Синтез аналогов экдистероидов и брассиностероидов на основе трансформаций 20-гидроксиэкдизона тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

005003587

На правах рукописи

Уразаева Яна Рустэмовна

СИНТЕЗ АНАЛОГОВ ЭКДИСТЕРОИДОВ И БРАССИНОСТЕРОИДОВ НА ОСНОВЕ ТРАНСФОРМАЦИЙ 20-ГИДРОКСИЭКДИЗОНА

02.00.03 - Органическая химия

2 4 НОЯ 2011

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации па соискание ученой степени кандидата химических паук

Уфа-2011

005003587

Работа выполнена в Учреждении Российской академии наук Институте нефтехимии и катализа РАН

Научный руководитель:

доктор химических наук, профессор Одиноков Виктор Николаевич

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор Валеев Фарид Абдуллович

доктор химических наук, профессор Зайнуллин Радик Аиварович

Ведущая организация:

Учреяадение Российской академии наук Новосибирский институт органической химии им. H.H. Ворожцова СО РАН

Защита диссертации состоится 14 декабря 2011 года в 1400 часов на заседании диссертационного совета Д 002.062.01 при Учреждении Российской академии наук Институте нефтехимии и катализа РАН по адресу: 450075, Уфа, проспект Октября, 141. Тел./факс: +7(347) 2842750; e-mail: ink@anrb.ru.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Учреждения Российской академии нате Института нефтехимии и катализа РАН, с авторефератом - на Интернет-сайте http ■Jlink.anrb.ru

Автореферат разослан 10 ноября 2011 года

Ученый секретарь ,

диссертационного совета

доктор химических наук

Шарипов Г.Л.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Экдистероиды - гормоны линьки и метаморфоза насекомых и ракообразных представляют собой обширную группу полигидроксилиро-ванных стеринов. К настоящему времени выделено и идентифицировано более 300 зоо- и фитоэкдистероидов. Известно, что экдистероиды обладают комплексом ценных свойств, полезных для медицины и сельского хозяйства. Установлено, что они нетоксичны для млекопитающих и человека и оказывают иммуномодулирующий, анаболический и противовоспалительный эффекты. Одним из наиболее широко изученных и доступных фитоэкдистероидов является 20-гидроксиэкдизон - основной компонент экдистеропдного состава растения Беггаш1а согопаШ. Помимо основного в растениях присутствуют минорные экдистероиды, которые, как полагают, обеспечивают защиту растения от насекомых-фитофагов. Уникальность структуры 20-гидроксиэкдизона обусловливает возможность трансформаций его в минорные и труднодоступные экдистероиды или аналоги с новыми свойствами, в том числе структурно родственные экдистероидам брассиностероиды - регуляторы роста и развития растений, выделение которых из природных источников неперспективно ввиду крайне низких концентраций брассинолидов в растениях.

Известно, что многие полезные для медицины свойства экдистероидов обусловлены их антиоксидантным действием, которое может быть усилено конъюгацией с природными антиоксидантами или их аналогами.

В этой связи разработка эффективных методов синтеза минорных экдистероидов, аналогов экдистероидов и брассиностероидов, а также конъюгатов экдистероидов с производными а-токоферола является актуальной задачей.

Работа выполнялась как плановая в Институте нефтехимии и катализа РАН по теме: «Химия экдистероидов и хроманолов: синтез и трансформации» (номер государственной регистрации 01.200.204384), «Химия стероидов, токоферолов и природных полисахаридов» (номер государственной регистрации 0120.0 850046), частично финансировалась Фондом содействия отечественной науке, грантом Президента РФ по государственной поддержке ведущих научных школ (НШ-6079.2008.3) и Академией наук Республики Башкортостан.

Цель и задачи исследования. Цель работы состояла в разработке путей синтеза аналогов экдистероидов и брассиностероидов на основе направленных трансформаций 20-гидроксиэкдизона - основного компонента растения БеггаЫа согопМа Ь., а также синтезе конъюгатов производных 20-гидроксиэкдизона с аналогом а-токоферола. Для достижения поставленной цели решались задачи по разработке методов преобразования стероидного остова и боковой цепи 20-гидроксиэкдизона, приближающих его структуру к структуре брассиностероида кастастерона, и разработке способа конъюгации экдистероидов с аналогом а-токоферола (витамина Е). Научная новизна. Разработан новый эффективный метод гидрирования малореак-ционноспособной двойной связи в кольце В экдистероидов над палладиевым катализатором в метаноле, содержащем метилат натрия, позволивший с высоким выходом в мягких условиях синтезировать труднодоступные 7,8-дигидроаналоги экдистероидов. Синтезированы 7,8а-дигидро-20-гидроксиэкдизон и 7,8а-дигидропонастерон А и их производные. Показано, что этот метод столь же эффективен при гидрировании 7,14-сопряженных диеновых экдистероидов. Диацетонид стахистерона В с высоким выходом был превращен в соответствующее 7,8а,14а,15-тетрагидропроизводное -диацетонид 7,8а-дигидро-14а-дезокси-20-гидроксиэкдизона. Полученный из диаце-тонида 20-гидроксиэкдизона дегидратацией по 14а- и 25-гидроксильным группам диацетонид ги-ангидростахистерона В в одну стадию был превращен в диацетонид 7,8а-дигидро-14а-дезоксипонастерон А, гидролиз которого привел к структуре, содержащей элементы понастерона А и кастастерона.

Озонолизом в присутствии пиридина диацетонидов <и-апгидро-20-гидроксиэкдизона проведена ш-оксофупкциопалшация боковой цепи. Показано, что наиболее эффективным методом окисления полученного альдегида до соответствующей кислоты - 25,26,27-трис-кор-аналога экдизоновой кислоты, является озоно-лиз в пиридине.

Найден новый метод регио- и стереонаправленной трасформации экдистероидов и их 7,8-дигидроаналогов в 2-дегидро-З-элк-экдистероиды и их 7,8-дигидропроизводные в одну стадию путем озонирования в пиридине. С помощью данного метода 20-гидроксгокдизон был превращен в 2-дегидро-3-эли-20-

гидроксиэкдизон - минорный экдистероид, выделенный из семян растения Froelichia Jloridana, который ранее синтезировали из того же исходного соединения в 6 стадий. Практическая значимость. Разработан эффективный и удобный препаративный метод гидрирования двойных связей в экдистероидах и 7,14-диеновых экдистерои-дах, использованный в синтезе аналогов экдистероидов и брассиностероидов. Предложен одностадийный метод регио- и стереоселективного превращения экдистероидов в 2-дегидро-З-эпи-экдистероиды. Синтезирован 2-дегидро-3-элг/-20-гидроксиэкдизон - минорный экдистероид растения Froelichiajloridana.

Синтезированы моно- и бис- конъюгаты 20-гидроксиэкдизона и его 20,22-ацетонида с аналогом а-токоферола. В результате биологического скрининга in vitro и in vivo установлено, что бис-аддукт в сравнении с 20-гидроксиэкдизоном и витамином Е гораздо более активно ингибирует процессы перекисного окисления липи-дов.

Апробация работы. Основные результаты исследований представлены на V Всероссийской научной конференции «Химия и технология растительных веществ» (Уфа, 2008), 30-ом Всероссийском семинаре «Озон и другие экологически чистые окислители» (Москва, 2008), Международной конференции «Актуальные проблемы химии природных соединений» (Ташкент, 2009), VII Всероссийской конференции с молодежной научной школой «Химия и медицина, 0рхимед-2009» (Уфа, 2009), Всероссийской конференции по органической химии (Москва, 2009), VII Международном симпозиуме по фенольным соединениям (Москва, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 статей и тезизы 7 докладов на конференциях, получен патент РФ.

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 102 страницах компьютерного набора (формат А4) и включает введение, литературный обзор на тему «Химия и биологическая активность экдистероидов, брассиностероидов и их аналогов», обсуждение результатов, экспериментальную часть, выводы, список литературы (129 наименований).

Автор выражает благодарность кандидату химических наук, старшему научному сотруднику Савченко Римме Гафуровне за постоянную научно-методическую помощь и активное участие в работе.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Химическими трансформациями 20-гидроксиэкдизона - одного из наиболее доступных экдистероидов ранее были получены многие малораспространенные в природе зоо- и фитоэкдистероиды, а также аналоги экдистероидов с новыми видами биологической активности. Сходство структур гормонов насекомых (экдистероидов) и фитогормонов (брассиностероидов) обусловливает возможность направленных трансформаций несоразмеримо более доступных растительных экдистероидов в брассиностероиды. Проведенные нами исследования по направленным трансформациям 20-гидроксиэкдизона привели к структурам, содержащим экдистероидные и брассиностероидные фрагменты.

и брассиностероидов.

1. Новый метод каталитического гидрирования экдистероидов в щелочных условиях.

На первом этапе приближения к структуре брассиностероида кастастерона предстояло найти метод восстановления малореакционноспособной Д7-связи с получением 7,8-дигидроаналогов экдистероидов. Недавно опубликованный метод гидрирования экдистероидов в присутствии нитрита натрия не удалось воспроизвести. Однако нами было найдено, что гидрирование Д7-связи в экдисгероидах гладко протекает в щелочной среде на палладиевом катализаторе в метаноле в присутствии ме-тилата натрия.

