Влияние ядерных белков и полипептидов на конформацию дезоксирибонуклеиновой кислоты тема автореферата и диссертации по физике, 01.04.15 ВАК РФ

Введение

Глава I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

Глава П. СТАТИСТИКА ПОЛИМЕРНЫХ ЦЕПЕЙ.

Глава Ш. МЕТОДИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ

1. Светорассеяние. Основы теории . ЗГ

2. Экспериментальная установка

3. Вязкость. Основы теории

4. Экспериментальная установка.

5. Двойное лучепреломление в потоке.

Основы теории

6. Экспериментальная установка.

Глава 1У. ЗАВИСИМОСТЬ ВДТОДИНАМИЧЕСКИХ И ОПТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ даОКСИРИБОНУКЛЕОПРОТЕИ-ДОВ ОТ ИХ МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССЫ

Глава У. СМОАШГАЦЩ ГИСТОНОВ Н2А и Н4.

1. Образцы.

2. Кинетика процесса агрегации гистонов

Н2А и Н4.

3. Параметры агрегатов гистонов Н2А и Н4, сформированных при разных ионных силах

Глава У1. ИЗМЕНЕНИЕ ВЫСШИХ УРОВНЕЙ СТРУКТУРЫ ДНК при

ВЗАИМОДЕЙСТВИИ С ГИСТОНАМИ Н2А и Н4.

1. Образцы.

2. Методика приготовления комплексов.

3. Комплексы ДНК с гистоном Н2А

4. Комплексы ДНК с гистоном Н4.

Глава УП. ВЛИЯНИЕ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПОЛИПЕПТВДОВ НА СТРУКТУРУ ДНК.

1. Образцы.III

2. Комплекс ДНК + A-I3. л , „ „ „

3. Комплекс ДНК + В-Ю.

4. Комплекс ДНК +

Выбоды

Общая характеристика работы, I

Актуальность работы. В клетках высших растений и животных генетический материал, т.е. ДНК, находится в ядре. Она ком-плексирует с белками и небольшим количеством РНК, образуя сложный надмолекулярный комплекс, именуемый хроматином, или, в его наиболее организованной форме, хромасомой. Хроматин, как структура организованных генов, привлек внимание исследователей после того, как усилиями ряда авторов было показано, что носителем генетической информации является ДНК. С тех пор одной из основных проблем молекулярной биологии является расшифровка иерархии структур хроматина.

Многочисленные исследования, направленные на решение этой задачи, по предмету изучения традиционно можно разделить на 4 группы:

1. исследование свойств хроматина, как целого,

2. исследование свойств нуклеопротеидов, полученных последовательной депротеинизацией нативного хроматина,

3. исследование искусственных комплексов между отдельными элементами хроматина,

4. изучение строения индивидуальных элементов хроматина /ДНК, гистонов, негистоновых белков/ в их свободном состоянии.

Достижения химиков-синтетиков последних лет позволяют добавить к перечисленным четырем традиционным путям исследования хр оматина еще один:

5. изучение влияния на структуру ДНК искусственно синтезированных полипептидов, моделирующих отдельные участки белков, взаимодействующих с ДНК Ш vivo , в частности, гистонов. ризации. Впервые получена зависимость характеристической вязкости нативного хроматина от молекулярной массы его частиц. Приводится эмпирическая формула, позволяющая определять массу частиц нативного хроматина по их характеристической вязкости, измеренной в 0,001 м ЫаС£ .

Научная и практическая ценность работы.

Проведенное исследование комплексов ДНК с гистонами и синтетическими полипептидами, имеющими различную первичную структуру, позволяет сделать вывод о преимущественной роли электростатических сил при взаимодействии ДНК с гистонами, что в значительной степени исключает специфичность данного процесса.

Достоверно установлено, что роль уникальной вторичной структуры гистонов во взаимодействии с ДНК пренебрежимо мала. Уникальная вторичная структура гистонов определяет гистон-гистоновые взаимодействия.

Б случае гистона Н4, процесс, так называемой, самосборки при увеличении ионной силы раствора приводит к образованию агрегатов, необладающих какими бы то ни было особыми полимерными свойствами.

