Синтез и исследование свойств производных салициловой кислоты тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

На правах рукописи

Лисина Светлана Викторовна

□□3466576

СИНТЕЗ И ИССЛЕДОВАНИЕ СВОЙСТВ ПРОИЗВОДНЫХ САЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ

02.00.03 - Органическая химия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

О 9 АПР 2003

Волгоград - 2009

003466576

Работа выполнена на кафедре химии Волгоградского государственного медицинского университета

Научный руководитель доктор химических наук, профессор

Брель Анатолий Кузьмич.

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор

Рахимов Александр Имануилович.

доктор химических наук, профессор Москва Виктор Владимирович.

Ведущая организация Учреждение Российской академии наук Институт

органической и физической химии им. А. Е. Арбузова Казанского научного центра РАН.

Защита диссертации состоится « 23 » 2009 г. в У на заседании

диссертационного совета Д 212.028.01 при Волгоградском государственном техническом университете по адресу 400131, г. Волгоград, пр. Ленина, 28, ауд. 209.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Волгоградского государственного технического университета

Автореферат разослан » иССО/С?^ 2009

года.

Ученый секретарь

диссертационного совета --- ЛукасикВ.А.

Введение

Актуальность темы. Химия нестероидных противовоспалительных средств (НПВС) является одной из динамически развивающихся отраслей химической науки, что обусловлено практической значимостью этих соединений. НПВС представляют собой обширную и разнообразную по химическому строению группу лекарственных средств, широко применяющихся в клинической практике. Большинство препаратов группы НПВС (в том числе и производные о-оксибензойной кислоты, известной как салициловая кислота - СК), относятся по современной терминологии к "кислотным" противовоспалительным средствам. Им присущи и сходные побочные эффекты: повреждающее действие на слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта, нарушение функции почек и некоторые другие. Производные СК (салицилаты) вошли в клиническую практику с конца XIX века и повсеместно применяются до настоящего времени. Такие производные СК как ацетилсалициловая кислота (АСК, аспирин), салицилат натрия, салициламид (САМ), метилсалицилат используются в медицине в качестве анальгетиков (болеутоляющее), антипирегиков (жаропонижающее) и антиагрегантов (антитромботическое). По последним данным производные СК можно рассматривать как биорегуляторы, которые синтезируются самим организмом и выполняют защитные функции. И это позволяет переосмыслить роль СК в патофизиологии человека и животных.

В связи с этим, актуальной задачей является разработка новых и усовершенствование известных путей синтеза производных СК, а также целенаправленный поиск эффективных терапевтических агентов на основе СК, отличающихся повышенной биологической активностью в сочетании с низкой токсичностью и менее выраженным побочным действием.

Цель работы состоит в разработке улучшенных способов синтеза, исследовании биологической активности производных СК, включающих амиды, сложные и простые эфиры СК, и выявлении взаимосвязей структуры) различных видов биологической активности и острой токсичности полученных соединений. Достижение поставленной цели предусматривало решение следующих задач: 1. Исследовать пути синтеза эфиров СК и АСК и подобрать оптимальные условия их получения.

2. Изучить кинетику синтеза сложных эфиров алкилированием соли СК соответствующими алкилгалогенидами. Определить кинетические параметры реакции.

3. Исследовать условия и пути синтеза амидов СК с использованием в качестве амидирующих агентов гидроксиламина, у-оксипропиламина, морфолина, аминокислот.

4. Изучить липофильности и липофобности полученных соединений.

5. Экспериментально изучить биологическую активность синтезированных соединений, включающую жаропонижающую активность, антибактериальное действие и острую токсичность.

Научная новизна. Впервые получены фосфорсодержащие сложные эфиры салициловой кислоты, а также амиды на основе различных амидирующих агентов (таких как аминокислоты, аминоспирты и морфолин), синтезированы и вновь установлены физико-химические константы ранее полученных амидов и эфиров салициловой кислоты. Изучена кинетика и установлены кинетические параметры реакции алкилирования соли салициловой кислоты аллилбромидом. Установлено, что для проведения данной реакции наиболее эффективным является >Ш-диметилформамид.

Впервые рассчитаны константы и рКа, характеризующие липофильность и липофобность веществ, позволяющие использовать их для прогноза взаимосвязи «строение - жаропонижающая активность - острая токсичность» в ряду синтезированных производных. Экспериментально установлено, что жаропонижающая и антибактериальная активности, а также острая токсичность (ДЦ5о) синтезированных производных коррелируют с рассчитанными константами. Найдены соединения, имеющие более выраженную жаропонижающую активность с пролонгированным действием по сравнению с аспирином.

Практическая значимость работы. Синтезировано и охарактеризовано 17 эфиров и 6 амидов СК.

Разработаны улучшенные способы получения эфиров СК и АСК этерификацией и алкилированием их солей алкилгалогенидом, являющихся потенциальными высокоэффективными жаропонижающими • средствами, позволяющие получать целевые соединения с высоким выходом и высокой чистотой.

Предложен метод получения N-салицилоилпроизводных ГАМК и метилового эфира Р-фенил-у-аминомасляной кислоты.

Экспериментальное исследование жаропонижающей, нротивомикробной активности синтезированных производных выявило высокую биологическую активность некоторых производных в сочетании с низкой токсичностью.

Изучение липофильности и липофобности полученных производных СК и АСК позволило выявить взаимосвязь «структура-активность-токсичность» в ряду полученных соединений. Установлено, что на основе синтезированных веществ целесообразен поиск новых производных СК и АСК, обладающих жаропонижающей, противомикробной и другими видами активностей пролонгированного действия, характеризующихся низкой токсичностью.

Апробация работы. Основные результаты работы докладывались и обсуждались на ежегодных сессиях ВолГМУ 2003-2007 гг. Всероссийской научно-методической конференции «Пути и формы совершенствования фармацевтического образования» (г. Воронеж, 2005 г), на Ш съезде фармакологов России (г. С.Петербург, 2007 г), Международной специализированной выставке «Аптека-2007» (г. Москва, 2007 г ), III научной международной конференции «Современные проблемы науки и образования» (г. Москва, 2008 г)

Публикация результатов. Результаты проведенных исследований опубликованы в II работах, из них 5 статей (из которых 1 статья в издании, рекомендованном ВАК по химическим дисциплинам и 1 статья - по биологическим наукам и медицине), тезисы 6 научных докладов, получен приоритет на 1 патент.

Объем и структура работы. Диссертационная работа включает введение, 3 главы, выводы и список использованной литературы. Работа изложена на 112 страницах машинописного текста, содержит 12 таблиц, 25 рисунков и 116 литературных ссылок.

Первая глава посвящена обзору литературы по методам синтеза, химическим и фармакологическим свойствам производных СК.

Во второй главе представлены результаты исследований путей и условий синтеза производных СК и изучения различных аспектов их биологической активности.

В третьей главе изложены характеристики исходных веществ, подробное описание прописей синтеза полученных соединений и их анализа.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Проанализировав литературные данные по различным подходам к синтезу производных СК можно сделать следующие выводы:

1. Осуществить исследования по поиску оптимальных условий синтеза сложных эфиров СК и АСК этерификацией салициловых кислот алифатическими спиртами и их производными. А также исследовать кинетику синтеза сложных эфиров алкилированием соли СК алкилгалогенидами.

2. Осуществить синтез амидов СК (особенно амидов на основе аминокислот), так как они демонстрируют различные виды фармакологической активности и переносятся лучше, чем другие производные СК.

3. Изучить различные виды биологической активности (жаропонижающую, антибактериальную) и острую токсичность, синтезированных соединений.

4. Определить и систематизировать величины, характеризующие липофильные и липофобные свойства синтезированных соединений.

