Синтез и свойств 2,5-дизамещенных силилфуранов тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.08 ВАК РФ

Государственный научный центр Российской Федерации

РГБ ОД "гниихтэос"

2 5 НОЯ ^

На правах рукописи

ДЕМИЧЕВА ЛАРИСА ЕВГЕНЬЕВНА

СИНТЕЗ И СВОЙСТВА 2.5-ДИЗАМЕЩЕННЫХ СИЛИЛФУРАНОВ

02.00.08 - химия элементоорганичеоких соединений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

МОСКВА - 1996

Работа выполнена в Латвийском институте органического синтеза.

Научный руководитель:

академик Латвийской АН

доктор химических наук, профессор ЛУКЕВИЦ Э,Я,

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор БАУКОВ Ю.И.

доктор химических наук, профессор ТРАБЕНЬ В.Ф.

Ведущая организация:

Институт элементоорганкческкх соединений им. А.Н.Несмеянова РАН

Защита диссертации состоится ' 1996г. в ¿У часов

на заседании диссертационного совета Д 138.15.01 при 1НЦ РФ Государственном научно-исследовательском институте химии и технологии элементоорганических соединений по адресу: 111123, Москва, шоссе Энтузиастов, 38.

С диссертацией мокко ознакомиться в библиотеке ШЦ РФ Государстве лого научно-исследовательского института химии и технологии элементоорганических соединений.

Автореферат разослан £МяЛ^^Л- 19^бг.

Ученый секретарь диссертационного совета САХАРОВСКАЯ Г.Б.

Актуальность работа. Элементоорганические производные фу-рана проявляют цитотоксические, противоопухолевые, психотропные, противовоспалительные и другие свойства. До сих пор изучались биологические свойства и их корреляции со строением моно-замещенных фурилсиланов , а также ряда производных 5-триметил-силилфурфурола.

Дизамещенные 2-фурилсиланы, содержащие в 5-ом положении диэтилацетальную и альдегидную группы, предоставляют большие возможности для получения синтонсв для синтеза новых биологически активных соединений, сочетающих влияние кремниевого и кар-бофункциональных заместителей на их биологические свойства, а также более углубленного изучения вопроса о влиянии введения карбофункциональных заместителей в «-положение фуранового кольца на электронное состояние а-замещешшх фурилсиланов. Наличие карбофункциональной группы в молекуле фурилсилана дает возможность изменять токсичность вещества, его растворимость, наконец, определенные биологические свойства при неизменном силиль-ном заместителе.

Целью работы был синтез 2,5-дизамещенных силилфуранов с широким спектром заместителей у кремния и карбофункциональных заместителей, изучение их физико-химических и биологических свойств в сравнении с бессилильными, углерод- и серусодержащими аналогами, прослеживание корреляций структура-активность, а также изучение на ряде примеров влияния кар<5офуш<ционального заместителя на реакционную способность гидросилильной группы в реакциях с производными этилена и ацетилена.

Научная новизна. Впервые синтезирован ряд неизвестных ранее 2,5-дизамещешшх силилфуранов. Получен первый представитель кремнийорганических соединений, содержащий в молекуле одновременно альдегидную и 31-Н-группы,- 5-диметилсилилфурфурол. Осуществлен синтез тиооемикарбазонов 5-силилфурфуролов из диэтил-ацеталей 5-силилфурфуролов без предварительной стадии гидролиза.

Установлена линейная зависимость соотношения изомеров, образующихся в результате гидросилилирования монозвмещенных ацетиленов диэтилацеталем 5-диметилсилилфурфурола 0Т1^(1эС1|1эС) и о-п для ряда заместителей, однотипно взаимодействующих с "-системой ацетилена.

На. основании ЯМР-спектров показано, что в случае Б-заме-щенных фурфуролов заместители во 2-ом и 5-ом положениях фурана

влияют друг на друга, если заместитель в 5-ом положении оказывается сопряженным с остатком молекулы фурфурола. Влияние заместителей на кольцо фурана неадцитивно.

Выявлено, что для изученных соединений и использованного теста цитотоксичность не коррелирует с противоопухолевой активностью и токсичностью на мышах.

Практическая ценность работы определяется тем, что полученные дизамещенные 2-фурилсиланы, содержащие в 5-ом положении ди-этилацетальную группу, являются синтонамк в синтезе новых биологически активных соединений. Выявлено, что большинство изученных тиосемикарбазонов проявляет различные виды и степень нейротроп-ной активности, зависящие от их строения. Проанализирована зависимость психотропных свойств от строения тиосемикарбазонов 5-замещенных фурфуролов. Синтезированы соединения, проявляющие противоопухолевую активность, сопоставимую с фторафуром по отношению к лимфолейкозу Р 388'и к асцитной форме карциномы легких Льйис. Четыре высокоактивный соединения отобраны для дальнейшей разработки лекарственных средств.

Структура работы. Диссертация состоит из введения, литературного обзора, обсуждения результатов, экспериментальной части, приложения, выводов и списка цитируемой литературы.

В первой главе обобщены и проанализированы литературные данные по исследованию биологических свойств фурановых производных. Четыре следующих главы отражают результаты и методики экспериментальных исследований.

I. ПОЛУЧЕНИЕ КРЕШЖЗАМЕЩЕННМX ДИЭТИЛАЦЕТАЛЕИ ФУРФУРОЛА.

1.1. Литийорганический синтез.

Силильные производные диэтилацеталя фурфурола, сульфидные аналоги, а также диэтилацеталь 5-формилфурфурола получены ли-тийорганическим синтезом из диэтилацеталя фурфурола по следующей схеме:

££^-CH(OEt)a 1

RS-Я^-СН (OEt) а<Д Ll-Д^-СН (OEt) -,RlR:,R3S1C:L .RJR'R^Sl-Ц^Х-СП (OEt),

X=J,Br / ' \ 1.0HC-NMea / \ 2.H0H

ClHaCSlMe3 У \ 3.MqS0u

MeaSlRaC-£T^VcH(OEt)a OHC-^TV-CH(OEt)a

R1 = Ra = lie; R= = H. Ph. CHCla, CH,C1, CHa=CH-CHa R* = Me; Ra = Ra =, Ph R1 » R3 = R3 = Ph, Me R = Me, Bu

Бутиллитий, полученный в диэтиловом эфире, прибавляли к ди-этилацеталю фурфурола при -30°С. Температуру смэси повышали до 20-30°С, охлаждали смесь, добавляли хлорсиланы при -35°С, либо мелкорастертую серу ( при получении серусодеожащих аналогов ) при. -5-0°С.

