Синтез и исследование новых производных 6-(арилметил)изоцитозина тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

На правах рукописи

Л

Гордеева Елена Александровна

СИНТЕЗ И ИССЛЕДОВАНИЕ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ 6-(АРИЛМЕТИЛ)ИЗОЦИТОЗИНА

02.00.03 - Органическая химия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Волгоград - 2009

10 2т

003473576

Работа выполнена на кафедре «Аналитическая, физическая химия и физико-химии полимеров» Волгоградского государственного технического университета.

Научный руководитель доктор химических наук, профессор,

член-корреспондент РАН, Новаков Иван Александрович

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор Брель Анатолий Кузьмич

доктор химических наук, профессор Краюшкин Михаил Михайлович

Ведущая организация

Институт физиологически активных веществ РАН, г.Черноголовка

Защита состоится «30» июня 2009 г. в 13°° часов на заседании диссертационного совета Д 212.028.01 при Волгоградском государственном техническом университете по адресу: 400131, г. Волгоград, пр. Ленина 28.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Волгоградского государственного технического университета.

Автореферат разослан «27» мая 2009 года

Ученый секретарь диссертационного совета

^//[¿¿Лг&с-—■

В.А. Лукасик

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.'

Легальность темы. Изоцитозип являемся структурным изомером цитозина - природного нуклеинового основания. Сходство химической структуры этих двух соединений по многом объясняет изначальный теоретический и практический интерес к изоцитозипу и его производным. Последние находят широкое применение в различных отраслях народного хозяйства, в особенности - в медицине. 15 последнее время, среди производных изоцитозина найдем целый ряд высокоактивных противорстровирусных агентов. Несмотря на то, что об изоцигозине и его производных известно довольно много: начиная от тау томерии и заканчивая методами получения, потребности современного рынка и нужды медицины, определяют необходимость в получении новых, производных изоцитозина с улучшенными практическими свойствами. В связи с этим важной задачей органической химии, в этой связи, становится поиск новых, эффективных путей синтеза производных изоцитозина и их функпионализации. 13 этой связи и была сформулирована цель настоящей работы и поставлены задачи, которые необходимо решить для ее достижения.

Цель работы - установление закономерностей синтеза новых производных изоцитозина, а также выявление взаимосвязи «химическая структура - противовирусная активность» в этом ряду соединений, для создания методов направленного конструирования новых ненуклеозидных ингибиторов рстровирусной репликации.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1. Исследование получения З-оксоэфиров с использованием цинкорганичсского синтеза Блэйза и изучение синтеза производных 2-тиоурацшта на их основе.

' 11 постановке чадач исследования и обсуждении результатов принимали активное участие д. х. н., проф. Орлинсон Ьорис Семенович и к. фарм. н. Навроцкий Максим Ьорисович

2. Исследование синтеза и аминолиза 5-алкил-6-(арилметил)-2-(метилсульфанил)ниримидин-4(3//)-опов.

3. Исследование синтеза и аминолиза 5-алкил-6-(арилметил)-2-(мс1илсульфанил)ииримидин-4(3/У)-онон.

4. Оценка эффективности твердофазного синтеза для получения производных изоцитозина.

5. Разработка подходов к направленному стереоселективному синтезу производных 6-(1-арилэтил)пиримидин-4(3//)-она.

6. Сравнительная оценка противовирусных и цитотоксических свойств полученных производных 2-амипо-4(3//)-(1иримидипона в остром эксперименте.

Научная новизна. В диссертационной работе впервые предложен твердофазный синтез новых производных изоцитозина, позволяющий в мягких условиях и с высоким выходом получать целевые продукты.

На основании систематических исследований установлено влияние растворителя на состав и выход продуктов аминолиза производных 2-(а.![килсульфаиил)пиримидин-4(3//)-она: показано каталитическое влияние моноэтилового эфира диэтиленгликоля на эту реакцию и предложено объяснение наблюдаемым явлениям.

Проведен анализ процессов конденсации 3-оксоэфиров с солями 5-алкилизотиурония и тиомочевиной в основной среде.

Впервые предложен подход к направленному стереоселективному синтезу функциональных производных б-( 1-арилэтил)ииримидш1-4(3//)-опа, основанный на получении хиральных 3-оксоэфиров из соответствующих нитрилов по реакции Блэйза, с последующей конденсацией полученных производных с солями З-алкилизотиурония, в условиях исключающих рацемизацию продукта.

На основании биологических исследований показана высокая апти-ВИЧ-1 активность и низкая цитотоксичность новых производных изоцитозина, проявляющаяся в микромолярном и паномолярпом диапазоне

концентраций действующих веществ. Впервые установлено, что антиревертазная активность не является единственным механизмом противоретровирусного действия производных изоцитозина.

Практическая ценность. Предложен удобный и эффективный one pot метод синтеза новых функционализированных производных изоцитозина, исходя из соответствующих производных 2-тиоурацила, позволяющий синтезировать целевые соединения с высоким выходом (до 93%) и чистотой (>98%). Разработан эффективный способ синтеза Л-изомера 2-(2,6-дифторфенил)пропановой кислоты и 3-оксоэфиров на ее основе, являющихся ключевыми полупродуктами в синтезе противовирусных средств. Разработаны эффективные методы синтеза новых производных 6-(арилметил)изоцитозина, позволяющие получать целевые соединения с высоким выходом и чистотой. По результатам проведенных биологических исследований выявлены основные закономерности химической структуры и биологической активности в ряду производных изоцитозина, являющиеся основой создания системы направленного конструирования новых высокоэффективных противовирусных агентов на основе этих веществ.

Апробация работы. Основные результаты работы докладывались и обсуждались на ежегодных научных сессиях ВолгГТУ в 2005-2008 гг., XI Международной научно-технической конференции «Перспективы развития химии и практического применения алициклических соединений» (Волгоград, 2008 г.), XIV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2008 г.).

Публикация результатов. По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, из них 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК, 7 тезисов научных докладов, ! патент РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, 3 глав обсуждения результатов, выводов и списка использованной литературы. Работа изложена на 146 страницах машинописного текста, содержит 14 таблиц, 320 литературных ссылок. В первой главе

проанализированы литературные данные по методам синтеза и функционализации, а также - практическому применению производных изоцитозина, н последующих главах обсуждаются собственные экспериментальные данные автора, касающиеся методов получения новых соединений и полупродуктов их синтеза, их физико-химических свойств, спектральных характеристик и фармакологической активности. Последняя глава содержи т описание методик синтеза полученных всшсств.

В ходе проведенной работы были разработаны новые подходы к синтезу производных изоцитозина. В качестве ключевых иптерсмедиатов, для построения гетероциклической системы пиримидина были использованы алкиловме зфиры 4-арил-З-оксобутаиовых кислот, полученные на основании соответствующих 2-арилуксусных кислот и их нитрилов. Последующая функционализапия пиримидинового фрагмента проводилась путем региосслектшшого алкилировапия по экзоцикличсскому атому серы с последующим сольволитическим расщеплением полученных производных алифатическими и жирно-ароматическими аминами.

1. Исследование особенностей синтеза алкил-2-алкил-4-арил-3-оксобу ганоагов

Для синтеза 2-псзамещспных и 2-мстилзамсщспных З-оксоэфиров были использованы методы, основанные па применении 2,2-диметил-1,3-диоксап-4,6-диона (кислоты Мельдрума):

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ

Дг

,01 мs

Аг Ме Ме

1.1. 1к 91%

Мс Ме

Лг-2.6-С1С,11,, 2+'-6-С1С(1Н

и калия 2-мстил-З-оксо-З-ттоксипропаиоата:

87%

в качестве исходных веществ. Целевые продукты были получены с высоким выходом (87-94%) и чистотой (>97%).

При получении алкиловых эфиров 2-алкил-4-арил-3-оксобутановых кислот был применен цинкорганический синтез Ьлэйза:

/+ r-/q£, ^ VV 2"с"н=° ,

^ Вг THF ^мнгпв, -NII,Br.-/.nCI,' '

Ar Аг

где; Aj-2,6-CI!C,H); 2-Г-6-С1-С6Н,; С, H,; la-1 h

R-Mc, El, i-Pr, s-Bu 62-78%

При изучении реакции было установлено, что оптимальным является 5-кратный мольный избыток реактива Реформатского, обеспечивающий полную конверсию нитрила. Также было исследовано влияние растворителей: толуола и тетрагидрофурана (THF) на ход реакции и состав ее продуктов. Было установлено, что проведение синтеза в толуоле, приводит к неполной конверсии исходного нитрила и образованию значительного количества побочного бромсодержащего 3-оксоэфира. Применение THF в качестве растворителя, увеличивает конверсию исходного нитрила. Первой стадией синтеза Блэйза является образование реактива Реформатского на поверхности цинка, который образует в растворителе сольватный комплекс. Этот комплекс окружен плотной сольватной оболочкой, в отличие от комплекса, образованного в толуоле, что уменьшает образование побочных продуктов. Поэтому растворителем выбора для проведения синтеза Блэйза явился тетрагидрофуран.

Увеличение алкильного фрагмента во 2-ом положении эфира замещенной 2-бромуксусной кислоты, приводит к снижению выхода целевого продукта, что связано со стерическим эффектом соответствующего заместителя. Также было показано, что в ходе синтеза происходит

образование побочного соединения (2-5%), идентифицированного как производное пиридина.

И ходе работы были получены новых метиловые и этиловые эфиры 4-арил-3-оксобутановых кислот. Чистота полученных соединений была подтверждена методом хромато-масс-сиекгромсгрии, а структура - методом ИК- и ЯМР I['-спектроскопии и через получение производных 2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1//)-опа.

2. Исследование синтеза 5-алкнл-6-(арилметил)-2-тиоксо-2,3-дигидроннримидин-4(Ш)-онов

Синтез 5-алкил-6-(арилметил)-2-тиоксо-2,3-дигиропиримидин-4( I //)-onoji был выполнен путем конденсации соответствующих 3-оксо:)фиров с (I bN)2CS в основной среде.

Исследование реакции конденсации 2-псчамсщсннмх 3-оксоэфиров в среде McOIl - McONa показало, что оптимальным является соотношение исходных реагентов: 3-оксоэфир : MeONa : (IbN^CS = 1 : 3 : 2, что позволяет

получать производные 2-тиоурацила с хорошим выходом (78-84%):

о 0 0

лГС^' (ITN):CS/ McONa ANH ЛсОН Амн

о МЮМ " (AfAs Na' "^rAs

Лг Лг н

где: ЛГ'2-CI-fi-l--C„l I,. 2.6-CI:CftiI, 2h. 2i

78-81%

Для 3-оксоэфиров, содержащих метальную группу в положении 2, выход целевых продуктов был ниже (например, 78% для этил 4-(2-хлор-6-фторфснил)-3-оксобу таноата, против 47% для этил 4-(2-хлор-6-фторфенил)-2-мстил-З-оксобутаноата). З-Оксоэфиры, содержащие lit- или /-Pr-грунпу в положении 2, практически не вступали в реакцию конденсации.

Исследование реакции конденсации в среде litOH - litOK. показало, что оптимальным является соотношение исходных реаген тов: 3-оксоэфир : litOK : (IljN^CS ~1:6: 2-3, что позволяет получать нелепые производные 2-тиоурацила и в случае соединений, содержащих lit-, /-Рг и s-Hu- группы во 2-ом положении:

лг.

о о

а

ОЕ1

(п.нкс^/тдоп

|лО|| к'я' IV о

Лг

о

II

лс: Лг 2.6-Ш;И,. 2-Г-6-П-С,.||;. <С„||.).: К Мс. 1.1. 1-1'г.л-Нп

При этом, ныход 5-1:1- (например, 31% для 6-(2-фтор-6-хлорбензил)замещепного 2-тиоурацила), 5-/"-Рг- (32%) и 5-5-Ви-замещенпых (21%) 2-тиурацилов оказался значительно ниже, чем выход соответствующих производных 2-тиотимина (84%).

Для успешного протекания реакции необходимо, чтобы карбонильная группа 3-окх'оэфира была максимально открыта для нуклеофилыюй атаки. Введение алкильных групп в а-положснис к карбопилу приводит к снижению С/У-кислотпости 3-оксоэфира и его способности к енолизапии. Также объемные алкильные группы экранируют карбонильную группу. Совокупность этих факторов снижает выход целевых продуктов.

В ходе работы были получены новые производные 6-арил-2-тиоксо-2.3-дигидрониримидип-4(1//)-она с выходом 21-84%. Индивидуальность полученных веществ подтверждена меюдом ТСХ, а структура - данными ИК- и ЯМР 1|'-спектроскопии.

3. Изучение закономерностей получения 6-(арилмстил)-2-(метилсу:1ьфа11Нл)-11иримидш|-4(3//)-0110и

5-Мстилированные производные 2-тиоурацила были получены двумя путями - посредством региосслсктивпого 5-мономстилирования соответствующих 2-тиоурацилои (метод Л):

и путем конденсации 3-оксоэфиров с Н2ЫС(ЫП)8Ме,1Ь80.| в срсдс ЫазСО.ч-НЮП (метод К):

п

О

н

|дс; Лг'2-1-6-С1-С„Н,. 2.6-С1,-С„11,; К""-И Мс. М

614)6%

H Me

о °YVä

R'O VOH |1I,NC4SMC|NII| n.SO,/Na,U), JL N ,

fi.n ....................ü.

\=/ u,o/i:u)ii if ^

R R

где: R'II. Me: R'-II. Г: R4l. Ir

50-78%

В ходе исследования реакции ^-метилирования 2-тиоуранилов была установлена зависимость состава и выхода продуктов от химической природы применяемого растворителя и основания. Алкилироваиие Mel н системе KOIl-EtOII (McONa-MeOII), в отличие от системы К2С03 - DMF, протекает рсгиосслективпо, давая продукты 5-моиомстилировапия. Алкилироваиие в системе KjCiOrDMF дало сложные смсси полиалкилирования:

9 Mel.'KXO, S о 9

Y^NH---► Y, + «y^N + ^[j N

'^(As DMr Ar-AN^S'Me ArJlNAs,Me A'^ANAs,Me

11 Me

При исследовании метода Б было показано, что введение алкилыюго фрагмента но а-положснис 3-оксоэфира приводит к снижению выхода целевых продуктов (например, с 78% для этил З-оксо-4-фслилбутаноата до 50% для этил 2-метил-3-оксо-4-фенилбутаноата). В случае проведения этой реакции с 3-оксоэфирами, содержащими Iii- и /'-Рг- группы во а-ноложсиии, целевые продукты получены не были. Это, очевидно, связано со стсричсским фактором соответствующего заместителя.

Таким образом, метод Б отличается большей препаративной прос тотой, в то время, как метод А дает возможность получать более широкий спектр указанных производных.

В ходе работы были синтезированы новые 6-(арилметил)-2-(меч'илсульфапил)-пиримидин-4(3//)-онов с выходом 50-78%. Индивидуальность полученных всщссти была подтверждена методом ТСХ, а структура-данными ИК- и ЯМР Н'-спсктроскопии.

