Синтез замещенных 6-сульфонилхинолин-4-карбоновых кислот и их производных тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

На правах рукописи

АНДРЕЕНКО Юлия Александровна

Синтез замещенных 6-сульфонилхинолин-4-карбоновых кислот

и их производных

Специальность 02.00.03 - Органическая химия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Иваново-2006

Работа выполнена в ООО «Исследовательский Институт Химического Разнообразия», г. Химки Московской области

Научный руководитель: доктор химических наук, профессор

Александр Васильевич Иващснко

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор Александр Станиславович Ссмейкин

кандидат химических наук Марии Владимировна Блюмина

Ведущая организация:

Всероссийский научно-исследовательский институт химических средств защиты растений

Защита состоится «11» сентября 2006 года в 10 часов па заседании диссертационного совета Д212.063.01 в ГОУ ВПО «Ивановский государственный химико-технологический университет» по адресу: 153000, г. Иваново, пр. Ф. Энгельса, д. 7.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ивановского государственного химико-технологического университета

Автореферат разослан «С?-л2006 г.

Ученый секретарь

Диссертационного совета ^^.¿Р Хелевина О. Г.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Разработка новых высокоэффективных биологически активных веществ вызывает неослабевающий интерес. Известно достаточно большое количество разнообразных лекарственных препаратов, в молекуле которых присутствует фрагмент хи-нолина. Хинолин-4-карбоновые кислоты и их производные представляют существенный интерес в плане синтеза биологически активных всщсств, отсюда исследования по поиску новых высокоэффективных препаратов на этой основе интенсивно развиваются.

Наиболее эффективным методом синтеза указанных молекулярных систем, то есть построение скелета молекул с учетом дальнейшей функционализации, следует признать реакцию Пфптцингера и ее модификации. Данная реакция основана на доступных исходных соединениях — изатина и его замещенных аналогов с одной стороны и мстиленкарбонильных соединений с другой, - и приводит к хинолин-4-карбоновым кислотам и их производным. Варьируя субстрат и реагент, можно синтезировать широкий круг различных хинолин- и 2-оксо-1,2-дигидрохинолип-4-карбоповых кислот, способных к дальнейшей функционализа-ции.

Стоит проявить внимание к возможности введения сульфамидных функций в молекулярные системы хинолин- и 2-оксо-1,2-дигидрохинолии-4-карбоновых кислот, а также хино-лин-3,4-дикарбоновых кислот, на одной из стадий; сведения о подобных молекулярных системах с сочетанием указанных функций в литературе ограничены. С точки зрения разработки высокоэффективных методов получения указанных классов соединений, особенно перспективной представляется возможность вовлечения в реакцию Пфитцингера с мстиленактивны-ми соединениями сульфо- и сульфанилзамещенных изатинов; сведения о подобных превращениях в литературе практически единичны (А. V. Ivachtchenko et al, J. Comb. Chem., 5, 645, 2003).

Таким образом, учитывая высокий фармакологический потенциал 6-сульфшшл-хинолин-и 2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых, а также хинолин-3,4-дикарбоновых кислот и их производных, актуальной задачей представлялось разработать эффективные методы синтеза этого класса соединений, создать комбинаторные библиотеки указанных молекулярных систем.

Важным и актуальным представляется оценка специфической физиологической активности этих соединений, позволяющей использовать их в качестве «молекулярных инструментов», а также активных лекарственных субстанций, селективно подавляющих программируемую клеточную смерть — апоптоз.

Работа выполнена в соответствии с планом научных исследовательских работ ООО «Исследовательский Институт Химического разнообразия» в период 2002-2005 гг. во исполнение программы «Биоскрининг активных веществ для создания готовых лекарственных средств и защиты растений» на базе ООО «Исследовательский Институт Химического Разнообразия» в рамках Федеральных целевых программ Министерства образования и пауки РФ «Исследования и разработки по приоритетным направлениям науки и техники (2005-2006 годы) и «Развитие медицинской промышленности в 1998-2000 гт. и на период до 2005 года»

Цель работы

1. Разработка новых методов синтеза производных хинолин- и 2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот в качестве биологически активных веществ широкого спектра применения.

2. Синтез неизвестных ранее замещенных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохииолин-4-карбоновых кислот, 6-сульфамоилхинолин-4-карбоновых и 6-сульфамоилхшюлин-3,4-дикарбоновых кислот.

3. Создание комбинаторных библиотек разнообразных производных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот, 6-сульфамоилхинолин-4-карбо-новых и 6-сульфамоилхииодин-3,4-дикарбоновых кислот и подтверждение биологической активности представленных молекулярных систем.

Научная новизна. Обнаружено необычное направление реакции Пфитцингера 5-сульфамоилизатинов в водно-спиртовой щелочи с малоновым эфиром, приводящее к неизвестным ранее б-сульфамоилхинолин-4-карбоиовым кислотам.

Впервые иа основе жидкофазного параллельного синтеза х использованием реакции Пфитцингера разработан способ получения неизвестных ранее замещенных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот.

Впервые использованы в реакции Пфитцингера в качестве изатиновой компоненты коммерческие продукты - соль изатин-5-сульфокислоты и 3,3-дихлор-2-оксо-1,2-дигидро-1#-индол-5-сульфокислота, в результате чего стали легко доступными неизвестные ранее 2-замещенные 6-сульфохинолин-3,4-дикарбоповые кислоты.

На этой основе разработаны новые методы получения б-сульфамоилхинолин-3,4-днкарбоновых ю.слот и 4-замещенных 8-сульфамоил-2,3-дигидро-Ш-пирроло[3,4-с]-хинолин-1,3-дионоо различных производных на этой основе.

Практическая значимость. В результате проведенных исследований стали легко доступными новые перспективные физиологически активные соединения, а именно, лекарственные препараты широкого спектра применения; патентоспособными являются эти соединения и методы их синтеза.

Обнаружен новый хемотип непептидных ингибиторов каспаз-3 - замещенные хинолип-карбоновые кислоты и их производные, обладающие физиологической активностью, в том числе специфической. Это позволяет использовать их в качестве «молекулярных инструментов», а также активных лекарственных субстанций, селективно подавляющих программируемую клеточную смерть (апоптоз).

Все синтезированные в ходе исследований целевые молекулярные системы протестированы на биологическую активность связи структура - in vitro ингибирующая каспазу-3-активность, найдены высокоэффективные ингибиторы каспазы-3, установлены наиболее перспективные для дальнейшей оптимизации лидеров сульфамоильные группировки.

Созданы комбинаторные библиотеки разнообразных сульфамоил производных хинолин-и 2-хинолон-4-карбоновых кислот с подтверждением биологической активности представ-jv-чых молекулярных систем.

Апробация работы и публикации. По материалам диссертации опубликованы 3 научные статьи, 11 тезисов докладов и получен патент РФ. Результаты работы представлены на научных встречах: XX Укршська конференции з opranÍ4iioi xímü, присвячеиа 75-р!ччю з дня народження академика О.В.Богатського (Одесса, 2004); The 9th National Conference on "Bioac-tive Keierocycles and Drug Discovery Paradigm"(Rajkot, Gujarat, India, 2005); Acid. 20й International Congress of Heterocyclic Chemistry (Palermo, Italy, 2005); American Chemical Society, Division of Medicinal Chemistry, Abstracts, 229lh ACS National Meeting, San Diego, CA, 2005.

Положения, выносимые на защиту. Новые замещенные 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновые и 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновые кислоты, 4-замещенные 8-сульфамоил-2,3-дигидро-1//-пирроло[3,4-с]хинолин-1,3-дионы и способы их получения.

Необычное направление реакции Пфитцингера 5-суяьфамоюшзаипов в водно-спиртовой щелочной среде при образовании in situ этаналя, который выигрывает конкуренцию у ди-этилмалоната, приводящее к неизвестным ранее б-сульфамоилхинолии-4-карбоновым кислотам.

Использование в реакции Пфитцингера в качестве изатиновой компоненты соли изатин-5-сульфокислоты и 3,3-дихлор-2-оксо-1,2-дигидро-1 //-индол-5-сульфокислоты.

Комбинаторные библиотеки разнообразных производных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолнн-4-карбоновых кислот, б-сульфамоилхинолин-4-карбоновых и б-сульфа-моилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот с подтверждением биологической активности представленных молекулярных систем.

Структура работы. Диссертация состоит из введения, литературного обзора, химической и экспериментальной частей, выводов и списка использованной литературы из 224 на-

именований и приложений. Работа изложена на 118 страницах, включает 69 рисунков, 18 схем и 11 таблиц.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Во Введении обоснована актуальность темы, научная новизна и практическая значимость результатов исследования, цели работы и положения, выносимые на защиту. В Литературном обзоре обобщены данные по химии изатинов и их производных, подробно рассмотрены имеющиеся литературные данные по использованию реакции Пфитцингера в синтезе хиполик- и хинолок-4-карбоновых кислот и их производных. Огдельный раздел посвящен биологической активности молекулярных систем с фрагментом хинолина и хинолона. Обосновано основное направление исследований. В Химической части содержатся основные результаты исследований и их обсуждение.

Определяющим направлением исследований, результаты которых представлепы в данной работе, является использование реакции Пфитцингера в синтезе 2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот, хинолин-4-карбоновых и хинолин-3,4-дикарбоно-вых кислот и их производных. Среди последних определяющим являлось введение в структуру целевых продуктов сульфзмоильной группировки. Указанные молекулярные системы объединены общими структурными формулами и обладают определенным общими свойствами, здесь - определенным видом физиологической активности.

1. Синтез замещенных б-сульфамоюлхинолин-4-карбоновых кислот а их производных

Исследован метод синтеза замещенных 6-сульфамоилхинолин-4-карбоновых кислот (X-4-ТСК) и их производных на основе изатина согласно следующей схеме:

.О

,9 ск„" с1 Г1

н

О

* о -о

С1Ч

,С1 НгО / АсОН

О + СН2(С°2а>2

I

СО,II

Схема 1

На первой стадии изатин 1 постепенно прибавляли к 2.3-2.5-кратному мольному избытку С1803Н при 55-60 °С и выдерживали при этой температуре 2-4 ч с получением после выделения с выходом до 75% 3,3-дихлор-2-оксо-2,3-дигидро-1//-индол-5-сульфо-хлорида 2, содержащий по данным ЬС МЭ, не менее 95% основного вещества. Отметим, что сулъфохло-рид 2 является коммерчески доступным продуктом.

Один их основных структурных фрагментов - сульфамидный — генерировался взаимодействием сульфохлорида 2 с аминами в присутствии основания. Метод заключался

в последовательном прибавлении к раствору сульфохлорида 2 в ТГФ амина (1.05 моль) и Е^Ы (1.05 моль) и выдерживании при 20 "С в течение 8 ч. После отгонки растворителя в вакууме продукт 3 подвергали жидкостной хроматографии (дихлометан-ТГФ на силикагеле). Амиды 3 выделены с выходами 54-87% и содержат, по данным ЬС М8, не менее 95% основного вещества.

Сульфамиды 3 превратись в основные прекурсоры 4, в структуре которых присутствовали сульфамидная группа и фрагмент изатина, способный к реакции Пфитцингера. Данное прекращение осуществляли обработкой сульфамидов 3 водным раствором ШгСОз(1.2 моль) с последующей отгонкой воды в вакууме досуха, растворением остатка в АсОН и, далее, добавлением концентрированной НС1 и кипячением в течение 1 -3 ч. После отгонки растворителя в вакууме продукты экстрагировали этилацетатом, выделяли и хроматографировали на силикагеле (дихлорметан-'ГГФ). Получали амиды 4 с выходами 46-82%, содержащие по данным ЬС Мв не менее 95% основного вещества

Взаимодействие сульфамоилизатинов 4 с метилепкарбонильными соединениями в щелочной водно-спиртовой среде имело свои особенности. Ожидаемая трансформация платиновой компоненты 4 в замещенные 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновые кислоты 11 при введении диэтилмалопата не происходило. Основными продуктами являлись замещенные 6-сульфамоилХ-4-КК 5, образование которых - результат реакции изатинов 4 с этаналем МеСПО.