Для сравнения физико-химических характеристик и выходов продуктов литийорганического синтеза сходным образом получены некоторые монозамещенные 2-силилфураны.

Выходы полученных нами монозамещенных 2-силилфуранов ( 8082% ) значительно выше выходов 5-кремнийзамещенных диэтилацета-лей фурфурола ( 20-69% ).

Данные анализа продуктов силилирования диэтилацеталя фурфурола R3S1C1 ( R3 a PhMea, PhaMe и Pha ) показывают, что количество непрореагировавшего диэтилацеталя фурфурола растет с ростом числа фенильных групп у атома Si. Содержание соответствующий силилированных альдегидов фурана в реакционной смеси также рас-

з

тэт при переходе от И3 = Р1тМеа к Н3 = РЬ, ( от 9,5% до 74,1% ). В процессе фракционирования ацетальная защита диэтилацеталя 5-трифенилсилилфурфурола снимается полностью. Та "•л зависимость наблюдается для этокси- и Сутоксисиланов, образующихся в результате взаимодействия хлорсиланов с побочными продуктами металлиро-вания диэтилацеталя фурфурола бутиллитием. Количество непрореа-гировавшего хлорсилана во всех случаях оставалось примерно одинаковым ( около 6Ж ).

Сходным образом протекает литийоргянкческий синтез в случае диэтилацеталей хлорметидциметилсилилфурфурола и дихлорметил-диметилсилилфурфурола.

Анализ хром-масс-спектрометрических данных позволяет отметить, что, в отличие от вышеупомянутых литийорганических синтезов, реакционная смесь, образующаяся при взаимодействии диме-тилхлорсилана с металлированным диэтилацеталем фурфурола, не содержит в заметных количествах ни этокси- и Сутоксисиланов, ни 5-диметилсилилфурфурола. Помимо непрореагировавшего диэтилацеталя фурфурола реакционная смесь предположительно содержит

Вследствие того, что результатом взаимодействия металлиро-ванного диэтилацеталя фурфурола с крайне реакционоспособным ал-лилдиметилсилилфурфурола составил 9,2%, выделить последний в чистом виде не удалось.

. 1.2. Гидросилилирование непредельных соединений диэтил-

Реакция гидросилилирования проводилась в отсутствие растворителей в атмосфере аргона при 70-80°С, либо в запаянной ампуле при Т20-130°С ( в случае Я-пропаргиламинов и аллиламинов >:

ацеталем 5-диметилсилилфурфурола.

й-(^Р-31Ме2Н + НСшСЯ»-

ы

R = CH(OEt)a, Ri = CMe3, H-C7H1S, siM«3, Ph, COOEt, CH2OH,

CHaOSiMe3, CHaN(CHa)u, CHaN(CHa)e, CHaNEta R = H, R1 = CMe3P CHaNEta

H PtCl

R-U^yslUejï + HaC=CHR»- —-* R-U^-SlUe, (CHa )aR» +

ke ___

R = CH(OEt)a, Ri = CMe3> SlMe3, CHaCMe3, CHaSlMe3, SlMea-^^ .

SiMe ( -Д^ • SiMea-££^-Cl. CHaCN,

CHaN(CHa)ul CHaN(CHa)s, CHaHEta, CHaNHCeH13, CHaCl, CHaBr

R = H, R1 = CMe3, SlMe3, CHaCMe3, CHaSlMe3

Легкость присоединения использованных гидросиланов к производным ацетилена, а также соотношение продуктов гидросилилиро-вания зависят от заместителей Ru R1. Влияние заместителей сказывается, в первую очередь, на продолжительности индукционного периода процесса гидросилилирбвания, то есть, вероятно, на времени образования активного каталитического комплекса ацетиленового производного с платиной. В случаях, когда заместители R1 проявляют электронодонорннй характер ( СМе3, h-C7H1s, Ph ) реакция начинается без нагревания, сразу же после добавления к эк-вимолярной смеси реагентов катализатора. Время индукционного периода при взаимодействии с триметилсилилацетиленом - примерно 5 минут. Чтобы инициировать взаимодействие диэтилацеталя 5-диме-тилсилилфурфурола с этиловым эфиром лропиоловой кислоты, необходимо нагревать реакционную смесь при 90-Ю0°С в течение 20 минут.

Диэтилацеталь 5-диметилсилилфурфурола реагирует с большинством изученных ацетиленовых производных с образованием /з-транс-и а-изомеров. Взаимодействие того же силана с триметилсилил- и третбутилацетиленом происходит стерео- и региоселективно с образованием только ^-транс-продукта. Использовав в качестве силили-рущего агента диметил(2-фурил)силан, и в случав трвтбутилаце-тилена получили смесь fî-транс- и а-изомеров в соотношении 10:1.

s

Рассматривая влияние электронных эффектов заместителей на соотношение изомеров, отметим, что согласно концепции о встречной поляризации тройной связи [А.Г.Пройдаков, С.В.Зинченко, Л.Б. Кривдин и др.//Журн.структуры.химии.-19Э1.-32.-.Ш.-С.73], все из использованных нами ацетиленовых производных ( за исключением Меэ51-СмСН ) содержат заместители, взаимодействующие преимущественно с одной из ортогональных п-систем тройной связи. При этом СМе3, СТНХ5, РЬ, СНаЫ(СНа)1., СНа11(СНа)5, СНата являются донорами электронов, и, следовательно, экранируют терминальный /э-углеродашй атом, а С0(Ш -акцептором, дезэкранируюсцим С^-атом. Вследствие того, что вторая п-система, но взаимодействующая непосредственно с заместителем, поляризуется под воздействием поляризации первой во встречном направлении, влияние такого рода заместителей на электронную плотность у ^-углеродного атома оказывается меньшим, чем у производных этилена. Триметилсилильная группа эффективно взаимодействует с обеими п-системами, поляризуя их в одном направлении.

При увеличении кратности связи между взаимодействующими ядрами "с наблюдается резкое увеличение чувствительности

(13ск13с) к эффектам замещения, что позволяет использовать эти константы для количественного описания влияния заместителей на л-системы тройной связи.

