Строение свойства нативных агликонов тритерпеновых гликозидов голотурий тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. Строение и свойства генинов из тритерпеновых гликозидов голотурий.

2.1. Введение.

2.2. Генины гликозидов голотурий сем. Holothuriidae.

2.2.1. Строение генинов из голотурина A A. agassizi.

2.2.2. Голотуриногенины и гомоаннулярные диены.

2.2.3. Артефактные предшественники голотуриногенинов.

2.2.4. Нативные агликоны гликозидов голотурий сем. Holothuriidae.

2.3. Генины гликозидов голотурий сем. stichopodidae.

2.3.1. Стихопогенины из гликозидов S. japonicus.

2.3.2. Генины гликозидов S. chloronotue, Т. ananas,

A. multifidus.

2.4. Генины гликозидов голотурий сем. Cucumariidae.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

3.1. Введение.

3.2. Изучение нативных агликонов в гликозидах голотурий сем. Stichopodidae методом АОС-ЯМР-спектроскопии

3.3. Выделение нативного агликона голотоксина Aj.

3.4. Строение нативных агликонов гликозидов голотурий

S. chloronotue, Т. ananas, A. multifidus.

3.5. Нативные агликоны гликозидов голотурии в. argue.

3.6. Нативные агликоны гликозидов голотурии ^aponica.

3.7. Строение стихопозидов А и В из S. chloronotue.

4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

5. ВЫВОДА.

Физиологически активные тритерпеновые гликозиды голотурий обнаружены в начале 60-х годов японским биологом Яманоучи и его американским коллегой Нигрелли. Эти вещества сразу же привлекли внимание специалистов своей высокой цитотоксической активностью, антигрибковыми свойствами, способностью эффективно блокировать проведение нервного импульса. Вполне закономерно, что их исследование сосредоточилось в приморских странах - преимущественно в СССР, США и Японии, которые и сейчас играют главную роль в изучении этих соединений.

Широкий спектр физиологической активности тритерпеновых гликозидов голотурий открывает большие перспективы для их практического использования в качестве лекарств и биопрепаратов. В Японии, например, некоторые представители этой серии веществ уже успешно прошли клинические испытания и предложены как медицинские препараты для лечения грибковых поражений кожи* Поскольку в других таксонах животных тритерпеновые гликозиды не обнаружены, наличие их у голотурий весьма интересно и заслуживает определённого внимания. Естественно, что изучение биологической роли и физиологической активности тритерпеновых гликозидов голотурий, взаимосвязи между их структурой и функцией, создание на их основе лекарственных препаратов и т.д. может основываться только на знании полной структуры гликозидов» С другой стороны своеобразие этой группы соединений делает структурное исследование гликозидов голотурий важным разделом химии гликозидов, способным внести существенный вклад в развитие методов установления строения природных веществ. Таким образом, структурное исследование тритерпеновых гликозидов голотурий представляется достаточно актуальным»

Целью настоящей работы является выяснение строения натив-ных агликонов гликозидов голотурий и выявление их трансформаций в условиях гидролиза гликозидов. Решение этой задачи - один из важнейших этапов при определении полной структуры гликозидов.

Научная новизна и практическая ценность данного исследования связана с тем, что впервые удалось выделить в индивидуальном состоянии ряд нативных агликонов, установить их строение, изучить их химические свойства и спектральные характеристики. В результате работы разработаны общие подходы к получению нативных агликонов из гликозвдов голотурий. Показаны большие возможности спектроскопии *3С-ЩР для решения проблемы нативного аг-ликона. Расшифровка спектров *3С-ШР полученных агликонов существенно облегчает выяснение строения агликонов у неизвестных ранее гликозидов. Установлено полное строение двух таких гликозидов* Выявление путей химических превращений нативных агликонов важно для разработки лекарственных форм- на основе гликозидов голотурий, поскольку при этом определяются стабильность и направления трансформаций агликонов в кислотной и щелочной средах. Результаты данного исследования можно будет применить и при разработке методов анализа соответствующих гликозидных препаратов с целью их стандартизации.

Достовещость полученных результатов в ряде случаев подтверждена параллельными исследованиями зарубежных химиков, а также других сотрудников лаборатории биосинтеза Тихоокеанского иститута биоорганической химии ДВНЦ АН СССР, в которой проводилась настоящая работа.

- 6

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

СТРОЕНИЕ И СВОЙСТВА ГЕНИНОВ ТРИТЕРПЕНОВЫХ ГЛИК03ИД0В ГОЛОТУРИЙ.