Сульфамошшзатины 4 подвергали кипячению в водно-спиртовом (1:1, об.) растворе КОН в течение 8-12 ч, после чего смесь подкисляли при охлаждении 1 N НС1 до рН ~ 1. Целевые продукты выделяли экстракцией этилацетатом с последующей очисткой хроматогра-фированием па силикагеле или кристаллизацией с выходами около 40 %. По данным ИКС, спектроскопии ЯМР 'Н и "С, включая НМВС и НМОС-корреляции было показано, что строение целевых продуктов соответствует формуле 5. По данным ЬС МЭ содержание основного вещества в целевых продуктах 5 — не менее 95 %.

Другой путь синтеза Х-4-КК 5 заключался во взаимодействии суийраш 4 с эгамалем в водном КОН с активацией реакционной массы микроволновым излучением (280 В, 2450 МГц) при 80 °С в течепие 15 мин. Выход продуктов 5 составил 15-30 %.

С целью объяснения этих результатов и установления возможного механизма подобной реакции были исследованы превращения субстрата 4 в водно-спнртовой среде в присутствии КОП с применением динамического ЬС МБ-анализа реакционной массы и метода меченых атомов. На основании анализа полученных данных мы полагаем, что механизм реакция образования 6-сульфамидоХ-4-КК можно представить схемой 2.

На первой стадии 5-сульфамоилизатин 4 рециклизовался под действием щелочи, превращаясь в соль 5-еульфамоилизатовой кислоты 12. Карбонильный атом углерода этого соединения в сильнощелочной среде подвергался нуклеофилыюй атаке атомом кислорода этанола, давая полуацеталь 13. Последний трансформировался в карбанион 13а и анион 13Ь с образованием т ет'/и этаналя МеСНО. Последний реагировал с солью аминокетокислоты 12 в условиях реакции с образованием 6-(№Н.'-7У-К.2-сульфамоил)Х-4-КК 5. Огмстим, что скорость реакции конденсации была существенно выше, чем в реакции с этаналем в классическом варианте.

R1 R* 9м - R1 Л CH

¿./Я о о Л jS, Л -Я

4 r11 R1 12 2 R, - 13

/Я ? " ?

SFYT^r =R;N/WCI1co2- -ме-аю

13a 13b ^

CHj(COjEt)2

v / Me-CHO 10,11 --^- 12 -- 5

Схема 2

Вместе с тем, ожидаемый продукт конденсации с вводимым в реакцию диэтилмалонатом - 2-оксо-1,2-дигидроХ-4-КК 11 или ее этиловый эфир - не были зарегистрированы в продуктах.

Для подтверждения постулируемого механизма в реакции 5-сульфамоилизатинов 4 использовали реагенты с меченым атомом углерода. Использование этанола, обогащенного

С-изотопом, приводило к образованию продуктов конденсации с этаналем -сульфамоил)Х-4-КК 5, который содержал метку 13С. С другой стороны, введение меченого этим же изотопом диэтилмалоната "СНгССОгЕЦг в присутствии этанола не вызывало образования каких-либо продуктов, обогащенных ,5С-изотопом.

Все указанные факты дают основания утверждать, что образующийся из этанола in situ этаналь в момент образования реагирует с аминокетокислотой 12, полностью выигрывая конкуренцию у другого вводимого в зону реакции метиленактивного соединения - дпэтил-малоиата. Очевидно, что электроноакцепторная сульфамоильная группировка в положении 5 ароматического кольца изатина 4 (точнее, 5-положении изатовой кислоты 12) сильно активирует карбонильный атом углерода кетогруппы, дезактивируя, в свою очередь, аминогруппу в положении 1. Это и приводит к взаимодействию в начальный момент времени именно с молекулой этанола. Логично предположить, что дальнейшие трансформации происходили in situ путем внутримолекулярной перегруппировки полуацеталя 13 без отщепления молекулы этаналя. Этими же соображениями можно объяснить сравнительно низкий выход продуктов 5 при использовании этаналя в качестве реагента в традиционных для реакции Пфитцингера условиях.

Реакция кислот 5 с первичными и вторичными аминами

в метаноле при комнатной температуре приводила, после отгонки растворителя, к четвертичным аммониевым солям б с 90-95 %-ными выходами. Последние трансформировались за 3 ч в амиды 6-(//-R'-jV-К2-сульфамоил)Х-4-КК 7 при действии РОСЬ при кипении реакционной массы. После отгонки избытка РОС1з и добавления воды смесь нейтрализовала NaHCO.i до рН -8-9. Амиды 7 выделили с выходами 20-90 %.

По другой процедуре аммонийные соли 6 подвергали дегидратации действием п-толуолсульфокислоты TsOH в кипящем толуоле в течение 60 ч с азеотропной отгонкой воды. После этого растворитель отгоняли в вакууме, продукты 7 очищали жидкостной хроматографией на силикагеле с последующей кристаллизацией из подходящего растворителя.

Амиды 7 были синтезированы также с промежуточным генерированием соответствующих хлорангидридов 8 обработкой кислот 5 РОСЬ. Реакцию хлорангидридизации проводили при 70 "С в течение 15 мин, затем смесь выдерживали при 20 °С 2 ч. Выходы хлорангидридов 6-(Лг-Рч.1-ЛЧ<2-сульфамоил)Х-4-КК составили 90-95 %. Последующую реакцию их с ами-

нами я'К'МН в диоксане осуществляли при 75 °С в течение 1 ч, выходы амидов 7 после выделения описанными выше способами составили 60-90 %).

В структурах молекулярных систем 7 достигнуто сочетание сульфамидных и карбокса-мидных функций в ядрах определяющего всю систему хинолинового фрагмента. Строение и чистота амидов 7 было доказано методами спектроскопии ЯМР 'Ни Так, в спектрах

ЯМР наблюдались сигналы в области 6.60-9.3 м. д., образование амидных группировок подтвердило наличие сигналов в области 0.72-0.89 м. д. для Н-3 и Н-5.

Функцшнализацня кислот 5 проводилась также синтезом их эфиров 9 на основе взаимодействия их хлорангидридов с солями гидроксилсодержащих соединений формулы Я4(Жа. Другой подход, касающийся синтеза бензиловых эфиров, заключался во взаимодействии солей кислот 5 и бензилбромидов формулы АгСН^Вг. Таким образом, данными методами получены соединения 9 с сочетанием сульфамидных и сложноэфирных функций. Реагенты 114(Жа содержали Я' строения:

-ОСК^СО-.Е! — ОС11-С6Н4Г -осн2-с6н5

По данным ЬС/МЭ содержание основного вещества в целевых продуктах 7 и 9 составляло не менее 95 %.

Для расширения ассортимента Х-4-КК в качестве мстиленактивных соединений в реакции с изатинами 4 или 14 п щелочной среде использованы метиленактивные реагенты общей формулы К'СОС! ЬК6; в результате синтезированы не описанные ранее 2-К.5-3-Г<.''-К7-6-(Л'-Я'-ЛГ-Я2-сульфамоил)Х-4-КК 15:

Общий метод заключался в том, что к суспензии изатина 4 или 14 в воде прибавляли в атмосфере азота КОП (10 моль). После выдержки про 20 "С до полнот растворения субстрата (что говорило об образовании соли изатовой кислоты 12) прибавляли метилепактив-ное соединение формулы R5COCH2R6 (2.8 моль) и перемешивали 8-12 ч. Выделение кислот 15 проводили подкислением при охлаждении концентрированной HCl до pH 5. Выходы кислот 15, содержащих по данным LC MS не менее 95% основного вещества, составили 6087%

Кислоты 15 подвергались функционализации — получение амидов 7 или эфиров 9-е использованием описанных выше методов (схема 1). Амиды 71» были также синтезированы па основе кислот 15 с использованием 1,Г-карбонилдиимидазола(С01) и промежуточным образованием имидизолидов 7а:

R',RS= Ме Ph -С6Н„Ме-о -C6H4Eln -С„Н,Ме,-3,4 -C6H3Me2-3,S -С„Н4+Рг -и -CsH4OMe-o -С6Н4ОМе-л -C6H3(OMe)r2,4 -C6H„OEt-n -C6H„SMe-n -1ЧНСйН4ОМе-л

Схема 3

1S

CDI

R

R3R4NH

R

R

з

7а

7Ь

Схема 4

К раствору кислоты 15 в дихлорметане при 20 °С прибавляли С01 (1.1 моль) и перемешивали реакционную массу до полного растворения кислоты 14. В зависимости от строения кислоты 15 время реакция составляло от 30 мин до нескольких часов. К раствору промежуточных имидазолидов 7а добавляли амин Я3К4КП (1.1 моль), и реакционную смесь кипятили 5 ч. Амиды 7Ъ после выделения обычными способами и очистки кристаллизацией получены с выходами 15-87%.

Одним из вариантов данного метода было получение незамещенных Х-4-карбоксамидов с использованием в качестве основания и реакции Пфитпингера 25 %-ного водного аммиака. Так, при взаимодействии 6-(метилпиперидино-сульфонил)изатина с ацетоном (30 моль) в 25 %-ном 1*Шз (160 моль) 2 ч при 20 °С, с последующей выдержкой в течение 15 ч при кипении реакционной массы был получен амид 2-метял-6-(4-метилпиперЕДин-1-сульфонил)Х-4-КК с выходом 34 %.

Таким образом, на основе 6-сульфамоилХ-4-КК 5 и 15 произведена жидкофазным параллельным синтезом комбинаторная библиотека 214 разнообразных 6-сульфамоилХ-4-карбоксамидов 7 и 7Ь.

2. Синтез замещенных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-ди1идрохииолин-4-карбоноп1лх кисло г и их производных

Поскольку попытка синтезировать 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидроХ-4-КК 10 закончилась неудачен, проведена реакция изатина 1 с диэтилмалокатом в водно-щелочной среде, проводящая к этил-2-оксо-1,2-дигидроХ-4-карбоксилату 16. Синтез данного прекурсора и его дальнейшие трансформации показаны на схеме:

СН2(С02Ш), ЕЮН/Н+ С15о3н си/

16 н

Схема 5

Первую стадию — формирование фрагмента 2-хинолона — проводили взаимодействием эквимолярных количеств изатина 1 и диэтилмалоната СНг^ОгЕОг в стандартных для реакции Пфитцингера условиях: КОН (1 моль), ЕЮН/Н^О, кипение, 8-12 ч. Продуктом реакции являлась кислота 16, которая путем этерефикации была переведена и эфир 16а.

Последний постепенно прибавляли к избытку СШОзН и выдерживали при комнатной температуре 1 ч, затем 5 ч при 50-60 °С. Последующие высаживание на лед и очистка кристаллизацией из АсОН привело к сульфохлорцду 17 с выходом 70 %.

Данный илтермедиат конвертировали в сульфамидоэфиры 18. Реакцию проводили согласно следующей методике: к водному раствору ШОН прибавляли при перемешивании сульфохлорид 17 и амин Я'К^Н (1.1 моль). Реакционную массу перемешивали 3 ч при ком-

натной температуре, поддерживая рН реакционной смееи ~8-9.. Затем реакционную смесь при охлаждении подкисляли 20 %-ной H2SO4 до рН 5, полученный продукт промывали кипящим этилацетатом. Выходы сульфамидоэфиров 18 составили 65-78 %.

