Алкалоиды Aconitum septentrionale K., Delphinium alpinum, D. cuneatum и D. elatum L. тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК УФИМСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ

На правах рукописи

Хайритдинова Эльвира Дарвитовна

УДК 547.944/945

Алкалоиды Aconitum septentrionale К., Delphinium alpinum, D. cuneatum и D. elatum L.

02.00.10 - Биоорганическая химия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

УФА-2005

Работа выполнена в Институте органической химии Уфимского научного центра Российской академии наук

Научный руководитель: кандидат химических наук,

доцент

Цырлина Е.М.

Официальные оппоненты: доктор химических наук,

профессор Мифтахов М.С. доктор химических наук, профессор Куковинец О.С.

Ведущая организация: Институт органической химии

им. Н.Д. Зелинского РАН (Москва)

Защита состоится «16» декабря 2005 г. в 14°° часов на заседании диссертационного совета Д 002.004.01 в Институте органической химии УНЦ РАН по адресу: 450054, Башкортостан, г. Уфа, Проспект Октября, 71.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Института органической химии УНЦ РАН.

Автореферат разослан «16» ноября 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор химических наук

Ф.А.Валеев

г и Ш1

теш/

з

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Использование в качестве лекарственных препаратов природных соединений растительного происхождения имеет ряд неоспоримых преимуществ перед синтетическими. Они издавна применяются в народной медицине, обладают высокой физиологической активностью, для их получения используется доступное возобновляемое сырье и более экологически приемлемые способы производства. Природные вещества, чаще всего, оптически-активные, энантиомерно чистые соединения.

В настоящее время около 30% всех препаратов, применяющихся в современной медицине, составляют лекарственные вещества растительного происхождения. В то же время, известно, что даже близкородственные виды растений могут сильно отличаться по природе синтезируемых вторичных метаболитов. К настоящему времени из 750 тысяч видов растений химически исследованы лишь около 7%.

Интерес исследователей к такому классу вторичных метаболитов как дитерпеновые алкалоиды вызван обнаружением у них широкого спектра физиологической активности, такой как противовоспалительная, местноанестезирующая, антиаритмическая, спазмолитическая, противоопухолевая, ганглиоблокирующая и другие.

Наиболее богатыми источниками дитерпеновых алкалоидов являются растения родов Delphinium и Aconitum семейства Ranunculaceae, широко распространенные на всей территории России, в том числе и в Башкортостане. Между тем, научное направление, связанное с выделением и химическим изучением дитерпеновых алкалоидов, в республике ранее не развивалось, и возможности дикорастущей флоры Башкортостана не известны.

Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Института органической химии УНЦ РАН по теме «Растительные биорегуляторы -алкалоиды и липиды некоторых растений, произрастающих в РФ» (per. № 01.20.00 13599), при финансовой поддержке Президента Российской Федерации (программа поддержки научных школ, грант НШ-139.2003.3), Российского фонда фундаментальных исследований (грант № 99-03-33509), Фонда индивидуальной поддержки ведущих ученых и научных школ (грант № 00-15-97325), Государственного контракта № 36 (10002-251Ш-09/118-141/010403-419).

Цель работы. Изучение алкалоидного состава трех видов растений рода Delphinium и технологического маточника суммы алкалоидов корней Aconitum septentrionale К. после отделения из нее лаппаконитина: выделение и разделение алкалоидов, идентификация известных и установление структуры новых соединений.

Научная новизна и практическая значимость. Исследован алкалоидный состав произрастающих на территории Башкортостана растений Delphinium elatum L., Delphinium alpinum и Delphinium cuneatum (доя двух последних впервые), а также образец технологического маточника производства препарата «Аллапинин». Выделены 19 алкалоидов, семь из которых оказались новыми. Установлено строение новых алкалоидов. Проведенные исследования расширяют представление о структурных типах дитерпеновых алкалоидов природного происхождения - четыре нордитерпеновых алкалоида принадлежат к новому ангидроликоктониновому типу, для которого описан лишь один алкалоид, им " рождение.

Предложен способ извлечения дополнительного количества лаппаконитина из технологического маточника.

Апробация работы. Результаты работы доложены на П1 Всероссийском совещании «Лесохимия и органический синтез» (Сыктывкар, 1998 г.), на II и III Всероссийских конференциях «Химия и технология растительных веществ» (Казань, 2002 г., Саратов, 2004 г.), на Молодежных научных школах-конференциях по органической химии (Екатеринбург, 2000 г., Казань, 2005 г.).

Публикапин. По материалам работы опубликованы 5 статей и тезисы 7 докладов на Всероссийских конференциях.

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 151 странице машинописного текста и состоит из введения, трех глав, списка использованной литературы, включающего 155 наименований, и приложения. Работа включает 10 таблиц, 4 схемы и 8 рисунков.

Автор выражает глубокую благодарность акад. Юнусову М.С. за предложенную тему, а также за постоянную помощь и поддержку, без которых выполнение настоящей работы было бы невозможно.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

1. Алкалоиды Delphinium elatum L.

Объектом изучения служили наземная часть и корни Delphinium elatum L. Выделенная из наземной части растения сумма алкалоидов составила 2.4%, а из корней - 2.0% опт веса воздушно-сухого (в/с) сырья. Из наземной части и корней выделены известные алкалоиды делькорин (1-), метилликаконитин (2), 6-дегидроделькорин (3), из наземной части выделен также элазин (4), а из корней -ликоктонин (5). Основным по содержанию в сумме алкалоидов наземной части являлся делькорин (-20% or суммы алкалоидов), в корнях 60% от суммы алкалоидов составлял метилликаконитин. Ранее делькорин был выделен только из семян этого растения, а 6-дегидроделькорин из Delphinium elatum L. выделен впервые.

2. Алкалоиды Delphinium alpinum

Изучался алкалоидный состав наземной части и корней Delphinium alpinum. В доступной нам литературе сведения об алкалоидном составе этого растения отсутствуют.

Сумма алкалоидов наземной части составила 2.3%, корней - 4.0% от веса в/с сырья. Из корней растения выделены известные алкалоиды метилликаконитин (2), который являлся основным по содержанию - 61.8% от суммы алкалоидов, ликоктонин (5), 6-ацетилдельфелин (б) и делаваин (7), а из наземной части -метилликаконитин (2), элазин (4), дельталин (8) и новый, ранее неописанный алкалоид альпинин (9).

2.1. Строение альпиннна (9)

По данным ИК-спектроскопии в молекуле альпинина (9) имеются сложноэфирные группы (1715-1750 см"1). Масс-спектр высокого разрешения дает для 9 молекулярную массу 752.386, что соответствует бругго-формуле C4|H56N20n. Данные ЯМР 'Н и 13С-спектров указывают на присутствие в 9 трех метоксильных групп, N-этильной группы и метилсукцинилантранильного фрагмента.

Масс-спектр 9 характерен для С^-дитерпеновых алкалоидов, а максимальная интенсивность пика иона [М-31]+ позволяет предположить наличие в положении С(1) метоксигруппы. Наблюдаемый в спектре ЯМР 'Н уширенный синглет при 3.88 м.д. свидетельствует о присутствии (3-метоксильной группы при С(6), а три трехпротонных триплета при 0.91, 1.07 и 1.17 м.д. указывают на наличие в молекуле алкалоида трех этильных групп. Первый из этих сигналов принадлежит протонам CHtCHtN группы, о присутствии которой свидетельствуют также сигналы при 14.0 и 51.0 м.д. в спектре ЯМР С.

Учитывая наличие однопротонного триплета при 4.80 м.д. (7^5.ОГц) в спектре ЯМР 'H, а также сигналов при 176.8, 26.2 и 11.6 м.д. в спектре ЯМР 13С (табл.1), можно утверждать, что в положении С(14) находится пропионилоксигруппа.

В спектре ЯМР 'Н четко устанавливаются синглет протона при С(17) (3.80 м.д.), три трехпротонных синглета в области 3.27-3.36 м.д., обусловленных метоксильными группами и дублет метальной группы (1.17 м.д.) сукцинимидного фрагмента.

В спектре ЯМР 13С алкалоида 9 в области 75-90 м.д. наблюдаются четыре сигнала метановых углеродов (С(1), С(6), С(14) и С(16)) и два сигнала четвертичных углеродов (табл.1). Один из этих сигналов (88.4 м.д.) принадлежит С(7)-ОН, другой (77.4 м.д.) может быть отнесен к С(8) атому, содержащему алкоксигруппу. Наличие такой группировки коррелирует с малой интенсивностью пика иона [М-15]+ (11%) в масс-спектре по сравнению с обычно наблюдаемым для С(7)-С(8) диола. Учитывая данные спектра ЯМР 'Н, заместителем при С(8) может быть метокси- или этоксигруппа. Основываясь на литературных аналогиях, мы расположили метоксигруппу в положение С(16), а этоксильную группу - у С(8).

Полное отнесение сигналов в спектрах ЯМР С для 9 было сделано на основании сравнения со спектром известного алкалоида метилликаконитина (2) (табл.1).

Таблица 1

Значения химических сдвигов (5, м.д.) в спектрах ЯМР |3С альпинина (9) и метилликаконитина (2)

6, м.д.___5, м.д.

АТОМ 9 2 Атом 9 2

С(1) 83.9 83.9 Ci-OCHj 55.8 55.7

С(2) 26.0 26.0 С14-ОСН3 58.1

С(3) 32.1 32.0 Ci4-OCOCH2CH3 176.8

С(4) 37.6 37.6 Cu-OCOCHjCH, 26.2

С(5) 43.2 43.2 Cu-OCOCHjfflî 11.6

С(6) 90.7 90.8 CI6-OCH3 55.9 56.3

С(7) 88.4 88.5 Сб-ОСНз 58.2 57.8

С(8) 77.4 77.4 Cg-OÇHi-CHj 64.4

С(9) 50.1 50.3 C8-OCH2-ÇH2 18.9

С(10) 45.7 46.1 c=o 164.1 164.1

С(11) 49 0 49.0 C(l') 127.0 127.1

С(12) 28 2 28 7 C(2') 133.0 133.0

С(13) 41.2 38.0 C(3') 129.4 129.4

С(14) 75.4 83.9 C(4') 133.7 133.6

С(15) 33.8 33.6 C(5-) 131.0 131.0

С(16) 82 2 82.5 C(6-) 1301 130.0

С(17) 64.4 64.5 C(l") 179.8 179.8

С(18) 69.3 69.5 C(2") 35.3 35.3

С(19) 52.3 52.3 C(3") 37.0 37.0

N-CH;-CH, 51.0 50.9 C(4") 175.8 175.8

N-CH2-CH, 14.0 14.0 C(5") 16.1 16.4

3. Алкалоиды корней Delphinium cuneaium

Изучали алкалоидный состав корней Delphinium cuneatum. Сведения об алкалоидном составе этого растения в доступной нам литературе отсутствуют.

Выделенная сумма алкалоидов составила 1.5% от веса в/с сырья. Из суммы алкалоидов выделены метилликаконитин (2) и два новых алкалоида - 16-деметоксиметилликаконитин (10) и 16-деметоксиделаваин (11), а также N,N'-ди(метоксикарбонил)-3,4-диаминотолуол (12).

3.1. Строение 1б-деметоксиметилликаконитина (10)

По данным ИК-спектроскопии в молекуле 10 имеется сложноэфирная группа (1720 см-1), что подтверждается получением аминоспирта 13 при щелочном гидролизе алкалоида. Масс-спектр высокого разрешения дает для 13 молекулярную массу 437.277, C24H39NCV Сравнение молекулярных масс исходного алкалоида ([М]+ 652) и аминоспирта, а также анализ спектральных данных 10 и 13 (ЯМР 'Н, 13С, ИК-, масс-спектры) указывают на то, что этерифицирующей кислотой в 10 является метилсукцинилантраниловая кислота.

