Синтез и взаимодействие с холинэстеразами эфиров кислот фосфора, содержащих гидрофобные группировки тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.08 ВАК РФ

ВВЕДЕНИЕ

СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О СТРОЕНИИ ХОЛИНЭСТЕРАЗ И МЕХАНИЗМЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ИХ С ФОСФОР ОРГАНИЧЕСКИМИ ИНГИБИТОРАМИ (Литературный обзор).

1. Введение.

2. Строение активного центра холинэстераз

3. Механизм гидролиза ацетилхолина холинэстеразами.

4. Механизм взаимодействия фосфорорганических соединений с холинэстеразаш.

4а. Механизм и виды ингибирования холинэстераз фосфорорганическими соединениями

46. Роль полярных факторов в процессе ингибирования холинэстераз фосфорорганическими соединениями

4в. Роль гидрофобных взаимодействий в процессе ингибирования холинэстераз фосфорорганическими соединениями

4г. Роль стерических факторов в процессе ингибирования холинэстераз фосфорорганическими соединениями

ОБЩАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА I

СИНТЕЗ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИХ ИНГИБИТОРОВ ХОЛИНЭСТЕРАЗ.

I. Синтез некоторых эфиров кислот фосфора, содержащих (5 ) -(^-алкшхмеркапто этильнуга или у? -алкил-сульфоксиэтильную группу

2. Синтез J> -оксиалкил(арил)сульфидов к -хлорэтнл-алкил^рилЭсулъфидов

3. Синтез О-этил-s -(у?-алкишертаптоэтилЭфенилтио-фосфонатов и их йодметилатов

4. Синтез О-алкил-s -(^ -метилмеркаптоэтил)фенилтио-фосфонатов и их йодметилатов

5. Синтез О-этил-s' -(у?-алкилмеркаптоэтил)циклогексил-тиофосфонатов и их йодметилатов.

6. Синтез О-этил-s -{^-алгашлеркаптоэтил)бензилтио-фосфонатов и их йодметилатов

7. Синтез s' -арил(бензил)меркаптоэтиловых эфиров тио-кислот фосфора

8. Синтез s-алкилдифенилтиофосфинатов

9. Синтез О-этил-s -алкилфенилтиофосфонатов

10. Синтез 0,0-дибутил-s -алкилтиофосфатов и 0,0-ди-гексил-s -алкилтиофосфатов

11. Синтез 0-этил- s - (у^ -алкилсульфоксиэ тил )метилтио-фосфонатов

12. Синтез 0-этил-0-(у^-алкилмеркаптоэтил)фенилфосфо-натов. О-Алкил-О-( -метилмеркаптоэтил)фенилфосфо-натов и их йодметилатов . J

13. Синтез 0-этил-0-(^/-алюшлеркаптоэтил)циклогексил-фосфонатов и их йодметилатов

14. Синтез О-этил-О-(f -алкшплеркаптоэтил)бензилфосфо-натов и их йодметилатов

ОЦЕНКА ЭЛЕКТР0ФИЛШ0Й Ф0 СФОРМИРУЮЩЕЙ СП0С0Ш0СТИ И ШДР0

Ф0БН0СТИ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИХ ИНГИБИТОРОВ

ГЛАВА П

МТИХОЛИНЭСТЕРАЗКЫЕ СВОЙСТВА ЭФИРОВ КИСЛОТ ФОСФОРА.

1. Взаимодействие 0-этил-з-(/ -алкилмеркаптоэтил)фе-нилтиофосфонатов и их йодметилатов с холинэстера-зами

2. Взаимодействие 0-этил-б-алюшоенилтиофосфонатов с холинэстеразами

3. Взаимодействие 0-этил-б-(/ -алкилмеркаптоэтил)-циклогексилтиофосфонатов и их йодметилатов с холинэстеразами

4. Взаимодействие 0-этил-Б -(/ -алкилмеркаптоэтил)-бензилтиофосфонатов и их йодметилатов с холинэстеразами

5. Взаимодействие 0-алкил-б -(/ -метилмеркаптоэтил)фе-нилтиофосфонатов и их йодметилатов с холинэстеразами

6. Взаимодействие Б -(/ -арил(бензил)меркаптоэтил/тио-фосфонатов и тиофосфатов с холинэстеразами

7. Взаимодействие б -алкилдифенилтиофосфинатов с холинэстеразами . I?

8. Взаимодействие 0,0-диалкил-б -алкилтиофосфатов с холинэстеразами а). Взаимодействие 0,0-дибутил-б -алкилтиофосфатов с холинэстеразами б). Взаимодействие 0,0-дигексил-б -алкилтиофосфатов с холинэстеразами .—

9. Взаимодействие 0-этил-б -(у^-алкилсульфоксиэтил)-метилтиофосфонатов с холинэстеразами

10. Взаимодействие 0-уЗ-алкилмеркаптоэтиловых эфиров фенилфосфоноЕой, бензилфосфоновой, щпшогексилфос

- 6 фоновой кислот и их йодметилатов с холинэстераза-ми а). Взаимодействие 0-этил-(/-алкилмеркаптоэтил)-фенилфосфонатов и их йодметилатов с холин-эстеразами б). Взаимодействие 0-этил-0-(^-алкилмеркапто-этил)бензилфосфонатов и их йодметилатов с холинэстеразами в). Взаимодействие 0-этил-0-(/2-алкилмеркаптоэтил)-циклогексилфосфонатов и их йодметилатов с хо-линэстеразами г).Взаимодействие 0-алкил-0-(у^-метилмеркапто-этил)фенилгаосфонатов и их йодметилатов с холинэстеразами

Фосфорорганические физиологически активные соединения в настоящее время нашли широкое применение в народном хозяйстве. Среди этих веществ найдены высокоэффективные инсектициды, акарициды, фунгициды, гербициды, многие из которых с успехом используются в сельском хозяйстве. Особенно возросла роль фосфорорганических пестицидов после ограничения масштабов применения хлорорганичес-ких инсектицидов, которые, как известно, обладают значительной персистентностью. Ряд фосфорорганических препаратов нашел также применение в медицине.

Запросы практики, однако, требуют поисков новых эффективных биологически активных веществ и, в первую очередь, химических средств защиты растений, которые обладали бы комплексом свойств, удовлетворяющий современным требованиям, например, таким, как высокая эффективность при низкой токсичности для человека, теплокровных животных и полезных насекомых, низкая персистентность и многие другие. Фосфорорганические соединения в этом отношении являются одними из наиболее перспективных.

Известно, что физиологическая активность фосфорорганических инсектоакарицидов связана с их способностью инактивировать холин-эстеразы - жизненно важные ферменты, принимакщие участие в регулировании передачи нервного возбуждения. Такой механизм передачи нервного возбуждения характерен не только для теплокровных животных, но и для членистоногих. Работами советских и зарубежных ученых показано, что холинэстеразы различных видов животных имеют, как правило, отличительные по характеру действия и поэтому изучение особенностей действия холинэстераз различного происхождения может послужить основой для поисков избирательно действуюцих фос-форорганических ингибиторов холинэстераз, а следовательно, и ин-сектоакарицидов, обладащих избирательностью действия по отношению к определенным видам животных. Для решения этой проблемы важное значение имеет изучение механизма антихолинэстеразного действия фосфорорганических соединений по отношению к холинэстеразам различных типов, в частности, к ацетилхолинэстеразе и бутирилхо-линэстеразе.

Систематические исследования в этом направлении проводятся коллективом сотрудников под руководством М.И.Кабачника, А.П.Брестки-ыа, В.И.Розенгарта и Н.Н.Годовикова. Ими было показано, что в процессе ингибирования холинэстераз фосфорорганическими соединениями важную, а иногда и решающую,роль, играет гидрофобная сорбция ингибитора на активной поверхности холинэстераз. Долгое время считалось, что гоосфорорганические соединения способны ингибировать хо-линэстеразы только необратимо. Однако в 1964 году Олдрщщем и Рейнер было показано, что гоосфорорганические ингибиторы способны тормозить каталитическую активность ацетилхолинэстеразы не только необратимо, но также одновременно по обратимому типу. Такой вид ингибирования получил название комбинированного.

В дальнейшем М.И.Кабачником, А.П.Бресткиным и Н.Н.Годовико-вым с сотрудниками было показано, что комбинированный вид ингибирования характерен не только для ацетилхолинэстеразы, но также и для бутирилхолинэстеразы. Было выявлено существенное влияние на такой вид ингибирования гидрофобных группировок, находящихся в молекуле фосфорорганического ингибитора. Однако оставались неся-ными факторы, оказывающие главное влияние на проявление этими соединениями комбинированного вида торможения каталитической активности холинэстераз. Поэтому представляло интерес выяснение этих факторов, что и послужило основным направлением настоящего исследования .

При этом, по нашему мнению, важно было выяснить роль гидрофобных группировок, находящихся как в отщепллвдейся, так и не-отщепляпцейся части молекулы ингибитора, на процесс обратимого ингибирования.

В качестве главных объектов исследования наш были выбраны эфиры фенилтиофосфоновой, фенилфосфоновой, циклогексилфосфоновой, циклогексилтиофосфоновой, бензилтиофосфоновой и бензилфосфоновой кислот, содержащих вув-положении тиоэфирной или алкоксильной группы алкилмеркапто- или соответствующую сульфониевую группировку, где варьировалась длина алкильной группы у сульфидного или сульфониевого атома серы. В случае фенилтиофосфонатов и фенилфос-фонатов варьировалась также джна алкоксильной группы у атома фосфора:

И: О Я X р р \ / \ +

К* Х-СН2СН2-5-Е" И» Х-СН2СН2-5-К"-1

К=СбН5, -С^, СбН5СН2, СН^, 0^0, С^н90; н»=с2н5о, с3н?о, с4н90, с^о, с6н13о-,

Н"=СН3 - С^, -СН2СбН5, СбН5, СбН5, -СбН4- СНГ П Х=0,Б

Кроме того, были изучены некоторые эфиры 0,0-диалкилтиофос-форных, дифенилтиофосфиновой и фенилтиофосфоновой кислот, у которых варьировалась джна алкильного радикала алктиольной группы: к=с6н5, с4н90, сбн13о.

X/ р/ I?'=0^0,0^0, с6н13о. ят?» к" эй" сбн5.

Н"=сн3 - сбн13) а также тиоэфиры глетилтиоуосйоновой кислоты, содержащие б ¿в -положении алктиольного радикала алкилсульфокси-группу, где варьировалась длина алкильного радикала, связанного с атомом сульфоксид-ной серы:

СНо ,0

С2Н50 / ^Б-С^С^- 8 -й И = СН3 - С6Н13. О

Соединения вышеуказанного типа были получены с использованием методов синтеза, описанных в литературе, при этом, с учетом специфики строения синтезируемых веществ, в эти методы вносились изменения, позволившие увеличить выходы целевых веществ и облегчить их выделение в индивидуальном состоянии.