5. Попытаться сформулировать некоторых закономерностей структура-активность-острая токсичность в ряду синтезированных производных СК.

1. Исследование особенностей синтеза алкильных эфиров салициловой кислоты: этерификация спиртами и алкилирование алкилгалогенидами

В связи с тем, что синтез по классическому методу проводится без водоотделения, длительность этерификации составляет 10-12 ч, выход составляет 5560 % и 80 % для амилсалицилата, что не нашло подтверждения в ходе эксперимента, проведенного нами, было изучено влияние различных условий реакции этерификации на выход целевого продукта. Например, получен бутиловый эфир СК с использованием различных катализаторов и условий синтеза.

он о

соон ?н П

+ Н3С-СН2-СН2-СН2 д=гг о-(СН2)3-СН3 +Н20

Использование серной кислоты в качестве катализатора позволило получить эфир с выходом 49,3 %. Замена серной кислоты на катионит позволила повысить выход бутилсалицилата до 56,1 %. А замена на л-толуолсульфокислоту (р-ТвОН)

позволила ещё больше увеличить выход. Он составил 79,2%. (табл. 1) Метод переэтерификации так же был использован для получения w-бутилсалицллата. В качестве катализатора использовался гидроксид натрия. Выход составил 67 % (по литературным данным от 64 до 77 %).

Таблица 1

Зависимость выхода н-буталсалицилата (Iii) от условий.

Соединение, III Условия Выход, %

[лит] [эксп]

ОН О H2S04 (конц) 69,1 49,3

катионит Н+ КУ-2 - 56,1

p-TsOH - 79,2

Переэтерификация в прис. NaOH 77,4 67,0

С использованием /э-ТбОН было получено 6 сложных алифатических эфиров СК. Так как выходы, указанные в литературных источниках, не были подтверждены или использовался катализатор, не описанный для использования в синтезе алкилсалицилатов, структура полученных соединений была подтверждена данными ПМР-спектроскопии. Для окончательного подтверждения строения синтезированных соединений нами были изучены масс-спектры некоторых представителей.

Фосфорсодержащие эфиры СК также были получены реакцией этерификации СК фосфорсодержащими спиртами с использованием катализатора/^-ТвОН:

II Р-ТБОН

+ 1УЭ-Р—снг—сн—он И

НО '

Другой метод синтеза сложных эфиров - алкилирование солей кислот галогеналкилами. Было установлено, что способ получения сложного аллилового эфира АСК реакцией алкилирования аллилбромидом в присутствии поташа в среде М,Ы-диметилформамида (ДМФА) по уравнению

ОАс ОАс о

/Ц/СООН ^г ^с'

и •

1/2KjCOJ * НдС^СН-СНд ДМФА. Г| -Т 0СН2СН=С112 + KBr+COj

имеет следующие преимущества: исключена стадия получения простых эфиров из спиртов, нет необходимости отделения воды, полученные эфиры не подвергаются

7

гидролизу и, наконец, продолжительность реакции составила 1,5 ч. Выход аллилсалицилата составил 82,7 %. Алкилирование калиевой соли аллилхлоридом удается провести только при нагревании реакционной массы до 90 - 100 °С в присутствии Nal в течение 10 ч. Выход продукта 58,2 %. Также был получен аллилсалицилат путем взаимодействия натрий салицилата с аллилбромидом в среде ДМФА. Смесь нагревают в течение 2-3 ч при температуре 90 - 100 °С. Выход составил 57,9 %.

Ненасыщенный фрагмент в аллильном заместителе подвергали эпоксидированию в щелочной среде действием 3-х кратного мольного избытка 30 % перекиси водорода. Следует отметить, что в случае о-ацетоксиаллилбензоата реакция сопровождается гидролизом ацилыюй группы. Выход глицидилсалицилата составил 56,2 %.

Другими путями - взаимодействием СК с эпихлоргидрином в водном растворе при температуре 90-95 °С в присутствии NaOH и салицилата натрия или калия с эпихлоргидрином в среде ДМФА в присутствии каталитических количеств Nal или KI при температуре 80-90 °С - не дали желаемых результатов.

Напряженный трехчленный оксирановый позволяет использовать его в дальнейшем синтезе. Так, например, оксирановый цикл в глицидиловом эфире СК был раскрыть в кислой среде. Структура полученных соединений была подтверждена данными ПМР- и масс спектроскопии.

Таблица 2. Физико-химические свойства сложных эфиров СК и ее производных.......^

№ к, И: выход, т„„..'с „20 по МЛ„ Найдено, %

Найд, Выч. С О н

VIII н о —СНг-НС-СЬ^ 56,2 102-105/ 3-5 мм.рт.ст 1,5940 1,3290 48,47 48,74 61,86 32,99 5,15

IX н О II —(СН2)г—Р(ОМе), 67,8 143-147./ 3-5 мм.рт.ст 1,5061 1,2811 63,60 64,17 48,17 35,05 5,47

X н О II —(Снг12—Р(ОС,Н,), 60,2 178-182/ 3-5 мм.рт.ст 1,4998 1,2143 73,27 73,43 51,66 31,79 6,29

XI н О II —(снг)г-р(0сн(сн3у 53,3 180-183/ 3-5 мм.рт.ст 1,4978 1,1658 83,92 82,61 54,55 29,09 6,97

XII -4° сн, —сн2-нс=сн2 82,7 130-134/ 3-5 мм.рт.ст 1,5145 1,1400 59,17 58,35 65,45 5,45 29,09

«II —СН2-НС=СНг —СНГНС=СН2 32,4 120-125./ 3-5 мм.рт.ст 1.5120 1,0405 62,94 62,68 71,56 22,02 6,42

XIV —сн^-нс=сн2 —сн3 63,8 98-102/ 3-5 мм.рт.ст 1,5052 1,0603 53,78 53,69 68,75 25,01 6.24

XV -сн3 53,5 'Г„ -84-86 - - 69,61 69,67 70,73 25,00 4,69

XVI н ?н —сн^нс—сн2 он 72,0 100-105/1-3 мм.рт.ст 1,572 1,3762 52,5 52.2 56,57 37,71 5,72

XVII н о-(снг)гр<о)(осн3)! —снгн<р-снг он 53,0 112-117/ 3-5 мм.рт.ст 1,5231 1,3151 81,58 81,3 48,25 36,78 6,01

2. Кинетика алкилирования салициловой кислоты

Была изучена реакция алкилирования салицилата калия аллилбромидом, протекающая согласно схеме:

Реакция осуществлялась в интервале температур 15-65°С при большом избытке аллилбромида (соль СК : аллилбромид = 1:60) кинетические зависимости, которой соответствовали реакции псевдопервого порядка. Так как ион калия является стандартным катионом в кинетических исследованиях, то в качестве соли был использован салицилат калия. Алкилирующий агент - аллилбромид - очищали по стандартной методике. По данным ТСХ единственным продуктом реакции алкилирования является аллилсалицилат. Количественный анализ осуществляли на газовом хроматографе «Цвет-500», Разделение проводили на колонке длиной 1,0 м с неподвижной фазой СЬгогшиоп Ы^ирег с 3% ОУ-225 (0,125-0,160 мм). Газ-носитель -аргон, температура испарителя и детектора 170°С.

На схеме приведен один из возможных механизмов реакции взаимодействия салицилата калия с аллилбромидом:

Установлено, что наблюдается явная корреляция между величиной диэлектрической проницаемости (е), донорным числом растворителя и выходом целевого продукта (табл. 3)

Таблица 3

Влияние природы растворителя на выход целевого аллилсалицилата (65 °С).

Растворитель е Донорное число Выход, %

ДМФА 36,7 26,6 84

диоксан 2,1 14,8 52

ацетон 20,8 17,0 65

толуол 2,4 - 19

время, мин

Рис. 1 Влияние температуры на скорость реакции образования аллилсалицилата Кинетические кривые выходят на плато, так как реакция в данных условиях необратима. Процесс алкилирования СК аллилбромидом подчиняется уравнению псевдопервого порядка.

