Водорастворимые полиэлектролитные комплексы полиметакрилатного аниона с дендримерами, глобулярными белками и поликатионами тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.06 ВАК РФ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР-------------

1.1. Полиэлектролитные комплексы(ПЭК)

1.1.1. Водорастворимые нестехиометричные полиэлектролитные комплексы

1.1.2. Строение частиц водорастворимых нестехиометричных полиэлектролитных Комплексов

1.1.3. Поведение нестехиометричных полиэлектролитных комплексов в водно-солевых растворах

1.2. ПЭК С дендримерами

1.3. Белок-полиэлектролитные комплексы (БПК)

1.3.1. Факторы, влияющие на комплексообразование в системе белок -полиэлектролит

1.3.2. Структурные модели комплексов (белки и полиэлектролиты)

1.3.3. Ферменты в полиэлектролитных комплексах

Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1.Объекты исследования

2.2. Методы исследования

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Водорастворимые полиэлектролитные комплексы

Astramol™ дендримеров с полиметакрилатным анионом

3.1.1. Влияние рН и ионной силы на устойчивость комплексов

3.1.2. Фазовые диаграммы растворов комплексов.

3.2. Водорастворимые полиэлектролитные комплексы глобулярных белков полиметакрилатным анионом.

3.2.1. Фазовые диаграммы растворов комплексов

ВЫВОДЫ

В настоящее время накоплена обширная информация о способах получения и поведении водорастворимых нестехиометричных полиэлектролитных комплексов (НПЭК), являющихся продуктами завершенных реакций между разноименно заряженными полиионами. Их описанию посвящен ряд обзоров, например, обзор Кабанова В.А. [1]. Уникальные свойства НПЭК, наиболее привлекательным из которых для использования в практических целях является способность претерпевать фазовые разделения в узких, удобных при работе с биологически активными веществами и заранее заданных диапазонах рН и ионной силы растворов, позволяют отнести эти новые макромолекулярные соединения к так называемым «умным» («smart» или «intelligent») полимерам. Перспективы использования НПЭК в медицине и биотехнологии подробно рассмотрены в обзорах [1,2,3].

Анализ работ, посвященных полиэлектролитным комплексам, образованным полиионом с партнером другой природы, например, ионогенным дендримером [4], глобулярным белком [5,6] или нуклеиновой кислотой [7,8,9] дает основания полагать, что в основе поведения таких комплексов лежат те же принципы и закономерности, какие были открыты при изучении НПЭК. Если это предположение справедливо, то в руки исследователя попадает весь арсенал средств воздействия на фазовое состояние и устойчивость комплексов, накопленный в результате длительных и детальных исследований НПЭК. Кроме того, при этом становится возможным использование уже выработанной стратегии для поиска путей приготовления комплексов с контролируемой растворимостью и стабильностью, то есть для создания новых «умных» полиэлектролитных комплексов, которые могут содержать биополимеры. Важность решения этого вопроса как такового и практическая значимость подобных комплексов очевидны и не вызывают сомнений, что делает особенно актуальной основную задачу диссертационной работы - выявление общих закономерностей поведения полиэлектролитных комплексов, состоящих из полиионов и противоположно заряженных партнеров различной химической природы.

Целью работы явилось изучение фазового состояния растворов и диссоциации полиэлектролитных комплексов, образованных одним и тем же полиметакрилатным анионом (ПМА*) с различными положительно заряженными партнерами - дедримерами, глобулярными белками и поликатионами, выявление общих принципов и особенностей поведения этих систем и разработка единого подхода к получению полиэлектролитных комплексов с контролируемой стабильностью и растворимостью.

Научная новизна работы определяется тем, что в ней впервые изучены водорастворимые полиэлектролитные комплексы, содержащие в качестве положительно заряженных компонентов Астрамол™ полипропилениминовые дендримеры пяти различных генераций. Установлены области существования комплексов, образованных ПМА* с дендримерами при изменении рН, концентрации вводимого низкомолекулярного электролита и совместном действии этих двух факторов. Построены фазовые диаграммы смесей растворов компонентов при различных рН и ионных силах. Выявлено глубокое сходство в поведении этих систем и комплексов, образованных ПМА* с поликатионами, продемонстрирована возможность получения дендример-содержащих полиэлектролитных комплексов с заданной устойчивостью и растворимостью.