Данные ЯМР 'Н, 13С-спектров свидетельствуют о наличии в молекуле 10 и 13 трех метоксильных групп и N-этильной группы, а масс-спектры характерны для Ci9-дитерпеновых алкалоидов. Тот факт, что в масс-спектрах 10 и 13 максимальную интенсивность имеет пик иона [М-31]\ позволяет расположить одну из метоксигрупп в положении С(1). Соотношение интенсивностей пиков ионов [М-15]+:[М-31]+ в масс-

спектрах-10 и 13, содержащих у С(1) метоксильную группу, равное 33:100 характерно для С ] о-дитерпеновых алкалоидов, имеющих С(6ХОСН3)-С(7)(ОН)-С(8)(ОН) группировку. Малая величина КССВ (7=1.6Гц) протона при С(6), а также сигналы при 3.77 м.д. и 3.72 м,д. (для 10 и 13 соответственно) свидетельствуют о присутствии Р-мегоксильной группы. Триплеты при 3.48 м.д. для 10 и 3.50 м.д. для 13 (У=4.2Гц) позволяют расположить третью из имеющихся метоксигрупп в а-ориентации при С(14). Также в спектрах ЯМР 1Н надежно устанавливаются синглеты протонов при С( 17) (3.11 м.д. для 10 и 3.12 м.д. для 13), два дублета диастереотопных протонов при С(19) (2.42 и 2.71 м.д. для 10, 2.43 и 2.68 м.д. для 13), по три трехпротонных синглета в области 3.20-3.40 м.д., обусловленных метоксильными группами, а также в 10 дублет метальной группы (1.48 м.д.) сукцинимидного фрагмента.

В спектре ЯМР 13С в режиме JMODCH алкалоида 10 имеются 8 сигналов от метановых углеродов, 3 сигнала метоксильных групп (56.0, 57.3, 58.5 м.д.) и 11 сигналов метиленовых и четвертичных углеродов основного углеродного скелета, а также сигналы, отвечающие метилсукцинилантранильному остатку и N-этильному фрагменту (51.1 и 14.2 м.д.).

Окончательное установление структуры 10 было сделано на основании сравнения химических сдвигов 10, 13 в спектрах ЯМР ,3С с известными соединениями метилликаконитином (2) (табл.1), кардиопеталидином (14) и виресценином (15) (табл.2), а также расчетами по аддитивным схемам с использованием а, (3 и у- инкрементов заместителей.

Сравнение спектров ЯМР ВС алкалоида 10 и метилликаконитина (2) показало, что химические сдвиги сигналов колец А и В отличаются менее, чем на 1 м.д., значительные изменения химических сдвигов наблюдаются для сигналов, обусловленных С(13), С(15) и С(16). Данные ЯМР 13С-спектра указывают на наличие в 10, по сравнению с метилликаконитином, дополнительной метиленовой группы и отсутствие одной метоксильной. Характер изменений химических сдвигов С(13), С(15) и С(16), наблюдающийся в спектрах ЯМР 13С при переходе от кардиопеталидина (14), в котором заместитель в положении С(16) отсутствует, к виресценину (15), имеющему С(16)-метоксигруппу, аналогичен наблюдающемуся при переходе от 10 к 2. Для С(13) и С(15) наблюдаются сильиопольные сдвиги при переходе от 15 к 14 (4.9 и 9.3 м.д.) и от 2 к 10 (6.1 и 8.2 м.д.).

На основании вышеизложенного установлено, что выделенный алкалоид 10 имеет структуру метилликаконитина без метоксильной группы при С(16), т.е. является « 16-деметоксиметилликаконитином».

14 r= r) = h 15r=r, =осн3

13 R=H

Таблица 2

Значения химических сдвигов (5, м.д.) в спектрах ЯМР ,3С 16-деметоксиметилликаконитина (10), 16-деметоксиликоктонина (13), кардиопеталидина (14), виресценина(15), 16-демегокси-19-оксосеколикокюнина(19)

Атом 8, м.д.

10 13 14 15 19 22

СО) 83.1 83 2 72.7 72.4 73.7 82.6

С(2) 25.5 25.6 29.6 28.5 30.4 25.5

С(3) 32.2 31.8 31.9 29.3 25.2 29.1

С(4) 37.8 39.0 33.5 37.7 46.6 46.9

С(5) 43.0* 43.2* 47.5 41.9 47.5 52.3

С(6) 90.9 90.8 34.0 33.5 79.9 921

С(7) 89.8 89.9 87.2 86.1 206.0 86.7

С(8) 77.6 77.7 78.4 76.2 208.5 77.2

С(9) 50.7 50.2 48.0 48.0 542 42.9

С(Ю) 46.3* 46.5* 43.8 43.6 41.9 46.0

С(И) 48.9 48.8 50.2 49.4 46.9 48.7

С(12) 29.1 29.2 32.0 26.9 26.4 27.9

С(13) 31.9 31.9 34.8 39.7 342 31.6

С(14) 84.9 85.3 75.8 75.5 86.8 83.1

С(15) 25.4 25.5 26.7 36.0 35.8 25.4

СО 6) 22.6 22.7 24.9 81.9 26.4 22.0

С(17) 64.9 65.4 64.0 64.9 67.7 63.7

С(18) 69.6 68.0 27.4 78.7 66.4 67.0

С(19) 52.5 52.9 59 4 55.8 171.9 174.1

СНГСН,-^' 14.2 14.4 13.5 139 123 120

СИз-СНг-И 51.1 51.3 50.5 50.5 41.4 43.3

С,-ОСНз 56.0 56.1 521 55.6

С14-ОСНз 58.5 58.3 56.8 59.1

С,6-ОСН3 56.4

С6-ОСНз 57.3 57.3 59.8 57.3

С!8-ОСНз 59.4

с=о 164.2

со') 127.1

С(2*) 133.0

С(З') 129.3

С(4') 133.6

С(5') 131.1

С(б') 130.0

С(1") 179.8

С(2") 35.3

С(Э") 37.0

С(4") 175.8

С(5") 16.4

»Возможна взаимозамена

В литературе примеры обнаружения природных алкалоидов с отсутствующей при С(16) метоксигруппой немногочисленны, поэтому была предпринята попытка подтверждения строения 10 и 13 химическим путем - корреляцией с известным алкалоидом, структура которого достоверно установлена.

Поскольку структура аминоспирта 13 близка к структуре ликоктонина (5) и отличается от него отсутствием заместителя в положении С(16), казалось целесообразным использовать ликокгонин для встречного синтеза по частично описанной в литературе схеме, включающей получение оксопроизводного 16, трансформацию его в секопродукг 17 с последующим отщеплением метанола с образованием а,(3-ненасыщенного кетона 18.

Гидрирование 18 над катализатором Р<3/С привело к 16-деметокси-19-оксосеколикокгонину (19) (схема 1). В ИК-спекгре продукта сохраняются полосы поглощения трех кетогрупп, а в спектре ЯМР 'Н отсутствуют сигналы олефиновых протонов. В спектре ЯМР |3С также исчезают сигналы углеродных атомов двойной связи (130.8 и 147.6 м.д.) и появляются сигналы метиленовых углеродных атомов при 35.8 и 26.4 м.д. Масс-спектр 19 дает пик молекулярного иона 449, максимальным является пик [М-28]+. Известно, что в масс-спектрометрии положительных ионов для С(7)-С(8) секодикетонов характер заместителя при С(6) напрямую не диагностируется. Было обнаружено, что в масс-спектре отрицательных ионов (ОИ) для 19 максимальным пиком является пик иона [М-ОСНз]", который стабилизируется, вероятно, за счет образования двойной связи С(6)-С(7) с локализацией отрицательного заряда на агоме кислорода при С(7).

Получение соединения 19 открывало две возможности дальнейших трансформаций. Первая - это проведение реакции восстановительного сочетания с замыканием цепи по положению С(7)-С(8) с получением пинакона 22, которое легко доступно и из природного алкалоида 10. Вторая возможность - это получение из 10 оксопроизводного 22, расщепление диольной системы которого под действием йодной кислоты должно привести к оксосекопродукту, идентичному соединению 19, полученному из ликоктонина.

Взаимодействие 16-деметокси-19-оксосеколикоктонина (19) с БтЬ (1:4) в безводном ТГФ при комнатной температуре привело к получению двух продуктов 20 и 21 с выходом 34 и 47% соответственно. Масс-спектр высокого разрешения дает для соединения 20 молекулярную массу 421.246, что соответствует брутго-формуле С23Н35К06. В ИК-спекгре наблюдаются полосы поглощения 1656 (амидный карбонил), 3200-3600 (ОН) см"1. О наличии амидной карбонильной группы свидетельствует также спектр ЯМР |3С (174.7 м д.).

Данные спектра ЯМР 'Н и 13С указывают на присутствие в 20 двух метоксильных групп (трехпротонные синглеты при 8Н 3.28 и 3.37 м.д.; квартеты при 5С 55.7 и 57.1 м.д.), М-этильной группы (триплет при §н 1.17 м.д.; квартет при 8С 12.3 и триплет при 8с 43.2 м.д.). Из спектра ЯМР |3С, снятого в режиме .1МСЮСН, следует наличие 13 сигналов метиленовых и четвертичных углеродов и 10 сигналов метановых и метальных углеродов. Совокупность спектральных данных позволяет утверждать, что соединение 20 является продуктом циклизации.

В спектре ЯМР 13С в области 67-88 м.д., характерной для атомов углеродов, содержащих метоксильные или гидроксильные группы, имеются пять сигналов. Два из них дублеты (83.0 и 84.0 м.д.), принадлежащие углеродам, связанным с метоксильными группами. Остальные три сигнала связаны с наличием гидроксильных групп: триплет в области 67.0 м.д. принадлежит С(18), а два синглета при 87.4 и 74.9 м д. - С(7) и С(8) соответственно (табл.3). Наличие в спектре ЯМР 'Н характерного триплета в области 3.58 м.д. позволяет расположить одну из метоксильных групп в положение С(14). Оставшаяся метоксигруппа может находиться у С(1) или у С(6). Известно, что при взаимодействии а-оксозамещенных

кетонов с 8тп12 легко идет процесс удаления а-заместителей. В нашем случае этот процесс может быть связан с группировкой С(6)(0СН3)-С(7)=0 и, следовательно, наиболее вероятно удаление метоксила у С(6) и соединение 20 имеет структуру 6,16-дидемегокси-19-оксоликоктонина.

Схема 1. Химические трансформации ликокгонина (5) и 16-деметоксиликокгонина (13).

-г-ОСН3

,-ОСНз

ОСН3

ОН 20

Таблица 3

Значения химических сдвигов (8, м.д.) в спектрах ЯМР ,3С 6,16-дидеметокси-19-оксоликоктонина (20) и 6,16-дидеметокси-7,19-диоксо-8(7->б)<ябео ликокгонина (21)

Атом 5, м.д 8, м.д

20 21 Атом

20 21

С(1) 84.0 84.6 С(13) 31.7 44.7

С(2) 25.6 31.5 С(14) 83.0 85.7

С(3) 28.1 30.5 С(15) 29.8 32.0

С(4) 48.1 44.7 С(16) 20.8 26.3

С(5) 47.0 42.8 С(17) 63.1 64.9

С(6) 34.9 59.6 С(18) 67.0 65.7

С(7) 87.4 206.8 С(19) 174.7 172.5

С(8) 74 9 77.9 CHrCH,-N 12.3 12.1

С(9) 45.4 45.9 СНз-СШ-N 43.2 40.6

С(10) 46.0 32.5 С1-ОСН3 55.7 57.0

С(11) 49 6 46.1 С14-ОСЯ3 57.1 57.4

С(12) 26.6 25.6

Данные ИК-спектра для соединения 21 свидетельствуют о наличии, кроме лакгамного карбонила, карбонипа в пятичленном кольце (1742 см"1), что подтверждается также данными спектра ЯМР |3С, в котором присутствуют синглетные сигналы при 172.5 и 206.8 м.д. соответственно. Масс-спектр высокого разрешения дает молекулярную массу 419.231 и брутто-формулу C23H33NO6. По данным спектра ЯМР *Н в молекуле имеются N-этильная (триплет при 1.15 м.д.) и две метоксильные (шестипротонный синглет при 3.37 м.д.) группы, одна из которых располагается при С( 14), о чем говорит триплет при 3.66 м.д. В спектре ЯМР С в режиме JMODCH присутствуют 12 сигналов меггиленовых и четвертичных углеродов и 11 сигналов метановых и метальных углеродов (табл.3).