Полученная эмпирическая формула зависимости характеристической вязкости частиц хроматина от их молекулярной массы позволяет с помощью сравнительно несложной и надежной методики определять молекулярную массу образцов хроматина по характеристической вязкости, измеренной в 0,001 М

Апробация работы. Основные результаты работы обсуждались на:

1. II Всесоюзной конференции по конформационным изменениям биополимеров в растворе. Тбилиси 1973 г.

2. III Всесоюзной конференции по конформационным изменениям биополимеров в растворе. Тбилиси IS75 г.

В настоящее время, несмотря на многолетнее совершенствование способов выделения хроматина и его элементов, на привлечение различных методов исследования, существующие экспериментальные данные и развитые на их основе теоретические обобщения не дают ясной и полной картины архитектуры хроматина на всех уровнях его организации в хромосому.

Сказанное свидетельствует об актуальности диссертационной работы, посвященной изучению молекулярных параметров хроматина и его компонентов, а также природы сил, ответственных за формирование хроматина.

Цель работы. Настоящая работа предпринята с целью выявления общих закономерностей во взаимодействии нуклеиновой и пептидной частей хроматина. Разделение процессов внутримолекулярных превращений и межмолекулярных взаимодействий и получение их количественных характеристик, позволяют существенно ограничить круг возможных механизмов сворачивания ДНК в столь компактную форму, какую она принимает в хроматине.

Научная новизна работы заключается в том, что одновременI ное применение методов светорассеяния и визкозиметрии впервые позволило однозначно отделить процесс внутримолекулярной компак-тизации ДНК от процесса межмолекулярной агрегации частиц нуклео-протеидов, получающихся при взаимодействии ДНК с гистонами и синтетическими полипептидами в растворе. Получены количественные характеристики изменения массы и размеров частиц нуклеогисто-на в зависимости от содержания пептидной компоненты. Впервые показано, что в процессе самосборки при повышении ионной силы раствора молекулы гистрна Н4 образуют агрегаты, подобные частицам гомологичного ряда, а их размеры сравнимы с размерами гибких макромолекул в идеальном растворителе при той же степени полиме

3. Международном симпозиуме по ДНК Прага 1979 г.

4. У1 Симпозиуме по межмолекулярному взаимодействию и конформа-циям макромолекул. Вильнюс 1982 г.

5. Научной сессии Института цитологии АН СССР, посвященной '250-летию АН СССР. Ленинград 1974 г.

выводы.

1. Изучены светорассеянные, вискозиметрия и динамическое двойное лучепреломление в растворах тимусного дезоксирибонукле-опротеида /ДНП/ различной молекулярной массы. Фракционирование осуществлялось дозированной ультразвуковой и механической обработкой исходного препарата. Получена эмпирическая формула, связывающая характеристическую вязкость, в 0.001 М NclCI с молекулярной массой ДНП. Экспериментальная зависимость оптической анизотропии от молекулярной массы позволила сделать вывод о третичной структуре ДНП-частиц.

С помощью теории Хирста оценена средняя равновесная жёсткость ДНП-частиц. Использование теории динамического двойного лучепреломления растворов неоднородных частиц для интерпретации экспериментальных данных позволило оценить степень суперспиральности ДНК в предложенной ранее гетерогенной модели для описания конформации ДНП-частиц. Полученный результат согласуется с предлагаемым в настоящее время распределением суперспиральной и линкерной ДНК в нуклеосомной структуре дезоксирибонуклеопротеида.

2. Изучено поведение гистонов Н2А и Н4 в растворах разной ионной силы. Оба гистона проявляют агрегационные свойства с возрастанием ионной силы раствора. Однако кинетика этого процесса и параметры равновесных, агрегатов Н2А и Н4, полученных при фиксированной ионной силе, существенно различаются. В случае гистона Н2А агрегация завершается при 0,3 М AlQ-Ct Образуемые при этом агрегаты обладают умеренной молекулярной массой и сохраняют стабильность до значительных ионных сил /2.5/. Молекулярная масса агрегатов Н4 неограниченно возрас

- 131 тает с увеличением ионной силы, а при ju = 0.6 агрегаты выпадают в осадок. Последнее обусловлено неспецифическими термодинамическими взаимодействиями, характерными для растворов высокомолекулярных соединений. Об этом свидетельствует отрицательный знак второго вириального коэффициента в этой области ионных сил. Из углового распределения интенсивности света, рассеянного растворами гистона Н4 следует, что размеры агрегатов, образованных при разных ионных силах, сопоставимы с размерами гибких макромолекул соответствующей массы в идеальном растворителе.

