Исследование путей синтеза изохинолиновых алкалоидов и бисиндольных оснований катарантуса розового, обладающих цитостатической активностью тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

од

Лапа Геннадий Борисович

Исследование путей синтеза изохинолиновых- алкалоидов и бисиндольных оснований катарантуса розового, обладающих цитостатйчёской" активностью

Специальность : 02.00.10 - Биоорганическая химия, химия природных и физиологически активных соединений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени ..... • кандидата химических наук/" "

Работа выполнена во Всероссийском институте лекарственных и ароматических растений (НПО ВИЛАР). г. Москва.

Научный руководитель - доктор химических наук, профессор Олег Никифорович Толкачев.

Официальные оппоненты:

1 Владимир Григорьевич Граник, доктор химических наук, профессор.

2 Леонид Дмитриевич Смирнов, доктор химических наук, профессор.

Ведущая организация: Всероссийский онкологический центр Российской Академии медицинских наук. (ВОНЦ РАМН)

Защита диссертации состоимся:г. на заседании Специализированного Совета ( Д 063.41.01) при Московском Государственной академии тонкой химической технологии им.

М.В. Ломоносова. 117571, г. Москва, пр. Вернадского д. 86.

С диссертацией в можно ознакомиться в библиотеке, института по адресу 113831, г. Москва, ул. М.Пироговская д. I.

Автореферат диссертации разослан 1395

Ученый секретарь Специализированного А.И. Лютик

совета, кандидат химических наук.

I. ОбЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РА60ТЫ Актуальность работы : Рост числа онкологических заболеваний, как следствие загрязнения окружающей среды, заставляет нас постоянно заниматься поиском новых цитостатических веществ к совершенствовать тел_ноло1 ни получения противоопухолевые препаратов. Выделение активных природных соединений

стимулировало ряд направлений в органическом синтезе: полный или частичный синтез этих соединений, моделирование и упрощение их структурт "использование синтетических "фрагментов- для ^усиления цитотоксической активности природного "ядра" и др. Разработанный ранее ^ НПО ■ * п * р" u-jr-t-f* ттт-.пг-т-г-ъ с7*рте з 3-ймнчопрочз^одкнх изохинолиновых алкалоидов кислотнокатализируемой циклизацией нитрилов дает удобный подход к синтезу I-замещенных аналогов природных соединений (в том числе и к 3-аминопапаверину). В связи с простотой этого способа, очевидна актуальность исследования возможностей кислотнокатализируемой циклизации нитрилов для разработки упрощенных синтезов родственных-классов изохинолиновых алкалоидов " (Оензо С с Зфенантридинов). Из множества соединений, обладающих заметной антилейкемической активностью, в настоящее время можно выделить два перспективных направления изохинолиновые алкалоиды группы бензоС сЗфенантридинов (нитидин, и др.), индольные алкалоиды катарантуса розового (винбластин, винкристин). В соответствии с этими двумя направлениями и сложилась эта. работа, состоящая из двух разделов:

1.- исследование возможностей, кислотнокатализируемой циклизации нитрилов для синтеза I,4-замещенных З-аминоизохшюлинов, удобных для получения цитотоксических алкалоидов (бен&>1 о :<}• "-'ттрилшов).

2. совершенствование способов производства .•••••и „•< ; л.¡богс

-ч -

алкалоида винкриптиня: цитото^пичеоких-Ы^бензоильных производных З-амино-6,7-дим0токси-1-метилизохинолина.

Технологию получения винкристина из отечественного винбластинг необходимо было создать для внедрения на. экспериментальном завода НПО ВИЛАР. В связи с тем, что основным источником упомянутых алкалоидов являются растения, культивируемые в условиях южных районов,. . - проблемы ограниченности- — сырьевых _ ре сурсов- - - делают актуальными как поиск простых путей синтеза,так у. совершенствование технологии щю^шдства данных соединений. Институтская тема "Винкристина сульфат" является . часты: государственной прогры*и«ы но производству противоопухолевые препаратов в-России. .....

Цель исследования: Усовершенствовать методики синтезе 3-аминоизохинолинов на основе кислотнокатализируемой циклизиции арилацвтонитрилов. Изучить возможности применения этой реакцш для получения других классов изохинолинов, например, конденсированных -гетероциклических- соединений. Синтезировать 1' изучить новые Н-ацилированные 3-аминоизохинолины нг цитотоксическую активность. Усовершенствовать способ юлучени; винкристина сульфата для создания лабораторного регламенте производства.

