Закономерности модифицирования поверхности твердых тел белками тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.11 ВАК РФ

ВВВДЕНИЕ.

Глава I. ЛИТЕРАТУРНЫМ ОБЗОР. Адсорбция белков на твердых телах и методы её исследования.7 г

1.1. Общая характеристика методов изучения адсорбции белков на твердых телах.

1.2. Закономерности адсорбции плазменных белков на твердых телах.

1.3. Закономерности адсорбции желатины.

1.4. Смачивание - метод исследования белковых систем.

1.5. Теоретические основы пьезоэлектрического микровзвешивания.

ЭКСПЕРШЖНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глаиа П. Методика эксперимента.

П.1. Объекты исследования.

П.2. Методика нанесения адсорбционных слоев

П.З. Методика измерения краевых углов

П.4. Методика пьезоэлектрического микровзвешивания

Глава Ш. Адсорбционные слои желатины и альбумина на гидрофобных твердых поверхностях.

Ш.1. Зависимость адсорбции и краевых углов воды на адсорбционных слоях от концентрации растворов белков

Ш.2. Гистерезис краевых углов на адсорбционных слоях.

Ш.З. Зависимость адсорбции и краевых углов на адсорбционных слоях от времени формирования слоя.

Ш.4. Зависимость адсорбции и смачивания адсорбционных слоев от температуры растворов белка.III

Глава 1У. Адсорбционные слои альбумина и желатины на гидрошильных твердых поверхностях

ВЫВОДЫ.

СПИСОК ОБОЗНАЧЕНИЙ И СОКРАЩЕНИЙ.

Адсорбционные слои белков на твердых телах представляют большой интерес как с теоретической, так и с практической точек зрения. Адсорбционные слои возникают на всех твердых объектах, приходящих в соприкосновение с живым организмом и должны приниматься во внимание при производстве зубных протезов, стоматологического оборудования /"1,2 У, контактных линз /"3 У, искусственных органов сердечно-сосудистой системы £ 4-8 У и т.д. Знание закономерностей адсорбции белков позволяет увеличить эффективность хроматографических процессов очистки и разделения белков [ 9Особую роль играют адсорбционные слои желатины на фоточувствительных частицах при производстве кинофотоматериалов Г ю-13 У.

Немалый интерес представляют адсорбционные слои белков и с теоретической точки зрения. Формирование их происходит из макромолекул белков - лиофильных коллоидных частиц, являющихся поверхностно-активными веществами. Изменяя физико-химические параметры процесса адсорбции, можно существенно изменить кон-формацию, структуру, степень агрегирования адсорбирующихся частиц при неизменном химическом составе. Адсорбировавшиеся частицы в профессе формирования адсорбционного слоя могут претерпевать конформационные изменения, агрегацию, дезагрегацию, дегидратацию и ряд других изменений.

Сложность рассматриваемых объектов и процессов их формирования, а также широкое распространение адсорбционных слоев в природе и технике привели к бурному росту в последние десять лет интереса к ним физико-химиков.

Системы, содержащие белки (адсорбционные слои на твердых и жидких границах раздела фаз,г,ели, пленки), много лет являются предметом исследований, проводимых на кафедре коллоидной химии химического факультета МГУ под руководством В.Н.Измайловой •

Несмотря на большое число работ, посвященных адсорбционным слоям белков (особенно плазменных), до сих пор не решен одноN значно вопрос - обратима или необратима адсорбция белков на твердых телах, каковы характеристики кинетики адсорбции, претерпевают ли макромолекулы белков конформационные изменения на границе раздела "раствор белка - твердое тело". Мало известно также о поверхностных свойствах - гидрофильноети, шероховатости, гетерогенности - адсорбционных слоев белков. Одним из немногих методов, позволяющих изучить эти свойства, является метод смачивания.

Применение этого метода для изучения белковых систем обосновано в работах В.А.Пчелина, а также в исследованиях, выполненных в последние годы на кафедре коллоидной химии МГУ под руководством Б.Д.Сумма и В.Н.Измайловой. Данная работа является продолжением этих исследований.

Существенным недостатком применяемых ранее методик является невозможность однозначной трактовки результатов,получаемых методом смачивания,из-за отсутствия данных о величине адсорбции белка. В связи с этим целью данной работы являлось создание методики, позволяющей получать данные по адсорбции и смачиванию на одних и тех же образцах, а также изучение с её помощью модифицирования адсорбционными слоями белков твердых тел различной природы.