Аналогичные эксперименты проделаны со смесями растворов ПМА* и различных глобулярных белков. Определены количества аминогрупп белков, доступных для взаимодействия с полианионом, и на основании этих данных проведен сравнительный анализ фазового состояния смесей компонентов. Установлена взаимосвязь устойчивости комплексов и протяженности гетерогенных областей на фазовых диаграммах их растворов. Показано, что фазовое поведение комплексов, растворимых в нейтральных и слабощелочных средах описывается в рамках поведения НПЭК, образованных лиофилизирующим полианионом и блокирующим белком, что позволяет эффективно контролировать их растворимость и стабильность.

Практическая значимость работы заключается в том, что обнаруженная возможность получения различных полиэлектролитных комплексов, способных разрушаться и претерпевать фазовое разделение в заданных диапазонах рН и ионной силы раствора может быть положена в основу разработки систем разделения биологических смесей и направленного транспорта биологически активных веществ, а также для создания датчиков и биосенсоров. Выявленные единые принципы образования водорастворимых полиэлектролитных комплексов могут иметь большое значение для решения широкого круга насущных задач биотехнологии, молекулярной биологии и медицины, в том числе для доставки генетического материала в клетку, создания дозирующих устройств, искусственных шаперонов и т.п.

выводы

1. Изучены водорастворимые полиэлектролитные комплексы полиметакрилатного аниона с Астрамол™ полипропилениминовыми дендримерами. Обнаружено, что с ростом номера генерации дендримера существенно повышается устойчивость комплекса к разрушающему действию низкомолекулярного электролита и расширяется гетерогенная область фазовой диаграммы его водно-солевого раствора, хотя рН-зависимая область существования комплекса и фазовая диаграмма смесей бессолевых растворов компонентов при этом практически не меняются. Установлено определяющее влияние состава смесей на положение граничных областей фазовых диаграмм, соответствующих нейтральным и слабощелочным средам, а также растворам с относительно невысокой ионной силой. Выявлены различия в протекании фазовых разделений, вызываемых изменением рН и ионной силы раствора, и показано, что эти различия носят тот же характер, что у аналогичных процессов в растворах комплексов, образованных полиионами противоположного знака заряда.

2. Исследованы водорастворимые полиэлектролитные комплексы полиметакрилатного аниона с глобулярными белками - лизоцимом, химотрипсиногеном и рибонуклеазой. Определены количества аминогрупп белков, доступных для взаимодействия с полианионом, и с учетом этих данных проведен сравнительный анализ фазового состояния смесей компонентов. Установлена взаимосвязь устойчивости комплексов и протяженности гетерогенных областей на фазовых диаграммах их растворов. Показано, что фазовое поведение комплексов, растворимых в нейтральных и слабощелочных средах, описывается в рамках поведения НПЭК, образованных лиофилизирующим полианионом и блокирующим белком.

3. Выявленное в работе глубокое сходство в поведении водорастворимых полиэлектролитных комплексов, образованных ПМА с дендримерами, глобулярными белками и поликатионами позволяет рассматривать эти системы с единых позиций, которые могут быть положены в основу разработки общего подхода к получению полиэлектролитных комплексов с заданными свойствами. На примере смесей ПМА с белками и с дендримерами проиллюстрирована возможность приготовления полиэлектролитных комплексов с контролируемой стабильностью и растворимостью.

1. Кабанов В.А. Физико-химические основы и перспективы применения растворимых интерполиэлектролитных комплексов(обзор) // Высокомолек. соед., 1994, 36, 5, с. 183.

2. Кабанов В.А., Кабанов В.А. интерполиэлектролитные комплексынуклеиновых кислот как средство доставки генетического материала в клетку(обзор) // Высокомолек. соед., 1994, 36, 2, с. 198.

3. Izumrudov V.A., Galaev I.Yu., Mattiasson В. Polycomplexes potential for bioseparation // Bioseparation. 1999, 7, 207.

4. Kabanov V.A., Zezin A.B., Rogacheva V.B., Gulyaeva Zh.G., Zansochova M.F., Joosten J., Brackman J. Interaction of Astramol Poly(propyleneimine) Dendrimers with Linear Polyanions// Macromoleculs 1999, vol. 32, c. 1904.

5. Izumrudov V.A. Competitive reaction in Solutions of protein-polyelectrolyte complexes//Ber.der Deutsc., Phys. Chem., 1996,100, c. 1017.

6. Xia. J., Dubin P. Protein-polyelectrolyte comfplexes in macromolecular Complexes in Chemistry and Biology. Eds.: Dubin/Bock, Davis, Schulz/Thies, Springer-Verlag Berlin Heidelberg 1994, Chapter 15, c. 247.