Нами установлена линейная зависимость соотношения изомеров, образующихся в результате гидросилилирования монозамеценных ацетиленов диэтилацеталем 5-диметилсилилфурфурола, от1 и сд для ряда заместителей, однотипно взаимодействующих с п-системой ацетилена. Преимущественное образование /э-аддуктов происходит при выраженных электронодонорных свойствах заместителя, а также при увеличении объема заместителя в ацетиленовом производном ( Рис. 1,2).

После тридцатиминутного нагревания (70-80°С) диэтилацеталя 5-дыдатилсилилфурфурола с И-пропаргилпирролидином исходные вещества остались без изменения. По-видимому, в этом случае на первой стадии процесса определяющим является не электронодонор-ный характер заместителя, а дополнительное взаимодействие Рг с атомом азота при образовании комплекса с непредельным фрагментом, что согласуется с литературными данными. В связи с этим реакцию диэтилацеталя 5-диметилсилилфурфурола с Ы-пропаргиламинами и аллиламинами проводили в запаянной ампуле при 120-130°С в те-

Ч9НИ9 20 минут.

а*И а+Е

4 * 1.0 0.8 • *

0.6 0.6 -

0.4 0.4

0.2 .л 1 ■ .1 . °п 0.2

-0.2 -0.1 0 0.1 0.2 0.4 РИС Л.

130 150

Рис.2.

170

Зависимость соотношения изомеров, образующихся в результате гидросилилирования ацетиленовых производных НСеСН диэтилацеталем 5-диметилси-лилфурфурола, и величины константы Гаммета. И = СООЕг (•); Р11 (*); н-с-,н,5 (.); СМе, (*); СНа1ТЕ14. - (о); 31Ме3 (*).

Зависимость соотношения изомеров, образующихся в результате гидросилилирования ацетиленовых производных НСаСН диэтилацеталем 5-диметилсилилфурфурола, и экспериментальных 1?13Г. ( по лит. данным '). ^ ° И = СООЕг (.); РЬ (к); Н-С7Н,_ («); СМе3 (а); БШе3 (м).

Реакция региоселективна и протекает по правилу Фармера в случае третичных вллиламинов.

Возрастание доли ^-продукта при переходе от ацетиленовых к этиленовым производным согласуется с вышеизложенной концепцией о более выраженном проявлении электронодонорных свойств заместителей у производных этилена в сравнении с производными ацетилена, а также с обнаруженной нами зависимостью доли ^-продукта от электронной природы заместителя.

Вторичный №-аллиламин взаимодействует с упомянутым гидроси-ланом с образованием как а-, так и ^-аддуктов в соотношении 1,8:1.

Взаимодействие диэтилацеталя 5-диметилсилилфурфурола и диметил(2-фурил)силана с монозамещенными этиленами, не содержащими атома азота, начинается при комнатной температуре. Во всех случаях в результате реакции образуется только продукт ^-присоединения с выходом 57-96?.

в

в

Гидросилилирование этиленовых производных HaC=CHR1 диметил-(2-фурил)силаном протекает более бурно и с меньшим временем индукционного периода , чем доэтилацеталем 5-даметилсилилфурфуроль.

I.3. Получение диэтилацеталя 5-диметил(<5-аминобутил)-силилфурфурола.

Восстановлением диэтилацеталя 5-(диметил-3-цианопропилси-лил)фурфурола алюмогидридом лития ( молярное соотношение 1:2 ) в абсолютном эфире с последующим разложением образующихся комплексов абсолютным этанолом-получен диэтилацеталь 5-диметил-(<5-аминобутил) силилфурфурол:

(Et0)aHC-O)-¿i(CHa)3CN 1'1ШН"> (EtO)aHC-/7~T\_¿1(CHa)1.NHa ¿le 2.С3Не0Н

Выход амина после фракционирования реакционной смеси 51,5%.

В результате формулирования диэтилацеталя 5-димотил(<5-ами-нобутил)силилфурфурола этилформиатом получен диэтилацеталь 5-(диметил-б-[(К-формил)аминобутил)силил)фурфурола с количественным выходом:

___ Ме

(EtO)aHC-CJ^-¿i(CHa)kNHa + СаН,0СН0 -»

• he

____ Me

--► (EtOJaHC-^^il (СНа) uNHGHO + СаНвОН

ке

II. ПОЛУЧЕНИЕ 5-ЗАЩИЩЕННЫХ ФУРФУРОЛОВ.

При кипячении эфирного раствора диэтилацеталей 5-замещен-ного фурфурола в присутствии п-толуолсульфокислоты в среде воды образуются соответствующие альдегиды:

R-^O^H(0Et)a Ha0(:rSH) ■ R-ÍZZ^-CHO ^^ -2 EtOH ^^

R = Me3Sl, HSlMea, PhSiMea, PhaSlMe, PhCH=CHSlMea,Me3C(CHa)aSlMe MeaSlCH=CHSIMea, NC(CHa)3SlMea, OHCHN(CHa)uSiMea, ClHaCSiMea ClaHCSlMea, MeS, BuS, OHC

Таким образом нами получен первый представитель кремнийор-ганических соединений, содержащий в молекуле одновременно альдегидную и 51-Н-группы,-5-диметилсилилфурфурол.

Скорость гидролиза диэтилацеталей фурфурола в условиях эксперимента зависит от времени кипячения, заместителя в 5-ом положении фурана и количества добавленной п-толуолсульфокислоты.

Снятие ацетальной защиты с альдегидной группы аминов (CHa)J№(CH3)3SlMea-£T^CH(OEt)a и EtaN(CHa)3SlMea-/^o^i-CH(0Et), происходит при добавлении кислоты в количестве более молярного, то есть только после образования соли.

Титрование вышеупомянутых аминов проводилось по известной методике насыщенным раствором хлористого водорода при температуре -Ю°С. Гидрохлориды оказались крайне гигроскопичными и расплывались на воздухе, поэтому они были охарактеризованы в виде соответствующих тиосемикарбазонов.

Для получения солей 5-далетил(¿-амшюбутил)силилфурфурола нами была разработана методика титрования спиртового раствора диэтилацеталя 5-диметил(<5-аминобутил)силилфурфурола 0,1н водным раствором HCl и Н3Са0„-2 Н30 в присутствии индикатора бромтимо-ловый синий. .