При гидрировании 20-гидроксиэкдизона 1 в присутствии 10%-ного Р<3/С (МеОН/МеСЖа, комнатная температура, атмосферное давление, Зч) и последующей

' Бикхатгаш А., Тапас1Шс1шгаЙла Т., 51п(*ат С., ТШгаНе^оп, 2002, 58, 6033.

обработке реакционной смеси хлористым аммонием образуется единственный продукт - 7,8а-дигидро-20-гидрокснэкдизон 2 (выход после колоночной хроматографии на Si02 превышал 90%). В тех же условиях и с высоким выходом диацетонид 20-гидроксиэкдизона 3 был превращен в 7,8а-дигидроаналог 4, а из диацетонида пона-стерона А 5 получен диацетонид 7,8а-дигидропонастерона А б (схема 1).

Схема 1.

1:R'.R^r'>R«-H 2:R'=R'-R'-R'=H (90.5V.)

J. Dum« = Г

Легкость гидрирования нереакционноспособной пространственно затрудненной Д7-связи экдистероидов в найденных нами условиях можно объяснить депрото-нированием исходного «//-сопряженного кетона в щелочных условиях (при действии метилата натрия) с образованием 6(7),8(9)-диенолята А, в котором происходит гидрирование Дад-связи с образованием 8,9-дигидроенолята Б, протонирование которого приводит к целевому 7,8-дигидроаналогу.

Диацетонид 6 был получен также гидрированием диацетонида со-дегидропонаетерона А 7 - продукта дегидратации диацетонида 20-гидроксиэкдизона 3. Таким образом, в данном случае наряду с двойной связью сопряженного 7-ен-6-она происходит гидрирование также двойных связей в боковой цепи (схема 2).

С целью синтеза 7,8а-дигидропонастерона All диацетонид 6 был подвергнут гидролизу. Однако удалось деблокировать только 2,3-дигидроксильные группы, при этом дополнительно происходила дегидратация по 14я-гидроксильной группе. В итоге, были выделены 20,22-ацетонид 7,8а-дигидропонастерона А 8 и его 14,15-ангидропроизводное 9. 7,8а-Дигидропонастерон А 11 был получен в 3 стадии путем гидрирования над Ni-Ra соединения 7 с последующим деблокированием вициналь-ных гидроксильных групп и каталитическим гидрированием понастерона А 10 над Pd-C в щелочном метаноле (схема 2).

Схема 2.

Структура полученных 7,8-дигидроаналогов 4 и 6 подтверждена Ш- и 2Э-спекграми ЯМР 'Н и 13С. Ядерный эффект Оверхаузера, наблюдаемый в экспериментах ЯОЕЗУ между протонами ^-ориентированной группы Н3С" и Н5 соединений 4 и 6, свидетельствует о шгс-сочленении колец А и В, то есть о ^-конфигурации протона при атоме С5. Ядерный эффект Оверхаузера между протонами Н* и аЛЮС14 (ЮЕ8У) подтверждает а-конфигурацию протока при атоме С8. Для диацетонида 4 был выполнен рентгеноструктурный анализ (рис.1), однозначно подтвердивший конфигурацию всех хиральных центров и показавший, что при гидрировании в щелочных условиях не происходит инверсии склонного к эпимеризации протона при атоме С5, то есть сохраняется цис-сочленение колец А и В в молекуле, а протон при вновь образующемся хиральном центре С* имеет а-конфигурацию.

Рис.1. Структура молекулы 2,3:20,22-диацетонида 7,8а-дигидро-20-гидроксиэкдизона (4) в кристалле.

Разработанный метод гидрирования эффективен также для 7,14-диеновых эк-дистероидов. Гидрированием диацетонида стахистерона В 12 (синтез!фован ранее дегидратацией диацетонида 3 под действием трифторуксусного ангидрида через промежуточный 25-трифторацетат 14*) получен 7,8а-дигидростахистерон В 13 (выход 92%). Оказалось, что гидрирование трифторацетата 14 также приводит к соединению 13, то есть в процессе гидрирования происходит гидролиз трифторацетильной группы (схема 3).

Схема 3.

14:Я-СОСР3

Без осложнений прошло гидрирование диацетонида 9а-гидроксистахистерона В 15 - продукта перегруппировки диацетонида 9а,14а-эпокси-14я-дезокси-20-гидроксиэкдизона*. При конверсии 44% с выходом 51% получен диацетонид 14а-дезокси-7,8а-дигидро-9а,20-дигидроксиэкдизона 16 (схема 4).

* Одиноков В.Н., Галяугдинов И.В., Недоттекин Д.В., Халилов Л.М. // Известия АН. Сер. хим., 2003, №1,220. ' Одиноков В.Н, Галяугдинов И.В., Веськипа H.A., Халилов Л.М., Долгуши» Ф.Н., Старикова З.А. //Химия гетероцит. соед., 2008, №9, 1339.

О превращении 7,14-диенов 12 и 15 в соответствующие тетрагидроаналоги 13 и 16 свидетельствует отсутствие в их спектрах ЯМР 13С сигналов ер2 гибридизован-ных атомов углерода (область 5 120-160 м.д.), а также винпльных атомов водорода в спектрах ЯМР 'Н (область 5-6 м.д.) и смещение сигнала кетогруппы (атома С6) в слабое поле (Д6~9 м.д.).

Полученный последовательной дегидратацией диацетонида 20-гидроксиэкдкзона 3 сначала по 25-гидроксильной группе (реагент МвСЛ/Ру-ОМАР), а затем по 14а-гидроксильной группе (обработка образовавшегося Д24/25-дегидропонастерона А 7 трифторуксусным аш-идридом в хлороформе в присутствии пиридина) диацетонид со-ангидростахистерона В 17 был успешно (гидрированием в одну стадию) превращен в диацетонид 7,8а-дигидро-14а-дезоксипонастерон А 18 (схема 5).

Схема 5.

Для соединения 18 был сделан рентгеноструктурный анализ (рис.2), однозначно подтвердивший конфигурацию вновь образовавшихся С* и С14 хиральных

центров, протоны при которых занимают «-положение. Установлено также, что ¡}-конфигурация протона при атоме С5 сохраняется {цис-сочленение колец А и В).

Рис.2. Структура молекулы 2,3:20,22-диацетонида-7,8а-дигидро-14а-дезокси-20-гидроксиэкдизона (18) в кристалле.

Гидролиз диацетонида 18 привел к соединению 19 (схема 6), в структуре которого присутствуют элементы, свойственные как экдистероидам (понастерону А), так и брассиностероидам (кастастерону).

Схема 6.

Таким образом, каталитическим гидрированием в щелочных условиях ди- и триеновых экдистероидов синтезированы 7,8а-дигидро-14а-дезоксиэкдистероиды, которые можно рассматривать также как аналоги брассиностероида кастасгерона

2. ю-Функционализация боковой цепи 20-гидроксиэкдизона.

Использованная в синтезе понастерона А и его 7,8о-дигидропроизводных

смесь диацетонидов 24(25)- и 25(26)-дегидропонастерона А 7 была подвергнута со-

функционализации путем озонолиза. При проведении озонолиза смеси 7 в пиридине образующиеся перекисные соединения разлагаются в процессе озонирования, что

позволяет избежать стадии восстановительного разложения пероксидов. Наряду с упрощением процесса повышаются выходы альдегида 20 и кетона 21 до 60 и 50% соответственно (против достигаемых ранее* 45 и 22 %).

Окислением альдегида 20 путем озонирования в пиридине с последующей обработкой реакционной смеси эфирным раствором диазометана был получен диаце-тонид 23-метоксикарбонил-25,26,27-трис-но/?-20-гидроксиэкдизона 22 - аналог 20-гидроксиэкдизоновой кислоты 23, выделенной из личинок насекомого 5ро3.ор1ега ИПогаИз.

При взаимодействии смеси карбонильных соединений 20 и 21 с малоновой кислотой в присутствии смеси пиридина и пиперидина (реакция Кневенагеля) избирательно вступает в реакцию только альдегид 20. В результате синтезирован диацето-нид 24-карбоксиметилиден-25,26,27-трис-нор-20-гидроксиэкдизона 24 (схема 7).

Схема 7.

В спектре ЯМР 13С сигналы карбонила групп С02Ме (соединение 22) и С02Н (соединение 24) наблюдаются при 5 171.6 и 176.0 м.д. соответственно. Сигналы атомов углерода двойной связи, сопряженной с карбоксильной группой, в спектре ЯМР 13С соединения 24 выходят в области 146.7 (С24) и 129.0 м.д. (С2'), которые в спектре ШС2С имеют кросс-пики с протонами НС2'' (6.94 м.д.) и НС2' (5.91 м.д.).

' Одиноков В Н., Назмеева С.Р., Савченко Р.Г., Галяутдинов И.В., Халилов П.М.МЖОрХ, 2002, 38, 550.

Таким образом, с применением на двух стадиях метода озонирования в пиридине синтезирован структурный аналог 20-гидроксиэкдизоновой кислоты. На примере конденсации Кневенагеля показана возможность избирательного вовлечения в реакцию из смеси альдегида и кетона более реакционноспособного альдегида.

3. Рсгио- и стерсоиаправлеиные трансформации кольца А 20-

гидрокснэкдизоиа и его производных при озонировании в пиридине.