7. Izumrudov V.A., Kargov S.I., Zhiryakova. M.V., Zezin А.В., Kabanov B.A. Competitive reaction in Solutions of Dna and water soluble interpolyelectrolyte complexes // Biopolymers 1995,35,c. 523.

8. Izumrudov V.A., Zhiryakova. M.V., Kudaibergenov S. Contollable stability of DNA-containing interpolyelectrolyte complexes in water salt solution. // Biopolymers(Nucleic Acid Science) 1999, 52, 2, c. 94.

9. Izumrudov V.A., Zhiryakova. M.V. Stability of DNA-containing interpolyelectrolyte complexes in water salt solution. // Macromol. Chem. Phys. 1999, 200, c. 2533.

10. Зезин А.Б., Рогачева В.Б., Полиэлектролитные комплексы. // В сб.:Успехи химии и физики полимеров.М.: Химия ,1973, с. 3.

11. Vogel M.K., Cross R.A., Bixler H.J., Guzman R.J. Medical uses for Polyeletrolyte complexes. // J.Macromol.Sci., Part A, Chem., 1970, vol.4, №3 p. 675.

12. Зезин А.Б., Кабанов В.А. Новый класс комплексных водорастворимых полиэлектролитов. // Успехи химии, 1982, т. 51, №9, с. 1447.

13. Kabanov V.A, Zezin А. В. Soluble interpolymeric complexes as a new class of synthetic polyelectrolytes // Pure Appl. Chem., 1984, 56 , 3, p.343.

14. Kabanov V.A Basic properties of soluble interpolyelectrolyte complexes applied to bioengineering and cell transformations. // In: Macromolecular Complexes in Chemistry and Biology, Dubin P. et al. Ed, Springer-Verlag, Berlin-Heidelberg, 1994, p. 151.

15. Kabanov V.A, Zezin А.В., Izumrudov V.A, Bronich T.K.,Bakeev K.N Cooperative interpolyelectrolyte reactions. // Macromol. Chem., Suppl., 1985, 13, p. 137.

16. Изумрудов B.A., Зезин А.Б., Кабанов B.A. Равновесие интерполиэлектроитных реакций и молекулярного « узнавания « в растворах интерполиэлектролитных комплексов // Успехи химии, 1991,.60, 7,с.1570.

17. Michaels A.S., Miekka. R.G. Polycation-polyanion complexes Preparation and properties of poly(vinyl-benzyl-trimethyl ammonium)-poly(styrene sulfonate). // J. Phys. Chem.,1961, 65, 10, p. 1765.

18. Michaels A.S., Falkenstein G.L., Schneider N.S. Dielectric properties of polycation-polyanion complexes. //J. Phys. Chem.,1965, 69, 5, p. 1456.

19. Hoffman A.S, Lewis R.W, Michaels A.S. Properties of polycation-polyanion complexes. // Polym.Preprints, 1969, 10, 2, p. 916.

20. Refojo M. Polyelectrolyte complexes: Permeability to water and potentional use in ophtalmology. //J. Appl. Polym. Sci., 1967, 11, 6, p. 1991.

21. Рогачева В.Б., Зезин А.Б., Каргин B.A. Исследование комплекса поли-1-лизина и полиакриловой кислоты // Биофизика, 1970, т. 15 с. 389.

22. Рогачева В.Б., Зезин А.Б. Взаимодействие слабых полимерных кислот и солей полимерных оснований. // Высокомолек. соед., 1969, 11, 5, с. 327.

23. Кабанов В.А., Паписов И.М. Комплексообразование между комплементарными синтетическими полимерами и олигомерами в разбавленных растворов // Высокомолек. соед., 1979, 21, 2, с. 243.

24. Baranovskii V.Yu., Litmanovich А.А., Papicov I.M., Kabanov V.A Quantitative studies of interaction between complementary polymers and olygomers in solution. // Eur. Polym. Journal, 1981, 17, 9, c. 969.

25. Michaeli J., Bejerano T. On the absorption of salts by water-insoluble polyacid-polybase interactions. //J. Polym. Sci., Polym. Chem.Ed., 1969, 7, p. 909.

26. Луценко В.В., Зезин А.Б., Лопаткин А.А. Статистическая модель кооперативной реакции между слабыми полиэлектролитами. // Высокомолек. соед., 1974, 16, 11, с. 2429.

27. Зезин А.Б., Рогачева В.Б., Комаров B.C., Разводовский Е.Ф. Образование амидных связей в полиэлектролитных солевых комплексах // Высокомолек. соед., 1975, 17, 12, с. 2637.