4. Исследование особенностей синтеза 5-алкнл-6-(арнлмстнл)-2-(мстнлсульфаннл)пирнмидин-4(3//)-011а с алифатическими и жирно-аромагическимп аминами

13 ходе проведенной работы был изучен амиполиз ¿'-алкилирстаппых производных 2-тиоурацила, как основной метод синтеза новых производных изоцитозина. Аминолиз 5-алкил-6-(арилметил)-2-

(метилсульфанил)пиримидип-4(ЗЯ)-оиов проводился при избытке амина от 2 до 20 кратного как без растворителя, гак и в растворителе (этиленгликоле, 2-этоксиэтаноле, моноэтиловом эфире диэтиленгликоля). Температурный режим реакции варьировался от 135 до 200°С.

38-К9"»

где: Х+У " КС. (ПГ)<. (СИ,),. OICII.CH,),. МА'К.'Н.СП,),: У»Н. X |>МТ1.С11,. 1-МсОС,.||,П1.( II,. 1-1-С-,,ИЛ'11.Л"11 .-нкп.писи, глисп.сп,. гллп.пцме). гласи..

2-(ш/></щ--2-|1афт-1-и.юиник:1о|2 2 111 ап-^-и.Памини: 1$ = II. Ме: К1 =-- II. Г. ( I: - Н. I . (Т

Выбор аминов для проведения этой реакции обусловлен тем, что образующиеся производные изоцитозина являются структурными аналогами 2-{ |2-(4-мстоксифенил)зтил|сульфанил ¡-5-метил-6-(2,6-дихлорбепзил)иири-мидин-4(3//)-она, являющегося, па сегодняшний день, одним из наиболее активных апти-ВИЧ-1 агентов.

Было установлено, что рассмотренная реакция протекает с заметной скоростью при )50-160"С. При повышении температуры свыше 160"С образовывалось значительное количество побочных продуктов. При температуре ниже 150°С скорость аминолиза существенно уменьшалась (ТСХ-контроль).

Также было установлено, что повышение избы тка амина от 5 до 20-ти кратною увеличивает образование побочных продуктов (ТСХ-коптроль),

предположительно являющихся продуктами амиполиза пиримидииового фрагмента. Также было установлено, что стерически затрудненные амины вступают в эту реакцию с большим трудом.

Региоселективиость реакции возрастала с применением сорастворитсля. Гак, в этиленгликоле снижалась степень осмоления, по все же, образовывались сложные смеси продуктов реакции. Исследования реакции в среде 2 -этоксиэтанола дали аналогичную картину реакционной массы, но продолжительность реакции значительно увеличилась. В то же время - несколько повысилась селективность протекания процесса. При использовании в качестве растворителя моноэтилового эфира диэтиленпшколя реакция протекала региоселективно. Это, вероя тно, связано с тем, что данный растворитель, являющийся укороченным аналогом подандов, способен координировать с небольшими катионными центрами переходного состояния реакции, стабилизируя его. Следует отметит)., что присутствие воды в растворителе приводит к образованию побочных продуктов, идентифицированных, как соответствующие производные урацила. Это очевидно связано с конкурентной реакцией основного гидролиза исходных 5-метилированных производных 2-тиоурацила.

Специфической особенностью аминолиза производных, содержащих 2,6-дифторбензильный фрагмент, явилась реакция мясо-замещения фтора:

О 0 0

.19% 2.14

В результате было получено 20 производных изоцитозина с выходом 38-89%. Индивидуальность полученных соединений подтверждена методом ТСХ, а структура - данными спектральных анализов. Данные о выходе и свойствах полученных соединений суммированы в таблице I.

Таблица 1. Физико-химические свойства 5-алкил-6-(арилметил)-2-(алкиламиио)ииримидин-4(3//)-оиов

Соединение К к' Лг Выход. % т„, "С

1 2..... 3 4 5 "б

""4а ........ гней с п.. М*с ......С И, ......89 146-148

" 4Ь....... ........ 4-Ме(Х.'. М4СЛ 1,(11. ' .......(VII. ~бТ 156-157

4с 1-Лс1С||.,СП.| Мс С,1! .....'б9 "782-184

411 1-Лс1СП,СН(Мс) ' Ме С«,11, 38 167-168

4е 1-Ас1СН,........ Мс С,II, 78...... 228-229

2-нафт-1 -нлбицикло[2.2.1 ]гсит-3-и;1 Мс Г ! с. и С,II, 48 232.5-233.Г1

г.'.сдьсН; .............. Ме" 2-1-6-01 С,,11; " 72 160.5-161.5

......4М........ ' рюьсн,СНГ Ме с..н. 57 '"~ 124-125

.....41 РЬСН.СН, Мс : »-I -с н. Я 175-176

......1 1 С, ||.(.||.( ¡1. Ме с„п. ;Й 140-191

4к Рь II 2.6-Р.С„|], 87 15<М60

41 Мс 2.6-Р-.С'„Н, 82 " 168-169

4гл ....... (ГН ('II-.!. ........~ Н 2.6-Р,С„Н, 51 209-210

4п (СП сп. .:<................. Ме 2.6-Г;С„Н, 53 210-211

4 о.......... (С.Н-СН-к Н 2.6-Р-Сг,Н, 48 174-175

;Р ¡С||;( 11.1. Мс 2 (.1- С .11. 56 224-225

4Ч (М П ('!!■>• II 2.6-1" .(",.11.. 63 215-216

4 г С)|( 11Г1|.|. Мс 2,6-Р,.ГйНз " 49 24 1-215

4$~ ........ МеЦСН^Н,). II 2.6-Р;С„Н, 195 196

41 МеК(СН,СН3)2 Ме" 2,6-Р,С„Н:, 52 235-236

5. Исследование особенностей твердофазного синтеза 5-алкил-6-(ар1]лмсг11л)из()11игоз1<нов

Косвенные методы синтеза изоцитозинов, основанные на амиполизе соответствующих 5-алкшшрованных производных 2-тиоурапилов, как правило, требуют жестких условий проведения и использования сораетворителя. В связи с этим, нами было исследовано применение твердофазного синтеза, известного из химии пептидов.

Проведение

твердофазного

синтеза

5-алкил-6-

(арилметил)изоиитозипов было основано па иммобилизации исходного соединения на полистирольной матрице. В качестве твердого носителя нами была применена смола Меррифилда (хлормстилированный полистирол), содержащая 1-1.3 мэкв хлорметильных фупп на 1 г и 1% дивипилбензольных сшивок. 2-'Гиотимины были иммобилизованы па полимерной подложке, пугем взаимодействия смолы Меррифилда с их натриевыми солями в среде безводного 1)МГ. Полученные сульфиды были окислены .м-хлориербензойной кислотой в соответствующие сульфопы. При взаимодействии этих соединений с избытком амина в среде безводного 'ПII-были получены целевые производные изоцитозина с хорошим выходом.

где: Аг~ С,,11,. 2-1'-6-П(.:л11,. 2.6-T~X"„I I

Resin-uciauiK [юлиаиролмюй матрицы, 'п-П'ВА-.н- члоpiiсроеiгй11ая кислот К- PliCll.rll.. TI-C„II,C IIXII.. 1Л1.1 »С ¡¡ СП I М. IMiCll.СП-СП,. 1-АсИ'Н,. 1-A;1CII,C1L.

I-AJCI I.CiHMej. Э-iгафi ¡1.ш11-1 -и.|0иiimк.I»j2 2.1 |i eniO-in

Ч'аким образом, был предложен новый подход к получению производных изоцитозина, основанный па твердофазном синтезе. В результате, целевые продукты были синтезированы с выходом 70-97%, при комнатной температуре в среде Till-'. Разработанная схема синтеза характеризуется следующими преимуществами: для ее реализации не требуется жестких условий, не используются ^-метилированные производные 2-тиоурацила, что позволяет избежать работы с токсичным и летучим Mel. Основная особенность предложенного способа состоит в том, что в синтезе используется иммобилизованная форма 2-тиотимина, что позволяет, без потерь исходного соединения, проводить ряд операций, связанных с удалением побочных продуктов.

о

о

В холе работы синтезировано 10 новых производных изоцитозина с выходом 70-97%, структура которых подтверждена методами ИК- и ЯМР II1-спектроскопии, а их индивидуальность - методом ТСХ.

6. Направленный, стсрсосслсктнннмн синтез производных 6-(1-ариллил)пчриш1дин-4(ЗН)-оиа

Известно, что переход от 6-(арилметил)замешепных производиых к 6-(1-арилэтил)замсще1шым аналогам, неизменно сопровождается более или менее выраженным ростом противовирусной активности полученных соединений. Также, было установлено, что максимум противовирусной активности ассоциируется с /¿-конфигурацией хирального атома углерода бензильной группы.

На примере получения Л-изомсра 6-| 1-(2,6-дифторфенил)этил|-5-мсгш1-2-(цикло11С11ТИлсул1,фапил)иирит1дип-4(3//)-оиа нами был предложен эффективный подход к направленному стереоселективпому синтезу чииых /¿-изомеров 2-замещенпых 5-алкил-6-( 1 -арилэтил)ниримидин-4(3//)-онов. Ключевым интермедиатом в этой схеме явился этиловый эфир (2,6-дифторфенил)-2-мстил-3-оксонентановой кислоты, путем конденсации которого с 5-циклопситилизотиурония бромидом в основной среде и был получен целевой продую':

Несмотря на невысокий выход целевого продукта, этот метод оказался более предпочтительным, по сравнению с двустадийиой схемой:

о

о

:0 {П,М)Х'К / Ги№-!;1

11,0

(Г N11

У Д. с-РспНг / к,1

1)М1

(ЛО

Одностадийная схсма позволяет получать целевой продукт с более высоким выходом, обеспечивает практически полное отсутствие рацемизации.

Оптическая чистота полученного соединения была доказана методом ВЭЖХ на хиральпой неподвижной фаз'с, путем сравнения с аутентичным образцом.

Для получения исходного 3-оксо:>фира нами были исследованы методы, основанные на использовании азотистых оснований, а также методы, основанные па использовании металлорганических соединений. В качестве ацилирующих агентов были применены (27?)-2-(2,6-

дифторфенил)пропаноилхлорид и (27?)-2-(2,6-дифторфенил)проиионитрил,

полученные из соответствующей хиральпой кислоты по схеме:

011 о МП,

о 14 I, N11,011 Меу^0 та

Р1,Мс ХХ МсС^ ^^Г 1КЧ!

88%

Следует отметить, что при использовании методов синтеза 3-оксоэфиров, основанных на применении азотистых оснований, неизменно происходила практически полная рацемизация и образование оптически неактивного 3-оксоэфира. В то же время, при использовании в качестве исходного соединения (2/?)-2-(2,6-дифчорфснил)пронионигрила и получения целевого З-оксшфира с применением синтеза 1>лл'1за, рацемизации практически не происходило:

71%

Исходная, оптически деятельная кислота была получена по схеме:

I KXO,. (McO),CO. 180V Ctsl 2.NaOll - 11,0

3.IIC l-H.O

l^jr^cooH

COCI

Me3N I'hMc

1М-)-пантолактон

Г Me с)

F

l.AeOli ■ 11,0 2. ДсОИ • II.O - IICI

Ключевым полупродуктом в синтезе явился этиловый эфир (2^5,4/?)-4-(2,6-дифторфенил)-2-мстил-3-оксонеитано1ЮЙ кислоты, который был получен путем ципкорганичсского синтеза Блэй.за на основе соответствующего хирального нитрила; при сравнении ЯМР 'И спектров 'лилового эфира (2Л5,4/0-4-(2,6-дифгорфсиил)-2-мстил-3-оксоиснтаповой кислоты с его (2Л5',4/^9)-изомером, показано, что сигнал проюна при С-4 в кислотном остатке выходит в виде квадруплета в области 4.23-4.29 м.д. для (2Л9,4Л)-изомера, и в виде мультиплета в области 4.13-4.30 м.д. для рацемата.

7. Исследование биологическом активности новых производных изоцитозипа

В ходе выполнения синтетической рабочы, был получен ряд производных изоцитозина, некоторые из которых, к настоящему моменту, уже прошли биологические исследования1. Химические структуры лих соединений приведены ниже:

где: R'-H (•1Mm..1o.-1i|.'ls). Me (ll. ln. Ip. Ir. 11):

( Ik. .11). I('1J,),N I 1m. In). (С!ЦК 11«. lp). ()(<TI,l'H.),N (Iq.'lr). MeN(C II.Í II,),N( l.s. 'ID

1 Автор выражает глубокую призматслыюсть A. Mai. M.Arlico, O. Kolili (IJniversita degli Studi di Roma «l,a Sapicnza». Italy), I. Clocet-Codina. J. A. Hste (Retrovirology Laboratory IrsiCaixa. Dadalona, Spain), <i- Sbardclla (Universila degli Studi di Salerno, Italy), G. Maga (Insituto di Genctica Molccolarc IGM-CNR. 1'avia. Italy) и ирокслсиис биологических ItCCJCllOmiHtlH.

Противовирусная активность'этих соединений была исследована на двух моделях: па колониях клеток, зараженных вирусом, и па изолировавших ревертазах ВИЧ-1. В качестве стандартов сравнении были использованы ифавирепп и невиранин - основные, применяемые в клинике ненуклеозидпые ингибиторы ревертазы ВИЧ-1. В приведенных таблицах суммированы основные данные по активности полученных веществ в отношении дикого штамма ВИЧ-1 (габл.2.), мутаншых штаммов ВИЧ-1 (табл.3), и аптиревертазной активности (табл.4).

Таблица 2. Противовирусная активность и цитотоксичность новых производных 6-(2,6-дифторбспзил)изоцитозипа

Соединение К' 'Жм,- им ЦК,,,. мМ 1-к:

4к н ' ыл........ 0.133 >85 >639

4т ¡1 (СН,)5Ы (То 13 >82 ........ ' '>6308

............. II ".........((тг:.л 0.022 >78 >3545

'ч II 0(С11С1Г),]\' 0.211 ■81 >184

-.я II МоМСТ1,СТ1,),Ы 6.09 ■78 1 3

■II Ме 0.03 81 -2700

4п Мс (СИ.ЬЫ 0.003 ■78 >26000

4р '"......Ме....."" " "'"' *1с|Щ ...... сГ05 ......... >75.......... >1500

4г Ме ........С)!(ТГП1 !\ 0.026 >78 >3000

4." "Мс........... " мсь7(сГга1?)Л 0.598 >75 >125

Нснирапим 0.08 ..у '■■87

Ифанирснц 0.00-1 "0.3 -75

Таблица 3. Противовирусная активность новых производных 6-(2,6-дифторбепзил)изоцитозина в отношение мутаншых штаммов ВИЧ-1

I

('ОС.'ШПСПМС

4т

.......-ц......"

"4п " .....¡г "

<1 г

Исвмранин Ифавиренц

! к'

'Ж,„. цМ

1К1.1.98 К ЮЗЫ у 18 к: У1881.

11 К.Т1:)Л: 2.2 > 10 0.71 8

П .....«лил 1.4 >10 0^43 >ю..........

