Закономерности удерживания и разделения энантиомеров профенов на хиральных неподвижных фазах тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.04 ВАК РФ

ИНСТИТУТ ТЕХНИЧЕСКОЙ ХИМИТ1 "----

48ЬЬои^

Решетова Елена Николаевна

ЗАКОНОМЕРНОСТИ УДЕРЖИВАНИЯ И РАЗДЕЛЕНИЯ ЭНАНТИОМЕРОВ ПРОФЕНОВ НА ХИРАЛЬНЫХ НЕПОДВИЖНЫХ ФАЗАХ

Специальность 02.00.04 - Физическая химия (химические науки)

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Пермь 2011

2 4 0-3 ГС77

4855804

Работа выполнена в лаборатории окислительного катализа в расплавленных электролитах Института технической химии УрО РАН, г. Пермь.

Научный руководитель:

кандидат химических наук Аснин Леонид Давыдович

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор

Краснов Виктор Павлович,

Институт органического синтеза УрО РАН,

г. Екатеринбург

кандидат химических наук, доцент Щуров Юрий Александрович, Пермский государственный университет

Ведущая организация:

Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН

Защита состоится 25.02.2011 г. в 13.00 часов на заседании диссертационного совета Д 004.016.01 в Институте технической химии УрО РАН по адресу: 614013, г. Пермь, ул. Академика Королева, 3.

Факс (342) 237-82-72, e-mail: info@itch.perm.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ИТХ УрО РАН. Автореферат разослан 25.01.2011 г.

Автореферат размещён на сайте ИТХ УрО РАН www.itch.perm.ru 25.01.2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат химических наук

Горбунов А.А.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования. Современные тенденции развития мировой фармацевтической промышленности свидетельствуют о растущей потребности в получении оптически чистых лекарственных форм, что обусловлено различием в химических и биологических свойствах индивидуальных энан-тиомеров. Например, противовоспалительное, жаропонижающее и анальгети-ческое действие производных 2-арилпропановой кислоты (профенов) связано с 8-конфигурацией хирального центра; Я-энантиомеры в некоторых случаях оказывают побочные эффекты. В связи с этим актуальным является создание точных, эффективных и надежных методик разделения и идентификации данных лекарственных хиральных препаратов, которые могут применяться и в производстве, и в последующем контроле.

В настоящее время самым распространенным и эффективным методом разделения и определения оптически чистых энангиомеров является высокоэффективная жидкостная хроматография на хиральньгх неподвижных фазах.

Известно, что метрологические характеристики методики напрямую зависят от выбора условий разделения. Поэтому для оптимизации аналитических и препаративных методик ВЭЖХ по параметрам хроматографического эксперимента необходимо детальное изучение физико-химических процессов, протекающих в системе адсорбат-адсорбент-элюент, в том числе определение термодинамических характеристик процессов на поверхности неподвижных фаз, установление закономерностей адсорбции разделяемых компонентов на границе раздела.

Целью исследования являлось изучение физико-химических закономерностей энантиоразделения производных 2-арилпропановой кислоты (профенов) на хиральных неподвижных фазах (ХНФ) в условиях высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и разработке методов их препаративного хроматографического разделения. Для достижения этой цели были решены следующие задачи:

- изучение закономерностей хроматографического разделения и удерживания энантиомеров профенов на ХНФ (полисахаридной, с привитым макро-циклическим гликопептидным антибиотиком эремомицином, фазе Пиркла) в условиях ВЭЖХ;

- определение термодинамических характеристик адсорбции (энтальпии, энтропии) профеновых кислот на выбранных ХНФ;

- определение зависимостей характеристик удерживания исследуемых профеновых кислот и селективности их разделения от температуры процесса и состава подвижной фазы (рН элюента, его ионной силы и концентрации органического модификатора в подвижной фазе);

- изучение влияния размера пробы на разделение рацемических смесей и форму кривых элюирования для различных составов подвижной фазы в уело-

виях препаративной ЖХ; определение чистоты и выхода полученных препаративным разделением энантиомеров.

Научная новизна.

Впервые проведено систематическое изучение характеристик хромато-графического удерживания, разделения и термодинамики адсорбции одного из представителей класса 2-арилпропановой кислоты - напроксена на полисаха-ридной хиральной неподвижной фазе СЫга1се101-Н.

Определены термодинамические величины адсорбции профеновых кислот (ибупрофена, напроксена, кетопрофена, флюрбипрофена) на сорбенте с привитым макроциклическим гликопептидным антибиотиком эремомицином. Показано, что характеристики удерживания и энантиоселективность разделения зависят от температуры, рН элюента и ионного состава подвижной фазы.

Впервые найдены условия препаративного разделения энантиомеров лекарственного препарата ибупрофена. Выделены индивидуальные изомеры ибупрофена в условиях препаративной жидкостной хроматографии; оценены чистота и выход полученных энантиомеров.

Практическая значимость. Определены условия разделения энантиомеров лекарственных препаратов в условиях нормально-фазового и обращенно-фазового режимов ВЭЖХ.

Предложены методы препаративного хроматографического разделения ибупрофена - широко используемого в настоящее время в фармацевтической промышленности как противовоспалительное, жаропонижающее и обезболивающее средство.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Данные по характеру разделения и удерживания энантиомеров профе-нов на хиральных неподвижных фазах трех типов: полисахаридной ХНФ, ХНФ с привитым макроциклическим гликопептидным антибиотиком эремомицином и фазе Пиркла.

2. Зависимости удерживания и селективности разделения энантиомеров производных 2-арилпропановых кислот от температуры, значения рН элюента, его ионной силы, а также концентрации органического модификатора в подвижной фазе.

3. Данные термодинамических характеристик адсорбции энантиомеров профенов на полисахаридной хиральной неподвижной фазе СЫга1се101-Н и на хиральном адсорбенте с привитым макроциклическим гликопептидным антибиотиком эремомицином Б1а5рЬег-СЫгакс1-Е (ЗАО «БиоХимМак СТ», Москва).

4. Условия выделения индивидуальных энантиомеров одного из представителей класса производных 2-арилпропановой кислоты - ибупрофена в условиях препаративной ВЭЖХ.

Апробация работы. Основные положения диссертации обсуждались на Всероссийском симпозиуме по хроматографии и хромато-масс-спектрометрии (г. Москва, Клязьма 2008), Международных конференциях «Техническая химия. От теории к практике» (г. Пермь 2008, 2010), XI и ХП молодежных научных школах-конференциях по органической химии (г. Екатеринбург 2008, г. Суздаль 2009), 34 Международном симпозиуме «HPLC-2009» (г. Дрезден, Германия 2009).

Диссертационная работа выполнена при поддержке грантов Американского фонда гражданских исследований и развития (№ 07-03-91106-АФГИР_а), научно-целевой программы «Конкурс научных проектов молодых ученых и аспирантов УрО РАН» (2008-2009 гг), Российского фонда фундаментальных исследований (№ 10-03-00048-а).

Публикации. Результаты диссертационной работы опубликованы в 4 статьях и 8 тезисах докладов на Всероссийских и Международных конференциях.

Структура и объём диссертации. Диссертация состоит из введения, четырех глав, выводов и списка цитированной литературы (184 ссылки). Диссертация изложена на 123 страницах текста, содержит 15 рисунков, 10 таблиц.

В первой главе приводится обзор литературы по хиральной хроматографии и методам разделения энантиомеров различных классов соединений на хиральных неподвижных фазах.

Во второй главе приведена экспериментальная часть: работа выполнялась на жидкостном хроматографе «Agilent 1100», измерения осуществляли на полисахаридной ХНФ Chiralcel OJ-H, представляющей собой иммобилизованную на силикагеле трис(4-метилбензоил)-целлюлозу, ХНФ с привитым макро-циклическим гликопептидным антибиотиком зремомицшгом Diaspher-Chiralsel-E, ХНФ (S,S)-Whelk-01 (привитый к силикагелю 1-(3,5-динитробензамидо)-1,2,3,4-тетрапцфофена1ггрен). В качестве объектов исследования были выбраны ибупрофен (I), флюрбипрофен (II), напроксен (Ш) и кетопрофен (IV).

I

П

СП,

СИ,

Ш

IV

Третья глава посвящена изучению термодинамики энантиоселективной адсорбции профенов на полисахаридном адсорбенте и ХНФ с привитым мак-роциклическим антибиотиком эремомицином.

Четвертая глава посвящена исследованию экспериментальных условий энантиоразделения методом препаративной жидкостной хроматографии на примере лекарственного препарата ибупрофена.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Анализ литературных данных по изучению методов получения чистых энантиомеров в условиях хиралыюй хроматографии показывает, что в последние годы наблюдается серьезный прогресс в решении широкого круга задач энантиомерного разделения и анализа разнообразных оптически чистых соединений, в том числе лекарственных форм. В то же время, исследованию такого значимого класса противовоспалительных препаратов как профены уделено недостаточное внимание. В этой связи целесообразным являлось изучение хроматографического разделения энантиомеров профенов на ХНФ различной природы.

ТЕРМОДИНАМИКА ЭНАНТИОСЕЛЕКТИВНОЙ АДСОРБЦИИ ПРОФЕНОВ

Адсорбция энантиомеров напроксена на химически модифицированной целлюлозе

В качестве подвижных фаз использовали смеси гексана с 10 и 20% этанола с добавкой 0.1% ТФУК. Тестовым адсорбатом служил один из широко используемых представителей класса профенов - напроксен (Ш).

Установлено, что увеличение доли этанола в подвижной фазе от 10 до 20% приводит к снижению фактора удерживания (к') в -1.9 раз, при этом величина селективности а практически не изменяется, сохраняя среднее значение 1.06 (при 22°С) (табл. 1). Дальнейшее увеличение доли спирта в элюенте, желательное для повышения скорости процесса, невозможно вследствие достижения предельного для данной колонки значения входного давления (50 атм).

Как следует из приведённых в табл. 1, 2 данных, время выхода напроксена значительно уменьшается с увеличением доли спирта в подвижной фазе, в то время как теплота адсорбции возрастает. Указанное обстоятельство связано с влиянием энтропийного фактора, изменение которого происходит не пропорционально изменению энтальпии. Для элюента с 10% этанола энтропийный терм составляет 55-57% от теплоты адсорбции, а для элюента, содержащего 20% этанола, энтропийный вклад компенсирует 90% адсорбционного изменения энтальпии.

