Исследование полипептидных токсинов из ядов скорпиона и тарантула тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

I. ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. ПОЖПЕШЩНЫЕ ТОКСИНЫ СЕЛЕКТИВНОГО ДЕЙСТВИЯ

ИЗ ЯДА. ЧЛЕНИСТОНОГИХ (Обзор литературы)

1.1. Токсины селективного действия из яда скорпионов

1.2. Инсектотоксины из ядов пауков и мйогоножек.

1.3. Инсектотоксины из яда перепончатокрылых

Глава П. ИССЛЕДОВАНИЕ ПОЛИПЕПТИДНЫХ ТОКСИНОВ ИЗ

ЯДОВ СКОРПИОНА И ТАРАНТУЛА (Обсуждение результатов)

П.1. Выделение и характеристика токсических компонентов из яда кавказского скорпиона Ви-ЫшБ еиреиа

П.2. Исследование структуры инсектотоксинов И5 и И^А из яда кавказского скорпиона Ви-Ышг еиреиз •••••

П.З. Исследование токсического компонента яда южно-русского тарантула Ьусоза з:твог1епз1з

Глава Ш. ЭКСШШЕНМЬНАЯ ЧАСТЬ.

ВЫВОДЫ.

Одной из центральных проблем современной физико-химической биологии является выяснение молекулярных механизмов транспорта ионов через клеточные мембраны. Особый интерес вызывают ионные каналы, играющие важнейшую роль в процессах нервного возбуждения, мышечного сокращения и т.д. Для исследования ионных каналов широко применяются различные фармакологические средства и, в первую очередь, уникальные биорегуляторы - природные токсины, способные нарушать нормальную работу этих мембранных транспортных систем. Так, с помощью нейротоксинов яда кобр осуществлен детальный анализ рецепторов ацетилхолина, ответственных за формирование и функционирование ионных каналов постсинаптической мембраны. Нейротоксины из яда скорпионов, а также тетродотоксин и батрахотоксин оказались незаменимыми при изучении молекулярной организации быстрых натриевых каналов электровозбудимых мембран. Следует особо отметить, что в ряде случаев природные токсины являются единственным надежным средством идентификации и исследования ионных каналов как в электрофизиологических, так и в биохимических экспериментах. Поэтому поиск новых токсинов представляется весьма актуальной задачей, поскольку позволяет получить эффективные молекулярные инструменты исследования функционально важных компонентов клеточных мембран.

Настоящая работа является частью исследований проводимых в ИБХ им. М.М.Шемякина АН СССР по изучению природных токсинов и использованию их для исследования компонентов возбудимых мембран. Она посвящена разработке метода выделения индивидуальных нейротоксинов из яда кавказского подвида скорпиона ви-ььиз еиреив , который значительно отличается по своему составу от ранее охарактеризованного яда среднеазиатского подвида этого скорпиона. Кроме того, в задачу работы входило исследование структуры инсектотоксинов яда в. еиреиз , а также выделение токсина из яда тарантула Ьусоза аи^<г1епв18 и изучение его механизма действия.

В литературном обзоре рассмотрены вопросы, связанные с выделением, установлением структуры и изучением механизмов действия инсектотоксинов из ядов членистоногих.

Автор выражает глубокую признательность академику Ю.А.Овчинникову за постоянное внимание к данной работе, а также старшему научному сотруднику, кандидату химических наук Е.В.Гришину за ценные советы и помощь в проведении экспериментов.

ВЫВОДЫ

1. Разработан метод фракционирования яда кавказского подвида скорпиона ВиШиз еиреиз , в результате чего получены в индивидуальном виде нейротоксины для млекопитающих М^-р М^» М^д и инсектотоксины Ид и ИдА.

2. Установлена полная аминокислотная последовательность инсекто-токсинов Ид и ИдА; получена информация о локализации внутримолекулярных дисульфидных связей молекулы токсина ИдА.

3. Разработан метод выделения белкового токсина из яда южнорусского тарантула Ьуооза з1пвог1епз1з . Показано, что этот токсин может быть использован для исследования кальциевых каналов гладких мышц.

1. Zlotkin Е. Chemistry of animal venoms.- Experientia, 1973, v. 9, N 7, p. 1453-1466.

2. Beard R.L. Venoms of Braconidae. in: Arthropod venoms, S. Bettini, ed., Springer-Yerlag Berlin Heidelberg Hew York,1978, p. 773-800.

3. Zlotkin E., Miranda P., Rochat H. .Chemistry and pharmacology of Buthinae scorpion venoms. in: Arthropod venoms, S. Bettini, ed., Springer-Verlag Berlin Heidelberg ïiew York, 1978,p. 317-369.

4. Орлов Б.H,,"Егоров В.В., Гелашвили Д.Б. Биологические основы действия яда скорпионов на организм. Биол.науки, 1981, т.2, с. 45-56.

5. Zlotkin E., Teitelbaum Z., Lester D., Lazarovici P. Toxins selective to insects derived from scorpion venoms. in: Hatural Toxins, Eaker D.E., Wadstroem T., éd., Pergamon, Oxford Hew York , 1980, p. 637-646.

