Физико-химическое исследование взаимодействия ионов меди(II) с некоторыми β-лактамными антибиотиками

Лапшин, Сергей Владимирович

Физико-химическое исследование взаимодействия ионов меди(II) с некоторыми β-лактамными антибиотиками тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.04 ВАК РФ

Лапшин, Сергей Владимирович АВТОР

кандидата химических наук УЧЕНАЯ СТЕПЕНЬ

Тверь МЕСТО ЗАЩИТЫ

2009 ГОД ЗАЩИТЫ

02.00.04 КОД ВАК РФ

Диссертация по химии на тему «Физико-химическое исследование взаимодействия ионов меди(II) с некоторыми β-лактамными антибиотиками»

Автореферат диссертации на тему "Физико-химическое исследование взаимодействия ионов меди(II) с некоторыми β-лактамными антибиотиками"

На правах рукописи

Лапшин Сергей Владимирович

Физико-химическое исследование взаимодействия ионов меди(П) с некоторыми р-лактамными антибиотиками

Специальность 02.00.04 - Физическая химия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

ТВЕРЬ 2009

1 4ЯНВЧП1П

003489929

Работа выполнена на кафедре неорганической и аналитической химии Тверского государственного университета

Научный руководитель кандидат технических наук, доцент

Алексеев Владимир Георгиевич

Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор

Смоляков Владимир Михайлович,

кандидат химических наук, доцент Добрынина Наталья Александровна

Ведущая организация Ивановский государственный университет

Защита состоится «24» декабря 2009 г. в 15 час. 30 мин. на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 212.263.02 при ГОУ ВПО «Тверской государственный университет»: 170002, г. Тверь, Садовый пер., 35, ауд. 226

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУ ВПО «Тверской государственный университет» по адресу: 170000, Тверь, ул. Володарского, 44 А.

С авторефератом диссертации можно ознакомиться на сайте ТвГУ http://university.tversu.ru/aspirants/abstracts.

Автореферат разослан « »_2009 г.

Ученый секретарь совета

по защите докторских и кандидатских

диссертаций Д 212.263.02,

кандидат химических наук, доцент

Общая характеристика работы

Актуальность темы

Постоянно возрастающее число применяемых в медицине антибиотиков делает актуальным изучение их взаимодействия с катионами металлов, прежде всего входящих в состав химических веществ живых организмов. Анализ научной литературы показывает, что антибиотики могут образовывать с катионами металлов комплексные соединения, в результате чего изменяются химические свойства антибиотиков и их биологическая активность. Наиболее применимыми являются Р-лактамные антибиотики. По своему строению они подразделяются на две группы: антибиотики группы пенициллина и антибиотики группы цефалоспорина. К первой относятся ампициллин, амоксициллин, карбенициллин, бензилпенициллин, оксацил-лин и др. Ко второй - цефазолин, цефотаксим, цефтриаксон и др. Одним их наиболее интересных комплексообразователей являются ионы меди(Н). Медь содержится в многих живых организмах (в том числе и человека), где играет важную роль в метаболизме.

Вместе с тем комплексообразование переходных металлов с антибиотиками изучено недостаточно. В литературе имеются данные о составе, строении и устойчивости их комплексов, но они не полны и зачастую противоречивы. Данные по комплексообразованию ионов меди(П) с некоторыми антибиотиками полностью отсутствуют.

Непрерывное увеличение числа антибиотиков, рост фальсифицированной продукции на рынке делает также актуальным создание методик количественного и качественного анализа лекарственных препаратов, основанных на знаниях их взаимодействия с различными катионами переходных металлов, в частности с катионами меди(П).

Целями данной работы являются:

1) Исследование комплексообразования ионов меди(П) с пенициллинами и цефалоспоринами.

2) Исследование влияния комплексообразования ионов меди(П) с пенициллинами и цефалоспоринами на гидролиз антибиотиков.

3) Разработка новых методик определения антибиотиков в различных лекарственных формах с использованием солей меди(П).

Задачи работы:

1) Изучение комплексообразования меди(П) с (З-лактамными антибиотиками потенциометрическим методом;

2) Изучение комплексообразования меди(П) с Р-лактамными антибиотиками спектрофотометрическим методом;

3) Поляриметрическое исследование кинетики гидролиза пенициллинов и цефалоспоринов в присутствии ионов меди(И) при различных условиях (рН, ионная сила раствора).

4) Разработка методик качественного и количественного определения антибиотиков с использованием результатов исследования их взаимодействия с ионами меди(П).

Методы исследований:

Комплексообразование в растворах антибиотиках исследованы методами потенциометрического титрования и спектрофотомерии в видимой области. Расчет констант равновесий выполнен в специализированной программе New DALSFEK (КСМ Soft, 200 г.). Исследование кинетики гидролиза (З-лактамных антибиотиков проведено поляриметрическим методом.

Научная новизна работы

Исследовано комплексообразование меди(П) с анионами типичных пенициллинов и цефалоспоринов, определены константы образования и спектральные характеристики комплексов.

Впервые исследована кинетика гидролиза пенициллинов в присутствии ионов меди(П) при различных значениях рН и ионной силы раствора.

Показано, что каталитическое действие ионов меди(П) обусловлено образованием комплекса с антибиотиком и последующим изменением его структуры.

Сделаны выводы о влиянии структуры антибиотика на устойчивость образующихся с медью(П) комплексов и кинетику их гидролиза.

Практическая ценность работы

Полученные величины констант устойчивости комплексов меди(И) с Р-лактамными антибиотиками позволяют сделать вывод, что эти соединения могут быть с успехом использованы для создания новых лекарственных препаратов. Больше всего это касается антибиотиков, имеющих аминогруппу, константы устойчивости комплексов меди(П) с которыми особенно высоки.

Результаты изучения кинетики гидролиза могут быть использованы в учебном процессе на кафедрах неорганической и аналитической и физической химии ТвГУ.

Разработанные методики определения антибиотиков могут быть использованы на фармацевтических предприятиях, а также учреждениями, которые контролируют качество выпускаемых в продажу лекарственных средств.

Личный вклад автора

Автором работы самостоятельно были проведены все эксперименты, а также обработка и анализ результатов исследования.

Апробация работы

Материалы диссертации были представлены на 14 конференциях: на V Всероссийской конференции «Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии», Саратов, 2005 г.; на ХП Региональных Кар-гинских чтений, Тверь, 2005 г.; на Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов-2005», Москва, 2005г.; на XIII Региональных Каргинских чтений, Тверь, 2006 г.; на Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов-2006», Москва, 2006г.; на XVI Российской молодежной научной конференции «Проблемы теоретической и экспериментальной химии», Екатеринбург, 2006г.; на XIV Региональных Каргинских чтений, Тверь, 2007г.; на Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «JIomohocod-2007», Москва, 2007г.; на X international conference on the problems of salvation and complex formation in solutions. Suzdal, 2007.; на VIII Всероссийской научно-практической конференции студентов и аспирантов «Химия и химическая технология в XXI веке», Томск, 2007г.; на XV Региональных Каргинских чтений, Тверь, 2008г.; на конференции «Наукоемкие химические технологии - 2008», Волгоград, 2008г.; на XVIII Российской молодежной научной конференции «Проблемы теоретической и экспериментальной химии», Екатеринбург, 2008г.; на IX Всероссийской научно-практической конференции студентов и аспирантов «Химия и химическая технология в XXI веке», Томск, 2008г.