Научная новизна и практическая значимость: Усовершенствова!

сштез_ 3-ашно_-р.,7-дим9токси-1гМ9тажзоот ___Синтезирова!

ряд - новых_____5-бензриламино=6,7-диметокси-1-м9тилизохинолинов,

замещенных—по - бензоильному фрагменту,--у-которых- впервые был; обнаружена цитотоксическая активность. Исследования взаимосвяси структура - активность показали, что наибольшей активность; обладают соединения, млеющие пара-замещение в оензоильной част!

молекулы.

Разработан лабораторный регламент полусинтеза винкристина. Наработана субстанция для разработки лекформы и биологических испытаний.

исследовано i ри пидлида К синтезу 1,4-замущенныл

3-амююизохинолинов, а также изучена возможность сочетания двух

различных нитрилов.

На защиту выносятся следующие положения:

— I" Синтез'тг-цитотоксическая актиБНостБгпрокзБод1ШХ_ЗчЗен!?о'иламино_"

6,7-диме токси-1 -ме тилизохинолкнов.

? Изучение направленности реакций замещенных феннлацетонитрилов

в условиях кислотнокатализируемой циклизации.

3 Разработка лабораторного регламента производства субстанции

винкристина сульфата.

Апробация работы: Материалы диссертации доложены на Х-ой

международной конференции по органическому синтезу (декабрь 1994,

Бангалор, _Индия), . тезисы опубликованы в сборнике. XVI-oro

международного конгресса по проблемам рака (ноябрь 1994,

Нью-Дейли, Индия). Одна статья направлена в Журнал Органической

Химии и две статьи в Химико-Фармацевтический журнал. Утвержден

лабораторный регламент производства субстанции винкристина.

Структура и обьеы работы : Диссертация состоит из введения,

обзора литературы по использованию кислотнокатализируемой

циклоконденсации нитрилов для синтеза изохинолинов, обсуждения

результатов работы, экспериментальной части и выводов. Работа

изложена на 129 страницах, содержит 8_ таблиц, 35_ рисунков и

л 108

список литературы, включающий _ ссылок.

основные результаты работы ...... ' "

I. Исследование направленности реакций «-замещенных - -------- фенилацетонитрилов в условиях- кислотнокатализируемой_ циклизации

Для изучения возможностей и расширения диапазона примененш

кислотнокатализируемой циклизации нитрилов • в-------синтеза

I ^4чзамещенных 3-аминоизохинолинов, удобных- --для—дальнейшей превращения в бензо[с]фэнантридины, мы исследовали реакцш а-замещенных фенилацетонитрилов -с ацетонитрилом .. под_действие1 ряда кислот (см. схемы I и 2). Предложено несколько спосооо получения синтонов, удобных для этой циклизации (см. схему 2 3), а также модифицировании методики получения известных Установлена структура нескольких побочных продуктов.

I.I Изучение реакции «-бензил-арилацетонитрилов с ацетонитрилом условиях кислотного катализа «-Замещенные производные 3,4-диметоксифенилацетонитрила с были синтезированы простым способом через кротоновую -конденсат (I) с соответствующим альдегидом , а затем восстановлением (c¡ схему I) производного акрилонитрила (II) до 1,2-дифени.

.....--пропионитрила (III).. Мы., использовал! .NaBf^ в ДМФА д

востановления (II), эта -.реакция-■-.протекалаколичественны выходами. Реакция нитрила (Illa) с ацетонитрилом в присутств сухого хлористого водорода дала хлоршйн""~(7а)'7 в-"качест основного продукта, и небольшое количество (10-12 нециклического имидоиламина (Vila) (масс-спектр М+ 379=297+2x4] который через несколько дней хранения на воздухе разрушал'

чСхема I

б н осн3 С1 Nilp Ме-С=й

в оснэ оснэ й I

Me-C=N

V VI I VII

С1

выделяя продукт гидролиза - амид (Via). При подщелачивании водным аммиаком эта реакционная смесь быстро гидролизуется до амида (Via). Известно, что на способность к циклизации соединений (V)

влияют _стеринеские_факторы_.радикалов«-положении к.нитрильной. .. группено - влияние-электронных факторов ранее-не -обсуадалось .--Для-—

устранения предположительного___электроотрицательного влияния

бензильного фрагмента на нитрильную группу при циклизации под. действием кислот, мы ; синтезировали I-(3,4-даче токсифенил)-2- (2,4,5-триметоксиф01шл)прошюнйтрил (Шв), который также не

______ .. реагировал в нужном направлении. - Использование^других. кислот

(CPgSOoH, BPg'EtgO, TsOH, НСЮ4+ Ac20, MsOH) , а также варьирование температурным режимом не привело к другим продуктам, кроме .тех,., что перечислены выше.. Среди, продуктов реакции. (Шб) с ацетонитрилом под действием CFgSQ^H были обнаружены продукты деметилирования. , . ' .