2.1. Введение.

Голотурии - широко распространённая и издавна известная группа морских животных. За свой характерный внешний вид ещё Плиний называл их морскими огурцами, а некоторые виды описывал до этого Аристотель. Голотурии представляют собой малоподвижных донных животных, встречающихся во всех частях Мирового океана, от прибрежных районов до глубоководных зон океанических впадин. Около тысячи известных видов голотурий объединены в класс Hoio-thurioidea, тип Echinodermata (Иглокожие). Голотурии обычно имеют средние размеры 10-40 см в длину, однако эти размеры могут колебаться у разных видов от метра до нескольких миллиметров /I/.

Около пятидесяти видов голотурий используются в пищу человеком и известны в Юго-Восточной Азии под общим названием "трепанг". Промысел трепанга ведётся преимущественно в тропических и субтропических районах: водах Малайского архипелага, на островах Тихого океана, Филиппинах, у берегов Китая и Японии. В дальневосточных морях СССР промысловое значение имеют виды sticho-pus gaponicus и Cucumaria japonicа. Первый давно используется в виде консервов и сушёных продуктов, второй стал объектом промысла только в последние годы.

О токсичности некоторых голотурий для рыб впервые упоминается ещё в конце прошлого века /2/. А жители ряда островов Индийского и Тихого океанов издавна применяли их для умерщвления рыбы во внутренних водах коралловых атоллов и последующего потребления её в пищу /3/. Многие традиционно съедобные виды также содержат токсичные вещества, однако достоверные случаи отравления голотуриями не описаны. По-видимому, их токсичность теряется или значительно уменьшается при длительной кулинарной обработке и под действием пищеварительных ферментов /2,4/. В результате при пероральном введении физиологически активные вещества голотурий мало опасны для человека.

Токсины у голотурий содержатся в мышечных стенках или во встречающихся у многих видов кювьеровых органах (железах). Возможно, существует связь между этими органами и так называемым феноменом эвисцерации /5,6/. Эвисцерация наблюдается у голотурий в экстремальных условиях: воздействии высокой температуры, недостатке кислорода и т.д. Стимулируется этот процесс также при добавлении в воду, где содержатся эти животные, продуктов эвисцерации других голотурий. Эвисцерация сопровождается энергичными сокращениями мышечного мешка и заканчивается резким выбрасыванием наружу струёй воды ряда внутренних органов. Со временем эти органы регенерируются /6/. Голотурии остаются токсичными для рыб и после эвисцерации, так как токсины содержатся также в мышечной и эпителиальной тканях. Продукты эвисцерации одной голотурии вызывают гибель в замкнутом пространстве не только рыб, но и ряда других животных: ракообразных, моллюсков, аннелид, кишечнополостных /5/.

Токсин из мышечных мешков Holothuria vagabunda (Н. leuco-epilota) изучался Яманоучи с 1942 г., он называл его голотури-ном. Однако первые работы Яманоучи были опубликованы на японском языке и не привлекли внимания научных кругов /2/. В 1952 г. американский учёный Нигрелли выделил и назвал голотурином активное вещество из кювьеровых желез голотурии Actinopyga agassizi /7/.

Вскоре токсины были обнаружены примерно у тридцати видов голотурий /4,5/. В настоящее время количество видов, изученных на содержание токсинов, превышает пятьдесят /8-10/, причём относятся они к четырём отрядам класса Holothurioidea. Последний, пятый отряд (Elasipoda) объединяет труднодоступные глубоководные вида, ещё не исследованные в этом отношении. Наиболее хорошо изученными являются голотурии из отряда Aspidochirota, а в нём -таковые из семейства Holothuriidae.

Химическое исследование токсинов голотурий установило их принадлежность к тритерпеновым гликозидам. Подобные соединения не обнаружены в других группах животных, но широко распространены в мире растений. Способность голотурий синтезировать три-терпеновые гликозиды из ацетата и ланостерина показана в нескольких работах с использованием радиоактивных предшественников /П-13/, причём в случае ланостерина биосинтез проходил с эффективностью в 200 раз большей, чем при использовании ацетата.

Тритерпеновые гликозиды голотурий, подобно некоторым растительным сапонинам, могут образовывать комплексы с холестерином. Это свойство неоднократно применялось ранее для их выделения из высушенных кювьеровых органов или этанольного экстракта мышечных мешков. Широко известный голотурин из A. agassizi, очищенный таким способом, получил название голотурина А. Его содержание может достигать 40% сухого веса исходных кювьеровых желез /5/.