Для измерения адсорбции белков в работе впервые был при

- б менен метод пьезоэлектрического микровзвешивания.

В качестве объектов были выбраны адсорбционные слои желатины и сывороточного альбумина человека (САЧ). Желатина представляет интерес, в первую очередь, как материал для производства кинофотоматериалов. Кроме того, свойства частиц, образуемых этим белком в растворах, существенно зависят от ряда физико-химических параметров, что позволяет изучать процесс адсорбции химически одинаковых частиц с разной степенью агрегирования макромолекул в них.

Сывороточный альбумин человека 5САЧ) - один из основных белков крови - представляет интерес в связи с проблемой тром-борезистентности. Структура макромолекул этого белка существенно отличается от структуры макромолекул желатины.

Свойства макромолекул желатины и САЧ в объеме раствора и 1 на жидких границах раздела фаз хорошо изучены £14,15} , что облегчает задачу по интерпретации полученных результатов и J проведении определенных аналогий.

- 7

- 127 -ВЫВОДЫ

1. Предложен метод пьезоэлектрического микровзвешивания для изучения строения и поверхностных свойств адсорбционных слоев белков на твердых телах.

2. Разработана методика нанесения прочно адгезированных гидрофильных и гидрофобных пленок на датчик микровесов (кварце вый резонатор).

3. Предложенным методом изучена адсорбция сывороточного альбумина человека (САЧ) и желатины на гидрофобных (полипропич » лен) и гидрофильных ( ){ь пленках, нанесенных на резонач тор.

Адсорбция Г альбумина в широком интервале концентраций раствора С=1,5:(10~*,''*10""^) моль/л при 293К растет пропорционально РдС- . При С > 1,5хЮ~5 моль/л достигается предельная адсорбция Г = 6 мг/м2 на полипропилене и 10 мг/м2 на ( ЗЮ^ Эти значения Гт соответствуют сплошному строению адсорбционного слоя. Адсорбция желатины на полипропилене при С < КГ6 моль/л и 278К постепенно растет до 2 мг/м2, резко увеличиваясь при С > Ю""6 моль/л (до 30 и более мг/м2), что ч • вызывается образованием крупных агрегатов желатины в растворе.

4. Совместным использованием метода пьезоэлектрического микровзвешивания и метода смачивания изучены закономерности модифицирующего действия белков с различной организацией макромолекул на гидрофильные (стекло, пленки ( 5)а ) и гидрофоб* ч ные (пластинки тефлона и полипропилена, пленки полипропилена) поверхности. Показано, что адсорбционные слои белков сильно модифицируют и гидрофильные, и гидрофобные подложки. При адсорбции САЧ на полипропиленовой пленке краевые углы 6 умен1гшаются до $ - 65-40°; на лленке ( - соответственно увеличиваются до 9 = 40-80°. С увеличением концентрации желатины на полипропилене & скачкообразно меняется от 100°до 40° при С > 10~6 моль/л, то есть при концентрации резкого увеличения адсорбции; далее углы остаются постоянными (40°). При модифицировании желатиной гидрофильных поверхностей в также составляет 40°. Близкие значения краевых углов 9 на модифицированных подложках указывают на сплошное строение адсорбцион-слоев ншсбелков. Смачивание данных объектов определяется поверхностными свойствами адсорбционных слоев.

5. По краевым углам воды на исходном и модифицированном полипропилене рассчитана полярная составляющая взаимодействия воды и поверхности адсорбционного слоя. В случае САЧ она значительно меньше полярной составляющей взаимодействия "вода-водаУ что говорит о возможности перехода макромолекул в процессе формирования краевого угла с поверхности раздела "твердое тело - жидкость" на поверхность "жидкость - газ".

6. Изучено влияние времени °С контакта подяожки с раствором белка на адсорбцию Г и на модифицирующее действие белков краевые углы воды в). Для САЧ при любых концентрациях адсорб-\ ция на полипропиленовой пленке происходит очень быстро. Уже через несколько сек значения Г и в близки к Гт и (?т.