Таким^ образом , можно - заключить,--что--бензильные^ производные

____________«-замещенных. фенилацетонитрилов нэ реагируют в данных условиях в

направлении изохинолиновой циклизации. ________

1.2 Изучение^ реакций производных а-фенилэтил-фенилацетоштрилов в условиях кислотного катализа

Структурный подход к формированию ~ системы..... колеи

цитотоксических бензо[с]фвнантридиновых алкалоидов (см-'схему 2) через '<*-замещенные фенилацетонитрилы, требовал наличия . двуг готовых колец и готового реакционного центра для формировать кольца В. Мы использовали для димеризации (I) нуклеофил среднеР основности:-изопропилат натрия. Полученный нитрил (VIII)--вводил* в реакцию с ацетонитрилом в присутствии хлористого водорода (см. схему 2). Условия, оптимизированные ранее для фенилацетонитрилов, оказались неприемлемыми для данной реакции. С выходом 3% ие реакционной массы был выделен 6-аминопиримидин (X). Изохинолш (Ш, удобный для дальнейшей циклизации в бензо1с]фенатридиновы1

___________скилот но образуется. ____________ ______"- • _____________;_i_____

____________ . - Наше-предположение _о.. том, что. нитрильная . группа-ацетонитрил;

-------------будет-реагировать с одинаковой - скоростью и с-- иминогрушой-и <

нитрильной . группой иминонитрила (Villa) не подтвердились Скорость реакции с иминогруппой, ■ вероятно, выше, чем i нитрильной. Катион (IX) преимущественно атакует нитрильную

4 Схема 2

сы

группу и циклизуется в аминопиримидин_ (X) . Результат реакции можно представить также как следствие участия в ней цис-енаминового таутомера (г-У111а), в то время как транс-енаминовый таутбмер" (Е-У1Н6) образует в условиях реакции

~1СГ

высокомолекулярные продукты (см. схвщ_Я±.

Другая возможность получения ключевого соединения для синтеза по схеме формирования колец в ОензоСс]фенантридинах АБ -> В , заключается в том, что можно собрать готовый углеродный скелет, а

-птмгтттт - Пг» ттфоп^фупипшг \гс±чч~\7П? >Л1

синтезировали замещенные 1,3-дифонилбутиронитрил-4-оны (XIV) через соответствующие халконы (XIII) (см. схему 3).

Основным неудобством соединения '(XIV) для циклизации в -условиях-'- -кислотного катализа—является—реакционоспособная карбонильная группа, методы восстановления которой-разработана в

литературе для амидов, не подходили для наших нитрилов, -так-как

. Схема 3

не__были селективны в отношении нитрильной групш. . Как. и ожидалось восстановление борогидридом натрия карбонила в соединении (Х1Уа) в кипящем метаноле приводило к количественной циклизации бутиронитрила в 3,5-дифенилтетрагидрофуранон-2 (XV) " ЧомГТжёму" 3У "Восстановлюкие вигртда (Х1Уо ) бсрсгидрздс;« натрия в . диоксане . при комнатной температуре количественно дает .соединение (XVI) и тлеет один большой недостаток - десятикратный ■избыток борогидрида натрия. Использование других восстановителей -(Н1-Дапеу, -ЫА1Н^-) -для дальнейшего восстановления - спирта- (XVIг не дало ■ результатов . поскольку они не селективны и вместе с гидроксилом затрагивают и нитрильную группу.