28. Комаров B.C., Рогачева В.Б., Зезин А.Б. Исследование структуры и свойств полимер-полимерных амидов// Высокомолек. соед., 1978, 20, 7, с. 1629.

29. Рогачева В.Б.,Мирлина С.Я., Каргин В.А. Электронно-микроскопические исследование взаимодействий противоположно заряженных полиэлектролитов в растворах. //Высокомолек. соед., 1970, 12, 5, с. 340.

30. Kabanov V.A., Kargina O.V., Mishustina L.A., Lubanov S.Yu., Kaluzynski K., Penczek S. A new family of crystallizable polyelectrolyte complexes // Macromol.Chem., Rapid Commun., 1981, 2, p. 343.

31. Кабанов B.A., Каргина О.В., Ульянова М.В., Литвинов И.А. Исследование надмолекулярной структуры кристаллизующихся полиэлектролитных комплексов на основе изотактической полиакрилой кислоты // Высокомолек. соед., 1982, 24, 11, с. 17.

32. Varma A. J., Majewicz Т., Smid J. Polysalt complexes of poly(vinyl-benzo-18-crown-6) and of poly(crown acrylate)s with polyanions. // J. Polym. Sci., Polym. Chem.Ed., 1979, 17, p. 1573.

33. Гуляева Ж.Г., Зезин А.Б., Разводовский Е.Ф., Берестецкая Т.З. Исследование полиэлектролитных комплексов на основе полимерных четвертичных аммонийных солей. //Высокомолек. соед., 1974, 16, 8, с. 1852.

34. Изумрудов В.А., Зезин А.Б. Конформация полиэлектролитов и реакции образования полиэлектролитных комплексов. // Высокомолек. соед., 1976, 18, 11, с. 2488.

35. Гуляева Ж.Г., Полетаева О.А., Калачев А.А., Касаикин В.А., Зезин А.Б. Исследование водорастворимых полиэлектролитных комплексов на основе полиакрилата натрия и 5,6-ионен бромида // Высокомолек.соед., 1976, 18, 12, с. 2800.

36. Изумрудов В.А., Касаикин В.А., Ермакова Л.Р., Зезин А.Б. Исследование водорастворимых полиэлектролитных комплексов неэквимольного состава. // Высокомолек. соед., 1978, 20, 2, с. 400.

37. Харенко О.А., Харенко А.В., Калюжная Р.И., Изумрудов В.А., Касаикин В.А., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Нестехиометричные полиэлектролитные комплексы-новые водорастворимые макромолекулярные соединения. // Высокомолек. соед., 1979, 21, 12, с. 2719.

38. Kabanov V.A., Zezin А.В., Mustafaev M.I., Kasaikin V.A. Soluble interploymer complexes of polyamines and polyammonium salts. // ln:Polymeric Amines & Ammonium Salts, Goethals E.J. Ed., Pergamon Press, Oxford-New York, 1980, p. 173.

39. Kabanov V.A ., Zezin A.B. A new class of complex water-soluble polyelectrolytes. // Macromol.Chem., Suppl., 1984, 6, p.259.

40. Гуляева Ж.Г., Зансохова М.Ф., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Состав и свойства полиэлектролитных комплексов на основе полимерных и олигомерных алифатических ионенов. // Высокомолек. соед., 1985, 27, 6, с. 426.

41. Нефедов Н.К., Ермакова Т.Г., Касаикин В.А., Зезин А.Б., Лопырев В.А. Влияние природы противоионов на образование и свойства нестехиометричных полиэлектролитных комплексов // Высокомолек. соед., 1985, 27, 7, с. 1496.

42. Харенко О.А., Харенко А.В., Касаикин В.А., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Строение нестехиометричных водорастворимых полиэлектролитных комплексов. // Высокомолек. соед., 1979, 21, 12, с. 2726.

43. Изумрудов В.А., Харенко О.А., Харенко А.В., Гуляева Ж.Г., Касаикин В.А., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Поведение нестехиометричных полиэлектролитных комплексов в водных растворах солей. // Высокомолек. соед., 1980, 22, 3, с. 692.

44. Изумрудов В.А., Бронич Т.К., Новикова М.Б., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Реакции замещения в трехкомпонентных макромолекулярных системах. // Высокомолек. соед., 1982, 24, 2, с. 339.

45. Изумрудов В.А., Савицкий А. П., Зезин А. Б., Кабанов В.А. Межмакромолекулярные реакции обмена с участием водорастворимых полиэлектролитных комплексов различного химического состава. // Высокомолек. соед., 1984, 26, 8, с. 1724.

