Физико-химические основы и приложения бионеорганической химии золота тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.04 ВАК РФ

государственный комитет российской федерации по высшему образований иркутский государственный университет

На правах рукописи

Для олуивбного пользования.

Экз. * 2.

. САФРОНОВ АЛЕКСАНДР ЮРЬЕВИЧ

СИЗИКО-ИМИЧЕСЮШ ОСНОВЫ И ПРИЛ02ЕНИЯ БИОНЕОРГАШЧШГОП ВШИ ЗОЛОТА

Специальность 02.00.04 - Физическая химия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на.< соискание ученой степени доктора химических наук

Иркутск 1995

Работа выполнена в Иркутском государственном университете, Институ-

те влектрохимии им. А. Нарушил а РАН и Оксфордском университете

I

Научный консультант; заслуженный деятель науки и техники РФ, почетный академик РАЕН, доктор технических наук, профессор А.С.Черняк

Официальные оппоненты}

доктор химических наук, профессор Тедорадэе Г.А,, доктор химических наук, профессор Сараэв В.В., доктор химических наук, профессор Бабкш В.А.

Ведущая организация; Иркутский государственный технический;университет

I

Защита состоится "¿У?" 1995 г. в ф чзсов на заседа-

нии диссертационного совета Д 063.32.02 по защити диссертаций на соискание ученой степени доктора химических наук при Иркутском государственном университете по адресу: 664033 г.Иркутск-33, ул.Лермонтова, 126, химический факультет.

Отзывы на автореферат просим направлять по адресу: 664033 г. Иркутск-33, ч/л 4020, ИНУС, ученому секретарю диссертационного сот вета Шевченко Г.Г. .

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке" Иркутского государственного университета.

Автореферат разослан 199Б Г.

Ученый секретарь диссертационного совета, канд. Х1л«. наук ; — Г.Г,Шевченко

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Бионеорганическая химия золота в последнее время усилиями биохимиков, неоргаников, физикохимиков, аналитиков я электрохимиков развивается устойчиво и динамично. В значительной мере ее развитие стимулируется практическим задачами. Теоретические разработки в этой области знаний необходимы для медицины, которая наряду с эффективными золотосодержащими лекарственными препаратами широко использует металлическое и коллоидное золото в гистохимических исследованиях и при создании уникальных по своим возможностям диагностических индикаторов - биосенсоров, позволяющих определять налйчие и концентрацию кизненновакннх ферментов и субстратов In situ. Применение сенсоров делает диагностику более экспрессной и эффективной, менее разрушительной для кивнх организмов, что, безусловно, современно и прогрессивно.

Основополагающее значение для процессов извлечения золота из руд и концентратов имеют исследования кинетики и механизма растворения золота нетоксичными растворителям}! и, в первую очеродь, веществами белковой природа. Последние, широко используются в микробиологических методах переработки золотосодержащего сырья, сущность' которнх заключается в специфическом селективном взаимодействии продуктов метаболизма бактерий - аминокислот, пептидов и белков - с леталлическим золотом и переводе его в растворимое состояние. Хотя )бщая картина процессов транспорта и растворения золота аминокислотами известна, остаются нерешенными вопросы, связанные с мехыгнз-том, кинетикой и энергетикой протекания каждой отдельной стадии. )то предопределило необходимость подробного изучения взаимодействия юлота с белками и белковыми остатками для понимания сущности процессов с целью после,дующей интенсификации их до параметров, прием-[емых для создания эффективной технологии. Кроме того, изучение

&того вопроса имеет с&мостоятвлыюе значение для хщщ вала?« В свяви с ведущимся поиском новых нетоксичных растворителе* агор;) металла, которой необходимы не только для технологии его извлечения, но многочисленных медика- иологических исследований, ДЛЯ некоторых областей гальванотехники и ряда других цедаЙ.

, Изучение окислителью-вооотанаэдательща и влектродащепких свойств аминокислот, пептидов и белков представляет самостоятельный интерес в овязи о быстро развивающимися направлениям!: в йио^лектро- • химии - биоэлектрокатвлизом и биаелаадраочнтааоы* характеризующимися широкий использованием влактрохщич&ских методов * два анаша? белков и их компонентов, а такшо для изучения механивма переноса электронов с белка не ьлвктрод и конформациониого состояния белков ■и модификаторов - промоторов их рвдокс реакций на пове^Сйооти а.свк-тродов. '

Таким образом, выяснение и йвпольвоеаниа на практика, оодорв» закономерностей кинетики и механизма процессов, Гфотекздщхх Не грв-нице раздела маталличиское золото - раствора d*oapfиича г кик М-щаств протеинового ряда, имеет фунданюегальйр» аначвцю ami »метших направлений развития биог зорганнчвской ищи золоте.

Исследования выполнялись в соответствии оплаавМИ научна ко-следовательских работ Иркутского государственного уадюврситвга И • являлись разделам^ цалого ряда тем, входящих В первой вшнейщх научно-исследовательских работ и заказ-нарядов, ут&ерцдошшх головными организациям/ высшей школы Российской Федерации'в период с 1979 по 1994. гг., в том числе в РоаоиЙскую 1ЙЙП "Платиноадв металлы, золото ч серебро России"» Работа вались а оогрудаичестм о Институтом педиатрии БСО РАШ (г.Иркутск) я вехтв* научна* центром аолотодооыващей промышленности Роосии - иркутским ЙШ благородных и редких металлов и алмазов (Иргиредмат), а такте' Центральным науч-но-исследовательскмгг геологоразведочным институтом ШНИГРМ, г.'Ьск-

ва) и Отделом природных дисперсных систем Института коллоидной химии и химий воды АН Украины (г.Киев).

Целью работы явилось детальное изучение физико-химических взаимодействий золота о а^инокислотами, пептидами и белками, приводящих к образованию поверхности« комплексов, окислительно-восстановительным превращениям биоорганических веществ на золоте и, в определенных условиях, к растворению металла с образованием его растворимых комплексных соединений, а также поиск в области практического применения полученных результатов для извлечения золота из различных сырьевых источников этого металла, для гистохимических исследований в медицине й для некоторых вопросов разработки и использования бийсейсоров, о распространением выявленных закономерностей на бяонеорганическую химию нэкоторых Платиновых металлов.

Методы исследований. Комплексно использованы физико-химичпо-

кйо, физические и химические методы исследования. Исходя из г?лект-рбХюамэской природы процессов растворения 'золота, особое внимгчип удалено применению современных электрохимических методов, позволяю-сих получить и оценить такие важные характеристики,, как величина и скорость адсорбцш биоорганических бещэств на золоте, число переносимых электронов, порядок и степень обратимости оцйслителыю-рос-становитг.льных реакций, и корректно описать изучаемые редокс процессы. Надежная интерпретация природа наблюдаемых явлений достигалась 'на основе сочетания электрохимических и спектроскопических

методов, среди-которых наиболее эффективным представляется исполь-

1

зование эллипсбметрии, ИК-спектроскопш внешнего отражения с Фурье-преобразлванием, биолюм;:Н9Сцентных методов, радиоспектроскопии, масс-спектрометрии, УФ-спектроскопии, а также атомно-абсорбционной спектроскопии для решения аналитических задач.

