А246 - 4,21 • I О"5 - А360 В,2-В6: СВ12 = 3,36 -10"5 - А360, Свб = 1,07 • I О"4 - А240 — 4,84 • 10"5 - А360

В2-В,: сВ2 = 9,11 ■ 10"5 - А445, св, = 6,17 • 10'5 -А246 - 7,48 • 10"5 - А445 В2 — В5: СВ2 = 9,11 -10"5-А445, Свб= 1,07 -Ю"4 - А290-3,84 -Ю"5 -А445

В 2-В6: СВ.2 = 6,66-10-5-А445, СВ6 = 1,07 • 10"4 ■ А2"0 - 3,84 • 10"5 • А445 В'2-В,: Св^ = 6,66-10"5-А445, с%, = 6,17 -Ю"5 - А246 - 7,48 -10"5 -А445

Ц _ ^ . св, = 6,25 -10"5 -А246-7,39-10"4 -А240; сВ6 = 1,08 • 10"4 • А290 - 1,14 • 10"5 - А246

Таблица 5. Уравнения для расчета содержания витаминов в тройных смесях.

Состав смеси Уравнения

1.В, 2.В6 3.В,2 СВ1 = 6,24 -10" -Л^"- 1,14 -10° -А""- 3,75-10° -Ам" Снл = 1,08 • 10"4 •А290 - 7,40 • 10"6 -А246 -4,42-10"5 •А36" Сй,2 = 3,36-10-5 -Аш

1.В, 2. В2 3.в6 С„, = 6,27 • 10° ■А"" -1,14-10° -А"" - 7,10-10° -А443 СК2 = 9,\\-ШЬ-А44' См = 1,09 • 10"4 -А2'"' - 7,42 • 10"6 -А246 - 3,02-10'5 -А445

1.В, 2. В*2 3.В,2 СВ1 = 6,17 • 10° -А'40 - 3,63 • 10° •А3"' - 4,79-10° -А4" Св.2= 7,33 -10"5 -А445- 8,91 -10"6 ■А360 СВц = 3,70-10"5 •Аш - 2,75-10 '"-А445

1.В, 2. В, 3.В,2 Ся, = 6,17 -10° -/Г" - 3,64 -10° -А'""- 4,76-10° -А44' СН2 = 9,98 • I О"5 •А445 - 1,22 • 10"5 -А360 Сип = 3,70 -10"5 -А360- 2,75 -10"5 -А445

Обозначения: А - оптическая плотность водно-солевого

раствора при данной характеристической длине волны; Ст, СН2, Сеч, Ст, СВц, - молярные концентрации витаминов Вь В2, В*2, В6 и В12 соответственно в водно-солевом растворе.

Концентрацию индивидуальных витаминов в бинарных и тройных смесях после экстракции определяли спектрофотомет-рически с применением расчетных уравнений, полученных методом Фирордта (табл. 4 и 5).

Нами разработаны методики разделения витаминов изо-пропиловым спиртом в водных растворах (табл. 6).

Установлено, что наиболее полно разделяется смесь витаминов Вп и Вь фактор разделения /? = 2050. При этом степень извлечения витамина Вп достигает 95,4 %, витамин В1 в тех же условиях извлекается не более, чем на 1 %.

Таблица 6. Коэффициенты распределения, степень извлечения и факторы разделения витаминов; экстрагент - изопропиловый спирт; {=5 :1, п = 3, Р = 0,95.

Смесь витаминов D, d2 R,,% r7,% fi

В12(1)-В,(2) 620±50 0,30±0,02 99 5 2000

В12 (1) — В*2 (2) 780±60 1,8±0,2 99 25 430

В12(1)-В2(2) 670±50 15±1 99 73 45

В12(1)-В6(2) 550±40 1,7±0,2 99 24 323

В2(1)-В,(2) 14±1 0,30±0,02 72 5 47

В2 (1)-В6(2) 13±1 1,3±0,1 71 19 10

Приводим результаты экстракционно-УФ-спектроскопи-ческого определения витаминов в фармпрепаратах (табл. 7).

Таблица 7. УФ-определение витаминов в фармацевтических препаратах; п = З, Р = 0,95.

Препарат Витамин Заявлено производителем Найдено по предлагаемой методике

«Пиридоксин -Виал 50 мг/мл» в6 50,0 мг/см3 49,7 ± 2,5 мг/см3

«Riboflavin tablets 2 mg» в2 2,00 мг 2,02 ± 0,10 мг

«Цианокобапам ин 0,5 мг/мл» В,2 0,50 мг/см3 0,51 ± 0,03 мг/см3

«Алфавит» таблетка № 1 (белого цвета) в, 1,50 мг 1,54 ±0,06 мг

в6 1,00 мг 0,98 ± 0,05 мг

Электрофоретическое определение включает экстракцию витамина, отделение органического слоя, получение кристаллического витамина и электрофоретический анализ раствора.

Приводим результаты электрофоретического определения витаминов в фармацевтических препаратах (табл. 8, рис. 3).

Таблица 8. Электрофоретическое определение витаминов в фармпрепаратах; п = З, Р = 0,95.

Препарат Витамин Заявлено производителем Найдено по предлагаемой методике

«Тиамин - Виал 50 мг/мл» в, 50,0 мг/см3 48,5 ± 2,5 мг/см3

«Нейромульти-вит» в, 100 мг 96 ± 5 мг

Вб 200 мг 180 ± 11 мг

«Комбилипен Табс» В, 100 мг 97 ± 5 мг

Вб 100 мг 95* ±5 мг

«Алфавит Школьник» № 1 в, 0,70 мг 0,70 ±0,03 мг

№2 Вб 0,70 мг 0,70 ± 0,03 мг

В2 0,80 мг не обнаружен

*из них 41,2 мг-определен пиридоксаль (коферментная форма пиридоксина), который производителем не заявлен.

На рисунке 3 приведены электрофореграммы стандартного раствора (С = 1 мг/см3) и анализируемых фармацевтических препаратов. В препарате «Алфавит Школьник» в таблетке № 1 (б) заявлено содержание витамина В! 0,7 мг, в таблетке № 2 (в) - содержание витаминов В2 - 0,8 мг и В6 - 0,7 мг. Установленное нами содержание витаминов В] и Вб совпадает с заявленным, однако в таблетке № 2 витамин В2 не обнаружен.

В одной таблетке «Комбилипен Табс» производителем заявлено содержание бенфотиамина (аналог витамина ВО -100 мг, пиридоксин гидрохлорида - 100 мг. Установленное нами содержание: бенфотиамина - 97 мг, пиридоксин гидрохлорида -53,8 мг. Идентифицирован также пиридоксаль - В*6 (41,2 мг), что обусловлено характерным свойством витаминов группы Вб -их способностью превращаться друг в друга.