Табл. 1. Характеристики удерживания и селективности для энантиомеров напроксена при 295 К и различной концентрации этанола в подвижной фазе. _

Энантиомер к А

10% С2Н5ОН

5 Я 9.86 10.37 1.05

20% С2Н5ОН

5 5.03 1.07

Я 5.37

Табл. 2. Термодинамические характеристики адсорбции энантиомеров напроксена. Т= 300 К - среднеарифметическая температура исследованного

Энантиомер АЯ°, кДж/моль ТА5?, кДж/моль АС0, кДж/моль

10% С2Н5ОН

5 -6.1 -3.5 -2.6

К -6.3 -3.5 -2.8

20% С2Н5ОН

5 -17.9 -16.3 -1.6

й -18.4 -16.6 -1.8

Энтропийные эффекты практически не сказываются на энантиоразделе-1ши при содержании полярного модификатора в подвижной фазе 10%. Энан-тиоселективность в этом случае полностью объясняется различием в энергиях связи энантиомеров с хиралъным селектором. Однако, при повышении доли спирта в растворителе энтропийный фактор начинает играть заметную роль в энантиоразделешш, что подтверждает экспериментальные данные по удерживанию энантиомеров напроксена на ХНФ СЫга1се1 01-Н (табл. 1).

Адсорбция энантиомеров профенов на хиралъном адсорбенте

с привитым антибиотиком эремомицином За последние несколько лет успешным классом хиральных селекторов для разделения энантиомеров фармакологически важных соединений стали макроциклические гликопептидные антибиотики. Они характеризуются стабильностью в водно-органических растворах (в отличие от полисахаридов), а благодаря наличию большого числа асимметрических центров и функциональных групп демонстрируют высокую энантиоселективность по отношению к различным классам хиральных соединений. Наиболее популярными антибиотиками, применяемыми для приготовления ХНФ, являются тейкопланин,

ванкомицин, ристоцитин А. Недавно в качестве хирального селектора было предложено использовать макроциклический антибиотик эремомицин

В настоящей части работы было исследовано влияние рН элюента и концентрации буферной соли в подвижной фазе на удерживание энантиомеров профенов, а также изучена термодинамика их адсорбции на указанной ХНФ. В качестве объектов исследования были выбраны соединения (I) - (IV).

Влияние рН подвижной фазы Сведения о влиянии рН элюента на разделение и удерживание энантиомеров получены на примере кетопрофена (IV) и напроксена (Ш).

Из рис. 1 видно, что форма кривых &'(рН) не зависит от соотношения вода-спирт и одинакова для обоих энантиомеров. Фактор удерживания возрастает при увеличении основности среды и достигает максимума при рНа ~ рК„ профена (в растворе вода-этанол 60:40 рКа для напроксена 5.7, для кетопрофена 5.4; в растворе вода-этанол 40:60 рКа для напроксена 6.4, для кетопрофена 6.1), после чего уменьшается.

к'

Рис. 1. Зависимость удерживания оптических изомеров кетопрофена (а) и напроксена (б) от значения рНа элюента, приготовленного с растворителями состава вода-этанол 40:60 (□, ■) и вода-этанол 60:40 (о, •). Светлыми символами обозначены 5-изомеры, темными - /{-изомеры. Т = 295 К. Элюент: 0.5М МШ, 0.1М (СН3СООН + СНзСОСЖН,), требуемое значение рН получали путем варьирования отношения СНзСООН/СНзСООЫН*

Этот факт объяснён, полагая, что удерживание профенов определяется совокупностью ионообменного и классического адсорбционного механизмов. При низких значениях рНа, когда диссоциация кислоты подавлена, профен адсорбируется в виде нейтральной молекулы. С повышением рНа возрастает доля диссоциированных молекул, которые адсорбируются по ионообменному механизму. Поскольку ион-ионное взаимодействие сильнее межмолекулярных

взаимодействий, вклад ионной составляющей в общее удерживание приводит к росту к'. Однако с увеличением основности подвижной фазы уменьшается доля протояированных аминных групп эремомицина, то есть центров прочной адсорбции анионов. Когда этот процесс начинает преобладать, наблюдается падение величины АЛ

Селективность а разделения энантиомерных пар также является немонотонной функцией кислотности подвижной фазы (рис. 2), положение максимума которой меньше чем величина рКа профена.

Рис. 2. Зависимость селективности разделения энантиомерных пар кетопрофе-на (1, 1') и напроксена (2, 2') в подвижных фазах, приготовленных с растворителями состава вода-этанол 40:60 (1, 2) и вода-этанол 60:40 (Г, 2') от значения рНа элюента. Т = 295 К

Из данных рис. 2 следует, что при изменении значений рН, изменение селективности происходит в гораздо меньшей степени при смещении от максимальных значений а в основную, чем при смещении в кислую область рН. По этой причине разделение оптических изомеров профенов следует осуществлять при значениях рНа, близких или несколько превышающих рКа аналита. Кроме того, можно сделать вывод о том, что ион-ионные взаимодействия вносят определяющий вклад в энантиоразделение. Действительно, по мере подавления диссоциации аналитов величина а быстро уменьшается и может достигать значения а = 1.

Изучено влияние рН элюента на термодинамические характеристики (энтальпия, энтропия) адсорбции профеновых кислот в диапазоне значений рН на восходящей ветви зависимости к' от рНа. Зависимость термодинамических величин от рН не является монотонной (табл. 3).

а

1.6п

4 5 6 7 8

рн

Табл. 3. Термодинамические характеристики адсорбции профенов при различных значениях рНа. Т - среднеарифметическая температура исследованного интервала, 299.75 К._____

Соединение РНа -АН0, Дж/моль Дж/моль ДАН0, Дж/моль ГАЛ.У0, Дж/моль ддс°, Дж/моль

5 Я 5 Я

I 5.25 9080 9900 8680 8690 -820 -10 -810

5.68 8880 9800 6870 7020 -910 -150 -770

4.63 10980 11500 9420 8970 -510 450 -970

П 5.25 10230 11860 6690 7330 -1630 -640 -990

5.68 10910 12670 6250 7000 -1760 -750 -1010

4.63 12030 11700 10430 9520 330 910 -580

1П 5.25 10800 11340 7370 7220 -540 150 -690

5.68 11270 11930 6610 6540 -650 70 -730

4.63 10250 10170 8260 7660 80 600 -520

IV 5.25 9730 10160 5960 5850 -430 110 -540

5.68 10590 11120 5740 5740 -530 0 -530

Как видно из табл. 3, зависимость теплоты адсорбции (-ЛЙ0) от кислотно-основных свойств подвижной фазы для Я- и Я-изомеров напроксена и кето-профена и 5-флюрбипрофена имеет минимум, что явно свидетельствует о наличии двух противоположно действующих факторов. При увеличении доли СНзСООН в эшоенте увеличивается конкурирующая способность растворителя за взаимодействие с адсорбционными центрами, соответствующий вклад ведёт к снижению |ДН°|. Этот эффект действует одновременно с возрастанием адсорбционной активности привитых частиц в связи с протонированием аминогрупп, но его влияние для упомянутых выше адсорбатов превалирует при рНа > 5.25. При меньшем значении рНа, энталышйный вклад более прочного удерживания за счёт взаимодействия с положительно заряженными фрагментами молекулы селектора начинает определять тенденцию к росту |АД°|. Сказанное не относится к 2?-флюрбипрофену, который характеризуется монотонным уменьшением теплового эффекта по мере снижения рНа подвижной фазы. Т.е. для него на фоне высокой энергии взаимодействия адсорбат-адсорбент

эффект конкурентной адсорбции ацетатных частиц (кислоты или аниона) определяет наблюдаемую зависимость Аот рНа во всём исследованном интервале значений этой величины. Энантиомеры ибупрофена, наоборот, демонстрируют тенденцию к повышению величины |ДН°) с уменьшением рНа. Такое поведение ибупрофена предположительно связано с особым механизмом адсорбции.

Зависимость энтропии адсорбции от рНа подвижной фазы (табл. 3) соответствует изложенной выше схеме. В результате первоначального уменьшения рНа АЯ0 для двуядерных профенов слабо изменяется, свидетельствуя о том, что структура комплекса адсорбент-адсорбат меняется не существенно. Для подвижной фазы с рНа 4.68 убыль энтропии адсорбата резко возрастает, указывая на образование пизкоэнтропийного комплекса.

Энталъпийно-энтропийная компенсация Получена зависимость ДД° - А5°, из которой видно, что при всех рассмотренных значениях рНа наблюдается хорошая линейная корреляция между АН0 и А5° для всех исследуемых профенов, кроме ибупрофена (рис. 3). Это подтверждает отличие механизма адсорбции ибупрофена от других исследуемых профенов.

Дж/(моль К)

Рис. 3. Компенсационные зависимости для энантиомеров напроксена, флюр-бипрофена, кетопрофена (S - тёмные символы, R - светлые символы) при рНа 4.63 (1), 5.25 (2) и 5.68 (3). Точки, отмеченные символом I, относятся к энантиомерам ибупрофена

Влияние ионного состава подвижной фазы Как следует из приведенных в табл. 4 данных, при увеличении концентрации буферной соли удерживание заметно уменьшается, при этом наблюдается незначительное снижение селективности в более концентрированных рас-

гворах, что согласуется с представлением о важности ионообменного механизма для адсорбции профенов.

Табл. 4. Влияние концентрации ацетата аммония на фактор удерживания и селективность при различных концентрациях уксусной кислоты (Сук) и рН подвижной фазы*. Т = 295 К._~__

0.1 М 0.2 М 0.3 М

снзсоока, снзсоогта, СН3СООШ4

Соединение К а а К кк а

При постоянном значении рНа=5.68

Сук = 0.175 М Сук = 0.245 М Сук = 0.402 М

Ибупрофен 0.78 0.99 1.28 0.56 0.71 1.26 0.43 0.53 1.24

Флюрбипрофен 1.90 2.79 1.47 1.28 1.86 1.45 0.94 1.33 1.42

Напроксен 1.92 2.50 1.31 1.37 1.77 1.29 1.03 1.30 1.26

Кетопрофен 2.04 2.49 1.22 1.38 1.66 1.21 1.03 1.22 1.20

Концентрация ацетата аммония и уксусной кислоты указаны для водного буферного раствора до смешения его с этанолом в соотношении 40:60. Значения рНа приведены для смешанного элюента.