Научная новизна работы характеризуется следующими ее основными

1 1 ■ ■ • 1 >

результатами:

- впервые на основе детального исследования кинетики и механизма процессов, протекающих на границе раздела металлическое золото-растворы веществ протеинового ряда, развиты обоснованные представления о сущности и стадийности явлений в этих гетерогенных системах, имеющие значения для химии и технологии извлечения и использования золота;

- а условиях анодной поляризации золота в растворах некоторых биоорганических веществ открыт на известный ранее для данных! систем биоэлектрокаталитический эффект ускорения процессов растворения этого металла, обусловленный образованием активных биоорганических ион-радикалов, ионизирующих золото;

- впервые на ^сновании выявленных общих закономерностей поведения оиаорганических веществ на золоте и палладии, без использования мембран и трансмембранных градиентов рН, осуществлен направленный контролируемый биоэлектрохимичеокий синтез АТФ на насыщенных водо-ропом палладиевых электродах, модифицированных АТФазой;

- разработан новый (применительно к золоту) метод исследования адсорбции биоорганических веществ, позволяющий получить важные количественные и качественные результаты при изучении кинетики и механизма процесса, а такие структурные и ориентационные характеристики адсорбированных на волотом электрода молекул.

В результате ^проведенных исследований найдены рациональные пути практического применения выявленных закономерностей физико-

химических взаимодействий в изучаемых системах в некоторых областях технологии и медицины:

- разработаны новые способы извлечения волота на металлических отходов, основание на эффекте Оиоэлектрокаталитического растворения золота;

определены целесообразные направления интенсификации и оптимизации процесов биотехнологической переработки золотосодержащего сырья

б

и предлоконв схем!» тестирования биоорганических веществ д1"! определения степени перспективности га применения в микробиологическом выщелачивании и Оъогетерокоагуляции полита;

- разработки новый способ извлечопип золота из упорных золотосодержащих концентратов;

- теоретически обосновано и практически реализовано применение коллоидного золота с нанесенными на его поверхность биоорганическими веществами для получения коньюгатов-меток при гистохимических исследованиях мест локализации физиологически активных ферментов и субстратов в нлаценте человека;

- выявлены теоретические предпосылг'5 создания Оиосенсора на субстраты галяктозооксидазы.

На зашиту выносятся:

- результаты исследования кинетики и механизма процессов взаимодействия золотв с аминокислотами, пептидами и белками и аффект био-электрокатплчтического растворения золота в их присутствии;

- способы интенсификации и оптимизации процессов извлечения эолств из отходов и концентратов в присутствии биоорганических веществ и невидных, растворителей;

- использование электрохимического "протонного насоса" для синтеза зденозинтрифосфата;

- данные по электрохимическому выщелачиванию золотосодержащих концентратов в растворах аминокислот и пептитн и по адсорбции биоорганических веществ на золоте, покезнващи" пути интенсификации кик-

1 *

ро(*ио.погического выщелачиря'щя и биогетерокоягуляади золотя, а также пути использования некоторых белков, тглпчпмп и аминокислот в пч;гохимиччоиом лппяиз« и при создании ''поселсоро&.

Апробация работы. Основные результаты работы докладывались на XIV »"О'.испном Чугяерском совещании по химш: комплексных соединений (Ив'1н<"!."1. ГРвГ), VI Всесоюзной ксм£ерекц:ти по электрохимии (Москва,

1982), XXII Международной конференции по координационной лии (Будапешт, 1982!, IV Всесоюзном совещании по проблеме "Реакционная способность и биологическая активность комплексов бпагородшх металлов11 (Черноголовка, 1982), Всесиозном совещании "Электрохимия и охрана окружающей среда" (Иркутск, 1984), VII Всесоюзном симпозиуме "Двойной слой и адсорбция на тьердцх електродах" (Тарту, 1985), Всесоюзной конференции "Химия и применение неьодных растворов" (Иваново, 1986), Всесоюзном совещь.ми "Применение химико-мсггаллур- • гичвских методов в схемах обогащения полезных ископаемых" (Караганда, 198?), IX Всесоюзном совещании по полярографии (Усть-Каменогорск, 198?), IV Всесоюзном соввща£ши "Проблемы сольватации и комп-лвксообраьования в растворах (Иваново, 1989), III Всесоюзной но;фэ-ренции по злектрокатализу (Черноголовка, 1991), научном семинаре химического отделешя университета г.Феррара (Италия, 1992), научной конференции химического факультета и ИНУСа, посвященной 76-летию Иркутского университета (1993), научных семинарах лаборатории неорганической химии и лаборатории новой химии Оксфордского глвер-ситета (I98ö, 1993).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 37 почетных работ и получено 3 авторских свидетельства.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, • трех размолов, включающих 11 глав, заключения, списка-использованной литературы из 508 наименований, 2 приложений, изложена на 387 страницах и содержи" рисунков и 20 таблиц.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Во введении обосновала актуальность и сформулирована основная Лель работы, оценены ее тгршшгчт^ая значимость и научная нэвиана. Первый раздел' представляет f.обой литературный обзор, лосг.уцт^шый

физико-химическим основой и практическим приложениям бионеорганической зги;,ни золотя. В нем изложены результаты исследований физ'жо--.химических свойств золоте и его поной в-растворах веществ протеинового ряда, рассмотрены проблемы биотехнологии этого моталла, а такта некоторые попроси биосенсорикч, медицины и биоэнергетики применительно к золоту. В последней главе первой части на основании проведенного литературного анализа обоснованы направления и сформулп-рсва:?' эктуальте теоретические и прикладные задачи исследований, проводимых автор м.

Во второй части, "осле обзора испс-льзованннх в работе методов и объектов нсследоввний, приведены основные экспериментальные результата изучения адсорбции и окислительно-восстановительных превращений в системах раствор биосрганического вещества протеинового ряда - металлическое золото и некоторые другие благородные атоллы, проведенного с применением плтрокого набора электрохимических, спектральных и других физических -я физико-химических методов и ттт:т. гягогие из которых б процесса Исследования били пущпелттю рязиптн, а в ряде случаев до полке ггн оригинялыями элементам! и установками.

В fзблЛ схематично суммирован» осиовьне результате исслЗдовй-ннй, проведенных на поляризованных металлах. Анчлиз-получрттх данных показывает, что поведение ипу.йомнх систем существенно зависит от ряда факторов, влияющих на систему, среди которых, особенно вая-ны?31 представляются рН раствора, а такт наличие и величина поляри-зугаего потенциала ка достаточно, шпщчет инертном металле. В зависимости от воздействия этих н ряда других факторов, процессы, проточавдиь в системе, можно разделить из несколько взаимозависимы* стадий, протекающих последовательно яля параллельно.

