Синтез пентациклических стероидов с дополнительным карбоциклом в 15,16-положениях тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

Галахова, Татьяна Николаевна АВТОР
кандидата химических наук УЧЕНАЯ СТЕПЕНЬ
Москва МЕСТО ЗАЩИТЫ
1993 ГОД ЗАЩИТЫ
   
02.00.03 КОД ВАК РФ
Автореферат по химии на тему «Синтез пентациклических стероидов с дополнительным карбоциклом в 15,16-положениях»
 
Автореферат диссертации на тему "Синтез пентациклических стероидов с дополнительным карбоциклом в 15,16-положениях"

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ нш ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ШШ тот Н.Д.ЗЕЛШСК0Г0

На правах рукописи УДК 542.91:647.92

ГАЛАХОВА ТАТЬЯНА НИКОЛАЕВНА.

СИНТЕЗ ПЕНТАЦШШЧЕОКИХ СТЕРОИДОВ О ДОПСШШТЕДЬШМ КАРБОЦИКЛОМ В 15,16-ПОЛОЖИПШХ

02.0а.03-органич9ская химия

Автореферат диссертации на соискание ученой отепэнп кандидата химических наук

Москва - 1993

Работа выполнена в Института органической химии имени Н.Д.Зелинакого РАН

Научный руководитель: доктор химических наук, . проф. А.В.Камарницкнй доктор химических наук, вед.н.с. И.О.Левина Официальные оппоненты: член-корр. РАН И.В.Торгов

доктор химических наук, проф. О.И.Завьялов Ведущее предприятие: Центр химии лекарственных средств -ВНИХФИ им.О.Орджоникидзе

Защита диссертации соотоится " " __ 1993 года в

_часов на заседании специализированного совета HQ02.62.Q2

по присуждении степени кандидата химических наук в Институте органической хямии им.Н.Д.Зелинского РАН, 117913, Ыосква, Ленинский проспект, 47.

О диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ИОХ РАН. Автореферат разсолан " "__ 1993 года.

Учений секретарь специализированного совета, доктор химических наук

Н.Я.Григорьева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Хорошо известно, что стероиды осуществ-!яют свои гормональные функция чероз связывание со специфическими елковнми рецепторами. Эффективность такого связывания опродо-яется двумя составляющими - полярной, ответственной за образована водородных связей активных центров стероидной молекулы, и ядрофобной, зависящей от формы гидрофобной поверхности стероид-ого скелета и ее соответствия молекуле рецептора.

На основании многочислошшх исследований было показано, что идрофобное взаимодействие играет серьезную роль в стероид-ецепторном связывании. Дакч нобольшие модификации стероидного колота, не затрвгиввпцие полярных центров, могут, в зависимости т места и конфигурации гидрофобных (алкильннх) заместителей, уве-ичить, либо, наоборот, резко уменьшить возможность образования тероид-рецепторного комплекса и, следовательно, биологическое ействие. Поэтоцу остается актуальной задача структурной модаЗи-ации природных стероидных гормонов путем введения п их молекулу ополнительных гидрофобных (алкильннх) заместителей, что позволяет олучать соединения с повнтшнной гормональной активности) я узким пектром действия.

Одним из направлений такой модификации соединений ряда прег-ана является введение в молекулу прогестерона алкильннх и цякло-лкилышх заместителей в области 17-центра.

В лаборатория химии стероидов и терпвноидов ИиХ ям.Н.Д.Зелия-кого РАН создан новый клвсс высока активных прогестагенов - прег-а-П'-пентаранов (1йа,17а-циклоалканопрогестеронов), комплексное соледование которых показало, что введение в I6а,17а-голожепия элекулм прогестерона циклоалкильных заместителей приводят к рез-эму возрастанию связывания с рецептором прогестерона и высокой рогестагенной активности. Также было высказано предположение о аличш в примыкащей области рецептора достаточно большого "корана", где имэпт место гидрофобные взаимодействия.

В связи со сказанным, представлялось интересным исследовать этой точки врения эффект введения циклоалкильных заместителей в элвкулу прогестерона по другим центрам кольца Б.

Принимая во внимание необходимую для сохранения (Экологической активности р-конфигурацию 17-вцетильной боковой цепи, ясно, что такими должны быть аналоги прегна-1'-пентаранов, содержащие дополнительный карбоцикл в 15,16-полоиешях, где можно было о кидать образования как а-, твк и р-ориентированного кольца Б*.

Цель роботы. Данная работа является часты) систематических исследований по синтезу и изучении свойств Б'-пентаранов и посвящена получению андростано- и а страно-1)' -пентаранов, содержащих дополнительный карбоцикл в 15,16-полокениях, а также разработке методов синтеза 15р,1бр-мешпенпрогествронв - первого представителя прогна-Б* -пентаранов с ^-ориентированным дополнительным карбо-циклом Б', изучению его пространственного строения и биологической активности.

