Новый метод синтеза В-N-гликозиламидов: синтез фрагментов гликопротеинов тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

ВВЕДЕНИЕ

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1. Общие сведения о структуре гликопротеинов

2. Методы синтеза p-N-гликозиламидов и гликозил-аспарагинов.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

1 . Введение

2. Синтез гликозилизотиоцианатов

3. Взаимодействие гликозилизотиоцианатов с карбоновыми кислотами.

4. Синтез 4-Н-гликозил-Ь-аспарагинов

5. Синтез аспарагин-связанного гликопептида

6. Синтез тиокарбамоилпептидов - возможное новое направление использования гликозилизотиоцианатов

Гликопротеины - гликозилированные белки - широко распространены в природе и выполняют целый ряд жизненно важных функций. К гликопротеинам относится большое число ферментов и гормонов. Гли-копротеинами являются групповые вещества крови; гликопротеины -обязательный компонент в клеточных мембранах.

В связи с большой значимостью гликопротеинов исследования их структуры, биосинтеза и биологической функции постоянно расширяются. Вполне естественно, что гликопротеины, представляющие собой конъюгаты белков с углеводами, одновременно являются носителями как углеводных, так и белковых свойств. В то же время наличие ко-валентной белок-углеводной связи определяет качественно новые свойства гликопротеинов, характерные только для этого класса биополимеров. Поэтому актуальной является задача синтеза соединений, воспроизводящих структуры фрагментов, включающие углевод-белковые связи в гликопротеинах. В настоящее время синтез таких гликопепти-дов важен по следующим причинам.

Во-первых, такие соединения необходимы для изучения свойств самой связи и в особенности для разработки новых эффективных методов структурного анализа гликопротеинов.

Во-вторых, они нужны для изучения специфичности и механизма действия ферментов, участвующих в биосинтезе и метаболизме гликопротеинов .

Несмотря на большое число известных синтезов модельных гли-копептидов, имеющиеся методы не всегда оказываются эффективными, особенно это относится к синтезу гликопептидов, моделирующих N-гликозиласпарагиновый тип углевод-белковой связи в гликопротеинах.

Настоящая работа посвящена разработке нового метода синтеза N-гликозиламидов, в том числе N-гликозиласпарагинов, основанного на взаимодействии гликозилизотиоцианатов с карбоновыми кислотами. Работа состоит из введения, литературного обзора, обсуждения собственных результатов и экспериментальной части.

В литературном обзоре мы сочли целесообразным дать общие сведения о структуре гликопротеинов, акцентируя главное внимание на структуре их углеводной части и узлах углевод-белковой связи. В обзоре рассмотрены существующие методы синтеза N-гликозиламидов и обсуждены их достоинства и недостатки. Рассмотрение этих литературных данных и привело нас к поиску нового метода синтеза N-гликозиламидов.

В обсуждении результатов, состоящем из семи параграфов, изложены полученные нами результаты: разработка нового способа получения гликозилизотиоцианатов, изучение взаимодействия гликозилизотиоцианатов с карбоновыми кислотами с целью поиска оптимальных условий синтеза гликозиламидов, синтез N-гликозиласпарагинов и гликопептидов, содержащих N-гликозилированные остатки аспарагина.

Поскольку мы располагали удобным и простым методом синтеза гликозилизотиоцианатов, то сочли целесообразным включить в работу описание нового возможного направления использования этих соединений. В результате взаимодействия гликозилизотиоцианатов со спей-сером, содержащим аминогруппу (аминокапроновая кислота), были получены лиганды для аффинной хроматографии ферментов. Использование этих лигандов другими авторами дало хорошие результаты.

Работа выполнена в лаборатории химии углеводов и гликопротеинов ИБХ им. М.М.Шемякина АН СССР - зав. лабораторией профессор А.Я.Хорлин.

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

ВЫВОДЫ

1. Разработан новый метод синтеза ацетилированных гликозилизотиоцианатов на основе реакции ацилгликозилгалогенидов с роданидом аммония в среде апротонных полярных растворителей.

2. Разработан новый метод синтеза |3-N-гликозиламидов, основанный на реакции гликозилизотиоцианатов с карбоновыми кислотами .