3. Изучены искусственные комплексы ДНК с гистонами Н2А и Н4 в растворе с ионной силой 0,015 М UclCL . Результаты гель-фильтрации на сефадексе G -100 показали, что в исследованном интервале соотношений ДНК/гистон все молекулы гистонов связаны с ДНК.

Методами светорассеяния и визкозиметрии показано, что в случае комплексирования с гистоном Н2А, ДНК претерпевает внутримолекулярную компактизацию при увеличении содержания гистона в комплексе от 0 до 18$, о чём свидетельствует уменьшение среднеквадратичного радиуса инерции и характеристической вязкости частиц НГ. При дальнейшем увеличении концентрации Н2А в комплексе до 35$ идёт процесс межмолэкулярной агрегации частиц НГ, на что однозначно указывает рост их молекулярной массы. На основании первичной и вторичной структур Н2А предложен молекулярный механизм обоих процессов.

Установлено, что несмотря на существенно разные роли гистонов Н2А и Н4 в организации хроматина w vivo , их воздействие на ДНК in vit\o имеет много общего. Зависимое

- 132 ти Rz , М и /р частиц НГ от содержания Н4 в комплексе при малых количествах ( 20$) Н4 идентичны аналогичным зависимостям, полученным для комплексов ДНК с Н2А. Этот факт позволяет сделать вывод, что и механизмы компак-тизации ДНК гистонами Н2А и Н4 одинаковы.

4. Увеличение содержания гистонов Н2А и Н4 в НГ ведёт к межмолекулярной агрегации, идущей с уменьшением ассиметрии частиц НГ по мере роста агрегатов. Частицы НГ ДНК + Н4 проявляют большую способность к агрегации, чем частицы НГ ДНК + Н2А, что и подтверждается частичным выпадением их в осадок и существенно меньшим вторым вириальным коэффициентом для НГ, содержащих одинаковое количество гистона.

5. Изучены искусственные комплексы ДНК с полипептидами:

-Ley-Gfy-Lyg- Giy-Gty- Ata-Lys ;

Pto- Gin - Pio-Jtci - Zys -Set-Ml- P\o-Ji(L -P*o и полипептидом регулярного строения Огп- •

Методами светорассеяния и визкозиметрии показано, что полипептиды, обладающие достаточным количеством положительно заряженных аминокислотных остатков и не обладающие уникальной вторичной структурой могут in isii^o действовать на ДНК подобно гистонам. Ведущая роль в компактизации ДНК при воздействии на неё полипептидов принадлежит электростатическим взаимодействиям.

6. Увеличение содержания пептидного компонента в комплексе с ДНК всегда приводит к межмолекулярной агрегации. Межмолекулярная агрегация частиц нуклеогистонов во многом определяется термодинамическими свойствами их водносолевых растворов.

7. Согласно экспериментальным данным наличие уникальной вторичной структуры у молекул гистонов играет незначительную роль в взаимодействии с ДВК. Уникальная вторичная структура гистонов, вероятно, имеет назначение организовывать слабые, в частности, гидрофобные силы и водородные связи, участвующие в гистон-гистоновых взаимодействиях.

1. Garrard W.T., Pearson W.K., Wake S.K., Boirner J. Biochem. Biopbtys.Res.com. 58, 50-56 (1974).

2. Bonner J., Dahmus M.E., Pambrough D., Huang R.C., Marushige K., Tuan I. Science 159, 47-56 (1968).

3. Olins A., Olins D. Science 183, 330-332 (1974).

4. Noll M. Nature 2£1, 249-252 (1974).

5. Hewish D., Burgoyne L. Biochem. Biophys. Res. Com. 52, 504-510 (1973).

6. Kornberg R. Science 184, 868 (1974).

7. Kornberg R., Thomas J.O. Science 184, 865-868 (1974).

8. Morris R.N. Cell 2» 627-632 (1976 b).

9. Morris R.N. Cell 8, 357-363 (1976 b).

10. Kornberg R. Ann. Rev. Biochem. 46, 931-954 (1977).

11. Prunell, Bear В., Kornberg R.D. Cold Spring Harbor Simp. Quant. Biol. .42, 103-108 (1978).

12. Bakaev V.V., Melnikov A.N., Osicka V.D., Varshavsky A.I. Nucl. Acids Red. 2, 1401-1419 (1975).

13. Pinch J.T., Lutter L., Phodes D., Brown R., Rushton R., Levitt M., Klug A. Nature 269, 29-36 (1977).

14. Pardon I.P., Worcester D.L., Wooley I.C., Cotter R.L., Lilley D.M.J., Richards B.M. Nucl. Acids Res. 3199-3214 (1977).