В брассиностероидах 2- и 3-гидроксильные группы кольца А являются а-ориентированными, тогда как в экдистероидах эти группы имеют /^-конфигурацию.

Возможным путем эпимеризации 2- и 3-гидроксильных групп может служить их окисление до кето-групп с последующим стереоселективным восстановлением до 2а,Зя-гидроксильных групп. Однако окисление эвдистероидов по гидроксильным группам кольца А протекает не селективно. Так, при окислении 20-гидроксиэкдизона периодатом натрия и соединениями шестивалентного хрома основным направлением реакции является расщепление связи С20-С22 с образованием постстерона (это может быть использовано для построения боковой цепи брассино-стероидов).

Нами была исследована возможность трансформации кольца А эвдистероидов в реакции озонирования. Хорошо известно, что стерически затрудненная Д7-связь в экдистероидах инертна к озону. С другой стороны, вторичные спиртовые группы, присутствующие в экдистероидах, могут присоединять молекулу озона по связи С-Н с образованием а-гидроксигидротриоксида, который неустойчив и разлагается с образованием соответствующего кетона.

При озонировании эвдистероидов в различных растворителях (СН2С12, ЕЮАс, ЕЮН, АсОН) было выявлено, что только при озонировании в пиридине при комнатной температуре с выходом -43% и при 50% конверсии исходного соединения образуется требуемое 2-дегидро-З-эни-производное. Таким образом, озонированием 20,22-ацетонида 20-гидроксиэкдизона 25 получен 20,22-ацетонид 2-дегидро-З-эпк-20-гидроксиэкдизона 26 (схема 8). Весьма знаменательно, что озонирование в найденных условиях 20-гидроксиэкдизона 1, содержащего дополнительную вторичную группу (в боковой цепи), также селективно приводит к 2-дегидро-3-эиы-20-

гидроксиэкдизону 27 - минорному экдистероиду, выделенному из семян растения РгоеНсЫаАопЛапа. Ранее* этот экдистероид был синтезирован путем шести стадийных трансформаций 20-гидроксиэкдизона с общим выходом 7%.

Схема 8.

Структура соединения 27 установлена Ш и 2Т) ЯМР 'Н и 13С экспериментами. Типичный для экдистероидов Д7-6-кетофрагмент остается неизменным в условиях реакции, что подтверждается наличием сигналов атомов углерода в области 203.3, 167.1 и 122.1 м.д. в спектре ЯМР 13С. Присутствие дополнительного сигнала в области, характерной для карбонильных углеродов (210.9 м.д.), свидетельствует о трансформации одной из вицинальных гидроксильных групп кольца А в кетон. Взаимодействие двух дублетов геминальных протонов (5 2.38 и 5 2.57 м.д., 21 13.8 Гц) с одним и тем же сигналом карбонильной группы (5 210.9 м.д.) в спектре НМВС свидетельствует о том, что данные сигналы относятся к группам Н2С' и ОС2 соответственно. В свою очередь, образование 2-кетона приводит к смещению сигнала атома С3 и протона при нем в более слабое поле (Д8с 7.4, Д5н 0.4 м.д.). Большая КССВ (.Г 11.9 Гц) в дублете протона НС3, отвечающая взаимодействию с аксиальным протоном группы Н2С'>, свидетельствует об аксиальной ориентации /?-протона при атоме С3. Соответственно, гидроксильная группа у атома С3 является а-ориентированной. Протон атома С5 не меняет в условиях реакции своей ^-ориентации. Его аксиальному положению в кольце А отвечает КССВ 14.6 Гц с аксиальным протоном группы Н2С*.

Избирательность окисления экдистероидов при озонировании в растворе пиридина, вероятно, обусловлена образованием комплекса пиридина с озоном, менее

* СЬагоаитк в., Ут^опршгоп^и! В., Зикватгагп А. // Те1гаИес!гоп, 2000,56, 9313.

реакционноспособного по сравнению с самим озоном. Однако, поскольку такого рода комплексы не стабильны, реакция в пиридине, предварительно насыщенном озоном, не протекала. Предпочтительность реакции по гидроксилыюй группе при атоме С2 обусловливается, по-видимому, атакой на пространственно более доступную аксиальную связь Н-С2 с образованием стабилизированного внутримолекулярной водородной связью а-гидроксигидротриоксида А. При его разложении образуется 2-оксопроизводное Б, которое в среде пиридина эпимеризуется по соседнему с кето-группой атому С3 (через ендиол В) с образованием, очевидно, более устойчивого 2-оксо-За-гидроксипроизводного, гидроксильная группа при атоме С5 которого экваториальна (схема 9).

С целью расширения применения стереоизбирателыюго окисления озоном в пиридине вторичных гидроксильных групп в кольце А экдистероидов была исследована возможность этой реакции с 7,8-дигидроаналогами экдистероидов. Озонирование в пиридине 20,22-ацетонида 7,8а-дигидроаналога 20-гидроксиэкдгоона 28 протекает аналогично негидрирова иному соединению 25 и приводит с выходом 43% при конверсии 50% к 20,22-ацетониду 2-дегидро-3-элк-7,8а-дигидро-20-гидроксиэкдизона 29 (схема 10). В отличие от 2,3:20,22-диацетонида 20-гидроксиэкдизона 3, не вступающего в исследуемую реакцию, его 7,8 а-дигидроаналог 4 при озонировании в пиридине (аналогично моноацетониду 28) с выходом 46% превращается в соединение 29 (схема 10). Как видно, в диацетониде 7,8а-днгидроаналога 4 связь Н-С' в 2,3-изопропилидендиоксидном цикле более доступна для атаки озоном по сравнению с диацетонидом 20-гидроксизкдизона 3.

Схема 9.

,о-о

в

4: И'+к'=МеаС

Озонирование 2,3:20,22-диацетонида 7,8а-дигидропонастерона А 6 (как и ди-ацетонида 4) с выходом 45% приводит к 20,22-ацетониду 2-дегидро-3-эим-7,8а-дигидропонастерона А 30 (схема 11). Изменения спектральных характеристик соединений 29 и 30 по отношению к исходным соединениям 4 и 6 аналогичны ранее приведенным для других 2-дегидро-З-элн-производных.

Схема 11.

Озонированием в пиридине диацетонида 6а-гидрокси-25-дезокси-7,8а-дигидропроизводного 32 получена смесь (3.7:1) диацетонида 6 и ацетонида 30 (схема 12). Очевидно, в первую очередь происходит окисление 6-гидроксигруппы, после чего образовавшийся кетон 6 превращается в 2-дегидро-З-эпи-производное 30. Соединения 6 и 30 были разделены с помощью колоночной хроматографии.

Соединение 32 было получено гидрированием над никелем Ренея диацетонида со-дегидропонастерона А 31, который в свою очередь, был получен со-дегидратацией диацетонида 7,8а-дигидро-20-гидроксиэкдизона 4 (схема 12).

У<

у,

у,

о

(63%) (17%)

6 + 30

Таким образом, разработанная методология озонирования в пиридине является общей для регио- и стереонаправленной трансформации вторичных гидроксиль-ных групп кольца А в экдистероидах и их производных в 2-дегидро-З-эли-экдистероиды. Данный метод озонолитического окисления эффективен также для окисления 6-гидроксильной группы.

4. Коныогаты 20-П1дроксшкцизона и его производных с ш-оксо-2С-аналогом а-токоферола и их биологическая (антиоксидаитная) актив-

Исследование медико-биологических свойств экдистероидов, оказавшихся нетоксичными для теплокровных животных и человека, выявили разнообразные полезные физиологические свойства. Экдистероиды регулируют минеральный, углеводный, липидный и белковый обмен, нормализуют уровень сахара и холестерина, стимулируют кроветворную функцию, оказывают иммуномодулирующее действие. В определенной мере столь разнообразная физиологическая активность экдистероидов обусловлена антиоксидантными свойствами, поскольку многие заболевания связаны с окислительным стрессом организма.

Для усиления фармакологического эффекта экдистероидов перспективным является их конъюгация с природными фенольными антиоксидантами - си-токоферолом и его аналогами. Нами исследовано взаимодействие 20-гидроксиэкдизона 1, его 2,3- 33 и 20,22-ацетонидов 25 с (б-бензилокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-ил)ацетальдегидом 34 - (<а-оксо-2С-аналогом а-токоферола) с целью синтеза соответствующих конъюгатов (схема 13).

При взаимодействии экдистероида 1 с 2-кратным мольным избытком альдегида 34, катализируемом фосфорномолибденовой кислотой (ФМК), получен с выходом 62% бисадцукг 35. Реакция ускоряется при использовании в качестве катализатора

ность.

ТбОН, однако выход бисацеталя 35 не изменяется. Реакция 2,3-ацетонида 20-гидроксиэкдизона 33 с эквимольным количеством хроманилэтаналя 34 в присутствии ТвОН или ФМК также приводит к бисаддукту 35, но его выход составил 35%. В тех же условиях из 20,22-ацетонида 25 был получен с выходом 60% 2,3-моноаддукт 36. По-видимому, образование бисаддукта 35 из 2,3-ацетонида обусловлено известной лабильностью последнего в кислотной среде.

Схема 13.