3. Предложенным методом препаративно получены гликозилами-ды, гликозиласпарагины и гликопептид-производные моно-, олиго-, нейтральных и аминосахаров.

4. Реакцией ацетилированного (З-Б-галактопиранозилизотиоциа-ната с незащищенной е-аминокапроновой кислотой получено N-глико-зилтиокарбамоилпроизводное, использованное в синтезе аффинного сорбента для выделения p-D-галактозидазы.

1. Montreuil J. "Primary Structure of Glycoprotein Glycan Basis for the Molecular Biology of Glycoproteins". 1.: Adv.Carbohydr. Chem.Biochem., 1980, v.37, p.157-223.

2. Strecker G., Montreuil J. "Glycoproteins et Glycoproteinoses". Biochemie, 1979, v.61, № 12, p.1199-1246.

3. Spiro R.G. "Glycoproteins". In: Adv.Protein Chem., N.Y. -London: Academic Press, 1975, -p.349-467.

4. Kenneth 0., Brianparent J., White S.L. "Carbohydrate Moieties of Glycoproteins". Biochem.Biophys.Acta, 1982, 650, p.209-232.

5. Berger E.G. "Structure, Biosynthesis and Functions of Glycoprotein Glycans". Experientia, 1982, v.38, № 10, p.1129-1258.

6. Kornfeld R., Kornfeld S. "Comparative Aspects of Glycoprotein Structure". Ann.Rev.Biochem., 1976, v.45, p.217-237.

7. Lemieux R.U. "F.R.S. Haworth Memorial Lecture Human Blood Groups and Carbohydrate Chemistry". Delivered at the IX-th International Symposium on Carbohydrate Chemistry on 11 April 1978, at the Institute of Education, University of London.

8. Micheel F., Ostmann E.A., Pielmeier G. "Die Bindung der Kohlenhydratkomponente in Protein". Tetrahedron Lett., 1963, № 2 , p.115-119.

9. Fournet В., Montreuil J., Strecker G., Dorland L., Haverkamp J., Fliegenthart J.F.G., Binette J.P., Schmid K. "Determination of

10. Primary Structures of 16 Asialo-carbohydrate Units Derived from Human Plasma a.-Acid Glycoprotein, by 360-MHz NMR-Spec-troscopy and Permethylation Analysis". Biochemistry, 1978, v.17, p.5206-5214.

11. Baenzyeger J.U., Fiete D. "Structure of the Complex Oligosaccharides of Fetuin". J.Biol.Chem., 1979, 254, p.789-795 .

12. Bogdanov V.P., Kaverzneva E.D., Andreyeva A.P. "Some Properties and the Structure of A-Glucosamine-Aspartic Fragment from Ovalbumin". Biochem.Biophys.Acta, 1964, 83, № 1, p. 6973.

13. Spiro R.G., Bhoyroo V.D. "Structure of the O-Glycosidically Linked Carbohydrate Units of Fetuin". J.Biol.Chem., 1974, 249, p.5704-5717.

14. Krusius Т., Finne J., Rauvala H. "Poly(glycosyl) Chains of Glycoproteins. Characterization of a Novel Type of Glycoprotein Saccharides from Human Erythrocyte Membrane". Eur. J.Biochem., 1978, v.92, p.289-300.

15. Madapally M.M., Wilson J.R., Zimmerman E.F. "Sialyltransfe-rase in Fetal Tissues: Incorporation of Sialic Acid into Endogenous and Exogenous Glycoprotein Acceptors". Arch, and Biophys., 1976, v.173, p.1-10.

16. Phelps C.F. "Glycosylation. Enzymology of Part-translational Modification of Proteins". Vol.1, Ed. by Freedman, Hawkins H.C., N.Y. London: Academic Press, 1980, v.l,p.105-155.

17. Bergmann M., Zervas L. "Uber ein Allgemeines Verfahren der Peptide-Synthese". Chem.Ber., 1932, B.65, S.1192-1201.

18. Bergmann M., Zervas L. "Uber die Synthese von Glycopeptiden des D-Glucosamines (N-Glycyl-D-Glucosamin und N-D-Alanyl-D-glucosamin)M. Chem.Ber., 1932, B.65, № 7, S.1201-1205.

