Газо-жидкостная хроматография в технологии низкомолекулярных биорегуляторов тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК УФйЖКИП НАУЧНЫЙ ЦЕЗГГР ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ

Рг- о ~

I и : ;

На правах рукописи

., - Л . -.

ЗЕЛЕНОМ Лариса МарксоБиа

ГАБО-ВДДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ В ТЕХНОЛОГИИ тСТОНОЛЕШЯРШХ БИОРЕГУЛЯТОРОВ

02.00.03 - Органическая химия

Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук в форме научного доклада

Уфа 1993

Работа выполнена в Институте органическое химии Уфимского научного центра Российской академии наук

Научные руководители -

академик РД11 Г.А. Толстихов

доктор хиккчесшах ваук старшин научный сотрудник Б.Ы. Леризн

Официальные оппонента:

доктор химических наук.

профессор

Ы.С. Мифтахов

кандидат хишчэишх ваук доцент

О.К. Кудашэва

Ведущая организация - Научно-исследовательский

технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений, г. Уфа

Зацита диссертации состоится ^ ОЛ/иг^З 199 5 г-в часов на заседании специализирогашюго соБвта

К.002.14.01. при Институте органической химии УКЦ РАН та адресу: 450054, г. Уфа, пр. Октября, 71, Зал заседаний Ученого Совета

С текстом доклада и работами диссертанта моано ознакомиться в научной библиотеке УНЦ РАН

Автореферат разослан "Ш? 1993 г.

Ученый секретарь спецЕадиаировашого совета

доктор химических наук Б.Ы. Леркан

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В последние десятилетия большое внимание удаляется получению биорегуляторов (пестицидов, стимуляторов роста астений, половых феромонов насекомых и др.) для нужд различных отраслей сельского хозяйства. Создаются отечественные технологии производства Бффективных пестицидов, разрабатываются пути синтеза феромонов, отличающихся высокой безопасностью для человека и окру-кащей среды. Постоянный интерес вызывает и созд&нио новых эффективных лекарственных средств.

Эффективность любого биорегулятора зависит от степени ег: химической чистоты, а при наличии стереоизоморов - от их соотношения, поскольку биологическая активность изомурных форм часто сувдственно различается. Поэтому создание технологии производства биорегуляторов и особенно таких сложных процессов, как синтез феромонов, требует нздежных методов анализа на всех стадиях их получения.Соответствующий аналитический контроль необходим также при практическом использовании биорегуляторов.

Среди физико-химических методов анализа органических соединений наибольшие возможности в разделении многокомпонентных смесей, особенно стереоизомерных, имеет метод газо-жидкостной хроматографии <ГКХ), который обладает высокой селективностью, чувствительностью и точностью. Такие достоинства ГЖХ, как экопрессность, экономичность. простота аппаратурного оформления, обеспечили широкое применение указанного метода в аналитическом контроле промышленного органического синтеза, а при анализе примесей в целевых продуктах сдолали его незаменимым. В связи с етим весьма актуальной является разработка газохроматогрофических методов анализа для контроля и оптимизации технологических процессов получения биорегуляторов, а также оценки качества соответствующих препаративных форм и их остаточных количеств в различных средах.

Работа выполнялась в соответствии с планом НИР Института органической химии УЩ РАН по томам: "Синтез низкомолокулярных биорегуляторов" (Я Госрегистрации 01.85.0 050108), "Синтез феромонов и гормональных препаратов насекомых" (# Госрегистрации 01.86.0П0537)"РЕзработка высокоэффективных .химических препаратов для интенсификации промышленного растениеводства и животноводства-"(* Госрегистрации ОТ.9ЛО.0533655).

Цель работы, изучение в условиях га поведения и параметров .'■-•щп'я следующих соединений, являвшихся прсыохуточшлгч, nod;/!-целевыми продуктами получения биорегуляторов: бутан(-ен,-ьн)-1,4-диолоь и их вцотатов, в том числе 'г- и е-ийомеров;

- стерсоизомеров углеводородов ряда с41-сгз и алифатических ненасыщенных Eucmw спиртов ряда с13-с1в;

- ацетатов стереоизомерных алифатических цэпасаденных высших спиртов ряда Cia_Cj.B к метиловых зфиров стереоизсмерных алифатических .неиасвдешшх высших карбоновцх кислот ряда сы~с1П;

- производных 1,2,3,4,7.7-гексахлорбицикло-Г2,2,1] -гепт-2-ена;

- производных хлорбензолов и 1,2,4-трлазола;

- 6-метш1-1,2,3,4-тетраг1!Дро51ирив1Дйн-2,4-дйоац к его прсизЕодашх;

- 9-кэто-?.Е-децвновой и 1-этил-6,7-дяфтор-1,4-дкг1адро-4-оксо-3- -хинолинкарОоновой (дафторхшюлкнкарбоновой) »сяопэт;

- N,N'-тетраметилмэтилендизшща;

- 3,4-даокситетрагидротаофандиоксида-1,i.

В задачу исследования входит создание ГКХ контроля всех технологических стадий получения следующих пестицидов: 1,2,3,4,7,7-Г8Ксахлорбицисло-['2,2,1]-гбптен-2-диш1-5,6-диметален)-сульфлта (эн-досульфан) и 4-пропил-2-(1ы-1,2,4-триазолил-1-метил)-2-(2,4-да-хлорфонил)-1,3-диоксолана (проликоназол), а также разработка ПК методик анализа для всех стадий синтеза форо^на непарного шелкопряда Lyinatrla dispar (даспарлур, 7,8-эпокси-2-метилоктадекан) в одной из компонент феромона хлопковой соеки Heliottüa armígera (9г-гексадеценадь), методик для определения стереоизомеря. .ю сооте-ча синто тичооко го ферошш комнатная мухи Kusoa doraos tica (мускалур, Oz-трикозан), Феромона озимой \х>вки Agrotie segetua (5г-децон-1 -пдацетет), феромоне дуосшй, листовертки íortrlx Ylridam (Ш-тэтрадецэя-1-илацетвт) и др. Зидачей исследования шшо?оя также разработка ГКХ методик ощюдалшшя действуй®«. вещаота (да) в препаратах, созданных на осново синтезированных биорегуляторов в ИОХ У1Щ РАН, и остаточных количеств ДВ в различных средах.

Научная ноеизкз. Методом ГЖХ исследовано взаимодейотвие изомерных алифатических ненасыщенных соединений с„, са-саа (углеводородов, спиртов, ацетатов, ефкров), а . также сероорганических соединений различных классов с неподвижными жидкими фазами (НЕФ) разной природа и полярности. Найдена • зависимость времени удерживания z,l изомеров указанных соединений

от природ« сорбата и Ш>.' Определены селективность НЖФ, характеризуемая коэффициентом селективности (i<e), степень разделения ;х), относит ,лышй удврююэешй обьем (v) и ко&ффщивнты ".слюттрт (хд) исследованных соединений.

Практическая ценность. Создан ГЖХ контроль технологии получения эпдосульфэна и пропиконазола, соответствующие методики вошли в лабораторные perjfeMeHTH на получение эндосульфана и прогшконазола и ТУ на пропиконазол. Разработаны ГЖХ методики анализа для всех стадий синтеза диспарлура и Эг-гексадеценаля, для определения н-(диметиламинометилен)-1,2,4-триазола, 9-кето-2Е-деценовой кислоты и пропиконазола в препаратах•"Базуран", "Апилюр" и "Аскоцин" соответственно.. Методики включены в ТУ на указанные препараты. Разработаны методики определения остаточных количеств пропиконазола в мёде, niN'~твтраметилметйленди8мин8 в воде, воздухе, почве, семенах, шроте я зеленой массе хлопчатника. Указанные методики вошли в пакет документов для Госхимкомиссии, что позволило последней разрешить к применению диспарлур, препараты "Армигаль" (феромон Hello-thla armígera), "Аскоцин", "Апилюр" и "Бисол-2", получаемый на основе n,N'-тетраметилмвтилендиаяина.

Разработаны ПЯС ■ методики анализа синтетических лекарственных препаратов "Доксилан" и "Оксикетацил" и их лекарственных форм. Указанные методики включены в лабораторные регламенты на получение этих препаратов, а на "Доксилан" - во временную фармакопейную статью. Методика анализa дифторхинолинкарбоновой кислоты в полупродукте синтезе пефлоксацина вошла в лабораторный регламент нв получение последнего.

Апробация работа. Результаты работы докладывались на конференций "Применение хроматография на предприятиях химического комплекса" (Пермь, 1989) я Межотраслевом семинаре по теории и практике хроматографии (Уфа, 1991).