Наиболее общим свойствам всех изученных биосргекических веществ является их адсорбция на поверхности благоролнох метелясв. Основное внимание при изучении адсорбции в данной работ» удялото

Таблица I. Осноыи^о й.па1строхишческие свойстни веществ протеинового ряда ка электродах из благородии* металлов (I - адсорбция, 2 - специфическое влектроо:шсление, 3 - ускорение ььодного растворения металла электрода, 4 - прямой »лектроакый перенос)

Золото Шштина Палладий Радий

Соединеше 3.0 7.Б 12.0 3.0 7.0 12.0 3.0 7.0 1л. 0 3.0 7.0 12.0

123 1234 123 123 123 123 12 Т2 12 12 ¡12 12

Цистеин +++ 4+4 44- 44- 4ч— + 4- 44 44 44 44 44 44

Глицин — 4— 4- 4- — 4- -•- 4- 4-

Гистидин (-++ +— 4 — 44' 44 44 4- 4- 4- Ч 1- 44

Триптофан 44- 44- 4— '44 44 44 44 44 4+ 44 44 44

Ыетионин 444 444 44- 44 *-4 44 44 44 44 44 +4 44

Аспарагадовая кислота Серин ++ 44 44- 44- 44- 4- 44- 4- 44- I 44- 44- 44-

Глицилглицин 444 +++ 4+4 44- 44- 44-

Цистеилглицин 44 44 44

Цистеилглутами-новая кислота Алрнилаланкн 44 44 + 4 44 4

Триглпщш .+---- 4—

Альбумин ------ ---

Цитохром О * ++ + -

Трипсин 44 ++ 44

Лизоцим Л - 4- 4-

Галактозоокгл-даза АТФаза + + 4-

трем основным классам веществ протеинового ряда - аминокислотам, 'коротга.,: пептидам к белкам. Из огромного класса аминокислот илучекы .шчь те представите ли, которые могут быть названы аурофнлмгями - в

у. О

первую очередь, это серосод» ржащие аминокислоты. Прч изучении адсорбции коротких пептидов наиболее тщательному исследованию подверглись два ряда олигопептидов: дипепгиды, содержаще атом серы, и простейший пептидный ряд гляцин-диглицин-триглицин, не имеющий боковых функциональных групп и позволяющий оценить роль пептидной группы, длины цепи и количества пептидных групп при адсорбции пептидов на золоте. Адсорбцию белков изучали на примере представителей разных классов этого семейства, имеющих в некоторых случаях полярные характеристики в других процессах взпимодействия с зилотом (на пример, альбумин и трипсин при флокуляции коллоидного золота).

Для изучения адсорбции в исследуемых системах был использован метод, основанный на уменьшении количества электричества, поимшего на десорбцию кислорода с поверхности золотого электрода в тгриеуч'т -вии в растворе конкурирующего адсорбата. Дня определения количества биоорганического вещества, адсорбированного на электроде, было сделано допущение, что эта величина эквивалентна количеству кислорсп, вытесненного адсорбатом с поверхности электрода. При исслчдованиг кинетики и механизма адсорбции биоорганичоских веществ на золоте были получены экспериментальные зависимости, отражающие влияние потенциала и времени адсорбции, а также скорости наложения потенциала и концентрации адсорбата на заполнение поверхности , электрода адсорбирующимся веществом. Разработанный новый (применительно к золоту) метод исследования электрохимической адсорбции биоорганических веществ прошел экспер^ентзльнуп апробацию с привлечением традиционно используемых для изучения адсорбции в подобных системах метода радиоактивных индикаторов и вольтямперометрического метода конкурирующей адсорбции на платине.

Для адекватной интерпретации результатов изучения адсорбции аминокислот, пептидов и белков на золоте методом, основанным на

л

конкурентной адсорбции кислорода и исследуемых биоорганических ве-

uidCTB, ниоолодмо имить шОДмьцию о процессах, происходящих на ^поверхности ¡электрода с участием кислородсодержащих частиц в присутствии конкурирующего адсорбента в условиях налагаемого на электрод потенциала адсорбция. Для получении этой информации, состоите поверхности аолотого електрода в киолых, нейтральных и щелочах растворах научали о помощью ИК-спьктроокогши вшиитчэ отражения с рье-npooöpaaobüHüöM, поляризуя электрод в области потенциалов, соответствующей активной адсорбции веществ протеинового ряда на зопо-' те, что позволяло установить основные парамьтры формирования оксидных слоев на поверхности аолотого ыюктрода в исследуемой.системе в условиях внешней поляризации. - '

Как"следует из- табл.1, варьируя влияющие параметра, можно обь-глючить адсорбцию на золото почти всох из изученных веществ (исклю ченивм является альбумин, адсорбция которого без частичного или полного деструктурирования на волоте не получена). При адсорбции аминокислот и олигопептидов на золоте, главным химическим футором, определяющим величину, кинэтику и моханиам адсорбции, является природа функциональных групп боковых цепей Волковых остатков. Наисолев сильно и прочно хемосорбкрукгся на золоте серосодержащие. аминомю-лоты и пепти.ры, причем сера всегда непосредственно участвует во взаимодействии биоорганических веществ с поверхностью золота. Схо-' кспть адсорбционнфо поведения серосодержащей аминокислоты цистеина "(Oys) а дипентида на ее основе цистеилглицина (CysGly) хорошо иллюстрирует рис Л: представленные' на нем кривые имеют типичную для большинства 1шшокислот колоколообразную ф^рму, положение этих кривых в шкал», нормального водородного' электрода ¡трактически не зависит от pH, а максимально значения заполнения в (.для цистерна олиз-.ккв к 0.9 moi'OcjiojH получены в нейтральных растворах Суг-соцчржйщиг белковьх остатков. Значения Кед„, а также некоторые друг/е кинетические паракачрн р,п сорбции Oys и CysGly иа яг готом я.тьм'ооде, рас-

f2

Рис Л. Зависимость яаполпэиия поверхности золотого »яжтрадя пи<тт<'-ином (а) и цистечлглищшоч (й) от готошшолп елсорйцки ири рЧ: 1 -3, 2- 7, 3- 13. Ю~3 И, 3 я 10 В/о, 20 п.