Схема 2. Возможный механизм образования соединений 20 и 21.

19

Sml2

О

Sml2

20

21

Совокупность всех данных позволяет приписать продукту структуру 21. Предполагаемый механизм образования продукта 20 может быть представлен схемой 2 по пути А, а продукта 21 - по пути В.

Поскольку воссоздание основного углеродного скелета молекулы сопровождалось элиминированием С(6)-ОСН3, для подтверждения строения 10 был осуществлен классический подход - окислением аминоспирта 13 перманганатом калия в водно-ацетоновом растворе получено оксопроизводное 22, расщепление которого НЮ4 привело к 16-деметокси-19-оксосеколикокгинину (19). Физико-химические характеристики конечных продуктов, полученных встречным синтезом из 5 и 13, полностью совпадают, что подтверждает предложенную структуру 10 и 13.

3.2. Строение 16-деметоксиделаваина (11 а, Ь)

Масс-спектр для 11 дает пик молекулярного иона [М]+ 684. По данным ИК-спектроскопии в молекуле 11 имеется сложноэфирная (1720 см "') и амидные группы (1540, 1590 см"1). Щелочной гидролиз 11 привел к получению аминоспирта, спектральные характеристики (ЯМР 'Н и 13С) которого идентичны описанному ранее 16-деметоксиликоктонину (13) - продукту щелочного гидролиза алкалоида 10. Таким образом, различия алкалоидов 10 и 11 связаны с заместителем при С(18).

В спектре ЯМР ,3С в режиме ХМСЮСН алкалоида 11 в области сигналов, относящихся к заместителю при С(18), некоторые сигналы носят сдвоенный характер, такие как 114.6/114.8, 141.6/141.8, 51.8/52.0 и 17.9/17.1 м.д. В области, характерной для углеродов карбонильных групп, имеются пять синглетов при 168.1, 169.9,172.5,174.1,176.0 м.д. (табл.4).

? ?

11 а Я = NHCCHCH2COCH3, R,=H

СН3 ? ?

11 bR = NHCCH2CHCOCHj, r,=h снз

7a,bRK3KB ll,R|=OCH3

Совокупность спектральных данных позволила предположить, что алкалоид 11 представляет собой пару не разделяющихся региоизомеров (11а и lib) с раскрытым метилсукцинимидным кольцом.

В литературе имеются сведения о подобных алкалоидах, в частности, об алкалоиде делаваине (7а, Ь), также являющимся смесью двух изомеров, и отличающимся от алкалоида 11 (а, Ь) наличием метоксилыюй группы при С(16). Отнесение сигналов в спектре ЯМР 13С 16-деметоксиделаваина (11а, Ь) сделано на основании сравнения с делаваином (7а, Ь) (табл.4).

Таблица 4

Значения химических сдвигов (8, м.д.) в спектрах ЯМР |3С 16-деметоксиделаваина (11а, Ъ) и делаваина (7а, Ь)

Атом 1 ), М.Д. Ô, м.д.

11 (а, Ь) 7 (а, Ь) Атом 11(а,Ь) 7(а,Ь)

С(1) 83.0 83.9 Шз-СНг-N 14.2 14.0

С(2) 25.5 26.1 СНз-СШ-N 51.1 50.9

С(3) 32.2 32.3 С,-ОСНз 56.1 55.7

С(4) 37.9 37.7 С,4-ОСН3 58.5 58.1

С(5) 43.1 43.4 С16-ОСН3 56.3

С(6) 90.9 91.1 С6-ОСНз 57.3 57.8

С(7) 89.9 88.6 с=о 168.1 168.1

С(8) 77.6 77.5 С(1') 114.6/114.8 114.7/114.8

С(9) 50.8 50.7 С(2') 141.6/141.8 141.7/141.9

С(Ю) 46.3 46.2 С(З') 120.6 120.8

С(П) 48.9 49.1 С(4') 134.9 134.9

С(12) 29.1 28.8 С(5') 122.5 122.6

С(13) 31.8 38.2 С(6') 130.4 130.3

С(14) 84.4 84.0 С(1") 172.5/176.0 172.4/175.9

С(15) 25.4 33.9 С(2") 39.0/35.8 39.1/35.9

С(16) 22.6 84.6 С(3") 37.5/41.4 39.1/41.5

С(17) 64.9 64.6 С(4") 174 1/169.9 174.1/169.9

С(18) 69.7 69.9 С(5") 17.9/17 1 17.9/17.1

С(19) 52.5 52.5 ОСНз 51.8/52.0 51.7/51.9

4. Алкалоиды корней Aconitum septentrionale К.

Объектом нашего исследования служил технологический маточник опытно-промышленною производства препарата «Аллапинин».

Сумма алкалоидов технологического маточника была разделена по силе основности на ряд узких фракций (рН 5.5, 7,9, 12).

Было обнаружено, что остаточные количества лаппаконитина (23) сконцентрированы во фракции рН 7, из которой 23 легко выделяется при добавлении ацетона. Дополнительное количество лаппаконитина составляет 4.2% от фракции рН 7 и 2.4% от суммы алкалоидов технологического маточника. Учитывая, что использование сырья даже с 0.5% (от веса в/с сырья) содержанием лаппаконитина является рентабельным, вторичная переработка технологического маточника, при условии отработки технологического процесса, представляется перспективной. Из фракции алкалоидов рН 7 выделен также известный алкалоид ранаконитин (24), а из фракции рН 12 - ликоктонин (5) и септединин (25).

Из фракции алкалоидов рН 5.5 выделены известный алкалоид акосеитин (26) и новые алкалоиды - ангидроликаконитин (27), септонин (28), септонтрионин (29) и аквельдин (30).

4.1. Строение ангидроликаконитина (27)

Масс-спектр высокого разрешения дает для ангидроликаконитина (27) молекулярную массу 650.319, C36H46N209. По данным ИК-спектроскопии в молекуле 27 имеется сложноэфирная группа (1720 см"1), что подтверждается щелочным гидролизом алкалоида и получением аминоспирта 31. В ИК-спектре 31 наблюдаются

интенсивная полоса поглощения карбонильной группы при 1712 см"1. Сравнение молекулярных масс исходного алкалоида ([М]+ 650) и аминоспирта ([М]+ 449) и анализ спектральных данных 27 и 31 (ЯМР 'Н, 13С, масс-, ИК-спектры) свидетельствуют о том, что этерифицирующей кислотой в 27 является сукцинилантраниловая кислота. Эти же данные указывают на присутствие в аминоспирте 31 четырех метоксильных групп (8Н 3.25, 3.26, 3.36, 3.53 м.д.) и К-этильной группы.

Из спектра ЯМР |3С ОЕРТ установлено, что в 31 имеется 11 метиленовых и четвертичных углеродов, а также 14 СН3 и СН-групп . Четыре сигнала при 79.4, 83.1, 83.3 и 83.7 м.д. относятся к метановым углеродным атомам, связанным с ОСН3; углеродам метоксигрупп соответствуют сигналы при 55.6, 56.6, 57.0, 59.5 м.д. Сигналы метальной (9.8 м.д.) и метиленовой (48.3 м.д) групп ЬГ-этильного фрагмента, а также сигнал углерода карбонильной группы (201.7 м.д.) расположены в более сильном поле, чем это обычно наблюдается в спектрах ЯМР 13С С19-дитерпеновых алкалоидов.

Реттеноструктурный анализ (РСА) аминоспирта 31 показал, что он имеет структуру ангидроликоктонина и отличается от обычных С дитерпеновых алкалоидов наличием мостика С(8)-С(17) вместо С(7)-С(17). Данные РСА свидетельствуют о значительных конформационных изменениях при переходе от обычного скелета С|9-дитерпеновых алкалоидов к модифицированному в ангидропроизводном. Конформации колец А (циклогексан) и В (циклогептанон) -искаженная ванна (рис. 1). Циклопентановое кольцо С находится в конформации конверт. Оставшиеся циклы также имеют конформации ванна или конверт. В результате этого молекула становится несколько конформационно напряженной.

31 я=н

35 Я=СНз

ЯО

сз

Рис. 1. Молекулярная структура ангидроликоктонина (31).

Полное отнесение сигналов в спектрах ЯМР 'Н и 13С аминоспирта 31 было проведено на основании экспериментов БЕРТ, 20 СОБУ, 2Б HSQC и 20 НМВС.

Наблюдаемые в 20 НМВС спектре, настроенном на дальние 'Н-13С КССВ, кросс-пики иллюстрирует рис.2. В качестве отправной точки при расшифровке использовали С=0 группу (С(7)), резонанс которой в спектре ЯМР С наблюдается в слабом поле при 201.7 м.д.

Рис. 2. Основные НМВС корреляции от протонов к углеродам для алкалоида 31.

Опираясь на эти данные, а также на 2D COSY (рис. 3), DEPT и 2D HSQC-спектры, представилось возможным однозначно идентифицировать резонанс протонсодержащих атомов углерода соединения 31, а с помощью 2D НМВС спектра -полное соотнесение всех сигналов в спектрах ЯМР 'Н и 13С, в том числе и резонансных линий углеродных атомов, не содержащих атомов водорода (рис. 2 и 4, табл. 5).

Рис. 3. Спектр 2D COSY алкалоида 31 в CDC13 при Т=30°С.

ОСЯг»

Рис. 4. Фрагмент спектра 20 НМВС алкалоида 31 в С0С13 при Т=30°С.

В спектре ЯМР |3С алкалоида 27 сигналы углеродных атомов основного скелета полностью соответствуют таковым аминоспирта 31 (табл.5). Дополнительные сигналы соответствуют наличию сукцинилантраноильного остатка.

Таблица 5

Значения химических сдвигов (5, м.д.) в спектрах ЯМР |3С ангидроликаконитина (27) и ангидроликокгонина (31)

Атом 8, м.д. 8, м.д.

27 АТОМ 31

31 27

С(1) 79.0 79.4 С(19) 55.6 56.1

С(2) 20 1 20 5 СНГСН,-К 9.8 9.8

С(3) 29 3 28 9 СН,-СН,-Ы 48.1 48.3

С(4) 38.9 40.3 С,-ОСН3 55 5 55.6

С(5) 46.3 45.6 Сб-ОСНз 59.5 59.5

С(6) 83.7 83.7 С,4-ОСН3 56.9 57.0

С(7) 201.2 201.7 С,6-ОСН3 56.6 56.6

С(8) 58.9 59.2 с=о 164 2

С(9) 42.2 42.5 С(1') 126.6

С(10) 48.9 49.1 С(2') 132.7

С(11) 51.2 51 3 С(З') 128 6

С(12) 314 31.5 С(4') 133.6

С(13) 39.5 39.6 С(5') 131.4

С(14) 83.7 83.3 С(б') 128.8

С(15) 25.9 26.0 С(1") 176 8

С(16) 82.8 83.1 С(2") 28.8

С(17) 65.8 66.0 С(3") 28.9

С(18) 70 5 69.6 С(4") 176 3

В спектре ЯМР 'Н наблюдаются изменения, связанные с заменой заместителя при С(18) - два дублета диастереотопных протонов находятся в более слабом (4.00 и 4.28 м.д.) поле, чем для 31. Два дублета при 8.22 и 7.27 м.д. и два триплета при 7.69 и 7.57 м.д. соответствуют сигналам протонов орто-замещенного фенильного фрагмента.

По аналогии с 31 выделенный алкалоид 27 назван «ангидроликаконитином».

4.2. Строение септонина (28) и септонтрионина (29)

Масс-спектр высокого разрешения дает для септонина (28) молекулярную массу 636.305, C35H44N2O9. Максимальным по интенсивности является пик иона [М-29]+.