Для желатины при С < 10~5 моль/л в течение 1-2 часов наблюдается увеличение Г и уменьшение 9 . При С > 10*"^моль/л начальные скорости адсорбции и модифицирования резко растут,что связано с образованием агрегатов макромолекул. Обработка кинетических зависимостей Г Сг) и в(ь) на основе критериального метода показала, что в изученных системах адсорбция белков на твердых телах разной природы идет в диффузионном режиме.

Ч/

1. Pearce E.1.P., Bibby B.C. Protein adsorption on bovine1966enamel. Arch. Oral Bi0l.-7vV.il, N0.5, p.329-336.

2. Sharma C.P., Clark G.C.F., Williams D.F. The adsorption of proteins on metal surfaces. — Engineering in Medicine, 1981, v.10, lTo.1, p.11-16.

3. Prourt J.E., Baszkin A., Boissonnade M.M. Adsorption of bovine submaxillary mucin on surface-oxidized polyethylene films.- J.of Coll.and Interf. Sci., 1983, v. 94, No.2, p.421-429.

4. Marmur A., Oooper S.b.; A model for the deposition and detachment of proteins and platelets on biomaterials. —

5. J.of Coll. and Interf.Sci., 1982, v.89, No.2, p.458-465.

6. Полшцук А.Я., Иорданский А.Л., Банков Г.Е. Диффузионно-кинетическая модель адоорбции плазменных белков на гидрофобной полимерной поверхности. Докл. АН СССР, 1982, т.264,6, с .1451-1435.

7. Walton A.G., Soderquist М.Е. Behavior of proteins at interfaces. Croat chem. acta, 1980, v.53, Ho. 2, p.363-372.- 132

8. Schwimmer S., Pardee A.B. Principles and procedures in the isolation of enzymes. Advan. Enzymol., 1953., v.14-, p.375-409.

9. Зимкин E.A., Ключевич В.Ф. Адсорбция желатины на галогени-дах серебра. В сб.Международный конгресс по фотографической науке. М.: Внешторгиздат, 1970, с.212-215.

10. Lanza P., Lippolis М.Т. Researches on the nature on the functional groups involved in the adsorption of gelatin on AgBr. J.Photogr. Sci., 1969, v. 17, По. 5, p.155-156.

11. Kragh A.M., Peacock R. Adsorption of gelation to a silver bromide. J. Photogr. Sci., 1967, v. 15, No.5, p.220-225.

12. Berendsen R., Berginon H. The adsorption of gelatin on silver bromide. J- Photogr. Sci., 1968, v.16, No. 5, p.194-198.

13. Вейс А. Макромолекулярная химия желатина. M.: Пищевая промышленность, 1971. - 477 с.

14. Измайлова В.Н., Ребиндер П.А. Структурообразование в белковых системах. М.: Наука, 1974. - 268 с.

15. Мазо В.К. Исследование взаимодействия белков с анионными ПАВ в объеме водной фазы и на границах раздела фаз различной природы. Дис. . канд.хим.наук. - М.: 1974. - 126 с.

16. Еленский А.В. Исследование панкреатической липазы в гомогенных и гетерогенных условиях. Дис. . канд.хим.наук. -М., 1977. - 221 с.

17. Chin Т.Н., Nyilas Е., Turcotte L.R. Microcalorimetric and electrophoretic studies of protein sorption from plasma.-Trans. Am. Soc. Artif. Intern. Organs., 1968, v. 24,p. 389 393.

18. Matuszewska В., Horde W., Icrklema J» Competitive Adsorption of Human Plasma Albumin and Dextran on Silver Iodide. -J.ttf Coll. and Interf. Sci,, 1981, v.84, Ho.2, p.403-408.

19. Eirich F.E., Kudish A. Adsorption of polyelectrolytes and polyampholytes at liquid-solid interfaces. Amer. Chem. Soc. Polym. Prepr., 1970, v.11, No.2, p.1350-1353.

20. Rowland F.W., Eirich F.K. Plow Hates of Polymer Solutions through Porous Disks as a Function of Solute. II. Thickness and Structure of Adsorbed Polymer Films. J.Polym. Sci., Part A1, 1966, v.203, No.4, p.2401-2421.

21. Soderquist M.E., Walton A.G. Structural changes in proteins adsorbed on polymer surface. J. of Coll. and Interf. Sci., 1980, v. 75, No.2, p.386-397.

