Выделение производных хлорофилла из растительного сырья и синтез амидов хлорина Е6 тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

Введение

Глава 1. Литературный обзор. Препаративная химия хлорофилла и его производных

1.1 Реакции периферических групп хлорофиллов и их производных.

1.1.1 Реакции винильной группы хлорофиллов и их производных.

1.1.1.1 Восстановление винильной группы

1.1.1.2 Реакции присоединения к винильной группе

1.1.1.3 Окисление винильной группы

1.1.2 Реакции карбоксильных и сложноэфирных групп

1.1.2.1 Гидролиз фитилпропионатного остатка

1.1.2.2 Реакции этерификации и переэтерификации

1.1.2.3 Получение амидных производных

1.1.2.4 Восстановление сложноэфирных групп

1.1.3 Реакции карбонильных групп

1.1.3.1 Восстановление карбонильных групп

1.1.3.2 Окисление карбонильных групп.

1.1.3.3 Реакции присоединения

1.1.3.4 Конденсации с участием карбонильных групп

1.2.3.5 Синтез иминных производных хлорофилла

1.2 Превращения экзоцикла Е производных хлорофилла

1.2.1 Неокислительные превращения экзоцикла Е

1.2.2 Окислительные превращения экзоцикла Е

1.3 Реакции хлоринового цикла производных хлорофилла

1.3.1 Препаративное получение металлокомплексов производных хлорофилла и их деметаллирование

1.3.2 Реакция Вильсмейера

1.3.3 Другие реакции мезозамеицения

1.3.4 Окисление пиррольных колец хлорннового цикла.

1.4 Препаративное получение некоторых производных хлорофилла.

Хлорофиллы относятся к числу важнейших природных соединений. Интерес к этим соединениям связан с их участием в процессе фотосинтеза. Для изучения процесса фотосинтеза было необходимо установить структуру этих пигментов и исследовать их свойства. В ходе установления строения хлорофилла было получено большое количество различных хлоринов. Был синтезирован ряд модельных производных хлорофилла. Изучение свойств этих модельных соединений способствует исследованию механизмов фотосинтеза. В этой области выполнен значительный объем работ, который позволил установить строение хлорофиллов и их производных, изучить их спектральные, кислотно-основные, координационные, каталитические и другие свойства. До относительно недавнего времени других применений производные хлорофилла как индивидуальные соединения не находили. Однако дальнейшее изучение свойств этих соединений и их аналогов позволило выявить новые области их применения.

В настоящее время одной из интенсивно развивающихся областей медицины является фотодинамическая терапия (ФДТ) различных заболеваний, в том числе онкологических. Порфириновые соединения, прежде всего порфириI ны крови, оказались эффективными фотосенсибилизаторами (ФС) для ФДТ. ФС первого поколения на основе порфиринов (такие препараты, как "Фото-фрин-Н" (Photofrin-HR)) успешно используются в клинической практике. Поиск новых ФС продолжается, ведутся интенсивные исследования по созданию ФС второго поколения. В связи с этим большое внимание уделяется различным производным хлорофилла. Считается весьма вероятным, что производные фео-форбида (а) и хлоринов е6 и р6 будут широко использоваться в клинической практике наряду с такими препаратами, как

Фотофрин-П" (Photofrin-Il ). Эти же вещества могут использоваться и как диагностические препараты в онкологии.

Перспективными фотосенсибилизаторами считаются, в частности, различные амидные производные хлорофилла. Это связано, в частности, с тем, что амидная связь, с одной стороны, относительно устойчива в организме и фрагменты, присоединенные такой связью, остаются присоединенными к молекуле ФС при его действии. С другой стороны, в организме имеются ферменты, катализирующие гидролиз амидной связи, что способствует выводу ФС из организма. Поэтому синтез амидных производных хлорофилла представляет большой интерес.

Замена винильной группы в положении 2 (номенклатура Фишера) производных хлорофилла на альдегидную позволяет сместить «полосу I» электронного спектра прглощения в длинноволновую область. Это улучшает спектральные свойства получаемых хлоринов как ФС. В связи с этим актуальной является разработка методов трансформации винильной группы производных хлорофилла в альдегидную.