Табл. 5. Влияние концентрации ацетата аммония на термодинамические характеристики адсорбции профенов при различных концентрациях СН3СООН (Сук) и рН подвижной фазы. Условия - в примечании к табл. 4. Т = 299.75 К.

0.1 М СНзСООГЩ, О.2МСН3СООШ4 0.3 М СН3СООМН4

Соединение -АН0, Дж/моль -ТАЯ0, Дж/моль -АН0, Дж/моль -ТАЗ0, Дж/моль -АН0, Дж/моль -ГД50, Дж/моль

5 л * 5 Л 5 * 5 Л 5 Л

При постоянном значении рНа = 5.68

С ж = 0.175 М СУК = 0.245 М = 0.402 М

Ибупрофен 6.6 7.8 5.2 5.8 6.5 7.4 5.9 6.3 5.9 7.2 6.0 6.7

Флюрбипрофен 9.7 11.7 6.1 7.2 9.3 11.2 6.7 7.6 8.8 10.5 6.9 7.8

Напроксен 10.1 10.9 6.4 6.7 9.7 10.6 6.9 7.2 9.4 10.0 7.3 7.4

Кетопрофен 9.5 10.2 5.8 5.9 9.1 9.7 6.3 6.4 8.5 9.1 6.4 6.6

В табл. 5 сравниваются значения термодинамических величин для разных составов подвижной фазы. При постоянном значении рНа для всех изомеров исследованных профенов с увеличением концентрации буферной соли в растворе наблюдается слабая тенденция к понижению теплоты адсорбции, которая коррелирует с увеличением количества уксусной кислоты в элюенте, добавленной для поддержания значения рНа на заданном уровне.

Анализ термодинамических данных показывает, что для всех исследуемых соединений адсорбция является энтальпийно контролируемым процессом.

ПРЕПАРАТИВНОЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ РАЗДЕЛЕНИЕ ЭНАНТИОМЕРОВ ИБУПРОФЕНА НА ХИРАЛЬНОЙ НЕПОДВИЖНОЙ ФАЗЕ WHELK Ol

Исследовано влияние экспериментальных условий (температуры, объема вводимой пробы, концентрации органического растворителя в подвижной фазе) на препаративное разделение профеновых кислот на примере ибупрофена (I). В качестве среды для разделения была выбрана ХНФ (S,S)~Whelk-01.

Хроматограммы разбавленных проб (/?5)-ибупрофена (12 мг/мл, объём пробы 1 мкл) характеризуются полным разделением пиков энантиомеров (рис. 4). Величина разрешения возрастает от 0.5 до 1.2 с уменьшением температуры от 50 до 30°С и доли этанола в подвижной фазе от 10 до 2 об. %.

Рис. 4. Хроматограммы ибупрофена. Колонка Whelk 01 (250x10 мм), подвижная фаза смеси гексан - этанол (2 об. %) + 0.5 об. % СН3СООН. Температура 30°С. Объем пробы 1 мкл. Длина волны 280 нм. Концентрация ибупрофена в пробе = 12 мг/мл

Увеличение размера пробы до препаративных количеств приводит к перекрыванию пиков, а при вводе рацемата в количестве 24 мг (объем пробы 200 мкл) разделения не наблюдается (рис. 5).

Особо сильное искажение пиков наблюдается при содержании этанола в элюенте 2 %, когда формируется и развивается дополнительный пик, по размеру сопостовимый с основными. Причиной такого поведения является конкурентная адсорбция аналита и полярного модификатора подвижной фазы (этанола в данном случае), ведущая к формированию так называемого систем-

ного пика, - зоны возмущения состава подвижной фазы, движущейся вдоль колонки коррелятивно с движением пика аналита. Для проявления эффекта необходимо, чтобы концентрация аналита была сопоставима с концентрацией модификатора. Именно поэтому интенсивность искажений убывает с ростом содержания этанола в подвижной фазе при неизменном объёме пробы.

6003 500

а

О

Ь зоо

L.

5 10 15

время, мин.

ю

время, мин.

Рис. 5. Хроматограммы ибупрофена. Колонка Whelk 01 (250x10 мм), подвижная фаза смеси гексан - этанол (2 об. %) + 0.5 об. % СН3СООН (а), гексан -этанол (10 об. %) + 0.5 об. % СН3СООН (б). Температура 30°С. Объем пробы, мкл: 1 - 50, 2 - 100, 3 - 200. Длина волны 280 им. Концентрация ибупрофена в пробе = 120 мг/мл

Анализ фракции, собранной от начала хроматограммы до минимума зоны возмущения (фракция 0 на рис. 5а), показывает, что её состав отличается от состава вещества первого пика основной группы (фракция I на рис. 5а) в сторону большего содержания первого элюируемого энантиомера ((/?)-ибупрофена). Следовательно, фракции 0 и I представляют по сути один пик, деформированный "наложением" системного возмущения. Для других составов подвижной фазы размер предфронтового пика невелик и его влияние на показатели разделения незначительно.

Влияние объёма пробы В случае первого элюируемого энантиомера (11-ибупрофен) общим правилом является уменьшение оптической чистоты фракции при увеличении объёма пробы, при этом не происходит снижения выхода К-ибупрофена (преимущественно при 30°С) (рис. 6). Для второй фракции (8-ибупрофен) наблюдается обратная картина (рис. 7).

Увеличение выхода разделяемых энантиомеров (90% и выше) происходит в обоих случаях (для Ы- и Б-форм) при снижении их чистоты даже при малой загрузке колонки (6 мг). В то же время, самые низкие выходы получены

для Б-ибуирофена при вводе в колонку 24 мг рацемата для всех составов подвижной фазы. В случае 1£-ибупрофена при максимальной загрузке колонки полученные энантиомеры имеют наименьшую чистоту.

объем пробы, мкл объем пробы, мкл

Рис. 6. Влияние объема вводимой пробы на чистоту и выход И-изомера ибу-профена. Концентрация этанола в подвижной фазе 2 об. %

Рис. 7. Влияние объема вводимой пробы на чистоту и выход Б-изомера ибу-профена. Концентрация этанола в подвижной фазе 2 об. %

Таким образом, получение высоких выходов одновременно с высокой чистотой достигается путем введения небольших объемов проб ибупрофена.

Влияние концентрации органического модификатора

Как следует из экспериментальных данных, время удерживания ибупрофена сокращается с увеличением содержания этанола в подвижной фазе, при этом значения селективности остаются постоянными в пределах погрешности эксперимента (рис. 8).

Наиболее высокие значения селективности наблюдаются для состава подвижной фазы гексанзтанол в соотношении 90:10 при температуре 30°С, в

этих условиях энантиоразделение также характеризуется низким временем удерживания, что является важным для препаративной хроматографии.

Рис. 8. Зависимость коэффициента удерживания к и селективности а от концентрации этанола в подвижной фазе. СибуПроф. = 12 мг/мл, объём пробы 1 мкл. ■ , □ - Я, И, 30°С; • , о - Б, Я, 40°С; ▲ , Д - 8, Я, 50°С

100-1 а

80

<3

Н

О 60-

Н

о

Я 40-1

ЕГ

20-

0-

I I И-ибупрофен ШЖМ 8-ибупрофен

40

т, с

# 80-

40

т,с

Рис. 9. Влияние концентрации этанола в подвижной фазе на чистоту разделяемых энантиомеров. Объем вводимой пробы 100 мкл; содержание этанола в подвижной фазе, об. %: 2 (а), 5 (б), 10 (в)

При низкой концентрации этанола (2 и 5 об.%) фракция второго элюи-руемого энантиомера (Б-ибунрофен) имеет оптическую чистоту выше, чем у энантиомера, этоируемого первым (К-ибупрофен) (рис. 9), а выход фракции первого элюируемого энантиомера (К-ибупрофен) выше, чем у энантиомера, элюируемого вторым (8-ибупрофен) (рис. 10). При повышении концентрации этанола до 10 об. % в обоих случаях наблюдается обратная картина

Определено влияние температуры и концентрации этанола в подвижной фазе на чистоту разделяемых энантиомеров (рис. 11). Факторы, ведущие к уменьшению времени выхода - повышение температуры и увеличение концентрации спирта - способствуют увеличению чистоты первого и снижению чистоты фракции второго элюируемого энантиомера.

I I Кибупрофек ШИИ в-ибупрофен 1

^60

О

X

3 40

100

80

«

о ВО

X

и 40

сс

20

0

30

40

т,с

эо

40

Т,С

50

100-

80-

&

ч во-

о

X

40-

в

20-

0-

40

т,с

Рис. 10. Влияние концентрации этанола в подвижной фазе на выход разделяемых энантиомеров. Объем вводимой пробы 100 мкл; содержание этанола в подвижной фазе, об. %: 2 (а), 5 (б), 10 (в)

а

100-, б

чо

40 80 120 160 200 объем пробы, м к л

40 80 120 160 200 объем пробы,мкл

Рис. 11. Влияние температуры и концентрации этанола в подвижной фазе на чистоту Л- (а) и Б-ибупрофена (б); темные символы соответствуют 2 об. % этанола, светлые - 10 об. % этанола в подвижной фазе. ■ , □ - 30°С; • , о - 40°С; А,

Полученные экспериментальные данные позволили сформулировать следующие рекомендации по энантиоразделению ибупрофена в условиях препаративной жидкостной хроматографии:

1. Получение высоких выходов одновременно с высокой чистотой разделяемых продуктов достигается путем введения небольших (50 мкл) объемов проб ибупрофена;

2. Несмотря на значительное сокращение времени удерживания энантиомеров ибупрофена с повышением температуры, нет преимуществ в использовании более высокой температуры процесса, поскольку это приводит к снижению селективности и чистоты разделяемых энантиомеров;

3. Энантиоразделение, проводимое с подвижной фазой гексан-этанол в соотношении 95:5 с добавкой 0.5 об. % уксусной кислоты при температуре 50°С и объеме вводимой пробы < 50 мкл (6 мг) является разумным компромиссом между селективностью разделения, временем удерживания, чистотой и выходом выделяемых энантиомеров.