Реализация результатов

Научные результаты диссертации использованы в учебном процессе при выполнении студентами химического факультета ТвГУ курсовых и выпускных работ, а также при выполнении проекта 2.1.1/6867 «Синтез и свойства новых наноструктурированных гидрогелей медицинского назначения на основе супрамолекулярных металлокомплексов» в рамках АВЦП «Развитие научного потенциала высшей школы (2009-2010 годы)».

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 6 статей (в том числе 2 статьи в журналах рекомендованных ВАК), 14 тезисов докладов.

Структура и объем работы

Диссертация представлена на 130, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, обсуждения результатов, выводов и списка литературы, состоящего из 87 библиографических ссылок. Работа содержит 42 рисунка, 11 таблиц.

Основное содержание работы

Во «Введении» обоснована актуальность темы диссертации, сформулированы основные цели и задачи диссертационного исследования, положения, выносимые автором на защиту.

В главе «Литературный обзор», приведен обзор научного материала по вопросам структуры, химических свойств, биологической активности_________

и применения пешшиллиновых и цефалоспориновых антибиотиков, химических свойствах меди и ее биологической роли, роли ионов меди(П) в сольволизе пенициллинов и цефалоспоринов, а также о методах анализа р-лактамных антибиотиках в различных лекарственных препаратах.

В главе «Экспериментальная часть» представлены результат исследования комплексообразования ионов меди(П) с наиболее распространенными антибиотиками; рассмотрено влияние кислотности среды и ионной силы раствора на кинетику гидролиза антибиотиков в присутствии ионов меди(П).

Исследование комплексообразования было проведено для шести широко используемых в России антибиотиков: четырех пенициллинов и двух цефалоспоринов.

Для проведения экспериментов использовали тригидрат ампициллина НАтр-ЗНчО, натриевую соль карбенициллина Ка2СагЬ («Ферейн», Россия), тригидрат амоксициллина НАхп-ЗН20, моногидрат цефалексина НСрх-Н20 («НешоГапп», Югославия), натриевую соль бензилпенициллина №Вгр («Биохимик», Саранск Россия), натриевую соль цефазолина («Биосинтез», Пенза Россия).

Структурная формула пеницилли- Структурная формула цефалоспори-

но

нов

Таблица 1. Название и строение пенициллинов

Название

Строение радикала

Бензилпенициллин (Вгр)

Карбенициллин (Carb) си- С(0)0Н

Ампициллин (Amp) СИ- ын2

Амоксициллин (Атх) Уиг NH2

Таблица 2. Название и строение цефалоспоринов

Название Ri R->

Цефазолин 1 -CH2- n-n

(Czl)

Цефалексин /"Л -сн3

(Срх) (/ ч)-сн - \=/ L,

Исследование комплексообразования ионов меди(И) с антибиотиками было проведено рН- метрическим методом.

Во всех случаях соотношение Cu(II) : L в титруемых растворах составляло 1:5, что позволяло учесть возможность образования полили-гандных комплексов.

Кривые титрования растворов, содержащих H2Amp+ (1) и Н2Атр+ + Си2+ (2), представлены на рис. 1. В области рН > 4, что соответствует добавлению 1 эквивалента NaOH и появлению в растворе анионов Amp", отмечается существенное расхождение кривых. При этом визуально наблюдается изменение окраски титруемого раствора от бледно-голубой до сине-фиолетовой. Все это свидетельствует об образовании комплексных соединений. То же самое наблюдалось и при титровании растворов амоксицил-лина и цефалексина в присутствии ионов меди(И). Таким образом, рН-метрический эксперимент показывает, что ионы Си2+ связывают в комплекс только анионы L" и не взаимодействуют с протонированными формами H2L+ и HL\

Рис. 1. Кривые рН-метрического Рис. 2. Кривые рН-метрического тит-

титрования. 1 - НзАтр*; 2 - рования. 1 - Н2Атх±; 2 - ГЬАтх* +

Н2Атр± + Си2+ раствором ИаОН Си2+ раствором ЫаОН 0.0477 М 0.0477 М

Рис. 3. Кривые рН-метрического Рис. 4. Кривые рН-метрического титрования. 1 - Н2Срх±; 2 - Н2Срх± + титрования. 1 - Иа2СагЬ; 2 - Ыа2СагЬ Си2+ раствором ИаОН 0.0477 М + Си2+ раствором Ш03 0.05 М

Систему Си(П) - СагЬ2" не титровали раствором №ОН, т.к. в щелочной среде карбенициллин выпадает в осадок.

рН

Рис. 5. Кривые рН-метрического титрования. 1 - NaBzp; 2 - NaBzp + Cu2+ раствором NaOH 0.0477 М

Рис. 6. Кривые рН-метрического титрования. 1 - NaBzp; 2 - NaBzp + Cu2+ раствором HN03 0.05 М

2 V(NaOH). ил

V (HNOj), un

Рис. 7. Кривые рН-метрического тит- Рис. 8. Кривые рН-метрического рования. 1 - NaCzl; 2 - NaCzl + Cu2+ титрования. 1 - NaCzl; 2 - NaCzl + раствором HN03 0.05 M Cu2+ раствором NaOH 0.0477 M

Во всех случаях присутствие в растворе ионов Си2+ вызывает небольшое смещение кривой титрования в кислую область, что подтверждает образование металлокомплексов. В кислой среде наблюдается схождение кривых чистого антибиотика и антибиотика в присутствии ионов меди(П). Это объясняется тем, что идет разрушение комплексного соединения с присоединением протона к антибиотику.

Математическая обработка рН-метрических данных была проведена с использованием специализированной программы расчета химических равновесий New DALSFEK. В математических моделях были учтены равновесия: протонирование анионов антибиотиков, гидролиз ионов меди(П) (которые были введены как известные константы) и равновесия образования

комплексных форм СиЬ, СиЬ2, Си(ОН)Ь, константы которых определялись в ходе расчета.

Комплексы СиЬ2 существуют в пренебрежимо малой концентрации и исключаются программой из расчета.