После перевода эфиров 18 в кислоты 11 щелочным гидролизом (выходы продуктов - 5080 %) следующую задачу - трансформацию 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидроХ-4-КК 11 в соответствующие карбоксамиды 19 осуществляли согласно схеме 5 с использованием ЛГ,ЛГ-карбонялдлимидаза (CDI) в качестве реагента. Выбор данного способа амидизации кислот 11 обусловлен тем, что описанные выше методы для синтеза амидов хинолип-4-карбоновых (схема 3) не могут быть реализованы для 1,2-дигидроХ-4-КК. Лактим-лахтамная таутомерия этих молекулярных систем исключает применение таких реагентов, как РОСЬ или SOCb.

Превращение Х44-КК 11 в соответствующие амиды 19 — осуществляли в две стадии. Первая заключалась во взаимодействии их с эквимолярным количеством NJ^Í'-карбонилдиимидазола (CDI) в ДМФА при 80 °С в течение 3 ч.

На второй стадии к полученному раствору имидазолида 19а без выделения его из реакционной массы, добавляли раствор амина R3R NH в ДМФА, после чего смесь выдерживали в тех же условиях 8 ч. Выходы (Ar-R3-iV-R4)aMiiflfiB-6-(W-Rl-Ar-R:!) суль-фамоил-1,2-дигидроХ-4-КК 19 составили 60-80%.

Строение и чистота амидов 19 подтверждены методами спектроскопии ЯМР 'II, а также LС MS. В спектрах ЯМР наблюдались сигналы в области 6.60-9.3 м. д., образование амидных группировок подтвердило наличие сигналов в области 0.48-0.52 м. д. протонов II3 и Hs, что отлично от приведенных выше значений аналогичных областей в спектрах амидов 7; кроме того, наблюдались сигналы N'-II -протонов в виде уширенного синглста в области 12.2512.31 м. д. По данным LC MS содержание основного вещества в целевых продуктах 19 - не менее 95 %.

Возможный путь синтеза 2-оксо-1,2-дигидроХ-4-КК 22 осуществлен по варианту Халь-беркана перегруппировкой А/-ацетилизатина в водно-щелочной среде с рециклизацией исходного продукта 20 и последующей внутримолекулярной реакцией Пфитщшгера согласно схеме б.

О Г ° "1 С°2Н

СЖт^0 ^^N-COMe 2) if - Ос\

СОМс

. 21 Н

2) Н

22 Н

Схема 6

Дальнейшие превращения кислоты 22 в амиды 19 осуществляли в соответствии с описанными выше процедурами аналогично схеме 3.

На основе 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидроХ-4-КК 11 произведена жидкофазным параллельным синтезом комбинаторная библиотека 373 разнообразных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидроХ-4-карбоксамидов 19.

3. Синтез замещенных б-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот и их производных

Взаимодействие 5-супьфамоилизатшюв 4 с эфирами р-кетокислот Я5С0СН2С02Ме в условиях реакции Пфнтцингера приводило к ряду замещенных 6-сульфамоилХ-3,4-дикарбоновых кислот (диКК) 23 (схема 7).

По данному способу к суспензии 4 в воде в атмосфере азота прибавляли КОН (11 моль), после растворения осадка (происходило образование изатовой кислоты 12) прибавляли при комнатной температуре метиленактивное соединение - эфир р-кетокислоты Я3СОС1 ЬСОгМе (2.8 моль) - и выдерживали 8-12 ч. Реакционную массу нейтрализовали при охлаждении концентрированной НС1 до рН 5. Выходы 6-сульфамоилХ-3,4-диКК 23 составили 59-95%.

1) С02Ме

ОС' I.

,CHj

2) Н

Группировки R3 в эфирах R3COCH2CC>2Me были выбраны из группы, содержащей: Ме, Рг, ¿-Pr, Bu, I-Bu, CF^ СН2ОМе, (СН2)2ОМе, Ph, 2-Ру, 4-Ру, 1-Ad, 2-furyl Соединения 23 переводили в соответствующие ангидриды {4-113-1,3-ди<жсо-1,3-дигидрофуро[3,4-с]Х-8-(М-К'-ЛЧК?)сульфамиды} 14 %) действием АсгО 40 моль) при 100 "С до полного растворения субстрата, охлаждением до 0 °С и выдержкой 3-4 ч. Выходы ангидридов 14 после выделения обычными методами составили 50-88 %.

Взаимодействии ангидридов 14 с первичными аминами R4NH2 - на схеме8 :

CONHR4

R'NH,

24

0,Н

CONHK

о о

i // 'Ni^4

° U

•ч

26

25Ь

Схема 8

В ходе процесса в среде пиридина при комнатной температуре за 1 ч происходило образование амидокислот 25а и 25Ь в качестве промежуточных продуктов, которые, как правило, без выделения из реакционной массы подвергались имидизации введением АсгО и выдержкой при 80 "С в течение 30 мин.

По нашему мнению, первая стадия - реакция пуклеофильного замещения при карбонильном атоме углерода в ангидриде 24 - протекала преимущественно в направлении амидо-кислоты 25а, поскольку 4-С-атом более активирован.

Выходы имидов 26 {2-Я3-4-

Я4 -1,3-диоксо-1,3-дигидро-1//-пирроло[3,4-с]Х-8-(Л^Я -АА-К2)сульфамидов} составили 60-65 %.

По другому способу смесь эквимолярных количеств фуро[3,4-с]хинолин-1,3-дионов 24 и аминов Я Ш ¡2 кипятили 24 ч в толуоле с азеотропной отгонкой воды, после чего растворитель отгоняли в вакууме. Продукт экстрагировали метиленхлоридом и выделяли обычным и методами. После хроматографировааия на силикагеле (СН2О2, затем С1 ЬСЬ-МсОН, 99:1, об.) имиды 26 получены с выходами 11-78%.

Еще один вариант синтеза имидов 26 заключался в использовании 6-сульфамоилХ-3,4-диКК 23, которые подвергались действию СП1 (2.2 моль) в .У-метилпирролидонс с последующим введением аминов ГЛШг и выдержкой в течение 1 ч при комнатной температуре, затем 2 ч при 80 °С. После выделения и очистки известным« способами получали соединения 26 с выходами 45-92%.

Разработал также способ получения 6-сульфоХ-3,4-диКК 28 на основе Ыа-соли 2,3-диоксо-2,3-дигидро-1 Я-индол-5-сульфокислоты (5-изатинсульфокислоты) 27:

С02Ме

к.

I IO '

NaOH 1Н/)

Ц^С02Н Дс20 / Ру

О

О

О

}

R4

28

R

29

О, /

R'R'NH 0'/

О R4NH:

2

26

31

30

Схема 9

Реакцию этого коммерчески доступного продукта с метиленактиными соединениям проводили в воде (20 "С, 12 ч) в присутствии LiOII-IbO (11 моль) аналогично описанной выше процедуре. Выходы 6-сульфоХ-3,4-диКК 28 составили 60-95%.

На этой основе предложен альтернативный путь синтеза имидов 26: на основе 6-сульфоХ-3,4-диКК 28 синтезированы пиридиниевые соли сульфокислот 29 (в сочетании с фрагментом ангидрида Х-диКК). Способ заключался в том, что диКК 28 в пиридине с введением Ас20 превращалась за 3 ч при 50-60 °С в пиридиний 1,3-диоксо-1,3-дигидрофуро[3,4-с]хинолии-6-сульфо1гаты 2.9 с выходами после выделения 71 -95%.

Данные соединения кипятили 3-5 ч в АсгОН с эквимолярными количествами первичных аминов R4NH2, в результате чего, после отгонки части растворителя в вакууме, выделяли Ру-соли имидосульфокислот 30 с выходами 75-97 %.

При кипячении этих соединений в сульфолане в присутствии РОСЬ (7.5 моль) с последующим высаживанием на лед выделяли сульфохлориды 31, выходы которых после очистки составили 55-85%. Соединения 30 растворяли в диоксане, и к полученному раствору добавлял;! амин RlR?NH (1.1 моль) и Мметилморфолин в качестве основания. Реакционную массу нагр* вали при 60 °С 3 ч, прибавляли воду, осадок отделяли, и, в случае необходимости, очищали кристаллизацией или флэшхроматографией на силикагеле. В результате синтезирован ряд имидов 26 с выходами 35-95%.

Соединение 26 [Rl+R2 = JV-морфолино, RJ = Me, R4 = (СНгЬОАс] модифицировали конденсацией (по типу кротоновой) с и-трифтормети лбензальдегидом в АсдО в присутств1ш ZnC12 с получением сульфамидоимида 26 с R - СН=СН-С6Н4-СРз-п.

Разработан способ получения ангидридов 24 на основе 2,3-дихлор-7-К'-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-индол-5-сульфамидов 3. Они подвергались взаимодействию с эфирами р-кетокислот - эти л-2-оксо-З -R3-npon аноатам и — в условиях реакции Пфитцингера. При этом происходила in situ щелочного реакция гидролиза атомов хлора с последующей конденсацией. После подкисления и выделения обычными приемами получены кислоты 23.

Предложен другой подход к синтезу аналога соединений 24, заключающийся в использовании диэтил-2-оксосукцината Et02C-CH2C0-C02Et в качестве метиленактивного соединения в реакции Пфитцингера с 5-(1-морфолино)сульфонил-3,3-дихлор-2-оксо-2,3-дягидро-Ш-индолом 3 (R'+R2= Д'-морфолино) в присутствии КОН в воде:

__^сн,

1) о^ 2

СОгЕ1 К

кон/н,о

* г II

-1-°

2) Н*

-СО,

Аср/Ру

СО,Н

Схема 10

Продуктом этого превращения являлась 6-(1-морфолино)сульфонил-Х-2,3,4-триКК 32. Ангидридизацию с одновременным декарбоксилированисм проводили действием избытка АсгО в присутствии пиридина аналогично описанному выше. Наиболее вероятный путь протекания этой реакции отображен на схеме 10: первоначальное декарбоксилирование с образованием Х-3,4-диКК 33, дегидратация которой приводила к ангидриду 24. Дчнное заключение следует из того, что декарбоксилирование в подобных молекулярных системах протекает уже при сравнительно низких температурах (50-60 "С), и наиболее активированной карбоксильной группой является таковая в положении 2. Она активировала акцепторными 1-атомом азота (а также 3,4-СОгН-группами) сильнее, чем 4-карбоксильная.

Для расширения ряда имидов 6-сульфамоил-Х-3,4-диКК 26 = ТУ-морфолино, Я4 =

(СН2)2ОАс] синтезирован 2-хлорзамещенный аналог, как это представлено на схеме:

СЩСМ).

МеОН/В;

N0

сы

НС1 / АсОН К^'ь'^^г^АЛсСу [

° ^А, п

35 "

^ .'о

N 1 Р

- о

он Лс*°

Соединение 38 способно к дальнейшей модификации путем а!Юматичсского нуклео-фильного замещения атома хлора, который находится в 2-положении ядра хинолина и, соответственно, обладает высокой подвижностью в указанной реакции. Продукты данных превращений привлекли внимание в связи с высоким фармакологическим потенциалом подобных молекулярных систем.

Синтез проводили с использованием замещенного изатина 4 [К'+К2 = М-морфолино], конденсацию которого с малононитрилом СНг(СЫ)2 проводили в среде МсОН в присутствии Л-метилморфолина как основания (В:) при кипении реакционной массы в течение 12 ч. Выход 2-[5-(морфолин-4-сульфонил)2-оксо-1,2-дигндроиндол-3-илидсн]малононитрила 35 после выделения из реакционной массы составил 96 %.