Известно, что в качестве исходных веществ для синтеза ФС для ФДТ используют метилфеофорбид (а) и пурпурин 18. Эти же производные хлорофилла представляют интерес как лиганды для синтеза металлокомплексов производных хлорофилла с переходными металлами, которые могут быть эффективными катализаторами различных процессов. Возможность широкого применения этих соединений определяется, прежде всего, их доступностью. Эти обстоятельства обусловливают потребность в поиске удобных и доступных источников производных хлорофилла и разработке надежных способов получения индивидуальных хлоринов в достаточно больших количествах.

Таким образом, целью настоящей работы является синтез амидов хлорина е . 2-формильных производных хлорофилла, а также разработка методов получения производных хлорофилла (метилфеофорбидов (а)т (Ь). пурпурина 18) из растительного сырья.

выводы

1. По реакции нуклеофильного раскрытия экзоцикла метилфеофорбида (а) получен ряд вторичных и третичных 6-амидов 7,у-диметиловых эфиров хлорина е6. Предложен способ получения 6,7-Ы,Ы'-(2-гидроксиэтил)-диамида

7-метилового эфира хлорина е6 и 6,у,7-Ы,Ы',Ы"-(2-гидроксиэтил)-триамида хлорина е6< Строение полученных соединений подтверждено методами ЯМР-, ИК-, электронной и масс-спектроскопии.

2. Методами ЯМР и ВЭЖХ показано, что третичные 6-амиды-7,у-диметиловые эфиры хлорина е6 в растворе существуют в виде двух изомеров. Существование двух изомеров в случае вторичных амидов не наблюдается.

3. Установлено, что при получении 6-амидов-7,7-диметиловых эфиров хлорина е6, наряду с процессом нуклеофильного раскрытия экзоцикла происходит обратимая изомеризация метилфеофорбида (а) в метилфеофорбид (а'). Показано, что реакционная способность метилфеофорбида (а) и метилфеофорбида (а') в реакции нуклеофильного раскрытия экзоцикла Б аминами практически одинакова.

4. Предложен метод трансформации винильной группы метилпирофеофорбида (а) в альдегидную. Метод заключается в окислении винильной группы в 1,2-дигидроксиэтильную действием перманганата калия в ацетоне с последующим окислением 1,2-дигидроксиэтильной группы в альдегидную периодатом натрия в тетрагидрофуране с уксусной кислотой и водой.

5. Разработаны методы контроля за процессами выделения и разделения производных хлорофилла при помощи ВЭЖХ и ТСХ. Предложены условия для качественного ВЭЖХ-анализа смесей, содержащих метилфеофорби-ды (а), (Ь), (а') и (Ь'); этилфеофорбиды (а) и (а'); 10-гидрокси-метилфео-форбиды (а) и (Ь); метилпирофеофорбиды (а) и (Ь), феофитин (а), феофор-бид (а) и пурпурин 18.

6. Разработан способ получения метилфеофорбидов (а) и (Ь) из липофильной фракции экстрактивных веществ серпухи венценосной. Изучены различные варианты получения хлорофилла и его производных из крапивы. Разработан метод окисления хлорофилла (а) и его форбиновых производных, содержащихся в различных концентратах производных хлорофилла, позволяющий получить пурпурина 18 без предварительного выделения форбиновых производных хлорофилла (а) из концентратов. Исследован состав хлорофиллина-сырца из хвойной лапки сосны. Показано, что в этом концентрате содержится пурпурин 18.

1. Kenner G.V., Mac Combie S.W., Smith K.M. Pyrrols end related compounds. Part XX1.. Separation and oxidative degradation of chlorophyll derivatives. // J. Chem. Soc. Percin Trans 1 (1973) p.2517-2523.

2. Smith K.M., Bushell M.J., Rimmer J., Unsworth J.F. Bacteriochlorophylls (c) from Chloropseudomonas etilenium. Comparation and NMR studies of the pheophorbides and derivatives. // J. Am. Chem. Soc. (1980) v. 102, p. 2437-2448.

3. Seely G.R. The structure and chemistry of functional groups. In " The chlorophylls" / ed. by L.P. Seely and C.R. Vernon, N-Y., Acad. Press (1966) p. 67108.

4. Fischer H., Stern A. Die Chemie des Pyrrols. Leipzig: Acad. Verl. (1940) Bd. 2, H. 2, 478 s.

5. Миронов А.Ф., Левинсон Е.Г. Синтез порфирин-хлориновых диме-ров с простой эфирной связью. // Биоорганическая химия (1995) том 21, №3, с. 230-234.