1.Т, юз

2 9^3 3,1 3.2 3,3 3,4 3£

♦ V

л. ♦

у * -6.1645Х+ 14.512 \ К2 =0,9562 !

"Чу*

\

Рис. 2 Логарифмическая зависимость констант- скоростей

Таблица 4

Кинетические и активационные параметры реакции

Температура, ^С Константа скорости, мин"' Среднеквадратичное отклонение величины

15 0,0007 0,0001

25 0,0022 0,0001

35 0,0060 0,0004

45 0,0086 0,0004

55 0,0126 0,0009

65 0,0205 0,0014

Кинетические и активационные параметры были рассчитаны методом наименьших квадратов: Еа = 51,25 кДж/моль, In А = 14,512, А = 2,0-Ю6.

Энергию активации процесса также рассчитывались по формуле: RT,T2ln^-

Еа =-—-L, которая составила ¿4,66 кДж/моль. Предэкспоненциальный

Т2 -Т,

множитель определяли по уравнению: In k = In А—-, In А =15,56, А = 5,7-106.

RT

iOln —

Температурный коэффициент находили согласно уравнению: lny = ———JL = 0,68; у

- 1,96. Т.к. у « 2, реакция подчиняется правилу Вант Гоффа.

3. Синтез амидов салициловой кислоты

Осуществлен синтез N-салицилоиламидов путем взаимодействия аминокислоты (или морфолина) с хлорангидридом кислоты в сильнощелочной среде при охлаждении.

XVIII, XIX, XX, XXI

Таблица 5

Физико-химические свойства амидов CK_

он ¿г , ^^ , где R выход, % т °г 1 пл , Rf

[эксп] [лит] [}ксп) (лиг)

XVIII —nh-ch2-cooh 57,7 51,8 165-167 165-166 0,81 (А)

XIX н,с /—СООН 1 —N н 43.8 57,7 175-176 Масло 0,83 (А)

XX —NH-(CH2)3-COOH 22,3 - 112-115 - 0,89 (Ь)

XXI / \ 72,0 165-168 0,74 (Б)

XXII —NH-OH 58,6 58,0 170-172 168-170 0,82 (Б)

XXIII —NH—(СН2)—ОН 79,3 - 54-56 - 0,78 (Б)

Примечание: (А) пропанол-вода=9:1; (Б) - бутанол-1

Низкие выходы амидов СК могут быть объяснены высокой нуклеофилыюстью карбоксилат-ионов, соответствующих аминокислот и феноксид-иона СК, образующихся в щелочной среде и пространственными затруднениями, связанными с

12

наличием фенильной группы (стерические константы фенильной группы Е^-1.66, а метильной Е|! = 0). Кроме того в молекуле метилового эфира р-фенил-у-аминомасляной кислоты имеется фенильный радикал в р-положении.

Рис 3. ЗБ структуры метилового эфира Р-фенил-у-аминомасляной кислоты и ГАМК, соответственно.

Для получения ацилированных оксизамещенных аминов был использован метод, описанный для получения гидроксамовой кислоты.

4. Исследование физиологической активности и острой токсичности производных СК *

Для изучения жаропонижающей активности использована методика, основанная на способности соединений понижать температуру тела у животных (крысы) с гипертермией, вызванной введением пирогенного вещества. Жаропонижающее действие оценивали по уменьшению гипертермической реакции через 2 ч после введения исследуемого вещества. Для уточнения длительности действия новых соединений регистрировали динамику изменения температуры в течение 5 ч. Новые химические соединения, производные СК и АСК, вводили внутрижелудочно через зонд в аналогичных дозах (50 мг/кг).

Скрининг антибактериального действия производных СК проводили в сравнении с 2 % спиртовым раствором СК. Изучаемые соединения были приготовлены также в виде 2 % спиртовых растворов.

* Автор выражает глубокую благодарность д.м.н., заведующему кафедрой фармакологии ВолГМУ, профессору Спасову Александру Алексеевичу, к.б.н., старшему научному сотруднику НИИ Фармакологии Мазановой Людмиле Степановне и д.м.н., профессору кафедры микробиологии ВолГМУ Крамарь Вере Сергеевне за организацию и помощь в проведении биологических исследований.

Антимикробное воздействие изучалось на стандартном штамме Е. coli М-17 (колибактерии) и 20 штаммах золотистого стафилококка методом стандартных дисков. Установлено бактериостатическое действие исследуемых препаратов.

Изучение острой токсичности новых производных CK проводилось на белых мышах массой 20-28 г (22,83+0,46г). Для проведения испытаний субстанции новых веществ растворяли в очищенном растительном масле. Изучаемые вещества вводили внутрижелудочно с помощью зонда, учитывая, что терапевтическая активность изучаемых химических веществ была показана при пероральном пути введения. Вещества исследовали в дозах от 1000 до 5000 мг/кг. Результаты проведенных исследований подвергнуты статистической обработке, достоверность различий оценивали с помощью критерия Стьюдента.

Таким образом:

1. В исследовании на крысах показано различие в жаропонижающем действии синтезированных соединений. Установлено, что

1.1 жаропонижающее действие усиливается с увеличением радикала в строении сложноэфирного фрагмента от С2, максимальна для H-C4 (даже по сравнению с АСК), и снова уменьшается при переходе к С5 и C«;

1.2 непредельный аллильный радикал несущественно влияет на активность CK, но в 4 раза усиливает антипиретическое действие АСК;

1.3 глицидиловый фрагмент в молекуле сложного эфира CK также усиливает жаропонижающую активность (выше, чем у АСК);

1.4 фосфорсодержащие эфиры (диалкил-|3-{0-салицилоил)этилфосфо1шты) по своему антипиретическому действию превосходят CK и АСК;

1.5 амид CK - N-салицилоилморфолин - не проявлял жаропонижающей активности.

2. По результатам исследования антибактериального действия на штаммах золотистого стафилококка S.aureus и кишечной палочки E.coli М-17, установлено, что исследованные вещества обладают низким уровнем антибактериального действия. Они лишь задерживают рост бактерий. Наибольшая чувствительность S. aureus выявлена к действию бутилсалицилата и N-салицилошшорфолина. Чувствительность Е. coli М-17 выявлена к действию бутилсалицилата, диметил-[3-(0-

салицилоил)этилфосфонату, аллилацетилсалицилату и К-салицилоилморфолипа. К растворам других соединений и самой СК Е. соН М-17 устойчива. 3. Согласно экспериментальным исследованиям острой токсичности, исследованные вещества, при внутрижелудочном введении мышам, можно отнести к классам умеренно и малотоксичных соединений;

3.1 Установлено, что с увеличением длины радикала в алифатическом эфире СК токсичность возрастает. Наличие ацетильной группы в молекуле аллилацетилсалицилата повышает активность, но вместе с этим увеличивает токсичность;

3.2 Во всех случаях величина острой токсичности (по сравнению с токсичностью АСК) уменьшалась в несколько раз.

5. Изучение липофильности и липофобиости производных СК

На основе данных по изучению липофильных и липофобных свойств СК, АСК и их синтезированных производных были выявлены закономерности, подтвержденные экспериментом. Универсальными параметрами для описания биологически активных веществ являются коэффициенты их распределения в различных водно-органических системах (1^Р) и константы кислотности (рКа).

Как показано с помощью анализа первоначального набора данных, липофильность бутилового эфира СК должна быть 3,83. Что касается эфиров АСК, то при сравнении липофобности АСК и аллилового эфира АСК, отмечено, эфир АСК более липофобен и как было подтверждено экспериментом, более активен как жаропонижающее соединении с пролонгированным действием.