Интермедиат 34 превращали в 6-(морфолин-4-сульфонил)-2-оксо-1,2-дщидроХ-4-диКК 35 с выходом 43 % посредством реакций перегруппировки и конденсации обработкой смеси соляной и уксусной кислот, выход ангидрида 36 после дегидратации под действием АсгО (100 °С, 30 мин) составил 91 %.

Ангидрид 36 трансформировали в имид реакций с 2-аминоэтанолом в среде пиридина при 20 "С в течение 1ч, затем вводили АсгО и выдерживали при 80 "С в течение 30 мин, по-

еле чего выделяли с выходом 86 % гидроксиимид 37 [Я4 = (СНг^ОАс]. В последнем продукте гидроксигруппу замещагш на атом хлора действием РОСЬ при кипении реакционной массы в течение 1ч. Выход целевого продукта - этил-2-{4-хлор-8-(морфолин-4-сульфонил)-1,3-диоксо-1,3-дигидропирроло[3,4-с]Х-2-ил}этаноата38 на последней стадии составил 96 %.

Подвижность атома хлора в субстрате 38 при атаке нуклеофильными реагентами позволили синггзировать ряд его 4-замещенных. На схеме 12 представлены реакция нуклеофиль-ного заме цсьия атома хлора под действием Л7- и 5-нуклеофилов и продукты дальнейших превращений.

Реакция хлорзамещенного субстрата 38 с тиомочевинои (МЩЬСБ в кипящем 2-пропаноле в течение 30 мин привела к продукту 39а с выходом 75 %; самопроизвольный гидролиз его вызвал образование соответствующего тиола и, далее, при медленном окислении - дисульфида.

Замещение с участием метилмеркаптоэтаноата НБСНгСОгМе в метилцеллозольве в ири-, сутствии СвгСОз в качестве депротонирукяцего агента позволило получить продукт 39Ь с выходом 65 %. Последний окисляли до сульфоксида 39с действием м- хлорнадбензойной кислоты в дихлорметане при 0 "С; выход 39с составил 70 %. Сульфон 39(1 синтезировали с выходом 56 % из сульфида 39Ь с использованием 3-х кратного избытка того же реагента, но при 50 °С за 1.5 ч.

Замещение с участием Л-нуклеофилов — морфолина, (2#)-2-аминометилсукцината или 4-фтор-3-хлораншшна - проводили по общей методике: /-РЮН, кипение реакционной массы, 20-60 мин; продукты замещения - 40а, 40Ь и 40с соответственно — были выделены с выходами 45-77%.

О (СН2)гОАС N

О ,(СН,)2-ОАс

а п = О, Л = Ьп = 0, Я = ся=1,Я» <1 я = 2, (I =

с(ынг)=кн

' СН2СО,Ме

рас1г(рри3)а

АгВ(ОН)г, ог НеШ(ОН)2 '

а Я = 3-С1-4-Р-С6Н3 Ъ Я = р-Ме2ЫСОС6П4 с Я = 3-Ру

Схема 12

Проведено также арилирование и гетерилирование в положении 4 соединения 38 с использованием борорганических реагентов. Так, применение арилборных кислот АгГ!(ОП)2 в сочетании с каталитической системой Рс1С12(РРЬз)2 позволило получить соединения 41а, 41Ь и 41с с выходами 30-60%.

4. Биологическая активность б-сульфамоилхинолин-4-карбоновых, 2-оксо-б-сульфамоил-1 ,2-днгидрохинолин-4-карбоиовых кислот и 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот и их производных

Синтезированные б-сульфамоилХ-4-KK, 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидроХ-4-КК и 6-сульфамоилХ-3,4-диКК и их производные были испытаны в качестве потенциальных физиологически активных соединений. Более конкретно, установлена специфическая физиологическая активность этих соединений, позволяющая использовать их в качестве «молекулярных инструментов», а также активных лекарственных субстанций, селективно подавляющих программируемую клеточную смерть (апоптоз — Apoptosis). Повышенная активация апоптоза является причиной таких заболеваний как кардиоваскулярные (например, острые ишемиче-ские поражения - ипсульт, инфаркт миокарда), нейродегенеративные, например, болезни Паркипсона и Альцгеймера, вирусные заболевания (например, гепатит-С и СПИД) - в связи с этим поиск и разработка новых лекарственных препаратов, подавляющих апоптоз является актуальнейшей задачей современной науки.

В результате проведенных исследований, направленных на поиск новых биологически активных соединений, в том числе селективно подавляющих апоптоз, обнаружен новый хемотип непептидных ингибиторов каспаз-3. Ими являются замещенные Х-4-КК и их производные, обладающие указанной физиологической активностью, в том числе специфической. Антипротеазная активность синтезированных соединений определялась согласно известному методу (Н. R. Stennicke, G. S. Salvesen, J. Biol. Chem., 272, 25719,1997) на 9 сериновых про-теазах (Каспазы 1-9), которые вовлечены в регуляцию программированной клеточной смерти (апоптозис) н воспалительных процессов. Активность каспаз определялась по скорости расщепления соответствующего субстрата, представляющего собой пептид со специфичной для каждой используемой каспазы последовательностью аминокислот с присоединенной флуоресцентной группой (мстилкумарин).

Наибольшую активность среди исследованных хемотнпов показали имиды 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот, то есть соединения общей формулы 26,39,40 и 41. Причем лучшие результаты были показаны при наличии в сульфамидном фрагменте -морфолипа, а в имидном фрагменте - гидроксиэтиламина или его замещенных аналогов.

Антиапоптозная активность определялась по известному методу (S. W. Burchiel et at, Methods, 21, 221-230, 2000) на клеточной линии ЗТЗ, полученной из АТСС (American Туре Culture Collection). В качестве примера в Таблице приведены результаты исследований для соединений общей формулы 26,39,40 и 41.

На основании исследования in vitro ингибирующей каспазу-3-активности синтезированных соединений найдены высокоэффективные ингибиторы каспазы-3.

Наибольшую активность среди исследованных молекулярных систем проявили соединения, имеющие в положение 4 алкильные, арильные и гетерильные группировки. Они продемонстрировали ингибирующую каспазу-3-активность ICso в пределах 20-60 пМ. 4-Меркаптопроизводные и их окисленные аналоги имели более низкую активность (ICso 2901290 пМ). 4-Алкиламино- и 4-ариламино-замещенные аналоги показали существенно более низкую активность : 1С50 5000-30000 пМ.

Таблица

Значения in vitro ингибирующей каспазу-3-активности сульфамидоамидов

0 /(СН2)—ОАс О

R ICso, nM

II 28 ±2

Me 23 ±2

/-Рг 40 ±3

Ph 27 ± 3

2-furyl 36 ±4

CH=CH-C6H4-CF3-w 33 ± 3

ОН 10900 ±3800

CI 294 ± 16

S-C(NH2)=NH 255 ± 20

S-CH2C(0)0Me 1290 ±30

l-morpholyl 15350 ±3500

NH-CH(C02Et)CH2-C(0)0Et 5190 ±2700

NH-C6H3-3-C1-4-F 27900 ± 3300

S0-CII2C02Me 352 ±21

S02-CH2C02Me 362 ± 26

C6H4-(CONMe2)-n 58 ±6

C6H3-3-Cl-4-F 33 ±4

3-Py 33 ±5

Установлены наиболее перспективные для дальнейшей оптимизации лидеров сульфамо-нльные группировки. Показано, что переход от 2-(2-гидроксиэтил)-4-метил-8-сульфамоил-2,3-дигидро-1Я-пирроло[3,4-с}хинолин-1,3-дионов к 2-(2-ацетилоксиэтил)-производным сопровождается 1.3-5- кратным увеличением ингибирующей каспазу-3 активности. Лидером этого ряда соединений является 2-(2-ацетилохсиэтия)-4-метил-8-(морфолино-4-сульфонил)-., 2,3-дигидро-Ш-пирроло[3,4-с]Х-1,3-дион, для которого Ю50 = 23 пМ.

Созданы фокусированные библиотеки и фармацевтические композиции, содержащие указанные соединения; разработаны способ их получения и применения для лечения и предупреждения развития различных заболеваний, в том числе связанных с повышенной активацией апоптоза.

ВЫВОДЫ

1. Обнаружено необычное превращение 5-сульфамоилизаинов в водно-спиртовой щелочи с образующимся в условиях реакции Пфитцингера этапалем, который выигрывает конкуренцию за субстрат у малонового эфира, приводящее к неизвестным ранее 6-сульфамоилхинолин-4-карбоновьш кислотам. На их основе произведена жидкофазным параллельным синтезом комбинаторная библиотека 214 разнообразных 6-сульфамоилхинолин-4-карбоксамидов.

2. Впервые с использованием реакции Пфитцингера разработан способ получения и осуществлен синтез неизвестных ранее замещенных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот, на основе которых разработан протокол производства и произведена жидкофазным параллельным синтезом комбинаторная библиотека 373 разнообразных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинопии-4-карбоксамидов.

N R

3. Впервые в качестве изатиновой компоненты в реакции Пфитцингера использованы коммерчески доступные натриевая соль изатип-5-сульфокислоты и 3,3-дихлор-2-оксо-1,2-дигидро-1 //-индол-5-сульфокислота, в результате чего стали легко доступными неизвестные разнее 4-замещенные 6-сульфохинолин-3,4-дикарбоновые кислоты.

4. Разработан протокол производства и произведена жндкофазпым параллельным синте-' зом комбинаторная библиотека 352 разнообразных 4-замещенных 8-сульфамоил-2,3-дигидро-1#-пирроло[3,4-с]хинолин-1,3-дионов двумя альтернативными путями: как через пиридиниевые соли 4-замеш.епных 1,3-диоксо-1,3-дигидро-фуро[3,4-с1хинолип-8-сульфокислот, так и последовательным взаимодействием б-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот с карбодиимидазолом и циклизацией образующихся имидазолидов первичными аминами.

5. Разработан метод получения широкого ряда 4-замещенных 8-сульфамоил-2,3-дигидро-1 Я-пирроло[3,4-с]хинолин-1,3-дионов последовательным превращением 4ч>ксо-8-сульфамоил-2,3-дигидро-1//-пирроло[3,4-с]хинолин-1,3-дионов в 4-хлор-8-сульфамоил-2,3-дигидро-1//-пирроло[3,4-с]хинолин-1,3-дионы и взаимодействием последних с различными нуклеофилами или введением их в реакцию Судзуки .

6. На основании исследования связи структура - in vitro ингибирующая каспазу-3-активность установлены наиболее перспективные для дальнейшей оптимизации сульфамо-ильные группировки. Лидером этого ряда соединений является 2-(2-ацетилоксиэтил)-4-мегил-8-(морфолино-4-сульфонил)-2,3-дипщро-1//-пирроло[314-с]хино-лин-1,3-дион, для которого ICso = 23 |лМ. Показано, что переход от 2-(2-гидроксиэтил)-4-метил-8-сульфамоил-2,3-дигидро-1//-1шрроло[3,4-с]хннолин-1,3-дионов к 2-(2-ацетилоксиэгил)-производным сопровождается 1.3-5- кратным увеличением ингибирующей каспазу-3 активности.

Автор выражает глубокую признательность всем соавторам своих работ, также организациям и отдельным лицам, оказавшим неоценимую помощь при выполнении описанных не-

СЛ£Д\){Ц1>!Я Я.

