Синтез пентациклических стероидов с дополнительными карбоциклом в 15.16-положениях тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

Галахова, Татьяна Николаевна АВТОР
кандидата химических наук УЧЕНАЯ СТЕПЕНЬ
Москва МЕСТО ЗАЩИТЫ
1993 ГОД ЗАЩИТЫ
   
02.00.03 КОД ВАК РФ
Автореферат по химии на тему «Синтез пентациклических стероидов с дополнительными карбоциклом в 15.16-положениях»
 
Автореферат диссертации на тему "Синтез пентациклических стероидов с дополнительными карбоциклом в 15.16-положениях"

РГ 6 од

российская академия 1шас

'.1шотнтэт органической химии им9нп н.д.зелинского

На правая рукописи УДК 542.91:547.92

ГАЛАХОВА ТАТЬЯНА НИКОЛАЕВНА

СИНТЕЗ ПЕНТАЦИКЛИЧЕСКИХ СТЕРОИДОВ О ДОПОЛНИТЕЛЬНЫ?! КАРБОЦИЮЮМ В 15,16-ПОЛОШШЯХ

02.00.СЗ-органичасквя химия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химичэских наук

Москва - 1993

Работа выполнена в Института органичаокой химии имени Н.Д.Зелинского РАН

Научный руководитель: доктор химических наук, проф. А.В.Камерницкий доктор химических наук, Ебд.н.о. И.О.Левша Официальные оппоненты: член-корр. РАН И.В.Торгов

доктор химических наук, проф. О.И.Завьялов Ведущее предприятие: Центр химии лекарственных средств -ВНИХФИ им.0.Орджоникидзе

Защита дассертвда состоится " года в

^^ часов на ваоедании специализированного совета К002.62.02 по приоувдевнв степанк кандидата химнчппкщг неук в Институте органической химии им.Н.Д.Зелинского РАН, 117913,"Москва, Ленинский проспект, 47.

О диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ИОХ РАН. Автореферат разе слан ¿Л^-Р 1993 года.

Ученый секретарь специализированного совета, доктор химических наук

Н.Я.Григорьева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работа. Хорошо известно, что стероиды осуществ-шют свои гормональные функции через связывание со специфнескими 10лковнш рецепторами. Эффективность твкого связывания опредэ-1Я9ТСЯ двумя составляющими - полярной, ответственной за образова-тв водородных связей активных центров стероидной молекулы, и вдрофобной, зависящей от формы гидрофобной поверхности стероид-юг о скелета и ее соответствия молекуле рецептора.

На основании многочисленных исследований было показано, что идрофобное взаимодействие играет серьезную роль в стероцд-юцепторном связывании. Даже небольшие модификации стероидного желета, не затрагивающие полярных центров, могут, в зависимости ;т моста и конфигурации гидрофобных (влкильннх) заместителей, уве-шчить, либо, наоборот, резко уменьшить возможность образования яероид-рецепторного комплекса и, следовательно, биологическое действие. Поэтому остается актуальной задача структурной модиГи-сации природных стероидных гормонов путем введения в их молекулу (ополнительных гидрофобных (влкильннх) заместителей, что позволяет юлучать соединения с повышенной гормональной активностью и узким яектром действия.

Одним из направлений такой модификации соединений ряда прег-»ана является введение в молекулу прогестерона алкильвнх и цикло-шсилыпи. заместителей в области 17-центра.

В лаборатории химии стероидов и терпеноидов ИиХ им.Н.Д.Зелин-жого РАН создан новый класс вксоковктившх прогествгенов - прег-га-В'-пентарапов (1&х,17а-циклоалкянопгрогеотерояов), комплексное гсследование которых показало, что введение в 16а,17а-полотония юлекулн прогестерона циклоолкнльных заместителей приводит к рез-;ому возрастании связывания с рецептором прогестерона и высокой грогествгенной активности. Также было высказано предположение о галичии в примыкащей области рецептора достаточно большого "кар-тна", где имеют место гидрофобные взаимодействия.

В связи со сказанным, представлялось интересным исследовать ! этой точки зрения вффект введения циклоалкилышх заместителей В галекулу прогестерона по другим центрам кольца П.

Принимая во внимание необходимую для сохранения биологической активности р-конЗигурацшо 17-ацетильной Соковой цепи, ясно, что такими долхны бить аналоги прегна-В'-пентаранаа, содержащие дополнительный карОоцикл в 15,1С-полоиениях, где можно было окидать образования как а-, так и ^-ориентированного кольца В*.