1. В результате исследования характера удерживания энантиомеров на-проксена на полисахаридной ХНФ (СЫга1се1 01-Н) и закономерностей хрома-тографического разделения в нормально-фазовом режиме хроматографии определены факторы, увеличивающие скорость процесса разделения и не понижающие при этом его селективность.

2. Установлено, что хиральная неподвижная фаза на основе привитого к поверхности силикагеля макроциклического гликопептидного антибиотика

Д-50°С

ВЫВОДЫ

эремомицина показывает хорошую разделяющую способность по отношению к энантиомерам профенов, а также, в отличие от полисахаридной ХНФ, проявляет стабильность в водно-органических растворах.

3. Определено влияние температуры, pH элюента и ионного состава подвижной фазы на характеристики удерживания, энантиоселективность и термодинамические величины адсорбции профеновых кислот на сорбенте с привитым антибиотиком эремомицином. Выявлено, что взаимодействие с хираль-ным селектором протекает по разному механизму адсорбции в зависимости от типа и пространственной конфигурации (S- или R-изомер) исследуемых профенов.

4. На основании проведенных исследований предложены условия разделения энантиомеров ибупрофена методом препаративной жидкостной хроматографии. Выделены индивидуальные изомеры ибупрофена; оценены чистота и выход полученных энантиомеров.

Основное содержание диссертации изложено в следующих публикациях:

Статьи:

1. Решетова E.H., Аснин Л.Д. Хроматографическое поведение и термодинамика адсорбции энантиомеров профенов на силикагеле с привитым антибиотиком эремомицином //Журн. физ. химии. - 2009. - Т. 83 - С. 643-648.

2. Аснин Л.Д., Качмарски К., Решетова E.H. Адсорбция энантиомеров на-проксена из растворов на химически модифицированной целлюлозе. Влияние полярного компонента жидкой фазы // Изв. АН. Сер.хим. - 2009. - № 8. - С. 1678-1682.

3. Решетова E.H., Аснин Л.Д. Закономерности хроматографического разделения энантиомеров профенов на эремомицин-содержащей неподвижной фазе // В сб.: «Техническая химия. От теории к практике». - Пермь. - 2008. -Т. 2. - С. 263-266.

4. Решетова E.H., Аснин Л.Д. Влияние ионного состава подвижной фазы на удерживание энантиомеров профенов на хиральном адсорбенте с привитым антибиотиком эремомицином // В сб.: «Техническая химия. От теории к практике». - Пермь. - 2010. - Т. 2. - С. 202-206.

Тезисы докладов:

1. Решетова E.H., Аснин Л.Д. Закономерности хроматографического разделения энантиомеров профенов на эремомицинсодержащей неподвижной фазе // Всерос. симпозиум «Хроматография и хромато-масс-спектрометрия». -Москва, Клязьма - 2008. - С. 100.

2. Решетова E.H., Аснин Л.Д. Термодинамика адсорбции энантиомеров нанроксена на химически модифицированной целлюлозе в условиях ВЭЖХ // XI Молодежная конф. по органической химии. - Екатеринбург. - 2008. - С. 92.

3. Asnin L., Reshetova Е. Enantioselective adsorption of naproxen enantiomers on an eremomycin-based stationary phase // Proceedings 32th International symposium HPLC. - 2008. - Baltimore. - P. 45.

4. Решетова E.H., Аснин Л.Д. Закономерности проявления компенсационного эффекта при адсорбции энантиомеров профенов на силикагеле с иммобилизованным эремомицином в условиях ВЭЖХ // Всерос. семинар «Термодинамика поверхностных явлений и адсорбции». - Иваново-Плёс. - 2008. - С. 24.

5. Asnin L, Reshetova Е. Separation of Ibuprofen Enantiomers on Whelk 01 Stationary Phase under Overloaded Conditions // 34th International symposium «HPLC 2009». - Dresden, Germany. - 2009. - P. 218.

6. Reshetova E., Asnin L. Micropreparative separation of ibuprofen enantiomers on Whelk Ol stationary phase. The effect of temperature, mobile phase composition, and sample size // 22nd international symposium «PREP 2009». - Philadelphia. - 2009. - P. 50.

7. Решетова E. H. Препаративное хроматографическое разделение энантиомеров ибупрофена на хиральной неподвижной фазе Whelk 01 // Всерос. конф. «Теория и практика хроматографии. Хроматография и нанотехнологии». -Самара.-2009.-С. 178.

8. Решетова Е. Н. Закономерности хроматографического разделения энантиомеров профенов на эремомицинсодержащей неподвижной фазе. Влияние буферного раствора // XII Всерос. научная конф. по органической химии. -Суздаль.-2009.-С. 71.

Автор выражает искреннюю признательность:

Д.х.н., профессору Федорову А. А., д.х.н., профессору Чекрышкину Ю. С., К.Х.Н. Толмачевой И. А., к.х.н. Роздяловской Т. А., к.х.н. Внутских Ж. А. за ценные замечания, оказанное внимание к работе, помощь и поддержку; K.X.H. Горбунову А. А. за проведение хромато-масс-спектрометрических анализов.

Для заметок

Для заметок

Подписано в печать.21.02.2011. Формат 60x84 1/16. Усл. печ. л. 1,25. Тираж 120 экз. Заказ № 197 Отпечатано в ООО «Алекс-Пресс» Адрес: г. Пермь, ул. Дружбы, 34 Тел. 22-00-184

Введение.

1. Хиральная хроматография 2-арилпропановых кислот обзор литературы).

Ы.Хиральные неподвижные фазы в высокоэффективной жидкостной хроматографии.

1.1.1. Хиральные неподвижные фазы Пиркла.

1.1.2. Хиральные неподвижные фазы, основанные на производных-полисахаридов: целлюлозы, амилозы.

1.1.3. Хиральные неподвижные фазы с привитыми макроциклическими селекторами.

1.1.4. Лигандообменные хиральные неподвижные фазы.

1.1.5. Хиральные неподвижные фазы на основе белков.

1.2. Влияние различных факторов на энантиоселективное разделение

1.2.1. Состав подвижной фазы в нормально-фазовой хроматографии.

1.2.2. Состав подвижной фазы в обращенно-фазовой хроматографии.

1.2.3. Влияние температуры на хиральное разделение.

1.3. Препаративная жидкостная хроматография.

1.4. Производные 2-арилпропановых кислот как объект исследования . 46 1.4.1. Хроматографическое разделение энантиомеров 2-арилпропановых кислот.

1.4.1.1. Аналитическая хроматография.

1.4.1.2. Препаративная хроматография.

2. Материалы и методики эксперимента.

3. Термодинамика энантиоселективной адсорбции профенов.

3.1. Изучение термодинамики адсорбции энантиомеров напроксена на полисахаридной хиральной неподвижной фазе.

3.2. Изучение термодинамики адсорбции энантиомеров профенов на хиральном адсорбенте с привитым антибиотиком эремомицином.

3.2.1. Влияние рН подвижной фазы на удерживание и селективность разделения.

3.2.2. Хроматографическое поведение и термодинамика адсорбции.

3.2.2.1. Общие закономерности селективности и удерживания.

3.2.2.2. Влияние рН подвижной фазы на удерживание энантиомеров профенов и термодинамические характеристики адсорбции.

3.2.2.3. Влияние термодинамики адсорбции на удерживание и селективность.

3.2.2.4. Энтальпийно-энтропийная компенсация.

3.2.3. Влияние ионного состава подвижной фазы на удерживание энантиомеров профенов.

4. Препаративное хроматографическое разделение энантиомеров ибупрофена на хиральной неподвижной фазе Whelk Ol.

4.1. Влияние объёма пробы.

4.2. Влияние концентрации органического модификатора.

4.3. Влияние температуры.

Выводы.

Современные тенденции развития мировой фармацевтической промышленности свидетельствуют о растущей потребности в получении оптически чистых лекарственных форм. Необходимость практического использования хиральных соединений в оптически чистой форме обусловлена различием в химических и биологических свойствах индивидуальных энантиомеров. Из десятков тысяч синтезируемых в мире органических соединений около половины являются хиральными. Так, оптически чистые хиральные соединения лидируют по продажам современных медпрепаратов на Западе (к примеру, объём мировых продаж лишь одного оптически чистого противоязвенного препарата (З)-омепразола в 2003 году превышал $3.8 млрд., а в 2006 году достиг $4.1 млрд.) [1, 2]. Требования к оптической чистоте препаратов постоянно растут. В основных законодательствах США (FDA, 1992 г.) И' стран Европейского Сообщества .< (СРМР, 1993 г.) появились регулирующие акты по энантиомерно чистым препаратам. Согласно основным положениям этих актов фирмы-заявители должны признавать существование препаратов, состоящих из стереоизомеров, пытаться их разделять, изучать их фармакологическую активность и осуществлять рациональный выбор стереоизомера для регистрации. В результате ориентирования фармацевтической промышленности Европы, США, Канады, Японии, а также ряда стран юго-восточной Азии на выпуск энантиомерно чистых препаратов, доля лекарственных препаратов, зарегистрированных во всем мире в виде отдельных энантиомеров, непрерывно растет [3].

Необходимо отметить, что энантиомерное производство лекарственных форм в России практически отсутствует. Выпускаемые в виде рацемических смесей отечественные синтетические лекарственные препараты уступают по лечебному эффекту аналогичным зарубежным препаратам, в состав которых входят чистые энантиомеры. На сегодняшний день зарубежные производители, несмотря на экономические трудности, по-прежнему аккумулируют значительную часть российского рынка лекарственных средств.