Таблица 6

Значения констант ионизации, логарифма коэффициента распределения и величины острой токсичности сложных эфиров СК

Соединение рКа ЬоёР ЛД50, мг/кг

расчет Лит. данные

СК 2,96 2,96 2,06 462,21

АСК 3,13 3,50 1,19 245,69

I 3,03 _ * 2,77 1320,00

II 3,32 3,80 3,30 -

III 3,55 3,90 3,83 3846,70

IV 4,09 _ * 3,64 -

V 3,56 _ * 4,36 1520,0

Продолжение таблицы 6

Соединение рКа ЬоёР ЛД50, мг/кг

расчет Лит. данные

VI 4,01 _ * 4,89 756,0

VII 2,56 _ * 3,06 2679,29

VIII 3,24 _ * 1,05 2744,61

IX 1,75 _ * 1,55 2296,82

X 2,93 _ * 2,61 2016,23

XI 3,14 _ * 3,31 1990,32

XII 3,10 _ * 2,30 2679,29

XVII 1,21 _ * 0,75 -

XXI _ * -од >5000

- * данные отсутствуют

Установлено, что при сравнении величин рКа, и величины ЛД50

наблюдается прямая зависимость между липофильностью и токсичностью соединений: при увеличении и уменьшении величины константы диссоциации (Ка) токсичность резко возрастает. Таким образом, оптимальными значениями этих трех параметров среди алкильных эфиров СК обладает бутилсалицилат. Аллиловый эфир АСК имеет близкое значение рКа с АСК, однако коэффициент распределения Ьо£Р у аллилового эфира АСК выше, что свидетельствует о более высокой липофильности, по сравнении с АСК. Таким образом, аллиловый эфир АСК обладает большей способностью проникать через мембраны клеток и большим временем удерживания, а, следовательно, и пролонгированным действием при низкой токсичности. Фосфорсодержащие эфиры СК также липофильны, что связано с наличием фосфонатной группы, что делает их схожими с компонентами фосфолипидного слоя. При удлинении алкильной группы фосфонатной части молекулы, возрастает липофильность, но также закономерно увеличивается токсичность.

Выводы

1. Синтезировано и охарактеризовано 17 эфиров и 6 амидов салициловой кислоты.

2. Изучена кинетика алкилирования калиевой соли салициловой кислоты аллилбромидом и предложен механизм реакции алкилирования, который

соответствует реакции, протекающей по механизму нуклеофильного замещения. Найдены кинетические параметры, которые соответствуют реакции псевдопервого порядка в условиях большого избытка аллилбромида (Е, = 51,25 кДж/моль, In А =14,512, А = 2,0-106).

3. Исследование влияния растворителя на выход целевых продуктов алкилировання ' показало, что увеличение диэлектрической проницаемости и донорного числа растворителя позволяет повысить выход на 20 % и сократить продолжительность реакции до 1,5 часов. Среди изученных растворителей наиболее эффективным является Ы,К-диметилформамид.

4. Рассчитаны константы, характеризующие липофильность и липофобность синтезированных производных салициловой кислоты и впервые на основе величин LogP, рКа и ЛД50 выявлена корреляция между структурой - биологической активностью - острой токсичностью в ряду эфиров и амидов салициловой кислоты. Среди алкиловых эфиров наибольшей жаропонижающей активностью обладают аллилацетилсалицилат и бутилсалицилат. Наличие аллилового фрагмента позволило повысить жаропонижающую активность АСК в 3 раза и пролонгированность действия в 2,5 раза. Фосфорсодержащие эфиры СК характеризуются величинами LogP более низкими, а при увеличении радикала алкоксигруппы фосфонатной части молекулы закономерно увеличивается токсичность. Амиды салициловой кислоты, в частности N-салицилоилморфолин, имеющие отрицательные значения LogP, не проявляют жаропонижающей активности, но обладают выраженным антимикробным действием.

5. Экспериментально установлено, что среди соединений, имеющих выраженную биологическую активность с пролонгированным действием по сравнению с аспирином, жаропонижающее действие возрастает в ряду аллилсалицилат, диметил-р-(0-салицилоил)этилфосфонат, бутилсалицилат, аллилацетилсалицилат, что позволит в дальнейшем осуществлять целенаправленный синтез соединений, обладающих жаропонижающей активностью.

Основные положения диссертации были опубликованы в:

1. Лисина, С. В. Синтез фосфорилированных производных салициловой кислоты как потенциальных лекарственных препаратов / С. В. Лисина // Материалы 61-ой итоговой научной конференции студентов и молодых ученых ВолГМУ, 21-25 апреля 2003 г. - Волгоград, 2003. - С. 175-176.

2. Брель, А.К. Синтез фосфорорганических биологически-активных соединений как потенциальных лекарственных препаратов / А. К. Брель, Е. А. Клочкова, С. В. Лисина // Сборник научных трудов. - Пятигорск, 2004. - Вып 59. - С. 325.

3. Лисина, С. В. Экспериментальное исследование жаропонижающей активности новых производных салициловой и ацетилсалициловой кислот / С. В. Лисина, Д. Ю. Нефедов // Научно-практическая конференция ВолГМУ «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины», 25-28 апреля 2006 г. -Волгоград, 2006.-С. 31.

4. Лисина, С. В. Синтез и фармакологическая активность новых производных салициловой кислоты и аспирина как потенциальных лекарственных препаратов/ А. К. Брель, С. В. Лисина // Успехи современного естествознания. - 2006. - №11. -С. 95-96.

5. Синтез и исследование жаропонижающей активности новых жирорастворимых салицилатов/А. К. Брель, А. А. Спасов, Л. С. Мазанова, С. В. Лисина // Психофармакология и биологическая наркология. - 2007. - Т. 7, ч. 1. - С. 1621.

6. Синтез и исследование жаропонижающей активности аллиловых эфиров салициловой кислоты и ее производных/ А. К. Брель, А. А. Спасов, Л. С. Мазанова, С. В. Лисина // XIV Международная специализированная выставка «Аптека-2007»:тезисы докладов. - Москва, 2007. - С. 125-127.

7. Синтез и исследование фармакологической активности производных салициловой кислоты/ С. В. Лисина // XII Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области, 13-16 ноября 2007 г. - Волгоград, 2007. - С. 23-24.

8. Исследования жаропонижающей активности новых производных салициловой кислоты / С. В. Лисина, А. К. Брель, Л. С. Мазанова, А. А. Спасов // Вестник ВолГМУ. -2007. - № 2. - С. 66-69.

9. Сравнительный анализ «структура-жаропонижающая активность» новых производных кислоты салициловой /С. В. Лисина, А. К. Брель, А. А. Спасов, Л. С.

Мазанова// Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Сборник научных трудов.- Пятигорск, 2008. - Вып. 63. - С. 445-447.

10. Брель, А. К. Противомикробная активность производных салициловой кислоты/А. К. Брель, В. С. Крамарь, С. В. Лисина//Успехи современного естествознания. -2008.-№5.-С. 80.

11. Синтез и жаропонижающая активность новых производных салициловой кислоты/ С. В. Лисина, А. К. Брель, А. А. Спасов, Л. С. Мазанова // Хим.-фарм. журнал. -2008. - Т. 42, № 10. - С. 27-29.

Подписано в печать У2.03.2009 г. Заказ № . Тираж 100 экз. Печ. л. 1,0 Формат 60 х 84 1/16. Бумага офсетная. Печать офсетная.

Типография ИУНЛ Волгоградского государственного технического университета. 400131, г. Волгоград, ул. Советская, 35

Введение.

Глава 1. Синтез производных салициловой кислоты (литературный обзор).

1.1 Общие методы получения простых и сложных эфиров салициловой кислоты.