Влияние тритерпеновых гликозидов голотурий на различные биологические системы изучалось в основном на клеточном уровне.

Наиболее ярко выраженной оказалась антифунгальная (антигрибковая) активность /14-16/. Она проявляется в широком интервале концентраций от I до 100 мкг/мл, и наиболее сильнодействующие гликозиды оказывают 100% ингибирующий эффект при концентрациях 1-20 мкг/мл. Для сравнения можно отметить, что тритер-пеновые гликозиды растительного происхождения обычно проявляют антифунгальные свойства при значительно более высоких концентрациях - 500-1000 мкг/мл и выше /15/.

Действие тритерпеновых гликозидов на нервную проводимость исследовалось в основном Фризом и др. /17-22/ на примере голоту-рина А. При этом отмечалось многообразие его воздействий и необратимость связывания с хеморецепторами синапсов.

В ряде работ изучались другие типы физиологической активности? цитотоксическая /23-26/, гемолитическая /5/, антиопухолевая /7, 26-28/.

Механизм физиологического действия тритерпеновых гликозидов, вероятно, заключается в связывании стериновых компонентов клеточных мембран, что и приводит к нарушению их свойств /29,30/. Так, биологические объекты, не содержащие стеринов, устойчивы к действию гликозидов голотурий /10/.

Более подробно физиологическая активность тритерпеновых гликозидов голотурий и их возможная биологическая роль рассмотрены в обзоре /31/.

- 10

1. Баранова З.И. Класс морские кубышки. - В кн: Жизнь животных. М.: Просвещение, 1968, т.2, с.227-247.

2. Halstead B.W. The Holothurioidea or sea cucumbers. Im Poisonous and venomous marine animals of the World. Washington, D.C.: U.S. Goverment Printing Office, 1965, v.1, p.567-588.

3. Prey D.G. The use of sea cucumber in poisoning fishes. Co-peia, 1951, H 2, p.175-176.

4. Yamanouchi T. On the poisonous substance contained in holo-thurians. Publ. Seto Marine Biol. Lab., 1955, v.4, К 2, p.184-202.

5. Nigrelli R.P., Jakowska S. Effects of holothurin A, a steroid saponin from the Bahamian sea cucumber (Actinopyga agassi-zi), on various biological systems. Ann. N.Y. Acad. Sci., 1960, v.90, p.884-892.

6. Mosher C. Observations on evisceration and visceral regeneration of the sea cucumber Actinopyga agassizi Selenka. Zoo-logica, 1956, v.41, U 1, p.17-26,

7. Higrelli R.P. The effect of holothurin on fish and mice with Sarcoma-180. Zoologica, 1952, v.37, H 1, p.89-90.

8. Elyakov G.B., Stonik V.A., Levina E.V., Slanke V.P., Kuznet-sova T.A., Levin V.S. A comparative study of the glycoside fractions of Pacific sea cucumbers. Сотр. Biochem. Physiol. , 1973, v.44, H 2B, p.325-336.

9. Elyakov G.B., Kuznetsova T.A., Stonik V.A., Levin V.S., Albo-res R. A comparative study of the glycosides from Cuban sub-littoral holothurians. Сотр. Biochem. Physiol., 1975, v.52, N 3B, p.413-417.

10. Elyakov G.B. , Stonik V.A., Levina E.V*, Levin V.S. Biosynthesis of stichoposides from acetate. Сотр. Biochem. Physiol. , 1975, v.52, Н 2B, p.321-323.

11. Аниеимов М.М.-, Щеглов B.B., Стоник B.A., Кульга А.Л., Левина Э.В., Левин B.C., Еляков Г.Б. Сравнительное изучение антигрибковой активности тритерпеновых гликозидов тихоокеанских голотурий. Докл. АН СССР, 1972, т.207, № 3, е.711-713.

12. Kitagawa I., Sugawara Т., Yosioka I. Antifungal glycosides from the sea cucumber Stichopus japonicus Selenka. Structures of holotoxin A and holotoxin B. Chem. Parm. Bull., 1976, v. 24, N 2, p.275-284.

13. Friess S.L., Standaert F.G., Whitcomb E.R., Nigrelli R.F., Chanley J.D., Sobotka H. Some pharmacologic properties of holothurin, an active neurotoxin from the sea cucumber. -J. Pharm. Exptl. Therap., 1959, v.126, В 4, p.323-329.

