Новые синтетические трансформации бетулина и его производных тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

На правах рукописи

МЕДВЕДЕВА Наталья Ивановна

НОВЫЕ СИНТЕТИЧЕСКИЕ ТРАНСФОРМАЦИИ БЕТУЛИНА И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ

02.00.03 - Органическая химия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

УФА-2005

Работа выполнена в Институте органической химии Уфимского научного центра Российской Академии наук.

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

кандидат химических наук, доцент

Флехтер О. Б.

член-корреспондент РАН Кучин А. В.

кандидат химических наук, старший научный сотрудник Боцман Л. П.

Ведущая организация: Тихоокеанский институт биоорганической

химии ДВО РАН

Защита диссертации состоится 21 октября 2005 года в 1400 часов на заседании диссертационного совета Д 002.004.01 в Институте органической химии Уфимского научного центра РАН по адресу: 450054, Башкортостан, г. Уфа, проспект Октября, 71.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке УНЦ РАН.

Автореферат разослан 8 сентября 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор химических наук

Валеев Ф. А.

</5959

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Растительные трихерпеноиды и продукты их синтетических трансформаций уверенно выдвигаются в качестве перспективных лекарственных препаратов. Так, на основе производных глицирризиновой и глицирретовой кислот разработаны высокоэффективные противовирусные (анти-ВИЧ), противовоспалительные и противоязвенные препараты; олеаноловая кислота успешно используется в качестве гепатопротектора. Бетулиновая кислота проходит предклиническую апробацию как средство для лечения метастатических меланом. Некоторые производные лупановых тритерпеноидов образовали группу анти-ВИЧ агентов с новым механизмом действия.

В последние годы всё большее внимание уделяется развитию методологии синтеза тритерпеноидов с более глубоким изменением нативного скелета. Так, 2-циано-3,12-диоксоолеан-1,9(11)-диен-28-овая кислота рекомендована к клиническим испытаниям в качестве ингибитора синтазы оксида азота и препарата для лечения различных воспалений и злокачественных опухолей.

Таким образом, проведение исследований в области трансформаций тритерпеноидов, а также синтез на их основе ценных для медицины веществ является актуальным.

Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Института органической химии Уфимского научного центра РАН по теме: «Синтез биологически активных веществ на основе растительных терпеноидов» (регистрационный номер 01.99.0011836).

Работа осуществлялась при финансовой поддержке Российского Фонда Фундаментальных Исследований (гранты № 00-03-81174, № 01-03-33131, 0203-81007, 05-03-32832), комплексной программы Президиума РАН "Направленный синтез веществ с заданными свойствами и создание функциональных материалов на их основе" и в рамках научной школы

академика Г. А. Толстикова (грант президента РФ на поддержку молодых учёных и ведущих научных школ НШ-1488. 2003.3).

Цель работы. Синтез новых биологически активных производных бетулина. Решаемые задачи:

- разработка новых схем скелетных трансформаций бетулина и его производных по кольцам А и Е;

- синтез новых фармакологически активных производных тритерпеноидов путем модификации функциональных групп с сохранением нативной структуры.

Научная новизна. Впервые разработаны методы синтетических трансформаций бетулина, позволившие получить новые производные А-динор-, А-тринор- и А-секоолеанана, а также А-тринор-, Е-нор-, тетранор-, А-секолупана. Синтезированы новые гетероциклические производные метилбетулоната, осуществлены реакции гликозилирования и ацилирования бетулина и аллобетулина. В ходе восстановительного превращения перекисных продуктов озонирования производных Зр-О-ацетил-22( 17-»28)<абео-луп-17(28),20(29)-диена в результате переэтерификации ацеталь-кетального типа получен тритерпеноид с триоксановым фрагментом в цикле Е. При озонировании А-мео-ангидропроизводных аллобетулина выделены ранее неизвестные устойчивые озониды.

Практическая значимость. Осуществлён синтез частично растворимых в воде 2-дезокси-а-1-а/?абино-гексопиранозидов метилового эфира бетулиновой кислоты. Предложены эффективные условия изомеризации бетулина в аллобетулин путем использования трифторуксусной кислоты в качестве кислотного катализатора. Синтезированы и охарактеризованы более 70 новых тритерпеновых производных, среди которых выявлены вещества с противовирусной, гепатопротекторной, противовоспалительной и противоязвенной активностью, антифвдантным и инсектицидным действием. Апробация работы. Результаты исследований доложены на четырёх Молодежных научных школах по органической химии (Екатеринбург 2000 г.,

2002 г.; Новосибирск 2001 г., 2003 г.); XVI Международном симпозиуме по медицинской химии (Болонья, 2000 г.); XII Европейском симпозиуме по органической химии (Гронинген, 2001 г.); Научной конференции, посвященной 70-летию со дня рождения академика В. А. Коптюга "Современные проблемы органической химии" (Новосибирск, 2001 г.), на I и II Всероссийских конференциях "Химия и технология растительных веществ" (Сыктывкар, 2000 г., Казань, 2002 г.); на VI Международной конференции "Биоантиоксидант" (Москва, 2002 г.); Международной конференции по природным и физиологически активным веществам (Новосибирск, 2004 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 статей в центральных журналах, тезисы 11 докладов на конференциях и симпозиумах. Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из обзора литературы на тему "Нативные и полу синтетические тритерпеноиды в качестве перспективных противоопухолевых и противовирусных агентов", двух глав (обсуждение результатов, экспериментальная часть) и приложения. Список литературы включает 216 наименований. Объем работы составляет 162 страницы, в том числе 14 рисунков, 26 схем, 3 таблицы.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ В результате синтетических трансформаций высших терпеноидов в последние годы получены новые убедительные примеры перспективности данного научного направления для медицины. Так, для доклинических исследований нами рекомендуются бетулиновая кислота в качестве ингибитора энтеровирусов, диникотинат бетулина как гепатопротектор и дигидрохинопимаровая кислота как противоязвенный агент. Дальнейшее развитие исследований в этой области направлено, прежде всего, на проведение трансформаций доступного тритерпеноидного метаболита группы лупана - бетулина, имеющего надежные сырьевые источники в России и технологичные методы выделения из отходов деревопереработки коры березы. Поскольку наиболее интересные производные тритерпеноидов

с ценной фармакологической активностью были получены ранее путем обычной модификации различных функциональных групп, то логичным направлением работы является синтез новых ацилатов, гликозидов, гетероциклических и других производных (раздел 1). Кроме бетулина в качестве еще одного объекта для трансформаций нами выбран тритерпеноид олеананового типа аллобетулин, легко синтезируемый из бетулина. Поскольку скелетные превращения бетулина изучены в гораздо меньшей степени, чем трансформации тритерпеноидов с сохранением нативной структуры, нами разработано несколько новых перспективных подходов синтеза А-нор-, А-секо- и Е-нор-производных с использованием в качестве ключевой стадии озонолиза тритерпеновых олефинов (раздел 2). 1. Синтез новых тритерпеновых производных лупанового и 19(5,28-эпокси-олеананового типов с сохранением нативной структуры 1.1. Синтез ацилатов Зр-гидрокси- и 3-оксиминотритерпеноидов

Новые группы ацилатов тритерпеновых спиртов: аллобетулина 1 и 28-оксоаллобетулина 2, бетулина 3 и бетулиновой кислоты 4 получены ангидридным и хлорангидридным методами. Гемисукцинаты, гемифталаты аллобетулина и 28-оксоаллобетулина 5-8 синтезированы кипячением тритерпеновых спиртов 1, 2 с трёхкратным избытком соответствующего ангидрида в пиридине с выходом 88-95% (схема 1).

Условия: а. янтарный или фгалевый ангидрид, пиридин, 115 °С, 15 ч

Эфиры пиретроидных кислот 9-11 и 15-20, циннамат 21, метоксициннамат 22 и никотинаты 23, 24 получены в результате

СООН

1,5,7 Х- Нг, 2,6, 8 Х = 0

этерификатщи спиртов 1-4 избытком соответствующих хлорангидридов кислот, проведённой в смеси пиридина-трибутиламина, с выходами 58-86% после очистки колоночной хроматографией.

28-Монозамещённые ацилаты бетулина 12-14, содержащие фрагменты пиретроидных кислот получены с использованием 1.5 экв. ацилирующего агента (выход 58-64%) (схема 2).

Условия- а 1 5 ммоль хлорангидрида кислоты, СбНбК-ВизМ, 20 °С, 4 ч;

Ь 3 0 ммоль хлорангидрида кислоты, С5Н5М-Ви3М, 60-70 °С, 3 ч

Строение ацилатов подтверждено данными элементного анализа, ИК и

ЯМР спектров. В спектрах ЯМР 13С сигналы сложноэфирных связей peí истрируются в области 5 170.0-173.9 м.д., отмечается также слабопольный сдвиг сигналов атомов СЗ и С28.

Синтез тритерпеновых ацилированных оксимов в литературе практически не описан. Нами в результате взаимодействия оксимов бетулоновой кислоты 25, метилового эфира бетулоновой кислоты 26 и 28-оксоаллобетулона 27 с избытком уксусного, янтарного, фталевого ангидридов или хлорангидрида никотиновой кислоты в среде бензола в присутствии основания (Et3N) выделены ацетил- 28, 31, 34, гемифталил- 29, 32, 35, гемисукцинил- 30, 33, 36 и никотиноил- 37 оксимины с выходами 6478% после очистки колоночной хроматографией (схема 3).

Схема 3

HON'

COOR

25,26

COOR

25,28-30,37 R=H, 26,31-33 R = CH3

28-33, 37

HON

28,31, 34 Х = %ДСНз 29,32,35 Х- Ns

НООС

34-36

° 30,33,36 X = N у*

37 Х= N4

Условия' а уксусный, янтарный, фгалевый ангидрид или

хлоран гидрид никотиновой кислоты,СвНб/йзЫ, 25 °С, 4 ч

Структура соединений 28-37 подтверждена данными ЯМР спектров, в которых отмечены характерные сигналы сложноэфирных групп в области 8 171.1-174.7 м.д. и протонов введённых фрагментов кислот.

1.2. Синтез 2-дезокси-а-гликозидов 28-оксоаллобетулина и метилового эфира бетулиновой кислоты

Синтез новых тритерпеновых 2-дезокси-а-гликозидов осуществлён гликальным методом. В результате гликозилирования 28-оксоаллобетулина 2 и метилового эфира бетулиновой кислоты 38 ацетатами /,-глюкаля или Ь-рамналя в присутствии сульфокислого катионита КУ-2-8 (Н+ - форма) и 1лВг в смеси СН2С12 - СН3СМ в безводных условиях при комнатной температуре вьщелены 3,4,6-три-Оацетил-2-дезокси- 39, 41 и 3,4-ди-Оацетил-2,6-дидезокси-а-^-ардбино-гексопиранозиды 40,42 с выходом 75-85% (схема 4).

Схема 4

К

^ко

СООСНз

41,42,45,46

г- 39,41 Я = СН2ОАс, Я=Ас Ь 40,42 К= СНз, К=Ас

43.45 Я = СН2ОН, Я = Н

44.46 Я= СН3, Я= Н Условия'а \ О-*, где Я= СН2ОАс или СН3,

АсоЛ- катионит КУ-2-8 (Н+), ЫВг, 20 "С, 3 ч; Ь. 5% КОН/МеОН, 20 "С, 3 ч

(З-Аномеры гликозидов методами ТСХ и ЯМР обнаружены не были. Протоны аномерных центров в спектрах ЯМР !Н 2-дезокси-а-Ь-арабино-гексопиранозвдов 39-42 обнаружены при 5 4.91 м.д. в виде дублета (•/,^^ =

Ас о

2.0-2.6 Гц), что говорит об их экваториальной ориентации, а значит, аксиальном расположении С1 -О-связи с агликоном и а-гликозидной связи.