Для всех синтезированных веществ была определена антихолин-эстеразная активность по отношению к ацетилхолинэстеразе эритроцитов крови человека и бутирилхолинэстеразе сыворотки крови лошади с использованием метода потенциометрического титрования при постоянном рН, метода измерения скорости начального изменения рН. На основании полученных данных был сделан вывод о том, что наличие определенным образом расположенных гидрофобных заместителей в молекуле ингибитора влияет не только на силу ингибирования, но и способствует проявлению комбинированного вида торможения каталитической активности холинэстераз. Наиболее резко этот эффект проявляются при наличии гидрофобных заместителей в неотщепляю-щейся части молекулы ингибитора. В значительно меньшей степени сказывается на эффекте комбинированного ингибирования наличие подобных заместителей в отщепляющейся части.

При обобщении полученных данных рассмотрены представления о роли гидрофобной сорбции в процессе ингибирования холинэстераз фосфорорганическими соединениями. Был сделан вывод, что следует рассматривать не только комплементарность отдельных гидрофобных группировок определенным гидрофобным участкам на активной поверхности холинэстераз, но и эффект комплементарности всей молекулы активной поверхности фермента. Здесь ванное значение имеет "согласованность" или "несогласованность" эффектов гидрофобной сорбции ингибитора на гидрофобных участках, расположенных в районе анионного и эстеразного пунктов холинэстераз. Таким образом, эффект комбинированного вида ингибирования холинэстераз зависит от многих факторов, причем здесь ведущую роль играют гидрофобные взаимодействия, существенно меняющие компле»Эг§арность молекулы ингибитора активной поверхности фермента. Установлено, что варьирование величины и положения гидрофобных и полярных заместителей в молекуле фосфорорганического ингибитора позволяет изменять не только силу ингибирущей активности этих соединений, но и характер их действия на холинэстеразы. Показано, что закономерности таких изменений для ацетилхолинэстеразы и бутирилхолинэстеразы различны.

Полученные в работе результаты могут быть использованы в исследовании специфических ингибиторов холинэстераз с различными механизмами действия, что может иметь важное значение при поисках новых пестицидов и других физиологически активных веществ.

Работа выполнена на Кафедре органической и биологической химии Кабардино-Балкарского государственного университета и в Институте элементоорганических соединений АН СССР по плану исследований, проводящихся под общим руководством академика М.И.Кабач-ника.

Все сделанные в работе выводы основаны на результатах, полученных в исследованиях, выполненных лично автором и под его руководством.

В работе принимали участие сотрудники и аспиранты Кабардино-Балкарского госуниверситета: М.Х.Беканов, Г.Г.Ольховая, В.М.Куза-мышев, Л.Г.Гринева.

Автор выражает благодарность профессору А.П.Бресткину и старшему научному сотруднику Р.С.Агабекяну за активное участие в проведении совместных биохимических исследований. современные представления о строении холинэстераз"и механизме взаимодействие их с фосфороргашческими ингибиторам.

Литературный обзор)

Холинэстеразы относятся к жизненно важным ферментам, участвующем в передаче нервного возбуждения. В настоящее время различают две группы холинэстераз, которые отличаются по свойствам и строению /I, 2/. К первой группе относится ацетилхолинэстераза (АХЭ) или ацетилгидролаза ацетилхолина (КФ 3.1.1.7.), физиологическое назначение которой состоит в гидролизе ацетилхолина - медиатора нервного возбуждения. Ко второй группе относится холинэстеразы или ацшггидролазы ацилхолинов (КФ 3.1.1.8.), физиологическое назначение которых пока неясно. Предполагается, что холинэстеразы защищают организм от случайно попадапцих в кровь ацетилхолина и подобных ему веществ /3/. В зависимости от того, холиновые эфиры каких кислот лучше всего гидролизуются холинэстеразами, различают, бутирилхолинэстеразу, пропионилхолинэстеразу, бензоилхолинэстера-зу и т.д.

Роль ацетилхолинэстеразн в передаче нервного возбуждения в настоящее время достаточно ясна. Вообще, механизм химической передачи нервного возбуждения изложен во многих обзорах и монографиях ■ /4-13/. Схематически его можно представить следуицим образом (рис. I).

В нервной клетке синтезируется при участии фермента холин-ацетилазы и коэнзима "А" ацетилхолин, который накапливается в окончании нервного волокна в виде синаптических пузырьков диаметром около 400 2 . При прохождении нервного импульса по аксону мк

1— I ммшш1ттпШМММ7Мт,

Рис. I. Схема синапса с химической передачей возбуждения.

А - электронно-микроскопическая картина синапса /14/. Б - выход молекул медиатора и их взаимодействие с молекулами рецептора /15/. Г - нейрофибриллы, 2 - мембрана глиальной клетки, окружающей синапс (изображена пунктиром), 3 - митохондрии, 4 - синаптические пузырьки, 5 - пресинапти-ческая мембрана, 6 - субсинаптическая (постсинапти-ч е екая) мембрана.

часть синаптических пузырьков проходит через персинаптиче скую мембрану и ацетилхолин поступает в синаптическую щель шириной 200-500 X. Взаимодействие ацетилхолина с холинорецепторами, расположенными на постсинаптической мембране, приводит к изменению поляризации последней, что, в свою очередь, вызывает возбуждение 1 или торможение'иннервируемой клетки. Ацетилхолин, выполнивший свою функцию, сразу же гидролизуется при помощи ацетилхолинэстеразы.

Многие фосфорорганические соединения обладают способностью необратимо блокировать холинэстеразы, то-есть лишают их способности осуществлять свою функцию. Это приводит к нарушению нормальной передачи нервного импульса и, в конечном счете, к гибели организмов.

Следует отметить, что мысль об антихолинэстеразном действии фосфорорганических соединений впервые была высказана А.Г.Гинецин-ским в 1942 году /2/. На способности фосфорорганических соединений ингибировать холинэстеразы и, в частности ацетилхолинэстера-зу, основано их применение в качестве инсектоакарицидов. Так как холинэстеразы различных организмов имеют различное строение, имеется принципиальная возможность получения фосфорорганических соединений,избирательно действующих на вредных насекомых и не токсичных для теплокровных животных и полезных насекомых. Для решения этой проблемы необходимо глубокое изучение строения холин-эстераз и механизма их действия. Прежде, чем перейти к изложению результатов, полученных нами при изучении механизма взаимодействия различных фосфорорганических соединений с холинэстеразами, рассмотрим литературные исследования, посвященные изучению строения холинэстераз, механизма гидролиза ацетилхолииа и взаимодействия холинэстераз с фосфорорганическими соединениями.

ВЫВОДЫ

1. Синтезированы эфиры метилтиофосфоновой, диэтилтиофосфорной, фенилтиофосфоновой, циклогексилтиофосфоновой, бензилтиофосфоно-вой и бензилфосфоновой кислот, содержащие в р -положении алк-тиольного радикала алкил(арил)меркаптогруппу и соответствующие им йодметилаты, тиоэфиры 0,0-дибутил- и 0,0-дигексилтиофосфор-ной, дифенилтиофосфиновой и О-этилфенилтиофосфоновой кислот, содержащие алктиольные радикалы, а также тиоэфиры метилтиофосфоновой кислоты, имеющие в £ -положении тиоэфирного радикала алкилсулъфоксигруппу.

2. Изучено взаимодействие синтезированных соединений с ацетилхо-линэстеразой эритроцитов крови человека и бутирилхолинэстера-зой сыворотки крови лошади.

3. Найдено, что 0-этил-Б -алкилмеркаптоэтил)фенилтиофосфонаты и их йодметилаты способны проявлять только необратимую ингиби-рующую активность не-зависимо от длины алкильного радикала, связанного с атомом сульфидной или сульфониевой серы.

4. Показано, что 0-алкил- Б-{р -метилмеркаптоэтил)фенилтиофосфона-ты, имеющие в алкоксильных группах этильные, пропильные и бу-тильные радикалы, являются необратимыми ингибиторами холинэстераз; увеличение радикалов до амильного и геКсильного сопровождается появлением комбинированного вида ингибирования.

5. Йодметилаты 0-алкил- -метилмеркаптоэтил)фенилтиофосфона-тов при увеличении алкильного радикала алкоксильной группы до амильного и гексильного приобретают свойства комбинированных ингибиторов лишь по отношению к бутирилхолинэстеразе. По отноше

ШШ И айемхожнэотеразе эти с])ос(1)орорганические ингибиторы являются только необратимыми ингибиторами.

6. 0-Этил- ^-алкишеркаптоэтил)циклогексилтиофосфонаты являются ингибиторами холинэстераз комбинированного вида действия и по активности резко уступают аналогичным фенилтиофосфонатам.

7. Ингибиругацая активность циклогексилтиофосфонатов по отношению к бутирилхолинэстеразе значительно зависит от длины алкоксиль-ного радикала, находящегося у атома сульфидной или сулъфоние-вой серы. По отношению к ацетилхолинэстеразе эти соединения менее активны и их эффективность мало зависит от длины алкиль-ного радикала, связанного с атомом сульфидной или сульфоние-вой серы.

8. Йодметилаты 0-этил-Б -(уз -алкилмеркаптоэтил)циклогексилтиофос-фонатов взаимодействуют с бутирилхолкнэстеразой по комбинированному типу,в то время как ацетилхолинэстеразу они ингибируют только необратимо, за исключением нонильного производного, который является ингибитором комбинированного действия.

9. Найдено, что 0-этил- Б-(уЗ -алкишеркаптоэтил)бензилтиофосфона-ты и их йодметилаты по отношению к бутирилхолинэстеразе являются более сильными ингибиторами, чем аналогичные фенилтиофос-фонаты. По отношению к ацетилхолинэстеразе имеет место обратное соотношение между активностями бензилтиофосфонатов и фе-нилтиофосфонатов.

10. На примерах Б-/> -арилмеркаптоэтиловых эфиров кислот фосфора показано, что соединения, имеющие у атома сульфидной серы фе-нильную, толильную или бензильную группировки, способны в определенных случаях проявлять комбинированный вид ингибирования.

11. Найдено, что тиоэфиры кислот пятивалентного фосфора, не содержащих в алктиольных радикалах каких-либо полярных группировок, такие как £ -алкилдифенилтиофосфинаты, 0-этил-уз-ал-килфенилтиофосфонаты, 0,0-дибутил--ажилтиофосфаты и 0,0-дигексил-^-ашшлтиофосфаты проявляют только комбинированный вид ингибирования.