II >! 0 "10.......... >10 >10

Ме 0.82 >10 ' 0.14 ........... >10

Мс (СП,)„Ы 1.7........ >10 0.57 ....... >10

Мс..... 0(СН,СН2)К >ю.......... >10 • 10 >10

9.9 1.8 0.87 5 6

0.08 0.09' о.ооб ..... 0.23

Таблица 4. Лптирсвертазиая активность новых производных 6-(2,6-

дифторбснзил)изоцитозина

Соединение К' к1 "ЖЧ). нМ

\vtiiih кюзи 1.1001 VI06 А VI79» У1811 У 1X11

4111 и" ........... "2.5......... 20 10 0.2 20 20 " 20

4Ч и схаьси,^ 0.7 15" " ?л>....... ' 40....... 20 ...... 20

........'45,...... п МсЩаШЬ)-^ 11.23 20 20 40" 40 " 20 20

4г Ме ~ (>;П1 СЦ.)\ 0.05 20 0.9 0.4 8.3 20 20

'11 Мс МеМ(С1ЬСН,),Ы 1 - 0.9 40 -

11синрами11 0.4 7 Ч 1(1 0.3 .15 18

Ифагшрсп<( 0.03 3 - - - 0.08

Из полученных данных видно, что анти-ВИЧ-1 активность полученных веществ и отношении дикою штамма ВИЧ-1 возрастает с введением мстильного радикала н положение 5 пиримидипового гетероцикла. Также, повышению противовирусной активности способствует включение экзоциклического атома азота фрагмента изонитозипа, в состав насыщенного, липофильного азотистого гстероцикла. Сопоставление данных об анти-ВИЧ-1 активности и способности угнетать ревертазу у полученных веществ, свидетельствует о том, что они не могут рассматриваться, как «чистые» ингибиторы обратной транскриптазы. По-видимому, противовирусная активность полученных веществ реализуется через целый ряд биохимических механизмов.

На основании проведенной работы выявлен лидер, по уровню противовирусной активности - 5-мети.ч-2-(пиперидин-1 -ил)-6-(2,6-дифторбепзил)пиримидин-4(3//)-он, превосходящий по анти-ВИЧ-1 активности мевирапин и ифавиренц, а также - обладающий низкой цитотоксичпостыо и большой терапевтической широтой.

Выводы:

1. Изучены закономерности синтеза производных изоцитозипа, позволяющие получать новые анти-ВИЧ-1 активные агенты па основе этих соединений.

2. Проведен синтез алкиловых эфиров 4-арил-З-оксобутановмх кислот и исследована их конденсация с тиомочевимой, приводящая к образованию 5-алкил-6-(арилметил)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1//)-онов (21-84%).

3. Выполнен сравнительный анализ двустадийного и одностадийного методов синтеза производных 6-(арилмстил)-2-(мстилсульфапил)пиримидин-4(3//)-она: установлено, что оба метода дают сопоставимый выход целевых продуктов в расчете на исходные алкиловые эфиры 4-арил-З-оксобутановых кислот (32-48%о). Таким образом, одностадийный метод отличается большей препаративной простотой, в то время, как двустадийпый метод дает возможность получать более широкий спектр целевых производных.

4. Исследован синтез производных изоцитозина с использованием реакции амиполиза соответствующих ^-метилированных 2-тиоурацилов. Показано, ч то проведение этой реакции в среде моноэтилового эфира диэтилеигликоля, повышает се региоселсктивпость и выход целевых продуктов (до 89%), по сравнению с ее проведением в других раствори телях и в их отсутствии.

5. Впервые предложен эффективный твердофазный синтез производных изоцитозина, который позволяет получать целевые продукты с высоким выходом (до 93%о) и чистотой (98-99%) при комнатной температуре, в среде аиротонного растворителя.

6. На примере получения 6-|(1Л)-1-(2,6-дифторфенил)этил]-5-метил-2-(циклопснтилсульфанил)пиримидин-4(3//)-она впервые предложен направленный стсреосслективный синтез производных 6-[(l/i)-l-(2,6-дифторфс1шл)этил|-5-метилпиримидин-4(3//)-она, основанный на промежуточном образовании (ЗЛ)-4,4-диметил-2-оксотетрагирофурап-3-ил (2Л)-2-(2,6-дифторфенил)пропаноата из полученного in situ, прохиралыгого 2-(2,6-дифторфепил)прон-1 -ен-1 -она.

7. Сравнительная оценка противовирусных свойств 10 соединений производных изоцитозина и их способности угнетать активность обратной транскринтазы дикого и мутантных штаммов ВИЧ-1, показали, что противовирусное действие, у этой группы соединений, очевидно, реализуется

через целый ряд биохимических механизмов, а не только через угнетение активности ревертазы. Установлено, что противовирусная и антиревертазпая активность в ряду синтезированных производных изоцитозипа возрастает при переходе от 5 незамещенных к 5-метилзамсщснпым аналогам, а также -при включении экзоциклического атома азота в состав липофильного насыщенног о азагстсроцикла.

8. В ходе биологических исследований, выявлен лидер по уровню противовирусной активности - 6-(2,6-дифторбензил)-5-метил-2-(нинеридин-1-ил)пиримидин-4(3//)-он, подавляющий репликацию дикого штамма ВИЧ-1 в концентрации 3 нМ и обладающий индексом селективности свыше 26000.

Основное содержание диссертации изложено в следующих публикациях:

1. Новаков, И. А. Региосслективпая реакция аминолиза 6-бензил-5-метил-2-(метилсульфанил)пиримидин-4(3//)-она алифатическими и жирно-ароматическими аминами / И. Л. 11оваков, Б. С. Орлинсон, И. Д. I 'ордеева и др. // Псрсисктиш развития химии и практического применения алициклических соединений. 2008: Тез. док. XI Международной научно-технической конференции. - Волгофад, 2008. - С. 155.

2. Новаков, И. Л. О взаимодействии 8-хлортеофиллииа с первичными адамантансодержащими аминами / И. Л. Новаков, Б. С. Орлинсон, Е. Л. Гордссва и др. // Перспективы развития химии и практического применения алициклических соединений. - 2008: Тез. док. XI Международной научно-технической конференции. - Волгоград, 2008. С. 142.

3. Новаков, И. Л. Усовершенствованный синтез фенкамфамина / И. Л. Новаков, Б. С. Орлинсон, Ii. А. I ордеева и др. //11ерепективы развития химии и практического применения алициклических соединений. - 2008: Тез. док. XI Международной научно-технической конференции. - Волгоград, 2008. -С.140.

4. Новаков, И. А. 5-Алкил-6-(2,6-дигалобспзил)-2-[(оксоалкил)сульфанил|-4(3//)-ниримидинш1Ы - новый класс ненуклсозидных ингибиторов репродукции ВИЧ-1 и ВИЧ-2. / И. А. Новаков, Б. С. Орлинсон, i:. А. 1 ордеева и др. // Человек и лекарство. - 2008. - Тез. док. XV Российского национального конгресса. - Москва, 2008. - С.676.

5. Новаков, И. А. Направленное конструирование новых потенциальных терапевтических агентов на основе азотсодержащих соединений каркасного строения / И. А. Новаков, Б. С. Орлинсон, li. A. I ордеева и др. // Перспективы развития химии и практического применения алициклических

соединений. - 2008: Тез. док. XI Международной научно-технической конференции. - Волгоград, 2008. - С. 10.

6. Поваков, И. А. Синтез и исследование б-арилметил-5-алкил-изоцизозинов / И. Л. Поваков, Б. С. Орлинсон, М. Б. Навроцкий, Н. А. Гордеева // XII Региональной конференции молодых исследователей Волгоградской области. - Тез. док. - Волгоград, 2007. ~С. 17-18.

7. Поваков, И. А. Твердофазный синтез новых производных изоцитозина / И. А. Поваков, Ь.С. Орлинсон, ¡i. А. Гордеева и др. // XIII Региональной конференции молодых исследователей Волгоградской области. - Тез. док. -Волгоград, 2007.-С. 17-19.

8. Пат. 2334740 РФ, М11К C07D213/30. Способ получения а-рацемата 1-(2-пиперидил)-1,2-этандиола /.Поваков И.А., Орлинсон Б.С., Брупилип Р.В., Навроцкий М.Б., Гремейчук С.А., Гордеева Г.А. № 2007125915; заявл. 09.07.07; опубл. 27.09.08.

9. Поваков, И. А. Исследование взаимодействия 6-бснзил-5-метил-2-(метилсульфанил)пиримидин-4(3#)-она с алифатическими и жирно-ароматическими аминами / И. А. Поваков, Б.С. Орлинсон, И. А. Гордеева и др. // ЖОрХ,- 2009. Т.45.-№5. - С.786-789.

Подписано в печать 2105.2009 г. Заказ • Тираж 100 экз. Печ. л. 1,0

Формат 60 х 84 1/16. Бумага офсетная. Печать офсетная.

Типография ИУНЛ Волгоградского государственного технического университета. 400131, г. Волгоград, ул. Советская, 35

Введение.

1. Изоцитозины: синтез, химические свойства и практическое применение (литературный обзор).

1.1 Химические свойства производных изоцитозина.'.

1.2 Практическое применение производных изоцитозина.

1.3 Получение производных изоцитозина.'.

2. Обсуждение результатов

2.1 Исследование особенностей синтеза алкил 2-алкил-4-арил-3-оксобутаноатов.

2.2 Исследование синтеза 5-алкил-6-(арилметил)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1#)-онов.

2.3 Изучение закономерностей получения 6-(арилметил)-2-(метилсульфанил)пиримидин-4(3//)-онов.

2.4 Исследование особенностей реакции 5-алкил-6-(арилметил)-2-(метилсульфанил)пиримидин-4(3//)-она с алифатическими и жирно-ароматическими аминами.

2.5 Исследование особенностей твердофазного синтеза 5-алкил-6-(арилметил)изоцитозинов.

2.6 Направленный, стереоселективный синтез функциональных производных

6-(1-арилэтил)пиримидин-4(3//)-она.

2.7 Исследование биологической активности новых производных изоцитозина.

3. Экспериментальная часть.

Выводы.

Изоцитозин (I) является структурным изомером цитозина - природного нуклеинового основания. Сходство химической структуры этих двух соединений во многом объясняет изначальный теоретический и практический интерес к изоцитозину и его производным. Среди ряда веществ, элементом структуры которых является фрагмент молекулы изо цитозина, найден широкий спектр соединений с практически полезными свойствами. В первую очередь, следует отметить некоторые высокоактивные противовирусные агенты этого ряда:

Ме^.^Ме HfT ^ У

F Me Me Cl Ме

Наряду с противовирусными агентами, среди производных изоцитози-на найдены также антигистаминные средства и препараты, стимулирующие выработку интерферонов [1]:

H2N Н

-N L-rJ t^V-F

Ч >=0 /-I N f. Vn

V-N Me О H

Бропиримин Мизоластин

Помимо этого, ряд производных изоцитозина находит широкое применение в сельском хозяйстве, используются в производстве полимеров, находят применение для создания антибактериальных средств и целого ряда других, практически полезных продуктов. Важно отметить, что сам изоцитозин В постановке задач исследования и обсуждении результатов принимали активное участие д. х. н., проф.

Орлинсон Борис Семенович и к. фарм. н. Навроцкий Максим Борисович. является ингибитором дезаминирования цитозина, а также стимулирует рост бактерий Bacillus subtilis, являющихся компонентами нормальной кишечной микрофлоры человека.

К настоящему времени, об изоцитозине и его производных известно довольно много: начиная от таутомерии и заканчивая методами получения. В то же время, потребности рынка и медицины, определяют необходимость в получении все новых производных изоцитозина более сложной структуры. В свою очередь, важной задачей органической химии, в этой связи, становится поиск новых, эффективных путей синтеза производных изоцитозина и их функционализации. В этой связи и была сформулирована цель настоящей работы и поставлены задачи, которые необходимо решить для ее достижения.

Цель работы заключается в установлении закономерностей синтеза новых производных изоцитозина, а также в выявлении взаимосвязи «химическая структура - противовирусная активность» в этом ряду соединений, для создания методов направленного конструирования новых ненуклеозидных ингибиторов ретровирусной репликации Задачи:

1. Исследование получения 3-оксоэфиров с использованием цинкоргани-ческого синтеза Блэйза и изучение синтеза производных 2-тиоурацила на их основе.

2. Исследование синтеза и аминолиза 5-алкил-6-(арилметил)-2-(метилсульфанил)пиримидин-4(3//)-онов.

3. Исследование синтеза и аминолиза 5-алкил-6-(арилметил)-2-(метилсульфанил)пиримидин-4(3//)-онов.

4. Оценка эффективности твердофазного синтеза для получения производных изоцитозина.

5. Разработка подходов к направленному стереоселективному синтезу производных 6-(1 -арилэтил)пиримидин-4(3//)-она.

6. Сравнительная оценка противовирусных и цитотоксических свойств полученных производных 2-амино-4(ЗЛ)-пиримидинона в остром эксперименте.

В диссертационной работе впервые предложен эффективный подход к твердофазному синтезу производных изоцитозина, позволяющий в мягких условиях и с высоким выходом получать целевые продукты.

На основании систематических исследований установлено влияние растворителя на состав и выход продуктов аминолиза производных 2-(алкилсульфанил)пиримидин-4(ЗЛ)-она: показано каталитическое влияние моноэтилового эфира диэтиленгликоля на эту реакцию и предложено объяснение наблюдаемым явлениям.

Проведен анализ процессов конденсации 3-оксоэфиров с солями S-алкилизотиурония и тиомочевиной в основной среде.

Впервые предложен подход к направленному стереоселективному синтезу функциональных производных 6-(1-арилэтил)пиримидин-4(3#)-она, основанный на получении хиральных 3-оксоэфиров из соответствующих нитрилов по реакции Блэйза, с последующей конденсацией полученных производных с солями 5-алкилизотиурония, в условиях исключающих рацемизацию продукта.

На основании биологических исследований показана высокая анти-ВИЧ-1 активность и низкая цитотоксичность новых производных изоцитозина, проявляющаяся в микромолярном и наномолярном диапазоне концентраций действующих веществ.

Впервые установлено, что антиревертазная активность не является единственным механизмом противоретровирусного действия производных изоцитозина.

Предложен удобный и эффективный one pot метод синтеза новых функционализированных производных изоцитозина, исходя из соответствующих производных 2-тиоурацила, позволяющий синтезировать целевые соединения с высоким выходом (до 93%) и чистотой (>98%).

Разработан эффективный способ синтеза Я-изомера 2-(2,6-дифторфенил)пропановой кислоты и 3-оксоэфиров на ее основе, являющихся ключевыми полупродуктами в синтезе противовирусных средств.

Разработаны оригинальные и эффективные методы синтеза новых производных 6-(арилметил)изоцитозина, являющихся потенциальными проле-карственными агентами, позволяющие получать целевые соединения с высоким выходом и высокой чистотой.

По результатам проведенных биологических исследований выявлены основные закономерности химической структуры и биологической активности в ряду производных изоцитозина, являющиеся основой создания системы направленного конструирования новых высокоэффективных противовирусных агентов на основе этих веществ.

Основные результаты работы докладывались и обсуждались на ежегодных научных сессиях ВолгГТУ в 2005-2008 гг., XI Международной научно-технической конференции «Перспективы развития химии и практического применения алициклических соединений» (Волгоград, 2008 г.), XIV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2008 г.).