15. Baldwin J.R., Boseley P.S., Bradbury C.P. Nature 253, 245-250 (1975).

16. Noll M. Nucl. Acids Red. 1573-1578 (1974).

17. Sollner-Webb В., Pelsenfeld G. Cell 10, 537-547 (1977).

18. Pelsenfeld G. Nature 271, 115-122 (1978).- 135

19. Stein A., Bine-Stein M., Simpson R.I. PNAS USA 71, 2780-2784 (1977).

20. Crick F.H.C., Klug A. Nature 255, 530-533 (1975).

21. Sobell H.M., Tsai C., Gilbert S.G., Jain S.C., Sacore T.D. PKAS USA 72* 3068-3072 (1976).

22. Camerini-Otero R.D., Sollher-Webb В., Felsenfeld G. Cell 8, 333-347 (1976).

23. Sollner-Webb В., R.D.Camerini-Otero, C.Felsenfeld. Cell 179-193 (1976).

24. Boseley P.G., Bradbury E.M., Butler-Brown G.S., Carpenter B.G., Stephens R.M. Eur. J. Biochem. 62, 21-31 (1976).

25. Moss 50., Stephens R.M., Crane-Robinson L., Bradbury E.M. Hucl. Acids Res. 2477-2485 (1977).

26. Bina-Stein M., Simpson R.T. Cell jn, 609-618 (1977).

27. Oudet P., Germond J.P., Sures M., Gallwitz D., Bellard M., Chambon P. Cold Spring Harbor Simp. Quant. Biol. 42, 287-300 (1978).

28. Camerini-Otero R.D., Felsenfeld G. ITucl. Acids Res. 4, 1159-1181 (1977).

29. DeLange R.J., Smith E.L. Ann. Rev. Biochem. 40, 279-314 (1971).

30. Huberman I.A. Ann. Rev. Biochem. 42, 355-378 (1973)•

31. Isenberg I. Ann. Rev. Biochem. 48, 159-191 (1979).

32. Spiker S., Isenberg I. Biochemistry JjS, 1819-1826 (1977).

33. Mardian I.K.W., Isenberg I. Biochemistry 17, 3825-3833 (1978).

34. Glover C.V.C., Gorovsky M.A. Biochemistry Г7» 5705-5713 (1978).

35. Martinson H.G., True R.J. Biochemistry 18, 1947-19571979)

36. Bradbury M., Crane-Robinson С. Histons & Nucleohistons. Hew York (-1971).

37. Sperling R., Bustin M. Biochemistry 14, 3322-3331 (1975).

38. Moss Т., Сагу R.D., Abercombie B.D., Crane-Robinson L., Bradbury E.M. Eur. J. Biochem. XI» 337-350 (1976).

39. Bohm L., Hayashi H., Cary P.D., Moss 0?., Crane-Robinson C., Bradbury E.M. Eur. J. Biochem. 21» 487-493 (1977).

40. Baker C.C., Isenberg I. Biochemistry Jjj, 629-634 (1976).

41. Георгиев Г.П., Бакаев B.B. Мол. биол. 12, 1205-1227 (1978).