14. Friess S.L., Durant R.C. Blockade phenomena at the mammalian neuromuscular synapse. Competition between reversible anticholinesterases and irreversible toxin. Toxicol. Appl. Pharm., 1965, v.7, p.373-381.

15. Friess S.L., Durant R.C., Chanley J.D., Mezetti T. Some structural requirements underlying holothurin A interactions with synaptic chemoreceptors. Biochem. Pharm., 1965, v#14, p.1237-1247.

16. Friess S.L., Durant R.C., Chanley J.D., Fash F.J. Role of the sulfate charge center in irreversible interactions of holothurin A with chemoreceptors. Biochem. Pharm., 1967, v.16, p.1617-1625.

17. Friess S.L» Mode of action of marine saponins on neuromuscular tissues. Fed. Proc., 1972, v.31» p.1146-1149.

18. De Groof R.C., Narahashi T. The effects of holothurin A on the resting membrane potential and conductance of squid axon. Europ. J. Pharm., 1976, v.36, U 2, p.337-346.

19. Ruggieri G.D., Ruggieri S.F., Higrelli R.F. The effects of holothurin, a steroid saponin from the sea cucumber, on the development of the sea-urchin. Zoologica, 1960, v.45, H 1, p.1-16.

20. Thron C.D., Durant R.C., Friess S.L. Neuromuscular and cytotoxic effects of holothurin A and related saponins at low concentration levels. Toxicol. Appl. Pharm., 1964, v.6, p.182-184.

21. Anisiraov M.M., Prokofieva H.G., Korotkikh L.Y., Kapustina I.I., Stonik V.A. Comparative study of cytotoxic activity of triterpene glycosides from marine organisms. Toxicon, 1980, v.18, p.221-223.

22. Pettit G.R., Herald D.I., Herald C.L. Antineoplastic agents. Sea cucumber cytotoxic saponins. J. Pharm. Sciences, 1976, v.65, H 10, p.1558-1559»

23. Nigrelli R.P., Zahl P.A. Some biological characteristics of holothurin. Proc. Soc. Exptl. Biol. Med., 1952, v.81, p.379-380.

24. Sullivan T.D., Ladue K.T., Higrelli R.F. The effects of holothurin, a steroid saponin of animal origin, on Krebs-2 ascites tumours in Swiss mice. Zoologica, 1955, v.40,H 1, p#49-52.

25. Корепанова E.A., Попов A.M., Анисимов M.M., Сидоров Е.П., Мольнар A.A., Антонов В.Ф. Действие тритерпеновых гликозидов на ионную проницаемость холестеринсодержащих бислойных липидных мембран. Докл. АН СССР, 1980, т.252, с.1261-1263.

26. Попов A.M., Ровин Ю.Г., Лихацкая Г.Н., Анисимов М.М., 1>уд-нев B.C. Особенности действия тритерпенового гликозида голотурина А на бислойные липид-стериновые мембраны. -Докл. АН СССР, 1982, т.264, с.987-990.

27. Анисимов М.М., Чирва В.А. О биологической роли тритерпеновых гликозидов. Успехи совр. биологии, 1980, т.90, с.351-364.

28. Nigrelli R.F., Chanley J.D., Kohn S.K., Sobotka H. The chemical nature of holothurin, a toxic principle from the sea cucumber (Echinodermata: Holothurioidea). Zoologica, 1955, v.40, U 1, p.47-48.

29. Chanley J.D., Leeden R., Wax J., Nigrelli R.P., Sobotka H. The isolation, properties and sugar components of holothurin A. J. Am. Chem. Soc., 1959, v.81, p.5180-5183.

30. Matsuno T., Yamanouchi T. A new triterpenoid sapogenin of animal origin (sea cucumber), r Nature, 1961, v.191, N 4783, p.75-76.

31. Chanley J.D., Mezzetti Т., Sobotka H. The holothurinoge-nins. Tetrahedron, 1966, v.22, N 6, p.1857-1884.

32. Dorfman L. Ultraviolet absorpsion of steroids. Chem. Rev., 1953, v. 53, N 1, p.47-144.

33. Физер Л., Физер M. Стероиды. М.: Мир, 1964, с.381-415.

34. Bancroft G., Haddad Y.M.Y., Summers G.H.R. Some reactions of 4,4,14o<-trimethyl-5oi-cholesta-8,25-dien-3o<-yl and 3£-yl toluene-p-sulphonates. J. Chem. Soc., 1961, p.3295-3303.