Таблица 2. Кииетичо -лечо параметр« адсорбции тютчича и цистпиггглп

о

щп<о на золотом эл^ктродэ (С^ Ю*' М) Веществ рН В„ЛС..П 0яло_,оГГ о/' К„лг»10 ".л-'М.«

7,5 С-.Г,0

7,0 п(тг/гг !3,0 33,0-1

7,3 4673,93 6.7 4017,197.3 T09.1I

--,-----—-------------------—-

- из уравнения кинотк'мекой йяот<зрмч,

чз уравнения стэшклг^рюй изотерм»/,

\

считанные из уравнений кшвтичоскик и стытоящптХ изоторм, а такжя уравнения Рогинского-?/ш>.яоит, представлены я г-Лч.г. Величины фактора неоднородности { щм С,уя я СунСАу тзгого гфячтичвгки один л-ковы для всех изученных (Л, а кор1рС'-*тя!?ки для констант ^доср^ции ни с измрнениег* рН, ни с нчт, однако мзксга'злышв величины

К получвнн ДЛЯ Н9ЙТр?ЛМ1ЧХ рЯС1ЦО|УЖ. ИПТЙ1««Р'?ТЯ1И»И НЯЛЛРЛЧвМНХ

ЦИСТ91Ш 3 0,0. 0,275 6,9

7 0,0 о.ыо 9,8

1ь 0,0 0,900 И.З

Цистеилглицин 3 0,0 ,0,383 23,0

7 0,0 0,600 13,2

13 0,4 0,517 7,2

Таблица 3. Расчет геометрических параметров адсорбированных на золотом электроде белковых остатков

Вещество • Р-1 ДО^х^Кл п*хЮ"13 емах 8!» А2 * 32,а2

Цистеин 3 3,5 2,2 0,50 3,8

7 4,9 ¿,0 0,85 2,4

13 2,8 1,8 0,40 • 4,5 9,0

Цистеилглицин 3 2,0 1.2 0,Б0 6,6

7 3,1 1.9 0,76 4,0

13 4,2 2.6 0,60 3,2 6,4

*п-количество частиц кислорода, вчтесненных с поверхности при адсорбции белковых остатков (п = АОтах/е).

)

явлений помогает приблизительный расчет поверхности электрода, занимаемой одной молекулой белкового остатка в растБорах с различным рЬ. На основе предположений о возможности молекул Сув и СувИу взаимодействовать с одним или с двумя атомами золота, были рассчитаны площади электродной поверхности, приходящиеся на одну молекулу аминокислот или пептида, адсорированную по одной (Б,) или по двум (Б2) функциональным группам белкового остатка, соответственно. Данные этих расчетов приведены в табл.3. Тьк как максимальная площадь, которую может занижать молекула цистеина, располагаясь'горизонталь-но к поверхности, равна ~Зх7х1С^нм2, а цистеилглицина - -4x11x10"^

г,

нм'', ни 1« одном из изученных случаев полного экранирования поверхности электр ода белковом остатком не' происходит. В то же время достаточно очьаидно, что рассчитанные значения Б должны коррелировать с величинами продольных заполнений, представленных на рис.1. Сопоставление приведенных в табл.2 и 3 и других имеющихся экспериментальных данных приводит к схеме адсорбции Суа и СуеС1у, представлон-

Т4

рНЗ

соон

аь—с!н

/ 5 \ 5 N4:

Су501у. ^ГООН шн сомн

сгн,

5

I

рН7

рН 12

ИМ соо-

5

Т'р ; сн,-01-с

г V

Н}М СО!

/ СИ,

соо-

N4, „ ! ° сн,-сн-(? снгс' ' 1 \ / \ N11 _ „ _

1 п.; м! '

Рис.2. Схема адсорбции цистеииа и цистеилглииина на полотом г>лект

роде из растворов с различным рН. «

ной на рис.2.

]

В тех случаях, когда биоорганические вещества протеинового ряда не содержат серу, механизм адсорбции-их во многом зависит от рН раствора и потенциала адсорбирующего электрода, а в общем вклеив в адсорбционное связывание'значительная роль принадлежит электростатической составляющей. Функцию непосредственного связывания с поверхностью металла в случае отсутствия в структурной цепи серы выполняют другие органические гетероатомы - азот и кислород.

Если изменение потенциала золотого электрода в сторону отрицательных значений ведет только к десорбции биоорганических веществ о

.1

¡и.ьирхносгп и«« видйляющогося на ней молекулярного

водорода (алектротоотшюалониь аминокислот и пептидов в изучаемых условиях не является характерным свойством), то поляризация электрода в противополощом направлении приводит к целому ряду окислительно-восстановительных превращений, протекающих ь нескольких направлениях,. Наиболее обидам к характерным из них является наученное с помощью вращающегося дискового электрода и вращающегося дискового электрода с кольцом специфическое электроокисление белковых остатков на золоте, разнообразное настолько,. нисколько разнообразны бо-кошт функциональные группы пептидов и ам^н^числот. В ряде случаев этот процесс протекает с образованием активных промежуточных продукта радикальього характера,'что, в свою очередь, приводит к биоэ-лвк'грокэдалитическому растворению золота и переходу его в раствор, в виде комплексов Аи(1). Как правило, окислению белковых остатков и сопутствующему ему процессу злактрокаталитичаского растворения золота благоприятствуют уменьшение рН и увеличение концентрации аминокислот и пептидов в растворе, хотя в случае глицилглицина наиболее олугопрзытшши длл растворения золота являются нейтральные раствори (таОл.4). Содержание "олота в растворах удавалось повысить, 'добавляя е раствор до электролиза 10% прогшленкярбоната: при анодной поляризации золотого електрода в водно-пропиленкарбонатных рас-, творах глицилглшццш в раствор переходит в 2-4 раза больше золота, гаи при использовании не содержащих пропиленкарбонат сред.

Согласно приведенным а работе результатам электрохимических и опоктральных исследований, эффект ..усмпенгя «йодного растворения ¡золота в аминокислотных и пептидных растворах, вероятно, во многом поуагюшин природой окисляющейся боковой функциональной грунш, однако немала« роль при этом'принадлежит и способности .аминокислот 'м гсшточои образояиьать комплексные соединении о перешедшим ь ра'.п-вор золотом. Об этим, в частности, свидетельствует сравнение ряда

ТоОлип.п ' ¡¡<\-'!гч9ст80 полото {иг/я 'См"'), растворенного НГ*Т

олзктроллзе в растворах С1уПу различного состав»)

Концентрация ИуИу.М Ю~3 Ю-2 5.1 СГ2,, ТО'"' ?-]ПЛ

Время олэктролизэ,мш 60 60 60 * 5П 50 ~90 ТУЛ 611

ФосФатннй буферный раствор, рН 7.45,Е=1.4 В 2.9 4.6 • 16.4 36.0 57.9

Ю-4 М НаС1 г ри 5.15,

Б =1.3 В 1.9 2.Г. 10.2 14.С 21.3 30.5 10~3 М ПС1, рН 4.65,

Е = 1.4 В 1.9 3.5 13.2 23.1 29.5 4В.2 Ю~2 И N301!, рН 8.1,

Е = 1.7 В 2.2 6.4 17.9 19.6 36.2 54.8

активности изучетшх аминокислот и С1у(31у п процессах электротяг ческого растворония золота с рядом комгшжсообрчзугсцей ш'.тгкн-ч'п указпнтпх веществ. Исходя из получонннх данных, способность б'5|ч<о вы* остатков ускорять анодное растворение золота .убивает м с.ло.пг>"-щей последовательности:

гистидин > глицилглицин > цистега > глицин, триптофпн. Этот ряд соответствует ряду комплексообразующвй способности приведенных веществ, за исключением цистеина, обладающего наибольшей ир аминокислот комплексообразующей активностью по отношении .к золоту. Следовательно, комплексообразование играет з процессах электроквтя-литического растворения золота важную роль.