Основное содержание диссертации опубликовано в работах:

1. Ivachtchenko A.V., Kobak V.V.,...Kuzovkova (Andrcenko) J.A. et al. / An Efficient, Parallel Liquid-Phase Synthesis of jV-Substituied 6-Aminosulfbnyl-2-Oxo-l,2-Dihydroquinoliuc-4-Carboxamide and 6-Aminosulfonylquinoline~4-Carboxamide Derivatives / // J. Comb. Chern. -2005. - Vol. 7. - P. 227-23 5.

2. Kravchenko D.V., Kuzovkova (Andrcenko) J.A., Kysil V.V. et at. / PyrroIo[3,4-c]quinoIinc-1,3-diones as potent caspase-3 inhibitors: SAR of the 4-substitutsd 2-(2-acethyloxyethyl)-8-(mo^holmc^-sulfonyl)^yrrolo[3/W]quinolmc-l,3-dioties. // J. Med. Chem. - 2005. - Vol. 48. -P. 3680-3683.

3. Иващенко A.B., Кобак В.В.,...Кузовкова (Андреепко) Ю.А. и др. / Замещенные 6-сульфо-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновые кислоты и их производные (варианты) и фокусированная библиотека. // Патент RU 2260002, публ. Еюл. № 25, 2005

4. Иващенко, A.B., Кобак В.В., Кузовкова (Андреенко) Ю.А., Ильин А.П., Кравченко В.В., Ткаченко С.Е, Хват A.B., Окунь И.М. / Хинолинкарбоновые кислоты, их производные, фокусированная библиотека. Международная заявка на патент РСТ RU 2004/000081, публ. WO 2004/078731, 2004.

5. Ivachtchenko A.V., Kobak V.V.,...Kuzovkova (Andreenko) Y.A. et al. / An Efficient, Parallel Liquid-Phase Synthesis of N-Substituted 6-Aminosulfonylquinoline-4-Carboxatnide Derivatives. // Тези допов!дсй XX Укршсыс. конф. з оргашчнш xiMÜ, присвячена 75-р1ччю з дня на-родже!шя академ1ка О.В. Богатського. Ч. I. - Одесса, 2004, С. 188.

6. Ivachtchenko A.V., Kysil V.M.....Kuzovkova (Andreenko) Y.A. et al. / Synthesis оГ Substituted l,3-Dioxo-l,3-dihydrofuro[3,4-c]quino!ine-8-sulfonic acid Amides./ Тези доповщей XX Укршськ. конф. з оргашчно! xiMÜ, присвячена 75-р1ччю з дня пароджепня академика О.В. Богатського. Ч. I. - Одесса, 2004, С. 184.

7. Ivachtchenko A.V., Kysil V.M.,...Kuzovkova (Andreenko) Y.A. et al. / Parallel LiquidPhase Synthesis of N-Substituted 6-Aminosulfonyl-2-Oxo-l,2-Dihydroquinoline-4-Carboxamides. // Тези доповщей XX Укршськ. конф. з оргатчжн xiMii, присвячена 75-р1ччю з дня наро-дження академжа О.В. Богатського. Ч. I. - Одесса, 2004, С. 179.

8. Ivachtchenko A.V., Kysil V.M.....Kuzovkova (Andreenko) Y.A. et al. / Combinatorial Libraries of Substituted l,3-Dioxo-l,3-dihydro-lH-pyrroIo[3,4-c]- quinoline-8-sulfonic acid and their Amides, // Тези допотдсй XX Укршськ. конф. з оргашчно! xiiviii, присвячена 75-р1ччю з дня народження академгса О.В. Богатського. Ч. I. - Одесса, 2004, С. 176.

9. Ivachtchenko A.V., Kysil V.M., Kuzovkova (Andreenko) Y.A. et al. / l,3-Dioxo-2,3-dihydro-l//-pyrrolo[3,4-c]quinolme Combinatorial Libraries. // Abstracts of Scientific Papers of the 9th National Conference on "Bioactive Heterocycles and Drug Discovery Paradigm", P-142. - Rajkot, Gujarat, India, 2005, P. 184.

10. Ivachtchenko A.V., Savchuk N.,.,.Kuzovkova (Andreenko) Y.A. et al. / Combinatorial Libraries of novel 3-oxo-l,2,3,4-tetrahydroquinoxaline-6-carboxamide. // Abstracts of Scientific Papers of the 9th National Conference on "Bioactive Heterocycles and Drug Discovery Paradigm". Abstracts of Scientific Papers, P-142. - Rajkot, Gujarat, India, 2005, P. 185.

11. Ivachtchenko A.V., Savchuk N.,...Kuzovkova (Andreenko) Y.A. et al. / Combinatorial Libraries of Substituted l,3-Dioxo-l,3-dihydro-lH-pyrrolo[3,4-c]quinoline-8-sulfonic acids and their Amide Derivatives. // Abstracts of Scientific Papers of the 9th National Conference on "Bioactive Heterocycles and Drug Discovery Paradigm". - Rajkot, Gujarat, India, 2005, P-142, P. 186.

12. Kravchenko D.V., Kuzovkova (Andreenko) Y.A., Kysil V.V. et al. / Synthesis and Selective Decarboxylation of 6-(Morpholine-4-sulfonyl)-quinoline-2,3,4-tricarboxylic Acid. // Book and Abstracts of Scientific Papers of the 20th International Congress of Heterocyclic Chemistry. - Palermo-Italy, 2005,2-РОЗ, P. 316.

13. Kravchenko D.V., Kuzovkova (Andreenko) Y.A., Kysil V.V. et al. / Synthesis of Substituted 2-(2-HydroxyctIiyl)-l,3-dioxo-2,3-dihydro-l№pyrrolo[3,4-c]quinoline-8-sulfonic Acid Amides as Potent Caspase-3 Inhibitors. // Book and Abstracts of the 20 International Congress of Heterocyclic Chemistry. - Palermo-Italy, 2005,2-P014, P. 327.

1Kravchenko D.V., Kuzovkova (Andreenko) Y.A., Kysil V.V., et al. t A Facile Synthesis of 2-Subs:< a\ted 4-(Morpholin-4-imn-4-methyl)-l,3-dioxo-2,3-dihydro-lW-pyrrolo[3,4-c]quinolin-8-sulfonatts as Potent Caspase-3 Inhibitors. // American Chemical Society, Division of Medicinal Chemistry , Abstracts, 229lh ACS National Meeting, San Diego, CA, 2005,405.

15. Kravchenko, D.V., Kuzovkova (Andreenko), Y.A., Kysil, V.V. et al. 14-Substitutcd 2-(2-АсеЛу1охуеЛу1)-8-(тофЬоНпе-4-8и1Гопу1)рупЫо[3,4-с^шпо1те-1,3^юпе5 as Potent Caspase-3 Inhibitors. // American Chemical Society, Division of Medicinal Chemistry, Abstracts, 229 ACS National Meeting, San Diego, CA, 2005,4045.

16. А.В.Иващенко, Д.В. Кравченко, Ю.А. Андреенко и др. // Изв. Вузов. Химия и хим. технология. - 2006.- Т.49. Вып.6. - С. 53-59.

Отпечатано в ООО «0ргсервис-2000» Подписано в печать 2 Ъ,0£.06Г Объем п.л.

Формат 60x90/16. Тираж т экз. Заказ № 115419, Москва, Орджоникидзе, 3.

Список сокращений и обозначений

Введение

1. Литературный обзор

1.1 Изатин и его превращения

1.2 Реакция Пфитцингера

1.3 Биологическая активность соединений с фрагментом хинолина

2. Химическая часть

2.1 Синтез замещенных 6-сульфамоилхинолин-4-карбоновых кислот и их производных

2.2 Синтез замещенных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидро-хинолин-4-карбоновых кислот и их производных

2.3 Синтез замещенных 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот и их производных 59 2.4. Биологическая активность 6-сульфамоилхинолин-4-карбоновых, 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот и 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот и их производных

3. Экспериментальная часть

3.1 Исходные вещества, растворители

3.2 Методики синтеза

3.3 Антипротеазная (каспазная) активность синтезированных соединений

3.4 Методы аналитического контроля

3.5 Идентификация основных синтезированных прекурсоров и целевых соединений

Выводы

Разработка новых высокоэффективных биологически активных веществ вызывает неослабевающий интерес. Известно достаточно большое количество разнообразных лекарственных препаратов, в молекуле которых присутствует фрагмент хинолина. Хинолин-4-карбоновые кислоты и их производные представляют существенный интерес в плане синтеза биологически активных веществ, отсюда исследования по поиску новых высокоэффективных препаратов на этой основе интенсивно развиваются.

Наиболее эффективным методом синтеза указанных молекулярных систем, то есть построение скелета молекул с учетом дальнейшей функционали-зации, следует признать реакцию Пфитцингера и ее модификации. Данная реакция основана на доступных исходных соединениях - изатина и его замещенные аналогов с одной стороны и метиленкарбонильных соединений с другой, - и приводит к хинолин-4-карбоновым кислотам и их производным. Варьируя субстрат и реагент, можно синтезировать широкий круг различных хинолин- и 2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот, способных к дальнейшей функционализации.

Стоит проявить внимание к возможности введения сульфамидных функций в молекулярные системы хинолин- и 2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот, а также хинолин-3,4-дикарбоновых кислот, на одной из стадий; сведения о подобных молекулярных системах с сочетанием указанных функций в литературе ограничены. С точки зрения разработки высокоэффективных методов получения указанных классов соединений, особенно перспективной представляется возможность вовлечения в реакцию Пфитцингера с метиленактивными соединениями сульфо- и сульфанилзамещенных изатинов; сведения о подобных превращениях в литературе практически единичны.

Таким образом, учитывая высокий фармакологический потенциал 6-сульфанил-хинолин- и 2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых, а также хинолин-3,4-дикарбоновых кислот и их производных, актуальной задачей представлялось разработать эффективные методы синтеза этого класса соединений, создать комбинаторные библиотеки указанных молекулярных систем.

Важным и актуальным представляется оценка специфической физиологической активности этих соединений, позволяющей использовать их в качестве «молекулярных инструментов», а также активных лекарственных субстанций, селективно подавляющих программируемую клеточную смерть -апоптоз.

Работа выполнена в соответствии с планом научных исследовательских работ ООО «Исследовательский Институт Химического разнообразия» в период 2000-2005 гг. во исполнение программы «Биоскрининг активных веществ для создания готовых лекарственных средств и защиты растений» на базе ООО «Исследовательский Институт Химического Разнообразия» в рамках Федеральных целевых программ Министерства образования и науки РФ «Исследования и разработки по приоритетным направлениям науки и техники (2005-2006 годы) и «Развитие медицинской промышленности в 1998-2000 гг. и на период до 2005 года»

Цель работы

1. Разработка новых методов синтеза производных хинолин- и 2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот в качестве биологически активных веществ широкого спектра применения.

2. Синтез неизвестных ранее замещенных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот, 6-сульфамоилхинолин-4-карбоновых и 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот.

3. Создание комбинаторных библиотек разнообразных производных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот, 6-сульфамоилхинолин-4-карбо-новых и 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот и подтверждение биологической активности представленных молекулярных систем.

Научная новизна

Обнаружено необычное направление реакции Пфитцингера 5-сульфа-моилизатинов в водно-спиртовой щелочи с малоновым эфиром, приводящее к неизвестным ранее 6-сульфамоилхинолин-4-карбоновым кислотам.

Впервые на основе жидкофазного параллельного синтеза с использованием реакции Пфитцингера разработан способ получения неизвестных ранее замещенных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот.

Впервые использованы в реакции Пфитцингера в качестве изатиновой компоненты коммерческие продукты - соль изатин-5-сульфокислоты и 3,3-дихлор-2-оксо-1,2-дигидро- 1Я-индол-5-сульфокислота, в результате чего стали легко доступными неизвестные ранее 2-замещенные 6-сульфохинолин-3,4-дикарбоновые кислоты.