1.2 Общие методы получения амидов салициловой кислоты.

1.3 Влияние изменений в строении производных салициловой кислоты на их активность.

Актуальность темы. Химия нестероидных противовоспалительных средств (НПВС) является одной из динамически развивающихся отраслей химической науки, что обусловлено практической значимостью этих соединений. НПВС представляют собой обширную и разнообразную по химическому строению группу лекарственных средств, широко применяющихся в клинической практике [1]. Большинство препаратов группы НПВС (в том числе и производные о-оксибензойной кислоты, известной как салициловая кислота — СК), относятся по современной терминологии к "кислотным" противовоспалительным средствам [1]. Им присущи и сходные побочные эффекты: повреждающее действие на слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта, нарушение функции почек и некоторые другие. Производные СК (салицилаты) вошли в клиническую практику с конца XIX века и повсеместно применяются до настоящего времени. Такие производные СК как ацетилсалициловая кислота (АСК, аспирин), салицилат натрия, салициламид (САМ), метилсалицилат используются в медицине в качестве анальгетиков (болеутоляющее), антипиретиков (жаропонижающее) и антиагрегантов (антитромботическое) [1, 2]. По последним данным производные СК можно рассматривать как биорегуляторы, которые синтезируются самим организмом и выполняют защитные функции. И это позволяет переосмыслить роль СК в патофизиологии человека и животных [3].

В связи с этим, актуальной задачей является разработка новых и усовершенствование известных путей синтеза производных СК, а также целенаправленный поиск эффективных терапевтических агентов на основе СК, отличающихся повышенной биологической активностью в сочетании с низкой токсичностью и менее выраженным побочным действием.

Цель работы состоит в разработке улучшенных способов синтеза, исследовании биологической активности производных СК, включающих амиды, сложные и простые эфиры СК, и выявлении взаимосвязей структуры, различных видов биологической активности и острой токсичности полученных соединений.

Достижение поставленной цели предусматривало решение следующих задач:

1. Исследовать пути синтеза эфиров СК и АСК и подобрать оптимальные условия их получения.

2. Изучить кинетику синтеза сложных эфиров алкилированием соли СК соответствующими алкилгалогенидами. Определить кинетические параметры реакции.

3. Исследовать условия и пути синтеза амидов СК с использованием в качестве амидирующих агентов гидроксиламина, у-оксипропиламина, морфолина, аминокислот.

4. Изучить липофильности и липофобности полученных соединений.

5. Экспериментально изучить биологическую активность синтезированных соединений, включающую жаропонижающую активность, антибактериальное действие и острую токсичность. Научная новизна. Впервые получены фосфорсодержащие сложные эфиры салициловой кислоты, а также амиды на основе различных амидирующих агентов (таких как аминокислоты, аминоспирты и морфолин), синтезированы и вновь установлены физико-химические константы ранее полученных амидов и эфиров салициловой кислоты. Изучена кинетика и установлены кинетические параметры реакции алкилирования соли салициловой кислоты аллилбромидом. Установлено, что для проведения данной реакции наиболее эффективным является Ы,Ы-диметилформамид.

Впервые рассчитаны константы Ьо§Р и рКа, характеризующие липофильность и липофобность веществ, позволяющие использовать их для прогноза взаимосвязи «строение - жаропонижающая активность - острая токсичность» в ряду синтезированных производных. Экспериментально установлено, что жаропонижающая и антибактериальная активности, а также острая токсичность (ЛД50) синтезированных производных коррелируют с рассчитанными константами. Найдены соединения, имеющие более выраженную жаропонижающую активность с пролонгированным действием по сравнению с аспирином.

Практическая значимость работы. Синтезировано и охарактеризовано 17 эфиров и 6 амидов СК.

Разработаны улучшенные способы получения эфиров СК и АСК этерификацией и алкилированием их солей алкилгалогенидом, являющихся потенциальными высокоэффективными жаропонижающими средствами, позволяющие получать целевые соединения с высоким выходом и высокой чистотой.

Предложен метод получения !Ч-салицилоилпроизводных ГАМК и метилового эфира р-фенил-у-аминомасляной кислоты.

Экспериментальное исследование жаропонижающей, противомикробной активности синтезированных производных выявило высокую биологическую активность некоторых производных в сочетании с низкой токсичностью.

Изучение липофильности и липофобности полученных производных СК и АСК позволило выявить взаимосвязь «структура-активность-токсичность» в ряду полученных соединений. Установлено, что на основе синтезированных веществ целесообразен поиск новых производных СК и АСК, обладающих жаропонижающей, противомикробной и другими видами активностей пролонгированного действия, характеризующихся низкой токсичностью.

Апробация работы. Основные результаты работы докладывались и обсуждались на ежегодных сессиях ВолГМУ 2003-2007 гг, Всероссийской научно-методической конференции «Пути и формы совершенствования фармацевтического образования» (г. Воронеж, 2005 г), на III съезде фармакологов России (г. С.-Петербург, 2007 г), Международной специализированной выставке «Аптека-2007» (г. Москва, 2007 г ), III научной международной конференции «Современные проблемы науки и образования» (г. Москва, 2008 г)

Публикация результатов. Результаты проведенных исследований опубликованы в 11 работах, из них 5 статей (из которых 1 статья в издании, рекомендованном ВАК по химическим дисциплинам и 1 статья — по биологическим наукам и медицине), тезисы 6 научных докладов, получен приоритет на 1 патент.

Объем и структура работы. Диссертационная работа включает введение, 3 главы, выводы и список использованной литературы. Работа изложена на 112 страницах машинописного текста, содержит 12 таблиц и 25 рисунков и 116 литературных ссылок.

Выводы

1. Синтезировано и охарактеризовано 17 эфиров и 6 амидов салициловой кислоты.

2. Изучена кинетика алкилирования калиевой соли салициловой кислоты аллилбромидом и предложен механизм реакции алкилирования, который соответствует реакции, протекающей по механизму нуклеофильного замещения. Найдены кинетические параметры, которые соответствуют реакции псевдопервого порядка в условиях большого избытка аллилбромида(Еа =51,25 кДж/моль, 1пА= 14,512, А = 2,0-106).

3. Исследование влияния природы растворителя на выход целевых продуктов алкилирования показало, что увеличение диэлектрической проницаемости и донорного числа растворителя позволяет повысить выход на 20 % и сократить продолжительность реакции до 1,5 часов. Среди изученных растворителей наиболее эффективным является N,14-диметилформамид.

4. Рассчитаны константы, характеризующие липофильность и липофобность синтезированных производных салициловой кислоты и впервые на основе величин рКа и ЛД5о выявлена корреляция между структурой -биологической активностью — острой токсичностью в ряду эфиров и амидов салициловой кислоты. Среди алкиловых эфиров наибольшей жаропонижающей активностью обладают аллилацетилсалицилат и бутилсалицилат. Наличие аллилового фрагмента позволило повысить жаропонижающую активность АСК в 3 раза и пролонгированность действия в 2,5 раза. Фосфорсодержащие эфиры СК характеризуются величинами более низкими, а при увеличении радикала алкоксигруппы фосфонатной части молекулы закономерно увеличивается токсичность. Амиды салициловой кислоты, в частности Н-салицилоилморфолин, имеющие отрицательные значения не проявляют жаропонижающей активности, но обладают выраженным антимикробным действием.

5. Экспериментально установлено, что среди соединений, имеющих выраженную биологическую активность с пролонгированным действием по сравнению с аспирином, жаропонижающее действие возрастает в ряду глицидилсалицилат, диметил — (3 — (О-салицилоил) этилфосфонат, бутилсалицилат, аллилацетилсалицилат, что позволит в дальнейшем осуществлять целенаправленный синтез соединений, обладающих жаропонижающей активностью.