160 тли

В6

В2

В,

Л_

75 тАи

6 7 8 9 10 11 мин (а)

110 тАи

в.

С«*

в6

9.7 9.9 10.1 10.3 мин 5 6 мин

(б) (в>

693 тАи

В6

В,

610 шли

6 7 8 9 10 мин 6 7 8 9 10 11 мин

(г) (д)

Рис 3. Электрофореграммы: (а) - стандартный раствор, (б) и (в) - «Алфавит Школьник», (г) - «Комбилипен Табс», (д) - «Нейромультивит».

Методики внедрены в учебный процесс при проведении лабораторного практикума на кафедре физической и аналитической химии Воронежского государственного университета инженерных технологий, апробированы в испытательной лаборатории

по сертификации продукции при ВГУИТ и в производственных лабораториях отдела контроля качества ОАО «Верофарм» (г. Воронеж).

Основные выводы и результаты

1. Систематически изучена экстракция витаминов группы В (тиамин гидрохлорид, рибофлавин, рибофлавин-мононуклеотид, пиридоксин гидрохлорид, цианокобаламин) из водно-солевых растворов гидрофильными растворителями разных классов (алифатические спирты, кетон, простые эфи-ры). Разработаны условия (высаливатель, продолжительность экстракции, рН, температура) для наиболее полного извлечения витаминов. С применением ИК-спектроскопии предложен механизм образования гидрато-сольватных комплексов. С целью повышения количественных характеристик экстракции витаминов применены бинарные и тройные смеси растворителей, установлен синергетический эффект.

2. Экстракция применена для разделения бинарных и тройных смесей витаминов с последующим спектроскопическим детектированием методом Фирордта. Погрешность определения витаминов в бинарных смесях не превышает 5 %, в тройных -10%. Разработан способ раздельного определения витаминов в водном растворе (Патент РФ № 2425836). Рассчитаны факторы разделения в бинарных и тройных смесях (в некоторых системах достигает 400 - 2000).

3. Для извлечения и разделения витаминов применены водорастворимые полимеры поли-Ы-виниламидного ряда (поли-N-винилпирролидон, поли-М-винил-капролактам), полиэти-ленгликоли с различной молекулярной массой и полиакрила-мида («зеленая» экстракция). Получены зависимости коэффициентов распределения и степени извлечения витаминов от концентрации полимера в растворе.

4. Разработан комплекс экстракционно-спектроскопичес-ких способов определения витаминов в водных растворах (Патенты РФ № 2407001, № 2407004, № 2413940). Методики применены для определения витаминов в фармацевтических препаратах: «Пиридоксин - Виал 50 мг/мл», «Riboflavin tablets 2 mg», «Цианокобаламин 0,5 мг/мл», «Алфавит». Предложенные методики внедрены в учебный процесс при

проведении лабораторного практикума на кафедре физической и аналитической химии Воронежского государственного университета инженерных технологий и апробированы в испытательной лаборатории по сертификации продукции при ВГУИТ..

5. Разработаны методики экстракционно-электрофоре-тического определения витаминов в таблетированных поливитаминных комплексах «Нейромультивит», «Алфавит -школьник», «Комбилипен Табс» и в растворе для инъекций «Тиамин - Виал 50 мг/мл. Методики апробированы в производственных лабораториях отдела контроля качества ОАО «Верофарм» (г. Воронеж).

Основные публикации по теме диссертации

Публикации в изданиях, рекомендованных ВАК РФ:

1. Н.Я. Мокшина, Я.И. Коренман, O.A. Пахомова, A.B. Зыков. Раздельное определение ароматических а-аминокислот и витаминов после экстракции из водных сред // Аналитика и контроль. 2009. Т.13, № 4. С. 169 -173. (0,30 пл., ает. - 0,08 пл.).

2. Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков. Коэффициенты распределения витамина В2 в системах гидрофильный органический растворитель - водно-солевой раствор // Журнал физической химии. 2010. Т. 84, № 3. С. 482-485. (0,25 пл. авт. -0,08 пл.).

3. Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков. Экстракционное разделение и спектрофотометрическое определение витаминов группы В в бинарных смесях // Химическая технология. 2010. № 5. С. 288 - 291. (0,25 пл. авт. -0,08 пл.).

4. A.B. Зыков, A.B. Пилипенко, Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина. Эффективные экстракционные системы для извлечения витаминов группы В гидрофильными растворителями из водных сред // В мире научных открытий. 2010. № 1, ч. IV. С.52 - 57. (0,4 пл. авт. - 0,1 п.л.).

5. Я.И. Коренман, A.B. Зыков, Н.Я. Мокшина. Закономерности межфазного распределения витаминов группы В в системах на основе полиэтиленгликоля // Журнал физической химии. 2011. Т. 85, № 5. С. 950 - 953. (0,25 пл. авт.-0,08 пл.).

6. Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков, Д.В. Быковский, Г.В. Шаталов Закономерности экстракции витаминов группы В синтетическими водорастворимыми полимерами // Журнал физической химии. 2011. Т. 85, № 11. С. 2142 - 2146. (0,30 пл., авт. - 0,06 пл.).

7. A.B. Зыков, Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина. Экстракционное разделение витаминов группы В синтетическими водорастворимыми полимерами // Аналитика и контроль. 2011. Т. 15, № 1. С. 96 -101.(0,4 п.л. авт. -0,13 пл.)

8. Я.И. Коренман, A.B. Зыков, Н.Я. Мокшина. Разделение тройных смесей витаминов группы В с применением гидрофильных экст-рагентов // Известия вузов. Химия и химическая технология. 2011. Т. 54, № 6. С. 47 - 50. (0,25 пл. авт. - 0,08 пл.).

9. Я. И. Коренман, A.B. Зыков. Извлечение витаминов группы В водорастворимыми полимерами // Вестник ВГУИТ. 2012. Т. 51, № 1. С. 119 - 121. (0,25 пл. авт. - 0,12 пл.).

10. Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зьнсов. Экстракционно-электрофоретическое определение витаминов группы В в фармацевтических препаратах //Журнал аналитической химии. 2012. Т. 67, № 12. С. 1068- 1071. (0,25 пл. авт. -0,08 пл.).

Публикации в сборниках научных трудов и материалах некоторых Всероссийских и Международных конференций

11. Я.И. Коренман, A.B. Зыков, Н.Я. Мокшина. Контроль содержания витаминов в падевых добавках - новый подход и его реализация // Сб. «Современные методы аналитического контроля качества и безопасности продовольственного сырья и продуктов питания». Москва. 2010. С. 59-63.

12. A.B. Зыков, Н.Я. Мокшина, Я.И. Коренман. Экстракционное разделение и определение витаминов группы В методом Фирордта // Съезд аналитиков России. Аналитическая химия - новые методы и возможности, Москва. 2010. С. 126 - 127.