12. Показано, что 0-этил-Б -(£ -ажилсулнроксиэтил)метилтиофос-фонаты способны проявлять только необратимую ингибирувдую активность. По сравнению с аналогичными соединениями сульфидного типа изученные вещества по отношению к ацетилхолинэстера-зе более активны, а по отношению к бутирилхолинэстеразе менее активны.

13. Найдено, что 0-этил-0-(/ -алкишеркаптоэтил)фенилфосфонаты, 0-алкил-0-(А -метилмеркаптоэтил)фенилфосфонаты, 0-этил-0-О^-алкилмеркаптоэтил)циклогексилфосфонаты, 0-этил-0-(р -ажил-меркаптоэтил) бензил:--^,фосфонаты и их йодметилаты являются только обратимыми ингибиторами холинэстераз. Сделан вывод о том, что алкиловые эфиры кислот пятивалентного фосфора способны ингибировать холинэстеразы только обратимо.

14. Показано, что*гидрофобная сорбция при определенных структурных особенностях ингибитора может способствовать благоприятной его ориентации на активной поверхности фермента, в результате чего скорость необратимого ингибирования возрастает. Однако гидрофобная сорбция может и препятствовать "правильной" ориентации, что приводит к эффекту обратимого ингибирования.

Гидрофобные заместители в молекуле ингибитора могут также создавать пространственные препятствия в реакции фосфори-лирования, что приводит к снижению константы скорости необратимого ингибирования и появлению обратимой компоненты.

15. Высказано предположение, что эффект избирательности антихо-лин^эстеразного действия, сила и вид ингибирования холинэсте-раз фосфорорганическиш соединениями зависят от ряда факторов, из которых наиболее существенными являются: электрофильная фосфорилируицая способность ингибиторов, гидрофобная сорбция определенных группировок ингибитора на соответствующих гидроп фобных участках активной поверхности фермента, согласованность или несогласованность гидрофобного связывания на гидрофобных участках в районах эстеразного и анионного центров.

16. Предложены схемы-согласованной'1 и несогласованной"сорбции молекул фосфорорганических ингибиторов на активной поверхности хо-линэстераз.

17. Определена инсектоакарицидная активность ряда синтезированных соединений, среди которых выявлены эффективные избирательно действующие акарициды. Сделан вывод о перспективности поиска новых фосфорорганических инсектоакарицидов на основе варьирования в их молекулах гидрофобных и полярных фрагментов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Можно попытаться суммировать наши знания о механизме ингибирования холинэстераз фосфорорганическими ингибиторам! и о зависимости ингибирующей активности фосфорорганических соединений от их строения.

Несомненно, что необратимое ингибирование холинэстераз - результат химической реакции фосфорорганических соединений с активным центром фермента - фосфорилирование эстеразного участка активного центра - гидроксила серина, включенного в полипептидную цепь фермента. Несомненно также, что обратимое ингибирование холинэстераз фосфорорганическими веществами - результат их сорбции на активной поверхности фермента, блокирующей (по тому или иному механизму) этот центр и не позволяющий, таким образом, естественному субстрату - ацетилхолину атаковать фермент.

При необратимом ингибировании действие ингибитора складывается из ряда актов, которые можно разделить на две группы: а) образование фермент-ингибиторного комплекса и б) собственно, реакция фосфорилирования. Образование фермент-ингибиторного комплекса включает сорбцию ингибитора, при которой он принимает надлежащую конформацию, и вызванную сорбцией коиформационную перестройку фермента. Собственно, фосфорилирование - тоже сложный процесс, в котором принимают участие разные функциональные группы фермента.

Поскольку мы в нашей работе старались сравнивать ряды фосфорорганических ингибиторов, характеризующихся примерно одинаковой электрофильной реакционной способностью, можно отвлечься от роли фактора фосфорилирования и сосредоточить свое внимание на первой группе фактов - образовании фермент-ингибиторного комплекса.

Сорбция молекулы фосфорорганического ингибитора на активном участке фермента зависит от разного типа взаимодействии. Это ион-ионное, ион-дипольное, диполь-дипольное взаимодействие и гидрофобная сорбция.

Ион-ионное (кулоновское) взаимодействие связывает триметил-аммониевую "головку" ацетилхолина с анионным участком активного центра или, соответственно, ониевую (заряженную) часть молекулы ингибитора (например, сульфониевую серу) с анионным участком.

Роль кулоновского взаимодействия в процессе ингибирования установлена большим количеством исследователей /53, 54, 97, 99105, 106, 208, 271/ и еще раз подтверждена в нашей работе. Так, при переводе сульфидной серы изученных тиофосфонатов в сульфониевую (см. общую часть), константы необратимого ингибирования холин-эстераз увеличиваются в 100-2500 раз.

Считается, что введение катионной группы в молекулу фосфор-органического ингибитора приводит к повышению констант необратимого ингибирования за счет двух факторов: ион-ионного взаимодействия с анионным центром фермента и увеличения электрофильной фосфорилирупцей способности ингибитора, вследствие индуктивного влияния заряженной группы. Разделить эти два фактора количественно очень трудно, но такая попытка была предпринята /III/. Было высказано предположение /112/, что при незначительном расстоянии между заряженной группой и атомом фосфора антихолинэстеразная активность ингибитора примерно в одинаковой степени определяется обоими факторами, а при большом расстоянии между указанными группами решающую роль играют ион-ионные взаимодействия.

В связи с изложенным, интересно отметить следующее. Если

- 226 ион-ионное взаимодействие играет существенную роль в процессе ингибирования холинэстераз фосфорорганическими соединениями, то появление заряда в молекулах ингибиторов обратимого вида действия должно также сильно увеличивать их ингибиругацую активность, как и в случае тиофосфонатов. Однако переход от сульфидных производных к сульфониевым, в случае изученных нами фосфонатов (см. общую часть), или не приводит к увеличению ингибирующей активности, им увеличивает ее незначительно (в 2-20 раз).

Видимо, следует признать, что ион-ионная сорбция играет свою роль, главным образом, в ориентации молекулы ингибитора (как субстрата) на активной поверхности фермента, при котором дожат осуществляться стадия фосфорилирования. В случае фосфонатов - обратимых ингибиторов - ориентация, естественно, роли не играет, и это резко снижает эффект от появления заряда; кроме того, в случае необратимых ингибиторов огромную роль играет индуктивный эффект ониевой группы, повышающей электрофильную реакционную способность соединения, что приводит к резкому увеличению ингибирующей активности фосфорорганических ингибиторов. •

Сказанное можно подтвердить тем, что константы щелочного гидролиза тиофосфонатов, которые прямо связаны с фосфорилирующей способностью фосфорорганических ингибиторов, увеличиваются при появлении катионной группы в отщепляющейся части молекулы фосфорорганических ингибиторов в 100-200 раз /139, 194/.

В случае дифенилтиофосфонатов типа (с6н^)2р(о)8(сн2)пбс2н^

I) и (с^^РСО^ссн^дбс^ • 5:, изученных ранее /78/, переход о

11) сн^ соединений типа (I) к соединениям типа (П) должен сопровождаться резким увеличением ингибирующей активности как при п= 2, так и при п = 6, за счет появления положительного заряда. На самом де к;

117 (при п = 2) и

- 227 ле в случае бутирилхолинэстеразы

-ту— = 5 (при п = 6), то-есть с увеличением расстояния между 1Са атомом фосфора и катионной головкой активность заряженных соединений приближается к активности незаряженных соединений. Несомненно, что в данном случае определенную роль играет эффект несогласованности гидрофобной и ион-ионной сорбции (см. ниже), но симбатное уменьшение констант щелочного гидролиза и констант скорости необратимого ингибирования бутирилхолинэстеразы заряженными соединениями при увеличении п (рис. 57) /79/ подтверждает, что падение ингибиторной активности связано в основном с падением фосфорилирущей активности фосфорорганических ингибиторов, как следствие - .т - эффекта.

50

4,5

-о 2

ИоН

10

2,5

20 5

1.0 П

2 3 4 5 6

Рис. 57. Зависимость констант скорости /79/:

1 необратимого торможения бутирилхолинэстеразы (к ); э.

2 щелочного гидролиза ( 1вК0н ); от (п) для соединений

С6Н5)2Р(0)Б(СН2)п8С2Н5.5: сн, р

Ион-дипольное взаимодействие, видимо, имеет место между анионным пунктом фермента и полярной функциональной группой, находящейся в отщепляемой части молекулы ингибитора, например, группировки -сн2-Б-К. Это видно, например, из сравнения антихо-линэстеразной активности Б -бутил-О-этилфенилтиофосфоната (I) и Б-уЗ -метилмеркаптоэтил-О-этилфенилтиофосфоната (П)

СХ О О ¿Не- уо б5\ / 6 Ч /

I) (П)

С^О^ ^ЗСН2СН2СН2СН3 С2Н5°// ЬСН2СН2-Б-СН5

Для соединения I, не имеющего полярной группировки в отщепляемой части молекулы ингибитора, константа необратимого ингибирор вания ацетилхолинэстеразы составляет 5,8*10 , а по отношению к о бутирилхолинэстеразе - 7,7*10 . В случае же соединения П, имеющего полярную группировку, эти константы соответственно равны 5,2*104 и 1,3«104, то-есть на два порядка выше.

Диполь-дипольное взаимодействие, по-видимому, разыгрывается на эстеразном участке фермента, где сорбируется ацетильная группа ацетилхолина, а при действии фосфорорганических соединений - фосфорильная группа ингибитора. Как уже было указано выше, диполь-дипольное взаимодействие, видимо, играет одну из главных ролей при взаимодействии фосфорорганических ингибиторов с холин-эстеразами. фактор, определяющий "прилипание" гидрофобных частей молекулы ингибитора к гидрофобным участкам активной поверхности. Роль гидрофобной сорбции очень важна, однако она будет положительной (в смысле ускорения процесса инги-бирования) лишь в том случае, если ее действие и действие электростатических факторов происходит согласованно, то-есть все факторы способствуют "правильной" ориентации молекулы ингибитора на активном участке фермента.

При несогласованности разных видов взаимодействия может наступить ослабление ингибиторной активности и даже изменение типа ингибирования от необратимого к обратимому.

На рисунке 58 приведены схемы некоторых вариантов несогласованной сорбции. Во всех случаях несогласованной сорбции молекула ингибитора ориентируется на активной поверхности ферментов таким образом, что атом фосфора и гидроксил серина пространственно разобщены, и фосфорилирование затруднено. Видимо, в случае такой несогласованной сорбции мы и обнаруживаем эффект комбинированного вида действия фосфорорганического ингибитора. При согласованной же сорбции все сорбционные силы, участвующие в каждом конкретном акте ингибирования фермента, ориентируют молекулу фосфорорганического ингибитора таким образом, что атом фосфора и гидроксил серина пространственно сближены, и может наступить процесс фосфорилирования.