Мягкое дезацетилирование соединений 39-42 в щелочном метаноле привело к получению целевых З-О-2-дезокси- и 3-0-2,6-дидезокси-а-£-арабиио-гексопиранозидов 43-46 с выходами 82-90%. 2-Дезокси-а-гликозиды метилового эфира бетулиновой кислоты 45, 46 полностью растворялись в 50% водном этаноле, растворимость в воде составила ~ 5-7%. 1.3. Синтез гетероциклических производных метилбетулоната

В качестве исходного соединения в синтезе новых гетероциклических производных лупановых тритерпеноидов использовали легко доступный

Условия, а НСООй, МеСЖа, бензол, 81°С, 3 ч; Ь.М2НсН20, ЕЮН, 81 °С, 2 ч;

с Ш2ШСОМН2 -на Ка0Ас.ЗН20, 40 °С, 6 ч; а ЭОС^, ОВД, 22 °С, 6 ч

метиловый эфир бетулоновой кислоты 47 (схема 5).

Синтез [3,2-с]-пиразола 49 проводили взаимодействием 2-гидроксиметиленпроизводного 48 с гидразин-гидратом при кипячении в ЕЮН с выходом 80%. Согласно спектру ЯМР 13С, сигналы пиразольного кольца обнаруживаются в слабом поле при § 112.5 (С2), 134.3 (СГ) и 177.0 (СЗ) м.д.

По реакции Харда-Моури из семикарбазона метилбетулоната 50 взаимодействием с избытком 80С12 в среде безводного СН2С12 получена смесь 1,2,3-тиадиазола 51 (выход 75%) и минорного тион-Б-оксида 52 (12%), которые были разделены колоночной хроматографией. В спектрах ЯМР 13С соединений 51, 52 наблюдаются сигналы тиадиазольного фрагмента (5 165.3, 145.1 м.д.). Кроме того, в спектрах ЯМР *Н пиразола 49 и тиадиазолов 51, 52 прослеживается влияние гетероциклического фрагмента на ХС гем-диметильных групп С23, С24 (слабопольный сдвиг на « 0.5 м.д.).

Таким образом, впервые получены и охарактеризованы [3,2-с]-пиразол-и 1,2,3-тиадиазол-производные, аннелированные с кольцом А метилового эфира бетулоновой кислоты.

2. Синтез и превращения нор- и секотритерпеноидов

2.1. Синтез стероидоподобного производного 19(3,28-эпоксиолеанана

Синтез тритерпеноидов, содержащих двойную связь в цикле А, предпринимался неоднократно с целью получения соединений с повышенной базовой фармакологической активностью. Так, производные А1(2) и А4(5) 18аН- и 18(Ш-глицирретовой кислот обнаружили мощную противовоспалительную активность. Интерес представляют также превращения, приводящие к стероидоподобным 4,4-динортритерпеноидам, осуществлённые недавно на основе производных олеаноловой, а ранее -глицирретовой кислот. Подобные соединения подавляют активацию ингибитора фактора некроза опухоли в макрофагах и эффективны как ингибиторы выработки Ж)-синтазы.

Актуальной является разработка схемы синтеза стероидоподобного производного олеананового типа из ашюбетулина, легко получаемого

11

изомеризацией бетулина. Данная катализируемая кислотами перегруппировка известна давно, однако нами обнаружено, что использование в качестве кислотного агента СР3СООН позволяет достаточно быстро при простой экспериментальной процедуре получать аллобетулин 1 с количественным выходом. Осуществлённый семистадийный синтез стероидоподобного производного представлен на схеме 6.

Условия: а СР3СООН, СН2С12,20 °С, 8 мин; Ь РС15, бензол-толуол, 0 °С, 30 мин;

с 03, СН2СЬ, -60 °С, гп/АсОН или Ме28; 4 МеМ$, ТГФ/ЕЬО, 20 "С, 3 ч; е. РОСЬ, пиридин, 20 °С, 1 ч; {. КОН/МеОН, 60 °С, 30 мин

На первом этапе аллобетулин подвергали дегидратации в присутствии РС15 при Т < 0 °С с образованием 3-изопропшшден-Л-нео-5аН-19Р,28-эпокси-18аН-олеана 53, который далее озонировали в СН2С12 при -60 °С и после восстановления перекисных продуктов (2п/АсОН, Ме2Б или гидрированием над катализатором Линдлара) вьщеляли 4,23,24-тринор-^-нео-5(ЗН-19р,28-эпокси-18аН-олеан-3-он 54. С использованием расчетов по

Синтез [3,2-с]-пиразола 49 проводили взаимодействием 2-гидроксиметиленпроизводного 48 с гидразин-гидратом при кипячении в ЕЮН с выходом 80%. Согласно спектру ЯМР 13С, сигналы пиразольного кольца обнаруживаются в слабом поле при 5 112.5 (С2), 134.3 (С Г) и 177.0 (СЗ) м.д.

По реакции Харда-Моури из семикарбазона метилбетулоната 50 взаимодействием с избытком БОСЬ в среде безводного СН2СЬ получена смесь 1,2,3-тиадиазола 51 (выход 75%) и минорного тион-Б-оксида 52 (12%), которые были разделены колоночной хроматографией. В спектрах ЯМР ,3С соединений 51, 52 наблюдаются сигналы тиадиазольного фрагмента (5 165.3, 145.1 м.д.). Кроме того, в спектрах ЯМР *Н пиразола 49 и тиадиазолов 51, 52 прослеживается влияние гетероциклического фрагмента на ХС гем-диметильных групп С23, С24 (слабопольный сдвиг на « 0.5 м.д.).

Таким образом, впервые получены и охарактеризованы [3,2-с]-пиразол-и 1,2,3-тиадиазол-производные, аннелированные с кольцом А метилового эфира бетулоновой кислоты.

2. Синтез и превращения нор- и секотритерпснондов

2.1. Синтез стероидоподобного производного 19р,28-эпоксиолеанана

Синтез тритерпеноидов, содержащих двойную связь в цикле А, предпринимался неоднократно с целью получения соединений с повышенной базовой фармакологической активностью. Так, производные Д1(2) и Д4(5) 18аН- и 18рН-глицирретовой кислот обнаружили мощную противовоспалительную активность. Интерес представляют также превращения, приводящие к стероидоподобным 4,4-динортритерпеноидам, осуществлённые недавно на основе производных олеаноловой, а ранее -глицирретовой кислот. Подобные соединения подавляют активацию ингибитора фактора некроза опухоли в макрофагах и эффективны как ингибиторы выработки ЫО-синтазы.

Актуальной является разработка схемы синтеза стероидоподобного производного олеананового типа из аллобетулина, легко получаемого

11

изомеризацией бетулина. Данная катализируемая кислотами перегруппировка известна давно, однако нами обнаружено, что использование в качестве кислотного агента С^СООН позволяет достаточно быстро при простой экспериментальной процедуре получать аллобетулин 1 с количественным выходом. Осуществлённый семистадийный синтез стероидоподобного производного представлен на схеме 6.

Условия: а. СР3СООН, СН2С1г, 20 "С, 8 мин; Ь. РС15, бензол-толуол, О "С, 30 мин;

с. Оз, СН2СЬ, -60 "С, ЫАсОН или Ме28; Л МеМ$, ТГФ/В20,20 °С, 3 ч, е РОСЬ, пиридин, 20 "С, 1 ч, I. КОН/МеОН, 60 °С, 30 мин

На первом этапе аллобетулин подвергали дегидратации в присутствии РС15 при Т < 0 °С с образованием 3-изопропилиден-Л-нео-5аН-19р,28-эпоксн-18аН-олеана 53, который далее озонировали в СН2С12 при -60 °С и после восстановления перекисных продуктов (7п/АсОН, Ме28 или гидрированием над катализатором Линдлара) вьщеляли 4,23,24-тринор-Л-нео-5рН-19р,28-эпоксн-18аН-олеан-3-он 54. С использованием расчетов по

аддитивным схемам и интерпретации спектров ЯМР 13С с модуляцией константы СН-взаимодействия и двумерной спектроскопии СН-корреляции нами проведено отнесение сигналов углеродных и протонных атомов в спектрах А-норкетона 54. Эти данные свидетельствуют об изменении конфигурации протона Н5 с а- в олефине 53 на р- в норкетоне 54 и сочленения циклов А/В с транс- в более стабильное г/мс-состояние.

В результате действия реагента Гриньяра на А-норкетон 54 получен спирт 55 в виде смеси изомеров (соотношение 1:4 по данным спектра ЯМР !Н). Дегидратация спирта 55 в пиридине в присутствии РОС13 протекала при комнатной температуре с образованием 3-метил-4,23,24-тринор-Л-иео-19Р,28-эпокси-18осН-олеан-3(5)-ена 56, что подтверждалось наличием сигналов двойной связи С3(5) в спектре ЯМР 13С (5 126.1, 141.6 м.д.). Озонирование олефина 56 проводили в СНгСЬ при - 60 °С и после восстановления перекисей в реакционной смеси содержались два продукта: целевой 3,5-секо-3,5-дикетон 57 (35%) и 3,5-озонид 58 (45%), выделенные в индивидуальном состоянии после очистки колоночной хроматографией и охарактеризованные ЯМР и масс-спектрами. Последним этапом схемы 6 стала альдольная конденсация 3,5-секодикетона 57, осуществлённая в среде МеОН в присутствии КОН. Выход 23,24-динор-19|3,28-эпокси-18аН-олеан-3-он-4(5)-ена 59 в пересчёте на исходный бетулин составил 16%.

Таким образом, нами впервые реализована схема синтеза производного 19р,28-эпоксиолеанана со стероидным кольцом А из бетулина. 2.2. Синтез и превращения А-тринортритерпеноидов

4,23,24-Тринор-5рН-кетон 54 является перспективным соединением для синтеза модифицированных нортритерпеноидов с г/ис-сочленением циклов А/В. С использованием окисления по реакции Байера-Виллигера, Бекмановской перегруппировки первого и второго рода кетоксима и построения тиадиазольного фрагмента по реакции Харда-Моури получены производные 60-65 (схема 7). Так, окисление А-нор-5рН-кетона 54 т-СРВА давало лактон 60 с хорошим выходом, причем для полной конверсии

13

исходного соединения потребовалось 7 дней. Перегруппировка оксима 61 под действием БОСЬ в абсолютном диоксане протекала с количественным образованием лактама 62. В соединениях 60 и 62 цис-сочленение колец А/Б сохраняется, что подтверждается сигналом Н5 в виде уширенного синглета с малыми КССВ.

Условия, а т-СРВА, 20 "С, 7 дней, b. NH2OHHCl, пиридин, 115 "С, 2 ч; с NH2NHCONH2 HCl, Et0H-H20, 40 "С, 6 ч; d. SOCl2, диоксан, 22 °С, 5 ч; е. p-TsCl, пиридин, 115 "С, 5 ч; f SOCl2, СН2С12,22 °С, 6 ч

В результате перегруппировки Бекмана второго рода оксима 61 под

действием и-TsCl в пиридине выделили тритерпеновый 3,5-секо-нитрил 63.