Значения констант протонирования анионов антибиотиков и константы образования гидроксокомплексов СиОН+ взяты из литературы:

^р(НАтр) = 7.28, 1ёР(НАтх) = 7.66, ^(НВгр) = 3.11, ^Р(НСрх) = 1.527----------

^р(НСагЬ) = 3.65, ^Р(НзСагЬ) = 6.46, 1ёР(НСрх) = 7.52, 1ёр(НСг1) = 2.87, ^Р(СиОН) = 6.7. Пригашали ^Р(Н20) = 13.89, т.к. при 20°С pKw = 14.16, а коэффициенты активности одновалентных ионов в 0.1 М растворе КЖ)з составляют 0.735.

Расчет показал, что в исследованных системах возможно образование комплексов состава СиЬ и Си(ОН)Ь. Форма Си(ОН)Ь в системах с бен-зилпенициллином и карбенициллинов не образуется. Полученные значения логарифмов констант устойчивости, включая найденные программой доверительные интервалы, представлены в табл. 3.

Таблица 3. Константы образования комплексов Си(П) с анионами антибиотиков

ь СиЬ+ Си(ОН)Ь

Ашр' 5.1 ±0.1 [_ 13.9 ±0.1

Ашх" 4.2 ± 0.2 13.3 ±0.1

Вгр- 3.23 ±0.02 -

СагЬг 3.07 ±0.06 -

Срх" 3.99 ±0.04 12.6 ±0.1

СгГ 4.13 ±0.02 13.1 ±0.1

Для всех изученных систем были сняты спектры в диапазоне 400 -1000 нм. Полученные спектры, а также спектр аква-ионов меди(П) представлены на рис. 9 и рис. 10.

X, нм

Рис. 9. Спектры растворов, содержащие: 1 - амоксициллин и ионы ме-ди(П); 2 - беюилпенициллин и ионы меди(П); 3 - карбенициллин и ионы меди(П); 4 - цефалексин и ионы меди(И); 5 - аква-ионы меди(П); 6 - цефа-золин и ионы меди(П) (кювета 5 см, спектрофотометр СФ-2000, рН = 7.5)

Рис. 10. Спектр раствора, содержащего ионы меди(П) и ампициллин (кювета 1 см, спектрофотометр СФ-2000, рН = 7.5)

Из спектров видно, что внесение антибиотика в раствор, содержащий аква-ионы меди(П), вызывает сдвиг максимума поглощения в коротковолновую

область с уменьшением коэффициента молярного поглощения, кроме системы Cu(II) - Amp, где коэффициент молярного поглощения возрастает. Сдвиг максимума поглощения в коротковолновую область показывает, что имеется координация ионов меди(П) с лигандом сильного поля, которым может являться атом N аминной группы или атом О р-лактамного кольца.

Таким образом можно предположить следующие структуры ком-

Рис. 11. Предполагаемая структура комплексного соединения меди(П) с ампициллином

Рис. 12. Предполагаемая струк- Рис. 13. Предполагаемая структура ком-

тура комплексного соединения плексного соединения меди(П) с карбе-

меди(Н) с амоксициллином и нициллином бензилпенициллином

Рис. 14. Предполагаемая структура комплексного соединения меди(И) с цефалексином и цефазолином

Для исследования кинетики распада антибиотиков в присутствии солей меди(П) растворы готовили следующим образом: в мерную колбу емкостью 250 мл помещали 0.5 г антибиотика, добавляли приблизительно 200 мл бидистиллированной воды, раствор нитрата меди(П) в количестве, необходимом для поддержания соотношения медь:антибиотик 1:3. Полученные растворы помещали в поляриметрическую трубку, термостатиро-вали в течении 20 минут, и определяли угол вращения плоскополяризо-ванного света с течением времени.

Р-лактамные антибиотики и продукты их разложения принадлежат к числу оптически активных веществ, т.е. веществ, способных изменять положение плоскости поляризации проходящего через них поляризованного света.

Для расчета константы скорости реакции первого порядка можно воспользоваться формулой.

Т а,-а*

где а« - угол вращения в момент начала реакции; с^ - угол вращения в данный момент от начала реакции; ал - угол вращения, соответствующий концу реакции. Угол oto на практике определить не удается и его определяют экстраполяцией прямой, построенной в координатах lg(a, - aK) от т на х = 0. Если график в указанных координатах представляет собой прямую, то это действительно реакция первого порядка.

Как показали проведенные эксперименты, бензилпенициллин, кар-бенициллин и цефотаксим в присутствии ионов меди(П) распадаются в одну стадию, то есть распад представляет собой реакцию первого порядка. Это видно из того, что график зависимости Ig(ao-a») от времени т представляет собой прямую.

Рис. 15. Линейная зависимость ^(сц-ои) от времени т для распада бензи-пенициллина (1) и карбенициллина (2) в присутствии ионов меди(И)

Константы скоростей распада приведены в таблице 4.

Рис. 16. Линейная зависимость ^(с^-о») от времени т для распада цефотаксима в присутствии ионов меди(П)

комплексов меди(П) с антибиотиками

Таблица 4. Константы скоростей реакций распада бензилпенициллина,

Си2+ Антибиотик рН раствора (ацетатный буфер) к, сек"1

Бензилпенициллин 4.17 2.70Т0"3

Карбенициллин 4.34 1.41 ТО"3

Цефотаксим 5.15 1.77Т0"4

Сравнив полученные данные с аналогичными, взятыми из научной литературы, полученных для чистых антибиотиков в тех же условиях, видно, что присутствие ионов меди(П) сильно усиливает распад антибиотиков. Так чистый бензилпенициллин гидролизуется с константой скорости 9.94 день"1, карбенициллин - 25.48 день"1 и цефотаксим - 3.16 день'1.

На примере системы Вгр - Си(П) было изучено влияние кислотности среды и ионной силы на константу скорости гидролиза. (рН поддерживалась карбонатно-бикарбонатным буфером, а ионная сила - раствором нитрата калия)

Рис. 17. Зависимость константы скорости гидролиза от ионной силы. 1 -рН=10.02, 2 - рН=8.74 (ко - константа скорости при нулевой ионной силе, которая была определена экстраполяцией на нулевую ионную силу графика зависимости 1п к от VI.)

Из рис.17 видна явная линейная зависимость константы скорости гидролиза от ионной силы. Таким образом, наличие солевого эффекта первого рода свидетельствует о том, что гидролиз протекает не в одну стадию. Предположительно в начальный период взаимодействия бензилпеницил-лина и ионов меди(П) образуется комплекс, который претерпевает внутримолекулярную перестройку и вновь получившийся комплекс гидролизует-ся с образованием продуктов гидролиза. Однако на имеющимся оборудовании определить константы скоростей других стадий не удалось.