Цель работы. Данная работа является чвстью систематических исследований по синтезу и изучении свойств Б'-пэнтаранов и посвящена получению шадростано- и астрано-1)'-пентаранов, содержащих дополнительный карОоцикл в 15,16-положениях, а также разработке методов синтеза 15р,1бр-мвтшюш1рагестарона - первого представителя прегна-Б' -пентаранов с р~ориентированным дополнительным карбо-циклом В', изучению его пространственного строения и биологической активности.

Научная новизна. Впервые осуществлен синтез и проведено систематическое исследование пространственного строения и биологического действия 1&р,1бр-меткленпрог8Стерона, не содержащего дополнительных полярных заместителей по сравнению с нативным гордоном.

Впервые получены и Б^-циклоалканодантараны андростано-вого и аотранового рядов с дополнительным циклом в 15,16-положе-ниях.

Впервые осуществлена реакция Виттига под высоким давлением по стеричвски затрудненной 17-карбонильной группе.

Установлено, что пространственное влияние 15р,1бр-метиле-нового заместителя на конформационную подвижность 17р-ацетильвой боковой цепи резко отличается от таковой для 1бр-метильного заместителя.

Предложен новый подход к рассмотрению, энергетики вращения 17р-ацетильной боковой цепи прегнановых стероидов, связыввщий возможность поворота 20-квр0онилыюй группы с ее соотношением с ангулярной 18-ивтильной группой.

Практическая значимость. Изучение пространственного строения я биологической активности 15р,1бр-метил9нпрогвст0ронв позволяет расширить предпосылки для выявления зависимости "структура- функции*.

Полученные эстрано- и андростано-О^-понтаранн могут представлять интерес как промежуточные продукты в синтезе циклогексано-замещенных аналогов половых гормонов эстрогенов и андрогенов.

Апробация рвботн и публикации. Отдельные части работа были трвдстовлены на X Конференции по изопреноидам (ЧССР, 1983г) и на 71 Мэвдународной конференции по органическому синтезу (ИШАК) (Москва, 1986г). Основное содержание работы изложено в 11 публикациях.

Объеы и структура работа. Диссертация состоит из введения, эбзора литературы, посвященного методам синтеза стероидов, конденсированных с циклопропановым фрагментом в положениях 15,16, обсуждения полученных результатов, экспериментальной части, выводов и зшска литературы. Работа изложена на страницах машинописного текста, содержит 9 таблиц, 9 рисунков, список литературы включает [60 наименований.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ

[. А15-17-0ксостероидн в реакциях (2+41 и Г2+3]-цихло-присоединения

В качестве основного метода построения Б'-пентаранов, содер-кащих дополнительный карбоцихл Б' в 15,16-положениях стероидной лолекулы, было выбрано циклоприсоединоние соответствутоэго углвво-цородного фрагмента по активированной 15,16-двойной связи А15--17-кетонов. С этой целью исследовалась реакционная способность зцетата зр-гидроксиандроста-5,15-диен-17-она 1 и метилового эфира [5-дегидроэстрона 2 в реакциях (2+4) и [2+3)-цтслоприсоединения. 1роведено сравнительное изучение конденсации бутп-1,3-диенов с знонвми 1 и 2 как диенофлломи (реакция Дильса-Альдера) с аналогич-тами реакциями, описанными в ряду А,б-20-оксопрегнанов, а также изучено присоединение даазомегана к енону 1 и эгидцяазоацетата к шояу 1 и к ацетату 16-дегидропрегненолон .1 21..

1.1 Синтез исходил сонряженшх кетовое - ацетата Зр-гидрокса-ацдроств-б, 1Б-днеи~17-онй 1 н метилового &фыра 15-дегидро-

8СТрОЦЛ 2

Исходный сопряженный кетон 1 получен модифицированным методе Джерасси из промшаленнодоступного вцетвта двгидроэпивндростерона в шесть стадий по схеме I.

Схема I

п>

11 Вг 111,IV

з Г~Ь о

Реагенты * 1 - Н0(СН2)20Н, КО(ОИ)3,р-ТвОН; 11 - 05И&ШШг3, ТГ®;

На1, ЫаИ603; 111 - КОН-МеОН; 1у - г-ВиОК, ШБО, 40°; V - Н*, Н20; VI - АогО, Ру

Аналогичным оОразом, исходя из метилового вфмра встрона 7 синтезирован метиловый вфир 1Б-дегидроэстрона 2 (мема I).

- Б -

1.3. 10,16-Цяклогекгз-З'-опоппдростапы п 1Б,1&-цшиюгеко--З'-екозотряш (»¿-пентарада ппдроотопового п оот-ранового рядов)

Возможность вовлэчения енона 1 в раакция Дильсо-Альдэра была изучена в олучав бута-1,3-диена и 2,З-диметилбутп-1,3-диена (схема 2). изевстно, что в ряду простых циклоп0нт-2-0н-1-онов эта

реакция протекаэт только а доататочно ввсткнх условиях. Поэтому были использованы два варианта ускорения реакции Дильса-Альдэро : катализ кислота',тп Льтаса и применение высокого давления.