По данным ИК-спектра в молекуле имеются ОН- (3200-3600 см"1) и СО (1714 см'1) группы. Анализ данных спектров ЯМР 'Н и 13С (8Н 7.28-8.10 м.д. (Аг), 5С 164.1, 176.6, 176.6 м д. (СО), 127.2-133.6 м.д. (Аг)) и масс-спектра (осколочный ион с массой 202) указывают на то, что этерифицирующей кислотой в 28 является сукцинилантраниловая кислота. В молекуле 28 имеется также карбонильная группа (5с 212.4 м.д.). Щелочным гидролизом алкалоида был получен аминоспирт 32.

Для 32 масс-спектр высокого разрешения дает молекулярную массу 435.262, C24H37NO6. В ИК-спекгре присутствуют полосы поглощения 1714 см"', что свидетельствует о нахождении С=0 группы в шестичленном кольце, а также 32003600 (ОН) см"1.

Данные спектров ЯМР 'Н и 13С указывают на наличие в аминоспирте 32 трех метоксильных групп (8Н 3.32, 3.34 и 3.38 м.д., 5С 82.6, 82.8, 83.6 м.д. и 6С 56.7, 57.1 и 57.3 м.д.), N-этильной группы (5Н 1.16 м.д.). Протон у С(14) в спектре ЯМР 'Н резонирует в виде характерного триплета при 3.42 м.д., что позволяет расположить в этом положении одну из метоксильных групп. Наблюдаемые значения химических сдвигов хорошо согласуются с локализацией двух оставшихся метоксильных групп в положениях С(1) и С(16).

............^.OCHj

ОСН3Г^\ „оси, 28R=0=( V-Л R,=H

29 R=CH3, Rj=H / О °Rl 32 R=R]=H

33 R=CHj, R,=Ac

34 R=R,=CH3

Сравнение спектральных данных (ИК-, ЯМР 'Н и ,3С-, масс-спектров) аминоспирта 32 и еще одного нового алкалоида - септонтрионина (29) указывает на близость их строения. Так, по данным ИК-спектра в структуре алкалоида 29 также имеется С=0 группа в шестичленном кольце (1702 см"1) и ОН-группа (3400 см"1). В спектре ЯМР С алкалоида 29 наблюдаются 11 синглетных и триплетных сигналов и 14 дублетов и квартетов. В спектре ЯМР 13С в режиме QU ATD в области

четвертичных углеродов, не содержащих кислородные функции, имеются три синглета при 37.1 (С(4)), 49.7 (С(11)) и 54.8 (С(8)) м.д. (табл.6), что позволяет предполагать наличие ангидроструктуры.

Масс-спектр высокого разрешения дает для 29 молекулярную массу 449.277, C25H39N06. Сравнение данных масс-спектров 29 и 32 свидетельствует о том, что их молекулярные массы различаются на СН2-группу. В спектре ЯМР 'Н септонтрионина (29) имеются сигналы N-этильной группы (1.14 м.д.) и четырех мегоксильных групп (3.27, 3.29, 3.30 и 3.36 м.д.), причем по данным спектра ЯМР 13С следует, что дополнительная метоксильная группа находится у метиленового атома углерода. В аминоспирте 32 сигнал С(18) наблюдается в виде триплета при 69.5 м.д., а в септонтрионине (29) он смещен в более слабое поле к 79.4 м.д., что позволяет расположить в 29 у С( 18) метоксильную группу.

В спектрах ЯМР 'Н алкалоидов 29 и 32 синглетные сигналы в слабом поле (4.24 и 4.26 м.д. соответственно) позволяют предположить, что в 29 и 32 имеется СН-ОН группа, причем рядом с ней находится дезэкранирующий ее заместитель. Тот факт, что в ацетильном производном (33), полученном при ацилировании септонтрионина (29) хлористым ацетилом, этот сигнал смещается в слабое поле до 5 42 м.д. (СН-ОАс), а при метилировании (34) соответствующий сигнал появляется при 3.78 м.д. подтверждает, что в исходной молекуле имеется СН-ОН группа. При этом в спектре ЯМР 3С синглет, принадлежащий СО смещается от 212.7 м.д. для 29 до 205.3 м.д. в 33 и 210.6 м.д. для 34.

Метилирование ангидроликоктонина (3J) привело к 35. Сравнение спектральных характеристик 34 и 35 (спектры ЯМР ]Н и 13С) показало, что они хотя и близки, но различны.

Обращает на себя внимание также тот факт, что в масс-спектрах алкалоидов 28, 29 и 32 тип фрагментации не соответствует ни обычно наблюдаемому для ликоктониновых алкалоидов, ни ангидроликаконитину (27). В то время как для 27 максимальным по интенсивности является пик молекулярного иона, а интенсивность пиков [М-ОСН3]+ и [М-СН3]+ составляет 33 и 31% соответственно, для 33 максимальную интенсивность имеют пики [М-СН3СО]+ и [М-СН3СОО]+. Что же касается 28, 29 и 32, то в их спектрах максимальную интенсивность имеет пик иона [М-29]+ [М-СО-Н]+, заметный вклад вносят также ионы [М-СО]+, [М-С0-СН30]+.

Фрагментация молекулярных отрицательных ионов в масс-спектрах резонансного захвата электронов различна в зависимости от структуры алкалоида. Для 27 и 31 основной вклад в масс-спектр вносит ОИ [М-ОСН3]', который, вероятно, связан с отщеплением метоксила в «-положении к СО-группе и стабилизируется, как и в случае секодикетона 19, за счет образования двойной связи с локализацией отрицательного заряда на атоме кислорода. В то же время, для 28, 29 и 34 максимальным является пик иона [М-Н]', для 34 наблюдается также ОИ [М-ОСН3]", но с интенсивностью 75%, а для 28 и 29 - ОИ [М-ОН]' с интенсивностью 11% и 6% соответственно. В случае алкалоида 33, имеющего в «-положении к СО-группе ацетатную группу, максимальным является пик иона [М-ОАс]'.

С учетом всего выше изложенного, для септонина (28), септонтрионина (29) и аминоспирта 32 были предложены структуры изо-ангидроликоктонинового типа с расположением при С(7) ОН-группы, а при С(6) С=0 группы.

Как и в случае ангидроликоктонина (31), для подтверждения структуры и полного отнесения сигналов в спектрах ЯМР *Н и 13С алкалоида септонтрионина (29)

была проведена серия экспериментов DEPT, 2D COSY, 2D HSQC и 2D НМВС (рис.57).

Рис. 5. Фрагмент спектра 2D НМВС алкалоида 29 в CDC13 при Т=30°С.

Рис. 6. Спектр 2D COSY алкалоида 29 в CDC13 при Т=30°С.

Для отнесения использовали фрагмент с характеристичными ЯМР параметрами, а именно карбонильную группу, резонанс углерода которой в спектре ЯМР 13С наблюдается в низких полях при 212.7 м.д. В отличие от 31, для которого в 2D НМВС спектре, настроенном на дальние 'Н-13С КССВ, наблюдаются кросс-пики

между СО и протонами четырех СН-групп и одной СН2-группы (рис.2), в 2Т) НМВС спектре 29 (рис. 5) наблюдаются кросс-пики между СО и протонами двух СН-групп. Этот факт служит еще одним доказательством расположения С=0 группы в положении С(6), в этом случае наблюдаемые кросс-пики возникают за счет взаимодействия с Н(5) и Н(7).

Дальнейший эксперимент по отнесению сигналов в спектрах 'Н и |3С был аналогичен таковому для ангидроликоктонина (31).

По данным 20 НвОС спектра однозначно были идентифицированы резонансы протонсодержащих атомов углерода, затем с помощью 20 НМВС спектра провели полное соотнесение всех сигналов в спектрах ЯМР 'Н и 13С, в том числе и резонансных линий углеродных атомов, не содержащих атомов водорода.

Рис. 7. Основные НМВС корреляции от протонов к углеродам для алкалоида 29.

Поскольку вопрос об относительной конфигурации заместителя при С(7) (а-ОН или Р-ОН) оставался открытым, для решения этого вопроса привлекли данные 20 >ЮЕ8У эксперимента. Основные ядерные эффекты Оверхаузера (яэО) приведены на рис.8. Наблюдаемые яэО между Н(7) и протонами групп СН2(15), СН2(19) и СН2(Е1) говорят о пространственной близости этих групп, т.е. Н(7) расположен по одну сторону цикла В с указанными группами. В то же время, если бы Н(7) был ориентирован по другую сторону цикла, то должны были наблюдаться яэО между Н(7) и Н(9), Н(10), которых в спектре 20 ШЕБУ нет.

Рис. 8. Принципиальные яэО и их корреляция со структурой 29.

Таблица 6

Значения химических сдвигов (8, м.д.) в спектрах ЯМР13С септонина (28), септонтрионина (29) и аминоспирта 32

Атом 8, м.д. 8, м.д.

28 29 32 Атом 28 29 32

С(1) 82.7 83.0 82.8 С(19) 53.8 54.4 54.5

С(2) 24.7 24.8 24.9 снгсн,-к 14.2 14.2 14.2

С(3) 34.3 34.4 34.5 СНз-СНг-К 50.1 50.1 50.2

С(4) 36.0 37.1 38.4 С1-ОСНЗ 57.2 57.1 57.1

С(5) 58.5 58.5 57.4 Си-ОСНз 57.3 57.2 57.3

С(6) 212.4 212.7 214.5 С16-ОСН3 56.8 56.6 56.7

С(7) 80.8 80.7 80.8 С18-ОСНз 59.1

С(8) 54.7 54.8 54.1 с=о 164.1

С(9) 45.3 45.2 45.9 си") 127.2

С(10) 46.3 46.4 46.6 С(2) 132.6

С(11) 49.6 49.7 49.4 С(3) 129.4

С(12) 31.4 31.5 31.4 С(4) 133.6

С(13) 39.4 39.3 39.4 С(5) 131.4

С(14) 82.6 82.8 82.6 С(6) 129.8

С(15) 28.0 28.0 28.1 С(1) 176.6

С(16) 83.5 83.6 83.6 С(2") 28.8

С(17) 63.0 63.2 63.3 С(3") 28.8

С(18) 70.3 79.4 69.5 С(4) 176.6

Таким образом, на основании данных спектра 2Б НМВС и наблюдаемых яэО был сделан вывод об относительной конфигурации протона при С(7), т.е. связь С(7) -Н ориентирована а, тогда как гидроксильная группа имеет р-ориентацию.

Все вышеперечисленные выводы о строении основного углеродного скелета 29 действительны также для септонина (28) и продукта его гидролиза 32.

4.3. Строение аквельдина (30)

По данным ИК-спектроскопии в молекуле имеются сложноэфирная (1712 см'1) и амидные группы (1560, 1592 см'1). Масс-спектр высокого разрешения дает для аквельдина (30) молекулярную массу 682.3458, СзуНзо^Ою- Характер распада в масс-спектре 30 аналогичен наблюдаемому в масс-спектре ангидроликаконитина (27). Максимальную интенсивность в масс-спектре 30 имеет пик молекулярного иона, имеются также пики средней интенсивности [М-31]+, [М-15]+.

Данные ЯМР Н, 13С-спектров указывают на присутствие в молекуле 30 четырех метоксильных групп и М-этильной группы. Наблюдаемые в спектре ЯМР 'Н алкалоида 30 синглет а-протона при С(б) в области 3.83 м.д. свидетельствует о присутствии метоксильной группы при С(6). Кроме того, в спектре ЯМР 'Н наблюдается синглет метоксильной группы при 3.72 м.д. В самом слабом поле имеется сигнал при 11.15 м.д., который принадлежит протону >ШСО группы.

В спектре ЯМР ,3С в режиме ШСЮСН алкалоида 30 имеются 9 сигналов от метановых углеродов, 4 сигнала метоксильных групп (55.8, 56.8, 57.1, 59.6 м.д.) и 11 сигналов метиленовых и четвертичных углеродов основного углеродного скелета.

Сигналы, отвечающие И-этильному фрагменту (48.3 и 9.9 м.д.) и сигнал углерода карбонильной группы (201.4 м.д.) расположены в более сильном поле, чем

обычно в спектрах ЯМР ,3С С,<гдитерпеновых алкалоидах и аналогичны таковым для ангидроликаконитина (27).