35. Веллюз Л., Легран M., Грожан М. Оптический круговой дихроизм. М.: Мир, 1967, с.136-142.

36. Habermehl G., Volkwein G. Aglycones of the toxins from the, Cuvierian organs of Holothuria forskali and a new nomenclature for the aglycones from Holothurioidea. Toxi-con, 1971, v.9, N 4, p.319-326.

37. TurschB., Guimaraes I.S.S., Gilbert В., AplinR.T., Duf-field A.M., Djerassi C. Griseogenin, a new triterpenoid sapogenin of the sea cucumber Halodeima grisea L. Tetrahedron, 1967, v.23, p.761-767.

38. Roller P., Djerassi C., Cloetens R., Tursch B. The isolation of three new holothurinogenins and their chemical correlation with lanosterol. J. Am. Chem. Soc., 1969, v.91, N 17, p.4918-4920.

39. Tursch В., Oloetens R., Djerassi C. Praslinogenin, a new holothurinogenin from the Indian Ocean sea cucumber Bohad-schia koellikeri. Tetrahedron Lett., 1970, p.467-470.

40. Habermehl G,, Volkwein G. Uber gifte der mittelraeerischen Holothurien. Naturwissen., 1968, v.55, p.83-84.45* Habermehl G., Volkwein G. Die aglyca der toxine von Holo-thuria polii. Liebigs. Ann. Chem., 1970, v.731, p.53-57.

41. Chanley J.D., Rossi C. Methoxylated neo-holothurinogenins. Tetrahedron, 1969, v.25, N 9, p.1897-1910.47* Chanley J.D., Rossi C. Heo-holothurinogenins by enzymatic hydrolysis of desulphated holothurin A. Tetrahedron, 1969, v.25, N 9, p.1911-1920.

42. Roller P., Tursch В., Djerassi C. Interrelation of sey-chellogenin and lanosterol through lanostane- 3/3,11J3,18-triol. J. Org. Chem.,1970, v.35, N 8, p.2585-2593.

43. Еляков Г.Б., Калиновская Н.И., Калиновский А.И., Стоник В.А. Кузнецова Т.А. Новые голотуриногенины голотурина Bj из Но-lothuria floridana. Химия природ, соединений, 1982, № 3, с.323-327.

44. Kitagawa I., Kobayashi М., Hori М., Kyogoku Y. Structures of four new triterpenoidal oligoglycosides, bivittosides A, В, С and D from the sea cucumber Bohadschia bivittata Mit-sukuri. Chem. Pharm. Bull., 1981, v.29, Ж 1, p.282-285.

45. Green G.F.H., Page J.E., Staniforth S.E. Proton magnetic resonance spectra of 11-oxo-steroids. J. Chem, Soc., 1965, p.7328-7337.

46. Green G.F.H., Page J.E., Staniforth S.E. Proton magnetic resonance spectra of д9(11) -steroidal 25R-sapogenins. -J. Chem. Soc., 1966,.p.807-813.

47. Shibata S., Tanaka 0., Sado M., Tsushima S. On genuine sa-pogenin of Ginseng. Tetrahedron Lett., 19бЗ, p.795-799.

48. Rothberg I., Tursch B.M., Djerassi C. 23-f-Acetoxy-17-de-oxy-7,8-dihydroholothurinogenin, a new triterpenoid sapogenin from a sea cucumber. J. Org. Chem., 1973, T*38,N 2, p.209-214.

49. Kitagawa I., Nishino T., Matsuno T., Akutsu H., Kyogoku У. Structure of holothurin B, a pharmacologically active tri-terpene-oligoglycoside from the sea cucumber Holothuria leu-cospilota Brandt.- Tetrahedron Lett., 1978, N 11, p.985-988.

50. Yasumoto T., Nakamura K., Hashimoto Y. A new saponin, holothurin B, isolated from sea cucumbers Holothuria vagabun-da and Holothuria lubrica. Arg. Biol. Chem.,1967, v.31,N 1, p.7-10.

51. Kitagawa I., Inamoto T., Fuchida M., Okada S., Kobayashi M., Nishino Т., Kyogoku Y. Structures of echinosides A and B, two antifungal oligoglycosides from sea cucumber Actinopyga echinites (Jaeger). Chem. Pharm. Bull., 1980, v.28, N 5, p.1651-1653.

52. Калинин В.И., Стоник В.А. Структура голотуриногенинаиз голотурии Holothuria edulis. Химия природ, соединений, 1982, № 2, с.2I5-2I9.

