Иммобилизованные гетероциклические азосоединения в сорбционно-спектроскопических и химических тест-методах анализа тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.02 ВАК РФ



на правах рукописи

МОРОЗКО СЕРГЕЙ АНАТОЛЬЕВИЧ

ИММОБИЛИЗОВАННЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ АЗОСОЕДИНЕНИЯ В СОРБЩЮННО-СПЕКТРОСКОПИЧЕОШХ И ХИМИЧЕСКИХ ТЕСГ-МЕТОДАХ АНАЛИЗА

02.00.02 - Аналитическая химия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Москва - 199.?»

Работа выполнена на кафедре аналитической химии Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова

Научный руководитель:

доктор химических наук, профессор Иванов В.М.

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор Кузнецов В.В. кандидат химических наук, ст. н. сотр. Тругнева Л.М.

Ведущая организация:

Институт общей и неорганической химии мм. Н.С. Курнакова РАН

Зашита состоится "4екА£РЯ 1995 г. в час. Юмин. в суд. 337 г на заседании диссертационного Совета Д.053.05.60 по химический наукам пои Московской государственном университете им. М.В. Ломоносова по адресу:

119899, ГСП. Москва, В-234. Воробьевы горы, МГУ. Химический факультет

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке химического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова.

Автореферат разослан "15"* f/ОЯОРЯ 1995 г.

"Ученый секретарь Совета, кандидат химических наук

И.И.Торочешникова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Контроль raí рязнекич объектов окружающей среды, например, вод, подгзер;хдает в большинстве случаев тенденцию к увеличению степени загрязненности практически всеми нормируемыми компонентами. Унификация пробоотборя, проГ.оподгототен, методов контроля и координация методических работ способствуют улучшению точности результатов. В последние годы большие надежды возлагают на тесг-мсгоды как новый и доступный вариант использования селективных и чувствительных методов обнаружения и количественного определения многих неорганических веществ. Сочетание сорбциониого концентрирования микроэлементов с простыми и доступными методами детектирования сокращает пробоподготовку, анализ и расход используемых реагентов, традиционный путь которого состоит в регистрировании изменения цвета в результате хромогенных химических реакций с последующим визуальным - и по возможности пост-инсгрумеитальным определением. Тем не менее, при разработке тест-методик часто не учитывается субъективный фактор человеческого зрения, не существует объективных критериев в рациональном выборе содержания и цвета используемых в тест-реакциях хромогенных реагентов. Недостаточно адекватно оцениваются метрологические характеристики разработанных тсст-методик, связанные с образованием окрашенных соединений.

В качестве альтернативного приема предлагается использовать цвегоизмер1пе:тьные системы, основанные на расчете общего цветового различия сравниваемых образцов, что позволит находить содержание микроэлементов визуальным методом с заранее заданной в лабораторных условиях погрешностью измерений.

Работа выполнена в соответствии с про1раммой "Экологическая безопасность России" rio темам: "Разработка экспрессных тест-методов обнаружения и определения токсичных веществ в почвах на уровне ПДК"(1Сма 5.2.1.18) и "Разработка научных основ и практических подходов к тест-методам ipyimoBoi о и индивидуального дейсгвия"(тема 5.2.1.3),. ti также приоршетных научных работ по грантам: "Экспресс-тесты контроля качества питьевой и технической воды в системе водопользования" (головная организация ГЕОХИ им. В.И. Вернадского РАН. тема 08.01.26) н "Теоретические основы иммобилизации н применение иммобилизованных органических реагент <>в при

тестировании и определении приоритетных загрязнителем в ооъектах окружающей среды" (юловная организация Томский государственный университет) направление 6.1, тема: "Фундаментальные проблемы охраны окрГ/кающсн среди и экологии человека".

Цел; работы - разработка высокочувствительных сорбдионно-спектроскопических экспресс-методов аначиза расгворов с применением цветомсгрического подхода. Для достижения поставленной «ели исследовано изменение цвета в резулыатг образования, сорбции окрашенных соединении и их состояния i (baue сорбентов, разработаны методические ограничения используемых в экспресс-анализе цветных химических реакций.

Научная новизна. На основании изучения адсорбции молекулярных и ионных форм гетероциклических азотсодержащих азосоединений стандартными сорбентами прослежено влияние структуры сорбента (кремнезема) на сорбцию органических реагентов, рассчитаны термодинамические константы сорбции.

Предложен н обоснован подход к разработке сорбциишю-цвето-мезрических методик определения микроэлементов с использованием визуального и пост-тилрум октального детектирования.

На примере 1-(2-пнридилазо)-2- нафтола, сорбирована зго ш кремнеземе, сформударовакы критерии визуального определенш окрашенного соединения я тест-образце.

. Предложено использовать цвсяометрический подход для опредс ления конехьн? ионизации окрашенных органических соединений.

Практическая ценность работы. Цвепометрическнй подхо; позволяет определиib константы кислотной диссоциации органически: реагентов {на примере 4-{2-г>иридидазо)резорцина и 1-(2-пиридилазо)-2 нафтола} в растворах и в фазе сорбента. Разработаны методически критерии для создания индихатортлх тест-систем. Разработан! селективные методики сорбпионно-цветометричеекого определена кобальта, меди и цинка с пределами обнаружения 0,01; 0,005; 0.00 мкг/мл при использовании метода твердофазной cneKipc фотометрии : 0.03: 0.01: 0.01 мкг/мл при использовании метода спектроскоп« диффузного отражения (V=20 мл, 0,5 г) соотвегственш

Методики отличаются достаточно широким диапазоном определяемы содержаний (дпа порядка) ff xopomeй воспроизводимостью результате гпализа (är-0.03-0.09). Разработанные методики применены к анализ водопроводной, поверхностных и сточных вод.

Положения, _выносимые на защиту.

1. Результаты изучения сорбции различных молекулярных и ионных форм гетероциклических азотсодержащих азосоединении на примере 4-(2-пиридилаг>о)рсзорцина (ПАР) и 1-(2-пиридилазо)-2-нафтола (ПАН) стандартными сорбентами класса ггремпгягмов.

2. Результаты спектроскопических и цветомстричесхих исследований состояния органических реагентов (ПАР и ПАН) и их комплексов с d- элементами IV группы Пцшодической системы Д.И. Менделеев» э растворе и на поверхности сорбентов.