Научная новизна. Впервые осуществлен синтез и проведено систематическое исследование пространственного строения и биологического действия 1Бр,1бр-метиленпрогвстерона, не содержащего дополнительных полярных заместителей по сравнению с нативным гормоном.

Впервые получены и ^-циклоалканопентараны андростано-вого и встранового рядов с дополнительным циклом в 15,16-полоке-ниях.

Впервые осуществлена реакция Виттига под высоким давлением по стерически затрудненной 17-кврбонильной груше." . ч

Установлено, что пространственное влияние' 15р,16р-метиле-нового заместителя на конфорыационную подвижность Г/р-ацетильной боковой цепи резко отличается от таковой для 1бр-метильного заместителя.

Предложен новый подход к рассмотрению внергетшш вращения 17р-ацетильной боковой цепи прегнановых стероидов, связывающий возможность поворота 20-кврбонильной группы с,ее соотношением с ангулярной 18-мегильной группой.

практическая значимость. Изучение пространственного отроения а биологической активности 1бр,1бр-метиленпрогестврона позволяет рааширить предпосылки для выявления зависимости "структура- функ-та".

Полученные эстрано- и андростано-Б^-пенгараны могут представлять интерес как промежуточные продукты в синтезе циклогвксано-замещенных аналогов половик гормонов эстрогенов и вндрогенов.

Апробация работы и публикации. Отдельные части работы были тредстаплены на X Конференции по изопреноидам (ЧССР, 1Э83г) и на П Международной конференции по органическому синтезу (ИШАК) (Москва, 1986г). Основное содержание работы изложено в И публикациях.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, эбзора литературы, посвященного методам синтеза стероидов, конденсированных с циклопропановым фрагментом в положениях 15,16, обсуждения полученных результатов, экспериментальной части, выводов и зпискв литературы. Работа изложена на страницах машинописного текста, содержит 9 таблиц, 9 рисунков, список литературы включает [60 наименований.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ

Д15-17-0ксостероиды в реакциях 12+41 и Г2+Э)~цгаш>-присоединения

В качестве основного метода построения О'-пентаранов, содер-сащих дополнительный карбоцикл И' в 15,16-положениях стероидной юлекулы, было выбрано циклоприсоединение соответствующего углево-юродного фрагмента по активированной 15,16-двойной связи А15-■17-кетонов. С этой целью исследовалась реакционная способность щетата зр-гидроксиандроста-5,15-диен-17-она 1 и метилового эфира 5-дегидроэстрона 2 в реакциях 12+41 и 12+31-циклоприсоединения. [ро веде на срав!Штельное изучение конденсации бутв-1,3-диенов о зонами 1 и 2 как диенофилами (реакция Дильса-Альдера) с аналогич-[ыми реакциями, описанными в ряду А' б-20-оксопрегаэнов, а также :зучено присоединение диязометена к енону 1 и атилдиазоэцетата к нону 1 и к ацетату 16-дегидропрегненолон1 2К

1.1 Синтез исходных сопряжении кетонов - ацетата зр-гидрокси-вЦ1фоста-Б,15-диен-17-она X и метилового вфнра 15-дегидро^ встроив 2

Исходный сопряженный кетон 1 получен модифицированным методе Диервсси из прошшдвннодоступного ацетата дагидроэпнандростерша в шесть стадий по схеме I.

66

6ГЪ

Л>

Схема I

Вг iii.lv

КеО

МеО

Реагента » 1 - И0(СН2)г0Н, НО(ОЕ1;)3,р-ТвОН; 11 - О^ШВГд, ТГФ;

Ка1, ЫаН803; 111 - КОН-МеОН; 1у - г-ВиОК, ВШО, 40°; у - Н+, Н20; VI - Ас20, Ру

Аналогичным оОразом, исходя из метилового в^нра естрона 7 синтезирован метиловый вфир 16-дегидроэстрона 2 (схема I).

1.3. 15, Хо-Цямогепс-З'-аиоандрсстапы п 1Б,16-цш1Яогеко--З'-епоострош (О^-пептврвпы пндроотанового п оот-рансшого радон)

Возможность вовлечения енона 1 в реакция Дильса-Альдера была изучена в олучае бута-1,3-давна п 2,3-диметялбута-1,3-диэна (слона 2). Известно, что в ряду простых циклопент-2-еп-1-онов эта реакция протекает только в достаточно жестких условиях. Поэтому были использованы два варианта ускорения реакции Дильса-Лльдера : катализ кислотами Льетса и применение высокого дввления.