Публикаций. По теме диосэртвщю опубликовано 19 статей и тезисы 3 докладов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЦ

I. Хроматографическое поведение, условия разделения и количествешое определенно продуктов синтеза эндосульфана

Нами создал газохроматогрэфнчекий контроль технологии полупро-.юшенцого производства ДВ инсектицидного препарата "Тиодап" - эндосульфана (5), полученного по схемо, приведенной ниже.

а

.¡Лон

Хх04 2'Н»'К

К1 'I ХЗАе

С'

■г пвдц

А

95%

Б

М»ОН,НС1.

С! С1

в 1 с^^Ч/"" г

. С1 С)

4, 76% Ё, 701

Для указанного процесса разраЗоташ Г^Х методики. опрзделакия состава реакционных смесей В продуктов («сходных, промахутощах и целевых). Изучение состава реакционной смэсй, получаемой па наиболее важной для технологии стшцш ещшфоваяия-'П«гр1фовашш 2-буиш-1,4-даола (I), показало, что наряду о цолашш дадататом 2г-бутен-1,4-даола (йг) за';сног побочнкх ровкщй образуются даацв-таты (2е,6,7), а также 2-бутад(-он)-1,4-даолц (Эг.Эе.Ю). Кроме того, в реакционной скаси содержится исходный диол (1-2%).

||Ч5Ао /тОДс ./^ОДо Ц!*81

АоО.]' Хх04" '\JOAo '»[гДс

2Е, 1-2Х 6, 3-5% 7. 0,^-1% 8. 5-7%

Сок ![/Ч>0Н Г"4™ •

он , на^;! ^он'

92,3-555 ЭЕ, 1-2% 10, 3-5%

Идентификация компонентов обсуздаемой реакционной смеси проведена методом Ж с использованием образцов диацетатов (2£,6,7) и диодов (эг.эе.ю), полученных встречным синтезом. Моноацетат 2-бутин-1,4-диолэ (8) Езделчн из реакционной смеси методом препаративной ПК (ПГЖХ) и идентифицирован на основании дашшх ИК-, 1й?Р-с1Ю]<Т]пв и элементного анализа. Моноацетатц диодов (Эх.ЭеДО) и данной реакционной смеси но обнаружены.

Поскольку а реакционной смеси на стад™ А присутствуют одновременно ацетаты и диолы, а последние обычно анализируют в виде диацетзтон, возникла необходимость прямого УЖ анализа даолов. В связи с тем, что при прямом анализе диодов резко возрастают требования к инертности твердого носителя, изучено поведение этих соединений на носителях разной природа и активности: инертном полимерном полихроме-1 и наименее активных из дото^итоенх носителей - хрома-тоно и » нкоз и инертоне-супер. одновременно для пар соединений (2г,2е) и (92,9е) изучена селективность ряда НЖФ: псдиэтилеигли-кольсукцинатп (ПЭГС), полиэтилонгликольядигганзта (ПЭГА) и полиэти-ленгликоль-2-нитротерефтзлата (4ФАР) на колонках 2,4 м яри программировании температуры э интервале 12СЫ80°С.

Хроматографическив характеристики соединений (1,2х/2,3.9х/е, 10) представлены в табл.1. Как видно, на всех исследованных твердая носителях со всеми изученными НЖФ получены достаточно симметричные пики даолов (к близки к I). Отсюда едэдуот, что дизтомитовые силанизировакние носителя нз вносят существенного вклада в асимче-рив пиков диолоз (1,92.93,10). Для трудноделимой пари даолов (Эг.ЭЕ) наибольшая степень разделения'достигнута на ПЭГС (к=1,02 нз ПЭГС, 0,92 - но ПЭГА и 0,22 - на ФФАР). Как следует из сравнения «е, ПЭГС имеет самую высокую салективноть к парам соединений (2г,2Е) и (92.Se). Селективность НЖФ возрастает в ряду ФФАР < ПЭГА < ПЭГС. На всех трех НЯЭ время удерживания диола (9е) меньше, чем диола (Эг), а диа;-етата (9е) больше, чем диацетата (9г), что видно из сравнения V.

Полученные данные позволил»! при анализе диолов вместо полихре-ма-1, работать с которым трудно из-за его высокой электростатаччо ста, использовать диатомитовые силвнизировашше носители хрем^н

м-а«-нм05 или ИШрточ-супйр. Для разделения г/е-изомеров дкац<зтата(2) и его диоло в качестве самой селективной НЖФ выбран ПЭГС (хроматог-рамма приведена на рис.1), а такж« разработана методика количеот-аешюго определения диолов (1,9х,9е,10) и их ацетатов (2?,2е,6~8) в реакционной смеси и целевом диацетате (2г).

Таблица I

Храматогрь±ичвские характеристики с-'.--динэний (1,2г/е,8,9г/е,ю)

(колонки 2,4 м, программирование температуры в инторвало 130- 170°С, стандарт - метанол)

Со Неподвижная жидкая фаза

ода ненца ПЭГС ПЭГА ФФАР

«а V | К К с К а V К X с к о V К К е

Твердый носитель - полихром-1

X 0,84 53,1 0,90 64,5 1,06 34,1

п 26 1,10 0.92 19,7 25,1 1,96 0,26 0,92 0,93 26.7 30.8 1.80 0,17 0,88 0,86 16,2 17,0 1,72 0,15

Э» 0,82 0,84 32,8 36.0 1,04 0,08 0,84 0,92 37.1 39,9 0,90 0,07 0,86 1,00 26.6 25,9 0,24 0,03

8 0,88 51,4 0.92 55,4 1,02 23,1

10 22,9 1.Н 27,0 0,96 20,1

Твердый носитель - хроматон и-А#-нмаз

i 0,78 ш.5 0,86 65,3 1,09 34,1

2г 2е 1,13 1,00 20.0 25.2 1хХХ>, и»сч 0(9а 30,0 1,82 0,20 0,84 0,02 16,3 17,1 1,72 0,16

9е 92 0,87 0,8© 33.0 36,5 0,92 0,06 1,08 1,07 26,0 26,3 0,22 0,02

8 1*20 вы 0,88 54,5 1 1,04 23,1

10 1,17' 2.3,3, 1,13 27,3 теорий юежгель - инертон- 0,96 -супер 20,4

i 0,76 58.0 ©„ш ©5.0 1,04 34,0

2г 2« 1,14 0,98 20.1 25 »5 i 72 0 17 и»1г 0,,9©, '30),| i*ш 0,20 0,88 0,88 16,1 1?,5> 1.3в' 0,24

9е 9г 0,85 0,86 33*7 36,1 п и п ил 0)»85 35.1 и,и.ш 0^90 39>б 0»9г 0 ,07 1,06 1,06 26,5 26,2 1,12 0,07

8 1,12 51,2 0,91 53,8 1,02 22,8

10 1,15 23,0 1:,Ю 27," 0,98 20,2

реакционной масси стада ацшшрования-гидрирования. Колонка 2,4 м, 55 ПЭГС, инортон-супер (0,16-0,20 мм), 130-170°0 (скорость подъема 5 град/мкн о изотермическими участиями 12 мот !п начало) и 4 мин (в конце), расход г&лия 40 см^/мип (СЬгот-Б).

I - додецонса1 (внутренний стандарт); Z- диацетат Оутан-1,4-диола; 3 - диацетат 2г-бутен-1,4-диола; 4 - Оутан-1,4-диол: 5 - диаиэтат 2е-оут>;и-1,4-дипла; 6 - 2е-Йутен-1,4-диол; 7 - ?,г бутан-1,4-даол; 3 - дизцетат 2-буткн-1,4-диола; 0 -мо-нса^етат ?.-буткн-10 - 2 Сутнн-1,4-дасл

Следует отметить, что разработанная методика может представить интерес в различных областях промышленного органического синтеза, поскольку указанные даоли являются базовыми полупродукт ачи в производстве пластмасс, лекарственных средств и других практически ценных еоцэств.

Нами разработана такяэ ГЕХ котодика опрэде;:о:йй котштрации исходного диола (I) в сырье, постаак .аом в еидэ 25« «¡одного раст-Еора. Проведен выбор сорбента, который удовлетворял бы требованиям, предъявляемым к анализу водных растворов диолое, С стой целью исследован гидрофобный пористый полимер - пэлиссрб-1, а также поли-сорб-1, модифицированный следующими 11ЖФ: полиэтиленгликолем-бСОО (ПЗГ-вОСО), ИЭГС, ПЭГЛ (стеклянные колонки 1,2 м, 130-Ш°С хроматограф с детектором по теплопроводности, 20-40% водные растворы дала). Определены к доола (I) и этиленгликоля (внутренний стандарт) при оптимальной температура 160°С (табл.2).