3. Методические оегюзы количественных измерений при шг его метрическом подходе для создания экспресс- или тест-методов химического глздшг.

4. Сорбцпоотго-цзегсметричсекие методики определения кобальта, меди и глшха с пределами обнаружения 0,01:0,005; 0,005 мкт/ мл при ncaom.ioF.amm метода твердофазной спектрофотоиетрии и 0,03; 0.01; 0,01 мкг/кл при использовании метода спектроскопии диффузного отраженна соответственно.

Апробация работы. Основные результаты работ;.: доложены па меадушредпой конференции "Фундаментальные и прикладные проблемы ozpsrni окрул-атощей среды" (Томск, 1995), международной копферендии "Лештскне горы - 95" (Москва, март 1995).

Публикации. По материалам диссертации опубликовало 3 статьи и 1 тезисы докладов.

Структура и обч.см работы. Диссертация состоит из введения, шести глав, выводов и списка литературы. Во введении обосновывается актуальность темы и цель работы, се новизна и практическая значимость. В обзоре литсрахуры (главы I и 2) рассмотрены общая характеристика сорбциошю-спектрофотомэтрических методов анализа a варианте пропускания и диффузного отражения, а также аоэмоясяостя измерения цвета окрашенных соединений, приведены примеры практической реализации. Во второй главе обобщены ддниые о сорбционных сзойспзах и применению стандартных, используемых в химической практике сорбентов различной природы в неорганической анализе; обсуждены теоретические вопросы количественных измерений спектроскопии свсгорассеивающих материалов. В последующих главах изложены экспериментальные данные. Третья глава содержит описают? исходных веществ, аппаратуры и техники эксперимента. В четвертой главе" рассмотрены сорбпионное извлечение и состояние исследуемых гетероциклических а>о reo держащих азосоединений в фазе сорбентов

стандартного типа, показано влияние структуры, сорбента на адсорбцию реагентов, исследованы оптические и кислотно-основные свойства модифицированных сорбентов. Пятая глава посвящена изучению аналитических свойств 1 -(2-пир(гдилазо)-2-иафтола (ПАЛ), иммобилизованного на Сиюхроме С-120 с целью выяснения основных закономерностей •сорбции, комплексе- и нветообразованип, а также последующего селективного определения следов элементов. Рассмотрено применение цвето-метрического подхода в экспресс- и тест-анализе. Возможности практического .использования нммобилизоваиного ПЛИ в сорбциошю-цвсто-мстрическом анализе-обсуждаются в шестой главе. Приведены характеристики разработанных него дик определения кобальта, меди и цинка.

Диссертация изложена на 130 страницах машинописного текста,' включает 19 рисунков и 13 таблиц. Слисок литературы содержит 171 работу отечественных и зарубежных авторов.

ЭКСИЕРИМЬЛ IТАЛЫ1АЯ ЧАСЛЪ

В качестве сорбентов использовали различные марки целлюлозы: целлюлоз) ЭХТПОЛА (эних-iopi кдриигризтаноламинцедлю.зоза, Oi J-форма, фракция $100 мкм. НПО "Биохимреактив", Олайье); целлюлозу КМ, бисерный полимер (кярбоксимслсшеллюлоза. КМЦ. Рваная, BcHi-рия); целлюлозу МК (микрокристаллическая порошковая, МКЦ, фракции $10(1 у 100-250 мкм); сусиппию Волокнистой целлюлозы (удельный вес ¿6.8-57,0 г/л). Которую готовили размалыванием на миксере 10 ¡¿-'рокоеористых фильтров "красная лента" до однородного сос-1ояш:я и добавлением в полученную масс}1 бидистиллята.

Использовали Снлохроны С-80 и C-I20 отечественного производ-стга различных фракций. Для гидроксилироваиия и удаления примесей катионов кремнеземы промывали 0,1 М HCl, отмывали бидистиллятом до нейтральной реакции и высушивали при 160° С.

В работе иснользовили отечественные ионообменные смолы КУ-2х8 и АВ-17хЬ зернением 0.10-0.25 мм. Сильнокислотный монофункциональный катмонообменник Ю-2x8 применяли в Н-фсрме, предварительно av oiMUnaaii 2,0 и 4,0 М растворами HCl до отрицательной реакции на иони железа (110 -¡атом Сидистиллятом до нейтральной реакции по укиверсадьпону индикатору и высушивали до воздушно-сухого состояния. Силыюосновной монофункциональный анионообменник ЛВ-17х8 №СИ(оги>.зовали в С1-форме. Очисгку проводили первоначально 2 М NaOH дд» удаления низкомолекулхрных фракций, а затем 0,5, 2,0 и 4.0 М HCl

до о гр i! цателы i о й реакции на ионы железа (III). Ионообменшас промывали бндистиллятом до нейтральной реакции по универсальному индикатору и высушивали до воздушно-сухого состояния.

Растворы (М0-3М) гетероциклических азососдипсний (ГАС) готовили растворением соолзетствугаших навесок перекристаллизованных препаратов гарантированной чистоты 1 -(2-пиридилазо)-2-наф гола (ПА11), 4-(2-пиридилазо)резорпина (ПАР) "Реанал", Венгрия соответственно в 0.5 М HCl и бидистнлляте.

Растворы металлов: железо, кобальт, марганец, медь, никель, хром, циик (I мг/мл) готовили растворением ссствстстую::;;:* -лорггдеп ндн нитратов и стандартизовали комплсксоиометричсски.

Кислотность среды создавали ацетапю-солянокислимп я аггетат-но-аммонийпы* *и буферными распзорами и контролировали стеклянным электродом на универсальном иономере ЭВ-74.

Спектры поглощения измеряли на спектрофотометре Hitachi-'24, оптические плотное!и - «а спектрофотометрах. КФК-3, СФ-46. Спектры дифф}"зпого отражения и пропускания измеряли на фоточлектроколорн-метреСисктротои (условия освещения и наб,аодсння соответствуют вид> Дифф. /8°). Координаты цвета получали па Спсктротонс или рассчнш-вали па ЭВМ.

Сорбигоо сседгягяшн проводили в статическом режиме. Для этого в сосуд с npjneproii пробкой, где находился исследуемый раствор, помещали 0,3 г сорбента и встряхивали на механическом вибр:: .орс до установления сарбциоиного равновесия. Концентрацию различных форм азососдиненин в равновесных растворах определяла косвенно спсзарофотометричесхи.