Реакция гетероциклизации семикарбазона 64 протекала в присутствии

аддитивным схемам и интерпретации спектров ЯМР 13С с модуляцией константы СН-взаимодействия и двумерной спектроскопии СН-корреляции нами проведено отнесение сигналов углеродных и протонных атомов в спектрах А-норкетона 54. Эти данные свидетельствуют об изменении конфигурации протона Н5 с ос- в олефине 53 на (3- в норкетоне 54 и сочленения циклов А/В с транс- в более стабильное цис-состояние.

В результате действия реагента Гриньяра на А-норкетон 54 получен спирт 55 в виде смеси изомеров (соотношение 1:4 по данным спектра ЯМР 'Н). Дегидратация спирта 55 в пиридине в присутствии РОС13 протекала при комнатной температуре с образованием 3-метил-4,23,24-тринор-А-нео-19р,28-эпокси-18аН-олеан-3(5)-ена 56, что подтверждалось наличием сигналов двойной связи С3(5) в спектре ЯМР 13С (5 126.1, 141.6 м.д.). Озонирование олефина 56 проводили в СН2С12 при - 60 °С и после восстановления перекисей в реакционной смеси содержались два продукта: целевой 3,5-секо-3,5-дикетон 57 (35%) и 3,5-озонвд 58 (45%), выделенные в индивидуальном состоянии после очистки колоночной хроматографией и охарактеризованные ЯМР и масс-спектрами. Последним этапом схемы 6 стала альдольная конденсация 3,5-секодикетона 57, осуществлённая в среде МеОН в присутствии КОН. Выход 23,24-динор-19р,28-эпокси-18аН-олеан-3-он-4(5)-ена 59 в пересчёте на исходный бетулин составил 16%.

Таким образом, нами впервые реализована схема синтеза производного 19Р,28-эпоксиолеанана со стероидным кольцом А из бетулина. 2.2. Синтез и превращения А-тринортритерпеноидов

4,23,24-Тринор-5рН-кетон 54 является перспективным соединением для синтеза модифицированных нортритерпеноидов с г/нс-сочленением циклов А/В. С использованием окисления по реакции Байера-Виллигера, Бекмановской перегруппировки первого и второго рода кетоксима и построения тиадиазольного фрагмента по реакции Харда-Моури получены производные 60-65 (схема 7). Так, окисление А-нор-5рН-кетона 54 т-СРВА давало лактон 60 с хорошим выходом, причем для полной конверсии

13

исходного соединения потребовалось 7 дней. Перегруппировка оксима 61 под действием БОСЬ в абсолютном диоксане протекала с количественным образованием лактама 62. В соединениях 60 и 62 цис-сочленение колец А/В сохраняется, что подтверждается сигналом Н5 в виде уширенного синглета с малыми КССВ.

Условия, а /я-СРВА, 20 °С, 7 дней; b. NH2OH HCl, нирщщн, 115 °С, 2 ч; с NH2NHC0NH2 HC1, ЕЮН-Н20, 40 "С, 6 ч; d SOCl2, диоксан, 22 "С, 5 ч, е. p-TsCl, пиридин, 115 °С, 5 ч; f SOCl2, СН2С12,22 "С, 6 ч

В результате перегруппировки Бекмана второго рода оксима 61 под

действием л-TsCl в пиридине выделили тритерпеновый 3,5-секо-нитрил 63.

Реакция гетероциклизации семикарбазона 64 протекала в присутствии

избытка ЗОС12в СН2С12 с образованием 1,2,3-тиадиазола 65 (74%), структура которого подтверждена ЯМР и масс-спектрами.

Для получения производных тетранорлупана нами реализован описанный выше подход, заключающийся в окислительном расщеплении озонолизом изопропилиденового фрагмента в олефине 66, который может быть легко получен из метилового эфира бетулиновой кислоты 38 в результате перегруппировки Вагнера-Меервейна (схема 8). Озонолиз ангидропроизводного 66 привел к получению метилового эфира 4,23,24,29-тетранор-Л-«ео-5рН-3,20-диоксо-луп-28-овой кислоты 67 с 1/нс-сочленением колец А/В, что подтверждается значением ХС атома С5 в спектре ЯМР 13С (б 57.8 м.д.).

Условия- а. РСЬ, бензол-толуол, О "С, 30 мин; Ь. 0},СИ2С^, -60 "С, ЫАсОН или Ме2в; с. ЫН2ОН-НС1, пиридин, 115 "С, 3 ч

Тритерпеновый кетон 67 был охарактеризован в виде соответствующего оксима 68, полученного стандартной реакцией с ЫН2ОН НС1 в пиридине, что подтверждается сигналами атомов при СЗ, С20 при 5 165.7, 162.3 м.д. в спектре ЯМР 13С.

Таким образом, впервые получены производные тринор-19р,28-эпокси-18а-олеана 60-65 и тетранор-лупана 67,68 с г/ис-сочленением циклов А/В. 2.3. Синтез 4,5-секотритерпеноидов и устойчивых озонидов аллобетулина

Известно, что дегидратация зр-гидрокситритерпеноидов в присутствии РС15 при Т = 0-10 °С позволяет получать олефины с эндо-положением

двойной связи в кольце А. В результате перегруппировки Вагнера-Меервейна из аллобетулина 1 и метилового эфира бетулиновой кислоты 38 нами получены и охарактеризованы 3(5)-ен-производные 69 и 73 (схема 9). Их озонолиз в СН2С12 при -60 °С с восстановлением перекисных продуктов позволил получить новые производные 4,5-секо-3,5-диоксо-19р,28-эпокси-18а-олеана 71 и 4,5-секо-3,5,20-триоксо-29-норлупана 74, охарактеризованные в виде соответствующих оксимов 72 и 75.

Условия а РС15, бензол-толуол, 5-10 °С, 30 мин, Ь 03, СН2СЬ, -60 °С, ЫАсОИ или Ме23; с Ш2ОН.НС1, пиридин, 115 °С, 3 ч

В качестве минорного продукта озонолиза указанного ангидропроизводного аллобетулина 69, содержащего стерически затруднённую двойную связь, был выделен За,5а-эпоксид 70, структура которого подтверждена РСА. При озонировании ангидропроизводного метштбетулината 73 аналогичный эпоксид в индивидуальном состоянии

выделен не был, что, по-видимому, связано с трудностью хроматографирования реакционной массы.

Выше нами отмечалось (раздел 2.1.), что при озонолизе олефина 56 был выделен озонид 58, который оказался устойчив к действию таких восстановителей как гп/АсОН или Ме28. Отметим, что наличие перекисных фрагментов положительно сказывается на проявлении биологических свойств (например, дитерпеноид секо-кадалинового ряда артемизинин известен своей высокой противомалярийной активностью). Мы предположили, что устойчивые озониды можно получить из других производных аллобетулина, содержащих затруднённую двойную связь.

Действительно, после озонирования ангидропроизводных 53, 69 без восстановления перекисных продуктов с последующей очисткой реакционной массы колоночной хроматографией нами были выделены озониды 76 и 77 (схема 10), физико-химические свойства которых не изменялись в течение двух лет при хранении в обычных условиях. Согласно масс-спектрам, озониды 76 и 77 имеют состав С30Н48О4, в спектрах ЯМР отмечены соответствующие сигналы карбонильных атомов (5 110.5 и 112.0 м.д. для соединения 76 и 5 113.2 и 118.7 м.д. для соединения 77).

Схема 10

Условия: а. 03, СНгСЬ, -60 °С

Таким образом, при озонолизе тритерпеновых олефинов впервые получены производные 4,5-секо-олеана и 4,5-секо-лупана. Впервые обнаружено образование устойчивых тритерпеновых озонидов при озонолизе 3(4)- и 4(5)-ен-производных 19Р,28-эпокси-18аН-олеана без восстановления перекисных продуктов.

2.4. Новая модификация цикла Е тритерпеноидов типа лупана

Модификация кольца Е лупановых тритерпеноидов проводилась, в основном, исходя из производных 18(19)-лупена с использованием окислителя Яи04 с образованием три-, тетранорпроизводных, в ряде случаев обладающих противоопухолевой активностью.

^ I—79 Я = Ас (73%) и.82Я = Н (73%) Ас° >^80

Условия: а РОСЬ, пиридин, 100 "С, 2 ч; Ь 03, -60°С, 2гУАсОН или Ме25, ТяО, пиридин, 20 "С, 48 ч, №ОАс/АсОН,ЮО °С, 2 ч, с. 03, СН2С12 - МеОН, -60 °С, 2п/АсОН или Ме28, й 5% КОН/МеОН, 22 °С, 2 ч Нами предложено новое направление скелетной модификации цикла Е

тритерпеноидов типа лупана, базирующееся на озонолизе производных

22(17->28)-абео-луп-17(28),20(29)-диена. Зр-0-Ацетил-22(17->28)-а<5ео-луп-

17(28),20(29)-диен 79 был синтезирован из зр-Оацетилбетулина 78

нагреванием в пиридине при 100 °С в присутствии РОС13 (схема 11), его

строение установлено РСА.

Озонолиз диена 79 в растворе при -60°С с последующим восстановлением перекисных продуктов и очисткой колоночной хроматографией привёл к получению продукта, не содержащего ожидаемых карбонильных групп. Согласно масс-спектру, соединение имеет состав Сз,Н4805. Спектр ЯМР |3С характеризуется сигналами трёх углеродных атомов, связанных с атомами кислорода (5 94.8, 104.5 и 105.5 м.д.), что указывает на наличие триоксанового фрагмента в кольце Е. Это позволило определить структуру продукта озонолиза как кеталь 80. Для подтверждения строения был проведен озонолиз 3(3-<9-ацетил-22(17—>28)дбео-29-нор-20-кето-луп-17(28)-ена 81, полученного из ЗР-Оацетилбетулина 78 в три стадии. После восстановления продуктов озонолиза кетона 81 выделено соединение, которое по своим физико-химическим и спектральным данным было идентично кеталю 80.

Таким образом, при восстановительном превращении перекисных продуктов озонолиза производных 3 р-0-ацетил-22( 17—>28)-абео-луп-17(28),20(29)-диена в результате переэтерификации ацеталь-кетального типа получено соединение с триоксановым фрагментом, что является новым направлением скелетной модификации цикла Е тритерпеноидов типа лупана. 3. Фармакологическая активность и антифидантное действие тритерпеновых производных лупановой и олеанановой групп*

Противовирусные свойства тритерпеновдов 26, 27, 49, 50, 51, 54, 79, 80, 82, 84 определяли в экспериментах на культурах клеток с вирусами герпеса простого типа 1 (ВГП-1), гриппа А/РРУЖо8госк/34 (Н7Ш) и энтеровирусом ЕСНОб.

Установлено, что все изученные соединения обладают противовирусными свойствами, однако отмечено неодинаковое влияние строения соединений на степень активности.

Высокоактивным в отношении вируса герпеса оказался пиразол метилового эфира бетулоновой кислоты 49 и Зр-Оацетил-22(17->28)-абео-луп-17(28),20(29)-диен 79. Метиловый эфир дигидробетулиновой кислоты 84

19

и оксим метилбетулоната 26 обладают умеренной противовирусной активностью в отношении вируса герпеса простого типа 1 и не активны в отношении двух других использованных вирусов. Малоактивными в отношении ВГП-1 оказались соединения 50, 51, 54, 79 и 80.