6. Yahel-Niv A., Zlotkin E. Comparative studies on venom obtained from individual scorpions by natural stings. Toxicon,1979, v. 17, H 5, p. 435-446.

7. Zlotkin E., Yahel-Niv A. Diversity in the composition of venom successively secreted by individual scorpions. Toxicon, 1979, v. 17, sup. И 1, p. 209.

8. Zlotkin E., Shulov S. Recent studies on the mode of action of scorpion neurotoxins. A review. Toxicon, 1969, v. 7, 2ST 3, p. 217-221.

9. Zlotkin E., Praenkel G., Miranda P., Lissitzky S., Shulov A. The effect of scorpion venom on blowfly larvae. in: Toxins of animal and plant origin, Tel-Aviv University,- 98 1.rael, 1972, p. 729-740.

10. Zlotkin E., Miranda P., Lissitzky S. A factor toxic to crustacean in the venom of the scorpion Androctonus australis Hector. Toxicon, 1972, v. 10, Я 3, p. 211-216.

11. Zlotkin E., Martinez G., Rochat H., Miranda P. A protein toxic to crustacea from the venom of the scorpion Androctonus australis Hector. Insect Biochem., 1975, v. 5, N 3, p. 243250.

12. Zlotkin E., Blondheim S.A., Shulov A.S. Effect of the venom of scorpion Leiurus quinquestriatus on the tympanic nerve of the Locust locusta Migratoria migratorioides. Toxicon, 1970, v. 8, If 1, p. 47-49.

13. Zlotkin E., Miranda P., Kupeyan 0., Lissitzky £э. A new toxic protein in the venom of the scorpion Androctonus australis Hector.- Toxicon, 1971, v. 9, N 1, p. 9-13.

14. Zlotkin E., Teitelbaum Z., Rochat H., Miranda P. The insect toxin from the venom of the scorpion Androctonus mauretani-cus mauretanicus: purification, characterization and specificity. Insect Biochem., 1979, v. 9, N 3, p. 347-354.

15. Teitelbaum Z., Lazarovici P., Zlotkin E. Selective binding of the scorpion venom insect toxin to insect nervous tissue. Insect Biochem., 1979, v. 9, H 3, p. 343-346.

16. Zlotkin E., Pelhate M. The neurotoxic action of the scorpion venom insect toxin. Toxicon, 1982, v.'20, li 1, p. 81-82,

17. Zlotkin E. Action of insect toxin and other toxins derived from the venom of the scorpion Androctonus australis oh isolated giant axons of the cockroach ( Periplaneta americana). J. Exp. Biol., 1982, v. 97, N 1, p. 67-77.

18. Pelhate M., Zlotkin E. Voltage dependent slowing of the turn of Na+ current in the cockroach giant axon induced by the scorpion venom "insect toxin". J. Physiol. London, 1981, v. 319, p. 30-31.

19. Darbon H., Rochat H., Kupeyan С., Van Rieschoten J., Zlo-tkin E. Covalent structure of the insect toxin of Androc-tonus australis Hector. Toxicon, 1982, v. 20, N 1, p. 64.

20. Darbon H., Zlotkin E., Kupeyan G., Van Rieschoten J., Rochat H. Covalent structure of the North Africa scorpion Androctonus australis Hector. Int. J. Peptide Protein Res., 1982, v. 20, U 4, p. 320-330.

21. Babin D.R., Watt D.D., Goos S.M., Mlegnek R.V. Amino acid sequence of neurotoxic protein variants from the venom of Centruroides sculpturatus Ev/ing. Arch. Biochem. Biophys., 1974, v. 164, N 2, p. 694-706.

22. Гришин E.B., Содцатова Л.Н., Солдатов H.M., Костецкий П.В., Овчинников Ю.А. Аминокислотная последовательность инсекто-токсина Hg из яда среднеазиатского скорпиона Buthus eupeus.-Биоорган, химия, 1979, т.5, № 9, с. 1285-1294.

23. Жданова Л.Н., Адамович Т.Е., Назимов И.В., Гришин Е.В., Овчинников Ю.А. Аминокислотная последовательность инсекто-токсина Hj из яда среднеазиатского скорпиона Buthus eupeus.-Биоорган, химия, 1977, т.З, Л 4, с. 485-493.

24. Содцатова Л.Н. Структурная характеристика инсектотоксинов из яда скорпиона Buthus eupeus . Дисс. канд.хим.наук. -Москва, 1977. - 83 с.

25. Гришин Е.В. Волкова Т.М., Соддатова Л.Н. Изучение токсических компонентов яда кавказского подвида скорпиона Buthus eupeus.-Биоорган.химия, 1982, т.8, В 2, с.155-164.

26. Арсеньев А.С., Кондаков В.И., Майоров В.Н., Вожова Т.М., Гришин Е.В., Быстров В.Ф., Овчинников Ю.А. Вторичная структура и отнесение сигналов в двумерных спектрах %-ЯМР ин-сектотоксина IgA Buthus eupeus . Биоорган.химия, 1983,т.9, & 6, с. 768-793.