6. Mironov A.F. Second generation photosensitisers based on natural chlorins and bacteriochlorins. // SPIE Proceedings CIS Selected Papers "Laser use in oncology" (1996) vol. 2728, p 150-164.i

7. Tamiaki H., Miyatake Т., Tanikaga R. Self-aggregation of synthetic zinc chlorins possessing "invers" keto- hydroxyl groups. U Tetragedron Lett. (1997) vol. 38, № 2, p.267-270.

8. Решетников A.B. Получение эффективных фотосенсибилизаторв на основе порфиринов и хлоринов, содержащих длинноцепные (i-оксиалкильные заместители: Автореф. дис. канд. хим. наук. — Москва, 1999 г— 21 с.

9. Hynnenen Р.Н. Chemistry of chlorophylls: modifications, in "Chlorophylls" / Ed. H. Scheer / CRC Press, Boca Raton Ann Arbor, Boston, London 1991, p. 145-209.

10. Pandey R.K., Shiau F.U., Smith N.N., Dougherty D.J., smith K.M. Synthesis of water-soluble cationic porphyrins and chlorins. // Tetragedron (1992) v. 48, №36, p. 7591-7600.

11. Morris I.K., Snow K.M., Smith N.N., Smith K.M. Synthesis of novel substituted porphyrins by mercuration and palladiurn-olefin methodology. // J. Org. Chem. (1990) v. 55, p. 1231-1236.

12. Jiang X., Pandey R.K., Smith K.M. Nucleoside adducts of vinilporphy-rins and vinilchlorins // J. Chem. Soc. Perkin Trans 1 (1996) p. 1607-1615.

13. Jiang X., Pandey R.K., Smith K.M. Synthesis of nucleoside adducts of porphyrins and chlorophyll derivatives. // Tetragedron Lett. (1995) v. 36., № 3, p. 365-368.

14. Pandey R.K., Shiau F.-U., Sumlin A.B., Dougherty T.J., Smith K.M. Synthesis of new bakterioclorins and their antitumor activity. // Bioorg. Med. Chem. Lett. (1994) vol. 4, № 10, p. 1263-1267.

15. Tamiaki H., Miyata S., Kureishi Y., Tanicaga R. Aggregation of synthetic zinc chlorins with several esterified alcil chains as models of bacteriochloro-phyll-c homologs. // Tetragedron (1996) v. 52., № 38, p. 12421-12432.

16. Osuka A., Wada U., Shinoda S. Covalently linked pyropheophorbideidimers as model of the special pair in the photosynthetic reaction center. // Tetragedron (1996) v. 52., № 12, p. 4311-4326.

17. Миронов А.Ф. Разработка сенсибилизаторов второго поколения на основе природных хлорофиллов. // Росс. Хим. Журн. (1998) JM®5, с. 23-26.

18. Wasielewski M.R., Johnson D.J., Neimczuc М.Р., Gaines G.L., O'Neil M.P., Svec W.A. Chlorophyll-porphyrin heterodimers with ortogonal тс-systems: solvent polarity dependent photophysics. II J. Am. Chem. Soc. (1990) v. 112, p. 64826488.

19. Tamiaki H., Kouba M. Synthesis of chlorophyll (a) homologs by Wittig and Knoevenagel reaction with methyl pyropheoporbide (d). // Tetragedron (1997) v. 53, № 31, p 10677-10688.

20. Holt A.S., Morley H.V. A proposed structure for chlorophyll (d). // Can. J. Chem. (1959) v. 37, № 3 p. 507-514.

21. Shinoda S., Osuca A., Nishimura U., Yamasaci Y. Synthesis of natural carotinoid modified pheophorbide diads for investigation of carotinoid-chlorophyll excited state interaction. // Chem. Lett. (1995) p. 1139-1140.

22. Wasielewski M.R., Svec W.A., Cope B.T. Bis-(chlorophyll)-cyclophanes. New models of the special pair chlorophyll. // J. Am. Chem. Soc. (1978) v. 100, p. 1961-1962.

23. Smith K.M., Goff D.A., Simpson D.J. Mesosubstitution of chlorophyll derivatives: direct rote for transformation of bacteriopheophorbides (d) into bacterio-pheophorbides (c). //J. Am. Chem. Soc. (1985) v. 107, p.4946-4954.

24. Smith K.M., Bisset J.M.F., Bushell M.J. Partial synthesis of optically pure methyl bacteriopheophorbides (c) and (d) from methyl pheophorbide (a). // J. Org. Chem. (1980) v. 45, p. 2218-2224.