19. Bergmann M., Zervas L., Salzmann L. "Synthese von L-Asparagin und D-Glutamin". Chem.Ber., 1933, B.66, S.1288-1290.

20. Tipson R.S., Pawson B.A. "N-Acylation of D-Ribosylamine". J.Org.Chem., 1961, v.26, № 11, p.4698-4701.

21. Baddiley J., Buchanann J.C., Handschumacher R.E., Pres-cott J.F. "Chemical Studies in the Biosynthesis of Purine Nucleotides. Part 1. The Preparation of N-Acylglucosyl-amines". J.Chem.Soc., 1956, p.2818-2823.

22. Bolton C.H., Jeanloz R.W. "The Synthesis of a Glucosamine2

23. Asparagine Compound. Benzyl N -Carbobenzyloxy-N-(2-acetamido-3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy-(3-D-glucopyranosyl) -L-asparagi-nate". J.Org.Chem., 1963, v.28, № 11, p.3228-3230.

24. Ellis G.P., Honeyman J. "Glycosylamines". In: Adv.Carbohydr. Chem., 1959, v.10, p.95-168.

25. Micheel F., Wulff H. "Uber die Reaktionen des D-Glucosamins (III Mitteil); Synthese eines D-Glucosamin-Anhydrids". Chem. Ber., 1956, В.89, S.1521-1530.

26. Inouye Y., Onodera K., Kitaoka S., Ochiai H. "An Acyl Migration in Acetohalogenoglucosamines". J.Amer.Chem.Soc., 1957, v.79, № 15, p.4218-4222.

27. Sproviero J.F., Salinas A., Bertiche E.S. "Ammonolysis of 2,3,4 ,6-tetra-0-Benzoyl-(3-d-Glucopyranosylamine". Carbohydr. Res., 1971, v.19, № 1, p.81-86.

28. Salinas A., Sproviero J.F. "Electronic Structure of Cyclic Hexoses". Carbohydr.Res., 1971, v.16, p.243-244.

29. Bertho A. "Uber Azidoderivate der Glucose". Chem.Ber., 1930, B.63, S.836-843.

30. Micheel F., Klemer A. "Glycosyl Fluorides and Azides". In: Adv.Carbohydr.Chem. N.Y.-London: Academic Press, 1961, v.16, p.85-97.

31. Ponpipom M.M., Bugianesi R.L., Shen T.Y. "Novel Analogs of Glycopeptides". Carbohydr.Res., 1980, v.82, p.141-148.

32. Гринштейн Дж., Виниц M. "Хлорангидридный метод". В кн.: Химия аминокислот и пептидов. М., Мир, 1965, с.464-468.

33. Steglich W., Hofle G. "N,N-Dimethyl-4-pyridinamine, a Very Effective Acylation Catalyst". Angew.Chem.Int.Ed.Engl., 1969, v.8, p.981.

34. Каверзнева Е.Д. , Коновалова М.И. "Синтез N-((З-Ь-аспарагил)-D-глюкозамина. О-З-метил-N-(а-метил-р-Ь-аспарагил)-D-глюкоз-аминида и их производных". Изв. АН СССР, сер.хим., 1963, № 1, с.124-128.

35. Boisonas R.A. "Une Nouvele Methode de Synthese Peptidique". Helv.Chim.Acta, 1951, v.34, p.874-879.

36. Goutsgeorgopoulos Ch., Zervas L. "On 3-D-Glucosylamides of L-Amino Acids and of Nicotinic Acid". J.Amer.Chem.Soc., 1961, v.83, p.1885-1888.

37. Nieman C., Hays J.T. "The Structure of N-Acetyl-d-glucosyl-amine". J.Amer.Chem.Soc., 1940, v.62, № 10, p.2960-2961.

38. Hockett R.G., Chandler L.B. "Lead Tetraacetate Oxidation in the Sugar Group. VIII. The Preparation and Proof of Structure of N-Acetyl-D-glucosylamine". J.Amer.Chem.Soc., 1944, v. 66, p.957-960.

39. Nieman C., Hays J.T. "Studies on the N-Acetyl-D-glucosamine of Hockett and Chandler". J.Amer.Chem.Soc., 1945, v.67p.1302-1304.