42. Thomas J.О., Kornberg R.D. PHAS 72, 2626-2630 (1975).

43. Thomas J.О., Kornberg R.D. PEBS lett. 58, 353-358 (1975).

44. Bonner W.M., Pollard H.B. Biochem. Biophys. Res. Commun.64, 282-288 (1975).

45. Van Lente P., Jackson J.P., Weintraub H. Cell 45-50 (1975).

46. Martinson H.G., McCarty B.J. Biochemistry Ю73-Ю781975).

47. Martinson H.G., Shetlar M.D., McCarty B.J. Biochemistry JJ5, 2002-2007 (1976).

48. Martinson H.G., McCarthy B.J. Biochemistry T5, 4126-41311976).

49. Chalkley R., Hunter C. PHAS USA 72, 1304-1308 (1975).

50. Olins D.E., Wright E.B. J. Cell. Biol. 5£, 304-317 (1973).

51. Hyde I.E., Walker 1.0. PEBS Lett. £0, 150-154 (1975).

52. De Lange R.J., Smith E.L. Ann. Rev. Biochem. 725-774 (1971).

53. Boublik M., Bradbury E.M., Crane-Robinson C., Rattle- 137

54. H.W.E. Nature Hew Biol. 22£, 149-150 (1971).

55. Weintraub H., Van Lente P. PNAS USA 71» 4249-4253 (1974).

56. McGhee J.M., Felsenfeld G. Ann. Rev. Biochem. 49, 11151156 (1980).

57. Сагу P.D., Moss Т., Bradbury E.M. Eur. J. Biochem. 89» 475-482 (1978).

58. Bradbury E.M., Moss Т., Hayashi H., Hjelm R.P., Suau P., Stephens R.M., Baldwin J.P., Crane-Robinson C. Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. £2, 277-286 (1977).

59. Riss H., Kubai D.P. Ann. Rev. Genet. 263-294 (1970).

60. Ronz M., Uehls P., Hozier J. PNAS USA 1879-1883 (1977).

61. Pineh I.Т., Klug A. PHAS USA 72, 1897-1901 (1976).

62. Suau P., Bradbury E.M., Bradbury J.P. Eur. J. Biochem. £7, 593-602 (1979).

63. Thoma P., Koller Т., Klug A. J. Coll. Biol. 8£, 403-427 (1979).

64. Thoma P., Koller T. Cell J2, 101-107 (1977).

65. Rattner I.В., Hamkalo B.A. J. Cell Biol. 81^, 453-457 (1979).

66. Renz M.f Nehls P., Hozier I. Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 42, 245-252 (1977).

67. Hozier I., Renz M., Hehls P. Chromosoma 62, 301-317 (1977).

68. Stratling W.H., Muller U., Zentgraf H. Exp. Cell. Res. 117, 301-311 (1978).

69. De Lange R.J., Fambrough D.M., Smitt E.L., Bonner J. J. Biol. Chem. 244, 319-334.69» Ogawa Y., Quagliarotti G., Jordan J., Tailor G.W., Stur-buck W.C., Busch M., J. Biol. Chem. 244, 4387-4395 (1969).- 138

70. Iwai К., Isikawa К., Hayashi H. Hature 226, 1056-1058 (1970).

71. Sugano H*, Olson M.O.J., Yeoman L.S., Jonson B.R., Taylor G.W., Starbuck W.C., Busch M. J. Biol. Chem. 247» 11, 3589-3602 (1972).

72. Yeoman L.S., Olson M.O.J., Sugano П., Jordan J.J., Taylor G.W., Starbuck W.C., Busch H. J. Biol. Chem. 247» 19, 6018-6023 (1972).

73. Lewis Р.И., Bradbury E.M. Biochem. Biophys. Acta 336, 153-158 (1974).

74. Chon P.I., Fasman G.D. Biochem. 1^, 222-230 (1974).

75. Заленский A.O. Кавд. дисс. ин-т Цитологии АН СССР, Ленинград, 1975.

76. De Lange R.J., Smith Е.Ъ. Account Chem. Res. 3688381 (1972).

77. Фриеман Э.В., Сибилева М.А., Пинаев Г.П., Воробьев В.И., Водницка Б., Сергеева Н.И., Пиотровский Ю., Нгуен Тхи Де, Голикова А.И. Мол. биол. 3, 182-189 (1969).