25. Brantley S.E., Gerlach В., Olmstead M.M., Smith K.M. Vinil group protection in porphyrins and chlorins: organoselenium derivatives. // Tetragedron Lett. (1997) v. 38., № 6, p. 937-940.

26. Порфирины: структура, свойства, синтез. Н.С. Ениколопян ред., М.:I1. Наука (1985) 334 с.

27. Hynnenen Р.Н., Lotonen S. Preparation of Phorbin Derivatives from Chlorophyll Mixture Utilising the Principle of Selective Hydrolysis. // Synthesis (1980) №7, p. 539-541.

28. Wasielewski M.R., Svec W.A. Synthesis of covalently linced dimeric derivatives of chlorophyll (a), pyrochlorophyll (a), chlorophyll (b) and bacteriochlo-rophyll (a). // J. Org. Chem. (1980) v. 45, p. 1469-1474.

29. Scheer H., Gross E., Nitsche B. Structure of methylpheophorbide-RCl. // Photochem. Photobiol., 1986, vol. 43, N 5, p. 559-571.

30. Wasielewski M.R., Studier M.H., Katz J.J. Covalently linced chlorophyll (a) dimer: a biomimetic model of special pair chlorophyll. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1976) v. 73, № 12, p. 4282-4286.

31. Bozer S.G., Closs G.L. A covalently bound dimeric derivative of pyro-chlorophyllide (a). A possible model for reaction center chlorophyll. // J. Am. Chem. Soc. (1976) v. 98, p. 5406-5408.

32. Borovcov V.V., Gribcov A.A., Kozyrev A.N., Brandis A.S., Ishida A.,i

33. Sacata Y. Synthesis and properties of pheophorbide-quinone compounds. // Bull. Chem. Soc. Jpn. (1992) v. 65, p 1533-1537.

34. Миронов А.Ф. Фотосенсибилнзаторы на основе порфиринов и родственных соединений для фотодинамической терапии рака. I/ Итоги науки и техники. Современные проблемы лазерной физики. Москва: ВИНИТИ (1989) с.5-62.

35. Верле Д., Гирт А., Богдан-Рай Т. Фотодинамическая терапия рака: второре и третье поколение фотофсенсибшшзаторов. // Известия АН. Серия химическая. (1998) №5, с. 836-845.

36. Liddell P.A., Burret D., Makings L.P., Pessiki P.J., Gust D., Moore Т.Д. Charge separation and energy transfer in carotinoid-pyropheophorbide-quinone tri-ades. // J. Am. Chem. Soc. (1986) v. 108, p. 5350-5352.

37. Lee S.-Ji. H., Jagerovich N., Smith K.M. Use of the chlorophyll derivative purpurin 18 for synthesis of sensitisers for use in photodinamic therapy. II J. Chem. Soc. Perkin Trans I (1993) p. 2369-2377.

38. Kozyrev A.N., Zheng G., Lazarou E., Dougherty T.J., Smith K.M., Pandey R.K. Synthesis of omeradin and purpurin 18 analogs as target-specific photo-sensitisers for photodinamic therapy. // Tetragedron. Lett. (1997) v. 38, № 19, p. 3335-3338.

39. Kozyrev A.N., Zheng G., Zhy C., Dougherty T.J., Smith K.M., Pandey R.K. Synthesis of stable bacterioclorophyll (a) derivatives as potential photosen-sitisers for photodinamic therapy. // Tetragedron. Lett. (1996) v. 37, № 36, p. 64316434.

40. Mironov A.F., Efremov A.V., Efremova O.A., Bonnet R. Novel chlorins with 5-lacton ring. // Mendeleev Commun. (1997) p. 244-245.

41. Abraham R.J., Rowan A.E., Smith N.N., Smith K.M. NMR spectra of the porphyrins. Part 42. The synthesis and aggregation behavior of some chlorophyll analogous. // J. Chem. Soc. Perkin Trans 2 (1993) p. 1047-1059.

42. Stoll A., Wiedemann E. Die oxime der phaophorbide (b). // Helv. Chim. Acta (1934) v. 17, p. 456-471.

43. Fischer R., Engel N., Henseleler A., Gossauer A. Synthesis of chlorophyll (a) labeled at C(32) from pheophorbide (a) methyl ester. // Helv. Chem. Acta (1994) v. 77, p. 1046-1050.