22. Богачёва E.H. Закономерности формирования и разрушения межфазных адсорбционных слоев и эмульсионных плёнок dL-XT--Дио. . канд. хим. наук. М., 1981. - 155 с.

23. Пчелин В.А. Поверхностные свойства белковых веществ. М.: Гизлегпром, 1951. - 147с.

24. Сб. Полимеры в медицине. М.: top, 1969г. - 259с.

25. Миронюк Н.В., Горюнов Ю.В., Измайлова В.Н., Сумм Б.Д. Влияние времени формирования адсорбционных слоёв белков на поверхности твёрдых тел на их смачиваемость водой. Вестник Моск. универ., сер.2, Химия, 1982, т.25, с.241-245.

26. Van der Scheer A., Bargeman D., Koetsier H.G., Smolders C.A.

27. Adsorbed layers of albumin and fibrinogen on polystyrene,probed by contact angle measurements. J. of Polymer Science: Polymer Symposium 1979, v.66, p. 399-407.

28. S8. Полторак O.M., Чухрай E.G. Физико-химические основы.ферментативного катализа. М.: Высш.школа, 1971. - 285с.

29. Mackenzie А.Р., Luyet B.J. Electron microscope study of the structure of very rapidly frozen gelation solution.

30. Biodynamica, 1962, v.9, No.172, p.'4-7-69*

31. Gorman R.R., Stoner G.E., Catlin A. The adsorption of fibrinogen. An electron microscope study. J.Phys.Chem., 1971» v. 75. lTo.14, p.2103-2107.

32. Brynda E., Houska M., Kalal J., Cepalova N.A. Adsorption of human fibrinogen and human serum albumin onto polyethylene.

33. Ann.Biomed. Eng., 1980, v.8, No.3, p.245-252. 52. Измайлова B.H., Тарасевич Б.Н., Бусол Т.Ф., Письменная Г.М. К определению толщины межфазных адсорбционных слоёв юелатины методом МНПВО. Коллоид.ж., 1977, т.39, №5, с.958-960.

34. Лаврентьев В.В., Сорокин Ю.Ю. Эллипсометрическое изучение изотерм адсорбции белков на кремнии. 1. физ.хим., 1979, Т.53, Ш, с.2967-2969.

35. Lok В.К., Cheng Т.-Ь., Robertson C.R. Total internal reflection fluerescence: a technique for examining interactions of macroipolecules with solid surfaces. J. of Coll. and Interf.

36. Sci., 1983, v. 94, No.1, p.87-103.

37. Зимина А.Л., Иорданский А.Л., Полищук А.Я., Григорян П.Л., Моисеев Ю.В., Заиков Г.Е. Исследования изменения структуры плазменных белков при адсорбции методом ЭПР.- Высокомол.соед., сер.А, 1980, т.22, №9, с.2143-2145.

38. Berber Ш.А., Mathis Q}., Ihlenfeld J.Y., Cooper S.L., Mosher D.F. Short term interactions of blood with polymeric vascular grafts materials: protein adsorption, trombus formation and leukocyte deposition. Scanning Electron Microsc., 1978, v.2, p.431.

39. Dulm P., Norde W. The adsorption of human plasma albumin on solid surfaces, with special attention to the kinetic aspects. J.of Coll. and Interf. Sci., 1983, v. 91, No.1, p.248-255.

40. Тарасович Ю.И., Смирнова В.А., Монахова Л.И. Адсорбция альбумина на кремнеземе. Коллоид.ж., 1978, т.40, №6,с.1214-1216.

41. Mizutani T.Adsorption of proteins on silicone-coated glass surfaces. J.of Coll. and Interf.Sci., v.82, No.1, p.162-166.

42. Burghardt T.P., Axelrod D. Total internal reflect!on/fluores-scence photobleasching recovery study of serum albumin adsorption dynamics.-Biophys. J., 1981, v.55, IT0.5, ,p.455-467.

43. Bull H.B.Adsorption of bovine serum albumin on glass. -Biochim.Biophys.Act., 1956, v.19, p.464-471.'

44. Macritchie P. Proteins at interfaces. -Adv. Prot. Ghem., 1976, v. 32, p.283-290.

45. Kennedy J.P., Pike Y.W. Water insoluble papain conjugate of hydrous titanium (IV) oxide and of surface-coating materials modified to hydrous titanium (IV) oxide. J.Chem.Soc., Perkin I, 1978, p.1138-1166.