На основании проведенных ранее исследований было показано, что в водных растворах ионы Си2+ с пенициллинами и цефалоспоринами образуют комплексные соединения. В этих комплексах с течением времени происходят необратимые изменения химической структуры лигандов. Внешние эффекты этих взаимодействий (изменение окраски, образование осадков) индивидуальны для каждого антибиотика. Проведенные эксперименты с различными лекарственными формами позволили разработать две простые и экспрессные методики идентификации пенициллинов и цефа-лоспоринов. Первая методика основана на различных эффектах возникающих при добавлении раствора сульфата меди(П) к раствору антибиотика (изменение окраски раствора, выпадение осадка). Вторая методика основана на различных эффектах возникающих при добавлении раствора, содержащего антибиотик на заранее пропитанную солями меди(П) фильтровальную бумагу (изменение цвета бумаги).

Методика количественного анализа основана на построении калибровочного графика зависимости тангенса угла наклона начального участка кинетической кривой, который представляет собой прямую, от концентрации антибиотика.

Рис. 18, Калибровочные графики для определения амоксициллина, ампициллина и бензилпенициллина

Основные выводы

1 .Показано, что ионы меди(П) образуют с анионами пенициллинов и цефа-лоспоринов комплексные соединения состава CuL и Cu(OH)L. 2.0пределены константы образования комплексных соединений при температуре 25.0°С и ионной силе ц = 0.1 (KN03). Сделаны предположения о структуре образующихся комплексов.

3.Методом поляриметрии показано, что присутствие ионов меди(П) ускоряет гидролиз пенициллинов и цефалоспоринов как в кислой, так и в щелочной средах. Изучена зависимость константы скорости гидролиза от ионной силы раствора при различных рН.

4.На основании визуальных эффектов, наблюдаемых при рН-метрических измерениях, разработаны две методики качественного определения антибиотиков в различных лекарственных формах.

5.На основании данных, полученных в результате изучения кинетики щелочного каталитического гидролиза антибиотиков, разработана методика количественного определения пенициллинов и цефалоспоринов в различных лекарственных формах.

Статьи в журналах, рекомендованных ВАК

1. Лапшин C.B., Алексеев В.Г. Кинетика гидролиза ампициллина в присутствии ионов меди(И) // Известия ВУЗов. Серия «Химия и химическая технология». 2009. Т. 52. № 1. С. 47 - 49.

2. Лапшин C.B., Алексеев В.Г. Комплексообразование меди(П) с ампициллином, амоксициллином и цефалексином // Журнал неорганической химии. 2009. Т. 54. № 7. С. 1127-1130.

Другие публикации по теме диссертации

1. Лапшин C.B. Исследование взаимодействия ионов меди(П) с антибиотиками // X Региональные Каргинские чтения. Тез. докл. конф. Тверь,

2003. С.34

2. Лапшин C.B. Исследование взаимодействия ионов меди(П) с некоторыми антибиотиками // Тез. докл. конф. Тверь: Тверской гос. ун-т, 2003. С.16

3. Алексеев В.Г., Жамкова О.Н., Лапшин C.B., Ларин C.B., Шигина О.Ю., Щербакова Е.Е. Взаимодействие ионов d-элементов с антибиотиками // Тез. докл. XXI Междунар. Чугаевской конф. по координационной химии. Киев, 2003. С.186

4. Алексеев В.Г., Жамкова О.Н., Лапшин C.B., Ларин C.B., Шигина О.Ю., Щербакова Е.Е., Якубович Ю.Я., Воробьев Н.В. Металлокомплексы ампициллина // Тез. докл. конф. Саратов, 2003. С.8

5. Лапшин C.B. Исследование взаимодействия ионов меди(П) с карбени-циллином и цефазолином. // Тез. докл. конф. Тверь: Тверской гос. ун-т,

2004. С.23

6. Лапшин C.B. Тест-метод идентификации пенициллинов // XII Региональные Каргинские чтения. Тез. докл. конф. Тверь, 2005. С.46

7. Лапшин C.B. Тест-определение пенициллинов в лекарственных формах с использованием солей меди(П) // Материалы конференции. Секция Химия. Т.1. Москва: МГУ им. М.В. Ломоносова, 2005. С. 27

8. Лапшин C.B. Тест-метод определения пенициллинов // Тез. докл. конф. Екатеринбург : Уральский гос. ун-т, 2005. С.80

9. Лапшин C.B., Шляхова Ю.Н. Кинетика гидролиза комплексных соединений меди(И) с бензилпенициллином, карбенициллином и цефотакси-мом.// Тез. докл. конф. Тверь: Тверской гос. ун-т, 2005. С.13

Ю.Лапшин C.B., Алексеев В.Г. Тест-определение бета-лактамных антибиотиков в лекарственных формах с использованием солей меди(П) и ртути(И) // Тез. докл. V Всеросс. конф. «Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии». Саратов: Научная книга, 2005. С.64

П.Лапшин C.B., Алексеев В.Г., Шляхова Ю.Н. Кинетика гидролиза комплексных соединений бета-лактамных антибиотиков в присутствии солей меди(П) // Тез. докл. V Всеросс. конф. «Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии». Саратов: Научная книга,

2005. С.65

12.Лапшин С.В., Лившиц Е.С., Шляхова Ю.Н. Гидролиз ампициллина и бензилпенициллина в присутствии ионов меди(П) // XIII Региональные Каргинские чтения. Тез. докл. конф. Тверь, 2006. С.42

13.Лапшин С.В., Лившиц Е.С., Шляхова Ю.Н. Гидролиз некоторых пени-циллиновых антибиотиков в присутствии ионов меди(П) // Материалы конференции. Секция Химия. Т.1. Москва: МГУ им. М.В. Ломоносова,

____________2006. С. 163-----------------------------------------------------------------

14.Лапшин С.В., Лившиц Е.С., Шляхова Ю.Н. Особенности кинетики гидролиза ампициллина и бензилпенициллина в присутствии ионов ме-ди(П) // Тез. докл. конф. Екатеринбург: Уральский гос. ун-т, 2006. С.341

15.Lapshin S.V., Demskaya E.V., Yakubovich Yu. Ya., Alekseev V.G. Influence of medium factor on hydrolysis kinetics of beta-lactam antibiotics // Abstr. of X international conference on the problems of salvation and complex formation in solutions. Suzdal, 2007. Vol. 1. P. 263

16.Алексеев В.Г., Лапшин C.B. Тест-определение пенициллинов в лекарственных формах с использованием солей меди (II) // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2007. № 1. С. 27 - 30

17-Алексеев В.Г., Лапшин С.В. Проверка пенициллинов // Химия и жизнь. 2008. №5. С. 42-45

18.Лапшин С.В., Алексеев В.Г. Комплексообразование карбенициллина с катионами меди(И) // Вестник ТвГУ. 2008. № 8. (Серия «Химия». Вып.6). С. 73 - 77

19.Лапшин С.В., Шляхова Ю.Н., Алексеев В.Г. Кинетический каталитический метод определения бензилпенициллина и феноксиметилпеницил-лина// Вестник ТвГУ. 2008. № 8. (Серия «Химия». Вып.6). С. 78 - 81

20.Лапшин С.В., Шляхова Ю.Н. Кинетический каталитический метод определения некоторых пенициллинов // XV Региональные Каргинские чтения. Тез. докл. конф. Тверь, 2008. С.51

Технический редактор A.B. Жильцов Подписано в печать 18.11.2009. Формат 60 х 84 Vjö-Усл. печ. л. 1,2. Тираж 100 экз. Заказ № 507. Тверской государственный университет Редакционно-издательское управление Адрес: Россия, 170100, г. Тверь, ул. Желябова, 33. Тел. РИУ: (4822) 35-60-63.