В настоящее время часть.энантиомерно* чистых лекарств производится »с применением микробиологических методов синтеза, однако для получения многих целевых соединений в энантиомерно чистой- форме такие методы либо неэффективны, либо вообще невозможны. Весьма эффективным является асимметрический синтез, но и этот метод не дает нужной степени чистоты энантиомерного продукта, так как для многих лекарственных, препаратов энантиомерная чистота должна быть не ниже 99,5%, а для отдельных лекарств и хиральных катализаторов — практически 100 % [4].

Другой способ получения^ энантиомеров - разделение рацемических смесей. Среди известных методов разделения наиболее эффективным и экономически целесообразным является метод энантиоселективной хроматографии. Для решения проблем селективности разделения изучается-связь структуры исследуемых молекул с их удерживанием на сорбентах разной химической природы, разрабатываются многомерные варианты хроматографии, обеспечивающие разделение нескольких тысяч компонентов, развивается теоретическое и компьютерное моделирование хроматограмм. Несмотря на крупнейший вклад отечественных ученых в мировую хроматографию, положение России в этой области науки и техники оставляет желать лучшего - хроматографическое разделение энантиомеров часто оказывается безуспешным в связи с использованием не очень эффективных методов хроматографии и малоактивных хиральных адсорбентов; а отсутствие адекватных моделей для описания энантиоразделения препятствует развитию новых промышленных технологий в разделении и очистке энантиомеров. Но, несмотря на существующие проблемы этой области, приоритет в прямом разделении сложных смесей и получении высокочистых компонентов надолго останется за хроматографией. К сожалению, в последнее время' российские исследования в области распознавания в энантиоселективной хроматографии, немногочисленны. В России созданием хиральных колонок для разделения энантиомеров соединений различных классов занимаются два исследовательских коллектива (ИНЭОС РАН и МГУ). Вопросы теории и практики энантиоразделения изучаются в ИТХ УрОРАН.

В связи с перечисленными выше проблемами актуальной становится задача создания методик получения оптически чистых стереоизомеров, представляющих интерес для современной фармацевтической промышленности.

Целью настоящего исследования являлось изучение физико-химических закономерностей энантиоразделения производных 2-арилпропановой кислоты (профенов) на хиральных неподвижных фазах (ХНФ) в условиях высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и разработке методов их препаративного хроматографического разделения. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

• изучение закономерностей хроматографического разделения и удерживания энантиомеров профенов на ХНФ (полисахаридной, с привитым макроциклическим гликопептидным антибиотиком эремомицином, фазе Пиркла) в условиях ВЭЖХ;

• определение термодинамических характеристик адсорбции (энтальпии, энтропии) профеновых кислот на выбранных ХНФ;

• определение зависимостей характеристик удерживания исследуемых профеновых кислот и селективности их разделения от температуры процесса и состава подвижной фазы (рН элюента, его ионной силы и концентрации органического модификатора в подвижной фазе);

• изучение влияния размера пробы на разделение рацемических смесей и форму кривых элюирования для различных составов подвижной фазы в условиях препаративной ЖХ; определение чистоты и выхода полученных препаративным разделением, энантиомеров.

Научная новизна.

Впервые проведено* систематическое изучение характеристик хроматографического удерживания, разделения и термодинамики адсорбции одного из представителей класса 2-арилпропановой кислоты — напроксена на полисахар иднойхиральной неподвижной-фазе СЫга1се1 СХГ-Н.

Определены термодинамические величины адсорбции профеновых кислот (ибупрофена,* напроксена, кетопрофена, флюрбипрофена) на сорбенте с привитым макроциклическим гликопептидным антибиотиком эремомицином. Показано, что' характеристики удерживания* и энантиоселективность разделения зависят от температуры, рН элюента и ионного состава1 подвижной фазы.

Впервые найдены условия препаративного разделения энантиомеров лекарственного препарата ибупрофена. Выделены индивидуальные изомеры ибупрофена*в условиях препаративной жидкостной хроматографии; оценены чистота и выход полученных энантиомеров.

Практическая значимость.

Определены условия разделения энантиомеров лекарственных • препаратов в условиях нормально-фазового и обращенно-фазового режимов ВЭЖХ.

Предложены методы препаративного хроматографического разделения ибупрофена — широко используемого в настоящее время в фармацевтической1 промышленности как противовоспалительное, жаропонижающее и обезболивающее средство.

На защиту выносятся следующие положения

1. Данные по характеру разделения и удерживания энантиомеров профенов на хиральных неподвижных фазах трех типов: полисахаридной ХНФ, ХНФ с привитым макроциклическим гликопептидным антибиотиком эремомицином и фазе Пиркла.

2. Зависимости удерживания и селективности разделения энантиомеров производных 2-арилпропановых кислот от температуры, значения рН элюента, его ионной силы, а также концентрации органического модификатора в подвижной фазе.

3. Данные термодинамических характеристик адсорбции энантиомеров профенов на полисахаридной хиральной неподвижной фазе СЫга1се1 01-Н и на хиральном адсорбенте с привитым макроциклическим гликопептидным антибиотиком эремомицином 01а8рЬег-СЫга1зе1-Е (ЗАО «БиоХимМак СТ», Москва).

4. Условия выделения индивидуальных энантиомеров одного из представителей класса производных 2-арилпропановой кислоты — ибупрофена в условиях препаративной ВЭЖХ.

ВЫВОДЫ

1. В результате исследования характера удерживания энантиомеров напроксена на полисахаридной ХНФ (СЫга1се1 0.1-Н) и закономерностей хроматографического разделения в . нормально-фазовом режиме хроматографии определены факторы, увеличивающие скорость процесса разделения и не понижающие при этом его селективность.

2. Установлено, что хиральная неподвижная фаза на основе привитого к поверхности силикагеля макроциклического гликопептидного антибиотика эремомицина показывает хорошую разделяющую способность по отношению к энантиомерам профенов, а также, в отличие от полисахаридной ХНФ, проявляет стабильность в водно-органических растворах.

3. Определено влияние температуры, рН элюента и ионного состава подвижной фазы на характеристики удерживания, энантиоселективность и термодинамические величины адсорбции профеновых кислот на сорбенте с привитым антибиотиком эремомиципом. Выявлено, что взаимодействие с хиральным селектором протекает по разному механизму адсорбции в зависимости от типа и пространственной конфигурации (8- или Я-изомер) исследуемых профенов.

4. На основании проведенных исследований предложены условия разделения энантиомеров ибупрофена методом препаративной жидкостной хроматографии. Выделены индивидуальные изомеры ибупрофена; оценены чистота и выход полученных энантиомеров.

1. Rouhi A.M. Chirality at work // Chem. Eng. News. 2003. - Vol. 81. - № 18. -P. 56-61.

2. Federsel H.-J. Facing chirality in the 21st century: approaching the challenges in the pharmaceutical industry // Chirality. 2003. - Vol. 15. - № SI. - P. S128-S142.

3. Lien Ai Nguyen, Hua He, Chuong Pham-Huy. Chiral Drugs. An Overview // International Journal of Biomedical science. 2006. - Vol. 2. - № 2. - P. 85-100.

4. Колтунов К.Ю. Энантиоселективный синтез органических соединений // Учеб.пособие. Новосибирск, 2010.-41 с.

5. Boehme W., Wagner G., Oehme U., Priesnitz U. Spectrophotometric and polarimetric detectors in liquid chromatography for the determination of enantiomer ratios in complex mixtures // Anal. Chem. 1982. - Vol. 54. - № 4. — P.709-711.

6. Purdie N., Swallows K.A. Analytical applications of polarimetry, optical rotatory dispersion, and circular dichroism // Anal. Chem. 1989. - Vol. 61. - № 2. - P. 77A-89A.

7. Francotte E.R. Enantioselective chromatography for the preparation of drug enantiomers // Chirality. 2003.

8. Zhang Y., Wu D.-R., Wang-Iverson D.B., Tymiak A.A. Enantioselective chromatography in drug discovery // Drug Discov. Today. 2005. - Vol. 10. - №8.-P. 571-577.

9. Tae Ho Yoo, In Ho Kim. Chiral separation of ketoprofen racemate by using Chirex 3005 and Kromasil CH1-II chiral column» // Korean J. Chem. Eng. 2004. -Vol.-21.-№2.-P. 521-526.

10. Pirkle W.H. Chromatographic separation of enantiomers on rationally designed chiral stationary phases, chromatography and separation chemistry. — 1986. — Chapter 6.-P. 101-106.

11. Nishi H., Ishii K., Taku K., Shimizu R., Tsumagari N. New chiral derivatization reagent for the resolution of amino acids as diastereomers by TLC and HPLC // Chromatographia. 1989. - Vol. 27. - № 7/8. - P. 301-305.

12. Dobashi Y., Hara S: Direct resolution of enantiomers by liquid chromatography with the novel chiral stationary phase derived from (R,R)-tartramide // Tetrahedron Lett. 1985. - Vol. 26. - P. 4217-4220.

13. Akanya J.N., Hitchen S.M., Taylor D.R. Chemically-bonded chiral column packings for high-performance liquid chromatography // Chromatographia. 1982. -Vol. 16. -№ 1. - P. 224-227.

14. Dappen R., Meyer V.R., Arm H. Chiral covalently bonded stationary phases for the separation of enantiomeric amine derivatives by high-performance liquid chromatography // Journal of Chromatography A. 1984. - Vol. 295. - P. 367376.

15. Lindner W, Hirschbock I, Tartaric acid derivatives as chiral sources for enantioseparation in liquid chromatography // J. Pharm. and Biomed. Anal. 1984. -Vol. 2.-№2.-P. 183-189.

16. Pirkle W.H., Pochapsky T.C. Considerations of chiral recognition relevant to the liquid chromatographic separation of enantiomers // Chem. Rev. 1989. - Vol. 89.-P. 347-362.

17. Zhao C.F., Cann N.M. Molecular dynamic study of chiral recognition for the Whelk-Ol chiral stationary phase // Anal. Chem. 2008. - Vol. 80. - P. 24262438.

18. Pirkle W.H., Welch C.J. Use of simultaneous face to face and face to edge tc-tz interactions to facilitate chiral recognition // Tetrahedron: Assymmetry. 1994. -Vol. 5.-№5.-P. 777-780.