27. Kupeyan C., Martinez G., Lissitzky S., Miranda F., Rochat H. Disulfide bonds of toxin II of the scorpion Androctonus australis Hector. Eur. J. Biochem., 1974, v, 47, H 3,p. 483- 489.

28. Gregoire J., Rochat H. Govalent structure of toxin I and II from the scorpion Buthus occitanus tunetanus. Toxicon, 1983, v. 21, N1, p. 153-162.

29. Almassy R.J., Fontecilia-Gamps J.C., Suddath F.L., Bugg G.E. Structure of variant-3 scorpion neurotoxin from Cen-truroides sculpturatus Ewing, refined at 1,8 1 resolution. J. Mol. Biol., 1983, v. 170, N 2, p. 497-527.

30. Lester D., Lazarovicx P., Pelhate M., Zlotkin E. Purification, characterization and action of two insect toxins from the venom of the scorpion Buthotus judaicus. Biochim. et biophys. acta, 1982, v. 701, N 3, p. 370-381.

31. Zlotkin E., Lester D., Lazarovici P., Pelhate M. The chemistry and axonal action of two insect toxins derived from the venom of the scorpion Buthotus judaicus. Toxicon, 1982, v. 20, N 1, p. 323-331.

32. Cahalan M. Modification of sodium channel gating in frog myelinated nerve fibre by Centruroides sculpturatus scorpion venom. J. Physiol., 1975, v. 244, p. 511-534.

33. Rochat H., Bernard P., Couraud F. Scorpion toxins; chemistry and mode of action. in: Advances in Cytopharmacolo-gy, B. Ceccarelli, F. Clementi, ed., Raven Press, New York, 1*979, v. 3, p. 325-333.

34. Delori P., Van Rietschoten J., Rochat H. Scorpion venoms and neurotoxins: an immunological study. Toxicon, 1981, v. 19, N 3, p. 393-407.

35. Jover E., Gouraud F., Rochat H. Two types of scorpion ne- 102 urotoxins characterized by their binding to two separate receptor sites on rat brain synaptosomes. Biochem. Biop-hys. Res. Commun., 1980, v. 95, N 4, p. 1607-1617.

36. Stahnke H.L. The genus Centruroides ( Buthidae ) and its venom. in: Arthropod venoms, S. Bettini, ed., SpringerVerlag Berlin Heidelberg Hew York, 1978, p. 277-307.

37. Watt D.D., Simard J.M., Babin D.R., Mlejnek R.V. Physiological characterization of toxins isolated from scorpion venom. in: Toxins: animal, plant and microbial, P. Rosenberg, ed., Pergamon Press, Oxford and New York, 1978, p. 647-660.

38. Babin d.r., Watt d.d., Goos S.M., Mlejnek r.v. Amino acid sequence of neurotoxin I from Centruroides sculpturatus Ewing. Arch. Biochem. Biophys., 1975, v. 166, N 1, p. 125134.

39. Pontecilia-Camps J. C., Suddath P.L., Bugg C.E., Watt D.D. Crystals of a toxic protein from the venom of the scorpion Centruroides sculpturatus Ewing: preparation and preliminary X-ray investigation. J. Mol. Biol., 1978, v. 123, N 4, p. 703-705.

40. Pontecilia-Camps J.C., Almassy.R.J., Suddath P.L., Watt D.D., Bugg C.E. Three-dimentional structure of a protein from scorpion venom: a new structural class of neurotoxins. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1980, v. 77, N 11, p. 6496-6500.

41. Suddath P.L., Bugg C.E., Ealick S.A., Almassy R.J., Ponteocilia-Camps J.C. The 1,3 A structure of a scorpion neurotoxin. A membrane-binding protein. Biophys. J., 1982, v. 37, 11, p, 185-186.

42. Гришин E.B., Солдатов H.M., Ташмухамедов Б.А., Атакузиев Б.7. Выделение, свойства и аминокислотный состав токсинов яда среднеазиатского скорпиона Buthus eupeus . Биоорган.химия, 1978, т.4, В 4, с.450-461.

43. Rosso J. P., Rochat H. Characterization, from the venom of Androctonus mauretanicus mauretanicus, of ten proteins including six neurotoxins. Toxicon, 1982, v. 20, N 1, p. 76.

44. Kumari K.V., Reddy G.R., Babu K.S. Effect of a scorpion venom (Heterometrus fulvipes) on Mg2+ adenosine triphosphatase activity in the cockroach. Toxicon, 1980, v. 18, N 3,p. 392-394.

45. Selvarajan V.R., Narajana Reddy K., Swami K.S. Scorpion venom effects on succinate dehydrogenase activity of sheep tissues. Toxicon, 1975, v.13, N 1, p. 143-144.

46. Prameelamma Y., Govardhan Reddy A.V., Swami K.S. Effects of venom from the scorpion Heterometrus fulvipes on some enzyme system of sheep brain. Toxicon, 1975, v. 13, H 4,p. 482-484.

47. Babu K.S., Muralikrishna D.P., Venkatachari S.A.T. Effect of scorpion venom on some physiological processes in cockroach. Toxicon, 1971, v. 9, N 2, p. 119-124.