К интересным результатам привела попытка восстановить карбонил соединения (Х1\'б) через, тиозамещенное соединение »(XVII) (см. схему 3), т.к. нитрил реагирует с дитиоэтаном с образованием дитиопроизводного (XVIII), которое далее не востанавливалось в нитрил при кипячении его с Ш-Напеу. На основе анализа химического поведения _ продуктов реакции двух тиогрупп 1,2-дитиоэтана с двумя нуклеофильными центрами -. углеродами циано- и карбонильной групп, мы предложили для продукта реакции структуру макрогетероцикла (XVIII). При электронном ударе в масс-спектре наблюдался пик молекулярного иона 449(100%) М+, который можно объяснить присоединением дитиоэтана с молекулярной массой 94 к нитрилу с молекулярной массой 355 (см/, схему 3), т.е. "355+94=449." 1®-спёктр ~"ГГ, 4Чвдтиацикло6ктана~" содержит полосы

хютаощения 3365 и 3170 см-1_- валентные колебания-связи -0-Н и

=И-Н. Сдвиг сигналов в область коротких волн.,„возникает при образовании внутримолекулярной, "водородной связи.. .Мы отнесли полосу поглощения 1670 см-1 к валентным колебаниям ,С=Н "группы в

тиоимиде (XVIII). Эти- предположения подтверждаются анализом спектров ЯМР.

Полученные результаты 13С-ЯМР (APT (Attached Proton Test)) показали, что нитрильная груша исходного соединения (XIV6) имеет ник в области четвертичных атимиь у^шрида, ни "+"-напра&ленность сигнала позволяет' выделить его среди других углеродов, в спектре побочного продукта (XVIII) этот сигнал исчезает. На основании каталога мы * отнесли" : сигнал 8-С (S-C=NH) 175,8, "который тздновременно подтверждается,—давая "+"-направленност1г.—Однозначно можно отнести 'расположение двойной связи в иминогруппе .л Если бы двойная связь являлась эндоциклической 8—0 — 7-0, то направленность двух сигналов 8-С и 7-С была бы одинаковой, но в спектре они раюнонаправлены': Сигналы при-; 47,6 (6-С) и "при-51,2 (7-С) разнонаправлбны,:' первый - "+" (метиленовая группа), а второй (метиловая 'груша). Т.е. двойная связь принадлежит иминогруппе. Наличие метиленовой группы при С-6 и метанового протона при С-7 подтверждается„анализом взаимодействия протонов в спектрах COSY, полученных для 1,4-дитиациклооктана (XVIII). Триплет н-7 тлеет вицинальную константу взаимодействия с двойными дублетами Нд-6 и Нв-6 равную 7,0 Гц.

Таким образом" использование указанных - производных а-фюнилэтил-фенилацетонитрилов не дает очень простого способа длл синтеза нитрилов, пригодных для кислотнокатализируемой циклизации

нитрилов. :________- ______ '_______

- Исследованные нами а-замещенные фенилацетонитрилы -не вступают в изохинохиновую циклизацию под действием кислот, показывая ограничения для применения их в кислотнокатализируемой циклизации нитрилов.

-Г)- - ......

2. Совершенствование технологии цитотоксических средств 2.1 Синтез цитостатических производных З-аыино-6,7-даметокси-1-ыетилизохинолинов -—Наш были- продолжены—работы но поиску новых- биологически активных соеданений среди произодных 3-аминоизохинолинов, синтезированных кислотнокатализируеной циклоконденсацией нитрилов, а также оптимизирован синтез З-амино-1-метилизохинолина

_(ХХ1) (см. схему 4)._________________ . '

Разработанный.' ранее синтез,. 3-амино-6,7-диметокси-" 1-метилизохинолина (XXI)"ш "модифицировали,"-7улучшив~ насыщение-реакционной массы сухим хлористым водородом до полного образования нитрижевой соли (XIX) при -12°С (ранее насыщалась реакционная масса до соотношения (1):НС1- I моль: 3,5 моль).

Схема 4

!Н"НС1

НС1

ЕЮН

XXI 1а 15 -рЛ-Н; ХХНб Р-Н, Нт=Мо; ХХ11в 1ЬН, ЙТ. СМо; ХХИг Н-рЛоМо;

Далее-мы заменили"'две"стадии - Н-ацетилирование и гидролиз— на' прямой гидролиз .3-шидоиламиноизох1шолина (XX) - в-.целевой-.аминл (XXI). В результате>_общий выход целевого амина поднялся с 13-19%

до 38-39%. З-Аминоизохинолин является слабым основанием и обладает самым кизкш« р!^ по сравнению~с-другими его изомерами. Поэтому для ацилирования аминогруппы мы использовали хлорангидриды соответствующих кислот (см. схему 4).