40. Frush H.L., Isbell H.S. "Mutarotation, Hydrolysis and Structure of D-Galactosylamines". J.Res.Natl.Bur.Standards, 1951, v.47, p.239-247.

41. Isbell H.S., Frush H.L. "Mutarotation, Hydrolysis and Rearrangement Reactions of Glycosylamines". J.Org.Chem., 1958, v.23, № 9, p.1309-1319.

42. Lobry de Bruyn C.A., Van Leent F.H. "Derives Ammoniacaux de Quelques Sucres (Lactose, Maltose, Galactose, Xylose, Arabi-nose, Rhamnose). Rec.trav.Chim., 1895, v.14, p.134-139

43. Onodera K., Kitaoka Sh. "N-Acylation of Unsubstituted Glycosylamines". J.Org.Chem., 1960, v.25, p.1322-1325.

44. Tipson R.S. "Acetylation of D-Ribosylamine". J.Org.Chem., 1961, v.26, № 7, p.2462-2464.

45. Yamamoto A., Miyashita Ch., Tsukamoto H. "Studies on Amino Sugars I. Preparation of N-Acyl Derivatives of 2-Acetamido-2-deoxy-fb-D-Glucopyranosylamine" . Chem.Pharm.Bull., 1965, v.13, № 9, p.1036-1041.

46. Etchison J.R., Holland J.J. "A Procedure for the Rapid, Quantitative N-Acetylation of Amino Sugar Methyl Glucosides". Anal.Biochem., 1975, v.66, № 1, p.87-92.

47. Yoshimura J., Hashimoto H., Ando H. "Studies on 2-Amino-2deoxy-D-Glucose Derivatives. Part XV. Synthesis of 1-N-Acyl2.acylamido-2-deoxy-3-D-glucopyranosylamines". Carbohydr.Res., 1967, v.5, № 1, p.82-92.

48. Bolton C.H., Hough L., Khan M.Y. "Some Further Studies on the Synthesis of Glycopeptide Derivatives. 2-Acetamido-2-deoxy-3-D-glucopyranosylamine Derivatives". Biochem.J., 1966, v.101, № 1, p.184-190.

49. Hirano S., Ishigami M., Ohe Y. "Resolution of Anomeric Ethyl 2-Amino-2-deoxy-D-glucopyranoside by Cation-Exchange Chromatography, and its N-Acylation with Carboxylic Anhydrides". J.Org.Chem., 1976, v.41, p.4038-4040.

50. Hirano Sh., Iwaki H., Kondo Y. "Preparation of some Novel N-Acyl Derivatives of 2-Acetamido-3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy

51. D-Glucopyranosylamine". Carbohydr.Res., 1978, v.65, p.307-310.

52. Takeda Т., Sugiura Y., Ogihara Y., Shibata S. "The Nephrito-genic Glycopeptide from Rat Glomamular Basement Membrane. Synthesis of a-D-glucopyranosylamines Derivatives". Can.J. Chem., 1980, v.58, № 23, p.2600-2603.

53. Garg H.G., Jeanloz R.W. "The Synthesis of the 1-w-(L-Aspart4.oyl)-glucosylamine-linkage. New synthesis of 1-N-(L-Aspart-1- and 4-oyl)-4-0-3-D-galactopyranosyl-3-D-glucopyranosylami-ne". Carbohydr.Res., 1975, v.43, p.371-376.

54. Paul В., Bernacki R., Korytnyk W. "Synthesis and Biological Activity of some 1-N-Substituted 2-Acetamido-2-deoxy-|b-D-glucopyranosylamine Derivatives and Related Analogs". Carbo-hydr.Res., 1980, v.80, № 1, p.99-115.

55. Marks G.S., Neuberger A. "Synthetic Studies Relating to the Carbohydrate-Protein, Linkage in Egg Albumin". J.Chem.Soc., 1961, p.4872-4879.

56. Tanaka M., Yamashida J. "The Synthesis of Various 1-N(L-Aspart-4-oyl)-glycosylamines and their Analogs". Carbohydr. Res., 1973, v.27, № 1, p.175-183.

57. Marks G.S., Marshall R.D., Neuberger A. "Observations on the Carbohydrate-Protein Bond in Egg Albumin". Biochem.J., 1962, v.85, № 2, Proc. 15p-16p.