Наряду с конъюгатами 35 и 36 выделены их 14,15-ангидропроизводные 37 и 38 с выходами 26 и 20% соответственно, которые можно рассматривать как соответствующие конъюгаты стахистерона В. б-Дебензилирование конъюгатов 35 и 36 гладко протекает при гидрировании в растворе этанола в присутствии катализатора Р(1-С и приводит к соответствующим соединениям 39 и 40 со свободной фенольной группой. Для бисаддукта 39 был снят масс-спектр МА1ЛЭ1 ТОР и зарегистрирован ион [М+Н]+.

В спектрах ЯМР 'Н и 13С полученных гибридных соединений присутствуют сигналы всех атомов водорода и углерода экдистероидного и хроманильного фрагментов молекул.

В спектре ЯМР ПС моноаддукга 36 в области, характерной для ацетальных атомов углерода, присутствуют сигналы четвертичного (5 106.97 м.д.) и третичного (6 101.97 м.д.) атомов углерода 20,22-0-шопропилидендиокси- и 2,3-0-эгилидендиоксигрупп соответственно. В спектре ЯМР 13С бисаддукта 35 наблюдаются 3 сигнала О-этилидендиоксигрупп в области 5 101.99, 101.41 и 101.63 м.д. с соотношением интенсивностей 2:1:1. Очевидно, два последних из них относятся к 20,22-0-(б-бензилокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-ил)этилидендиокси- фрагменту.

При образовании 1,3-диоксоланов - циклических 2,3- и 20,22-ацеталей в соединении 35 появляются два новых асимметрических атома С2 и С2 . Из них в спектре ЯМР 13С только сигнал атома С2 удваивается в результате образования №Д,Й)-и (Д,Д,Л)-диастереомерных 1,3-диоксоланов. Очевидно, наблюдаемое удвоение сигнала С2" происходит вследствие влияния сильно различающихся заместителей при атомах С20 и С22 в 1,3-диоксолановом цикле 20,22-ацеталя. В то же время в 2,3-ацетале заместители при атомах С2 я С3 1,3-диоксоланового цикла мало отличаются друг от друга, и сигнал хирального ацетального атома С2 выходит одним пиком. Сигналы протонов при ацетальных атомах С2 и С2 в спектрах ЯМР 'Н бисаддукта 36 представляют собой уширенные синглеты (у/щ 13 Гц) в области 8 5.18 (20,22-ацеталь) и 5.24 м.д. (2,3-ацеталь).

В спектрах ЯМР 13С соединений 37 и 38 [вместо сигналов 5 ~31 (С^) и -85 м.д. (С") в спектрах аддуктов 35 и 36] обнаруживаются сигналы яр2-гибридизованных атомов углерода при 5 -123 (С14) и -149 м.д (С'5), а в спектрах ЯМР 'Н этих соединений дополнительно к сигналам в области 5 ~6.1 м.д. (НС7) появляются сигналы 8 -6.0 м.д. (НС75). Эти данные свидетельствуют об образовании связи Д14(15) в соединениях 37 и 38 - конъюгатах стахистерона В.

Таким образом, впервые синтезированы конъюгаты экдистероидов с аналогом а-токоферола по его карбонильной группе.

Антиоксидантная активность 20-гидроксиэкдизона 1, его моно- 40 и бис-39-конъюгатов исследована (Башкирский Государственный Университет) на примере

модельной реакции инициированного окисления 1,4-диоксана при 348 К и концентрации ингибирующих добавок 4-10"5 моль/л. Для сравнения в аналогичных условиях изучены антиокислительные свойства а-токоферола и его аналогов (6-гидрокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-ил)этанола и 6-гидрокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-карбоновой кислоты (тролокс). В результате проведенных кинетических исследований найдено, что значения эффективных констант скорости ингибирования инициированного окисления 1,4-диоксана для соединений 1, 40, 39, а-токоферола, 6-бензилокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-илэтанолом и тролоксом находятся в соотношении 0.04: 1.6:1.1:0.4:1.3:4.0, соответственно.

Таким образом, эффективность ингибирования окисления 1,4-диоксана моно-40 и бисаддуктами 39 выше таковой для «-токоферола, но уступает тролоксу.

В Институте химии растительных веществ АН Узбекистана (г. Ташкент) проведен биологический скрининг in vitro и in vivo на печени мышей антиоксидантных свойств синтезированных конъюгатов. Установлено, что бис-аддукт 39 в сравнении с 20-гидроксиэкдизоном и коммерческим витамином Е гораздо более активно ингиби-рует процессы перекисного окисления липидов. Кроме того, отмечено выраженное повышение по сравнению с 20-гидроксиэкдизоном и витамином Е активности ферментов каталазы и супероксиддисмугазы, определяющих состояние антиоксидант-ной защиты организма.

ВЫВОДЫ

1. Разработан эффективный и селективный метод гидрирования двойных связей в экдистероидах и 7,14-диеновых экдистероидах в щелочных условиях (MeONa/MeOH) над палладиевым катализатором (10% Pd-C).

2. Путем дегидратации по 14а- и 25-гидроксильным группам диацетонида 20-гидроксиэкдизона и последующих стадий каталитического гидрирования в щелочных условиях и деблокирования гидроксильных групп синтезирован 7,8а-дигидро-14а-дезоксипонастерон А, содержащий структурные элементы экдистероида и брас-синостероида.

3. Озонолизом в пиридине диацетонида ш-аигидро-20-гидроксиэкдизона проведена íü-функционализация боковой цепи. Окислением выделенного альдегида с помощью

озона в пиридине получена соответствующая кислота - трис-нор-аналог 20-гидроксиэкдизоновой кислоты. Показано, что при взаимодействии смеси ш-оксопроизводных с малоновой кислотой (реакция Кневенагеля) в реакцию вступает только альдегидная компонента.

4. Разработан метод регио- и стереонаправленной трансформации экдистероидов и 7,8-дигидроэкдистероидов по кольцу А, приводящей к 2-дегидро-З-э/ш-экдистероидам в одну стадию путем озонирования в растворе пиридина. Предложен одностадийный синтез 2-дегидро-3-элм-20-гидроксиэкдизона - минорного экдисте-роида растения Froelichia floridana, ранее получаемого в 6 стадий из того же исходного соединения - 20-гидроксиэкдизона.

5. Разработан метод конъюгации экдистероидов с &>-оксо-2С-аналогом а-токоферола. Синтезированы 2,3-моно- и 2,3:20,22-бис-конъюгаты 20-гидроксиэкдизона, проявившие высокую антиоксидангную активность. Установлено, что в испытаниях in vitro и in vivo бис-конъюгат более активно (в сравнении с витамином Е) ингибирует процессы перекисного окисления липидов , а также повышает активность ферментов каталазы и супероксиддисмутазы , определяющих состояние антиоксидантной активности организма.

Основное содержание работы изложено в следующих публикациях:

1. R.G.Savchenko, Y.R. Urmanova*, R.V. Shafikov, S.R. Afon'kina, L.M. Khalilov, V.N. Odinokov. Regio- and stereodirected transformation of 20-hydroxyecdysone to 2-dehydro-3-e/n'-20- hydroxyecdysone under ozonization in pyridine. // Mendeleev Commun., 2008,18, № 4, 191-192.

2. Р.Г. Савченко, Я.Р. Уразаева, P.B. Шафиков, В.Н. Одинокое. Регио- и стереона-правленное окисление экдистероидов и их 7,8-дигидроапалогов озоном в пиридине. ИЖОрХ, 2009, 45, № 8, 1163-1166.

Урманова Я.Р. сменила фамилию на Уразаеву Я.Р.

3. Р.Г. Савченко, Я.Р. Уразаева, Р.В. Шафиков, В.Н Одиноков. Эффективный метод селективной трансформации экдистероидов в 7,8-дигидроаналоги путем каталитического гидрирования в щелочных условиях. // ЖОрХ, 2010, 45, № 1, 147-149.

4. В.Р. Хайруллина, Я.Р. Уразаева, Р.Г. Савченко, А.Я. Герчиков, В.Н Одиноков. Антиокислительные свойства конъюгатов производных 20-гидроксиэкдизона с по-лизамещенным хроманилальдегидом. И Кинетика и катализ, 2010, 51, № 4, 1-5.

5. Р.Г. Савченко, Я.Р. Уразаева, А.Ю. Спивак, В.Н. Одиноков. Конъюгаты 20-гидроксиэкдизона, стахистерона В и их 20,22-ацетонидов с (6-бензилокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2ил)ацетальдегидом. IIЖОрХ, 2010, 46, № 8, 1158-1161.

6. R.G. Savchenko, Y. R. Urasaeva, I.V. Galyautdinov, S.R. Afonkina, L.M. Khalilov, F.M. Dolgushin, V.N. Odinokov. Synthesis of 7,8a-dihydro-14a-deoxyecdysteroids. // Steroids, 2011, 76, 603-606.

7. Р.Г. Савченко, Я.Р. Уразаева, C.P. Афонькина, В.Н. Одиноков. Трансформации диацегонида ш-ангидро-20-гидроксиэкдизона в 7,8а-дигидропонастерон А и его ацетониды. И ЖОрХ, 2011, 47, № 7, 1078-1080.

8. Р.Г. Савченко, Я.Р. Уразаева, В.Н. Одиноков. Способ получения 2-дегвдро-З-эпы-20-гидроксиэвдизона, минорного экдистероида семян растений Froelichia flori-dana. И Патент РФ № 2397177, Бюл. изобр. № 23 (2010).