На этой основе разработаны новые методы получения 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот и 4-замещенных 8-сульфамоил-2,3-дигидро-1#-пирроло[3,4-с]-хинолин-1,3-дионов различных производных на этой основе.

Практическая значимость

В результате проведенных исследований стали легко доступными новые перспективные физиологически активные соединения, а именно, лекарственные препараты широкого спектра применения; патентоспособными являются эти соединения и методы их синтеза.

Обнаружен новый хемотип непептидных ингибиторов каспаз-3 - замещенные хинолинкарбоновые кислоты и их производные, обладающие физиологической активностью, в том числе специфической. Это позволяет использовать их в качестве «молекулярных инструментов», а также активных лекарственных субстанций, селективно подавляющих программируемую клеточную смерть (апоптоз).

Все синтезированные в ходе исследований целевые молекулярные системы протестированы на биологическую активность связи структура - in vitro ингибирующая каспазу-3-активность, найдены высокоэффективные ингибиторы каспазы-3, установлены наиболее перспективные для дальнейшей оптимизации лидеров сульфамоильные группировки.

Созданы комбинаторные библиотеки разнообразных производных хино-лин- и 2-хинолон-4-карбоновых кислот с подтверждением биологической активности представленных молекулярных систем.

Положения, выносимые на защиту

Новые замещенные 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновые и 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновые кислоты, 4-замещенные 8-сульфамоил-2,3-дигидро-1Я-пирроло[3,4-с]хинолин-1,3-дионы и способы их получения.

Необычное направление реакции Пфитцингера 5-сульфамоилизаинов в водно-спиртовой щелочной среде при образовании in situ этаналя, который выигрывает конкуренцию у диэтилмалоната, приводящее к неизвестным ранее 6-сульфамоилхинолин-4-карбоновым кислотам.

Использование в реакции Пфитцингера в качестве изатиновой компоненты соли изатин-5-сульфокислоты и 3,3-дихлор-2-оксо-1,2-дигидро-1/7-индол-5-сульфокислоты.

Комбинаторные библиотеки разнообразных производных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот, б-сульфамоил-хинолин-4-карбоновых и 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот с подтверждением биологической активности представленных молекулярных систем.

1 ЛИТЕРАТУРНЫМ ОБЗОР

Производные функционально замещенных молекулярных систем ряда хинолина являются биологически активными соединениями широкого спектра действия. С этой точки зрения весьма перспективными являются производные хинолин- и хинолонкарбоновых кислот, имеющие высокий фармакологический потенциал благодаря широким возможностям их дальнейшей функционализации. Эффективным методом синтеза данных соединений является реакция Пфитцингера [1-6] (ее также называют реакцией Пфитцинге-ра-Борше [5]).

Превращение изатина и его замещенных аналогов 1.1 в замещенные хи-нолин-4-карбоновые (цинхониновые) кислоты 1.3 при действии кетонов 1.2, имеющими в а-положении к карбонильной метиленовую группировку -СН2-СО-, в присутствии щелочей - КОН или NaOH - впервые обнаружено и описано в 1886 году Пфитцингером [7]: сн, X 12 о O R" С02н

ОН О

-н2о

2) Н - (1Л)

Следует отметить постоянно возрастающий интерес к этой реакции, обусловленный ее широкими возможностями в плане синтеза перспективных биологически активных веществ. Варьируя субстрат и реагент (1.1 и 1.2 соответственно), можно синтезировать из доступных исходных соединений с хорошими выходами чрезвычайно широкую гамму производных хинолин-карбоновых кислот (ХКК). Подобное варьирование позволит при построении скелета данных молекулярных систем ввести в них необходимые функциональные группы для перехода к целевым продуктам минимальными средствами.

выводы

1. Обнаружено необычное превращение 5-сульфамоилизаинов в водно-спиртовой щелочи с образующимся в условиях реакции Пфитцингера этана-лем, который выигрывает конкуренцию за субстрат у малонового эфира, приводящее к неизвестным ранее 6-сульфамоилхинолин-4-карбоновым кислотам. На их основе произведена жидкофазным параллельным синтезом комбинаторная библиотека 214 разнообразных 6-сульфамоилхинолин-4-карбоксамидов.

2. Впервые с использованием реакции Пфитцингера разработан способ получения и осуществлен синтез неизвестных ранее замещенных 2-оксо-6-сульфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновых кислот, на основе которых разработан протокол производства и произведена жидкофазным параллельным синтезом комбинаторная библиотека 373 разнообразных 2-оксо-6-сул ьфамоил-1,2-дигидрохинолин-4-карбоксамидов.

3. Впервые в качестве изатиновой компоненты в реакции Пфитцингера использованы коммерчески доступные натриевая соль изатин-5-сульфокислоты и 3,3-дихлор-2-оксо-1,2-дигидро-1Я-индол-5-сульфокислота, в результате чего стали легко доступными неизвестные разнее 4-замещенные 6-сульфохинолин-3,4-дикарбоновые кислоты.

4. Разработан протокол производства и произведена жидкофазным параллельным синтезом комбинаторная библиотека 352 разнообразных 4-замещенных 8-сульфамоил-2,3-дигидро-1#-пирроло[3,4-е]хинолин-1,3-дионов двумя альтернативными путями: как через пиридиниевые соли 4-замещенных 1,3-диоксо-1,3-дигидро-фуро[3,4-с]хинолин-8-сульфокислот, так и последовательным взаимодействием 6-сульфамоилхинолин-3,4-дикарбоновых кислот с карбодиимидазолом и циклизацией образующихся имидазолидов первичными аминами.

5. Разработан метод получения широкого ряда 4-замещенных 8-сульфамоил-2,3-дигидро-1#-пирроло[3,4-с]хинолин-1,3-дионов последовательным превращением 4-оксо-8-сульфамоил-2,3-дигидро-1#-пирроло[3,4с]хинолин-1,3-дионов в 4-хлор-8-сульфамоил-2,3-дигидро-1#-пирроло[3,4-с]хинолин-1,3-дионы и взаимодействием последних с различными нуклео-филами или введением их в реакцию Судзуки.

6. На основании исследования связи структура - in vitro ингибирующая каспазу-3-активность установлены наиболее перспективные для дальнейшей оптимизации сульфамоильные группировки. Лидером этого ряда соединений является 2-(2-ацетилоксиэтил)-4-метил-8-(морфолино-4-сульфонил)-2,3-дигидро-1#-пирроло[3,4-с]хинолин-1,3-дион, для которого IC50 = 23 jliM. Показано, что переход от 2-(2-гидроксиэтил)-4-метил-8-сульфамоил-2,3-дигидро-1Я-пирроло[3,4-с]хинолин-1,3-дионов к 2-(2-ацетилоксиэтил)-производным сопровождается 1.3-5- кратным увеличением ингибирующей каспазу-3 активности.

1. Р. Джулиен, Э. Мейер, Э. Принта, в кн.: Гетероциклические соединения. Под ред. Р. Эльдерфилда, пер. с англ. Н.К. Кочеткова, И.Ф. Луценко, Г.Я. Кондратьевой, изд-во иностр. лит., М., 1954,3, 357 с.

2. Изатин и его производные, Штиинца, Кишинев, 1977, с. 228.

3. F. D. Рорр, in: Adv. Heterocycl. Chem., Ed. A. Katritzky, A.J. Boulton, Acad. Press, N.-Y., San Francisco, London, 1975,18, 2.

4. А. Серрей. Справочник no органическим реакциям. Пер. с англ. М., 1962.

5. В. К. Вацуро, Г. Л. Мищенко, Именные реакции в органической химии, Химия, М., 1976,

6. М.-Г. А. Швехгеймер, ХГС, 323 (2004).

7. W. Pfitzinger, J. Prakt. Chem., 33, 100 (1886).

8. J. F. V. da Silva, S. J. Garden, A. C. Pinto, J. Braz. Chem. Soc., 12, 273 (2001).

9. M. Alam, M. Younas, M. A. Zafar et al, Pat J. Sci. Ind. Res., 32,246 (1989).

10. S. J. Garden, J. C. Torres, A. A. Ferreira et al, Tetrahedron Lett., 38, 1501 (1997).

11. R. R. Smolders, A. Waefelaer, D. Frascart, Ing. Chim. (Brussels), 64, 5, (1982).

12. Пат. 79-771 Япония (1979); Chem. Abstrs, 91, 19317 (1979).

13. W. M. Bryant III, G. F. Huhn, J. H. Jensen et al, Synt. Commun. 23, 1617 (1993).

14. W. A. Lopes, G. A. Silva, L. C. Sequeira et al, J. Braz. Chem. Soc., 4, 273 (1993).

15. W. J. Welstead Jr., H. W. Moran, H. F. Stauffer et al, J. Med. Chem., 22, 1074 (1979).

16. A. Tailor, J. Chem. Res. (S) 347 (1980).

17. К. C. Rice, B. J. Boone, A. B. Rubin, T. J. Rauls, J. Med. Chem., 19, 887 (1976).

18. P. G. Gassman, B. W. Cue Jr., T. Y. Lue, J. Organ. Chem., 42, 1334 (1977).

19. Пат. 4188325 США (1980); Chem. Abstrs, 90,45482 (1980).

20. Пат. 4252723 США (1981); Chem. Abstrs, 93, 204455 (1981).

21. S. W., Write, L. D. McClure, D. L. Hageman, Tetrahedron Lett., 37, 4631 (1996).

22. P. Hewawasam, N. Meanwell, Tetrahedron Lett., 35, 7303 (1994).

23. C. Rivalle, E. Bisogni, J. Heterocyclic Chem., 34,441 (1997).

24. K. Smith, G. A. El-Hiti, A. C. Hawes, Synlett, 945 (1999).

25. Y. Cheng, S. Goon, 0. Meth-Cohn, J. Chem. Soc., Per kin Trans. 1, 1619 (1998).

26. M. Ishida, G. Prota, Gazz. Chim. Ital. 116,407 (1986).

27. T. Ohnuma, H. Kasuya, Y. Kimura, Y. Ban, Heterocycles, 17,377 (1982).

28. G. Beggiato, G. Casalboremictli, A. Geri, D. Pietropaolo, Ann. Chim., 83, 355 (1993).

29. M. В. Горелик, ji. С. Эфрос, Основы химии и технологии ароматических соединений, Химия, М., 1992, 640 с.

30. М. N. Palmer, P. S. Mclntyre, J. Chem. Soc. В, 639 (1969).

31. С. F. Koelsch, J. Org. Chem., 16,1362 (1951).

32. C. Enhelhard, J. Prakt. Chem., 57,467 (1898).

33. W. Borsche, O. Vorbach, Liebigs Ann. Chem., 537,22 (1938).

34. H. R. Henze, D. W. Carroll, J. Am. Chem. Soc., 76,4580 (1954).

35. Ng. Ph. Buu-Hoi, R. Royer, J. Chem. Soc., 106 (1948).

36. Ng. Ph. Buu-Hoi, R. Royer, N. D. Xuong, P. J. Jacquigton, J. Organ. Chem., 18,1209(1953).

37. H. R. Henze, J. W. Melton, E. O. Forman, J. Am. Chem. Soc., 70,2622 (1948).

38. L. B. Cross, H. R. Henze, J. Am. Chem. Soc., 61,2730 (1939).

39. A. M. Dowell, H. S. McCullough, P. K. Calaway, J. Am. Chem. Soc., 70, 2261948).

40. R. L. Sublett, P. K. Calaway, J. Am. Chem. Soc., 70, 764 (1948).

41. N. Okuda, J. Pharm. Soc. Jpn., 71,1275 (1951).

42. J. A. Knight, H. K. Porter, P. K. Calaway, J. Am. Chem. Soc., 66,1893 (1944).

43. P. K. Calaway, H. R. Henze, J. Am. Chem. Soc., 61, 1355 (1939).44. 0. Newel, P. K. Calaway, J. Am. Chem. Soc., 69, 116 (1947).