1

Схема 2

О

О

0

8 : И - Н

9 : Н " Ив

10 : Н - Н

11 : И - Не

о

О

I

ш

12 : н - н

13 : Н - Не

14

Реагенты I 1 - СНг-С(Ые)-С(Мэ)=СН2, А1013, СНг012, 20°;

11 - 0Нг=0(Н)-0(Н)=СН2, 14 квар,СН201г, ВО ? 111 - МеОНа- МеОВ; Асг0-Ру

- е -

Конденсация енона 1 с 2,3-диметилбута-1,3-диенам в присутствии 0,1-1 моль-вкв различных кислот Льшса (А1Вг3, вгз- Е^О, + - + -

Не30ВРд и Е130ВР4) приводила к значительному разрушению исходного сопряженного катана 1; по-видимому, это, в определенной степэ-ни, связано с известным фактом легкой деконьшгации Д15-17-катоноа в условиях катализа кислотами Льшса. Положительные результаты дало применение вквимольного количества безв. А1013. В результате, с выходом 28% был выделан единственный 15р,1бр-циклоадцукт Ц.

Как и следовало ожидать, форсирование данного бимолекулярного процесса высоким давлением сделало его препаративным. Так, при выдерживании исходных компонентов при 14 кбар и 80° (6ч) образуется с выходом 75Ж смесь диастереомерных циклоаддуктов 9 и Ц в соотношении 2:1 (схема 2). О менее рэакционноспособным бута-1,3-даеном реакция протекает хуже, давая с выходом 50Ж смесь 8 и Ш о тем же соотношением изомеров.

Третичный центр О16 циклоаддуктов 8 и 9, расположенный в а-полокешш к 17-кетогрупда, претерпевает катализируемую сильными основаниями вгшыеризацию. Действительно, при кипячении о ЫеОНа в МеОН адцукты а и 9, после реацетилирования, полностью превращаются в впимеры 12, 1_3 (схема 2). В тех же условиях цинлоаддукты 10, 1.1 не вшшеризувтся в соединения 14.

Аналогичная конденсация метилового ефира 15-дегидроэстрона 2 • о 2,3-диметилбута-1,3-диеном при 14 кбар и 80° (6ч) привела с общим выходом 50% к смеси дяастереомарных циклоаддуктов 1§ и Ш в соотношении 6:1 (схема 3).

Схема 3

15 16

Реагенты : 1 - СНг«0(Ые)-0(Ыа)»СНг, 14 кбвр. СН201£, 80°, 6ч

Попытки осуществить диеновую кояденоацип 2 п условиях катализа кислотами Льиоа (А1013, ВГ3»Е1;20 ) в данном случае оказалиоь полностью безрезультатными, происходило лишь осмоленив роакционной ом си.

Строение циклоадцуктов 8_- 13, 15, 1§ доказано совокупностьв дшшых физтсо-хтлгавского анализа. Так, стереохимия циклоадцуктов андростанового ряда 8, 9, Ц и 13 прэдлокана на основе спектров кругового дихроизма (КД), согласно которым (Алиис 297, Ле +0,83 для 8, 297, Де 40,77 ДЛЯ 9, Хлих 300, Де +4,Б1 ДЛЯ 11 И Ыаз 302, Ае +3,09 для 1_3) щпслоп/иукта 3, 9 являются 15а, 16а-изомераки (ЦИКЛОГВКС-З'-ОН В отрицательном октшгго, ДЛЯ 1- Хтах 297, Ас +3,46), а цгаслоодцукт II - 15р,1бр-изошром (циклогекс-З'-он в по-лопитольном октанте). Для 13 могло допустить предпочтительной твист-конфорлацию, т. есть транс-1Ба, 1бр-сочлэнение. Данные спектров ШР согласуются со ствреохимичвсккми отнесениями.

Окончательное доказательство стереохимии утловодородных колец С' андростаяо- и эстраноЧ^-пэятяранов (8 -13, 15 п 1§) сделано на основании спектров ЯМР130 этих соединений, подробно обсувдавмых п диссертации. Для циклоадцуктов 9_ и Ц конфигурация подтверждена рентгеноструктурным анализом (РСЛ)^'

Таким образом, изучение диеновой конденсации двух стероидных

15-дэгидро-17-кетонов 1 и 2 как диенофилов с бута-1,3-диенани ш-казало, что в обоих случаях реакция протекает нестереоизбиратель-яо, реализуются оба возможных подхода дивна к стероидной молекуле с образованием диастереомерннх 15а, 16а- и 1Бр,1бр-цикловдцуктов в отличие от строгой стереонаправленности аналогичной реакции в ряду

16-дегидро-20-оксостэроидов, где стареосггецгфгаго образуются только 16а,17а-циклоаддукти. Полученные результата отличны и от известных данных о предпочтительном р-подходе реагента при присоединении нуклеофилов по А,5-связи Д18-17-оксоствроидов.