Сорбшгоштс извлечет» и соепяппгс гстеротпйлкческва азоеосдпнсклЗ в фазе сорбсгггоп стандартного тппэ

Применению гетероциклических азосо единений в качестве модификаторов неподвижной фазы в статическом в в динамическом режимах в немалой степени способствуют как высокие чувствительность и контрастность цветных реакций их с ионами металлов, так и возможность иммобилизации на подходящих матрицах - органических и неорганических полимерных ссрРстах. В аналитической химии из известных ГАС чаще всего используют пиридиновые азосоедипения: 1-(2-пиридилазо)-2-нафтол (ПАН) и его растворимый в воде аналог 4-(2-пирилилаэо)резорцин (ПАР).

Адсорбцию ПАР и ПАН изучали в отсутствие органических растворителей д,Dt ироюпироаанних форм рем ояхои (рII 1-2), где они растворимы в водных средах. Извлечение и состояние ГАС в фазе сорбента при различной кислотности среды проанализированы на примере водорастворимого ПАР.

При выборе оптимального носителя для иммобилизации в качестве моделей взяты простые и широко распространенные сорбенты класса целлюлоз, кремнеземов и ионообменников. Адсорбционные взаимодействия поверхности Силохромов и целлюлоз обусловлены в основном наличием силанольной и гидроксильной 1руш1ировок, которые являются наиболее реакционноспособными и лете вступают в химические реакции на поверхности сорбента. Целлюлоза ЭХТЕОЛА содержит среди многих поверх ностно-акти л пых групп третичные аминогруппы. Основными «оногенными группами в сильнокислотном КУ-2х8 являются суль-фоновые, а в ' сильнооспонном АВ-17х8 - преимущественно 1 етрамс тнЛ а м м о i ш сп ы с группы. Все перечисленные сорбенты содержат множество центров, способных притягивать полярные ил» ионогенные группы «олскул реагентов, поэтому вклад в сорбцию азосоедннений ■вза'и модсйсгвий с участием поверхностных групп сорбентов в различных ■ср'сдах -оценен с ■позиции влияния различных факторов па эффективность •силирйтяжгния п реальных проиееспх сорбции.

'^(нииНе-кйслоТностн среды из сорбцию. Из зависимости степени зо-•Bjfe4eíma<R, Щ ПАР ог кислотности среды"(рце. I) можно выявить пеко-•торые тшдепшш адсорбционного взаимодействия, а такАе влияние па •Него •реакциопиоснисобных 1ру.Ш рс;п e¡na и природы сорбента.

Существенный вклад В сорбцию вносят OÍI-ipyirnu реагента, что подтверждается практически полним %) извлечением протониро-«ппноги формы ПАР па предельно п'дроксилярованных кремнеземах и катйоп'оо'бмелпике•КУ-2хН (рис. кривые 1-3). ">то говорит "в пользу механизма -сорбции -НАР, включающего образование водородных связей между «илапольимми и сульфопоными •группировками поверхностей Кремнеземов и катиснообмепника с хинопгидразЬпной струтлурон молекулы в растворе. По-видимому, именно избыток электронов в бензольном кольце, имеющийся в Na-форме ПАР, применяемой в неорганическом *шалнзе, способствует существованию этой формы, поэтому адсорбционные язг.имодсТгстзия с поверхностьто сорбентов должны сопросо-к-•д.тться образованием энергетически более выгодных связей.

•В повышение сорбциочной емкоези кремнеземов и хатионообмен-ника * кислых средах (рП<3) вносит, также ион-дипольное взаимодейст-

вне протонированной формы ПАР (II3R+) и диссоциированных сила-подьных л сульфопоаых г])}'ли copGсигов. Вследствие диссоциации молекулы реагента при увеличении основности срсды (повышении pli) происходит разрушение этих связей, отсюда л уменьшение степени извлечения ПАР поверхностями кремнезема и катионообмешпгка при рН>3.1) то же время ступенчатая диссоциация окхигрупп резорцинового фрагмента молекулы в щелочной среде значительно увеличивает подвижность электронной системы ПАР за счет свободных электронных пар атомов кислорода. По-ш/дшпшу, локализация электронной г пот-поста и водородная связь окешрупп ПАР с ОП-грулпдмп тидратноЛ оболочки целлюлозы н объясняет удерживание молекулярной формы ПАР поверхностью сорбента при pli ~ 5 (рис. 1, кривая 8).

В свою очередь, изменение кислотности среды вызывает также уве-" личепис аюгкзносш ноиерхиосгимх 1"рупп целлюлоз!,i ЭХТЕОЛА н аш:о-нообмешшка AIÎ-I7x8 (особенно аминных атомов азога поверхности). Вероятно этим и объясняется одинаковое увеличение адсорбционной способности сорбентов, а также большое'сродство uo.iu функционально-' го сорбента (целлюлоза ЭХТЕОЛА) с многочисленными "полярными"

Рис. I. Влияние кислотности среды па степень извлечения ПАР Силохромом С-120 (фракция 100-200 мкм, !), C-S0 (фракция 100-200 мкм, 2), КУ-2х8 (3), АВ-17хЬ (4), целлюлозой ЭХТЕОЛА (5), МКЦ (фракция 100-250 мкм, .6), КМЦ (7), волокнистой целлюлозой (8)

ipymiaMH на поверхности не только к молекулярной, но и анионной формам ПАР. При использовании обычной целлюлозы ПАР теряет свое сродство к сорбенту за счет уменьшения специфических взаимодействий молекул реагента с сорбентом, вызванного уменьшением сил электростатического взаимодействия. По-видимому, высокая субстантивиостъ молекул азосоедннсния на поверхност и обычной целлюлозы говорит о то««, что происходит параллельная ориенгаци: молекул сорбага относительно поверхиосш сорбента. 'JaieM реагент диффундирует вглубь иптермиц.л-яярного пространства целлюлозы, где тсраст свою гидратную оболочку и образует arperar.

При сравнении адсорбционной способности целлюлоз важно отме-Ttrn.. тго сорбцконная ем ¡: петь м гп:ри ста лл i ¡ ч сской пе.хтюлозы гораздо выше, чем обычной волокнистой. По уменмнешпо адсорбции молекулярной формы ПАР m модельных растворов (pH 3) сорбенты располагаются в следующей последив л слыккт и:

Si02 H205KV-2xb-OXl LOJL4>KMU>MKU>BojiOKHiici;uî целлюлоза. Максимальное модифицирование поверхности сорбента в случае микрокристаллической цстлюдозы происходит при pH ёб, ашшнооймешшка при рИ >11, а кремнеземов и кашонообмешшха при рН^З.