48. Reddy G.R., Kumari K.V., Babu K.S. Effect of scorpion (Heterometrus fulvipes) venom on succinate ' dehydrogenase activity of the cockroach Periplaneta americana. Indian J. Exp. Biol., 1980, v. 18, IT 8, p. 867-869.

49. Zlotkin E. Insect selective toxins derived from scorpion venoms: an approach to insect neuropharmacology. Insect- 104

50. Biochem., 1983, v. 13, N 3, p. 219-236,

51. Lazarovici P., Zlotkin E. Toxins specifically active to arthropods and mammals from the venom of the scorpion Scorpio maurus palmatus (Scorpionidae). Toxicon, 1979, v. 17, sup. N 1, p. 98.

52. Lazarovici P., Yanai P., Pelhate M., Zlotkin E. Insect toxic component from the venom of a chactoid scorpion, Scorpio maurus palmatus (Scorpionidae). J. Biol. Ohem., 1982,v. 257, N 14, p. 8397-8404."

53. Lazarovici P., Zlotkin E. A mammal toxin derived from the venom of a chactoid scorpion. Сотр. Biochem. Biophys. 0, 1982, v. 71 0, N 2, p. 177-181.

54. Zlotkin E., Teiterbaum Z., Lester D., Lazarovici P. Toxins selective to insects derived from scorpion venoms. Toxicon, 1979, v. 17, H" 1 sup., p. 208.

55. Piek T. Arthropod venoms as tools for the study of neuromuscular transmission. Сотр. Biochem. Physiol., 1981, v. PT0 68, If 1, p. 75-84.

56. Каменская M.A. Нейротоксшш в физиологических исследованиях. -Итоги науки и техники;сер. Физиология человека и животных, Москва, 1982, т.26.

57. Hurlbut W.P., Cecarelli В. Use of black widow spider venom to study the release of neurotransmitters. in: Advances in cytopharmacology, B. Ceccarelli, ed., Raven Press, Iiew York, 1979, v. 3, p. 87-115.

58. Nery L., Bettinl S., Prank M. The effect of Latrodectus ma-ctans tredecimguttatus venom on the endogenous activity of Periplaneta americana nerve cord. Toxicon, 1965, v. 3,1. N 1, p. 95-99.

59. D'Ajello V., Mauro A., Bettlni S. Effect of the venom of the black widow spider, Latrodectus mactans tredecimgutta-tus, on evoked action potencials in the isolated nerve cord of Periplaneta americana. Toxicon, 1969» V. 7» N 1, p. 139-144.

60. Griffiths D.J.G., Smysth T., Jr. Action of black widow spider venom at insect neuromuscular junction. Toxicon, 1973, v. 11, N3, p. 369-374.

61. Majori G., Bettini S., Oasaglia 0. Effect of black widow spider venom on the cockroach heart. J. Insect Physiol., 1972, v. 18, N 9, p. 913-927.

62. Frontali N., Grasso A. Separation of three toxicologica-lly different protein components from the venom of the spider Latrodectus tredecimguttatus. Arch. Biochem. Biophys., 1964, v. 106, N 1, p. 213-218.

63. Gull-Candy S.G., Neal H., Usherwood P.N.R. Action of black widow spider venom on an aminergic synapse. Nature (London), 1973, v, 241, N 5388 , p. 353-354.

64. Grasso A. Preparation and properties of a neurotoxin purified from the venom of black widow spider (Latrodectus mactans tredecimguttatus ). Biochim. et biophys. acta, 1976, v. 439, N 2, p. 406-412.

65. Oraberg R.L., Smyth T., Jr., Benton A.W. Isolation of a neurotoxin with a presynaptic action from the venom of the black widow spider (Latrodectus mactans, Fabr.). Toxicon, 1976, v. 14, N 3, p. 329-333.

66. Prontali N., Ceccarelli B., Gorio A., Mauro A., Siekevitz P., Tzeng M.-G., Hurlbut W.P. Purification from black widow spider venom of protein factor causing the depletion of synaptic vesicles at neuro-muscular junction. J. Cell

67. Biol., 1976, V. 68, IT 2, p. 462-479.

68. Pinkelstein A*, Rubin L.L., Tzeng M.-C. Black widow spider venom: effect of purified toxin on lipid bilayer mem. branes. Science, 1976, v. 193, N 4257, P. 1009-1011.

69. Красильников O.B., Терновский В.И., Ташмухамедов Б.A. Исследование каналообразующих свойств яда каракурта. -Биофизика, 1982, т.27, № I, с.72-75.

70. Lebez D., Maretic Z., Gubensek P., Kristan J. Studies on labeled animal poisons. II. Distribution of the venom of various spiders labeled with SE,^ and P^2 in guinea-pig. Toxicon, 1968, v. 5, N 3, p. 261-262.

71. Усманов П.Б., Казаков И. , Каликулов Д. , Атакузиев Б.У., Юкельсон Л.Я., Ташмухамедов Б.А. Низкомолекулярный канало-формерный компонент нейротоксинов ядов пауков семейства

72. Theridiidae . Хим.прир.соед., 1983, т.З, с.400-401.

73. Schenone H., Suarez G. Venoms of Scytotidae. Genus Loxosce- 107 les. in: Arthropod venoms, S. Bettini, ed., SpringerVerlag Berlin Heidelberg New York, 1978, p. 247-275.