ß процессе гидролиза ацетальной группы диэтилацеталя 5-метилтиофурфурола происходит окисление атома серы и образование наряду с 5-метилтиофурфуролом соединения MeS-i^^i-CHO, структура которого подтверждена масс-спектром.

III. ПРОИЗВОДНЫЕ 5-ЗАМЕЩЕННЫХ ФУРФУРОЛОВ ПО КАРБОНИЛЬНОЙ ГРУППЕ.

Синтез производных 5-замещонных фурфуролов по карбонильной группе проводили по двум основным направлениям: I. получение разнообразных, не известных ранее, производных по карбонильной группе при постоянном заместителе в 5-ом положении фурана(SiMe3) для сравнения их биологических свойств с теми же производными незамещенного фурфурола; 2. варьирование заместителя в 5-ом положении фурана при постоянном заместителе во втором положении (-CHNNHCSNH,).

III.1. Производные 5-триметилсилилфурфурола.

Синтез оснований Шиффа из D-глюкозамина и 5-триметилсилил-

Q

фурфурола ( или фурфурола ) осуществляли в водной среде по методу Бергмана-Цервасз.

НОСН, НОСНд

оА(|*У|Н,ОН + -' ..

И = 31Ме3, Н

Интерпретация спектров ПМР проведена в соответствии с данными [ В.П.Панов, А.К.Трухманов, Р.Г.Жбанков//Журн. приклада, спектроскопии.-1973.-T.I9.Ji6.-С .Т131 ].

Соотношение а,р-изомеров N-(5-триме тилсилилфурфурилиден)-2-дезокси-2-амино-Б-глюкозы 1:3.

Взаимодействием Б-глюкозамина с 5-триметилсилилфурфурили-денсемикарбазидуксусной кислотой в этаноле получен 2-дезокси-2-аминий-й-глюкозо( 5-триметилсилил )фурфурилиденсемикарбазидуксус-нокислый:

НОСЕ,

6насоон

И = Н, 31Меа

ОНСЕ,

Ьиаг ^'"й;

Гидросульфитные производные,- 5-триметялсилилфурфурол-а-оксисульфонат N8 и фурфурил-а-оксисульфонат натрия,- получены взаимодействием соответствующего альдегида с насыщенным раствором КаНБОз то аналогии со стандартной методикой:

__ ОН о

+ НаНБ03 -.

Р = Н, 51Ые3 В

Кипячением 5-триметилсилилфурфурола с соединениями, содержащими Ща-группу, в этаноле ( или водном этаноле ) получены азометиновые производные:

Ме351-(Г^-СН0 + Н^СН2СН(0Ме)2-» Ме331-(£оЗД-СНЖ;НаСН(0Ме)а

Me3Si-i^T\-CHO + H3N(CH,)uMe,Sl-/7^-CH(0Et),

-► Ме3Б 1-110)Х-Ш (СНа) ^Ме^-^ДУ-СН (ОЕг) а

И-^ТУ-СНО + ная-ы — сн -> н-^Т^сш-м- сн

Н = Ме331-СН=СН;, Ме331

+ наи-1?^]) -► н-^Т^сш-О] • Н.и-С^

Е = й , Ме331

При нагревании в течение 25 минут раствора диметилацет'аля 5-триметилсилилфурфурилиденаминоацетальдегида с водным раствором эквимолярного количества п-толуолсульфокислоты происходит образование 5-триметилсилилфурфуроля:

Ме331-/7^-е™сНаСН(0Ме)а Ме351-^Т\_СН0

100%

Снятия ацетальной защиты в этих условиях не происходит, что подтверждено данными ГЖХ и масс-спектрометрии.

Нагревание смеси 5-триметилсилилфурфурола с эквимолярным количеством 2-аминопиридина в 70%-ном водном этаноле, вопреки ожиданию, приводит к образованию

• • HaN-Cj) с 39,3£-ным

выходом. Если изменить порядок смешивания реагентов и к 5-три-метилсилилфурфуролув 50%-ном водном этаноле добавлять по каплям спиртовый раствор эквимолярного количества 2-аминопиридина, результат получается тот же.

Интерпретируя ИКС-спектры 0,1 М, 0,01 М растворов полученных нами продуктов взаимодействия фурфурола и 5-триметилсилил-фурфурола с 2-аминопиридином, а также МКС-спектры этих соединений в твердом виде по аналогии с работой ( Hlromu Sugeta // Bull Chem.Soc.Jpn.-1981.-V.54.-P. 3T06 ], приходим к выводу, что в

твердом состоянии и, частично, в растворах с концентрацией выше 0,1 М продукты взаимодействия r_£7~3)-CHO с 2_аминопиРиДином соответствуют представленным выше структурам. данные элементного анализа и ЯМР-спектров подтверждают этот вывод.

III.2. Тиосемикарбазоны 5-замещенного фурфурола.

Часть тиосемикарбазонов получена традиционным путем -кипячением 5-замещенных фурфуролов с тиосемикарбазидом в 70%-ном этаноле . Другая часть получена из соответствующих диэтил-ацеталей 5-замещенных фурфуролов без предварительной стадии гидролиза, в присутствии каталитических количеств п-толуолсульфо-кислоты, либо без добавления р-ТБН:

R-^^(CH=CH)nCHO + HaNNHCSNHa --

-► (СН=СН )nCHNNHCSNH3

n=0, R= H; Me; СМе3; MeS; BuS; CH(0Et)a ; SlMe3; HMeaSl;

EtMeaSi; ClCHaMeaSl; ClaCHMeaSl; NC(CHa)3MeaSl; CaHa0„ СаНа0ц. NHa(CHa)„MeaSl; HCl (CHa)4N(CHa)3MeaSI ; HCl EtaN(CHa)3MeaSl; Me3CCH=CHMeaSi ; Me3C(CHa)aMeaSl; n=2, R= Me3Sl;

R-Z/U-CH(0Et)a —-k R-^-U-CHHNHCSNH.,

. HaNNHCSNHa ^^

R=Me3SlCH=CHMeaSl ; Me3Sl(CHa)aMeaSi; Me3Sl(CHa)3MeaSl; CTHlsCH=CHMeaSl; PhCH=CHMeaSl; PhaMeSi; PhMeaSl;

G^-SiMea (CHa )aMeaSi;

( £^JV-)aSlMe(CHa)aMeaSi ;

Cl-U^s)X-SiUe3 (CHa )aMeaSi;

CeH13NHa(CH2)3MeaSi; TS"

IV. ЯМР-СПЕКТРОСКОШЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ 2,5-ДМЗАМЕЩЕННУХ СШШФУРАНОВ.

Нами рассмотрены *-Н, 13с, аэд! ЯМР-спектры 5-замещенных фурфуролоз и соответствующих им диэтилацеталей, содержащих в 5-ом положении фурана различные.алкилсилильные заместители, в сравнении с углерод- и серусодержащими аналогами, а также рядом монозамещенных силилфуранов.