Влияние структу ры сорбента рассмотрено на модельной системе адсорбции протонироваиных форм ПАР и ПАН поверхностью гидрокси-лированных кремнеземов. Сравнительный анализ результатов позволяет сделать выводы об адсорбционном взаимодействии сорбат - сорбень При меньшей удельной поверхности кремнезема основное количество peareirra диффундирусг и сорбируется ькутри кремнеземного скелета. В этом случае большие значение при адсорбции катионной фермы реагентов приобретает размер пор кремнезема. Oí мечено увеличение емкосш моиослоя при адсорбции ПАЛ на Склохромс С-80, так как его пористость выше по сравнению с Силохромоч С-120. При увеличении молекулярной массы реагента (при переход? с ПАР к ПАН) возрастает и сила адсорбционного взаимолейст-вия. а, следовательно, и устойчивость к "отмывке" молекул реагента с поверхности сорбента.

Каслотво-осиовные свойства ПАР и ПАН. Структурно наиболее интересная, а для неорганического анализа важная особенность исследуемых органических реагентов, содержащих функциональную оксиазо-груттировху, состоит в том. что они могут находиться в зависимости or структуры соединения преимущественно в азоформе (1). хинонгидразонной форме (II) или же в виде смеси этих форм в

соответствии с равновесием:

1

Использование но,чно-орг.чмич1ск'их град, а также хорошая ряствори-мос1ь рсш сигов в кислых средах (рП-1.0) способствует смещению тауто-мерного равновесия в сторону образования рсакционноснособней проформы. Дополнительная стабилизация азоформы возможна за счет образования внутримолекулярной водородной связи, сопровождающейся образованием нового квази-ароматичсского цикла. Использование 112504 уменьшает скорость образования про тонированных форм. Пример по через сутки реагенты полностью переходят в менее реакционноспособные прспонированные хинонгилразонные формы, поэтому адсорбционные взаимодействия изучали при рН 1,0 сразу после приготовления растворов красителей.

Одной из наиболее важных физико-химических характеристик являются константы диссоциации фуикциопалыю-апалитическ.л 1рулп реагента, без знания которых невозможно детальное исследование механизма к о <;; л ек сообразовали я, расчет констант равновесия и устойчивости, поэтому актуальна разработка новых методов определения констант диссоциации. Хотя и есть принципиальная возможность использовать . для определения состава и устойчивости равновесных соединений любое, функционально связанное с равновесием свойство реагента или системы в целом, нотснциомстрия и спектрофотометрия остаются основными методами исследования. Однако наибольшее количество информации при расчете равновесий в с-,;стс*.'е проявляется в изменении цвета раствора, причел» главное преимущество слектрофотояетрнчесюгх методов анализа перед потенциоме1рическнм заключается в его большей чувствительности, позволяющей работать с концентрациями, при которых реагенты присутствуют в мономерной форме. Основой нракшчески всех расчешых спсктрофотометрических методов являются уравнения материального баланса и амплитудные изменения оптической плотности растворов, при условии выполнения закона Бугсра-Ламбсрта-Бсра. И хотявероятность поглощения света молекулами окрашенного соединения в общем пропорциональна интегральной площади, ограниченной кривой спектра поглощения, а, следовательно, точнее, но

амплитудные значения, определенные из высот свсюпоглощсния, прочно вошли в практику аналитической химии ш-за просипи их измерения.

Настоящее исследование было направлено на то, чтобы показать применение относительно нового метода анализа (цкетомстрик) при расисте кислотно-основных равновесий в растворах и на поверхности сорбента. Так, используя координаты цвета равноконграстной колориметрической системы (С)Н.197Ь). которые дают интегральное распределение светопоглощения исследуемой равновесней системы в широком диапазоне длин волн (350-720 им), можно региеарировшь изменения сьойсль равновесных состояний реагента, минуя пшрсшпость в неправильном выборе измеряемых участков спектра пог лощения реагента, что существенно повышает достоверность полученных результатов (рис.2). Необходимым условием -прямолинейности кос\рдщтт цвета является выполнение закона Вебсра-Фехиера.

Из общего -аила ломаных линий следует, ито существуют дискретные -шаченая р!Л -среды. *де цвет 1чраситедей изменяется ■пропорционально содержанию •формы сушат б о в.ал у я реагентов в растворах, яри посгроении дифференциальной зависимости изменения цвета ИЛ!1 и ПЛП от кислотности среды должны -прояви!ся максимумы, которые соответствуют гратгаплм значениям -рН существования форм реагентов в растворе. Учитывая, что при содержаний красителей 5-1 О*6- . МО'4 моль/л и ц = 0,1-1,5 (рН 1,0-13.1)) молекулы НАР и 11АН в раегторах не ассоциированы, графическим -методом рассчитаны -Консгашы диссоциации реагентов в «одно-ацетоновых смесях. Полученные значения близки к литературным данным (табл.1).

Оидечено расширение области существования реакционноспособ-Иой молекулярной формы реагапа при уменьшении диэлектрической проницаемости среды ( Е). Характер изменения констант рК^гц и рКдц приводит к тому, что реагент взаимодействует с ионами металлов в более кислой среде (рК^Н уменьшается при уменьшении £) и консганта устойчивости комплекса возрастает (рКоН увеличивается при уменьшении £). Приведенные результаты показывают более резкое изменение цвета и существования форм реагентов при изменении . кислотности среды с увеличением содержания полярного растворителя.