13. A.B. Зыков, Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина. Экстракционное разделение и определение витаминов В6 и В]2 в водном растворе // Меж-дунар. конф. «Аналитика РБ - 2010». Минск. 2010. С. 69.

14. A.B. Зыков, Ю.В. Цыплухина, Н.Я. Мокшина, Я.И. Коренман. Экстракция витаминов группы В водорастворимыми полимерами из водных сред // IV Междунар. конф. «Экстракция органических соединений». Воронеж. 2010. С. 213.

15. A.B. Зыков, O.A. Пахомова, Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, Ю.В. Цыплухина. Применение полиэтиленгликолей для концентрирования витамина В,2 // III Всерос. симпозиум «Разделение и концентрирование в аналитической химии и радиохимии». Краснодар. 2011. С. 246.

16. Я.И. Коренман, A.B. Зыков, Н.Я. Мокшина. Новые экстракционные системы для определения витаминов В2 и В|2 // XIX Менделеевский съезд по общей и прикладной химии. Волгоград. 2011.Т.4С. 478.

17. A.B. Зыков, Н.Я. Мокшина, Я.И. Коренман. Межфазное распределение витаминов группы В в системах на основе полиэтиленглико-лей // IV Всерос. конф. «Теория и практика массообменных процессов химической технологии». Уфа. 2011. С. 58.

18. Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков. Закономерности экстракции витаминов группы В в системах на основе поли-N-виниламидов // Сб. «Химия и химическая технология», Караганда, Казахстан. 2012. Т.2. С. 114- 117.

19. A.B. Зыков, Я.И. Коренман. Эффективные экстракционные системы для извлечения витаминов группы В гидрофильными растворителями из водных сред // VI Всерос. конф. с междунар. участием «Мен-делеев-2012». Санкт-Петербург. 2012. ч. IV. С. 316.

1. Патент 2407001 РФ, МПК7 G 01 N 31/00. Способ определения рибофлавина в водном растворе / Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков // Изобретения. - 2011. - № 35 (ч. III). - С. 856.

2. Патент 2407004 РФ, МПК7 G 01 N 33/18. Способ определения пиридоксина гидрохлорида в водном растворе / Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков // Изобретения. - 2011. - № 35 (ч. III). - С. 857.

3. Патент 2413940 РФ, МПК7 G 01 N 33/18, С 07 Н 23/00. Способ определения витамина В12 в водных растворах / Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков // Изобретения. 2011. № 7 (ч. III). С. 689.

4. Патент 2425835 РФ, МПК7 С 07 Н 23/00. Способ извлечения витамина В,2 из водного раствора / Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков // Изобретения. - 2011. - № 22 (ч. III). - С. 696.

5. Патент 2425836 РФ, МПК7 С 07 Н 23/00, G 01 N 21/78. Способ раздельного определения витаминов В| и В|2 в водном растворе / Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков // Изобретения. - 2011. -№ 22 (ч. III). - С. 696.

ФГБОУ ВПО «Воронежский государственный университет инженерных

технологий» Отдел полиграфии ФГБОУ ВПО «ВГУИТ» Адрес университета и отдела полиграфии: 394036, Воронеж, пр. Революции, 19

Патенты

Подписано в печать J » /Js Усл. печ. л. У. О. Тираж ¡ООг Заказ № 3£8

■ZSZ /Я, ,2012 г.

экз.

Содержание диссертации автор исследовательской работы: кандидата химических наук, Зыков, Алексей Владимирович

ВВЕДЕНИЕ. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные способы определения водорастворимых витаминов

1.2. Применение экстракции в анализе препаратов и продуктов, содержащих водорастворимые витамины"

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Строение и физико-химические свойства витаминов В|, В2, В6 и В|

2.2. Экстрагенты и высаливатели

2.3. Методика экстракции витаминов

2.3.1. Экстракция гидрофильными растворителями и их смесями

2.3.2. Экстракция водорастворимыми полимерами

2.3.3. Расчет количественных характеристик экстракции

2.4. Спектрофотометрическое определение витаминов

2.5. ИК-спектроскопический анализ водных растворов витаминов и экстрактов

2.6. Электрофоретическое определение витаминов в органических экстрактах

2.7. Статистическая обработка результатов эксперимента

ГЛАВА 3. ЭКСТРАКЦИЯ ВИТАМИНОВ ГРУППЫ В

ИНДИВИДУАЛБНБ1МИ РАСТВОРИТЕЛЯМИ

И ИХ СМЕСЯМИ 49 3.1. Экстракция витаминов гидрофильными растворителями разных классов

3.1.1. Экстракция ацетоном

3.1.2. Экстракция алифатическими спиртами

3.1.3. Экстракция эфирами

3.2. Экстракция витаминов бинарными и тройными смесями растворителей

3.3. Особенности извлечения витаминов группы В водорастворимыми полимерами различного строения

3.3.1. Экстракция полиэтиленгликолями

3.3.2. Экстракция поли-1М-виниламидами

3.3.3. Экстракция полиакриламидом

ГЛАВА 4. ЭКСТРАКЦИОННОЕ РАЗДЕЛЕНИЕ И СЕЛЕКТИВНОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНОВ ГРУППЫ В В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТАХ 76 4.1. Разработка методики спектрофотометрического раздельного определения витаминов группы В в их бинарных и тройных смесях

4.2. Экстракционное разделение витаминов гидрофильными растворителями

4.3. Применение полимеров для разделения и селективного определения витаминов

4.4. Разработка способов экстракционного разделения и определения витаминов группы В в фармацевтических препаратах

4.4.1. Спектрометрическое определение витаминов в фармацевтических препаратах

4.4.2. Электрофоретическое определение витаминов в фармацевтических препаратах

ВЫВОДЫ

Введение диссертация по химии, на тему "Экстракция витаминов группы B и их определение в фармацевтических препаратах"

Актуальность

Витамины группы В - тиамин гидрохлорид (ВО, рибофлавин (В2), ри бофлавин-мононуклеотид (В 2), пиридоксин гидрохлорид (Вб), цианоко-баламин (В)2) - относятся к важнейшим биологически активным веществам. Они не накапливаются в организме, их содержание следует постоянно пополнять. Для восполнения недостаточного поступления витаминов с рационом все чаще употребляют поливитаминные комплексы и пищевые добавки. Контроль качества и подлинности новых лекарственных препаратов, поливитаминных комплексов, биологически активных добавок для детей и спортсменов, содержащих различные витамины, - актуальная задача аналитической химии.

Таблетированные препараты помимо действующего вещества содержат вспомогательные разбавители - крахмал, глюкозу, свекловичный сахар. Агар-агар и желатин обеспечивают их распад в желудке или кишечнике при контакте с пищеварительными соками. Связывающие вещества (вода, крахмальный клейстер, сахарный сироп) повышают прочность таблеток. Иногда добавляют и безвредные для организма красители, чтобы лекарство имело привлекательный внешний вид (выглядело аппетитным).