58. Marks G.S., Marshall R.D., Neuberger A. "Carbohydrates in Protein. 6. Studies on the Carbohydrate-Peptide Bond in Hen's-Egg Albumin". Biochem.J., 1963, v.87, № 2, p.274-281.

59. Marshall R.D., Neuberger A. "Carbohydrates in Protein. VIII. The Isolation of 2-Acetamido-l-(L-p-aspartamido)-1,2-dideoxy-(3-D-glucose from Hen's Egg Albumin". Biochemistry, 1964, v.3, p.1596-1600.

60. Tsukamoto H., Yamamoto A., Miyashita C. "Isolation and Identification of 2-Acetamido-l-p(L-p-aspartamido)-1,2-dideoxy-D-Glucose from Partial Hydrolysate of Ovalbumin Glycopeptide Preparation". Biochem.Biophys.Res.Commun., 1964, v.15, p.151-157.

61. Yamamoto A., Tsukamoto H. "Studies on Amino Sugars. III. Isolation and Identification of Cristalline N-acetylglucosamine-asparagine Compound from Ovalbumin". Chem.Pharm.Bull., 1965, v.13, № 9, p.1046-1052.

62. Yamamoto A., Tsukamoto H. "Preparation of a-Benzyl-N-Benzyl-oxycarbonyl-D-L-aspartate and its Resolution by 2-Acetamido-2-deoxy-3,4,6-tri-O-acetyl-p-D-glucosylamine". Chem.Pharm. Bull., 1965, v.13, № 9, p.1131-1134.

63. Деревицкая B.A., Молодцов H.В., Кочетков H.K. "Гликопептиды. Сообщение II. Синтез N-аминоацильных производных глюкозиламина-". Изв. АН СССР, сер.хим., 1966, № 7, с.1188-1191.

64. Молодцов Н.В., Кочетков Н.К., Деревицкая В.А. "Гликопептиды. Дальнейшее развитие синтеза N-аминоацильных производных амино-сахаров". Изв. АН СССР, сер.хим., 1963, с.2165-2172.

65. Spinola М., Jeanloz R.W. "The Synthesis of a Di-N-acetylchito-biose Asparagine Derivative, 2-Acetamido-4-0-(2-acetamido-2-deoxy-p-D-glucopyranosyl) -1-N- (4-L-aspartyl) -2-deoxy-(3-D-gluco-pyranosylamine". J.Biol.Chem., 1970, v.245, № 16, p.4158-4162.

66. Yoshimura J., Hashimoto H. "Synthesis of N-Glycyl-2-acetami-do-2-deoxy-p-D-glucopyranosylamine". J.Chem.Soc.Japan, Pure Chemistry Section (Nippon Kagaku Zasshi), 1964, v.85, p.239-240.

67. Cowley D.E., Hough L., Peach C.M. "Synthesis of some Amino-acyl Derivatives of 2-Acetamido-2-deoxy-|3-D-Glucopyranosyl-amine and of 2-Amino-l-N-(4-L-aspartyl)-2-deoxy-(3-D-Gluco-pyranosylamine". Carbohydr.Res., 1971, v.19, p.231-241.

68. Киселева В.В., Максимов В.И., Каверзнева Е.Д. "Хроматографи-ческий способ выделения I-N-(а-бензил)-N'-(карбобензокси-3-L-аспартил)-2-ацетамидо-4,6-0-бензилиден-1,2-дидезокси-3-Б-глю-копиранозиламина при синтезе карбодиимидным методом". Изв.

69. АН СССР, сер.хим., 1972, № 4, с.959-961.

70. Paul В., Korytryk W. "Synthesis of -2-Acetamido-3,4,б-tri-O-acetyl-2-deoxy-(3-D-Glucopyranosylamine and Dimer Formation". Carbohydr.Res., 1978, v.67, p.457-468.

71. Shaban M.A.E., Jeanloz R.W. "The Synthesis of A Mannosyl N-Acetylglucosamine-L-asparagine Compound: 2-Acetamido-N-(L-aspart-4-oyl)-2-deoxy-3-0-a-D-Mannopyranosyl-p-D-glucopyrano-sylamine". Carbohydr.Res., 1972, v.21, p.347-356.