53. Олейникова Г.К., Кузнецова Т.А,, Ровных Н.В., Калиновский А.И., Еляков Г.Б. Голотурин А^ из Карибской голотурии Holothuria floridana. Химия природ, соединений, 1982, № 4, с.527-528.

54. Кузнецова Т.А., Калиновская Н.И., Калиновский А.И., Олейникова Г.К., Ровных Н.В., Еляков Г.Б. Строение голотурина Вj из голотурии Holothuria floridana. Химия природ, соединений, 1982, № 4, с.482-484.

55. Калинин В.И., Стоник В.А. Гликозиды голотурии Bohadschia graeffei. Химия природ, соединений, 1982, № 6, с.789-790.

56. Kitagawa I., Nishino Т., Kobayashi М., Matsuno I., Akutsu Н., Kyogoku Y. Bioactive triterpene-oligoglycosides from the sea cucumber Holothuria leucospilota Brandt (1). Structure of holothurin B. Chem. Pharm. Bull., 1981, v.29,H 7, p.1942-1950.

57. Kitagawa I., Nishino T., Kobayashi M., Kyogoku Y. Bioactive triterpene-oligoglycosides from the sea cucumber Holothuria leucospilota Brandt (2). Structure of holothurin A. Chem. Parm. Bull., 1981, v.29, N 7, p.1951-1956.

58. Стоник В.А., Чумак А.Д., Исаков В.В., Белогорцева Н.И., Чир-ва В.Я., Еляков Г.Б. Строение голотурина В из Holothuria atra. Химия природ, соединений, 1979, № 3, с.522-527.

59. Калинин В.И., Стоник В.А., Авилов С.А. Гликозиды голотурии Holothuria edulis. Химия природ, соединений, 1981, № 3, с.403-404.

60. Kitagawa I., Kobayashi M., Kyogoku Y. Structural elucidation of triterpenoidal oligoglycosides from the Bahamean sea cucumber Actinopyga agassizi Selenka. Chem. Pharm. Bull., 1982, v.30, H 6, p.2045-2050.

61. Олейникова Г.К., Кузнецова Т.А., Калиновский А.И., Стоник В.А., Еляков Г.Б. Голотурин Aj, новый тритерпеновый глико-зид голотурии Holothuria floridana. Химия природ, соединений, 1981, № I, с.101-102.

62. Олейникова Г.К., Кузнецова Т.А., Иванова Н.С., Калиновский А.И., Ровных Н.В., Еляков Г.Б. Новый тритерпеновый глико-зид голотурин Aj из Карибских голотурий сем. Holothu-riidae. - Химия природ, соединений, 1982, № 4, с.464-469.

63. Milliet A., Khuong-Huu P. Voie d'acces a la synthese de la seychellogenine a partir du cycloartenol. Tetrahedron Lett., 1974, N 23, p.1939-1942.

64. Demarco P.V., Farcas E., Doddrell D., Mylari B.L., Wenkert E. Pyridin-induced solvent shifts in the nuclear magnetic resonance spectra of hydroxylic compounds. J. Am. Chem. Soc., 1968, v.90, p.5480-5486.

65. Ильин С.Г., Тарнопольский Б.А., Сафина З.И., Соболев А.Н., Дзизенко А.К., Еляков Г.Б. Кристаллическая и молекулярная структура ацетата 17-дезокси-22,25-оксидоголотуриногенина. Докл. АН СССР, 1976, т.230, № 4, с.860-862.

66. Левин B.C. Дальневосточный трепанг. Владивосток: Дальнев. книж. изд., 1981, 191 стр.

67. Еляков Г.Б., Кузнецова Т.А., Васьковский В.Е. О составе гликозидной фракции из Stichopus jjaponicus. Химия природ. соединений, 1968, № 4, с.253-254.

68. Elyakov G.B., Kuznetsova T.A., Dzizenko A.K., Elkin Yu.N. A chemical investigation of the trepang (Stichopus japoni-cus Selenka): the structure of triterpenoid aglycones obtained from trepang glycosides. Tetrahedron Lett., 1969, U 15, p.1151-1153.

69. Tan W.L., Djerassi C., Payos J., Clardy J. The structure of the sea cucumber sapogenin holotoxinogenin. J. Org. Chem., 1975, v.40, К 4, p.466-470.

70. Tamelen E.E., Anderson R.J. 24,25-Dihydrolanosterol, 24,25-dihydro- A1-^1^-protosterol, isoeuphenol, (-)iso-tirucallol, and parked. J. Am. Chem. Soc., 1972, v.94, p.8225-8228.