Изменение заместителей у атома в соединениях

и Н1Н2Нзз1-/£^-сН(0Е1;)а незначительно сказывается на экранировании протонов кольца фурана ( & Н3= 6,4±0,05 м.д., <5 Ни= 6,6^0,09 м.д., 6 Нг= 7,64^0,03 м.д.). Диэтилацеталь-

ная группа во 2-ом положении заметно не влияет на хим.сдвиги протонов кольца фурана в сравнении с монозамещенными силилфура-

нами.

В отличие от кремнийсодеркащих заместителей серусодержащие заместители (МеБ, ВиБ) не вызывают дезэкранирования протонов кольца фурана , тогда как альдегидная группа смещает сигналы кольцевых протонов в более слабые поля в сравнении с алкилсилиль-ными заместителями. • -

Появление метиленового мостика между атомом кремния и фура-ном вызывает увеличение электронной плотности у Н"(д<5= 0,4-м.д.) в сравнении с диэтилацеталом 5-триметилсилилфурфурола, то есть приводит к исчезновению электроноакцепторного эффекта алкилсилильной группы по отношению к фурановому кольцу, обусловленного й„-рп взаимодействием между.вакантными й-орбита-лями и п-электронами фуранового кольца, что уже было отмечено ранее для монозамещенных производных фурана

В отличие от диэтилацетальной альдегидная группа во 2-ом положении оказывает электроноакцепторное действие на п-систему 5-замещенного фурана, вызывая слабопольный сдвиг сигналов протонов Н3 ( на 0,4-0,5 м.д.) и Н •»( на 0,6 м.д.) в сравнении с соответствующими диэтилацеталями и монозамещенными силилфуранами.

Меньший слабопольный сдвиг протонов Н3 и Н" в._ШР-спектре фурфурола , содержащего в 5-ом положении кольца фурана заместитель Ме3СНС=СНМе251-, можно предположительно объяснить как ослаблением с1п- ря взаимодействия атома с п-электронной системой фурана вследстви«. конкурирующего взаимодействия с п-систе-

мой группы Ме3СНС=СН-, тг;; и передачей элез'тронодонорного эффекта группы Ме3С- по существующей в этом соединении сопряженной системе. В пользу последнего предположения свидетельствует тот

факт, что протон альдегидной группы в этом соединении более экранирован, чем в других силилзамещенных фурфуролах. Таким же сдвигом характеризуются протоны альдегидной группы в 5-замещен-ных фурфуролах, содержащих соответственно МеБ и ВиБ заместители.

Анализ спектров ЯМР "С 5-кремнийзамещенных фурфуролов и соответствующих им диэтилацеталей показывает, что появление заместителей в 5-ом положении фурана, содержащего во втором положении как группу -СН(ОЕг)а , так и -СНО, вызывает дезэкраниро-вание углеродных ядер С5, С" и Са кольца фурана в сравнении, соответственно, с незамещенными диэтилацеталем фурфурола и фурфуролом. Степень' дезэкранирования уменьшается в ряду. С® > О > Са

С увеличением числа фенильных групп у атома Б1 в ряду Н = РМ1е331, Р11аМе51, Р1г351 происходит перераспределение и, в конечном счете, выравнивание электронной плотности у ядер О и С* фурана.

Химические сдвиги ядер С3' фурана для изученных 5-силилза-мещенных диэтилацеталей фурфурола изменяются незначительно с заменой заместителей у атома Б1 (дб "с, м.д. -.-0,8 ), тогда как для ряда альдегидов наблюдается экранирование ядер С3 фурана ( д<5 = -2,1... -4,6 м.д.).

В ряду изученных диэтилацеталей 5-замещенных фурфуролов изменение заместителей в 5-ом положении практически не сказывается на химических сдвигах а-углерода ( при условии постоянства растворителя ¿«Со,3 96,8 - 0,4 м.д. ).

Химический сдвиг ядра углерода альдегидной группы оказался более чувствительным к перемене заместителя у Св фурана. Наибольшее изменение в & 13с ( сдвиг в сторону сильных полей на 2 м.д. ) вызывает замена кремнийсодержащих заместителей на се-русодеркащие. Изменение заместителя у атома кремния в ряде случаев также сказывается на & ЯМР 13Са.

Для И = МеаССН=СН31Меа, МеэС(СНа)а31Меа отмечено экранирование ядра углерода альдегидной группы (лб ~ I м.д. ). Учитывая, что спектры ЯМР "с 5-фенилдиметилсилилфурфурола, 5-дифенилме-тилсилилфурфурола и 5-трифенилсилилфурфурола были сняты в ДМСО-йв, который вызывает слабопольный сдвиг резонанса ядер углерода ~ на 0,6 м.д. в сравнении с СБС13, уместно говорить о тенденции

к дезэкранированию ядер Са у этих соединений.

Таким образом передача влияния заместителя в 5-ом положении фурана на Ссч альдегидной' группы происходит в тех случаях, когда заместитель оказывается сопряженным с остатком молекулы фурфурола ( алкилсульфидные заместители, силильные заместители, в которых атом соединен с атомом углерода в состоянии эр2-гибридизации ).

Наблюдается и обратное влияние: замена диэтилацетальной группы на альдегидную вызывает слабопольный сдвиг на 2 м.д. резонанса "51 ( И= Н31Меа, Меа31СНаС1, Меа31СН=СНСМеэ,31Ме3 ).

Появление диэтилацетальной группы во 2-ом положении фурана не вызывает изменений в & ЯМР "б; в сравнении с соответствующим силилзамещенным фураном.