. _________3-Ашшо-6.7-диметокси-1-метилизохинолин - (XXI) в биоиспытаниях

показал высокую острую токсичность, не проявлял спазмолитической активности, при этом обладал низкой цитотоксической активностью (см. табл. I). При Н-0ензоилировании цитотоксичеекая активность увеличилась в три раза. Мы связываем-это-с тем, что И-ароильные производные (ХХПа-г) напоминают по расположению ароматических колец бензо[с]фенантридиновые алкалоиды— (ниткдин, --сангвинарин и др. (XII)) и многочисленные вариации на эту тему. На проявление цитотоксической активности бензо[с]фенантридиновых алкалоидов и модельных соединений влияет тип замещения в кольцах А и Б, и как следствие этого, расстояние между кислородами и азотом (наличие треугольного фармакофора О-К-О в молекуле (XII) - стрелки на схеме 2). 3,4,5-Триметоксифенацильный фрагмент оказался очень важным в "производных халкона (ХШв) (см. схиму 3) с антимитотическими свойствами, не уступающими по активности колхицину, а также винбластину и винкристину (на схеме 5). Причем данные халконы взаимодействовали с теми же местами связывания на тубулине, что и винкристин с винбластином. Анализ структура-активность выявил важность для_ данных халконов двух

..... фрагментов: триме токсифенацильного - и-диметиламинофенильного - (или

- - ■ - пиридинового)-.-----------------------------------------------------------------------

'Бее эти факторы были" использованы при"выборе структ^ы целевых соединений. Расположение ■• радикалов в бензоильном фрагменту мы выбирали несимметричным замещению в ароматическом ядре

изохшюлиновой части, поскольку известно, что соединения с различным порядком замещения в разных ароматических кольцах чаще проявляют цитостатические свойства.

0иПТ0о11р0оаНГи»5 ССЭДИНЭНИЛ (XXXI а "А / 1 о гид хл ^УТ^ЛС/Х »1-1 и ьК*1Л. экспериментах радиометрическим % методом (в ВОЩ РАМН). Была исследована цитотоксическая активность в опытах с культавируемыми клетками карциномы яичника .человека (линия СаОу). Показателе^ — активности-служило-угнетение-включения, 'Н-ткмидина в ДНК клеток. - - — ■:■ ■ ".р- ТабЛЩЭ 1 -.-"•-.•"'

Влияние производнах З-ациламто-Т-метил-«,7-.7^ятоксшзохино.'Шна на включение, 3Н-тимидина в.ДЩ клеток линии СаОУ карциномы яичника человека. . ■ :

- --------Результаты, представленные-в-таблице - 1}- показывают - что

______соединения (ХХПб.в) . проявили одшаковуШ-^-умереннуз

-16- ■ •.-.

• —Б

цитотоксическую активность (СЕ50= б-10 ) в отношении культуры клеток карциномы яичников человека линии СаОу. Соединение (ХХПг), содержащее триметоксиОензоильный заместитель, для которого гфедполагалась активность, не проявило цитотоксической активности (СЕ50> 6'10 ). -

Из сопоставления химической структуры и биологической активности рассматриваемых соединений следует, что на величину активности влияют заместители в ацильном остатке, причем наиболее активными ""^соединениями являются пара-замещенные производные. Таким образом можно сделать предположение, что механизм действия синтезированных соединений отличается от тякоиого для перечисленных выше цитотоксических халконов и алкалоидов.

2.2 Разработка лабораторного регламента произодства винкристина и исследование побочных продуктов окисления

На основе утвержденной .Госпрограммы по производству

-------цитостатических препаратов,_принятой в 1990 г, тематический план

ВИЛА.Р предусматривал разработку регламента производства субстанции винкристина сульфата и ВФС на винкристина сульфат.

Поскольку любой патент содержит скрытые особенности способа . производства ("кпоч-Ьок?"), основной задачей мы считали достижение результатов ( выходов в реакции ), приведенных в патентах. Кроме проверки патентных данных и нахождения -скрытых - особенностей, ^важной .задачей , которую мы пытались решить, ¡являлась задача -упрощения наиболее-сложных-этапов-и приведение-их:в-соответствие с техническими возможностями" произодственно-эк'спвриментального завода ВШ1АР.

На основе анализа патентного материала нами за основу были

выбраны два способа получения- винкристина низкотемпературным окислением винбластина: в среде этилацетата или в среде те трагидрофурана.