72. Shaban M.A.E., Jeanloz R.W. "The Synthesis of Oligosaccharide-L-asparagine Compounds. Part IV. 2-Acetamido-N-(L-aspart-4-oyl)-2-deoxy-6-0-a-D-mannopyranosyl-p-D-Glucopyranosylamine". Carbohydr.Res., 1972, v.23, p.243-249.

73. Dunstan D., Hough L. "Syntheses of Cellobiosyl, Maltosyl, and Lactosyl Derivatives of Asparagine". Carbohydr.Res., 1972,v. 23, p.17-21.

74. Dunstan D., Hough L. "The Synthesis of 2-Acetamido-l-N-(4-L-aspartyl)-2-deoxy-|3-D-galactopyranosylamine" . Carbohydr. Res . , 1972, v.25, p.246-248.

75. Garg H.G., Jeanloz R.W. "The Synthesis of Protected Glycopep-tides Containing the Amino Acid Sequences 34-37 and 34-38 Bovine Ribonuclease B". Carbohydr.Res., 1974, v.32, p.37-46.

76. Shaban M.A.E., Jeanloz R.W. "The Synthesis of Glycopeptide Fragments of Human Plasma a^-Acid Glycoproteins by Sequential Elongation at the Terminal-amino Group". Carbohydr.Res., 1975, v.43, № 2, p.281-291.

77. Garg H.G., Jeanloz R.W. "Synthesis of-Substituted Glycopep-tides Containing a 2-Acetamido-2-deoxy-p-D-glycopyranosyl Residue and the Amino Acid Sequence 18-22 of Bovine Pancreatic Deoxyribonuclease A1". J.Org.Chem., 1976, v.41, № 14,p.2481-2484.

78. Kunz H., Buchholz M. "Synthese von Glycopeptiden: Selektive Carboxydeblockierung an Vollstanding geschutzten Glucosylse-rin Derivaten". Angew.Chem., 1981, v.93, № 10, S.917-918.

79. Kunz H., Kauth H. "Synthese von Glycopeptiden: Selektive Amidodeblockierung an 2-Phosphonioethoxycarbonyl Geschutzten Asparagin-N-Acetylglucosamin. Bausteinen". Angew.Chem., 1981, v.93, № 10, S.918-919.

80. Hanessian S. "Selective Hydrolysis of Amide Bonds in Acet-amido Deoxy Sugars': Tetrahedron Letter, 1967, № 16, p.1549-1552.

81. Marshall R.D. "The Kinetics of the Acid Hydrolysis of 2-Acet-amido-l-N-(3-L-aspartyl)-2-deoxy-3-D-glucopyranosylamine". Biochim.Biophys,Acta, 1969, v.192, p.381-384.

82. Austen B.M., Marshall R.D. "Alkaline Reductive Cleavage of 4-N-(2-Acetamido-2-deoxy-3-D-glucopyranosyl)-L-asparagine". Biochem.J., 1971, v.124, № 2, р.14р-15р.

83. Cowley D.E., Hough L., Khan M.Y. "The Acid Hydrolysis of 2-Acetamido-l-N-(4-L-aspartyl)-2-deoxy-3-D-glucopyranosylamine". Carbohydr.Res., 1971, v.19, № 9, p.242-244.

84. Clamp J.R., Dawson G., Hough L., Khan M.Y. "The Enzymic Hydrolysis of 2-Acetamido-l-N-(4-L-aspartyl)-2-deoxy-3~D-glucopy-ranosylamines". Carbohydr.Res ., 1966, v.3, № 2, p. 254-255."

85. Yoshimura J., Hashimoto H. "Acid Hydrolysis of 2-Acetamido-l-N-(3-L-aspartyl)-2-deoxy-3-D-glucopyranosylamine and 1-N-Acetyl-2 (g-L-aspartyl) amino . -2-deoxy-p-D-glucopyranosylamine". Carbohydr.Res., 1967, v.4, № 5, p.435-438.

86. Bush C.A., Duben A., Ralapati S. "Conformation of the Glyco-peptide Linkage in Asparagine-Linked". Biochemistry, 1980,v.19, p.501-504.