44. Mettath S., Shibata M., Alderfer J.L., Seng M.O., Smith K.M., Rein R., Dougherty T.J., Pandey R.K. Synthesis and spectroscpic properties of novel benzo-chlorines derived from chlorophyll (a). // J. Org. Chem. (1998) v. 63, p.1646-1656.

45. Говоров А.Г., Корженевскнй А.В., Койфман О.И. Иммобилизация феофитина (Ь) на поливиниловом спирте. Изучение свойств иммобилизатов. // Изв. ВУЗов. Химия и хим. технология. (1993) г. 36, № 3, с. 75-81.

46. Говоров А.Г., Корженевскнй А.В., Койфман О.И. Иммобилизация феофитина (Ь) на поливиниловом спирте в среде органических кислот и их смесей с водой. // Изв. ВУЗов. Химия и хим. технология. (1993) т. 36, № 9, с. 86-90.

47. Говорв А.Г. Исследование свойств металлопорфиринов, иммобилизованных на полимерную матрицу: Автореф. дис. канд. хим. наук. ИГХТА, Иваново 1993 г.

48. Michalski T.J., Hunt J.E., Hindmann J.C., Katz J.J. Synthesis and properties of 3-vinil-3-desmethylchlorophyll (a). // Tetragedron. Lett. (1985) v. 26, № 40, p. 7875-4878.

49. Jaquinod L., Nucro D.J., Medforth C.J., Pandey R.K., Forsyth T.P., Olmstead M.M., Smith K.M. Synthesis and characterization of bis-chlorins from McMurry reaction of formilchlorines. // Angew. Chem. Int. Ed. Engl. (1996) v. 35, № 9,p. 1013-1016.i

50. Stoll A., Wiedemann E. Die benzoylverbindimgen und oxime von methyl phaophorbide (a) und phaophorbide (a). // Helv. Chim. Acta (1934) v. 17, p. 163-182.

51. Hanson L.K., Chang C.K., Ward В., Callahan P.M., Babcock J.T., Head J.T. Spectral properties of protonated Schiff base porphyrines and chlorins. 1NDO-CI calculation and resonance Raman studies. П J. Am. Chem. Soc. (1984) v. 106, p. 3950-3958.

52. Watanabe Т., Nakazato M., Konno M., Saitoh S., Honda K. Epimerisation in the pheophytin (a/a') system. //Chem. Lett. (1984)p. 1411-1414.

53. Watanabe Т., Nakazato M., Honda K. Kinetic and thermodinamic parameters for the pheohpytyn (a/a1) epimerisation in organic solvents. // Chem. Lett. (1986) p. 253-256.i

54. Hynnenen P.H., Lotonen S. Large-scale preparation of crystalline (10S) chlorophylls (a) and (b). // Synthesis (1983) p.705-708.

55. Hynnenen P.H., Lotonen S. An improved method for the preparation of (10R) and (1 OS) pheophytins (a) and (b). // Synthesis (1983) p.708-710.

56. Гуринович Г.П., Севченко A.H., Соловьев K.H. Спектроскопия хлорофилла и родственных ему соединений. Минск: Наука и техника, 1968 518 с.

57. Hynnenen Р.Н., Lotonen S. A convenient method for the preparation of chlorin e6 and rodin g7 trimethyl esters. // Synthesis (1980) p. 541 -543.

58. Порфирины: структура, свойства, синтез. / Н.С. Ениколопян ред., М: Наука, 1985-334 с.

59. Ma L., Dolphyn D. Nucleophylic reaction of l,8-diazabiciclo-5,4,0J-undec-7-en and l,5-diazabiciclo-[4,3,0.-non-5-en with methyl pheophorbide (a). Unexpected produkts. // Tetragedron (1996) v. 52, № 3, p 849-860.

60. Pennington F.C., Boetcher N.B., Kats J.J. Ring V reactions of chlorophylls and pheophytins with amines. // Вioorganic Chemistry (1974) v. 3, p. 204-212.

61. Ellsworth Р.Л., Storm C.B. Methyl 10-epipheophorbide (a): an unusual stability relative chlorophyll (a) or (a'). //J. Org. Chem. (1978) v. 43, p. 281-283.

62. Weller A., Livingston R. The reaction of chlorophyll with amines. // J. Am. Chem. Soc. (1954) v. 76, p. 1575-1578.

63. Рабинович E. Фотосинтез. M.: Издательство иностранной литературы 1951, т. 1 с.464-470.