46. Edwards H., Rutter P.R. The adsorption of bovine serum albumin and dextran D250 at the solid-liquid interfaces.

47. J. of Coll. and Interf. Sci., 1980, v.78, No.2, p.304-311.

48. Боброва Л.Е. Структурообразование в гелях желатины. Дис.канд. хим. наук М., 1971, 161с.

49. Боброва JI.Е., Измайлова В.Н., Ребиндер П.А. Светорассеяние в растворах и гелях желатины. -Коллоидн.ж., I9V3, т.35, №5, с.887-892.

50. Pouradier J., Roman J. Etude de Quelques facteurs influençant Ъ'adsorption de la gelatine a la surface des cristaux d'halogenure d'argent. Sci. et Industr.Photogr. Sci., 1952, V.23, p.4-13.

51. Curme H.C., Natale C.C. The adsorption of gelatin to a silver bromide sol. J.Phys. Chem., 1964, v.68, No.10, p.3QO$-3016.

52. Сугиура Масааки. Адсорбция желатины на поверхности Токё когё сикэноё хококу,

53. Tokyo kogyo shikensho hokoku, Repts Govt Chem. Ind. Res. Inst. Tokyo, 1970, v. 65, No.11, p.447-452.

54. Kragh A.M. The adsorption of gelatin by suspended solids and the mechanism of flocculation. J.Photogr. Sei., 1964, v. 12, No.4, p.191-201.

55. Pouradier J., Rondeau A. Etude de quelquee facteur» influençant l1adsorption de la gelatine a la surface des cristaux d'halogenure d'argent (II) .-J.chim. phys. et. phys.-chim. biol., 1971, v.68, No.7-8, p.1108-1112.

56. Zimkin E., Klyuchevich V. The adsorption of gelatine to a silver bromide microcrystals. J.Photogr. Sci., 1968, v.16, No.4, p.154-156.

57. Липатов Ю.С., Сергеева Л.M. Адсорбция полимеров. Киев: Наукова думка, 1972. - 195с.

58. Zsigmondi R.-Kolloidchemie, Leipzig, 1918, Bd.173, s.358.

59. Caselli M., Traini A. Adsorption of gelatine on colloidal gold.-J.Electroanal. Chem., 1974. v.50, N0.3, p.387-397•79* Groszek A.J., Wood H.W. The adsorption of gelatin to a silver powder. J.Photogr'^1" Sei., 1955, v.13, N0.5, p.133-138.

60. Groszek A.J., Wood H.W. Heat of adsorption of gelatin on silver bromide. Chem. I.Ind., 1964, p.2057.

61. Ребиндер П.А., Липец М.Б., Римская H.H., Таубман А.Б. Фи-зико-химия флотационных процессов. М.-Л.-Свердловск: Металлургиздат, 1933.-230с.

62. Сумм Б.Д., Горюнов ю.В. Физико-химические основы смачивания и растекания. М.: Химия, 1976,- 251с.

63. McMillan C.E., Walton A.G. A circular dichroism technique for the study of adsorbed protein structure. J.of Colloid and Interf. Sci., 1974-, v.48, p.345-349.

64. Adams А.Ъ., Fischer G.C., "Vroman L. The complexity of blood at simple in interfaces. J. of Coll. and Interf.Sci., 1978, v.65, Ho.3, p.4-68-478.

65. Щукин Е.Дм Перцов А.В., Амелина Е.А. Коллоидная химия. -М.: Изд-во МГУ, 1982, с.142.

66. Поверхностно-активные вещества. Справочник, под ред.Абрам-зона А.А., Гаевого г.М. Л.: Химия, 1979, с.25.91« Bikerman J.J. Contact angles of "built-up" multilayers.

67. Trans. Faraday Soc., 194-0, v.36, p.412-4-17. 92« El-Shimi A., Goddard E.D. Wettability of some low energy surfaces.-J.Coll.and Interf.Sci., 1974,v.48, p.242-248.

68. Кантор Л.А., Абдиев K.S., Измайлова В.Н., Сумм Б.Д. Связь характеристик избирательного смачивания и устойчивости эмульсий, стабилизированных белками. Докл. АН СССР, 1982, т.262, NÖ, с.649-652.