Циклоприсоедиввние диенов к енонвн 1 и 2 проходит с преимущественным образованием а,а-изомеров, однако о увеличением давления возрастает доля р,р-изомеров: при 10 кбвр соотношение 9: Ц гу 6:1, при 14 кбвр оно изменяется до 3:1. А)

РОЛ выполнен в Институте кристаллографии им.А.В.Шубникова РАН

- в -

Данные по вшшризащш свидетельствуют о том, что цшиюпрц-совданениэ является кинетически коатролируекшм процоссои, а 1Ба,1бр-вщшри 12, 13 - тврюдаиаиЕчаскши продуктами.

Полученные соединения шгут предогаалять интерес как проаепу-точшэ продукты в синтезе цшиюгексвнозшещешшх аналогов подовых гормонов встрогенов и ендрогенов.

1,3. 10,16-Цшишлроящюандросташ (О'-псвтсроны вдроотанового

Вторым примером 15,16-цшиюалквностароидов, синтоаироввшшх в настоящей работа, явились 1Б,16-матиленпроцзводныв 17-оксо-аидроатаиов, образующиеся а результате [2+3]-циклоприсо8данешш даазоштава и втилдаазоацатата (ЗДА) к енону 1-

Как и следовало ожидать, взаимодействие 1. с избытком эфирного раотвора С1^К2 (охема 4) при 20° и нораальногл давлении (14ч) при-

рода)

Охема 4

О

О

Ас

1

111

11

О

\

О

IV

1@ I Л « Ас 19 » й - Н

Литоты « 1 - 0Н2Н2, 0ф., 20°, 14 ч; 11 - ВР^Еу), вц.; 111 - Ма303(0)1, НаН, ШБО; АсгО-Ру; 1т - (1-Рго>3а. о4ншо

поло о выходом 903 к продукту цшслопрксоедшания - А'-шфвзолииу 17, каталитичоскоо расцоплотнэ которого сфиратом ВР3 в ацетоне дало соответствующий 15р,1бр-цпклопропан 18, полученный такзга встречным синтезом - реакцией 1_ с димэпшзульфжсонийштштдом, генерированным In situ из !ie3S(0)I и КаН в D'EO, и послодущим оцоте-лярованием промежуточного Зр-гидроксицшслопропана 19. Последний прэвратили далоо по Опшнауэру в Д*-3-кетопродукт НО (схема 4).

В отлична от диазомэтано ЭДА не реагирует о 1 в обычных условиях (атмосферное давление и t до 150°). Поэтому ш предприняли попытки осуществить взанмодейотвиэ указанных роогептов в условиях высокого давлания, где, по аналогии о реакцией Дилъса-Альдерэ потопа 1 с бута-1,3-дионами, моию било огшдать обоих диастврвомер-ifflx 15,16-циклоадцуктоп. Кроме того, нельзя был о предугадать рз-гиопаправленность данного процесса , а такта исключить воямокность образования изоморннх д1-п дг-лиразолщгав, как это пвблвдалось d реакции ЭДА с ацетатом дегадропрэгаеполона 21 (схема Б), из которой первичный лабильный препшМба, 17а]-А1-пиразолип 22 п устойчивый прегнаИ6а,17аЗ-Д- -пирвзолии 23 выделены о общим выходом 753 в соотношении 3:2.

Схема^Б

Реагенты ! 1 - N..сиса^ЕЪ, 14 кбвр, 20°

Тем не мэнвв, в результате реакции 1 о I,5-кратным избытком ЭДА в СН2С1г при 14 кбар и 20° (6ч) удалось получить о выходом 603 единственный продукт 12+31-циклоприсоедо™ния- Л1-пиразолинкарбо-новий эфир 24 (схема 6). При этом показано, что Л1-пирвэолин 24 не изомэризуется в содержащий группировку Д2-пиразолин в раз-

личных, условиях (нагревание в органических растворителях, длительное выдерхившше, контакт о сорбентам), тогда как Д1-пиразо-линкарбодавый вфир 22 при контакта с сорбентом в присутствии кислот и оснований претерпевает прототрошшй сдвиг двойной связи с образованием изомерного 23.

Схема_6

Строение соединений 22, 23 - 25 доказано совокупностью данных ЙК-, ПМР- и 130 ЯМР-спектров.