Как згже было указано выше, несогласованность сорбции, видимо, имеет место в случае дифенилтиофосфонатов, изученных ранее

78/. Резкое уменьшение ингибирулцей активности соединений

С6Н^)2Р(0)8(СН2)П8С2Н^^ при увеличении ( п) связано, как сн-, р было указано (см. вьппе), не только с уменьшением фосфорилирую-щей способности фосфорорганических ингибиторов, но и с несогласованностью ион-ионного взаимодействия на анионном пункте и ди-поль-дипольного взаимодействия на эстеразном пункте (рис. 58а), которая является следствием неоптимального расстояния между фосфором и ониевым зарядом.

- 230

В работе /186/, а также неоднократно в наших исследованиях, было показано, что несогласованность гидрофобных взаимодействий в отщепляемой и неотщепляемой части молекулы резко ослабляет ин-гибиторный эффект, так как прочная гидрофобная сорбция гидрофобных радикалов на гидрофобных участках, в районах эстеразного и анионного пунктов активной поверхности ферментов, ориентирует атом фосфора так, что он отделен от гидроксила серина и фосфори-лирование затруднено (рис. 58с).

Эффект такой несогласованной сорбции подтверждается при рассматривании антихолинэстеразной активности соединений типа абр(о)бспн2п+1 при разных п .

По отношению к ацетилхолинэстеразе (рис. 59) вещества типа (с2н50)сн5р(0)бспн2п+1 при росте п показывают повышение ин-гибирупцей активности до п = 8-Ю, в зависимости от строения радикала, а вещества типа (С4Н9°)2Р^0^спН2п+1' хорошо сорбирующиеся за счет гидрофобной сорбции алкоксильных групп на гидрофобных участках, расположенных в районе эстеразного пункта, практически не повышают констант необратимого ингибирования (ка) с ростом (п), а в случае (сбн1з0)2р(°)8Спн2п+1 после п = 4 наблюдается даже снижение значений этих констант. Таким образом, наличие двух объемистых гидрофобных групп в молекуле ингибитора не дает с ростом п такого роста ка, как наличие только одной (рост к2 метильного производного). Видимо, сорбция одновременно двух: гидрофобных групп невыгодно ориентирует атом фосфора по отношению к сериновому гидроксилу.

Производные дифенилтиофосфиновых кислот (0бН5)2Р(0)БСпн2п+1, хотя и показывают рост ка, но при п = 6 становятся уже слабее этоксиметильного производного. Отметим, что у всех веществ, кроме этоксиметильных, наблюдается обратимая компонента торможения,

- 231 что свидетельствует о наличии непродуктивной сорбции.

По отношению к бутирилхолинэстеразе (рис. 60),гидрофобные области активной поверхности которой выражены^ для соединений метального ряда (с2н^о)сы^р(о)бспы2п+^, наблюдается резкий рост К2 до п= 6; то же имеет место и для соединений (с2н^о)с6н^р(о)бспн2п+^ (табл. 67). Б -Алкилдибутилтиофосфаты, гораздо более активные в силу хорошей гидрофобной сорбции, тоже показывают рост ка (но есть обратимая компонента), а Б -алкил-гексилтиофосфаты при малых п показывают самую высокую активность ( Б-метальное производное), но в силу эффекта "несогласованности" повышения активности с ростом п не наблюдается.

Б -Алкилдифенилтиофосфинаты при небольших п (1-3) приблизительно равны по силе этоксиметильным и этоксифенильным производным, а далее с ростом п существенно отстают от них. Отметим, что обратимая компонента ингибирования (результат непродуктивной сорбции) в этом случае у дифенильных производных выражена сильно ( к. порядка 10 ).

Как уже было указано выше, несогласованность сорбции может привести даже к изменению вида ингибирования от необратимого к обратимому. Так, в работе /65/ показано, что Б-метилдииозпропил-тиофосфинат ( 1-с^н,-7)2Р(о)бсн^) является ингибитором ацетилхолинэстеразы и бутирилхолинэстеразы только обратимого вида действия; б-метилдифенилтиофосфинат (с6н^)2р(о)бсн^ - чисто обратимый ингибитор ацетилхолинэстеразы. Видимо, в данном случае проявляется эффект гидрофобного экранирования (рис. 58 а), Изученные нами 0-этил- Б -нонижлеркаптоэтил)циклогексилтиофосфонат С6Н11(С2Н£-0)Р(0)БСН2СН2БС^Н1^ и 0-этил- Б -бензилмеркапто-этил)циклогексилтиофосфонат С6Н11(С2Н^0)Р(0)БСН2СН2БСН2С6НС;, хотя и являются ингибиторами комбинированного действия, но очень а) он несогласованность ион-ионной и диполь-дипольной сорбции / о р- Б-СИМЯ ж, в) он несогласованность ион-ионной и гидрофобной сорбции с) несогласованность гидрофобных форбций в районах эстераз-ного и анионного пунктов а) гидрофобное экранирование фосфора

Рис. 58. 5 4 1

J1

5 б 8 О п

Рис. 59* Зависимость констант скорости необратимого ингибирова-ния (1б ацетилхолинэстеразы соединениями: (С^ОХЗ^РСО)^ (I)

СбН5)2Р(0)ЯЙ (С6Н130)2Р(0)8К (С^ОСН^РСОБЕ (С4Нд0)2РС0)БН

2)

3)

4)

5)

Рис. 60. Зависимость констант скорости необратимого ингибирования бутирилхолинэстеразы соединениями:

СбН5)2Р(0)8Е (I)

С^ОСН^РСОБН (2)

С^ОС^РСОБЕ (3) (СбН130)2Р(0)8К (4) с4нд0)2р(0)вн (5) близки по ингибирупцей способности к обратимым ингибиторам. Константы необратимой компоненты ингибирования у них очень малы, соп О ответственно ка = 1,5«10 л/моль мин. и ка = 1,8«10 л/моль мин, а судя по константам к. и к. »характеризующим обратимую ком

X у X X ) »5 поненту ингибирования (соответственно К- =3,0*10 6

X } л:

5,(МО-4, К. ч =2,0.10~5), они являются

1,3-Ю"5 и К,

1,Г сильными обратимыми ингибиторами. Прямые зависимости 1б -ттг от

Т/т; ъ для указанных соединений почти параллельны оси абсцисс (рис. 61), то-есть приближаются по углу наклона к обратимым ингибиторам. й

5,0 4,о V V о?

1% О ю 7

20 зо

40

50

1?

Рис. 61. Зависшлость 1 &-Т& от времени инкубации ( -ъ) ацетилхолинэстеразы с I - с^^с^узжо^сн^н^с^д и = 5,6 'Ю-5М и 2 - СбН1 Л (С^Н^О )Р(0 )ЗСН2СН2ЙСН2СбН5 —

Видимо, в данном случае имеет место несогласованность гидрофобной сорбции циклогексильной и нонильной (соответственно - бен-зильной) групп и диполь-дипольной сорбции атома фосфора на гидроксил серина.

Здесь необходимо учитывать еще одно обстоятельство. Мы знаем, что увеличение гидрофобных радикалов в молекуле ингибитора как в неотщепляемой, так и в отщепляемой частях молекулы вызывает усиление ингибиторного эффекта только до определенного предела. Дальнейшее увеличение алкильных групп приводит к падению эффективности. Мы полагаем, что в этом случае сказывается действие второго этапа формирования фермент-ингибиторного комплекса - кон-формационной перестройки фермента, предшествующей или сопутствующей элементарному акту фосфорилирования. Слишком большие гидрофобные радикалы, не умещающиеся на гидрофобных участках, препятствуют конформационным перестройкам, и это приводит кснижению активности ингибитора.

Ацетилхолинэстераза, особо специфично адаптированная к ме-тильной группе ацетилхолина, интенсивно ингибируется производными метилфосфоновой кислоты. Хотя и у ацетилхолинэстеразы в районе эстеразного пункта есть гидрофобные участки, все-таки во многих случаях метильная группа дает наибольший эффект.

У многих из исследованных нами веществ иигибирование активности холинэстераз происходит по комбинированному типу, т.е., наряду с необратимым ингибированием, имеет место обратимое, характеризующееся равновесными константами к• и К. и соответству

1, Г X , о кщее образованию фермент-ингибиторного комплекса, не превращающегося в фосфорилированный фермент. В таблице 68 дана сводка проявления обратимой компоненты в зависимости от строения ингибитора.

При рассмотрении таблицы 68, прежде всего, бросается в глаза соотношение свойств веществ 'Ш 3, 12 и 19. При наличии ^9-ал-килмеркаптоэтильной группы у атома серы (вещество № 3), связанной с атомом фосфора, эффекта обратимости нет, и он появляется только при высших алкоксильных группах при фосфоре (с^н^о или сбн^О вместо с2н^о), а если к атому серы присоединена алкильная группа без заместителей (вещество 12) или арильная группа (вещество 19), то обратимость налицо. Видимо, фиксация алкилсульйид-ной иж диалкилсульфониевой группы (но не арилсульфидной) на анионном пункте активного центра энзима благоприятствует продуктивной сорбции, т.е. образованию фермент-ингибиторного комплекса, превращающегося в фосфорилированный фермент. К тому же, у сульфидных и сульфониевых производных константы необратимого ингибирования фермента значительно выше, чем у алкильных (см. выше).

Наибольший эффект обратимого ингибирования в ряду простых &-алкильных производных показывают вещества с двумя бутокси- и гексокси - группа!® у атома фосфора 14 и 15). Они хорошо сорбируются, благодаря гидрофобным взаимодействиям, что способствует образованию с ферментом как "непродуктивного" комплекса, так и "продуктивного" комплекса. Благодаря тому, что объемистые гидрофобные группы у них связаны с атомом фосфора не непосредственно, а через кислородный атом (т.е. "отодвинут" от атома фосфора), гидрофобная сорбция не оказывает стерических препятствий акту фосфорилирования. Вещество с двумя фенильными 0$ 13), в силу сте-рической жесткости, сорбируется, вообще, хуже, причем и "непродуктивно" и "продуктивно".

В ряду Б-алкилмеркаптоалкильных производных этокси-метиль-ные и этокси-фенильные (по фосфору) производные 1-4) вовсе не показывают эффект обратимости. У этокси-бензильных веществ (йй 5 и 6) обратимость есть, и по бутирилхолинэстеразе хорошо выражена, но только у "незаряженных" сульфидных производных. Оние-вые производные ингибируют оба фермента только необратимо. Эти ве

1. Кабачник M.И. Влияние фосфорорганических веществ на передачу нервного возбуждения.-Вестник АН СССР,1968, ifô,с.86-94.

2. Голиков С.Н.,Розенгарт В.И., Холинэстеразы и антихолинэсте-разные вещества.- Л.,изд-во "Медицина",1964.- 193 с.