Таблица 2

Коэффициенты асимметриии пиков 2-бутин-1,4-диола и этиленгликоля (колонки 1,2 м, полимерный сорбент, 160°С)

коэффициент асимметрии

Соединение Полисорб-1 Полисорб-1 Г лисорб-1 Полисорб-1

+ПЭГ-6000 +ГОГС +ПЭГА

2-Бутин-1,4-диол 1,44 I, 10 1,24 1,32

Этиленгликоль 1,66 I. 12 1,30 ..46

Из приведенных данных видно, что наг ;злее симметричные шжи даола (I) и этиленгликоля получены на полисорбе-1, модифицированном' ГОГ-6000 (к=1,10 и 1,12 соответственно). Это гозеолило разработать экспресс-метод анализа водного раствора данного диола с применением указанной колонки. Разработанная методика апробирована на товарном дколе (I) и может быть использована в аналитическом контроле его производства Еместо химического анализа по ТУ 64-5-52-79.

На стадии конденсации (стадия Е) при разработке методики количественного определения основного продукта (3) и примесей даацетои (2г,2е,6) использована наиболее селективная к этим ацетатам ННФ -ПЭГС (колош'.а 1,2 м, 80-200°С). В продукте конечной стадии Г - цо-. левом эндосульфанэ (5), образущемг ' в виде г<еси двух стереоизоме-ров (5а,5р), обнаружены в качестве примесей диацетат (3), даол (4)

и соединение с тетрагидрофурановым фрагментом (II). Последнее выделили из реакционной смеси методом ПЛХ и идентифицировали по данным ИК-, ПМР-с^ектров и эль,рентного анализа.

С1-

С1-

С1.

СГ

С1 I

0С>

С1

II

Поведение соединений (5а,р) и (3,4,11), имеющих высокую темпэ-ратуру плавления (>200°С), в условиях ГЖХ изучено нз колонках, заполненных инертоном аш-нмоз с нанесенными Еысокотемпературзшми НЖФ разной полярности - силоксановыми эластомерами ЗЕ-ЗО и ХЕ-60 (табл.3). Из приведенных данных видно, что наиболее симметричные пики анализируемых соединений ()получены на колонке с ХЕ-60. Для труднодвлимых пар соединений (Бр)-(З) и (4)-(П) ХЕ-60 также более селективна, чем ЗЕ-ЗО. (Значения х для указанных пар 0,20 и 0,07 - на ХЕ-60, соответственно 0,05 и 0.03 - на ЗЕ-ЗО).

Таблица 3

Хромотографическио характеристики соединений (3,4,5а,р,П) (колонки 1,2 м, программирование температура в интервале 200-240°С, стандарт - дигексилфталат)

Неподвижная жидкая фаза

Соединение БЕ-30 ХЕ- -60

X V к к к V К к

а с а с

5а 0,64 36,2 1,03 17,0

3 1,22 38,1 1,02 42,1

5Р 0,93 40,1 0,61 0,05 1,05 51,1 0,88 0,20

11 1,32 Я8,0 1,06 70,1

4 1,26 70,0 0,58 0,03 0,93 75,0 0,84 0,07

Эти данные позволили при разработке методик количественного определения продуктов на стада Г а примесей в цел&вом эндосульфане (5) использовать ХЕ-60 в качестве НЕФ .

Таким образом, на основании результатов изучения хроматографа-ческого поведения и условий разделения продуктов многостадийного синтеза эндлоульфана разработаны ГНХ методики анализа, позволяюдаз контролировать весь технологический .¡роцесс с удовлетворительной погрешностью. Так, для диацетата (2г) доверительный.интервал среднего значения (х±Дх)=92,1+0,8Ж, коэффициент вариации (\и)=1,6%, для . эндосульфана (5а) значение (х±Дх)=64,8±0,Э, щЛ,?, для (5)3) соответственно 31,610,5 и 1,92. (при п--8, р=0,95). Применение указанных методик позволило оптимизировать технологию синтеза эндосульфана и получить исходныо данше на проектирование опытной установки.

Наряду со стореоизомеркши сульфитами (5а, р) изучено также хроматографическое поведение на различных НИ> и найдены условия разделения и выделения из сложных смесей других сароорганических соединений: изомерных тиабициклооктанов и тизбициклононанов, сульфидов гапшнового и ментенового рядов, замешенных 2-тиолен-Б,2-длок-ездов, алкиларилульфэнов, 2,Б-дизакещешшх сульфоланов. Так, методом ПГЖХ (колонка с 11ЭГ-20М) выделены в индивидуальном виде двенад-кадцать г/Е-игомерных дизаыещенных сульфоланов (из смаси 2,5-дибинил—, 2-вшшл-5-изопропенил--, 2-винил-2-ые тил-5-изопропенил-, 2,5-изопропенил-, 2,5-дившшл-5-метцл-, 2.с-диБшглл-2,5-диметил-сульфолаиор) и восемь г/е-изомерных соединений (из смеси 2,5-дивинил-, 2-проненил-5-винил-, 2,5-дивишл-З-метил-, г-виш-5-пропенил-З-метилсульфоланов). Установлено, что для есодш. 'НИЙ атого ряда время удерживания Е-кзокероа моньяо, чем г-изомеров.

2.Хроматографичес;сое поведений, идентификация и количественное определенно примесей в техническом ггрошшоназоло

\

I

При создании технологии полупромышленного производства ДВ системного фунгицидного препарата "Тилт" (схема приведена ниже) нами разработана ГЖХ методика определения примесей в целевом техническом продукте (17).

С1 С1 С1 Ц

^ 1 гГЧ

г-Л^

э+ НО I

,<ч/> XV

сГ V 13 а

16 17

Гьзохромзтографическоо изучение состава реакционной снеси, получаемой на заключительной стадии процесса, позволило установить, что наряду с целевил продуктом (17), соедкнегожм (12-16) и растворителями (циклогексан, ДМСО) в указанной смеси содеркятся также г^-дахлор^энзцилбромид (18), (1?4-1,2,4-триазолил-1-метил)(2,4-ди-хлорфешиОкетон (19) и изомер пропиконазола 4-пропил(4ы-Г,2,4-триазолил-1-метил)- 2-(2,4-дихлорфо!ш1)-1,3-джжсол;1н (20), образуются за счет побочных реакций. Идентификация соединений (12-20) проверена по образцам, выделенным из реакционной массы или полученным ястрэчнш синтезом. Соединения (12-20) и указашше растворители присутствуют и в самом продуко (17).

С1

С1

19

СН,-<|

м

С целью количественного определения примесей в целевом продукте (17) методом ГЖХ изучена возможность применения в качестве твердого носителя ккертона-супер, а з качестве К&1> - силоксановых эластомеров ЗЕ-ЗО и ОУ-225 (55). Установлено, что обе эти фазы не пригодны для анализа смеси указанных соединений. Так, на колонке с БЕ-ЗО соединения с галоидной (14,16,18), галоидной и триазольной

(17,19,20) функциями, особенно триязол (13) и диол (12) дают размытие пики, не поддающиеся точной количественной оценке. На колонке с силоксановым эластомером, модифицированном яитрильными группами (0V-225.), который наиболее пригоден для анализа и-сгадоркащих ооеда-' нений, нэ удалось десорбировать триазол (13) с содержащим 0,21.02 масс, и пропиконазол (20). Еысокую эффективность и селективность прояв. . сорбент, который готошг'Ч смещениям (соотношение 1:1 по объему) инертона-супер с нанесенным SE-30 (Ъ%) и того же носителя с 07-225 (5%). В табл. 4. приведены ко и v изученных соединений, полученные на колоше со смешанным сорбентом, и максимальные массовые доли примесей в целевом продукте (17).