Сложная матрица таблетированных поливитаминных комплексов обусловливает необходимость предварительного извлечения аналитов и их концентрирования. Применение современных хроматографических и электрохимических методов определения водорастворимых витаминов связано с использованием сложного в эксплуатации и дорогостоящего оборудования, требует специальной подготовки обслуживающего персонала.

Решение задачи возможно методом жидкостной экстракции и последующего анализа концентрата физико-химическими методами. Экстракция водорастворимых витаминов группы В систематически не изучена, единственный известный коэффициент распределения относится к системе рибофлавин - изобутиловый спирт (0,47). Между тем, экстракция -одна из главных стадий извлечения биологически активных веществ на многих фармацевтических предприятиях.

Наиболее перспективна экстракция частично или неограниченно растворимыми в воде (гидрофильными) растворителями, а также экологически безопасными водорастворимыми полимерами. Выбор полимеров в качестве экстрагентов обусловлен, прежде всего, их высокой комплексообра-зующей способностью по отношению к биологически активным веществам и возможностью безреагентной реэкстракции.

Изучение распределения витаминов в системах с гидрофильными растворителями и водорастворимыми полимерами расширяет возможности применения экстракции в анализе (повышается селективность, снижаются пределы обнаружения) поливитаминных комплексов и биологически активных добавок. В качестве методов исследования концентратов целесообразно применять УФ-спектроскопию и электрофорез. Спектроскопия в ИК-и УФ-областях является фармакопейным методом анализа витаминов. Электрофоретическое определение витаминов малоизучено, поэтому разработка комплексной схемы анализа витаминов, включающей экстракцию и последующее электрофоретическое детектирование органической фазы, вносит определенный вклад в развитие аналитической химии витаминов. В этой связи актуальной аналитической задачей представляется экстракция витаминов группы В гидрофильными растворителями и водорастворимыми полимерами с последующим спектроскопическим и электрофоретическим анализом концентратов.

Цель исследования

Цель исследования - разработка эффективных разнохарактерных экстракционных систем для извлечения витаминов группы В из водных сред и фармацевтических препаратов с применением УФ-спектроскопического и электро-форетического методов детектирования определяемых компонентов.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

• установление оптимальных условий извлечения витаминов гидрофильными растворителями и их смесями;

• изучение межфазного распределения витаминов в системах водорастворимый полимер - водно-солевой раствор;

Научная новизна

Систематически изучена экстракция витаминов группы В из водных сред гидрофильными растворителями разных классов (спирты, эфиры, кетон) и их смесями в присутствии высаливателя. Методом ИК-спектроскопии изучены механизмы взаимодействия водорастворимых витаминов с органическими растворителями, представлены схемы образования гидратно-сольватных комплексов.

Для экстракции витаминов группы В применены карбоцепные полимеры поли-Ы-виниламидного ряда - поли-Ы-винилпирролидон (ПВП-18000) и поли-ТЧ-винилкапролактам (ПВК-18000) со средневязкостными молекулярными массами 18000, а также полиэтиленгликоли (ПЭГ-2000 и ПЭГ-5000) и полиакрил амид (ПА А-10000).

Разработаны оптимальные условия экстракции (выбор высаливателя, исходное соотношение объемов водной и органической фаз, температура, рН, продолжительность экстракции, концентрация полимера). Экстракционные системы применены для разделения бинарных и тройных смесей витаминов.

Практическая значимость

Разработан комплекс экстракционно-спектрометрических и экстрак-ционно-электрофоретических методик определения витаминов в фармацевтических препаратах (таблетированные поливитаминные комплексы и препараты, ампулы для инъекций).

Основные положения, представляемые к защите:

• экстракционные системы для эффективного разделения смесей витаминов;

• методики селективного УФ-спектроскопического определения витаминов в бинаоньтх и тройных смесях м етодом Фирордта;

• новые экстракционно-спектроскопические и экстракционно-электро-форетические методики определения витаминов в фармацевтических препаратах.

Апробация работы

Отдельные разделы диссертационной работы доложены на Съезде аналитиков России (Москва, 2010), хт и XII Международных конференциях «Пищевые технологии и биотехнологии» (Казань, 2010, 2012), Республиканской конференции с международным участием «Аналитика РБ - 2010» (Минск, 2010), XI и XII Всероссийских конференциях «Химия и химическая технология в XXI веке» (Томск, 2010, 2011), IV Международной конференции «Экстракция органических соединений» (Воронеж, 2010), III и IV Международных симпозиумах по сорбции и экстракции (Владивосток, 2010, 2011), i Международной конференции «Современные методы аналитического контроля качества и безопасности продовольственного сырья и продуктов питания» (Москва, 2010), XIX Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Волгоград, 2011), 77 и 78 конференциях «Науков1 здо-бутки молод1 - виршенню проблем харчування людства в XXI стагптп» (Киев, Украина, 2011, 2012), II Международной конференции «Актуальные проблемы химической науки, практики и образования» (Курск, 2011), V Всероссийской конференции «Химия в современном мире» (Санкт

Петербург, 201 1), III Всероссийском симпозиуме с международным участием «Разделение и концентрирование в аналитической химии и радиохимии (Краснодар, 2011), IV Всероссийской конференции «Теория и практика массообменных процессов химической технологии» (Уфа, 2011), Республиканской конференции «Зеленая химия - в интересах устойчивого развития» (Самарканд, Узбекистан, 2012), II Международной конференции «Химия и химическая технология» (Караганда, Казахстан, 2012), VI Всероссийской конференции молодых ученых, аспирантов и студентов с международным участием «Менделеев-2012» (Санкт-Петербург, 2012), отчетных научных конференциях и семинарах ВГУИТ (2009 - 2012).

Публикации

Объем и структура работы

Список источников диссертации и автореферата по химии, кандидата химических наук, Зыков, Алексей Владимирович, Воронеж

1. Беликов, В. Г. Фармацевтическая химия Текст. / В. Г. Беликов. - Пятигорск: Пятигорск, фарм. акад., 1996. - Т. 2. - 608 с.

2. Зрелова, JT. В. Экспрессный анализ микро- и макроэлементов в витаминных лекарственных средствах рентгенофлюоресцентным методом Текст. / JI. В. Зрелова, А. П. Арзамасцев, С. Б. Ходжаев, Е. М. Майорова // Фармация. 2008. - № 6. - С. 32 -33.

3. Xiashi, Z. Study on the inclusion interactions of b-cyclodextrin and its derivative with dyes by spectrofluorimetry and its analytical application Текст. / Z. Xiashi, S. Jing, J. Wu // Talanta. 2007. - V. 72, № 1. -P. 237 -242.