87. Houben-Weil."Methoden der Organischen Chemie". IV Auflage, G.Thieme Verlage, Stuttgart, 1955, Bd.9, S.880.

88. Kraft F., Karstens H. "Uber Diparatoluylaamid und Diorthoto-luylamid". Chem.Ber., 1892, Bd.25, S.452-459.

89. Kay P. "Uber die Einwirkung von Sauren und Saurenanhydride auf Senfole". Chem.Ber., 1893, Bd.26, S.2848-2852.

90. Саундерс Д.Х., Фриш К.К. "Химия плиуретанов". М., Химия, 1968, с.91-241 .

91. Fischer Е. "Synthese Neuer Glucoside". Chem.Ber., 1914, Bd.47, S.1377-1393.

92. Haring K.M., Johnson T.B. "Researches on Nitrogenous Glycosides II. The Synthesis of Glycosido Ureides". J.Amer.Chem.Soc., 1933, v.55, № 1, p.395-402.

93. Johnson Т.В., Bergman W. "Researches on Nitrogenous Glycosides. I. The Utilization of Glucose Isocyanates for Glycoside Syntheses". J.Amer.Chem.Soc., 1932, v.54, P.3360-3363.

94. Johnson T.B., Bergman W. "Researches on Nitrogenous Gluco-sides. IV. Some New Attempts to Synthesize Pyrimidine Glycosides". J.Amer.Chem.Soc., 1938, v.60, p.1916-1923.

95. Micheel F., Lengsfeld W. Uber die Reaction des D-Glucos-amins. II. Mitteil; Verbindungen von D-Glucosamine mit Aminosauren". Chem.Ber., 1956, Bd.89, S.1246-1253.

96. Micheel F., Petersen H., Kochling H. "Uber die Reaktionen des D-Glucosamins, XIII"1"; Die Struktur des 3,4,6-Triacetyl-N-acetyl-D-glucosamin-l-3-isothiocyanats". Chem.Ber., 1960, Bd.93, № 1, S.1-3.

97. Micheel F., Petersen H. "Uber die Reaktionen des D-Glucos-amines. XI. Darstellung und Reaktionsweise einer echten Acetobromverbindung". Chem.Ber., 1959, Bd.92, S.298-301.

98. Micheel F., Kamp F.P., Petersen H. "Uber die Reaktionen des D-Glucosamins. IV. Die Acetohalogenverbindungen des D-Glucosamins". Chem.Ber., 1957, Bd.90, S.521-523.

99. Кульшин B.A. , Мачарадзе P.Г., Зурабян С.Э., Шульман M.JI. , Хорлин А.Я. "Новый способ получения ацетилированных гликозилизотиоцианатов". Авт. свид. СССР № 666182 (1979), Бюлл. изобр. , 1979 , № 21, с.81.

100. Зурабян С.Э., Волосюк Т.П., Хорлин А.Я. "Удобный способ получения р-нитрофенил-|3-0-глюкозаминидов". Изв. АН СССР, сер.хим., 1968, № 7, с.1612-1614.

101. Зурабян С.Э., Мачарадзе Р.Г., Хорлин А.Я. "Новый способ получения гликозиламидов". Тезисы докладов VI Всесоюз.конф. по химии и биохимии углеводов. М.: Наука, 1977, с. 5152.

102. Зурабян С.Э., Мачарадзе Р.Г., Хорлин А.Я. "Новый путь синтеза N-гликозиламидов". Изв. АН СССР, сер.хим., 1979, с.877-880.

103. Зурабян С.Э., Мачарадзе Р.Г., Хорлин А.Я. "Синтез производного 2-ацетамидо-2-дезокси-(3-В-глюкопиранозил-Б-аспарагина".-Биоорганическая химия, 1978, т.4 № 8, с.1135-1136.

104. Khorlin A.Ya., Zurabyan S.E. and Macharadze R.G. "Synthesis of Giycosylamides and 4-N-Glycosyl-L-Asparagine Derivatives". Carbohydr .Res . , 85(1980), p. 201-208.

105. Neuberger A., Gottschalk A., Marshall R.B., Spiro R.G. "In Glycoprote ins (Gottschalk A., ed.), Elsevier Publishing Company, Amsterdam-New York-London, 1972, p.450-490.