р-Конфигурация дополнительных циклов Б* в 18 и 25 и, следовательно, пиразолиновых колец а 17 и 24 приписана на основании данных ПМР-спектров в тих соединен о учетом известной для 16,16-мвтилен-17-оксовндростанов зависимости ХО 1Н Ме-18 от ориентации цикло-пропанового кольца. Значения О 1В-СН3 0,96 м.д. для 17 и 1,02 м.д. для 25 попадают в диапазон, характерный для 1Бр,1бр-метиленпроиа-водных (*Н 1В-0Н3 для а,а-изомеров - 1,12 -1,1В и для р,р-изомвров - 0,96 - 1,02 м.д.)- Кроме того, пространственно сближенное расположение 18-СНз-грушш и С2-Н в молекуле 25 показано методом ЯЭО.

Таким образом, (2+3)-циклоприсоединенио диазометана (I бар) и ЗДА (14кбар) к Д,ь-17-оксоандростану 1 протеквет регио- и стерео-шецифично из р-области стероидного скелета, что, вероятно, можно объяснить удаленностью 18-СНд группы от реакционных центров в мо-

лекуло 1, и о другой стороны - аатрудпошгастьа а-подаада реагента вследствие 1,2-пашпюдействкй 1-йа-Н н углеродного конца диполя.

II. Спитаз п споЗстаа 1бр, 1бр-!1етало1шрогасторона

Пути и возиоенооти синтеза 1Б,16-циклоалканопрогеотеровов была изучены на примера построения 17р-ацетильной боковой цепи исходя из 1Бр,1бр~кагллен-17-оксоандростана 19, более доступного, чем какой-либо из полученных изомеров 1Б,1&-цшслогакоапо-17-като-нов.

Интерес к синтезу 16,16-мэтленпрогостерона именно о р-кон-фигурацией дополнительного карбоцикла поддерживался теи, что хотя 1бр-метилавмещеншй прогестерон полаоотьв лишен геотагониой ективности, априорно пэльая было предположить тога гэ для прогестерона о 1Бр,1бр-иетиленопым аашотителем, существенно отличающимся по своей геоиэтрии.

Выбор двухотапного пути синтеза 1Бр,1бр-иагап9Шфогаотврона -метилирование Д,5-связи кетопа а наращивание 17р-ацэтильной боковой цепи образующегося 1Бр,1бр-цатилен-17-оксовидроотана 19 обусловлен известной прадрачтательиооты! реакций присоединения в кольце В в првгнановом ряду из а-области стероидной колокули.

содергвщих, по сравнешш о прогестероном, полярных групп. Ее решение было найдено о исшльвоааниеи конденсации по Виттигу 1Бр,1бр--штилап-17-оксоандроотаяа 1_9 о иатоксикотилонтрнфенилфоофорапои в качестве шшчевой стадии для построения 17р-ацетилыюй боковой цепи в 19.Когон 19 оказался мало реакциошюспособен о втой кондан-оации в обычных условиях, выход олефипов 26, 27 (схеиа 7) иа превышал 101. Ускорение раакции Вцттига в случае затрудненного 17-не-

стоящая в работе задача требовала получения соединений, на

çirm9_7

Реагенты s i - MeOCH^Pl^Cl", t-BuOK, ТГФ, 5 кбар, 20°; il - 70% НС10Л, вф; Iii - HeMgl, вф-тл, 55°, 1,5ч; lv -{1-Рго)3А1,СбН1О0;тл; y - 3,4-дигидро-2Н-пиран,р-ТзОН бзл, 2ч; vi - MeMgl, вф тл 50°,1,5ч; vil -РДО, СН2С12, 48ч; 7111 - 1556 HCl, EtOH, Зч

тона 19 осуществлено взаимодействием последнего, Ue0CH2PPli301 и t-BuOK в ТГФ при 5 кбар, 20° (5ч), при атом с выходом 7(3% получена смесь стераоизомаршх олофинов 26/27 (схема 7) в соотношении 97:3 (по данным HMF). Преобладающий Z-изомер 26 выделен в индивидуальном состоянии, его crpoemie подтверждено спектральными данными.

Конфигурация связи 0(17)=С(20) в 26 доказана экспериментом по ЯЭО.

Гидролиз кетоксиолефинов 26,27 70% НС104 в эфире привел к альдегиду 28, строение которого также вытекает из данных физико-химического анализа.

Кипячением 28 с HeMgl в среде вфир-толуол при 60° получены с количественным выходом зпимерные диолы 29,30 в соотношении 4:1, которые были выделены в индивидуальном состоянии. Их строение следует из данных ГШР спектров этих соединений.