Охема 2

1

О

О

О

О : Н - И 9 : Н - Не

10 : Н - Н

11 : И - На

О

12 : Н - Н

13 : И - Не

14

Реагенты « 1 - СН2-(НЫе)-0(Ме)=ОН2, А1013, СН201г, 20°;

11 - ОН2=С(Н)-0(Н)=СН2, 14 кбар,СНг01г, 80 ? 111 - МеСШа- НеОН; Асг0-Ру

Конденсация енона 1 с 2,3-диметилбута-1,3-диенам в присутствии 0,1-1 моль-экв различных кислот Льшса (А1Вг3, ВР3• Et20.

Ме30ВР4 и Et30BP4) приводила к значительному разрушению исходного сопряженного кетона 1; по-видимому, это, в определенной степени, связано с известным фактом легкой деконьюгацш А15-17-кетонов в условиях катализа кислотами Льшса. Положительные результаты дало применение эквиыольного количества безв. А1013. В результате, с выходом 28% был выделен единственный 15р,1бр-циклоаддукт Ц.

Как и следовало отдать, форсирование данного бимолекулярного процесса высоким давлением сделало его препаративным. Так, при выдерживании исходных компонентов при 14 кбар и 80° (6ч) образуется с выходом ЧЪ% смесь диастереомерных циклоаддуктов 9 и Ц в соотношении 2:1 (схема 2). О менее реакционноспособным бута-1,3-диеном реакция протекает хуже, давая с выходом 50Ж смесь 8 и 10 с тем же соотношением изомеров.

Третичный центр О16 циклоаддуктов 8 и 9, расположенный в а-полокении к 17-кетогруппе, претерпевает катвлизируемую сильными основаниями апимеризациш. Действительно, при кипячении о MeONa в МеОН аддукты 8 и 9, после реацетшшрования, полностью превращаются в апимеры VZ, 13 (схема 2). В тех же условиях циклоадцукты 10, Ц не впимеризуются в соединения 14.

Аналогичная конденсация метилового эфира 15-дегидро8строна 2 • с 2,3-диметил0ута-1,3-диеном при 14 кбар и 80° (6ч) привела с общим выходом 50$ к смеси диастереомерных циклоаддуктов Ц и !§ в соотношении 6:1 (схема 3).

4

Схема 3

О

О

О

Реагенты s 1 - CH2-0(Me)-0(Me)-CHz, 14 кбар, 0Н2С12, 80°, бч

Попытки осуществить диеновую конденсацию 2 в условиях катали-зп кислотами Льиса (А1013, BF3-Et20 ) в данном случае оказались полностью безрезультатными, происходило лишь осмоление реакционной смеси.

Строоппо циклоаддуктов 8_- 13, 15, 16 доказано совокупностью дашшх физико-химического анализа. Так, стереохимия циклоаддуктов щщростанового ряда 8, 9, Ц и 13 предложена на основе спектров кругового дихроизма (КД), согласно которым (W* 297, Де +0,88 для 8, Адаах 297, Де +0,77 для 9, Ы 300, Де +4,61 для 11 п Лшаз 302, As +3,09 для 13) циклоаддуктн 8, 9 являются 16а,16а-изоморамя (циклогекс-З'-ен в отрицательном октанте, для 1- Хтах 297, Де +3,46), а циклоадцуга* П - 15р,1бр-изомвром {циклогекс-З'-еп в по-логштельном октанте). Для 13 можно допустить предпочтительной твист-кояформацию, т. есть транс-1Ба,1бр-сочлвнешга. Данные спектров ГОЛ5 согласуются со стереохимическими отнесениями.

Окончательное доказательство стереохимии углеводородных колец D' андростано- и встропо-В^-пентаранов (8 -1.3, [5 я 1.6) сделано но основании спектров ЯМР13С этих соединений, подробно обсуждаемых в диссертации. Для цикловдцуктов 9_ и 1.1 конфигурация подтверждена рентгеноструктурным анализом (PCA)t'

Таким образом, изучение диеновой конденсации двух стероидных 1Б-дэгидро-17-кетонов I и 2 как диенофилов о бута-1,3-диономи показало, что в обоих случаях реакция протекает нестереоизбиратель-но, реализуются оба возможных подхода диена к стероидной молекуле о образованием диастереомерннх 15а, 16а- и 1Бр,1бр-циклоаддуктов в отличив от строгой стереонаправленности аналогичной реакции в ряду 16-дегидро-20-оксост9роидов, где стареоспэцифнчно образуются только 16а,17а-циклоаддукты. Полученные результаты отличны и от известных данных о предпочтительном р-подходе реагента при присоединении нуклеофилов по Д,5-связи Д1В-17-оксостероидов.