71. Еляков Г.Б., Перетолчин H.B. Кукумариозид С новый три-терпеновый гликозид из голотурии Cucumaria fraudatrix.- Химия природ, соединений, 1970, № 8, с.637-638.

72. Афиятуллов Ш.Ш., Стоник В.А., Калиновский А.И., Еляков Г.Б. Кукумариогенин из гликозидов голотурии Cucumaria fraudatrix. Химия природ, соединений., 1983, № I, с.59-64.- 119

73. Сметанина О.Ф., Калиновский А.И., Кузнецова Т.А., СтоникВ.А., Еляков Г.Б. Новые генины гликозидов из Карибской голотурии Parathyona sp. (Holothurioidea, Cucumariidae). -Химия природ, соединений, 1983, № I, с.64-68.

74. Еляков Г.Б., Стоник В.А., Афиятуллов Ш.Ш., Калиновский А.И., Шарыпов В.Ф., Коротких Л,Я. Нативные генины из гликозидов голотурий. Докл. АН СССР, 1981, т.259, № 6, с.1367-1369.

75. Стоник В.А., Шарыпов В.Ф., Калиновский А.И., Еляков Г.Б. Строение нативных генинов и миграция двойной связи в тритер-пеновых гликозидах голотурий семейства Stichopodidae. -Докл. АН СССР, 1979, т.245, № 5, с.1133-1134.

76. Еляков Г.Б., Мальцев И.И., Калиновский А.И., Стоник В.А. Строение голотоксина Aj (стихопозида А), основного тритерпе-нового гликозида тихоокеанской промысловой голотурии Sticho-pus japonicus Selenka. Биоорг. химия, 1983, т.9, № 2,с.280-281.

77. Stothers J.B. Carbon-13 NMR spectroscopy. N.Y. and London: Academic Press, 1972, p.282-303.

78. Knight S.A. Carbon-13 : НШ spectra of some tetra- and pen-tacyclic triterpenoids. Org. Magn. Reson., 1974, v. 6, N 3, p.603-611.

79. Калиновский А.И., Шарыпов В.Ф., Стоник В.А., Дзизенко А.К.,тоЕляков Г.Б. Спектроскопия АОС-ЯМР агликонов гликозидов голотурий. Биоорг. химия, 1980, т.6, № I, с.86-89.

80. Tori К., Seo S., Yoshimura Y., Arita H., Tomita Y. Glyco-sidation shifts in СагЪоп-13 1Ш spectroscopy: carbon-13 signal shifts from aglycone and glucose to glucoside. -Tetrahedron Lett., 1977, N 2, p.179-182.

81. Калиновский А.И., Шарыпов В.Ф., Стоник B.A., Еляков Г.Б. Структура нативного агликона стихопозида А голотурии sti-chopus daponicus Selenka. Биоорг. химия, 1980, т.6, № б, с.951-952.

82. Стоник В.А., Мальцев И.И., Еляков Г.Б. Строение теленото-зидов А и В из голотурии Thelenota ananas. Химия природ, соединений, 1982, № 5, с.624-628.

83. Polonsky J., Yaron Z., Rabanal R.M., Jacouemin H. 20,21-Anhydromelianone and melianone from Simarouba amara (Si-maroubaceae). Carbon-13 KMR spectral analysis of A^-tiru-callol-type triterpenes. Israel J. Chem., 1977, v*16,N 1, p.16-19.

84. Dawson M.C., Halsal T.G., Jones E.R.H., Robins P.A. Theiaction of hydrogen chloride on butyrospermol. J. Chem. Soc., 1953, H 1, p.586-589.

85. Nagai N., Ando Т., Tanaka H., Tanaka 0., Shibata S. Saponins and sapogenins of Ginseng: stereochemistry of the sa-pogenin of ginsenosides -Rb1, -Rbg and -Rc. Chem. Pharm. Bull., 1972, v.20, H 6, p.1212-1216.

86. Шарыпов В.Ф., Калиновская Н.И., Стоник B.A. Вццеление го-лоста-9(II),25(26)-диен-Зр-ол-16-она нативного агликона из гликозидов голотурии Stichopus japonicus. - Химия природ, соединений, 1980, № 6, с.845-846.

87. Adams H.K., Вгусе Т.А., Campbell I.M., Мс Corkindale N. J., Gaudemer A., Gmelin R., Polonsky J. Carboxyacetylquercinic acid a novel triterpene conjugate from Daedalea quercina.- Tetrahedron Lett., 1967, p.1461-1465.