1. Алехин, Е.К. Аспирин: новая жизнь старого лекарства / Е.К. Алехин// Соросовский образовательный журнал — 1999 — №7.— С. 85-90.

2. Насонов, Е. JL Эффективность и переносимость нестероидного противовоспалительного препарата. Нимесулид: новые данные / Е. JI. Насонов// Российский медицинский журнал.— 2001.— Т. 9, № 15 — С. 33-36.

3. Salicylic Acid sans Aspirin in Animals and Man: Persistence in Fasting and Biosynthesis from Benzoic Acid // J/ R. Paterson et al/. // J. Agric. Food Chem-2008.- v.56, № 24.- P. 11648-11652.

4. Сайке, П. Механизмы реакций в органической химии/ П. Сайке М.: Химия, 1977.-320 с.

5. Kagan, F. Reactions in the salicylic acid series. A new rearrangement of acetylsalicylic acid derivatives/ F.Kagan, R. D. Birfenmeyer/ J. Am. Chem. Soc. — 1959.-v. 81, № 8.-P. 1986-1991.

6. Беккер, Г. Органикум. Практикум по органической химии. В 2 т., Т. 2./Г. Беккер.- М.Мир, 1979.-448 с.

7. Титце, JL Препаративная органическая химия/ JI. Титце, Т. Айхер. М.: Мир, 1999.-704 с.

8. Пат. US5910511, A01N 37/10. Method of treating an aspirin-treatable condition using salicylic acid derivatives/Guttag A. — 1999.

9. Получение алкиловых эфиров акриловой и метакриловой кислот методом этерификации и переэтерификации. Обзорная информация / сост. А.И. Серегина. М.: Научно-исследовательский институт технико-экономических исследований, 1978.— 32 с.

10. Гелыптейн, P.M. Алкильные эфиры СК. Общий метод их получения. / P.M. Гелыптейн, Н.Ф. Кривошеева// Методы получения химических реактивов и препаратов, Вып 13- М.: Всесоюзный НИИ химических реактивов и особо чистых химических веществ, 1965—С.5.

11. Пат. US4652401, А61К 7/46. Salicylic esters as perfumes./ Schaper U., Streschnak В., Bloesl S., Sommer W.; Henkel. Kommanditgesellschaft auf Aktien, Fed. Rep. of Germany-1987.

12. Пат. US2397498. Esterification of salicylic acid/ R. L. May; Sinclair Refining Company, New York. -1946.

13. Пат. US3941878, A61K 31/165, A61K 31/615. Medicaments having psychotropic properties./М. A. Stenger, H.Cousse, M. G. Mouzin; Pierre Fabre S.A., France.- 1976.

14. Sivakumar, S. Homogeneous system for the synthesis of benzyl salicylate/ S. Sivakumar, V.G. Pangarkar, S.B. Sawant // Org. proc. res. dev.- 2002. v. 6(2).— P. 149-151.

15. Esters from the reactions of alkyl halides and salts of carboxylic acids/ H.E. Hennis et al.// I&EC Product research and development. 1967. - v. 6, № 3. - P. 193-195 c.

16. Nielsen, N. M. Evaluation of glycolamide esters and various other esters of aspirin as true aspirin prodrug/ N. M. Nielsen, H. Bundgaard// J. Med. Chem.-1989.-v. 32.-P. 727-734.

17. Changing patient characteristics and the effect on mortality in endocarditis. / С. H. Cabell et al. // Arch. Intern. Med. 2002. - №162. - P. 90-94.

18. Пат. US4891228, C01B 31/26. Medicated cleansing pads./ L. A. Thaman, J. P. S. Nogueira, T. Petraia; Richardson-Vicks Inc., Wilton, Conn. 1990.

19. Пат. US5262407, A61K 31/60. Use of salicylic derivatives for the treatment of skin aging. / J. L. Leveque, D. S. Leger; L'Oreal, Paris, France. — 1993.

20. Пат. US5891451, А61К 7/48. Skin treatment with salicylic acid esters. / A. A. Guerrero, P. L. Dorogi, Т. C. Klepacky; Elizabeth Arden Company, Division of Conopco, Inc., New York, N. Y. 1999.

21. Лекарственные средства: в 2 т./ М.Д. Машковский — 14-е изд, перераб, испр. и доп.—М.: Новая волна, 2000.-Т.1,2.

22. Пат. US4800196, A01N 37/36. Phenyl salicylate and benzyl salicylate as acaricidal agents./Nomura J., Aoki S., Nishimura A.; Earth Chemical Co., Ltd., Japan. 1989.

23. Herrmann, M. Salicylic acid: an old dog, new tricks, and staphylococcal disease/ M. Herrmann// The Journal of clinical investigation-2003 v. 112, № 2-P. 149-151.

24. Owens, M.R. The inhibitory effect of sodium salicylate on synthesis of factor VII by the perfused rat liver/ M. R. Owens, C.D.Cimino// Thromb. Res — 1980.-№18.-P. 839.

25. Paris, G.Y. Glycerides as prodrugs. 1. Synthesis and anti-inflammatory activity of l,3-bis(alkanoyl)-2-(0-acetylsalicyloyl)glycerides (Aspirin triglycerides)/ Paris G.Y., Garmaise D.L., Cimon D.G. // J. Med. Chem.- 1979.- v. 22, №6.- P. 683-687.

26. Khamnei, S. Neighboring group catalysis in the design of nucleotide prodrugs/ S.Khamnei, P. F.Torrence // J. Med. Chem- 1996,-v. 39 , № 20. -P.4109-4115.

27. Пат. US644077. Acetyl salicylic acid./ Hoffman F.; Bayer Co. 1900.

28. Pfaffenrath, V. Analgesics and NSAIDs in the treatment of the acute migraine attack/ V.Pfaffenrath, S.Scherzer // Cephalalgia- 1995. №15.-P. 14-20.

29. Adding heparin to aspirin reduces the incidence of myocardial infarction and death in patients with unstable angina. A meta-analysis/ Oler A. et al.// JAMA.-1996.-№276.-P. 811—815.

30. Roth, G.J. Aspirin, platelets, and thrombosis: theory and practice/ G.J. Roth, D.C. Calverley//Blood.- 1994.-v. 83, № 4.-P. 885-898.

31. Antitumor-active cobalt-alkyne complexes derived from acetylsalicylic acid: studies on the mode of drug action/ I. Ott et ah. // J. Med. Chem 2005 - v. 48, № 2,- P. 622-629.

32. Prevention of fat-induced insulin resistance by salicylate/ J. K. Kim et al.//The Journal of Clinical Investigation. 2001.- v. 108, № 3.- P. 437-446.

33. A prospective study of fibrinogen and risk of myocardial infarction in the Physicians' Health Study/ J. Ma et ah.// J. Am. Coll. Cardiol.- 1999.- № 33. -P. 1347-1352.

34. Остроумова, О.Д. Возможности применения Кардиомагнила у пациентов с сахарным диабетом/ О.Д. Остроумова // Рус. Мед. Журнал. -2004.- т. 12, № 5. С.34-37.

35. Cederlund, Н. Antibacterial activities of non-antibiotic drugs/ H. Cederlund, P.A. Mardh // J. Antimicrob. Chemother. 1993.- № 32.- P. 355-365.

36. Cederlund, H. Antibacterial activities of N-acetylcysteine and some nonsteroidal anti-inflammatory drugs/ H. Cederlund, P.A.Mardh// J. Antimicrob. Chemother.- 1993.- № 32. P. 903-904.

37. Burns, J. L. Salicylate-inducible antibiotic resistance in Pseudomonas cepasia because of decreased permeability/ J. L. Burns, D. K. Clark // Antimicrob. Agent Chemother.- 1989.-№ 33.- P. 136-141.