9. Я.Р. Урманова*, Р.Г. Савченко, Р.В. Шафиков, В.Н. Одиноков. Превращения 20-гидроксиэкдизона и его производных под действием озона и надкислот. // Тезисы докладов, V Всероссийской научной конференции «Химия и технология растительных веществ», Уфа, 2008, с.ЗОО.

10. Р.Г. Савченко, Я.Р. Урманова*, Р.В.Шафиков, В.Н. Одиноков. Озонирование 20-гидроксиэкдизона и одностадийный синтез 2-дегидро-3-энн-20-гидроксиэкдизона - минорного фитоэкдистероида. // Тезисы докладов 30 Всероссийского семинара «Озон и другие экологически чистые окислители», Москва, 2008, с. 58-63.

11. Р.Г. Савченко, Я.Р. Уразаева, В.Н. Одиноков. Озонирование как новая методология в полусинтетическом подходе к минорным экдистероидам. // Тезисы докладов Конференции «Актуальные проблемы химии природных соединений», Ташкент, Узбекистан, 2009, с. 27.

12.Я.Р. Уразаева, Р.Г. Савченко, А.Ю. Спивак, О.В. Иванова, В.Н. Одиноков. Копъ-югаты производных 20-гидроксиэкдизона с полизамещенным хроманилальдеги-дом - аналогом витамина Е. // Тезисы докладов VII Всероссийской конференции с молодежной научной школой «Химия и медицина, 0рхимед-2009», Уфа, 2009, с.286.

13.Я.Р. Уразаева, Р.Г. Савченко, В.Н. Одиноков. Эффективный метод селективного каталитического гидрирования Д7-связи в экдистероидах. // Тезисы докладов Всероссийской конференции по органической химии, Москва, 2009, с. 136.

14.Я.Р. Уразаева, Р.Г. Савченко, А.Ю. Спивак, В.Н. Одиноков, В.Р. Хайруллина, А.Я. Герчиков. Синтез новых эффективных антиоксидантов на основе конъюгации 20-гидроксиэкдизона и его 20,22-ацетонида с С2-аналогом а-токоферола. // Тезисы докладов VII Международного симпозиума по фенольным соединениям, Москва, 2009, с. 116.

15.Я.Р. Уразаева, Р.Г. Савченко, В.Н. Одиноков. Трансформации экдистероидов как путь синтеза природных экдистероидов. // Тезисы докладов VII Всероссийской конференции с международным участием «Химия и медицина», Уфа, 2010, с. 137.

Подписано в печать 2.11.2011. Бумага офсетная. Формат 60x84 Vie Гарнитура «Тайме». Печать трафаретная. Усл. печ. л. 1. Тираж 125. Заказ 198.

Типография Уфимского государственного нефтяного технического университета

Адрес издательства и типографии: 450062, Республика Башкортостан, г. Уфа, ул. Космонавтов, 1

Список принятых сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

ХИМИЯ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ЭКДИСТЕРОИДОВ, БРАССИНОСТЕРОИДОВ И ИХ АНАЛОГОВ.

1.1. Биологическая активность экдистероидов и их аналогов.

1.1.1. Экдизонная активность фитоэкдистероидов.

1.1.2. Медико-биологическая активность фитоэкдистероидов.

1.2. Синтез экдистероидов и их аналогов.

1.3. Брассиностероиды и их фитогормональная активность.

1.4. Аналоги, структурно родственные экдистероидам и брассиностероидам

ГЛАВА 2. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

2.1. Новый метод каталитического гидрирования экдистероидов в щелочных условиях.;.

2.2. со-Функционализация боковой цепи 20-гидроксиэкдизона.55

2.3. Регио- и стереонаправленные трансформации кольца д А 20-гидроксиэкдизона и его производных при озонировании в пиридине.:.:.

2.4. Конъюгаты 20-гидроксиэкдизона и его производных с со-оксо-2С- * аналогом а-токоферола и их биологическая (антиоксидантная) активность.

ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

3.1. 7,8а-Дигидроаналоги экдистероидов.

3.2. со-Функционализированные аналоги экдистероидов.

3.3. 2-Дегидро-З-эпи-экдистероиды и 2-дегидро-3-эпи-7,8а-дигидроэкдисте-роиды.

3.4. Конъюгаты 20-гидроксиэкдизона и его производных с аналогом а-токоферола.

ВЫВОДЫ.

Экдистероиды - гормоны линьки и метаморфоза насекомых и ракообразных представляют собой обширную группу полигидроксилированных стеринов. К настоящему времени выделено и идентифицировано более 300 зоо- и фитоэкдистероидов. Известно, что экдистероиды обладают комплексом ценных свойств, полезных для медицины и сельского хозяйства. Установлено, что они нетоксичны для млекопитающих и человека и оказывают иммуномодулирующий, анаболический и противовоспалительный эффекты. Одним из наиболее широко изученных и доступных фитоэкдистероидов является 20-гидроксиэкдизон - основной компонент экдистероидного состава растения 8еггаШ1а согопМа. Помимо основного в растениях присутствуют минорные экдистероиды, которые, как полагают, обеспечивают защиту растения от г насекомых-фитофагов. Уникальность структуры 20-гидроксиэкдизона ■ обусловливает возможность его трансформаций . в минорные и труднодоступные из природных источников экдистероиды. Известно, что 4 многие полезные для медицины свойства экдистероидов связаны с их антиоксидантными свойствами, которые могут быть усилены их конъюгацией с природными антиоксидантами или их аналогами.

Структурное подобие экдистероидов брассиностероидам — регуляторам роста и развития растений, перспективных для применения в сельском хозяйстве, располагает к модификациям стероидного остова экдистероидов в соединения, аналоговые брассиностероидному типу. Такого рода трансформации доступных экдистероидов вполне оправданы, поскольку выделение брассиностероидов из природных источников нецелесообразно из-за крайне низкой их концентрации в растениях.

В этой связи цель работы состояла в разработке путей синтеза аналогов экдистероидов и брассиностероидов на основе направленных трансформаций 20-гидроксиэкдизона - основного компонента растения 8еггаШа согопМа, Ь., а также синтезе конъюгатов производных 20-гидроксиэкдизона с аналогом а-токоферола. Для достижения поставленной цели решались задачи по разработке методов преобразования стероидного остова и боковой цепи 20-гидроксиэкдизона, приближающих его структуру к структуре брассиностероида кастастерона, и разработке способа конъюгации экдистероидов с аналогом а-токоферола (витамина Е).

В результате проведенных исследований разработан новый эффективный метод гидрирования малореакционноспособной двойной связи в кольце В экдистероидов над палладиевым катализатором в метаноле, содержащем метилат натрия, позволивший с высоким выходом в мягких условиях синтезировать труднодоступные 7,8-дигидроаналоги экдистероидов. Синтезированы 7,8а-дигидро-20-гидроксиэкдизон и 7,8а-дигидропонастерон А и их производные. Показано, что этот метод столь же эффективен при гидрировании 7,14-сопряженных диеновых экдистероидов. Полученный из диацетонида 20-гидроксиэкдизона дегидратацией по 14а- и 25-гидроксильным группам диацетонид су-ангидростахистерона В в одну стадию был превращен в диацетонид 7,8а-дигидро-14а-дезоксипонастерон А, гидролиз которого привел к структуре, содержащей элементы понастерона А и кастастерона.

Озонолизом в присутствии пиридина диацетонидов су-ангидро-20-гидроксиэкдизона проведена со-оксофункционализация боковой цепи.

Показано, что наиболее эффективным методом окисления полученного альдегида до соответствующей кислоты - 25,26,27-трис-нор-аналога экдизоновой кислоты, является озонолиз в пиридине.

Найден новый метод регио- и стереонаправленной трасформации экдистероидов и их 7,8-дигидроаналогов в 2-дегидро-З-эли-экдистероиды и их 7,8-дигидропроизводные в одну стадию путем озонирования в пиридине. С помощью данного метода 20-гидроксиэкдизон был превращен в 2-дегидро-З-эии-20-гидроксиэкдизон - минорный экдистероид, выделенный из семян растения РгоеИсМа \oridana, который ранее синтезировали из того же исходного соединения в 6 стадий.

Работа выполнялась как плановая в Институте нефтехимии и катализа РАН по теме: «Химия стероидов, токоферолов и природных полисахаридов» (номер государственной регистрации 0120.0850046), частично финансировалась Фондом содействия отечественной науке, грантом Президента РФ по государственной поддержке ведущих научных школ (НТТТ-6079.2008.3) и Академией наук Республики Башкортостан.

Выводы

1. Разработан эффективный и селективный метод гидрирования двойных связей в экдистероидах и 7,14-диеновых экдистероидах в щелочных условиях (МеОЫа/МеОН) над палладиевым катализатором (10% Рс1-С).

2. Путем дегидратации по 14а- и 25-гидроксильным группам диацетонида 20-гидроксиэкдизона и последующих стадий каталитического гидрирования в щелочных условиях и деблокирования гидроксильных групп синтезирован 7,8а-дигидро-14а-дезоксипонастерон А, содержащий структурные элементы экдистероида и брассиностероида.

3. Озонолизом в пиридине диацетонида ¿о-ангидро-20-гидроксиэкдизона проведена су-функционализация боковой цепи. Окислением выделенного альдегида с помощью озона в пиридине получена соответствующая кислота -трис-нор-аналога 20-гидроксиэкдизоновой кислоты. Показано, что при взаимодействии смеси су-оксопроизводных с малоновой кислотой (реакция Кневенагеля) в реакцию вступает только соответствующий альдегид.