В отношении вируса гриппа активность средней степени выраженности проявил кеталь 80. Слабой противовирусной активностью обладали соединения 49, 50, 54, 51, 79. В отношении энтеровируса ЕСН06 соединения 26,27 показали слабую активность.

Исследование гепатопротекторной активности оксима бетулоновой кислоты 25 показало, что соединение обладает выраженной желчегонной активностью, близкой к активности известного гепатопротектора карсила. Кроме того, данное соединение предотвращает образование деструкций слизистой оболочки желудка, однако его противоязвенная активность уступает действию препарата вентера.

Скрининг ацилатов бетулина позволил выявить соединение 16, которое обладало противовоспалительной активностью аналогично препарату сравнения ортофену.

Исследование эффективности аллобетулина 1 и его ацилатов 9 - 11, 24 в отношении личинок колорадского жука Leptinotarsa <1есетНпеа1а показало, что аллобетулин 1 и его эфир с перметриновой кислотой 11 проявляют антифидантную активность во всех использованных концентрациях, последний также сочетает ее с инсектицидным действием.

Таким образом, выявлены новые тритерпеновые соединения, обладающие противовирусной, гепатопротекторной, противоязвенной, противовоспалительной активностью и антифидантным действием.

* Изучение противовирусной активности производных тритерпеноидов выполнено в НИИ эпидемиологии и микробиологии МЗ Беларуси под руководством д.мн. Е.И. Бореко; изучение гепатопротекторной, противоязвенной и противовоспалительной активности выполнено в лаборатории Новых лекарственных средств ИОХ УНЦ РАН под руководством к б н Басченко Н Ж , изучение антифидантной активности выполнено в лаборатории Биохимии адаптивности насекомых ИБГ УНЦ РАН под руководством д б н. Николенко А. Г

Выводы

1. Разработаны новые направления скелетной модификации колец А и Е бетулина, позволившие получить производные А-динор-, А-тринор-. А-секоолеанана и А-тринор-, Е-нор-, тетранор-, А-секолупана.

2. Осуществлён синтез стероидоподобного тритерпеноида 23,24-динор-19р,28-эпокси-18а-олеан-3-он-4(5)-ена из бетулина с общим выходом 16%. На основе 4,23,24-тринор-Л-нео-5рН-19Р,28-эпокси-18а-олеан-3-она получены нортритерпеновые производные с г^ис-сочленением циклов А/В, содержащие фрагменты лактона, лактама, тнадиазола и секонитрила.

3. Предложен перспективный подход синтеза 4,5-секо-тритерпеноидов, основанный на озонолитическом расщеплении 4(5)-ен-производных аллобетулина и метилбетулината. При озонировании А-нео-ангидропроизводных аллобетулина впервые выделены устойчивые озониды.

4. Установлено, что в результате восстановительного превращения перекисных продуктов озонолиза производных Зр-0-ацетил-22(17~>28)абео-луп-17(28),20(29)-диена происходит переэтерификация ацеталь-кетального типа с образованием тритерпенового производного, содержащего триоксановый фрагмент в цикле Е.

5. Проведена функционализация бетулина и аллобетулина с получением производных [3,2-с]пиразола, 1,2,3-тиадиазола, З-О-2-дезокси-, и 3-0-2,6-дидезокси-а-Л-ярабино-гексопиранозидов. Синтезировано 30 новых ацилатов Зр-гидрокси- и 3 -оксиминотритерпеноидов.

6. Среди новых тритерпеновых производных бетулина и аллобетулина выявлены вещества, обладающие противовирусной, гепатопротекторной, противоязвенной, противовоспалительной активностью, антифидантным и инсектицидным действием.

Основное содержание работы изложено в публикациях:

1. Флехтер О. Б., Медведева Н. И., Карачурина JI. Т., Балтина J1. А., Зарудий Ф. С., Галин Ф. 3., Толстиков Г. А. "Синтез и противовоспалительная активность новых ацилпроизводных бетулина" // Хим.-фарм. журнал. -2002. - Т. 36. - №9. - С. 29-32.

2. Нигматуллина Л. Р., Флехтер О. Б., Балтина JI. А., Медведева Н. И., Толстиков Г. А. "Синтез метилового эфира [3,2-с]-пиразол-луп-20(29)-ен-28-овой кислоты" // Химия природ, соедин. - 2002. - №6. - С. 458-459.

3. Флехтер О. Б., Третьякова Е. В., Медведева Н. И., Балтина JI. А., Галин Ф. 3., Толстиков Г. А., Бакулев В. А. "Синтез терпеновых 1,2,3-тиадиазолов на основе циклопентанонпимаровой и бетулоновой кислот" // ЖОрХ. - 2004. -Т. 40.-Вып. 1.-С. 99-101.

4. Медведева Н. И., Флехтер О. Б., Балтина Л. А., Галин Ф. 3., Толстиков Г. А. "Синтез 4,5-секо-производных аллобетулина" // Химия природ, соедин. -2004. - №3. - С. 209-211.

5. Флехтер О. Б., Бореко Е. И., Нигматуллина Л. Р., Павлова Н. И., Медведева Н. И., Николаева С. Н., Третьякова Е. В., Савинова О. В., Балтина Л. А., Карачурина Л. Т., Галин Ф. 3., Зарудий Ф. С., Толстиков Г. А. "Синтез и фармакологическая активность ацилированных оксимов бетулоновой кислоты и 28-оксо-аллобетулона" // Хим.-фарм. журнал. - 2004. - Т. 38. - №3. -С. 31-34.

6. Флехтер О. Б., Бореко Е. И., Нигматуллина Л. Р., Павлова Н. И., Медведева Н. И., Николаева С. Н., Ашавина О. Ю., Савинова О. В., Балтина Л. А., Галин Ф. 3., Толстиков Г. А. "Синтез и противовирусные свойства производных лупановых тритерпеноидов" // Хим.-фарм. журнал. - 2004. - Т. 38.-№7.-С. 10-13.

7. Медведева Н. И., Флехтер О. Б., Третьякова Е. В., Галин Ф. 3., Балтина Л. А., Спирихин Л. В., Толстиков Г. А. "Синтетические трансформации высших терпеноидов. XI. Синтез производных А-нор-5рН-19р,28-эпокси-18ос-олеан-3-она" // ЖОрХ. - 2004. - Т. 40. - Вып. 8. - С. 1140-1145.

8. Флехтер О. Б., Медведева Н. И., Карачурина Л. Т., Балтина Л. А., Галин Ф. 3., Зарудий Ф. С, Толстиков Г. А. "Синтез и фармакологическая активность эфиров бетулина, бетулиновой кислоты и аллобеггулина" // Хим.-фарм. журнал. -2005. - Т. 39. - №8. - С. 9-12.

9. Медведева Н. И., Флехтер О. Б., Балтина Л. А., Галин Ф. 3., Толстиков Г. А. "Синтез 2-дезокси-а-гликозидов бетулиновой кислоты" // Тезисы докладов Молодежной научной школы по органической химии. -Екатеринбург, 2-6 мая 2000 г. - С. 242.

10. Флехтер О. Б., Балтина Л. А., Нигматуллина Л. Р., Медведева Н. И., Ашавина О. Ю., Толстиков Г. А., Галин Ф. 3. "Синтез физиологически активных веществ на основе бетулина и его производных" // Тезисы докладов Всероссийской конференции «Химия и технология растительных веществ». - Сыктывкар, 25-30 сентября 2000 г. - С. 148.

11. Flekhter О., Nigmatullina L., Medvedeva N., Tret'yakova E., Ashavina O., Tolstikov G. "Development of betulinic and quinopimaric acids as a route to new

drugs" // From the Book of Abstracts of XVI International Symposium on Medicinal Chemistry. - Bologna. - Italy, 18-22 September 2000. - PA-153.

12. Медведева Н.И., Флехтер О.Б., Балтина Jl.А., Галин Ф.З., Толстиков Г.А. "Ацилирование бетулина и аллобетулина" // Тезисы докладов Молодежной научной школы-конференции "Актуальные проблемы органической химии". - Новосибирск, 2-6 апреля 2001 г. - С. 179.

13. Flekhter О.В., Nigmatullina L.R., Medvedeva N.I., Ashavina O.Y., Tret'yakova E.V., Barzilova A.B., Baltina L.A., Galin F.Z., Tolstikov G.A. "New transformations of lupane triterpenoids" // From the Book of abstracts of the 12* European Symposium on Organic Chemistry. - Groningen, July 13-18, Netherlands 2001.-P2-76.

14. Flekhter O.B., Nigmatullina L.R., Medvedeva N.I., Ashavina O.Y., Tret'yakova E.V., Baltina L.A., Galin F.Z., Tolstikov G.A. 'Transformations of lupane triterpenoids" // Тезисы докладов научной конференции, посвященной 70-летию со дня рождения академика В. А. Коптюга "Современные проблемы органической химии". - Новосибирск, 17-21 сентября 2001 г. - С. 100.

15. Медведева Н. И., Флехтер О. Б., Балтина Л. А., Галин Ф. 3., Толстиков Г. А. "Синтез норпроизводных метилбетулината" // Тезисы докладов V Молодежной научной школы-конференции по органической химии. -Екатеринбург, 22-26 апреля 2002 г. - С. 293.

16. Карачурина Л. Т., Флехтер О. Б., Сапожникова Т. А., Хисамутдинова Р. Ю., Макара Н. С., Третьякова Е. В., Медведева Н. И., Зарудий Ф. С., Галин Ф. 3., Толстиков Г. А. "Противовоспалительные свойства да- и тритерпеноидов" // Тезисы докладов VI Международной конференции "Биоантиоксидант". - Москва, 16-19 апреля 2002 г. - С. 249-250.

17. Флехтер О. Б., Бореко Е. И., Нигматуллина Л. Р., Медведева Н. И., Балтина Л. А., Толстиков Г. А., Карачурина Л. Т., Галин Ф. 3. "Химические трансформации и биологическая активность лупановых тритерпеноидов" И Материалы II Всероссийской конференции "Химия и технология растительных веществ". - Казань, 24-27 июня 2002 г. - С. 26.

18. Медведева Н. И., Флехтер О. Б., Смирнова И. Е., Галин Ф. 3., Балтина Л. А., Толстиков Г. А. "Синтез производных А-нор-5рН-19р,28-эпокси-18а-олеан-3-она" // Тезисы докладов Международной научной школы-конференции "Актуальные проблемы органической химии". - Новосибирск, 29 сентября-3 октября 2003 г. - Д42.

19. Medvedeva N. I., Flekhter О. В., Galin F. Z., Tolstikov G. A. "Synthesis of a new triterpenoid - steroid hybrid molecule from betulin" // From the Book of Abstracts of 2th International Conference on Natural Products and Physiologically Active Substances Italy, 12-17 September 2004. - PA-115.