38. Effect of salicylate and related compounds on fusidic acid minimal inhibitory concentrations in Staphylococcus aureus/ С. T. D. Price et ah. // J. Antimicrob. Chemother 1999.- № 44 - P. 57-64.

39. Пат. US5665766, A61K 31/34, C07D 493/00. Ester of an organic nitrate and a salicylate./ W. Byrne, A. Rynne; Cal International Limited, Dublin, Ireland. -1997.

40. Пат. US4631293, С07С 69/74, А6IK 31/235. (-)Campholenic acid ester of salicylic acid and pharmaceutical^ acceptable salts thereof having mucosecretolytic, analgesic, and antipyretic activity. / С. C. Mora; Camillo Corvi S.p.A., Italy-1986.

41. Пат. US20020065254A1, A61K 31/603, A61K 31/12. Ibuprofen-aspirin and hydroxymethylacylfiilvene analogs./ A. Guttag 2002.

42. Ивашкин, В.Т. Актуальные вопросы безопасности ненаркотических анальгетиков/ В.Т. Ивашкин, В.П. Фисенко, А.А. Шептулин//Клиническая фармакология и терапия — 1999. №5.— С. 25-29.

43. Пат. US4600531, С07К 13/00, А61К 35/14. Production of alpha-alpha cross-linked hemoglobins in high yield./ J. A.Walder; University of Iowa Research Foundation, Iowa-1986.

44. Пат. US4598064, C07K 13/00, A61K 35/14. Production of alpha-alpha cross-linked hemoglobins./ J. A. Walder; University of Iowa Research Foundation, Iowa-1986.

45. Пат. US5041615, C07C 67/14, C07D 213/55. Preparation of bis(salicyl) diesters./ T. T.Hai, D. J.Nelson, A.Srnak; Baxter International Inc., Deerfield-1991.

46. Diaspirins that cross-link beta chains of hemoglobin: bis(3,5-dibromosalicyl)succinate and bis(3,5-dibromosalicyl)fiimarate/ J. A. Walder et al. //Biochem.- 1979.-№18.-P. 2816.

47. Hardmanand, J.G. The Pharmacological Basis of Therapeutics/ J.G. Hardmanand, L.E. Limbird.- 10 ed.-NewYork, McGrawHill.- 2001.- 652 p.

48. Пат. US6593315B2, A01N 37/36, C07C 69/76. Salicylic acid derivatives, processes for their preparation, compositions comprising them, and their use./ A. Gypser et al.; BASF Aktiengesellschaft 2003.

49. Синтезы органических препаратов. Сб.4/ под ред. Б. А. Казанского-М.: Иностранная литература, 1953 660 с.

50. Рубцов, М.В. Синтетические химико-фармацевтические препараты. Справочник/ М.В. Рубцов, А.Г. Бойчиков.-М.: Медицина, 1971.-330 с.

51. Пат. US4629812, С07С 103/20, Method for producing N,N'-bis-salicyloylhydrazine./ W.Von Gentzkow; Siemens Aktiengesellschaft, Fed. Rep. of Germany 1986.

52. Пат. GB1398360, C07C 109/06. Process for the manufacture of acylhydrazine./ T.Sharman; Ciba-Geigy AG., Switzerland 1975.

53. Пат. US4446266, C08K 5/25, A61K 61/535. N,N'-bis-salicyloylhydrazine as a metal deactivator./ W.Von Gentzkow; Imperial Chemical Industries Limited, England.- 1984.

54. Пат. US3917617, C07D 295/16. l-2,6-dihydroxy-4-hydrocarbylbenzoyl.polymethyleneimines and derivatives./ R. K. Razdan, H. G. Pars; Sharps Associates, Cambridge 1975.

55. Пат. US4287191, A01N 37/36, C07C 101/74, C07C 119/02. Novel salicylanilides and microbiocidal compositions and uses thereof./ R. A. Coburn, R. T. Evans, R. J. Genco, A. Batista; The Research Foundation of State University of New York, N.Y.-1981.

56. Пат. US4310682, C07C 103/76. Halo-salicylanilide./Ozawa I., Ito Т., Hamada Y., Takeuchi I. 1982.

57. Пат. US6566394B1, A61K 31/336, A61K 31/609, C07D 303/06, C07D 303/36, C07D 237/38. Salicylamide derivatives. / Takeuchi Т., Umerawa K., To-E S., Matsumoto N., Yoshioka Т., Agata N., Hirano S., Isshiki K.; Mercian Corporation, Japan. 2003.

58. Пат. US6720435B2, C07D 301/12, C07D 301/19. Oxirane production method. / D. Balthasart, M. Strebelle, J-P. Catinat; Solvay, Brussels (BE). 2004.

59. Брель, А. К. Синтез и биологическая активность ацетатов 2(3)-диалкилфосфоналканолов// А.К. Брель, И.Н. Тюренков, Г. В. Стрельцова// Хим.-Фарм. Журнал. -1988. т. 2, № 12. -С. 167-169.

60. Пат. US2810718. Basic salicylamides./ В. W. Horrom, L. R., U.S. Swett; Abbott Laboratories, North Chicago.- 1957.

61. Пат. US2879290. 3-N,N,-di-(lower alkyl)-carbamyl.-2-acyloxybiphenyl compounds./ B. D. Tiffany; Upjohn Company, Michigan. 1959.

62. Пат. US4010266, C07D 265/ЗОВ. Phenylvinyl morpholine compounds./ J. McLoughlin, A. J. Guildford; Siemens Aktiengesellschaft, Fed. Rep. of Germany. 1977.

63. Результаты изучения противоишемических свойств нового производного ГАМК соединения РГПУ-189 и фенибута в сравнительном аспекте/ JI.E. Бородкина и др.//Современные наукоемкие технологии. -Волгоград, 2007. № 5. - С.64.

64. Синтез и противовоспалительная активность некоторых амидов салициловой кислоты производных а-аминокислот / Диванян Н.М и др. // Хим.-фарм.журнал. - 1978. - т XII, № 9. - С. 45-48

65. Пат. US6399798B2, С07С 233/65, C07D 262/26. Method of preparing alkylated salicylamides./ D.Gschneidner, J. N.Bernadino, W. E. Bay; Emisphere Technologies, Inc., NY.- 2002.

66. Химические свойства структурных компонентов сополимеров Nвинилпирролидона и N-винил-у-аминомасляной кислоты/А.И. Сливкин идр. // Вестник ВГУ, серия: Химия. Биология. Фармация. 2003 - № 2. -С.228-234.

67. Дайсон, Г. Химия синтетических лекарственных веществ/ Г. Дайсон, Мей П. М.: Мир, 1964. -240 с.

68. Пат. US5852047, А61К 31/40, C07D 207/08, C07D 207/12. Pharmaceutical product comprising a salicylate of an esterifiable ACE-inhibitor. / W. Byrne, A. Rynne; Cal International Limited, Dublin, Ireland. 1998.

69. Пат. US4140769, C07C 103/76. 3-Substituted salicylamides./ R. N. Schut, H. E. Hartzler, E. O. Snoke, J. W. Van Dyke; Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind.- 1979.

70. Пат. US4987133, A61K 31/495. Salicylic acid derivatives./ H. Kurmeier, W. Weber, H. Radunz, H. Schliep; Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung, Fed. Rep. of Germany. 1991.

71. Джонстон, Р. Руководство по масс-спектрометрии для химиков-органиков/ Р. Джонстон; под ред. Р. Г. Костяновского. М.: Мир, 1975. -238 с.

72. Юделевич, В.А. Фосфорорганические лекарственные препараты / В.А. Юделевич, Б.И. Ионин С-Пб.: Теза, 1995. - 86 с.