4. Разработан метод регио- и стереонаправленной трансформации кольца А экдистероидов и 7,8-дигидроэкдистероидов в 2-дегидро-З-эии-экдистероиды в одну стадию путем озонирования в растворе пиридина. Предложен одностадийный синтез 2-дегидро-3-эям-20-гидроксиэкдизона - минорного экдистероида растения Froelichia floridana, ранее получаемый в 6 стадий из того же исходного соединения - 20-гидроксиэкдизона.

5. Разработан метод конъюгации экдистероидов с су-оксо-2С-аналогом а-токоферола. Синтезированы 2,3-моно- и 2,3:20,22-бис-конъюгаты 20-гидроксиэкдизона, проявившие высокую антиоксидантную активность. Установлено, что в испытаниях in vitro и in vivo бмс-конъюгат более активно (в сравнении с витамином Е) ингибирует процессы перекисного окисления липидов, а также повышает активность ферментов каталазы и супероксиддисмутазы, определяющих состояние антиоксидантной функции организма.

1. Butenandt A, Karlson P. Uber die isolierung eines metamorphose-hormones der insekten in kristallisierten form. // Z. Naturforsch. 1954. - V. 9. - № 6. - P. 389-391.

2. Nakanishi K., Koreeda M., Sasaki S., et al. Insect hormones structure of ponasterone A, an insect moulting hormone from the leaves of Podocarpus nakali. II Chem. Commun. - 1966. - № 24. - P. 915-917.

3. Лафон P. // Физиология растений. 1998. - Т. 45. - № 3. - С. 326-346.

4. Ахрем А.А., Ковганко Н.В. Экдистероиды: химия и биологическая активность. Минск: Наука и техника. 1989. - С. 325.

5. Ануфриева Э.Н., Володин В.В., Носов A.M., Гарсиа М., Лафон Р. Состав и содержание экдистероидов в растениях и культуре ткани Serratula coronata. II Физиология растений. 1998. - Т. 45. - № 3. — С. 382-389.

6. Новосельская И.Л., Горовиц М.Б., Абубакиров Н.К. Фитоэкдистероиды растения Serratula coronata. ПХПС. 1981-№ 5. - С. 668-669.

7. Kholodova Yu., Mishunin I. Phytoecdysteroids insect molting hormones of different structure in Serratula coronata L. species. II Kolloquen Pflansenphisiol - 1985. -V. 9. - P. 56-57.

8. Володин В.В., Лукша В.Г., Дайнен JI. Пунегов В.В., Алексеева Л.И., Колегова НА., Тюкавин Ю.А., Ребров А.И. Инокостерон и макистерон А из Serratula coronata. // Физиология растений. 1998. — Т. 45. - № 3. - С. 378-381.

9. Фитоэкдистероиды. Под ред. Володина В.В. Наука: Санкт-Петербург. -2003.-С. 293.

10. Dinan L. Phytoecdysteroids: biological aspects. // Phytochemistry. 2001. - V. 57.-P. 325-339.

11. Lafont R., Boutheir A., Wilson I.D. in: Insect chemical ecology (I. Hrdy, Ed), Academia, Prague, The Hague. 1991. - P. 197.

12. Kubo I., Komatsu S., Asaka Y., De Boer G. Isolation and identification of apolar metabolites of ingested 20-hydroxyecdysone in frass of Heliothis virescens larvae. // J. Chem. Ecol 1987. - V. 13. - C. 785-794.

13. Robinson P.D., Morgan E.D., Wilson I.D., Lafont R. The metabolism of ingested and injected 3H.ecdysone by final instar larvae of Heliothis armigera. HPhysiol. Entomol.-m7.-V. 12.-P. 321-330.

14. Slavolainen V., Wuest J., Lafont R., Connat J.-L. Effects of ingested phytoecdysteroids in the female soft tick Ornithodoros moubata. // Experientia. 1995. -V. 51.-P. 596-600.

15. Dinan L. in: Studies in Natural Products Chemistry (Atta-ur-Rhaman, Ed.), Elsevier, Amsterdam. 2003. - V. 29. - P. 3-71.

16. Lafont R. Reverse endocrinology, or "hormones" seeking functions. // Insect Biochem. 1991. -V. 21. - P. 697-721.

17. Lafont R., Horn D.H.S. Phytoecdysteroids: Structures and Occurrence In Ecdysone-Form Chemistry to Mode of Action. Ed. Koolman J. Gerg Thieme: Stuttgart.-1989.-39.

18. Ohtaki T., Milkman R.D., Williams C.M. Ecdysone and ecdysone analogues: their essay on the freshfly Sarcophaga peregrina. II Proc. Natl. Acad. Sci. — USA, 58.-P. 981-984.

19. Lafont R., Wilson I.D. www,ecdybase.org.

20. Suksamrarn A., Yingyongnarongkul B. Synthesis and molting hormone activity of 3-ep/-2-deoxy-20-hydroxyecdysone and analogues. I I Tetrahedron. -1997. V. 53. - № 9. - P. 3145-3154.

21. Bergamasco R., Horn D.H.S. The biological activities of ecdysteroids and analogues. In Progress in ecdysone research; Amsterdam. 1980. - P. 299324.

22. Suksamrarn A., Sommechai C. Ecdysteroids from Vitex pinnata. II Phytochemistry. 1993. - V. 32. - P. 303-306.

23. Cherbas P., Trainor D.A., Stonard R.J., Nakanishi K. 14-Deoxymuristerone, a compound exhibiting exceptional molting hormonal activity. // J. Chem. Soc., Chem. Commun.-1982.-P. 1307-1309.

24. Nakanishi K. Past and present studies with ponasteroneponasterones, the first insect molting hormones from plants.// Steroids. -1992. V. 57. - P. 649-657.

25. Harmatha J., Dinan L., Lafont R. Biological activities of a specific ecdysteroid dimer and of selected monomeriic structurial analogues in the Bn bioassay. // Insect biochem. and mol. Biol. 2002. - V. 12. - P. 181-185.

26. Arai H., Watanabe B., Nakagawa., Miyagawa H. Synthesis of ponasterone A derivatives with varios steroid skeleton moieties and evaluation of their binding to the ecdysone receptor of Kc cells. // Steroids. 2008. - V. 73. - P. 14521464.

27. NakagawaY., Minacuchi C., TakahashiK., Ueno T. Inhibition of 3H.ponasterone A binding by ecdysone agonists in the intact Kg cell line. // Insect Bioch. Mol. Biol 2002. - V. 32. - P. 175-180.

28. Watanabe B., Nakagawa Y., Ogura T., Miyagawa H. Stereoselective synthesis of (22R)- and (22S)-castasterone/ponasterone A hybrid compounds and evaluation of their molting hormone activity. // Steroids. 2004. - P. 483-493.

29. Hikino H., Takemoto T. Arthropod moulting hormones from plants, Achyranthes and Cyathula. H Naturwiss. 1972. - V. 59. - P. 91-98.

30. Najmutdinova D.K., Saatov Z. Lung local defense in experimental Diabetes mellitus and the effect of 11,20-dihydroxyecdysone in combination with maninil. // Arch. Insect Biochem. Physiol. 1999. - V. 41. - P. 144-147.

31. Dinan L. Phytoecdysteroids: biological aspects J/Phytochemistry. 2001. - V. 57.-P. 325-339.

32. Lafont R., Dinan L. Practical uses for ecdysteroids in mammals including humans: and update.// Journal of insect science. 2003. - P. 1-30.

33. Bathori M., Pongracz Z. Phytoecdysteroids from isolation to their effects on humans.// Curr Med Chem. -2005. - V. 12. - P. 153-172.

34. Burdette W.J. Hormonal heterophylly, invertebrate endocrinology, and phytohormones. // Canser Res. 1972. - V. 32. - P. 1088-1090.

35. Slama K., Lafont R. Insect hormones ecdysteroids: their presence and actions in vertebrates. // Eur. J. Entomol., - 1995. - V. 92. - P. 355-377.

36. Takahashi H., Nishimoto K. Antidiabetic agents containing ecdysterone or inokosterone. // Jpn Kokai Tokkyo Koho J.P. -1992. V. 4. - P. 125.

37. Lupien P.J., Hinse C., Chaudhary K.D. Ecdysone as a hypocholesterolemic agent. II Arch. Int. Physiol. Biochim. 1969. -V. 77. - P. 206-212.

38. Mironova V.N., Kholodova Yu.D., Skatchkova T.F. Hypocholesterolemic effects of phytoecdy- sones in experimental hypercholesterolemia in rat. // Vopr. Med. Khimii. 1982. -V. 3. - P. 101-104.

39. Syrov V.N., Nabiev A.N., Sultanov M.B. Action of phytoecdysteroids on the bile-secretory function of the normal liver and in experimental hepatitis. // Farmakol. Tobikol. 1986. - V. 49. - № 3. - P. 100-103.

40. Ozynska L.F., Saad L.M., Kholodova Yu.D. Antiradical properties and antioxidant activity of ecdysterone. // Ukr. Biokhim Zh. 1992. - V. 64. -№ 2. -P. 114-117.