И 58 12

РНБ Русский фонд

2006-4 15959

Отпечатано в типографии БИТО

Подписано в печать 23.08.0S. Тираж 125 жз. Заказ 093. 450005, Уфа, ул. Мингажсва, 120

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР "Нативные и полусинтетические 8 тритерпеноиды в качестве перспективных противоопухолевых и противовирусных агентов"

1.1. Введение

1.2. Антимеланомный агент бетулиновая кислота

1.3. Анти-ВИЧ агент 3-0-(3',3'-диметилсукцинил)бетулиновая кислота

1.4. Противовоспалительный и противоопухолевый агент 2-циано- 16 3,12-диоксоолеан-1,9(11)-диен-28-овая кислота

1.5. Противовирусная и противоопухолевая активность нативных 24 тритерпеноидов и их полусинтетических производных

1.6. Фармакологическая активность ряда природных и синтетических 37 тритерпеноидов с изменённым скелетом

ГЛАВА 2. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

2.1. Синтез новых тритерпеновых производных лупанового и 19(3,28- 47 эпокси-олеананового типов с сохранением нативной структуры

2.1.1. Синтез ацилатов ЗР-гидрокси-и 3-оксиминотритерпеноидов

2.1.2. Синтез 2-дезокси-а-гликозидов 28-оксоаллобетулина и 55 метилового эфира бетулиновой кислоты

2.1.3. Синтез гетероциклических производных метилбетулоната

2.2. Синтез и превращения нор- и секотритерпеноидов

2.2.1. Синтез стероидоподобного производного 19|3,28-эпоксиолеанана

2.2.2. Синтез и превращения А-тринортритерпеноидов

2.2.3. Синтез 4,5-секотритерпеноидов и устойчивых озонидов 75 аллобетулина

2.2.4. Новая модификация цикла Е тритерпеноидов типа лупана 80 2.3 Фармакологическая активность и антифидантное действие тритерпеновых производных лупановой и олеанановой групп

ГЛАВА 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ВЫВОДЫ

Химия растительных метаболитов терпеноидного класса сыграла выдающуюся роль в становлении и развитии важнейших разделов современной органической химии. Фитохимические исследования, посвященные изучению компонентного состава растений и строения их метаболитов, ведутся в мире в постоянно увеличивающемся масштабе. Много внимания уделяется средствам народной медицины, история многих из которых насчитывает не одно тысячелетие.

Параллельное развитие фитофармакологии, поставленной на современный экспериментальный уровень, позволило получить превосходные результаты. Не' случайно, что многие крупные фармацевтические компании взяли под контроль фитохимические исследования.

Важным направлением медицинской химии стало изучение синтетических трансформаций растительных метаболитов, выбор которых в качестве объектов для исследований зависит от ряда факторов. Наиболее приемлемым считается исследование растительных метаболитов, о биологической активности которых имеются надежные сведения, и которые являются доступными в настоящее время или в ближайшем будущем по мере формирования сырьевой базы. Трансформации подобных метаболитов, часто уже применяемых в практической медицине, имеют такие цели, как повышение базовой активности, снижение токсичности и побочных эффектов, улучшение транспорта в организме. К примеру, на основе метаболита тиссатаксола, положенного в основу эффективного канцеростатика паклитакселя, получено несколько десятков производных, проходящих в настоящее время доклинические исследования. Выделяемый из полыни сесквитерпен артемизинин обладает уникальной противоплазмодийной активностью и используется для получения более активных водорастворимых производных.

Многие метаболиты сами по себе ценности для медицины не представляют, но обладают привлекающей доступностью. Трансформации таких веществ могут иметь две цели: синтез известных практически важных соединений и синтез веществ с потенциальной ценностью, включаемых в систему биотестирования и фармакологические исследования.

Примерами реализации первой цели могут служить отработанные в промышленном масштабе технологии получения стероидных гормонов, в том числе кортикостероидов на основе растительных стероидов диосгенинал ситостерина.

Направление, связанное с поиском ценных для медицины агентов на основе неактивных метаболитов, к настоящему времени накопило немало убедительных примеров. Так, побочный алкалоид опия используется для получения таких необходимых агентов, как налаксон и бупренорфин.

Есть и другие примеры реализации второй цели. Они не оставляют сомнения в перспективности исследований по целенаправленным трансформациям растительных метаболитов в качестве важного научного направления. Необходимо подчеркнуть особую актуальность этих исследований для нашей страны, располагающей уникально богатой сырьевой базой, которая сегодня используется крайне неэффективно.

Соединениями, сочетающими доступность с ценной биологической активностью, богат класс тритерпеноидов. На основе производных глицирризиновой и глицирретовой кислоты разработаны высокоэффективные, противовирусные (анти-ВИЧ), противовоспалительные и противоязвенные препараты. Для клинических испытаний в качестве средства лечения злокачественных опухолей рекомендована 2-циано-3,12-диоксоолеа-1,9-диен-28-овая кислота.

Последние два десятилетия дали основания возлагать надежды на введение в терапию ряда болезней препаратов на основе тритерпеноидов лупанового ряда. Эти надежды безусловно связаны с бетулином -тритерпеноидом, поразительно широко распространенным в природе и легко получаемым практически в любом количестве. Бетулиновая кислота проходит предклиническую апробацию как препарат для лечения метастатических меланом и является перспективным ингибитором энтеровирусов. Некоторые производные бетулиновой кислоты образовали группу анти-ВИЧ агентов с новым механизмом действия. В России, не только располагающей уникальными растительными ресурсами, но и имеющей богатые научные традиции, дальнейшее развитие исследований несомненно актуально.

Целью данной работы являлся синтез новых биологически активных производных бетулина для выполнения которой были поставлены следующие задачи:

- разработка новых схем скелетных трансформаций бетулина и его производных по кольцам А и Е;

- синтез новых фармакологически активных производных тритерпеноидов путем модификации функциональных групп с сохранением нативной структуры.

Выводы

1. Разработаны новые направления скелетной модификации колец А и Е бетулина, позволившие получить производные А-динор-, А-тринор-, А-секоолеанана и А-тринор-, Е-нор-, тетранор-, А-секолупана.

2. Осуществлён синтез стероидоподобного тритерпеноида 23,24-динор-19|3,28-эпокси-18а-олеан-3-он-4(5)-ена из бетулина с общим выходом 16%. На основе 4,23,24-тринор-^-нео-5рН-19Р,28-эпокси-18а-олеан-3-она получены нортритерпеновые производные с г/иосочленением циклов А/В, содержащие фрагменты лактона, лактама, тиадиазола и секонитрила.

3. Предложен перспективный подход синтеза 4,5-секо-тритерпеноидов, основанный на озонолитическом расщеплении 4(5)-ен-производных аллобетулина и метилбетулината. При озонировании А-нео-ангидропроизводных аллобетулина впервые выделены устойчивые озониды.

4. Установлено, что в результате восстановительного превращения перекисных продуктов озонолиза производных ЗР-0-ацетил-22(17—>28)абео-луп-17(28),20(29)-диена происходит переэтерификация ацеталь-кетального типа с образованием тритерпенового производного, содержащего триоксановый фрагмент в цикле Е.

5. Проведена функционализация бетулина и аллобетулина с получением производных [3,2-с]пиразола, 1,2,3-тиадиазола, 3-0-2-дезокси-, и 3-0-2,6-дидезокси-а-Ь-арабмно-гексопиранозидов. Синтезировано 30 новых ацилатов ЗР-гидрокси- и 3-оксиминотритерпеноидов.

6. Среди новых производных бетулина и аллобетулина выявлены вещества, обладающие противовирусной, гепатопротекторной, противоязвенной, противовоспалительной активностью, антифидантным и инсектицидным действием.

1. Setzer W. N., Setzer M. C. Plant-derived triterpeniods as potential antineoplastic agents. // Mini Rev. Med. Chem. 2003. - Vol. 3. - P. 540-556.

2. Eiznhamer D. A., Xu Z-Q. Betulinic acid: a promising anticancer candidate. // IDrugs. 2004. - Vol. 7. - No. 4. - P. 359-373.

3. Семёнов А. А. Очерк химии природных соединений. // Сибирская издательская фирма РАН, Новосибирск, Наука. 2000 г. 664 с.

4. Толстиков Г. А., Балтина JI. А., Шульц Э. Э., Покровский А. Г, Глицирризиновая кислота. // Биоорган, химия. -1997. -Т. 23.-№ 9.-С. 691-709.

5. Толстиков Г. А., Балтина Л. А., Сердюк Н. Г. Глицирретовая кислота. И Хим.-фармацевт, ж. 1998. - Т. 32. -№. 8. - С. 5-14.

6. Машковский М. Д. // Лекарственные средства, Харьков, Торсинг. -1998.-Т. 1.-С. 435.

7. Плясунова О. А., Ильина Т. В., Киселёва Я. Ю., Федюк Н. В., Балтина Л. А., Толстиков Г. А., Покровский А. Г. Анти-ВИЧ активность пента-О-никотината глицирризиновой кислоты. // Вестник РАМН. 2004. - № 11. - С. 42-46.

8. Иосинори Н. Получение карбеноксолона и его динатриевой соли. Заявка 61-165348, Япония. Заявл. 16. 01. 85., опубл. 26. 07.86. МКИ с 07 с 69/40 с 07 с 67/08.

9. Suzuki S., Matsuda Y., Sugawara Т., Tabata Т., Ishibashi H., Hoshikawa Y., Kubo H., Kondo T. Effects of carbenoxolone on alveolar fluid clearance and lung inflammation in the rat. // Crit Care Med. 2004. - Vol. 32. - No. 9. - P. 1910-1915.

10. Liu J. Pharmacology of oleanolic acid and ursolic acid. // J. Ethnopharmacol. 1995. - Vol. 49. - P. 57-68.12. http://www.cosmetics.spb.ru/13. http://www.preobrajenie.com/

11. Погребняк Л. В. Разработка технологии таблетированной лекарственной формы на основе нового полусинтетического производного бетулина, обладающего противотуберкулёзной активностью. Автореферат дисс. канд. фарм. наук., Пятигорск, 2005 г., 24 с.

12. Cichewicz R. Н., Kouzi S. A. Chemistry, biological activity, and chemotherapeutic potential of betulinic acid for the prevention and treatment of cancer and HIV infection. // Med. Res. Rev. 2004.- Vol. 29. - No. 1. - P. 90-114.

13. Fulda S., Scaffidi C., Susin S. A., Krammer P. H., Kroemer G., Peter M. E., Debatin K.-H. Activation of mitochondria and release of mitochondrial apoptogenic factors by betulinic acid. // J. Biol. Chem. 1998. - Vol. 273. - No. 51. - P. 33942-33948.

14. Schmidt M. L., Kuzmanoff K. L., Liang-Indeck M. L., Pezzuto J. M. Betulinic acid induces apoptosis in human neuroblastoma cell lines. // Eur. J. Cancer. 1997. - Vol. 33. - No. 12. - P. 2007-2010.

15. Wick W., Grimmel C., Wagenknecht В., Dichgans J., Weller M. Betulinic acid-induced apoptosis in glioma cells: a sequential requirement for new protein synthesis, formation of reactive oxygen species, and caspase processing. //

16. Pharmacol. Exp. Ther. 1999. - Vol. 289. - No. 3. - P. 1306-1312.

17. Fulda S., Susin S. A., Kroemer G., Debatin K.-M. Molecular ordering of apoptosis induced by anticancer drugs in neuroblastoma cells. // Cancer Res. -1998. Vol. 58. - P. 4453-4460.

18. Fulda S., Debatin K.-M. Betulinic acid induced apoptosis through a direct effect on mitochondria in neuroectodermal tumors. // Med. Pediatr. Oncol. -2000. Vol. 35. - No. 6. - P. 616-618.