46. Кабанов В.А., Зезин А.Б., Рогачева В.Б., Рыжиков С.В. Диспропорционирование нестехиометрических полиэлектролитных комплексов в водно-солевых растворах. //Докл. АН СССР, 1982, 267, 4, с. 862.

47. Рогачева В.Б., Рыжиков С.В., ЩорсТ.В., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Структурно-химические превращения нестехиометричных полиэлектролитных комплексов в водно-солевых растворах. // Высокомолек. соед., 1984, 26, 11, с. 2417.

48. Кабанов В.А., Зезин А.Б., Рогачева В.Б., Изумрудов В.А., Рыжиков С.В. Сопряженные физико-химические превращения в водно-солевых растворах нестехиометричных полиэлектролитных комплексов. // Докл. АН СССР, 1982, 262, 6, с. 1419.

49. Рогачева В.Б., Рыжиков С.В., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Особенности фазовых превращений в водно-солевых растворах нестехиометричных полиэлектролитных комплексов. // Высокомолек. соед., 1984, 26, 8, с. 1674.

50. Гуляева Ж.Г., Апдошина И.В., Зансохова М.Ф., Рогачева В.Б., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Фазовые разделения в водно-солевых растворах полиэлектролитных комплексов. // Высокомолек. соед., 1990, 32, 4, с. 776.

51. Бакеев К.Н., Изумрудов В.А, Зезин А. Б., Кабанов В. А. Влияние низкомолекулярного электролита на тушение люминесценции в растворах нестехиометричных полиэлектролитных комплексов. // Высокомолек. соед., 1987, 29, 6, с. 424.

52. Изумрудов В.А., Бронич Т.К., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Влияние длины N-алкильного заместителя в поли-4-винилпиридиниевом катионе на устойчивость полиэлектролитных комплексов. // Высокомолек. соед., 1989, 31, 5, с. 326.

53. Коробко Т.А., Изумрудов В.А., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Роль неполярных взаимодействий в реакциях нестехиометричных полиэлектролитных комплексов с анионами ПАВ // Высокомолек. соед., 1994, 36, 2, с. 223.

54. Изумрудов В.А., Рыкунова А.И., Синицын А.А. Интерполиэлектролитные реакции в растворах нестехиометричных полиэлектролитных комплексов, стабилизированных взаимодействиями различной химической природы. // Вестн. МГУ, Сер. 2, Химия, 1993, 34, 4, с.405.

55. Семчиков Ю.Д. Дендример- новый класс полимеров // Соросовский образовательный журнал, 1998, 2, с. 45.

56. De Brabander Е.М.М.; Meijer, E.W. Poly(propyleneimine) dendrimers: Large-scale Synthesis by heterogeneously Catalyzed Hydrogenations // Angew.Chem., Int. Ed. 1993,32,1308.

57. Koper G.J.M., van Genderen M.H.P., Elissen-Roman C., M.W.P.L. Baars M.W.P.L., Borkovec M., Protonation mechanism of poly(propyleneimine) Dendrimers and Some Associated Oligo Amine//J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, c. 6512.

58. Rietveld I.В., Bedeaux D. Self diffusion of poly (propyleneimne) Dendrimers in methanol// Macromoleculs. 2000, 33, c. 7912.

59. Rietveld I.В., Smit J.M. Colligative and Viscosity Properties of Poly(propyleneimine) dendrimers in methanol.// Macromoleculs. 1999, 32, c. 4608.

60. Scherrenberg R., Coussens В., van Vliet P, Edouard G., Brackman J., de Brabander E. The molecular characteristic of poly(propyleneimine) Dendrimers As studied with Small-Angle Neutron Scattering// Macromomoleculs. 1998, 31, c. 456.

61. Ramzi A., Scherrenberg R., Bruckman J., Joosten J., Mortensen K. Intermolecular interaction between Dendrimer molecules .in Solution studied by Small-Angle Neutron Scattering//Macromolecules. 1998, 31, c. 1621.

62. Kabanov V.A., Zezin A.B., Rogacheva V.B., Gulyaeva Zh.G., Zansochova M.F., Joosten J., Brackman J. Polyelectrolyte Behavior of Astramol Poly(propyleneimine) Dendrimers // Macromoleculs 1998, vol. 31, c. 5142.