Сравнение спектральных данных 30 и ангидроликаконитина (27) позволило утверждать, что основной углеродный скелет выделенного алкалоида имеет ангидроструктуру, и различия между этими алкалоидами связаны с заместителем при С(18). Сигналы углеродных атомов в спектре ЯМР 13С дизамещенного фенильного кольца расположены в области 114 7-144.2 м.д., а сигналы карбонильных углеродов резонируют при 170.3 и 173.0 м.д (табл.7).

Таблица 7

Значения химических сдвигов (8, м.д.) в спектре ЯМР 13С аквельдина (30)

Атом 8, м.д. 8, м .д.

30 АТОМ 30

С(1) 79.3 С(19) 55.8

С(2) 20.3 ÇHJ-CH2-N 9.9

С(3) 29.0 CHI-CH;-N 48.3

С(4) 39 7 С1-ОСН3 55.8

С(5) 46.6 С6-ОСН3 59.6

С(6) 83.9 См-ОСНз 57.1

С(7) 201.4 С,б-ОСНз 56.8

С(8) 59.1 С=0 168 4

С(9) 42.5 С(1') 114.7

С(Ю) 49.2 С(2') 144.2

С(11) 51.5 С(З') 120.5

С(12) 31.5 С(4') 134.8

С(13) 39.3 С(5') 122.7

С(14) 83 4 С(б') 130.7

С(15) 26.0 С(1") 170.3

С(16) 83.0 С(2") 29.6

С(17) 66.0 С(3") 32.7

С(18) 70.8 С(4") 173.0

Совокупность спектральных данных позволила предположить, что алкалоид 30 представляет собой изомер алкалоида ангидроликаконитина (27) с раскрытым сукцинимидным кольцом. Выделенный алкалоид был назван аквельдином

ВЫВОДЫ

1. Исследован алкалоидный состав корней и наземной части растений Delphinium elatum L. и Delphinium alpinum, корней Delphinium cuneatum, а также образец технологического маточника производства препарата «Аллапинин» (корни Aconitum septentrionale К.)- Алкалоидный состав Delphinium cuneatum и Delphinium alpinum исследован впервые. Выделены 19 алкалоидов, семь из которых оказались новыми.

2. Из наземной части Delphinium alpinum выделен новый алкалоид альпинин, структура которого установлена на основании спектральных данных (ИК-, масс-, ЯМР 'Н и |3С).

3. Из корней Delphinium cuneatum выделены новые алкалоиды 16-деметоксиметилликаконитин, относящийся к малочисленной группе С,9-дитерпеновых алкалоидов, не содержащих заместитель в положении С(16), а также 16-деметоксиделаваин в виде смеси региоизомеров. Строение алкалоидов установлено с помощью спектральных данных (ИК-, масс-, ЯМР 'Н и 13С) и для 16-деметоксиметилликаконитина подтверждено химической корреляцией с ликоктонином.

4. Из технологического маточника производства препарата «Аллапинин» выделены ранее неописанные алкалоиды ангидроликаконитин, аквельдин, септонин и септонтрионин, которые принадлежат к ангидроликоктониновому типу нордитерпеновых алкалоидов. Структуры алкалоидов были установлены на основании спектров ИК, масс, ЯМР 'н и |3С, а также гомоядерных ('Н-'Н) и гетероядерных (!Н-|3С) корреляций; структура ангидроликаконитина подтверждена рентгеноструктурным анализом продукта его щелочного гидролиза. Получен ряд производных ангидроликаконитина и септонтрионина.

5. Выявлены особенности масс-спектрометрического распада для представителей алкалоидов ангидро- и изо-ангидроликоктонинового строения. При электронном ударе для алкалоидов ангидроликоктониновой структуры максимальный пиком является пик молекулярного иона, в то время как для изо-ангидро алкалоидов максимальную интенсивность имеет пик иона [М-29]+.

6. Впервые для анализа строения дитерпеновых алкалоидов ангидро- и изо-ангидроликоктонинового типа использованы данные масс-спектрометрии резонансного захвата электронов и установлено, что они могут служить для диагностики природы заместителя в а-положении к карбонильной группе.

7. Предложен способ извлечения дополнительного количества лаппаконитина из технологического маточника.

Материалы диссертации опубликованы в работах:

1. Юнусов М.С., Цырлина Е.М., Хайритдинова Э.Д., Спирихин Л.В., Ковалевский А.Ю., Антипин М.Ю. «Ангидроликаконитин» - новый дитерпеновый алкалоид из Aconitum septentrionale К. // Изв. АН. Сер. хим. - 2000. - № 9. - С. 1640-1644.

2. Хайритдинова Э.Д., Цырлина Е.М., Спирихин Л.В., Федоров Н.И., Ефремов Ю.Я., Юнусов М.С. 16-Деметоксиметилликаконитин - новый нордитерпеновый алкалоид из корней растения Delphinium cuneatum II Изв. АН. Сер. хим. - 2003. - № 9.-С. 1968-1970.

3. Пихтовников C.B., Мавродиев В.К., Фурлей И.И., Хайритдинова Э.Д., Цырлина Е.М. Масс-спектры резонансного захвата электронов некоторых дитерпеновых алкалоидов // Изв. АН. Сер. хим. - 2003. - № 8. - С. 1768-1770.

4. Хайритдинова Э.Д, Цырлина Е.М., Спирихин Л.В., Федоров Н.И., Юнусов М.С. «Альпинин» - новый нордитерпеновый алкалоид из Delphinium alpinum // Химия природ, соедин. - 2005. - № 5. - С. 469-471.

5. Хайритдинова Э.Д., Цырлина Е.М., Спирихин JI.B., Федоров Н.И., Юнусов М.С. Нордитерпеновые алкалоиды Delphinium cuneatum // Химия природ, соедин. -2005. - № 5. - С. 467-468.

6. Цырлина Е.М., Хайритдинова Э.Д., Зинурова Э.Г., Юнусов М.С. Алкалоиды Delphinium elatum L. и Aconitum septentrionale К. // III Всероссийское совещание «Лесохимия и органический синтез»: Тез. докл. - Сыктывкар, 1998. - С. 94.

7. Хайритдинова Э.Д., Цырлина Е.М., Спирихин Л.В., Антипин М.Ю., Юнусов М.С. «Ангидроликаконитин» - новый дитерпеновый алкалоид из Aconitum septentrionale К.// Молодежная научная школа по органической химии: Тез. докл. -Екатеринбург, 2000. - С. 299.

8. Цырлина Е.М., Хайритдинова Э.Д., Юнусов М.С. Алкалоиды корней Аконита северного // Всероссийская конференция «Химия и технология растительных веществ»: Тез. докл. - Сыктывкар, 2000. - С. 152.

9. Хайритдинова Э.Д., Цырлина Е.М., Спирихин JI.B., Федоров Н.И., Ефремов Ю.Я., Юнусов М.С. Алкалоиды Delphinium cuneatum // II Всероссийская конференция «Химия и технология растительных веществ»: Тез. докл. - Казань, 2002. - С. 52.

10. Хайритдинова Э.Д., Цырлина Е.М., Спирихин Л.В., Юнусов М.С. Восстановительное сочетание секопроизводных дитерпеновых алкалоидов // 111 Всероссийская конференция «Химия и технология растительных веществ»: Тез. докл. - Саратов, 2004. - С. 121-122.

11.Хайритдинова Э.Д., Цырлина Е.М., Спирихин Л.В., Сафина Р.Н., Федоров Н.И., Юнусов М.С. Нордитерпеновые алкалоиды Delphinium alpinum // VIII Молодежная научная школа-конференция по органической химии: Тез. докл. - Казань, 2005. -

12. Хайритдинова Э.Д., Цырлина Е.М., Спирихин Л.В., Юнусов М.С. Нордитерпеновые алкалоиды Aconitum septentrionale К. // VIII Молодежная научная школа-конференция по органической химии' Тез докл - Казань, 2005. -

С. 416.

С. 417.

Соискатель

Хайритдинова Э.Д.

i

n

I

г

Хайритдинова Эльвира Дарвитовна

Алкалоиды Aconitum septentrionale К., Delphinium alpinu D. cuneatum и D. elatum L.

02.00.10 - биоорганическая химия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Лицензия № 0177 от 10.06.96 г. Подписано в печать 14.11.2005 г. Отпечатано на ризографе. Формат 60x84 Vi6. Усл.-печ. л. 1,5. Уч.-изд. л. 1,7 Тираж 100 экз. Заказ № 326.

450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3, ГОУ ВПО «Башгосмедуниверситет Росздрава»

2 8 68

РНБ Русский фонд

2006-4 26791

Введение.

Глава 1. Литературный обзор

Химические превращения углеродного скелета С^-нордитерпеновых алкалоидов.

1.1. Окисление вицинальных диолов.

1.1.1. Окисление С(7)-С(8) диолов.

1.1.2. Окисление С(8)-С(9) диолов.

1.1.3. Окисление С(13)-С(14) диолов.

1.2. Реакции с разрывом С(7)-С(17) связи.

1.2.1. Гидроксипроизводные.

1.2.2. Образование и превращения ангидропроизводных.

1.2.3. Реакция пиролиза.

1.2.4. Реакции с участием заместителя при С(8).

1.3. С(11)-С(17)-секопроизводные.

1.4. Разрыв С(12)-С(13) связи.

1.5. Разрыв С(13)-С(16) связи.

1.6.1М-С(19)-секопроизводные.

Глава 2. Обсуждение результатов.

2.1. Алкалоиды Delphinium elatum L.

2.2. Алкалоиды Delphinium alpinum.

2.2.1. Строение альпинина (9).

2.3. Алкалоиды корней Delphinium cuneatum.

2.3.1. Строение 16-деметоксиметилликаконитина (10).

2.3.2. Строение 16-деметоксиделаваина (11 а, Ь).

2.4. Алкалоиды корней Aconitum septentrionale К.

2.4.1. Строение ангидроликаконитина (31).

2.4.2. Строение септонина (32) и септонтрионина (33).

2.4.3. Строение аквельдина (34).

Глава 3. Экспериментальная часть.

3.1. Алкалоиды наземной части Delphinium elatum L.

3.2. Алкалоиды корней Delphinium elatum L.

3.3. Алкалоиды корней Delphinium alpinum.

3.4. Алкалоиды наземной части Delphinium alpinum.

3.5. Алкалоиды корней Delphinium cuneatum.

3.6. Алкалоиды корней Aconitumseptentrionale ЬС.

3.7. Алкалоиды технологического маточника.

Выводы.

Научно-технический прогресс, усиление антропогенного давления на природную среду и связанное с этим ее загрязнение, утрата естественной связи между человеком и природой, ухудшение физического здоровья людей, истощение запасов природных ископаемых - все эти факторы обуславливают интерес исследователей к поиску альтернативных источников сырья и созданию безотходных экологически чистых технологий.

С экологической точки зрения использование в качестве лекарственных препаратов природных соединений растительного происхождения имеет ряд неоспоримых преимуществ перед синтетическими. Они издавна применяются в народной медицине, обладают высокой физиологической активностью, широким спектром действия, для их получения используется доступное возобновляемое сырье и более экологически приемлемые способы производства. Природные вещества, чаще всего, оптически-активные, энантиомерно чистые соединения.

В настоящее время около 30% всех препаратов, применяющихся в современной медицине, составляют лекарственные вещества растительного происхождения. В то же время, вследствие уникальности и огромного многообразия химического строения вторичных метаболитов даже близкородственных видов растений, к настоящему времени из 750 тысяч видов химически исследованы лишь около 7%.

С таким классом вторичных метаболитов как дитерпеновые алкалоиды человечество знакомо с давних времен: соком аконита смазывали наконечники копий и стрел, в народной медицине различные виды аконита использовались для лечения сибирской язвы, острого воспаления легких, туберкулеза желез внутренней секреции, как наружное болеутоляющее средство. Различные виды живокости использовались для лечения невралгии, ревматизма, интоксикации, различных переломов, зубной боли и других заболеваний.