69. Кантор Л.А. Влияние твёрдых поверхностей на устойчивость эмульсий, стабилизированных белками. Дис. . канд.хим. наук. М., 1982. - 174с.

70. Пчелин В.А. О "гидрофобности" волоса. Коллоидн.ж., 1936, т. 2, с.247-248.

71. Пчелин В.А., Короткина И.И. Строение и физико-химические свойства поверхностных слоев высокомолекулярных соединений. I. Молекулярная структура поверхностных слоев студней желатины. Ж. физ. хим., 1938, т.12, с.50-58.

72. Миронюк Н.В., Бусол Т.Ф., Тарасович Б.Н., Горюнов Ю.В., Измайлова В.Н., Сумм Б.Д. Зависимость поверхностных свойств межфазных адсорбционных слоёв желатины от конформационного состояния макромолекул. Высокомол. соед., Б., 1982, т.24, с.391-395.

73. Сумм Б.Д., Горюнов Ю.В., Киселёва Н.В., Измайлова В.И., Смачиваемость и поверхностные свойства межфазных адсорбционных слоёв белков.- Коллоидн. ж., 1985, т.45, №6, C.II62-II67.

74. Абрамзон A.A., Головина Н.Л., Зайченко Л.П., Калева Б.М., Черпалова Т.Н. Изучение угла смачивания инвертирующих поверхностей. Коллоидн. д., 1978, т.40, tel, с.114-115.

75. Wolfram Е., Szteigopolos К. Zselatingelek und Vesithetosege.- Magy. Kern. Folyoirat, 1976, b.82, No.9, s.438-442.

76. Вольфрам Э-, Стергиолулос X. Смачиваемость гелей желатины.-Acta Chim. Acad.Sci.Hungar., 1974, t.92, No.2,p.157-167.

77. Машнина H.B. Смачивание гелей желатины. Дис. . канд.хим. наук. М., 1985т 147с.

78. Машнина Н.В., Горюнов Ю.В., Измайлова В.Н., Сумм Б.Д. Зависимость смачиваемости гелей желатины от их структурно-механических свойств. Докл. АН СССР, 1981, т.260, №2, с.571-574.

79. Summ B.D., Gorjunov ïu.V., Mastäna N.V. Wetting of gelatin gels.- VIII European Chemistry of Interfaces Conference, Siofok, Hungary, 1982, p.80.

80. Браудо E.E., Толстогузов В.Б., Слонимский Г.Л. О смачиваемости студней и плёнок желатина. Высокомол. соед., сер. Б, 1967, т.9, с.796.

81. Браудо Е.Е., Толстогузов В.Б., Ершова В.А., Слонимский Г.Л. Смачиваемость водой студней, содержащих желатину и глобулярные белки. Коллоидн. ж., 1971, т.55, с.655-656.

82. Braudo Е.Е., ITikitina Е.А., Tolstoguzov W.B. Benetzbarkeitиvon Gelatinegelen durch wabrige Elektrolyt; und Harnstofflösungen, Z.Phys. Chem. (DDE), 1973, Bd.253, N0.5-6,1. S.300-210.

83. Браудо E.E., Толстогузов В.Б., Никитина Е.А. Исследование смачиваемости студней желатины. Коллоидн.ж., 1974, т.56, с.208-215.

84. Иванов Г.А. Пьезокварцевое микровзвешивание в лабораторных . исследованиях. Заводск. наб., 1972, №6, с.693-699.

85. Гугля В.Г., Иванов Г.А., Семенова З.А. Определение термодинамических характеристик с помощью пьезоэлектрического микровзвешивания. ¡Заводск. лаб., I9V0, т.36, №3, с.289-292.

86. King W.H. Piezoelectrie Sorption Detector. Anal.Chemistry, 1964, v. 36, По.9, p.1735-1739.

87. Ц4. Fisher W.W ., King W.H. A new method for measuring of oxidation stability of elastomers.- Anal. Chemistry, 1967, v.39» lTo.11, p. 1265-1273.

88. King W.H. Applications of the quartz crystal resonator.-Vacuum Microbalance Techniques. F.Y.: Plenum Press, 1971, p.183-199.