3. Михельсон М.Я.,3еммаль Э.В.-Ацетилхолин. О молекулярном механизме действия.-Л.,изд-во "Наука", 1970.-278 с.

4. Экклс Дж. Физиология синапсов.- 1966.- 149 с,

5. Барлоу Р. Введение в химическую фармакологию.- М.,изд-во "ИЛ", 1959.- 217 с.

6. Шаповалов A.M. Клеточные механизмы синаптической передачи.- М., изд-во "Медицина". 1966.- 174 с.

7. McLennan H., Sawders W.B. Go. Synaptic transmission.-Philadelphia.,1963, p. 213.

8. Feldber W. Acetilcholin. In: Metabolism of the nervous system.- Ed. Righter D., London, Pergamon Press,1957, p. 493-509.

9. Katz B. Nerve, muscle and synapse. New-York,1966,p.145.

10. Nachmansohn D. Chemical and molecular basis of nerve activity.- Academe Press. N.Y., London, 1959, p. 265.

11. Кибяков А.В. Химическая передача нервного возбуждения.-M.-Л., изд-во "Наука", 1964.- 137 с.

12. Коштоянц Х.С. Белковые тела, обмен веществ и нервная регуляция.» М., изд-во "Наука", 1951.- 189 с.

13. Robertas iS.D.Jr1. Histophysiology of synapses and Neurose eretion.-fie1w-York. Macmilan. 1964— 201 p.

14. Экклс Дж. Синапс.- В сб.:Молекулы и клетки.- IL ,изд-во1. Мир", 1966, с. 49-67.

15. Cohen J.A., Oosterbaan R.A., warringa M.G.P.J.,

16. Jansz U.S. Chemical structure of the reactive group of esterases.- Disc, iaraaay iioc. 19?5> ¿0» p. 114-1i9» 17« Cohen J.A., (Josterbaan H.A., Jansz H.S., Berends F.

17. Cohen J.A., Oosterbaan H.A., V/arringa M.G.P.J. Turnover number of ali-esterase, pseudo-and true Cholinesterase coid the coiabinaüion of these едкузкs v±r,h diifcopropyifluophosxlite.- Biochim. et Biophvc. Acta, 1955, 18, p. 228-235.

18. Кабачник М.й. Дбдувахабов A.A., Агабекова И.PI. .Бресткин

19. А.П.»Волкова Р.И., Годовиков H.H., Годына Е.И., Михайлов С.С.,Михельсон М.Я.,Розенгарт В.И.»Розенгарт Е.В., Ситкевич Р.В. Гидрофобные области активного центра хо-линэстераз.-Успехи химии, 1970, 39, с. 1050 -1064.

20. Kabachnik M.I., Brestkin А.P., Godovikov N.N., Michel-son M.J., Rosengart -¿.V., Rosengart V.J. Hidrophobic areas of the active suriace of cholinesterases.-Pharmacol. Rev., 1970, 22, p. 355-387.

21. Z>. Kolle G.B. Gholinesterases und anticholinesterase agents.

22. Handbuch, der exper. Pharmacologic, 1963, Bd.15,s.187-299.

23. Яковлев В.А. Кинетика ферментативного катализа.- М. : "Наука", 1965.- 248 с.

24. Кабачник М.й.,Бресткин А.П.»Михельсон М.Я. О механизме физиологического действия фосфороргаличесшх соединений. IX Менделеевским съезд,общей и прикладной химии,- М. : "Наука", 1965.- 47 с.

25. Wilson I.В., Bergmann F.A. Studies on Cholinesterase.

26. Bergmarm F.A., Segal R. The relationship of quaternary ammonium salts to the anionic site of true and pseudo cholinesteraseBiochem. J., 1954, 58, p. 692-698.

27. Bergmann F. Structure of the active surface of cholinesterases and the mechanism of their catalytic action in ester hydrolysis.-Advances in Catalysis., 1958, 10, p. 130-137.

28. Berry W.K. The turnover number of Cholinesterase.- Bio-chem. J., 1951, fiit p. 615-620.

29. Schaffer U.K., May S.O., Summerson W.H. Serine phosphoric acid form diisopropylphosphoryl derivate of eei Cholinesterase.- J.Biol. Cheni., 1954, 206, p.201-209.

30. Schaffer N.K., May S.O., Summerson W.H. Serine phoephoric acid from diisopropylphosphoryl chymotrypsin.- J. Biol. Chem., 1953, 202, p. 67-7535. Jandorf B.J., Wagner-Jauregg Т., 0'Weill J., Stolberg M.A*.

31. Cunningham L.W. Proposal for a mechanism of reaction forhydrolytic enzymes.-Scienee, 1957, 125, p. 1145-1149. 38. Noguchi J., Tokura S., Komai Т., J'anamoto H., Ohnishi A. Ilydrolytic enzyme models.- J. Biochem., 1968, 64, p.703-- 707.

32. Брюс Т.,Бенкович С. Механизмы биоорганических реакций.-изд-во "Мир", ГЛ., 1970.- 392 с.

33. Roskoski R., Choline acetyltransferase and acetylcholinesterase : Evidence for Essential histidine residues.-Biochemistry, 1974, 13^ Р* 5141-5144.

34. Michel H.О•, Schaffer N.K. Failure of sarin ( isoprophyl-methylphosphonofluoridate) to react with c(.-chymotrypsin inachtivated by tosyl phenylalanine chloromethyl ketone.-Arch. Biochem. Biophys., 1966, 117, p. 513-514.

35. Zeller E.A., Bisseger A. Influence of drugs and chemotherapy on enzyme reactions. 111. Cholinesterases of brain and erythracytes.- Helv. Chim. Acta., 1945» 26, p. 169-174.

36. Wilson I.B. Mechanism of enzyme hydrolysis. 1. Role of the acidic group in the esteratic site of acetylcholinesterase.- Biochem. et Biophys. Acta., 1951 , 7, p. 466-477.

37. Koshland D.E. The active aste and enzyme activity.-Advan. Enzymol., 1960, 22, p. 45.

38. Григорьева Г.М., Влияние ионов тетраалкиламмония на взаимодействие вне холинэстераз с фосфороргаяическимиингибиторами.-Биохимия,1965,30, с. 415-422.

39. Григорьева Г.М.,Яковлев В.А. Термодинамическая характеристика взаимодействия холинэстераз с ионами тетраалкиламмония.- Биохимия, 1965, 30, с. 875-879.

40. Wilson I.B., Bergmann F. Cholinesterase. V11. Active surface of acetylcholine esterase derived fromeffects of ph. on inhibitors.- J. Biol. Chem. , 1950, 185 , p. 479-489.

41. Wilson I.B. Acetylcholinesterase. X11. Further studies of binding forces.- J. Biol. Chem., 1952,122, p.215-225.

42. Bergmann P., V/urzel M. Structure of the active surface of serum Cholinesterase.- Biochim. et Biophys. Acta ., 1954, 11 , p. 251-257.

43. Tammelin L.E. Choline esters substrates and inhibitors of Cholinesterase.- Svensk. Kem. Tidskr., 1958, 70 , p. 157-181.

44. Волкова P.И. »Годовиков H.H. Дабачник M.K. ,Магазз:ник JI.Г.,

45. Мастрюкова Т.А. ,Михельсон М.Я. ,Рожкова. Е.К. »Фруентов И. К.,

46. Яковлев В.А. Химическое строение и биологическая активность фосфорорганических ингибиторов холинэстераз.- Вопросы мед. хим., 1961, 7 , с. 250-259.

47. Hsia J.,, Kosmanu В., Piette L. Organophosphate spinlabel studies of inhibited esterases, JL- chymotryp-sin and cholinesterase.- Biochim. Biophys. Res. Commun.,1969, ¿6 , p. 75-78.

48. Morrisett J., Broomfield C., Hackley B. A New Spin Label Specific for the Active site of Serine Enzymes.-J. Biol.Chem., 1969, 244 , p.5758-5767.

49. Ходаковская O.A. Исследование конформационных переходов в холинэстеразе и d-химотрепсине с помощью спин-меченного фосфорорганического ингибитора.- Кандидатская диссертация, М., 1974, с. 131.

50. Яковлев В.А., Ходаковская О.А.,Гусовская Т.П. Исследование Jj-хиглотрипсина с помощью спин-меченного ингибитора.- Биофизика, 1974, 19, с. 224-232.

51. Morrisett J., Broomfield С. A Comparative Study of Spin-labeled Serine Enzymes : Acetylcholinesterase , Trypsin, (Jv.- Chymotrypsin, Elastase, and Subtilisin.-J. Biol. Chem., 1969 , 247 , p. 7224-7231.

52. Brestkin A.P. and Hosengart E.V. Cholinesterase catalysis.- Nature (London), 1965, 20£ , p. 388-389.

53. Кабачник М.И. Фосфорорганические физиологически активные вещества.- Вестник АН СССР, 1964, МО, с. 60-68.

54. Яковлев В.А.Механизм и кинетика взаимодействия фосфорорганических соединений с холинэстеразой.- В сб."Химия и применение фосфорорганических соединений", труды П конференции, ГЛ., изд-во "Наука", 1962, с. 424-436

55. Зеймаль Э.В. ,Ми::ельсон М.Я. »Фруентов Н.К. О физиологической активности фосфорорганических соединений.- В сб.:Химия и применение фосфорорганических соединений. Изд. АН СССР, ГЛ.,-Л., 1962, с. 403-423.

56. Krupka R.M., Leidler K.I. Molecular mechanisms for hydrolytic enzyme action.- J. Amer. Chem. Soc., 1961, 83 , 1445-1451.

57. Бресткин А.П.,Брик И.Л.Волкова Р.И.»Майзель Е. Б. ,Розен-гарт Е.В. Влияние ионной силы и органических растворителей на взаимодействие холинэстераз с субстратами и фосфорорганическими ингибиторами.- Биохимия, 1970 , 35 , вып. 2, с. 382-393.

58. Кошланд Д. Катализ в кивой природе и в пробирке.- В сб.:

59. Горизонты'биохимии, М., 1964, с. 202-213.

60. Садыков А.С.,Розенгарт Е.В.»Абдувахабов А.А.»Асланов Х.А. Холинэстеразы. Активный центр и механизм действия.- Изд. ФАН Уз.ССР, Ташкент, 1976,- с.205.

61. Гурдалиев Х.Х. Синтез и антимолинэстеразные свойства некоторых азотсодержащих эфиров дифенилфосфиновой и дифенил -тиофосфиновой кислот.- Кандидатская диссертация, М., 1972. 155 с.

62. Карданов II.А. Синтез и антихолинэстеразные свойства 0-(^-алкилмеркаптоалкил)дифенилфосфина.тов, $ -(¿V-алкил-меркаптоалкил)дифенилтиофосфияатов и их йодметилатов. -Кандидатская диссертация, М., 1972. 161 с.