Проведя множество экспериментальных синтезов и препаративных

ЧтяппГ^тпк. тгиттатштч и тгд-паггтс'пи'зпт*от< тштт пг^^тлт^ гтппиит-пп ми

—г - ------» —------■ — ----'.г—- ----г-'*-1 ----------— -----» —

сделали однозначный вывод о преимуществах условий окисления в ■ среде те трагидрофурана, так" как в среде этилацетата образуется 10-15% трудноотделяемой'примеси - дезформилвинкристина (БРУСЮ.

-------Образование-БРУСЕ в-реакции- мы- предположили на основании-наших-----

ТСХ и работ проведенных ранее в ВИЛАРе при разработках способов производства винбластина и лейрозина. Данное предположение • мы подтвердили ■ Ы-формилированием предполагаемого алкалоида (см. .•"■"-- - - - ■ •. -- - - Схема' 5'

оно - усгг - винкристин

V - ^-Зюрмилвиндолин -

-ТВ-

схему 5). Необходимостьформилирования определялась нами при обнаружении в реакционной смеси ВРУСИ как по результатам ТСХ, так и по результатам ВЭЖХ. В таблице 2 приведены результаты Н-формилирования. Формилирование проводили по методу смешанных £ШгидридоЕ смесью Аси НСООгГ. Эфф^кт>твностъ определяли по уменыпнию пика ЮГУСИ с временем удерживания Т=42-43 мин при ВЭЖХ. Из таблицы 2 видно, что формилирование значительно снижает содержание дезформилвинкристина, но при этом

-------- снижает-общий-выход^-;-------------------------------------------

- -г. - Таблица 2

Формилирование реакционной смеси

по данным ВЗЖХ. в %

* сумма алкало- исходное содерж. конечное ! содерж.

п/п идов в г. УСН БГУСЫ УСЙ БРУСН

I 0,59 51,79 5,7 82,52 1,2

2 о, 65 15,24 21,7 40,33 2,3

3 1,60 62,40 12,30 92,36 4,0

Контроль на содержание примесей в реакционной смеси на ТСХ или на ВЗЖХ, позволяет выбрать один из двух способов очистки субстанции до требований проекта ВФС ( не менее 95%). С участием Т.Н. Лобановой разработаны оба способа • очистки субстанции: дробная экстракция и хроматография.

. Хроматография "применялась" для очистки более загрязненных смесей, с содержанием винбластина свыше 5% и винкристина с~65% и ■ ниже. Апробованные ^ами_*^ода._разделега^дашой^умлы алкалоидов на окиси алюминия (второй степени активность по Брокману) оказались неудачными. В данных условиях идет образование большого количества дезацетил-винкристина. Хроматография на

дезактивированной окиси элкминия (третьей степени активности) мало селективна и длительна, что приводит к потерям продукта (свыше 30%). Хроматография на силикагеле L 40/100 (Chemapol), элюент бензол-дихлорметан-диэтиламин 80:20:1 оказалась приемлемым вариантом-тиггазибийщим очищать ёйШфй^тин до 9в-97? чистоты.

Нами выделен из реакционной смеси побочный продукт окисления VCR, названный примесью PI. Примесь.была очищена до 92% чистоты (по данным ВЗЖХ) - и для нее был получен ряд спектров.

Масс-спектр.__(ЕАВ-)_имел-лик_молекулярного иона со значением М-+Н-равным 840, соответствующим побочному продукту окисления винкристина""С4е^1^^~"824,^" "т.е~. "824+16. На спектре FAB есть сигналы ионов: 780, 679, которые могли бы образоваться при отрыве молекул метанола (МеОНГ- 32) и N-фэрмила (С=0 - 28), т. е. 840 -32 - 28 = 780.

Предположение, что PI является Ф -оксидом винкристина мы проверяли восстанослением примеси PI с водным раствором FeS04 и с NaBH^ в метаноле. На основе ТСХ можно преддоложить, что восстанавливается как N-окись, так и формильная группа соединения.

тт

Из анализа сигналов ПМР и С-ЯМР спектров можно сделать вывод

о сохранении всех лабильных функциональных групп в молекуле PI,

при сравнении с винкристином, и предположить, что PI является 61

N -оксидом винкристина. - В результате лабораторных препаративных" наработок, выполненных

на-основе- двух-указанных -способов, была "наработана' субстанция винкристина для разработки лекформы (лиофилизированный порошок с лактозой), для токсикологических и доклинических- испытаний. Утвержден лабораторный регламент производства винкристина.