Циклоприсоединение диенов к енонам 1 и 2 проходит с преимущественным образованием а,а-изомеров, однако о увеличением давления возрастает доля р,р-изомеров: при 10 кбар соотношение 9: Ц

ы 6:1, при 14 кбар оно изменяется до rJ 2:1.

*)

РОЛ выполнен в Институте кристаллографии им.А.В.Щубникова РАН

- а -

Данные по впикеризации свидетельствуй1 о том, что циклопри-соэдинение является кинетически контролируем; процессом, а 1Ба,1бр-впимэры 12, 13 - тершдшшмЕческима продуктами.

Полученные соединения могут представлять интерес как промежуточные продукты в синтезе циклогексадазамещенных аналогов половых гормонов ветрогонов и андрогенов.

1,3. 16,16-Ццкдодропанозндросташ (Б^-пентарони адроотенового

Вторым примером 15,16-циклоалкавоотероидов, синтезированных в настоящей работа, явились 16,16-нетилвнпроизводные 17-оксо-андростанов, образущиеся в результате [2+3]-циклоприсоадинешя дивзометана и эгалдиазоацетата (ЭДА) к енону 1.

Как и следовало ожидать, взаимодействие 1 с избытком эфирного раствора СН^ (схема 4) при 20° и нормальном давлении (14ч) при-

рода)

Схема 4

О

О

Ас

1

Ас

111

11

О

18 I й » Ас

19 I II - Н

Лагенты 1 1 - 0Н2На, 8ф.( 20°, 14 ч; и - ВР^О, ац.; 111 - Иаа03(0)1, НаН, ШБО; Асг0-Ру; IV - (1-РтО)3А1, 06БШ0

еоло о выходом 90S к продукту цтитоприсоодинония - А'-ПИрПЗОЛПНу 17, каталитическое расщоплонио которого вфиратом ВР3 в ацетоне дало соответствующий 15р,1бр-цнклопропап 1_8, полученный также вст-рзчннм синтезом - реакцией 1 с дшэтилсульфоисонийметилидом, генерированным In situ из Ms3S (0)1 и Hall в DM50, и последующим ацети-лировшшом промежуточного Зр-гидроксициклопропшш 19. Последний превратили далее по Оппенауэру в Дл-3-кетопродукт 20 (схема 4).

В отличие от дипзометано ЭДА не реагирует о 1 в обнчпых условиях (атмосферное давление и t до 150°). Поэтоглу ш предприняли попытки осуществить взаимодействие указанных реагентов в условиях высокого давления, где, по аналогии о реакцией Дильса-Альдэра ко-тона 1 с бута-1,3-даошзми, можно било ояидать обоих диастореомор-:шх 16,16-цшслоаддуктов. Креме того, нельзя было предугадать рэ-гионаправлэшгость данного процесса , а тпк-ю пгаслгчить возмокность образования изомерных Д1-п Дг-гафазолннон, как это наблюдалось п реакции ЭДА о ацетатом дэгидропрапюполона 21 (схема б), из которой первичный лабильный про пш С16а, 17а ]-&' -пирвзолин 22 п устойчивый прептИ6а,17а]-А- -пирпзолин 23 выделены с общим выходом 75% в соотиояэнии 3:2.

Схема^Б

Реагенты г 1 - Н2СНС02Е1;, 14 кбар, 20°

Тем не менее, в результате реакции 1 о 1,5-крвтннм избытком ЭДА в СН2С12 при 14 кбар и 20° (6ч) удалось получить с выходом 60% единственный продукт (З+ЗЗ-циклоприсоодонэния- А'-пиразолинкарбо-новый эфир 24 (схема 6). При этом показано, что А1-пирвзолин 24 не изоме^изуется в содержащий группировку =Н-НН Аг-пирвзолин в раз-

личных условиях (нагревание в органических растворителях, длительное выдерхивание, контакт о сорбентом), тогда как Д1-пиразо~" линкарбоновый вфир 22 при контакте с сорбентом в присутствии кислот и оснований претерпевает прототропный сдвиг двойной связи о образованием изомерного 23.

Схема 6

Реагенты I 1 - ^СНСО^, 14 кСар, 20°; 11 - 220°, -Лг

Строение соединений 22, 23 - 25 доказано совокупностью дагшых ИК-, ПМР- и 130 ЯМР-спектров.