63. Simeon V., Reiner E. Effect of Temperature and ph. on Carbamoylation and Phosphorylation of Serum Cholin-esterases.- Biochem., 1972, 1^0 , p. ;?15-524.

64. Ahmed U.K., Casida J.E., Nichols R.E. Bovine metabolism of organophosphorus insecticides. Significance of rumen fluid v;ith. particular reference to parathion.- J. Agr. Food Chem., 1958, 6 , p. 740-748.

65. Aldridge W.N,, Davison A.N. Inhibition of erythrocyte cholinesterase by tri-esters of phosphoric acid.

66. Dietyl p-nitrophenylphosphate (E600) and analogs.-Biochem., 1952, ¿1 , p 62-70.

67. Абдувахабов А.А.,Садыков А.А.»Зунарова К.М.»Асланов Х.А.,ят

68. Садыков А.С. Химические сдвиги Р некоторых фосфорорга-нических соединений.- Докл. АН Уз.ССР, 1973,№3, с.41-42.

69. Абдувахабов А.А.,Инаятов К.,Садыков А.А.»Садыков А.С.1. ЯТ

70. Химические сдвиги Р О-алкилметилхлортиофосфонатов.-Докл. АН Уз.ССР, 1973, №5, с.48-49.

71. Абдувахабов А.А.»Садыков А.А.»Далимов Д.И.»Асланов Х.Н.,1. ЯТ

72. Садыков А.С. Химические сдвиги Р О-алкилметилхлорфос-фонатов.-Докл. АН Уз.ССР, 1973,№10, с.30-31.

73. Абдувахабов А.А.,Садыков А.А.»Асланов Х.А.»Годовиков Н.Н.,ят

74. Fukuto T.R. Chemistry said action of organic phosphorusresearch.- Advances in Pest Control Research, 1957» 1. » p. 147-153.

75. Fukuto Т.Н., Metcalf K.L., March Е,В., Maxon M.G. Chemical behavior of sistox isomers in biological systems.- J. Econ. Entomol., 1955, 48 , p. 347-363.

76. Fukuto Т.Н., Metcalf R.L., March R.B., Maxon M.G. A watersoluble systemic insecticide Op-diethyl, S-2-ethyl-mercaptoethylphosphorothiolate methosul-fate.- J. Amer.Chem. Soc.,1955, 77 , p. 3670-3671.

77. Hobbig;er F. The inhibition of cholinesterases by 3(dietho}iyphosphinylo>:y)-N-methylcholinium methyl— sulfate and its tertiary base.- Brit. J. Pharmacol., 1954, 9 , p. 159-165.

78. Koelle G.B., Steiner E.C. The cerebral distribution of a tertiary arid a quaternary anticholinesterase agent following intravenous and intraventricular injection.- J. Pharmacol, 1956, 118 ,p. 420-434.

79. Tammelin L.E. Metyl-fluoro-phosphorylcholines.

80. Acta. Chem. Scand., 1957, 11 »P- 859-865.

81. ЮЗ. Бресткин А.П.,Брик И.Л.»Волкова Р.И., Годовиков Н.Н., Теплов Н.Е.,Кабачяик М.М. Антихолинэстеразные свойства 0,0-диэтил~5-(jô -арилметиламиноэтил)тиофосфатов и их метилсульфометилатов.- Докл. АН СССР, 1965,163,с.365-368.

82. Семенов И.В. ,Фруентов II.К. Сопоставление строения ряда новых фосфорорганических соединений с антихолинэстераз-ным действием и способностью вызывать спазм бронхов.

83. В кн.:Физиологическая роль ацетилхолина и изыскание новых лекарственных веществ.- Л.,1957.- 245 с.

84. Семенов И.В.,Фруентов Н.К. Об усилении антихолинэстераз-ного действия и способности вызывать спазмы бронхов при метилсульфометилировании некоторых фосфорорганических веществ,- В сб.трудов кафедры судебной медицины.- I ЛМИ, вып. 2, 1958, с. 183-189.

85. Яковлев В.А.»Волкова Р.И. Исследование активных центров холияэстераз с помощью фосфорорганических ингибиторов.- Докл. АН СССР,1962,146, с. 217-220.

86. Heath D.F. Organophosphorus poisons,- Pergamon Press, Oxford, 1961, p. 527.

87. Годовиков H.H. Синтез и взаимодействие с холинэстера-зами некоторых эфиров монотиокислот фосфора.- Докторская диссертация.- ГЛ., 1969.- 361 с.

88. Foss R., Kraus A. Ionic Association. 11. Several Salts in Dioxane-Water Mixtures.- J. Amer. Chem. Soc., 1957, 72 , P. 3304-3310.

89. W* Бресткин А.П.,Брик И.Л. .Гинецинская JI.И., Годовиков H.H.,Q

90. Кабачник М.И., Теплов II. Е. Ингибирование афгихолинэстера-зы 0,0-диэтил-2 -(jà -арилметиламиноэтил)тиофосфатами и их метилсульфометилатами.- Изв.АН СССР, 1968,с.2070-2074.

91. Годовиков H.H. Антихолинэстеразные свойства некоторых фосфорорганических соединений.- В сб.: Химия и применение фосфорорганических соединений. -Изд."Наука", труды Ш конференции, 1972, с.423-431.

92. Годовиков H.H.»Кабачник М.И.,Теплов Н.Е. Влияние основности 0,0-диэтил-^ -(ß -арилметиламиноэтил)тиофосфатов на скорость их взаимодействия с бутирилхолинэстеразой.-Изв. АН СССР, сер.хим., 1968, с. 972-975. .

93. Годовиков H.H.,Гурдалиев Х.Х.,Кабачник М.И. Синтез

94. S-iß -арижетиламиноэтил)дифенилтиофосфинатов и их йодметилатов.-ЖОХ, 1971, 41(9), с.1942-1945.

95. Бресткин А.П,Брик И.Л.»Годовиков H.H.»Кабачник М.И., Киреева Е.В.»Трифонова С.А. Антихолинэстеразные свойства 0,0-диизопропил-5 -(ß У, А/ -арилметиламиноэтил)тио-фосфатов и их йодметилатов.- Изв. АН СССР,сер.хим.,1976, с. 429-431.

96. Ярв Я.Л.,Аавиксаар A.A.»Годовиков H.H.»Лобанов Д.И. Эффект катионного заряда отщепляющейся группы в реакции фосфорорганических ингибиторов с ацетилхолинэстеразой,-Биоорганическая химия, 1977, 3 , с. 268-271.

97. Годовиков H.H., Годына Е.И.,Кабачник М.И.,Михельсон М.Я., Розенгарт Е.Б.»Яковлев В.А. Антихолинэстеразные свойства некоторых О-этил-5' -алкилметилтиофосфонатов.- Докл.АН СССР, 1963, 151 , с. II04-II08.

98. Бресткин А.П.»Годовиков H.H.,Годына Е.В.,Кабачник М.И., Михелъсон М.Я.,Розенгарт Е.В. Антихолинэстеразные свойства О-этил-S -алкилметилтиофосфонатов.- Доклад. АН СССР, 1964, 158 , с. 880-883.

99. Бреслер С.Е.,Талмуд Д.Л. О природе глобулярных белков.-Докл. АН СССР, 1944, 43, с. 326-330.

100. Бреслер С.Е. О строении глобулярных белков и их взаимодействии с внешней средой. Биохимия, 1949, 14, $2,с. 180-189.

101. Бреслер С.Е. Введение в молекулярную биологию.- Изд. АН СССР, М.,1963,- 519 с.

102. Kauzmann W. Some factors in the interpretation of protein denaturation.- Advances in Protein Chem., 1959, 14 , P. 1-65.

103. Волькенштейн M.B. Физика ферментов.- Изд."Наука", М., 1967.- 199 с.

104. Троицкий Г.В. Гидрофобные взаимодействия в глобулярных белках.- В кн.: Вопросы биосинтеза, структуры и функции биополимеров.- Издг"Наунова думка", Киев,1967, с. 152 -175.

105. Мосолов В.В. Влияние жирных кислот на структуру молекулы трипсина.- Докл. АН СССР, 1364, 155 , JS 4, с. 953 -956.

106. Hofstee В.Н. Patty acid esters as substrates for trypsin and chymotrypsin.- Biochem. et Biophys. Acta., 1957, 24 , p. 211-213.

107. Бресткин А.П.,Годовиков Н.Н.,Годына Е.И.,Кабачник М.И., Розеягарт В.И. Антихолинэстеразные свойства 0-этил- S -(¿^-фенилалкил)метилтиофосфонатов.- Изв. АН СССР, сер. хим., 1968, с. 2294-2295.

108. Бресткин А.П.»Волкова Р.И.»Годовиков Н.Н.»Кабачник М.И. Антихолинэстеразные свойства 0-этил-$ -(J> -алкилмеркап-тоэтил)метилтиофосфонатов.- Изв.АН СССР, сер.хим., 1968, с. 2028 2033.

109. Абдувахабов А.А. Годовиков Н.Н.,Кабачник М.И.»Михайлов С.С., Розеягарт В.И., Ситкевич Р.В. Антихолинэстеразные свойства О-п-алкил-5 -бутижетилтиофосфонатов.-Докл. АН СССР,1966, 171» с.857-859.

110. Абдувахабов A.A.,Агабекова И.И.Годовиков H.H.,Кабачник М.И.»Розенгарт В.И. Действие 0-алкил-$ п -бутилметил-тиофосфонатов с разветвленными группами на холинэстера-зы.- Изв. АН СССР, сер.хим., 1968, с. 2480-2484.

111. Абдувахабов A.A.,Агабекова И.И.»Годовиков H.H.»Кабачник М.И.»Розенгарт В.И. Влияние степени разветвленности 0-алкилъного радикала на антихолинэстеразные свойства 0-алкил-S -п-бутилметилтиофосфонатов.- Изв. АН СССР, сер. хим., 1970, с. 1588-1594.

112. Бресткин А.П.О роли гидрофобного взаимодействия в инги-бировании холинэстераз.- В сб.:Химия и применение фос-форорганических соединений, труды IУ конференции, изд. "Наука", М., 1972.- 322 с.

113. Бресткин А.П.»Майзелъ Е.Б.,Розенгарт Е.В. Влияние некоторых органических растворителей на реакционную способность холинэстеразы.- Биохимия, 1969 , 34 , вып.5, с.1062-1067.

114. Абдувахабов А. А. .Годовиков II.Н. Дабачник М.И.,Розен-гарт В.И.,Ситкевич Р.В. Антихолинэстеразные свойства О-п-алкил-S -п-гексилметилтиофосфонатов.- Изв. АН СССР, сер.хим., 1969, с. III7-II2I.