64. Hynnenen Р.Н., Assandri S. Chlorophyll's 11. Allomerization of chlorophylls (a) and (b). // Acta Chem. Scand. (1973) v. 27, №5, p. 1478-1486.

65. Ma L., Dolphyn D. Stereoselective synthesis of new chlorophyll (a) related antioxidants isolated from marine organisms. // J. Org. Chem. (1996) v. 61, p. 2501-2510.

66. Березин Б.Д. Комплексные соединения порфиринов и фталлоциа-нина. М: Наука, 1978 280с.I

67. Nichol A.W. Formilation of Fe (111) porphyrins and chlorins of natural origin. // J. Chem. Soc. (C) (1970) p.903-910.

68. Пономарев Г.В. Формнлпорфирины и их производные в химии порфиринов. (Обзор). // Химия гетеорциклических соединений (1994) №11/12, с. 1669-1696.

69. Пономарев Г.В. Синтез и свойства оснований Шиффа мезоформил-порфиринов. (Обзор). // Химия гетеорциклических соединений (1996) №11/12, с. 1472-1493.

70. Пономарев Г.В. Диметиламинометилпорфирины. Синтез и свойства. // Химия гетеорциклических соединений (1997) №10 с. 1299-1344.

71. Smith K.M., Langry K.C., Minnetien O.M. Peripheral mercuration of metalloporphyrins: novel synthesis of deoxophylloerithroethioporphyrin and de-oxophylloerithrin methyl ester. // J. Org. Chem. (1984) v. 49, p. 4602-4609.

72. Mironov A.F., Lebedeva V.S. Cyclic N-hidroxyimides in series of chlorins and porphyrins. // Tetragedron. Lett. (1998) v. 39, № , p. 6431-6434.

73. Scheer H., Katz J.J. New peripheral metal complexes related to chlorophylls. // J. Am. Chem. Soc. (1975) v. 97, p. 3273-3275.

74. Pandey R.K., Isaac M., Mac Donald L, Medforth C.J., Senge M.O.,

75. Dougherty T.J., Smith K.M. Pinacol-pinacolon rearrangment in vie dihidroxychlorinsiand bacteriochlorins: effect of substituents at the peripheral positions. // J. Org. Chem. (1997) v. 62, p. 1463-1472.

76. Kozyrev A.N., Dougherty T.J., Pandey R.K. Effect of substituents in 0s04 reaction of metallochlorins regioselective synthesis of isobacteriochlorins and bacteriochlorins. // Tetragedron. Lett. (1996) v. 37, №22 , p. 3781-3784.

77. Kozyrev A.N., Pandey R.K., Medforth С J., Zheng G., Dougherty T.J., Smith K.M. Synthesis and unusual spectroscopic properties of novel ketobacteriopur-purins. // Tetragedron. Lett. (1996) v. 37, № 6, p. 747-750.

78. Gerlach В., Smith K.M. A convenient synthetic approach to 8-vinil-chlorophyll derivatives. // Tetragedron. Lett. (1996) v. 37, № 31, p.5431-5434.

79. Bidigare R.R., Kennicutt M.C., Keeny-Kennicutt M.C. Isolation and purification of chlorophyll (a) and (b) for the determination of stable carbon and nitrogen isotope composition. // Anal. Chem. (1991) v. 63, p. 130-133.

80. Iriyama K., Shiraky M. Partial purification of chlorophyll extracted from spinach leaves before chromatographic separation. // Chem. Lett. (1977) p. 787-788.

81. Gleixner G., Karg V., Kis P. Rapid preparation of pure chlorophyll (a). // Experienta (1982) v. 38, p. 303-304.

82. Shiraki M., Yoshiura M., Iriyama K. Rapid and easy separation of chlorophylls and plant yellow pigments by thin-layer chromatography. // Chem. Lett. (1978) p. 103-104.

83. Iriyama K., Shiraki M. High-performance liquid chromatography of chlorophylls and some of their derivatives. // Chem. Lett. (1978) p. 281-282.

84. Iriyama K., Yoshiura M., Ishii Т., Shiraki M. An improved method for the preparation of chlorophyll by means of column chromatography with Sepharose CL-6B. // J. Liq. Chromatogr. (1981) v. 43 (3), p. 533-538.