Таблица 4

Хроматографические характеристики примесей технического пропиконазола (17) (колонка 1,2 м, смешанный сорбент, программирование температуры в интервале 50-26сЯс, стандарт - гексан)

Соединение С,%масс. к а v

Циклогексан 1,0 1,00 1,7

Дима тилсульфоксвд 2,0 0,87 10,3

Пентан-1,2-диол (12) 0,2 1,14 12,3

1,2,4-Триазол (13) 0,3 1,12 19,0

2,4-Дихлорацетофенон (14) 0,2 1,12 24, 7

2-Мэтил-4-пропил-2-(2,4-дихлорфенил)- 0,7 33,7

1,3-диоксолан (15) 1,™

2,4-Дихлорфонацилбромид (18) (In—I,2,4-Триазолил-1-метил)(2,4-ди- 0,4 1,12 33,7

1,20

хлорфенил Жетон (19) 0,5 46,3

2-Бромметил-4-про1ШЛ-2- (2,4-дихлорфенил)-1,3-диоксолан (16) 1,14

1,7 42,7

4-Пропил-2- ( 4n-I , 2.4-триазолил-1 -ме тил) -2-(2,4-дихлорфеш1л)-1,з-даоксолан (20)

5,0 0,98 70,0

4-Пропил-2-(In-I,2,4-триазолил-1-метил)-2-(2,4-дихлорфе1ш)-1,3-диоксолан (17)

90*2,0 0,92 51,3

*Для пропиконазола (17) даяо минимальное значение С.

Для расчета хроматограмм в качестве внутренних стандартов использовали этилгексшфгалат (определек. з основного вещества) и диметилфталат (определение примесей). Полученные результаты позволили разработать методику анализа технического продукта, по которой для наиболее сложных объектов ГЮС анализа диола (12) и триазола

(13) относительная ошибка определения не правыйсет * 10%, что вполне удовлетворительно для концентрации $ 0,3%.

Указав;! мэтодо.а апроояровэна на опипшх партиях •-рогшшазола и применяется в ЙОХ УНЦ РАН при оценке качества продукта при его по л у чеши.

3. Применение метода ГЖХ в синтезе половых феромонов насекомых

В условиях ГЖХ на полярных ЯЖФ изучено човодониа следующих стереоизомерных алифатических ненасыщенных соединений* углеводородов ряда сА1-с,3, спиртов ряда с10-с1В и их ацетатов, метиловых эфиров кислот ряда c8-cia- Структуры зткх соединений и их хрома-тографичоские характеристики представлены в табл.5,6. Исследование проводили на кварцевых капиллярных колонках (КК) 25 и 50 м и d=0,2 т с нанесенными Н№, в качестве которых использованы 1,2,3-трис-(2-цианэтокси)пропан (ЦЭП) и полиатиленгликолъ-20 ООО (ПЭГ-20М) с эффективностью по додекану соответственно 4623 и 2705 чтг/м, при Ю0°о.

Как и следовало ожидать, для исследованных г- и е-изомерных соединений на колонках с ПЭГ-2СМ и ЦЗП существует линзйная зависимость ко ад относительным удерживаемым объемом (в логарифмическом масштабе) и числом углеродных атомов в цепи, но характер взаимодействия этих, изомеров с указанными различный. Так, на ПЗГ-2Ш, как следует из сравнения v (табл.5,S), r-изомеры углесо-дородоа, ацетатов, гфиров и н-кзоморн спиртов удерживаются слабое. Нз ЦЗП сливав удерживаются s-йзомера ацетатов и эфиров (взаимодействие углеводородов я спиртов с указанной фазой не изучалось). Найдено, что характер взаимодействия стереоизомеров изу-<Гёниых классов соединений не зависит от местоположения двойной связи в цепи, что также следует из сравнения v. Кроме того, найдено, что температура колонки в интервале 100-170°С не влияет на характер удерживания i/в-изошров.

Хроматографпеекка характеристики стерзоизомеров углеводородов и эфиров на капиллярных колонках при оптимальной температуре Стандарт - гексан

Соединение

ПЭГ-20М цэп

Л V X 1°С V к X

ЛЛ с ЛА/

I

ллууч

ЧЛ-ЛЛЛЛ^/

"^Ч-^СООМв СООМ»

соон. соом*

✓Ч^Ч _ ^Л^ С00М» СООМв

ч/ч _ СООМо

Л^Л/Ч/^ СООМв ч/^Ч - СООМв

/У^^Л^/СОСИ»

✓Ч = ЛАЛЛЛ СООМв СООМв

•СООЙв

АЛЛ = ЛЛЛЛЛ СООМв ,СООКо

170 170

140

11,2 11,5

8,0 8,2

6,9

7,1

1,4 0,03 1,4 0,03

1,8 0,06

6 2

100 ' • 2,0 0,06 6,6

130 6,0 6,5 1,9 0,06 - - -

100 8,2 8,7 2,9 0,06 ПО Н,1 9,0 4,9 0,18

120 11,2 И,4 1,4 0,03 130 13,7 11,3 *3,8 0,09

ПО И,2 11,4 0,7 0,03 120 18,5 16,3 2(1 0,09

ПО Н,Э 12,3 1,2 0,03 130 10,8 16,4 3,2 0,09

140 12,9 13,1 1,1 0,03 150 22,6 20,1 3,0 0,09

140 13,3 13,6 0,9 0,03 150 22,9 20,4 2,7 0,09

160 16,0 16,3 0,7 0,02 150 32,0 38,5 2,1 0,06

170 16,1 16,3 0,7 0,02 150 44,9 39,9 2,0 0,06

ХроматограАмческие характеристики стереоизомеров спиртов и : ацетатов на капиллярых колонках при. оптимальной температуре

Стандарт - гексая

Соединение ПЭГ-20М цзп

1°С V 1 к X с 1°С V к к с

-.....-ОН 1 '

ЛЛ-Л/у'0Ав

чЛ-ЛЛ^Аоде Л^АЛАЛ одо

ЛЛ-ЛАЛ/О*' УЧ^АЛЛ/ОАо

(21)

140

140

160 170

170 170

НО

120 120

140 140

140 150 150

18,5

1,3 0,04

16,2 18,5 '18,2 1'2 °'04

18,5

18>1 1,2 0,03

19,5 1,1 0,03

19.2

19,7 1,1 0,03

19.3

23,5 1,0 0,03

23.0

10.1

10>4 0,8 0,03

14.0

14,5 °'7 О'03

13'8 0,7 0,03

14.1

16,1

16.5 °'8 °'03

16,3 0,8 0,03

16.6

16,7

17 1 0,9 0,03 17,1

17 6 0,9 0,02

17,7 18,1 °'8 °'02

НО

130

130

12,9 П.7 19,3 17,9 19,0

150

17.6

24.0 22,8

150 24,3 22,3

. 24,9

150 22,0

28.1 26,8 33,1

31.7

150

150

2.5 0,09

2.4 0,09

2.6 0,08

2,7 0,06 0,9 0,03

3,3 0,13 2,9 0,06

2.5 0,09

Выявленные зависимости в характере удерживания г- и к-изомеров изученных соединений позволяют проводить безэталонную идентификацию каждого изомера в смеси, что попользовано нами при определении е-изомерв (как правило менее активного) в анализа целевых продуктов при разработке новых путей синтеза феромонов. В ходе робо.л определялся стерзолзог ;здый состав фаромонов ооймой (21) к сосновой (22) соьок, дубовой аалаиой листовертки (23) а комнатной мухи (24). Следует отметить, что для с1а, С1Ц ацетатов и углеводорода саз на колонке с ПЭГ-20М время удерживания Е-кномера больше, чем 2-изомера, а на колосе с НЭП для указанных пцотатор - е-иэомора меньиа, чем г-изомера. Для дшшх феромонов разработали методики анализа их стореоизомериого соотвеэ.

Проведении® исследования позволили тлхжэ разработать ГЖХ методики анализа продуктов на всех стадий синтеза диспарлура - 7,8-эпокси-2-мигалоктадекана (27).

снао-^=о

9

НзхСхо"

н2.1с1

совн

25

26

н н

Л-

1 О I

27

Особое внимание уделено анализу продуктов на заБершаодих стадиях синтеза диспарлура при его получении из ацетилена и изо-ва бромистого. При анализе продуктов (КК, НЭГ-20М) установлено, что гидрирование 2-метил-7-октадоцинв (25) на катализаторе Линдлара приводит к смеси г- а е-изомеров 2-метил-7-октадецена (26) в соотношении 88:12. Это соотношение сохраняется и в эпокси-де (27), полученном окислением углеводорода (26) 4-карбометокси-аадбензойной кислотой. Причем,'также как и для углеводорода (26) для эпоксида (2?) время удврквван"Е-изомера больше, чем г-изомера.

Ут-^ма «а»*тл ТЛГУ »»а ттт-1* птояочот'а гтп/>—

..^/^тм «ъ/л./, ими.. ¿(ииУЦоО.ыи' 4 и..< ^ ии н1

дуктов на всех стадиях синтеза 92-гексадеце»;аля.