р-Конфигурация дополнительных циклов 0' в 1_8 и 25 и, следовательно, пкразолиновых колец в 17 и 24 приписана на основании данных ПМР-спектров втих соединений о учетом известной для 16,16-метилец-17-оксоандростанов зависимости ХО 'н Ме-18 от ориентации цикпо-пропанового кольца. Значения в 18-СН3 0,96 м.д. для Ц и 1,02 м.д. для 25 попадают в диапазон, характерный для 1&р Дбр-матилашгроиа-водных ('Н 18-СН3 для а,а-изомэров - 1,12 -1,18 и для р,р-изомеров - 0,96 - 1,02 м.д.). Кроме того, пространственно сближенное расположение 18-СИ3-грушш и 02-Н в молекуле 25 показано методом ЯЗО.

Таким образом, 12+33-циклоприсоединение диазометана (I бар) а ЭД4 (14кбар) к Л1Ь-17-оксоандроотану 1 протекает регио- и стерео-шецифично из §-области стероидного скелета, что, вероятно, можно объяснить удаленностью Гв-И^ группы от реакционных центров в мо-

лекуяо 1, п о другой оторопи - ватруднэшюотьв а-подаода реагента вслэдотше I,2-взнпиодействиа 14а-Я и углороддого конца диполя.

II. Синтез и свойства 1Бр,1бр-цат5ишнпрогестеропа

Пути и возмоености синтеза 16,16-циклоалканопрогеотеровов Сила изучены на примера построения 17р-ацатильной боковой цепи исходя из 15р,1бр-метилен-17-оксоавдроатана 19, более доотупнсго, чем какой-либо из полученных изомеров 1Б,16-циклог0Коано-17-квто-иоа.

Интерес к синтезу 16,16-мэтиленпрогеотерона ишнно о р-кон-фзгурацивй дополнительного карбоцихла поддергивался тем, что хотя 1бр-метилзашщонпцй прогестерон полноотьв лишен гестаганной ективности, априорно нельзя было предполояить тога гв для прогестерона о 1Бр,1бр-ыетиленовыи ваиоотителем, существенно отличао-цимся по своей геометрии.

Выбор двухвтагаюго пути синтеза 1Бр,1бр-котиленпрогеатерона -цотилирование Д10-связи ко топа 1_ и паращивание 17р-ацатильной боковой цепи образующегося 1бр,1бр-нэтилеи-17-оксоандроствна 19 обусловлен извеотпой предпочтительностью реакций присоединения в кольце С в прогпановом ряду из а-областа отероидаой молекулы.

О

Стоящая в работе задача требовала получения соединений, на содержащих, по сравнению о прогестероном, полярных груш. Ее решение было найдено о испольвованием конденсации по Виттигу 1Бр,1бр--метилвн-17-окоовндроотана 1_9 о мэтоксинетшшнтрифонилХюофоршюм в качестве ключевой стадии для построения 17р-вцетилыюй боковой цепи в 1.9.Кетой 19 оказался мало ревкцнонноспособен и атой конден-оации в обычных условиях, вшод олефшов 26 , 27 (схема 7) ив пропитал 101. Ускорение {»акции Внттига а случае ватрудиешюго 17-ка-

Реагенты s 1 - MeOCH^Ft^Cl", t-BuQK, ТГФ, 5 кбар, 20°; ii - 7056 НС10Д, вф; Iii - MeMgl, вф-тл, 55°, 1,5ч; Iv -(i-Pro)3А1,С6Н1О0;тл; т - 3,4-дигидро-2Н-пиран,р-ТзОН бзл, 2ч; vi - MeMgl, еф тл 50°,1,5ч; vil -РДО, СНгС12, 48ч; Tili - 15% HCl, EtOH, Зч

+

тона 19 осуществлено взаимодействием последнего, !ieOGH2FPH3Gl и t-BuOK в ТГФ при 5 Köap, 20° (5ч), при этом с выходом 70% получена смесь стереоизомерних олефинов 26/27 (схема 7) в соотношении 97:3 (по данным ШР). Преобладающий Z-изомар 26 виделеи в индивидуальном состоянии, его строенио подтверждено спектральными данными.

Конфигурация связи C(I7)=C(2Q) в 26 доказана экспериментом по ЯЭО.

Гидролиз метоксиолефинов 26,27 70% НС104 в эфире привел к альдегиду 2В, строение которого также вытекает из дашшх физико-химического анализа.

Кипячением 28 с MeHgl h среде вфир-толуол при 50° получены с количественным выходом эпимэрныэ диолы 29,30 в соотношении 4:1, которые были выделены в индивидуальном состоянии. Их строение следует из данных ПМР спектров этих соединений.

Окисление спиртов 29,3Q РДО или PCO в СН2012 до желаемого дикетона 31 потребовало значительного времени и сопровождалось сильным осмолешем. Окисление 29,30 по Оппенауэру еквимольным количеством (1-Рго)3А1 приведо о выходом 30% к 15р,1бр-метиленпро-гестерону 31, при атом в качестве второго продукта реакции с выходом 15% выделен монокетон 32. Увеличение количества (1-Рго)3А1 приводило к осмоленив реакционной смеси.