74. Geren C.R., Chan T.K., Howell D.E., Odell G.V. Isolation and characterization of toxins from brown recluse venom (Loxcosceles reclusa). -Arch. Biochem. Biophys., 1976, v. 174, N 1, p.90-99.

75. Babcock J.L., Civello D. J. , Geren C.R. Purification and characterization of a toxin from brown recluse spider (Loxosceles reclusa) venom gland extracts. Toxicon, 1981, v. 19, If 5, P. 677-689.

76. Forrester L.J., Barrett J.T., Campbell B.J. Red blood cell lysis induced by the venom of the brown recluse spider. The role of sphingomyelinase D. Arch. Biochem. Biophys. , 1978, v. 187, N 2, p. 355-365.

77. Kurpiewski G., Forrester L.J., Barrett J.T., Campbell B.J. Platelet aggregation and sphingomyelinase D activity of a purified toxin from the venom of Loxosceles reclusa.-Biochim. et biophys. acta, 1981, v. 678, N 3, p. 467-476.

78. Norment B.R., Vinson S.B. Effect of Loxosceles reclusa Gertsch and mulaib venom on Heliothis virescens (P.) larvae. Toxicon, 1969, v. 7, I 1, p.99-101.

79. Eskafi P.M., Norment B.R. Physiological action of Loxosceles reclusa venom on insect larvae. Toxicon, 1976, v. 14, N 1, p. 7-14.

80. Poil L.D., Frazier J.L., Norment B.R. Partial characterization of letal and neuroactive components of the brown recluse spider (Loxosceles reclusa) venom. Toxicon, 1979, v. 17, N 4, p.347-354.

81. Norment B.R., Poil L.D. Histopathology and physiological action of venom from the brown recluse spider, Loxoscelesreclusa. Toxicon, 1979, v. 17, N 1 sup., p. 131.

82. Foil L. D., Chambers H.W., Norment B.R. Loxosceles reclusa venom component toxicity and interaction in Musca domestica. Toxicon, 1980, v. 18, N 1, p. 112-117.

83. Jong Y.S., Uorment B.R., Heitz J.R. Separation and characterization of venom components in the brown recluse spider (Loxosceles reclusa). Toxicon, 1979, v. 17, II 3, p. 307312.

84. Schenberg.S., Pereira Lima P.A. Venoms of Ctenidae. in: Arthropod venoms. S. Bettini, ed., Springer-Verlag Berlin Heidelberg Hew York, 1978, p. 217-245.

85. Pereira Lima P.A., Schenberg S. Caracteristicas e sepagao dos componentes do veneno de Phoneutria fera. Gienc. e Gult. (Sao Paulo), 1964, v. 16, N 1, p. 187-189.

86. Scheberg S., Pereira Lima P.A. Phoneutria nigriventer venom pharmacology and biochemistry of its components. - in: Venomous animals and their venoms, W. Bucherl and E.E. Buckley, ed., New York-London, Acad. Press, 1971, v. Ill,p. 279-297.

87. Kawai N., Niv/a A., Abe T. Spider venom contains specific receptor blocker of glutaminergic synapces. Brain Res., 1982, v. 247, N 1, p. 169-171.

88. Kawai N., Mwa A., Abe T. Block of glutamate receptors by a spider toxin. in: CNS Receptors - Prom molecular pharmacology to behavior, P. Mandel and P.V. De-Feudis, ed.,- 109

89. Raven Press, New York, 1983, p. 221-227.

90. АЪе Т., Kawai N., Niv/a A. Effect of a spider toxin on the glutaminergic synapse of lobster muscle. J. Physiol. (London), 1983, v. 339, p. 243-252.

91. Kawai N., Niwa A., Abe T. Block of glutamate receptors by a spider toxin. Adv. Biochem. Psychopharmacol., 1983, v. 37, P. 221-227.

92. Kawai N., Niwa A., Abe T. Effect of a spider toxin on glutaminergic synapses in the mammalian brain. Biomedical Research, 1982, v. 3, N 3, p. 353-355.

93. Kawagoe R., Onodera K., Takeuchi A. Release of glutamate from the crayfish neuromuscular junction. J. Physiol., 1981, v. 312, p. 225-236.

94. Curtis D.R., Johnston G.A.R. Amino acid transmitters in the mammalian central nervous system. Ergebn. Physiol., 1974, v. 69, N 1, p. 97-188.

95. Cottman C.W., Poster A., Lanthorn T. An overview of glutamate as a neurotransmitter. in: Glutamate as a Neurotransmitter, Di Chiara G., Gessa G.L., ed., Raven Press, New York, 1981, p. 1-27.

96. Kawai N., Niwa A., Abe T. Specific antagonism of the glutamate receptor by an extract from the venom of the spider Araneus ventricosus. Toxicon, 1983, v. 21, N 3, p. 438440.