Другим существенным направлением окислительно-восстановитель-чых превращений является реализация трехкомпонентной поверхностно?, системы золото-дипептид-йелок, в которой возможна реализация прямого электронного переноса между активным центром редокс-белкя, имеющем в своем составе атом металла с переменной валентностью, и поверхностью электрода. Для создания таких систем требуются как рмяния основных закономерности олсорЛции биооргяниччоких промотороп, тяг

1(Г*А

и необходимая селекция при выборе или синтеза бифункционального промото'ра, способного соединить все три компонента на электродной поверхности. Электрохимическое и эллипсом^тричес-кое изучение системы золе- ■ то-дипбптид-цитохром с при различных условиях модификации золотого • электрода пептидами Суа01у и СуаС1и полазало, что определяющая

I

роль адсорбции и ориентации промотора делает важным рН раствора последнего и область потенциалов, при которой реализуется электронный перенос. В данном случае максимальный отклик промотируемой дате "тидом редокс-реакщш цитохрома с удалось получить лишь на электроде, модифицированном в нейтральных растворах пептидов (рис. За,в,г,е), где, согласно данным адсорбционных измерений, С^С1и и СуэИу имеют наиболее удобную для промо-тирования вертикальную ориентацию и самые высокие значения заточения поверхности электрода дипептидп.ш, тогда кал в кислых растворах (рис.Зд) уменьшение отклика связано, о количественным уменьшением адсорбции пгпиДов, а в щелочных (рис.36) адсорбция предполагается кэк минимум через две боковые группы, что делает промотировиние реакции цитохроые о невозможным.

Ипх^дя Г'З общности многих электрохимических свойств золота и платиновых металлов, стал". возможным распространить некоторое выяв-

ите

Рис.3. Циклические вольтамперограммы. измеренные на золотом электроде, модифицированном СувСау (а, б, в) и СуаИи (г,д,е), в 10""4М растворе цигохрома с. Фоновый электролит - 2 >1СГ2М КН2Р04 + Ю-1Ы ЫаОЮ^ (рН 7,0), в раствор модификатора добавляется НдР04 или НаОН. рН: 7,0 (а.в.г.е), 2,0 (д), 12,0 (б). ■Ь 2.10"2 В/о, т 3 мин.

ленный закономерности электрохимического поведения веществ протеинового ряда на золоте на другие металлы. Абсолютно очевидной является схожесть в адсорбционном' поведении цистеина на золоте и плати-

не, а такке схожесть,общих электрохимических свойств аминокислот на всех изученных ме/аллах платиновой группы. Эти факты и сделали возможным использование ' известных закономерностей, используемых при модифкцировании электродов, для замены золотой подложки на паллгди-евий генештор протонов, что позволило впервые реализовать прямой электрохимический синтез АТФ из АДФ и неорганического фосфата на модифицированной ферментом электродной поверхности. Для этого пал-ладиевый электрод насыщали электрохимически генорируемым водородом, модифицировали АТФазой, а затем поляризовали анодно в растворах АДФ, содержащих катионы Ма2* и неорганический фосфат. Синтез осуществлен благодаря потоку протонов от палладиевого электрода к ферменту, адсорбированному на электродной поверхности, как покьзано на рис.4. Биолшинесцонтшй ¿».тоток регистрировали ,;;> специально соз-

люцнфернн, лоциферала (02)

Рис.4. Схема генерации АТФ и фототока с помощью АТФоинтетазн^на поверхности насыщенного водородом палля.яиеаого электрода

дщпюь оригинальна установке, представляющий собой лкишометр, рогпст;1» в Ни изменение концентрации АТФ, генерируемой и рестьор с поверхности поляризуемого электрода.

Тратья часть работы посвящено практическому использованию полученных научных данных в технологии извлечения золота, а такие в некоторых областях медицины и биосенсорики.

Эффект электрокаталитического растворения золота в растворах биоорганических веществ лег в основу двух способов извлечения золота из отходов, решающих задачу получения растворов золота и пригодных для растворения золотосодержащих покрытий в гальванотехнике, гидрометаллургии, а также в лабораторной практике при проведении медико-биологических исследований. Ч предложенных способах получения достаточно концентрированных золотосодержащих растворов электрохимическое растворение золота ведут в присутствии глицилглицича или гистидина, а для повышения степени извлечения золота в растворы глицилглицина добавляют 10 объемных процентов пропиленкарбоната.

Кроме того, основные закономерности кинетики и механизма изученных процессов позволили определить пути интенсификации и оптики>

зации разрабатываемых прогрессивных технологических методов микробиологического выщелачивания и б'/огетерокоагуляции золота и использовать биоэлект^юкаталитический эфХект для извлечения золота из руд и концентратов.

Выявленные при экспериментальных исследованиях особенности кинетики и механизма взаимодействия золота с веществами протеинового ряда и, в первую очередь, отдельных стадий этого процесса - ад-сорб'яии и окисления аминокислот и пептидов и растворения золота в их присутствии - ярились основой при разработке критериев отбора белковых остатков и белков для интенсификации и оптимизации процессов выщелачивания и гетерокоагуляции золота. Ш основании этих данных в работе предлагается принципиальная схема селекционных иссле-

2.0

дований ашшокислот, пептидов, белков и других б^оорганичесглх и биологически реагентов, входящих в состав использующейся или поре-' пективной биомассы в биотэхяологических процессах извлечения золота (рис.5). На первой этапе исследований определяется адсорбционная активность белковых составляющих по отношению к золоту, которая является определяющей для всех последующих превращений в системе. На втором этапе оценивается возможность отобранных реагентов епбди-фгооски окисляться на поверхности золота. Белковые составляющие, специфическое окисление для которых не характерно, являются перспективными реагентами для транспортной стадии биогетерокоагулящш. Белки и белковые остатки, подвергающиеся специфическому окиелг.нию, тестируются в качестве возможных растворителей золота потьг.циоста -тически на ускорешш растворения золота в области потенциал-ш т

микробиологичеокое выщелачивание золота

Рис.1:.. Схема оценки возможности использование белковых остатков для »

нетоксичной технологии переработки золотосодержащего сырья

электроокисления. Вещества, ускорящие анодное растворение, представляют Интеле для микробиологического выщелачивания золота. Эти вещества могут быть использованы в биотехнологических процессах как преобладающие компоненты биомассы или основные составляющие методов выщелачивания, в которых используются соответствующие синтетические реакционные среды. Вещества, специфически окисляющиеся на золотом электроде, но не проявляющие биоэлектрокаталитического эффекта, проходят дальнейшую проверку на природном или близком к природному синтетическом сырье как возможные реагенты для биогетерокоагуляции.

Установление механизма электрокаталитического действия бцрор-ганических веществ на анодное растворение золота позволило на основе полученных закономерностей использовать изученные вещества для извлечения золота из упорных концентратов. Исследование проведено на сульфидных золотосодержащих концентратах, промышленная переработка которых обычными методами неэффективна. Важнейшими составляющи-1 т концентратов являлись сульфидные минералы -пирит (ТеБ^) и ерсе-нопирит (УеАзБ), содержащие субмикроскопичежое золото. В соответствии с полученными данными вольтаршрометричэских измерений, окисление некоторых белковых остатков (а значит, и растворение золота в их присутствии) и вскрытие исследуемых золотосодержащих концентратов происходят при близких анодных потенциалах, поэтому поляризация концентрата способствует переводу золота в раствор с высоким выходом. На базе выполненных исследований создан способ извлечения золота из пиритно-арсенопиритных рудных концентратов в присутствие аминокислот и пептидов.