Цветометрический подход изучения состояния органических реагентов херсвао зарекомендовал себя для растворов, однако изучение прототитических реакций органических реагентов на поверхности сорбента является не менее важным этапом исследования. Прежде всего протолитическне равновесия характеризуют реакционную способность

Таелн^а. Kcксганхы диссоцаапнн ПАР а ПАН (ц = СЛ)

Реагент Cre^s рК.; П^Яи-'нкые Ллтерат}

: с -!-=» с

f - — т . р - о 95 ) дз;ит~:г

iL-iF Зс-^i pb^s'j-} 2.7 z Л 2.55 i 0.15

ПАН ЮЧ-аый 2. ¡-'s.2 2.32-4.04

anerctt P^OH 11.9*0.2 J 1.90 12.uO-G.03

P-'-NII 107* 1.90 ¿0.03

зс^г^я DICQH 12.0-4,2 i 2.II5 12.22— ».05

. Л Т. __

P-NH ОН

; -7 ^ - ^

1 "> О j. л -»

1.S7* 2,09 ± ?.СЗ !2-_*б ¡2.63 ± С.Сб

* Рассчитано- ао корреляционным .р^вне.чшм лля волно-анетоновыз. растворов

реагентов. посхотьку реакппи такого гнпг более локализованы по сравнению. з=трк::ер. с гикзями хоматежсообразожания, а поэтому и полгчаемая »е-зоо мания солее или менее достоверно опенк*зет реакционна то ■способность^ раяных узястуо« функциональных групп сорбента и иммобилизованного на нем органического реагента. Кроме гого. знанае :шс:огко-исноаных свойств реагенте» необходимо д.тя количественного ^аиошмя устойчивости комплексных соединений на поверхности сербента. образующихся с изменением числа протонов в молекуле молзфикаторз. В ллтгратуре д^я лоегг-огния дифференциальных ттът-jx ¡пмгнення изета загге^ллся Tepioni Specific Colour Discriminauer: 'SCD). гостом*7 расчеты пгизедекы с использование*? ?той величины.

В н^сгочшей работе исследовал.:» состояние ПАН а ©азе кремнезема <Снлодрои C-12J.) и стирол-днвинилбешольной матрице (катнонообмйннкк КУ-2хS) с прнмгнегшгм методов СДО и ТФС (рис.3). Пра помощи графического мегера и изетомгтрнческого подхода найдены кегепзтк дпсссцпалш! ПАН е фазе сорбентгз (п = 5, Р = л.95):

Сорбент КУ-2х8 Силохром С-120

РКМ1 1,5 ¿0,2 1,4 ±0,2

РКОН 12.2 ±0,1 13.2 ±0,2

полученные значения констант диссоциации протоннрованнон формы реагента примерно одинаковы па разных сорбентах и смещены по сравнению с константами диссоциации этой формы ПАН в растворах (табл. 1). По-видимому, это можно объяснить существованием особого рода специфических взаимодействий в среде сорбаг-сорбснт. Конспшты диссоциации шдроксогрутшы рсакша различны па разных сорбентах, тем не менее, в случае катионообменника это значение находится близко от величины,^полученной для раствора (табл. 1). Найденная величина

о 1,0 В \ 2,0 ^ \ 35 7,оЧ \ър 50

aw i \ 25 " а * .v4» II up *

5 г ■ A

-10 -5 'Gtej 5 point

Blue

Рис. 2. Изменение координат цвета А. В 5-10"5 М ПАР (1) и 2.5-10"5 М ПАН (20 % ацетона,2) при различной кислотности среды. Цифровые значения на прямых соответствуют величине рН в раство-ре(Ц=0,1)

SCD

АО

50

20

iO

№

I 0,01 Ч

РН-"

Рис. 3. Изменения величины БСВ модифицированных сорбентов 30 мкмоль/г Сх-ПАН

(1) и 10 мкмоль/г КУ-2-ПАН

(2) от кислотности среды, полученные методами СДО (1) и ТФС (2). Фракция сорбентов 200-355 мкм

константы диссоциации ¿ля сорбента на основе кремнезема может быть объяснена, вероятно, разрушением кремнеземного скелета (рН 1С) и диссоциацией кремниевой кислоп; (рК( =9.9; р1<2 = 11.8: рКз = ¡3.7).

Таким образом, количественное описание равнс?есия в фазе сорбента представляет значительно белее трудную задачу я включает обычно ряд упрощений и предположении, не поддающихся строгой проверке. Несмотря на это. исследования ионообменного равновесия на поверхности твердой фазы предлагаемым методом не только упрошаюг. з известной степени, методику экспериментального исследования равновесных реакций, но и предс1авляю1 несомненный ишег-ес прежде всего вследствие широкого использования челагообразую:иих сорбентов в аналитической химии.

Комплексообразованне кобальта (III), хрома (III), железа (П, III), марганца (II), мели (II), никеля (П) н цинка (II) га кремнеземе, модифицированном I- (2- пнриднлазо)- 2- ндетолоч

Основная часть работ по иммобилизованным органическим соединениям посвящена их практическому применению при анализе природных и промышленных объектов, а лишь в немногих работах выясняют причины высокой реакционной способности модификатора, изучают свойства органического реагента и его комплексов, а также другие теоретические проблемы. Для оценки параметров изменения цвета реакций комплексообразования с точки зрения метода цветомегрии з качестве органического реагента выбран 1Ч2-пиридилазо)-2-нафтол (ПАН), .являющийся одним из лучших по селективности и г/в стб н т ель нос ш -¿агентов класса гетероциклических азосоединений.

В качестве объекта для исследования выбраны ¿-элементы Г\' периода Периодической системы Л.И. Менделеева, кг>т~гые к?-?2 своей высокой токсичности являются приоритетными загрязняющими ингредиентами в окружающей среде. В качестве носителя выбран кремнезем вследствие того, что он хорошо щучен, просто модифицируется. обладает высокой скоростью массообмела, механической прочностью и пекаиухаемостыо з различных растворителях, что очень удобно при нммобилзг? ации на нем хромогенных органических реагентез. Немаловажен также фпхт "есшзетпости кремнезема, так как что не сказывается на оптических свойствах образующихся комплексных соединений и позволяет применить его в качестве модели хтя изучения цвета при хомплексообра-

зовании. Выводы по изменению оптических характеристик в процессе комплексообразованля строились на основании результатов, полученных методами спектроскопии диффузного отражения. (СДО) и цветомег-рин. При сопоставлении оптических свойств хоиллскс-ов иммобилизованного на кремнеземе ПАН со светопотошеякгм их в растворе, отмечено образование комплексов идентичного состг-lm.