97. Minelli A. Secretion of Gentipeds. in: Arthropod venoms,

98. S. Bettini, ed., Springer-Verlag Berlin Heidelberg New

99. York , 1978, p. 73-85. 108# Маматкадиров А., Жуков B.B., Усманов П.Б., Мандельштам Ю.Е.

100. Действие ядов некоторых членистоногих на нейроны таракана Periplaneta americana L. -»Докл.АН СССР, 1982, т.265, JS 4, С.1002-1005.- no

101. Whaler B.C. Neurotoxins. in: Physiological Pharmacology, W.S. Root and P.G. Hoffmann, ed., Acad. Press, New York and London, 1967, p. 430-434.

102. Visser B.J., Spanjer W., De Klonia H., Piek T. , Van der Meer C., Van der Drift A.G.M. Isolation and some biochemical properties of a paralysing toxin from the venom of the wasp Microbracon hebetor (Say). ~ Toxicon, 1976,v. 14, N 3, p. 357-370.

103. Visser B.J., Labruyere W.T., Spanjer W., Piek T. Characterization of two paralyzing protein toxins (A-MIX and B-MTX), isolated from a homogenate of the wasp Microbracon hebetor (Say). Comp. Biochem. Physiol., 1983, v. 75 B,1. N 3, p. 523-530.

104. Piek T. , Spanjer W., Njio K.D., Veenendaal R.L., Mantel P. Paralysis caused by the venom of the wasp, Microbracon gelechiae. J. Insect Physiol., 1974, v. 20, N 23, p. 2307-2319.

105. Piek T., Veenendaal R.L., Mantel P. The pharmacology of Microbracon venom. Comp. Biochem. Physiol., 1982, v. 72 C, N 2, p. 303-309.

106. Walther C., Rathmayer W. The effect of Habrobracon venom on excitatory neuromuscular transmission in insect. J. Comp. Physiol., 1974, v. 89, N 1, p. 23-38.

107. Rathmayer W., Walther C. Electrophysiological investigation of the mode of action and specificity of Habrobracon venom. Toxicon, 1975, v. 13, N 2, p. 116.

108. Piek T. Solitary wasp venoms and toxins as tools for the study of neuromuscular transmission in insect. Ciba Pound. Symp., 1982, v. 88 (NeuroPharmacol., Insect), p. 275-290.

109. Piek Т., Njio K.D. Neuromuscular block in honeybees by the venom of the bee wolf wasp (Philanthus triangulum P.). Toxicon, 1975, v. 13, N 2, p. 199-201.

110. Njio K.D., Piek T. Effect of the venom of the bee wolf wasp Philanthus triangulum P. on contraction and presynaptic vesicles in locust muscle. Toxicon, 1979, v. 17,1. N 6, p. 631-638.

111. May Т.Е., Piek T. Neuromuscular block in locust skeletal muscle caused by the venom preparation made from the digger wasp Philanthus triangulum P. from Egypt. J. Insect Physiol., 1979, v. 25, N 3, p. 685-691.

112. Piek Т., Spanjer W., Veldsema-Currie R.D., Van Groen Т., de Haan N., Mantel P. Effect of venom of the digger wasp Philanthus triangulum P. on the sixth abdominal ganglion of the cockroach. Gomp. Biochem. Physiol., 1982, v. 71G, N 2, p. 159-164.

113. Visser B.J., Spanjer W. Biochemical study of two paralyzing insect venoms. Acta Physiol. Pharmacol, neerl, 1969, v. 15, N 1, p. 107-108.

114. Piek Т., Mantel P., Engels E. Neuromuscular block in insect caused by the venom of the digger wasp Philanthus triangulum P. Сотр. Gen. Pharmacol., 1971, v. 2, N 3, p. 317-321.

115. Piek Т., Mantel P., Jas H. Ion-channel block in insect- 112 muscle fibre membrane by the venom of the digger wasp, Philanthus triangulum P. J. Insect Physiol., 1980, v. 26, N 4, p. 345-349.

116. Piek T. (fc-Philanthotoxin, a semi-irrevercible blocker of ion-channels. Сотр. Biochem. Physiol., 1982, v. 72 C, N 2, p. 311-315.

117. Clarck R.B., Donaldson P.L., Gration K.A.F., Lambert J.J., Piek Т., Ramsey R., Spanjer W., Usherwood P.N.R. Block of locust muscle glutamate receptors by ¿'-philantho toxin occurs after receptor activations.- Brain Res., 1982, v. 241, N 1, p. 105-114.

118. Антонов C.M., Антонова H.B., Магазаник Л.Г. Влшшйе нейро-токсинов на освобождение медиатора из двигательных нервных окончаний личинки дрозофилы Drosophila melanogaster. -Журнал эвол.биохимии и физиологии, 1979, т.ХУ, с.623-625.

119. Magazanik L.G., Antonov S.M. Selective action of some neurotoxins on transmitter release from motor neuromuscular ¿junction of Drosophila melanogaster larvae. in: Neurotransm.: Сотр. Aspects, 1980, p. 297-308.

120. Gawade S.P. The effect of venom from the Indian tropical wasp vespa tropica on nerve-muscle preparations from Drosophila larvae. Toxicon, 1983, v. 21, N 6, p. 882-886.