89. Гугля В.Г., Бельков В.М., Костиков В.И. Метод изучения поверхностной диффузии и растекания тонких слоёв жидкостей.- Киев: Наукова думка, 1980, т.6, с.20-30.

90. Хрлленд Л. Плёночная микроэлектроника. М.: Мир, 1968, с.366.

91. Sauerbrey G.The use of quartz oscillators for weighing thin layers and for microweighing. Z.Phusik, 1959, v.155,p.206-222.

92. Мэзон У. Пьезоэлектрические кристаллы и их применение в ультраакустике. М.: Из-во иностр.лит., I952-446C.

93. Stockbridge C.D. Resonance frequency versus mass added to quartz crystals.- Vacuum Microbalance Techniques, N.Y.: Plenum Press, 1966, p.193-205.

94. Nidermayer R., Gladkich N., Hillecke D. Thin film thickness measurements with a quartz oscillator, Vacuum Microbalance Techniques, N.Y.: Plenum Press, 1966, p.217-229.

95. Багаев В.П., Теренько B.C. Электрическая поляризация кварцевых линз среза AT. Вопросы радиоэлектроники. Детали и компоненты аппаратуры. Серия III, 1965, в.2, с.41-49.

96. Богуш М.Е. Теория колебаний линзовых пьезоэлементов в приближении захвата энергии. Электронная техника. Радиодетали и радиокомпоненты. Сер. 5,19V?, в.2(21), с.3-14.

97. Багаев В.П. Расчёт эквивалентной индуктивности металлизированных кварцевых линз среза AT Электронная техника. Радиокомпоненты. Сер.IX, 1966, в.5, с.18-23.

98. Путилова И.Н. Руководство к практическим занятиям по коллоидной химии. М.: Высшая школа, 1961, с.286.

99. Дерягин Б.В. О зависимости краевого угла от микрорельефа или шероховатости смачиваемой поверхности. Докл.АН СССР, 1946, т.51, №7, с.357-360.

100. Айлер Р. Химия кремнезема, т.2. М.: Мир, 1982, с.706-^08.Л

101. Radczewski О.Е., Richter Н. Elektronenmikroskoische Untertsuchung von Kieselsauresolen.- Kolloid.-Zt., 1941, Bd.96, S.1-7.

102. Стрепихеев ft.А., Деревицкая В.А. Основы химии высокомолекулярных соединений. М.: Химия, 1976, с.305.

103. Neumann А., Good R.Techniques of measuring contact angles.- 145 -In: Surface and Colloid Science. Experimental methods. N.Y.-Londons Plenum Press, 1976, v.11, p. 31-93*'

104. Warner A.W., Sfcockbridge C.D. Mass- and thermal messure-ment with resonating crystalline quartz.-In: Proc.of the 1961 Conf.Held at the National Bureau of Standards.New York: Plenum Press, 1962, v. 2, p.71-92."

105. Красильщик B.3., Чупахин M.C., Гриднев Ю.А., Белякова Т.К. Пьезоэлектрическое микровзвешивание сухого остатка жидкостей. Ж. анал. хим., 1978, т.53, в.1, с.5-12.

106. Белки. Под ред.Нейрата А., Бейли Ж. М.: 1956, т.2, с.246. 154. Boedtker Н., Doty Р.А study of gelatin molecules, aggregates and gels. - J. of Phys. Chem., 1954, v.58, No.7, p.968-983.

107. Кульман P. А., Пчелин В.А. Влияние конформационного перехода типа спираль клубок на поверхностно-активные свойства желатины. - В сб. Макромолекулы на границе раздела фаз. -Киев: Наукова думка, 1971, с.54-56.

108. Нарышкина Е.П., Волков В.Я., Долинный А.И., Измайлова В.Н. Исследование процессов геле образования желатины методом ЯМР высокого разрешения.- Коллоидн.ж., 1982, т.44, N32,с.356-360.

109. Клесов А.А., Березин И.В. Практический курс химической и ферментативной кинетики. М.: Изд-во МГУ, I9V6, с.264.

110. Автор выражает глубокую благодарность В.М.Белькову за помощь при освоении методики пьезоэлектрического микровзвешивания, а также А.Е.Налыху и А.А.Канаеву за электронномикроско-пические и профилографические исследования.