106. Arakawa Y., Imanari Т., Tamura Z. "Betermination of Natural and Amino Sugars in Glycoproteins by gas Chromatography". Chem.Pharm.Bull., 1976, v.24, № 9, p.2032-2037.

107. Шредер Э., Любке К. "Аспартилпептиды". В кн.: Пептиды. М.: Мир, ,1967, с. 261 -271 .

108. Церетели А.К., Куликова А.К., Шиян С.Д., Тихомирова А.С. "Очистка внутриклеточной (З-В-галактозидазы Saccharomyces Fragilis". Прикладная биохимия и микробиология, 1980, т.16, № 6, с.902-908.

109. Летунова Е.В., Тихомирова А.С., Шиян С.Д., Маркин В.А.,

110. Хорлин А.Я., Безбородов A.M. "Очистка и свойства З-Б-галак-тозидазы Alternaria Tenuis". Биохимия, 1981, т.46, № 5, с.911-919.

111. Chambers R.E., Clamp J.R. "An Assessment of Methanolysis and Other Factors Used in the Analysis of Carbohydrate-Containing Material". Biochem.J., 1971, 125, p.1009-1018.

112. Гринштейн Дж., Виниц M. "Химические методы синтеза пептидов". В кн.: Химия аминокислот и пептидов. М.: Мир, 1965, с. 274772 .

113. Лемье Р.У. "Тетра-О-ацетил-а-Б-глюкопиранозилбромид". В кн.: Методы химии углеводов. М.: Мир, 1967, с.123-125.

114. Finan P.A., Warren C.D. "The Purification of Acetyl-glycosyl Bromides". J.Chem.Soc., 1962, № 7, p.2823-2824.

115. Tipson R.S., Isbell H.S. "Infrared Absorption Spectra of some 1-Acetimidopyranosid Derivatives and Reversing Acetylat-ed Pyranoses". J.Res.Nat.Bur.Standards, 1961, v.65A, № 1,p.31-50.

116. Cerezo A.S. "N-H Proton Absorption in the NMR Spectra of N-Acyl-Glycosylamines, N.Acetyl-2-Amino-2-Deoxy-D-Glycoses, and 1,1-bis(Acylamido)-1-deoxy-alditols". Chem. and Ind., 1971, p.96-97.

117. Mesmer A.J., Pinter E., Szeco F. "Acetylzucker-Phosphinimine und -Carbodiimide". Angew.Chem.Int.Ed.Engl., 1964, v.3,p.227-231.

118. Kampf F.P., Micheel F. "Uber D-Glucose Derivate von Thiosemi-carbazonen und ihre Biologische Wirksamkeit." Chem.Ber., 1956, Bd.89, S.133-140.

119. Bhuyan B.K., Fraser T.J., Buskirk H.H., Neill G.L. "Antileukemic Activity of Streptozotocin (NSC-85998) and its

120. Analogs". Cancer Chemotherapy Reports, 1972, v.56, № 6, p.709-720.

121. Osawa T. "Reactions of 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-p-D-Glucopy-ranosyl Isothiocyanate with Partially Protected Sugar Derivatives". J.Org.Chem., 1966, v.31, № 11, p.3839-3840.

122. Bannister B. "The Synthesis and Biological Activities of some Analogs of Streptozotocin". J.Antibiot., 1972, v.25, № 7-9, p.377-386.

123. Yamamoto A. "L-Asparagine-N"^. "Biochem.Prep., 1963, v.10, p.10-18.

124. Гринштейн Дж., Виниц M. "Хлоргидрат этилового эфира глицил-глицина". В кн.: Химия аминокислот и пептидов. М.: Мир, 1965, с.311-312.

125. Считаю своим приятным долгом выразить глубокую благодарность коллективу лаборатории за постоянную помощь в выполнении данной работы.

126. Приношу искреннюю благодарность кандидату химических наук старшему научному сотруднику С.Э.ЗУРАБЯНУ, который в течение ряда лет был моим непосредственным руководителем.

127. Я благодарю также кандидата химических наук Н.В.БОВИНА за ценные советы и помощь в оформлении диссертации.

128. Я искренне признателен сотрудникам отдела инструментальных методов анализа ИБХ им. М.М.Шемякина, снимавшим спектры синтезированных нами соединений и выполнявшим элементные анализы.