го

Вывода

1. Изучена область применения кислотнокатализируемой циклоконденсации нитрилов в синтезе 3-аминоизохинолинов, реакционная способность замещенных фенилацетонитршюв в синтезе конденсированных-и--полифункциональных систем, например -11-амино-бензо [ с ]фенантридинов, 4-бензил-З-аминоизохинолинов.

2. Показано , что на направление реакции влияют факторы : характер и положение функциональных групп в бензольном кольце фенилаЦетбнитрила, стерические и электронные факторы а-замещающие г фрагментов, а также нуклеофильность кислот-катализиторов" (HCl, CFgSOgH," др.); ~ .....

3. Исследованы побочные направления реакций «-замещенных фенилацетонитршюв. . Выделены и охарактеризованы новые соединения: 5,7-бис(3,4-диметоксифенил)-5-гидрокси-8-имино-1,4-дитиациклооктан и др. Структура выделенных соединений доказана спектральными методами с использованием ИК-, ПМР-,

то

С-ЯМР- и масс-спектров.

4. Оптимизирован синтез 3-амшю-6,7-диметокси-1-метилизохинолина. Подучена новая группа биологически активных соединений, производных 3-бензоиламшо-6,7-диметокси-1-метилизохинолина. 3N-(4-метилбензоил)- и ЗК-(4-метоксибензоил)-производные проявили цитотоксическую активность в тестах на

о

включение "Н-тимидина в карщшому -линии CaOV.

5. Разработан лабораторный" регламент--получения -винкристина сульфата (цитот-оксического средства) окислением винбластина сульфата.

Список работ: ________

1. Tolkachev V.N., Skurydina D.F.', Nikolaeva Т.О., Sereda A.V., Sukhov I.E., Lapa G.B., Tolkachev O.N., Sokolov S. Ya. Structure-antitumor-. activity study oi polyoxygenated indoles and Isoqulnolines // XVI International cancer congress New Delhi. India - 30 Oct. - 5 Nov. 1994. Abstract Book - I, PSBII - 15, P. 303,- - .....'

2. Sereda A.V., Sukhoy I.E., 1лра G.B., Tolkachev O.N. Acid promoted cyclocondensation of. arylacetonltriles. The X th Internationl conference jm _organic _■ synthesis. December 11-16 1994. Bangalore, India. Abstract . P WED9y. p. 1Y9.

3 Середа А.В., [сухов И.Е.], Лапа Г.В., Золотарев Б.М., Ярцева И.А., Толкачев О.Н.. КИОЛОТНОКАТАЛИЗИРУИШ ЦИКЛОКОНДЕНСАВДЯ НИТРИЛОВ. II. НОВЫЙ СИНТЕЗ 3-АМИН0И30ХИН0ЛШ0В, ЗЧЩДОИЛАШШЗОХИНОЛИНОВ И ПРОИЗВОДНЫХ З-ИМйНО-2-АЗАСПИРО [4,5]ДЕКА-6,9-Дй5Н-8-0НА // ЖОрХ - 1994 - N 12 - С.

------4—Лапа-Г.Б., Толкачев В.0.,-Иванова Т.П. ; Толкачев О.Н.:

КИйТОШОКАГАЛШИРУЕМАЯ ЩШЖОНДЕНСАЦИЯ НИТРИЛОВ. III. СИНТЕЗ ЗАМЕЩЕННЫХ З-АаШНОИЗОХИНОЛИНОВ И ИХ ВДТОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ. // Хим. Фарм. К. - 1995 - N - С.

5 Середа А.В., Лапа Г.Б., 'Сухов И.Е.1 , Белова Л.Ф., Соколов С.Я., Толкачев O.H.. КИСЛ0ТН0КАТАЛИЗИРУЕМАЯ ЦИКЛОКОНДЕНСАЦИЯ

_____ _ НИТРРОВ,_____IV.______СИНТЕЗ____И- - СПАЗМОЛИТИЧЕСКАЯ---- АКТИВНОСТЬ

________. .1-ЗАМЕЩЕННЫХ 3-АМЖ0И30ХИН0ЛИН0В И - ИХ ПРОИЗВОДНЫХ // Хим.- Фарм.

- Ж. В печати. ~ ~" '

Множ. цех АО "Турбо-техника" Зак. 130 25.04.95 Тир. 100