4. Власова, И.В. Спектрофотометрический анализ смесей витаминов с применением метода множественной регрессии Текст. / И.В,. Власова, A.C. Шелпакова, E.H. Масякова // Аналитика и контроль. 2009. -Т. 13, №2.-С. 86-90.

5. Масякова, Е. Н. Спектрофотометрический анализ смесей водорастворимых витаминов с применением хемометрических алгоритмов: Автореф. дис.канд. хим. наук Текст. / Е. Н. Масякова. — Томск, политех, ун-т, 2009. 23 с.

6. Монахова, Ю.Б. Определение витаминов в смесях различного состава спектрофотометрическим методом с автомодельным разделением кривых Текст. / Ю.Б. Монахова, С.П. Муштакова, С.С. Колесникова Журн. аналит. химии. 2010. - Т. 65, № 6. - С. 601-608.

7. Tian-shan L. Spectrophotometric determination of vitamin В! using the system Fe2+ 2,2 -dipyridyl Текст. / L. Tian-shan // Hebei shifan daxue xuebao. J. Hebei Norm. Univ. Natur. Sci. Ed. - 2005. - V. 29, № 1. -P. 52 -54.

8. Терехова, И. В. Термодинамика избирательного взаимодействия циклодекстринов с некоторыми представителями витаминов группы В Текст. / И. В. Терехова, Н. А. Обухова // XV Междунар. конф. по хим. термодинамике. М., 2005. - Т. 2. - С. 139.

9. Pórtela, J. G. Determination of vitamin Вб in pharmaceutical formulations by flow injection-solid phase spectrophotometry Текст. / J. G. Pórtela, A. C. Costa, L. S. Teixeira // J. Pharm. and Biomed. Analyt. 2004. -V. 34, № 3. -P. 543 -549.

10. Perez-Ruiz, T. Successive determination of thiamine and ascorbic acid in pharmaceuticals by flow injection analysis Текст. / Т. Perez-Ruiz, С. Martinez-Lozano, A. Sanz, A. Guillen // J. Pharm. and Biomed. Analyt. 2004. - V. 34, № 3. - P. 551 - 557.

11. ГОСТ P 50929 96. «Премиксы. Методы определения витаминов группы В. - М.: Госстандарт России. - 1996. - 36с

12. Набиева, А. М. Экстракционно-спектрофотометрическое определение витамина В12 в алоэ-вера с помощью краун эфира ДБ-18-К-6 Текст. / A.M. Набиева, О. Каддур//Хим. проблемы. -2008. -№ 1.-С. 102-104.

13. Ерина, О.В. Экстракционно-фотометрическое определение рутина в водных средах Текст. / О.В. Ерина, Н.Я. Мокшина, В.Ф. Селеменев, JT.C. Нечаева // Вестник Воронеж, гос. ун-та. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2005. - № 1. - С. 26 - 28.

14. Стурова, И.В. Определение витамина В| в растительных премиксах методами зонного капиллярного электрофореза Текст. / И.В. Стурова, Н.В. Комарова, Н.Ю. Страшилина, A.B. Калач // Химия растительного сырья. 2007. -№ 4. - С. 121 - 122.

15. Количественный анализ хроматографическими методами Текст. / Под ред. Э. Кэц. М.: Мир, 1990. - 320 с.

16. Сакодынский, К.И. Аналитическая хроматография Текст. / К.И. Са-кодынский, В.В. Шатц. М.: Химия, 1993. - 464 с.

17. Рудаков, О.Б. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии Текст. / О.Б. Рудаков, И.А. Востров, C.B. Федоров, A.A. Филипов, В.Ф. Селеменев, A.A. Приданцев. Воронеж: Водолей, 2004. - 528 с.

18. Арзамасцев, А.П. Анализ методик ТСХ для стандартизации водорастворимых витаминов Текст. / А.П. Арзамасцев // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. 2009. - № 4. - С. 37 - 40.

19. Беляева, Ю.Ю. Идентификация и одностадийное определение витаминов препарата «Ревит» методом тонкослойной хроматографии Текст. / Ю.Ю. Беляева, И.Я. Моисеева, И.В. Кузнецова // Изв. вузов. Поволжский регион. Медицинские науки. 2009. - № 4. - С. 3 - 11.

20. Changna, Y. Rapid determination of water- and fat-soluble vitamins with microemulsion electrokinetic chromatography Текст. / Y. Changna,C. Yuhua, D. Shaodong, W. Yun // J. Chromatogr. A. 2008. - V. 1193, № 1 - 2.-P. 172 - 177.

21. Zhu, W. Determination of L-carnitine in hygiene products by HPLC with a reversed-phase Текст. / W. Zhu, J. Yang, Ya. Liu, W. Wei, S. Zhang // J. Instrum. Analyt. 2008. - V. 27, № 10. - P. 1124 - 1127.

22. Филимонов, В. П. Обращенно-фазовая ВЭЖХ для аналитического контроля витаминов в фармацевтических препаратах Текст. / В. Н.Филимонов, С. И. Сирицо, JT. В. Денисова // III Всерос. конф. «Аналитика России». Краснодар, 2009. - С. 106.

23. Tian-zi, L. Determination of vitamin B| and Вб in capsules Gengnian Ling HPLC Текст. / L. Tian-zi, W. Ya-li, Z. Xin-mu // Huaxi yaoxue zazhi. -2000,- V. 15.-P. 205 -209.

24. Xi-ru, Huang. Comparison of methods for determining the components in the tablets of metronidazole Текст. / Huang Xi-ru, Liu Xu, Fu Chao-mei //Spectrosc. and Spectral. Analyt. -2003. -V. 23, № 6. P. 1160- 1162.

25. Amidzic, R. RP-HPLC determination of vitamins B,, B3, B6, folic acid and Вi2 in multivitamin tablets Текст. / R. Amidzic, J. Brboric,O. Cudina, S. Vladimirov // J. Serb. Chem. Soc. 2005. - V. 70, № 10. P. 1229-1235.

26. Li, Y. The optimization of HPLC-UV conditions for use with FTIR detectstion in the analysis of В vitamins Текст. / Y. Li, Phyllis R. Brown // J. Chromatogr. Sci. 2003. - V. 41, № 2. - P. 96 - 99.

27. Быков, A. M. Лабораторный контроль водо- и жирорастворимых витаминов с помощью метода ВЭЖХ Текст. / А. М. Быков, Т. Н. Ма-лова, Г. Н. Дударева // VII Конф. «Аналитика Сибири и Дальнего Востока». Новосибирск. - 2004. - Т. 2. - С. 142.

28. Sari, А. Витаминный состав некоторых таксонов Salvia L., растущих в Турции Текст. / A. Sari, М. Kursat, S. Civelek, I. Emre // Химия природных соединений. 2009. - Т. 45, № 6. - С. 784 -785.