19. Pirkle W.H., Mahler G., Myung Ho Hyun Separation of the enantiomers of 3,5-dinitrophenyl carbamates and 3,5-dinitrophenyl ureas // J. of Liquid Chromatography & Related Technologies. 1986. - Vol. 9. - № 2 & 3. - P. 443453.

20. Myung Ho Hyun, Yoon Jae Cho Chiral separation by HPLC with Pirkle-type chiral stationary phases // Chiral Separations 2004. - Vol. 243. - P. 197-205.

21. Blum A.M., Lynam K.G., Nicolas E.C. Use of a new Pirkle-type chiral stationary phase in analytical and preparative subcritical fluid chromatography of pharmaceutical compounds // Chirality. 1994. — Vol. 6. - P. 302-313.

22. Pirkle W.H., Welch C.J., Lamm B. Design, synthesis and evaluation of an improved enantioselective naproxen selector // J. Org. Chem. 1992. - Vol. 57. — № 14.-P. 3854-3860.

23. Pirkle W.H., Welch C.J. An improved chiral stationary phase for the chromatographic separation of underivatized naproxen enantiomers // J. Liq. Chromatogr.- 1992.-Vol. 15.-P. 1947-1955.

24. Rees D., Skerrett R. Conformational analysis of cellobiose, cellulose and xylan // Carbohydr. Res. 1968. - Vol. 7. - P. 334-348.

25. O'Brien T., Crocker L., Thompson R., Thompson K., Toma P.H., Conlon D.A., Feibush B., Moeder C., Bicker G., Grinberg N. Mechanistic aspects of chiral discrimination on modified cellulose // Anal. Chem. — 1997. Vol. 69. - № 11.— P. 1999-2007.

26. Cabusas M.E.Y. Chiral separations on HPLC derivatized polysaccharide CSPs: temperature, mobile phase and chiral recognition mechanism studies // Diss. . Doctor of philosophy in chemistry. Blacksburg, Virginia, 1998. 144 p.

27. Hesse G., Hagel R. Eine vollständige racemattrennung durch elutions-chromatographie an cellulose-tri-acetat // Chromatographya. 1973. - Vol. 6. — P. 277-280.

28. Okamoto Y., Aburatani R., Hatada K. Chromatographie chiral resolution : XIV. Cellulose tribenzoate derivatives as chiral stationary phases for highperformance liquid chromatography // Journal of Chromatography A 1987. - V. 389.-P. 95-102.

29. Okamoto Y., Aburatani R., Miura S., Hatada K. Chiral stationary phases for HPLC: cellulose tris(3,5-dimethylphenylcarbamate) and tris(3,5-dichlorophenylcarbamate) chemically bonded to silica gel // J. Liq. Chromatogr. — 1987. -№ 10.-P. 1613-1628.

30. Okamoto Y., Kawashima M.5 Hatada K. Useful chiral packing materials for HPLC resolutionof enantiomers: phenylcarbamates of polysaccharides coated on silica gel // J. Am. Chem. Soc. 1984. - Vol. 106: - P. 5357-5359.

31. Küsters E., Kis Z.L. Enantiomeric separation of chiral theophylline derivatives by liquid chromatography on cellulose-based sorbents // Journal of Chromatography A. 1997. - Vol. 760. - № 2. - P. 278-284.'

32. Chankvetadze B., Yashima E., Okamoto Y. Dimethyl-, dichloro- and chloromethylphenylcarbamates of amylose as chiral stationary phases for highperformance liquid chromatography // Journal of Chromatography A. 1995. -Vol. 694, № l.-P. 101-109.

33. Selditz U., Liao Y., Franke J.P., De Zeeuw R. A., Wikstrom H. Direct enantiomeric separation of mianserin and 6-azamianserin derivatives using chiral stationary phases // Journal of Chromatography A. 1998. - Vol. 803. - № 1-2. -P. 169-177.

34. Okamoto Y., Kaida Y. Resolution by high-performance liquid chromatography using polysaccharide carbamates and benzoates as chiral stationary phases // Journal of Chromatography A. 1994. - Vol. 666. - № 1-2. - P. 403^119.

35. Yashima E. Polysaccharide-based chiral stationary phases for highperformance liquid chromatographic enantioseparation // Journal of Chromatography A. 2001. - Vol. 906. - № 1-2. - P. 105-125.

36. Medvedovici A., Sandra P., Toribio L., David F. Chiral packed column subcritical fluid chromatography on polysaccharide and macrocyclic antibiotic chiral stationary phases // Journal of Chromatography A. 1997. - Vol. 785. - P. 159-171.

37. Tang Y. Significance of mobile phase composition in enantio-separation of chiral drugs by HPLC on a cellulose based chiral stationary phase // Chirality. -1996.-Vol. 8.-P. 136-142.

38. Gyoung Won Kang, Joung Но Ко, Won Jo Cheong. Thermodynamic study of enantioseparation of arylpropionic acids with a chiralcel OJ-H stationary phase // Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies. 2005. - Vol. 28. -№4.-P. 513-526.

39. Okamoto Y, Yashima E. Polysaccharide derivatives for chromatographic separation of enantiomers // Angew. Chem, Int. Ed. Engl. 1998. - Vol. 37. - P. 1020-1043.

40. Yashima E, Fukaya H, Okamoto Y. (3,5-Dimethylphenyl)carbamates of cellulose and amylose regioselectively bonded to silica gel as chiral stationary phases for high-performance liquid chromatography // J. Chromatogr, A. 1994. -Vol. 677.-P. 11-19.

41. Franco P, Senso A, Oliveros L, Minguillo'n C. Covalently bonded polysaccharide derivatives as chiral stationary phases in high-performance liquid chromatography // J. Chromatogr, A. 2001. - Vol. 906. - P. 155-170.

42. Francotte E. Enantioselective chromatography. An essential and versatile tool for the analytical and preparative separation of enantiomers // Chimia. 1997. -Vol. 51.-P. 717-725.

43. Абелян B.A. Циклодекстрины: получение и применение. Ереван: Изд. Дом «Ван-Арьян», 2001. - 519 с.

44. Armstrong D.W., Stalcup A.M., Hilton M.L., Duncan J.D., Faulkner J.R., Chang S.C. Derivatized cyclodextrins for normal-phase liquid chromatographic separation of enantiomers // Anal. Chem. 1990. - Vol. 62. - № 15. - P. 16101615.

45. Berthod A., Armstrong D.W., Li W. Multiple enantioselective retention mechanisms on derivatized cyclodextrin gas chromatographic chiral stationary phases // Anal. Chem. 1992. - Vol. 64. - P. 873-879.

46. Armstrong D.W., Chen S., Chang C., Chang S. A new approach for the direct resolution of racemic beta adrenergic blocking agents by HPLC // J. Liq. Chromatogr. 1992. - Vol. 15. - № 3. - P. 545-556.

47. Armstrong D.W., Tang Y., Chen S., Zhou Y., Bagwell C., Chen J-R. Macrocyclic antibiotics as a new class of chiral selectors for liquid chromatography // Anal. Chem. 1994. - Vol. 66. - № 9: - P. 1473-1484.

48. Xiao T.L., Zhang B., Lee J.T., Hui F., Armstrong D.W. Reversal of enantiomeric elution order on macrocyclic glycopeptide chiral stationary phase // J. Liq. Chromatogr. Relat. Technol. 2001. - Vol. 24. -№ 17. - P. 2673-2684.

49. Berthod A., He B.L., Beesley T.E. Temperature and enantioseparation by macrocyclic glycopeptide chiral stationary phases // J. Chromatogr. A. 2004. -Vol. 1060.-P. 205-214.

50. Berthod A., Liu Y., Bagwill C., Armstrong D.W. Facile liquid chromatographic enantioresolution of native amino acids and peptides using a teicoplanin chiral stationary phase // J. Chromatogr. A. 1996. - Vol. 731. - P. 123-137.

51. Berthod A., Chen X., Kullman J.P., Armstrong D.W., Gasparrini F., D'Acquarica I., Carotti A. Role of the carbohydrate moieties in chiral recognition on teicoplanin-based LC stationary phase // Anal. Chem. 2000. - Vol. 72. - P. 1767-1780.

52. Wolf C., Pirkle W.H. Synthesis and evaluation of a copolymeric chiral stationary phase // J. Chromatogr: A. 1998. - Vol. 799. - P. 177-184.

53. D'Orazio G., Aturki Z., Cristalli M., Quaglia M.G., Fanali S. Use of vancomycin chiral stationary phase for the enantiomeric resolution of basic and acidic compounds by nano-liquid chromatography // J. Chromatogr. A. 2005. — Vol. 1081.-№ 1.-P. 105-113.

54. Кузнецов M.A., Нестеренко П.Н., Васияров* Г.Г., Староверов С.М. Высокоэффективная жидкостная хроматография энантиомеров ос-аминокислот на силикагеле с иммобилизованным эремомицином // Журн. анал. хим. 2008. - Т. 63. - № 1. С. 64-72.

55. Thompson R.A., Ge Z., Grinberg N., Ellison D., Tway P. Mechanistic aspects of the stereospecific interaction for aminoindanol with a crown ether column II Anal. Chem. 1995. - Vol. 67. -№ 9. - P. 1580-1587.

56. Steffeck R.J., Zelechonok Y., Gahm K.H. Enantioselective separation of racemic secondary amines" on a chiral crown ether-base liquid chromatography stationary phase // J. Chromatogr. A. 2002. - Vol. 947. - P. 301-305.

57. Dotsevi G., Sogah Y., Cram D.J. Chromatographic optical resolution through chiral complexation of amino ester salts by a host covalently bound to silica gel // J. Am. Chem. Soc. 1975. - Vol. 97. - № 5. - P. 1259-1261.

58. Shinbo T., Yamaguchi T., Nishimura K., Sugiura M. Chromatographic separation of racemic amino acids by use of chiral crown ether-coated reversed-phase packings // J. Chromatogr.A. 1987. - Vol. 405. - P. 145-153.

59. Davankov V.A., Semechkin A.V. Ligand-exchange chromatography // J. Chromatogr. 1977. - Vol. 141. - № 3. - P. 313-353.

60. Davankov V.A., Rogozhin S.V., Semechkin A.V. Ligand-exchange chromatography of racemates: resolution of a-amino acids // J. of Chromatography A. 1974. - Vol. 91. - P. 493^196.