Н,

свм13№с(сна)в0н -» свн13с=с(сн,)8сн -к свн13с=с(сна)7сн0

20 29

Результата анализа продуктов (КК, ПЭГ-20М), полученных на заперааюцих стаг'ях, показали, что при иис-гидрировании 9-геяаадецин-1-ола (23) наряду о 91-гексадвцэн-1-олом (29) образуется до 3% е-изомера, причем для спирта (29) время удерживания Б-изомэра меньше, чем г-изомера.

Выявленные закономерности в ГЯС поведении г-и е-изсмеров изученных алифатических соединений находят применение в аналити-чэской практике ИОХ УНЦ РАН при безэталонной идентификации продуктов стереонаправленного синтеза феромонов и родственных соединений .

Наряду с алкенами, приведенными в табл.5, наш изучено поведение в условиях ГЖХ (колонки с ПЭГ-6000, ПЭГ-1500) следующих алкенов: 5-метилен-2-нонена, 5-метален-2-ундецена, 5-метилен~2-додоцена, 5-метилен-2-тридецена, бе-иетален-2-нокена, бе-мотилен-

2-ундецена, 5е-мэтилен-2-тридецена, а также 2-,4-металеноктанов, 5-,7-металентридекаков, 5-метиленундекана, 7-метиленгептадекака и

3-метилензамещонных гептана, нонана, ундекана, тридекана. Найдены условия их разделения и выделения из смесей методом ПГЖХ.

4.Количественное определение действующего вещества в препаратах *Базуран", "Алилюр" и "Аскоцин"

Как известно, метод ГЖХ ввиду его высокой чувствительности широко применяется для определения малых концентраций ДЗ в различных препаративных формах. Этот метод использован наш для определения содержания соединений (30-33) в препаратах, созданных в по ело дше года в ИОХ УНЦ РАН. Физические свойства указанных соединений приведены в табл.9.

"Еозурзн" - высокоэффективный иммуностимулятор для зерновых культур, представляющий собой 1%-ный водный раствор гЫдиметил-аминсмэтилен)-1,2,4-триазола (30). Изучено поведение указанпого соединения (водные растворы 0,5-3$) в условиях ГЯХ (стеклянные колонки 1,2 м, полихром-1 с нанесенными ШФ 5% ПЭГ-6000, ОУ-225, БЕ-ЗО, Ю0-150°С). Обнаружено, что при »130° это соединение

Физические свойства соединений (30-33)

Соединение

Т.кш.,°С

т.ш!.,°с

Растворимость

I (30) 79-81/6

ндсг мм рт.ст.

0-СН,-СрОМо (32) 0-(СНя)2-СООМо (33)

215

216

р. в воде и органических растворителях

51 тр-р- в воде

р.. в органических растворителях

тр.р. в воде р. в органических растворителях

тр.р. в воде р. в органических растворителях

частично разлагается, о чем свидетельствует появление на хромзто-грамме двух пиков, один из которых соответствует продукту гидролиза. При температуре <130° соединение (30) необратило сорбируется на колонке. Полученные данные позволили сделать вывод о том, что прямое ГЖХ определение указанного амшопроизводного триазола в водо невозможно.

Для осуществления ГЖХ определения соединения (30) в водном растворе нами применен метод извлечения его из воды органическим растворителем с последующим ГЖХ анализом экстракта. В условиях ГЖХ поведение указанного соединения (О,5-ЗЖ, органический растворитель) изучали на стеклянных колонках 1,2 м, заполненных инерто-ном-супор с нанесенными ШФ 0У-225, БЕ-ЗО (5й), а также смешанным сорбентом (см.стр. 12), при 120-160°С. В качестве экстрагента использовали снс(3, снас13 и гексан, при этом степень извлечения соединения (30) из воды составила соответственно 94 , 86 и 78Ж. Обнаружено, что на хроматограммэ, полученной на колонке с БЕ-ЗО, пик соединения (30) имеет растянутый передний фронт, а на колонке с ОУ-225 указанное соединение необратимо сорбируется. Удовлетворительные результаты получены на колонке со смешанным сорбентом

при 150°С: к =0,92, к=1,12, v=0,52 (внутренний стандарт - хино-лин). Следует отметить, что в данном случае,как и в случае анализа продуктов технического пропиконазола, некоторые из которых содержат триазольные функции, лучшие результаты достигнуты на смешанном сорбенте.

Полученные результаты позволили разработать ГЖХ методику определения ДВ в препарате "Базуран", основанную на извлечении ДЗ из указанного препарата с помощью chciв и последующим анализом экстракта на колонке со смешанным сорбентом (хроматограф с детектором по теплопроводности). Для разработанного метода относительная погрешность определения ДВ в препарато "Базуран" не превышает +33.

"Апшшр" - противороевый препарат, рекомендованный к применению з пчеловодстве, представляющий собой водный раствор (0,3%) феромона медоносной пчелы (ДЗ) - 9-кето-2е-деценовой кислоты (31) и минорных добавок (по 0,003%) - метиловых эфиров фенилуксусной (32) и фенилпрошюновой (33) кислот. Нами изучено поведение соединений (31-33) в условиях ГЖХ на стеклянных колонках 1,2 м с полихромом-I и НЖФ ПЭГ-2СМ, ПЭГС, E-30I (силоксановый эластомер), 0Y-225, (5%) пря программировании температуры в интервале 120190° и температуре испарителя 200-250°с. В процессе изучения обнаружено, что на поведение кетокислоты (31) влияет температура колонки и испарителя, а также природа и полярность НЖФ. Так, на хрсматограмме, полученной на колонке с E-30I при температуре испарителя >220° и температуре колонки >180°, пик кетокислоты -уменьшается, а при температуре испарителя 240° и температуре колонки 190° исчезает полностью. В то же время при температуре испарителя 210° и температуре колонки 170° получены удовлетворительные хроматографические характеристики кетокислоты: постоянное отношение плошадей пиков кетокислоты и внутреннего стандарта, но(31)=1,04. Напротив, на ПЭГ-20М и ПЭГС (120-190°) не удалось получить воспроизводимые хроматографические характеристики кетокислоты, а на 0V-225 вообще отсутствует десорбция ее при указанных температурах.

Полученные данные позволили сделать вывод о том, что прямое ГЯХ определение кетокислоты (31) в воде возможно на слабополярных НЖФ типа E-30I с использованием в качестве твердого носителя полихрома-I. Найден оптимальный температурный режим анализа указанного препарата на колонке о E-30I. Это программирование

температуры в интервале 140-170° со скоростью 12°/тт при температуре испарителя 210°. Определены характеристики удерживания анализируемых компонентов в условиях анализа. Так, у(31)=1,72, у(32)=0,42, у(33)=0,Б8 (внутренний стандарт-диметилфталат).

Результаты работы позволили разработать методику количественного определения котошслоты (31) и эфиров (32,33) в препарате ■"Лпилюр". В данной методика относительная ошибка определения не превышает ±5,23 для кэтокислоты к 1Ю,1й для эфиров, что вполне удовлетворяет требованиям точности при определении малых концентраций.

Разработанные мэтодшш анализа препаратов "Еазуран" и "Лпн-люр" позволяют быстро определять концентрации ДВ в них и рекомендованы к применешвз в аналитическом контроле качества указаншх препаратов.

"Аскоцин" - Еысоко:-;Зйштив;1Уй препарат против аскосфероза пчзл, представляющей собой 25Й раствор пропиюназола (17) в органической среде. Нами разработана методика прямого Г/ОС определения прошшоназола в указшшом препарате с использованием колои-ал 1,3 м с инэртоко:,¡-супер и ЗЕ-ЗО (5%) прк 220°С. Внутренний стандарт для расчета хроматограмм - бис- (2-этилгексил)фталат, Метрологическая характеристика метода: (Х1АХ)=25,410,3«, средняя квадратичная погрешность (о)=0,4, «=1,6£ (при о=8 р=0,95). Методика посто-яшю используется при оценке качества "Аскоцина" при его получении.

5. Определение остаточных количеств ДВ препаратов "Вксол-2" и "Да: цшГв различных сродах

При определении« южропримесвй в анализируемых объектах га-зохроматографические методы анализа вследствие их высокой чувствительности и просготы потеснили физические к хкмическко методы. При втом метод ГКХ, находящий все большее применение в указанной области, осуществляется двумя способами: прямым (использование селективных детекторов) и с предварительным концентрированием пробы; последний наиболее распространен в анализе растительных объектов. Оба эти способа мы применили при разработке ГКХ методик анализа различных сред ка сстаточкыз количества ДВ прег.зрятсв

"Еисол-2" и "Аскоцин", созданных в ИОХ УНЦ РАН и внедренных в практику.