73. Грандберг, И. И. Органическая химия/ И. И. Грандберг. — М.: Дрофа, 2001.-352 с.

74. Физер, Л. Реагенты для органического синтеза. В 5 т. Т. IV. М.: Мир, 1971.-235 с.

75. Общая органическая химия / под ред. Д. Бартона и В.Д.Оллиса. М.: Химия, 1982.-400 с.

76. Терней, А. Современная органическая химия. В 3 т. Т. 1 / А. Терней. — М.: Мир, 1981.-680 с.

77. Свойства органических соединений. Справочник/ под ред. А. А. Потехина. Л.: Химия, 1984. - 520 с.

78. Пат. US6465399, С10М 141/02. Lubricant composition./ N. Koishikawa, Y. Tatsumi; Asahi Denka Koygo Kabushiki Kaisha, Tokyo (JP). 2002.

79. Денисов, E. Т. Кинетика гомогенных химических реакций/ Е. Т. Денисов. М.: Высшая школа,1988. - 391 с.

80. Энтелис, С. Г. Кинетика реакций в жидкой фазе. Количественный учет влияния среды/ С. Г. Энтелис, Р. П. Тигер. М.: Химия, 1973. - 416 с.

81. Pfeffer, Р. Е. Esterification by alkylation of carboxylic salts. Influence of steric factors and other parameters on reaction rates/ P. E. Pfeffer, L. S. Silbert// J.Org.Chem. 1976. - v. 41, № 8. - P. 1373-1379.

82. Голдберг, Ю. Ш. Избранные главы межфазного катализа/ Ю. Ш. Голдберг. Рига, Зинатне, 1989. — 553 с.

83. Гамет, Л. Основы физической органической химии / Л. Гамет. М.: Мир, 1972.-534 с.

84. Химическая кинетика / В. И. Глазов и др.. Волгоград: РПК «Политехник», 2007. — 52 с.

85. Грандберг, И. И. Практические работы и семинарские работы по органической химии/ И. И. Грандберг. — М.: Дрофа, 2001. — 352 с.

86. Палм, В.А. Основы количественной теории органических соединений/ В.А. Палм. Л.: Химия, 1977. - 360с.

87. Тринус, Ф. П. Нестероидные противовоспалительные средства / Ф.П. Тринус, Н. А. Мохорт, Б. М. Клебанов. Киев: Здоров'я, 1975 205 с.

88. Синтез и жаропонижающая активность новых производных салициловой кислоты/ С. В. Лисина и др. // Хим.-фарм. журнал. 2008. - Т. 42, № Ю.-С. 27-29.

89. Синтез и исследование жаропонижающей активности новых жирорастворимых салицилатов / С. В. Лисина и др. // Психофармакология и биологическая наркология. — 2007. — Т. 7, ч.1. — С. 1621.

90. Брель, А. К. Противомикробная активность производных салициловой кислоты / А. К. Брель, В. С. Крамарь, С. В. Лисина // Успехи современного естествознания. 2008. - №5. - С. 80.

91. Саноцкий, И. В. Критерий вредности в гигиене и токсикологии при оценке опасности химических соединений/ И.В. Саноцкий, И.П. Уланова. — М.: Медицина, 1975.-328 с.

92. Shalmashi, A. Solubility of Salicylic acid in water, ethanol, carbon tetrachloride, ethyl acetate, and xylene / A. Shalmashi, A. Eliassi// J. Chem. Eng. Data. 2008. -v. 53. - P. 199-200.

93. Вознесенский, А. Г. Клиническая фармакология нестероидных противовоспалительных средств: методическое пособие / А. Г. Вознесенский/ ВолГМУ. Волгоград, 1999. - 89 с.

94. Гордон, А. Спутник химика / А. Гордон, Р. Форд. — М.: Мир, 1975. -544 с.

95. Токсикокинетические особенности интоксикации норборнаном у крыс./ В.Д. Гладких и др. // Российский биомедицинский журнал. —2006. —т. 5. — С. 111-120.

96. Sangster, J. Octanol-Water partition coefficients: fimdamentals and physical chemistiy. Wiley Sériés in Solution Chemistiy / Sangster, J. — Chichester: John Wiley & Sons Ltd., 1997. P. 178.

97. Брель, A. К. Синтез фосфорилированных алканолов / A.K. Брель, A. И. Рахимов, Л. M. Филимонова// Журн. Общ. Хим. 1980. - т. 50 (CXII). -С. 56.

98. Рахимов, А. И. Синтез фосфорорганических соединений/ А. И. Рахимов. М., Наука, 1985. - 248 с.

99. Пат. СССР 707922, C07F9/40. Способ получения у-диалкилфосфонпропанолов./ А. К. Брель, Л. М. Филимонова, А. И. Рахимов, Н. А. Брель, Ф. В. Мудрый; Волгоградский Политехнический Институт. — 1980.

100. Дзимко, В.М. Салицилоилхлорид./ В.М. Дзимко, И.С. Маркович // Химические реактивы и препараты. Вып 1. / Группа научно-технической информации. -М., i960 С. 27.

101. Синтезы а, Р-непредельных соединений. Методические указания к лабораторным занятиям. / Чувашский государственный университет им. И. Н. Ульянова, сост. Е. О. Насакина, П. М. Лукин, А. Н., Лыщиков. -Чебоксары, 1985. -50 с.

102. Семенова, Н. Ф. Салицилгидроксамовая кислота/ Н. Ф. Семенова, Н. И. Резник, И. В. Хвостов // Методы получения химических реактивов и препаратов, Вып 9 М.: Всесоюзный НИИ химических реактивов и особо чистых химических веществ, 1964- С. 24-25.

103. Шварц, Г. Я. Методические указания по изучению новых нестероидных противовоспалительных препаратов. Руководство поэкспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ/ Шварц Г. Я., Сюбаев Р. Д. — М.: Медицина, 2000.— 320 с.

104. Беленький, М. JI. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта/ МЛ. Беленький. Л.: Медгиз, 1963. — 420 с.

105. Пяткин, К. Д. Руководство к практическим работам по медицинской микробиологии/ К. Д. Пяткин, Н. С. Маякова, Н. Д. Трофимова. М.: Медицина, 1969. - 296 с.

106. Manganese-catalyzed epoxidations of alkenes in bicarbonate solutions/ B. S. Lane et al.//J. Am. Chem. Soc. 2002. - v. 124, № 40. - P. 11946-11954.

107. Ester prodrugs of cyclic 1-(<S)- 3-hydroxy-2-(phosphonomethoxy)propyl.-5-azacytosine: synthesis and antiviral activity/M. Krecmerova [et al.] // J. Med. Chem. 2007. -v. 50, № 23. - P. 5765-5772.

108. Kaur, K. Mechanism of inhibition of the class С ^-Lactamase of Enterobacter cloacae P99 by cyclic acyl phosph(on)ates: rescue by return / K. Kaur, M. J. K. Lan, R. F. Pratt/ J. Am. Chem. Soc. 2001. - v. 123, № 43. - P. 10436-10443.

109. Salicylate poisoning / G. Dickinson et al. // Cln. Med. Assoc. J. 1992. -№ 147 (10).-P. 1426-1427.

110. Пурдела, А. Химия органических соединений фосфора / А. Пурдела, Р. Вылчану; под ред. М. И. Кабачника. М.: Химия, 1972. - 752 с.

111. Пат. US4275059, А61К 31/60, А61К 31/61, А61К 31/66, А61К 31/615. Salicylate anti-inflammatory composition./ L. Flora, M. D. Francis. The Procter &GambIe Company, Ohio. 1981.

112. Franz, R. G. Comparisons of pKa and Log P values of some carboxylic and phosphonic acids: synthesys and measurement/ R. G. Franz// AAPS Pharmsci.-2001.-№3 (2). P. 967-990.