По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, из них 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК, 7 тезисов научных докладов, 1 патент РФ; в печати находится еще 5 статей.

Диссертация состоит из введения, 3 глав обсуждения результатов, выводов и списка использованной литературы. Работа изложена на 146 страницах машинописного текста, содержит 14 таблиц, 320 литературных ссылок. В первой главе проанализированы литературные данные по методам синтеза и функционализации, а также - практическому применению производных изоцитозина, в последующих главах обсуждаются собственные экспериментальные данные автора, касающиеся методов получения новых соединений и полупродуктов их синтеза, их физико-химических свойств, спектральных характеристик и фармакологической активности. Последняя глава содержит описание методик синтеза полученных веществ.

Выводы:

1. Изучены закономерности синтеза производных изоцитозина, позволяющие получать новые анти-ВИЧ-1 активные агенты на основе этих соединений.

2. Проведен синтез алкиловых эфиров 4-арил-З-оксобутановых кислот и исследована их конденсация с тиомочевиной, приводящая к образованию 5-алкил-6~(арилметил)-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4(1//)-онов (21-84%).

3. Выполнен сравнительный анализ двустадийного и одностадийного методов синтеза производных 6-(арилметил)-2-(метилсульфанил)пиримидин-4(3//)-она: установлено, что оба метода дают сопоставимый выход целевых продуктов в расчете на исходные алкиловые эфиры 4-арил-З-оксобутановых кислот (32-48%). Таким образом, одностадийный метод отличается большей препаративной простотой, в то время, как двустадийный метод дает возможность получать более широкий спектр целевых производных.

4. Исследован синтез производных изоцитозина с использованием реакции аминолиза соответствующих ^-метилированных 2-тиоурацилов. Показано, что проведение этой реакции в среде моноэтилового эфира диэтиленгликоля, повышает ее региоселективность и выход целевых продуктов (до 89%), по сравнению с ее проведением в других растворителях и в их отсутствии.

5. Впервые предложен эффективный твердофазный синтез производных изоцитозина, который позволяет получать целевые продукты с высоким выходом (до 93%) и чистотой (98-99%) при комнатной температуре, в среде апротонного растворителя.

6. На примере получения 6-[(1Л)-1-(2,6-дифторфенил)этил]-5-метил-2-(циклопентилсульфанил)пиримидин-4(ЗЛ)-она впервые предложен направленный стереоселективный синтез производных 6-[(li?)-l-(2,6дифторфенил)этил]-5-метилпиримидин-4(3//)-она, основанный на про

108 межуточном образовании (37?)-4,4~диметил-2-оксотетрагирофуран-3-ил (2/?)-2-(2,6-дифторфенил)пропаноата из полученного in situ, прохи-рального 2-(2,6-дифторфенил)проп-1 -ен-1 -она.

7. Сравнительная оценка противовирусных свойств 10 соединений производных изоцитозина и их способности угнетать активность обратной транскриптазы дикого и мутантных штаммов ВИЧ-1, показали, что противовирусное действие, у этой группы соединений, очевидно, реализуется через целый ряд биохимических механизмов, а не только через угнетение активности ревертазы. Установлено, что противовирусная и антиревертазная активность в ряду синтезированных производных изоцитозина возрастает при переходе от 5 незамещенных к 5-метилзамещенным аналогам, а также - при включении экзоцикличе-ского атома азота в состав липофильного насыщенного азагетероцикла.

8. В ходе биологических исследований, выявлен лидер по уровню противовирусной активности - 6-(2,б-дифторбензил)-5-метил-2-(пиперидин-1-ил)пиримидин-4(3#)-он, подавляющий репликацию дикого штамма ВИЧ-1 в концентрации 3 нМ и обладающий индексом селективности свыше 26000.

Заключение:

Анализ литературных данных о практическом применении изоцитози-нов показал, что производные изоцитозина проявляют антибактериальные, противоопухолевые активности, интерфероногенные и противовоспалительные свойства. Также изоцитозины являются структурными аналогами 3,4-дигидро-2-алкокси-4-оксобензилпиримидинов (DABO) - ненуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы ВИЧ-1.

Существует 3 общих подхода к получению производных изоцитозина: конденсация 1,3-дикарбонильных соединений с гуанидином, аминолиз 2-тиоурацила и гидролиз 2-амино-4-галогенпиримидинов. Наиболее универсальным методом, дающим высокие выходы продуктов, является нуклео-фильное замещение алкилсульфанильной группы 2-тиоурацила на остаток соответствующего амина. Варьирование исходных аминов и производных 2

О О тиоурацила позволяет получать различные незамещенные, N"монозамещенные и А^А^-дизамещенные производные изоцитозина.

-Метилированные производные 2-тиоурацила — исходные соединения для получения изоцитозинов могут быть получены двумя основными путями: посредством б'-монометилирования соответствующих 2-тиоурацилов MeHal и конденсацией 3-оксоэфиров с H2NC(SMe)NH, полученной in situ. Последний метод позволяет сократить синтез на одну стадию, избежать использования дорогостоящих реагентов и безводных растворителей, без потери в выходе целевых продуктов, в случае 5-незамещенных соединений и производных 2-тиотимина. Первый метод дает возможность получать практически любые соединения этого ряда,

В основе построения пиримидинового цикла 2-тиоурацила лежит конденсация 3-оксоэфиров с (H2N)2CS. Варьирование структуры исходных 3-оксоэфиров позволяет получать различные производные 2-тиоурацила.

З-Оксоэфиры являются важными интермедиатами в органическом синтезе, поэтому разработан ряд методов их получения. В случае, когда необходимы 3-оксоэфиры, незамещенные по положению 2, желательно использовать методы, основанные на использовании 1,3-дикарбонильных соединений, особенно производных малоновой кислоты, потому что металлорганический синтез дает более низкие выходы.

Для получения 3-оксоэфиров с Me-, Et-, /-Рг- заместителем во 2-ом положении можно использовать металлорганический синтез и методы, основанные на применении 1,3-дикарбонильных соединений.

Для получения 3-оксоэфиров с разветвленным алкильным заместителем в положении 2 предпочтителен цинкорганический синтез, позволяющий получать целевые продукты с высокими выходами и меньшим количеством стадий.

2. Обсуждение результатов

2.1 Исследование особенностей синтеза алкил-2-алкил-4-арил-3-оксобутаноатов

На основании изложенного выше анализа подходов к синтезу 3-оксоэфиров, нами было исследовано получение 2-замещенных этил-4-арил-З-оксобутаноатов с помощью синтеза Блэйза, 2-незамещенных метил-4-арил-З-оксобутаноатов на основании кислоты Мельдрума, этил-4-(2,6-дифторфенил)-3-оксо-2-этилбутаноата из хлорангидрида в присутствии Et3N-MgCl2.

Этиловые эфиры 2-алкилзамещенных 4-арил-З-оксобутановых кислот были получены путем цинкорганического синтеза Блэйза: rY^OB rY^ob 2НС1/Н*°Д Et04R

Ar-/ Br THF ANH2nBr-NH4Br/ZnCl2 0=/~

Ar=2,6-C12C6H3; 2-F-6-Cl-C6H3; C6H5; R=Me, Et, /-Pr, 5-Bu la-lh 62-78%

Ar

В качестве исходных соединений для синтеза нами были использованы соответствующие доступные нитрилы.

Синтез Блэйза осуществлялся в среде тетрагидрофурана, с использованием цинковой стружки и соотношениях 2-арилацетонитрил : алкил-2-бромалканоат : цинк =1:5:6. Следует отметить, процесс начинается только при использовании свежей стружки, не содержащей следов окисной пленки. Активацию процесса проводили с использованием йода (время активации 615 минут). При его использовании происходит дополнительное удаление следов оксидной пленки и образование йодистого цинка - слабой кислоты Льюиса, промотирующей образование металл органического соединения, за счет возникновения координационных комплексов с алкил-2бромалканоатом и нитрилом. Основной критерий начала реакции - образование реактива Реформатского, что сопровождается окрашиванием реакционной массы в зеленый цвет.

В реакции используется 5-кратный мольный избыток реактива Реформатского, обеспечивающий полную конверсию нитрила. Проведение реакции с меньшим избытком металлорганического соединения неизменно приводит к появлению непрореагировавшего нитрила в составе продуктов реакции.

Известно [277], что химическая природа растворителя оказывает значительное влияние на ход реакции и состав ее продуктов. Так применение толуола, приводит к неполной конверсии исходного нитрила и образованию значительного количества побочного бромсодержащего 3-оксоэфира [290]. Проведение реакции в среде кипящего тетрагидрофурана (THF) приводит к полной конверсии исходного нитрила, но также сопровождается образованием побочного 3-оксоэфира.

Вне зависимости от применяемого растворителя, первой стадией в механизме синтеза Блэйза является образование реактива Реформатского на поверхности цинка:

R OEt zn R OEt R OEt

-4 — >4 — M

Br О BrZn О OZnBr и, при сольватации, реактив немедленно переходит в раствор с образованием сольватных комплексов. Образованный в THF металлоорганический реактив менее нуклеофилен и более основен, чем комплексы, образуемые в толуоле, и поэтому окружен плотной сольватной оболочкой, которая препятствует взаимодействию с другой молекулой бромэфира, снижая образование побочного бромсодержащего 3-оксоэфира. Поэтому растворителем выбора для проведения синтеза Блэйза явился тетрагидрофуран - апротонный малополярный растворитель эфирного типа.

А в основе образования побочных продуктов синтеза в THF, вероятно, лежат следующие химические превращения: о

BrZn N R R О R

OEt R

Ph

OEt О R

THF R

О + Ph

EtO

ZnBr О

ZnBr

EtO

THF EtO

HBr О

COOEt

OZnBr

-ZnBr,,-EtOH

-OEt R R

Необходимо отметить, для соединений содержащих изопропильную и 2-вгаор-бутильную группы во 2-ом положении существенно сложнее протекает кислотный гидролиз бромцинковых производных енаминоэфиров. Очевидно, это явление связано с экранированием енаминового фрагмента 2,6-дизамещенной бензильной группой и разветвленным алкильным фрагментом, находящимся при соседних атомах углерода. В результате, осуществить полную конверсию енаминоэфира в 3-оксоэфир, без заметного расщепления целевого 3-оксоэфира (гидролиз и декарбоксилирование) — не удается. Поэтому сниженным оказывается и выход целевых продуктов. Выход и физико-химические свойства полученных веществ суммированы в таблице 2.1.

Кроме этого, при проведении синтеза Блэйза образуются побочные продукты, характеризующиеся высокой температурой плавления. Было показано, что полученные соединения являются производными пиридина, образующимся по следующей схеме:

OEt

R R OEt д

BrZnHN—\ + )—^

BrZn О THF

Аг

BrZnO OEt

EtO H

Ar

OH 1

HC1 Ar

- Г if

R,0 0^

H Ar

1. Cupps, T. L. Use of Allyltrimethylsilane of the formation of potential C-Nucleoside Precursors / T. L. Cupps, D. S. Wise, L. B. Townsend // J. Org. Chem.- 1982.-Vol. 47, №26.-P. 5115-5120.

2. Roth, B. 5-Arylthiopyrimidines. IV. Spectrophotometric Determination of Successive Acid dissociation Constants Differing by Less Than Two pK Units / B. Roth, J. F. Bunnett // J. Am. Chem. Soc. 1965. -Vol. 87, № 2. - P. 334339.

3. Stewart, R. Comparison of the Acidities and Basicities of Amino-Substituted Nitrogen Heterocycles / R. Stewart, M. G. Harris // J. Org. Chem. 1978. -Vol. 43, № 16.-P. 3123-3126.

4. Sponer, J. Nonplanar Geometries of DNA Bases. Ab Intitio Second-Order Moller-Plesset Study / J. Sponer, P. Hobza // J. Phys. Chem. 1994. - Vol. 98, № 12. -P.3161-3164.

5. Shukla, M. K. Theoretical Study of Proton Transfer in Hypoxanthine Tautomers: Effects of Hydration / M. K. Shukla, J. Leszczynski // J. Phys. Chem. A. 2000. - Vol. 104, № 13. -P. 3021-3027.

6. Roberts, C. Theoretical and Experimental Study of Isoguanine and Isocyto-sine: Base Pairing in an Expanded genetic System / C. Roberts, R. Bandaru, C. Switzer // J. Am. Chem. Soc. 1997. - Vol. 119, № 20. - P. 4640-4649.

7. Psoda, A. Structure and Tautomerism of the neutral and Monoanionic Forms of 4-thiouracil Derivatives / A. Psoda, Z. Kazimierczuk, D. Shugar // J. Am. Chem. Soc. 1974. -Vol. 96, № 22. - P. 6832-6839.

8. Kawahara, S. Ab Intio and Density Functional Studies of Substituent Effects of an A-U Base Pair on the Stability of Hydrogen Bonding / S. Kawahara, T. Wada, S. Kawauchi, T. Uchimaru, et.al. // J. Phys. Chem. A. 1999. - Vol. 103, №42.-P. 8516-8523.

9. Les, A. Theoretical ab Initio Study of the Protomeric Tautomerism of 2-Hydroxypyrimidine, 4-Hydroxypyrimidine, and Their Derivatives / A. Les, L. Adamowicz //J. Phys. Chem. A. 1990. - Vol. 94, № 18. - P. 7021-7032.

10. Kwiatkowski, J. S. Contributions from Electron Correlation to the Relative Stabilities of the Tautomers of Nucleic Acid Bases / J. S. Kwiatkowski, R. J. Bartiett, W. B. Person // J. Am. Chem. Soc. 1988. -Vol. 110, № 8. -P. 23582361.

11. Bednar, R. A. Intramolecular Proton Transfer through Water in Diamine Monocations / R. A. Bednar, W. P. Jencks // J. Am. Chem. Soc. 1985. - Vol. 107, №24.-P. 7135-7138.

12. Dodin, G. Tautomerizm of Neutral and Cationic N-Substituted 4-Aminopyrazolo3,4-<aT.Pyrimidines / G. Dodin, M. Dreyfus, O. Bensaude, J.-E. Dubois // J. Am. Chem. Soc. 1977. - Vol. 99, № 22. -P.7257-7265.

13. Sontjens, S. H. M. Intermolecular " JNN Coupling in Multiply Hydrogen-Bonded ureidopyrimidinone Dimers in Solution / S. H. M. Sontjens, M. H. P. van Genderen, R. P. Sijbesma // J. Org. Chem. 2003. - Vol.68, № 23. -P. 9070-9071.

14. Zhanpeisov, N. U. Theoretical Quantum Chemical Study of Tautomerizm and proton Transfer in 6, 8-Dithioguanine / N. U. Zhanpeisov, W. W. Cox, J. Leszczynski // J. Phys. Chem. A. 1999. - Vol. 103, № 23. - P. 4564-4571.

15. Gupta, D. Complex Formation of Isocytosine Tautomers with Pd11 and Pt11 / D. Gupta, M. Huelsekopf, M. M. Cerda, R. Ludwig, et.al. // Inorg. Chem. -2004.-Vol. 43, № 11.-P. 3386-3393.

16. He, W. Modeling of Hydrogen Bonds in Monohydrated 2,4-Dithiothymine: An Ab Initio and AIM Study / W. He, Y. Xue, H. Zhang, A. Tian, N.-B. Wong // J. Phys. Chem. 2006. - Vol. 110, № 3. - P. 1416-1422.