Кроме технологических задач извлечения золота, выявленные закономерности пригодны для использования в некоторых областях медицины, в частности, при изучении гистохимической локализации ряда ферментов и создании новых типов биосенсоров на электрохимической основе.

Выявленные закономерности кинетики и механизма адсорбции 1Ы1-тидов и белков на золоте помогли разработать новый метод получения коньюгаточ фермент-коллоидное золото и субстрат-коллоидно« »»лото для маркерно-гистохимического выявления локализации энзимов, п ?ак-ке остатков глюкозы и лактата в пгаценте человека. Метод основан на конкурентном замещении белков на поверхности золотых частиц. С помощью разработанного метода удалось установить места локализацп! г плаценте человека энзимов, катализирующих окислительно-восстановительные реакции глутатиона, а также остатков лактата и глюкозы, меченых коллоидном ■золотом, причем использование предлагаемых .чонь-.огатов позволило выявить новые места локализации белков, которые ранее известными гистохимическими методами не опредетялись.

Фвлщвп приобретения

в

-0.5

1 • +

>

\л • _

коллоидам золотом,предварительно стабилизированные альбумином,свойств меченого фермента при добавлении попшднего в раствор, объ-1 ясняется в рамках упомина-

вшихся ыгае закономернос-стэй. Известно, чтс коллоидное золото представлю-' собой отрицательно заряь-нную суспензию, стсбиль-ность которой по;.1ДврШВ8в-тся электростл'пн'" !'!», Бе-Рис.6. Зависимость заполнения поверхно- лковис макр<.л*>чг, 'Свисти золота альбумином (1,2) и трипсином модайствуют с поверхностью (о) от Б_п„.' рН "\0, тптг.,с: 1-50, 2,3- частиц зопота в таких рас-

НДО * Н1'у

200; Сйв'ш Ч,М: I- 5-Ю"5, Г Ю-5 творах в условиях, близких

(О.Р.Э.)

к изучавшимся выше условиям электрохимической адсорбции, увеличивая или уменьшая при атом стабильность коллоида. Данине, приведенные на ряс.8, л сна ггжязывают значительную "положительную" адсорбцию трипсина и еще. более значительную "отрицательную" адсорбцию альбумина на золоте в области потенциалов, близких к точке нулевого заряда. Следовательно, не с.'язывакадийся с золотом адсорбционно альбумин вызывает хорошую стабилизацию коллоидного золота и препятствует флокул.'ции, а трипсин активно адсорбируется на золоте и вызывает флокуляцию коллоида. Способность ферментов коньюгата, в частности, лактат дегидрогонязы и гексокиназы, стабилизировать частшя коллоидного золота, согласно полученным данным, ниже, чем у альбумина, но выше, чем у трипсина. Таким образам, исходя из прямой корреляции адсорбционной и флокулирущей способностей белков, можю полагать, что фермент проникает через неадсорбирукадийся альбумин в приповерхностный слой золотины с последующей слабой адсорбцией из ее поверхности, по существу, занимает вакантные полсгти вокруг частицы золота, образованные "отрицательно" адсорбирующимся на золоте альбумином, не нарушая пт>и этом структуру и стабилизирующие свойства альбуминовых раство|ов из-за сволй относительно низкой флокулируицай способности.

На базе г»М»-кта прямого электронного переноса, продемонстрпро-ваного на пример« поверхностного комплекса золото-серосодержащий дапептнд-пятохроч с и использованного для гистохимического выявления мест локавнзации ферментов, катализирующих реакции глутатиона, возможно создание электрохимических биосенс^ов. Нами были выявлены теоретически 'гр-дяо'илгн для со здания »ле кц ю химического сенсора из галактозу и ря^ячозу, которые т-лятсл субстратам/, фермента га-лакто'. >оою- В - -'»отнетстъии с рвяу ль гагами модельных экспериме-

нтов. ■./->■"с—1 пилт, н'><л«.-даемнП при кручении системы модифицироьа-НШЙ ■( »д-гяляктой'кж'я'днчв-суботрят-кислорол, приняд-

?А

лежит меди, являющийся основной частью активного цен'.ра фермента.

ОБЩЕ вывода

г".

1.Впервнз детально исследовано кинетика и механизм процессов, протекающих ¡¡а границе раздела металлу, «чеков золото-растворы С>'.юор-ганических веществ протеинового ряда и пвмщахся оенбвополагашима для развития бионеорганической х и с ¡.а во экспериментальных данных развиты обоснованные афедставления о сущности и стадийности явлений в изучавшихся гетерогенных системах, имеющие значение для химии и технологии извлечения и использования золота.

2. Изучена' адсорбция нз поляризованной поверхности- золотого

электрода- основных жизненноважннх аминокислот, а такжр ряда да- и

трипептидов и представителей некоторых классов белков. Показана

важность наличия в структурах изучавшихся молекул некоторых (в чао/

тности, серосодержащих) функциональных групп, электростатического состояния поверхности электрода и формы нахождения биоорганических веществ в растворе, что в совокупности определяет основные кинетические параметры и механизм адсорбции вещестЕ протеинового ряда на ', золоте.

3. Для'аминокислот и лелтидов, способных специфически окисля-( ться на золотом электроде, -измеренк основные параметры процессов я

. предложен механизм электроокисления, включающий в некоторых случаях образование промежуточных частиц радикальной природы, а также участие в окислении ду,мерных агрегатов и частиц более высокой степени агрегации. Выявлено опроделяющее значение ориентации изучаемой биоорганической молекулы при ::-;зор,5ции для во послэдутмего злектрооки-. оле.-ля на поверхности золота.

4. Покавчн'\ чт-1 при анодной поляризации золотого электрода в

• Р5

присутствии гистилина, глицилглицина и некоторых других малых молекул происходит значительное ускорение электрохимического растворения золота: потенциал начала' растворения п кислых и нейтральных растворах смещается в область менее положительных потенциалов на 0.6 В но сравнению с потенциалом растворения золота в отсутствие биоорганических веществ. Впервые обнаруженный в данных системах биоэлектрокаталитический эффект обусловлен образованием при специфическом окислении аминокислот и пептидов активных ион-радикалов, способных ионизировать золото, а также образованием комплексов золота с аминокислотами и пептидами, повышающих устойчивость ионов золота в растворе.

5. Изучено влияние ориентации модификаторов на поверхности золота при их адсорбции на прямой электронный перенос в системе золото-дипеитид-цитохром п. О помощью эллютсомэтрических и электро-' химических данных охарактеризован образующийся поверхностный комп-леке, электронный перенос в котором возможен лишь при благоприятном расположении промоторовС}1 а поверхности золота, зависящем от рН растворов этих веществ в процессе модификации золотого электрода.'