44. W. Pfitzinger, J. Prakt. Chem., 38, 582 (1888).

45. W. Pfitzinger, J. Prakt. Chem., 56,283 (1897).

46. П. H. Рабинович, В. К. Дзиркал, Хим-фарм. пром., 271 (1933).

47. Т. Ujiie, Chem. Pharm. Bull., 14,461 (1966).

48. P. С. Беленькая, В. В. Лопачев, А. Е. Липкин, Хим-фарм. жури., 9, № 7, 131975).

49. В. Б. Брасюнас, Т. А. Андреянова, Т. С. Сафонова и др., ХГС, 819 (1988).

50. J. Halberkann, Berichte, 54,3090 (1921).

51. V. Q. Yen, Ng. Ph. Buu-Hoi, N. D. Xuong, J. Organ. Chem., 23,1858 (1958).

52. E. R. Buchman, H. Sargent, Т. C. Myers, J. A. Seneker, J. Am. Chem. Soc.,68,2692 (1946).

53. G. Y. Sarkis, J. Chem. Eng. Data, 17,388 (1972).

54. W. Borche, H. Weusmann, A. Fritzsche, Berichte, 57,1770 (1924).

55. W. Borche, M. Wagner-Roemmich, Liebigs Ann. Chem., 544,274 (1940).

56. Ng. Ph. Buu-Hoi, J. Chem. Soc., 795 (1946).

57. G. B. Crippa, E. Scevola, Gazz. Chim. ltal., 67,119 (1937).

58. Пат. 02-96566 Япония (1990); Chem. Abstrs, 113,132016 (1990).

59. G. Stefanovic, M. Pavicic-Woss, L. Lorenc, M. L. Mihailovic, Tetrahedron, 6,97 (1959).

60. A. Godarg, G. Queguiner, J. Heterocycl. Chem., 21, 27 (1984).

61. Sh. D. Lesense, H. R. Henze, J. Am. Chem. Soc., 64,1897 (1942).

62. А. Л. Гершунс, А. А. Павлюк, Укр. хим. журн., 30,1086 (1964).

63. М. М. Rapport, А. Е. Senear, J. F. Mead, J. В. Koepfli, J. Am. Chem. Soc., 68,2695 (1946).

64. W. Langenbeck, D. Heuchel, Monatsh. Chem., 98, 535 (1967).

65. H. Waldmann, J. Prakt. Chem., 147,338 (1936).

66. Ng. Ph. Buu-Hoi, P. Jacquingnon, Compt. rend., 244, 786 (1957).

67. R. J. Bass, Chem. Ind. (London), 849 (1973).

68. A. Ermili, R. Guiliano, Gazz. Chim. Ital., 89, 517 (1959).

69. R. F. Brown, Th. L. Jacobs, S. Winstein et al, J. Am. Chem. Soc., 68, 27051946).

70. J. Brown, L. Brauns, Berichte, 60, 1253 (1927).

71. P. Kranzlein, Berichte, 70,1776 (1937).

72. E. R. Buchman, Ch. M. McCloskey, J. A. Seneker, J. Am. Chem. Soc., 69, 3801947).

73. Пат. 2166297 Франция (1974); Chem. Abstrs, 80,27120 (1974).

74. Ch. Prevost, J. Filippi, P. Grammaticakis, Compt. rend., 258,954 (1964).

75. Ш. А. Аветян, А. С. Азарян, А. А. Ароян, Арм. хим. журн., 26, 763 (1973).

76. Р. С. Беленькая, У. И. Бореко, М. Н. Земцова и др., Хим-фарм. журн., 15,3,29(19815).

77. Ng. Ph. Buu-Hoi, R. Royer, Bull. Soc. Chim. Fr., 14, 820 (1947).

78. Ng. Ph. Buu-Hoi, J. Chem. Soc., 2882 (1949).

79. Ng. Ph. Buu-Hoi, P. Cagniant, Bull Soc. Chim. Fr., 13,123 (1946).

80. Ng. Ph. Buu-Hoi, Compt. rend, 224,1363 (1947).

81. E. R. Buchman, H. Sargent, Т. C. Myers, J. A. Seneker, J. Am. Chem. Soc., 68,2710 (1946).

82. J. S. Gillespie, R. J. Rowlett, R. E. Davis, J. Med. Chem., 11,425 (1968).

83. Ng. Ph. Buu-Hoi, P. Cagniant, Bull. Soc. Chim. Fr., 13, 134 (1946).

84. Ng. Ph. Buu-Hoi, P. Cagniant, Bull. Soc. Chim. Fr., 13, 374 (1946).

85. G. P. Mueller, R. E. Stobaugh, J. Am. Chem. Soc., 73,1598 (1950).

86. L. C. March, W. A. Romanchick, G. S. Bajwa, M. M. Joulie, J. Med. Chem.,16,337(1973).

87. Б. И. Ардашев, А. С. Зарифьян, Г. Г. Глуховец, ХГС, 525 (1972).

88. Пат. 4680299 США (1987); РЖХим, 140114П, (1988).

89. Пат. 4861783 США (1990); РЖХим, 17053П, (1990).

90. Ng. Ph. Buu-Hoi, М. Sy М, J. Riche, J. Organ. Chem., 22, 668 (1957).

91. A. Etienn, Bull. Soc. Chim. Fr., 16, 515 (1949).

92. E. A. Robinson, М. Т. Bogert, J. Organ. Chem., 1, 65 (1936).

93. M. De Clercq, Ng. Ph. Buu-Hoi, Compt. rend., 227, 1251 (1948).

94. M. De Clercq, Ng. Ph. Buu-Hoi, Compt. rend., 227,1377 (1948).

95. E. J. Cragoe, M. D. Bealor, Ch. M. Robb et al, J. Organ. Chem., 18, 561,1953).

96. Пат. 305952 Европа (1989); Chem. Abstrs, 11, 97106 (1989).

97. Пат. 3799929 США (1975); РЖХим, 2087П, (1975).

98. P. Cagniant, A. Deluzarche, Compt. rend., 223, 1148 (1946).

99. P. Cagniant, A. Deluzarche, Compt. rend., 225, 455 (1947).

100. Ng. Ph. Buu-Hoi, Nguen-Hoan, Rec. trav. chim., 67, 309 (1948).

101. W. Steinkopf, H.-J. Petersdorff, LiebigsAnn. Chem., 543,149 (1939).

102. M. H. Земцова, П. Jl. Трахтенберг, А. Е. Липкин, Т. Б. Рыскина, Хим-фарм. журн., 7, № 8,13 (1973).

103. М. Th. Nguien, V. С. Pham, Т. Н. Le, Nh. N. Truong, Тар Chi Hoa Hoc., 21, № 3,27 (1983); Chem. Abstrs, 100, 138919 (1984).

104. G. Sarodnick, G. Kempter, Phamazie, 40,384 (1985).

105. А. Л. Гершунс, П. Я. Пустовар, ХГС, 641 (1971).

106. А. Л. Гершунс, А. Н. Бризицкая, П. Я. Пустовар, ХГС, 1536 (1973).

107. G. Y. Sarkis, J. Chem. Eng. Data, 17,388 (1972).

108. H. Gilman, L. Tolman, S. P. Massie, J. Am. Chem. Soc., 68, 2399 (1946).

109. G. J. Atwell, В. C. Baguley, W. A. Denny, J. Med. Chem., 32,396 (1989).

110. Ng. Ph. Buu-Hoi, R. Royer, Rec. trav. chim., 67, 175 (1948).

111. J. Servoin-Sidonine, M. Montaigne-Lepine, G. Saint-Ruf, Bull. Soc. Chim. Fr., 40,1460(1973).

112. M. Jancevska, V. Prisaganec, Croat. Chem. Acta, 46, 65 (1974).

113. W. Borche, Liebigs Ann. Chem., 2,11, 21A (1910).

114. Ng. Ph. Buu-Hoi, Т. B. Loc, N. D. Xuong, Bull. Soc. Chim. Fr., 37, 174 (1970).

115. Л. E. Холодов, Г. П. Сырова, В. Г. Яшунский, ХГС, 78 (1970).

116. М. Loss, Н. Stafford, J. Chem. Soc., 1680 (1959).

117. И. Ф. Тищенкова, Л. Е. Холодов, В. Г. Яшунский, ХГС, 102 (1971).

118. М. Cirje, Rev. Roum. Chim., 18, 1013 (1973).

119. А. П. Стурис, Ю. А. Банковский, Изв. АН ЛатвССР, Сер. хим., 740 (1989).

120. Ng. Ph. Buu-Hoi, Т. В. Loc, P. J. Jacquignon, J. Chem. Soc., 738 (1958).

121. Ng. Ph. Buu-Hoi, R. Royer, Rec. trav. chim., 66,305 (1947).

122. P. J. Jacquignon, Ng. Ph. Buu-Hoi, J. Org. Chem., 22, 72 (1957).

123. E. Noelting, A. Herzbaum, Berichte, 44,2585 (1911).

124. Ng. Ph. Buu-Hoi, P. Cagniant, Bull. Soc. Chim. Fr., 11, 343 (1944).

125. F. A. Al-Tai, A. M. El-Abbady, A. S. Al-Tai, J. Chem. U. A. R., 10, 339 (1967); Chem. Abstrs, 69, 86801 (1968).

126. Пат. 4918077 США (1990); Chem. Abstrs, 113,115114 (1990).

127. A. Hassner, M. J. Addadin, J. Org. Chem., 27,1911 (1962).

128. Ng. Ph. Buu-Hoi, P. Cagniant, Berichte, 77,118 (1944).

129. R. R. Smolders, A. Waefelaer, R. Commans et al, Bull. Soc. Chim. Belg., 91, 33 (1982).

130. J. R. Hlubucek, E. Ritchie, W. C. Taylor, Austr. J. Chem., 23,1881 (1970).

131. A. Allais, J. Guillaume, A. Poittevin et al, Eur. J. Med. Chem., 17, 371 (1982).

132. P. Cagniant, A. Deluzarche, Compt. rend., 223, 808 (1946).

133. R. F. Brown, K. J. Coulston, F. W. Eastwood, M. R. Moffat, Tetrahedron, 48, 7763 (1992).

134. J. Wang, G. Jiang, W. Fang, J. Yin, Zhongguo Yiyao Gongye Zazhi, 22, 193 (1991); Chem. Abstrs, 115, 83138 (1991).

135. Г. А. Климов, В. А. Стоник, M. H. Тиличенко,ХГС, 821 (1973).

136. R. Madhav, Ph. L. Southwick, J. Heterocycl. Chem., 9,443 (1972).

137. J. A. Gainor, St. M. Weinreb, J. Organ. Chem., 47,2833 (1982).

138. Th. S. Work, J. Chem. Soc., 426 (1942).

139. A. E. Senear, H. Sargent, J. F. Mead, J. B. Koepfli, J. Am. Chem. Soc., 68, 2695 (1946).

140. J. A. Gainor, St. M. Weinreb, J. Organ. Chem., 46, 4317 (1981).

141. Э. Дж. Крэго, Ч. M. Робб, в сб. Синт. орг. преп., изд-во иностр. лит., М., 1964,12,123.

142. Е. J. Cragoe, Ch. М. Robb, М. D. Bealor, J. Org. Chem., 18, 552 (1953).