Влияние кислотности среды на сорбшпо ионов металлов из водных растворов изучали в интервале рИ 1-10. тто обусловлено растворимостью кремнезема в сильнокислых и ооьпошелочных средах. Измерения проводили при оптимальном времени достижения сорбционного равновесия. Найдено, что в кислой среде (рН 1,0-2.5) модифицированный сорбент реагирует только с Co(UI), Cu(II) и Сг(Ш) (при нагревании), а реакция с другими металлами практически Ее происходит. Изучение оптимальных условий комплексообразования (рве. 4) показало, что в щелочной среде (рН 10) ПАН реагирует с ограниченным числом ионов (Fe(II), Zn(ll), Мл(И)}. Повысить селективность реакинн ПАН в отношении отдельных элементов можно, используя в анализе маскирующие вещества (например, для селективного определенна цинка (II) - формаль-доксим)._

J^K Рис. 4. Зависимость измене-

10,5 '

вия энергии ноля катиона от рН^ и оптимальные области рН комплексообразования ионов и сполов с Сх-ПА11

V Ст(Й)

10,0 • ч Со oil) \

ч1х Fe(t|)

<ЕШ)

Znfllrf >ФШШ

4,5

л

\ х . \

Mn(ij)l ^^

ч

2 к е 8 Ю рИ

Считается, что напряженность электрического поля элемента (Ек), вычисленная по закону Кулона, может служить относительной мерой электростатического воздействия иона мет.зтзя нл мплокулу органического реагента. На рис. 4 прослеживается чегкая корреляция между изменением энергии поля катиона и кислотностью среды 50% комплркгопбрп-зования иона металл с ПАН. Она показывает, что сила взаимодействия и ряд устойчивости зависят от pli.

Используемый иммобилизованный на кремнеземе И АН (Cx-llAii) образует с нонами металлов комплексы, различающиеся по цвету. Фиксирование изменения цвета в зависимости от содержания иона металла в растворе с помощь» координат цвета .(А,В) позволяет перейти с качественного к словесного описания цвета к количественному опкептпо состояния кттлекатх соедялелкй va поверхности сорбента.

Избирательность реакции органического реагента е данный катионом (группой катионов) и последовавшее за этим изменение цвет озгга- . Чает наибольшую в условиях реакции устойчивость образовавшегося комплекса именно с данным ионом по* сравнению с другими. На практике это простое утверждение сводится к чрезвычайно сложной-картине взаимодействия лигапда с катионом металла. Считается, что химическая активность тяжелых металл о з обусловлена недостроеппоешэ 3<3-орбнтали, в спою очередь. это сказывается на их склонности в ' комплек-сообрпзованию, поляризации и объясняет переменную валентность элементов. При изучении степени изменения oxpscsm модифицировап-ного сорбента по насыщенности (AS) образующиеся комплексных соединений (рис. 5) прослеживается четкая коррсаяшдо от эффективного ионного радиуса металла. Причем эю характерно как для трех-, так и для двухзарядных ионов.

При поиске чувствительных цветных реакций особое внимание обращают на условия проведения реакций. Однако до сих пор отдельно стоит вопрос, связанный с количественным выражением контрастности реакций. Простейшее и на сегодняшний лень, пожалуй, единственно доступное выражение контрастности в аналитической химии рассматривается как разность положений максимумов светопо! лощения комплекса и реагента в оптимальных условиях комплексоибразования. В применяемом нами методе цвеюметрин - это разность в цветовом топе (AT) модифицированного и з a к о м п л ск со в a i гн о го сорбента.

Изучение взаимодействия какого-либо иона с органическим реагентом. внешним проявлением которого является цветная реакция, начинается с установления его поляризующего действия или ионного состоя-

ния металла. Позюму предсшвляло шпсрсс рассмотрение изменения кошраснюсти аналитической реакции модифицированного ПАП с ионами мепаллои, используя цвстометрический подход (рис. С). Полученная закономерность прямое следствие того, что устойчивость образующегося комплексного соединения зависит не только от свойств самого органического реагента, но также и от координационного числа и ионного радиуса катиона. Таким образом, увеличение устойчивости комплексных соединений сказывается на уменьшении контрастности аналитической реакции.

В настоящий момент не существует даже условных границ количественной оценки контрастности аналитических реакций в методе цве-томстрии, что связано с малым ст о использованием. По-видимому, срос-

30

о

£25

.ас

л о tí.

зг 20

15

10 '

'р CoOji)

d Ct(F¿i>

1100

so

i¿60

С»I

\ FeOiO л Y> . ч Cu(ij)

| Mitro 1 V *MÍ>

^OZn(Ü)

er»

65

70

15

ta

85

<4¡uyc исжцПМ

40

20

МлО»)

-о- ~

Cu(lj)

\

\

\

\

\

tó

12

км

Рис. 5. Измените цветового различия но насыщенности (AS) Сх-ПАН при образова-1ши комплексного соединения от радиуса иона металла

Рис. 6. Изменение различия в цветовом топе (ДТ) Сх-ПАН от константы устойчивости образующегося комплексного соединения

том и накоплением практических данных появится возможность установить гранимы д;1Я мало-, средне- и С с^ою очередь, это позволит более адекватно выбирать и исследовать условия комплсксообразовапич, определять чувствительность органических рез-гептов и т.п. По уже сейчас метод может стоп, незаменимым п использовании и разумном сочетании с другими методами анализа.

Остановимся на наиболее интересных апашиичегких приложениях метода цветометрии, возникших при изучении изменения nucía Сх-ЦДН в результате комнлехсообразования.

Применение закономерностей шлч-цения unei а о экспресс- а тест-аналнзе. При разработке тест-методик определяемый ион мсталла обыч-по идентифицируют но пнету образуемого им комплексного соединения с тест-реагентом. Обычно закономерность изменения цвета гге фиксируется и происходит только регнетргщи.ч данного флктя.

В основе метола цветометрии лежит формула ог .цего нвегопою различия пли разпоотгепочносш (Ali). Построение градуированных тест-шкал д,тя визуальною определения с применением известной зависимости АЕ от содержания определяемого микроэлемента позволь« избавиться от погрешности при ее составлении и количественно описать пс только интенсивность, по я изменение цвета при тест-опрсделечии. Так как равноконтрастнзя колг>римепч;чес»:::я система создячл с расчетом, что одной единице АН епиттитггнуст один порог цветоразличения. то значения концентраций определяемого микроэлемента, наиболее точно фиксируемые глазом человека, выбирают в соответствии с определенным- шагом ЛЕ. В варианте восприятия человеком цвет с поверхности реактивной бумаги (сорбент) рекомендуется создавать тссг-шкалы с ЛП 5-10.