6. Для оценки влияния природы электродного материала на выявленные закономерности электрохимического поведения биоорганических веществ протеинового ряда, проведено вольтамперометрическое исследование растворов этих веществ на электродах из платиновых металлов (платина, палладий, родий), углеродных материалов (пирографит, сака), а также стали, свинца, ниобия, тантала и титана. Установлено заметное сходство электрохимического поведения аминокислот и пептидов на золоте, платиновых металлах и углеродных материалах при несколько более и менее силыгчх адсорбционных взаимодействиях по сравнению с золотыми электродами на платиновых металлах и пирографите, соответственно. На всех остальных электродных матьриалэх, характеризующихся активным ростом оксидных пленок на поверхности при цик-

лировании потенциала электрода, ам/нокислоты и пептиды электрохимически неактивны.

7. На основании выявленных общих закономерностей в поведении биоорганичесм« веществ на золоте и пвлладии, впервые осуществлен направленный контролируемый биоэляктрохкмический синтез аденозин-трифосфата на насыщенных водородом палладиевых электродах, модифицированных АТФазвй, без использования естественных и искусственных мембран и трансмембранных градиентов рН. В течение 2-3 мин из растворов АДФ и неорганического фосфата в присутствии катионси магния удалось получить до 10 М АТ$ благодаря потоку протонов через фермент, адсорбированный на поверхности палладиевого электрода. .

8.- используя обнаруженный и изученный эффект биоэлектрокаталл-тичвского раствора-гая золота, разработаны новые способы извлечения золота из металлических отходов и получения растворов золота с коп-центрацией до 60 м"/л>см анодной поляризацией золотосодержащих образцов р тьчение часа в аминокислотных и пептидных средах е отсутствие и в присутствии добавок пропиленкарбопата.

9. Получены данные, позволяющие определить напраачения интенсификации и оптимизации основных методов бис.технологической переработки золотосодержащего сырья - микробиологического выщелачивания и биогетерокоагуляции золота - на принципах замены химических окислителей вог,действием электрического тока, направленной пелекции золо-торастворяющих микроорганизмов и использования, наряду с аминокислотами, коротких пептидов в качестве растворителей золста. Предложена схема вольтамперометрического тестирования биоорганических веществ для • определения степени перспективности и/ г.шменения в указанных биотехж логических ;;хемьх. На базе накопленных. и сЙрабо-ганных данных разработы новый способ изв,~эчения золота из упорных золотосодержащих концентратов в присутствии гистидина и глчшлгли-ЦИН8 ' -

10. Теоретически обосновано и практически реализовано применение колпоилного 3' лота с нянесенными на его поверхность биоорганическими веществами для получения коныогатов, используемых в качестве матки при гистохимических исследованиях мест локализации некоторых физиологически активных ферментов и субстратов (глутатион, глу-татион-пероксидазч, глутатион-редуктаза, остатки лактата и глючозы) в плаценте человека.

11. В результате детального исследования выявлены теоретические предпосылки создания биосенсора на субстраты галактозооксида^ы - галактозу и рафиноау - на основе количественной регистрации ред-окс-отклика прямого электронною переноса, осуществляемого на модифицированном ферментом золотом электроде в присутствии молекулярного кислорода.

12. По нашему мнению, развитие бионеорганическоР химии золота должно предусматривать расширение круга применяемых методов иссле-

с дования и углубление на этой основе представлений о сущности рассматриваемых процессов,0дяль»оЯгаее усложнение используемых биоорганических веществ, а также прикладные исследования, прежде всего, в направлениях, возможности и значение которых доказаны в данной работе. Представляется целесообразным использовать научно-методический спкт, накопленный щч' выполнении данной работы, для развитая бионеорганической химии серебра и платиновых металлов.

СПИСОК НАУЧШХ ТРУДОВ ПО ТЕМЕ ДИССЁГГАиТО

1. Сапронов A.D..Тарасевич Ы.Р..Богдановская В.А.,Черняк A.C. Ускорение электрохимического растворения золота при комплексообра-зованип его с аминокислотами и Ноптидами//Тез.докл. XIV Всесоюзн. Чугээвского совещания по химии комплексных соединений. - Иваново, I9ÖI.-T.2.-C.433-434.

2. Сафронов A.D.,Черняк A.C. Анодное растворение золота в присутствии аминокислот и пептидов//Тез.докл. VI Всесоюзн.конф. по электрохимии. -М.: ВИНИТИ.1982.-Т.3.-С Л30.

3. Сафронов A.D.»,Тарасович М.Р..Богдановская В.А.,Черняк A.C. Влияние комплексооОразоЕания на электрохимическое растворение золоте в аминокислотных и'пептидных растворах//Тез.докл. IV Всесоюзн. совь^лия по щю0.пв„1в "Реакционная способность и биологическая активность комплексов благородных металлов".-ЧерноголовкаЛ9&2.-С.82.

4. Taraaevlch H.R..Safronov A.Yu..Bogdanovskaya V.A..Chernyak A.S. Influence of Complexlng on Electrochemical Gold Dissolution In Solutions of Amino Acids and Peptldes/ZAbstr. XXII International Conference on Coordination Chemistry.-Budapest,1982.-V.2.-P.552.

5. A.c. 3459237, 1ЖИ3 C25C 1/20. Способ извлечена золота из отходов /А.Ю.Сафронов, М.Р.Тарасович, A.C.Черняк, В.А.Богдановская (СССР).-ДСП.

S. Тарасович М.Р. .Сафронов A.D. .Богдановская В.'». .Черняк А ,С.

i

Электрохимическое поведение некоторые аминокислот и пептидов на золоте. Адсорбция глицйлглицина на золотом элпстродэ//Электрохимия .-1983.-Т.19.-С ЛR7-I73.

7. Сафронов А.Ю..Тарасович М.Р..Богдановская В.А..Черняк A.tí. Электроокисленис глиципглипина, гистидинз и цтстеина на золотом эле к троде//Электрохимия.-1933.-Т.IЭ.-С.423-426.

8. Сафронов А.Ю. .Черняк A.C..Богдановен^,: В.А..Тарасевич М.Р. Использование нетоксичных кодалвксообранователей бежовой природы а процессах электрохимического растворения золста//Тез.докл. Всесоюзна совещания "Электрохимия vi охрана окружающей ередн".-Иркутек, 1984.-С.30. °

0. Черняк А.С.,Овчинникова 0.В,,Сафронов A.n. Теория и практика некоторых "новых процессов рястворения и концегг/рирог ,ния золота.', и спреоря7/'Гэз.докл. Ки-ференцпи, поев. ir-o-летию со дня рождения

Д.И.Менделеева.-Иркутск,1984.-С.39-41.

10. Тарасович М.Р..Богдановская В.А. .Сафронов А.Ю.,Черняк A.C. Адсорбция глицшп лицина и некоторых аминокислот на различных электродных мятериалах//ЛкойноП слой и адсорбция на твердых электродах Vil/Ten.докл. Всесоюэн.симпозиума.-Тарту, 1985.• П.31 •'>-317.