121. Schmidt J.0., Blum M.S. Toxicity of Dolichovespula macu-lata venom. Toxicon, 1979, v. 17, N 5, p. 645-648.- 113

122. АЪе Т., Kawai N., Niwa A. Purification and properties of a presynaptically acting neurotoxin, mandaratoxin, from hornet (Vespa mandarinia). Biochemistry, 1982, v. 21, N 7, p. 1693-1697.

123. Kawai N., Abe Т., Hori S., Niwa A. Effect of a neurotoxin in hornet /venom on neuromuscular junction of lobster. -Comp. Biochem. Biophys.0,,1980, v. 65 0, N 2, p. 87-92.

124. Sampaio S.V., Laure C.J., Giglio J.R. Isolation and characterization of toxic proteins from the venom of the brazilian scorpion Tityus serrulatus. Toxicon, 1983, v. 21,1. N 2, p. 265-277.

125. Dent M. A.R., Possani L.D., Ramirez G.A., Fletcher P.L., Jr. Purification and characterization of two mammalian toxins from the venom of the mexican scorpion Centruroides noxius Hoffmann. Toxicon, 1980, v. 18, N 3, p. 343-350.

126. Possani L.D., Fletcher P.L., Alagon A.B.C., Alagon A.C., Julia J.Z. Purification and characterization of a mammalian toxin from the venom of the mexican scorpion, Centruroides limpidus tecomanus Hoffmann.- Toxicon, 1980, v. 18, N 2, p. 175-183.

127. Mc Intosh M.E., Watt D.D. Purification of toxins from the north american scorpion Centruroides sculpturatus. in: Toxins of animal and plant origin, Tel-Aviv University, Israel, 1972, p. 529-544.

128. Miranda F., Kupeyan C., Rochat H., Rochat C., Lissitzky S. A general method for animal neurotoxin purification. in: Toxins of animal and plant origin, Tel-Aviv University, Israel, 1972, p. 251-257.

129. Гришин E.B., Солдатова Л.Н., Шахпаронов М.И., Казаков В.К, Аминокислотная последовательность нейротоксина Mjq из ядасреднеазиатского скорпиона Buhtus eupeus # Био-орган.химия, 1980, т.6, J6 5, с.714-723.

130. J. Biochem., 1970, v. 16, N 3, p. 514-523.

131. Rochat H. Isotoxins in animal venoms. in: Materials of 5th Inter. Symp. Animal, Plant, Microbial Toxins, San Jose, Costa Rica, 1976, p. 48.

132. Rochat H., Rochat C., Kupeyan C., Miranda P., Lissitzky S., Edman P. Scorpion neurotoxins: a Family of homologous proteins. FEBS Lett., 1970, v. 10, N 5, p. 349-351.

133. Zervas L., Otani T.M., Winitz M., Greenstein J.P. Studies on arginine peptides. II. Synthesis of L-Arginyl-L-arginine and other U-terminal arginine dipeptides. J. Amer. Chem. Soc., 1959, v. 81, N 11, p. 2878-2884.

134. Wuthrich K., Wieder G., Wagner G., Braun W. Sequential resonance assignments as a basis for determination of spatial protein structures by high resolution proton nuclear magnetic resonance. J. Mol. Biol., 1982, v. 155, N 3,1. P. 311-319.

135. Billeter M., Braun W., Wuthrich K. Sequential resonance1assignments in protein H ШШ spectra: computation of ste-rically allowed proton-proton distances and statistical analysis of proton-proton. J. Mol. Biol., 1982, v. 155, N 3, p. 321-346.

136. Wagner G., Wuthrich K. Sequential resonance assignmentsin protein H nuclear magnetic resonance spectra. Basic pancreatic trypsin inhibitor. J. Mol. Biol., 1982, v. 155, N 3, p. 347-366.

137. Wieder G., Lee K.H., Wuthrich K. Sequential resonancelassignments in protein Я ШШ spectra: glucagon bouned to perdeuterated dodecylphosphocholine micelles. J. Mol. Biol., 1982, v. 155, N 3, p. 367-384.

138. Торчинский Ю.М. Сера в бежах. M. Наука, 1979, -с. 58-64.

139. Hirs G.H.W. Cystine peptides. in: Methods in Enzymolo-gy, Hirs G.H.W., ed., New York and London, Acad. Press, 1967, v. XI, p. 475-478.

140. Торчинский Ю.М. Сера в бежах. М. Наука, 1979, -с. I0I-I02.

141. Glade Bennett J. Paper chromatography and electrophoresis, special procedure for peptide maps. in: Methods in En-zymology, Hirs C.H.W., ed., New York and London, Acad. Press, 1967, v. XI, p. 330-339.

142. Guy 0., Shapanka R., Greene L.J. The structure of the bovine pancreatic secretory trypsin inhibitor Karal's inhibitor. II. Determination of the disulfide bonds and proteolysis by thermolysin. - J. Biol. Chem., 1971, v. 246, N 24, p. 7740-7747.

143. Pox J.W., Elzinda M., Tu A.T. Amino acid sequence and disulfide bond assignment of myotoxin A isolated from the venom of prairie rattlesnake (Crotalus viridis viridis). -Biochemistry, 1979, v. 18 , N 4, p. 678-684.