41. Kizmenko A.L. Antioxidant effect of 20-hydroxyecdysone in a model system. // Ukr. Biokhim Zh. 1999. -V. 71. -№ 3. -P. 35-38.

42. Syrov V.N., Nasyrova S.S., Khushbaktova Z.A. The results of experimental study of phytoecdysteroids as erythropoiesis stimulators in laboratory animals. // Eksp. Klin. Farmacol. 1997. - V. 60. - № 3. - P. 41-44.

43. Kalasz H., Bathori M. A ketdimenzios retegkromatografia. // Magyar KemikusokLapja. 2003. - V. 58. - P. 81-85.

44. Саатов 3., Сыров B.H., Маматханов А.У., Абубакиров Н.К. Фитоэкдистероиды растений рода Ajuga и их биологическая активность. // ХПС. 1994. - № 2. - С. 152-159.

45. Сыров В.Н., Куркумов А.Г. О тонизирующих свойствах экдистерона, выделенного из левзеи сафлоровидной. // Доклады АН УзССР. -1977. № 12.-С. 27-30.

46. Hocks P., Wiechhert R. 20-Hydroxyecdison, isoliert aus insecten. // Tetrahedron Lett. 1966. - V. 26. - P. 2989-2993.

47. Hoffmeister H., Grutzmacher H.F. Zur chemie des ecdysterons. // Tetrahedron Lett. 1966. -V. 33. - P. 4017-4023.

48. Kametani Т., Nemoto H. Recent advances in the total synthesis of steroids via intramolecular cycloaddition reactions. // Tetrahedron. 1981. - V. 37. - № 1. -P. 3-16.

49. Ахрем А.А., Левина И.С., Титов Ю.А., Экдизоны стероидные гормоны насекомых. Минск: Наука и техника. - 1973. - С. 232.

50. Smagge G. Ecdysone: structures and functions. Springer, Belgium. 2009. - P. 650.

51. Ковганко H.B., Кашкан Ж.Н., Чернов Ю.Г., Ананич С.К., Соколов С.Н., Сурвило В.Л. Синтез экдистероидови родственных им соединений. // ХПС. 2003. - № 5. - С. 335-360.

52. Canonica L., Danieli В., Lesma G., Palmisano G. Unusual photochemical behavior of the enone chromophore of the insect moulting hormone 20-hydroxyecdysone. // J. Chem.Soc.Chem.Commun. 1985. - P. 1321-1322.

53. Canonica L., Danieli В., Lesma G., Palmisano G., Mugnoli A. Fe(II)-induced fragmentation reaction of y-hydroperoxy-a,/?-enones. Part I: synthesis of 13(14-%)-аЪео-steroids. //Helv. Chim. Acta. 1987. - V. 70. - P. 701-716.

54. Hikino H., Mohri K., Arihara S., Hikino Y., Takemoto Т., Mori H., Shibata K. Inokosterone, an insect metamorphosing substance from Achyranthes fauriei: absolute configuration and synthesis. // Tetrahedron. 1976. - V. 32. - P. 3015-3021.

55. Lee Sh.-Sh., Nakanishi K., Cherbas P. Synthesis of 26-Iodoponasterone, a New and very Active Ecdysteroid. И J. Chem. Soc. Chem. Commun. -1991. P. 5152.

56. Segraves W.A., Richards G. Regulatory and devel- opmental aspects of ecdysone-regulated genes. // Invertebr. Reprod. And Devel. 1990. - V. 18. -P. 67-76.

57. Savchenko R.G., Shafikov R.V., Afonkina S.R., Odinokov V.N. Transformation of 20-hydroxyecdysone to inokosterone. // Mend. Commun. -2006.-P. 90-92.

58. Rimpler H. Pterosteron, Polypodin В und ein neues ecdysonartiges Steroid (Viticosteron E) aus Vitex megapotamica (Verbenaceae). // Tetrahedron Lett. -1969.-P. 329-333.

59. Галяутдинов И.В., Назмеева С.Р., Савченко Р.Г., Веськнна Н.А., Недопекин Д.В., Фатыхов А.А., Халилов JI.M., Одиноков В.Н. Новые производные 20-гидроксиэкдизона. Синтез витикостерона Е. // ЖОрХ. -2004. Т. 40. - № 5. - С. 709-717.

60. Charoensuk S., Yingiongnarongkul В., Suksamrarn A. Synthesis of 2-Dehydro-3- epz-20-hydroxyecdysone. // Tetrahedron. 2000. - V. 56. - P. 9313-9317.

61. Suksamrarn A., Ganpinyo P., Sommechai C. Base-catalyzed autooxidation of 20-hydroxyecdysone. Synthesis of calonysterone and 9,20-dihydroecdysone. // Tetrahedron Lett. 1994. - V. 35. - P. 4445-4448.

62. Horn D.H.S., Bergamasco R. Chemistry of ecdysteroids. In comparative insect physiology. // Biochemistry and Pharmacology 1985. - V. 7. - P. 185-248.

63. Homvisasevongsa S., Chuaynugul A., Chimnoi N., Suksamrarn A. Stereoselective synthesis and moulting activity of 2,3-diepi-20-hydroxyecdysone and 2,3-<#e/?/-5a-20-hydroxyecdysone. // Tetrahedron. -2004. V. 60. - P. 3433-3438.

64. Baltaev U., Gorovitz M.B., Rashkes Y.V., Abubakirov N.K. Phytoecdyso-nes from Rhaponticum integrifolium. II. Integristerone A. // Khim. Prir. Soedin. -1977.-P. 813-819.

65. Kumpun S., Yingiongnarongkul В., Lafont R. Stereoselective synthesis and molting activity of integristerone A and analogues. // Tetrahedron. 2007. - V. 63.-P. 1093-1099.

66. Zhu W-M., Zhu H-J., Tian W-S., Hao X-J., Pittman C.U. The selective dehydroxylation of 20-hydroxyecdysonr by Zn powder and anhydrous acetic acid.//Synth. Commun.-2002.-V. 32.-№9.-P. 1385-1391.

67. Drach S.V., Khripach A.V., Litvinovskaya R.P., Lyakhov A.S., Schneider В., Zhylitskaya H.A. Stereoselective synthesis of 9a-hydroxylated ecdysteroids. // StewKfr.-2010.-V. 75.-P. 184-188.

68. Pongrasz Z., Bathori M., Toth G., Simon А., Мак M., Mathe I. 9a-Dihydroxyecdysone a new natural ecdysteroid from Silene italica ssp. Nemoralis. II J. Nat. prod. 2003. - V. 69. - P. 389-94.

69. Caine D.: in Organic Reaction, Dauben W.G. Ed. Wiley, New York, 1976. -V. 23.-P. 1.

70. Dry den H.L. in: Organic Reaction in Steroid Chemistry, Fried J., Edwards J. A. (Eds), Van Nostrand Reinhold Co., New York. -1972. V. 1. - P. 27.

71. Canonica L., Danieli В., Lesma G., Palmisano G., Mugnoli A. Fe(II)-Induced fragmentation reaction of y-hydroperoxy-a,/?-enones. // Helv. Chim. Acta. -1987. -V.70.-701-716.

72. Одиноков B.H., Галяутдинов И.В., Ибрагимова А.Ш., Веськина H.A., Халилов JI.M., Долгушин Ф.М., Старикова З.А. Новые аналоги экдистероидов с кислородсодержащими гетероциклами в стероидном остове.ПХГС. -2008.-Т. 9.-С. 1339-1355.

73. Одиноков В.Н., Савченко Р.Г., Шафиков Р. В., Афонькина С.Р., Халилов Л.М., Качала В.В., Шашков A.C. Стереохимия гидридного восстановления производных 20-гидроксиэкдизона. // ЖОрХ. 2005. - Т. 41.- С. 13231330.

74. Luche J.L. Reduction of natural enones in the presence of cerium trichloride. // J. Am. Chem. Soc. 1978. -V. 100. - P. 2226-2227.

75. Haag Т., Luu В. Synthesis of putative precursors of ecdysone. II J. Chem. Soc. Perkin Trans. I. 1988. - P. 2353-2363.

76. Шафиков P.B., Афонькина C.P., Савченко Р.Г., Галяутдинов И.В., Одиноков В.Н. Стереоизбирательность гидрогенолиза 14-агидроксильной группы в диацетонидах 6-дигидро-5а-20-гидроксиэкдизонов. // ЖОрХ. -2007. Т. 43. - № 2. - Р. 310-311.

77. Одиноков В.Н., Савченко Р.Г., Шафиков Р. В., Афонькина С.Р., Галяутдинов И.В., Халилов Л.М., Шашков A.C. Аналоги экдистероидов с тетразамещенной Д8'14-связью. II ЖОрХ. 2008. - Т. 44. - № 5. - Р. 681684.

78. Нарзуллаев A.C., Юнусов М.С., Моисеенко A.M., Сабиров С.С. Реакция Cip-тритерпеновых алкалоидов с натрием в жидком аммиаке. // ХПС.1989.-№2.-С. 372-375.

79. Werawattanametin К., Podimnang V., Suksamrarn A. Ecdysteroids from Vitex glabrata. II J. Nat. Prod. 1986. - V. 49. - P. 365-366.