17. Beijer, F. H. Strong Dimerization of Ureidopyrimidones via Quadruple Hydrogen Bonding / F. H. Beijer, R. P. Sijbesma, H. Kooijman, A. L. Spek // J. Am. Chem. Soc. 1998. - Vol. 120, № 27. - P. 6761-6769.

18. Lafitte, V. G. H. Uredopyrimidinones Incorporating a Functionalizable p-Aminophenyl Electron-Donating Group at C-6 / V. G. H. Lafitte, A.E. Aliev, H. C. Hailes, K. Bala, et.al. // J. Org. Chem. 2005. - Vol. 70, № 7. - P. 27012707.

19. Hirschberg, J. H. К. K. Supramolecular Polymers from Linear Telechelic Siloxanes with Quadruple-Hydrogen-Bonded Units / J. H. К. K. Hirschberg, F. H. Beijer, H. A. van Aert, P. С. M. M. Magusin // Macromolecules. 1999. -Vol. 32, № 8. - P. 2696-2705.

20. Seela, F. 6-Aza-2'-deoxyisocytidine Synthesis, Properties of Oligonucleotides, and Base-Pair Stability Adjustment of DNA with Parallel Strand orientation / F. Seela, Y. He // J. Org. Chem. 2003. - Vol. 68, №2. - P. 366-368.

21. Chen, X. Stability and Structure of DNA Duplexes Containing Isoguanosine and Isocytidine / X. Chen, R. Kierzek, D. H. Turner // J. Am. Chem. Soc. -2001.-Vol. 123, №7.-P. 1267-1274.

22. Zhanpeisov, N. U. Specific Solvation Effects on the Structures and Properties of Adenine-Uracil Complexes. A Theoretical ab Initio Study / N. U. Zhanpeisov, J. Leszczynski // J. Phys. Chem. A. 1998. - Vol. 102, № 30. - P. 6167-6172.

23. Barsky, D. Guanine-Cytosine base Pairs in Parallel-Stranded DNA: An ab Initio Study of the Keto-Amino Wobble Pair versus the Enol-Imino Minor Tautomer Pair / D. Barsky, M. E. Colvin // J. Phys. Chem. A. 2000. - Vol. 104, №37.-P. 8570-8576.

24. Sponer, J. Interaction Energies of Hydrogen-Bonded Formamide Dimer, Formamidine Dimer, and Selected DNA Base Pairs Obtained with Large Basis Sets of Atomic Orbitals / J. Sponer, P. Hobza // J. Phys. Chem. A. 2000. -Vol. 104, № 19. - P. 4592-4597.

25. Sukhanov, O. S. Molecular Structure and Hydrogen Bonding in Polyhy-drated Complex of Adenine: A DFT Study / O. S. Sukhanov // J. Phys. Chem. B. 2003. -Vol. 107, № 12. -P. 2846-2852.

26. Gadre, S. R. Electrostatics for Exploring Hydration Patterns of Molecules. 3. Uracil / S. R. Gadre, 1С. Babu, A. P. Rendell // J. Phys. Chem. 2000. - Vol. 104, №39.-P. 8976-8982.

27. Shishkin, О. V. Does the Hydrated Cytosine Molecule Retain the Canonical Structure? A DFT Study / О V. Shishkin, L. Gorb, J. Leszczynsky // J. Phys. Chem. A. 2000. - Vol. 104, № 22. - P. 5357-5361.

28. Dkhissi, A. Theoretical Calculations and Matrix-Isolation FT-IR Studies of Hydrogen-Bonded Complexes of Molecules Modeling Cytosine or Isocytosine Tautomers. 7. 2-Hydroxypyrimidine/2-Oxopyridine Complexes with H20 / A.

29. Dkhissi, L. Houben, J. Smets, L. Adamowicz // J. Phys. Chem. A. 2000. -Vol. 104, № 43. - P. 9786-9792.

30. Hirao, I. Dual Specificity of the Pyrimidine Analogue, 4-Methylpyridin-2-one, in DNA Replication / I. Hirao, T. Ohtsuki, T. Mitsui, S. Yokoyama // J. Am. Chem. Soc. -2000.-Vol. 122, №25.-P. 6118-6119.

31. Пат. US6689884 Bl, C07D 239/00, C07D 473/00. Supramolecular pairing system, its preparation and use / Miculka C., Windhab N., Eschenmoser A., Scherer S., Quinkert G. 2004.

32. Пат. US6911296 B2, G03F7/039, C08G85/00, C08G77/26. Imageable element and composition comprising thermally reversible polymers / Pappas P.S., Monk A., Saraiya S., Huang J. 2005.

33. Moroni, F. Ab Initio of the Crystallographic Solvation Pattern of the Cytosine -Guanine Base Pair in DNA / F. Moroni, A. Famulari, M. Raimondi // J. Phys. Chem. A. -2001.-Vol. 105, №7.-P. 1169-1174.

34. Yamauchi, K. Combinations of Microphase Separation and Terminal Multiple Hydrogen Bonding in Novel Macromolecules / K. Yamauchi, J. R. Lizotte,

35. D. M. Hercules, M. J. Vergne // J. Am. Chem. Soc. 2002. - Vol. 124, № 29. -P. 8599-8604.

36. Dyer, E. Carbamates and Ureas Derived from Amino- and Oxopyrimidines /

37. E. Dyer, M. L. Gluntz, E. J. Tanck // J. Am. Chem. Soc. 1962. - Vol. 27. - P. 982-985.

38. Пат. US6683151 Bl, C09D175/00, C09D11/00; C08L75/00. Supramolecular compound / Loontjens J.A., Jansen J. E. G. A., Plum B. J. M. 2004.

39. Crowe, L. L. Reversible Attachment of Perylenediimide Fluorophore to Glass Surfaces via Strong Hydrogen-Bonding / L. L. Crowe, К. M. Solntsev, L. M. Tolbert // Langmuir. 2007. - Vol. 23, № 11. - P. 6227-6232.

40. Hosmane, R. S. Chemical Modification of Nucleic Acid Components: Reactions of Gytosine, Cytidine, Isocytosine, and Adenine witn methyl N-Cyanometanimidate / R. S. Hosmane, N. J. Leonard // J. Org. Chem. 1981. -Vol. 46, № 7. - P. 1457-1465.

41. LaChance-Galang, K. J. Terpsichorean Movements of Pentaammineruthe-nium on Pyrimidine and Isocytosine Ligands / K. J. LaChance-Galang, I. Maldonado, M. L. Gallagher, W. Jian, et.al. // Inorg. Chem. 2001. -Vol. 40, №3.- P. 485-492.

42. Kruppa, M. Reversible Coordinative Bonds in Molecular Recognition / M. Kruppa, B. Konig // Chem. Rev. 2006. -Vol. 106, № 9. - P. 3520-3580.

43. Jonson, Т. B. Clorination of 2,3-Diketotetrahydropyrimidines by Action of a Mixtutr of Superoxol and Hydrochloric Acid / Т. B. Jonson //J. Am. Chem. Soc. 1943.-Vol.65. - P. 1218-1219.

44. Smith, D. L. Electrochemical Reduction of Pyrimidine, Cytosine and Related Compounds: Polarography and Mascroscale Electrolysis / D. L. Smith, P. J. Elving // J. Am. Chem. Soc. 1962. -Vol. 84, № 8. - P. 2741-2747.

45. Ikawa, M. Utilization of Folin-Ciocalteu Phenol Reagent for the Detection of Certain Nitrogen Compounds / M. Ikawa, T. D. Schaper, C. A. Dollard, J. J. Sasner // J. Argic. Food. Chem. Vol.51, №7. - 2003. - P. 1811 -1815.

46. Shiue, C.-Y. A Facile Synthesis f l-p-D-Arabinofuranosyl-2-seleno- and — 4-selenouracil and Related Compounds / C.-Y. Shiue, S.-H. Chu // J. Org. Chem. 1975. - Vol. 40, № 20. - P. 2971-2974.

47. Tong, G. L. Synthesis of a Pyrimidine Analog of Tetrahydrofolic Acid and Its 7,10-Methenyl Derivative / G. L. Tong, W. W. Lee, L. Goodman // J. Am. Chem. Soc. 1964. -Vol. 86. - P. 5664-5668.

48. Mitchell, G. N. Nitration and Bromination of Isocytosine-6-acetic Acid. Some Corrections / G. N. Mitchell, R. L. McKee // J. Org. Chem. 1974. -Vol. 39, №2.-P. 176-179.

49. Пат. CA458542 (13) (A). Chlorination of isocytosine / Erwin K., Thomas W C. 1949.

50. Пат. GB569085 (A). Improvements in chlorination of isocytosine / AMERICAN CYANAMID CO. 1945.

51. Пат. GB559455 (A). Process of preparation 2-amino-4-chloropyrimidine. -1944.

52. Пат. US4795812, C07D239/42, C07D239/46, C07D403/04, C07D403/12, C07D239/00, C07D403/00, (IPC1-7): C07D239/42, C07D239/48. 4-Substituted 6-6aryl-pirymidine compounds / Wierenga W., Skulnick H.; Upjohn CO. — 1989.

53. Ashton, W. T. Synthesis and Antiherpetic Activity of (±)-9-[(Z)-2-(Hydroxymethyl)cyclopropyl.methyl]gyanine and Related Compounds / W. T. Ashton, L. C. Meurer, C. L. Cantone, A. K. Field, et.al. // J. Med. Chem. -1988.-Vol. 31,№ 12. — P. 2304-2315.

54. Пат. DE 3247995 Al, C07D239/54 / Peeters, Hermann, Dr. 1984.

55. Angier, R. B. Alkylation of 2-Amino-4-hydroxypyrimidines with Acryloni-trile and with Dimethyl Sulfate: Two pyrimidol,2-a.pyrimidinediones / R. B. Angier, W. V. Curran // J. Am. Chem. Soc. 1961. - Vol. 26. - P. 1891-1895.

56. Johnson, Т. B. Pyrimidines: their amino and aminooxy derivatives / Т. B. Johnson, D. A. Hahn. // Chem. Rev. 1933. - Vol. 13, № 2. - P. 193-303.

57. Mallory, W. R. Pyrimidj4,5-c.pyridazines. 2. Preferential Formation of Pyrimido[6,l-c][l,2,4]triazines by Cyclizations with Simple and Complex ex-Halo Ketones / W. R. Mallory, R. W. Morrison // J. Org. Chem. 1980. - Vol. 45, № 19.-P. 3919-3921.

58. Bell, S. C. The Synthesis and Reaction of Some Imidazol,2- a.pyrimidines / S. C. Bell, W. T. Caldwell // J. Am. Chem. Soc. 1960. - Vol. 82. - P. 14691471.

59. Cooper, A. J. L. Synthesis and Properties of the a-Keto Acids / A. J. L. Cooper, J. Z. Ginos, A. Meister // Chem. Rev. 1983. - Vol. 83, № 3. - P. 321358.

60. Пат US4225710, C07D487/04. Pyrimido(4,5-c)pyridazines / Morrison R. W., Mallory W.R., Styles V. L. 1980.

61. Taylor, E. С. Condensation of 2,4-Diamino-6(lH)-pyrimidinone witn 2-(Aminomethylene)cyclopentanone / E. C. Taylor, S. R. Fletcher // J. Org. Chem. 1984. - Vol. 49, № 17. - P. 3226-3227.

62. Nair, V. Structural Alteration of Nucleic Acid Bases by Bromomalonalde-hyde / V. Nair, R. J. Offerman, G. A. Turner // J. Org. Chem. 1984. -Vol. 49, №21.-P. 4021-4025.

63. Morrison, R. W. Pyrimido4,5-c.pyridazines. 5. Summary of Cyclization with Vicinally Functionalized Reagents and Studies of the Reductive Behavior of the Ring System / R. W. Morrison, V. L. Styles // J. Org. Chem. 1982. -Vol. 47, № 4. - P. 674-680.

64. Styles, V. L. Pyrimido4,5-c.pyridazines. 4. Cyclizations with a-Keto Acids / V. L. Styles, R. W. Morrison // J. Org. Chem. 1982. -Vol. 47, № 3. - P. 585587.

65. Filipovska, A. Building a Parallel Metabolism within the Cell / A. Filipovska, O. Rackham // ACS Chem. Biology. 2008. -Vol. 3, № 1. - P. 5163.

66. Kiralj, R. On Heteroaromaticity of Nucleobases. Bond Lengths as Multidimensional phenomena / R. Kiralj, M. M. Ferreira // J. Chem. Inf. Comput. Sci. -2003. Vol. 43, № 3. - P. 787-809.

67. Sanjayan, G. J. Cyanuryl-PNA Monomer: Synthesis and Crystal Stucture / G. J. Sanjayan, V. R. Pedireddi, K. N. Ganesh // Org. Lett. 2000. - Vol. 2, № 18.-P. 2825-2828.

68. Saladino, R. Synthesis and Degradation of Nucleic Acid Components by Formamide and Iron Sulfur Minerals / R. Saladino, V. Neri, C. Crestini, G. Co-stanzo, et.al. // J. Am. Chem. Soc. 2008. -Vol. 103, № 46. - P. 15512-15518.

69. Пат. US2003129506 (Al), G03F7/039, C08G18/28, C08G18/38, C08G18/54. Imageable element and composition comprising thermally veversi-ble polymers / Pappas P.S., Monk A., Saraya S., Huang J. 2003.

70. Musier-Forsuth, K. Base-Analog-Induced Aminoacylation of an БУЧА helix by a tRNA Synthesis / K. Musier-Forsuth, J.-P. Shi, B. Henderson, R. Bald, et.al. // J. Am. Chem. Soc. 1995. - Vol. 117, № 27. - P. 7253-7254.

71. Hobza, P. Structure, Energetics, and Dynamics of the Nucleic Acids Base Pairs: Nonempirical Ab Initio Calculations / P. Hobza, J. Sponer // Chem. Rev. 1999. -Vol. 99. - № 11. -P.3247-3276.

72. Clarke, M. J. Non-Platinum Chemotherapeutic Metallopharmaceuticals / M. J. Clarke, F. Zhu, D. R. Frasca // Che. Rev. 1999. - Vol. 99, № 9. - P. 25112533.

73. Atwell, S. Structure of Copper-Mediated Base Pair in DNA / S. Atwell, E. Meggers, G. Spraggon, P. G. Schultz // J. Am. Chem. Soc. 2001. -Vol. 123, № 49.- P. 12364-12367.

74. Glasser, L. Proton Conduction and Injection in Solids / L. Glasser // Chem. Rev. 1975. -Vol. 75, № 1.-P. 21-65.

75. Hill, D. J. A Field Guide to Foldamers / D. J. Hill, M. J. Mio, R. B. Prince, T. S.Hughes, et.al.//Chem. Rev.-2001.-Vol. 101, № 12.- P. 3893-4011.

76. Doerr, I. Nucleoside. XL. The Introduction of a 2,3'-Imino Bridge into Pyrimidine Nucleosides / I. Doerr, J.J. Fox // J. Am. Chem. Soc. — 1967. -Vol.89, №7. P. 1760-1761.