Содержание диссертации автор исследовательской работы: кандидата химических наук, Лапшин, Сергей Владимирович

Список сокращений и условных обозначений, использованных в диссертации.

1. Введение.

2. Литературный обзор.

2.1. Антибиотики группы пенициллина.

2.2. Антибиотики группы цефалоспорина.

2.3. Пенициллины и цефалоспорины как лиганды координационных соединений.

2.4. Химические свойства меди.

2.5. Роль ионов меди(П) в биологических системах.

2.6. Структура комплексов меди(П) и их электронные спектры.

2.7. Кинетика сольволиза антибиотиков. Роль ионов меди(П) в сольволизе.

2.8. Качественные и количественные методы определения (3-лактамных антибиотиков.

3. Экспериментальная часть.

3.1. рН-метрическое исследование комплексообразования меди(П) с изучаемыми антибиотиками.

3.2. Спектрофотометрическое исследование комплексообразования ионов меди(П) с антибиотиками и строение комплексов.

3.3. Кинетика гидролиза антибиотиков в присутствии ионов меди(П).

3.4. Методики качественного определения антибиотиков в лекарственных формах.

3.5. Методика количественного определения пенициллинов в лекарственных формах.!.

Введение диссертация по химии, на тему "Физико-химическое исследование взаимодействия ионов меди(II) с некоторыми β-лактамными антибиотиками"

Хоо - угол вращения плоскополяризованного света в конце реакции х — ионная сила раствора, моль/л

3 - константа образования комплексного соединения а — активность, моль/л

Amp" — анион ампициллина

Arrnf — анион амоксициллина

An - анион

Bzp~ - анион бензилпенициллина 2

СагЬ - анион карбенициллина

Срх~ - анион цефалексина

Ctx~ - анион цефтриаксона

СхпГ — анион цефотаксима

Czl~ - анион цефазолина

- молярный коэффициент активности

Н2Атр+ - катион ампициллина

Н2Ашх — амоксициллин

НгАшх1 — цвиттер-ион амоксициллина

H2Carb — карбенициллин

Н2Срх+ — катион цефалексина

Н3Ашх+ — катион амоксициллина

НАшр - ампициллин

НАтр* — цвиттер-ион ампициллина

НАшх- - анион амоксициллина HBzp - бензилпенициллин

HCarb" - анион карбенициллина (продукт диссоциации H2Carb по первой ступени)

НСрх - цефалексин

НСрх* - цвиттер-ион цефалексина

HCzl - цефазолин

I - ионная сила к - константа скорости

Ка — константа кислотной диссоциации

Kt - катион

L — лиганд

Оха - анион оксациллина т - время t - температура, °С Т — абсолютная температура, К z — заряд иона

1. Введение

Актуальность темы Постоянно возрастающее число применяемых в медицине антибиотиков делает актуальным изучение их взаимодействия с катионами металлов, прежде всего входящих в состав химических веществ живых организмов. Анализ научной литературы показывает, что антибиотики могут образовывать с катионами металлов комплексные соединения, в результате чего изменяются химические свойства антибиотиков и их биологическая активность. Наиболее применимыми являются Р-лактамные антибиотики. По своему строению они подразделяются на две группы: антибиотики группы пенициллина и антибиотики группы цефалоспорина. К первой относятся ампициллин, амоксициллин, карбенициллин, бензилпенициллин, оксациллин и др. Ко второй - цефазолин, цефотаксим, цефтриаксон и др. Одним их наиболее интересных комплексообразователей являются ионы меди(П). Медь содержится в многих живых организмах (в том числе и человека), где играет важную роль в метаболизме.

Непрерывное увеличение числа антибиотиков, рост фальсифицированной продукции на рынке делает также актуальным создание методик количественного. и качественного анализа лекарственных препаратов, основанных на знаниях их взаимодействия с различными катионами переходных металлов, в частности с катионами меди(П).

В связи с этим были сформулированы следующие цели работы:

1) Исследование комплексообразования ионов меди(П) с пенициллинами и цефалоспоринами.

Для достижения этой цели были поставлены взаимосвязанные задачи:

1) Изучение комплексообразования меди(П) с (3-лактамными антибиотиками потенциометрическим методом;

2) Изучение комплексообразования меди(П) с Р-лактамными антибиотиками спектрофотометрическим методом;

3) Поляриметрическое исследование кинетики гидролиза пенициллинов и цефалоспоринов в присутствии ионов меди(П) при различных условиях (рН, ионная сила раствора).

Заключение диссертации по теме "Физическая химия"

Выводы

1. Показано, что ионы меди(П) образуют с анионами пенициллинов и цефалоспоринов комплексные соединения состава CuL" и Cu(OH)L.

2. Определены константы образования комплексных соединений при температуре 25.0°С и ионной силе jli = 0.1 (KNO3). Сделаны предположения о структуре образующихся комплексов.

3. Методом поляриметрии показано, что присутствие ионов меди(П) ускоряет гидролиз пенициллинов и цефалоспоринов как в кислой так и в щелочной средах. Изучена зависимость константы скорости гидролиза от ионной силы раствора при различных рН.

4. На основании визуальных эффектов, наблюдаемых при рН-метрических измерениях, разработаны две методики качественного определения антибиотиков в различных лекарственных формах.

5. На основании данных, полученных в результате изучения кинетики щелочного каталитического гидролиза антибиотиков, разработана методика количественного определения пенициллинов в различных лекарственных формах.

Научная новизна

Практическая значимость

Полученные величины констант устойчивости комплексов меди(П) с (3-лактамными антибиотиками позволяют сделать вывод, что эти соединения могут быть с успехом использованы для создания новых лекарственных препаратов. Больше всего это касается антибиотиков имеющих аминогруппу, константы устойчивости которых особенно' высоки.

Реализация результатов

Апробация результатов работы на конференциях

1. Лапшин С.В. Исследование взаимодействия ионов меди(П) с антибиотиками // X Региональные Каргинские чтения. Тез. докл. конф. Тверь, 2003. С.34.