85. Iriyama K., Yoshiura ML Selection of adsorbents for the separation of chlorophylls. // J. Liq. Chromatogr. (1982) v. 5 (11), p. 2211-2216.

86. Iriyama K., Yoshiura M., Shiraki M. Micro-method for the qualitativeiand quantitative analysis for photosinthetic pigments using high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. (1978) v. 154, p. 302-305.

87. Yoshiura M., Iriyama K., Shiraki M., Okada A. Preparation of chlorophyll (a) and chlorophyll (b) by column chromatography with Sephasorb HP ultra-fine. // Bull. Chem. Soc. Jpn. (1979) v. 52, p 2383-2385.

88. Watanabe Т., Hongu A., Honda K. Preparation of chlorophylls and pheophytins by isocratic liquid chromatography. // Anal. Chem. (1984) v. 56, p. 251256.

89. Omata Т., Mucata N. A rapid and efficient method to prepare chlorophylls (a) and (b) from spinach leaves. H Photochem. Photobiol. (1980) v. 31 p. 183185.

90. Iriyama К., Oguka N., Takainiya A. A simple method for extraction and partial purification of chlorophyll from plant materiel, using dioxane. // J. Biochem. (1974) v. 76, p. 901-904.

91. Iriyama K., Shiraki M. An improved method for extraction, partial purification separation and isolation of chlorophyll from spinach leaves. // J. Liq. Chro-matogr. (1979) v. 2 (11), p. 255-276.

92. Iriyama K. A rapid and convenient method for purification and isolation of chlorophyll (a) from Porphyra Yesoensis. П Biochim. Biophys. Res. Comm. (1978) v. 83, p. 501-505.

93. Bible К. C., Buytendorp K. Tutichlorin: a nickel chlorin isolated from caribean tunicate Trididemmim Solidum. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA (1988) v. 87, p. 4582-4586.

94. Бажанова Н.В., Маслова Т.Г., Попова И.А., Попова О.Ф., Сапожников Д.И., Эйдельман З.М. при участии Черноморского С.М. и Меницкой Я.М. Пигменты пластид зеленых растений и методика их исследования. M.-JI.: Наука, 1964-120 с.

95. Hyvarien К., Helaja J., Kuronen P., Kilpelainen I., Hynnenen P.H. 'H and 13C NMR-Spectra of the Metanolic Allomerisation Products of 132(R)-Chlorophyll (a). // Magnetic Resonance in Chemistry (1995) vol. 33, p. 646-656.

96. Gatt S., Dagan A., Santus R., Mazier J.-C., Chapman J.D. Phorbin derivatives and their use in the diagnoses and therapy of cancer. US Pat № 5492924. 1996-02-20.

97. A.B. Решетников, В.И. Швец, Г.В. Пономарев. Водорастворимые тетрапиррольные фотосенсибилизаторы для фотодинамической терапии рака. Вкн.: Успехи химии порфиринов. Т 2. СПб.: НИИ химии СПбГУ, 1999 с. 115127.

98. Патент РФ № 2138509, Пунегов В.В., Мишуров В.П., Никитина Е.Н. «Способ получения экдистероидов растения рода Serratula а-экдизона, (3-экдизона и инокостерона», 27.09.1999

99. Ягодин В. И. Основы химии и технологии переработки древесной зелени. JI: Наука, 1981 224 с.

100. Sakata К., Yamamoto К., Ishikawa Н., Yagi A., Etoh Н., Ina К. Chlo-rophyllon (a), a New Pheophorbide (a) Related Compound Isolated from Ruditapes Phyllipinarum as an Antioxidative Compound I J Tetragedron. Lett. (1990) № 38, p.l 165-1168.

101. Гордон А., Форд P. Спутник химика. M: Мир, 1976 541 с.

102. Воскресенский П.Н. Техника лабораторных работ. М.:Химия, 1970- 720 с.

103. Вайсбергер А., Проскауэр Э., Пуддик Дж., Тупс Э. Органические растворители М.: Иностр. лит-ра, 1958 579 с.

104. Current Data Pa/ametere NAME AMID1491 EXPNO 11. PBOCNO 11. USER meg1. F2 Acquisition ParametersV

105. ЛМ и г /I « SO in О f| П (4 м -« H irtoor't^rifi^v^г' f (о (л (v1. F/ \w 4!/\1. Oate Time1.STRUM PROBHD PULPROG TD1. SOLVENT1. NS