19. Selzer E., Thallinger C., Hoeller C., Oberkleiner P., Wacheck V., Pehamberger H., Jansen B. Betulinic acid-induced Mcl-1 expression in human melanoma mode of action and functional significance. // Mol. Med. - 2002. - No.8. P. 877-884.

20. Rieber M., Strasberg R. M., Rieber M. Induction of p53 without increase in p21 WAF1 in betulinic acid-mediated cell death is preferential for human matastatic melanoma. // DNA Cell Biol. 1998. - Vol. 17. - No. 5. - P. 399-406.

21. Fulda S., Jeremias I., Steiner H. H., Pietsch Т., Debatin K.-M. Betulinic acid: a new cytotoxic agents against malignant brain-tumor cells. // Int. J. Cancer. -1999.-Vol. 82.-P. 435-441.

22. Zuco V., Supino R., Righetti S. C., Cleris L., Marchesi E., Gambacorti-Passerini C., Formelli F. Selective cytotoxicity of betulinic acid on tumor cell lines, but not on normal cells. // Cancer Lett. 2002. - Vol. 175. -No. 1. - P. 17-25.

23. Kim Y.K., Yoon S.K., Ryu S.Y. Cytotoxic triterpenes from stem bark of Physocarpus intermedins. II Planta Med. 2000. - Vol. 66. - No. 5. - P. 485-486.

24. Kim J.Y., Koo H.M., Kim D.S.H.L. Development of C-20 modified betulinic acid derivatives as antitumor agents. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001. -Vol. 11.-P. 2405-2408.

25. Tomas-Barberan F.A., Hostettmann K. A cytotoxic triterpenoid and flavonoids from Crossopteryxfebrijuga. H Planta Med. 1988. - Vol. 54. - No. 3. -P. 266-267.

26. Setzer W. N., Setzer M. C., Bates R. В., Jackes B. R. Biologically active triterpenoids of Syncarpia glomulifera bark extract from Paluma, north Queensland, Australia. // Planta Med. 2000. - Vol. 66. - No.2. - P. 176-177.

27. Kim D. S. H. L., Pezzuto J. M., Pisha E. Synthesis of betulinic acid derivatives with activity against human melanoma. // Bioorg. Med. Chem. Lett. -1998.-No. 8.-P. 1707-1712.

28. You Y., Kim Y., Nam N., Ahn B. Synthesis and cytotoxic activity of A-ring modified betulinic acid derivatives. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2003. - No. 13. - P. 3137-3140.

29. Thumher D., Turhani D., Pelzmann M., Wannemacher В., Knerer В., Formanek M., Wacheck V., Selzer E. Betulinic acid: a new cytotoxic compound against malignant head and neck cancer cells. // Head Neck. 2003. - Vol. 25. -No. 9. - P. 732-740.

30. Wachsberger P. R., Burd R., Wahl M. L., Leeper D. B. Betulinic acid sensitization of low pH adapted human melanoma cells to hyperthermia. // Int. J. Hyperthermia. 2002. - Vol. 18. - No. 2. - P. 153-164.

31. Noda Y., Kaiya Т., Kohda K., Kawazoe Y. Enhanced cytotoxity of some triterpenes toward leukemia L1210 cells cultured in low pH media: possibility of anew mode of cell killing. // Chem. Pharm. Bull. 1997. - Vol. 45. - No. 10. - P. 1665-1670.

32. Jeremias I., Steiner H.H., Benner A., Debatin K.M., Herold-Mende C. Cell death induction by betulinic acid, ceramide and TRAIL in primary glioblastoma multiforme cells. // Acta Neurochir. (Wien). 2004. - Vol. 146. - No. 7. - P. 721729.

33. Fulda S., Jeremias I., Debatin К. M. Cooperation of betulinic acid and TRAIL to induce apoptosis in tumor cells. // Oncogene. 2004. - Vol. 23. - No. 46.-P. 7611-7620.

34. Hashimoto F., Kashiwada Y., CosentinO L.M., Chen Ch.-H., Garrett P.E., Lee K.-H. Anti-AIDS agents-XXVII. Synthesis and anti-HIV activity of betulinic acid and dihydrobetulinic acid derivatives. // Bioorg. Med. Chem. 1997. - Vol. 5. No.12.-P. 2133-2143.

35. Lee K.-H., Kashiwada Y., Hashimoto F., Cosentino L.M., Manak M. Betulinic acid and dihydrobetulinic acid derivatives and uses therefore. // US Patent, Oct. 21, 1997, No. 5679828.

36. Aiken C., Chen C. Betulinic acid derivatives as HIV-1 antiviral. // Trends Mol. Med. 2005. - Vol. 11.-No. 1.-P. 31-36.

37. Lee K.-H. Current developments in the design of new drug candidates from plant natural product leads. // J. Nat. Prod. 2004. - Vol. 67 - No. 2. - P. 273-283.

38. Граник В. Г., Григорьев Н. Б. Экзогенные доноры оксида азота (химический аспект). // Изв. АН Сер. Хим. 2002. - № 8. - С. 1268-1313.

39. Граник В. Г. Григорьев Н. Б. Оксид азота (NO). // Москва.: Вузовская книга, 2004. 360с.

40. Ito Y., Pandey P., Place A., Sporn M., Gribble G., Honda Т., et al. The novel triterpenoid CDDO induces apoptosis of human myeloid leukemia cells by a caspase-8 dependent mechanism. // Cell Growth Differ. 2000. - Vol. 11. - P. 261-267.

41. Wang Y., Porter W. W., Suh N., Honda Т., Gribble G., Leesnitzer L. M., et al. A synthetic triterpenoid 2-cyano-3,12-dioxooleana-l,9-dien-28-oic acid

42. CDDO), is a ligand for the peroxisome proliferator-activated receptor y. // Mol.

43. Endocrinol. 2000. - Vol. 14. - No. 10. - P. 1550-1556.

44. Ito Y., Pandey P., Sporn M.B., Datta R., Kharbanda S., Kufe D. The novel triterpenoid CDDO induces apoptosis and differentiation of human osteosarcomacells by a caspase-8 dependent mechanism. // Mol. Pharmacol. 2001. - Vol. 59. -No. 5.-P. 1094-1099.

45. Place A. E., Suh N. Williams C. R., Risingsong R., Honda Т., Honda Y., Gribble G. W., Leesnitzer L. M., Stimmel J. В., Willson Т. M., Rosen E., Sporn M. B.

46. The novel synthetic triterpenoid, CDDO-imidazolide, inhibits inflammatory response and tumor growth in vivo. II Cancer Res. 2003. - Vol. 9. - No. 7. - P. 2798-2806.

47. Ikeda Т., Spom M., Honda Т., Gribble G. W., Kufe D. The novel triterpenoid CDDO and its derivatives induce apoptosis by disruption of intracellular redox balance. // Cancer Res. 2003. - Vol. 63. - No. 17. - P. 5551-5558.

48. Minns L.A., Buzoni-Gatel D., Ely К. H., Rachinel N., Luangsay S., Kasper L. H. A novel triterpenoid induces transforming growth factor (3 production by intraepithelial lymphocytes to prevent. // Gastroenterology. 2004. - Vol. 127. - No. 1. -P. 119-126.

49. Zhang C., Konopleva M., Andfeff M., Duvic M. The novel synthetic triterpenoid CDDO (2-cyano-3,12-dioxoolean-l,9-dien-28-oic acid) indused in mycosis fungoides/sezary cells. // J. Invest. Dermatol. 2004. - Vol. 123. - No. 2. - P. 380-387.

50. Inoue S., Snowden R. Т., Dyer M. J., Cohen G. M. CDDO induces apoptosis via the intrinsic pathway in lymphoid cells. // Leukemia. 2004. - Vol. 18. No. 5.-P. 948-952.

51. Kashiwada Y., Hashimoto F., Cosentino L.M., Chen C.H., Garrett P.E., Lee K.H. Betulinic acid and dihydrobetulinic acid derivatives as potent anti-HIV agents. // J. Med. Chem. 1996. - Vol. 39. - P. 1016-1017.

52. Quere L., Wenger Т., Schramm H. J. Triterpenes as potential dimerization inhibitors of HIV-1 protease. // Biochem. Biophys. Res. Comm. 1996. - Vol. 227. p. 484-488.

53. Sun I.C., Kashiwada Y., Morris-Natschke, Lee K.H. Plant-derived triterpenoids and analogues as anti-HIV agents. // Curr. Top. Med. Chem. 2003. -Vol. 3.-P. 155-169.

54. Kurokawa M., Basnet P., Ohsugi M., Hozumi Т., Kadota S., Namba Т., Kawana Т., Shiraki K. Anti-Herpes simplex virus activity of moronic acid purified from Rhus javanica in vitro and in vivo. // J. Pharm. Exp. Ther. 1999. - Vol. 289. -P. 72-78.

55. Boreko E. I., Pavlova N. I., Savinova О. V., Nikolaeva S. N., Flekhter O. В., Phyzhova N. S., Nikandrov V. N. Inhibition of virus reproduction and proteinase activity by lupane and some other terpenes. // News Biomed. Sci. -2002. No. 3. - P. 86-91.

56. Pavlova N. I., Savinova О. V., Nikolaeva S. N., Boreko E. I., Flekhter O. B. Antiviral activity of betulin, betulinic and betulonic acids against some enveloped and non-enveloped viruses. // Fitoterapia 2003. - Vol. 74. - P. 489492.

57. Платонов В. Г., Зорина А. Д., Гордон М. А., Чижов Н. П., Балыкина JI. В., Михайлов Ю. Д, Иванен Д. Р., Тран Ким Тви, Шавва А. Г. Исследование противогриппозной активности тритерпеноидов. // Хим.-фармацевт. ж. 1995. - Т. 29. - № 2. - С. 42-46.

58. Sun I.-C., Shen J.-K., Wang H.-K., Cosentino L.M., Lee K.H. Anti-AIDS agents. 32. Synthesis and anti-HIV activity of betulin derivatives. // Bioorg. Med.

59. Chem. Lett. 1998. - Vol. 8. - P. 1267-1272.

60. Kashiwada Y.,Chiyo J., Ikeshiro Y., Nagao Т., Okabe H., Cosentino L. "* M., Fowke K., Lee K.-H. 3,28-Di-<9-(dimethylsuccinyl)-betulin isomers as anti

61. HIV agents. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001. - Vol. 11. - P. 183-185.

62. Zhu Y., Shen J.-K., Wang H.K., Cosentino L.M., Lee K.H. Synthesis and anti-HIV activity of oleanolic acid derivatives. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001. -Vol. 11.-P. 3115-3118.

63. Kashiwada Y., Nagao Т., Hashimoto A., Ikeshiro Y., Okabe H., Cosentino L. M., Lee K.-H. Anti-AIDS agents 38. Anti-HIV activities of 3-Oacyl ursolic acid derivatives. // J. Nat. Prod. 2000. - Vol. 63. - P. 1619-1622.

64. Sun I.C., Wang H.K., Kashiwada Y., Shen J.K., Cosentino L.M., Chen C.H., Yang L.M., Lee K.H. anti-AIDS agents. 34. Synthesis and structure-activity relationships of betulin derivatives as anti-HIV agents. // J. Med.Chem. 1998. -Vol. 41.-P. 4648-4657.