Лучшие результаты достигнуты при последовательном окислении обеих гидроксильных групп в 29,30. Для втой цели зр-гидроксигруппу в 28 защитили, превратив в Зр-тетрагидропиранильное производное 33. Реакция Гриньяра последнего с MeMgl в описанных выше условиях привела к смеси 20-спиртов 34,35 Эту смесь окислили РДО в 20-оксопроизводное 36, сняли защиту Зр-гидроксигруппы и полученный зр-гидрокси-Д5-прегнан 37 окислили в конечный 31 (схема 7). Общий выход на этих превращениях (28 - 33 34,35 - 36 -» 37 - 31) составил 40% против 17%, достигнутых при проведении реакции по схиме (?§ - 29,30 - 31).

Таким образом, исходя из 1Бр,1бр-мвтилен-17-оксоандроствна 19 осуществлен семистадийный синтез D^-пентарана 31 с р-ориентиронан-ным дополнительным карбокальцам^необходимого в последующих биологических исследованиях.

III. Биологические свойства 1Бр,160-и2тяленпрогссторона.

Полярное взаимодействие прогестерона и ого производных о рецепторами обеспечивается образованием водородных связей протонодо-норных центров рецептора о обеими карбонильными группами стероидной молекулы, что требует возможности нахоздения их во взаимно-, фиксированном положении в пространстве.

Необходимое для стероид-рецепторного связывания (СРС) взвимо-. полоЕэние 3- и 20-поляршх центров может быть достигнуто в результате поворота наиболее конформационно подвижной 0 (20)-карбонильной группы вокруг ординарной связи 0(17)-С(20).

Естественно предположить, что стврические препятствия, зат-. рудняицие вращение 17р-ацетильной боковой цепи, в состав которой входит 20-карбоиил, должны сказаться на биологической активности • стероидного гормона.

Действительно, 1бр-мвтшшрогестерон 38, вращение боковой цепи : которого сильно заторможено 1бр-ыэтильным ¡заместителем, полностью лишен биологического действия.

Для синтезированного 1Бр,1бр-метиленпрогестерона 31 априорно нельзя было предположить того же, так как подробное исследование ; 31 методом рентгеноотруктурного анализа (РОА)* выявило существенные отличия в геометрии молекул 31 и 38.

По данным РОА 31 и 38 конформвция 0(20)-карбонильной группы, определяемая торсионными углами т(0(13)-0(17)-0(20)-0(20)) п : т[0(1б)-0(17)-0(20)-0(20)1 (для 31 - -62,5° и 173? для 38 - +19° и -108° соответственно), различна в этих молекулах.

Существенно отличагтоя ыевду собой и положения р-заместите-. лей при 0-16 в 31 и 38.

Трехчленный цикл 0(15)-0(16)-0(22)**^ в 31 является практически правильным трвугольшпкга, енход атома 0(22) из плоскости кольца Б [0(14)-0(15)-0(16)-0(17)1 составляет 1,143 А°, тогда .

' РСА выполнен в Институте фвзики 0.0.РАН канд.физ-мат.наук

А.Д.Васильевым.

**) 0(22)-дополнительный углеродный атом 1бр,1бр-метиленового

звена в 31 пли 1бр-метльной группы в 38.

как 16р-С113 группа в 38 занимает тотраэдрическоо положение о длиной связи С(16)-С(22) равной 1,532 Л°. Отклонение 0(22)-метиленового заместителя относительно соседней 17р-вцетилыюй цепи, характеризущееся торсионным углом т[С(22)-0(16)-0(17)-0(20)], в 31 гораздо значительнее такового для 1бр-СН3- группы в 38. Для 31 зтот угол равен 81,43°, а для 38 составляет всего 27,9? Расстояние 0(18)...0(20), влияющее на конформационную подвижность Соковой цепи и определяемое информацией кольца Б (13р-конверт для 31, и 13р,14а-полукресло для 38) и положением 20-карбонильной группы, в 31 больше и составляет 3,287 А° против 2,95 А° для 38.

Таким образом, данные РСА показывают, что степень стерических затруднений для вращения 17р-ацетильной боковой цепи в 15р,1бр--метиленпрогестероне 31 уменьшается в сравнении с 1бр-метилпро-гестароном 38.

Как было сказано, необходимость одновременного связывания 3-и 20-кислороднцх центров с рецептором требует их фиксированного положения в пространстве.