29. Mandai, S. M. Rapid determination of vitamin B2 and B.2 in human urine by isocratic liquid chromatography Текст] / S. M. Mandai, M. Mandai, A. K. Ghosh, S. Dey //Anal. Chim. Acta. 2009. - V. 640, № 1 - 2. - P. 110 - 113.

30. Филимонов, В.H. Влияние состава бинарной подвижной фазы на разделение водорастворимых витаминов в режиме ионной хроматографии Текст. / В.Н. Филимонов, С.И. Сирицо, JI.H. Балятинская // Сорбц. и хроматогр. процессы. 2004. - Т. 4, № 6. - С. 764 - 768.

31. Gatti, R. Determination of Cinchona alkaloids and vitamin B6 by highperformance liquid chromatography with fluorescence detection / R. Gatti, G M. G.ioia, V. Cavrini // Anal. Chim. Acta. 2004. - V. 512, № 1,-P. 85-91.

32. Боев, А. С. Вольтамперометрический сенсор с фталоцианином кобальта для определения витамина В6 в БАД Текст. / А. С. Боев // Междун. конф. молодых ученых по фундаментальным наукам «Ло-моносов-2006». Химия. М., 2006.-Т. 1,- С. 12.

33. Боев, А. С. Вольтамперометрическое определение форм витамина В6 с помощью химически модифицированного фталоцианином кобальта электрода: Автореф. дис. канд. хим. наук Текст. / А. С. Боев. -Томск, политехи, ун-т, 2008. 21 с.

34. Боев, А. С. Вольтамперометрическое определение пиридоксина (витамина В6) на модифицированном платиновом электроде Текст. / А. С. Боев, Е. И. Короткова, А. А. Бакибаев // Изв. вузов. Химия и хим. технология. 2008. - Т. 51, № 5. - С. 21 - 24.

35. Ганжали, M. P. Новый метод определения витамина В6 с помощью быстрой непрерывной циклической вольтамперометрии Текст. / М. Р. Ганжали, П. Нороузи, С. Ширвани-Арани, А. Мохаммади // Электрохимия. 2008. - Т. 44, № 2. - С. 173-181.

36. Михеева, Е. В. Вольтамперометрическое определение водо- и жирорастворимых витаминов в многокомпонентных смесях Текст. / Е. В. Михеева, JT. С. Анисимова, Г. Б. Слепченко // Всерос. конф. «Электроаналитика-2005», Екатеринбург. 2005. - С. 107.

37. Wanyun, Q. Voltammetric determination of pyridoxine (Vitamin Вб) by use of a chemically-modified glassy carbon electrode Текст. / Q. Wanyun, W. Kangbing, H. Shengshui // J. Pharm. and Biomed. Analyt. 2004. - V. 36, № 3. - P. 631 - 635.

38. Xiu-Qin, X. Quantitative determination of vitamin Вб cyclic voltammetry Текст. / X. Xiu-Qin, C. Duo-Chang, Z. Ru-Yi, H. Xiao-Ying // Chin. J. Appl. Chem. 2004. - V. 21, № 10.-P. 1016-1019.

39. Akbay, N. Determination of vitamin B,2 by chemiluminescence flow system Текст. / N. Akbay, E. Gok // Журн. аналит. химии. 2008. - Т. 63, № 11,-С. 1176- 1180.

40. Li J. Pressurized capillary electrochromatographic analysis of water-soluble vitamins by combining with on-line concentration technique Текст. / J. Li, L. Yaling, D. Yanyan, X. Da // J. Chromatogr. A. 2007. - V. 1154, № 1-2. -P. 416-422.

41. Sharma, P. Quantitative micro level determination of В group vitamins by differential pulse polarography Текст. / P. Sharma, N. P. Trivedi // J. Indian Chem. Soc. 2006. - V. 83, № 4. - P. 361 - 363.

42. Cinta, Pinzaru S. Identification and characterization of pharmaceuticals using Raman and surface-enhanced Raman scattering Текст. / Pinzaru S. Cinta, I. Pavel, N. Leopold, W. Kiefer // J. Raman Spectrosc. 2004. -V. 35, № 5.-P. 338 - 346.

43. Основы аналитической химии. Общие вопросы. Методы разделения и концентрирования. Текст. / Под ред. Ю.А. Золотова. М.: Высш. шк, 1999. -Т. 1.-351 с.

44. Основы жидкостной экстракции Текст. / Под ред. Г.А. Ягодина. -М.: Химия, 1981.-400 с.

45. Золотов, Ю.А. Разделение и концентрирование в химическом анализе Текст. / Ю.А. Золотов // Рос. хим. журн. -2005. Т. 49, № 2. - С. 6.

46. Москвин, Л.Н. Царицына Л.Т. Методы разделения и концентрирования в аналитической химии Текст. / Л.Н. Москвин, Л.Г. Царицына. -Л.: Химия, 1991. 256 с.

47. Юртов, Е.В. Структурообразование в экстракционных системах Текст. / Е.В.Юртов // Сб. «Структурообразование и межфазные явления в системах жидкость жидкость». - М.: РХТУ им. Д.И. Менделеева. - 2001.-С. 84 - 95.

48. Zhuo, Guo. Adsorption of vitamin B|2 on ordered mesoporous carbons coated with PMMA Текст. / Guo Zhuo, Zhu Guangshan, Gao Bo, Zhang Daliang, Tian Ge, Chen Yue, Zhang Weiwei, Qiu Shilun // Carbon. -2005.-V. 43, № 11.-C. 2344 -2351.

49. Ramos, A. M. Recovery of Vitamin В12 and cephalosporin-C from aqueous solutions by adsorption on non-ionic polymeric adsorbents Текст. / A. M. Ramos, M. Otero, A. E. Rodrigues // Separ. and Purif. Technol. -2004.-V. 38, № l.-C. 85 -98.

50. Коренман, И.М. Экстракция в анализе органических веществ Текст. / И.М. Коренман. М.: Химия, 1977. - 200 с.

51. Коренман, И.М. Экстракция органических веществ Текст. / И.М. Коренман. Горький: Горьк. гос. ун-т, 1973. - 160 с.

52. Мокшина, Н.Я. Экстракция аминокислот и витаминов Текст. / Воронеж: Воронеж, гос. технол. акад. 2007. - 246 с.

53. Пахомова О.А. Новые экстракционные системы для определения а-аминокислот в водных средах: дис.канд. хим. наук. Саратов: Саратов. гос. ун-т. 2007. - 151 с.

54. Нифталиев, С.И. Экстракция аспарагина гидрофильными растворителями из водных растворов Текст. / С.И. Нифталиев, Н.Я. Мокшина, О.А. Пахомова // Изв. вузов. Химия и хим. технология. 2006. Т.49, № 4. - С. 8 - 11.