61. Rogozhin S.V., Davankov V.A. Ligand chromatography on asymmetric complex-forming sorbents as a new method for resolution of racemates // J. Chem. Soc. D.-1971.-Vol. 10.-P. 490a.

62. Gubitz G., Jellenz W., Santi W. Separation of the optical isomers of amino acids by ligand-exchange chromatography using chemically bonded chiral phases // J. Chromatogr. 1981. - Vol. 203. - P. 377-384.

63. Feibush B., Cohen M.J., Karger B.L. The role of bonded phase composition on the ligand- exchange chromatography of dansyl-D,L-amino acids // J. Chromatogr.- 1983.-Vol. 282.-P. 3-26.

64. Gelber L.R., Karger B.L., Neumeyer J.L., Feibush B. Ligand exchange chromatography of amino alcohols. Use of Schiff bases in enantiomer resolution // J. Am. Chem. Soc. 1984. - Vol. 106. - P. 7729-7734.

65. Davankov V.A. Enantioselective ligand exchange in modem; separation techniques // J; of Chromatography A. 2003. - Vol: 1000: -№1-2. -P: 891-915.

66. Stewart K.K., Doherty R.F. Resolution of DL-tryptophan by affinity chromatography on bovine-serum albumin-agarose columns // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1973.- Vol. 70.-№10.- P. 2850-2852.

67. Miwa T., Ichikawa M., Tsuno M., Iiattori T., Mivakawa T., Kayano M., Miyake Y. Direct liquid chromatographic resolution of racemic compounds: use of ovomucoid as a column ligand // Chem. Pharm. Bull. — 1987. Vol. 35. — P. 682686.

68. De Lorenzi E., Fell A.E., Holmes A.L., Caccialanza G., Massolini G;, Gandini C., Kitsos M., Ponci C. Enantiomeric LC separation of calcium antagonists on protein-based chiral stationary phases // Chirality. 1993. — Vol: 5. - № 8. - P. 622-626.

69. Miwa T., Miyakawa T., Miyake Y. Characteristics of an avidin-conjugated column in direct liquid chromatographic resolution of racemic compounds // J. Chromatogr.A. 1988. - Vol. 457. - P. 227-233.

70. Pirkle W., Welch C. An investigation into the role of solvation-in a well characterized chiral recognition system // J. Liq. Chromatogr & Related Tech. — 1991.-Vol. 14. -№ 11.-P. 2027-2042.

71. Zief M., Crane L.J., Horvath J. Selection of the mobile phase for enantiomeric resolution via chiral stationary phase columns // J. Liq. Chromatogr. & Related Technologies. 1984. - Vol. 7. - № 4. - P. 709-730.

72. Okamoto Y., Aburatani R., Kaida Y., Hatada K. Direct optical resolution of carboxylic acids by chiral HPLC on cellulose and amylose tris(3,5-dimethylphenylcarbamate)s // Chem. Lett. 1988. - P. 1125-1128.

73. Koller H., Rimbock K.-H., Mannschreck A. High-pressure liquid chromatography on triacetylcellulose: characterization of a sorbent for the separation of enantiomers // J. Chromatogr.A. 1983. - Vol. 282. - P. 89-94.

74. Садек П. Растворители для ВЭЖХ. M.: Бином, 2006. - 704 с.

75. Horvâth С., Melander W., Molnar I. Liquid chromatography of ionogenic substances with nonpolar stationary phases // Anal. Chem. 1977. - Vol. 49. — № l.-P. 142-153.

76. Loeser E., Drumm P. Investigation of anion retention and cation exclusion effects for several CI 8 stationary phases // Anal. Chem. 2007. - Vol. 79. - P. 5382-5391.

77. Gritti F., Guiochon G. Effect of the ionic strength of salts on retention and overloading behavior of ionizable compounds in reversed-phase liquid chromatography. II. Symmetry-C18 // Journal of Chromatography A. 2004. -Vol. 1033.-P. 57-69.

78. Энгельгардт X. Жидкостная хроматография при высоких давлениях. -М.: Изд. «Мир», 1980. 245 с.

79. Gritti F., Guiochon G. Critical contribution of nonlinear chromatography to the understanding of retention mechanism in reversed-phase liquid chromatography // J. Chromatogr. A. 2005. - Vol. 1099. -№ 1-2. - P. 1-42.

80. Neue U.D., Wheat Т.Е., Mazzeo J.R., Mazza C.B., Cavanaugh J.Y., Xia F., Diehl D.M. Differences in preparative loadability between the charged and uncharged forms of ionizable compounds // J. Chromatogr. A. 2004. - Vol. 1030. -№ 1-2.-P. 123-134.

81. Stâhlberg J. Retention models for ions in chromatography // J. Chromatogr. A.-1999.-Vol. 855.-№ l.-P. 3-55.

82. Ilisz I., Berkecz R., Péter A.A. HPLC separation of amino acid enantiomers and small peptides on macrocyclic antibiotic-based chiral stationary phases: a review//J. Sep. Sci. 2006. - Vol. 29. -№ 10.-P. 1305-1321.

83. Аснин JI. Д., Решетова Е.Н. Хроматографическое поведение и термодинамика адсорбции энантиомеров профенов на силикагеле с привитым антибиотиком эремомицином // Журн. физ. химии. — 2009. — Т. 83. -№. 4.-С. 643-648.

84. Maier N.M., Nicoletti L., Lâmmerhofer M., Lindner W. Enantioselective anion exchangers based on cinchona alkaloid derived carbamates: Influence of Cg/Cç stereochemistry on chiral recognition // Chirality. 1999. - Vol. 11. — № 7. -P. 522-528.

85. Roses M., Canals I., Allemann H., Siigur K., Bosch E. Retention of ionizable compounds on HPLC. 2. Effect of pH, ionic strength, and mobile phase composition on the retention of weak acids. // Anal. Chem. 1996. — Vol. 68. — P. 4094-4100.

86. Hancock W.S., Knighton D.R., Napier J.R., Harding D.R.K., Venable R. Determination of thermodynamic parameters for the interaction of a lipid-binding peptide and insulin with a reversed-phase column // J. Chromatogr. 1986. - Vol. 367-P. 1-8.

87. Melander W., Campbell D.E., Horvath C. Enthalpy-Entropy Compensation in Reversed-Phase Chromatography // J. Chromatogr. 1978. - Vol. 158 - P. 215225.

88. Cole and L.A., Dorsey J.G. Temperature dependence of retention in reversed phase liquid chromatography. 1. Stationary phase considerations // Anal. Chem. — 1992. Vol. 64. - P. 1317-1323.

89. Cabrera K., Lubda D. Influence of temperature on chiral high-performance liquid chromatographic separations of oxazepam and Prominal on chemically bonded (3-cyclodextrin as stationary phase // J. Chromatogr. A. — 1994. Vol. 666. -№ 1-2.-P. 433^438.

90. Krug R.R., Hunter W.G., Grieger R.A. Enthalpy-Entropy compensation. 1. Some Fundamental statistical problems associated with the analysis of van't Hoffand Arrhenius data // The Journal of Physical Chemistry. — 1976. — Vol. 80. № 21 - P. 2335-2341.

91. Trotta F., Cravotto G., Rossignoli S. Asymmetric synthesis in the presence of cyclodextrins // J. of Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry. 2002. -Vol. 44. - P. 293-296.

92. Pham X.-H., Kim J.-M., Chang S.-M., Kim I.-H. Kim W.-S. Enantioseparation of D/L-mandelic acid with L-phenylalanine in diastereomeric crystallization // J. of Molecular Catalysis B: Enzymatic. 2009. - Vol. 60. - № 12. - P. 87-92.

93. Andersson S., Allenmark S.G. Preparative chiral chromatographic resolution of enantiomers in drug discovery // J. Biochem. Biophys. Methods. 2002. - Vol. 54.-P. 11-23.

94. Miyazawa T. Enzymatic resolution of amino acids via ester hydrolysis // Amino Acids.- 1999.-Vol. 16.-P. 191-213.

95. Maier N.M., Franco P., Lindner W. Separation of enantiomers: needs, challenges, perspectives // Journal of Chromatography A. 2001. - Vol. 906. - № 1-2.-P. 3-33.

96. Francotte E.R. Enantioselective chromatography as a powerful alternative for the preparation of drug enantiomers. // J. Chromatogr. A. 2001. - Vol. 906. - P. 379-397.

97. Sajonz P., Natishan T.K., Antia F.D., Frenette R. Optimization of the preparative separation of a chiral pharmaceutical intermediate by high performanceliquid chromatography // Journal of Chromatography A. 2005. - Vol. 1089. - P. 135-141.

98. Cox G.B. Packing materials for enantioselective preparative, chromatography // Analusis Mag. 1998. - Vol. 26. - № 7. - P. M70-M76.

99. Miyabe K., Suzuki M. Estimation of Adsorption Parameters of a Binary-System by Applying the Lewis Rule // J. Chem. Eng. Jpn. 1994. - Vol. 27. - № 2.-P. 257-259.

100. Miller L., Bergeron R. Analytical and preparative resolution of enantiomers of verapamil and norverapamil using a cellulose-based chiral stationary phase in the reversed-phas // J. Chromatogr. 1993. - Vol. 648. - № 2. - P. 381-388.

101. Miller L., Weyker C. Analytical and preparative resolution of enantiomers of prostaglandin precursors and prostaglandins by liquid chromatography on derivatized cellulose chiral stationary phases // J. Chromatogr. 1990. - Vol. 511. -P. 97-107.

102. Brocks D.R., Pasutto F.M., Jamali F. Analytical and semi-preparative highperformance liquid chromatographic separation and assay of hydroxychloroquine enantiomers // J. Chromatogr. 1992. - Vol. 581. - № 1. - P. 83-92.

103. Jabobson S.C., Felinger A., Guiochon G. Optimizing the sample size and the retention parameters to achieve maximum production rates for enantiomers in chiral chromatography // Biotechnol. and Bioeng. 1992. - Vol. 40. - P. 12101217.