2. Лапшин С.В. Исследование взаимодействия ионов меди(П) с некоторыми антибиотиками // Тез. докл. конф. Тверь: Тверской гос. ун-т, 2003. С.16

3. Алексеев В.Г., Жамкова О.Н., Лапшин С.В., Ларин С.В., Шигина О.Ю., Щербакова Е.Е. Взаимодействие ионов d-элементов с антибиотиками // Тез. докл. XXI Междунар. Чугаевской конф. по координационной химии. Киев, 2003. С.186.

4. Алексеев В.Г., Жамкова О.Н., Лапшин С.В., Ларин С.В., Шигина О.Ю., Щербакова Е.Е., Якубович Ю.Я., Воробьев Н.В. Металлокомплексы ампициллина // Тез. докл. конф. Саратов, 2003. С.8.

5. Лапшин С.В. Исследование взаимодействия ионов меди(П) с карбенициллином и цефазолином. // Тез. докл. конф. Тверь: Тверской гос. ун-т, 2004. С.23

6. Лапшин С.В. Тест-метод идентификации пенициллинов // XII Региональные Каргинские чтения. Тез. докл. конф. Тверь, 2005. С.46

7. Лапшин С.В. Тест-определение пенициллинов в лекарственных формах с использованием солей меди(П) // Материалы конференции. Секция Химия. Т. 1. С. 27

8. Лапшин С.В. Тест-метод определения пенициллинов // Тез. докл. конф. Екатеринбург : Уральский гос. ун-т, 2005. С.80.

9. Лапшин С.В., Шляхова Ю.Н. Кинетика гидролиза комплексных соединений меди(П) с бензилпенициллином, карбенициллином и цефотаксимом.// Тез. докл. конф. Тверь: Тверской гос. ун-т, 2005. С.13

Ю.Лапшин С.В., Алексеев В.Г. Тест-определение бета-лактамных антибиотиков в лекарственных формах с использованием солей меди(П) и ртути(Н) // Тез. докл. V Всеросс. конф. «Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии». Саратов: Научная книга, 2005. С.64.

П.Лапшин С.В., Алексеев В.Г., Шляхова Ю.Н. Кинетика гидролиза комплексных соединений бета-лактамных антибиотиков в присутствии солей меди(П) // Тез. докл. V Всеросс. конф. «Современные проблемы теоретической и экспериментальной химии». Саратов: Научная книга, 2005. С.65.

13.Лапшин С.В., Лившиц Е.С., Шляхова Ю.Н. Гидролиз некоторых пенициллиновых антибиотиков в присутствии ионов меди(П) // Материалы конференции. Секция Химия. Т.1. С. 163.

Н.Лапшин С.В., Лившиц Е.С., Шляхова Ю.Н. Особенности кинетики гидролиза ампициллина и бензилпенициллина в присутствии ионов меди(П) // Тез. докл. конф. Екатеринбург: Уральский гос. ун-т, 2006. С.341

16.Лапшин C.B., Шляхова Ю.Н. Кинетический каталитический метод определения некоторых пенициллинов // XV Региональные Каргинские чтения. Тез. докл. конф. Тверь, 2008. С.51.

Публикации в журналах, рекомендованных ВАК

1. Лапшин С.В., Алексеев В.Г. Кинетика гидролиза ампициллина в присутствии ионов меди(П) // Известия ВУЗов. Серия «Химия и химическая технология». 2009. Т. 52. № 1. С. 47-49.

2. Лапшин С.В., Алексеев В.Г. Комплексообразование меди(П) с ампициллином, амоксициллином и цефалексином // Журнал неорганической химии. 2009. Т. 54. № 7. С. 1127-1130.

Публикации в других научных журналах

1. Алексеев В.Г., Лапшин С.В. Тест-определение пенициллинов в лекарственных формах с использованием солей меди (II) // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2007. № 1. С. 27-30.

2. Алексеев В.Г., Лапшин С.В. Проверка пенициллинов // Химия и жизнь. 2008. № 5. С. 42-45.

3. Лапшин С.В., Алексеев В.Г. Комплексообразование карбенициллина с катионами меди(П) // Вестник ТвГУ. 2008. № 8. (Серия «Химия». Вып.6). С. 73-77.

4. Лапшин С.В., Шляхова Ю.Н., Алексеев В.Г. Кинетический каталитический метод определения бензилпенициллина и феноксиметилпенициллина // Вестник ТвГУ. 2008. № 8. (Серия «Химия». Вып.6). С. 78-81.

4. Заключение

Список источников диссертации и автореферата по химии, кандидата химических наук, Лапшин, Сергей Владимирович, Тверь

1. Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках. М.: Высшая школа, 1986. 448 с.

2. Машковский М.Д. Лекарственные средства. В 2-х т. М.: Медицина, 1993.

3. Atntonio Doadri L., Mayorga Antonio, Orenga Regina VO~ and Cu~ Interactions with Ceftriaxone and Ceftizoxime. HPLC Kinetic Studies // J. Braz. Chem. Soc. 2002. Vol.13. No.l.P. 95-100.

4. Алексеев В.Г., Воробьев H.B., Якубович Ю.Я. Кислотно-основные равновесия в растворах цефотаксима и цефтриаксона // Журнал физической химии. 2006. Т. 80. № 9. С. 1615 1619.

5. Buss W.C., Reyes E., Balers T.D. Metal ion catalyzed oxidation of the antibiotic rifampicin. // Commun chem pathol pharmacol. 1977. Vol. 17. No 3. P. 547 550.

6. Lin P.S., Kwock L., Heflter K., Misslbeck G. Effects of iron, copper, cobalt and their chelators on the cytotoxicity of bleomycin. // Cancer res. 1983. Vol 43. No 3. P. 1049- 1053.

7. Gutierrez Navaro P., Martinez de las Parras P.J., Marquez Garcia A. Reaction of sodium amoxicillin with Cu(II) ion in a methanolic medium. // Journal pharm sci. 1991. Vol 80. No 9. P. 904 907.

8. Cakir S., Coskun E., Bicer E., CakirO. Electrochemical study of the complexes of aspartame with Cu(II), Ni(II), and Zn(II) ions in the aqueous medium. // Carbohydr res. 2003. Vol 338. No 11. P. 1217 1222.

9. Cressman W.A., Sugita E.T., Doluisio J.T., Niebergall P.J. Complexation of penicillins and penicilloic acids by copper ion. // Pharm pharmacol. 1966. Vol 18. No 12. P. 801 -808.

10. Mujawar S.K., Sudhakaran V.K., Jadhav K.P., Shewale J.D. Measurement of cephalosporin С by Cu~ complex formarion // Biotechnology and applied biochemistry. 1995. Vol 22. No 2. P. 125.

11. Tomida H., Schwartz MA. Further studies on the catalysis of hydrolysis and aminolysis of benzylpenicillin by metal chelates // Journal pharm sci. -1983. Vol 72. No 4. P. 331 335.

12. Medez R., Alemany Т., Martin-Villacorta J. Catalysis of hydrolysis and aminilysis of non-classical beta-lactam antibiotics by metal ions and metal chelates // Chem pharm bull. 1983. Vol 40. No 12. P. 3228 3233.