Окисление спиртов 29,30 РДС или PCO в СН2012 до желаемого дикетоне 31 потребовало значительного времени и сопровождалась сильным осмоленном. Окисление 29,30 по Оппенауару эквимольным количеством (1-Рго)3М привело о выходом 30% к 1Бр,1бр-метиленпро-гестерону 31, при атом в качестве второго продукта реакции с выходом 1Ь% выделен монокетон 32. Увеличение количества (1-Рго)3А1 приводило к осмолению реакционной смеси.

Лучшие результаты достигнуты при последовательном окислении обеих гидроксильных групп в 29,30. Для этой цели зр-гидроксигруппу в 28 защитили, превратив в Зр-тетрагидропиранильное производное 33. Реакция Гриньяра последнего с MeMgl в описанных выше условиях привела к смеси 20-спиртав 34,35 Эту смесь окислили РДО в 20-оксопроизводное 36, сняли аащиту Зр-гидроксигруппы и полученный Зр-гидрокси-А5-прегнвн 37 окислили в конечный 31 (схема 7). Общий выход на этих превращениях (20 - 33 - 34,35 - 36 -« 37 - 31) составил 40% против 17%, достигнутых при проведении реакции по схеме (28 - 29,30 - 31).

Таким образом, исходя из 1Бр,1бр-м8тилен-17-оксоандростана 19 осуществлен свмистадайний синтез D^-пентврвна 31 о р-ориентированным дополнительным карбокольцом,необходимого в последующих биологических исследованиях.

III. Бполэгсческка свойства I5ß Дбр-иатилсппрогестсрона.

Полярное взаимодействие прогестерона и его производных с рецепторами обеспечивается образованием водородных связей протонодо-норных центров рецептора о обеими карбонильными группами стероидной молекулы, что требует возможности нахождения их во взаимно-, фиксированном полокешш в пространстве.

Необходимое для стеронд-рецепторного связывания (ОРС) взашо-пологение 3- п 20-шлярных центров могет быть достигнуто в результате поворота наиболее конфорлационно подвитой 0(20)-карбонильной группы вокруг ординарной связи 0(17)-О(20).

Естественно предполоють, что стерические препятствия, зат-руднящие вращение 17р-оцотильной боковой цепи, в состав которой входит 20-карбопкл, додали сказаться на биологической активности • стероидного гормона.

Действительно, 1бр-метилпрогестерон 38, вращение боковой цеш : которого сильно заторможено 1бр-метальшм заместителем, полностьэ липен биологического действия.

Для синтезированного 1Бр,1Бр-мэгиленпрогестерона 31 априорно нельзя было предположить того же, так как подробное исследование ; 31 методом рентгеноструктурного анализа (РОА)* выявило существенные отличия в геометрии молекул §1 и 38.

По данным PGA 31 и 38 информация 0(20)-карбонильной группы, определяемая торсионными углами 1CO(13)-0(17)-0(20)-0(20)1 н т[0 (16)—0 (17)—0(20)—0(20) Э (для 31, - -62,5° и 173? для 38 - +19° и -108° соответственно), различна в втих молекулах.

Существенно отличатся мввду собой п положения р-занестпте-; лей при 0-16 в 31 и 38.

Трехчленный цикл 0(35)-0(16)-С(22)*** в 31 является практически правильным треугольником, выход атома 0(22) из плоскооти кольца D Ю(14)-0(15)-0(1б)-0(17)1 составляет 1,143 А°, тогда ,

*' РСА выполнен в Институте физики 0.0.РАН кенд.физ-мат.наук

А.Д.Васильевым.

**) 0(22)-дополнительный углеродный атом 1Бр,1бр-метиленового

звена в 31 или 1бр-метльной группы в 38.

как 1бр-СН3 груша в 38 занимает тетраэдрическоэ положение о длиной связи С(16)-С(22) равной 1,532 Отклонение 0(22)-метяленового заместителя относительно соседней 17р-вцетильной цепи, характеризующееся торсионным углом 110(22)-0(16)-0(17)-0(20)1, в 31. гораздо значительнее такового для 1бр-СН3- группы в 38. Для 31 этот угол равен 81,43°, а для 38 составляет всего 27,9? Расстояние 0(18)...0(20), влияющее на конформационную подвижность боковой цепи и определяемое конформациай кольца Б (13р-конверт для 31, и 13р,14а-полукресло для 38) и положением 20-карбонильной группы, в 31 больше и составляет 3,287 А° против 2,95 А° для 38.

Таким образом, данные ГОЛ показывают, что степень стерических затруднений для вращения 17р-вцвтильной боковой цепи в 15р,16р--метиленпрогэстероне 31 уменьшается в сравнении с 1бр-метилпро-гвстероном 38.

Как было сказано, необходимость одновременного связывания 3-и 20-кислородных центров с рецептором требует иг фиксированного положения в пространстве.