Если в результате аналитической рсатлдпг тссг-обрззец теряет собственную окраску или обесцвечивался, при этом цвет матрицы тест-образца близок к белому (например, при использовании кр<-мнез<-ма или отдельных марок целлюлоз), то для построения тест-шкалы лучше всего использовать ,обратную величину- - степень белтины тест-образца \Y= 100 - АЕ. Зависимость изменения параметров белизны (W) и раэпоо*-тепочносги (АЕ) тест-образца от содержания оиреде-ысмого микроэлемента в анализируемом объекте имеет вид логарифмической крнпой. поэтому, взя0 постоянный шаг ЛИ = 10, получаем изменение содержания определяемого мтгролемеита в тест-образце в геометрической прогрессии, что часто предзагают использовать при созлап'.ги пизуальной тест-шкалы. Снимается также вопрос о нижней •

границе определяемых содержаний любой тест-методики. Ею можно считан общее цветонос различие в 10 усл.ед. между исходным тест-образцом (Е0) и тест-образцом, прореагировавшим с определяемым элементом (Е): Е-Ео=10.

Оптимизации содержании opiaiiH4cci:oro реагента в тест-образце. Для изучения изменения цвета модифицированного сорбента, лучше всего различимого зрением человека, исследовали Сх-11А!1 с различной ем-.костью но реагенту и вследствие novo с различной насыщенностью (S) но цвету (1-26,9%; 11-54,2%; 111-72,4%). На основании данных но изменению координат цвета {Л,В) Сх-ПЛП с разной емкостью но реагенту на примере образования окрашенного комплекса с цинком (рис. 7) сделан вывод о том, что прямолинейная зависимость В = f(A) в более широком диапазоне концентраций наблюдается при использовании модифицированного сорбента II с насыщенностью (S), рапной 54,2%. При работе с сорбентом 1 (S=26,9%) велика роль случайной составляющей при создании визуально различаемой шкалы для определения микроэлемента. В случае сорбента III (S=72,4°/e) теряется прямолинейность изменения координат цвета от содержания металла на модифицированном сорбенте, что заставляет выбирать и обрабатывать более узкие интервалы содержаний иопоп металлов. Таким образом, содержание окрашенного соединения при составлении цветной шкалы в экспресс-идк тест-методах химического анализа не должно выходить за пределы

Veffijv__ I'hc. 7. Изменение координат

Б Л

цвета сорбента А, В Сх-ПЛП от содержания цинка в растворе при разной емкости сорбента по I1A11 (1-1IJ) с линиями равного цветового тона при pH 9,2. Содержание цинка, мкг/10 мл: 0-0; 1-5; 2-10; 320: 4-50. Емкость, мкмоль/г. 1-5; 11-25; 111-50

20-60°л по степени насыщенное;и (S), в противном случае оно плохо различимо зрением обычного человека.

Практическое использопппне мпдпфггцнровяттого 1- (2- пярпдилазо)-2- пафтоло-.î катионообменника в тсст-аналнзе

Проведенные исследования, а также литературные данные свидетельствуют о том, что использование 1 •(2-пири;1илазо)-2-нафтола, иммобилизованного на сорбентах разной природы, позволяет достигать низких пределов обнаружения в сорбциоппо-спсктроекопическом анализе при высокой чувствительности и хорошо воспроизводимых результатах.

Возмо;кности метода цветометрии с применением координат цвета в настоящей работе проиллюстрированы !»« прлмер? со?дг»!??»!» селективных сорбциоино-спектроскопических м его дик опреде-ления кобалыа (III), меди (И) и нинка (II) с использованием иммобилизованного ПАИ на ионообмешшке КУ-2х§(КУ-2-11АП).

При образовании окрашенного соединения и седиментации сорбента сравнивали ею цвег со стандартной градуированной цветной шкалой определения микроэлемента, использул шат'АП = 10.

Длл пост-инструмснтальпого анализа рзстаор декантировали, сорбент высушивали до воздушно-сухого состояния и измеряли подходящим спектроскопическим методом (ТФГ или СДО) относительно образ* па контрольного опыта.

Сорбшюшш-снсктроскопнчсское определение кобальта, меди и нинка провоем следующим образом. 1ч исслсдуемомым паоворам (V^IO мл): кобальта добавляют 0,1 мл I M ÎIC1 (pli 2), 2 мл I M NaCI И 0,1 мл насыщенного раствора КЮ4; меди - 0,1 мл 1М IICI (pli 2) и 2 мл I M NaCI; ципка - 0,1 M Nr.Olí (рП Î0), 2 мл 1 M NaCI и 2 ил 5*Л pacTnó-ра формальдокснма. Растзоры' доводят до объема 20 мл бидиеТнллиро-взнной водой, вносят 0,5 г КУ-2-ПАИ и истряхилпкгг на механическом вибраторе в течение 15 .мин. Затем, » (лнтнмоеш oí вила анали la, либо помешают сорбеш в кювету (1 = 0,1см) и измеряют cueiоиоглощение от-носшельно перфорированной'пласт инки (А = 1,20) - метод ТФС, либо довод4j сорбеш до воздушно-сухого состояния и измеряют диффузное отражение - метод СДО. По спектральным характеристикам рассчитывают координаты цвета сорбента относительно образца контрольного опыта. Метрологические характеристики разработанных методик приведены л табл. ?.

Таблица 2. Метроло! у. чески е характеристики сорбшюшю-спсктроскопи-Ческих методик ц i s ет о .ч ет р и ч еск о г о опредслени.;; кабалы a, мода и циика (п = 5. Р = 0,55), Л' = 20 .мл, rnjci'-2-lLA.H = г

Ион Диапазон Предел обнаружения, srnúrv

металла определяемых мг.'л

содержаний, мг/'л (метод ТФС/СДО) (метод ТФС/ОДО)

Кобальт 0.J -1.0 0.01 /0.03 0,05/0.07

Медь 0.05- 1.0 0.005/0.01 0.07/0.07

Цинк 0.05 - 1.0 0.005 /0.01 0.05/0.05

Определению 10-мкх кобальта в 20 мл Не мешаки по крайней мере 1:10^ - кратные количества щелочных и щелочно-земе-тьиых мслаллии; 2 -10* Ni; 500 Cu; 100 Cd; Zn; 2C Ге(Ш). Для устранения влияния сопутствующих ионоп возмсааю их маа:нрсва;.;:с этилендиамиптетрауксус-иой кислотой в субстехиометрическом количестве по отношению :с определяемому иону. Разработанная сорбционно-спекзроскоиическая методика характеры >уе)си высокой воспроизводимостью результатов анализа и по своим характеристикам не уступает известной экстракционно-фотомегричсской методике с применением тою же реатеша, по намечает использование органических растворителей.