Сравнение зафиксированных в спектрах ЯМР 13с и вычисленных по аддитивной схеме значений химических сдвигов ядер углерода кольца фурана 5-метилтиофурфурола, 5-диметилсилилфурфурола, 5-триметилсилилфурфурола и соответствующих диэтилацеталей ( выбор соединений определен наличием данных б «с ЯМР для монозамещен-ных силилфуранов ), показывает, что вклад альдегидной группы и заместителей в 5-ом положении фурана в экранирование ядер углерода кольца фурана этих соединений неаддитивен. Вычисленные и найденные экспериментально значения химических сдвигов ядер углерода кольца фурана диэтилацеталей вышеупомянутых 5-замещен-ных фурфуролов совпадают, что говорит о независимом электроно-акцепторном влиянии заместителей нм кольцо фурана в последнем случае.

Для 5-метилтиофурфурола , учитывая возможность окисления атома серы с образованием сульфоксидной группы, нельзя исключать возможность межмолекулярного взаимодействия.

V. ЦИТОТОКСИЧЕСКАЯ И ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДНЫХ ФУРФУРОЛА И ЕГО 5-ЗАМЕЩЕННЫХ.

Исследование цитотоксической активности ( концентрация в мкг/мл, подавляющая рост клеток опухоли на 50-60% - ЕС50 ) соединений проведено на культуре клеток меланомы В1е. Противоопухолевую активность веществ изучали в двух сопряженных тестах на асцитных формах лимфе зйкоза Р 388 и карциномы легких Льюис, выражали в % О/К ( отношение продолжительности жизни- мышей в опыт-

ных группах к контролю), для выявления корреляций активность -строение изучены цитотоксические и противоопухолевые свойства производных незамещенного фурфурола, а также серусодержащих и углеродных аналогов кремнийорганических производных фурфурола. • Нашей задачей было, кроме того, выявление корреляций ( или их . отсутствие ) между цитотоксичностью соединений, их токсичностью на мышах и противоопухолевой активностью.

Фурфурол и его карбофункциональные производные , за исключением натрийгидросульфита фурфурола нецитотоксичны. Последний обладает умеренной цитотоксичностью (ЕС50=18мкг/мл ). Введение диэтилацетального заместителя в положение 5-фуранового кольца не приводит к изменению значения цитотоксичности. Небольшое увеличение цитотоксичности в сравнении с фурфуролом наблюдается при введении в положение 5- третбутильного заместителя, значительное увеличение ( 3-10 раз )- при введении различных алкилсилильных и алкилсульфидных заместителей. В ряду изученных 5-замещенных фур-фуролов вид заместителей у кремния мало сказывается на цитотоксичности соединений.

Характер зависимости цитотоксичности диэтилацеталей 5-замещенных фурфуролов от вида заместителя в 5-ом положении фурана аналогичен описанному выше для 5-замещенных фурфуролов. Помимо алкилсилильных и алкилсульфидных групп'значительное увеличение цитотоксичности вызывает введение в 5-е положение фурана группы -СНШНС5Ш2. Значения цитотоксичности для диэтилацеталей и соответствующих альдегидов - величины одного порядка. Исключение составляет пара диэтилацеталь 5-диметил(б-аминобутил)силилфур-фурола и оксалат 5-диметил(<5-аминобутил)силилфурфурола. При переводе в солевую форму ( с одновременным снятием ацетальной защиты ) высокотоксичного диэтилацеталн это свойство теряется.

В ряду карбофункциональных производных 5-триметилсшшлфур-фурола наибольшей цитотоксичностью обладает исходный 5-триметил-силилфурфурол ( ЕСво=1,8мкг/мл ). Активность исчезает полностью, либо значительно уменьшается при введении в 5-триметилсилилфур-фурол защитных групп, делающих его растворимым в воде.

Поскольку перевод альдегида в тиосемикарбазон приводит к увеличению цитотоксичности, то, ведя поиск цитотоксичных веществ среди кремнийорганических производных фурфурола, логично было, исследовать ряд тиосемикарбазонов 5-замещенного фурфурола. Действительно, все исследованные тиосемикарбазоны - высокоцитотоксич-

те соединения. У солевых форм аминов в этом ряду активность вы-жена слабее.

Во всех группах исследованных веществ, исключая тиосемикар-Оазоны, значения максимально переносимых доз соединений, в том числе и высокоцитотоксичннх, находились в диапазоне 100-1000 мг/кг. Диапазон МИД тиосемикарбазонов 10-100 мг/кг. Внутри этой группы явной зависимости между цитотоксической активностью и токсичностью на мышах также не прослеживается.

Из всех изученных Веществ противоопухолевой активностью обладали тиосемикарбазон 5-триметилсилил-2~фурилпентадиеналя, тиосемикарбазон 5-фенилдиметилсили.мфурфурола и тиосемикарбазон 5-{даметил-^-[диметил(2'-фурил)силил]этилсилил}фурфурола, достоверно увеличивавшие продолжителность жизни мышей с лимфолейко-зом Р 388 соответственно на 28%, 25%, 23£, что выше, чем для натулана и ГММ ( 8% и 3% соответственно ) при меньших оптимальных дозах и сопоставимо с фторафуром.

Проведенное исследование цитотоксичности и противоопухолевой активности позволяет придти к выводу, что для изученных соединений и использованного теста цитотоксичность не коррелирует с противоопухолевой активностью. На основании полученных данных можно заключить, что цитотоксичность является необходимым, но недостаточным условием для того,- чтобы утверждать, что соединение будет обладать противоопухолевой активностью.

VI. НЕЙРОТРОПНАЯ АКТИВНОСТЬ КРЕМНШОРГАНИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДНЫХ ФУРФУРОЛА.

Изучение нейротропной активности кремяийорганических производных фурфурола проводилось в сравнении с углеродными, серусо-держащими аналогами, а также рядом 2-силилфуранов. Свойства последних изучались с целью выявить корреляции структура - активность .

Изучение токсических свойств тиосемикарбазонов показало, что большинство исследованных соединений проявляет среднюю токсичность ( ЛДЕО - 103-890 мг/кг ). Низкотоксичные 'хиосемикарба-зоны 5-метил-,'5-метилтио- и 5-триметилсилилфурфурола ( ЛД5П > 2000, 1410 и 1630 мг/кг соответственно ) и высокотоксичный тиосемикарбазон 5-третбутилфурфурола ( ДЦЕ0 =20,5 мг/кг ) - иск- „ лючения.