78. Palau J., Mozo А. Е. Querol. Biochemie 62, 241-249 (1980).

79. Olins D.E., Olins A.L. J. Mol. Biol. 57, 437-455 (1971).

80. Olins D.E., Olins A.L., Von Hippel P. J. Mol. Biol. 2£, 157-176, 167 (1967).

81. Weiskopf M., Li H.I. Biopolymers J6, 669-684 (1977).

82. Li H.I., Howard I.C., Pinkston M.P., Santella R.M. Cheng A.B. Stud. Biophys. 67, 1-4 (1978).

83. Zama M. Biochem. Biophys. Acta 366, 124-134 (1974).

84. Brown J., Langloise I.K., Lauren D.R., Stoochroff B.K., Williams R.E. Can. J. Chem. 52, 3140-3148 (1974).

85. Tsyboi M., Matsuo K., T'so P.O.P. J.Mol. Biol. 15, 256257 (1966).

86. Epstein P., Yu S.S., Li H.I. Biochemistry 3706 (1974).

87. Garrol D., Bothman M.R. Biochem. Biophys. Res. Commun.46, 1681-1722 (1972).

88. Johns E.W., Butler I.A. Nature 204, 853 (1964).

89. Shapiro I.E., Leng M., Pelsenfeld G. Biochemistry 8, 32193242 (1969).

90. Carrol D. Biochemistry JH, 421-426 (1972).

91. Jordon C.P., Lerman L.S., Venahle I.H. Nature New Biol. 236, 67 (1972).

92. Santella R.H., Li H.I. Biopolymers J6, 1879-1894 (1977).

93. Stokrova S., Sponar I.; Havranek M., Sedlacek В., Blaha K. Biopolymers 1Д, 1231-1244 (1975).

94. Крылов А.С., Гурский Г.В.,Кондратьева H.O., Марьяш А,И., Полетаев П.И., Шибаев В.А. Мол.биол. 12, 297-307 (1978).

95. Sponar I., Stokrova S., Blaha К. Stud. Bioph. 61., 75-90 (1978).

96. Blaha K., Stokrova S., Sedlacek В., Sponar I. Coll.Czech. Chem. Commun. 41, 2273-2288 (1976).

97. Priedman S., Tsio P.O. Biochemistry JO, 3099-3111 (1971).

98. Santella R.S., Li H.I. Biopolymers 1J3, 1909-1914 (1975).

99. Sponer I., Boublick H. Biophys. Acta 209, 532-540 (1970).

100. Сибилева M.A., Осипова Т.Н., Заленский A.O., Чебишян M.A., Голикова А.И., Воробьев В.И,, Фрисман Э.В. Мол. биол. 10, 514-520 (1976).

101. D*Anna J.A., Jr., Isenberg I. Biochemistry 12> 2093-2098 (1974).

102. Prisman E.V., Sibileva M.A., D'jakova E.B., Vorob*ev V.I., Turoverova L.V. Biopolymers 13, 863-877 (1974).

103. Борхсениус C.H., Туроверова Л.В., Винокурова Т.И., Ильина И.Д., Воробьев В.й. Мол. биол. 3, 507-517 (1969).

104. Zuby G., Doty P. J. Mol. Biol. J., 1-20 (1959).

105. Цветков B.H., Сказка B.C. Оптика и спектроскопия 7, 808-815 (1959).

106. Debye P. J. Phys. a. Coll. Chem. 51., 18-32 (1947).

107. Zimm B. J. Chem. Phys. 16, 1093-1099 (1948).

108. Zimm В. J. Chem. Phys. Дб, 1099-1106 (1948).

109. Doty P., Steiner R. J. Chem. Phys. 18,1211-1220 (1950).

110. Beattie W., Booth C. J. Phys. Chem. 64, 696-703 (1960).

111. Beattie W., Booth C. J. Polumer Sci. 44, 81-92 (1960).

112. Sadron Ch. J. Chem. Phys. 58, 877-891 (1961).

113. Luzzati V., Benoit H. Acta Crystallogr. 297-306 (1961).

114. Птицын О.Б., Эйзнер Ю.Е. № III7-II2I (1959).

115. Carpenter D., Krigbaum W. J. Chem. Phys. 24, 1041-1057 (1956).

116. Cantow H. Makromolek. Chem. 18/Ч9, 367-415 (1956).

117. Kuhn W., Kuhn H., Buchner P. Ergebn. exakt. Haturwiss. 2£, 1-5 (1951).

118. Kuhn W., Kuhn H. Helv. Chim. Acta 28, 97-106 (1945).

119. Debye P., Bueche A. J.Chem.Phys. 16, 573-578 (1948).- 141

120. Kirkwood J., Riseman J. J. Chem. Phys. 1J, 442-450 (1949).

121. Zimm B. J. Chem. Phys. 269-271 (1956).

122. Pox Т., Flory P. J. Polymer Sci. 745-751 (1950).

123. Фрисман Э.В., Щагина Л.В., Воробьев В.И. Колл. ж. 27, 130-137 (1965).