Для 0(20)-карбо1шльной группы его обычно рассматривают как определенную конформацию (поворот вокруг связи 0(17)-0(20)), характеризуемую точным значением торсионного угла т£0(16)-0(17)--0(20)-0(20) ].

Однвко, такой подход игнорирует пространственную связь манду расположением полярных центров и геометрией гидрофобной поверхности стероида, такке играющей серьезную роль в СРО.

На основании изучения соотношения структуры и функции созданного в нашей лаборатории нового класса шсоко активных 16а,17а-цикловлканопрогестеронов (прегнв-В'-пентаранов) было высказано предполокение, что основным переменным параметром, характеризующим полонение в пространстве 0(20)-кар<3онильной группы и зависящим от изменений, вносимых в молекулу размером дополнительного В'-карбоцикла, является не столько торсионный угол ИС(16)-0(17)—0(20)-0(20)1, сколько расстояние (1) мевду 0(20)-кислородным атомом и 18-метильной группой, принимаемой за центр гидрофобного связывания. При втом критерием возможности СРС должна служить способность 0(20)-карбонильной группы занять положение, столь же удаленное от центра 0(18) как в прогестероне.

Для подтверждения вгого предположения было предпринято исследование ряда производных прогестерона, содержащих С^алкильные заместители в ближайшем соседстве о 20-карбонильной группой.

Методом молекулярной механики рассчитвнв *' ' конформационноя внергия и значения (1) при последовательном изменении угла х для молекул прогестерона 39, 1бр-метилпрогестерона 40, 15р,1бр-мети-ленпрогестерона 31. и 1бр-мегалпрогестерона 38, в которых последовательно возрастает степень стерических затруднений для вращения 17р-ацетильной группы. Показано, что для всех четырех соединений существует энергетический min при (1)=3,0 А° в то время как min при (1)=3,5-3,б А° характерен для первых трех соединений и отсутствует у 38, полностью лишенного биологического действия. Отсюда можно было допустить, что 1Бр,1бр-мэтиленпрагестерон 31., имеющий одинаковую о прогестероном форму кривой потенциальной анергии (Е), должен обладать биологической активностью. Испытания на про-гествгенную активность 31 на крольчихах в тесте трансформации пролиферации эндометрия по Нлаубергу-ЫакФейлу (таблица I) подтвердили эти предположения. Из сопоставления кривых зависимости Е от расстояния (1) для прогестерона 39 и 15р,1бр-метиленпрогестерона 31 вытекает, что min при (1)=3,5 А° у этих соединений энергетически одинаковы.

Таблица I

Гестагенная активность 15р,1бр-метиленпрогестерона 31 и прогестерона 39 в тесте Клауберга-МакФейла.

Соединение Интервал доз И 50 Относительная

(мг/кг) (мг/кг) активность

39 0,0125 - 4 0,26 I

31 0,004 - 0,4 0,05 5,2

Расчет проведен в Центре рентгеноструктур. иссл. ООТХ РАН к.х.н. О.В.Линдеманом

**)

Биологические испытания на животных выполнены в Институте акушерства и гинекологии РАМН, Санкт-Петербург.

Тем на менее относительная вктишюоть 31 в пять раз превосходит активность прогестерона. В атом случае, по-видимому, проявляется повышение гидрофобной составляпцей в 0Р0 аа счет 1Бр,1бр--ыетиленовой группы. Если 8то так, то гидрофобный "карман" про-гестероиового рецептора в районе цикла Б расположен не только в а-области стероидной молекулы, как вто было найдено для 16а, 17а--циклоалканопрогеогвронов, но, в какой-то степени, н в р-области.

шшда

1. Впервые осуществлен синтез в выполнено систематическое исследование пространственного строения и биологического действия 1Бр,1бр-метиленпрогестерона, на содержащего дополнительных по лярных заместителей по сравнении о натившш гормоном.

2. Впервые получены Ю*- и цикловлкшюпоцтарани вндростановаго и естрвнового рядов о дополнительный циклом 0' в 1Б,^-положениях.

3. Показано, что реакция Дильса-Альдера бута-1,3-диенов в

А15-17-оксоотароидов в условиях высокого давленая протекает нестарооспецифично о образованием даастереомэршх 1Ба,16а- к 1Бр,1бр-циклогексенопентвранов, тогда как цшиюпрмсоодшшнмо диазометана при нормальной давлении н втилдиазоацетата при 14 кбар к А15-17-оксоандростану протекает регио- к стервоспеци-фичыо из р-области стероидной молекулы.

4. Осуществлена реакция Внттига под высоким давлением по стеря-чвски затрудненной 17-карбонильной группа.