104. Schramm H., Kniep H., Seidel-Morgenstern A. Optimization of Solvent Gradients for Chromatographic Separations // Chem. Eng. Technol. 2001. Vol. 24.-№2.-P. 133-138.

105. Heuer C., Hugo P., Mann G., Seidel-Morgenstem A. Scale up in preparative chromatography // J. Chromatogr. A. 1996. - Vol. 752. - P. 19-29.

106. Boysen H., Wozny G., Laiblin T., Arlt W. CDF simulation of preparative chromatography columns considering adsorption isotherms. // Chem. Ing. Tech. — 2002. Vol. 74. - P. 294-298.

107. Juza M, Mazzotti M, Morbidelli M. Simulated moving-bed chromatography and its application to chirotechnology // Trends Biotechnol. 2000. — Vol. 18. - P. 108-118.

108. Charton F., Bailly M., Guiochon G. Recycling in preparative liquid chromatography // J. Chromatogr. A. 1994. - Vol. 687. - P. 13-31.

109. Jamali F., Mehvar R., Pasutto F.M. Stereospecific aspects of drug action and disposition: therapeutic pitfalls // J. Pharm. Sci. 1989. - Vol. 78. - № 9. - P. 695-715.

110. Mullangi R., Yao M., Srinivas N.R. Resolution of enantiomers of ketoprofen by HPLC: a review // Biomed. Chromatogr. 2003. - Vol. 17. - № 7. - P. 423434.

111. Todd P.A., Clissold S.P. Naproxen: a reappraisal of its pharmacology, and therapeutic use in rheumatic diseases and pain states // Drugs. 1990. - Vol. 40. — P. 91-137.

112. Janssen A., Schiffmann S., Birod K., Maier T.J., Wobst I., Geisslinger G., Grosch S. p53 is important for the anti-proliferative effect of ibuprofen in colon carcinoma cells // Biochem. Biophys. Research Commun. 2008. - Vol. 365. - № 4.-P. 698-703.

113. Wechter W.J., Leipold D.D., Quiggle D.D., McCracken J.D., Murray J.E.D., Loughman B.E. R-Flurbiprofen, a chemopreventive and teatment of cancer // Inflammopharmacology. 2000. - Vol. 8. - P. 189-206.

114. Overbeke A.V., Baeyens W., Dewaele C. Comparative study on the enantiomeric separation of several non-steroidal anti-inflammatory drugs on two cellulose-based chiral stationary phases // J. Chromatogr. 1995. - Vol. 18. - № 12.-P. 2427-2443.

115. Yagi M., Shibukawa A., Nakagawa T. Direct injection analysis of ketoprofen enantiomers in plasma using column-switching high-performance liquid chromatography system // Chem. Pharm. Bull. 1990. - Vol. 38. - № 9. - P. 2513-2517. '

116. Crowther J.B., Covey T.R., Dewey F.Q. Henion J.D: Liquid chromatographic/mass spectrometric determination of optically active drugs // Anal. Chem. 1984. - Vol. 56. - P. 2921-2926.

117. Nicoll-Griffith D;A. Stereoelectronic model to explain the resolution of enantiomeric ibuprofen amides on the pirklc chiral stationary phase.// J. Chromatogr. 1987. - Vok 402. - P: 179-187:

118. Pirkle W.H., McCune J.B. Improved chiral stationary phase for the separation of the enantiomers of chiral; acids as their anilide derivatives // J. Chromatogr. -1989: — Vol. 471. — P. 271—281.

119. Nicoll-Griffith D. A., Ihaba T., Tang B.K., Kalow W. Method to determine the enantiomers of ibuprofen from* human urine by high-performance: , liquid chromatography // J. Chromatogr. 19881- Vol. 428. - № l.-P. 103-112.

120. Kakodkar S.V., Zief M. Resolution of derivatized acids and amines on JTB-X: a new urea bonded chiral stationary phase // Chirality. 1990. - Vol; 2. - № 2. -P. 124-127.

121. Yang M.H*;, Lin J.-Y. N-Ai'ylcarbamoyl derivatives of amino acids as chiral stationary phases for optical resolution by high-performance liquid chromatography // J. Chromatogr. 1993. - Vol. 631. - № 1-2. - P: 165-171.

122. Hyun M.H., Cho S.M., Ryoo J.-J., Kim M.S. A mechanistic: evaluation for the resolution of enantiomers of a-arylpropionic acid derivatives on tc-basic chiral stationary phases // J. Liq. Chromatogr. 1994. - Vol. 17. - № 2. - P. 317-328.

123. Ahn H.-Y., Shiu G.K., Trafton W.F., Doyle T.D. Resolution of the enantiomers of ibuprofen: comparison study of diastereomeric method and chiral stationary phase method // J. Chromatogr.B. 1994. - Vol. 653. - P. 163-169.

124. Wainer I.W., Alembik M.C. Resolution of enantiomeric amides on a cellulose-based chiral stationary phase: steric and electronic effects // J. Chromatogr.A. 1986. - Vol. 358. - P. 85-93.

125. Berthod A., Jin H.L., Beesley T.E., Duncan J.D., Armstrong D.W. Cyclodextrin chiral stationary phases for liquid chromatographic separations of drug stereoisomers // J. Pharm.& Biomed. Anal. 1990. - Vol. 8. - № 2. - P. 123130.

126. Armstrong D.W., Ward T.J., Armstrong R.D., Beesley T.E. Separation of drug stereoisomers by the formation of B-cyclodextrin inclusion complexes // Science. 1986. - Vol. 232. - P. 1132-1135.

127. Francotte E.R., Richert P. Applications of simulated moving-bed chromatography to the separation of the enantiomers of chiral drugs // J. Chromatogr. A. 1997. - Vol. 769. - P. 101-107.

128. Welch C.J. Semipreparative separation of enantiomers using the Whelk-Ol chiral stationary phase: naproxen & abscisic acid as case studies // Chemistry in New Zealand. 1993. - Vol. 57. - P. 9.

129. Peper S., Lubbert M., Johannsen M., Brunner G. Separation of ibuprofen enantiomers by supercritical fluid simulated moving bed chromatography // Sep. Sci. Technology. 2002. - Vol. 37. - № 11. - P. 2545-2566.

130. Won J.H., Cho Y.S., Kim Y.D., Ahn D.J. Enantio-separation of R, S-ibuprofen using Simulated Moving Bed (SMB) chromatography // Hwahak Konghak.- 2001. -Vol. 39.-№ 6.-P. 685-691.

131. Аснин Л.Д. в кн.: Хроматография на благо России. - М.: Граница, 2007. -С. 34-42.

132. Peper S., Johannsen М., Brunner G. Preparative chromatography with supercritical fluids. Comparison of simulated moving bed and batch processes // J. Chromatogr. A. 2007. - Vol. 1176. - № 1-2. - P. 246-253.

133. Ribeiro A.E., Gra?a N.S., Pais L.S., Rodrigues A.E. Preparative separation of ketoprofen enantiomers: choice of mobile phase composition and measurement of competitive adsorption isotherms // Sep. Purif: Technol. — 2008. Vol. 61. - P. 375-383.

134. Аснин Л.Д. Микропрепаративное хроматографическое разделениеiэнантиомеров напроксена // Хим.-фарм. журн. 2008. - Т. 42. - № 7. - Р. 5456.

135. Gyllenhaal О., Stefansson М. Reversal of elution order for profen acid enantiomers in normal phase LC on Chiralpak AD // J. Pharm. Biomed. Anal. -2008. Vol. 46. - № 5. - P. 860-863.

136. Charton F., Jacobson S.C., Guiochon G. Modeling of the adsorption behavior and the chromatographic band profiles of enantiomers. behavior of methyl mandelate on immobilized cellulose // J. Chromatogr. 1993. - Vol. 630. — P. 21— 35.

137. Zhou D., Kaczmarski K., Cavazzini A., Liu X., Guiochon G. Modeling of the separation of two enantiomers using a microbore column // J. Chromatogr. A. — 2003.-Vol. 1020.-№2.-P. 199-217.

138. Александров B.B. Кислотность неводных растворов. Харьков: Высш. школа, 1981. - 152 с.

139. Canals I., Oumada F.Z., Rosés М., Bosch Е. Retention of ionizable compounds on HPLC. 6. pH measurements with the glass electrode in methanol-water mixtures // J. Chromatogr. A. 2001. - Vol. 911. - № 2. - P. 191-202.

140. Gritti F., Kazakevich Y., Guiochon G. Measurement of hold-up volumes in reverse-phase liquid chromatography. Definition and comparison between static and dynamic methods // J. Chromatogr. A. 2007. - Vol. 1161. - P. 157-169.

141. Okamoto Y., Kawashima M., Aburatani K., Hatada K., Nishiyama T., Masuda M. Optical resolution of p-blockers by HPLC on cellulose triphenylcarbamate derivatives // Chem. Lett. 1986. - P. 1237-1240.

142. Ràfols C., Rosés M., Bosch E. Dissociation constants of several non-steroidal anti-inflammatory drugs in isopropyl alcohol/water mixtures // Anal. Chim. Acta. -1997. Vol. 350. - P. 249-255.

143. Prokhorova A.F., Shapovalova E.N., Shpak A.V., Staroverov S.M., Shpigun O.A. Enantiorecognition of profens by capillar}' electrophoresis using a novel chiral selector eremomycin // J. Chromatogr. A. 2009. - Vol. 1216. - P. 36743677.

144. Vailaya A., Horvath C. Exothermodynamic Relationships in Liquid Chromatography // J. Phys. Chem. B. 1998. - Vol. 102. - P. 701-718.

145. Welch CJ. Evolution of chiral stationary phase design in the Pirkle laboratories // J. Chromatogr. A. 1994. - Vol. 666. - № 1-2. - P. 3-26.

146. Arnell R., Forssén P., Fornstedt T. Tuneable Peak Deformations in Chiral Liquid Chromatography // Anal. Chem. 2007. - Vol. 79. - № 15. - P. 58385847.

147. Golshan-Shirazi S., Guiochon G. Theoretical study of system peaks and elution profiles of high concentration bands of binary mixtures eluted by a binary eluent containing a strongly retained additive // Anal. Chem. 1989. - Vol. 61. -№21.-P. 2373-2380.