Несмотря на то, что химическое изучение дитерпеновых алкалоидов началось около 100 лет назад, первый пример использования дитерпеновых алкалоидов в официальной медицине относится к 50-м годам XX века, когда в фармакопею вошел препарат «Мелликтин», действующим веществом которого являлся метилликаконитин.

К настоящему времени накоплено и обобщено огромное количество данных по структуре, свойствам и физиологической активности этого класса соединений. Одним из современных направлений в химии дитерпеновых алкалоидов является изучение зависимости структура-свойство и создание на этой основе лекарственных препаратов. За рубежом работы в рассматриваемой области, в основном, проводятся по выявлению зависимости «строение-анальгезирующая и противовоспалительная активности», отечественные исследования связаны, главным образом, с разработкой антиаритмических средств. Антиаритмические свойства были обнаружены во второй половине 70-х годов прошлого столетия, и «Аллапинин» пока является единственным представителем класса дитерпеновых алкалоидов, используемым в качестве антиаритмика.

Многогранность биологически-активных свойств дитерпеновых алкалоидов стимулирует дальнейшие исследования, направленные на выделение алкалоидов из растительного сырья, установление их структуры, изучение зависимости структура-свойство. Создание на их основе лекарственных средств остается одной из актуальных задач современной биоорганической химии.

Наиболее богатыми источниками дитерпеновых алкалоидов являются растения родов Delphinium и Aconitum семейства Raniinculaceae, широко распространенные на всей территории России, в том числе, и в Башкортостане. Между тем, научное направление, связанное с выделением и химическим изучением природных соединений, в республике ранее не развивалось, и возможности дикорастущей флоры Башкортостана как источника алкалоидов с целью создания новых лекарственных препаратов медицинского и ветеринарного назначения не известны.

В связи с этим, целью диссертационной работы явилось изучение алкалоидного состава трех видов растений рода Delphinium и технологического маточника суммы алкалоидов корней Aconitum septentrionale К. после отделения из нее лаппаконитина: выделение и разделение алкалоидов, идентификация известных и установление структуры новых соединений.

В результате проведенных исследований из корней и наземной части растений Delphinium elatum и Delphinium alpinum, корней Delphinium cuneatum (виды Delphinium cuneatum и Delphinium alpinum изучены впервые), а также образца технологического маточника производства препарата «Аллапинин» (корни Aconitum septentrionale К.) выделены 19 алкалоидов, семь из которых оказались новыми. Установлено строение новых алкалоидов: четыре из них принадлежат к новому ангидроликоктониновому типу, для которого описан лишь один нордитерпеновый алкалоид, имеющий природное происхождение.

1. Stem E.S. The diterpenoid alkaloids from Aconitum, Delphinium, and Garrya species // The alkaloids. Chemistry and physiology. Ed. Manske R.H.F. - New York, London: Academic Press, 1960. - Vol. 7. - P. 473-503

2. Pelletier S.W., Keith L.H. Diterpene alkaloids from Aconitum, Delphinium, and Garrya species: The Ci9-diterpene alkaloids // The alkaloids. Chemistry and physiology. Ed. Manske R.H.F. New York, London: Academic Press, 1970. --Vol. 12.-P. 2-134

3. Edwards O.E. Diterpenoid alkaloids // The alkaloids. A specialist periodical reports. Ed. Saxton J.E. Burlington House, London, W1V OBN: The chemical society, 1971.-Vol. 1.-P. 433-481

4. Pelletier S.W., Page S.W. The diterpenoid alkaloids: chemistry and synthesis // The alkaloids. A specialist periodical reports. Ed. Saxton J.E. Burlington House, London, W1V OBN: The chemical society, 1975. - Vol. 5. - P. 230-241

5. Pelletier S.W., Page S.W. Diterpenoid alkaloids // The alkaloids. A specialist periodical reports. Ed. Grundon M.F. Burlington House, London, W1V OBN: The chemical society, 1976. - Vol. 6. - P. 256-271

6. Pelletier S.W., Page S.W. Diterpenoid alkaloids // The alkaloids. A specialist periodical reports. Ed. Grundon M.F. Burlington House, London, W1V OBN: The chemical society, 1977. - Vol. 7. - P. 247-267

7. Pelletier S.W., Page S.W. Diterpenoid alkaloids // Nat.Prod.Rep. 1984. - Vol. 1. - № 4. - P. 375-386

8. Pelletier S.W., Page S.W. Diterpenoid alkaloids // Nat.Prod.Rep. 1986. - Vol. 3.-№5.-P. 451-464

9. Yunusov M.S. Diterpenoid alkaloids // Nat.Prod.Rep. 1991. - Vol. 8. - № 5. -P. 499-521

10. Yunusov M.S. Diterpenoid alkaloids // Nat.Prod.Rep. 1993. - Vol. 10. - № 5. p. 471-486

11. Atta-ur-Rahman, Choudhary M.I. Diterpenoid and steroidal alkaloids // Nat.Prod.Rep. 1995. - Vol. 12. - № 4. - P. 361-379

12. Atta-ur-Rahman, Choudhary M.I. Diterpenoid and steroidal alkaloids // Nat.Prod.Rep. 1997. - Vol. 14. - № 2. - P. 191-203

13. Atta-ur-Rahman, Choudhary M.I. Diterpenoid and steroidal alkaloids // Nat.Prod.Rep. 1999. - Vol. 16. - № 5. - P. 619-635

14. Joshi B.S., Pelletier S.W. Resent developments in the chemistry of norditerpenoid and diterpenoid alkaloids // Alkaloids: chemical and biological perspectives. Ed. Pelletier S.W. Amsterdam: Elsevier, 1999. - Vol. 13. - P. 289-370

15. Przybylska M., Marion L. Crystal structure of de(oxymethylene)lycoctonine hydriodide monohydrate // CanJ.Chem. 1956. - Vol. 34. - № 26. - P. 21892192

16. Юнусов M.C. Алкалоидоносная флора бывшего СССР источник боилогически активных соединений // Химия в интересах устойчивого развития. - 1997. - № 5. - С. 41-56

17. Юнусов М.С., Юнусов С.Ю. Строение дельфатина // Химия природ.соедин. 1970. - № 3. - С. 334-339

18. Нарзуллаев А.С., Юнусов М.С., Юнусов С.Ю. Алкалоиды Delphinium corumbosum // Химия природ.соедин. 1973. - № 4. - С. 497-501

19. Нарзуллаев А.С., Юнусов М.С., Юнусов С.Ю. Дезоксиделькорин новый алкалоид из Delphinium corumbosum // Химия природ.соедин. - 1974. - № 3.-С. 412-413

20. Нарзуллаев А.С., Юнусов М.С. Строение 14-ацетилнудикаулина // Химия природ.соедин. 1991. - № 4. - С. 547-549

21. Аметова Э.Ф., Юнусов М.С., Банникова В.Е., Абдуллаев Н.Д., Тельнов В.А. Строение монтикамина и монтиколина // Химия природ.соедин. -1981.-№4.-С. 466-470

22. Юнусов М.С., Нежевенко В.Е., Юнусов С.Ю. Строение илиенсина // Химия природ.соедин. 1975. - № 1. - С. 107-108

23. Нежевенко В.Е., Юнусов М.С., Юнусов С.Ю. Алкалоиды Aconitum monticola. Строение акомонина // Химия природ.соедин. 1975. - № 3. - С. 389-395

24. Тельнов В.А., Голубев Н.М., Юнусов М.С. Умброзин новый алкалоид из Aconitum umbrosum // Химия природ.соедин. - 1976. - № 5. - С. 675-676

25. Anet R. and Marion L. Some structural features of delcosine // Can.J.Chem. -1958. Vol. 36. - № 5. - P. 766-770

26. Skaric V. and Marion L. Reactions of oxodelcosine and interrelation of delcosine and delsoline // Can.J.Chem. I960. - Vol. 38. - № 12. - P. 24332440

27. Нарзуллаев A.C., Матвеев B.M., Сабиров C.C., Юнусов М.С. Строение оксосекодельтерина// Химия природ.соедин. 1988. - № 1. - С. 104-107

28. Cookson R.C. and Trevett М.Е. Aconitum and Delphinium alkaloids. Part II. Interrelation of the functional groups of delpheline // J.Chem.Soc. 1956. - P. 3121-3129

29. Cookson R.C. and Trevett M.E. The functional groups of delpheline // Chem. and Ind. 1954. - № 43. - P. 1324-1325

30. Кузовков А.Д. и Платонова Т.Ф. Исследование аконитовых алкалоидов. XVI. О строении эльделина // Журнал общей химии. 1959. - Т. 29. - Вып. 11.-С. 3840-3845

31. Edwards О.Е., Marion L., and Palmer K.H. Lycoctonine: the "a-iso" and "anhydro-a-iso" compounds // J.Org.Chem. 1957. - Vol. 22. - № 11. - P. 1372-1375

32. Benn M.N., Cameron M.A.M., and Edwards O.E. The alkaloids of Delphinium brownii Rydb. The structure of browniine // Can.J.Chem. 1963. - Vol. 41. - № 2. - p. 477-482

33. Тельнов B.A., Юнусов M.C., Юнусов С.Ю. Строение лаппаконитина // Химия природ.соедин. 1970. - № 5. - С. 583-588

34. Mollov N., Tada М. and Marion L. The structure of lappaconine // Tetrahedron Letters. 1969. - № 26. - P. 2189-2192

35. Chen Q.-H, Wang F.-P, Yu K.-B. Novel product and its derivatives from the reaction of lappaconitine with HI04 // Chinese Chemical Letters. 2000. - Vol. 11.-№8.-P. 689-692

36. Wang F.-P, Chen Q.-H, Li Z.-B, and Li B.-G. Novel products from oxidation of the norditerpenoid alkaloid pseudaconitine with НЮ4 // Chem.Pharm.Bull. -2001. Vol. 49. - № 6. - P. 689-694

37. Wiesner K, Gotz M, Simmons D.L. and Fowler L.R. The structure of aconitine // Tetrahedron Letters. 1959. - № 2. - P. 15-24

38. Wiesner K, Gotz M, Simmons D.L. and Fowler L.R. The structure of aconitine // Coll.Czech.Chem.Commun. 1963. - Vol. 28. - № 9 - P. 24622478

39. Edwards O.E, Los M, and Marion L. Hydroxylycoctotine // Can.J.Chem. -1959. Vol. 37. - № 12. - P. 1996-2006

40. Edwards O.E, Fonzes L, and Marion L. The correlation of chasmanine with browniine // Can.J.Chem. 1966. - Vol. 44. - № 5. - P. 583-589

41. Edwards O.E. and Marion L. Lycoctonine and its oxidation products // Can.J.Chem. 1952. - Vol. 30. - P. 627-645

42. Edwards O.E. and Marion L. Lycoctonine: the environment of the nitrogen // Can.J.Chem. 1954. - Vol. 32. - P. 1146-1148

43. Takayama H, Yamaguchi K.-I, Okazaki T, Aimi N, and Sakai S.-I. Chemical conversion of lycoctonine into aconitine alkaloid, 7-deoxylycoctonine // J.Chem.Soc, Chem.Commun. 1987. - № 11. - P. 818-820

44. Valenta Z. and Wright I.G. The structure and chemistry of hydroxylycoctonine // Tetrahedron. 1960. - Vol. 9. - № 3-4. - P. 284-288

45. Yamada S. Oxidation products of hydroxylycoctonam // Bull.Chem.Soc.Jpn. -1964. Vol. 35. - № 4. - P. 670-672

46. Edwards O.E, Marion L, and Mclvor R.A. Lycoctonine: acid catalyzed rearrangements // Can.J.Chem. 1954. - Vol. 32. - № 7. - P. 708-717

47. Edwards O.E, Marion L, and Stewart D.K.R. The structure of lycoctonine // Can.J.Chem. 1956. - Vol. 34. - № 9. - P. 1315-1328

48. Edwards O.E. Rearrangements during deamination of 4-amino-4-des(oxymethylene)anhydrolycoctonam // Can.J.Chem. 1981. - Vol. 59. - № 21.-P. 3039-3043