13. Cressman WA, Sugita ET, Doluisio JT, Niebergall PJ. Cupric ion-catalyzed hydrolysis of penicillins: mechanism and site of complexation // Journal pharm sci. 1969. Vol 58. No 12. P. 1471 1476.

14. Klevay L. M., Medeiros D. M. Deliberations and evaluations of the approaches, endpoints and paradigms for dietary recommendations about copper // J. Nutr. 1996. Vol 126. No22. P. 2419-2426.

15. Weiss A., Fallab S., Erlenmeyer H. Semi-quantitative Bestimung von kleinen Mengen Uran, Kupfer bnd Teisen in Gesteinen // Helv. Chim. Acta. 1957. V.40. No 3. P.611 614.

16. Cressman W.A., Sugita E.T., Doluisio J.T., Niebergall P.J. Cupric ion catalyzed hydrolysis of penicillins. Mechanism and site of complexation. // J. Pharm. Pharmacol. 1966. V.18. № 3. P. 801 808.

17. Gressman W.A., Niebergall P.J. Cupric ion catalyzed aminolys of penicillins. Mechanism and site of complexation // J. Pharm. Pharmacol. 1967. V.19. № 11. P.774.

18. Cressman W.A., Sugita E.T., Doluisio J.T., Niebergall P.J. Cupric ion-catalyzed hydrolysis of penicillins: mechanism and site of complexation. // J. Pharm. Sci. 1969. V.58. № 12. P. 1471 1476.

19. Gensmantel N.P., Proctor Ph., Page M.I. Influence of magnesium glutamate on stability of penicillin G aqueous solution // J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2. 1980. № 11. P. 1725 1732.

20. Fazakerley G.V., Jackson G.E. Determination of the Solution Conformation of Adenosine 2':3'-Monophosphate by Nuclear Magnetic Resonance with Lanthanide Probes // J. Inorg. Nucl. Chem. 1975. V.37. P. 23712375.

21. Ogorevc В., Hudnik V., Gomiscek S., Smyth M.R., Vos J.G. Spectroscopic and polarographic investigations of copper(II)-azithromycin interactions under equilibrium conditions // Inorg. Chim. Acta. 1985. V.108. P. L3-L6.

22. Sher A., Veber M., Marolt-Gomiscek M., Gomiscek S. The study of complexation of copper(II) with ampicillin // Int. J. Pharm. 1993. V.90. P.181-186.

23. Sher A., Veber M., Marolt-Gomiscek M., Gomiscek S. Complexation of copper(II) ions with ampicillin // Int. J. Pharm. 1993. V.99. P. 119-123.

24. Abd El., Wahed M.G., Ayad M. Thermodynamic and thermal investigation of Co(II), Ni(II) and Cu(II) complexes with adenine // Analytical Letters. 1984. V. 17. № B3. P.205-216.

25. Shoukry M.M. Potenciometric stidies of binary and ternary complexes of amoxicillin//Talanta. 1992. V.39. № 12. P.1625-1628.

26. Moratal J.M., Borras J., Donaire A. Metal complexes of cephradine: Synthesis and equilibrium studies // Inorg. Chim. Acta. 1989. V.162. P.l 13-119.

27. Abdel Gaber A.A., Farghaly O.A., Ghandour M.A., El-Said H.S. Poten-tiometric studies on some cephalosporin complexes // Monatshefte fur Chemie. 2000. V.131.P.1031- 1038.

28. Anacona J.R., Figueroa E.M. Synthesis and antibacterial activity of metal complexes of cefazolin // Journal Coordination Chemistry. 1999. V.48. P.l 81189.

29. Anacona J.R., Alvarez P. Synthesis and antibacterial activity of copper(II) complexes with sulphathiazole and cephalosporin ligands // Transition Metal Chemistry. 2002. V.27. P.856-860.

30. Anacona J.R., Serrano J. Synthesis and Antibacterial Activity of Cefixime Metal Complexes // J Journal Coordination Chemistry. 2003. V.56. № 4. P.313-320.

31. Chohan Z.H., Supuran C.T., Scozzafava A. Metal-based antibacterial and antifungal penicillins: synthesis, characterization, and biological properties // J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2004. V.19. № 1. P. 79 84.

32. Kapetanovic V., Veselinovic D., Suznjevic D. Differential pulse polarographic investigation of copper(II)cephalexin complex // Analytical Letters. 1990. V.23. № 10. P. 1857 1872.

33. Robinson-Fuentes V. A., Jefferies T.M., Branch S.K. Degradation pathways of ampicillin in alkaline solutions // J. Pharm. Pharmacol. 1997. Vol 49. No-9: P. 843 -851. .

34. Dinner A. Cephalosporin degradations // J. Med. Chem. 1977. Vol 20. No 7. P. 963 965.

35. Ливер Э. Электронная спектроскопия неорганических соединений: М.: Мир, 1987. Т.2. 443 с.

36. Березин Д.Б.,. Березин Б.Д. Современный курс органической химии. М.: Высшая школа, 2003.

37. Ratte E.S., Guttman D.E., Ravin L J. Kinetics of degradation of cefazolin and cephalexin in aqueous solution // Arzneimittelforschung. 1978. Vol 28. No 6. P. 944-948.

38. Sunkara G., Navarre C.B., Kompella U.B. Influence of pH and temperature on kinetics of ceftiofiir degradation in aqueous solutions // J. Pharm. Pharmacol. 1989. Vol 51. No 3. P. 249-255.

39. Gressman W.A., Sugita E.T., Doluisio J.T., Niebergall P.J. Reaction of sodium ampicillin with Cu(II) and Zn(II) ions in metanolic medium // J. Pharm. Pharmacol. 1966. V. 18, № 12. P. 801.

40. Gressman W.A., Sugita E.T., Doluisio J.T., Niebergall P.J. Reaction of sodium amoxicillin with Cu(II) ion in a methanolic medium // J. Pharm. Sci. 1969. V. 58. №12. P. 147.

41. Jashuda Т., Shimada S. pH and temperature on kinetics of beta-lactam degradation in aqueous solutions // J. Antibiot. 1971. V.24. P. 290.

42. Gensmantel N.P., Gowling E.W., Page M.I. Influence of magnesium glutamate on stability of penicillin G aqueous solution // J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2. 1978. № 4. P. 335.

43. Tomida H., Schwartz M.A. Influence of magnesium glutamate on stability of penicillin G aqueous solution // J. Pharm. Sci. 1983. V. 72. № 4. P. 331.

44. Fernandez-Gonzalez A., Badia R., Diaz-Garcia M.E. Insigth into of beta-lactam antibiotics with copper(II) ions in aqueous and miccelar media: kinetic and spectrometric studies // Anal. Biochem. 2005. V. 341. № 1. P. 113.