"Ексол-2" - новый иммуностимулятор для хлопчатника и озимой р;щ, представляет собой 60%-ный водный раствор щавелевокислой соли м.м'-тетрамэтилметалендиамина (34) в вода. Указанная соль неустойчива и разлагается (нагревание, или щелочная среда, 20°С) до г>|,ы'-тетраметаиметилендиамина (35).

Газохроматографический анализ соли (34) осуществлен нами в виде ..мина (35). Поведение указанного амина (0,02-3,00 мкг/мл в воде и диэтиловом эфире) изучали на колонках 1,2, 2,4, 3,7 м, которые были заполнены полихромом-1, модифицированным кон- (510%), с ПЭГ-6000 (5-15%), при 70-120° и температуре испарителя Ю0-200°С на хроматографа с плэменно-иокпзациокннм детектором (ОТЩ). Удовлетворительные результаты получены на колонке 3,7 м с полихромом-1, модифицированным хон (8%), с нанесенным ПЭГ-6000 (1595) при температуре колонки и испарителя 110° (время удерживания амина - 145 сек, скорость потока гелия 40 см3/мин, минимально; детектируемое количество амина - 4 «Ю-5 мкг).

ГТолучешше данные позволили разработать высокочувствительный экспресс-метод определения микропримесей амина (35) в воздухе к соли (34) в воде (в виде указанного амина) без предварительного концентрирования пробы, причем для перевода соли в амин к I л пробы воды прибавляли по I мл 0,01 н растворов N004 и гоаисо3. Следует особо подчеркнуть, что прямой анализ амина (35) в данном случае осуществлен с применением ПМД.

Для расчета хроматограмм калибровку проводили по растворам амина в воде (0,02-3,00 мкг/мл). Калибровочный график описывается уравнением прямой с*1,14 « * ь, (для растворов 0,02-0,80

мкг/мл) и уравнением с=1,64 « 10 « и, (для растворов 0,80-3,00 мкг/мл); в приведенных уравнениях ь - высота пика амина на хрома-тогрвмме, мм.

В случае анализа амина в воздухе калибровку проводили по паровоздушным смесям, которые создавали с помощью диффузионного поршневого дозатора на динамической установке (схема Б.Я.Экштат с

34

35

сотр). На данной установке применяли дозатор с капилляром 22 см и <1=0,5 мм. Калибровочные графики, полученные на паровоздушных смесях и па водьых растворах, хорошо согласуются. Относительная по-грзшность определения амина в воде и воздухе -предложенным ютодом не превышает +Юй (диапазон измеряемых концентраций 0,02-3,00 мг/л для воды к 0,02-3,00 мг/к3 для воздуха).

Определение сода (34) в растительных обыадгах и почве проводили г:о аглшу (35). используя способ предварительного концентрирования его лз сухих проб. Обнаружено, что зо влажных образцах под влиянием растительных ферментов указанный амин разрушается. В качеств^ экстрагонта испытали ряд растворителей. Требованиям га-зсхрсматограСического анализа в дагпюм случаз удовлетворяет только диэтилоеый эфир. Найдено, что степень извлечения шина (35) из семян, шрота и зеленой массы хлопчатника, а также почвы нэ менее 60% (экстракция а аппарате Сокслетта, 3 ч). Анализ экстракта проводили в условиях пас, описанных выие. Определению не мешают другие пестицида, применяемые на хлопчатнике.

Полученные данные позволили разработать методику определения остаточных количеств ДВ препарата "Еисол-2" в указанных растительных объектах с удовлетворительной метрологической характеристикой: иикний предел обнаружения соли 0,02 мг/кг, амина - 0,01 мг/кг, размах варьирования 61,2-32,4%, (Х1ЛХ)=?1,8+8,1%; стандартное отклонение 18,7% (для растительных объектов), соответтвенно 57,1-3,4, 6Ь,2±7,3, +7,9% (для ПОЧВЫ) при п-7, р-0,95.

При разработке методики определения остаточных количеств ДВ препарата "Аскоцин" (см. стр. го) в мёде нами тага® использован метод предварительного извлечения пропиконазола из пробы экстракцией органическим растворителем. Найдено, что в данном случае лучшие зкстракг-ошше свойства проявила смесь бензола с даэтило-вым эфиром (2:3). Для хромэтографического анализа экстракта применили колонку со смешанным сорбентом (на осново БЕ-ЗО к ОУ-225), проявившую, как показано ранее, лучшие сорбционные свойства при анализе малых концентраций соединений с триазольной функцией (хроматограф с ГВД). Оптимальная температура анализа 260°С, время удерживания пропиконазола - 140 сок при расходе гелия 40 мл/мин. Расчет хроматограмм проводили методом соотношения со стандартом по высотам пиков. Нижний предел обнаружения пропиконазола - 0,01 мг/кг, среднее значение определения - 9455. Метод избирателен. Другие пестициды и экстрагируемые компоненты мэда определению не

мешают. Метрологическая характеристика метода: (х±Ах)=0,015± 0,0008, в=0,0012, ш=8,0% (при П=Ю, р=0,Э5).

6. Применение ГНХ в анализе синтетических лекарственных средств

Достоинства метода ГЖЗС делают его незаменимым в количественном анализе высокоплавких кристаллических веществ, в том числе термически неустойчивых, зачастую труднорэстворимых в воде и органическихрастворителях. Такие вещества обычно анализируют в виде их производных - соединений более ккзкоплавких или тгазкипя-щих, и кроме того хорошо растворимых в различных растворителях. В табл. 10 приведены физические свойства соединений (36,37.40), а также лх производннх (38,39,41), которые являлись объекта»® изучения при разработке ГЖХ методов анализа синтетических лекарственных средств.

Определение 6-метилурацила в "Огссиметяциле". 5-Гидроокси-6-метил-1,2,3,4-тетрагидропир»а!ИД1Ш-2,4-дкон (36), являющийся основной составной частью лекарственного препарата "Оксиметацил", проявляет свойства адаптогена, иммуномодуляторя и кардиостимула-тора. Это соединение, полученное окислением 6-метил-1,2,3,4-тетрагидрот1р1аядин-2,4-даюна - 6-моталурацила (37), содержит примесь последнего, которая существенно влияет на биологическую активность препарата.

В связи с тем, что для оценки качества "Оксиметацила" требовался кадекный метод определения пиримидина (37) в нем, разработан ГКХ метод определения остаточного количества указанного пиримидина в соединении (36). Соединения (36,37), тугоплавкие и труднорастворимые в еодэ и органических растворителях, переводил:! путем силилирования в триметилсилиловые эфнры -соотве тстпенно в 2,4,5-трис-тримв тилсилилокси-6-метилпиримидин (38) и 2,4-бис-триметилсилилокси-6-м9тк,пшримидш1 (39), которые имеют более низкие температуры плавления и кипения, достаточно хорошо растворимы в органических растворителях. Строение этих соединений подтверждено нвми ИК-, ПМР-спектрами и элементным анализом. В качестве силилирунцих агентов использовали м-триметилсилилдиэтиламин (тнзоед) в ДМФ • и смесь 1,1,1,3,3,3-гексаметилдисилазана (нтю) с триметилхлорсиланом (тйз) в соотношении 10:1 в дкоксане. Отметим,что использование

■Физические свойства соединений, (32-41)

Соединение

Т.кип., иС Т.пл., С

Растворимость

,он

■«V

о

я

Н(.

o^N^S

(36)

(37)

возг.

СНз

OS i (СНЭ)з 1 OSi(CH3>3

1CH3) I сн,

OSi(СНз)з

1 л

(38) I34-135/I мм рт.ст.

(CH3)3Siff

О. /О

А

НСГ I

О- ,0

/X

АсСГ ОАс

сн3

(39)

(40)

I08/I мм рт.ст.

он

>300

340

I6I-I62

тр.р. в воде, н.р. в орга-ниче -ских растворителях

тр.р. в воде и органических растворителях н.р в воде, р в ацето-нитриле, дал.тго

ДМСО

Е.р. в воде, р. в ацото-нитрилэ, ДМФЛ,ТГФ ДМОО

р. в воде, м.р. в бензоле, хлороформе , тр.р. в спирте ацетоне

тр.р. в воде, (41) 148-157/0,08 157-158 Р'

мм рт.ст. ?киГ

раство-

___рителях

тмбоса препаративно более удобно, чем широко распространенной системы нмоб и тмг. Кроме того, при оптимальной температуре (Ю0°С) склилирование заканчивается через 2 ч. Существенная

пп>зш| 1Т!> о «режггатчехпмграу ут*ттР1л*а ^ ппчрл пи по

удовлетворительно разделить их на колонках со сдьбсиолпрннми 1К> силоксановой природа, таких как SE-30, E-3QI, ov-i, 0V-17.