77. Martin, D. M. G. The Action of Diazomethane on Ribonucleosides. Preparation of Ribonucleoside 2'- and 3'-Methyl Ethers / D. M. G. Martin, С. B. Reese, G. F. Stephenson // Biochem. 1968. - Vol. 7, № 4. - P. 1406-1412.

78. DoeiT, I. L. Nucleosides. XXXIX. 2'-Deoxy-2'-fluorocytidine, l-((3-D-Arabinofuranosyl)-2-amino-1,4(2Y)-4-iminopyrirnidine, and Related Derivatives /1. L. Doerr, J. J. Fox // J. Org. Chem. 1967. - Vol. 32, № 5. - P. 19671971.

79. Watanabe, K. Nucleosides. XXXI. 3'-Amino-3'-deoxyhexopyranosyl Nucleosides. IV. Nucleoside Conversions in the З'-Aminohexose Series / K. Watanabe, J. J. Fox // J. Org. Chem. 1966. - Vol. 31, № 1. - P. 211 -217.

80. Chu, С. K. Nucleosides. 107. Synthesis of 5-(p-D-Arabinofuranosyl)isocytosine and Related C-Nucleosides / С. K. Chu, U. Reichman, K. A. Watanabe, J. J. Fox // J. Med. Chem. 1978. - Vol. 21, № 1. -P. 96-100.

81. Hirota, K. Pyrimidines. 17. Novel Pyrimidine to Pyridine Transformation Reaction. One-Step Synthesis of Pyrido2,3-d.Pyrimidines / K. Hirota, Y. Ki-tade, S. Senda, M. J. Halat, et.al. // J. Org. Chem. 1981. - Vol. 46, № 5. - P. 846-851.

82. Minanoto, K. Synthesis and Alkali-Hydrolysis Reactions of Some 2,3'-(Substituted imino)pyrimidine Nucleosides Lacking a 2'-Hydroxyl Group / K. Minamoto, K. Azuma, N. Fujiwara, S. Eguchi, et.al. // J. Org. Chem. 1989. -Vol. 54, № 19. - P. 4543-4549.

83. Secrist III, J. A. Homo-C-nucleosides. The Synthesis of Certain 6-Substituted 4-Pyrimidinones / J. A. Secrist III // J. Org. Chem. 1978. - Vol. 43, № 14.-P. 2925-2927.

84. Benner, S. A. Understanding Nucleic Acids Using Synthetic Chemistry / S. A. Benner//Acc. Chem. Res. 2004. - Vol. 37, № 10. - P. 784-797.

85. Rice, K. P. RecA Protein Promotes Strand Exchange with DNA Substrates Containing Isoguanine and 5-Methyl Isocytosine / K. P. Rice, J. C. Chaput, M. M. Cox, C. Switzer //Biochem. 2000. -Vol. 39, № 33. - P. 10177-10188.

86. Switzer, C. Y. Enzymatic Recognition of the Base Pair between Iso-cytidine and Isoguanosine / C. Y. Switzer, S. E. Moronev, S. A. Benner // Biochemistry. 1993. - Vol. 32, № 39. - P. 10489-10496.

87. Neuner, P. New Fmoc Pseudoisocytosine Monomer for the Synthesis of a Bis-PNA Molecule by Automated Solid-Phase Fmoc Chemistry / P. Neuner, P. Monaci // Bioconjugate Chem. 2002. - Vol. 13, № 3. - P.676-678.

88. Tong, G. L. Synthesis of a Pyrimidine Analog of Tetrahydrohomofolic Acid / G. L. Tong, W. W. Lee, L. Goodman // J. Am. Chem. Soc. 1966. -Vol. 9, №4.-P. 590-593.

89. Venkateswarlu, D. Py*Pu'Py Type Triplex with Modified Bases: Ab Initio SCF-MO Studies toward Improved DNA Recognition / D. Venkateswarlu, J. Leszczynski //J. Phys. Chem. 1999. -Vol. 103, № 18. - P. 3489-3493.

90. Джилкрист, Т. Химия гетероциклических соединений : пер. с англ. / Джилкрист. -М.: Мир, 1996. 464 с.

91. Гауптман, 3. Органическая химия : пер. с нем. / 3. Гауптман, Ю. Грефе, X. Ремане.-М.: «Химия», 1979. 832с.

92. Wright, G. Е. Synthesis of 6-(Phenylhydrazino)uracils and Their Inhibition of a Replication-specific Deoxyribonucleic Acid Polymerase / G. E. Wright, N. C. Brown // J. Med. Chem. 1974. - Vol. 17, № 12. - P. 1277-1282.

93. Mitsui, Т. An Efficient Unnatural Base Pair for a Base-Pair-Expanded Transcription System / T. Mitsui, M. Kimoto, Y. Harada, et.al. // J. Am. Chem. Soc. 2005. - Vol. 127, № 24. - P. 8652-8658.

94. Cate, A. T. Disulfide Exchange in Hydrogen-Bonded Cyclic Assemblies: Stereochemical Self-Selection by Double Dynamic Chemistry / A. T. Cate, P. Y. W. Dankers, R. P. Sijbesma, E. W. Meijer // J. Org. Chem. 2005. - Vol. 70, № 15.-P. 5799-5803.

95. Kream, J. On the Cytosine Deaminase of Yeast / J. Kream, E. Chargaff // J. Am. Chem. Soc. 1952. - Vol. 74, № 20. - P. 5157-5160.

96. Bickoff, E. M. Purine Derivatives in Alfalfa as Growth Stimulants for Bacillus subtilis / E. M. Bickoff, R. R. Spencer, S.C. Witt, В. E. Knuckles, et.al. // J. GR. Food Chem. 1968. - Vol. 16, № 2. - P. 245-251.

97. Пат. WO 96/06614, A61K31/505, A61K 31/52, C07D 239/02, C07D 437/00. Novel antibiotic compounds and methods to treat gram-positive bacterial and mycoplasmal infections / Brown N.C., Wright G. 1996.

98. Wright, G. E. Inhibitors of Bacillus subtilis DNA Polymerase III. 6-Anilinouracilis and 6-(Alkylamino)uracilis / G. E. Wright, N. C. Brown // J. Med. Chem. 1980. - Vol.23, №1. - p. 34-38.

99. Wright, G. E. Inhibitors of Bacillus subtilis DNA Polymerase III. Structure-Activity Relationships of 6-(Phenylhydrazino)uracilis / G. E. Wright, N. C. Brown//J. Med. Chem. 1977. - Vol. 20, № 9. - P. 1181-1185.

100. Bennett, В. C. Crystal Structure of the Anthrax Drug Target, Bacillus an-thracis Dihydrofolate Reductase / В. C. Bennett, H. Xu, R. F. Simmerman, R. E. Lee, et. al. //J. Med. Chem. Vol. 50, №18. - 2007. - P.4374-4381.

101. Varney, M. D. Protein Structure-Base Design, Synthesis, and Biological

102. Evaluation of 5-thia-2,6-diamino-4(3i7)-oxoprimidines: Potent Inhibitors of124

103. Glycinamide Ribonucleotide Transformylase with Potent Cell Growth Inhibition / M.D. Varney, C. L. Palmer, W. H. Romines III, T. Boritzki, et.al. // J. Med. Chem. 1997. - Vol. 40, № 16. - P. 2502-2524.

104. Miller, R. L. Guanine Phosphoribosyltransferase from Escherichia coli, Specificity and Properties / R. L. Miller, G. A. Ramsey, T. A. Krenitsky, G. B. Elion//Biochem. 1972. -Vol. 11, №25.-P. 4723-4731.

105. Пат. US4302587, C07D239/36. 6-(l-Methylhydrazino)isocytosine / Morrison R. W., Mallory W.R., Styles V. L. 1981.

106. Lever, O. W. Monocyclic Pteridine Analogues. Inhibition of Escherichia coli dihydropteroate Synthase by 6-Amino-5-nitrosoisocytosines / O. W. Lever, L. N. Bell, H. M. McGuire, R. Ferone // J. Med. Chem. 1985. - Vol. 28, № 12. -P. 1870-1874.

107. Zapf, C. W. Synthesis of 2-Amino-4-pyrimidinones from Resin-Bound Guanidines Prepared Using Bis(allyloxycarbonyl)-Protected Triflylguanidine / C. W. Zapf, M. Goodman // J. Org. Chem. 2003. - Vol. 68, № 26. - P. 1009210097.

108. Geshwindner, S. Discovery of a Novel Warhead against /?-secretase through Fragment-Base Lead Generation / S. Geshwindner, L.-L. Olsson, J. S. Albert, J. Deinum, et.al. // J. Med. Chem. 2007. - Vol. 50, № 24. - P. 59035911.

109. Edwards, P. D. Application of Fragment-Based lead Generation to the Discovery of Novel, Cyclic Amidine /?- Secretase Inhibitors with Nanomolar Potency, Cellular Activity, and High Ligand Efficiency / P. D. Edwards, J. S.

110. Albert, M. Sylvester, D. Aharony, et.al. 11 J. Med. Chem. 2007. - Vol. 50, № 24.-P. 5912-5925.

111. Congreve, M. Recent Developments in Fragment-Based Drug Discovery / M. Congreve, G. Chessari, D. Tisi, A. J. Woodhead // J. Med. Chem. 2008. -Vol. 51, №13.-P. 3661-3680.

112. McMillan, D. C. Lipids versus Proteins as Major Targets of Pro-Oxidant, Direct-Acting Hemolytic Agents / D. C. McMillan, C. L. Powell, Z. S. Bowman, J. D. Morrow, et.al. // Toxicological Sciences. 2005. - Vol. 88, № 1. - P. 274-283.

113. Beauchamp, L. M. Modifications on the Heterocyclic Base of Acyclovir: Syntheses and Antiviral Properties / L. M. Beauchamp, B. L. Dolmatch, H. J. Schaeffer, P. Collins, et.al. // J. Med. Chem. 1985. - Vol. 28, № 8. - P. 982987.

114. Beauchamp, L. M. Effect of Acyclic Pyrimidines Related to 9-(l,3-Dihydroxy-2-propoxy)methyl.guanine Herpesviruses / L. M. Beauchamp, B. L. Serling, J. E. Kelsey, K.K. Biron, et.al. // J. Med. Chem. 1988. - Vol. 31, № l.-P. 144-149.

115. Young, R. C. Dipole Moment in Relation to H2 receptor Histamine Antagonist Activity for Cimetidine Analodues / R. C. Young, G. J. Duran, J.C. Emmett, C.R. Ganellin, et.al. // J. Med. Chem. 1986. - Vol. 29, № 1. - P. 4449.

116. Ganellin, R. Medicinal Chemistry and Dynamic Structure-Activity Analysis in the Discovery of Drugs Acting at Histamine H2 Receptors / R. Ganellin // J. Med. Chem. -1981,- Vol. 24, № 8. P. 914-920.

117. Guan, Z. Modular Domain Structure: A Biomimetic Strategy for Advanced Polymeric Materials / Z. Guan, J. T. Roland, J. Z. Bai, S. X. Ma, et.al. // J. Am. Chem. Soc. 2004. - Vol. 126, № 7. - P. 2058-2065.

118. Yamauchi, K. Thermoreversible Poly(alkyl acrylates) Consisting of Self-Complementary Multiple Hydrogen Bonding / K. Yamauchi, J. R. Lizotte, Т. E. Long // Macromolecules. 2003. - Vol. 36, № 4. - P. 1083-1088.

119. Sontjens, S. H. M. Thermoplastic Elastomers Based on Strong and Well-Defined Hydrogen-Bonding Interactions / S. H. M. Sontjens, R. A.E. Renken, G. M. L. van Gemert, T. A. P. Engels, et.al. // Macromolecules. 2008. - Vol. 41, № 15.-P. 5703-5708.

120. Пат. JP2002251005 (A), G03F7/004, B41C1/055, B41N1/14, G03F7/00. Printing system using negative working thermal plate for on-press development / Van A.H., Vermeersch J., Kokkelenberg D. 2002.

121. Buhlmann P. Influence of Natural, Electrically Neutral Lipids on the Potentiometric Responses of Cation-Selective Polymeric Membrane Electrodes /127

122. P. Btihlmann, M. Hayakawa, T.Ohshiro, et.al. // Analytical Chemistry. 2001. -Vol. 73, № 14.-P. 3199-3205.

123. Canco, R. Novel Slow-, Tight-Binding HIV-1 Reverse Transcriptase Nucleoside inhibitors Highly Active Against Drug Resistant Mutants / R. Canco, A. Mai, D. Rotili, M. Artico, et.al. // Chem. Med. Chem. 2007 - № 2. - P. 445-448.

124. Mai, A. Synthesis and Biological Properties of Novel 2-Aminopyrimidin-4(3H)-ones Highly Potent against HIV-1 Mutant Strains / A. Mai, M. Artio, D. Rotili, I. Clott-Codina, et.al. // J. Med. Chem. 2007. - Vol. 50, № 22. - P. 5412-54.

125. Пат. US5434157, C07D239/47. 6-Aryl pyrimidine compounds and method for treating viral infections and inducing interferon production / Wier-enga W., Skulnick H.I., Stringfellow D.A. 1995.

126. Пат. US6635636 (Bl), С 07D239/36B, C07D239/46C3. Substituted 6-benzyl-4-oxopyrimidines, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them / Martino A., La Colla Paola 2003.

127. Chi, Y.-F. Researches on Pyrimidines. Synthesis of 5-Phenylcytosine / Y.-F. Chi, Y.-L. Tien // J. Am. Chem. Soc. 1933. - Vol. 55, № 10. - P. 41854186.

128. Пат. W02004096147, A61K31/505, C07D239/52, C07D239/56, A61K, A61K31/505, C07D239/00, (IPC1-7): A61K. Oxo-pyrimidine compounds / Storer R., La Colla P., Artico M., et. al.; IDENIX CAYMAN LTD. 2004.

129. Nizi, E. Solid Phase Synthesis of 2,6-Disubstituted-4(3/i/)-pirimidinones Targeting HIV-1 Reverse Transcriptase / E. Nizi, M. Botta, F. Corelli, et al. // Tetrahedron Lett. 1998.-Vol. 39.-P. 3307-3310.

130. Пат. US2740785, C12740785, C07D-239/28. 4-Hydroxy-5-alkyl-6-arylpyrimidine derivatives / Nicholson R.T., Rorig K.J 1954.

131. Scherp, H. W. Convenient Synthesis of thymine and 5-Methylisocytosine / H. W. Scherp // J. Am. Chem. Soc. 1946. - Vol. 68, № 5. - P. 912-913.

132. Caldwell, W. T. A New Synthesis of Isocytosine / W. T. Caldwell, H. B. Kime // J. Am. Chem. Soc. 1940. - Vol. 62, № 9. - P. 2365.

133. Northey, E. H. Chemical Side of Chemotherapy / E. H. Northey // Industrial and Engineering Chemistry. 1943. - Vol. 35, № 8. - P. 829-836.

134. Пат. GB568512 (A), C07C69/67, C07C69/00, C07C69/67. Formylacetic ester / AMERICAN CYANAMID CO. 1945.

135. Пат. US 2250332 (A), C07D239/46, C07D239/00, C07D239/46C3. Preparation of isocytosine / Kuh E. 1941.