Для 0(20)-карбонильной группы его обычно рассматривают как определенную конформацию (поворот вокруг связи 0(17)-0(20)], характеризуемую точным значением торсионного угла т[0(16)-0(17)-—0(20)—0(20) ].

Однако, такой подход игнорирует пространственную связь между расположением полярных центров и геометрией гидрофобной поверхности стероида, также играющей серьезную роль в СРО.

На основании изучения соотношения структуры и функции созданного в нашей лаборатории нового класса высоко активных 16а,17а-циклоалканопрогестеронов (прегна-В'-пентаранов) было высказано предположение, что основным переменным параметром, характеризующим положение в пространстве 0(20)-карбонильной группы и зависящим от изменений, вносимых в молекулу размером дополнительного Б'-карбоцикла, является не столько торсионный угол т[0(16)-0(17)—0(20)-0(20)], сколько расстояние (1) между 0(20)-кислородным атомом и 18-метилыюй группой, принимаемой за центр гидрофобного связывания. При втом критерием возможности СРО должна служить способность 0(20)-карбонильной группы занять положение, столь же уделенное от центра 0(18) как в прогестероне.

Для подтверждения этого предположения было предпринято исследование ряда производных прогестерона, содержащих ^-алкильные заместители в ближайшем соседстве о 20-карбонильной группой.

Методом молекулярной механики рассчитанв ' конформационная внергия и знвчения (1) при последовательном изменении угла т для молекул прогестерона 39, 15р-мэтилпрогестерона £0, 15р,1бр-мети-ленпрогестеронв 31_ и 1бр-мвтилпрогестерона 38, в которых последовательно возрастает степень стерических затруднений для вращения 17р-ацетильной группы. Показано, что для всех четырех соединений существует энергетический min при (1)=3,0 А? в то время как min при (1)=ч3,5-3,б А° характерен для первых трех соединений и отсутствует у 38, полностью лишенного биологического действия. Отсюда можно было допустить, что 1Бр,1бр-метиленпрогестерон 31., имеющий одинаковую о прогестероном форму кривой потенциальной анергии (Е), должен обладать биологической нктивностью. Испытания на про-гествгенную активность 31 на крольчихах в тесте трансформации пролиферации эндометрия го Клвубергу-МакФейлу (таблица I) подтвердили эти предположения. Из сопоставления кривых зависимости Е от расстояния (1) для прогестерона 39 и 15р,1бр-метиленпрогестерона 31. вытекает, что min при (1)=3,5 А° у этих соединений энергетически одинаковы.

Таблица I

Гестагенная активность 15р,1бр-метиленпрогестерона 31. и прогестерона 39 в тесте Клауберга-МакФейла.

Соединение Интервал доз ED „„ 50 Относительная

(мг/кг) (мг/кг) активность

0,0125 - 4 0,26 I

31 0,004 - 0,4 0,05 5,2

Расчет проведен в Центре рентгенаструктур. иссл. ООТХ РАН к.х.н. О.В.Линдеманом

**)

Биологические испытания на животных выполнены в Институте акушерства и гинекологии РАМН, Санкт-Петербург.

Тем на менее относительная активность 31 в пять раз превосходит активность прогестерона. В этом случае, по-видимому, проявляется повышение гидрофобное составляющее в ОРО за счет 1Бр,1бр--метиленовой группы. Если это так, то гидрофобный "карман" про-гестеронового рецептора в районе цикла Б расположен не только ь а-области стероидной молекулы, как вто было найдено для 16а,17а--циклоалквнопрогеотеронов, во, в какой-то степени, и в р-области.

вывода

1. Впервые осуществлен синтез н выполнено систематическое исследование пространотввшюго строения в биологического действия 15р,1бр-метиленпрогестерана, не содержащего дополнительных по лярных замеотителеа по сравнении о натишыа гормоном.

2. Впервые получены и цшиюалквяопентарвш ввдроотанового и всграиового рядов о дополнительным циклом 0' в 15,16-поло-жениях.

3. Показано, что реакция Дальсв-Альдера бутв-1,3-даенов ж Д1&-17-оксостероидов в условиях высокого давления протекает нестэреоспвцифично о образованием даастереомерных 1Ба,16а- и 15р,1бр-циклогексенопентвранов, тогда как циклопрнсоеданвшш дивзометвна при нормальной давлении я втацдиазоацетата при 14 кбар к А,5-17-оксоандростану протекает регио- к стереосаеци-фичио ив р-области стероидной молекулы.

4. Осуществлена реакция Виттига под высоким давлением по стера-чески затрудненной 17-карбокильной груша.

Б. Установлено, что пространственное влияние 1бр,1бр-метиленового заместителя на кон&ормвционнуо подвижность 17р-ацэтильной боковой цепи ревко отличается от такового для 1бр-метилыюго ваместителя.