11. BogdanovsVaya V.A.,Safmnov A .Yi'i., Tarapé vi ch М.П. .Chemyak A.S. Adsorption And Anodic Oxidation of Glyoylglyclne And Some Amino Acida on a Gold Electmle//J.ElecJ;roanal •0hem.-1ci8f..-V.202.-Г.517-167.

12. Шевцова И.Я..Сафронов А.Ю..Черняк A.C. Влияние нропиленка-рбоната на процессы взаимодействия золота с белковыми остатками // Тез.докл. Всесоюэн.конфэрпнции "Химия и применение наводных растворов" .-Иваново,I986.-Т.2.-С.363.

13. A.c.. 1302995, МКИ3 С25С Т/ГО. С22В II/04. Способ извлечения золота из руд /А.П.Сафронов, М.Г.Тарасович, А.С.Черняк, В.А.Богдановен I, И.Д.Фридман, В.Я.Землянская, В.С.Виленкин (СССР).-ЛСП.

14. Александрова Л.Р..Андреев R.H..Богдановская В.А..Сафронов AS. Адсорбция и электроокисление валина на углеродных материалах// Электрохимия.-1987.-Т.23,* 2.-С.276-Г7 9.

15. Сафронов АЛ). .Цнкунова Г.В.,Минеев Г.Г. ,Кохо О.В.,Чер»як A.C. Электрохимическое поведение тройной системы глицин-иодид-церхлорат на золотом электроде//Эл»ктрохимия.- 1987.- Т.23,* 3.- С. 315-320."

16. Богдановская В.А.,Сафронов А.Ю..Тарасович М.Г.,Черняк A.C. Электрохимичесн je поведение некоторых аминокис чот и пентил/'в га золоте. Свойства золотосодержащих раочяоров глицилглицинч//Радкс>лл. журн!."Электрохимия".-М.:Т987.-12 е.- Дап.ВИНИТИ * ЗПЯЗ-ВЯЯ/Опубл.: Электрохимия.-1989.-Т.25,Ж.-С Л 41.

• 17. Шевцова И.Я.,Черняк A.C.,Сафонов А.Ю. Полярография глици-лглицина и гистидина на золоте в водно-пропиленкарбонатнпх раств'»-

рах//Тез.докл. IX Всессюзн. совещания по полярографии.-Усть-Каменогорск, 1987. -Т. I. -2 с.

18. Сафронов А.Ю..Черняк-A.C. Электрохимические аспекты биохй-микометаллургических процессов//Тез.докл. Всесоюзн.совещания "Применение химико-металлургических методов в схемах обогащения полезных ископаемых".-Караганда, 1987,. -С. 28-29.

19. A.c. 1443473; МКИ3 С2БС Г/20. Способ электрохимического растворения золота из металлических отходов в растворе/А.Ю.Сафронов, А.С.Черняк, И.Я.Шевцова (СССР).-ДСП.

20. Худякова Р.В..Богдановская В.А..Сафронов А.Ю.,Тарасович Н.Р.,Черпак A.C. Адсорбция трипсина на золотом электроде//Электро~ химия.-Т388.-Т.24,Л IQ.-C.I405-I409.

21. Черняк A.C..Сафронов А.Ю. Состояние и актуальные направления исследований в области биотехнологии золота/ЛТерспсктивы применения reo- и биотехнологии для извлечения золита из нетрадиционного сырья/Сборник науч.трудов Иргиредмата.-Иркутск,1988.-С.56-67. .

22. Шевцова И-Я..Черняк A.C. .Сафронов А.Ю. Влияние сол'ватаци-онных•эффектов на электроадсорбцию и электроокисление белковых остатков на золоте//Тез.докл. IV Всесоюзн.совещания "Проблемы сольватации И комплексообразования в растворах".-Иьаново,1989,-С.IF3.

23. Сафронов А.ТР. ,Кристенсся П.А. ИК-спектроскспичвские характеристики поверхности аолотого электрода в растворах с различным pH //Электрохимия.-I99Q. -Т. 26 ,)t 7.-С.869-873.

24. Сафронов А.Ю.,Хилл Х.А.О..Баркер П.,Ди Глерия К.,Леттинг-тон O.K. Влияние pH растворов модификаторов на прямой электронный перенос в система золотой злектрод-пептид-цитохром ^/Фундаментальные и прикладные аспекты эльктроке-;ализа.-'Тез.докл. III Бсесо.ззн.кс нференции по злектрокатализу.-Ч.,1991.-С.29.

25. Шевцова И.Я.,Богдановская В.А..Сафронов А.Ю.,черняк A.C. Влияние,'пропиленкарбон8та на электрохимическое поведение золота в

растворах аминокислот и пептидов/УФундаментальные и прикладные аспекты электрокатализа/Тез.докл. III Всесоюзн.конференции по электрокатализу .-М.,Т991.-С.34.

26. Сафронов А.П..Кристенсен П.А. ИК-спектроскопические характеристики поверхности поляризованного золотого электрода//Фундамен-тальные и прикладные аспекты электрокатализа/Тез.докл. III Всесо-гзн.конференции по электрокатализу.-М. ,1991 .-С.65.

27. Сафронов А.Г). .Александрова Л.Р. .Черных С.Г..Черняк А.С. Электрохимические явления на границе раздела золотой электрод-раствор триптофзна//Электрохимия.-1991.-Т.27,№ Б.-С.648-664. ^

28. Glazyrln A.L. ,Ko]esnlkov S.I..Safronoy A.Yu. Histochemlcal Localization of Oxidized Glutathlune-Catalysing Bizymes in Human Term Placenta//Hlstochem.J.-1993.-V.25.-P.45-50.

29. Сафронов A.10. .Белоусова O.B..БогДановская В.А. .Тарасевяч M.P.,Черняк А.С. Электрохимическое поведение триглицина иа эодоте// Электрохимия.-1993.-Т.294.-С.521-523.

30. Сафронов А.Ю. .Влияние рН раствора на адсорбцию модификаторов и пряюй электронный переносов системе золотой алвктрод-бело-вый остаток-цитохром с//Электрохимия.-1993.-Т.29,* 4.-С.524-528.

31. Сафринов А.Л.,Хилл Х.А.0.,Баркер П.,Ли Глерия К. Электрохимическая адсорбция пептидов-промоторов прямого электронного переноси в растворах с различным рН. Электрохимические исследования // Электрохимия.-1993.-Т.29,* 5.-С..660-663.

32. Саф.ронов А.Ю. .Хилл Х.А.О. Деттингтон O.K.,Ли Глерия К. Электрохимическая адсорбция пептидов-промоторов прямого электронного переноса в растворах с различным рН. Эллипсометрические исследования / /Зле ктрохимия.-1993.-Т.29,# 5. -С.664-^59.

33. Сафронов А.Ю..Кашевск'лй А.В..Серншева Н.В.,Черняк А.С. Адсорбция на золотом электроде серосодержащих аминокислот и пепти-дсз//электрохимия.-Т993.-Т.29,< 7.-С.858-863.