65. Holz-Smith S. L., Sun I. C., Jin L., Matthews T. J., Lee K.-H., Chen C.H. Anti-AIDS agents 42. The role of HIV-1 envelope in the anti-HIV activity of Betulinic acid derivative IC9564. // Antimicrob. Agents Chemother. 2001. - Vol. 45.-P. 60-66.

66. Huang L., Yuan X., Aiken C., Chen C. Bifunctional anti-human immunodeficiency virus type 1 small molecules with two novel mechanisms of action. II Antimicrob. Agents Chemother. 2004. - Vol. 48. - No. 2. - P. 663-665.

67. De Clercq E. New developments in anti-HIV chemotherapy. // Curr. Med. Chem. 2001. Vol. 8. - No.13. - P. 1543-1572.

68. Huang L., Yuan X., Aiken C., Chen C.H. Bifunctional anti-human immunodeficiency virus type 1 small molecules with two novel mechanisms of action. // Antimicrob. Agents Chemother. 2004. - Vol. 48. - P. 663-665.

69. Покровский А.Г., Плясунова О.А., Ильичева Т.Н., Борисова О.А., Федюк Н.В., Петренко Н.И., Петухова В.З., Шульц Э.Э., Толстиков Г.А.

70. Синтез производных растительных тритерпенов и исследование их противовирусной и иммуностимулирующей активности. // Химия в интересах устойчивого развития. 2001. - Т. 9. - С. 485-491.

71. Mitaine-Offer А .С., Hornebeck W., Sauvain М., Zeches-Hanrot М. Triterpenes and phytosterols as human leucocyte elastase inhibitors. // Planta Med. -2002.-Vol. 68.-P. 930-932.

72. Aratanechemuge Y., Hibasami H., Sanpin K., Katsuzaki H., Imai K, Komiya T. Induction of apoptosis by lupeol isolated from Mokumen (Gossampinus malabarica L. Merr) in human promyelotic leukemia HL-60 cells. // Oncol. Rep. -2004.-Vol. 11. P. 289-292.

73. Hata K., Hori K., Takahashi S. Role of p38 МАРК in lupeol-induced В16 2F2 mouse melanoma cell differentiation. // J. Biochem. 2003. - Vol. 134. -No. 3. - P. 441-445.

74. Mutai C., Abatis D., Vagias C., Moreau D., Roussakis C., Roussis V. Cytotoxic lupane-type triterpenoids from Acacia mellifera. II Phytochemistry. -2004. Vol. 65. - No.8. - P. 1159-1164.

75. Hata K., Ishikawa K., Hori K., Konishi T. Differentiation-inducing activity of lupeol, a lupane-type triterpene from Chinese dandelion root (Hokouei-kon), on a mouse melanoma cell line. // Biol. Pharm. Bull. 2000. - Vol. 23. - No. 8. - P. 962-966.

76. You J. J., Nam N. H., Ют Y., Bae К. H., Ahn B. Z. Antiangiogenic activity of lupeol from Bombax ceiba. II Phytother. Res. 2003. - Vol. 17. - No. 4. - P. 341-344.

77. Wada S., Iida A., Tanaka R. Screening of triterpenoids isolated from Phyllanthus flexuosus for DNA topoisomerase inhibitory activity. // J. Nat. Prod. -2001. Vol. 64. - No. 12. - P. 1545-1547.

78. Saleem M., Afaq F., Adhami V.M., Mukhtar H. Lupeol modulates NF-kB and PI3K/Akt pathways and inhibits skin cancer in CD-I mice. // Oncogene. -2004. Vol.23. - No. 30. - P. 5203-5214.

79. Chaturvedula V.S.P., Schilling J.K., Johnson R.K., Kingston D.G. New cytotoxic lupane triterpenoids from the twigs of Coussarea paniculata. II J. Nat. Prod.- 2003. Vol. 66. - No. 3. - P. 419-422.

80. Hata K., Hon K., Takahashi S. Differentiation- and apoptosis-inducing activities by pentacyclic triterpenes on a mouse melanoma cell line. // J. Nat. Prod. 2002. Vol. 65. - No. 5. - P. 645-648.

81. Mutai C., Abatis D., Vagias C., Moreau D., Roussakis C., Roussis V. Cytotoxic lypane-type triterpenoids from Acacia mellifera. II Phytochemistry. -2004. Vol. 65. - P. 1159-1164.

82. Ye W.C., Ji N.N., Zhao S.X., Liu J.H., Ye Т., McKervey M.A., Stevenson P. Triterpenoids from Pulsatilla chinensis. И Phytochemistry. 1996. -Vol. 42. - No. 3. - P. 799-802.

83. Chatterjee P., Pezzuto J.M., Kouzi S.A. Glucosidation of betulinic acid by Cunninghamella species. // J. Nat. Prod. 1999. - No. 62. - P. 761-763.

84. Chatterjee P., Kouzi S.A., Pezzuto J.M., Hamann M.T. Biotransformation of the antimelanoma agent betulinic acid by Bacillus megaterium ATCC 13368. // Appl. Environ. Microbiol. 2000. - No. 66. - P. 3850-3855.

85. Kouzi S.A., Chatterjee P., Pezzuto J.M., Hamann M.T. Microbial transformations of the antimelanoma agent betulinic acid. // J. Nat. Prod. 2000. -No. 63.-P. 1653-1657.

86. Chen Y. G., Qin G. W., Cao L., Leng Y., Xie Y. Y. Triterpenoid acid from Schisandra propinqua with cytotoxic effect on rat luteral cells and human decidual cells in vitro. II Fitoterapia. 2001. - Vol. 72. No. 4. - P. 435-437.

87. Chen Y. G., Wu Z. C., Lv Y. P., Gui S. H., Wen J., Liao X. R., Yuan L. M., Halaweish F. Triterpenoids from Schisandra henryi with cytotoxic effect on leukemia and hela cells in vitro. II Arch. Pharm. Res. 2003. - Vol. 26. No. 11.-P. 912-916.

88. Chen D. F., Zhang S. X., Wang H. K., Zhang S. Y., Sun Q. Z., Cosentino L. M., Lee К. H. Novel anti-HIV lancilactone С and related triterpenes from Kadsura lancilimba. II J. Nat. Prod. 1999. - Vol. 62.- P. 94-97.

89. Ku Y. G., Rao V., Chen C., Wu C., Guh J., Lee S. A novel secobetulinic acid 3,4-lactone from Viburnum aboricolum. II Helv. Chim. Acta. -2003.-Vol. 86.-P. 697-702.

90. Ngassapa O. D., Soejarto D. D., Che C., Pezzuto J. M., Farnsworth N. R. New cytotoxic lupane lactones from Kokoona Ochracea. II J. Nat. Prod. 1991. - Vol. 54. No. 5. - P. 1353-1359.

91. Ngassapa O., Soejarto D. D., Pezzuto J. M., Farnsworth N. R., Che C. T. Further lupane lactones from Kokoona ochracea. II J. Nat. Prod. 1993. - Vol. 56.-No. 10.-P. 1676-1681.

92. Muhammad I., Sayed K. A., Mossa J. S., Al-Said M., El-Feraly F., Clark A. M„ Hufford C. D„ Oh S., Mayer M. S. Bioactive 12-oleanene triterpene andsecotruterpene acids from Maytenus undata. II J. Nat. Prod. 2000. - No. 63. - P. 605-610.

93. Gunatilaka A. A. L. Triterpenoid quinonemethides and related compounds. // Prog. Chem. Org. Nat. Prod. 1996. - Vol. 67. - P. 1-123.

94. Ngassapa O., Soejarto D. D., Pezzuto J. M., Farnsworth N. R. Quinone-methide triterpenes and salaspermic acid from Kokoona ochracea. II J. Nat. Prod. 1994. - Vol. 57. - No. 1. - P. 1-8.

95. Shirota O., Morita H., Takeya K., Itokawa H. Cytotoxic aromatic triterpenes from Maytenus ilicifolia and Maytenus chuchuhuasca. H J. Nat. Prod. -1994. Vol. 57. -No. 12 - P. 1675-1681.

96. Setzer W. N., Shen X., Bates R. В., Burns J. R., McClure K. J., Zhang P., Moriarity D. M., Lawton R. O. A phytochemical investigation of Alchornea latifolia. И Fitoterapia 2000. - Vol. 71. No. 2. - P. 195-198.

97. Wada S., Tanaka R., Iida A., Matsunaqa S. In vitro inhibitory effects of DNA topoisomerase II by fernane-type triterpenoids isolated from a Euphorbia genus. II Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998. - Vol. 8. No. 20. - P. 2829-2832.

98. Urban M., Sarek J., Klinot J., Korinkova G., Hajduch M. Synthesis of A-seco derivatives of betulinic acid with cytotoxic lupane activity. // J. Nat. Prod. -2004.-No. 67.-P. 1100-1105.

99. Lee S. S., Chen W. C., Huang С. F., Su Y. Preparation and cytotoxic effect of ceanothic acid derivative. // J. Nat. Prod. 1998. - Vol. 61. - No. 11. - P. 1343 - 1347.

100. Ovesna Z., Vachalkova A., Horvathova K., Tothova D. Pentacyclic triterpenoic acids: new chemoprotective compounds. // Neoplasma. 2004. - Vol. 51.-No. 5.-P. 327-333.

101. Карачурина Л. Т. Биохимические механизмы гепатопротекторного действия тритерпеноидов группы лупана и их фармакологическая активность. Автореферат дисс. канд. биол. наук, Уфа, 2004, 23 с.

102. Флехтер О. Б., Нигматуллина Л.Р., Балтина Л. А., Карачурина Л. Т., Галин Ф. 3., Зарудий Ф. С., Толстиков Г. А., Бореко Е. И., Павлова Н. И.,

103. Николаева С. Н., Савинова О. В. Получение бетулиновой кислоты из экстракта бетулина. Противовирусная и противоязвенная активность некоторых родственных терпеноидов. // Хым.-фармацевт. ж. — 2002. Т. 36. - №. 9. - С. 26-28.

104. Ма С., Nacamura N., Hattori М. Chemical modification of oleanene type triterpenes and their inhibitory activity against HIV-1 protease dimerisation. // Chem, Pharm. Bull. 2000. - Vol. 48. - No. 11.-P. 1681-1688.

105. Just M., Recio C., Giner R., Cuellar M., Manez S., Bilia A., Rios J. Antiinflammatory activity of unusual lupane saponins from Bupleurum fruticescens. II Planta Med. 1998. - No. 64. - P. 404-407.

106. Иванов А. С., Захарова Т. С., Одинокова JI. Э., Уварова Н. И. Гиполипидемические свойства гликозидов бетулина. // Хим.-фармацевт, ж. -1987.-№9.-С. 1091-1094.

107. Anderson М. В., Musser J. Н. Lupane triterpenoid derivatives (Glycomed Inc.) PCT Int. Appl. WO 95 04,526 (CI. A61K31/00), 16 Feb 1995, US Appl. 105,095, 09 Aug 1993; 42 pp. (C. A. 122: 256432j).

108. Флехтер О. Б., Балтина Л. А., Насыров X. М., Громакова Л. С., Толстиков Г. А. 3-0-2-Дезокси-а-£-рамнопиразид метилового эфираглицирретовой кислоты, проявляющий гепатопротектурную активность. // Патент РФ№ 2148584 от 10.05.2000.