80. Одиноков B.H., Галяутдинов И.В., Недопекин Д.В., Веськина H.A., Халилов JI.M. Трансформация ацетонидов 20-гидроксиэкдизона в подэкдизон В. ИЖОрХ. 2003. - Т. 39. - С. 1013-1017.

81. Одиноков В.Н., Афонькина С.Р., Шафиков Р. В., Савченко Р.Г., Галяутдинов И.В., Халилов Л.М., Шашков A.C. 7,8-Дигидроаналоги экдистероидов. //ЖОрХ. -2007. -Т. 43. № 6. - С. 830-837.

82. Baron D.L., Luo W., Yanzen L., Pharis R.P., Back T.G. Structure-activity studies of brassinolide B-ring analogues. II Phytochem. 1998. - V. 49. - P. 1849-1858.

83. Галяутдинов И.В., Веськина H.A., Афонькина С.Р., Халилов Л.М., Одиноков В.Н. Синтез оксимов 20-гидроксиэкдизона, его диацетонида и их 14,15-ангидропроизводных. II ЖОрХ. 2006. - Т. 42. - С. 1352-1357.

84. Rodrigues J., Nunez L., Peixinho S., Jimenez C. Isolation and synthesis of the first natural 6-hydroximino 4-en-3-one-steroids from the sponges Cinachyrella spp. // Tetrahedron Lett. 1997. - V. 38. - P. 1833-1836.

85. Holland H.L., Kumaresan S., Tan L., Njar V.C.O. Synthesis of New 6-Hydroximino-oxo Steroids. // J. Chem. Soc. Perkin trans I. 1992. - P. 585587.

86. Zeelen F J. // Medicinal chemistry of steroids. Elsevier. - Amsterdam-N-Y.1990.-P. 357.

87. Михалева А.И., Зайцев А.Б., Трофимов Б.А. Оксимы как реагенты. И Yen. Хим. 2006. - Т. 75. - С. 834.

88. Шафиков Р.В., Уразаева Я.Р., Афонькина С.Р., Савченко Р.Г., Халилов Л.М. Одиноков В.Н. Оксимы производных 20-гидроксиэкдизона и ихперегруппировка в лактамы. // ЖОрХ. 2009. - Т. 45. - № 10. - С. 14731478.

89. Prakash S.G.K. Yudin А.К. Perfluoroalkylation with organosilicon reagents. // Chem. Rev. 1997. - V. 97. - P. 757-786.

90. Singh R.P. Shreeve J.M. Nucleophilic Trifluoromethylation Reactions of Organic Compounds with (Trifluoromethyl)trimethylsilane. // Tetrahedron. -2000. -V. 56. P. 7613-7632.

91. Одиноков B.H., Савченко Р.Г., Назмеева C.P., Галяутдинов И.В. Метод мягкого триметилсилилирования 14а-гидроксильной группы в экдистероидах. // Известия АН, Сер. хим. -2002.-С. 1810-1811.

92. Ишмуратов Г.Ю., Харисов Р.Я., Яковлева М.П., Боцман Л.П., Муслухов P.P., Толстиков Г.А. Новый метод прямого восстановления продуктов озонолиза 1-алкилциклоалкенов в кетоспирты. II Известия АН, Сер. Хим. -1999.-№1.-С. 198-199.

93. Fujioka S., Sakurai A. Brassinosteroids //NPR. -1999. P. 1-10.

94. Yokota Т. The structure, biosynthesis and function of brassinosteroids. // Trends in Plant Sci. 1997. -V. 2. -№ 4. -P. 137-143.

95. Fujioka S et al. Biological activities biosynthetically-related congeners of brassinolide. II Biosci. Biotechnol. Biochem. 1995. - V. 59. - P. 1973-1975.

96. Yokota T. and Mori K. Molecular structure and biological activity of brassinolide and related brassinosteroids, in: Molecular structure and biological activity of steroids (Bohl M., Duax W.L. eds). 1992. - P. 317-340.

97. Grove M.D., Spencer G.F., Rohwedder W.K., Mandava N., Worley J.F., Warthen J.D., Steffens G.L., Flippen-Anderson J.L., Cook J.L. Brassinolide, aplant growth-promoting steroid isolated from Brassica napus pollen. I I Nature. 1979.-V. 281.-P. 216-217.

98. Yokota Т., Arima M., Takahashi N. Castasterone, a new phytosterol with plant-hormone potency, from chestnut insect gall. // Tetrahedron Lett. 1982. -V. 23.-P. 1275-1278.

99. Griffiths P.G. et al. 6-Deoxytyphasterol and 3-dehydro-6- deoxoteasterone, possible precursors to brassinosteroids in the pollen of Cupresus arizonica. И Biosci. Biotechnol. Biochem. 1995. -V. 59. - P. 956-959.

100. Bajguz A., Tretyn A. The chemical characteristic and distribution of brassinosteroids in plants. // Phytochemistry. 2003. - V. 62. - P. 1027-1046.

101. Ковганко H.B., Ананич C.K. Прогресс в химическом синтезе брассиностероидов. ИХимия природ, соедин. 2002. - № 2. - С. 99-117.

102. Voigt В., Dinan L. The ecdysteroid agonist/antagonist and brassinosteroid-like activities of synthetic brassinosteroid/ecdysteroid hybrid molecules. // Cell. Mol. Life Sei. 2001. - V. 58. - P. 1133-1140.

103. Lichtblau D. Synthese von 25-hydroxycastasteron und anderen phytohormonal wirksamen brassinosteroiden. // PhD thesis, Halle(Saale), Germany. -1999.

104. Voigt В., Porzel A., Bruhn C., Wagner C., Merzweiler К., Adam G. Synthesis of 24-epicathasterone and related brassinosteroids with modified side chain. // Tetrahedron. 1997. - V. 53. - P. 17039-17054.

105. Nakagawa Y., Shimizu В., Oikawa N., Akamatsu M., Nishimura K., Kurihara N., Ueno Т., Fujita Т. Classical and Three-dimenssional QSAR in agrochemistry. ed. by Hanch C. and Fujita T. American Chemical Society, Washington D.C. 1995. - P. 288-301.

106. Watanabe В., Nakagawa Y., Miyagawa H. Synthesis of castasterone/ponasterone hybrid compound and evaluation of its molting hormone-like activity. II J. Pestic. Sci. 2003. - V. 28. - P. 188-193.

107. Watanabe В., Nakagawa Y., Ogura T.,, Miyagawa H. Stereoselective synthesis of (22R)- and (22S)- castasterone/ponasterone A hybrid compounds and evaluation of their molting hormone activity. // Steroids. -2004. V. 69. -P. 483-493.

108. Suksamrarn A., Tanachatchairatana T., Sirigarn C. Stereoselective catalytic hydrogénation of A7-6-ketosteroids in the presence of sodium nitrite.// Tetrahedron. 2002. - V. 58. - P. 6033-6037.

109. Савченко Р.Г., Уразаева Я.P., Шафиков P.B., Одиноков В.Н. Эффективный метод селективной трансформации экдистероидов в 7,8-дигидроаналоги путем каталитического гидрирования в щелочных условиях.ПЖОрХ.-2010.-Т. 45.-№ 1.-Р. 147-149.

110. Савченко Р.Г., Уразаева Я.Р., Афонькина С.Р., Одиноков В.Н., Бушмаринов И.С., Халилов JI.M. Трансформации диацетонида ш-ангидро-20-гидроксиэкдизона в 7,8а-дигидропонастерон А и его ацетониды. // ЖОрХ. 2011. - Т. 47. - № 7. - С. 1078-1080.

111. Одиноков В.Н, Галяутдинов И.В., Ибрагимова А.Ш., Веськина Н.А., Халилов JI.M., Долгушин Ф.Н., Старикова З.А. Новые аналоги экдистероидов с кислородсодержащими гетероатомами в стероидном остове. ИХГС. 2008. - № 9. - Р. 1339-1355.

112. Yingyongnarongkul В., Suksamrarn A. Asymmetric dihydroxylation of stachysterone С: stereoselective synthesis of 24-<?/>/-abutasterone. // Tetrahedron. 1998. - V. 54. - P. 2795-2800.

113. Suksamrarn A., Yingyongnarongkul В., Charoensuk S. Regioselective synthesis of 24-e^/-pterosterone. I I Tetrahedron. 1999. -V. 55. - P. 255-260.

114. Schwartz С., Raible J., Mott К., Dussault Р.Н. "Reductive ozonolysis" via a new fragmentation of carbonyl oxides. // Tetrahedron. 2006. - V. 62. - P. 10747-10752.

115. Siddall J.B., Horn D.H.S., Middleton E.J. Synthetic studies on insect hormones. The synthesis of a possible metabolite of crustecdysone (20-hydroxyecdysone). II J. Chem. Commun. 1967. - P. 899-900.

116. Galbraith M.N., Horn D.H.S., Middleton E.J. Thomson J.A., Siddall J.B., Hafferl W. Catabolism of crustecdysone in the blowfly Calliphora stygia. II J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1969. - P. 1134-1135.

117. Савченко Р.Г., Уразаева Я.Р., Шафиков P.B., Одиноков В.Н. Регио- и стереонаправленное окисление экдистероидов и их 7,8-дигидроаналогов озоном в пиридине. И ЖОрХ. 2009. - Т. 45. - № 8. -Р. 1163-1166.

118. Sheldrick G. // Acta Crystallographica Section A. 2008. - V. 64. - P. 112.