Б. Установлено, что проотрвнотвенное влияние 1Бр,1бр-мвтпвнового заместителя нв конформационную подвижность Г/р-ацвтидьшВ бо ковой цепи ревко отличается от твкового для 1бр-метального заместителя.

6. Предложен новый подход к рассмотрении вквргетикн вращвшн 17р--боковой цепи прегнвновых стероидов, связиввщий выергио, необходимую для повороте 20-карбонильной группы, о ее соотношением а ангулярной 18-метильноЖ грушюЯ.

7. Обнаружено, что 15р,юр-ыэгиленпрогестерон, в отличие от 1бр--метилпрогестерона, обладает высокой црогестагенной активность!) в тесте Клауберга-МакФейла, превышающей в Б раз активность нативного гормона.

8. Высказано предположение о наличии гидрофобного "кармана" в прогеотероновом рецепторе в положении, соответствующем 15,16-цвнтрам прогестерона такта и в р-области стероидной молекулы.

Основные результаты исследований представлены в следующих публикациях :

1. Камерницкий A.B., Гвлахова Т.Н., Левина И.О., Эльянов В.О. Циклоприсоединение даазоуксусного вфира к ацетату 16-дегид-ропрегненолона при высоком давлении // Изв.АН ССОР. Сер.хим.-1977.-* 10.-0.2374-2375

2. Левина И.О., Камерницкий A.B., Мортикова В.И., Галахова Т.Н. Шиткин В.Ы., Эльянов B.C. I,3-Диполярное присоединение нитроновых эфиров и днааоацетага к 16-дегидро-20-кетостероидам под высоким давлением // Тез.докл. на V Советско-Индийском симпозиума по химии природных соединений.- Ереван. 1978, С.74

3. Камерницкий A.B., Гвлахова Т.Н., Левина И.О., Павлов В.А., Эльянов B.C. Трансформ, стероиды. Сообщ. 126. Синтез и стереохимия изомерных андроста-О'-пентаранов (15,16-циклогекс- 3*--ено-андроотанов) //Изв.АН ССОР. Сер.-хим.-1982.-* 9.-0.2147-2151

4. Левина И.С., Галахова Т.Н., Камерницкий A.B. Сштев 15,16-циклогексеноандростанов и астранов // Тез.докл. на X Конференции то изопреноидвм.-ЧССР.I983, С.

Б. Камерницкий A.B., Галахова Т.Н., Левина И.С., Эльянов Б.О., Хвжеева З.И. Симонов В.И. Трансформ, стероиды. Сообщ. 136. Синтез изомерных 15,16-циклогексеновстра-1,3,5(10)-триен-17-анов в изучение стереонвправленности диеновой конденсации в ряду стероидных 15-дэгидро -17-кетонов //Изв.АН ССОР. Сер.хим.-1984.-* 3.-О.665-671

6. Богданов B.C., Черепанова Е.Г., Галахова Т.Н., Левина И.О., Камерницкий A.B. Спектры ЯМР13С и стереоизомерия в рядах анд-

ростана- и острвио-D*-пентаранов // Изв.АН Q0QP. Оар.хим.-1984.-Л 5.-0.I038-I045

7. Камершщкий A.B., Галахова Т.Н., Левша И.О., Эльянов В.О. Богданов B.C., Черепанова Б.Г. Трансформ, стероиды. Соойщ. 148. 1,3-Цшиопряссединенив даазомегана и диазоацетата к А3-17-кетовндростану при нормальном и высоком давлении // Изв.АН ССОР. Сер.хим.- 1985.-J» 8.-0.I893-IB98

8. Левина И.О., Куликова Л.Е., Галахова Т.Н., Эльявов В.О. Органический синтез при высоких давлениях : реакции 12+4]- и [2+31-циклоприсоединения Д15-17- и Д1в-20-кетоотероидов // Тез.докл. ва VI Международной конференции по оргвническоыу синтезу (ИШАК). - Москва. 1986, С.80

9. Галахова Т.Н., Стшлша Г.А., Нулин В.Ы., Камершщкий A.B., Левина И.О. Индуцируемое высоким давлением матоксимэтилеыиро-вание по Виттигу 1Бр,1бр-метилеиоаднрост-Б-ен-Зр-ол-17-она // Изв.АН СССР. Сер.хим.- 1990.-Л 12.-0.2877-2878

10. Галахова Т.Н., Левина И.О.,Камершщкий A.B., Богданов B.C. Синтез 1Бр,1бр-матапэярпрогестеронв //Изв.РАН. Сер.хим.-1993.-й 1.-0.203-207

11. Васильев А.Д., Галахова Т.Н., Левша И.О.,Камершщкий A.B. Уолекулярная и кристаллическая структура I6ß,lßß-ывтилвипро-геотерона //Кристаллография.- 1992.-й 6.-0.1478-1484