49. Edwards O.E., Marion L., and Palmer K.H. The interrelation of delpheline and lycoctonine // Can.J.Chem. 1958. - Vol. 36. - № 7. - P. 1097-1102

50. Cygler M, Przybylska M., Edwards O.E. An acetoxy lactam acid from 4-amino-4-deoxymethyleneanhydrolycoctonam// Acta Cryst. 1982. - В 38. - № 2. - p. 479-482

51. Cygler M, Przybylska M., Edwards O.E. A keto lactam acid from lycoctonine // Acta Cryst. 1982. - В 38. - № 5. - P. 1500-1503

52. Edwards O.E. and Marion L. Lycoctonine: periodate oxidation studies // Can.J.Chem. 1954. - Vol. 32. - № 2. - P. 195-213

53. Cookson R.C. and Trevett M.E. Aconitum and Delphinium alkaloids. Part III. Some rearrangements in the delpheline and lycoctonine series. A monobasic dicarboxylic acid // J.Chem.Soc. 1956. - № 10. - P. 3864-3869

54. Furusawa S. The aconite alkaloids. XXVII. On lucaconine/ /Bulletin of the Chemical Society of Japan. 1959. - Vol. 32. - № 4. - P. 399-403

55. Amiya T. and Shima T. On anhydrodiacetyllucaconitine (diacetyldelcosine, m.p. 159-161°) and its derivatives // J.Org.Chem. 1961. - Vol. 26. - № 7 -P.2616-2617

56. Amiya T. and Shima T. The aconite alkaloids. XXXVII. Anhydro-• diacetyldelcosine (anhydrodiacetyllucaconitine) and its novel hydrogenation //Bulletin of the Chemical Society of Japan. 1967. - Vol. 40. - № 8. - P. 19571960

57. Нарзуллаев A.C., Юнусов M.C. Реакция ликоктониновых алкалоидов с уксусным ангидридом и /з-толуолсульфокислотой // Химия природ.соедин. -1991.-№4.-С. 545-547

58. Edwards O.E. Pyrolysis of diterpenoid ester alkaloids // Chem.Commun. -1965.-Vol. 14.-P. 318-319

59. Wiesner К., Brewer H.W., Simmons D.L., Babin D.R., Bickelhaupt F., Kallos J., Bogri T. The structure of neoline // Tetrahedron Letters. 1960. - № 3. - P. 17-24

60. Султанходжаев M.H., Юнусов M.C., Юнусов С.Ю. Строение караколидина // Химия природ.соедин. 1975. - № 4. - С.481-486

61. Wang F.-P., Liang Х.-Т. Chemisrty of the diterpenoid alkaloids // The alkaloids: chemistry and pharmacology. Ed. Cordell G.A. San Diego: Academic, 1992. - Vol. 42. - P. 151-247

62. Pelletier S.W., Finer-Moore J., Desai R.C., Mody N.V., and Desai H.K. The pyrodelphonine chromophore. Crystal structures of pyrodelphinine and delphinine // J.Org.Chem. 1982. - Vol. 47. - P. 5290-5297

63. Wiesner K., Inada T. The photoreduction of desmethoxypyrodelphonine // JACS. 1969. - Vol. 91. - № 4. - P. 1036-1037

64. Wang F.-P., Pelletier S.W. Preparation and mechanism of 7,17-seco Ci9-diterpenoid alkaloids via pyrolysis of their N-oxides in diglyme // Chenese Chem.Lett. 1991. - Vol. 2. - № 2. - P. 103-106

65. Wang F.-P., Yang J.-S., Chen Q.-H., Yu L., and Li B.-G. New access to 7,17-seco norditerpenoid alkaloids via reduction of the corresponding 8-cfiloro derivatives // Chem.Pharm.Bull. 2000. - Vol. 48. - № 12. - P. 1912-1916

66. Jacobs W.A., and Craig L.C. Delphinine. III. Action of hydrochloric, nitric and nitrous acid on delphinine and its derivatives // J.Biol.Chem. 1940. - Vol. 136. -P. 303-321

67. Desai H.K., Joshi B.S, Ross S.A., Pelletier S.W. Methanolysis of the C-8 acetoxyl group in aconitine-type alkaloids: a partial synthesis of hokbusine A // J.Nat.Prod. 1989. - Vol. 52. - № 4. - P. 720-725

68. Pelletier S.W., Srivastava S.K., Joshi B.S. Alkaloids of Aconitum columbianii // Heterocycles. 1985. - Vol. 23. - № 2. - P. 331-337

69. Pelletier S.W., Ying C.S., Joshi B.S., Desai H.K The structures of forestine and foresticine, two new C19-diterpenoid alkaloids from Aconitum forrestii // J.Nat.Prod. 1984. - Vol. 47. - № 3. - P. 474-477

70. Pelletier S.W., Joshi B.S., Glinski J.A., Chokshi H.P., Chen S.-Y., Bhandary K., Go K. The structures of four new Ci9-diterpenoid alkaloids from Aconitum forrestii Stapt // Heterocycles. 1987. - Vol. 25. - №. 2. - P. 365-366

71. Pelletier S.W., Desai H.K., Jiang Q., Ross S.A. An unusual epimerization of the a-OH-1 group of the norditerpenoid alkaloid delphisine // Phytochemistry. -1990. Vol. 29. - № 11. - P. 3649-3652

72. Wang F.-P., Fan J.-Z., Jian X.-X., Li B.-G. Modifications о f norditerpenoid alkaloids: III. Preparation of 7,17-seco yunnaconitine derivatives via rearrangement of chloroamine // Chinese Chemical Letters. 1999. - Vol. 10. -№5.-P. 379-382

73. Wang F.-P., Li Z.-B., Dai X.-P. and Peng C.-S. Structural revision of franchetine and vilmorisine, two norditerpenoid alkaloids from the roots of Aconitum spp. // Phytochemistry. 1997. - Vol. 45. - № 7. - P. 1539-1542

74. Kulanthaivel P. and Pelletier S.W. Deoxygenation reactions of Ci9-diterpenoid alkaloids // Tetrahedron Letters. 1987. - Vol. 28. - № 34. - P. 3883-3886

75. Kulanthaivel P. and Pelletier S.W. Deoxygenation reactions of Ci9-diterpenoid alkaloids // Tetrahedron. 1988. - Vol. 44. - № 14. - P. 4313-4320

76. Srivastava S.K., Joshi B.S., Newton M.G., Lee D., and Pelletier S.W. Heterolytic fragmentation of deltaline, a norditerpenoid alkaloid // Tetrahedron Letters. 1995. - Vol. 36. - №. 4. - P. 519-522

77. Wang F.-P., Chen Q.-H. and Li B.-G. Novel synthesis of 12,13-seco norditerpenoid alkaloids via semipinacol rearrangement and reaction with Br2-HOAc // Tetrahedron. 2001. - Vol. 57. - P. 4705-4712

78. Wang F.-P. and Xu L. To seek an approach toward the chemical conversion of Ci9-diterpenoid alkaloids to taxoids // Tetrahedron. 2005. - Vol. 61. - № 8. -P. 2149-2167

79. Chen Q.-H. and Wang F.-P. Further studies on synthesis of the 12,13-seco norditerpenoid alkaloids // Chem.Pharm.Bull. 2002. - Vol. 50. - № 10. - P. 1310-1317

80. Wiesner К., Bickelhaupt F., Valenta Z. Structure and substitution of the C-D ring system of delphinine // Tetrahedron 1958. - Vol. 4. - P. 418-420

81. Wiesner K., Bickelhaupt F., and Babin D.R. Rigorous proof of allylic rearrangement in the pyro-iso-pyro change in delphinine // Experientia 1959. -Vol. 15.-P. 93-95

82. Li Z.-B., Chen Q.-H., Wang F.-P., Li B.-G. Oxidation of the norditerpenoid alkaloids isotalatizidine and 6-epiforsticine // Chinese Chemical Letters. -2000. Vol. 11. - № 5. - P. 421-424

83. Chen Q.-H., Xu L., and Wang F.-P. A new access to the cleavage of the N-19 bond of norditerpenoid alkaloids and their derivatives by formation of oxaziridines // Heterocycles. 2002. - Vol. 57. - № 12. - P. 2357-2363

84. Chen Q.-H., Xu L. and Wang F.-P. A novel conversion of norditerpenoid alkaoids into aconane-type deterpenes // Tetrahedron. 2002. - Vol. 58. - P.9431-9444

85. Xu L., Chen Q.-H. and Wang F.-P. A novel rearrangement of the A ring of the immonium salt derives from norditerpenoid alkaloid yunaconitine // Tetrahedron. 2002. - Vol. 58. - P. 4267-4271

86. Bachelor F.W., Brown R.F.C. and Biichi C. The constitution of ring A in aconitine // Tetrahedron Letters. I960. - № 10. - P. 1-9

87. Chen Q.-H., Xu L., Wang F.-P. Preparation of the N,19-seco norditerpenoid alkaloids from norditerpenoid alkaloid yunaconitine // Chinese Chemical Letters. 2003. - Vol. 14. - JVb 2. - P. 147-150

88. Малютин Н.И. Система рода Delphinium L.(Ranunculaceae), основанная на морфологических признаках семян // Бот. журн. 1987. - Т. 72. - № 5. - С. 683-693.

89. Канчуин М.Н., Федоров Н.И. О распространение Delphinium elatum на Южном Урале // Современные направления изучения флоры и растительности: Материалы регион, научн.-практ. конф. Бирск, 2000. - С. 72-74

90. Е. И. Штейнберг. Аконит или бореи,-Aconitum L. // Флора СССР. М.-Л.: Изд. АН СССР. - 1937.-№7.-С. 183-186.

91. Цицилин А.Н., Шретер А.И. Прогноз природных ресурсов Aconitum septentrionale Koelle в Башкирской АССР // Растительные ресурсы. 1990. - Т. 26. - Вып. 4. - С. 513-519

92. Keller V.O. Hellebore group // Arch. Pharm.-1925. Vol. 263. - P. 274-293. -CA.-1925. - Vol. 19.-P. 2500

93. Ross S.A., Desai H.K., Joshi B.S., Srivastava S.K., Glinski J.A., Chen S.Y., Pelletier S.W. The structure and partial synthesis of delelatine, an alkaloid from Delphinium species // Phytochemistry. 1988. - Vol. 27. - №/Г1. - P. 3719-3721

94. Pelletier S .W., Ross S.A., Kulanthaivel P. New alkaloids from Delphinium elatum L. // Tetrahedron. 1989. - Vol .45. - № 7. - P. 1887-1892

95. Pelletier S.W., Ross S.A., Desai H.K. A norditerpenoid alkaloids from Delphinium elatum II Phytochemistry. 1990. - Vol. 29. - № 7. - P. 2381-2383

96. Ross S A. Delphinium elatum L. // Tetrahedron. 1991. - Vol. 47. - № 46. -P.9585-9598

97. Wada K., Yamamoto Т., Bando H., Kawahara N. Four diterpenoid alkaloids from Delphinium elatum. // Phytochemistry. 1992. - Vol. 31. - № 6. - P. 2135-2138

98. Park J.C., Desai Desai H.K., Pelletier S.W. Two new norditerpenoid alkaloids from Delphinium elatum Var. "Black night" // J. Nat. Prod. 1995. - Vol. 58. - № 2. - P. 291-295

99. Самусенко Л.Н., Разакова Д.М., Бессонова H.A., Горелова А.П. Алкалоиды культивируемых видов Aconitum chasmanthum и Delphinium elatum L. // Химия природ, соедин. 1992. -№ 1. - С. 146-148

100. Бессонова Н.А., Саидходжаева Ш.А. Алкалоиды культивируемого растения Delphinium elatum II Химия природ, соедин. 1998. - № 2. - С. 245-246

101. Goodson J.A. Alkaloids of the seeds of Delphinium elatum L. // J. Chem. Soc. -1943.-P. 139-141

102. Strzelecka H. Alkaloids of Delphinium elatum. III. Quantitative and qualitative investigations of alkaloids complex during growth I I Diss. Pharm. Pharmacol. 1968. -Vol. 20. -№3.- P. 319-324