136. Пат. US 2230970, C07D239/46, C07D239/00, C07D239/46C3. Purification of crude isocytosine / Jackson P. 1941.

137. Пат. GB548422 (A). Improvements in 2-aminopyrimidines. 1942.

138. Пат. CA 447114 (13) A. Preparation of isocytosine / Everett H.M. 1948.

139. Пат. FR926209 (A), C07D239/46C3, C07D239/46, C07D239/00. Procede pour la preparation de Г isocytosine / Hultquist M. M. E. 1947.

140. Пат. GB554324 (A). Preparation of isocytosine. 1943.

141. Пат. FR951685 (A), C07D239/46, C07D239/00, C07D239/46C3. Procede de preparation de l'isocytosine / NEPERA CHEMICAL CO INC. 1949.

142. Неницеску, К. Д. Органическая химия. В 3 т. Т.2. М: изд-во иностранной литературы, 1962. - 1048 с.

143. Tam, S. Y.-K. Nucleosides. 113. Synthesis of 6-(/?-D-Ribofuranosyl)Pyrimidines. A New Class of Pyrimidine C-Nucleosides / S. Y.-K. Tam, R. S. Klein, F. G. de las Heras, J. J. Fox // J. Org. Chem. 1979. -Vol. 44, № 26. - P. 4854-4862.

144. Johnson Т. B. Researches on Pyrimidines. LXX. The Isomerism of 4-Phenylisocytosine / Т. B. Johnson, A. J. Hill // J. Am. Chem. Soc. 1914. -Vol. 36, №9.-P. 1201-1209.

145. Gruijters, B. W. T. Catalyst Recycling via Hydrogen-Bonding-Based Affinity Tags / B. W. T. Gruijters, M. A. C. Broeren, F. L. van Delft, R. P. Si-jbesma // Org. Lett. 2006. - Vol. 8, № 15.-P. 3163-3166.

146. Литвинов, В. П. Химия гетериладамантанов. Часть 3. Шести-, семи- и восьмичленные гетериладамантаны / В. П. Литвинов, М.-Г. А. Швехгей-мер // ЖОрХ. 2000. - Т. 36, Вып.З. - С. 329.

147. Curran, W. V. Some New Synthesis of Amino- and Alkylaminopyrimidi-nes and -pteridines / W. V. Curran, R. B. Angier // J.Org. Chem. 1963. - Vol. 28, №10.-P. 2672-2677.

148. Новаков, И. А. Синтез новых ^-адамантилпроизводных 2-амино-6метил-4(3//)-пиримидинона потенциальных активаторов выработки фактора некроза опухоли / И.А. Новаков, Б.С. Орлинсон , М.Б. Навроцкий и др. // ХГС. - 2006. - № 10.-С. 1541-1544.

149. Еркин, А. В. Полифункциональные производные изоцитозина. Влияние гидратации на прототропную таутомерию 2-(2-гидроксиэтил)амино-6-метил-4-оксопиримидина / А. В. Еркин, В. И. Крутиков// ЖОрХ. 2005. -Т.75, Вып.4. - С. 677-682

150. Renault J. Synthesis and antiviral study of dihydrothieno and thianopyrimidine diones acyclic nucleosides as potential anti-HIV agents / Renault J.,1301.duree D., Robba M. // Nucleosides Nucleotides 1994. - Vol. 13, № 5. - P. 1135-1145.

151. Spychala J. A facile preparation of N -arylisocytosines / J. Spuchala // Synth. Commun. 1997. - Vol. 27, № 11. - P.1943-1949.

152. Сим О.Г. Синтез биологически активных новых 5-замещенных производных 2-аминопиримидин-4(ЗН)-она // Канд. Дисс. Москва, 2006.

153. Hilbert, G. Е. Researches on Pyrimidines. CXIII. An improved method for the synthesis of cytosine / G. E. Hilbert, Т. B. Johnson // J. Org. Chem. 1930. -Vol. 52. - P. 1152-1157.

154. Hilbert, G. E. The Alkylation of Pyrimidines. An Attempt to prepare 1-Glucosidocytosine / G. E. Hilbert // J. Am. Chem. Soc. 1934. - Vol. 56, № 1. -P. 190-195.

155. Wempen, I. The Synthesis of 6-flourocytosine and Related Compounds / I. Wempen, J. J. Fox // J. Org. Chem. 1963. - Vol. 6, № 6. - P. 688-693.

156. Wallace, J. M. Anhydrides of the Normal Aliphatic Saturated Monobasic Acids / J. M. Wallace, J. E. Copenhaver // J. Am. Chem. Soc. 1941. - Vol. 63, № 3. - P. 697-699.

157. Sasaki, T. Synthesis and Properties of Some Pyrimidine 2,4'-Cyclo Nucleosides / T. Sasaki, K. Minamoto, T. Asano, M. Mivaka // J. Org. Chem. -1975.-Vol. 40, № l.-P. 106-111.

158. Chung, W. K. Pyrimidines. 16. Novel s-Triazine to Pyrimidine Ring transformation Reaction / W. K. Chung, С. K. Chu, K. A. Watanabe, J. J. Fox. // J. Org. Chem. 1979. - Vol. 44, № 22. - P. 3982-3983.

159. Fissekis, J. D. Synthesis of 5-Carboxymethyluridine. A Nucleoside from Transfer Ribonucleic Acid / J. D. Fissekis, F. Sweet // Biochem. 1970. — Vol. 9, № 16.-P. 3136-3142

160. Minamoto, K. synthesis and Alkali-Hydrolysis Reactions of Some 2,3'-(Substituted imino)Pyrimidine Nucleosides Lacking a 2'-Hydroxyl Group / K. Minamoto, K. Azuma, N. Fujiwara, S. Eguchi // J. Org. Chem. 1989. - Vol. 54, № 19.-P. 4543-4549.

161. Mai, A. Synthesis and Anti-HIV-1 Activity of Thio Analogues of Dihy-droalkoxybenzyloxopyrimidines / A. Mai, M. Artico, G. Sbardella, S. Massa, et.al. // J. Med. Chem. 1995. - Vol. 38, №17. - P. 3258-3263.

162. Sbardella, G. Does the 2-Vethylthiomethyl Substituent Really Confer High Anti-HIV-1 Activity to S-DABO? / G. Sbardella, A. Mai, M.Artico, S. Massa, et.al. // Med. Chem. Res. 2000. - Vol. 10, № 1. - P. 30-39.

163. Mai, A. Dihydro(alkylthio)(naphthylmethyl)-oxopyrimidines: Novel Non-nucleoside Reverse Transcritase Inhibitors of the s-DABO Series / A. Mai, M. Artico, G. Sbardella, S. Quartarone, et.al. // J. Med. Chem. 1997. - Vol. 40, № 10.-P. 1447-1454.

164. Danel, К. Anti-HIV active naphthyl analogues of HEPT and DABO / K.Danel, C.Nielsen, E.B.Pedersen. // Acta Chem. Scand. 1997. - № 51. - P. 426-430.

165. Навроцкий, M. Б. Синтез и изучение фармакологической активности новых производных 6-(арилметил)-4(3//)-пиримидинона : дисс. . канд. фарм.наук / Навроцкий Максим Борисович. Пятигорск, 2002. - 192 с.

166. Danel, К. Synthesis and anti-HIV-1 activity of novel 2,3-dihydro-7H-thiazolo3,2-a.pyrimidin-7-ones / K. Danel, E.B. Pedersen, C. Nielsen // J. Med. Chem. 1998. -Vol.41, №2. -P. 191-198.

167. Pedersen, О. S. The Flourishing Syntheses of Non-nucleoside Reverse Transcriptase Inhibitors / O. S. Pedersen, E. B. Pedersen // Synthesis. 2000. -№4.-P. 479-495.

168. Botta, M. 6-Alkyl and 5,6-Dialkyl-2-methoxy-4(3#)-pyrimidinones in the Transformations of Pyrimidines / M. Botta, M. Cavalieri, D. Ceci, F. De An-gelis, et.al. // Tetrahedron. 1984. - Vol. 40, № 17. - P. 3313-3320.

169. Симон, И. Б. Синтез веществ с антитиреоидным действием. III. S-Метил-6-производные тиоурацила / И. Б. Симон, И. И. Крвтуновская // ЖОХ. 1951. - Т. 21, № 4. - С. 760-764.

170. Пат. US4521599, С079265/02. Process for the preparation of 1,3-oxazine-4-ones / Skulnick H., Wierenga W.; The Upjhon Company 1984.

171. Вейганд-Хильгетаг. Методы эксперимента в органической химии : пер. с англ. М.: Химия, 1968 - 944 с.

172. Andersen, G. W. Antithyroid compounds. Synthesis of 5- and 6-substituted 2 thiouracils from 3-oxoesters and thiourea / G. W. Andersen, I. F. Halverstadt, W. H. Miller // J. Am. Chem. Soc. 1945. - № 67. - P. 2197-2200.

173. Monostory J. New derivatives on carbon atom 6 of thiouracil with antithy-roidal effects / J. Monostory // An. Asoc. Quim. Argent. 1952. - №40. - P. 99108.

174. Morren H. G. (Methylbenzyl)thiouracil / H. G. Morren // Chem. Abstr. -1955.-№.49.-P. 1824-1828.

175. Ароян, А. А. Производные пиримидина. XXI. Замещенные 6-(4-Алкоксибензил)пиримидины / А. А. Ароян, M. С. Крамер // Арм. Хим. Журн. 1971. - Т. 24, № 2. - С. 161-166.

176. Пат. US2740785, C07D239/46, C07D239/00. 4-hydroxy-5-alky 1-6-arylpyrimidine derivatives / Rorig К.J., Nicholson R.T.; Searle & CO. 1956.

177. Jackman, M. The preparation of Some 6-Substituted-2-thiouracils / M. Jackman, A.J. Bergman, S. Archer // J. Am. Chem. Soc. 1948. - Vol. 70. - P. 497-500.

178. Wamberg, M. Synthesis of fiiroannelated analogues of Emivirine (MKC-442) / M. Wamberg, E.B. Pedersen, C. Nielsen, et al. // Arch. Pharm. (Wein-heim). 2004. - Vol. 337, № 3. - P. 148-151.

179. El-Brollosy, N. R. Synthesis of Novel MRC-442 Analogues with Potent Activities against HIV-1 / N.R. El-Brollosy, E.B. Pedersen, C. Nielsen // Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. 2003. - Vol. 336. - P. 236-241.

180. Johnson, Т. B. Researches on Pyrimidines. CLIX. Synthesis of 6-Benzyl-and 5-Benzyluracils / Т. B. Johnson, J. C. Ambelang // J. Am. Chem. Soc. -1938. Vol. 60. - P. 2941-2944.

181. Aly, Y. L. Synthesis and anti-HIV-1 Activity of New MKC-442 Analogues with an Alkylnyl-substituted 6-benzyl group / Y. L. Aly, E. B. Pedersen, P. La Colla, R. Loddo // Arch. Pharm. Chem. Life Sci. 2007. - Vol.340. - P. 225-235.

182. Baker, B. R. An antimalarial alkaloid from hydrangea. XVIII. Derivatives of 4-pyrimidone / BR. Baker, R. E. Schaub, J. P. Joseph, et al. // J. Org. Chem.- 1953.-Vol.18.-P. 133-137.

183. Danel, K. Easy synthesis of 5,6-disubstituted acyclouridine derivatives / K. Danel, E. Larsen, E. B. Pedersen // Synthesis 1995. - Vol.8. - P 924-936.

184. Riegel, B. The synthesis of p-keto esters by the decomposition of acylated malonic esters / B. Riegel, W. M. Lilienfeld //J. Am. Chem. Soc. 1945. - Vol. 67, №8.-P. 1273-1275.

185. Wang, X. A process for the synthesis of p-lcetoesters using in-situ generated (trymethylsilyl)malonates / X. Wang, et. al. // Tetrahedron Letters 1994.- Vol. 35, № 50. P. 9323-9326.

186. Breslow, D. S. A new synthesis of P-ketoesters of the type RCOCH2COOC2H5 / D. S. Breslow, E. Baumgarten, C. R. Hauser // J. Am. Chem. Soc. 1944. - Vol. 66. - P. 1286-1288.

187. Pichat, L. Ethyl Acryloylacetate and its Homologs by Acylation of Trimethylsilyl Ethoxycarbonylacetate / L .Pichat, J.-P. Beaucourt // Synthesis -1973. -P.573-574.

188. Schmidt, U. Polycarbonylverbindungen Uber Synthesen mit den Trimethylsilylestem der AcetessigSAure und Malonsurel. Ein neuer Weg zu

189. Diacyl-methanen und Diacyl-essigsaureestern / U.Schmidt, M. Schwochau // Mh. Chem. 1967. - Vol.4. - P. 1492-1512.

190. Завьялов, С. И. Кислота Мельдрума реагент для синтеза производных тиофана / С. И. Завьялов, О. В. Дорофеева, О. К. Таганова // ЖОХ. -1985. - С.1691-1692.

191. Yonemitsu, О. Meldrums acid in organic synthesis. 2. A general and versatile synthesis of P-keto esters / O. Yonemitsu, Y. Oikawa, K. Sugano // J. Org. Chem. 1978. - Vol.43, №10. - P. 2087-2088

192. Oikawa, Y. Methyl Phenylacetylacetate From Phenylacetatyl Chloride and Meldrum's Acid / Y. Oikawa, T. Yoshioka, K. Sugano, O. Yonemitsu, et.al. // Org. Syn. 1985. - Coll. Vol.23. - P. 198-202.

193. Moody, C. J. Diels-Alder reactivity of pyrano4,3-b.indol-3-ones, indole 2,3-quinodimethane analoges / C. J. Moody, K. F. Rahimtoola // J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1990. - Vol. 1. - P. 673-679.

194. Houghton, P. R. A modified preparation of P-keto esters / R. P. Houghton, D. J. Lapham // Synthesis. 1982. - Vol. 12. - P. 451-452.

195. Ohkubo, M. Studies on cerebral protective agents. VI. Synthesis of novel 4-(4-nitrobenzoyl)pyrimidine and related compounds with anti-anoxic activity / M. Ohkubo, et al. // Chem. Pharm. Bull. 1994. - Vol. 42, № 6. - P. 1279-1285.

196. Capozzi, G. A protocol for the efficient synthesis of enantiopure p-substituted P-lactones / G. Capozzi, S. Roelens, S. Talami // J. Org. Chem. -1993. Vol. 58, № 28. - P. 7932-7936.

197. Wierenga, W. Alyphatic and Aromatic (3-keto esters from monoethyl malonate: ethyl 2-butyrylacetate / W. Wierenga., H. I. Skulnick. // Org. Synth. -1980.-Coll. Vol. 7.-P. 213-215.

198. Katagiri, N. Studies on ketene and derivatives. CIX. Synthesis of naturally occurring anthracene-9, 10-diones / N. Katagiri, T. Kato, J. Nakano // Chem. Pharm. Bull. 1982. - Vol. 30, № 7. p. 2440-2446.

199. Clay, RJ. A safe economical method for the preparation of |3-oxo esters / R.J. Clay, et. al. // Synthesis 1992. - P. 290-292.