143. Пат. 4268513 США (1982); РЖХим, 20127П, (1982).

144. R. W. Irvine, J. C. Summers, W. C. Taylor, Austr. J. Chem., 36,1419 (1982).

145. Ng. Ph. Buu-Hoi, R. Royer, Compt. rend., 223, 806 (1946).

146. Ф. H. Кост, M. А. Юровская, M. H. Txao, ХГС, 1512 (1975).

147. Ф. H. Кост, M. А. Юровская, M. Т. Нгуэн, A.c. 513032 СССР (1977); РЖХим, 70143П, (1977).

148. Г. Т. Татевосян, А. Г. Терзян, С. П. Экмеджан, Изв. АН АрмССР, 325, (1964).

149. Ch. Kaneko, Н. Fujii, Sh. Kawai et al, Chem. Pharm. Bull., 30, 74 (1982).

150. W. Pfitzinger, J. Prakt. Chem., 66, 263 (1902).

151. M. Haring, G. Still, Helv. Chim. Acta, 44, 642 (1961).

152. W. Ried, F. Kohlhaas, Liebigs Ann. Chem., 707, 242 (1967).

153. H. Meyer, Liebigs Ann. Chem., 721,1545 (1981).

154. W. Ried, P. Weidemann, Berichte, 104,3341 (1971).

155. R. Walter, J. Prakt. Chem., 67, 504 (1903).

156. О. M. Радул, С. M. Буханюк, М. А. Рехтер и др., ХГС, 1427 (1982).

157. И. К, Моисеев, М. Н. Земцова, П. JI. Трахтенберг и др., Хим-фарм. журн., 22, № 9,1448(1988).

158. Е. Zrike, Н. G. Lindwall, J. Am. Chem. Soc., 58, 49 (1936).

159. J. A. Aeshliman, J. Chem. Soc., 2902 (1926).

160. Yo. Kawase, S. Yamaguchi, O. Maeda et al, J. Heterocycl. Chem., 16, 487 (1979).

161. S. Yamaguchi, K. Tsuzuki, M. Kinoshita et al, J. Heterocycl. Chem., 26, 281 (1989).

162. W. Borche, W. Jacobs, Berichte, 47, 354 (1914).

163. Пат. 76-41429 Япония (1976); Chem. Abstrs, 85, 73443 (1976).

164. F. J. Di Carlo, H. J. Lindwall, J. Am. Chem. Soc., 67,199 (1945).

165. Th. Jacobs, S. Winstein, G. B. Linden et al, Org. Synt. 3,456 (1955).

166. J. Buchi, H. Hurni, R. Lieberherr, Helv. Chim. Acta, 32,1806 (1949).

167. R. A. Egli, C. Richter, Helv. Chim. Acta, 40,499 (1957).

168. R. E. Lyle, D. E. Portlock, M. J. Kane, J. A. Bristol, J. Organ. Chem., 37, 3967 (1972).

169. Заявка 61-91162 Япония (1986); Chem. Abstrs, 105, 208605 (1986).

170. P. Rajamanickam, P. Shanmugan, Synthesis, 541 (1985).

171. P. S. Mohan, P. Rajamanickam, P. Ayyasamy et al, Indian J. Chem. Sec. B, 28B, 270(1989).

172. A. Jain, A. K. Mukerjee, Indian J. Chem. Sec. В, 26B, 1102 (1987).

173. B. A. Johnsen, K. Undheim, Acta Chim. Scand., 38B, 109 (1984).

174. M. Д. Машковский, Лекарственные средства, Медицина, М., 1977, 1, 624 е., 2,560 с.

175. М. М. Кацнельсон, Приготовление синтетических химико-фармацевтических препаратов, М., Гостехиздат, 1923,299 с.

176. S. F. Chen, L. М. Рарр, R. J. Ardecky et al, Biochem. Pharmacol., 40, 709 (1990).

177. G. Eastland Jr., J. Prous, J. Castacer, Drugs Future, 13,13 (1988).

178. L. Dejmek, Drugs Future, 15,126 (1990).

179. G. A. Giardina, L. F. Raveglia, M. Grundi et al, J. Med. Chem., 42, 10531999).

180. L. W. Deady, J. Desneves, A. J. Kaye et al, Bioorg. Med. Chem., 8, 9772000).

181. Пат. 5371225 США (1993); Chem. Abstrs, 120,217318 (1994).

182. Пат. 5604235 США (1994); Chem. Abstrs, 120, 106976 (1994).

183. WO 0238547 (2002); Der. Abstrs, C, 454769 (2002).

184. Пат. 0458636 Европа (1995); Chem. Abstrs, 125,202043 (1996).

185. P. Desos, E. Ruano, H. Al-Badri et al, Drugs Future, 27 (A), 212 (2002).

186. R. Ciusa, Gazz. Chim. Ital., 72, 567-570 (1942).

187. A. Godard, G. Queguiner, J. Heterocycl. Chem., 17,465 (1980).

188. E. Campaigne, J. H. Hutchinson, J. Heterocycl. Chem., 7, 655 (1970).1901. Ganjian, M. Khorshidi, I. Lalezari, J. Heterocycl. Chem., 28,1173 (1991).

189. A. V. Ivachtchenko,. V. V. Kobak, A. P. Il'yin et al, J. Comb. Chem. 5, 645 (2003).

190. A. V. Ivachtchenko, V. V. Kobak,. J. A. Kuzovkova (Andreenko) et al, J. Comb. Chem., 7.227 (2005).

191. D. V. Kravchenko, J. A. Kuzovkova (Andreenko), V. V. Kysil et al, J. Med. Chem., 48. 3680 (2005).

192. Иващенко А. В., Кобак В. В,. Кузовкова (Андреенко) Ю. А. и др., Замещенные 6-сульфо-2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-карбоновые кислоты и их производные (варианты) и фокусированная библиотека. Патент RU2260002, публ. Бюл. № 25, 2005.

193. Иващенко, А.В., Кобак В.В., Кузовкова (Андреенко) Ю.А. и др., Хино-линкарбоновые кислоты, их производные, фокусированная библиотека. Международная заявка на патент РСТ RU 2004/000081, публ. WO 2004/078731, 2004.

194. А. V. Ivachtchenko, V. V. Kobak,. Y. A Kuzovkova (Andreenko) et al., Тези donoeideu XX Укртсък. конф. з оргашчног xmii, присвячена 75-р1ччю з дня народження акаделика О.В.Богатсъкого. Ч. I. Одесса, 2004, С. 188.

195. А. V. Ivachtchenko, V. М. Kysil. Y. A. Kuzovkova (Andreenko) et al., Тези donoeideu. XX Укртсък. конф. з оргамчно! xmii, присвячена 75-piumo з дня народження акаделика О.В. Богатського. Ч. /. Одесса, 2004, С. 184.

196. А. V. Ivachtchenko, V. М. Kysil,.Y. A. Kuzovkova et al., Тези donoeideu XX Укртськ. конф. з оргатчно1 xmii, присвячена 75-р1ччю з дня народження академта О.В. Богатського. Ч. I. Одесса, 2004, С. 179.

197. А. V. Ivachtchenko, V. М. Kysil,.Y. A. Kuzovkova (Andreenko) et al., Тези donoeideii XX Укртсък. конф. з оргашчног xmii, присвячена 75р'тчю з дня народження акаделика О.В. Богатсъкого. Ч. I. Одесса,2004, С. 176.

198. А. V. Ivachtchenko, V. М. Kysil, Y. A. Kuzovkova (Andreenko) et al., Abstrs of Scientific Papers of the 9th National Conference on "Bioactive Heterocycles and Drug Discovery Paradigm", P-142. -Rajkot, Gujarat, India,2005, P. 184.

199. A. V. Ivachtchenko, N. Savchuk N.,. Y.A Kuzovkova (Andreenko). et al., Abstrs of Scientific Papers of the 9th National Conference on "Bioactive Heterocycles and Drug Discovery Paradigm", P-142. Rajkot, Gujarat, India, 2005, P. 185.

200. A. V. Ivachtchenko, N. Savchuk,.Y. A. Kuzovkova (Andreenko) et al., Abstrs of Scientific Papers of the 9th National Conference on "Bioactive Heterocycles and Drug Discovery Paradigm" P-142. Rajkot, Gujarat, India, 2005, P. 186.

201. D. V. Kravchenko, Y. A. Kuzovkova (Andreenko), V. V. Kysil et al., Book and Abstrs of Scientific Papers of the 2(fh International Congress of Heterocyclic Chemistry. Palermo-Italy, 2005,2-РОЗ, P. 316.

202. D. V. Kravchenko, Y. A. Kuzovkova (Andreenko), V. V. Kysil et al., Book and Abstracts of the 2(fh International Congress of Heterocyclic Chemistry. -Palermo-Italy, 2005, 2-P014, P. 327.

203. А.В.Иващенко, Д.В. Кравченко, Ю.А. Андреенко и др., Изв. Вузов. Химия и хим. технология. 2006, Т.49, Вып.6, С. 53-59.

204. А. V. Ivachtchenko, V. V. Kobak, А. V. Khvat et al., Book and Abstracts of the 19th International Congress of Heterocyclic Chemistry. Fort Collins, CO, 2003,2-РОЮ5, P. 205.

205. Kravchenko D.V., Kuzovkova (Andreenko) Y.A., Kysil V.V. et al. American Chemical Society, Division of Medicinal Chemistry, Abstracts, 22$h ACS National Meeting, San Diego, С A, 2005,405.

206. Kravchenko, D.V.; Kuzovkova (Andreenko), Y.A.; Kysil, V.V. et al. American Chemical Society, Division of Medicinal Chemistry, Abstracts, 229th ACS National Meeting, San Diego, С A, 2005,4045.

207. N. Miyaura, A. Suzuki, Chem. Rev. 95,2457 (1995).

208. In: Apoptosis: Pharmacological Implications and Therapeutic Opportunities, Ed. S. H. Kaufmann, Academic Press, San Diego, 1997.

209. V. L. Cryns, J. Yuan, In: When Cells Die, Eds. R. A. Lockshin, Z. Zakeri, J.

210. Tilly,, Wiley- Liss: New York, 1998,177.

211. D. W. Nicholson, N. A. Thornberry, Trends Biochem. Sci. 22, 299 (1997).

212. D. W. Nicholson, Cell. Death. Differ., 6,1028 (1999).

213. A. G. Porter, R. U. Janicke, Cell Death Differ., 6, 99 (1999).

214. J. Chapman, W. Magee, H. Stukenbrok et al, Eur. J. Pharmacol. 456, 59 (2002).

215. C. Scott, C. Sobotka-Briner, D. Wilkins et al, Pharmacol. Exp. Therap. 304 (1), 433 (2003).

216. D. Anselmo, M. Katori, M. Kaldas et al, Amer. J. Transplant. 2 (3), 920 (2002).

217. M. Garcia-Calvo, E. Peterson, B. Leiting et al, J. Biol. Chem. 273, 32608 (1998).

218. D. Karanewsky, X. Bai, S. Linton et al, Bioorg. Med. Chem. Lett. 8, 2757 (1998).

219. D. Lee, S. A. Long, J. H. Murray, et al, J. Med. Chem. 44, 2015 (2001).

220. H. R. Stennicke, G. S. Salvesen, J. Biol Chem., 272,25719 (1997).

221. S. W. Burchiel et al, Methods, 21,221-230 (2000)

222. Technology Platform, In: Custom Chemistry, Chemical Diversity Labs, Inc.: San Diego, CA, 5 (2002); Available at http://www.chemdiv.com.

223. T. P. Misko, M. K. Highkin, A. W. Veenhuizen et al, J Biol Chem., 273, 15646 (1998).