103. Юнусов M.C. Масс-спектрометрия в структурных исследованиях дитерпеновых алкалоидов // Изв. АН. Серия хим. 1997. - № 3. - С. 10961104

104. Юнусов М.С, Рашкес Я.В, Тельнов В.А, Юнусов С.Ю. Масс-спектры дитерпеновых алкалоидов с ликоктониновым скелетом // Химия природ, соедин. 1969. - №6. -С. 515-519

105. Hanuman J.B, Katz А. 'Н -NMR spectra of norditerpenoid alkaloids. A rewiew // J.Nat.Prod. 1994. - Vol. 57. № 11. - P. 1473-1483

106. Pelletier S.W, Srivastava S.K, Joshi B.S, Olsen J.D. Alkaloids of Aconotum colubianum Nutt // Heterocycles. 1985. - Vol. 23. - № 2 - P. 331338

107. Pelletier S.W, Joshi B.S, Glinski J.A, Chokshi H.P, Chen S.-Y, Brandary K, Go K. The structure of four new Cjrditerpenoid alkaloids from Aconitum forrestii Stapt // Heterocycles. 1987. - Vol. 25. - P. 365-366

108. Pelletier S.W, Dailey O.D, Jr., Mody N.V, Olsen J.D. Isolation and structure elucidation of the alkaloids of Delphinium glaucescens Rybd // J.Org.Chem. 1981. - Vol. 46. - P. 3284-3293

109. Юнусов М.С, Рашкес Я.В, Салимов Б.Т, Аметова Э.Ф, Фридлянский Г.В. Особенности отщепления метального радикала у ликоктониновых алкалоидов под действием электронного удара // Химия природ, соедин. -1985.-№ 4.-С. 525-536

110. Gonzales A.G, de la Fuente G, Reina M, Timon I. The stucture of graciline, a new diterpenoid alkaloid from Delphinium gracile // Heterocycles. 1984. - Vol. 22. - № 4. - P. 667-669

111. Gonzales A.G., de la Fuente G., Orribo Т., Acosta R.D. Nevadenine and nevadensine, two new diterpenoid alkaloids from Aconitum nevadense Vechtr I I Heterocycles. 1985. - Vol. 23. - № 12. - P. 2979-2982

112. Achmatowicz O., Jr., Tsuda Y., Marion L. The oxidation of diterpenoid alkaloids // Can.J.Chem. 1965. - Vol. 43. - №8. - P. 2336-2344

113. Molander G.A. Application of lanthanide reagent in organic synthesis // Chem.Rev. 1992. - Vol. 92. - P. 29-68

114. Molander G.A., Kenny C. Intramolecular reductive coupling reactions promoted by samarium diiodide // J.Am.Chem.Soc. 1989. - Vol. 111. - P. 8236-8246

115. Ogawa A., Takeuchi H., Hirao T. Diastereoselective pinacol coupling of alkyl aryl ketones with rare earth metals in the presence of chlorosilanes // Tetrahedron Letters. 1999. - Vol. 40. - P. 7113-7114

116. Nakayama J., Yamaoka S., Hoshino M. Stereoselective synthesis of erythro-and threo-l,2-diols from diketo sulfides via cis-3,4-dihydroxythiolanes // Tetrahedron Letters. 1987. - Vol. 28. - № 16. - P. 1799-1802

117. Namy J.L., Souppe J., Kagan H.B. Efficient formation of pinacols from aldehydes or ketones mediated by samarium diiodide // Tetrahedron Letters. -1983. Vol. 24. - № 8. - P. 765-766

118. Molander G.A., Hahn G. Lanthanides in organic synthesis. 2. Reduction of a-heterosubstituted ketones // J.Org.Chem. 1986. - Vol. 51. - № 7. - P. 11351138

119. Нарзуллаев A.C., Юнусов M.C., Моисеенков A.M., Сабиров C.C Реакция С^-дитерпеновых алкалоидов с натрием в жидком аммиаке // Химия природ.соедин. 1989. - № 3. - С. 372-375

120. Нарзуллаев А.С., Юнусов М.С., Сиротенко Е.Г., Рашкес Я.В., Сабиров С.С. Реакции ликоктониновых алкалоидов с 7,8-метилендиоксигруппой с Na в жидком аммиаке // Химия природ.соедин. 1989. - № 4. - С. 527-532

121. Pelletier S.W., Harraz F.M., Badawi M.M., Tantiraksachai S., Wang F.-P., Chen S.-Y. The diterpenoid alkaloids of Delphinium delavaya Franch var. Pogonanthum (H.-M.) Wang // Heterocycles. 1986. - Vol. 24. - № 7. -P. 1853-1865

122. Rosendaht H.V. // Arb.Pharmacol.Inst.Dorpat. 1895. - Vol. 11. - P. 1

123. Schutze H. And Ulfert F. Lappaconitine // Arch.Pharm. -1922. Vol. 260. -P. 230-243

124. Weidemann G. Alkaloids of monkshood {Aconitum septentrionale Koelle) // Arch.Exptl.Patrol.Pharmakol. 1922. - Vol. 95. - P. 166-180

125. Marion L., Forzes L., Wilkins C.K., Jr., Boca J.P., Sandberg F., Thorsen R., Linden E. The alkaloids о f A conitum s eptentrionale Koelle // С an.J.Chem. -1967. Vol. 45. - № 9. - P. 969-973

126. Przybyska M., Marion L. The crystal structure of des-(oxymethylene)-hydroiodide monohydrate // Can.J.Chem. 1956. - Vol. 34. - № 2. - P. 185-187

127. Mollov N., Taba M., Marion L. Structure of lappaconine // Tetrahedron Letters 1969. - Vol. 26. - P. 2189-2192

128. Юнусов M.C., Рашкес Я.В., Юнусов С.Ю., Саматов А.С. Масс-спектры алкалоидов типа зонгорина. Строение зонгорамина // Химия природ, соедин. 1970. - № 1. - С. 101-107

129. Pelletier S.W., Mody N.V., Venkov А.Р., Mollov N.M. The structure of ranaconitine, a new diterpenoid alkaloids of Aconitum ranunculaefolium II Tetrahedron Letters 1978. - № 50. - P.5045-5046

130. Pelletier S.W., Sawhney R.S., Aasen A.J. Septentrionine and septentriodine: two new Ci9-diterpenoid alkaloids from Aconitum septentrionale Koelle I I Heterocycles. 1979. - Vol. 12. - № 3. - P. 377-381

131. Pelletier S.W., Mody N.V., Sawhney R.S. Carbon-13 nuclear magnetic resonance spectra of some Ci9-diterpenoid alkaloids and their derivatives // Can.J.Chem. 1979. - Vol. 57. - № 13. - P. 1652-1655Я

132. Ross S.A., Desai H.K., Pelletier S.W. New diterpenoid alkaloids from Delphinium staphisafria Linne // Heterocycles. 1987. - Vol. 26. - № 11. - P. 2835-2904

133. Усманова C.K., Тельнов B.A., Юнусов M.C., Абдуллаев Н.Д., Шретер А.И., Филиппова Г.Б. Сепаконитин новый алкалоид из Aconitum septentrionale // Химия природ, соедин. - 1987. - № 6. - С.879-883

134. Joshi B.S., Desai Н.К., Pelletier S.W., Holt E.M., Aasen A.J. Septentriosine a new C2o-diterpenoid alkaloid from Aconitum septentrionale II J.Nat.Prod. -1988. - Vol. 51. - № 2. - P. 265-271

135. Ross S.A., Pelletier S.W., Aasen A.J. New norditerpenoid alkaloids from Aconitum septentrionale I I Tetrahedron. 1992. -Vol. 48. - № 7. - P. 1183-1192

136. Sayed H.M., Desai H.K., Ross S.A., Pelletier S.W., Aasen A.J. New diterpenoid alkaloids from the roots of Aconitum septentrionale: isolation by an ion exchange method // J.Nat.Prod. 1992. - Vol. 11. - № 11. - P. 1595-1606

137. Тельнов B.A., Усманова C.K. Лейконин новый алкалоид из Aconitum 9 leucostomum и Aconitum septentrionale II Химия природ, соедин. - 1992. - №5. С. 538-540

138. Усманова С.К., Тельнов В.А., Абдуллаев Н.Д. Строение нового алкалоида септенина // Химия природ, соедин. 1993. - № 3. - С. 412-414

139. Ross S.A., Joshi B.S., Pelletier S.W., Newton M.G., Aasen A.J. 2-acetylseptentriosine, a new diterpenoid alkaloid from Aconitum septentrionale И J.Nat.Prod. 1993. - Vol. 56. - № 3. - P. 424-429

140. Joshi B.S., Sayed H.M., Ross S.A., Desai H.K., Pelletier S.W., Cai P.,Snyder J.K., and Aasen A.J. Septatisine, a novel diterpenoid alkaloid from Aconitum septentrionale Koelle I I Can.J.Chem. -1994. Vol. 72. - № 1. - P. 100-104

141. Усманова C.K., Юнусова И.М.,Ташходжаев Б.,Бессонова И.А. Структура септедина // Химия природ, соедин. 1995. - № 1. - С. 104-108

142. Усманова С.К., Бессонова И.А. Алкалоиды Aconitum septentrionale К. // • Химия природ, соедин. 1996. - № 1. - С. 77-81

143. Усманова С.К., Бессонова И.А., Мильгром Е.Г. Септерин и септефин -новые алкалоиды Aconitum septentrionale II Химия природ, соедин. 1996.- № 2. С. 225-228

144. Усманова С.К., Бессонова И.А., Абдуллаев Н.Д., Левкович М.Г. Строение акосептина представителя нового типа нордитерпеноидных алкалоидов // Химия природ, соедин. - 1999. - № 1. - С. 113-115

145. Allen F.H., Kennard О., Watson D.G., Brammer L., Orpen A.G., Taylor R. Tables of bond lengths determined by X-ray and neutron d iffraction/ Part 1 / Bond lengths in organic compounds // J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2. 1987. -№ 12.-S1-S19.

146. Зефиров Ю.В., Зоркий П.М. Ван-дер-Вааальсовы радиусы и их применение в химии // Успехи химии. 1989. - Т. 58. - вып. 5. - С. 713746

147. Croasmun W.R., Carlson R.M.K. Two-dimensional NMR spectroscopy. Application for chemists and biochemists / Weinheim. New York, 1987. -511 p.

148. Derome A.E. Modern NMR techniques for chemistry research (Organic chemistry series) / Pergamon. 1987. - 295 p.

149. Atta-ur-Rahman. One and two dimensional NMR spectroscopy / Elsevier. -Amsterdam, 1989. 579 p.

150. Pelletier S.W., Mody N.V., Dailey O.D., Jr. 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy of methylenedioxy group-containing Ci9-diterpenoid alkaloids and their derivatives II Can.J.Chem. 1980. - Vol. 58. - № 17. - P. 1875-1879

151. Жамиерашвили М.Г., Тельнов В.А., Юнусов M.C., Юнусов С.Ю. Алкалоиды Delphinium iliense II Химия природ, соедин. 1977. - № 6. - С. 836-838

152. Pelletier S.W., Sawhney R.S., Desai Н.К., Mody N.V. The diterpenoid alkaloids of Consolida ambigua II J.Nat.Prod. 1980. - Vol. 43. - P. 395-406

153. Pelletier S.W., Mody N.V., Sawhney R.S., Bhattacharryya J. // Heterocycles.- 1977. -Vol. 7. № 1. - P. 327-339

154. Molander G.A., Harris C.R. Sequenced reaction with samarium (II) iodide/ Tandem intramolecular nucleophilic acyl substitution intramolecular Barbier cyclization // J.Am.Chem.Soc. 1995. - Vol. 117. - P. 3705-3716

155. Breitmaier E., Voelter W. Carbon-13 NMR spectroscopy: high resolution methods and applications in organic chemistry and biochemistry / Weinheim. -New York, 1987.-511 p.