55. Нифталиев, С.И. Экстракция некоторых алифатических аминокислот из водных растворов с применением смеси гидрофильных растворителей Текст. / С.И. Нифталиев, Н.Я. Мокшина, O.A. Пахомова // Хим. технология. 2005. - № 5. - С. 44 - 46.

56. Мокшина, Н.Я. Электрохимическое определение ароматических аминокислот в экстрактах на основе гидрофильных растворителей Текст. / Н.Я. Мокшина, O.A. Пахомова, С.И. Нифталиев // Журн. аналит. химии. 2007. - Т. 62, № 10. - С. 1072 - 1078.

57. Нифталиев, С.И. Селективное определение ароматических аминокислот в экстрактах на основе гидрофильных растворителей Текст. / С.И. Нифталиев, Н.Я. Мокшина, O.A. Пахомова // Хим. технология. -2006. -№ 7.-С. 45 -47.

58. Коренман, Я.И. Экстракционное разделение тирозина и глицина Текст. / Я.И. Коренман, O.A. Пахомова // Современные наукоемкие технологии. -2007. -№ 5. С. 16- 18.

59. Мокшина, Н.Я. Раздельное определение тирозина и фенилаланина в водном растворе Текст. / Н.Я. Мокшина, O.A. Пахомова // II Меж-дунар. симпозиум «Разделение и концентрирование в аналитической химии и радиохимии». Краснодар. - 2005. — С. 220.

60. Кожанова, Л. А. Определение водо- и жирорастворимых витаминов в поливитаминных препаратах методом высокоэффективной жидкостнойхроматографии Текст. / JT.A. Кожанова, Г. А. Федорова, Г. И. Барам // Жури, аналит. химии. 2002. - Т.57, № 1. - С. 49 - 54.

61. Богданова, JI.A. Хроматографическое определение водорастворимых витаминов в премиксах Текст. / JT.A. Богданова, Е.Н. Масякова, Н.Ю. Пермякова, И.В. Власова // Вестн. Омск. гос. ун-та. 2007. -№ 1. - С. 303-304.

62. Вострикова, О.М. Особенности экстракции витамина В.2 «-крезолом Текст] / О.М. Вострикова, Е.Л. Смольская, Н.Л. Егуткин // Журн. прикл. химии, 1991.-Т. 64, № 10.-С. 2202-2205.

63. Смольская, Е.Л. Синергентные смеси для экстракции витамина В)2 из водных растворов Текст. / Е.Л.Смольская, О.М.Вострикова, Н.Л. Егуткин // Журн. прикл. химии. 1993. - Т.66, № 3. - С. 686 - 689.

64. Майданов, В.В. Экстракция витамина В|2 монокарбоновыми кислотами Текст. / В. В. Майданов, О. М. Вострикова //1 Всесоз. конф. «Экстракция органических соединений». Воронеж, 1989. - С. 125.

65. Shaopu, L. Spectrophotometric determination of vitamin Bi2 in a pharmaceutical formulation using triphenylmethane acid dyes Текст. / L. Shaopu, Z. Zhuyuan, L. Hongqun // J. Pharm. and Biomed. Anal. -2002,- №3,-P. 685-694.

66. Полянских, Е.И. Особенности экстракции витаминов В2 и В6 н-бутанолом в присутствии высаливателей Текст. / Е.И. Полянских, Е.М. Рахманько, О.В. Шуляковская, // «Экстракция органических соединений»: IV Междунар. конф. Воронеж. - 2010. - С. 287.

67. Мокшина, Н.Я. Экстракция никотиновой кислоты из водно-солевых сред Текст. / Н.Я. Мокшина, Р.В. Савушкин, Г.Ю. Орос, О.В. Ерина // Сорбц. и хроматогр. процессы. 2006. - Т. 6, № 2. - С. 332 - 336.

68. Ерина, О.В. Экстракция рутина из водно-солевых сред Текст. / О.В. Ерина, Н Я Мокшина, В Ф Селеменев, Л С Нечаева // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. 2005. - Т. 4, № 3,-С. 364-366.

69. Ерина, O.B. Экстракционное извлечение фолиевой кислоты водорастворимыми полимерами Текст. / О.В. Ерина, В.Ф. Селеменев, В.Ю. Хохлов, Г.В. Шаталов // Изв. вузов. Химия и хим. технология.2009.-Т. 52, № 9.-С. 36-38.

70. Бондаренко, М.С. Применение трехфазной экстракционной системы для анализа биологически активных веществ Текст. / М.С. Бондаренко, В.А. Франковский, Э.Т.Оганесян // Журн. аналит. химии. -1988.-Т.43.№ З.-С. 511 -515.

71. Морозкина, Т.С. Витамины. Краткое руководство для врачей и студентов медицинских, фармацевтических и биологических специальностей Текст. / Т.С. Морозкина, А.Г. Мойсеенок. Минск: ООО «Оскар», 2002,- 112 с.

72. Солдатенков, А.Т. Основы органической химии лекарственных веществ Текст. / А.Т. Солдатенков, Н.М. Колядина, И.В. Шендрик. -М.: Мир; БИНОМ.-2007,- 191 с.

73. Справочник химика: в 6 т. Текст. /' Под. ред. Б.П. Никольского. М.: Химия, 3-е изд. - 1971. - Т.2. - 1168 с.

74. Глущенко, H.H. Фармацевтическая химия Текст. / H.H. Глущенко, Т.В. Плетенева, В.А. Попков. -М.: Изд. центр «Академия», 2004. 384 с.

75. Солдатенков, Н.М. Основы органической химии пищевых, кормовых и биологически активных добавок Текст. / А.Т. Солдатенков, Н.М. Колядина, Ле Туан Ань, В.Н. Буянов. М.: Химия, 2006. - 278 с.

76. Арзамасцев, А.П. Фармацевтическая химия Текст. / А.П. Арзамасцев. -М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. 640 с.

77. Мокшина, Н.Я. Раздельное определение ароматических си-аминокислот и витаминов после экстракции из водных сред Текст. / Н.Я. Мокшина, Я.И. Коренман, O.A. Пахомова, A.B. Зыков // Аналитика и контроль. 2009. - Т. 13, №4.-С. 169- 173.

78. Райхардт, К. Растворители и эффекты среды в органической химии Текст. / К. Райхардт. М.: Мир, 1991. - 763 с.

79. Кирш, Ю.Э. Поли-М-винилпирролидон и другие поли-Ы-виниламиды Текст. / Ю.Э. Кирш,-М.: Наука, 1998.-252 с.

80. Кузнецов, В.А. Синтез и радикальная полимеризация циклических N-виниламидов: Дис.канд. хим. наук Текст. / В.А. Кузнецов. М.: Моск. гос. академия тонкой хим. технологии им. М.В. Ломоносова. -1998.- 143 с.