Введение метальной группы в 5-е полозке: ле фурана уменьшает острую токсичность более, чем в 15 раз; включение атома S между метальной группой и фурановым кольцом изменяет величину ЛД50 с > 2000 ммг/кг до I4IQ мг/кг. Замещение двух водородных атомов в метильной груше на этоксильные уменьшает величину ДЦ5П в 10. раз. Замещение всех водородных атомов в метильной группе на метальные группы вызывает резкое увеличение острой токсичности ( в 100 раз ). Углеродный аналог 5-триметилсилилфурфурола в 80 раз более токсичен.Наименьшей токсичностью в серии тиосемикарбазонов 5-силилзамещенных фурфуролов обладает 5-триметилсилилфурфурол. Замещение метильной группы на Н, Et, СНаС1 или Ph уменьшает величину ЛДВ0 в 4-6 раз. Введение второй фенильной группы вместо метильной не изменяет значения ЛД5„.

Все изученные тиосемикарбазоны оказывают, в различной степени, действие на двигательную активность, мышечный тонус и температуру тела в отличие от исследованных нами 2-силилфуранов, не обладающих депримирующей активностью и нетоксичных.

Прослеживая корреляции структура исследованных тиосемикарбазонов - нейротропная активность, необходимо отметить, что , изменяя заместители в 5-ом положении фуранового кольца, можно изменить степень активности соединения, а также спектр его фармакологического действия: Присутствие SlMea(СНа)2SlMeaД^ДЗ-С!, MeS, CH(0Et)a групп в 5-ом положении фурана вызывает значительное уменьшение депримирующей активности. Замена хлорсодержаще-го тиофена фураном вызывает увеличение депримирующей активности в тестах "вращающегося стержня" в 4 раза и "подтягивания на перекладину" в 10 раз, более того, изменяет спектр нейротропной активности соединения. Так, например, тиосемикарбазон 5-{диме-тил-/?-[димэтил (2'-фУрил)силил 1 этилсилил)фурфурола оказывает активирующее действие на центральную нервную систему: он уменьшает длительность этанолового наркоза, увеличивает длительность фенаминовой стереотипии, оказывает выраженное действие на процессы памяти, улучшает обучение и полностью предотвращает ретроградную амнезию. Тогда как тиосемикарбазон 5-{диметил-/э-[ди-метил(5-хлор-2?иенил)силил]этилсшшл}фурфурола, напротив, проявляет седативные свойства во всех этих тестах.

Появление второй фенильной группы в серии R = SlMeaPh, SlMePha, SiMeaCH=CHPh уменьшает депримирующую активность в различных тестах в 5-20 раз Включение -СН=СН- группы между атомом

51 и фенильной группой незначительно изменяет депримирующую активность. Седативная активность соединений возрастает в ряду И = Б1МеаСН=СНРЬ > 31МеР11а> 31МеаРУг согласно их влиянию на действие наркотических веществ и коразола.

Тиосемикарбазоны 5-дшетилфенилсшшлфурфурола и 5-метилди-фенилсилилфурфурола не проявляют антигипоксической активности и снижают фармакологическое действие фенамина на 52,8% и 65,6% соответственно, тогда как тиосемикарбазон 5-[диметил(2*-фенилэт-1-енилсилил}фурфурола продлевает жизнь животным в условиях гипоксии более, чем вдвое, усиливает фармакологическое действие фенамина на' 89% и положительно влияет на процессы памяти.

Замещение метальной группы в БШе., тиосемикарбазона 5-три-метилсилилфурфурола на Н, СНаС1 и Р1г вызывает уменьшение или полную потерю антигипоксической активности.

В ряду тиосемикарбазонов 5-замещенного фурфурола с И = 31Меэ, Меа81(СНя)а81Ме3, Меа31(СНа)э31Ме3. Меа31НС=СН31Ме3 наибольшей нейротропной активностью депримирующего типа ( с учетом токсичности ) обладает тиосемикарбазон 5-триметилсилилфур-фурола. Введение между кольцом фурана и 31Ме3 группы Меа31НС=СН приводит к уменьшению терапевтического индекса в различных тестах на двигательную активность и мышечный тонус в 4-10 раз, практически не сказывается на ноотропных свойствах , но вызывает увеличение длительности гексеналового и этанолового наркоза," появление антифенаминовой активности, улучшение процессов памяти. Замена группы -СН=СН- на -СНа-СНа- вызывает резкое уменьшение депримирующей активности ( I = ЛД50/ЭД30 в .тестах "вращающегося стержня", "трубы", "гипотермии" уменьшается в 100 раз ), уменьшение антигипоксической активности и ретроградной амнезии, но ведет к дальнейшему увеличению седзтивной активности. Включение в алкильную цепочку, разделяющую группы Меа31 и Б1Ме3 еще одной метиленовой группы приводит к уменьшению вдвое токсичности соединения, вследствие чего, несмотря на значительный рост ЭД в тес тах на двигательную активность и мышечный тонус, терапевтический индекс изменяется мало. Седативная активность при этом уменьшается.

Нейротропная активность 2-фурилсиланов в целом заметно ниже активности соответствующих тиосемикарбазонов.

Большинство изученных тиосемикарбазонов 5-замещенного фурфурола проявляет выраженную нейротропную активность. Тиосемикар-

базоны силилзамещенного фурфурола более акт ины и обладают своеобразным спектром фармакологической активности. Ряд соединений

предложен для дальнейшей разработки лекарственных средств.

ВЫВОДЫ.

1. Разработаны методы получения и синтезированы неизвестные ранее 2,5-дизамещенные силилфураны.

2. Получен первый представитель кремнийорганических соединений, содержащий в молекуле одновременно альдегидную и Б1-Н-груп-пы,-5-диметилсилилфурфурол.

3. Осуществлен синтез тиосемикарбазонов 5-силилфурфуролов из диэтилацеталей 5-силилфурфуролов без предварительной стадии гидролиза.

4. Установлена линейная зависимость соотношения изомеров, образующихся в результате гидросилилирования монозамещенных ацетиленов дизтилацеталем 5-диметилсилилфурфурола от1^ 1зсв1зс и о-п для ряда заместителей, рднотипно взаимодействующих с

п-системой ацетилена.

5. На основании ЯМР-спектров показано, что, в случае 5-замещен-ных фурфуролов, заместители во 2-ом и 5-ом положениях фуршш влияют друг на друга, если заместитель в 5-ом положении оказывается сопряженным с остатком молекулы фурфурола. Влияние заместителей на кольцо фурана неаддитивно.