144. Wetzel R. Assignment of the disulfide bonds of leuKocyte interferon. Nature, 1981, v. 289, N 5798, p. 606-609.

145. Mise Т. Bahl O.P. Assignment of disulfide bonds in the subunit of human Chorionic Gonadotropin. J. Biol. Chem., 1981, v. 256, N 13, p. 6587-6592.

146. Reeve J.R., Pierce J.G. Disulfide bonds of glycoprotein hormones. Int. J. Peptide protein Res., 1981, v. 18, N 1, p. 79-87.

147. Торчинский Ю.М. Сера в белках. М. Наука, 1979,- с.91-92.

148. Арсеньев A.C., Кондаков В.И., Майоров В.Н., Быстров В.Ф., Овчинников Ю.А. Конформадионный ЯМР-анализ пространственной структуры инсектотоксина И^А Buthus eupeus.- Биоорган.химия, 1983, т.9, Ik 12, с. 1667-1689.

149. Schanbacher P.L., Lee C.K., Hall J.E., Wilson I.B., Howell D.E., Odell G.V. Composition and properties of tarantula Dugesiella hentzi (Girard) venom. Toxicon, 1973, v. 11, U 1 , p. 21-29.

150. Lee C.K., Chan Т.К., Ward B.C., Howell D.E., Odell G.V. The purification and characterization of a necrotoxin from tarantula, Dugesiella hentzi (Girard) venom. Arch. Biochem. Biophys., 1974, v. 164, N 2, p. 341-350.

151. Chan Т.К., Geren C.R., Howell D.E., Odell G.V. Adenosine triphosphate in tarantula spider venoms and its synergistic effect with the venom toxin. Toxicon, 1975, v. 13, N 1, p. 61-66.

152. Schanbacher P.L., Lee C.K., Wilson I.Bi, Howell D.E. Odell G.V, Purification and characterization of tarantula, Dugesiella hentzi (Girard) venom hyaluronidase. Comp. Biochem. Physiol., 1973, v. 44 B, N 2, p. 389-396.

153. Reisfeld R.A., Lewis U.J,, Williams D.E. Disk electrophoresis of basic protein and peptides on polyacrylamide gels. Nature (London), 1962, v. 195, N 4-838, p. 281-283.

154. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Д.: Гос.Изд-во мед.лит-ры, 1963. - с. 81.

155. Habeeb A.F.S.A. Reaction of protein sulfhydryl groups with Ellmann's reagent. in: Methods in Enzymology, С.Н.Т/. Hirs, S.N. Timasheff, ed,, New York and London, Acad, Press, 1972, v. XXV, part B, p. 457-464.

156. Mendez E., Lai C.Y. Reaction of peptides with fluoresca-mine on paper after chromatography or electrophoresis, -Anal. Biochem., 1975, v. 65, N 1-2, p. 281-292.

157. Ambler R.P. Sequence determination. Carboxypeptidases A and B. in: Methods in Enzymology, Hirs C.H.W., Timasheff S.N., ed., New York and London, Acad. Press, 1972, v. XXV, part B, p. 262-272.

158. Ганкина Э.С., Королева E.M., Беленький Б.Г. Пути увеличения чувствительности ручного варианта метода Эдмана в дансил-модификации. Биоорган.химия, 1979, т.5, №4, с.485-491.

159. Steitz Т.A., Goldman A., Engelman D.M. Quantitative application of the helical hairpin hypothesis to membrane proteins. Biophys. J., 1982, v. 37, N 1, p. 124-125.

160. Gray W.R. Dansyl chloride procedure. in: Methods in

161. Enzymology, Hirs C.H.W., ed., New York and London, Acad. Press, 1967, v. XI, p. 139-147.

162. Беленький Б.Г., Ганкина Э.С., Прянишникова С.А., Эрастов Д.П., Микротонкослойная хроматография динитрофенильных и фенил-тиогидантоиновых производных аминокислот. Молек.биология, 1967, т.1, вып.2, с.184-189.

163. Chen R. The sequence determination of a protein in a micro scale: the sequence analysis of ribosomal protein L 34 of Escherichia coli. Hoppe-Seyler's Zeitschrift fur Phisiol. Chem., 1976, v. 357, N 6, p. 873-886.

164. Andrews P. Estimation of the molecular weight of proteins by sephadex gel-filtration. Biochem. J., 1964, v. 91,1. N 2, p. 222-233.

165. Shapiro A.L., Vinuella E., Maizel J.V. Molecular weight estimation of polypeptide chains by electrophoresis in SDS-polyaerylamide gels. -Biochem. Biophys. Res. Commun.,1967, v. 28, N 5, p. 815-820.

166. Kato Т., Sasaki M., Kimura S. Application of dansyl reaction for characterization of peptides with low molecular weight by the method of electrophoresis in SDS-polyacryl-amide gels. Anal. Biochem., 1975, v. 66, N 2, p. 515522.

167. Погадаев В.И., Тимин E.H., Ходоров Б.И. О механизмах самопроизвольного расслабления деполяризованной в гиперкалиевой среде гладкой мышцы (taenia coli морской свинки). -Биофизика, 1976, т.XXI, вып. 5, с. 848-855.