Для расчета хроматограмм в качестве внутреннего стандарта использовали силыироьанннй додециловый спирт (ДДС). Послодний ег.оцили в градуированную и анализируемую смеси перед силллирова-».",'6М. Покачано, "то в условиях ровкаии ДДС нацело сашмрувтся. ЗГстапсадеяо линоияая зависимость между концентрацией (2-10% iiücc.; пг-риадип (37) и соотношением площадей пиков эфира (39) и OKjMviiípcванного ДДС на хроматогреммв (стеклянная колонка 1,2 м с ■.гнчртоном-сумр й 5Ж SE-3G, хроматограф с детектором по теплопро-. годности í > Содо ринка указанного пиримидина в "Оксиметациле", как правило, не вышя 4-62. Для разработанного метода анализа w не рр^ншявт 2,855; (3íiAS)s4,3iO,I4S (при п=3, р=0,95). Методика прошла ^.робации на лабораторных партиях препарата и таблеткахШз fio го я рекомендована для оценки качества "Оксиметацила" и его лекарственной Форш в производстве.

Определение 3,4-диокситэтрагидротиофендиоксида-1,1 в ^оясилпне". 3,4-Диокситетрпгидротиофендиоксид-1,1 (40), являющийся основной составной частью препарата "Доксялан", обладает ка-ропонижающкм, противовоспалительным и обезболивающе действием и рекомендован к применению в виде ЗЖ водного раствора или свечей. С целью разработки ГЯХ методики определения диола (40) в препарате и лекарственных формах нами изучено поведение указанного диола (в ацетоне) в условиях ГЖХ на стеклянных колонках 1,2 м, заполненных хроматонолЛ n-aw-hmds с НХФ ПЭГ-20М, СК'ГФТ-50, E-30I (IOS), при 170-210° и температуре испарителя 280-320°С. Во всех случаях наблюдали частичное разложение диола (40), о чем свидетельствовало появление на хроматограмме двух пиков, один из которых соответствовал продукту разложения - сульфолену-3.

Полученные результаты позволили сделать вывод о том, что прямое ГЖХ определение диола (40) невозможно ввиду его термической неустойчивости. Для ГЯХ о проделай''; указанного диола последний превращали в диацетат (41), для чего к предварительно обезвоженному даолу (40) прибавляли безводный пиридин и свежеперег-нанный уксусный ангидрид. Смесь перемешивали в течение 1,5 ч при комнатной температуре. Строение даацетата (41) подтверждено данными ИК-, ПМР-спектров и элементным анализом.

Изучение поведения даацетата (41) проводили на тех же колонках при 150-190°С. Удовлетворительные результаты получены на ко-

лонко с СКТСТ-50. Так, для пиры соединений дибутилфталэт (внутренний стандарт) - диацетат (41) значение к составляет 1,34, при \/(41ы ,17.

Результаты проведенных исследований позволили разработать методику определения диола (40) в видо длацзтатэ (41) в препарате "Доксилан" и его лекарствошгых формах. Для разработанного метода (х±йх>0,251035г, з-0,014, <#=8% (при г,--3, р=0,95%). Проведена апробация разработанной методики на указашшх объектах.Методика рекомендована для оцедаи их качества и включена во временную фармакопейную статью.

Хромзтогра.1дческое поведение и условия разделения метилового у. этилового эфиров дифторхиноликкарооновой кислоты. При создании технологаи многостадийного синтеза высокоэффективного антибиотика пефлоксацинс, полученного на основе о-дифторбонзола, нами разработана ГКХ методика контроля одной из стадий процесса - гидролиза этилового офира дафторхинолинкарбоновой кислоты (42). Методика предназначена для количественного определения остаточного количества эфира (42) в продукте его гидролиза - дифторхинолинкарбоно-вой кислоте (43). Ввиду того, что указанная кислота является кристаллическим высокоплавким веществом, но растворяющимся в воде и многих органических растворителях, она не может быть объектом прямого гкх анализа. В условиях ГЖХ эту кислоту изучали.в виде ее метилового эфира (44). Физические свойства соединеиий (42-44) приведены в табл. II.

Для превращения (43)—>(44) проводи метилирование кислоты диазометаном. Найдены оптимальные условия этой реакции (30+1° С, диэтиловый эфир, добавка небольшого количества метанола). Строение полученного эфира (44) подтверждено данными элемонтного анализа, а так?" ИК~ и ПМР-спектрами.

Поведение эфиров (42,44) изучали в условиях ГЖХ на колонках 1,2 м с инертоном и-ди и высокотемпературными НЖФ БЕ-30, СКТФТ-50, 07-225 (5-15%) при 240-280°С. Удовлетворительное разделение указанных эфиров получено на БЕ-ЗО (5%) при 250°: к=1,23, \/(42)-1,45, у(44)=1,32, (внутренний стандарт - дигоксилфталат).

Полученные результаты позволили разработать ГЖХ методику определения остаточного количества эфира (42) в продукте его гидролиза (43) при получении пефлокеащша. Относительная погрешность определения данного эфира при содержании 1-2% не более '+5,1%, эфира (44) б пересчете на кислоту (43) - ±2,7%. Указанная метода-

Таблица II Физические свойства соединений (42-44)

СОс~Ш№НИО

Т.ПЛ.

Растворимость

0021 (42)

(43)

:ООМв (44)

148-149

244-245

147

н.р. Р-

в Еоде, в оргатш-ческих растворителях

н.р. в воде р. в ДКФ,

дасо

при ь"

н.р. Р-

в воде, в органических растворителях

ка апробирована на опытных партиях этой кислоты, полученной на полупромышленной установке, и Еключена в лабораторный регламент на получение пефлоксацина.

ВЫВОДЫ

I.Исследовано взаимодействие i- и е-изомеров ненасыщенных соединений алифатического ряда с полярными неподвижными жидкими фазами. Показано, что на жидкой фазе ПЭГ-20М в рядах углеводородов с11-с53, метиловых эфиров карбоновы^, кислот св-с4в. ацетатов с12-с1а г-изомеры удерживаются слабее

е-кзсмеров, у сикртов ряда с1а-сА|1 х~изокори - сильное е-изокеров. На кадкой фазо ЦГШ г-иоомуры указанных ацотатов и г'щ'.роб удерживаются сильное, чем е-иг,омета. Характер удерживания данных отереоизомероз не зависит от расположения двойной связи в цепи, на него не влияет температура хроматографичоской колонки в интерзале 1П0-170°С.

2. Разработаны газохрсматогса^ическио методики определения сторао-• изомерного состава ряда предшественников к феромонов насекомых:

2-ме,глл-7-октадецена, 7.8-эпокси-2-мотилоктадешЦ1, 9-гш:<:эдо-цек-1--слг, Э-трикозена, 5-дсц->н-1-илзцетата, 9-ТитрйД0Ц<ш-1~ и л а це т а т а к 11 - то т р а ду це н - Г -и-'а цо т г I т а.

3. Создан гязохроматогряфическщ! контроль технологии полупрмашюн-ного получе:!ия эндосульфлаа. Идентифицираанц иримеги в техническом про:а1коназолс'. Разработаны газог.роь1атографаче«сие методика анаг.'за продуктов на всех стадиях синтеза Громова попарного шелко>фЯда и одной кн компонент феромона хлопковой совки.

4. Для газохроматографичвокого определения алифатических си, са дколое, 1,2,4-триезола :: соединений с триазолл.пий фуясцией (0,2-Ь,0£ в многокомпонентной смеси) предложено использовать диатоми-тоше твердые носители типа хроматок н-ди-нкез и ииортон-сушр. При анализе триазолов удовлетворительные хроматографические параметры достигнуты на смешанном сорбенте с неполярным и полярным (нитрилсодерхсащим) силоксановыми эластомерами. Разработана методика определения м-(дшетиламшюметилен)~1,2,4-триазола в ьодо.

5. Разработаны г :охроматографические методики определения пролико-нозола в 1фоиаратв "Лскоцин" и Э-кето-йе-деценовой кислоты Е препарате "Апилюр".

О. Разработана методики определения остаточных количеств нропикона-зола ь меде, ц,ы' -тотраметилметилендиамшш п воде, воздухе, почве, семенах, шроте и зеленой массе хлопчатника. Показана возможность применения метода газо-жидкостной хроматографии длй 1фямо-го анализа остаточных количеств м.к'-татраметишетилекдиаминз в нлде (предел обнаружения 0,02 мг/кг) и воздухе (предел обнаруко-

тлч а П ЛО М-Р /4,3'

и , им ни / м / .