63. Li Y., Dubin P., Spindler R., Tomalia D. Complex Formation between Poly(dimethyldiallylammonium chloride) and Carboxylated Starburst Dendrimers.// Macromolecules, 1995, 28, 8426.

64. Huang Q.R., Dubin P.L., Moorefield C.N., Newkome G.R. Countion binding on Charged Spheres : Effect of pH and Ionic Strength on the Mobility of Carboxyl-Terminated Dendrimers//J. Phys. Chem. B, 2000, 104, 898.

65. Zhang H., Dubin P.L., Ray J., Manning G.S., Moorefield C.N., Newkome G.R. Interaction of a Polycation with small Oppositely Charged Dendrimers // J. Phys. Chem. B, 1999, 103, 2347.

66. Kokufuta E, Shimizu H, Nakamura I Salt Linkage formation of poly(diallydimethylammonium chloride) with Acidic Groups in the Polyion complex between Human carboxyhemoglobin and Potassium polyvinyl alcohol) Sulfate, // Macromolecules 1981,14:1178.

67. Park J.M., Muhoberac B.B., Dubin P;, Xia J. Effect of protein Charge Heterogeneity in Protein- Polyelectrolyte Complexation // Macromolecules 1992, 25, 290.

68. Kokufuta E. In Macromolecular Complexes in Chemistry and Biology : Dubin, P.L., Davis R., Thies C., Bock J., Schulz D., Eds.: Springer-Verlag: Heidelberg, 1993;1. Chapter 18.

69. Ануфриева E. В., Наутов В.Д., Кузнецова И.П., Лущик В.Б., Краковяк М.Г. Взаимодействие молекул белка с линейным полиэлектролитом в растворе //Высокомолек. соед. 1987, Т.А29, №3, 593.

70. Dubin P., Ross Т., Sharma I., and Yegerlehner Е. Coacervation of Polyelectrolyte-Protein Complex. // American Chemical Society Chapter 8, 1987,162.

71. Xia J., Dubin P., and Dautzenberg H. Light Scattering, Electrophoresis, Turbidimetry Studies of Bovine Serum Albumin-Poly(.dimethyldiallylammonium chloride) Complex // Langmuir 1993, 9, 2015.

72. Mattison K., Brittain I., and Dubin P. Protein- Polyelectrolyte Phase Boundaries // Biotechnol. Prog. 1995, 11, 632.

73. Зайцев B.C., Изумрудов B.A., Зезин А.Б Новый тип водорастворимых Белок-полиэлектролитных комплексов//Высокомолек.соед. 1992, 34, 138.

74. Кабанов В.А., Евдакимов В.П., Мустафаев М.И., Антипина А.Д. ооперативное связывание сывороточного альбумина кватернизованными поли-4-винилпиридинами и структура образующихсякомплексов // Молек.биол., 1977, 11, вып. 3, 582.

75. Зайцев B.C., Изумрудов В.А., Зезин А.Б., Кабанов В.А водорастворимые белок-полиэлектролитные комплексы, содержащие избыток белка в качестве лиофилизирующего компонента //ДАН. 1992, Т.322, 2, 318.

76. Margolin A.L., Sherstyuk S.F., Izumrdov V.A., Zezin А.В., and Kabanov V.A. Enzymes in polyelectrolyte complexes the effect of phase transition on thermal stability // Eur J Biochem 1985, 146, 625.

77. Takahashi D., Kubota Y., Kokai K., Izumi Т., Hirata M., and Kokyfuta E. Effects of Surface Charge Distribution of proteins in Their Complexation with Polyelectrolytes in an Aqueous Salt- free System // Langmuir 2000, 16, 3133.

78. Tsuboi A., Izumi Т., Hirato M., Xia J., Dubin P., and Kokyfuta E. Complexation of protein with a strong Polyanion in an Aqueous Salt- free Solution // Lanmuir 1996, 12,6295.

79. Краковяк М.Г., Ануфриева Е.В., Кабанов В.А., Скороходов С.С. Получение полимеров с люминесцентными метками // Высокомолек. соед., 1969, т.11,11, с. 2499.ч

80. Пергушов Д.В., Изумрудов В.А., Зезин А.В., Кабанов В.А. Влияние низкомолекулярных солей на поведение водорастворимых нестехиометричных полиэлектролитных комплексов // Высокомолек.соед. 1993, 35, 7, 844.

81. Xia J., Dubin P., Kim Y., Muhoberac В., Klimkowski V. Electrophoretic and quasi-elasic light scattering of soluble protein- polyelectrolyte complexes // J. Phys. Chem. 1993, 97, 17, 4528.