6. Выявлено, что для изученных соединений и использованного теста цитотоксичность не коррелирует с противоопухолевой активностью и токсичностью на мышах.

7. Синтезированы соединения ( тиосемикарбазон 5-триметилсилил-2-фурилпентадиеналя, тиосемикарбазон 5-фенилдиметилсилилфурфу-рола, тиосемикарбазон 5-(дометил-/?-[диметил(2'-фурил )сшшл]-этилсилил)фурфурола ), проявляющие противоопухолевую активность, сопоставимую с фторафуром, по отношению к лимфолейко-зу Р 388.

8. Проанализирована зависимость психотропных свойств от строения тиосемикарбазонов 5-замещенных фурфуролов. Отмечено, что большинство изученных тиосемикарбазонов проявляет различные виды и степень нейротропной активности, зависящие от их строения. Активность 2-фурилсиланов заметно ниже активности соответствующих тиосемикарбазонов.

9. Высокоактивные тиосемикарбазоны 5-диметил(/э-триметилсилил)-этилсалилфурфурола, Б-1диметил(2'-фенилэт-1-енил)силил1фурфу-рола, 5- {диме тил-п- [ диметил (2'-фурил) силил ] этилсилил)фурфурола и Б-[ диметил (3',3-диметилбут-Г-енил) силил ]фурфурола отобраны для дальнейшей разработки лекарственных средств.

Основное содержание диссертации отражено в следующих

работах:

1. Э.Лукевиц, Л.Е.Демичева, Н.П.Ерчак, Ю.Попелис Гидросилилиро-вание непредельных соединений диэтилацеталем 5-диметилсилил-фурфурола //Изв.РАН, Сер.хим. Г993.-ЛЮ.-СЛ784-1788.

2. Э.Лукевиц, Л.Демичева Биологическая активность производных фурана // ХГС.-1993.-A3.-С.291-321.

3. E.Lukevlca, L.Demicheva, N.Erchak, S.Germane Synthesis and neurotropic, activity oi silyl-3ubstituted furfural thloseml-carbazones // Appl.Organomet.Chem.-1993.-V.-7.-P.543-551.

4. Э.Я.Лукевиц, Н.П.Ерчак, Л.Е.Демичева, В.Н.Веровский Синтез и цитотоксичность производных фурфурола // Хим.-фарм.журн.-1992.-Jil.-С. 45-48.

5. А.С. 1436469 СССР // Лукевиц Э.Я., Ерчак Н.П., Хохлова Л.Н., Германе С.К., Веровский В.Н., Демичева Л.Е., Аугустане И.С. Тиосемикарбазоны триалкилсилиларилальдегидов, обладающие но-отропной и противоопухолевой активностью.

6. А.С. I6I4449 СССР // Л.Е.Демичева, Н.П.Ерчак, Э.Я.Лукевиц

• 5-(Диметил(3',3' -диметилбут-Г-енил)силил)фурфурол в качестве промежуточного продукта для синтеза тиосемикарбазона 5-( диметил (3', З-диметилбут-1-енил)силил)фурфурола, обладающего неротропной активностью. ~ "

7. А.С. I6I2545 СССР // Э.Лукевиц, Л.Е.Демичева, С.К.Германе, Н.П.Ерчак Тиосемикарбазон 5-(диметил(З'.З' -диметилбут-1-енил) силил)фурфурола, обладающий нейротропной активностью.

8. А.С. 1607353 СССР // Н.П.Ерчак, Л.Е.Демичева, Э.Я.Лукевиц Способ получения диэтилацеталя 5-диметилсилилфувфурола.

9. А.С. 1436470 СССР // Э.Я.Лукепиц, Н.П.Ерчак, А.Г.Одынец, С.К.Германе, Л.Е.Демичева Тиосемикарбазон Б-этилдиметилси-лилфурфурола, обладающий нейротропной и гепатопротекторной активностью.

активностью.

10. E.Lukevlcs, L.Demicheva, N.Erchak, S.Germane Synthesis and neurotropic activity of sllyl-subatituted furfural thlose-mlcarbazones // X-th International Symposium on Organoslll-con Chemistry: Abstracts of Papers.- Poznan, Poland,- 1993.-P.300.

11. Э.Лукевиц, Н.П.Ерчак, Л.Е.Демичева, В.H.Веронский, И.Аугус-тане Синтез, цитотоксическая и противоопухолевая активность производных фурфурола и его 5-замещешшх // IV Всесоюзная конференция " Биологическая активность соединений кремния, германия и олова " Тез. докл.-Иркутск, 1990.- С. 32.

12. Н.П.Ерчак, Л.Е.Демичева, В.II.Перовский, И.Аугустане, Э.Лукевиц Синтез и цитостагическая активность фурилсиланов // VII Всесоюзная конференция по химии, технологии пр-ва и практ. применению кремнийорганических соед.: Тез.докл.-М., 1990.-4.2.-С. 166.

13. N Erchak, L.Demicheva, L.Khokhlova, J.Popells, E.Lukevlcs Electronic effects In hete^aromatlc organoelemental derivatives // 14-th International Symposium on the Organic Chemistry of Sulfur: Abstracts of Papers.- Lodz, Poland.-1990.-C.-P.T.

14. Н.П.Ерчак, Л.Е.Демичева, Ю.Ю.Иопелйс, Э.Лукевиц Синтез и 41, 13с ЯМР-спектроскопическое исследование 5-алкилтиофурфуролов // XVII Всесоюзная конференция " Синтез и реакционная способность орг. соедин. серы": Тез.докл.-Тбилиси.-1989.-С.37.

15. N.P.Erchak, V.F.Matorykina, L.E.Demlcheva, E.Lukevlcs Hydrosllylatlon with 2-furylhydroBllanes // V-th International Symposium on Furan Chemistry: Abstracts of Papers.- Riga -1988.-P.97.

16. E.Lukevlcs, N.Erchak, L.Demicheva, S.Germane Synthesis and neurotropic activity of 5-substltuted furfufal thlosemlcar-bazones // Phosphorus, Sulphur, Silicon.-1994.-V.95-96.-

P. 499-500.

17. Э.Лукевиц, Л.Е.Демичева, Ю.ЮЛТопелис Исследование 2,5-диза-мещенных силилфуранов методом спектроскопии ЯМР // ХГС.-1996.- Ä4.-С.449-457.