124. Haggins М. J. Amer. Chem. Soc. 64, 2716-2721 (1942).

125. Цветков В.Н., Фрисман Э.В. ДАН СССР 97, 647-650 (1954).

126. Peterlin A., Stuart Н. Zs. Phys. 112,1-19, 129-147 (1939).

127. Kuhn W. Experientia 1., 28-36 (1945).

128. Kuhn W., Grun P. Kolloid. Zs. 101, 248-260 (1942).

129. Maxwell J. Treatise on Electricity and Magnetism, p.65. London 1873»

130. Цветков B.H. Высокомол. соед. 5, 740-749 (1963).

131. Фрисман Э.В., Сибилева М.А., Красноперова А.В. Высок, соед. I, 597-606 (1959).

132. Peterlin A. J. Polym. Sci. 2, 4551-4580 (1945).

133. Фрисман Э.В., Щагина Л.В., Воробьев В.И., Шапиро. Т.В. Биохимия 31, I027-IQ4I (1966).

134. Denbigh K.G. Tran. Paraday Soc. Дб, 936-939 (1940).

135. Sperling R., Bustin M. Biochemistry 1J., 3322-3331 (1975).

136. Johns E.W. Biochem. J. 105, 611-614 (1967).

137. Panyim S., Chalkey R. Arch. Biochem. Biophys. 130, 337346 (1969).

138. Lowry O.H., Rosenbrough U.J., Parr A.L., Randall R.J. J. Biol. Chem. Ijgt 265-275 (1951).

139. Воробьев В.И.,Бирштейн T.M. Мол.биол. 5, 327-333 (1971).

140. De Lange R.J., Fambrough D.M., Smitt E.L., Bonner J. J. Biol. Chem. 244, 319-344 (1969).- 142

141. Sautiere P., Tyron D., Laine В., Mizon J., Ruffin P., Biserte G. Eur. J. Biochem. 41.» 563-576 (1974).

142. Воробьев В.И., Бирштейн T.M., Алексанян В.И., Заленский А.О. Мол.биол. 6, 346-352 (1972).

143. Сюй Мао, Фрисман Э.В. Высокомол. соед. 4, 1839-1843, (1962).

144. Prothero J.W. Biophys. J. 6, 367-370 (1960).

145. Kotelchuk D., Scheraga N.A. PflAS USA 61, 1163-1170 (1968).

146. Crane-Robinson C., Hayashi H., Cary P.D. Eur. J. Biochem, Ц» 487-493 (1977).

147. Эскин B.E., Гумаргалиева K.3. Высокомол. соед. 2, 265271 (I960).

148. Эскин В.Е., Авдреева Л.Н. Высокомол. соед. 3 , 435-440 CI96I).

149. Спирин А.С. Биохимия 23, 656-660 (1958).

150. Chestopalov B.V., Chirgadze Уи.Ж. Eur. J. Biochem. 67, 123-128 (1976).

151. Johns E.W. Biochem. J. 105, 611-614 (1967).

152. Фрисман Э.В., Воробьев В.И., Щагина Л.В. Высокомол. соед. 6, 884-892 (1964).

153. Eigner J., Doty P. J. Mol. Biol. 12, 549-563 (1965).

154. Crothers D.M., Zimm B.H. J. Mol. Biol. J2, 525-531 (1965).

155. Готлиб Ю.Я., Светлов Ю.Б. ДАН СССР, сер. Химия, 168, 621-623 (1966).158. фрисман Э.В., Сибилева М.А. Высокомол.соед. 3, 12841294 (1961).

156. Корякина Н.И., Буриченко В.К. Химия природных соед. 6,788.794 (1975).

157. Richards B.M., Pardon I.P. Exper. Cell Res. 62, 184-189 (1970).

158. Гречишко B.C., Буриченко B.K., Митин Ю.В. Тезисы докл. Всесоюзного симпозиума по химии белков и пептидов,с.178 (1977).