Определению 10 мкг меди в 20 мл в оптимальных условиях сорбции (pH 2,0) не мегпзктг по крайней мере 1 ООО-кратные количества щелочных я гпелочно-земетьных металлов; 200 /г.. Сг(И1); 100 Ni. Со{11): Ю !-"с(11.1И). <'о(Ш). Мешающее «пмяние кобачьта (Ш) и железа при подготовке пробы к определению меди устраняют аскорбиновой кислотой, либо пирофосфатом натрия. Разработанная методика определения позволяет анализировать водные пробы природных объектов, содержащие п •10-7% меди.

Определению 10 мкг цинка в 20 мл не мешают по крайней мерс 1000-кратные количества щелочных и щслочпо-зсмсльних металлов; 100 Мп(П). Fefll.Hl). Со(Ц): 50 Ni(ll), Cu(!I) и С о(Ш). Разработанная методика позволяет анализировать образцы природных объектов, содержащие п • 10*6 % цинка.

Правильность разработанных методик проверена при анализе природных и водопроводных вод. При определении кобальта в водопроводной воде методами добавок и внутреннею стандарта найдено (2-4)Т0"6 %. Анализ природных вод т. Москвы на медь и цинк (с при-

менснием концентрирования) показал, что содержание их в анализируемых объектах находится в пределах (0,4-2,0) • Ю-6 % и (3,£-39,0) ■ !0~íf Vú

соответственно.

выкоды

1. Из\'чена сорбция ¿-(2-пири.чи'1азо)резорпина (ПАР) и 1-(2-пири-дилазо)-2-нафюла (ПАП) стандартными сорбентами из водных растворов с различной кислотностью среды. Установлено влияние структуры сорбента (кремнезема) на адсорбцию pCaieiiiuu. Рассчитаны термодинамические парами ipu сорбции молекулярных и ионных форм ПАР и ПАТ1 на кремнеземах с различной удельной поверхностью, диаметром пор «размером частиц.

2. Найдены условия получения модифицированных сорбентов с заданной емкое!ью по азосоедит-нию и разработаны методики контроля содержания реагентов я фазе сорбента но H ioiq»i¡iM »дсорбции и на основе необратимых реакций окислсния ПАР и I1A1I солями церия (ГУ).

3. Изучено состояние реагентов в растворе и на поверхности'сорбентов; Сделано предположение о причинах адсорбционного закр.-нлени* реагентов на основании оптических и кислотно-основных спойпг иммобилизованных ПАР и ПАП. Uck.w.híí иг^менимос;. ппетомстрн-ческого подхода для расчета констант лигсонмяний-окрашенных' органических соединений » растворе и ни поверхности сорбента:

4. С целыо выяснения основных закономерностей сорбции, komiuckco- и цветообразования, а также возможности последующего сслек¿¡¡иного определении найдены оптимальные условия сорбции поной кобальта (III), хрома (Ш), жолла (I!. 111). марганца (II), меди (II), никеля (!]) и тппга (!!) ::а кремнеземе, модифицированном ПАН.

5. Проведена оценка некоторых параметров изменен;».? п'етп реакций комнлексообразования. Установлено, чю оптические характеристики комплексов » pacjiiupaí и сорбатов практически совпадают. Показано, что степень изменения окраски модифицированною сороснта но" контрастности и насыщенности зависит от эффективного ионного радиуса Mciajbia н константы устойчивости образующегося комплексного соединения.

6. Изучены некоторые методологические вопросы измерения и обработки аналитического сигнала в методе цветометрни. Установлено, что цветовое различие сорбагоп по светлоте и насыщенности позволяет идеигифипирояать определяемые ионы.

7. Па основании изучения общих закономерностей изменения цвета для визуальною экспресс-определения приводиio¡ оптимизации содержания органического реагента в тест-образце. Содержание окрашенного соединения при составлении цветной шкалы в тест-методах химического анализа не должно выходить за пределы 20-60% по степени цветовой насмшснности, в противном случае - шкала плохо различима. Показано, что при создании зест-шкалы необходимо использовать кршерии общею цветового различия (ДЕ) человеческою i лаза. При визуальном детект ировании окрашенной поверхности в capitaine отражения ДЕ - 10.

8. Разработана сорбциошю-цвсгомстрическая методика определения Со(Ш), Си (11) и Zn(H) 1-(2-пкрид1иазо)-2-пзфтолом. Предел обнаружения пост-инструментальпого определения при использовании метода твердофазной спектрофотометрии (ТФС) равен соответственно 0,01; 0.005; 0.005 мг/л. спектроскопии диффузного отражения (СДО) - 0,03; 0,01; 0.01 мг/л (Y = 20 мл. ш«СУ-,-П\Л~ Диапазоны определяемых содержаний равны 0,1-1,0 мг/л Со(Ш); 0,05-1,0 мг/:: Си(И): 0.05-1.0 мг/л Zn(II).

Осповпос содержа иле днсссртаппп изложено в следутотпх работах:

1. Иванов В.М.. Морозко С.А., Золотов Ю.А. Определение кобальта в водопронодной воле методом спектроскопии диффузного отаження с сорбционным концентрированием. // Жури. аналит. химии. 1993. Г.4Ь.

. îii S. C.13S9-139S.

2. Иванов В.М., Морозко CA., Качин C.B. Тест-методы с ' аналитической химии. Обнаружение и определение кобальта

иммобилизованным !-(2-пиридилазо)-2-нафтолом. И Жури, аналит. химия. ! 994. Т.49. № 8. С.857-861.

3. Морозко С.А.. Иванов В.М. Тест-метолы в аналитической химии. Иммобилизованный 1*(2-ииридилазо)-2-нафтол как аналитический реагент. // /Кури, аналш. химии. 1995. T.5Ù. Кг 0. С.629-635.

4. Иванов В.М., Морозко С.А., Кузнецова G.B., Фшуровская В.Н., Барбалат Ю.А., Сабри Массуд Азриби. Teci-методы экологического контроля вод и почв J Международная конференция "Фундаментальные и прикладные проблемы охраны окружающей среды". (Тома:, 199;). Т е:.докл. С.