6. Предложен новый подход к рассмотрении энергетики вращения 17р--боковой цепа прегнановых стероидов, связывающий внаргшо, необходимую ддя поворота 20-кар0ошш>вой группы, а ее соотношением о ангулярной 18-метильной группой.

- IB -

7. Обнаружено, что 1Бр,1бр-метилэнпрогестерон, в отличие от 1бр--матилпрогестарона, обладает высокой прогестагенной активностью в тесте Клауберга-МакФейла, превышающей в 5 раз активность наганного гормона.

8. Высказано предположение о наличии гидрофобного "кармана" в прогестероновом рецепторе в положении, соответствующем 15,16-центрам прогестерона также и в р-области стероидной молекулы.

Основные результаты исследований представлены в следущих публикациях :

1. Камврницкий A.B., Гвлахова Т.Н., Левина И.О., Эльянов В.0. Циклоприсоединэние диазоуксусного эфира к ацетату 16-дегид-ропрегненолонв при высоком давлении // Изв.АН СССР. Сер.хим.-1977.-* I0.-0.2374-2375

2. Левина И.О., Нвмерницкий A.B., Мортикова Е.И., Галахова Т.Н. ШиткияВ.М., Эльянов B.C. 1,3-Диполярное присоединение нитроновых офиров и диавоацетата к 16-дегидро-20-кетостероидам под высоким давлением // Тез.докл. на V Советско-Индийском симпозиуме по химии природных соединений.- Ереван. 1978, С.74

3. Камерницкий A.B., Галахова Т.Н., Левина И.О., Павлов В.А., Эльянов B.C. Трвнсформ. стероиды. Сообщ. 126. Синтез и стереохимия изомерных вндроста-Б'-пентарвнов (15,16-циклогекс- 3'--ено-андроотанов) //Изв.АН СССР. Сер.-хим.-1982.-J» 9.-0.2147-2151

4. Лавина И.О., Галахова Т.Н., Нвмерницкий A.B. Синтев 15,16-цвклогексеноандроствнов и встранов // Тез.докл. на X Конференции то изопреноидам.-ЧССР.I983, С.

Б. Квмершщкий A.B., Галахова Т.Н., Левша И.О., Эльянов B.C., Хажэева З.И. Симонов В.И. Трвнсформ. стероиды. Сообщ. 136. Синтез изомерных 15,16-циклогексеноэстра-1,3,5(10)-триен-17-анов и изучение стереонаправленности диеновой конденсации в ряду стероидных 15-дегиДро-17-кетонов //Изв.АН СССР. Сер.хим.-1984.-* 3.-С.665-671 .

Б. Богданов B.C., Черепанова Е.Г., Гвлахова Т.Н., Левина И.О., Камерницкий A.B. Спектры ЯМР130 и стереоизомерюя в рядах вид-

ростана- и эстрано-й'-пентаранов // Изв.АН 000Р. Сэр.хим.-1984.-й 6.-0.1038-1045

7. Квмерницкий A.B., Галахова Т.Н., Левша И.О., Эльянов Б.О. Богданов B.C., Черепанова Б.Г. Траноформ. стероиды. СооОщ. 148. I,3-Циклоприсовдинвиие диазометана и диазоацетата к А3-17-кетоандростану при нормальном и высоком давлении // Изв.АН ССОР. Сер.хим.- 1985.-* 8.-0.1893-1898

8. Левина И.О., Куликова Л.Е., Галахова Т.Н., Эльянов Б.О. Органический синтез при высоких давлениях : реакции (2+41- и С2+31-цикпоприсоединения A1S-I7- и А16-20-катоатароидов // Тез.докл. на VI Международной конференции по органическому синтезу (ИШАК). - Москва. 1986, 0.80

9. Галахова Т.Н., Сташина Г.А., Жулин B.U., Квмерницкий A.B., Левина И.О. Индуцируемое высоким давлением матоксиметилениро-вадае по Виттигу 1Бр,1бр-метиленоаднрост-Б-ен-Зр-ол-17-она // Изв.АН ССОР. Сор.хим.— 1990.-Л 12.-0.2877-2878

10. Галахова Т.Н., Левша И.О.,Квмерницкий A.B., Богданов В.О. Синтез 15р,1бр-метиленопрогвстерона //Изв.РАН. Сер.хим.-1993.-* I.-0.203-207

11. Васильев А.Д., Галахова Т.Н., Левина И.О.,Квмерницкий A.B. Молекулярная и кристаллическая структура 1Бр,1бр-метиленпро-гвстерона //Кристаллография.- 1992.-* 6.-0.I478-I484