88. Kutney J.P., Elgendorf G., Worth B.R., Rowe J.W., Conner A.H., Nagasampagi B.A. New triterpenes from the bark of Western white pine (Pinus monticola Dougl). Helv. Chim. Acta, 1981, v.64, H 4, p.1183-1207<.

89. Калиновский А.И., Авилов С.A., Спепанов B.P., Стоник B.A. Курилогенин новый генин из гликозидов голотурии Duasmodac-tyla kurilensis. - Химия природ, соед., 1983, № 6, с.724.

90. Iton Т., Tamura Т., Matsumoto Т. Tirucalla-7,24-dienol:a new triterpene alcohol from tea seed oil. Lipids, 1976, v.11, U 6, p.434-441.

91. Lawrie W., Hamilton W. , Spring F.C., Watson H.S# The constitution and stereochemistry of butyrospermol. J. Chem. Soc., 1956, p.3272-3280.

92. Uyeo S., Okada J., Matsunaga S. The structure and stereochemistry of abieslactone. Tetrahedron, 1968, v.24,p.2859-2880.

93. Калиновский А.И., Шарыпов В.Ф,, Афиятуллов Ш.Ш., Кузнецова Т.А., Стоник В.A.i Еляков Г*Б. Изучение некоторых вопросов стереохимии агликонов гликозидов голотурий методом спектроскопии 13С-ЯМР. Биоорг. химия, 1983, т.9, Р II, сЛ558-1563*

94. Beierbeck Н., Saunders J.K,, ApSimon J.W. The semiempi13rical derivation of nuclear magnetic resonance shifts. Hydrocarbons, alcohols, amines, ketones, and olefins. -Can. J. Chem., 1977, v.55, N 15, p.2813-2828.

95. I* Мальцев И.И., Стоник В.А., Калиновский А.И. Стихопозид Е новый тритерпеновый гликозид из голотурий сем. Stichopodidae. - Химия природ, соединений, 1983, Р 3, с.308-312.

96. Gameau P.X., Simard J.I»., Harvey 0., ApSimon J.W., Gi-rard M. The structure of psoluthurin A, the ma^or tri-terpene glycoside of the sea cucumber Psolus fabricii. -Can. J. Chem., 1983, v.61, H 7, p.1465-1471.

97. Калинин В.И., Степанов B.P., Стоник В.А. Псолюсозвд А -новый тритерпеновый гликозид из голотурии Psolus fabricii. Химия природ, соединений, 1983, № б, с.789-790.

98. Голыптейн И.Дж., Хейг Г.В., Льюис В.А., Смит Ф. Контролируемая деградация полисахаридов с помощью перйодатного окисления и гидролиза (распад по Смиту). В кн.: Методы химии углеводов, М.: Мир, 1967, с.471-477*

99. Деканосидзе Г.Е., Чирва В.Я., Сергиенко Т.В., Уварова Н.И. Методы получения и идентификации агликонов. В кн.: Исследование тритерпеновых гликозидов. Тбилиси: Мецниереба, 1982, с.29-30.

100. Стоник В.А., Шарыпов В.Ф., Кузнецова Т.А., Калиновский А.И. Нативные агликоны тритерпеновых гликозидов голотурии Bohadchi^ argus. Химия природ, соединений, 1982, Р б, с.790-791.

101. Олейникова Г.К., Кузнецова Т.А. Двухступенчатая деградация по Смиту голотурина Bj из голотурии Holothuria flori-dana. Химия природ, соединений, 1983, № 4, с.534-536.

102. Lavie D., Benjamino B.S., Shvo У. The nuclear magnetic resonance study of methyl group signals in the cucurbi-tanes. Tetrahedron, 1964, v.20, p.2585-2592.

103. Haasnoot C.A.G., de Leeuw A.A.M., de beeuw H.P.M., Altona C. Conformational analysis of the sugar ring in nucleosides and nucleotides in solution using a generalizedKarplus equation. Org. Magn. Reson., 1981, v.15, 1 1, p.43-52.

104. Шарыпов Чумак А.Д«, Стоник В.А*, Еляков Г.Б. Строение стихопозидов А и В голотурии Stichopus chloronotus. Химия природ, соединений, 1981, № 2, с*181-184»

105. Easterwood V.M., Huff B.J.L. Carbohydrate analysis by gas chromatography of acetilated aldononitriles. Svensk. Papers., 1969, v.72, К 23, p.768-772.