115. Bracha P., O'Brien R.D. Trialkylphosphate and phosphor©-tiolate anticholinesterases. 1. Amiton analogs.- Biochemistry, 1968,J7, p. 1545-1554.

116. Bracha P., O'Brien R.D. Trialkylphosphate and phosphoro-tiolate anticholinesterases, 11. Effect of chain length on potency.- Biochemistry, 1968, 7 , p. 1555-1564.

117. Bracha P., O'Brien R.D. Hydrophobic bonding of trialkyl phosphates and phosphorothiolates to a^^tylcholinesterase.- Biochemistry, 1970,9, p. 741-745.

118. Годовиков H.H.,Годына Е.И.Дабачник М.И.,Розенгарт В.И., Шмелева В.Г. Избирательное ингибирование неспецифической холинэстеразы некоторыми 0,0-диэтил-$ -алкилтиофос-фатами.- Докл. АН СССР, 1967,174» с. 603-606.

119. Абдувахабов А.А.»Зупарова K.M.»Годовиков H.H.,Кабачник М.И.»Крашенюк А.И.»Михайлов С.С.,Розенгарт В.И. О новых гидрофобных участках в работе эстеразного центра холинэстераз.- Докл.АН СССР, 1973 , 211 » с. 1209 -1212,

120. Крашенюк А.И.»Михайлов С.С.»Розенгарт В.И.»Абдувахабов А.А.»Зупарова K.M.»Годовиков H.H.»Кабачник М.И. О новых гидрофобных участках в районе эстеразного центра холинэстераз.- Докл. АН СССР , 1973 , 211, № 5,с.1209-1212.

121. Gatterdam P.E., Casida I.E., Stoutamire D.M. Relation of structure to stability, antiesterase activity, and toxicity, with substituted vinyl phosphate insecticides.- J.Econ. Entomol., 1959, ¿2, p. 270-276.

122. Krzyzanowskj/M. Inhibition and reactivation of acetylcholinesterase by an inhibitor with an asymmetric. Patom. Arch. Immunol.- Terap. Doswiadozalnej.,1960,8 , p. 263-268.

123. Spencer E. J. The dissimilar selective toxicity of two vinyl phosphorotionate isomers (tiono Phosdrin).-Can. J. Biochem. and Physiol., 1961, 3£, p.1790-1792.

124. Boter H.L., Platenburg J.M. Organophosphorus compound part V. The resolution of O-alkylhydrogen methylphos-phothicates with ( + ) and ( ) - d\ -phenj^lethylami-ne.- Rec.Trav.Chim., 1967, 86 , p.399-406.

125. Fukuto T.R., Metcalf R.L. Insecticidal activity of the enantiomorphs of O-ethyl-S- |^2-(ethylthi on) ethyl. ethyl-phosphonothiolate.J.Econ. Entomol., 1959, 52 ,p.739-740.

126. Butler T.C. Anesthetic activet.i of the cis-trans isomers of trichloroethylidene glycerol.- J. Pharmacol., 1944, 61 , p. 72-77.

127. Fukuto T.R. , Hornig E.O., Met<7,alf R.L. , V/inton M.J. Configuration of the Q^-andJ)-Isomers of Methyl 3--(Dimethoxyphosphinyloxy)crotonate (Phosdrin ® ).-J. Org. Chem., 1961, 26 , p. 4620-4623.

128. Ludnena F.P., Euler L.V., Tullar B.F., Lands A.M. Effect of the optical isomers of some sympathomimetic amines on the quinea pig bronchioles.- Arch, intern, pharmacodynamic.,1957, 111, p. 392-399.

129. Takamiya K. Antitunior activities of Cu Chelates.-Natura, 1960, 185, p. 190-191.

130. Lesser 3. Meso-0,0'-succinylbis(^ -methylcholine).-J. Pharm. Pharmacol., 1960, 18 , p. 408-411.

131. Barlow R., Hamilton J. The stereospecificity of nicotine.- Brit. J. Pharmacol, 1965, p. 206-212.

132. Вайсберг M.C. Исследование тиофосфорорганических производных аминокислот.- Кандидатская диссертация, М.,1975.-- 201 с.

133. Ariens iiJ,J. Drugdesign. Possibilities and limitations.-Chimia., 1972, 26(7), p. 355-361.

134. Годовиков H.II. ,Беканов M.X. ,Берхамов M.X.,Кабачник М.И.yue

135. Кузамышев В.М.,Берхамов М.Х.»Годовиков Н.Н.»Жасминова В.Г., Кабачник М.И. Синтез О-этил-5 -(уз -алкилмеркаптоэтил)бен-зилтиофосфонатов и их йодглетилатов.- Изв. АН СССР, сер. хил., 1976, с. 1885-1887.

136. Годовиков H.H.,Беканов М.Х., Берхамов М.Х.»Кабачник М.И. Синтез О-алкил-s -(уЗ-метилмеркаптоэтил)фенилтиофосфона-тов, 0-алкил-0-(^-метилглеркаптоэтил)фенилфосфонатов и их йодметилатов.- ЖОХ, 1974, 44, с.1236-1238.

137. Годовиков H.H.»Кузамышев В.М.»Берхамов М.Х. ,Кабачник М.И. Синтез 0-этил-0-О#-алкилмеркаптоэтил)циклогексилфосфона-тов и их йодметилатов.- Изв. АН СССР, сер. хим., 1976,с. 1883-1885.

138. Агабекян P.C.,Берхамов М.Х.»Годовиков H.H.Дабачник М.И., Ольховая В.Г. Синтез и взаимодействие с ацетилхолинэстера-зой некоторых 5 -алкилдифенилтиофосфинатов.- Изв. АН СССР, сер.хим., 1974, с. 407-410.

139. Ольховая Г.Г.,Берхамов М.Х.,Агабекян P.C.,Годовиков H.H., Кабачник М.И.Синтез и взаимодействие с холинэстеразами 0-этил-5"-алкилфенилтиофосфонатов.- Изв. АН СССР, сер. хим., 1975, с. I837-1840.

140. Агабекян P.C. »Берхамов М.Х. »Годовиков H.H. »Кабачник М.И. »• Ольховая Г.Г.Синтез и антихолинэстеразные свойства 0-этил--5 -iß -алкилсульфоксиэтил)м9тилтиофосфонатов.- Изв. АН СССР, сер.хим., 1974, с. 1369-1372.

141. Агабекян P.C., Беканов М.Х.»Берхамов М.Х.»Годовиков H.H.,

142. Кабачник М.И. Взаимодействие 0-этил-0-(^3-алкилмеркаптоэтил)фенилфосфонатов и О-алкил-5 -(уз-метилмеркаптофенил)тио Jфенилдюсфонатов с холинэстеразами.- Изв. АН СССР, сер.хим.,1974, с. 874-877.

143. Беканов М.Х.,Бресткин А.П.,Берхамов М.Х.»Годовиков H.H., Кабачник М.И., Смирнов 0.И.»Ольховая Г.Г.Взаимодействие О-алкил-5 -(^-метижеркаптоэтил)фенилтиофосфонатов и их йодаетилатов с холинэстеразами.- Изв. АН СССР, сер,хим.,1975, с. 2573-2576.

144. Агабекян P.C.,Берхамов М.Х.,Годовиков H.H. Дабачник М.И., Ольховая Г.Г. Взаимодействие■ s-алкилдифенилтиофосфина-тов с бутирилхолинэстеразой.- Изв. АН СССР, сер.хим., 1974, с. 450-454.

145. Кузамышев В.М.»Берхамов М.Х.»Годовиков H.H.,Агабекян P.C., Киреева Е.Г.,Пегова В. К. Дабачник М.И. Взаимодействие 0-этил-S-iß -алкижеркаптоэтил)циклогексилтиофосфонатови их йодметилатов с холинэстеразами.- Изв. АН СССР, сер. хим., 1977, с. 1600-1605.

146. Годовиков H.H.,Агабекян P.C.,Кузамышев В.М.,Берхамов М.Х., Захарова Л.М., Пегова 3.К.Дабачник М.И. Взаимодействие О-этил-О-{ji -алкилмеркаптоэтил)циклогексилфосфонатов и их йодметилатов с холинэстеразами.- Изв. АН СССР, сер.хим., 1977, с. 1606-1609.

147. Пат. 2571989 (US). Neutral esters of tiophophoric acid./ Schräder G.- Опубл.& O.A., 1952,46,s.5066.

148. Пат. 856549 (Ger.). Neutral esters of thioph'osphoric acid./ Schräder G.-Опубл. ВС.А. ,1952, 49, 5786 а.

149. Пат. 818552 (Ger.). Neutral esters of thiolphosphoric acid./ Schräder G.- Опубл.в с.А.,1955, 47, 5959 i.195* Пат. 926488 (Ger.). Neutral esters of thiophosphoric acid./ Schräder G., Lorenz W.- Опубл.В O.A., 1956, 50, 2655 f.

150. Пат. 935432 (Ger.). 0,0-Dialkyl 0-2-alkylthioethyl thiophosphates./ Schräder G.- Опубл. В G.А.,1956, ¿0, 4448 g.

151. Пат. 961083 (Ger.). 0,O-Dialkylthiolphosphoric S-y3 -mercaptoethyl esters./ Schräder G.-Опубл.B O.A., 1957, ¿1» 15549 h.

152. Пат. 830508 (Ger.). Esters of thiophosphoric acid. / Schräder G.-Опубл. В O.A.,1955, 47, ':058 a.

153. Пат. 1014107 (Ger.). Phosphates./ Maier-Bode H.,

154. Kötz G.- Опубл. В O.A., 1957, 5i, P296 c.

155. Hoff mann F.iV., Moore Т.Е. Organic Phosphorus Compounds. 11. Isomeric Alkyl Phosphoro- and Phosphonothioates.-J. Amer. Chem. Soc., 1958, 80, p. 1150.

156. Кабачник М.И.,Голубева Е.И.,Пайкин В.М., Шабанова М.П., Гампер Н.М., Ефимова Л.Ф. Фосфорорганические инсектициды. jÖ-фторэтиловые эфиры кислот фосфора.- ЖОХ, 1959, 29 , №5, с. I671-1680.

157. Пат. 1109680 (Ger.). Verfahren Zur Herstellung Von

158. Alkylphophonsäure-O-alkyl-thiolestern./ Schräder G.-Опубл. Chem. Zbl., 1963, 22539.

159. Methoden der organischen Chemie. Organische Phosphor Verbindungen, Stuttgart, 1964, bandX11, 2, s.587-681. 111. Derivate Schwefelhaltigere Phosphor Sauren.

160. Пишимука П.С. О превращениях тио- и селенофосфорных эфиров.- ЖРФХО, 1912, 44, с. 1406-1554.