45. Mujawar S.K., Sudhakaran V.K., Jadhav K.P., Shewale J.D. Measurement of cephalosporin С by Cu(II) complex formation // Biotechnology and'applied biochemistry. 1995. V. 22. No 2. P. 125.

46. Hamdan II. In vitro study of the interaction between omeprazole and the metal ions Zn(II), Cu(II) and Co(II) // Pharmazie. 2001. V 56. No 11. P. 877881.

47. White E.R., Carrol M.A., Zarembo J.E., Bender A.D. Reverse phase high speed liquid chromatographt of antibiotics // Antibiot. (Tokyo). 1975. Vol.28. No. 3. P. 205-214.

48. White E.R., Zarembo J.E. Reverse phase high speed liquid chromatographt of antibiotics II. Use of high efficiency small particle columms // Antibiot. (Tokyo). 1981. Vol. 34. № 7. P. 836-844.

49. Straub R.F., Voyksner R.D. Confirmatory assay for the simultaneous detection of penicillins and cephalosporins in milk using liquid chromatography/tandem mass spectrometry // J. Chromatography. 1993. Vol. 647. № l.p. 167-181.

50. Nishi H., Tsumagari N., Kakimoto Т., Terabe S. Separation and Determination of Yellow Gardenia Pigments for Food and Iridoid Constituents in Gardenia Fruits by Micellar Elektrokinetic Chrjmatographe // J. Chromatography. 1989. Vol.477. № 2. P.259-270.

51. Pajchel G., Pawlowski K., Tyski S. CE versus LC for simultaneous determination oh amoxicillin/clavuanic acid and ampicillin/sulbactam in pharmaceutical formulations for injetions// J. Pharm. Biomed. Analysis. 2002. Vol. 29. № l.P. 75-81.

52. Gensmantel N.P., Gowling E.W., Page M.I. Metal Ion Catalysis in the Aminolysis of Penicillin // J.C.S. 1978. Perkin II. P. 335 342.

53. Gensmantel N.P., Proctor P., Page M.I. Metal ion Catalysis Hydrolysis of Some p-Lactam Antibiotocs // J.C.S. 1980. Perkin II. P. 1725 - 1732.

54. Ланчини Д., Паренти Ф. Антибиотики. М.: Мир, 1985. 272 с.

55. Быстрова Л.В., Серова Л.И. Пенициллиновые и цефалоспориновые антибиотики //Антибиотики. 1982. Т. 27. № 8. С. 574 576.

56. Stok F.G. Cu(II) catalysis, hydrolysis of beta-lactam ampicillin // Analyst. 1954. V.79. № 944. P. 662.

57. Weaver W.J., Reschke R.F. Spectrofotometric determination of sodium 2/6-dimethoxyphenyl penicillin monohydrate.// J. Pharm. Sci. 1963. V. 52. P. 362.

58. Van Krimpen P.С., Van Bennekom, Bult A. Penicillins and cefalosporins // Pharmaceutisch Weekblad Scientific Edition. 1987. Vol.9. P.l 23.

59. Эшворт M. P. Титриметрические методы анализа органических соединений. М.: Химия, 1968. 338 с.

60. Полюдек-Фабини Р., Бейрих Т. Органический анализ. JL: Химия, 1981. С. 463-480.

61. Красникова А.В., Иозеп А.А. Спектрофотометрическое определение пенициллиновых антибиотиков // Хим.-фарм. журн. 2003. Т. 37. № 9. С. 4951.

62. Шаршунова М., Шварц В., Михалец Ч. Тонкослойная хроматография в фармацевтической и клинической биохимии. М.: Мир, 1980.

63. Евгеньев М.И., Гармонов С.Ю., Шакирова Л.Ш. Проточно-инжекционное определение новокаиновой соли бензилпенициллина в препаратах пенициллина со спектрофотометрическим детектированием // Журн. аналит. химии: 2001. Т. 56. № 6. С. 642-646

64. Алексеев В.Г., Нерсесова А.Ф., Халяпина Я.М. Определение бензилпенициллина, ампициллина и карбенициллина методом бумажной хроматографии // Журн. прикладной химии. 2005. Т. 78. № 4. С. 613 — 615.

65. Блинов Н.О., Хохлов А.С. Бумажная хроматография антибиотиков. М.: Наука, 1970. С.364

66. Яковлев К. П. Метод тонкослойной хроматографии и его приложение в фармацевтической химии. 1989. 178 с.

67. Беликов В.Г. Анализ лекарственных веществ фотометрическими методами. Опыт работы отечественных специалистов // Рос. хим. журн. (Журн. Рос. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева). 2002. Т.32 № 4. С.52 -56.

68. Навашин С.М., Фомина И.П. Рациональная антибиотикотерапия. М.: Медицина, 1982 С. 57

69. Шведене Н.В., Боровская С.В. Ионометрическое определение Р-лактамных антибиотиков // Журн. аналит. химии. 2003. Т. 58. № 11. С. 1208-1213.

70. Дегтерев Е.В. Анализ лекарственных средств в исследованиях, производстве и контроле качества // Росс. хим. журн. 2002. Т. 46. № 4. С. 43-51.

71. Алексеев В.Г., Демская Е.В., Додонова М.С. Термодинамические константы кислотно-основных равновесий в растворах пенициллинов // Журн. общ. хим. 2005. Т. 75. № 6. С. 1049.

72. Алексеев В.Г., Демская Е.В., Милаше Е.А., Иголкин В.В. Кислотно-основные свойства амоксициллина// Журн. общ. хим. 2005. Т. 75. № 7. С. 1211.

73. Алексеев В.Г., Волкова И.А. Кислотно-основные свойства некоторых пенициллинов // Журнал общей химии. 2003. Т. 73. № 10. С.1709 — 1711.

74. Алексеев В.Г., Даландуцкая B.C., Маркелова С.В., Авилкина А.А. Кислотно-основные свойства цефалотина, цефазолина и цефалексина // Журн. общ. хим. 2005. Т. 75. № 8. С. 1349.

75. Назаренко В.А., Антонович В.П., Невская Е.М. Гидролиз ионов металлов в разбавленных растворах. М.: Атомиздат, 1979. 191 с.

76. Marshall W.L., Frank E.U. Ion product of water substance 0-1000°C, 110000 bars. New international formulation and its background // J. Phys. Chem. Ref. Data. 1981. V. 10. № 2. P. 295.

77. Hamer W.J., Wu Y.C. Ion interaction approach to calculations of volumetric properties of aqueous multiplete-solutie electrolyte solutions // J. Phys. Chem. Ref. Data. 1972. V. 1. № 4. P. 1047

78. Яцимирский К.Б., Крисс E.E., Гвяздовская В.Л. Константы устойчивости комплексов металлов с биолигандами. Киев: Наукова думка, 1979. 228 с.