109. Klinotova Е., Krecek V., Klinot J., Endova M., Eisenreichova J., Budesinsky M., Sticha M. Glycosylation of triterpene alcohols and acids of the lupane and A-secolupane series. // Collect. Czech. Chem. Commun. 1997. - Vol. 62.-No. 10.-P. 1776-1798.

110. Одинокова JI. Э., Ошиток Г. И., Денисенко В. А., Ануфриев В. Ф., Толкач А. М., Уварова Н. И. Гликозилирование бетулина и его ацетатов в присутствии карбоната кадмия. // Химия природ, соедин. 1984. - № 2. - С. 182-187.

111. Одинокова Л. Э., Денисенко М. В., Денисенко В. А., Уварова Н. И. Гликозилирование тритерпеновых спиртов ряда лупана. // Химия природ, соедин. 1988. - № 2. - С. 212-217.

112. Ohara S., Hishiyama S. Utilization of triterpenoids. 1. Synthesis of betulin glycosides by cyclodextrin glycosyltransferase. // Mokuzai Gakkaishi. -1994. Vol. 40. - No. 4. - P. 444-451.

113. Флехтер О. Б., Балтина Л. А., Спирихин Л. В., Байкова И. П., Толстиков Г. А. Гликозилирование ацетатов бетулина гликалями. // Изв. АН, сер. хим. 1998. - № 3. - С. 531-533.

114. Flekhter О. В., Baltina L. A., Tolstikov G. A. Glycals in the stereoselective synthesis of triterpene 2-deoxy-a-L-glycosides under condition of acidic catalysis. // J. Nat. Prod. 2000. - Vol. 63. - P. 992-994.

115. Толстиков Г. А., Флехтер О. Б., Шульц Э. Э., Балтина Л. А., Толстиков А. Г. Бетулин и его производные. Химия и биологическая активность. И Химия в интересах устойчивого развития- 2005.-№. 1.-С. 1-30.

116. Ким X. О., Толстиков Г. А., Горяев М. И. О некоторых гетероциклических производных глицирретовой кислоты. // Изв. АН КазССР, Сер. Хим. 1969. - Т. 6. - С. 46-48.

117. Govardhan С., Reddy R. P., Ramiach Т. S., Rao Т. V. Aza triterpenes. Part-IV: synthesis of ring A fuzed (3,2-c)isooxazoles and (3,2-c)furazans of methyl oleanate and methyl betulinate. // J. Indian Chem. Soc. 1983. - Vol. 60. - No. 9. - P. 858-860.

118. Толстиков Г. А., Горяев M. И., Ким X. О. Синтез олеаноловой и 11-кетоолеаноловой кислот. Н Изв. АН КазССР, Сер. Хим. -1966.-№ 2.-С. 76-80.

119. Dehaen W., Voets М., Bakulev V. A. Synthesis and properties of 1,2,3-thiadiazoles. II Advances in Nitrogen Heterocycles. 2000. - Vol. 4. - P. 37-105.

120. Ирисметов M. П., Джиембаев Б. Ж., Арыстанова Т. А., Барамысова Г. Т. Химия и применение природной глицирризиновой кислоты и её производных. // Алматы. 2002. - 287 с.

121. Dirsch V. М., Kiemer А. К., Wagner Н., Vollmar А. М. The triterpenoid quinonemethide pristimerin inhibits induction of inducible nitric oxide synthase in murine macrophages. // Eur. J. Pharmacol. 1997. - No. 336. - P. 211-217.

122. Honda Т., Gribble G. W. Design and synthesis of 23,24-dinoroleanolic acid derivatives, novel triterpenoid steroid hybrid molecules. // J. Org. Chem. -1998. - Vol. 63. - No. 14.- P. 4846-4849.

123. Baran J. S., Langford D. D., Liang C., Pitzele B. Synthesis and biological activities of substituted glycyrrhetic acids. // J. Med. Chem. 1974. - Vol. 17. -No. 2.-P. 184-191.

124. Schulze H., Pieron H. Zur Kenntnis des Betulins. // Ber. II. 1922. - No. 2.-P. 2332-2346.

125. Dischendorfer О. Phytochemical studies. I. Betulin. // Monatsh. Chem-1923.-Vol. 44.-P. 123-139.

126. Установление структуры органических соединений физическими и химическими методами. // Под. ред. Варшавского Я. М., Луценко И. Ф., М.: "Химия". 1967. - 800 с.

127. Толстиков Г. А., Алибаева X. М., Потапов В. М. XIX. О некоторых А-триснорпроизводных глицирретовой кислоты. // ЖОрХ. 1969. - Т. 5. -Вып. 9.-С. 1631-1635.

128. Pettit G. R., Green В., Bowyer W.J. Steroids and related natural products. VI. The structure of a-apoallobetulin. // J. Org. Chem. 1961. - Vol. 26. - P. 2879-2883.

129. Одиноков В. H., Толстиков Г. А. Озонолиз современный метод химии олефинов. // Успехи химии. - 1981. - Т. L. - №. 7. - С. 1207-1251.

130. Dutta S. R., Pradhan В. P. Hydrogen peroxide oxidation of lupanone in presence of selenium dioxide. // Indian J. Chem. 1982. - Vol. 21B. - P. 575-577.

131. Garman R., Cowley D. The structure and partial synthesis of canaric acid. // Austral. J. Chem. 1965. - Vol. 18. - P. 213-217.

132. Klinot J., Sumanova V., Vystrcil A. Triterpenes . XXI. 3,4-Seco derivatives of betulinic acid. // Collect. Czech. Chem. Commun. 1972. - Vol. 37. -P. 603-609.

133. Valterova I., Klinot J., Vystrcil A. Preparation and antibacterial activity of di-, tri- and tetraoic acids derived from3,4-secolupane. // Collect. Czech. Chem. Commun. 1983. - Vol. 48. - P. 649-661.

134. Sejbal J., Homolova M., Tislerova I., Krecek V. Preparation and conformational analysis of 1,2-seco derivatives of 19(3,28-epoxy-18a-oleanane. // Collect. Czech. Chem. Commun.- 2000. Vol. 65. - P. 1339-1356.

135. Sejbal J., Klinot J., Hrncifova D., Vystrcil A. Oxidation of 19(3,28-epoxy-18a-oleanan-3-one and 1-one with peracids. // Collect. Czech. Chem. Commun. 1985. - Vol. 50. - P. 2753-2759.

136. Sejbal J., Klinot J., Vystrcil A. Reaction of 3-keto and 2-ketotriterpenoids with m-chloroperoxybenzoic acid in aliphatic alcohols. A new method of preparation of a-hydroxy ketones. // Collect. Czech. Chem. Commun. -1987. Vol. 52. - P. 1052-1061.

137. Krstic N. M., Lirenc L. В., Pavlovic V. D., Tinant В., Declercq J. P. An unusual ozonolysis of the A8(14)-unsaturated steroids. // J. Chem. Res. 2002. -No. 8. - P. 392-394.

138. Denisenko M. V., Pokhilo N. D., Odinokova L. E., Denisenko V. A., Uvarova N. I. Ruthenium tetroxide oxidation of 3p-acetoxy-28-hydroxy-18-lupene to tricyclic products. // Tetrahedron Lett. 1996. - Vol. 37. - No. 29. - P. 51875190.

139. Одинокова Л.Э., Денисенко M.B., Денисенко B.A., Уварова Н.И. Ретрореакция Михаэля производных 28-метокси-18,19-секолупан-18,19-диона. И Химия природ, соедин. 1990.- № 2.- С. 210-215.

140. Kakuno Т., Yoshikawa К., Arihara S. Ilexosides А, В, С and D antiallergic 18,19-seco-ursane glycosides from fruit of Ilex Crenata. // Tetrahedron Lett. 1997. - Vol. 32. - No. 29. - P. 3535-3538.

141. Anjaneyulu A. S. R., Narayana M., Sree A., Murty S. Wagner-Meerwein rearrangements in lupanes. // Indian J. Chem. 1980. - Vol. 19B. - P. 735-738.

142. Fuchino H., Nozawa O., Tanaka N. Double bond migration on the 22(17—>28) abeo-lupane skeleton. // Chem. Pharm. Bull. 1994. - Vol. 42. - No 9. - P. 1745-1749.

143. Jagadeesh S. G., Krupadanam G. L. D., Srimannarayana G. Tobacco caterpillar antifeedant from the gotti stem wood triterpene betulinic acid //J. Agric. Food Chem. 1998. - Vol. 46. - P. 2797-2799.

144. Huang F.-Y., Chung B. Y., Bentley M. D., Alford A. R. Colorado potato beetle antifeedants by simple modification of the birchbark triterpene betulin // J. Agric. Food Chem. 1995. - Vol. 43. - P. 2513-2516.

145. Lugemwa F. N. Huang F.-Y., Bentley M. D, Mendel M. J., Alford A. R. A Heliothis zea antifeedant from the abundant birchbark triterpene betulin // J. Agric. Food Chem. 1990. - Vol. 38. - P. 493-496.

146. Нигматуллина Jl. P. Синтез новых физиологически активных веществ на основе тритерпеноидов лупанового ряда. Дисс. канд. хим. наук, Уфа, 2005 г.

147. Kim D.S.H.L., Chen Z., Van Tuyen N. Pezzuto J.M., Qiu S., Lu Z.-Z. A concise semi-synthetic approach to the betulinic acid from betulin. // Synth. Commun. 1997. - Vol. 27. - No. 9. - P. 1607-1612.

148. Otsuka H., Fujioka S., Komiya Т., Goto M., Hiramatsu Y., Fujimura H. Studies on anti-inflammatory agents. V. A new anti-inflammatory constituent of Ryracantha crenulata Roem. // Chem. Pharm. Bull. 1981. - Vol. 29. - No. 11. -P. 3099-3104.

149. Vesterberg К. Alb., Vesterberg R. Betulin I. // Arkiv. Kem. Mineral. Geol. 1926.-Vol. 9.-P. 17.

150. Вейганд-Хильгетаг. Методы эксперимента в органической химии. // Химия, Москва. 1968 - С. 231-237.

151. Балтина Л.А., Сердюк Н.Г., Кондратенко P.M., Толстиков Г.А., Васильева Е.В. Трансформации глицирризиновой кислоты. Синтез новых ацилатов. // ЖОрХ, 1994. - Т. 64. - Вып. 12. - С. 2040-2047.

152. Наумова Б.С., Чекмарева И.Б., Жданович Е.С., Преображенский Н.А. Получение производных никотиновой кислоты. // Хим.-фармацевт. ж. -1969.-Т. 3. № 5. - С. 11-12.

153. Жданов Ю. А., Дорофеенко Г. Н., Корольченко Г. А., Богданова Г. В. Практикум по химии углеводов. // Высшая школа, Москва. 1973. - С. 204.

154. Ю. В. Карякин, А. И. Ангелов. Чистые химические вещества. Н Москва, Химия. 1974.

155. Sabesan S., Neira S. Synthesis of 2-deoxy sugars from glycals. // J. Org. Chem. 1991. - Vol. 56. - P. 5468-5472.

156. Li T.S., Wang J.-X., Zheng X.-J. Simple synthesis of allobetulin, 28-oxoallobetulin and related biomarkers from betulin and betulinic acid catalysed solid acids. II J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1. 1998. - P. 3949-3956.

157. Robertson A., Soliman Y., Owen E. O. Polyterpenoid compounds. I. Betulinic acid from Cornus florida. II J. Chem. Soc. 1939. - P. 1267-1273.