200. Rathke, M. W. Synthesis of (3-ketoacids and methyl ketones using bis(trimethylsilyl)malonate and triethylamine in the presence of lithium or magnesium halides / M.W. Rathke, M.A. Nowak // J. Org. Chem. 1985. -Vol. 15, № 12. - P. 1039-1050.

201. Straley, J. Ethyl Benzoylacetate / J. Straley, A. Adams // Org. Synth. -1963.-Coll. Vol.4.-P. 415.

202. Modi, P. Indole-2-acetic acid methyl esters: methyl 5-methoxyindole-2-acetate / P. Modi, R. Oglesby, S. Archer // Org. Synth. 1995. - Vol. 72. - P. 125.

203. Troostwijk, С. B. Method for synthesis of 4-substituted acetoacetates / C. B. Troostwijk, R. M. Kellog // J. Chem. Soc., Chem. Commun. 1977. - P.932-933.

204. Narasimhan, N. S. Mechanism of acylation of dilithium salts of beta-keto esters an efficient synthesis of anibine / N. S. Narasimhan, R. K. Ammanaman-chi // J. Org. Chem. 1983. - Vol. 48, № 22. - P. 3947-3950.

205. Melillo, D.G. A practical synthesis of thienamycin / D.G. Melillo, I. Shinkai, T. Liu, et. al. // Tetrahedron Lett. 1980. - Vol. 21. - P. 2783-2786.

206. Kamijo, Т. 1-Асу 1-3-substituted imidazolium salts as highly reactive acy-lating agents / T. Kamijo, et al. // Chem. Pharm. Bull. Vol. 30, № 11. - 1982. -P. 4242-4244.

207. Kamijo, Т. An Improved and Convenient Synthesis of Esters Using 1,1'-Carbonyldiimidazole and a Reactive Halide / T. Kamijo, et al. // Chem. Pharm. Bull. 1984. - Vol.32, №12. - P. 5044-5047.

208. Artico, M. Non-nucleoside anti-HIV-1 Reverse Transcriptase Inhibitors (NNRTIs): A Chemical Survey from Lead Compounds to Selected Drugs for Clinical Trials / M. Artico, et.al. // IL Farmaco. 1996. - Vol. 51, № 5. - P. 305-331.

209. Hamada, Y. Synthesis of Mugineic Acid through Direct C-Acylation Using Diphenyl Phosphorazidate / Y. Hamada, T. Shioiri // J. Org. Chem. 1986. -Vol. 51.-P. 5489-5490.

210. Hamada, Y. New methods and reagents in organic synthesis. 24. A new synthesis of prumycin as an application of the direct c-acylation using diphenyl phosphorazidate (DPPA) / Y. Hamada, et al. // Tetrahedron Lett. 1982. - Vol. 23, № 11. -P.l 193-1196.

211. Shioiri, T. Natural product synthesis utilizing 4-alkoxycarbonyloxazoles as P-hydroxy-a-amino acid synthons / T. Shioiri, et al. // Heterocycles 1988. -Vol.27, № 4. - P. 1035-1050.

212. Shioiri, T. Amino acids and peptides. X. Phosphorus in Organic Synthesis. V. On the mechanism for the Peptide synthesis by diphenyl phosphorazidate / T. Shioiri, et al. // Chem. Pharm. Bull. 1974. - Vol. 22, № 4. p. 855-858.

213. Hamilakis, S. Acylaminoacetyl derivatives of active methylene compounds. 3. C-Acylation reactions via the hippuric acid azalactone / S. Hamilakis, D. Kontonassios, C. Sandris // J. Hetercycl. Chem. 1994. - Vol. 31, № 5. -P. 1145-1150.

214. Ewing, W. R. A short, stereocontrolled synthesis of (-)-detoxinine / W. R. Ewing, M. M. Joullie // Heterocycles 1988. - Vol. 27, № 12. - P. 2843-2850.

215. Price, J. A. Diethyl Benzoylmalonate / J. A. Price, D. S. Tarbell // Org. Synth. 2004. - Coll. Vol. 4. - P. 285-288.

216. Ono, N. Alkylation and Acylation of Active Methylene Compounds Using l,8-Diazabicyclo5[l.4.0]undec-7-ene as a Base / N. Ono, et al. // Bull. Chem. Soc. Jap. 1979. - Vol.52, №6. - P. 1716-1719.

217. Obaza, J. A malonic ester synthesis with acid chlorides. The homologation of dioic acids / J. Obaza, F. X. Smith // Synth. Com. 1982. - Vol. 12, № 1. - P. 19-23.

218. Беккер, X. Органикум : пер. с нем. в 2 т. Т2. / X. Беккер, Г. Домшке, Э. Фангхенель, и др. М.: Мир, 1992. - 474 с.

219. Dann, О. Ringschliisse von Arylketosulflden zu. Thionaphthenen / О. Dann, M. Kokorudz // Chem. Ber. 1958. - Vol. 91. - P. 172-180.

220. Темникова, Т. И. Курс теоретических основ органической химии / Темникова. М.: Химия, 1968. — 1008 с.

221. Handbook of Chemistry and Physics / (ed. Lide D.R.) 8led., CRC Press LLC-2000.

222. Reese, С. Methoxyacetyl as a protecting group in ribonucleoside / С. В., Reese, J. С. M. Stewart // Tetrahedron Lett. 1968. - № 40. - P. 4273-4276.

223. McElvain, S. M. Ethyl benzoylacetate / S. M. McElvain, К. H. Weber // Org. Syn. 1955. - Coll. Vol.3. - P. 379-380.

224. Sato, T. Facile synthesis of p-ketoesters by coupling reaction of the refor-matsky reagent with acyl chlorides catalyzed by a palladium complex / T. Sato, T. Itoh, T. Fujisawa // Chem. Lett. 1982. - P. 1559-1560.

225. Kagan, H. B. Reaction de Reformatsky sur les nitriles. I. Preparation de P-ceto-esters non substitues, mono ou disubstitues en a / H. B. Kagan, M. Y.-H. Suen // Bull. Chim. Soc. France P. 1819-1822.

226. Hannick, S. M. Improved procedure for the Blaise reaction: a short, practical route to the key intermediates of the Saxitoxin synthesis / S. M. Hannick, Y. Kishi // J. Org. Chem. 1983. - Vol. 48, № 21. - P. 3833-3835.

227. Narkunan, K. Synthesis of 8-hydroxy-p-oxo esters using sonochemical Blaise reaction / K. Narkunan, B.-J. Uang // Synthesis 1998. - P. 1713-1714.

228. Lee, A. S.-Y. A simple and highly efficient synthesis of b-amino-a,b-unsaturated ester via sonochemical Blaise reaction / A. S.-Y. Lee, R.-Y. Cheng, O.-G. Pan // Tetrahedron Lett. 1997. - Vol. 38, № 3. - P.443-446.

229. Bestman, H. J. Neue Synthesemoglichkeiten fur a-verzweigte p-keto-carbonsaureester/ H. J. Bestman, G.G. Graf, H. Hartung, et. al. // Chem. Ber. -1970. -№ 103.-P. 2794-2801.

230. Holmquist, C. R. A selective method for the direct conversion of aldehydes into P-keto esters with ethyl diazoacetate catalyzed by tin(II) chloride / C. R. Holmquist, E. J. Roskamp // J. Org. Chem. 1989. - Vol. 54, № 14. - P. 3258-3260.

231. Lazar, J. Mannich condensation of the methyl ester of 7-oxocholic acid / Lazar J., et. al. // Chem. and Ind. 1963. - №22. - P. 913.

232. Claisen, L. Ueber eine neue Bildungsweise de Benzoylessig / L. Claisen, O. Lowman // Ber. 1887. - Vol. 20. - P. 651 -654.

233. House, H. О. Modern Synthetic Reactions / H. O. House, ed. W. A. Benjamin // Menlo Park, 2nd ed. 1972. - P. 734-746.

234. Garst, J. F. Claisen ester condersation equilibria model calculations / J. F. Garst // J. Chem. Educ. - 1979. - Vol. 56, №11. - P. 721-722.

235. Bartmess, J. E. The addition of carbanions to the carbonyl group in the gas phase / J. E. Bartmess, R. L. Hays, G. Caldwell // J. Am. Chem. Soc. 1981. -Vol. 103. - P. 1338-1344.

236. Хиккинботтом, В. Реакции органических соединений Текст. / В. Хиккинботтом. М., 1939. - 579 с.

237. Tufariello, J. J A stereospecific synthesis of (±)-cocaine / J. J Tufariello, J. J. Tegeler, Sing Chun Wong, et. al. // Tetrahedron Lett. 1978. - Vol.19. - P. 1733-1736.

238. Tufariello, J. J. Synthesis in the tropane class of alkaloids. Pseudotropine and dl-cocaine Text. / J. J. Tufariello, G. B. Mullen, J. J. Tegeler, et. al. // J. Am. Chem. Soc. 1979. - Vol. 101, № 9. - P. 2435-2442.

239. Еремийчук, А. С. Синтез и исследование новых производных 6-(2,6-дигалогенбензил)-5-алкил-2-(алкилсльфанил)-4(3#)-пиримидинонов: дисс. . канд. хим. наук. / А. С. Еремийчук. Волгоград, 2008. - 135с.

240. Hermkens, P. Н. Н. Solid-phase organic reactions: A review of the recent literature / P. H. H. Hermkens, H. C. J. Ottenheijm, D. Rees // Tetrahedron. -1996. Vol. 52. - P. 4527-4554.

241. Пат. US4912219, C07D401/14, C07D405/14, C07D409/14. 2-(4-pyrimidin-2-ylamino)piperidin-l-yl.benzimidazole compound [Text] / Manoury P., Binet J., Defosse G. 1990.

242. Гершкович, А. А. Синтез пептидов. Реагенты и методы / А.А. Гер-шкович, В.К Кибирев Киев: Наукова думка, - 1987.

243. Boojamra, С. G. An Expedient and Hign-Yielding Method for the Solid-Phase Synthesis of Diverse 1,4-Benzodiazepine-2.5-diones / C. G. Boojamra, К. M. Burow, J. A. Ellman // J. Org. Chem. 1995. - Vol. 60, № 18 -P. 57425743.

244. Goof, D. A. Solid phase synthesis of defind l,4-benzoiazepine-2,5-dione mixture / D. A. Goof, R. N.Zuckermann // J. Org. Chem. - 1995. - Vol. 60, № 18.-P. 5744-5745.

245. Dressman, B. A. Solid phase synthesis of hydantoins using a carbamate linker and novel cyclization / cleavage step / B. A. Dressman, L. A. Spangle, S. W. Kaldor, et.al. // Tetrahedron Lett. 1996 - Vol. 37. -P. 937-940.

246. Zhang, C. Synthesis of tetrasubstituted imidazoles via a-(N-acyl-N-alkylamino)-|3-ketoamides on wang resin / C. Zhang, E. J. Moran, T. F. Woi-wode, et.al. // Tetrahedron Lett. 1996. - Vol. 37. - P. 751-754.

247. Sarshar, S. Imidazole libraries on solid support / S. Sarshar, D. Siev, A. M. M. Mjali, et.al. // Tetrahedron Lett. 1996. - Vol.37. - P. 835-838.

248. Marzinik, A. L. Solid support synthesis of highly functionalizated pyra-zoles and isoxazoles; Scaffolds for molecular diversity Text. / A. L. Marzinik, E. R. Felder // Tetrahedron Lett. 1996. - Vol. 37. - P. 1003-1006.

249. Gordeev, M. F. Approaches to Combinatorial Synthesis of heterocycles: Solid Phase Synthesis of Pyridines and Pyrrido2,3-d.pyrimidines / M. F. Gordeev, D. Y. Patel, E. M. Gordon // J. Org. Chem. 1996. - Vol. 61. -P. 924.

250. Ruhland, B. Solid-Supported Combinatorial Synthesis of Structurally Diverse yS-Lactoms / B. Ruhland, A. Bhandari, E. M. Gordon, et.al. // J. Am. Chem. Soc. 1996. - Vol. 118. - P. 253-254.

251. Wipf, P. A solid phase protocol of the biginelli dihydropyrimidine synthesis suitable for combinatorial chemistry / P. Wipf, A. Cunningham // Tetrahedron Lett. 1995. - Vol. 36. - P. 7819.

252. Holmes, C. P. Strategies for Combinatorial Organic SynthesisA Solution and Polymer-Supported Synthesis / C. P.Holmes, J.P.Chinn, G. C.Look, et.al. // J. Org. Chem. 1995. - Vol. 60, № 22. - P. 7328-7333.

253. Mohan, R. Pictet-Spenglev reaction on solid support synthesi of 1,2,3,4-tetrahydro-P-carboline libraries / R. Mohan, Y.-L. Chou, M. M. Morrisey // Tetrahedron Lett. 1996. - Vol. 37. - P. 3963-3966.

254. Ojima, I. Asymmetric hudrogenation of ketopantoyl Lactone: D(-)-pantonyl Lactone / I. Ojima, T. Kogure, Y. Yoda // Org. Synth. 1990. -Coll.Vol. 7-P.417.

255. Brun, E. M. New Conditions for the Generation of Dianions of Carboxylic Acids / E.M. Brun, I. Casades, S. Gil, et.al. // Tetrahedron Letters. 1998. -Vol. 39.-P. 5443-5446.

256. Armand-Ugon, M. The Anti-HIV Activity of ADS-J1 Targets the HIV-1 gpl20 / M. Armand-Ugon, I. Clotet-Codina, C. Tintori, et.al. // Virology. -2005. Vol. 343. - P. 141-149.

257. Титце, JI. Препаративная органическая химия: Реакции и синтезы в практикуме органической химии и научно-исследовательской лаборатории : пер. с нем. / Л.Титце, Т. Айхер. М.: Мир, 1999.- 704 с.

258. Бирзниекс, К. А. Синтез и изучение свойств аминов ряда адамантана : Автореф. дис. на соиск. уч. ст. к. х. н. / К. А. Бирзниекс Волгоград, 1988.-169с.

259. Ranyuk, Е. R. Synthesis of new family of Adamantylpyridin-2-amines by Palladium-catalyzed Amination / E.R.Ranyuk, S.L. Golub, A.K. Buryak, B.S.Orlinson, I.A. Novakov, I.P.Beletskay / SYNTHESIS. 2007. - № 14. - P. 2215-2221.

260. Пат. DEI 110159 (B), C07D213/38, C07D295/02, C07D295/033, C07D213/00,C07D295/00. Improvements in or relating to amino-norcamphane compounds / Thesing Dipl J., Seitz Dipl G., Hotovy R., Sommer S. 1961.

261. Сводный каталог фирм «Lancaster Synthesis-Alfa Aesar: All in One / Research Chemicals, Metals and Materials»- Moccow: 'Reakov Too', 2006-2007.-1749 p.

262. Danel, K. Synthesis and potent anti-HIV-l activity of novel 6-benzyluracilanalogues of l-(2-hydroxyethoxy)methyl.-6-(phenylthio)thymine / K. Danel,145

263. E. Larsen, Е.Р. Pedersen et.al. // J. Med. Chem. 1996. - Vol. 39, № 12. - P. 2427-2431.