81. Говарикер, В.Р. Полимеры Текст. / В.Р. Говарикер, Н.В. Висватхан, Д. Шридхар. М.: Наука, 1990. - 395 с.

82. Коренман, Я.И. Коэффициенты распределения витамина В2 в системах гидрофильный органический растворитель водно-солевой раствор Текст. / Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков//Журн. физ. химии. - 2010. - Т. 84, № 3. - С. 482 - 485.

83. Цыплухина, Ю.В. Экстракция а-аминокислот с ароматическими заместителями синтетическими водорастворимыми полимерамиТекст.: Дис.канд. хим. наук / Ю.В. Цыплухина. Воронеж: Воронеж. гос. ун-т, 2006. - 140 с.

84. Мокшина, Н.Я. Экстракция и определение ароматических а-аминокислот и водорастворимых витаминов закономерности и новые аналитические решения. Дис.док. хим. наук Текст. / Н.Я. Мокшина. - Краснодар: Кубан. гос. ун-т, 2007. - 328 с.

85. Берштейн, Н.Я. Спектрофотометрический анализ в органической химии Текст. / Н.Я. Берштейн, H.J1. Каминский. Л.: Химия, 1986. - 200 с.

86. Дехант, Н. Инфракрасная спектроскопия полимеров Текст. / Н. Де-хант, Р. Данц, В. Киммер, Р. Шмольке. М.: Химия, 1976. - 471 с.

87. Беллами, Л. Новые данные по ИК-спектрам сложных молекул Текст. / Л.Беллами. -М.: ИЛ, 1971. 318 с.

88. Углянская, В.А. Инфракрасная спектроскопия ионообменных материалов Текст. / В.А. Углянская, Г.А. Чикин, В.Ф. Селеменев, Т.А. Завьялова. Воронеж: Воронеж, гос. ун-т, 1989. - 208 с.

89. Казицына, Л.А. Применение УФ-, ИК- и ЯМР-спектроскопии в органической химии Текст. / Л.А. Казицына, Н.Б. Куплетская. М.: Высш. шк., 1971. - 263 с.

90. Наканиси, К. Ифракрасные спектры и строение органических соединений Текст. / К. Наканиси. М.: Мир, 1965. - 220 с.

91. Комарова, Н.В. Практическое руководство по использованию систем капиллярного электрофореза «КАПЕЛЬ» Текст. / Н.В. Комарова, Я.С. Каменцев. СПб.: ООО «Веда», 2006. - 212 с.

92. Вершинин, В.И. Планирование и математическая обработка результатов химического эксперимента Текст. / В.И.Вершинин, Н.В.Перцев. Омск: Изд-во ОмГУ. - 2005. - 216 с.

93. Пилипенко, А.Т. Аналитическая химия: в 2 т. Текст. / А.Т. Пилипенко, И.В. Пятницкий. -М.: Химия, 1990. Т. 1. - 480 с.

94. Соловкин, A.C. Высаливание и количественное описание экстракционных равновесий Текст. / A.C. Соловкин. М.: Атомиздат, 1969. -124 с.

95. Губин, С.А. Экстракционное и сорбционное концентрирование фенол- и нафтолсульфокислот закономерности и применение в анализе Текст.: Дис. . канд. хим. наук / A.C. Губин. - Краснодар: Кубан. гос. ун-т, 2006. - 181 с.

96. Гуриков, Ю.В. О природе сольватирующей способности растворителей Текст. / Ю.В. Гуриков // Журн. физ. химии. 1986. - Т. 60, № 5. -С. 1 153 - 1 157.

97. Константинова, H.A. Экстракционно-титриметрическое определение галоген- и аминобензойных кислот в водных растворах Текст.: Дис. канд. хим. наук / H.A. Константинова. Краснодар: Кубан. гос. ун-т, 2003,- 160 с.

98. Ермолаева, Т. Н. Экстракция моно- и полифункциональных ароматических соединений гидрофильными растворителями общие закономерности и электрохимический анализ неводных концентратов Текст.: дис.докт. хим. наук / Т. Н. Ермолаева - М.: МГУ, 1999. -294 с.

99. Сайке, П. Механизм реакций в органической химии Текст. / П. Сайке. -М.: Химия, 1991.- 320 с.

100. Смирнов, В.И. Сольватация оксибензолов в спиртах Текст. / В.И. Смирнов, Г.А. Крестов // Журн. физ. химии. — 1994. Т. 68, № 2. -С. 258 -261.

101. Нейланд, О.Я. Органическая химия Текст. / О.Я. Нейланд. М.: Высш. шк, 1990.-332 с.

102. Мокшина, Н.Я. Синергизм при экстракции аскорбиновой и никотиновой кислот бинарными смесями растворителей Текст. / Н.Я. Мокшина, О.В. Ерина, O.A. Пахомова, Р.В. Савушкин // Журн. физ. химии.-2007.-Т.81,№ 12,- С. 2181 -2185.

103. Привалко, В.П. Молекулярное строение и свойства полимеров Текст. / В.П. Привалко. Ленинград: Химия, 1986. - 168 с.

104. Иванский, В.И. Химия гетероцикличеких соединений Текст. / В.И. Иванский. М.: Высш. шк., 1978. - 559 с.

105. Осипова, Е.А. Водорастворимые комлексообразующие полимеры Текст. / Е.А. Осипова // Соросовский образоват. журн. 1999. - № 8. -С. 40-47.

106. Чурилина, Е.В. Извлечение антоцианового красителя из водно-солевых растворов полиэтиленгликолем ПЭГ-5000 Текст. / Е.В. Чурилина, Я.И. Коренман, П.Т. Суханов, В.М. Болотов // Журн. прикл. химии. 2007. - Т. 80, № 12. - С. 2026 - 2028.

107. Чурилина, Е.В. Применение водорастворимых поли-1М-виниламидов для извлечения и концентрирования антоцианового красителя из водных сред Текст. / Е.В. Чурилина, Г.В. Шаталов, Я.И. Коренман, П.Т. Суханов//Журн. прикл. химии.-2008.-Т. 81, №4.-С. 690-692.

108. ГОСТ 7047-55. Витамины А, С, Д, Вь В2 и РР. Отбор проб, методы определения витаминов и испытания качества витаминных препаратов Текст. М.: Госстандарт России. - 2009. - 48 с.

109. Коренман, Я.И. Экстракционное разделение и спектрофотометриче-ское определение витаминов группы В в бинарных смесях Текст. /Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина, A.B. Зыков // Хим. технология. -2010. № 5. -С. 288 -291.

110. Зыков, A.B. Экстракционное разделение витаминов группы В синтетическими водорастворимыми полимерами Текст. / A.B. Зыков, Я.И. Коренман, Н.Я. Мокшина // Аналитика и контроль. 2011. -Т. 15,№ 1.-С. 96-101.