7. Разработаны газохроматографические методики определения б-метил-урацила в препарате "Оксиметацил", 3,4-диокситетрагадротиофен-даоксида-1,1 в препарате "Доксилан", 1-этил-б,7-дафтор-1.4-ди-гадро-4_-оксо-3-ШШИНкарбоноБОЙ кислоты в предшественнике антибиотика пефлок^ацкаа.

Основное содержание диссертации изложено в следукацк.

публикациях:

1. Кулакова Р.В., Еарипопа Ф.В., Толстиков Г.А., Зеленова Л.М., Пе :асенко A.A., Спириля Л.З., Джамилев У.Ц. Взакмодейдтвие 3-сульфолена с 1,3-диенами, катализированное комплексами палладия //Изв. All СССР. Сэр. xem.-I980.-JS8.-C.I833-I838.

2. Вострикова О.С., Ибрагимов А.Г., Толстяков Г.А., Зеленова Л.Ц.. Дкемилев У.Ы. Димеризация и содимеризация высших а-олефинов, каталмированяая комплексами циркония //Изв. АН СССР. Сэр. хим,-IS30.-ÄII.-С.2320-2322.

3. Кулакова Р.В., Гайсин Р.Л.. Толстиков Г.А., Зеленова Л.Ц., Дже-К31Л9В УМ. Катализированная низковалентными комплексами никеля теломеризация толуолсульфиновой кислоты с бутадиеном /Л1зв АН СССР. Сер. xidi. 1980.-JflI.-С.26IQ-26I2.

4. Джемилэв У.Ы., Ибрагимов А.Г., Вострикова О.С., Толстиков Г.А.. Зеленова Л.Ы. Ношй метод ß-алкилирования а-олефинов с помощью даалкилалшиннйхлоридов в присутствии каталитических количеств ко?шлексов Ti,Zr и нг //Изв. АН СССР. Сер. xkm.-I98I.-J62.-C.36I-364.

*

б. Вострикова О.С., Ибрагимов А.Г., Толстиков Г.А., Зеленова Л.Ы., Д|вмилев У.М. Содимеризация а-олефинов с„-схо с бутадиеном под действием комплексов циркония //Изв. АН СССР. Сер. хкм.-1981.-JS6.-C.I4I0-I4I2.

У

6. Ишмуратов Г.О.. Балезина Г.Г., Одаюнов В.Н.. Зеленова Л.Ы., Толстиков Г.А. Новый одностадийный путь стереоспецнфичзского

синтеза (z)-ajiKeH-l-ojios из ацетиленовых альдегидов //Изв. АН СССР. Серия хим.-1983.-N3.-С.671-672.

7. Толстиков Г.А.,Лерман Б.И., Комиссарова Н.Г., Звленовя Л.М. Исследование взаимодействия галогоиидов сера с непредельными соединениями. XX. Реакции двухлористой сери с 1-ыетил-4-изопропенил- и 1,4-даетш1-4-винил-1-циклогексенами. Синтез тиа-бициклооктанов и тиабицкклонэианов //Курн. opi1. химии.-1983.-

• Т.XIX.-вып.2.-С.321-332.

8. Толстиков Г.А., Канзафаров Ф.Я., Джемилев У.М., Кантюкова Р.Г., Зеленова Л.М. Электрофильное тиилирование бициклических монотерпенов сероводородом и I-бутантиолом //2урн. орг. химии.-1933.-Т.XIX.-вып.10.-С.2075-2081.

9. Одиноков В.И., Балезина Г.Г., Ишмуратов Г.Ю.. Салимгареева И.М., Богатова Н.Г., Зеленова Л.М., Ыуслухов P.P., Толстиков Г.А. Феромоны насекомых и их аналоги. X. Стереоналравленный синтез i Е, Е) -8,10-додекадн.енола //Хим. природ. сое дин. -1984-JÍ4. -С. 514-

.ч'олстиков Г.А., Шульц Э.Э., Зеленова Л.М., Капина А.П., Казаков üifl. Кинетика взаимодействия г-тиолон-Б.з-даоксидов с 1,3-диенами //Изв. АН СССР. Сер. хим.-1986.-JíI.-с. 37-41.

!.Зеленова Л.М., Берг A.A., Селимов Ф.А., Джемилев У.М. Газохрома-то1*рафическое определение n,n' -тетраметилмешлендиамина в воде и воздухе //Гигиена и санитария.-1988.-JH0.-C.65-66.

Г.Берг A.A., Зеленова Л.Ы., Ломакина С.И., Уыанская Л.И., Ыуринов 10.И. Газохроматографическое определение пропиконазола и его диа-"тираоморов в препаративной форме //Научн.-техн. cö. Сер. Методы анализа и контроля качества продукции. М.: НИИТЭХИМ.-198Э.-rijri.I.- С.1-4.

rip; '-..А., Зеленова Л.М., Уыанская Л.И. Газохроматографический ¡нализ водного раствора 0утин-2-диола-1,4 //Научн.-техн. cö. Чр. Методы анализа и контроля качества продукции. Ы.: НИИТЭХИЫ. 1989.-ВЫП.2.-С.1-3.

14.ЛИСЕВДН Е.А., Тодсткков Г.А., Дгемилев У.М., Комиссаров В.л СШ01УЛЛ1Ш Р.Л., Муллагзлиев И.Р., Зеленова Л.М., Борг A.A. Кин-тяжа и продукты стадий синтеза 1,2,3,4,7,7-гассахлор-бйцисло-t2(2,I]-гвптвн-2-диил-5,6-(метилен)сульфита (эндосульфа-пз). б.Получрчие эндосульфана взаимодействием 1,2,3,4,7,7-гсксахлорбицикло-(2,2,1)-гептен-2-диил-5,6-ди(оксимоталона) с хлористым тионилом //Деп. в ВИНИТИ * 29SI-B89.-I9a0.-30 С.

15.3еленоЕЗ Л.М., Балтина Л.А., Берг A.A., Уманская Л.И., Кривоно-гов В.П., Муринов D.K., Толстиков Г. А. Определение 6-ыетилурацила в сксиметациле методом ГЖХ //Хим.-фарч. жури. -1990 -М.-С.77-79.

*

Ю.ЗеленоваЛ.М..Берг A.A.,ЛомакинаС.И.,Балезинэ Г.Г.Газохроматогра-фическое определение состава технического эндосульфана //Нэучн,-техн. cö. Сер. Методы анализа и контроля, качества продукции. М.: НШТЭХИМ. -1990.-ВЫП.6.-С.1-4.

17.Берг A.A., Зеленова Л.М., Ломакина С.И. Газохроматографическсл определение состава технического пропиконазола //Научн.-техн сб. Сер. Метода анализа и контроля качества продукции, и.: НШГЗ ХИМ.-1991.-вып. 7.-С. 1-4.

18.Толстиков Г.Г., Зеленова Л.М., Уманская Л.И., Ломакина С.К.. Пале тана г.Г.,Селимов Ф.А., Сафиуллин Р.л., Шерешовец В.в. Газохроматографический контроль технологии синтеза зндосульфана -действующего вещества препарата "Тиодан" //Деп. в ВИНИТИ.

» 3705-В92.-I992.-48 С.

19.3еленова Л.М., Уманская Л.И., Михайленко О.И., Муринов D.H.. толстиков Г.А. Определение остаточные, количеств пропиконазола в мёде методом газо-жидкостной хроматографии //Научн.-техн. сб. Сер. Охрана окружапцей среда, вопроса экологии и контроль качества продукции. Ы.: НИИТЭХИЫ.-1992.-ИШ.10.-С.1-4.

20.Зеленова Л.М., Берг A.A., Унанская Л.И., Балезина^ Г.Г. Газохроматографический анализ бутин(-ен,-ан)-I,4-диолов и та ацетатов //Применение хроматографии на предприятиях химического

комплекса Лез .докл. -Пермь.-19ВЭ.-С.75-76.

21 .Зеленова Л.М., Берг А.А., Ломакина С.К., Балезина Г.Г. Газохромзтографическов определение состава технического ондосульфзна //Тез.докл. -Пермь.-1289.-0.133-139.

гг.ЗеленоЕа Л.М., Умансхая Л.й., Берг А.А. Газохроматографическов определение геометрических изомэров полевых феромонов насекомых • //Тез.док.".. Межотраслевого семинара по теории и практике хроматографы.-Уфа.-1991.-С. 50.