159. Камилова P.P., Буриченко В.К., Мейтус Э.Е. Докл. АН Тадж.ССР 20, 6 (1977).1бз# Асатиани B.C. Биохимический анализ, с.28-33. ЦОДИА, Тбилиси (I960).

160. Фрисман Э.В., Сибилева М.А., Голикова А.И., Пинаев Г.П., Воробьев В.И. Мол. биол. 4, 587-589 (1970).

161. Морошкин В.А., Заленский А.О., Фрисман Э.В., Воробьев В.И. В сб.: Конформ.изменения биополимеров в растворах, с.91-92, Тбилиси (1975).

162. Эскин В.Е. Высокомол.соед. I, 138-142 (1959).

163. Kuhn W. Kolloid Z. 87, 3-15 (1939).

164. Kuhn W., Huhn H. Helv. Chim. Acta 26, 1394-1402 (1943).

165. Flory P. J. Chem. Phys. 17, 303-310 (1949).

166. Flory P. Principles of the Plymer Chemistry. H.Y. 1953.

167. Uotley Ж., Debay P. J. Polym. Sci. Г£, 99-102 (1955).

168. Фрисман Э.В., Сюй Мао. Высокомол. соед. 3, 285-290 (1961).

169. Щагина Л.В., Рихтер Д., Фрисман Э.В., Воробьев В.И. Мол. биол. 3, 221-235 (1969).

170. Цветков В.Н., Бычкова В.Е., Саввон С.Н., Некрасов И.К.

171. Высокомол. соед. I, I407-I4I5 (1959). 175. Kratky О., Porod G. Rec. IDrav. Chim. 68, 1106-1115 (1949).- 144

172. Benoit H., Doty P. J. Phys. Chem. 57, 958-962 (1953).

173. Фрисман Э.В., Воробьев В.И., Щагина Л.В. Высокомол. соед. 6, 884-890 (1964).

174. Морошкин В.А., Карташева Е.В., Фрисман Э.В., Рамм Е.И., Воробьев В.И., Никун В.Н., Камилова P.P., Корякина Р.И., Буриченко В.К. Мол. биол. 14, 795-803 (1980).

175. Wilkinson R.S., Thurston G.B. Biopolymers 1555-1571 (1976).

176. Hearst J.E. J. Chem. Phys. 1506-1511 (1965).

177. Hearst J.E., Tagami Y. J. Chem. Phys. 48, 4149-4155 (1965).

178. Elgin S.C.R., Weintraub H. Ann. Rev. Biochem. 44, 725774 (1975).

179. Santella R.S., Li H.I. Biochemistry 3604-3615 (1975).

180. D»Arma I.A., Isynberg J. Biochemistry 22* 2093-2096 (1974).

181. Elgin S.C.R., Weintraub H. Arm. Rev. Biochem. 44, 725-774 (1975).

182. Бирштейн T.M., Будтов В.П., Фрисман Э.В., Яновская Н.К. Высокомол.соед. 4, № 3, 455-462 (1962).

183. Фрисман Э.В., Бойцова И.Н. Вестник ЛГУ, 4, вып.1, 26-29, (1959).

184. Фрисман Э.В., Воробьев В.И., Щагина Л.В., Яновская Н.К. Высокомол.соед. 4, № 5, 762-768 (1962).189* Щагина Л.В., Рихтер Э., Фрисман Э.В., Воробьев В.И. Мол.биол. 3, в.2, 221-227 (1969).

185. Eigner J., Doty P%J. Mol. Biol. T2, 549-560 (1965).

186. Olins A.L., Carlson R.D., Wright E.B., Olins D.L. Nucleic Acids Res. 2» 3271-3279 (1976).

187. Фрисман З.В. Докторская диссертация. ЛГУ 1964 Ленинград.

188. В заключение автор считает своим приятным долгом выразить глубокую благодарность научному руководителю, профессору Э.В.Фриеман, за постоянное внимание к работе и доброжелательную критику.

189. Автор благодарит сотрудников института Цитологии АН СССР А.О.Заленского и Е.И.Рамм за предоставленные препараты гистонов и синтетических полипептидов, а также за участие в обсуждении полученных результатов.

190. Всех сотрудников лаборатории молекулярной биофизики НИИФ

191. ЛГУ автор благодарит за проявленный интерес и помощь, оказанную в работе.