161. Schräder G. Die Entwicklung neuer Insekticide auf Grundlade von organisehen Flour- und Phosphorverbindungen.- Monographie, 62, 2 Weinheim, 1952.

162. Годовиков H.II. Химия и применение фосфорорганических соединений. (Выступления).- Труды I конференции, Изд. АН СССР, М., 1957, с. 212-215.

163. Henglein A., Schräder G. Isomerization phenomena ofthe Systemic insecticides Sistox,and Metasystox.-Z.Naturforsch,1955, 10b, p. 12-18.

164. Кабачник M.И.,Иоффе C.T.»Мастрюкова Т.А. К теории тауто-мерного равновесия раствора. Таутомерия диалкилтиофосфа-тов.- ЗКОХ, 1955, 25 , të 4, с. 684-693.

165. Пат. 2690451 (US). Sulfur-containing esters of phosphoric acid./ Gilbert E.E., Gongh J.Mc.- Опубл. В С.A.,1955, 42, 11683 с.

166. Morrison D.C. The Reaction of Sulfenyl Chlorides with Trialkyl phosphites.- J. Amer. Chem. Soc.,1955i77iP«181.

167. Петров К.А.»Близшок H.K., Савостенок В.А. Реакции суль-фенамидов с соединениями трехвалентного фосфора, ЖОХ, 1961, 31^. М, с. I36I-I366.

168. Петров К.А., Еяизнюк Н.К., Максуров И.Ю. Реакции кислых фосфитов, тиофосфитов, фосфонитов и диалкилфосфинокси-дов с дисульфидами,- НЮХ, 1961, 31, "I, с. 176-179.

169. Пат. 1136041 (Ger.). Thiophosphoric acid esters. / Schräder G.- Опубл. В O.A. ,1963,¿8, 11276 h.

170. Пат. 2713018 (US). 0,0-Dialkyl-S-l,2-bis(alkoxy-carb ori.il )e thy lj monothiophosphates and miticidal compositions therefrom./ Johnson G.A.- Опубл. В O.A., 1956, 50 , 2113 h.

171. Пат. 836349 (Ger.). Verfahren Zur Herstellung von neutralen Astern der Thiophophorsäure./ Schräder G.

172. Опубл,, в кн.: Г.Шрадер "Новые фосфорорганические инсектициды". Изд."Мир", М., 1970,473.

173. Пат. 949229 (Ger.). Verfahren Zur Herstellung von Sulfoxydgruppen haltigen Estern der Phosphor- und Tiophosphorsäuren./ Lorenz W., MUhlmann R.»Schräder G.

174. Пат. 947568 (Ger.). Verfahren Zur Herstellung von Sulfoxydgruppen enthaltenden iistern der Phosphor -und Thiophosphorsäuren./ Mühlmann R., Lorenz W., Schräder G.

175. Пат. 1009621 (Ger.). S-Sulfoxy-substituted alkyl 0,0-dialkyl phosphoromonotioates./ Lorenz W. , S&hrader G.- Опубл. в O.A.,1959, 53 , 21665 h.

176. Пат. 948241 (Ger.). Phosphoric or thiophosphoricesters containing sulfone radicals. / Mühlmann R., Schräder G.- Опубл. В G.А.,1956, ¿1 , 4426 f.

177. Mikolajczyk M., Zatorsky A. ^-Phosphorylsulphoxi-des. 1. Synthesis.- Synthesis, 1973, H>p. 669-674.

178. Пат. 964045 (Ger.). Verfahren Zur Herstellung von Thiophosphorosäure listern./ Lorenz V/., Mühlmann R., Schräder G.

179. Пат. 871448 (Ger.). Monothiophosphoric esters./Lorenz.-Опубл. В G.А.1954, 48 , 1414 i.

180. Kohlег Е.Р., Potter Н. The Properties of Unsaturated Sulfur Compounds. 1. Alpha,Beta Unsaturated Sulfones.

181. J. Amer. Chem. Soc., 193b, 57, p. 1316-1319.

182. Доконова Ю.В. Галоидсульфиды.- M., 1978.- 278 с.

183. Kirнег IV.П., Richter G.H. The effect of structure oforganic halides on their rate of reaction with inorganic halides. 111. The effect of the phenylthio,alpha-naphthoxyl and beta-naphthoxyl groups.- J. Amer. Chem. Soc., 1929, 51 » P- 3409-3413.

184. Whither T., Reid E. A sulfide Alcohol, or "butyl mer-capto-ethyl alcohol.- J. Amer. Chem. Soc., 1921, 43, p. 636-638.

185. Wenitzescu C., Scarlatescu N. Addition of hydrogen sulfide and mercaptans to alkylene oxydes.- Ber.,1935, 68 B, p. 587-591.

186. Bennet G., Heathcoat F., Mosses A. Influence of the sulfur atom on the reactivity of adjacent atoms or groups.- J. Chem. Soc., 1929, p. 2567-2572.

187. Rosen R., Reid E.1S. Sesqui-mustard gas or "bis- --chloro-ethyl ether of ethylene ditio-glycolJ. Amer. Chem. Soc., 1922, 44 , p. 634-639.

188. Годовиков Н.Н,Карданов H.A.Дабачник М.И. Синтез 0-(р-ал-кижеркаптоэтил)дифенилфосфинатов и их йодметилатов.-КОХ, 1972, 42 , с. 273-276.259.

189. Вейганд-Хильгетаг. Присоединение серы по кратншл связям.-В кн.: "Методы эксперимента в органической химии". Изд. "Химия", 1969, 558 с.

190. Дат, 2662917 (US). Organic thiophosphorus Compounds.

191. Jensen V/.L.- Опубл. в С.А. ,1954,48, 13711 g.

192. Kirner W., V/indus W. J> -chloroethylemethyl sulfide.-Org. Syntheses. X1V., 1934, p. 1Ö19.и

193. Dernuth R., Meyer V. Uber die Sulfurane.- Lieb. Ann., 1887, 240, p. 305-317.

194. Копылова Б.В. ,Яшкина JI.В. ,Карапетьяи Ш.А. ,Фрейдлина Р.Х. Радикальная реакция этиленсульфида с арилдиазонийхлори-дами в присутствии CuClg*- АН СССР, сер. хим.,1975, №5, с. II83-II85.

195. Мастрюкова Т.А.»Сахарова Т.Е.,Кабачник М.И.Тонкослойная хромотография тиофосфорорганических соединений.- Изв. АН СССР , сер. хим., 1963, М2, с. 22II-22I3.

196. Пат. 1072245 (Ger.). Verfahren Zur Herstellung vonphosphousäure 0 - alkyl - thiolestern./ Schräder G. И

197. Песни В.Г.Далецкий А.М. Соли диалкилтиофосфорных кислот.- ЖОХ, 1961, 31, т, с. 2508-2518.

198. Пат. 1116228 (Ger.). Thiophоsphonic acid ethylen-imides. / Schräder G.- Appl.Sept., 1960, 16 , 2 pp.

199. Гефтер E.JI. Улучшенные методы синтеза фенилдихлорфос-фина и дихлорангидрида фенилфосфиновой кислоты.- S0X, 1958, 28, с.1338-1340.

200. Michaelis А. Uber die Verbindungen der Elemente der Stickstoffgruppe mit den Radicalen der aromatischen Reihe.- Lieb. Ann., 1876,181, s. 265-363.

201. Евдаков В.П.»Алипова Е.И. Исследование в области амидов и ангидридов кислот фосфора. УП. Синтез и некоторые превращения ангидридов фосфиновых кислот.- ЖОХ, 1965, 35, 1Ю, с. 1584-1587.

202. Мастрюкова Т.А. Исследование в области таутометрии и двойственной реакционной способности тиофосфороргани-ческих соединений.- Докторская диссертайдя. М., 1967, 482 с. Приложение "Изыскание новых тиофосфороргани-ческих инсектицидов.- М., 1967.- 194 с.

203. Мастрюкова Т.А.,Кабачник М.И. Применение уравнения Гамметта с константами в химии фосфорорганических соединений.- Успехи химии, 1969, 38, № 10, с. 1751 -1782.

204. Fujita Т., Iv/asa J., Hausch С. A New Substituent Constant , Г , Derived from Partition Coeffcients.- J. Amer. Chem. Soc.,1964,86, p. 5175-5180.

205. Hansch C., Leo A., Unger S.H., Kim K.H., Nikitiani D., E. Lien. Aromatic substituent constants for structure-activity correlations.- J.Med.Chem.,1973,16(11), s.1207-1216.

206. Беканов M.X. ,Бресткин А. П., Берхамов M.X., Годовиков H. H., Кабачник М.И.»Смирнов О.И. Взаимодействие 0-этил- S-алкилмеркаптоэтил)фенилтиофосфонатов и их йодмети-' латов с холинэстеразами.- Изв. АН СССР, сер. хим., 1974, с. 2808-28П.

207. Абдувахабов А.А. Синтез и исследование холинэргически активных соединений на основе фосфорорганических производных алкалоидов и родственных веществ.- Докторская диссертация. Ташкент, 1978 .- 396 с.

208. Heath D., Venderkar М. Spontaneous reactions of 0,0-di-methyl S-ethylthioethyl phosphorothiolate„and related compounds in Wather and on storage,and their effectson the toxicological properties of the compounds.- J. Biochem., 1957, 67 , p. 187-201.

209. Мастрюкова Т.А., Агабекян Р.С.,Урюпин А.Б.,Кабачник М.И. Синтез и антихолинэстеразные свойства некоторых s-бенз-гидриловых эфиров монотиокислот фосфора,- Изв. АН СССР, сер.хим., 1977, с. 2317-2320.

210. Годовиков Н.Н.,Беканов М.Х.,Берхамов М.Х.,Кабачник М.И. Синтез О-этил-S -алкилмеркаптоэтил)фенилтиофосфона-тов, 0-этил-0-(^-алкилглеркаптоэтил)фенилфосфонатов и их йодметилатов.- SOX, 1974 ,44, с.34-37.

211. Кабачник М.И., Годовиков H.H.,Панкин Д,М.,Шабанова М.П., Гампер Н.М., Ефиглова Л.Ф. Фосфорорганические инсектициды, некоторые производные метилтиофосфиновой и метилди-тиофосфиновой кислот,- ЖОХ, 1958, вып. 6, с.1568-1573.

212. Кабачник М.И.,Мастрюкова Т.А.,Курочкин H.H. Эфиры алкил-тиофосфиновыхх и алкилтиофосфиновых кислот.- Изв. АН СССР, сер.хим., 1956, вып.2, с.193-198 .

213. Брик И.Л.»Яковлев В.А. Антихолинэстеразная активность продуктов окисления эфиров дитиофосфорной кислоты (М-74).-Биохимия, 1962, 27, вып.З, с. 481-486.